Javascript дар айни замон дар браузери шумо ғайрифаъол аст. Баъзе хусусиятҳои ин вебсайт ҳангоми хомӯш кардани javascript кор намекунанд.
Бо тафсилоти мушаххаси худ ва доруи мушаххаси мавриди таваҷҷӯҳи худ сабти ном кунед ва мо ба маълумоте, ки шумо бо мақолаҳо дар базаи васеи мо пешниҳод мекунед, мувофиқат мекунем ва ба таври фаврӣ ба шумо нусхаи PDF-ро бо почтаи электронӣ мефиристем.
Стелла С, Витале СР, Марторана Ф, Массимино М, Павоне Г, Ланзафаме К, Бианка С, Барон С, Горгоне С, Фичера М, Манзелла Л.
Стефания Стелла, 1,2 Силвия Рита Витале, 1,2 Федерика Марторана, 1,2 Мишел Массимино, 1,2 Ҷулиана Павоне, 3 Катя Ланзафаме, 3 Себастяно Бианка, 4 Чиара Бароне, 5 Кристина Горгоне, 6 Марко Фичера Лицелина1, ва тибби таҷрибавӣ, Донишгоҳи Катания, Катания, 95123, Италия; 2 Маркази таҷрибавии онкология ва гематология, AOU Policlinico “G.Rodolico – San Marco”, Катания, 95123, Италия; 3 Онкологияи тиббӣ, AOU Policlinico “G. Rodolico – San Marco”, Катания, 95123, Италия; 4 Генетикаи тиббӣ, ARNAS Garibaldi, Катания, 95123, Италия; 5 Medicine Genetics, ASP, Syracuse, 96100, Италия; 6 Шӯъбаи илмҳои биотиббӣ ва биотехнология, Донишгоҳи Катания, Генетикаи тиббӣ, Катания, Италия, 95123; Институти тадқиқотии 7Oasi-IRCCS, Троина, 94018, Италия Муошират: Стефания Стелла, тел +39 095 378 1946, почтаи электронӣ [email protected]; [email protected] Ҳадаф: Мутатсияҳои ҷарима дар BRCA1 ва BRCA2 ва саратони муқарраршудаи сина (BC), тухмдон (OC) ва дигарҳое, ки бо хатари умри саратон алоқаманданд. Санҷиши гени BRCA калиди арзёбии хатари инфиродӣ, инчунин барои дарёфти усулҳои пешгирӣ дар интиқолдиҳандагони солим ва муолиҷаи дӯзандагӣ дар беморони саратон мебошад. Паҳншавӣ ва паҳншавии ҷуғрофии BRCA1 дар саросари BRCA2. минтақаҳо ва гарчанде ки маълумот дар бораи вариантҳои патогении BRCA дар оилаҳои Сицилия мавҷуд аст, тадқиқотҳое, ки махсусан ба популятсияҳои шарқии Сицилия нигаронида шудаанд, кам нестанд. Ҳадафи тадқиқоти мо таҳқиқи ҳодиса ва паҳншавии тағиротҳои патогении BRCA дар гурӯҳи беморони пеш аз милод аз Сицилияи шарқӣ ва арзёбии робитаи онҳо бо истифода аз мавҷудияти пайдоиши минбаъдаи BC буд. бо дараҷаи варамҳо ва индекси паҳншавӣ алоқаманд аст. НАТИҶАҲО: Дар маҷмӯъ, 35 беморон (9%) варианти патогении BRCA доштанд, 17 (49%) дар BRCA1 ва 18 (51%) дар BRCA2. Тағйироти BRCA1 дар беморони секаратаи манфии BC маъмуланд, дар ҳоле ки дар беморони гирифтори BRCA2 мутатсияҳои маъмули BRCA2 бештар маъмуланд. Субъектҳои дорои вариантҳои BRCA1 дараҷаи варам ва индекси пролиферативӣ ба таври назаррас баландтар буданд: Бозёфтҳои мо шарҳи вазъи мутатсиявии BRCA-ро дар беморони пеш аз милод аз шарқи Сицилия таъмин мекунанд ва нақши таҳлили NGS-ро дар муайян кардани беморони ирсии BC.Дар маҷмӯъ, ин маълумотҳо бо далелҳои қаблии дастгирии муолиҷаи BRCA ва муолиҷаи пролиферативии мошин барои муолиҷаи пролиферативии BRCA мувофиқат мекунанд.
