మీ బ్రౌజర్‌లో ప్రస్తుతం జావాస్క్రిప్ట్ నిలిపివేయబడింది. జావాస్క్రిప్ట్ నిలిపివేయబడినప్పుడు ఈ వెబ్‌సైట్ యొక్క కొన్ని లక్షణాలు పనిచేయవు.
మీకు ఆసక్తి ఉన్న నిర్దిష్ట వివరాలు మరియు నిర్దిష్ట ఔషధంతో నమోదు చేసుకోండి, మీరు అందించే సమాచారాన్ని మా విస్తృతమైన డేటాబేస్‌లోని కథనాలతో సరిపోల్చుతాము మరియు మీకు వెంటనే PDF కాపీని ఇమెయిల్ చేస్తాము.
作者 స్టెల్లా S, విటేల్ SR, మార్టోరానా F, మాసిమినో M, పావోన్ G, లాంజాఫేమ్ K, బియాంకా S, బరోన్ C, గోర్గోన్ C, ఫిచెరా M, మంజెల్లా L
స్టెఫానియా స్టెల్లా, 1,2 సిల్వియా రీటా విటాలే, 1,2 ఫెడెరికా మార్టోరానా, 1,2 మిచెల్ మాసిమినో, 1,2 గియులియానా పావోన్, 3 కటియా లాంజాఫేమ్, 3 సెబాస్టియానో ​​బియాంకా, 4 చియారా బరోన్, 5 క్రిస్టినా గోర్గోన్, ఫిచెరా 6, 76 Manzella1,21 క్లినికల్ అండ్ ఎక్స్‌పెరిమెంటల్ మెడిసిన్ విభాగం, కాటానియా విశ్వవిద్యాలయం, కాటానియా, 95123, ఇటలీ;2 ప్రయోగాత్మక ఆంకాలజీ మరియు హెమటాలజీ కోసం కేంద్రం, AOU Policlinico "G.Rodolico - San Marco", Catania , 95123, ఇటలీ; 3 మెడికల్ ఆంకాలజీ, AOU పాలిక్లినికో "G. రోడోలికో - శాన్ మార్కో", కాటానియా, 95123, ఇటలీ; 4 మెడికల్ జెనెటిక్స్, ARNAS గారిబాల్డి, కాటానియా, 95123, ఇటలీ; 5 మెడిసిన్ జెనెటిక్స్, ASP, సిరక్యూస్, 96100, ఇటలీ; 6 బయోమెడికల్ మరియు బయోటెక్నాలజీ సైన్సెస్ విభాగం, కాటానియా విశ్వవిద్యాలయం, మెడికల్ జెనెటిక్స్, కాటానియా, ఇటలీ, 95123; 7ఒయాసి రీసెర్చ్ ఇన్స్టిట్యూట్-IRCCS, ట్రోయినా, 94018, ఇటలీ కమ్యూనికేషన్స్: స్టెఫానియా స్టెల్లా, టెల్ +39 095 378 1946, ఇమెయిల్ [email protected]; [email protected] ఉద్దేశ్యం: BRCA1 మరియు BRCA2 లలో జెర్మ్‌లైన్ ఉత్పరివర్తనలు మరియు క్యాన్సర్ జీవితకాల ప్రమాదంతో సంబంధం ఉన్న రొమ్ము క్యాన్సర్ (BC), అండాశయం (OC) మరియు ఇతరాలను స్థాపించారు. BRCA జన్యువు కోసం పరీక్ష అనేది వ్యక్తిగత ప్రమాదాన్ని అంచనా వేయడానికి, అలాగే క్యాన్సర్ రోగులలో ఆరోగ్యకరమైన క్యారియర్‌లలో నివారణ పద్ధతులను కనుగొనడానికి మరియు చికిత్సలను టైలరింగ్ చేయడానికి కీలకం. BRCA1 మరియు BRCA2 మార్పుల ప్రాబల్యం భౌగోళిక ప్రాంతాలలో విస్తృతంగా మారుతూ ఉంటుంది మరియు సిసిలియన్ కుటుంబాలలో BRCA వ్యాధికారక వైవిధ్యాలపై డేటా ఉన్నప్పటికీ, తూర్పు సిసిలీలోని జనాభాను ప్రత్యేకంగా లక్ష్యంగా చేసుకున్న అధ్యయనాలు లోపించాయి. తూర్పు సిసిలీ నుండి వచ్చిన BC రోగుల సమూహంలో BRCA వ్యాధికారక జెర్మ్‌లైన్ మార్పుల సంభవం మరియు పంపిణీని పరిశోధించడం మరియు తదుపరి తరం సీక్వెన్సింగ్ ఉపయోగించి నిర్దిష్ట BC లక్షణాలతో వారి అనుబంధాన్ని అంచనా వేయడం మా అధ్యయనం యొక్క లక్ష్యం. కణితి గ్రేడ్ మరియు విస్తరణ సూచికతో సంబంధం ఉన్న మార్పుల ఉనికి. ఫలితాలు: మొత్తంమీద, 35 మంది రోగులు (9%) BRCA వ్యాధికారక వైవిధ్యాన్ని కలిగి ఉన్నారు, BRCA1 లో 17 (49%) మరియు BRCA2 లో 18 (51%). BRCA1 మార్పులు ట్రిపుల్-నెగటివ్ BC రోగులలో ప్రబలంగా ఉన్నాయి, అయితే BRCA2 ఉత్పరివర్తనలు లూమినల్ BC లో ఎక్కువగా కనిపిస్తాయి. రోగులు. క్యారియర్లు కాని వారితో పోలిస్తే, BRCA1 వేరియంట్‌లతో ఉన్న సబ్జెక్టులు గణనీయంగా ఎక్కువ ట్యూమర్ గ్రేడ్ మరియు ప్రొలిఫెరేటివ్ ఇండెక్స్‌ను కలిగి ఉన్నాయి. ముగింపులు: మా పరిశోధనా ఫలితాలు తూర్పు సిసిలీ నుండి BC రోగులలో BRCA మ్యూచువల్ స్థితి యొక్క అవలోకనాన్ని అందిస్తాయి మరియు వంశపారంపర్య BC ఉన్న రోగులను గుర్తించడంలో NGS విశ్లేషణ పాత్రను నిర్ధారిస్తాయి. మొత్తంమీద, ఈ డేటా మ్యుటేషన్ క్యారియర్‌లలో క్యాన్సర్ యొక్క సరైన నివారణ మరియు చికిత్స కోసం BRCA స్క్రీనింగ్‌కు మద్దతు ఇచ్చే మునుపటి ఆధారాలతో స్థిరంగా ఉంది.
