మీ బ్రౌజర్‌లో ప్రస్తుతం జావాస్క్రిప్ట్ నిలిపివేయబడింది. జావాస్క్రిప్ట్ నిలిపివేయబడినప్పుడు ఈ వెబ్‌సైట్‌లోని కొన్ని ఫీచర్లు పనిచేయవు.
మీ నిర్దిష్ట వివరాలు మరియు మీకు ఆసక్తి ఉన్న నిర్దిష్ట ఔషధంతో నమోదు చేసుకోండి, మీరు అందించిన సమాచారాన్ని మా విస్తృతమైన డేటాబేస్‌లోని కథనాలతో సరిపోల్చి, వెంటనే మీకు PDF కాపీని ఇమెయిల్ చేస్తాము.
作者 స్టెల్లా S, విటేల్ SR, మార్టోరానా F, మాసిమినో M, పావోన్ G, లాంజాఫేమ్ K, బియాంకా S, బరోన్ C, గోర్గోన్ C, ఫిచెరా M, మంజెల్లా L
స్టెఫానియా స్టెల్లా, 1,2 సిల్వియా రీటా విటాలే, 1,2 ఫెడెరికా మార్టోరానా, 1,2 మిచెల్ మాసిమినో, 1,2 గియులియానా పావోన్, 3 కటియా లాంజాఫేమ్, 3 సెబాస్టియానో ​​బియాంకా, 4 చియారా బరోన్, 5 క్రిస్టినా గోర్గోన్, ఫిచెరా 6, 76 Manzella1,21 క్లినికల్ అండ్ ఎక్స్‌పెరిమెంటల్ మెడిసిన్ విభాగం, కాటానియా విశ్వవిద్యాలయం, కాటానియా, 95123, ఇటలీ;2 ప్రయోగాత్మక ఆంకాలజీ మరియు హెమటాలజీ కోసం కేంద్రం, AOU Policlinico "G.Rodolico - San Marco", Catania , 95123, ఇటలీ; 3 మెడికల్ ఆంకాలజీ, AOU పాలిక్లినికో "G. రోడోలికో - శాన్ మార్కో", కాటానియా, 95123, ఇటలీ; 4 మెడికల్ జెనెటిక్స్, ARNAS గారిబాల్డి, కాటానియా, 95123, ఇటలీ; 5 మెడిసిన్ జెనెటిక్స్, ASP, సిరక్యూస్, 96100, ఇటలీ; 6 డిపార్ట్‌మెంట్ ఆఫ్ బయోమెడికల్ అండ్ బయోటెక్నాలజీ సైన్సెస్, యూనివర్సిటీ ఆఫ్ కాటానియా, మెడికల్ జెనెటిక్స్, కాటానియా, ఇటలీ, 95123; 7 ఓయాసి రీసెర్చ్ ఇన్‌స్టిట్యూట్-IRCCS, ట్రోయినా, 94018, ఇటలీ సంప్రదింపులు: స్టెఫానియా స్టెల్లా, టెల్ +39 095 378 1946, ఇమెయిల్ [email protected]; ఉద్దేశ్యం: BRCA1 మరియు BRCA2 జన్యువులలోని జెర్మ్‌లైన్ మ్యుటేషన్లు, రొమ్ము క్యాన్సర్ (BC), అండాశయ క్యాన్సర్ (OC) మరియు ఇతర క్యాన్సర్‌లు జీవితకాల క్యాన్సర్ ప్రమాదంతో ముడిపడి ఉంటాయి. వ్యక్తిగత ప్రమాదాన్ని అంచనా వేయడానికి, అలాగే ఆరోగ్యకరమైన క్యారియర్‌లలో నివారణ పద్ధతులను కనుగొనడానికి మరియు క్యాన్సర్ రోగులకు తగిన విధంగా చికిత్సలను రూపొందించడానికి BRCA జన్యువును పరీక్షించడం కీలకం. BRCA1 మరియు BRCA2 మార్పుల ప్రాబల్యం భౌగోళిక ప్రాంతాలవారీగా విస్తృతంగా మారుతూ ఉంటుంది, మరియు సిసిలియన్ కుటుంబాలలో BRCA పాథోజెనిక్ వేరియంట్లపై డేటా ఉన్నప్పటికీ, తూర్పు సిసిలీలోని జనాభాను ప్రత్యేకంగా లక్ష్యంగా చేసుకున్న అధ్యయనాలు లేవు. తూర్పు సిసిలీకి చెందిన BC రోగుల సమూహంలో BRCA పాథోజెనిక్ జెర్మ్‌లైన్ మార్పుల సంభవం మరియు విస్తరణను పరిశోధించడం, మరియు నెక్స్ట్-జనరేషన్ సీక్వెన్సింగ్ ఉపయోగించి నిర్దిష్ట BC లక్షణాలతో వాటి సంబంధాన్ని అంచనా వేయడం మా అధ్యయనం యొక్క లక్ష్యం. మార్పుల ఉనికి ట్యూమర్ గ్రేడ్ మరియు ప్రొలిఫరేషన్ ఇండెక్స్‌తో పరస్పర సంబంధం కలిగి ఉంది. ఫలితాలు: మొత్తం మీద, 35 మంది రోగులలో (9%) BRCA పాథోజెనిక్ వేరియంట్ ఉంది, వీరిలో 17 మందిలో (49%) BRCA1లో మరియు 18 మందిలో (51%) BRCA2లో ఉంది. ట్రిపుల్-నెగటివ్‌లో BRCA1 మార్పులు ఎక్కువగా ఉన్నాయి. BC రోగులలో BRCA2 ఉత్పరివర్తనలు ఎక్కువగా కనిపిస్తాయి, అయితే లూమినల్ BC రోగులలో ఇవి సర్వసాధారణం. BRCA1 వేరియంట్లు లేనివారితో పోలిస్తే, BRCA1 వేరియంట్లు ఉన్నవారిలో ట్యూమర్ గ్రేడ్ మరియు ప్రొలిఫరేటివ్ ఇండెక్స్ గణనీయంగా ఎక్కువగా ఉన్నాయి. ముగింపులు: మా పరిశోధనలు తూర్పు సిసిలీలోని BC రోగులలో BRCA ఉత్పరివర్తన స్థితిపై ఒక అవలోకనాన్ని అందిస్తాయి మరియు వంశపారంపర్య BC ఉన్న రోగులను గుర్తించడంలో NGS విశ్లేషణ పాత్రను ధృవీకరిస్తాయి. మొత్తంమీద, ఈ డేటా ఉత్పరివర్తన క్యారియర్‌లలో క్యాన్సర్ యొక్క సరైన నివారణ మరియు చికిత్స కోసం BRCA స్క్రీనింగ్‌కు మద్దతు ఇచ్చే మునుపటి ఆధారాలతో స్థిరంగా ఉంది.