Саратони сина (BC) бемории маъмултарин дар саросари ҷаҳон ва марговартарин саратон дар занон мебошад.1 Хусусиятҳои биологӣ, ки пешгӯии BC ва рафтори клиникиро муайян мекунанд, бо мурури замон ба таври васеъ омӯхта ва қисман равшан карда шудаанд. Дар асл, дар айни замон якчанд маркерҳои суррогатӣ барои тасниф кардани BC ба зергурӯҳҳои гуногуни молекулавӣ истифода мешаванд. Онҳо ба зергурӯҳҳои гуногуни молекулавӣ тақсим карда мешаванд. ретсептори омили афзоиши эпидермалии 2 (HER2) амплификация, индекси паҳншавии Ki-67 ва дараҷаи варам (G).2 Маҷмӯи ин тағирёбанда категорияҳои зерини BC-ро муайян кард: 1) варамҳои люминалӣ, ки ифодаи ER ва/ё PgR-ро нишон медиҳанд, 75% BCs-ро ташкил медоданд. манфӣ, ва Luminal B, вақте ки Ki-67 ба 20% ё бештар аз он баробар буд ва дар ҳузури тақвияти HER2, новобаста аз шохиси паҳншавӣ; 2) варамҳои HER2+, ки ER ва PgR манфӣ мебошанд, вале амплификацияи HER2-ро нишон медиҳанд. Ин гурӯҳ 10% тамоми варамҳои синаро ташкил медиҳад; 3) Саратони синаи сегонаи манфии сина (TNBC), ки ифодаи ER ва PgR ва амплификацияи HER2-ро нишон намедиҳад, тақрибан 15% саратони синаро ташкил медиҳад.2-4
Дар байни ин зергурӯҳҳои BC, дараҷаи варам ва шохиси паҳншавӣ биомаркерҳои буришро ифода мекунанд, ки мустақиман ва мустақилона бо хашмгинӣ ва пешгӯии варам алоқаманданд.5,6
Илова ба хусусиятҳои биологии дар боло зикршуда, дар тӯли чанд соли охир нақши тағироти ирсии ирсӣ, ки ба рушди BC оварда мерасонад, аҳамияти бештар пайдо мекунад.7 Тақрибан 1 аз 10 варами сина аз сабаби тағирёбии хатти генҳо дар генҳои мушаххас мерос гирифта мешавад.8 Ду тадқиқоти калони эпидемиологӣ, ки зиёда аз 180,000 занонро дар бар мегиранд, ба наздикӣ муайян карда шуданд. BRCA1, BRCA2, CHK2, PALB2, RAD51C ва RAD51D) пеш аз ҳама барои ирсии BC масъуланд. Дар байни ин генҳо, BRCA1 ва BRCA2 (минбаъд BRCA1/2 номида мешавад) таносуби қавитаринро бо рушди варамҳои сина нишон доданд, ки мутаносибии қавитаринро бо рушди варамҳои сина нишон доданд.9-12 хатари тамоми умри BC ва инчунин дигар бемориҳои ашаддӣ, аз ҷумла тухмдонҳо, ғадуди простата, гадуди зери меланома ва меланома. Аз синни 13 то 80 сола, ҳодисаҳои маҷмӯӣ BC дар занони дорои варианти патогении BRCA1 (PV) 72% ва дар занони гирифтори BRCA42 69% аст.
Қобили зикр аст, ки як нашрияи нав нишон медиҳад, ки хатари милод аз намуди PV вобаста аст. Дар асл, дар муқоиса бо вариантҳои патогении буридан, вариантҳои барҷастаи гумроҳӣ, махсусан дар генофонди BRCA1, бо коҳиши хатари BC, махсусан дар занони солхӯрда алоқаманданд.15
Мавҷудияти BRCA1 ё BRCA2 PV бо хусусиятҳои гуногуни биологӣ ва клиникопатологӣ алоқаманд буд.16,17 BC-ҳои марбут ба BRCA1 одатан аз ҷиҳати клиникӣ хашмгин, суст фарқкунанда ва хеле пролиферативӣ мебошанд. Ин варамҳо одатан се маротиба манфӣ буда, синну соли барвақти саршавиро доранд. Варамҳое, ки дар беморони BRCA2 ба таври маъмулӣ зоҳир мешаванд. дараҷаҳои хуб фарқкунанда ва нишондиҳандаҳои пролиферативии тағйирёбанда. Ин варамҳо дар люмени B бештар маъмуланд ва одатан дар калонсолони калонсол ба вуҷуд меоянд.16-18 Қобили зикр аст, ки мутатсияҳо дар BRCA1 ва BRCA2 ҳассосиятро ба табобатҳои мушаххас, аз ҷумла намакҳои платина ва доруҳои мақсаднок ба монанди поли(ADP-рибоза) ингибиторҳои (ПАР2) полимерӣ (PAR20) зиёд мекунанд.
Дар тӯли чанд соли охир, татбиқи пайдарпайии насли оянда (NGS) дар амалияи клиникӣ имкон дод, ки шумораи афзояндаи беморони пеш аз милод аз санҷиши молекулавӣ барои синдромҳои ҳассосияти саратон, аз ҷумла BRCA1 / 2.21 Ҳамзамон, таърифҳо дар асоси меъёрҳои дақиқи таърихи оила, демографӣ ва арзиши беҳтари хусусиятҳои клиникии инфиродӣ / CA1 гузаранд. озмоиш.22,23 Дар ин замина, далелҳо дар бораи скрининги BRCA1/2 дар популятсияҳои мушаххас ҷамъ мешаванд, ки фарқиятҳоро дар байни минтақаҳои ҷуғрофӣ нишон медиҳанд.24–27 Ҳарчанд гузоришҳо дар бораи когорти BC дар ғарби Сицилия мавҷуданд, маълумоти камтар дар бораи скрининги BRCA1/2 дар аҳолии шарқии Сицилия мавҷуд аст.28,29
Мо дар ин ҷо натиҷаҳои скрининги хатти BRCA1/2-ро дар беморони пеш аз милод аз шарқи Сицилия тавсиф мекунем, ки минбаъд мавҷудияти мутатсияҳои BRCA1 ё BRCA2-ро бо хусусиятҳои асосии клиникопатологии ин варамҳо алоқаманд мекунанд.
Тадқиқоти ретроспективӣ дар "Маркази таҷрибавии онкология ва гематология" дар беморхонаи Поликлинико гузаронида шуд. Родолико - Сан-Марко дар Катания. Аз январи соли 2017 то марти соли 2021, ҳамагӣ 455 беморони сина ва тухмдон, меланома, гадуди зери меъда ё простата барои ташхиси бемории саратони простата фиристода шуданд. санҷиши генетикӣ. Ин тадқиқот мувофиқи Эъломияи Ҳелсинки гузаронида шуд ва ҳамаи иштирокчиён пеш аз таҳлили молекулавӣ розигии хаттии огоҳшударо пешниҳод карданд.