రొమ్ము క్యాన్సర్ (BC) ప్రపంచవ్యాప్తంగా అత్యంత సాధారణమైన ప్రాణాంతకత మరియు మహిళల్లో అత్యంత ప్రాణాంతకమైన క్యాన్సర్.1 BC రోగ నిరూపణ మరియు క్లినికల్ ప్రవర్తనను నిర్ణయించే జీవసంబంధమైన లక్షణాలను కాలక్రమేణా విస్తృతంగా అధ్యయనం చేసి పాక్షికంగా వివరించడం జరిగింది.వాస్తవానికి, ప్రస్తుతం BCని వివిధ మాలిక్యులర్ సబ్టైప్‌లుగా వర్గీకరించడానికి అనేక సర్రోగేట్ మార్కర్‌లను ఉపయోగిస్తున్నారు.అవి ఈస్ట్రోజెన్ (ER) మరియు/లేదా ప్రొజెస్టెరాన్ రిసెప్టర్ (PgR), హ్యూమన్ ఎపిడెర్మల్ గ్రోత్ ఫ్యాక్టర్ రిసెప్టర్ 2 (HER2) యాంప్లిఫికేషన్, ప్రొలిఫరేషన్ ఇండెక్స్ Ki-67 మరియు ట్యూమర్ గ్రేడ్ (G).2 ఈ వేరియబుల్స్ కలయిక కింది BC వర్గాలను గుర్తించింది: 1) ER మరియు/లేదా PgR ఎక్స్‌ప్రెషన్‌ను చూపించే లూమినల్ ట్యూమర్‌లు BCలలో 75% వాటాను కలిగి ఉన్నాయి. ఈ కణితులను Ki-67 20% కంటే తక్కువగా ఉన్నప్పుడు మరియు HER2 నెగటివ్‌గా ఉన్నప్పుడు లూమినల్ Aగా మరియు Ki-67 20%కి సమానంగా లేదా అంతకంటే ఎక్కువ ఉన్నప్పుడు మరియు HER2 యాంప్లిఫికేషన్ సమక్షంలో లూమినల్ Bగా విభజించారు, విస్తరణ సూచికతో సంబంధం లేకుండా; 2) ER మరియు PgR ప్రతికూలంగా ఉన్నప్పటికీ HER2 యాంప్లిఫికేషన్‌ను చూపించే HER2+ కణితులు. ఈ సమూహం అన్ని రొమ్ము కణితుల్లో 10% వాటా కలిగి ఉంది; 3) ER మరియు PgR వ్యక్తీకరణ మరియు HER2 యాంప్లిఫికేషన్‌ను చూపించని ట్రిపుల్-నెగటివ్ రొమ్ము క్యాన్సర్ (TNBC), రొమ్ము క్యాన్సర్‌లలో దాదాపు 15% వాటా కలిగి ఉంది.2-4
ఈ BC ఉప రకాల్లో, కణితి గ్రేడ్ మరియు విస్తరణ సూచిక కణితి దూకుడు మరియు రోగ నిరూపణతో ప్రత్యక్షంగా మరియు స్వతంత్రంగా సంబంధం కలిగి ఉన్న క్రాస్-సెక్షనల్ బయోమార్కర్లను సూచిస్తాయి.5,6
పైన పేర్కొన్న జీవసంబంధమైన లక్షణాలతో పాటు, BC అభివృద్ధికి దారితీసే వారసత్వ జన్యు మార్పుల పాత్ర గత కొన్ని సంవత్సరాలుగా చాలా ముఖ్యమైనదిగా మారింది.7 10 లో 1 రొమ్ము కణితులు నిర్దిష్ట జన్యువులలో జెర్మ్‌లైన్ మార్పుల కారణంగా వారసత్వంగా వస్తాయి.8 180,000 కంటే ఎక్కువ మంది మహిళలు పాల్గొన్న రెండు పెద్ద ఎపిడెమియోలాజికల్ అధ్యయనాలు ఇటీవల ఎనిమిది జన్యువుల సమూహాన్ని (అంటే, ATM, BARD1, BRCA1, BRCA2, CHK2, PALB2, RAD51C, మరియు RAD51D) గుర్తించాయి, ఇవి ప్రధానంగా వంశపారంపర్య BCకి కారణమని గుర్తించాయి. ఈ జన్యువులలో, BRCA1 మరియు BRCA2 (ఇకపై BRCA1/2 అని పిలుస్తారు) రొమ్ము కణితుల అభివృద్ధితో బలమైన సహసంబంధాన్ని చూపించాయి.9-12 వాస్తవానికి, జెర్మ్‌లైన్ BRCA1/2 ఉత్పరివర్తనలు BC యొక్క జీవితకాల ప్రమాదాన్ని అలాగే అండాశయం, ప్రోస్టేట్, ప్యాంక్రియాటిక్, కొలొరెక్టల్ మరియు మెలనోమాతో సహా ఇతర ప్రాణాంతకతలను గణనీయంగా పెంచుతాయి. 13 నుండి 80 సంవత్సరాల వయస్సు వరకు, BRCA1 వ్యాధికారక వైవిధ్యం (PV) ఉన్న మహిళల్లో BC యొక్క సంచిత సంభవం 72% మరియు 69% BRCA2 PV.14 ఉన్న మహిళలు
ముఖ్యంగా, ఇటీవలి ప్రచురణ BC ప్రమాదం PV రకంపై ఆధారపడి ఉంటుందని సూచిస్తుంది. వాస్తవానికి, వ్యాధికారక కత్తిరింపు వైవిధ్యాలతో పోలిస్తే, మెరుస్తున్న మిస్సెన్స్ వైవిధ్యాలు, ముఖ్యంగా BRCA1 జన్యువులో, ముఖ్యంగా వృద్ధ మహిళలలో BC ప్రమాదాన్ని తగ్గించాయి.15
BRCA1 లేదా BRCA2 PV ఉనికి వివిధ జీవసంబంధమైన మరియు క్లినికోపాథలాజికల్ లక్షణాలతో ముడిపడి ఉంది.16,17 BRCA1-సంబంధిత BCలు వైద్యపరంగా దూకుడుగా, పేలవంగా భేదం కలిగి మరియు అధిక విస్తరణకు గురవుతాయి.ఈ కణితులు సాధారణంగా ట్రిపుల్ నెగటివ్‌గా ఉంటాయి మరియు ప్రారంభ వయస్సులోనే ప్రారంభమవుతాయి.BRCA2-పరివర్తన చెందిన రోగులలో సంభవించే కణితులు సాధారణంగా మధ్యస్థం నుండి బాగా-భేదించబడిన గ్రేడ్‌లు మరియు వేరియబుల్ ప్రోలిఫెరేటివ్ సూచికలను ప్రదర్శిస్తాయి.ఈ కణితులు ల్యూమన్ Bలో ఎక్కువగా కనిపిస్తాయి మరియు సాధారణంగా వృద్ధులలో సంభవిస్తాయి.16-18 ముఖ్యంగా, BRCA1 మరియు BRCA2లలో ఉత్పరివర్తనలు ప్లాటినం లవణాలు మరియు పాలీ(ADP-రైబోస్) పాలిమరేస్ ఇన్హిబిటర్లు (PARPi) వంటి లక్ష్య ఔషధాలతో సహా నిర్దిష్ట చికిత్సలకు సున్నితత్వాన్ని పెంచుతాయి.19,20
గత కొన్ని సంవత్సరాలుగా, క్లినికల్ ప్రాక్టీస్‌లో నెక్స్ట్-జనరేషన్ సీక్వెన్సింగ్ (NGS) అమలు చేయడం వలన BRCA1/2.21తో సహా క్యాన్సర్ ససెప్టబిలిటీ సిండ్రోమ్‌ల కోసం మాలిక్యులర్ పరీక్ష చేయించుకోవడానికి BC రోగుల సంఖ్య పెరుగుతోంది. అదే సమయంలో, కుటుంబ చరిత్ర, జనాభా మరియు క్లినికోపాథలాజికల్ లక్షణాలకు సంబంధించిన ఖచ్చితమైన ప్రమాణాల ఆధారంగా నిర్వచనాలు BRCA1/2 పరీక్షకు అర్హమైన వ్యక్తులను బాగా గుర్తించగలవు.22,23 ఈ సందర్భంలో, నిర్దిష్ట జనాభాలో BRCA1/2 స్క్రీనింగ్‌పై ఆధారాలు పేరుకుపోతున్నాయి, ఇది భౌగోళిక ప్రాంతాలలో తేడాలను హైలైట్ చేస్తుంది.24–27 పశ్చిమ సిసిలీలో BC కోహోర్ట్‌పై నివేదికలు ఉన్నప్పటికీ, తూర్పు సిసిలీ జనాభాలో BRCA1/2 స్క్రీనింగ్‌పై తక్కువ డేటా అందుబాటులో ఉంది.28,29
తూర్పు సిసిలీ నుండి BC రోగులలో జెర్మ్‌లైన్ BRCA1/2 స్క్రీనింగ్ ఫలితాలను మేము ఇక్కడ వివరిస్తాము, BRCA1 లేదా BRCA2 ఉత్పరివర్తనాల ఉనికిని ఈ కణితుల యొక్క ప్రధాన క్లినికోపాథలాజికల్ లక్షణాలతో మరింత పరస్పరం అనుసంధానిస్తుంది.
పోలిక్లినికో హాస్పిటల్‌లోని “సెంటర్ ఫర్ ఎక్స్‌పెరిమెంటల్ ఆంకాలజీ అండ్ హెమటాలజీ”లో పునరాలోచన అధ్యయనం జరిగింది. కాటానియాలోని రోడోలికో - శాన్ మార్కో. జనవరి 2017 నుండి మార్చి 2021 వరకు, రొమ్ము మరియు అండాశయం, మెలనోమా, ప్యాంక్రియాటిక్ లేదా ప్రోస్టేట్ క్యాన్సర్ ఉన్న మొత్తం 455 మంది రోగులను BRCA/2 జన్యు పరీక్ష కోసం మా మాలిక్యులర్ డయాగ్నస్టిక్ లాబొరేటరీకి సూచించారు. ఈ అధ్యయనం హెల్సింకి డిక్లరేషన్ ప్రకారం నిర్వహించబడింది మరియు పాల్గొనే వారందరూ పరమాణు విశ్లేషణకు ముందు వ్రాతపూర్వక సమాచార సమ్మతిని అందించారు.
