Javascript айни замон дар браузери шумо ғайрифаъол аст. Баъзе хусусиятҳои ин вебсайт ҳангоми ғайрифаъол кардани Javascript кор намекунанд.
Бо маълумоти мушаххас ва доруи мушаххаси мавриди таваҷҷӯҳи худ сабти ном кунед ва мо маълумотеро, ки шумо пешниҳод мекунед, бо мақолаҳо дар пойгоҳи додаҳои васеи мо муқоиса мекунем ва фавран нусхаи PDF-ро ба шумо тавассути почтаи электронӣ мефиристем.
Стелла С, Витале СР, Марторана Ф, Массимино М, Павоне Г, Ланзафаме К, Бианка С, Барон С, Горгоне С, Фичера М, Манзелла Л.
Стефания Стелла, 1,2 Силвия Рита Витале, 1,2 Федерика Марторана, 1,2 Мишел Массимино, 1,2 Ҷулиана Павоне, 3 Катя Ланзафаме, 3 Себастяно Бианка, 4 Чиара Бароне, 5 Кристина Горгоне, 6 Марко Фичера Лицелина1, ва тибби таҷрибавӣ, Донишгоҳи Катания, Катания, 95123, Италия; 2 Маркази таҷрибавии онкология ва гематология, AOU Policlinico “G.Rodolico – San Marco”, Катания, 95123, Италия; 3 Онкологияи тиббӣ, AOU Policlinico “G. Rodolico – San Marco”, Катания, 95123, Италия; 4 Генетикаи тиббӣ, ARNAS Garibaldi, Катания, 95123, Италия; 5 Medicine Genetics, ASP, Syracuse, 96100, Италия; 6 Департаменти илмҳои биотиббӣ ва биотехнология, Донишгоҳи Катания, Генетикаи тиббӣ, Катания, Италия, 95123; 7 Институти тадқиқотии Оази-IRCCS, Троина, 94018, Италия Тамос: Стефания Стелла, тел +39 095 378 1946, почтаи электронӣ [email protected]; [email protected] Мақсад: Мутатсияҳои гениалӣ дар BRCA1 ва BRCA2 ва саратони сина (BC), тухмдон (OC) ва дигар бемориҳои марбут ба хатари якумрии саратон. Санҷиши гени BRCA барои арзёбии хатари инфиродӣ, инчунин барои ёфтани усулҳои пешгирӣ дар интиқолдиҳандагони солим ва табобати мувофиқ дар беморони саратон калиди муҳим аст. Паҳншавии тағйироти BRCA1 ва BRCA2 дар минтақаҳои ҷуғрофӣ ба таври васеъ фарқ мекунад ва гарчанде ки маълумот дар бораи вариантҳои патогении BRCA дар оилаҳои Сицилия мавҷуд аст, таҳқиқоте, ки махсусан ба аҳолии шарқии Сицилия нигаронида шудаанд, нокифояанд. Ҳадафи таҳқиқоти мо таҳқиқи паҳншавӣ ва тақсимоти тағйироти патогении гениалии BRCA дар як гурӯҳ беморони BC аз шарқии Сицилия ва арзёбии робитаи онҳо бо хусусиятҳои мушаххаси BC бо истифода аз пайдарпайии наслҳои оянда буд. Мавҷудияти тағйирот бо дараҷаи варам ва индекси паҳншавӣ алоқаманд аст. НАТИҶАҲО: Дар маҷмӯъ, 35 бемор (9%) варианти патогении BRCA доштанд, 17 (49%) дар BRCA1 ва 18 (51%) дар BRCA2. Тағйироти BRCA1 дар сегонаи манфӣ маъмуланд. беморони гирифтори саратони склероз, дар ҳоле ки мутатсияҳои BRCA2 дар беморони гирифтори саратони склерози люминалӣ бештар маъмуланд. Дар муқоиса бо шахсони ғайриинтиқолдиҳанда, субъектҳои дорои вариантҳои BRCA1 дараҷаи баланди варам ва индекси пролиферативӣ доштанд. Хулосаҳо: Бозёфтҳои мо шарҳи умумии вазъи мутатсияи BRCA-ро дар беморони гирифтори саратони склероз аз шарқи Сицилия пешниҳод мекунанд ва нақши таҳлили NGS-ро дар муайян кардани беморони гирифтори саратони склерози ирсӣ тасдиқ мекунанд. Умуман, ин маълумот бо далелҳои қаблӣ, ки скрининги BRCA-ро барои пешгирӣ ва табобати дурусти саратон дар интиқолдиҳандагони мутатсия дастгирӣ мекунанд, мувофиқанд.