Хусусиятҳои гистологӣ ва биологии (ER, PgR, ҳолати HER2, Ki-67 ва дараҷаи) BC дар биопсияи аслӣ ё намунаҳои ҷарроҳӣ бо назардошти танҳо ҷузъҳои варамҳои хашмгин арзёбӣ карда шуданд. Бар асоси ин хусусиятҳо, BC-ҳо ба таври зерин тасниф карда шуданд: luminal A (ER+ ва/ё PgR+, HER7-2%, HER7-2/0), PgR+, HER2-, Ki-67≥20%), luminal B-HER2+ (ER ва/ё PgR+, HER2+), HER2+ (ER ва PgR-, HER2+) ё секаратаи манфӣ (ER ва PgR-, HER2-).
Пеш аз арзёбии ҳолати мутатсияи BRCA1 ва BRCA2, як гурӯҳи бисёрсоҳавӣ, аз ҷумла онколог, генетик ва равоншинос барои ҳар як бемор машварат оид ба генетикаи варам гузарониданд, то мавҷудияти BRCA1 ва/ё BRCA1-ро муайян кунад. ё ашхосе, ки хавфи баланди PV дар генофонди BRCA2 доранд. Интихоби беморон тибқи дастурҳои Ҷамъияти итолиёвии саратоншиносии тиббӣ (AIOM) ва тавсияҳои маҳаллии Сицилия анҷом дода шуд.30,31 Ба ин меъёрҳо дохил мешаванд: (i) таърихи оилавии вариантҳои патогении маълум дар генҳои ҳассосият (масалан, BRCA1, BRCA3PT, EN); (ii) мардон бо пеш аз милод; (iii) онҳое, ки BC ва OC доранд; (iv) занони гирифтори BC <36 сола, TNBC <60 сола ё дутарафаи BC <50 сола; (v) таърихи тиббии шахсии то 50 сол аз милод ва на камтар аз як хеши дараҷаи якум: (а) аз милод < 50 сол; (б) ОК-и ғайримусинӣ ва ғайримарзӣ дар ҳама синну сол; $C) дутарафаи милод; $D) мард аз милод; $E) саратони гадуди зери меъда; (е) саратони простата; (vi) ду ё зиёда таърихи шахсии пеш аз милод > 50 сол ва таърихи оилавии бемории пеш аз милод, ОК ё саратони гадуди зери меъда барои хешовандоне, ки бо ҳамдигар хешовандони дараҷаи якум мебошанд (аз ҷумла хешовандоне, ки бо онҳо хешовандони дараҷаи якум мебошанд); (vii) Таърихи шахсии ОК ва ҳадди аққал як хешовандони дараҷаи якум: (а) то милод <50 сол; (б) NOC; $C) дутарафаи милод; $D) мард аз милод; (vii) зан бо дараҷаи баланди OC сероз.
Аз ҳар як бемор намунаи хуни периферикии 20 мл гирифта шуда, дар найҳои EDTA (BD Biosciences) ҷамъоварӣ карда шуд. ДНК-и геномӣ аз намунаҳои хуни 0,7 мл бо истифода аз маҷмӯаи изолятсияи QIAsymphony DSP DNA Midi (QIAGEN, Ҳилден, Италия) мувофиқи дастурҳои истеҳсолкунанда аз Qubit ® фишурдашуда ҷудо карда шуд. Science, Waltham, MA, USA) Гузаронидани миқдор. Ғанигардонии ҳадаф ва омодасозии китобхона аз ҷониби Oncomine™ BRCA Research Assay Chef анҷом дода мешавад, ки барои бор кардан ба маҷмӯаи Ion AmpliSeq™ Chef Reagents DL8 барои омодасозии автоматии китобхона мувофиқи дастурҳои истеҳсолкунанда омода карда мешавад. Маҷмӯа аз ду ҳавзи мултиплекси PCR иборат аст, ки онҳоро барои омӯзиши ҳама BRCA1 ва NMCA020 истифода бурдан мумкин аст. (NM_000059.3) генҳо. Хулоса, 15 мкл аз ҳар як ДНК-и маҳлулшуда (10 нг) ба лавҳаҳои штрих-код барои омода кардани китобхона илова карда шуд ва ҳама реактивҳо ва масолеҳи масрафшуда ба асбоби Ion Chef™ бор карда шуданд. Омодасозии автоматии китобхона ва ҷамъбандии китобхонаи штрих-кодшуда баъдан тавассути асбоби штрих-код ҷамъоварӣ карда шуд. Qubit® 3.0 Флюорометр (Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA, ИМА) мувофиқи дастурҳои истеҳсолкунанда. Ниҳоят, китобхонаҳо дар таносуби эквимолярӣ дар қубурҳои намунавии Ion Chef™ (найҳои штрих-код) муттаҳид карда мешаванд ва ба асбоби Ion Chef™ бор карда мешаванд. (Thermo Fisher Scientific) бо истифода аз Ion 510 Chip (Thermo Fisher Scientific). Таҳлили маълумот аз ҷониби Amplicon Suite (SmartSeq srl) ва Ion Reporter Software анҷом дода шуд.