BC యొక్క హిస్టోలాజికల్ మరియు బయోలాజికల్ లక్షణాలు (ER, PgR, HER2 స్థితి, Ki-67, మరియు గ్రేడ్) కోర్ బయాప్సీ లేదా సర్జికల్ నమూనాలపై అంచనా వేయబడ్డాయి, దూకుడు కణితి భాగాలను మాత్రమే పరిగణనలోకి తీసుకున్నారు. ఈ లక్షణాల ఆధారంగా, BC లను ఈ క్రింది విధంగా వర్గీకరించారు: లుమినల్ A (ER+ మరియు/లేదా PgR+, HER2-, Ki-67<20%), లుమినల్ B (ER+ మరియు/లేదా PgR+, HER2-, Ki-67≥20%), లుమినల్ B-HER2+ (ER మరియు/లేదా PgR+, HER2+), HER2+ (ER మరియు PgR-, HER2+) లేదా ట్రిపుల్ నెగటివ్ (ER మరియు PgR-, HER2-).
BRCA1 మరియు BRCA2 మ్యుటేషన్ స్థితిని అంచనా వేయడానికి ముందు, ఆంకాలజిస్ట్, జన్యు శాస్త్రవేత్త మరియు మనస్తత్వవేత్తతో కూడిన బహుళ విభాగ బృందం ప్రతి రోగికి BRCA1 మరియు/లేదా BRCA1 ఉనికిని లేదా BRCA2 జన్యువులో PV ప్రమాదం ఎక్కువగా ఉన్న వ్యక్తులను నిర్ధారించడానికి కణితి జన్యుశాస్త్ర సంప్రదింపులను నిర్వహించింది. ఇటాలియన్ సొసైటీ ఆఫ్ మెడికల్ ఆంకాలజీ (AIOM) మార్గదర్శకాలు మరియు స్థానిక సిసిలియన్ సిఫార్సుల ప్రకారం రోగి ఎంపిక జరిగింది.30,31 ఈ ప్రమాణాలలో ఇవి ఉన్నాయి: (i) ససెప్టబిలిటీ జన్యువులలో తెలిసిన వ్యాధికారక వైవిధ్యాల కుటుంబ చరిత్ర (ఉదా., BRCA1, BRCA2, TP53, PTEN); (ii) BC ఉన్న పురుషులు; (iii) BC మరియు OC ఉన్నవారు; (iv) BC <36 సంవత్సరాలు, TNBC <60 సంవత్సరాలు, లేదా ద్వైపాక్షిక BC <50 సంవత్సరాలు; (v) BC <50 సంవత్సరాల వ్యక్తిగత వైద్య చరిత్ర మరియు కనీసం ఒక మొదటి-డిగ్రీ బంధువులు: (a) BC < 50 సంవత్సరాలు; (b) ఏ వయస్సు గల నాన్-మ్యూకినస్ మరియు నాన్-బోర్డర్‌లైన్ OC; (c) ద్వైపాక్షిక BC; (డి) పురుష BC; (ఇ) ప్యాంక్రియాటిక్ క్యాన్సర్; (ఎఫ్) ప్రోస్టేట్ క్యాన్సర్; (vi) రెండు లేదా అంతకంటే ఎక్కువ BC యొక్క వ్యక్తిగత చరిత్ర > 50 సంవత్సరాలు మరియు ఒకరికొకరు ఫస్ట్-డిగ్రీ బంధువులైన బంధువులకు BC, OC, లేదా ప్యాంక్రియాటిక్ క్యాన్సర్ కుటుంబ చరిత్ర (ఆమె ఫస్ట్-డిగ్రీ బంధువులు అయిన బంధువులతో సహా); (vii) OC యొక్క వ్యక్తిగత చరిత్ర మరియు కనీసం ఒక ఫస్ట్-డిగ్రీ బంధువు: (ఎ) BC <50 సంవత్సరాలు; (బి) NOC; (సి) ద్వైపాక్షిక BC; (డి) పురుష BC; (vii) హై-గ్రేడ్ సీరస్ OC ఉన్న స్త్రీ.
ప్రతి రోగి నుండి 20 mL పరిధీయ రక్త నమూనాను పొంది EDTA ట్యూబ్‌లలోకి (BD బయోసైన్సెస్) సేకరించారు. తయారీదారు సూచనల మేరకు QIAsymphony DSP DNA Midi కిట్ ఐసోలేషన్ కిట్ (QIAGEN, హిల్డెన్, ఇటలీ) ఉపయోగించి 0.7 mL మొత్తం రక్త నమూనాల నుండి జెనోమిక్ DNAను వేరుచేసి, Qubit® 3.0 ఫ్లోరోమీటర్ (థర్మో ఫిషర్ సైంటిఫిక్, వాల్తామ్, MA, USA) ద్వారా పంపించారు. క్వాంటిఫికేషన్ నిర్వహించండి. టార్గెట్ ఎన్‌రిచ్‌మెంట్ మరియు లైబ్రరీ తయారీని Oncomine™ BRCA రీసెర్చ్ అస్సే చెఫ్ నిర్వహిస్తారు, తయారీదారు సూచనల ప్రకారం ఆటోమేటెడ్ లైబ్రరీ తయారీ కోసం Ion AmpliSeq™ Chef Reagents DL8 కిట్‌లోకి లోడ్ చేయడానికి సిద్ధంగా ఉంటుంది. కిట్‌లో రెండు మల్టీప్లెక్స్ PCR ప్రైమర్ పూల్స్ ఉంటాయి, వీటిని అన్ని BRCA1 (NM_007300.3) మరియు BRCA2 (NM_000059.3) జన్యువులను అధ్యయనం చేయడానికి ఉపయోగించవచ్చు. క్లుప్తంగా, లైబ్రరీ తయారీ కోసం బార్‌కోడ్ చేసిన ప్లేట్‌లకు ప్రతి డైల్యూటెడ్ నమూనా DNA (10 ng) యొక్క 15 µL జోడించబడింది మరియు అన్ని రియాజెంట్‌లు మరియు వినియోగ వస్తువులు Ion Chef™ పరికరంలో లోడ్ చేయబడ్డాయి. ఆటోమేటెడ్ లైబ్రరీ తయారీ మరియు బార్‌కోడ్ చేసిన నమూనా లైబ్రరీ పూలింగ్ తర్వాత Ion Chef™ పరికరంలో నిర్వహించబడ్డాయి. తయారీదారు సూచనల ప్రకారం తయారుచేసిన లైబ్రరీల సంఖ్యను Qubit® 3.0 ఫ్లోరోమీటర్ (థర్మో ఫిషర్ సైంటిఫిక్, వాల్తామ్, MA, USA) ద్వారా అంచనా వేయబడింది. చివరగా, లైబ్రరీలను Ion Chef™ లైబ్రరీ నమూనాలో ఈక్విమోలార్ నిష్పత్తులలో కలుపుతారు. ట్యూబ్‌లు (బార్‌కోడెడ్ ట్యూబ్‌లు) మరియు అయాన్ చెఫ్™ ఇన్‌స్ట్రుమెంట్‌పై లోడ్ చేయబడ్డాయి. అయాన్ 510 చిప్ (థర్మో ఫిషర్ సైంటిఫిక్) ఉపయోగించి అయాన్ టోరెంట్ S5 (థర్మో ఫిషర్ సైంటిఫిక్) ఇన్‌స్ట్రుమెంట్ (థర్మో ఫిషర్ సైంటిఫిక్) ఉపయోగించి సీక్వెన్సింగ్ నిర్వహించబడింది. యాంప్లికాన్ సూట్ (స్మార్ట్‌సెక్ srl) మరియు అయాన్ రిపోర్టర్ సాఫ్ట్‌వేర్ ద్వారా డేటా విశ్లేషణ నిర్వహించబడింది.