రొమ్ము క్యాన్సర్ (BC) ప్రపంచవ్యాప్తంగా అత్యంత సాధారణమైన ప్రాణాంతక వ్యాధి మరియు మహిళలలో అత్యంత ప్రాణాంతకమైన క్యాన్సర్.1 BC యొక్క రోగ నిర్ధారణ మరియు క్లినికల్ ప్రవర్తనను నిర్ణయించే జీవసంబంధమైన లక్షణాలు కాలక్రమేణా విస్తృతంగా అధ్యయనం చేయబడ్డాయి మరియు పాక్షికంగా వివరించబడ్డాయి. వాస్తవానికి, BCని వివిధ మాలిక్యులర్ ఉప రకాలుగా వర్గీకరించడానికి ప్రస్తుతం అనేక ప్రత్యామ్నాయ గుర్తులు (సరోగేట్ మార్కర్లు) ఉపయోగించబడుతున్నాయి. అవి ఈస్ట్రోజెన్ (ER) మరియు/లేదా ప్రొజెస్టెరాన్ రిసెప్టర్ (PgR), హ్యూమన్ ఎపిడెర్మల్ గ్రోత్ ఫ్యాక్టర్ రిసెప్టర్ 2 (HER2) యాంప్లిఫికేషన్, ప్రొలిఫరేషన్ ఇండెక్స్ Ki-67 మరియు ట్యూమర్ గ్రేడ్ (G).2 ఈ వేరియబుల్స్ కలయిక కింది BC వర్గాలను గుర్తించింది: 1) ER మరియు/లేదా PgR వ్యక్తీకరణను చూపే లూమినల్ ట్యూమర్లు, 75% BCలను కలిగి ఉన్నాయి. ఈ ట్యూమర్లను Ki-67 20% కంటే తక్కువగా మరియు HER2 నెగటివ్‌గా ఉన్నప్పుడు లూమినల్ Aగా, మరియు Ki-67 20%కి సమానంగా లేదా అంతకంటే ఎక్కువగా ఉండి, ప్రొలిఫరేషన్ ఇండెక్స్‌తో సంబంధం లేకుండా HER2 యాంప్లిఫికేషన్ ఉన్నప్పుడు లూమినల్ Bగా విభజించారు; 2) ER మరియు PgR నెగటివ్‌గా ఉండి, HER2 విస్తరణను చూపించే HER2+ కణితులు. ఈ సమూహం అన్ని రొమ్ము కణితులలో 10% ఉంటుంది; 3) ER మరియు PgR వ్యక్తీకరణ మరియు HER2 విస్తరణను చూపించని ట్రిపుల్-నెగటివ్ బ్రెస్ట్ క్యాన్సర్ (TNBC), రొమ్ము క్యాన్సర్లలో సుమారు 15% ఉంటుంది.2-4
ఈ BC ఉపరకాలలో, ట్యూమర్ గ్రేడ్ మరియు ప్రొలిఫరేషన్ ఇండెక్స్ అనేవి క్రాస్-సెక్షనల్ బయోమార్కర్లు, ఇవి ట్యూమర్ తీవ్రత మరియు రోగ నిరూపణతో ప్రత్యక్షంగా మరియు స్వతంత్రంగా సంబంధం కలిగి ఉంటాయి.5,6
పైన పేర్కొన్న జీవసంబంధ లక్షణాలతో పాటు, రొమ్ము క్యాన్సర్ (BC) అభివృద్ధికి దారితీసే వంశపారంపర్య జన్యు మార్పుల పాత్ర గత కొన్ని సంవత్సరాలుగా మరింత ప్రాముఖ్యతను సంతరించుకుంది.7 ప్రతి 10 రొమ్ము కణితులలో సుమారు 1, నిర్దిష్ట జన్యువులలోని జెర్మ్‌లైన్ మార్పుల కారణంగా వంశపారంపర్యంగా వస్తుంది.8 180,000 కంటే ఎక్కువ మంది మహిళలపై జరిపిన రెండు పెద్ద ఎపిడెమియోలాజికల్ అధ్యయనాలు, వంశపారంపర్య BCకి ప్రధానంగా బాధ్యత వహించే ఎనిమిది జన్యువుల సమూహాన్ని (అంటే, ATM, BARD1, BRCA1, BRCA2, CHK2, PALB2, RAD51C, మరియు RAD51D) ఇటీవల గుర్తించాయి. ఈ జన్యువులలో, BRCA1 మరియు BRCA2 (ఇకపై BRCA1/2గా సూచించబడతాయి) రొమ్ము కణితుల అభివృద్ధికి అత్యంత బలమైన సంబంధాన్ని చూపించాయి.9-12 వాస్తవానికి, జెర్మ్‌లైన్ BRCA1/2 మ్యుటేషన్‌లు BCతో పాటు అండాశయ, ప్రోస్టేట్, ప్యాంక్రియాటిక్, కొలొరెక్టల్ మరియు మెలనోమా వంటి ఇతర ప్రాణాంతక వ్యాధుల జీవితకాల ప్రమాదాన్ని గణనీయంగా పెంచుతాయి. 13 నుండి 80 సంవత్సరాల వయస్సు వరకు, BRCA1 ఉన్న మహిళల్లో BC సంచిత సంభవం 72%గా ఉంది. పాథోజెనిక్ వేరియంట్ (PV) మరియు BRCA2 PV ఉన్న మహిళల్లో 69%.14
ముఖ్యంగా, ఇటీవలి ఒక ప్రచురణ ప్రకారం BC ప్రమాదం PV రకంపై ఆధారపడి ఉంటుందని తెలుస్తోంది. వాస్తవానికి, వ్యాధికారక టంకేటింగ్ వేరియంట్‌లతో పోలిస్తే, స్పష్టమైన మిస్‌సెన్స్ వేరియంట్‌లు, ముఖ్యంగా BRCA1 జన్యువులో, BC ప్రమాదాన్ని తగ్గించడంతో సంబంధం కలిగి ఉన్నాయి, ప్రత్యేకించి వయసు పైబడిన మహిళల్లో.15
BRCA1 లేదా BRCA2 PV ఉనికి వివిధ జీవసంబంధ మరియు క్లినికల్ పాథలాజికల్ లక్షణాలతో ముడిపడి ఉంది.16,17 BRCA1-సంబంధిత BCలు క్లినికల్‌గా దూకుడుగా, తక్కువగా విభేదించబడినవిగా మరియు అధికంగా వృద్ధి చెందేవిగా ఉంటాయి. ఈ కణితులు సాధారణంగా ట్రిపుల్ నెగటివ్‌గా ఉంటాయి మరియు చిన్న వయస్సులోనే ప్రారంభమవుతాయి. BRCA2-మ్యుటేషన్ ఉన్న రోగులలో సంభవించే కణితులు సాధారణంగా మధ్యస్థం నుండి బాగా విభేదించబడిన గ్రేడ్‌లను మరియు వేరియబుల్ ప్రొలిఫరేటివ్ సూచికలను ప్రదర్శిస్తాయి. ఈ కణితులు ల్యూమెన్ Bలో ఎక్కువగా కనిపిస్తాయి మరియు సాధారణంగా వృద్ధులలో సంభవిస్తాయి.16-18 ముఖ్యంగా, BRCA1 మరియు BRCA2లోని మ్యుటేషన్‌లు ప్లాటినం సాల్ట్‌లు మరియు పాలి(ADP-రైబోస్) పాలిమరేస్ ఇన్హిబిటర్స్ (PARPi) వంటి టార్గెటెడ్ డ్రగ్స్‌తో సహా నిర్దిష్ట చికిత్సలకు సున్నితత్వాన్ని పెంచుతాయి.19,20
గత కొన్ని సంవత్సరాలుగా, వైద్య విధానంలో నెక్స్ట్-జనరేషన్ సీక్వెన్సింగ్ (NGS) అమలు చేయడం వల్ల, BRCA1/2తో సహా క్యాన్సర్ సున్నితత్వ సిండ్రోమ్‌ల కోసం మాలిక్యులర్ పరీక్ష చేయించుకునే రొమ్ము క్యాన్సర్ (BC) రోగుల సంఖ్య పెరుగుతోంది.21 అదే సమయంలో, BRCA1/2 పరీక్షకు అర్హులైన వ్యక్తులను మరింత మెరుగ్గా గుర్తించడానికి, కుటుంబ చరిత్ర, జనాభా సంబంధిత, మరియు క్లినికల్-పాథలాజికల్ లక్షణాలకు సంబంధించిన కచ్చితమైన ప్రమాణాల ఆధారంగా నిర్వచనాలు రూపొందించబడ్డాయి.22,23 ఈ నేపథ్యంలో, నిర్దిష్ట జనాభాలో BRCA1/2 స్క్రీనింగ్‌పై ఆధారాలు పెరుగుతున్నాయి, ఇవి భౌగోళిక ప్రాంతాల మధ్య వ్యత్యాసాలను హైలైట్ చేస్తున్నాయి.24–27 పశ్చిమ సిసిలీలోని BC సమూహంపై నివేదికలు ఉన్నప్పటికీ, తూర్పు సిసిలీ జనాభాలో BRCA1/2 స్క్రీనింగ్‌పై తక్కువ డేటా అందుబాటులో ఉంది.28,29
తూర్పు సిసిలీకి చెందిన రొమ్ము క్యాన్సర్ రోగులలో జరిపిన జెర్మ్‌లైన్ BRCA1/2 స్క్రీనింగ్ ఫలితాలను మేము ఇక్కడ వివరిస్తున్నాము, అంతేకాకుండా BRCA1 లేదా BRCA2 ఉత్పరివర్తనాల ఉనికిని ఈ కణితుల యొక్క ప్రధాన క్లినికల్ పాథలాజికల్ లక్షణాలతో అనుసంధానిస్తున్నాము.
కాటానియాలోని రోడోలికో – శాన్ మార్కో పాలీక్లినికో ఆసుపత్రిలోని “సెంటర్ ఫర్ ఎక్స్‌పెరిమెంటల్ ఆంకాలజీ అండ్ హెమటాలజీ”లో ఒక పునరాలోకన అధ్యయనం నిర్వహించబడింది. జనవరి 2017 నుండి మార్చి 2021 వరకు, రొమ్ము మరియు అండాశయ, మెలనోమా, ప్యాంక్రియాటిక్ లేదా ప్రోస్టేట్ క్యాన్సర్‌తో బాధపడుతున్న మొత్తం 455 మంది రోగులు BRCA/2 జన్యు పరీక్ష కోసం మా మాలిక్యులర్ డయాగ్నస్టిక్ ప్రయోగశాలకు పంపబడ్డారు. ఈ అధ్యయనం హెల్సింకి ప్రకటనకు అనుగుణంగా నిర్వహించబడింది మరియు మాలిక్యులర్ విశ్లేషణకు ముందు పాల్గొన్న వారందరూ లిఖితపూర్వక సమాచార సమ్మతిని అందించారు.