Саратони сина (СС) маъмултарин саратон дар саросари ҷаҳон ва марговартарин саратон дар занон аст.1 Хусусиятҳои биологие, ки пешгӯии СС ва рафтори клиникиро муайян мекунанд, бо мурури замон ба таври васеъ омӯхта ва қисман равшан карда шудаанд. Дар асл, айни замон якчанд нишондиҳандаҳои ивазкунанда барои тасниф кардани СС ба зергурӯҳҳои гуногуни молекулавӣ истифода мешаванд. Онҳо эстроген (ER) ва/ё ретсептори прогестерон (PgR), зиёдшавии ретсептори омили афзоиши эпидермалии 2 (HER2), индекси паҳншавӣ Ki-67 ва дараҷаи варам (G) мебошанд.2 Омезиши ин тағирёбандаҳо категорияҳои зерини СС-ро муайян кард: 1) Варамҳои люминалӣ, ки ифодаи ER ва/ё PgR-ро нишон медиҳанд, 75% СС-ро ташкил медоданд. Ин варамҳо минбаъд ба Луминал А, вақте ки Ki-67 камтар аз 20% ва HER2 манфӣ буд, ва Луминал В, вақте ки Ki-67 ба 20% ё аз он зиёдтар буд ва дар ҳузури зиёдшавии HER2, новобаста аз индекси паҳншавӣ, тақсим карда шуданд; 2) Омосҳои HER2+, ки ER ва PgR манфӣ мебошанд, аммо амплификацияи HER2-ро нишон медиҳанд. Ин гурӯҳ 10% ҳамаи омосҳои синаро ташкил медиҳад; 3) Саратони синаи сегона-манфӣ (TNBC), ки ифодаи ER ва PgR ва амплификацияи HER2-ро нишон намедиҳад, тақрибан 15% саратони синаро ташкил медиҳад.2-4
Дар байни ин зергурӯҳҳои варами BC, дараҷаи варам ва индекси паҳншавӣ биомаркерҳои буриши уфуқиро нишон медиҳанд, ки мустақиман ва мустақилона бо хашмгинии варам ва пешгӯии он алоқаманданд.5,6
Илова бар хусусиятҳои биологии дар боло зикршуда, нақши тағйироти генетикии меросӣ, ки боиси пайдоиши BC мешаванд, дар чанд соли охир аҳамияти бештар пайдо кардааст.7 Тақрибан 1 аз 10 варами сина аз сабаби тағирёбии хатҳои ҷанинӣ дар генҳои мушаххас мерос гирифта мешаванд.8 Ду таҳқиқоти бузурги эпидемиологӣ, ки беш аз 180,000 занро дар бар мегиранд, ба наздикӣ як гурӯҳи ҳашт генро (яъне ATM, BARD1, BRCA1, BRCA2, CHK2, PALB2, RAD51C ва RAD51D) муайян карданд, ки асосан барои BC-и меросӣ масъуланд. Дар байни ин генҳо, BRCA1 ва BRCA2 (минбаъд BRCA1/2 номида мешаванд) робитаи қавитаринро бо инкишофи варамҳои сина нишон доданд.9-12 Дар асл, мутатсияҳои BRCA1/2-и хатҳои ҷанинӣ хатари BC ва инчунин дигар омосҳои бадсифат, аз ҷумла тухмдон, простата, гадуди зери меъда, колоректалӣ ва меланомаро дар тӯли умр ба таври назаррас зиёд мекунанд. Аз синни 13 то 80 солагӣ, паҳншавии умумии BC дар заноне, ки варианти патогении BRCA1 (PV) доранд, 72% -ро ташкил медиҳад ва 69% дар заноне, ки BRCA2 PV.14 доранд
Қобили зикр аст, ки дар як нашрияи ахир нишон дода шудааст, ки хатари BC аз намуди PV вобаста аст. Дар асл, дар муқоиса бо вариантҳои буридашавандаи патогенӣ, вариантҳои миссенсии намоён, махсусан дар гени BRCA1, бо хатари коҳишёфтаи BC, махсусан дар занони калонсол, алоқаманданд.15
Мавҷудияти BRCA1 ё BRCA2 PV бо хусусиятҳои гуногуни биологӣ ва клиникӣ-патологӣ алоқаманд буд.16,17 BC-ҳои марбут ба BRCA1 майл доранд, ки аз ҷиҳати клиникӣ хашмгин, тафриқаи суст ва хеле афзоишёбанда бошанд. Ин варамҳо одатан се маротиба манфӣ буда, дар синни барвақт пайдо мешаванд. Варамҳое, ки дар беморони мутатсияшудаи BRCA2 пайдо мешаванд, одатан дараҷаҳои миёна то хуб тафриқашуда ва нишондиҳандаҳои тағйирёбандаи пролиферативиро нишон медиҳанд. Ин варамҳо дар люмени B бештар маъмуланд ва одатан дар калонсолони калонсол пайдо мешаванд.16-18 Қобили зикр аст, ки мутатсияҳо дар BRCA1 ва BRCA2 ҳассосиятро ба табобатҳои мушаххас, аз ҷумла намакҳои платина ва доруҳои мақсаднок, ба монанди ингибиторҳои поли(ADP-рибоза) полимераза (PARPi), зиёд мекунанд.19,20
Дар тӯли чанд соли охир, татбиқи секвенсияҳои насли оянда (NGS) дар амалияи клиникӣ ба шумораи афзояндаи беморони BC имкон дод, ки аз санҷиши молекулавӣ барои синдромҳои ҳассосияти саратон, аз ҷумла BRCA1/2, гузаранд.21 Ҳамзамон, таърифҳо дар асоси меъёрҳои дақиқ дар бораи таърихи оила, хусусиятҳои демографӣ ва клиникӣ-патологӣ барои муайян кардани беҳтари афроде, ки сазовори санҷиши BRCA1/2 мебошанд, истифода мешаванд.22,23 Дар ин замина, далелҳо дар бораи скрининги BRCA1/2 дар аҳолии мушаххас ҷамъ мешаванд, ки фарқиятҳоро дар минтақаҳои ҷуғрофӣ нишон медиҳанд.24-27 Гарчанде ки гузоришҳо дар бораи когортаи BC дар Сицилияи ғарбӣ мавҷуданд, маълумоти камтар дар бораи скрининги BRCA1/2 дар аҳолии шарқии Сицилия дастрас аст.28,29
Мо дар ин ҷо натиҷаҳои скрининги BRCA1/2-и ҷанинро дар беморони гирифтори BC аз шарқи Сицилия тавсиф мекунем, ки мавҷудияти мутатсияҳои BRCA1 ё BRCA2-ро бо хусусиятҳои асосии клиникию патологии ин варамҳо минбаъд алоқаманд мекунад.
Дар "Маркази онкологияи таҷрибавӣ ва гематология"-и беморхонаи Поликлинико, Родолико - Сан-Марко дар Катания, як таҳқиқоти ретроспективӣ гузаронида шуд. Аз моҳи январи соли 2017 то марти соли 2021, дар маҷмӯъ 455 бемор бо саратони сина ва тухмдон, меланома, саратони гадуди зери меъда ё простата барои санҷиши генетикии BRCA/2 ба озмоишгоҳи ташхиси молекулавии мо фиристода шуданд. Ин таҳқиқот мувофиқи Эъломияи Ҳелсинки гузаронида шуд ва ҳамаи иштирокчиён пеш аз таҳлили молекулавӣ розигии хаттии огоҳона доданд.