అన్ని వేరియంట్ నామకరణాలు ఆన్‌లైన్‌లో అందుబాటులో ఉన్న హ్యూమన్ జీనోమ్ వేరియేషన్ కన్సార్టియం యొక్క ప్రస్తుత మార్గదర్శకాలను అనుసరించాయి (HGVS, http://www.hgvs.org/mutnomen). BRCA1/2 వేరియంట్‌ల యొక్క క్లినికల్ ప్రాముఖ్యతను ఇంటర్నేషనల్ కన్సార్టియం ENIGMA (ఎవిడెన్స్-బేస్డ్ నెట్‌వర్క్ ఫర్ ఇంటర్‌ప్రెటింగ్ జెర్మ్‌లైన్ మ్యూటెంట్ అల్లెల్స్, https://enigmaconsortium.org/) వర్గీకరణను ఉపయోగించి మరియు ARUP, BRCAEXCHANGE, ClinVar, IARC_LOVD, మరియు UMD వంటి విభిన్న డేటాబేస్‌లను సంప్రదించడం ద్వారా నిర్వచించబడింది. వర్గీకరణలో ఐదు విభిన్న ప్రమాద వర్గాలు ఉన్నాయి: నిరపాయకరమైన (వర్గం I), అవకాశం ఉన్న నిరపాయకరమైన (వర్గం II), అనిశ్చిత ప్రాముఖ్యత యొక్క వైవిధ్యం (VUS, వర్గం III), అవకాశం ఉన్న వ్యాధికారక (వర్గం IV) మరియు వ్యాధికారక (వర్గం V). VarSome ప్రోటీన్ నిర్మాణం మరియు పనితీరుపై ఉత్పరివర్తనాల ప్రభావాన్ని కూడా విశ్లేషించింది, ఇది 30 డేటాబేస్‌లకు ప్రాప్యత కలిగిన సమాచార సాధనం.32
ప్రతి VUS కి సంభావ్య క్లినికల్ ప్రాముఖ్యతను కేటాయించడానికి, కింది గణన ప్రోటీన్ ప్రిడిక్షన్ అల్గోరిథంలు ఉపయోగించబడ్డాయి: MUTATION TASTER, 33 PROVEAN-SIFT (http://provean.jcvi.org/index.php), POLYPHEN-2 (http:// /genetics.bwh.harvard.edu/pph2/) మరియు Align-GVGD (http://agvgd.hci.utah.edu/agvgd_input.php). తరగతి 1 మరియు 2 గా వర్గీకరించబడిన వైవిధ్యాలను వైల్డ్ రకంగా పరిగణించారు.
సాంగర్ సీక్వెన్సింగ్ ప్రతి వ్యాధికారక వేరియంట్ ఉనికిని నిర్ధారించింది. క్లుప్తంగా, BRCA1 మరియు BRCA2 జన్యు సూచన సీక్వెన్స్‌లను (వరుసగా NG_005905.2, NM_007294.3 మరియు NG_012772.3, NM_000059.3) ఉపయోగించి కనుగొనబడిన ప్రతి వేరియంట్‌కు ఒక జత నిర్దిష్ట ప్రైమర్‌లను రూపొందించారు. అందువల్ల, సాంగర్ సీక్వెన్సింగ్ తర్వాత లక్ష్య PCRను ప్రదర్శించారు.
BRCA1/2 జన్యువుకు ప్రతికూలంగా పరీక్షించబడిన రోగులను తయారీదారు సూచనల ప్రకారం, పెద్ద జన్యు పునర్వ్యవస్థీకరణల (LGR) ఉనికిని అంచనా వేయడానికి మల్టీప్లెక్స్ లిగేషన్-డిపెండెంట్ ప్రోబ్ యాంప్లిఫికేషన్ (MLPA) ద్వారా పరీక్షించారు. క్లుప్తంగా, DNA నమూనాలను డీనాట్ చేస్తారు మరియు 60 వరకు BRCA1 మరియు BRCA2 జన్యు-నిర్దిష్ట ప్రోబ్‌లను ఉపయోగిస్తారు, ప్రతి ఒక్కటి సుమారు 60 న్యూక్లియోటైడ్‌ల పొడవు గల నిర్దిష్ట DNA క్రమాన్ని గుర్తిస్తుంది. ప్రత్యేకమైన PCR యాంప్లికాన్‌ల సెట్‌ను కలిగి ఉన్న ప్రోబ్ యాంప్లిఫికేషన్ ఉత్పత్తులను కేశనాళిక ఎలక్ట్రోఫోరెసిస్ ద్వారా మరియు తగిన బ్యాచ్-నిర్దిష్ట కోఫాలిజర్ పట్టికలతో (www.mrcholland.com) కలిపి కోఫాలిజర్.నెట్ సాఫ్ట్‌వేర్ ద్వారా విశ్లేషించారు.
ఎంచుకున్న క్లినికోపాథలాజికల్ వేరియబుల్స్ (హిస్టోలాజికల్ గ్రేడ్ మరియు Ki-67% ప్రొలిఫరేషన్ ఇండెక్స్) BRCA1/2 PV ఉనికితో సంబంధం కలిగి ఉన్నాయి, p-విలువ <0.05 ముఖ్యమైనదిగా భావించి ఫిషర్ యొక్క ఖచ్చితమైన పరీక్షను ఉపయోగించి ప్రిజం సాఫ్ట్‌వేర్ v. 8.4 ఉపయోగించి లెక్కించబడ్డాయి.
జనవరి 2017 మరియు మార్చి 2021 మధ్య, 455 మంది రోగులను జెర్మ్‌లైన్ BRCA1/2 ఉత్పరివర్తనాల కోసం పరీక్షించారు. పోలిక్లినికో హాస్పిటల్‌లోని సెంటర్ ఫర్ ఎక్స్‌పెరిమెంటల్ ఆంకాలజీ అండ్ హెమటాలజీలో ఉత్పరివర్తన పరీక్ష జరిగింది. సిసిలియన్ మార్గదర్శకం (http://www.gurs.regione.sicilia.it/Indicep1.htm, N. 02-Venerdì 10 Gennaio 2020) ప్రకారం, రోడోలికో ఆఫ్ కాటానియా - శాన్ మార్కోలో మొత్తం 389 మంది రోగులు ఉన్నారు, వీరిలో రొమ్ము క్యాన్సర్, 37 అండాశయ క్యాన్సర్, 16 ప్యాంక్రియాటిక్ క్యాన్సర్, 8 ప్రోస్టేట్ క్యాన్సర్ మరియు 5 మెలనోమా ఉన్నాయి. క్యాన్సర్ రకం మరియు విశ్లేషణ ఫలితాల ప్రకారం రోగుల పంపిణీ చిత్రం 1లో చూపబడింది.
చిత్రం 1 అధ్యయనం యొక్క అవలోకనాన్ని చూపించే ఫ్లో చార్ట్‌ను చూపిస్తుంది. రొమ్ము, మెలనోమా, ప్యాంక్రియాటిక్, ప్రోస్టేట్ లేదా అండాశయ కణితులు ఉన్న రోగులను BRCA1 మరియు BRCA2 జన్యువులలో ఉత్పరివర్తనాల కోసం పరీక్షించారు.
సంక్షిప్తాలు: PVలు, వ్యాధికారక వైవిధ్యం; VUS, అనిశ్చిత ప్రాముఖ్యత కలిగిన వైవిధ్యం; WT, వైల్డ్-టైప్ BRCA1/2 శ్రేణి.
మేము మా అధ్యయనాలను రొమ్ము క్యాన్సర్ సమూహాలపై ప్రత్యేకంగా కేంద్రీకరించాము. రోగుల సగటు వయస్సు 49 సంవత్సరాలు (శ్రేణి 23-89) మరియు ప్రధానంగా మహిళలు (n=376, లేదా 97%).
ఈ సబ్జెక్టులలో, 64 (17%) మందికి BRCA1/2 ఉత్పరివర్తనలు ఉన్నాయి మరియు అందరూ స్త్రీలే. ముప్పై ఐదు (9%) మందికి PV మరియు 29 (7.5%) మందికి VUS ఉన్నాయి. 35 వ్యాధికారక వేరియంట్లలో పదిహేడు (48.6%) BRCA1లో మరియు 18 (51.4%) BRCA2లో సంభవించగా, 5 VUS BRCA1లో (17.2%) మరియు 24 (82.8%) BRCA2లో సంభవించాయి (గణాంకాలు 1 మరియు 2). MLPA విశ్లేషణలో LGR లేదు.