Ҳама номенклатураи вариантҳо ба дастурҳои ҷории Консорсиуми Вариатсияи Геномҳои Инсон, ки дар интернет дастрасанд (HGVS, http://www.hgvs.org/mutnomen) риоя мешуданд. Аҳамияти клиникии вариантҳои BRCA1/2 бо истифода аз таснифи Консорсиуми Байналмилалии ENIGMA (Шабакаи ба далелҳо асосёфтаи Germline for Interpreting All Mutan) муайян карда шудааст. https://enigmaconsortium.org/) ва машварати пойгоҳи додаҳои гуногун, аз қабили ARUP, BRCAEXCHANGE, ClinVar, IARC_LOVD ва UMD. Тасниф панҷ категорияи гуногуни хатарро дар бар мегирад: зарарнок (категорияи I), эҳтимоли хуб (категорияи II), варианти аҳамияти номуайян (VUS, категорияи категорияи III), патогении эҳтимолӣ (патогенӣ) V).VarSome инчунин таъсири мутатсияҳоро ба сохтор ва функсияи сафедаҳо, як воситаи иттилоотӣ бо дастрасӣ ба 30 пойгоҳи додаҳо таҳлил кардааст.32
Барои муайян кардани аҳамияти потенсиалии клиникӣ ба ҳар як VUS, алгоритмҳои зерини ҳисобкунии пешгӯии сафедаҳо истифода шуданд: MUTATION TASTER, 33 PROVEAN-SIFT (http://provean.jcvi.org/index.php), POLYPHEN-2 (http:///genetics.bwh.harvard.edu/pph-DG) ва Align-DG (http://agvgd.hci.utah.edu/agvgd_input.php). Вариантҳое, ки ҳамчун синфи 1 ва 2 тасниф шудаанд, навъи ваҳшӣ ҳисобида мешуданд.
Пайдарпайвандии Сэнгер мавҷудияти ҳар як варианти патогениро тасдиқ кард. Ба таври мухтасар, як ҷуфт праймерҳои мушаххас барои ҳар як варианти ошкоршуда бо истифода аз пайдарпаии истинодҳои генҳои BRCA1 ва BRCA2 тарҳрезӣ шуда буданд (NG_005905.2, NM_007294.3 ва NG_012772.3, NM95.030, ба таври эҳтиром ба PC ҳадаф гирифта шуд). пас аз Сэнгер секвенсия иҷро карда шуд.
Бемороне, ки барои гени BRCA1/2 манфӣ санҷидаанд, мувофиқи дастурҳои истеҳсолкунанда барои арзёбии мавҷудияти азнавсозии геномии калон (LGR) тавассути амплификацияи мултиплекс вобаста ба зонд (MLPA) санҷида шуданд. Хулоса, намунаҳои ДНК денатурат карда мешаванд ва то 60 генҳои BRCA1 ва BRCA2 тақрибан як генҳои мушаххаси DNA60 муайян карда мешаванд. нуклеотидҳо бо дарозӣ. Маҳсулоти амплификацияи зонд, ки аз маҷмӯи беназири ампликонҳои ПТР иборат аст, баъдан тавассути электрофорези капиллярӣ ва нармафзори Cofalyser.Net дар якҷоягӣ бо ҷадвалҳои мувофиқи партияи мушаххаси Cofalyser (www.mrcholland.com) таҳлил карда шуданд.
Тағйирёбандаҳои клиникӣпатологии интихобшуда (дараҷаи гистологӣ ва шохиси паҳншавии Ki-67%) бо мавҷудияти BRCA1/2 PV алоқаманд буданд, ки бо истифода аз нармафзори Prism v. 8.4 бо истифода аз санҷиши дақиқи Фишер бо фарз кардани арзиши p <0,05 муҳим аст.
Дар байни моҳи январи соли 2017 ва марти соли 2021, 455 беморон барои мутатсияҳои ҷанини BRCA1/2 муоина карда шуданд. Санҷиши мутатсия дар Маркази таҷрибавии онкология ва гематологияи беморхонаи Поликлинико гузаронида шуд. Мувофиқи дастури Сицилия (http://www.gurs.regione.itcilia.sidic.1, 02-Venerdì 10 Gennaio 2020), Rodolico of Catania – San Marco” дар маҷмӯъ, 389 бемор саратони сина, 37 саратони тухмдон, 16 саратони гадуди зери меъда, 8 саратони простата ва 5 меланома буданд. Тақсимоти беморон аз рӯи намуди саратон ва натиҷаҳои таҳлил дар расми 1 нишон дода шудааст.
Дар расми 1 диаграммаи ҷараён нишон дода шудааст, ки шарҳи тадқиқотро нишон медиҳад. Беморони гирифтори варамҳои сина, меланома, гадуди зери меъда, простата ё тухмдон барои мутатсия дар генҳои BRCA1 ва BRCA2 санҷида шуданд.
Ихтисорот: PVs, варианти патогенӣ; VUS, варианти аҳамияти номуайян; WT, пайдарпаии навъи ваҳшӣ BRCA1/2.
Мо ба таври интихобӣ таҳқиқоти худро ба гурӯҳҳои саратони сина равона кардем. Синну соли миёнаи беморон 49 сола (диапазони 23-89) ва асосан занон буданд (n=376 ё 97%).
Аз ин субъектҳо, 64 (17%) мутацияи BRCA1/2 доштанд ва ҳама занон буданд. Сиву панҷ (9%) PV ва 29 (7,5%) VUS доштанд. Ҳабдаҳ (48,6%) аз 35 варианти патогенӣ дар BRCA1 ва 18 (51,4%) дар BRCA2 ва 18 (51,4%) дар BRCA2 рух додаанд, дар ҳоле ки дар 1721 нафар. (82,8%) дар BRCA2 (Расмҳои 1 ва 2). LGR дар таҳлили MLPA мавҷуд набуд.