Хусусиятҳои гистологӣ ва биологии (ER, PgR, ҳолати HER2, Ki-67 ва дараҷаи) BC дар биопсияи аслӣ ё намунаҳои ҷарроҳӣ арзёбӣ карда шуданд, ки танҳо ҷузъҳои хашмгини варамро ба назар мегиранд. Бар асоси ин хусусиятҳо, BC-ҳо чунин тасниф карда шуданд: люминалии A (ER+ ва/ё PgR+, HER2-, Ki-67<20%), люминалии B (ER+ ва/ё PgR+, HER2-, Ki-67≥20%), люминалии B-HER2+ (ER ва/ё PgR+, HER2+), HER2+ (ER ва PgR-, HER2+) ё сегонаи манфӣ (ER ва PgR-, HER2-).
Пеш аз арзёбии ҳолати мутатсияи BRCA1 ва BRCA2, як гурӯҳи бисёрсоҳавӣ, ки аз онколог, генетик ва равоншинос иборат аст, барои ҳар як бемор машварати генетикаи варамро анҷом дод, то мавҷудияти BRCA1 ва/ё BRCA1 ё афродеро, ки хатари баланди PV дар гени BRCA2 доштанд, муайян кунад. Интихоби беморон мувофиқи дастурҳои Ҷамъияти онкологияи тиббии Италия (AIOM) ва тавсияҳои маҳаллии Сицилия анҷом дода шуд.30,31 Ин меъёрҳо инҳоянд: (i) таърихи оилавии вариантҳои маълуми патогенӣ дар генҳои ҳассосият (масалан, BRCA1, BRCA2, TP53, PTEN); (ii) мардон бо BC; (iii) онҳое, ки BC ва OC доранд; (iv) занон бо BC <36 сол, TNBC <60 сол ё BC дуҷониба <50 сол; (v) таърихи тиббии шахсии BC <50 сол ва ҳадди аққал як хеши дараҷаи аввал: (a) BC <50 сол; (b) OC-и ғайримусинӣ ва ғайримарзӣ аз ҳар синну сол; (c) BC дуҷониба; (d) саратони гадуди зери меъда; (e) саратони простата; (vi) ду ё зиёда таърихи шахсии саратони гадуди зери меъда > 50 сол ва таърихи оилавии саратони гадуди зери меъда, саратони гадуди зери меъда ё саратони гадуди зери меъда барои хешовандоне, ки хешовандони дараҷаи аввал бо якдигар мебошанд (аз ҷумла хешовандоне, ки ӯ бо онҳо хешовандони дараҷаи аввал аст); (vii) Таърихи шахсии саратони гадуди зери меъда ва ҳадди аққал як хеши дараҷаи аввал: (a) саратони гадуди зери меъда <50 сол; (b) саратони ғадуди зери меъда; (c) саратони гадуди зери меъда дуҷониба; (d) саратони гадуди зери меъда мард; (vii) зане, ки саратони гадуди зери меъда серозии дараҷаи баланд дорад.
Аз ҳар як бемор намунаи хуни периферии 20 мл гирифта шуда, ба найчаҳои EDTA (BD Biosciences) ҷамъоварӣ карда шуд. ДНК-и геномӣ аз намунаҳои хуни пурраи 0,7 мл бо истифода аз QIAsymphony DSP DNA Midi kit Isolation Kit (QIAGEN, Ҳилден, Италия) мувофиқи дастурҳои истеҳсолкунанда ҷудо карда шуд ва аз флуорометри Qubit® 3.0 (Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA, ИМА) гузаронда шуд. Миқдоркуниро анҷом диҳед. Ғанигардонии ҳадаф ва омодасозии китобхона аз ҷониби Oncomine™ BRCA Research Assay Chef анҷом дода мешавад, ки барои бор кардан ба маҷмӯаи Ion AmpliSeq™ Chef Reagents DL8 барои омодасозии автоматии китобхона мувофиқи дастурҳои истеҳсолкунанда омода аст. Маҷмӯа аз ду ҳавзи праймери PCR мултиплекс иборат аст, ки метавонанд барои омӯзиши ҳамаи генҳои BRCA1 (NM_007300.3) ва BRCA2 (NM_000059.3) истифода шаванд. Хулоса, 15 µL аз ҳар як намунаи ДНК-и обшуда (10 нг) барои омодасозии китобхона ба табақчаҳои штрихкод илова карда шуд ва ҳамаи реагентҳо ва масолеҳи масрафшаванда ба асбоби Ion Chef™ бор карда шуданд. Сипас омодасозии автоматии китобхона ва ҷамъоварии китобхонаи намунавии штрихкод дар асбоби Ion Chef™ анҷом дода шуд. Сипас шумораи китобхонаҳои омодашуда бо истифода аз флуорометри Qubit® 3.0 (Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA, ИМА) мувофиқи дастурҳои истеҳсолкунанда арзёбӣ карда шуд. Дар ниҳоят, китобхонаҳо дар таносубҳои эквимолярӣ дар найчаҳои намунавии китобхонаи Ion Chef™ муттаҳид карда мешаванд. (найчаҳои штрих-коддор) ва ба асбоби Ion Chef™ бор карда шуданд. Пайдарпайӣ бо истифода аз асбоби Ion Torrent S5 (Thermo Fisher Scientific) (Thermo Fisher Scientific) бо истифода аз чипи Ion 510 (Thermo Fisher Scientific) анҷом дода шуд. Таҳлили маълумот аз ҷониби Amplicon Suite (SmartSeq srl) ва Ion Reporter Software анҷом дода шуд.