కేవలం తీవ్రమైన కణితి భాగాలను మాత్రమే పరిగణనలోకి తీసుకుని, కోర్ బయాప్సీ లేదా శస్త్రచికిత్స నమూనాలపై BC యొక్క హిస్టోలాజికల్ మరియు బయోలాజికల్ లక్షణాలను (ER, PgR, HER2 స్థితి, Ki-67, మరియు గ్రేడ్) అంచనా వేశారు. ఈ లక్షణాల ఆధారంగా, BCలను ఈ క్రింది విధంగా వర్గీకరించారు: లూమినల్ A (ER+ మరియు/లేదా PgR+, HER2-, Ki-67<20%), లూమినల్ B (ER+ మరియు/లేదా PgR+, HER2-, Ki-67≥20%), లూమినల్ B-HER2+ (ER మరియు/లేదా PgR+, HER2+), HER2+ (ER మరియు PgR-, HER2+) లేదా ట్రిపుల్ నెగటివ్ (ER మరియు PgR-, HER2-).
BRCA1 మరియు BRCA2 మ్యుటేషన్ స్థితిని అంచనా వేయడానికి ముందు, ఒక ఆంకాలజిస్ట్, ఒక జెనెటిసిస్ట్, మరియు ఒక సైకాలజిస్ట్‌తో కూడిన బహుళ-విభాగాల బృందం, ప్రతి రోగికి ట్యూమర్ జెనెటిక్స్ కన్సల్టేషన్‌ను నిర్వహించింది. BRCA1 మరియు/లేదా BRCA2 జన్యువులో PV (పాథోజెనిక్ వేరియెన్స్) అధిక ప్రమాదం ఉన్న వ్యక్తులను గుర్తించడానికి ఈ కన్సల్టేషన్ జరిగింది. ఇటాలియన్ సొసైటీ ఆఫ్ మెడికల్ ఆంకాలజీ (AIOM) మార్గదర్శకాలు మరియు స్థానిక సిసిలియన్ సిఫార్సుల ప్రకారం రోగుల ఎంపిక జరిగింది.30,31 ఈ ప్రమాణాలలో ఇవి ఉన్నాయి: (i) సున్నితత్వ జన్యువులలో (ఉదా., BRCA1, BRCA2, TP53, PTEN) తెలిసిన పాథోజెనిక్ వేరియెంట్‌ల కుటుంబ చరిత్ర; (ii) BC (రొమ్ము క్యాన్సర్) ఉన్న పురుషులు; (iii) BC మరియు OC (అన్నవాహిక క్యాన్సర్) ఉన్నవారు; (iv) 36 సంవత్సరాల కంటే తక్కువ వయస్సులో BC, 60 సంవత్సరాల కంటే తక్కువ వయస్సులో TNBC (ట్రాన్స్‌జెండర్ బ్లాక్ క్యాన్సర్), లేదా 50 సంవత్సరాల కంటే తక్కువ వయస్సులో ద్వైపాక్షిక BC ఉన్న మహిళలు; (v) 50 సంవత్సరాల కంటే తక్కువ వయస్సులో BC యొక్క వ్యక్తిగత వైద్య చరిత్ర మరియు కనీసం ఒక మొదటి-డిగ్రీ బంధువు: (a) 50 సంవత్సరాల కంటే తక్కువ వయస్సులో BC; (b) ఏ వయస్సు వారికైనా నాన్-మ్యూసినస్ మరియు నాన్-బోర్డర్‌లైన్ OC; (c) ద్వైపాక్షిక BC; (d) పురుష BC; (ఇ) ప్యాంక్రియాటిక్ క్యాన్సర్; (ఎఫ్) ప్రోస్టేట్ క్యాన్సర్; (vi) రెండు లేదా అంతకంటే ఎక్కువ: 50 సంవత్సరాల కంటే ఎక్కువ వయస్సు ఉన్న రొమ్ము క్యాన్సర్ (BC) యొక్క వ్యక్తిగత చరిత్ర మరియు ఒకరికొకరు మొదటి-స్థాయి బంధువులైన బంధువులకు (ఆమెతో మొదటి-స్థాయి బంధువులుగా ఉన్న బంధువులతో సహా) రొమ్ము క్యాన్సర్, అండాశయ క్యాన్సర్ (OC) లేదా ప్యాంక్రియాటిక్ క్యాన్సర్ యొక్క కుటుంబ చరిత్ర; (vii) అండాశయ క్యాన్సర్ (OC) యొక్క వ్యక్తిగత చరిత్ర మరియు కనీసం ఒక మొదటి-స్థాయి బంధువు: (ఎ) 50 సంవత్సరాల కంటే తక్కువ వయస్సులో రొమ్ము క్యాన్సర్; (బి) నాన్-ఓరల్ క్యాన్సర్ (NOC); (సి) ద్వైపాక్షిక రొమ్ము క్యాన్సర్; (డి) పురుష రొమ్ము క్యాన్సర్; (vii) అధిక-గ్రేడ్ సీరస్ అండాశయ క్యాన్సర్ ఉన్న మహిళ.
ప్రతి రోగి నుండి 20 mL పరిధీయ రక్త నమూనాను EDTA ట్యూబ్‌లలో (BD బయోసైన్సెస్) సేకరించారు. తయారీదారు సూచనల ప్రకారం QIAsymphony DSP DNA మిడి కిట్ ఐసోలేషన్ కిట్ (QIAGEN, హిల్డెన్, ఇటలీ) ఉపయోగించి 0.7 mL పూర్తి రక్త నమూనాల నుండి జెనోమిక్ DNAను వేరుచేసి, పరిమాణీకరణ చేయడానికి దానిని Qubit® 3.0 ఫ్లోరోమీటర్ (థర్మో ఫిషర్ సైంటిఫిక్, వాల్థమ్, MA, USA) ద్వారా పంపారు. తయారీదారు సూచనల ప్రకారం ఆటోమేటెడ్ లైబ్రరీ ప్రిపరేషన్ కోసం అయాన్ ఆంప్లిసీక్™ చెఫ్ రియాజెంట్స్ DL8 కిట్‌లోకి లోడ్ చేయడానికి సిద్ధంగా, టార్గెట్ ఎన్‌రిచ్‌మెంట్ మరియు లైబ్రరీ ప్రిపరేషన్‌ను ఆంకోమైన్™ BRCA రీసెర్చ్ అస్సే చెఫ్ ద్వారా నిర్వహిస్తారు. ఈ కిట్‌లో రెండు మల్టిప్లెక్స్ PCR ప్రైమర్ పూల్స్ ఉంటాయి, వీటిని అన్ని BRCA1 (NM_007300.3) మరియు BRCA2 (NM_000059.3) జన్యువులను అధ్యయనం చేయడానికి ఉపయోగించవచ్చు. క్లుప్తంగా, లైబ్రరీ ప్రిపరేషన్ కోసం బార్‌కోడ్ చేసిన ప్లేట్‌లకు పలుచన చేసిన ప్రతి నమూనా DNA (10 ng) నుండి 15 µL జోడించబడింది మరియు అన్ని రియాజెంట్లు మరియు వినియోగ వస్తువులు అయాన్ చెఫ్™ పరికరంలో లోడ్ చేయబడ్డాయి. ఆ తర్వాత అయాన్ చెఫ్™ పరికరంలో ఆటోమేటెడ్ లైబ్రరీ ప్రిపరేషన్ మరియు బార్‌కోడ్ చేసిన నమూనా లైబ్రరీ పూలింగ్ నిర్వహించబడ్డాయి. తయారీదారు సూచనల ప్రకారం, సిద్ధం చేసిన లైబ్రరీల సంఖ్యను క్యూబిట్® 3.0 ఫ్లోరోమీటర్ (థర్మో ఫిషర్ సైంటిఫిక్, వాల్థమ్, MA, USA) ద్వారా అంచనా వేశారు. చివరగా, లైబ్రరీలను కలిపివేస్తారు. అయాన్ చెఫ్™ లైబ్రరీ శాంపిల్ ట్యూబ్‌లలో (బార్‌కోడ్ ఉన్న ట్యూబ్‌లు) సమమోలార్ నిష్పత్తులలో ఉంచి, అయాన్ చెఫ్™ పరికరంలోకి లోడ్ చేశారు. అయాన్ 510 చిప్ (థర్మో ఫిషర్ సైంటిఫిక్) ఉపయోగించి, అయాన్ టొరెంట్ S5 (థర్మో ఫిషర్ సైంటిఫిక్) పరికరం ద్వారా సీక్వెన్సింగ్ నిర్వహించబడింది. యాంప్లికాన్ సూట్ (స్మార్ట్‌సీక్ ఎస్ఆర్ఎల్) మరియు అయాన్ రిపోర్టర్ సాఫ్ట్‌వేర్ ద్వారా డేటా విశ్లేషణ జరిగింది.