చిత్రం 2. 389 మంది రొమ్ము క్యాన్సర్ రోగులలో BRCA1 మరియు BRCA2 ఉత్పరివర్తనాల విశ్లేషణ.(A) 389 మంది రొమ్ము క్యాన్సర్ రోగులలో వ్యాధికారక వైవిధ్యాలు (PV) (ఎరుపు), అనిశ్చిత ప్రాముఖ్యత కలిగిన వైవిధ్యాలు (VUS) (నారింజ), మరియు WT (నీలం) పంపిణీ; (B) 389 మంది రొమ్ము క్యాన్సర్ రోగులు ముప్పై ఐదు (9%) మందికి BRCA1/2 వ్యాధికారక వైవిధ్యాలు (PVలు) ఉన్నాయి. వాటిలో, 17 (48.6%) BRCA1 PV క్యారియర్లు (ముదురు ఎరుపు) మరియు 18 (51.4%) BRCA2 క్యారియర్లు (లేత ఎరుపు); (C) 389 మంది సబ్జెక్టులలో 29 (7.5%) మంది VUS, 5 (17.2%) BRCA1 జన్యువులు (ముదురు నారింజ) మరియు 24 (82.8%) BRCA2 జన్యువులు (లేత నారింజ) కలిగి ఉన్నారు.
సంక్షిప్తాలు: PVలు, వ్యాధికారక వైవిధ్యం; VUS, అనిశ్చిత ప్రాముఖ్యత కలిగిన వైవిధ్యం; WT, వైల్డ్-టైప్ BRCA1/2 శ్రేణి.
BRCA1/2 PV ఉన్న రోగులలో BC మాలిక్యులర్ సబ్‌టైప్‌ల ప్రాబల్యాన్ని మేము తరువాత పరిశోధించాము. పంపిణీలో 2 (5.7%) లుమినల్ A, 15 (42.9%) లుమినల్ B, 3 (8.6%) లుమినల్ B-HER2+, 2 (5.7%) HER2+ మరియు 13 (37.1%) TNBC రోగులు ఉన్నారు. BRCA1-పాజిటివ్ రోగులలో, 5 (29.4%) మందికి లుమినల్ B BC, 2 (11.8%) మందికి HER2+ వ్యాధి, మరియు 10 (58.8%) మందికి TNBC ఉన్నాయి. BRCA1 ఉత్పరివర్తనలు లేని కణితులు లుమినల్ A లేదా లుమినల్ B-HER2+ (చిత్రం 3). BRCA2-పాజిటివ్ ఉప సమూహంలో, 10 (55.6%) కణితులు లుమినల్ B, 3 (16.7%) లుమినల్ B-HER2+, 3 (16.7%) TNBC మరియు 2 (11.1%) ఉన్నాయి. luminal A (చిత్రం 3). ఈ సమూహంలో HER2+ కణితులు లేవు. అందువల్ల, TNBC రోగులలో BRCA1 ఉత్పరివర్తనలు ప్రబలంగా ఉన్నాయి, అయితే BRCA2 మార్పులు ల్యూమన్ B వ్యక్తులలో ప్రధానంగా ఉన్నాయి.
చిత్రం 3 BRCA1 మరియు BRCA2 లలో వ్యాధికారక వైవిధ్యాలు ఉన్న రోగులలో రొమ్ము క్యాన్సర్ ఉపరకాల వ్యాప్తి. రొమ్ము క్యాన్సర్ రోగుల పరమాణు ఉపరకాలలో BRCA1- (ముదురు ఎరుపు) మరియు BRCA2- (లేత ఎరుపు) PV ల పంపిణీని చూపించే హిస్టోగ్రామ్‌లు. ప్రతి పెట్టెలో నివేదించబడిన సంఖ్యలు ప్రతి రొమ్ము క్యాన్సర్ ఉపరకాల కోసం BRCA1 మరియు BRCA2 PV ఉన్న రోగుల శాతాన్ని సూచిస్తాయి.
సంక్షిప్తాలు: PVలు, వ్యాధికారక వైవిధ్యం; HER2+, హ్యూమన్ ఎపిడెర్మల్ గ్రోత్ ఫ్యాక్టర్ రిసెప్టర్ 2 పాజిటివ్; TNBC, ట్రిపుల్-నెగటివ్ బ్రెస్ట్ క్యాన్సర్.
తరువాత, మేము BRCA1 మరియు BRCA2 PV ల రకం మరియు జన్యు స్థానికీకరణను అంచనా వేసాము. BRCA1 PV లో, మేము 7 సింగిల్ న్యూక్లియోటైడ్ వైవిధ్యాలు (SNV లు), 6 తొలగింపులు, 3 నకిలీలు మరియు 1 చొప్పించడాన్ని గమనించాము. ఒకే ఒక మ్యుటేషన్ (c.5522delG) కొత్త ఆవిష్కరణను సూచిస్తుంది. రెండు విషయాలలో కనుగొనబడిన అత్యంత సాధారణ BRCA1 PV c.5035_5039delCTAAT. ఈ మార్పులో BRCA1 ఎక్సాన్ 15 లో ఐదు న్యూక్లియోటైడ్లు (CTAAT) తొలగించబడతాయి, దీని ఫలితంగా కోడాన్ 1679 వద్ద టైరోసిన్ ద్వారా అమైనో ఆమ్లం లూసిన్ ప్రత్యామ్నాయం అవుతుంది మరియు అంచనా వేసిన ప్రత్యామ్నాయ స్టాప్ కోడాన్‌తో అనువాద ఫ్రేమ్‌షిఫ్ట్ కారణంగా అకాల ప్రోటీన్ కత్తిరింపుకు దారితీస్తుంది. అన్ని ఇతర మార్పులు ఒకే ఒక సందర్భంలో కనుగొనబడతాయి. ముఖ్యంగా, నివేదించబడిన PV లలో ఒకటి స్ప్లైస్ సైట్ ఏకాభిప్రాయ ప్రాంతంలో ఉంది (c.4357+1G>T) (టేబుల్ 1).
BRCA2 PV కి సంబంధించి, మేము 6 తొలగింపులు, 6 SNVలు మరియు 2 నకిలీలను గమనించాము. కనుగొనబడిన మార్పులలో ఏవీ కొత్తవి కావు. మా జనాభాలో మూడు ఉత్పరివర్తనలు పునరావృతమయ్యాయి, c.428dup మరియు c.8487+1G>A 3 విషయాలలో గమనించబడ్డాయి, తరువాత c.5851_5854delAGTT రెండు సందర్భాలలో తిరిగి పొందబడ్డాయి. c.428dup మార్పులో BRCA2 యొక్క ఎక్సాన్ 5 లో C పునరావృతం ఉంటుంది, ఇది కత్తిరించబడిన, పనిచేయని ప్రోటీన్‌ను ఎన్కోడ్ చేస్తుందని అంచనా వేయబడింది. c.8487+1G>ఒక మ్యుటేషన్ BRCA2 ఇంట్రాన్ 19 (± 1,2) యొక్క ఇంట్రానిక్ ప్రాంతంలో సంభవిస్తుంది మరియు స్ప్లికింగ్ ఏకాభిప్రాయ క్రమాన్ని ప్రభావితం చేస్తుంది, ఫలితంగా మార్పు చెందిన స్ప్లికింగ్ ఫలితంగా అసాధారణ లేదా హాజరుకాని ప్రోటీన్ వస్తుంది. c.5851_5854delAGTT వ్యాధికారక వైవిధ్యం న్యూక్లియోటైడ్ స్థానాలు 5851 నుండి 5854 వరకు కోడింగ్ ఎక్సాన్ 10 లో 4-న్యూక్లియోటైడ్ తొలగింపు కారణంగా ఉంది. BRCA2 జన్యువు మరియు ఊహించిన ప్రత్యామ్నాయ స్టాప్ కోడాన్ (p.S1951WfsTer) తో అనువాద ఫ్రేమ్‌షిఫ్ట్‌కు దారితీస్తుంది. ముఖ్యంగా, గతంలో నివేదించినట్లుగా, c.631G> A మరియు c.7008-2A> T మార్పులు రెండూ ఒకే రోగిలో కనుగొనబడ్డాయి.34 మొదటి మ్యుటేషన్‌లో BRCA2 ఎక్సాన్ 7 లోని అడెనోసిన్ (A) ను న్యూక్లియోటైడ్ కలిగిన గ్వానైన్ (G) తో భర్తీ చేయడం జరుగుతుంది, దీని ఫలితంగా కోడాన్ 211 వద్ద వాలైన్ ఐసోలూసిన్‌గా మారుతుంది, ఐసోలూసిన్ అమైనో ఆమ్లం అనేది చాలా సారూప్య లక్షణాలతో కూడిన అమైనో ఆమ్లం. ఈ మార్పు సాధారణ mRNA స్ప్లిసింగ్‌ను ప్రభావితం చేస్తుంది. రెండవ వేరియంట్ ఒక అంతర్గత ప్రాంతంలో ఉంది మరియు BRCA2 ను ఎన్‌కోడింగ్ చేసే జన్యువు యొక్క ఎక్సాన్ 13 కి ముందు డబుల్ A నుండి థైమిన్ (T) ప్రత్యామ్నాయానికి దారితీస్తుంది. c.7008-2A> T మార్పు వేర్వేరు పొడవుల బహుళ ట్రాన్స్‌క్రిప్ట్‌లను ఉత్పత్తి చేయవచ్చు. ఇంకా, BRCA2 PV ల సమూహంలో, 18 మార్పులలో 4 (22.2%) అంతర్గత.