Ҳамаи номгузории вариантҳо дастурҳои ҷории Консорсиуми тағйирёбии геноми инсонро, ки онлайн дастрас аст (HGVS, http://www.hgvs.org/mutnomen), риоя мекарданд. Аҳамияти клиникии вариантҳои BRCA1/2 бо истифода аз таснифи Консорсиуми байналмилалии ENIGMA (Шабакаи далелҳо барои тафсири аллелҳои мутантҳои гермлинӣ, https://enigmaconsortium.org/) ва машварат бо пойгоҳҳои додаҳои гуногун, ба монанди ARUP, BRCAEXCHANGE, ClinVar, IARC_LOVD ва UMD муайян карда шуд. Таснифот панҷ категорияи хавфи гуногунро дар бар мегирад: бехавф (категорияи I), эҳтимолан бехавф (категорияи II), варианти дорои аҳамияти номуайян (VUS, категорияи III), эҳтимолан патогенӣ (категорияи IV) ва патогенӣ (категорияи V). VarSome инчунин таъсири мутатсияҳоро ба сохтор ва функсияи сафеда, як воситаи иттилоотӣ бо дастрасӣ ба 30 пойгоҳи додаҳо, таҳлил кард.32
Барои таъин кардани аҳамияти эҳтимолии клиникӣ ба ҳар як VUS, алгоритмҳои зерини пешгӯии сафедаҳои ҳисоббарорӣ истифода шуданд: MUTATION TASTER, 33 PROVEAN-SIFT (http://provean.jcvi.org/index.php), POLYPHEN-2 (http:// /genetics.bwh.harvard.edu/pph2/) ва Align-GVGD (http://agvgd.hci.utah.edu/agvgd_input.php). Вариантҳое, ки ҳамчун синфҳои 1 ва 2 тасниф карда шуданд, намуди ваҳшӣ ҳисобида шуданд.
Пайдарпайии Сангер мавҷудияти ҳар як варианти патогениро тасдиқ кард. Хулоса, як ҷуфт праймерҳои мушаххас барои ҳар як варианти ошкоршуда бо истифода аз пайдарпайиҳои истинодии генҳои BRCA1 ва BRCA2 (мутаносибан NG_005905.2, NM_007294.3 ва NG_012772.3, NM_000059.3) тарҳрезӣ карда шуданд. Аз ин рӯ, PCR-и мақсаднок ва баъдан пайдарпайии Сангер анҷом дода шуд.
Бемороне, ки натиҷаи озмоиши гени BRCA1/2-ро манфӣ арзёбӣ карданд, мувофиқи дастурҳои истеҳсолкунанда бо роҳи амплификацияи зондҳои вобаста ба лигатсия (MLPA) барои арзёбии мавҷудияти тағйироти калони геномӣ (LGR) санҷида шуданд. Хулоса, намунаҳои ДНК денатуратсия карда мешаванд ва то 60 зондҳои хоси генҳои BRCA1 ва BRCA2 истифода мешаванд, ки ҳар кадоме як пайдарпайии мушаххаси ДНК-ро бо дарозии тақрибан 60 нуклеотид муайян мекунанд. Сипас маҳсулоти амплификацияи зондҳо, ки аз маҷмӯи беназири ампликонҳои PCR иборатанд, бо истифода аз электрофорези капиллярӣ ва бо истифода аз нармафзори Cofalyser.Net дар якҷоягӣ бо ҷадвалҳои мувофиқи Cofalyser барои партия таҳлил карда шуданд (www.mrcholland.com).
Тағирёбандаҳои интихобшудаи клиникию патологӣ (дараҷаи гистологӣ ва индекси паҳншавии Ki-67%) бо мавҷудияти BRCA1/2 PV алоқаманд буданд, ки бо истифода аз нармафзори Prism v. 8.4 бо истифода аз санҷиши дақиқи Фишер бо назардошти аҳамияти арзиши p <0.05 ҳисоб карда шудаанд.
Аз моҳи январи соли 2017 то марти соли 2021, 455 бемор барои мутатсияҳои BRCA1/2-и ҷанинӣ муоина карда шуданд. Санҷиши мутатсия дар Маркази онкология ва гематологияи таҷрибавии беморхонаи Поликлинико гузаронида шуд. Тибқи дастури Сицилия (http://www.gurs.regione.sicilia.it/Indicep1.htm, N. 02-Venerdì 10 Январ 2020), дар Родолико аз Катания - Сан Марко" дар маҷмӯъ 389 бемор буданд. Дар ин ҷо саратони сина, 37 саратони тухмдон, 16 саратони гадуди зери меъда, 8 саратони простата ва 5 меланома буданд. Тақсимоти беморон аз рӯи намуди саратон ва натиҷаҳои таҳлил дар расми 1 нишон дода шудааст.
Дар расми 1 диаграммаи ҷараёни таҳқиқот нишон дода шудааст, ки шарҳи мухтасари онро нишон медиҳад. Беморони гирифтори варамҳои сина, меланома, гадуди зери меъда, простата ё тухмдон барои мутатсияҳо дар генҳои BRCA1 ва BRCA2 санҷида шуданд.
Ихтисорот: PVs, варианти патогенӣ; VUS, варианти дорои аҳамияти номуайян; WT, пайдарпайии BRCA1/2-и навъи ваҳшӣ.
Мо таҳқиқоти худро интихобан ба гурӯҳҳои саратони сина равона кардем. Синну соли миёнаи беморон 49 сол (диапазони 23-89) буд ва асосан занон буданд (n=376 ё 97%).
Аз ин субъектҳо, 64 нафар (17%) мутатсияҳои BRCA1/2 доштанд ва ҳамаашон зан буданд. Сиву панҷ нафар (9%) PV ва 29 нафар (7.5%) VUS доштанд. Ҳабдаҳ (48.6%) аз 35 варианти патогенӣ дар BRCA1 ва 18 (51.4%) дар BRCA2 рух доданд, дар ҳоле ки 5 VUS дар BRCA1 (17.2%) ва 24 (82.8%) дар BRCA2 рух доданд (Расми 1 ва 2). LGR дар таҳлили MLPA мавҷуд набуд.
Расми 2. Таҳлили мутатсияҳои BRCA1 ва BRCA2 дар 389 беморони гирифтори саратони сина.(A) Тақсимоти вариантҳои патогенӣ (PV) (сурх), вариантҳои дорои аҳамияти номуайян (VUS) (норанҷӣ) ва WT (кабуд) дар 389 беморони гирифтори саратони сина; (B) 389 беморони гирифтори саратони сина Сиву панҷ нафар (9%) вариантҳои патогении BRCA1/2 (PV) доштанд. Дар байни онҳо, 17 нафар (48,6%) интиқолдиҳандагони PV BRCA1 (сурхи тира) ва 18 нафар (51,4%) интиқолдиҳандагони BRCA2 (сурхи равшан) буданд; (C) 29 нафар (7,5%) аз 389 субъект интиқолдиҳандаи VUS, 5 нафар (17,2%) генҳои BRCA1 (норанҷи тира) ва 24 нафар (82,8%) генҳои BRCA2 (норанҷи равшан) буданд.