అన్ని వేరియంట్ నామకరణాలు ఆన్‌లైన్‌లో అందుబాటులో ఉన్న హ్యూమన్ జీనోమ్ వేరియేషన్ కన్సార్టియం (HGVS, http://www.hgvs.org/mutnomen) యొక్క ప్రస్తుత మార్గదర్శకాలను అనుసరించాయి. BRCA1/2 వేరియంట్ల యొక్క వైద్యపరమైన ప్రాముఖ్యతను ఇంటర్నేషనల్ కన్సార్టియం ఎనిగ్మా (ఎవిడెన్స్-బేస్డ్ నెట్‌వర్క్ ఫర్ ఇంటర్‌ప్రిటింగ్ జెర్మ్‌లైన్ మ్యూటెంట్ అల్లెల్స్, https://enigmaconsortium.org/) యొక్క వర్గీకరణను ఉపయోగించి మరియు ARUP, BRCAEXCHANGE, ClinVar, IARC_LOVD, మరియు UMD వంటి వివిధ డేటాబేస్‌లను సంప్రదించడం ద్వారా నిర్వచించారు. ఈ వర్గీకరణలో ఐదు విభిన్న ప్రమాద వర్గాలు ఉన్నాయి: నిరపాయమైనది (వర్గం I), నిరపాయమైనదిగా భావించబడేది (వర్గం II), అనిశ్చిత ప్రాముఖ్యత కలిగిన వేరియంట్ (VUS, వర్గం III), వ్యాధికారకమైనదిగా భావించబడేది (వర్గం IV), మరియు వ్యాధికారకమైనది (వర్గం V). VarSome 30 డేటాబేస్‌లకు ప్రాప్యత కలిగిన ఒక సమాచార సాధనమైన ప్రోటీన్ నిర్మాణం మరియు పనితీరుపై ఉత్పరివర్తనాల ప్రభావాన్ని కూడా విశ్లేషించింది.32
ప్రతి VUSకు సంభావ్య క్లినికల్ ప్రాముఖ్యతను కేటాయించడానికి, ఈ క్రింది కంప్యూటేషనల్ ప్రోటీన్ ప్రిడిక్షన్ అల్గారిథమ్‌లను ఉపయోగించారు: మ్యుటేషన్ టేస్టర్, ప్రోవీన్-సిఫ్ట్ (http://provean.jcvi.org/index.php), పాలిఫెన్-2 (http://genetics.bwh.harvard.edu/pph2/) మరియు అలైన్-జివిజిడి (http://agvgd.hci.utah.edu/agvgd_input.php). క్లాస్ 1 మరియు 2గా వర్గీకరించబడిన వేరియంట్‌లను వైల్డ్ టైప్‌గా పరిగణించారు.
సాంగర్ సీక్వెన్సింగ్ ప్రతి వ్యాధికారక వేరియంట్ యొక్క ఉనికిని నిర్ధారించింది. క్లుప్తంగా, BRCA1 మరియు BRCA2 జన్యు రిఫరెన్స్ సీక్వెన్సులను (వరుసగా NG_005905.2, NM_007294.3 మరియు NG_012772.3, NM_000059.3) ఉపయోగించి, గుర్తించబడిన ప్రతి వేరియంట్ కోసం ఒక జత నిర్దిష్ట ప్రైమర్‌లు రూపొందించబడ్డాయి. అందువల్ల, టార్గెటెడ్ PCR నిర్వహించి, ఆ తర్వాత సాంగర్ సీక్వెన్సింగ్ చేశారు.
BRCA1/2 జన్యువు పరీక్షలో నెగటివ్ వచ్చిన రోగులకు, పెద్ద జన్యు పునఃఅమరికల (LGR) ఉనికిని అంచనా వేయడానికి, తయారీదారు సూచనల ప్రకారం మల్టిప్లెక్స్ లైగేషన్-డిపెండెంట్ ప్రోబ్ యాంప్లిఫికేషన్ (MLPA) ద్వారా పరీక్షలు నిర్వహించారు. క్లుప్తంగా చెప్పాలంటే, DNA నమూనాలను డీనాచురేట్ చేసి, 60 వరకు BRCA1 మరియు BRCA2 జన్యు-నిర్దిష్ట ప్రోబ్‌లను ఉపయోగిస్తారు, వీటిలో ప్రతి ఒక్కటి సుమారు 60 న్యూక్లియోటైడ్‌ల పొడవు గల ఒక నిర్దిష్ట DNA క్రమాన్ని గుర్తిస్తుంది. ఒక ప్రత్యేకమైన PCR యాంప్లికాన్‌ల సమితిని కలిగి ఉన్న ప్రోబ్ యాంప్లిఫికేషన్ ఉత్పత్తులను, ఆ తర్వాత క్యాపిల్లరీ ఎలక్ట్రోఫోరెసిస్ ద్వారా మరియు తగిన బ్యాచ్-నిర్దిష్ట కోఫలైజర్ పట్టికలతో (www.mrcholland.com) కలిపి Cofalyser.Net సాఫ్ట్‌వేర్ ద్వారా విశ్లేషించారు.
ఎంపిక చేయబడిన క్లినికోపాథలాజికల్ వేరియబుల్స్ (హిస్టోలాజికల్ గ్రేడ్ మరియు Ki-67% ప్రొలిఫరేషన్ ఇండెక్స్) BRCA1/2 PV ఉనికితో సంబంధం కలిగి ఉన్నాయి, వీటిని ప్రిజం సాఫ్ట్‌వేర్ v. 8.4 ఉపయోగించి ఫిషర్ యొక్క ఖచ్చితమైన పరీక్ష ద్వారా లెక్కించారు, ఇక్కడ p-విలువ <0.05 ముఖ్యమైనదిగా పరిగణించబడింది.
జనవరి 2017 మరియు మార్చి 2021 మధ్య, 455 మంది రోగులకు జెర్మ్‌లైన్ BRCA1/2 మ్యుటేషన్‌ల కోసం స్క్రీనింగ్ చేయబడింది. మ్యుటేషన్ పరీక్షను పాలీక్లినికో హాస్పిటల్ యొక్క సెంటర్ ఫర్ ఎక్స్‌పెరిమెంటల్ ఆంకాలజీ అండ్ హెమటాలజీలో నిర్వహించారు. సిసిలియన్ మార్గదర్శకాల (http://www.gurs.regione.sicilia.it/Indicep1.htm, N. 02-Venerdì 10 Gennaio 2020) ప్రకారం, కాటానియాలోని "రోడోలికో - శాన్ మార్కో"లో మొత్తం 389 మంది రోగులకు రొమ్ము క్యాన్సర్, 37 మందికి అండాశయ క్యాన్సర్, 16 మందికి ప్యాంక్రియాటిక్ క్యాన్సర్, 8 మందికి ప్రోస్టేట్ క్యాన్సర్ మరియు 5 మందికి మెలనోమా ఉన్నాయి. క్యాన్సర్ రకం ప్రకారం రోగుల పంపిణీ మరియు విశ్లేషణ ఫలితాలు పటం 1లో చూపబడ్డాయి.
పటం 1 అధ్యయనం యొక్క అవలోకనాన్ని చూపే ఫ్లో చార్ట్‌ను చూపుతుంది. రొమ్ము, మెలనోమా, ప్యాంక్రియాటిక్, ప్రోస్టేట్ లేదా అండాశయ కణితులు ఉన్న రోగులకు BRCA1 మరియు BRCA2 జన్యువులలోని ఉత్పరివర్తనాల కోసం పరీక్షలు జరిపారు.
సంక్షిప్తాలు: PVs, పాథోజెనిక్ వేరియంట్; VUS, అనిశ్చిత ప్రాముఖ్యత కలిగిన వేరియంట్; WT, వైల్డ్-టైప్ BRCA1/2 సీక్వెన్స్.
మేము మా అధ్యయనాలను రొమ్ము క్యాన్సర్ సమూహాలపై ప్రత్యేకంగా కేంద్రీకరించాము. రోగుల సగటు వయస్సు 49 సంవత్సరాలు (వయస్సు పరిధి 23-89) మరియు వారిలో అధిక శాతం మంది మహిళలు (n=376, లేదా 97%).