తరువాత మేము క్రియాత్మక డొమైన్‌లు మరియు ప్రోటీన్-బైండింగ్ ప్రాంతాలలో BRCA1/2 హానికరమైన ఉత్పరివర్తనాలను మ్యాప్ చేసాము (Fig. 4). BRCA1 జన్యువులో, 50% PVలు రొమ్ము క్యాన్సర్ క్లస్టర్ ప్రాంతంలో (BCCR) ఉన్నాయి, అయితే 22% ఉత్పరివర్తనలు అండాశయ క్యాన్సర్ క్లస్టర్ ప్రాంతంలో (OCCR) ఉన్నాయి (Fig. 4A). BRCA2 PVలో, 35.7% వైవిధ్యాలు BCCR ప్రాంతంలో ఉన్నాయి మరియు 42.8% ఉత్పరివర్తనలు OCCRలో ఉన్నాయి (Fig. 4B). తరువాత, మేము BRCA1 మరియు BRCA2 ప్రోటీన్ డొమైన్‌లలో PV స్థానాన్ని అంచనా వేసాము. BRCA1 ప్రోటీన్ కోసం, మేము లూప్ మరియు కాయిల్డ్ కాయిల్ డొమైన్‌లలో మూడు PVలను మరియు BRCT డొమైన్‌లో రెండు ఉత్పరివర్తనాలను కనుగొన్నాము (Fig. 4A). BRCA2 ప్రోటీన్ కోసం, 4 PVలు BRC రిపీట్ డొమైన్‌కు మ్యాప్ చేయబడ్డాయి, అయితే 3 ఇంట్రానిక్ మరియు 3 ఎక్సోనిక్ మార్పులు ఒలిగో/ఒలిగోసాకరైడ్-బైండింగ్ (OB) మరియు టవర్ (T) డొమైన్‌లలో కనుగొనబడ్డాయి (Fig. 4 బి).
చిత్రం 4 BRCA1 మరియు BRCA2 ప్రోటీన్ల యొక్క స్కీమాటిక్ ప్రాతినిధ్యం మరియు వ్యాధికారక వైవిధ్యాల స్థానికీకరణ. ఈ సంఖ్య రొమ్ము క్యాన్సర్ రోగులలో BRCA1 (A) మరియు BRCA2 (B) వ్యాధికారక వైవిధ్యాల పంపిణీని చూపిస్తుంది. ఎక్సోనిక్ ఉత్పరివర్తనలు నీలం రంగులో చూపించబడ్డాయి, ఇంట్రానిక్ వైవిధ్యాలు నారింజ రంగులో చూపించబడ్డాయి. బార్ ఎత్తు కేసుల సంఖ్యను సూచిస్తుంది. BRCA1 మరియు BRCA2 ప్రోటీన్లు మరియు వాటి క్రియాత్మక డొమైన్‌లు నివేదించబడ్డాయి.(A) BRCA1 ప్రోటీన్‌లో లూప్ డొమైన్ (RING) మరియు న్యూక్లియర్ లోకలైజేషన్ సీక్వెన్స్ (NLS), కాయిల్డ్-కాయిల్ డొమైన్, SQ/TQ క్లస్టర్ డొమైన్ (SCD) మరియు BRCA1 C-టెర్మినల్ డొమైన్ (BRCT) ఉన్నాయి.(B) BRCA2 ప్రోటీన్‌లో ఎనిమిది BRC రిపీట్‌లు, హెలికల్ డొమైన్ (హెలికల్)తో కూడిన DNA-బైండింగ్ డొమైన్, మూడు ఒలిగోన్యూక్లియోటైడ్/ఒలిగోసాకరైడ్-బైండింగ్ (OB) ఫోల్డ్‌లు, టవర్ డొమైన్ (T) మరియు C వైపున NLS ఉన్నాయి. బ్రెస్ట్ క్యాన్సర్ క్లస్టర్ రీజియన్ (BCCR) మరియు అండాశయ క్యాన్సర్ క్లస్టర్ రీజియన్ (OCCR) అని పిలువబడే ప్రాంతాలు దిగువన.*స్టాప్ కోడన్‌లను నిర్ణయించే ఉత్పరివర్తనాలను సూచిస్తుంది.
తరువాత మేము BRCA1/2 PV ఉనికితో పరస్పర సంబంధం కలిగి ఉండే BC క్లినికోపాథలాజికల్ లక్షణాలను పరిశోధించాము. 181 BRCA1/2-నెగటివ్ రోగులు (క్యారియర్లు కానివారు) మరియు అన్ని క్యారియర్‌లకు (n = 35) పూర్తి క్లినికల్ రికార్డులు అందుబాటులో ఉన్నాయి. కణితి విస్తరణ రేటు మరియు గ్రేడ్ మధ్య పరస్పర సంబంధం ఉంది.
మా కోహోర్ట్ యొక్క మధ్యస్థం (25%, పరిధి <10-90%) ఆధారంగా మేము Ki-67 పంపిణీని లెక్కించాము. Ki-67 < 25% ఉన్న సబ్జెక్టులను "తక్కువ Ki-67"గా నిర్వచించారు, అయితే ≥ 25% విలువలు ఉన్న వ్యక్తులను "అధిక Ki-67"గా పరిగణించారు. నాన్-క్యారియర్లు మరియు BRCA1 PV క్యారియర్‌ల మధ్య ముఖ్యమైన Ki-67 తేడాలు (p<0.01) కనుగొనబడ్డాయి (Fig. 5A).
చిత్రం 5 BRCA1 మరియు BRCA2 PVలు ఉన్న మరియు లేని రొమ్ము క్యాన్సర్ మహిళల్లో గ్రేడ్ పంపిణీతో Ki-67 యొక్క సహసంబంధం.(A) 181 నాన్-క్యారియర్ BC రోగులలో BRCA1 (18) లేదా BRCA2 (17) PV రోగులలో మధ్యస్థ Ki-67 విలువలను చూపించే బాక్స్‌ప్లాట్. 0.5 కంటే తక్కువ P విలువలు గణాంకపరంగా ముఖ్యమైనవిగా పరిగణించబడ్డాయి.(B) BRCA1 మరియు BRCA2 మ్యుటేషన్ స్థితి (WT సబ్జెక్టులు, BRCA1 మరియు BRCA2 PVల క్యారియర్లు) ప్రకారం BC క్యాన్సర్ రోగులను హిస్టోలాజికల్ గ్రేడ్ గ్రూపులుగా (G2 మరియు G3) కేటాయించడాన్ని సూచించే హిస్టోగ్రాం.
అదేవిధంగా, కణితి గ్రేడ్ BRCA1/2 PV ఉనికితో సంబంధం కలిగి ఉందో లేదో మేము పరిశీలించాము. మా జనాభాలో G1 BC లేనందున, మేము రోగులను రెండు గ్రూపులుగా విభజించాము (G2 లేదా G3). Ki-67 ఫలితాలకు అనుగుణంగా, విశ్లేషణ కణితి గ్రేడ్ మరియు BRCA1 మ్యుటేషన్ మధ్య గణాంకపరంగా ముఖ్యమైన సహసంబంధాన్ని వెల్లడించింది, BRCA1 క్యారియర్‌లలో G3 కణితుల నిష్పత్తి నాన్-క్యారియర్‌లతో పోలిస్తే ఎక్కువ (p<0.005) (మూర్తి 5B).