Ихтисорот: PVs, варианти патогенӣ; VUS, варианти дорои аҳамияти номуайян; WT, пайдарпайии BRCA1/2-и навъи ваҳшӣ.
Мо минбаъд паҳншавии зергурӯҳҳои молекулавии BC-ро дар беморони гирифтори BRCA1/2 PV таҳқиқ кардем. Тақсимот 2 (5.7%) люминал A, 15 (42.9%) люминал B, 3 (8.6%) люминал B-HER2+, 2 (5.7%) HER2+ ва 13 (37.1%) беморони TNBC-ро дар бар мегирифт. Дар байни беморони BRCA1-мусбат, 5 (29.4%) BC-и люминал B, 2 (11.8%) бемории HER2+ ва 10 (58.8%) TNBC доштанд. Варамҳое, ки мутатсияҳои BRCA1 надоранд, ё люминал A ё люминал B-HER2+ буданд (Расми 3). Дар зергурӯҳи BRCA2-мусбат, 10 (55.6%) варам B-и люминал, 3 (16.7%) B-HER2+, 3 (16.7%) TNBC ва 2 (11.1%) буданд. люмени А (Расми 3). Дар ин гурӯҳ ягон варами HER2+ мавҷуд набуд. Ҳамин тариқ, мутатсияҳои BRCA1 дар беморони TNBC маъмуланд, дар ҳоле ки тағйироти BRCA2 дар шахсони люмени В бартарӣ доранд.
Расми 3 Паҳншавии зергурӯҳҳои саратони сина дар беморони дорои вариантҳои патогенӣ дар BRCA1 ва BRCA2. Гистограммаҳое, ки тақсимоти PV-ҳои BRCA1- (сурхи тира) ва BRCA2- (сурхи равшан)-ро дар байни зергурӯҳҳои молекулавии беморони гирифтори саратони сина нишон медиҳанд. Рақамҳое, ки дар дохили ҳар як қуттӣ гузориш шудаанд, фоизи беморони гирифтори PV BRCA1 ва BRCA2-ро барои ҳар як зергурӯҳи саратони сина нишон медиҳанд.
Ихтисорот: PVs, варианти патогенӣ; HER2+, ретсептори 2-и омили афзоиши эпидермалии инсон мусбат; TNBC, саратони синаи сегона-манфӣ.
Баъдан, мо намуд ва маҳаллисозии генҳои BRCA1 ва BRCA2 PV-ҳоро арзёбӣ кардем. Дар BRCA1 PV, мо 7 варианти як нуклеотидӣ (SNV), 6 ҳазф, 3 такрор ва 1 воридкуниро мушоҳида кардем. Танҳо як мутатсия (c.5522delG) кашфи навро ифода мекунад. Маъмултарин PV BRCA1, ки дар ҳарду субъект ошкор карда шуд, c.5035_5039delCTAAT буд. Ин тағйирот ҳазфи панҷ нуклеотид (CTAAT)-ро дар экзони BRCA1 15 дар бар мегирад, ки боиси ивазшавии лейцини аминокислота бо тирозин дар кодони 1679 мегардад ва аз сабаби тағйири чаҳорчӯба бо кодони алтернативии пешгӯишудаи қатъкунӣ ба буридани бармаҳали сафеда оварда мерасонад. Ҳама тағйироти дигар танҳо дар як ҳолат ошкор карда мешаванд. Қобили зикр аст, ки яке аз PV-ҳои гузоришшуда дар минтақаи консенсуси сайти пайвастшавӣ ҷойгир буд (c.4357+1G>T) (Ҷадвали 1).
Дар мавриди BRCA2 PV, мо 6 ҳазф, 6 SNV ва 2 такрорро мушоҳида кардем. Ҳеҷ яке аз тағйироти ёфтшуда нав нестанд. Се мутатсия дар аҳолии мо такрор шуданд, c.428dup ва c.8487+1G>A дар 3 субъект мушоҳида шуданд, пас аз он c.5851_5854delAGTT дар ду ҳолат барқарор карда шуд. Тағйироти c.428dup такрори C-ро дар экзони 5-и BRCA2 дар бар мегирад, ки пешгӯӣ шудааст, ки сафедаи кӯтоҳ ва ғайрифунксионалиро рамзгузорӣ мекунад. Мутатсияи c.8487+1G>A дар минтақаи интронии интрон 19 BRCA2 (± 1,2) рух медиҳад ва ба пайдарпайии консенсуси сплайсинг таъсир мерасонад, ки боиси тағйир ёфтани сплайсинг мегардад, ки боиси ғайримуқаррарӣ ё набудани сафеда мегардад. Варианти патогении c.5851_5854delAGTT аз сабаби ҳазфи 4-нуклеотид аз мавқеъҳои нуклеотид 5851 то 5854 дар экзони рамзгузории 10-и BRCA2 мебошад. ген ва боиси тағйирёбии фреймвайронкунии тарҷумавӣ бо кодони алтернативии пешгӯишудаи стоп (p.S1951WfsTer) мегардад. Қобили зикр аст, ки тавре ки қаблан гузориш дода шуда буд, ҳарду тағйироти c.631G>A ва c.7008-2A>T дар як бемор ошкор карда шуданд.34 Мутатсияи аввал иваз кардани аденозин (A)-ро дар экзони 7 BRCA2 бо гуанин (G)-и дорои нуклеотид дар бар мегирад, ки боиси тағйирёбии валин ба изолейцин дар кодони 211 мегардад, изолейцин. Кислотаи аминокислота аминокислотаест, ки хосиятҳои хеле монанд дорад. Ин тағйирот ба пайвастшавии муқаррарии mRNA таъсир мерасонад. Варианти дуюм дар минтақаи интронӣ ҷойгир аст ва боиси ивазшавии дукаратаи A ба тимин (T) пеш аз экзони 13-и ген, ки BRCA2-ро рамзгузорӣ мекунад, мегардад. Тағйироти c.7008-2A>T метавонад транскриптҳои сершумори дарозии гуногунро ба вуҷуд орад. Ғайр аз ин, дар гурӯҳи PV-ҳои BRCA2, 4 аз 18 тағйирот (22.2%) интронӣ буданд.