ఈ సబ్జెక్టులలో, 64 (17%) మందికి BRCA1/2 మ్యుటేషన్లు ఉన్నాయి మరియు వారందరూ మహిళలు. ముప్పై ఐదు (9%) మందికి PV మరియు 29 (7.5%) మందికి VUS ఉన్నాయి. 35 పాథోజెనిక్ వేరియంట్లలో పదిహేడు (48.6%) BRCA1లో మరియు 18 (51.4%) BRCA2లో సంభవించాయి, అయితే 5 VUSలు BRCA1లో (17.2%) మరియు 24 (82.8%) BRCA2లో సంభవించాయి (మూర్తులు 1 మరియు 2). MLPA విశ్లేషణలో LGR లేదు.
పటం 2. 389 మంది రొమ్ము క్యాన్సర్ రోగులలో BRCA1 మరియు BRCA2 ఉత్పరివర్తనాల విశ్లేషణ. (A) 389 మంది రొమ్ము క్యాన్సర్ రోగులలో వ్యాధికారక వేరియంట్లు (PV) (ఎరుపు), అనిశ్చిత ప్రాముఖ్యత గల వేరియంట్లు (VUS) (నారింజ), మరియు WT (నీలం) పంపిణీ; (B) 389 మంది రొమ్ము క్యాన్సర్ రోగులలో ముప్పై ఐదు మందికి (9%) BRCA1/2 వ్యాధికారక వేరియంట్లు (PVలు) ఉన్నాయి. వారిలో, 17 మంది (48.6%) BRCA1 PV క్యారియర్లు (ముదురు ఎరుపు) మరియు 18 మంది (51.4%) BRCA2 క్యారియర్లు (లేత ఎరుపు); (C) 389 మందిలో 29 మంది (7.5%) VUSలను కలిగి ఉన్నారు, 5 మంది (17.2%) BRCA1 జన్యువులను (ముదురు నారింజ) మరియు 24 మంది (82.8%) BRCA2 జన్యువులను (లేత నారింజ).
సంక్షిప్తాలు: PVs, పాథోజెనిక్ వేరియంట్; VUS, అనిశ్చిత ప్రాముఖ్యత కలిగిన వేరియంట్; WT, వైల్డ్-టైప్ BRCA1/2 సీక్వెన్స్.
తరువాత మేము BRCA1/2 PV ఉన్న రోగులలో BC మాలిక్యులర్ ఉప రకాల ప్రాబల్యాన్ని పరిశోధించాము. ఈ పంపిణీలో 2 (5.7%) లూమినల్ A, 15 (42.9%) లూమినల్ B, 3 (8.6%) లూమినల్ B-HER2+, 2 (5.7%) HER2+ మరియు 13 (37.1%) TNBC రోగులు ఉన్నారు. BRCA1-పాజిటివ్ రోగులలో, 5 (29.4%) మందికి లూమినల్ B BC, 2 (11.8%) మందికి HER2+ వ్యాధి, మరియు 10 (58.8%) మందికి TNBC ఉంది. BRCA1 మ్యుటేషన్లు లేని కణితులు లూమినల్ A లేదా లూమినల్ B-HER2+గా ఉన్నాయి (చిత్రం 3). BRCA2-పాజిటివ్ ఉప సమూహంలో, 10 (55.6%) కణితులు లూమినల్ B, 3 (16.7%) లూమినల్ B-HER2+, 3 (16.7%) TNBC మరియు 2 (11.1%) లూమినల్ Aగా ఉన్నాయి (చిత్రం 3). ఈ సమూహంలో HER2+ కణితులు ఉన్నాయి. అందువల్ల, TNBC రోగులలో BRCA1 ఉత్పరివర్తనాలు ఎక్కువగా ఉండగా, ల్యూమెన్ B వ్యక్తులలో BRCA2 మార్పులు అధికంగా ఉన్నాయి.
పటం 3 BRCA1 మరియు BRCA2 లలో పాథోజెనిక్ వేరియంట్లు ఉన్న రోగులలో రొమ్ము క్యాన్సర్ ఉపరకాల ప్రాబల్యం. రొమ్ము క్యాన్సర్ రోగుల మాలిక్యులర్ ఉపరకాలలో BRCA1- (ముదురు ఎరుపు) మరియు BRCA2- (లేత ఎరుపు) PVల పంపిణీని చూపే హిస్టోగ్రామ్‌లు. ప్రతి బాక్స్‌లో నివేదించబడిన సంఖ్యలు ప్రతి రొమ్ము క్యాన్సర్ ఉపరకానికి BRCA1 మరియు BRCA2 PV ఉన్న రోగుల శాతాన్ని సూచిస్తాయి.
సంక్షిప్తాలు: PVs, పాథోజెనిక్ వేరియంట్; HER2+, హ్యూమన్ ఎపిడెర్మల్ గ్రోత్ ఫ్యాక్టర్ రిసెప్టర్ 2 పాజిటివ్; TNBC, ట్రిపుల్-నెగటివ్ బ్రెస్ట్ క్యాన్సర్.
తదనంతరం, మేము BRCA1 మరియు BRCA2 PVల రకం మరియు జన్యు స్థానాన్ని అంచనా వేశాము. BRCA1 PVలో, మేము 7 సింగిల్ న్యూక్లియోటైడ్ వేరియంట్‌లను (SNVలు), 6 తొలగింపులను, 3 నకిలీలను మరియు 1 చొప్పించడాన్ని గమనించాము. కేవలం ఒక ఉత్పరివర్తనం (c.5522delG) మాత్రమే కొత్త ఆవిష్కరణను సూచిస్తుంది. రెండు సబ్జెక్టులలో గుర్తించబడిన అత్యంత సాధారణ BRCA1 PV c.5035_5039delCTAAT. ఈ మార్పు BRCA1 ఎక్సాన్ 15లో ఐదు న్యూక్లియోటైడ్‌ల (CTAAT) తొలగింపును కలిగి ఉంటుంది, దీని ఫలితంగా కోడాన్ 1679 వద్ద అమైనో ఆమ్లం ల్యూసిన్ స్థానంలో టైరోసిన్ ప్రవేశిస్తుంది, మరియు ఊహించిన ప్రత్యామ్నాయ స్టాప్ కోడాన్‌తో అనువాద ఫ్రేమ్‌షిఫ్ట్ కారణంగా అకాల ప్రోటీన్ కుదించబడటానికి దారితీస్తుంది. మిగిలిన అన్ని మార్పులు కేవలం ఒక కేసులో మాత్రమే గుర్తించబడ్డాయి. ముఖ్యంగా, నివేదించబడిన PVలలో ఒకటి స్ప్లైస్ సైట్ ఏకాభిప్రాయ ప్రాంతంలో (c.4357+1G>T) ఉంది (పట్టిక 1).
BRCA2 PVకి సంబంధించి, మేము 6 తొలగింపులు, 6 SNVలు మరియు 2 నకలులను గమనించాము. కనుగొనబడిన మార్పులలో ఏవీ కొత్తవి కావు. మా జనాభాలో మూడు ఉత్పరివర్తనాలు పునరావృతమయ్యాయి, c.428dup మరియు c.8487+1G>A 3 మంది వ్యక్తులలో గమనించబడ్డాయి, ఆ తర్వాత c.5851_5854delAGTT రెండు కేసులలో కనుగొనబడింది. c.428dup మార్పు BRCA2 యొక్క ఎక్సాన్ 5లో C యొక్క పునరావృతాన్ని కలిగి ఉంటుంది, ఇది కుదించబడిన, పని చేయని ప్రోటీన్‌ను ఎన్‌కోడ్ చేస్తుందని అంచనా వేయబడింది. c.8487+1G>A ఉత్పరివర్తనం BRCA2 ఇంట్రాన్ 19 (± 1,2) యొక్క ఇంట్రానిక్ ప్రాంతంలో సంభవిస్తుంది మరియు స్ప్లైసింగ్ ఏకాభిప్రాయ క్రమాన్ని ప్రభావితం చేస్తుంది, దీని ఫలితంగా స్ప్లైసింగ్ మార్పు చెంది అసాధారణమైన లేదా లోపించిన ప్రోటీన్‌కు దారితీస్తుంది. c.5851_5854delAGTT వ్యాధికారక వేరియంట్ కోడింగ్ ఎక్సాన్ 10లోని 5851 నుండి 5854 న్యూక్లియోటైడ్ స్థానాల మధ్య 4-న్యూక్లియోటైడ్ తొలగింపు కారణంగా ఏర్పడుతుంది. BRCA2 జన్యువులో మార్పు, అంచనా వేయబడిన ప్రత్యామ్నాయ స్టాప్ కోడాన్ (p.S1951WfsTer)తో ట్రాన్స్‌లేషనల్ ఫ్రేమ్‌షిఫ్ట్‌కు దారితీస్తుంది. ముఖ్యంగా, గతంలో నివేదించినట్లుగా, c.631G>A మరియు c.7008-2A>T అనే రెండు మార్పులు ఒకే రోగిలో కనుగొనబడ్డాయి.34 మొదటి మ్యుటేషన్‌లో, BRCA2 ఎక్సాన్ 7లోని అడెనోసిన్ (A) స్థానంలో గ్వానైన్ (G) కలిగిన న్యూక్లియోటైడ్ వస్తుంది, దీని ఫలితంగా కోడాన్ 211 వద్ద వాలైన్, ఐసోల్యూసిన్‌గా మారుతుంది. ఐసోల్యూసిన్ అమైనో ఆమ్లం అత్యంత సారూప్య లక్షణాలను కలిగి ఉంటుంది. ఈ మార్పు సాధారణ mRNA స్ప్లైసింగ్‌ను ప్రభావితం చేస్తుంది. రెండవ వేరియంట్ ఇంట్రానిక్ ప్రాంతంలో ఉంటుంది మరియు BRCA2ను ఎన్‌కోడ్ చేసే జన్యువు యొక్క ఎక్సాన్ 13కు ముందు డబుల్ A స్థానంలో థైమిన్ (T) ప్రతిక్షేపణకు దారితీస్తుంది. c.7008-2A>T మార్పు వివిధ పొడవుల బహుళ ట్రాన్స్‌క్రిప్ట్‌లను ఉత్పత్తి చేయవచ్చు. అంతేకాకుండా, BRCA2 PVల సమూహంలో, 18 మార్పులలో 4 (22.2%) ఇంట్రానిక్.