DNA సీక్వెన్సింగ్ టెక్నాలజీలో పురోగతులు BRCA1/2 జన్యు పరీక్షలో అపూర్వమైన పురోగతిని సాధించాయి, ఇది కుటుంబ క్యాన్సర్ చరిత్ర కలిగిన రోగులకు కీలకమైన చిక్కులను కలిగి ఉంది. ఈ రోజు వరకు, అమెరికన్ సొసైటీ ఆఫ్ మెడికల్ జెనెటిక్స్ 35 మరియు ENIGMA వ్యవస్థ ప్రకారం సుమారు 20.000 BRCA1/2 వైవిధ్యాలను గుర్తించి వర్గీకరించారు. 35,36 BRCA1/2 మ్యూచువల్ స్పెక్ట్రం భౌగోళిక ప్రాంతాలలో విస్తృతంగా మారుతుందని అందరికీ తెలుసు. 37 ఇటలీలో, BRCA1/2 PVల రేటు 8% నుండి 37% వరకు ఉంది, ఇది విస్తృత అంతర్గత-దేశం వైవిధ్యాన్ని చూపుతుంది. 38,39 దాదాపు 5 మిలియన్ల జనాభాతో, నివాసితుల సంఖ్య పరంగా సిసిలీ ఇటలీలో ఐదవ అతిపెద్ద ప్రాంతం. పశ్చిమ సిసిలీలో BRCA1/2 పంపిణీపై డేటా ఉన్నప్పటికీ, ద్వీపం యొక్క తూర్పు భాగంలో విస్తృతమైన ఆధారాలు లేవు.
తూర్పు సిసిలీలోని BC రోగులలో BRCA1/2 PV సంభవంపై మా అధ్యయనం మొదటి నివేదికలలో ఒకటి.28 మా బృందంలో ఇది ఇప్పటివరకు అత్యంత సాధారణ వ్యాధి కాబట్టి, మేము మా విశ్లేషణను BCపై కేంద్రీకరించాము.
389 BC రోగులను పరీక్షించినప్పుడు, 9% మంది BRCA1/2 PV లను తీసుకెళ్లారు, ఇవి BRCA1 మరియు BRCA2 మధ్య సమానంగా పంపిణీ చేయబడ్డాయి. ఈ ఫలితాలు ఇటాలియన్ జనాభాలో గతంలో నివేదించబడిన వాటికి అనుగుణంగా ఉన్నాయి.28 ఆసక్తికరంగా, మా బృందంలో 3% (13/389) మంది పురుషులు. ఈ రేటు పురుషుల రొమ్ము క్యాన్సర్‌కు (అన్ని BC లలో 1%) ఊహించిన దానికంటే ఎక్కువగా ఉంది,40 BRCA1/2 మ్యుటేషన్ ప్రమాదం ఆధారంగా మా జనాభా ఎంపికను ప్రతిబింబిస్తుంది. అయితే, ఈ పురుషులలో ఎవరూ BRCA1/2 PVని అభివృద్ధి చేయలేదు, కాబట్టి వారు PALB2, RAD51C మరియు D వంటి తక్కువ సాధారణ ఉత్పరివర్తనాల ఉనికిని తోసిపుచ్చడానికి మరింత పరమాణు విశ్లేషణకు అభ్యర్థులుగా ఉన్నారు. BRCA2 VUS స్పష్టంగా ఉన్న 7% విషయాలలో అనిశ్చిత ప్రాముఖ్యత యొక్క వైవిధ్యాలు తిరిగి పొందబడ్డాయి. ఈ ఫలితం కూడా ముందుగా ఉన్న ఆధారాలకు అనుగుణంగా ఉంది.28,41,42
BRCA1/2 ఉత్పరివర్తన చెందిన మహిళల్లో BC మాలిక్యులర్ సబ్టైప్‌ల పంపిణీని మేము విశ్లేషించినప్పుడు, TNBC మరియు BRCA1 PV (58.8%) మధ్య మరియు లూమినల్ B BC మరియు BRCA2 PV (55.6%) మధ్య తెలిసిన అనుబంధాలను మేము నిర్ధారించాము.16,43 BRCA1 మరియు BRCA2 PV క్యారియర్‌లలోని లూమినల్ A మరియు HER2+ కణితులు ఇప్పటికే ఉన్న సాహిత్య డేటాకు అనుగుణంగా ఉన్నాయి.16,43
తరువాత మేము BRCA1/2 PV రకం మరియు స్థానంపై దృష్టి పెడతాము. మా బృందంలో, అత్యంత సాధారణ BRCA1 PV c.5035_5039delCTAAT. అయినప్పటికీ Incorvaia et al. ఈ వేరియంట్‌ను వారి సిసిలియన్ కోహోర్ట్‌లో వివరించలేదు, ఇతర రచయితలు దీనిని జెర్మ్‌లైన్ BRCA1 PV.34గా నివేదించారు. మా కోహోర్ట్‌లో అనేక BRCA1 PVలు కనుగొనబడ్డాయి - ఉదా. c.181T>G, c.514del, c.3253dupA మరియు c.5266dupC - ఇవి సిసిలీలో గమనించబడ్డాయి.28 వీటిలో, రెండు BRCA1 వ్యవస్థాపక ఉత్పరివర్తనలు (c.181T>G మరియు c.5266dupC) సాధారణంగా తూర్పు మరియు మధ్య ఐరోపా (పోలాండ్, చెక్), స్లోవేనియన్, ఆస్ట్రియన్, హంగేరియన్, బెలారసియన్ మరియు జర్మన్) లకు చెందిన అష్కెనాజీ యూదులలో కనిపిస్తాయి, 44,45 మరియు, యునైటెడ్ స్టేట్స్ మరియు అర్జెంటీనాలో, ఇటీవల BC మరియు OC ఉన్న ఇటాలియన్ రోగులలో "పునరావృత జెర్మ్‌లైన్ వేరియంట్"గా నిర్వచించబడ్డాయి. 34c.514del వేరియంట్‌ను గతంలో పలెర్మో మరియు మెస్సినాలోని ఉత్తర సిసిలీ నుండి 8 మంది రొమ్ము క్యాన్సర్ రోగులలో గుర్తించారు. ఆసక్తికరంగా, ఇన్‌కోర్వాయా మరియు ఇతరులు కూడా. కాటానియాలోని కొన్ని కుటుంబాలలో c.3253dupA వేరియంట్‌ను కనుగొన్నారు.28 అత్యంత ప్రాతినిధ్య BRCA2 PVలు c.428dup, c.5851_5854delAGTT మరియు ఇంట్రానిక్ వేరియంట్ c.8487+1G>A, ఇవి మరింత వివరంగా నివేదించబడ్డాయి 28 పలెర్మోలోని c.428dup, c.5851_5854delAGTT PV ఉన్న రోగిలో వాయువ్య సిసిలీలోని గృహాలలో, ప్రధానంగా ట్రాపాని మరియు పలెర్మో ప్రాంతాలలో గమనించబడింది, అయితే c.5851_5854delAGTT PV వాయువ్య సిసిలీలోని గృహాలలో గమనించబడింది.8487+1G> మెస్సినా, పలెర్మో మరియు కాల్టానిస్సెట్టా నుండి వచ్చిన వ్యక్తులలో A వేరియంట్ ఎక్కువగా కనిపిస్తుంది.28 రెబ్బెక్ మరియు ఇతరులు. గతంలో కొలంబియాలో c.5851_5854delAGTT మార్పును వివరించింది.37 మరొక BRCA2 PV, c.631+1G>A, సిసిలీ (అగ్రిజెంటో, సిరాకుసా మరియు రగుసా) నుండి BC మరియు OC రోగులలో కనుగొనబడింది.28 ముఖ్యంగా, ఒకే రోగిలో రెండు BRCA2 వేరియంట్ల (BRCA2 c.631G>A మరియు c.7008-2A>T) సహజీవనాన్ని మేము గమనించాము, ఇది గతంలో నివేదించబడినట్లుగా సిస్ మోడ్‌లో వేరు చేయబడిందని మేము భావించాము.34,46 ఈ BRCA2 ఉబుల్ ఉత్పరివర్తనలు ఇటాలియన్ ప్రాంతంలో తరచుగా గమనించబడతాయి మరియు అకాల స్టాప్ కోడాన్‌లను పరిచయం చేస్తాయని కనుగొనబడింది, ఇది మెసెంజర్ RNA స్ప్లైసింగ్‌ను ప్రభావితం చేస్తుంది మరియు BRCA2 ప్రోటీన్ విఫలమయ్యేలా చేస్తుంది.47,48
మేము BRCA1 మరియు BRCA2 PV లను ప్రోటీన్ డొమైన్‌లు మరియు జన్యువుల యొక్క పుటేటివ్ OCCR మరియు BCCR ప్రాంతాలలో కూడా మ్యాప్ చేసాము. ఈ ప్రాంతాలను రెబ్బెక్ మరియు ఇతరులు వరుసగా అండాశయ మరియు రొమ్ము క్యాన్సర్‌ను అభివృద్ధి చేయడానికి ప్రమాద ప్రాంతాలుగా వర్ణించారు.49 అయితే, జెర్మ్‌లైన్ వైవిధ్యాల స్థానం మరియు రొమ్ము లేదా అండాశయ క్యాన్సర్ ప్రమాదం మధ్య అనుబంధానికి సంబంధించిన ఆధారాలు వివాదాస్పదంగా ఉన్నాయి.28,50-52 మా జనాభాలో, BRCA1 PV లు ప్రధానంగా BCCR ప్రాంతంలో ఉన్నాయి, అయితే BRCA2 PV లు ప్రధానంగా OCCR ప్రాంతంలో ఉన్నాయి. అయితే, పుటేటివ్ OCCR మరియు BCCR ప్రాంతాలు మరియు BC లక్షణాల మధ్య ఎటువంటి అనుబంధాన్ని మేము కనుగొనలేకపోయాము. BRCA1/2 ఉత్పరివర్తనలు ఉన్న పరిమిత సంఖ్యలో రోగులు దీనికి కారణం కావచ్చు. ప్రోటీన్ డొమైన్ దృక్కోణం నుండి, BRCA1 PV లు మొత్తం ప్రోటీన్‌లో పంపిణీ చేయబడతాయి మరియు BRCA2 మార్పులు BRC రిపీట్ డొమైన్‌లో ప్రాధాన్యతగా కనిపిస్తాయి.