Сипас, мо мутатсияҳои зараровари BRCA1/2-ро дар доменҳои функсионалӣ ва минтақаҳои пайвастшавии сафедаҳо харитасозӣ кардем (Расми 4). Дар гени BRCA1, 50% PV дар минтақаи кластери саратони сина (BCCR), дар ҳоле ки 22% мутатсияҳо дар минтақаи кластери саратони тухмдон (OCCR) ҷойгир буданд (Расми 4A). Дар PV BRCA2, 35,7% вариантҳо дар минтақаи BCCR ва 42,8% мутатсияҳо дар OCCR ҷойгир буданд (Расми 4B). Сипас, мо ҷойгиршавии PV-ро дар доменҳои сафедаҳои BRCA1 ва BRCA2 арзёбӣ кардем. Барои сафедаи BRCA1, мо се PV-ро дар доменҳои ҳалқавӣ ва печонидашуда ва ду мутацияро дар домени BRCT пайдо кардем (Расми 4A). Барои сафедаи BRCA2, 4 PV ба домени такрории BRC харитасозӣ карда шуданд, дар ҳоле ки 3 тағйироти интроникӣ ва 3 тағйироти экзоникӣ дар доменҳои пайвастшавандаи олиго/олигосахарид (OB) ва бурҷ (T) (Расми 4B).
Расми 4 Намунаи схемавии сафедаҳои BRCA1 ва BRCA2 ва ҷойгиршавии вариантҳои патогенӣ. Ин расм тақсимоти вариантҳои патогении BRCA1 (A) ва BRCA2 (B)-ро дар беморони гирифтори саратони сина нишон медиҳад. Мутатсияҳои экзоникӣ бо ранги кабуд ва вариантҳои интроникӣ бо ранги норанҷӣ нишон дода шудаанд. Баландии сатр шумораи ҳолатҳоро нишон медиҳад. Сафедаҳои BRCA1 ва BRCA2 ва доменҳои функсионалии онҳо гузориш дода шудаанд.(A) Сафедаи BRCA1 дорои домени ҳалқавӣ (RING) ва пайдарпайии маҳаллисозии ҳастаӣ (NLS), домени печдор, домени кластерии SQ/TQ (SCD) ва домени терминалии C-BRCA1 (BRCT) мебошад.(B) Сафедаи BRCA2 дорои ҳашт такрори BRC, домени пайвастшавандаи ДНК бо домени спиралӣ (Helical), се пӯшиши пайвастшавандаи олигонуклеотид/олигосахарид (OB), домени бурҷӣ (T) ва NLS дар тарафи C мебошад. Минтақаҳое, ки минтақаи кластерии саратони сина (BCCR) ва кластери саратони тухмдон номида мешаванд. Минтақа (OCCR) дар поён нишон дода шудаанд.* Мутатсияҳоеро ифода мекунад, ки кодонҳои стоп-ро муайян мекунанд.
Сипас мо хусусиятҳои клиникию патологии BC-ро таҳқиқ кардем, ки метавонанд бо мавҷудияти BRCA1/2 PV алоқаманд бошанд. Сабтҳои пурраи клиникӣ барои 181 бемори BRCA1/2-манфӣ (ғайри интиқолдиҳандагон) ва ҳамаи интиқолдиҳандагон (n = 35) дастрас буданд. Байни суръати паҳншавии варам ва дараҷаи он ҳамбастагӣ вуҷуд дошт.
Мо тақсимоти Ki-67-ро дар асоси медианаи когортаи худ (25%, диапазон <10-90%) ҳисоб кардем. Субъектҳое, ки Ki-67 < 25% доштанд, ҳамчун "Ki-67 паст" муайян карда шуданд, дар ҳоле ки афроде, ки арзишҳо ≥ 25% доштанд, "Ki-67 баланд" ҳисобида шуданд. Тафовутҳои назарраси Ki-67 (p <0.01) байни ғайриинтиқолдиҳандагон ва интиқолдиҳандагони PV BRCA1 ёфт шуданд (Расми 5A).
Расми 5. Ҳамбастагии Ki-67 бо тақсимоти дараҷавӣ дар занони саратони сина бо ва бе PV-ҳои BRCA1 ва BRCA2.(A) Нақшаи қуттӣ, ки арзишҳои миёнаи Ki-67-ро дар 181 беморони ғайри интиқолдиҳандаи BC дар муқоиса бо беморони PV-и BRCA1 (18) ё BRCA2 (17) нишон медиҳад. Арзишҳои P аз 0.5 камтар аз ҷиҳати оморӣ аҳамиятнок ҳисобида шуданд.(B) Гистограмма, ки тақсимоти беморони саратони BC-ро ба гурӯҳҳои дараҷаи гистологӣ (G2 ва G3) мувофиқи ҳолати мутатсияи BRCA1 ва BRCA2 (субъектҳои WT, интиқолдиҳандагони PV-ҳои BRCA1 ва BRCA2) нишон медиҳад.
Ба ҳамин монанд, мо таҳқиқ кардем, ки оё дараҷаи варам бо мавҷудияти BRCA1/2 PV алоқаманд аст. Азбаски G1 BC дар аҳолии мо вуҷуд надошт, мо беморонро ба ду гурӯҳ (G2 ё G3) тақсим кардем. Мувофиқи натиҷаҳои Ki-67, таҳлил робитаи аз ҷиҳати оморӣ муҳимро байни дараҷаи варам ва мутатсияи BRCA1 нишон дод, ки дар муқоиса бо интиқолдиҳандагони ғайриинтиқол, таносуби бештари варамҳои G3 мушоҳида шудааст (p <0.005) (Расми 5B).