తరువాత మేము BRCA1/2 హానికరమైన మ్యుటేషన్‌లను ఫంక్షనల్ డొమైన్‌లు మరియు ప్రోటీన్-బైండింగ్ ప్రాంతాలలో మ్యాప్ చేసాము (Fig. 4). BRCA1 జన్యువులో, 50% PVలు బ్రెస్ట్ క్యాన్సర్ క్లస్టర్ రీజియన్ (BCCR)లో ఉన్నాయి, అయితే 22% మ్యుటేషన్‌లు ఓవేరియన్ క్యాన్సర్ క్లస్టర్ రీజియన్ (OCCR)లో ఉన్నాయి (Fig. 4A). BRCA2 PVలో, 35.7% వేరియంట్‌లు BCCR ప్రాంతంలో ఉన్నాయి మరియు 42.8% మ్యుటేషన్‌లు OCCRలో ఉన్నాయి (Fig. 4B). తరువాత, మేము BRCA1 మరియు BRCA2 ప్రోటీన్ డొమైన్‌లలో PV యొక్క స్థానాన్ని అంచనా వేసాము. BRCA1 ప్రోటీన్ కోసం, మేము లూప్ మరియు కాయిల్డ్ కాయిల్ డొమైన్‌లలో మూడు PVలను మరియు BRCT డొమైన్‌లో రెండు మ్యుటేషన్‌లను కనుగొన్నాము (Fig. 4A). BRCA2 ప్రోటీన్ కోసం, 4 PVలు BRC రిపీట్ డొమైన్‌కు మ్యాప్ చేయబడ్డాయి, అయితే 3 ఇంట్రానిక్ మరియు 3 ఎక్సోనిక్ మార్పులు ఒలిగో/ఒలిగోశాకరైడ్-బైండింగ్‌లో కనుగొనబడ్డాయి. (OB) మరియు టవర్ (T) డొమైన్‌లు (మూర్తి 4B).
పటం 4 BRCA1 మరియు BRCA2 ప్రోటీన్ల రేఖాచిత్ర ప్రాతినిధ్యం మరియు వ్యాధికారక వైవిధ్యాల స్థానికీకరణ. ఈ పటం రొమ్ము క్యాన్సర్ రోగులలో BRCA1 (A) మరియు BRCA2 (B) వ్యాధికారక వైవిధ్యాల పంపిణీని చూపుతుంది. ఎక్సోనిక్ ఉత్పరివర్తనాలు నీలం రంగులో, ఇంట్రోనిక్ వైవిధ్యాలు నారింజ రంగులో చూపబడ్డాయి. బార్ ఎత్తు కేసుల సంఖ్యను సూచిస్తుంది. BRCA1 మరియు BRCA2 ప్రోటీన్లు మరియు వాటి క్రియాత్మక డొమైన్‌లు నివేదించబడ్డాయి. (A) BRCA1 ప్రోటీన్‌లో ఒక లూప్ డొమైన్ (RING) మరియు ఒక న్యూక్లియర్ లోకలైజేషన్ సీక్వెన్స్ (NLS), ఒక కాయిల్డ్-కాయిల్ డొమైన్, ఒక SQ/TQ క్లస్టర్ డొమైన్ (SCD), మరియు ఒక BRCA1 C-టెర్మినల్ డొమైన్ (BRCT) ఉంటాయి. (B) BRCA2 ప్రోటీన్‌లో ఎనిమిది BRC రిపీట్‌లు, ఒక హెలికల్ డొమైన్‌తో కూడిన DNA-బైండింగ్ డొమైన్ (Helical), మూడు ఒలిగోన్యూక్లియోటైడ్/ఒలిగోశాకరైడ్-బైండింగ్ (OB) ఫోల్డ్‌లు, ఒక టవర్ డొమైన్ (T), మరియు C వైపున ఒక NLS ఉంటాయి. బ్రెస్ట్ క్యాన్సర్ క్లస్టర్ రీజియన్ (BCCR) మరియు ఓవేరియన్ క్యాన్సర్ క్లస్టర్ రీజియన్ అని పిలువబడే ప్రాంతాలు. (OCCR) దిగువన చూపబడ్డాయి.* స్టాప్ కోడాన్‌లను నిర్ధారించే ఉత్పరివర్తనాలను సూచిస్తుంది.
తరువాత మేము BRCA1/2 PV ఉనికితో సంబంధం కలిగి ఉండగల BC క్లినికల్ పాథలాజికల్ లక్షణాలను పరిశోధించాము. 181 మంది BRCA1/2-నెగటివ్ రోగులకు (నాన్-క్యారియర్లు) మరియు క్యారియర్లు అందరికీ (n = 35) పూర్తి క్లినికల్ రికార్డులు అందుబాటులో ఉన్నాయి. కణితి వ్యాప్తి రేటు మరియు గ్రేడ్ మధ్య సంబంధం ఉంది.
మేము మా సమూహం యొక్క మధ్యస్థం (25%, పరిధి <10-90%) ఆధారంగా Ki-67 పంపిణీని లెక్కించాము. Ki-67 < 25% ఉన్న వారిని "తక్కువ Ki-67" గా, మరియు ≥ 25% విలువలు ఉన్న వారిని "అధిక Ki-67" గా నిర్వచించాము. BRCA1 PV క్యారియర్లు కాని వారికి మరియు క్యారియర్లు కాని వారికి మధ్య Ki-67 లో గణనీయమైన తేడాలు (p<0.01) కనుగొనబడ్డాయి (పటం 5A).
పటం 5 BRCA1 మరియు BRCA2 PVలు ఉన్న మరియు లేని రొమ్ము క్యాన్సర్ మహిళలలో గ్రేడ్ పంపిణీతో Ki-67 యొక్క సహసంబంధం. (A) 181 మంది క్యారియర్ కాని BC రోగులలో మధ్యస్థ Ki-67 విలువలను BRCA1 (18) లేదా BRCA2 (17) PV రోగులతో పోల్చి చూపే బాక్స్‌ప్లాట్. 0.5 కంటే తక్కువ ఉన్న P విలువలు గణాంకపరంగా ముఖ్యమైనవిగా పరిగణించబడ్డాయి. (B) BRCA1 మరియు BRCA2 మ్యుటేషన్ స్థితి (WT సబ్జెక్టులు, BRCA1 మరియు BRCA2 PV క్యారియర్లు) ప్రకారం BC క్యాన్సర్ రోగులను హిస్టోలాజికల్ గ్రేడ్ గ్రూపులుగా (G2 మరియు G3) విభజించడాన్ని సూచించే హిస్టోగ్రామ్.
అదేవిధంగా, ట్యూమర్ గ్రేడ్ మరియు BRCA1/2 PV ఉనికి మధ్య సంబంధం ఉందో లేదో మేము పరిశీలించాము. మా జనాభాలో G1 BC లేనందున, మేము రోగులను రెండు గ్రూపులుగా (G2 లేదా G3) విభజించాము. Ki-67 ఫలితాలకు అనుగుణంగా, విశ్లేషణలో ట్యూమర్ గ్రేడ్ మరియు BRCA1 మ్యుటేషన్ మధ్య గణాంకపరంగా ముఖ్యమైన సంబంధం ఉన్నట్లు వెల్లడైంది, BRCA1 క్యారియర్లు కానివారితో పోలిస్తే క్యారియర్లలో G3 ట్యూమర్ల నిష్పత్తి ఎక్కువగా ఉంది (p<0.005) (చిత్రం 5B).