చివరగా, మేము BC క్లినికోపాథలాజికల్ లక్షణాలను BRCA1/2 PVతో పరస్పరం అనుసంధానించాము. పరిమిత సంఖ్యలో రోగులు చేర్చబడినందున, మేము Ki-67 మరియు కణితి గ్రేడ్ మధ్య గణనీయమైన సహసంబంధాన్ని మాత్రమే కనుగొన్నాము. Ki-67 యొక్క అంచనా మరియు వివరణ కొంతవరకు వివాదాస్పదంగా ఉన్నప్పటికీ, అధిక విస్తరణ రేట్లు వ్యాధి పునరావృత ప్రమాదం మరియు తగ్గిన మనుగడతో ముడిపడి ఉన్నాయని ఖచ్చితంగా చెప్పవచ్చు. ఈ రోజు వరకు, "అధిక" మరియు "తక్కువ" Ki-67 మధ్య తేడాను గుర్తించడానికి కటాఫ్ 20%. అయితే, ఈ థ్రెషోల్డ్ మా BRCA1/2 మ్యుటేషన్ రోగి జనాభాకు వర్తించదు, ఇది 25% మధ్యస్థ Ki-67 విలువను కలిగి ఉంది. అధిక Ki-67 రేట్లలో ఈ ధోరణిని మా లూమినల్ B మరియు TNBC కోహోర్ట్‌లలో ప్రాబల్యం ద్వారా వివరించవచ్చు, వీటిలో కొన్ని లూమినల్ A కణితులు ఉన్నాయి. అయితే, కొన్ని ఆధారాలు అధిక Ki-67 కటాఫ్ (25–30%) రోగులను వారి రోగ నిరూపణ ప్రకారం బాగా వర్గీకరించవచ్చని సూచిస్తున్నాయి.53,54 మా విశ్లేషణ ఫలితాల నుండి, గణనీయమైన సహసంబంధం ఆశ్చర్యం కలిగించదు. అధిక Ki-67 మధ్య సంభవిస్తుంది. మరియు గ్రేడ్‌లు మరియు BRCA1 PV ఉనికి. నిజానికి, BRCA1-సంబంధిత కణితులు TNBCకి విలక్షణమైనవి మరియు మరింత దూకుడు లక్షణాలను ప్రదర్శిస్తాయి.16,17
ముగింపులో, ఈ అధ్యయనం తూర్పు సిసిలీ నుండి వచ్చిన BC సమూహంలో BRCA1/2 యొక్క ఉత్పరివర్తన స్థితిపై నివేదికను అందిస్తుంది. మొత్తంమీద, మా పరిశోధన ఫలితాలు BCలో ఉత్పరివర్తన ప్రాబల్యం మరియు క్లినికోపాథలాజికల్ లక్షణాల పరంగా ముందుగా ఉన్న ఆధారాలకు అనుగుణంగా ఉన్నాయి. BRCA1/2- ఉత్పరివర్తన BC రోగుల పెద్ద జనాభాలో మల్టీజీనోమ్ విస్తరించిన ఉత్పరివర్తన విశ్లేషణను ఉపయోగించడం వంటి మరిన్ని అధ్యయనాలు BRCA1/2 కంటే విభిన్నమైన మరియు తక్కువ తరచుగా ఉండే PVల ఉనికిని అంచనా వేయడానికి హామీ ఇవ్వబడ్డాయి. ఇది జన్యు ఉత్పరివర్తనాల కారణంగా క్యాన్సర్ ప్రమాదం ఎక్కువగా ఉన్న వ్యక్తుల సంఖ్యను గుర్తించడానికి మరియు సరైన నిర్వహణకు అనుమతిస్తుంది.
పరిశోధన ప్రయోజనాల కోసం రోగులు తమ కణితి నమూనాలను అనామకంగా విడుదల చేయడానికి సమాచార సమ్మతిపై సంతకం చేశారని మేము నిర్ధారించాము. హెల్సింకి ప్రకటన ప్రకారం అన్ని రోగులు వ్రాతపూర్వక సమాచార సమ్మతిపై సంతకం చేశారు. AOU పోలిక్లినికో “G.Rodolico – S.Marco” విధానం ప్రకారం, BRCA1/2 విశ్లేషణ క్లినికల్ ప్రాక్టీస్ ప్రకారం నిర్వహించబడింది మరియు అన్ని రోగులు వ్రాతపూర్వక సమాచార సమ్మతిని ఇచ్చినందున ఈ అధ్యయనం నైతిక సమీక్ష నుండి మినహాయించబడింది. పరిశోధన ప్రయోజనాల కోసం రోగులు తమ డేటాను ఉపయోగించడానికి కూడా సమ్మతిస్తున్నారు.
ఎథిక్స్ కమిటీ కోరిన విధంగా రొమ్ము క్యాన్సర్ రోగుల సంరక్షణలో ఆయన చేసిన సహాయానికి ప్రొఫెసర్ పాలో విగ్నేరికి మేము కృతజ్ఞతలు తెలియజేస్తున్నాము.
ఫెడెరికా మార్టోరానా ఇస్టిటుటో జెంటిలి, ఎలి లిల్లీ, నోవార్టిస్, ఫైజర్ నుండి గౌరవ వేతనాలను నివేదిస్తున్నారు. ఇతర రచయితలు ఈ రచనలో ఎటువంటి ప్రయోజనాల సంఘర్షణలను ప్రకటించలేదు.
1. సంగ్ హెచ్, ఫెర్లే జె, సీగెల్ ఆర్ఎల్, మరియు ఇతరులు. గ్లోబల్ క్యాన్సర్ గణాంకాలు 2020: ప్రపంచవ్యాప్తంగా 185 దేశాలలో 36 క్యాన్సర్ల సంభవం మరియు మరణాలను గ్లోబోకాన్ అంచనా వేసింది.CA క్యాన్సర్ జె క్లిన్.2021;71(3):209-249.doi: 10.3322/caac.21660