Расми 2. Таҳлили мутатсияҳои BRCA1 ва BRCA2 дар 389 беморони саратони сина. (A) Тақсимоти вариантҳои патогенӣ (PV) (сурх), вариантҳои аҳамияти номуайян (VUS) (норанҷӣ) ва WT (кабуд) дар 389 беморони саратони сина; (B) 389 беморони саратони сина 35 (9%) вариантҳои патогении BRCA1/2 (PVs) доштанд. Дар байни онҳо 17 (48,6%) интиқолдиҳандагони BRCA1 PV (сурхи торик) ва 18 (51,4%) интиқолдиҳандагони BRCA2 (сурхи сабук) буданд; (C) 29 (7,5%) аз 389 субъектҳо VUS, 5 (17,2%) генҳои BRCA1 (норанҷии торик) ва 24 (82,8%) генҳои BRCA2 (норанҷии сабук) доштанд.
Ихтисорот: PVs, варианти патогенӣ; VUS, варианти аҳамияти номуайян; WT, пайдарпаии навъи ваҳшӣ BRCA1/2.
Мо минбаъд паҳншавии зергурӯҳҳои молекулавии BC дар беморони гирифтори BRCA1/2 PV-ро таҳқиқ кардем. Тақсимоти 2 (5,7%) luminal A, 15 (42,9%) luminal B, 3 (8,6%) luminal B-HER2+, 2 (5,7%) HER2+ ва 13% mon HER2+ ва 13 mon (37% TBCN11. беморон, 5 (29,4%) luminal B BC, 2 (11,8%) бемории HER2+ ва 10 (58,8%) TNBC дошт. Омосҳои бе мутатсияҳои BRCA1 ё luminal A ё luminal B-HER2+ (Расми 3). Дар BRCA2-мусбат зергурӯҳҳои B-15, luminal %) буданд. (16,7%) luminal B-HER2+, 3 (16,7%) TNBC ва 2 (11,1%) luminal A (Расми 3) буданд. Дар ин гурӯҳ ягон варами HER2+ вуҷуд надошт. Ҳамин тавр, мутатсияҳои BRCA1 дар беморони TNBC маъмуланд, дар ҳоле ки тағиротҳои инфиродӣ BRCA2 дар B lumen бештаранд.
Тасвири 3 Паҳншавии зергурӯҳҳои саратони сина дар беморони дорои вариантҳои патогенӣ дар BRCA1 ва BRCA2.Гистограммаҳо, ки тақсимоти BRCA1- (сурхи торик) ва BRCA2- (сурх сурх) дар байни зергурӯҳҳои молекулавии беморони саратони сина нишон медиҳанд. Рақамҳое, ки дар ҳар як қуттӣ гузориш дода шудаанд, фоизи беморони гирифтори BRCA21 ва ҳар як намуди саратони BRCAPV-ро нишон медиҳанд.
Ихтисорот: PVs, варианти патогенӣ; HER2+, ретсептори омили афзоиши эпидермалии инсон 2 мусбат; TNBC, саратони сина манфии сегона.
Баъдан, мо намуд ва маҳалли ҷойгиршавии генофонди BRCA1 ва BRCA2-ро арзёбӣ кардем. Дар BRCA1 PV, мо 7 варианти ягонаи нуклеотидҳо (SNVs), 6 несткунӣ, 3 такрорӣ ва 1 воридкуниро мушоҳида кардем. Танҳо як мутатсия (c.5522delG) як кашфи нави маъмултарин дар BRCA11 буд. c.5035_5039delCTAAT.Ин тағирот ҳазфи панҷ нуклеотид (CTAAT) дар экзони BRCA1 15-ро дар бар мегирад, ки дар натиҷа лейцини аминокислотаҳо бо тирозин дар кодони 1679 иваз карда мешаванд ва аз сабаби тағирёбии чаҳорчӯбаи тарҷума бо як тағирёбии алтернативии пешгӯии пешгӯии протеиниА танҳо як тағироти дигари пешгӯии кодоналии пешгӯишаванда мебошанд. Қобили зикр аст, ки яке аз PV-ҳои гузоришшуда дар минтақаи консенсуси макони пайвастшавӣ ҷойгир буд (c.4357+1G>T) (Ҷадвали 1).
Дар робита ба BRCA2 PV, мо 6 ҳазф, 6 SNV ва 2 такрорро мушоҳида кардем. Ҳеҷ кадоме аз тағиротҳои ёфтшуда нав нестанд. Се мутатсия дар популятсияи мо такрор шуд, c.428dup ва c.8487+1G>A дар 3 субъект мушоҳида шуд, пас аз он дар ду маврид c.5851_5854delAGTT2 такрор шуд. такрори C дар экзони 5-и BRCA2-ро дар бар мегирад, ки пешбинӣ шудааст, ки протеини буридашуда ва ғайрифунксионалӣ рамзгузорӣ кунад. Мутацияи c.8487+1G>А дар минтақаи дохилии BRCA2 intron 19 (± 1,2) ба амал меояд ва ба пайдарпаии консенсуси пайвастшавӣ таъсир мерасонад, ки дар натиҷа протеини ғайримуқаррарӣ тағйир меёбад. Варианти патогении c.5851_5854delAGTT бо сабаби ҳазфи 4-нуклеотид аз мавқеъҳои нуклеотидҳои 5851 то 5854 дар экзони рамзгузории 10-и гени BRCA2 ба амал меояд ва боиси тағирёбии чаҳорчӯбаи тарҷума бо кодони алтернативии пешгӯии таваққуф мегардад (п.S1951Wf ба таври қаблӣ гузориш нашудааст). Дар як бемор c.631G>A ва c.7008-2A>T ошкор карда шуданд.34 Мутацияи аввал иваз кардани аденозин (А) дар экзони BRCA2 7 бо гуанини (G) дорои нуклеотиди иборат аст, ки дар натиҷа валин ба изолейцин дар кодони 211 тағйир меёбад, изолейцин амхисҳои кислотаи изолейин бо таъсироти хеле шабеҳи кислотаи изолейкин. mRNA splicing. Варианти дуюм аст, ки дар як минтақаи intronic ҷойгир ва боиси дучандон A ба тимин (T) пеш аз экзон 13 ген рамзгузорро BRCA2. The c.7008-2A>T Тағйирот метавонад транскриптҳои сершумор дарозии гуногун тавлид. Ғайр аз ин, дар гурӯҳи BRCA2 аз PVs (% 2 аз PVs, таѓйироти 284).