DNA సీక్వెన్సింగ్ టెక్నాలజీలో వచ్చిన పురోగతులు BRCA1/2 జన్యు పరీక్షలలో అపూర్వమైన అభివృద్ధికి దోహదపడ్డాయి, ఇది క్యాన్సర్ కుటుంబ చరిత్ర ఉన్న రోగులకు కీలకమైన చిక్కులను కలిగి ఉంది. ఇప్పటి వరకు, అమెరికన్ సొసైటీ ఆఫ్ మెడికల్ జెనెటిక్స్ 35 మరియు ఎనిగ్మా (ENIGMA) వ్యవస్థ 35,36 ప్రకారం సుమారు 20,000 BRCA1/2 వేరియంట్‌లు గుర్తించబడి, వర్గీకరించబడ్డాయి. BRCA1/2 మ్యుటేషనల్ స్పెక్ట్రమ్ భౌగోళిక ప్రాంతాలలో విస్తృతంగా మారుతుందని అందరికీ తెలిసిందే. 37 ఇటలీలో, BRCA1/2 PVల రేటు 8% నుండి 37% వరకు ఉంది, ఇది దేశంలోపల విస్తృత వైవిధ్యాన్ని చూపిస్తుంది. 38,39 దాదాపు 5 మిలియన్ల జనాభాతో, సిసిలీ నివాసుల సంఖ్య పరంగా ఇటలీలో ఐదవ అతిపెద్ద ప్రాంతం. పశ్చిమ సిసిలీలో BRCA1/2 పంపిణీపై డేటా ఉన్నప్పటికీ, ద్వీపం యొక్క తూర్పు భాగంలో విస్తృతమైన ఆధారాలు లేవు.
తూర్పు సిసిలీలోని BC రోగులలో BRCA1/2 PV సంభవంపై వచ్చిన మొదటి నివేదికలలో మా అధ్యయనం ఒకటి.28 మా సమూహంలో ఇది అత్యంత సాధారణ వ్యాధి కాబట్టి, మేము మా విశ్లేషణను BC పై కేంద్రీకరించాము.
389 మంది రొమ్ము క్యాన్సర్ రోగులను పరీక్షించినప్పుడు, వారిలో 9% మందిలో BRCA1/2 PVలు ఉన్నట్లు కనుగొనబడింది, ఇవి BRCA1 మరియు BRCA2లలో సమానంగా విస్తరించి ఉన్నాయి. ఈ ఫలితాలు ఇటాలియన్ జనాభాలో గతంలో నివేదించబడిన వాటితో సరిపోలుతున్నాయి.28 ఆసక్తికరంగా, మా అధ్యయన సమూహంలో 3% (13/389) మంది పురుషులు ఉన్నారు. పురుషుల రొమ్ము క్యాన్సర్‌కు (అన్ని రొమ్ము క్యాన్సర్లలో 1%) ఊహించిన దాని కంటే ఈ రేటు ఎక్కువగా ఉంది,40 ఇది BRCA1/2 మ్యుటేషన్ ప్రమాదం ఆధారంగా మేము జనాభాను ఎంపిక చేసుకోవడాన్ని ప్రతిబింబిస్తుంది. అయితే, ఈ పురుషులలో ఎవరికీ BRCA1/2 PV అభివృద్ధి కాలేదు, కాబట్టి PALB2, RAD51C మరియు D వంటి అరుదైన మ్యుటేషన్ల ఉనికిని తోసిపుచ్చడానికి వారు తదుపరి మాలిక్యులర్ విశ్లేషణకు అభ్యర్థులుగా ఉన్నారు. BRCA2 VUS స్పష్టంగా ఉన్న 7% మంది వ్యక్తులలో అనిశ్చిత ప్రాముఖ్యత గల వేరియంట్లు కనుగొనబడ్డాయి. ఈ ఫలితం కూడా ఇప్పటికే ఉన్న ఆధారాలతో సరిపోలుతోంది.28,41,42
BRCA1/2 మ్యూటెంట్ మహిళలలో BC మాలిక్యులర్ సబ్‌టైప్‌ల పంపిణీని మేము విశ్లేషించినప్పుడు, TNBC మరియు BRCA1 PV (58.8%) మధ్య మరియు లూమినల్ B BC మరియు BRCA2 PV (55.6%) మధ్య ఉన్న సంబంధాలను మేము నిర్ధారించాము.16,43 BRCA1 మరియు BRCA2 PV క్యారియర్‌లలోని లూమినల్ A మరియు HER2+ కణితులు ఇప్పటికే ఉన్న సాహిత్య డేటాతో స్థిరంగా ఉన్నాయి.16,43
తరువాత మేము BRCA1/2 PV యొక్క రకం మరియు స్థానంపై దృష్టి పెడతాము. మా సమూహంలో, అత్యంత సాధారణ BRCA1 PV c.5035_5039delCTAAT. అయినప్పటికీ ఇంకోర్వాయా మరియు ఇతరులు. వారి సిసిలియన్ సమూహంలో ఈ వైవిధ్యాన్ని వివరించనప్పటికీ, ఇతర రచయితలు దీనిని జెర్మ్‌లైన్ BRCA1 PVగా నివేదించారు.34 మా సమూహంలో అనేక BRCA1 PVలు కనుగొనబడ్డాయి – ఉదాహరణకు c.181T>G, c.514del, c.3253dupA మరియు c.5266dupC – ఇవి సిసిలీలో గమనించబడ్డాయి.28 వీటిలో, రెండు BRCA1 ఫౌండర్ మ్యుటేషన్లు (c.181T>G మరియు c.5266dupC) తూర్పు మరియు మధ్య ఐరోపా (పోలాండ్, చెక్), స్లోవేనియన్, ఆస్ట్రియన్, హంగేరియన్, బెలారసియన్ మరియు జర్మన్ దేశాల అష్కెనాజీ యూదులలో సాధారణంగా కనిపిస్తాయి),44,45 మరియు, యునైటెడ్ స్టేట్స్ మరియు అర్జెంటీనాలో, BC మరియు OC ఉన్న ఇటాలియన్ రోగులలో ఇది ఇటీవల "పునరావృత జెర్మ్‌లైన్ వేరియంట్"గా నిర్వచించబడింది. 34c.514del వేరియంట్ గతంలో ఉత్తర సిసిలీలోని పలెర్మో మరియు మెస్సినాకు చెందిన 8 మంది రొమ్ము క్యాన్సర్ రోగులలో గుర్తించబడింది. ఆసక్తికరంగా, ఇంకోర్వాయా మరియు ఇతరులు కూడా అల్. కాటానియాలోని కొన్ని కుటుంబాలలో c.3253dupA వేరియంట్‌ను కనుగొన్నారు.28 అత్యంత ప్రాతినిధ్యం వహించే BRCA2 PVలు c.428dup, c.5851_5854delAGTT మరియు ఇంట్రానిక్ వేరియంట్ c.8487+1G>A, ఇవి పలెర్మోలోని c.428dup ఉన్న ఒక రోగిలో మరింత వివరంగా నివేదించబడ్డాయి.28 c.5851_5854delAGTT PV వాయువ్య సిసిలీలోని గృహాలలో, ప్రధానంగా ట్రాపాని మరియు పలెర్మో ప్రాంతాలలో గమనించబడింది, అయితే c.5851_5854delAGTT PV వాయువ్య సిసిలీలోని గృహాలలో గమనించబడింది. 8487+1G>A వేరియంట్ మెస్సినా, పలెర్మో మరియు కాల్టానిస్సెట్టా నుండి వచ్చిన వ్యక్తులలో సర్వసాధారణం.28 రెబ్బెక్ మరియు ఇతరులు. కొలంబియాలో c.5851_5854delAGTT మార్పును ఇంతకుముందు వివరించారు.37 సిసిలీ (అగ్రిజెంటో, సిరాకుసా మరియు రగుసా) నుండి వచ్చిన BC మరియు OC రోగులలో మరొక BRCA2 PV, c.631+1G>A, కనుగొనబడింది.28 ముఖ్యంగా, మేము ఒకే రోగిలో రెండు BRCA2 వేరియంట్‌ల (BRCA2 c.631G>A మరియు c.7008-2A>T) సహజీవనాన్ని గమనించాము, ఇది ఇంతకుముందు నివేదించిన విధంగానే సిస్ మోడ్‌లో వేరు చేయబడిందని మేము భావించాము.34,46 ఈ BRCA2 ద్వంద్వ ఉత్పరివర్తనాలు నిజానికి ఇటాలియన్ ప్రాంతంలో తరచుగా గమనించబడతాయి మరియు ఇవి అకాల స్టాప్ కోడాన్‌లను ప్రవేశపెట్టి, మెసెంజర్ RNA స్ప్లైసింగ్‌ను ప్రభావితం చేసి, BRCA2 ప్రోటీన్ విఫలమవడానికి కారణమవుతాయని కనుగొనబడింది.47,48
మేము ప్రోటీన్ డొమైన్‌లు మరియు జన్యువుల యొక్క OCCR మరియు BCCR ప్రాంతాలుగా భావించబడుతున్న వాటిలో BRCA1 మరియు BRCA2 PVలను కూడా మ్యాప్ చేసాము. ఈ ప్రాంతాలను రెబ్బెక్ మరియు ఇతరులు వరుసగా అండాశయ మరియు రొమ్ము క్యాన్సర్ వచ్చే ప్రమాదకర ప్రాంతాలుగా వర్ణించారు.49 అయితే, జెర్మ్‌లైన్ వేరియంట్‌ల స్థానానికి మరియు రొమ్ము లేదా అండాశయ క్యాన్సర్ ప్రమాదానికి మధ్య ఉన్న సంబంధానికి సంబంధించిన ఆధారాలు వివాదాస్పదంగానే ఉన్నాయి.28,50-52 మా జనాభాలో, BRCA1 PVలు ప్రధానంగా BCCR ప్రాంతంలో ఉన్నాయి, అయితే BRCA2 PVలు ప్రధానంగా OCCR ప్రాంతంలో ఉన్నాయి. అయినప్పటికీ, మేము OCCR మరియు BCCR ప్రాంతాలుగా భావించబడుతున్న వాటికి మరియు BC లక్షణాలకు మధ్య ఎటువంటి సంబంధాన్ని కనుగొనలేకపోయాము. BRCA1/2 మ్యుటేషన్‌లు ఉన్న రోగుల సంఖ్య పరిమితంగా ఉండటం దీనికి కారణం కావచ్చు. ప్రోటీన్ డొమైన్ దృక్కోణం నుండి చూస్తే, BRCA1 PVలు మొత్తం ప్రోటీన్ పొడవునా విస్తరించి ఉంటాయి మరియు BRCA2 మార్పులు ప్రాధాన్యంగా BRC రిపీట్ డొమైన్‌లో కనిపిస్తాయి.