Пешрафтҳо дар технологияи секвенсияи ДНК имкон доданд, ки дар санҷиши генетикии BRCA1/2 пешрафтҳои бесобиқа ба даст оварда шаванд, ки барои беморони дорои таърихи оилавии саратон оқибатҳои муҳим доранд. То имрӯз, тақрибан 20,000 варианти BRCA1/2 мувофиқи Ҷамъияти Амрикоии Генетикаи Тиббӣ 35 ва системаи ENIGMA муайян ва тасниф карда шудаанд.35,36 Маълум аст, ки спектри мутатсияи BRCA1/2 дар минтақаҳои ҷуғрофӣ ба таври васеъ фарқ мекунад.37 Дар дохили Италия, сатҳи PV-ҳои BRCA1/2 аз 8% то 37% буд, ки тағирёбии васеи дохили кишварро нишон медиҳад.38,39 Бо аҳолии қариб 5 миллион, Сицилия аз ҷиҳати шумораи аҳолӣ панҷумин минтақаи калонтарини Италия аст. Гарчанде ки маълумот дар бораи тақсимоти BRCA1/2 дар ғарби Сицилия мавҷуд аст, дар қисмати шарқии ҷазира далелҳои васеъ вуҷуд надоранд.
Таҳқиқоти мо яке аз аввалин гузоришҳо дар бораи паҳншавии BRCA1/2 PV дар беморони BC дар шарқи Сицилия мебошад.28 Мо таҳлили худро ба BC равона кардем, зеро ин бешубҳа бемории маъмултарин дар гурӯҳи мост.
Ҳангоми санҷиши 389 беморони гирифтори саратони сина, 9% BRCA1/2 PV доштанд, ки байни BRCA1 ва BRCA2 баробар тақсим шудаанд. Ин натиҷаҳо бо натиҷаҳое, ки қаблан дар аҳолии Италия гузориш шуда буданд, мувофиқанд.28 Ҷолиб он аст, ки 3% (13/389)-и когорти мо мард буданд. Ин нишондиҳанда нисбат ба интизорӣ барои саратони синаи мардона (1% аз ҳамаи BC) баландтар аст,40 ки интихоби моро дар асоси хатари мутатсияи BRCA1/2 инъикос мекунад. Бо вуҷуди ин, ҳеҷ яке аз ин мардон BRCA1/2 PV надоштанд, аз ин рӯ онҳо номзадҳо барои таҳлили минбаъдаи молекулавӣ буданд, то мавҷудияти мутатсияҳои камтар маъмул, ба монанди PALB2, RAD51C ва D ва ғайраро истисно кунанд. Вариантҳои дорои аҳамияти номуайян дар 7% субъектҳое, ки дар онҳо BRCA2 VUS намоён буд, пайдо карда шуданд. Ҳатто ин натиҷа бо далелҳои қаблан вуҷуддошта мувофиқ аст.28,41,42
Вақте ки мо тақсимоти зергурӯҳҳои молекулавии BC-ро дар занони мутант BRCA1/2 таҳлил кардем, мо робитаҳои маълумро байни TNBC ва BRCA1 PV (58.8%) ва байни BC-и люминалии B ва BRCA2 PV (55.6%) тасдиқ кардем.16,43 Варамҳои люминалии A ва HER2+ дар интиқолдиҳандагони PV BRCA1 ва BRCA2 бо маълумоти адабиёти мавҷуда мувофиқанд.16,43
Сипас, мо ба намуд ва макони BRCA1/2 PV тамаркуз мекунем. Дар гурӯҳи мо, маъмултарин PV BRCA1 c.5035_5039delCTAAT буд. Гарчанде ки Incorvaia et al. ин вариантро дар когорти сицилиягии худ тавсиф накардаанд, муаллифони дигар онро ҳамчун як ҷанини BRCA1 PV гузориш додаанд.34 Дар когорти мо якчанд PV-ҳои BRCA1 пайдо шуданд - масалан, c.181T>G, c.514del, c.3253dupA ва c.5266dupC - ки дар Сицилия мушоҳида шудаанд.28 Аз инҳо, ду мутатсияи асосгузори BRCA1 (c.181T>G ва c.5266dupC) одатан дар яҳудиёни ашкеназии Аврупои Шарқӣ ва Марказӣ (Полша, Чехия), словенӣ, австриягӣ, маҷорӣ, белорусӣ ва олмонӣ), 44,45 пайдо мешаванд ва дар Иёлоти Муттаҳида ва Аргентина ба наздикӣ ҳамчун "варианти такрории ҷанини" беморони итолиёвӣ бо BC ва OC муайян карда шуд. Варианти 34c.514del қаблан дар 8 бемори гирифтори саратони сина аз шимоли Сицилия дар Палермо ва Мессина муайян карда шуда буд. Ҷолиб он аст, ки ҳатто Инкорвая ва дигарон... варианти c.3253dupA-ро дар баъзе оилаҳо дар Катания пайдо карданд.28 Намояндагони аз ҳама бештари PV-ҳои BRCA2 c.428dup, c.5851_5854delAGTT ва варианти интронии c.8487+1G>A мебошанд, ки бо тафсилоти бештар 28 дар беморе дар Палермо бо c.428dup, c.5851_5854delAGTT гузориш дода шудаанд. PV дар хонаводаҳои шимолу ғарби Сицилия, асосан дар минтақаҳои Трапани ва Палермо мушоҳида шудааст, дар ҳоле ки c.5851_5854delAGTT PV дар хонаводаҳои шимолу ғарби Сицилия мушоҳида шудааст. Варианти 8487+1G>A дар субъектҳои Мессина, Палермо ва Калтаниссетта бештар маъмул буд.28 Реббек ва дигарон. қаблан тағйироти c.5851_5854delAGTT-ро дар Колумбия тавсиф карда будем.37 Боз як BRCA2 PV, c.631+1G>A, дар беморони BC ва OC аз Сицилия (Агридженто, Сиракуза ва Рагуса) пайдо шудааст.28 Қобили зикр аст, ки мо ҳамзистии ду варианти BRCA2 (BRCA2 c.631G>A ва c.7008-2A>T)-ро дар ҳамон бемор мушоҳида кардем, ки мо тахмин мезадем, ки онҳо дар ҳолати cis ҷудо карда шудаанд, чунон ки қаблан чунин гузориш дода шуда буд.34,46 Ин мутатсияҳои BRCA2 дар ҳақиқат дар минтақаи Италия зуд-зуд мушоҳида мешаванд ва муайян карда шудаанд, ки кодонҳои бармаҳали стоп-ро ба вуҷуд меоранд, ки ба пайвастшавии РНК-и мессенҷер таъсир мерасонанд ва боиси нокомии сафедаи BRCA2 мешаванд.47,48
Мо инчунин PV-ҳои BRCA1 ва BRCA2-ро дар минтақаҳои эҳтимолии OCCR ва BCCR-и доменҳо ва генҳои сафеда харитасозӣ кардем. Ин минтақаҳо аз ҷониби Реббек ва ҳамкорон мутаносибан ҳамчун минтақаҳои хавфи пайдоиши саратони тухмдон ва сина тавсиф шудаанд.49 Аммо, далелҳо дар бораи робитаи байни ҷойгиршавии вариантҳои ҳуҷайраҳои ҷанин ва хатари саратони сина ё тухмдон баҳсбарангез боқӣ мемонанд.28,50-52 Дар аҳолии мо, PV-ҳои BRCA1 асосан дар минтақаи BCCR ҷойгир буданд, дар ҳоле ки PV-ҳои BRCA2 асосан дар минтақаи OCCR ҷойгир буданд. Аммо, мо натавонистем ягон робита байни минтақаҳои эҳтимолии OCCR ва BCCR ва хусусиятҳои BC пайдо кунем. Ин метавонад аз сабаби шумораи маҳдуди беморон бо мутатсияҳои BRCA1/2 бошад. Аз нуқтаи назари домени сафеда, PV-ҳои BRCA1 дар тамоми сафеда паҳн шудаанд ва тағироти BRCA2 афзалиятнок дар домени такрории BRC пайдо мешаванд.