Мо баъдан харитаи BRCA1 / 2 мутатсияҳои зараровар дар доменҳои функсионалӣ ва минтақаҳои сафеда-ҳатмӣ (расми 4) .Дар ген BRCA1, 50% PVs дар минтақаи кластери саратони сина (BCCR) ҷойгир буданд, дар ҳоле ки 22% мутатсия дар минтақаи кластери саратони тухмдон (OCCR) ҷойгир буданд (Расми 42 PVCA3, Варианти PVCA3. Дар Варианти PVBR% 427). воқеъ дар минтақаи BCCR ва 42,8% мутатсияҳо дар OCCR ҷойгир буданд (расми 4B). Баъдан, мо ҷойгиршавии PV дар дохили доменҳои протеини BRCA1 ва BRCA2 арзёбӣ кардем. Барои протеини BRCA1, мо се PVs дар ҳалқа ва доменҳои coiled, ва ду мутатсия дар домени BRCTg.PVA4 (Барои протеини BRCT PVA2) ёфтем. ба домени такрории BRC харита шудааст, дар ҳоле ки дар доменҳои олиго/олигосахарид-ҳатмии (OB) ва бурҷ (T) 3 тағироти интронӣ ва 3 экзоникӣ ошкор карда шуданд (Расми 4B).
Тасвири 4 Намоиши схематикии сафедаҳои BRCA1 ва BRCA2 ва маҳаллисозии вариантҳои патогенӣ. Ин рақам тақсимоти вариантҳои патогении BRCA1 (A) ва BRCA2 (B) дар беморони саратони сина нишон медиҳад. Мутацияҳои экзоникӣ бо ранги кабуд нишон дода шудаанд, дар ҳоле ки вариантҳои интронӣ бо ранги афлесун нишон дода шудаанд. Баландии сатр шумораи ҳолатҳо ва протеинҳои гузоришшудаи BRCA2-ро нишон медиҳад. Протеини BRCA1 дорои домени ҳалқа (RING) ва пайдарпаии маҳаллисозии ядроӣ (NLS), домени печонидашуда, домени кластери SQ/TQ (SCD) ва домени BRCA1 C-терминал (BRCT) мебошад. (B) Протеини BRCA2 дорои ҳашт такрори BRC, як домени ҳатмии ДНК (бо се домени спиралӣ) дорад. Қатҳои олигонуклеотид/олигосахаридҳои ҳатмӣ (OB), домени бурҷ (T) ва NLS дар тарафи C. Майдонҳо бо номи Минтақаи кластери саратони сина (BCCR) ва минтақаи кластери саратони тухмдон (OCCR) дар поён нишон дода шудаанд.*Мутацияҳоеро ифода мекунанд, ки кодонҳои қатъиро муайян мекунанд.
Пас аз он мо хусусиятҳои клиникии клиникии милодро таҳқиқ кардем, ки метавонанд бо ҳузури BRCA1 / 2 PV алоқаманд бошанд. Сабтҳои пурраи клиникӣ барои 181 беморони BRCA1 / 2-манфӣ (на интиқолдиҳандагон) ва ҳама интиқолдиҳандагон (n = 35) дастрас буданд. Дар байни суръати паҳншавии варамҳо ва дараҷа алоқамандӣ вуҷуд дошт.
Мо тақсимоти Ki-67-ро дар асоси медиани гурӯҳи мо ҳисоб кардем (25%, диапазони <10-90%). Субъектҳои дорои Ki-67 < 25% ҳамчун "Ки-67 паст" муайян карда шуданд, дар ҳоле ки ашхоси дорои арзишҳои ≥ 25% "баланд Ki-67" ҳисобида шуданд. Фарқияти назаррас байни Ki-67 ва ғайрикари <1-70 ёфт шуд. Интиқолдиҳандагони BRCA1 PV (расми 5А).
Тасвири 5 Муносибати Ki-67 бо тақсимоти дараҷа дар занони саратони сина бо BRCA1 ва BRCA2 PVs. (A) Қуттии ҷадвал нишон медиҳад, ки арзишҳои медиании Ki-67 дар 181 беморони интиқолдиҳандаи пеш аз милод нисбат ба BRCA1 (18) ё BRCA2 (17) беморони PV. Қиматҳои P аз 0,5 грами назарраси ӯро ифода мекунанд. Беморони саратони милод ба гурӯҳҳои дараҷаи гистологӣ (G2 ва G3) мувофиқи ҳолати мутатсияи BRCA1 ва BRCA2 (субъектҳои WT, интиқолдиҳандагони BRCA1 ва BRCA2 PVs).
Ба ҳамин монанд, мо тафтиш кардем, ки дараҷаи варам бо мавҷудияти BRCA1/2 PV алоқаманд аст. Азбаски G1 пеш аз милод дар аҳолии мо мавҷуд набуд, мо беморонро ба ду гурӯҳ тақсим кардем (G2 ё G3). Мутобиқи натиҷаҳои Ki-67, таҳлил таносуби аз ҷиҳати оморӣ муҳимро байни дараҷаи варамҳо ва мутацияи баландтари BRCA1 дар пропорцияи автомобилии BRCA3, мутацияи GBR1, муайян кард. нисбат ба интиқолдиҳандагон (p<0.005) (Расми 5B).