చివరగా, మేము BC క్లినికోపాథలాజికల్ లక్షణాలను BRCA1/2 PVతో పరస్పర సంబంధం చేశాము. చేర్చబడిన రోగుల సంఖ్య పరిమితంగా ఉన్నందున, మేము Ki-67 మరియు ట్యూమర్ గ్రేడ్ మధ్య మాత్రమే గణనీయమైన సంబంధాన్ని కనుగొన్నాము. Ki-67 యొక్క అంచనా మరియు వివరణ కొంతవరకు వివాదాస్పదంగా ఉన్నప్పటికీ, అధిక ప్రొలిఫరేటివ్ రేట్లు వ్యాధి పునరావృతమయ్యే ప్రమాదాన్ని పెంచుతాయని మరియు మనుగడను తగ్గిస్తాయని ఖచ్చితంగా చెప్పవచ్చు. ఇప్పటి వరకు, "అధిక" మరియు "తక్కువ" Ki-67 మధ్య తేడాను గుర్తించడానికి కటాఫ్ 20%గా ఉంది. అయితే, ఈ పరిమితి మా BRCA1/2 మ్యుటేషన్ రోగుల సమూహానికి వర్తించదు, వీరిలో మధ్యస్థ Ki-67 విలువ 25%గా ఉంది. అధిక Ki-67 రేట్లలో ఈ ధోరణిని మా లూమినల్ B మరియు TNBC సమూహాలలో ఉన్న ప్రాబల్యం ద్వారా వివరించవచ్చు, వీటిలో కొన్ని లూమినల్ A కణితులు మాత్రమే ఉన్నాయి. అయితే, అధిక Ki-67 కటాఫ్ (25–30%) రోగులను వారి రోగ నిరూపణ ప్రకారం మెరుగ్గా వర్గీకరించవచ్చని కొన్ని ఆధారాలు సూచిస్తున్నాయి.53,54 మా విశ్లేషణ ఫలితాల ప్రకారం, అధిక Ki-67 మరియు గ్రేడ్‌ల మధ్య గణనీయమైన సంబంధం ఉండటంలో ఆశ్చర్యం లేదు. BRCA1 PV ఉనికి. వాస్తవానికి, BRCA1-సంబంధిత కణితులు TNBCకి విలక్షణమైనవి మరియు మరింత దూకుడు లక్షణాలను ప్రదర్శిస్తాయి.16,17
ముగింపుగా, ఈ అధ్యయనం తూర్పు సిసిలీలోని రొమ్ము క్యాన్సర్ (BC) సమూహంలో BRCA1/2 యొక్క ఉత్పరివర్తన స్థితిపై ఒక నివేదికను అందిస్తుంది. మొత్తమ్మీద, రొమ్ము క్యాన్సర్‌లో ఉత్పరివర్తన ప్రాబల్యం మరియు క్లినికల్-పాథలాజికల్ లక్షణాల పరంగా, మా పరిశోధన ఫలితాలు ఇప్పటికే ఉన్న ఆధారాలతో ఏకీభవిస్తున్నాయి. BRCA1/2 కంటే విభిన్నంగా మరియు తక్కువగా కనిపించే PVల (ప్రిలిమినరీ వేరియంట్స్) ఉనికిని అంచనా వేయడానికి, మల్టీజీనోమ్ విస్తరించిన ఉత్పరివర్తన విశ్లేషణ వంటి పద్ధతులను ఉపయోగించి, BRCA1/2 ఉత్పరివర్తన చెందిన రొమ్ము క్యాన్సర్ రోగుల పెద్ద సమూహాలపై మరిన్ని అధ్యయనాలు అవసరం. ఇది జన్యు ఉత్పరివర్తనల కారణంగా క్యాన్సర్ వచ్చే ప్రమాదం ఎక్కువగా ఉన్న, పెరుగుతున్న సంఖ్యలో ఉన్న వ్యక్తులను గుర్తించడానికి మరియు వారికి సరైన చికిత్స అందించడానికి వీలు కల్పిస్తుంది.
పరిశోధన ప్రయోజనాల కోసం తమ కణితి నమూనాలను అనామకంగా విడుదల చేయడానికి రోగులు సమాచార సమ్మతి పత్రంపై సంతకం చేశారని మేము నిర్ధారించుకున్నాము. హెల్సింకి ప్రకటన ప్రకారం రోగులందరూ లిఖితపూర్వక సమాచార సమ్మతి పత్రంపై సంతకం చేశారు. AOU పాలీక్లినికో “జి. రోడోలికో – ఎస్. మార్కో” విధానం ప్రకారం, BRCA1/2 విశ్లేషణ వైద్య పద్ధతికి అనుగుణంగా నిర్వహించబడినందున మరియు రోగులందరూ లిఖితపూర్వక సమాచార సమ్మతిని ఇచ్చినందున, ఈ అధ్యయనానికి నైతిక సమీక్ష నుండి మినహాయింపు ఇవ్వబడింది. పరిశోధన ప్రయోజనాల కోసం తమ డేటాను ఉపయోగించడానికి కూడా రోగులు సమ్మతిస్తున్నారు.
నైతిక కమిటీ అభ్యర్థించిన విధంగా రొమ్ము క్యాన్సర్ రోగుల సంరక్షణలో సహాయం చేసినందుకు ప్రొఫెసర్ పాలో విగ్నేరి గారికి మేము ధన్యవాదాలు తెలియజేస్తున్నాము.
ఫెడెరికా మార్టోరానా ఇస్టిట్యూటో జెంటిలి, ఎలి లిల్లీ, నోవార్టిస్, ఫైజర్ నుండి గౌరవ వేతనాలు పొందినట్లు నివేదించారు. ఇతర రచయితలు ఈ పనిలో ఎటువంటి ఆసక్తి వైరుధ్యాలు లేవని ప్రకటించారు.
1. సంగ్ హెచ్, ఫెర్లే జె, సీగెల్ ఆర్ఎల్, మరియు ఇతరులు. గ్లోబల్ క్యాన్సర్ స్టాటిస్టిక్స్ 2020: ప్రపంచవ్యాప్తంగా 185 దేశాలలో 36 క్యాన్సర్ల సంభవం మరియు మరణాలను గ్లోబోకాన్ అంచనా వేస్తుంది. సిఏ క్యాన్సర్ జె క్లిన్. 2021;71(3):209-249. doi: 10.3322/caac.21660