Ниҳоят, мо хусусиятҳои клиникию патологии BC-ро бо BRCA1/2 PV муқоиса кардем. Аз сабаби шумораи маҳдуди беморони дохилшуда, мо танҳо як робитаи назаррасро байни Ki-67 ва дараҷаи варам пайдо кардем. Гарчанде ки арзёбӣ ва тафсири Ki-67 то андозае баҳсбарангез боқӣ мемонад, маълум аст, ки сатҳи баланди пролиферативӣ бо хатари афзоиши такроршавии беморӣ ва коҳиши зиндамонӣ алоқаманд аст. То имрӯз, ҳадди ниҳоӣ барои фарқ кардани Ki-67-и "баланд" ва "паст" 20% аст. Аммо, ин ҳадди ниҳоӣ ба аҳолии беморони мутатсияи BRCA1/2-и мо, ки арзиши миёнаи Ki-67 25% дорад, дахл надорад. Ин тамоюл дар сатҳи баланди Ki-67-ро метавон бо паҳншавӣ дар когортҳои люминалии B ва TNBC шарҳ дод, ки дар онҳо варамҳои люминалии A кам буданд. Аммо, баъзе далелҳо нишон медиҳанд, ки ҳадди баланди Ki-67 (25-30%) метавонад беморонро мувофиқи пешгӯии онҳо беҳтар табақабандӣ кунад.53,54 Аз натиҷаҳои таҳлили мо, як робитаи назаррас ҳайратовар нест. Байни Ki-67-и баланд ва дараҷаҳо ва мавҷудияти BRCA1 PV. Дар асл, варамҳои марбут ба BRCA1 хоси TNBC мебошанд ва хусусиятҳои хашмгинтарро нишон медиҳанд.16,17
Хулоса, ин таҳқиқот гузоришеро дар бораи вазъи мутатсияи BRCA1/2 дар як гурӯҳи BC аз шарқи Сицилия пешниҳод мекунад. Умуман, бозёфтҳои мо бо далелҳои қаблан мавҷудбуда, ҳам аз ҷиҳати паҳншавии мутатсия ва ҳам аз ҷиҳати хусусиятҳои клиникию патологӣ дар BC мувофиқанд. Таҳқиқоти бештар дар популятсияҳои калонтари беморони BC-мутанти BRCA1/2, ба монанди истифодаи таҳлили васеъшудаи мутатсияи бисёргеномӣ, барои арзёбии мавҷудияти PV-ҳое, ки фарқкунанда ва камтар аз BRCA1/2 мебошанд, заруранд. Ин имкон медиҳад, ки шумораи афзояндаи субъектҳое, ки хатари афзояндаи саратон аз сабаби мутатсияҳои генетикӣ доранд, муайян ва дуруст идора карда шаванд.
Мо тасдиқ кардем, ки беморон розигии огоҳонаро барои нашри беном аз намунаҳои варами худ барои мақсадҳои тадқиқотӣ имзо карданд. Ҳамаи беморон мувофиқи Эъломияи Ҳелсинки розигии хаттии огоҳонаро имзо карданд. Мувофиқи сиёсати AOU Policlinico “G.Rodolico – S.Marco”, ин тадқиқот аз баррасии ахлоқӣ озод карда шуд, зеро таҳлили BRCA1/2 мувофиқи амалияи клиникӣ анҷом дода шуд ва ҳамаи беморон розигии хаттии огоҳона доданд. Беморон инчунин ба истифодаи маълумоти худ барои мақсадҳои тадқиқотӣ розӣ ҳастанд.
Мо аз профессор Паоло Виньери барои кумакаш дар нигоҳубини беморони гирифтори саратони сина, ки аз ҷониби Кумитаи ахлоқӣ дархост шудааст, изҳори сипос менамоем.
Федерика Марторана аз Istituto Gentili, Eli Lilly, Novartis, Pfizer хайрияҳо пешниҳод мекунад. Муаллифони дигар изҳор медоранд, ки дар ин кор ҳеҷ гуна низоъи манфиатҳо вуҷуд надорад.
1. Сунг Х, Ферлай Ҷ, Сигел РЛ ва дигарон. Омори ҷаҳонии саратон дар соли 2020: GLOBOCAN сатҳи паҳншавӣ ва фавти 36 саратонро дар 185 кишвари ҷаҳон арзёбӣ мекунад. CA Cancer J Clin.2021;71(3):209-249.doi: 10.3322/caac.21660