Пешрафтҳо дар технологияи пайдарпайии ДНК ба пешрафтҳои бесобиқа дар озмоиши генетикии BRCA1/2 имкон доданд, ки барои беморони дорои таърихи оилавии саратон оқибатҳои муҳим доранд. То имрӯз, тақрибан 20.000 вариантҳои BRCA1/2 мувофиқи Ҷамъияти генетикаи тиббии Амрико 35 ва системаи ENIGMA13 муайян ва тасниф карда шудаанд. спектри мутатсия дар минтақаҳои ҷуғрофӣ ба таври васеъ фарқ мекунад.37 Дар Италия сатҳи BRCA1/2 PV-ҳо аз 8% то 37% буд, ки тағйирёбии васеи дохили кишварро нишон дод.38,39 Сицилия бо аҳолии қариб 5 миллион нафар аз ҷиҳати шумораи аҳолӣ панҷумин минтақаи калонтарин дар Италия мебошад. дар кисми шаркии чазира ягон далели васеъ нест.
Тадқиқоти мо яке аз гузоришҳои аввалин оид ба паҳншавии BRCA1/2 PV дар беморони пеш аз милод дар Сицилияи шарқӣ мебошад.28 Мо таҳлили худро ба BC равона кардем, зеро ин бемории маъмултарин дар гурӯҳи мост.
Ҳангоми санҷиши 389 беморони пеш аз милод, 9% BRCA1/2 PV-ҳоро интиқол доданд, ки дар байни BRCA1 ва BRCA2 баробар тақсим карда шудаанд. Ин натиҷаҳо бо натиҷаҳои қаблан гузоришшуда дар аҳолии Италия мувофиқат мекунанд.28 Ҷолиб он аст, ки 3% (13/389) гурӯҳи мо мардон буданд. Хавфи мутатсияи BRCA1/2. Бо вуҷуди ин, ҳеҷ яке аз ин мардон BRCA1/2 PV-ро таҳия накарданд, аз ин рӯ онҳо барои таҳлили минбаъдаи молекулавӣ барои истисно кардани мавҷудияти мутатсияҳои камтар маъмул ба монанди PALB2, RAD51C ва D, дар байни дигарон буданд. Вариантҳои аҳамияти номуайян дар 7% субъектҳое дарёфт карда шуданд, ки дар натиҷаи ин BRCA2 пешгӯӣ буд. далел. 28,41,42
Вақте ки мо тақсимоти зертипҳои молекулавии BC дар занони мутант BRCA1/2-ро таҳлил кардем, мо ассотсиатсияҳои маълумро байни TNBC ва BRCA1 PV (58,8%) ва байни luminal B BC ва BRCA2 PV (55,6%) тасдиқ кардем. маълумот.16,43
Сипас мо ба намуд ва ҷойгиршавии BRCA1/2 PV тамаркуз мекунем. Дар гурӯҳи мо маъмултарин BRCA1 PV c.5035_5039delCTAAT буд. Ҳарчанд Incorvaia et al. ин вариантро дар когорти сицилии худ тавсиф накардаанд, муаллифони дигар онро ҳамчун хати насли BRCA1 PV гузориш додаанд.34 Дар гурӯҳи мо якчанд BRCA1 PV-ҳо пайдо шуданд - масалан c.181T>G, c.514del, c.3253dupA ва c.5266dupC - ки дар ду мутатсия дар SBR28 мушоҳида шудаанд. (c.181T>G ва c.5266dupC) маъмулан дар яҳудиёни Ашкеназии Аврупои Шарқӣ ва Марказӣ (Полша, Чехия), Словенӣ, Австрия, Маҷористон, Беларус ва Олмон пайдо мешаванд), 44,45 ва дар Иёлоти Муттаҳида ва Аргентина, ба наздикӣ ҳамчун "навбати такроршавандаи ҷарима" муайян карда шуд ва дар беморони BC41 варианти ҷадиди ҷанин буд. қаблан дар 8 беморони саратони сина аз шимоли Сицилия дар Палермо ва Мессина муайян карда шуданд. Ҷолиб он аст, ки ҳатто Incorvaia et al. Варианти c.3253dupA-ро дар баъзе оилаҳо дар Катания пайдо карданд.28 Намояндагии бештари PV-ҳои BRCA2 c.428dup, c.5851_5854delAGTT ва варианти интроникии c.8487+1G>A мебошанд, ки дар як бемор дар Палермо бо c.45858dup, c.45845dup, ба таври муфассал гузориш дода шудаанд. дар хонаводаҳои шимолу ғарби Сицилия, асосан дар минтақаҳои Трапани ва Палермо мушоҳида шудааст, дар ҳоле ки c.5851_5854delAGTT PV дар хонаводаҳои шимолу ғарби Сицилия мушоҳида шудааст. Варианти 8487+1G>A бештар дар субъектҳои Мессина, Палермо ва Калтаниссетбек ва Аллтанисбетта маъмул буд28. қаблан тағирёбии c.5851_5854delAGTT дар Колумбия тавсиф карда шуда буд.37 Дигар BRCA2 PV, c.631+1G>A дар беморони BC ва OC аз Сицилия (Агригенто, Сиракуса ва Рагуса) пайдо шудааст.28 Қобили зикр аст, ки мо ҳамзистии ду варианти BRCA2 ва BRCA2 cA (BRCA2>36) мушоҳида кардем. c.7008-2A>T) дар ҳамон бемор, ки мо тахмин карда будем, ки дар реҷаи cis ҷудо карда шуда буд, тавре ки қаблан гузориш дода шуда буд.34,46 Ин мутатсияҳои BRCA2 воқеан дар минтақаи Италия зуд-зуд мушоҳида мешаванд ва муайян карда шудаанд, ки кодонҳои пеш аз мӯҳлатро ҷорӣ мекунанд, ки ба пайвастшавии паёмнависии РНК таъсир мерасонанд ва боиси нокомии сафедаи BRCA2 мегардад84.
Мо инчунин PV-ҳои BRCA1 ва BRCA2-ро дар минтақаҳои тахминии OCCR ва BCCR доменҳо ва генҳои сафедаҳо харита кардем. Ин минтақаҳоро Реббек ва дигарон тавсиф кардаанд. мутаносибан ҳамчун минтақаҳои хавфи рушди саратони тухмдон ва сина.49 Бо вуҷуди ин, далелҳо дар бораи робитаи байни ҷойгиршавии вариантҳои хати тухмдон ва хатари саратони сина ё тухмдон баҳснок боқӣ мемонанд.28,50-52 Дар аҳолии мо, BRCA1 PVs асосан дар минтақаи BCCR ҷойгир буданд, дар ҳоле ки мо дар минтақаҳои BRCA2 пеш аз PVCH ҷойгир буданд. дар байни минтақаҳои тахминии OCCR ва BCCR ва хусусиятҳои BC ягон робита пайдо карда наметавонад. Ин метавонад ба шумораи маҳдуди беморони мутацияҳои BRCA1/2 вобаста бошад. Аз нуқтаи назари домени сафеда, PVs BRCA1 дар тамоми сафеда тақсим карда мешаванд ва тағиротҳои BRCA2 афзалиятнок дар домени такрории BRC пайдо мешаванд.
Ниҳоят, мо хусусиятҳои клиникӣ-патологии пеш аз милодро бо BRCA1/2 PV алоқаманд кардем. Аз сабаби шумораи маҳдуди беморон, мо танҳо таносуби назаррасро байни Ki-67 ва дараҷаи варам пайдо кардем. Ҳарчанд арзёбӣ ва тафсири Ki-67 то андозае баҳсбарангез боқӣ мондааст, мутмаин аст, ки сатҳи баланди пролиферативӣ бо зиёд шудани хатари такроршавии беморӣ ва коҳиши беморӣ алоқаманд аст. Фарқияти байни "баланд" ва "паст" Ki-67 20% аст. Аммо, ин ҳадди ақалл ба аҳолии мутацияи BRCA1/2, ки арзиши миёнаи Ki-67 25% дорад, дахл надорад. Ин тамоюл дар сатҳи баланди Ki-67 метавонад бо паҳншавии люминалии B ва TNBCH, ки чанде аз colum luminal мо буд, шарҳ дода шавад. Баъзе далелҳо нишон медиҳанд, ки дараҷаи баландтари Ki-67 (25-30%) метавонад беморонро мувофиқи пешгӯиашон беҳтар гурӯҳбандӣ кунад.53,54 Аз натиҷаҳои таҳлили мо, таносуби назаррас тааҷҷубовар нест. Байни Ki-67 ва синфҳои баланд ва мавҷудияти BRCA1 PV рух медиҳад. хусусиятҳо.16,17
Хулоса, ин таҳқиқот гузоришро дар бораи вазъи мутатсиявии BRCA1/2 дар когорти милод аз шарқи Сицилия пешниҳод мекунад. Дар маҷмӯъ, бозёфтҳои мо бо далелҳои қаблан мавҷудбуда ҳам дар робита ба паҳншавии мутатсия ва хусусиятҳои клиникӣ дар милод мувофиқат мекунанд. Тадқиқотҳои бештар дар популятсияҳои калонтари BRCA1/2-мутанти BC, аз қабили васеъ кардани таҳлили мутансионии BC, баҳогузорӣ карда мешаванд, ки бо истифода аз ташхиси бисёрҷонибаи мутанти BC. мавҷудияти PVs, ки фарқкунанда ва камтар аз BRCA1/2 мебошанд. Ин имкон медиҳад, ки муайян ва идоракунии дурусти шумораи афзояндаи субъектҳои хавфи зиёдшавии саратон аз сабаби мутатсияҳои генетикӣ.
Мо тасдиқ кардем, ки беморон розигии огоҳона барои озод кардани намунаҳои варамҳои худ барои мақсадҳои таҳқиқот беном имзо кардаанд. Ҳама беморон мувофиқи Эъломияи Ҳелсинки розигии хаттии огоҳшударо имзо карданд. Мувофиқи сиёсати AOU Policlinico "G.Rodolico - S.Marco", ин таҳқиқот аз баррасии ахлоқӣ озод карда шуд, зеро ба ҳама беморон таҳлили хаттӣ дода шудааст. розигӣ. Беморон инчунин ба истифодаи маълумоти онҳо барои мақсадҳои тадқиқотӣ розигӣ медиҳанд.
Мо ба профессор Паоло Вигнери барои кӯмакаш дар нигоҳубини беморони саратони сина, ки аз ҷониби Кумитаи этика дархост шудааст, ташаккур мегӯем.
Федерика Марторана дар бораи гонорар аз Иституто Ҷентили, Эли Лилли, Новартис, Пфайзер гузориш медиҳад. Муаллифони дигар дар ин кор бархӯрди манфиатҳоро эълон намекунанд.
1. Sung H, Ferlay J, Siegel RL, et al. Global Cancer Statistics 2020: GLOBOCAN мизони 36 саратонро дар 185 кишвари ҷаҳон тахмин мезанад.