Javascript одоогоор таны хөтөч дээр идэвхгүй байна. Javascript идэвхгүй болсон үед энэ вэб сайтын зарим функц ажиллахгүй.
Өөрийн дэлгэрэнгүй мэдээлэл, сонирхож буй эмийн талаар бүртгүүлээрэй, бид таны өгсөн мэдээллийг манай өргөн хүрээний мэдээллийн санд байгаа нийтлэлүүдтэй тааруулж, PDF хуулбарыг шууд имэйлээр илгээх болно.
Жүжигчин: Стелла С, Витале СР, Марторана Ф, Массимино М, Павоне Г, Ланзафаме К, Бианка С, Барон С, Горгоне С, Фичера М, Манзелла Л
Стефания Стелла, 1,2 Силвиа Рита Витале, 1,2 Федерика Марторана, 1,2 Мишель Массимино, 1,2 Жулиана Павоне, 3 Катиа Ланзафаме, 3 Себастьяно Бианка, 4 Чиара Бароне, 5 Кристина Горгоне, 6 Марко Фичера Лицелина12. болон Туршилтын Анагаах ухаан, Катаниагийн Их Сургууль, Катания, 95123, Итали;2 Туршилтын Хавдар судлал, Гематологийн төв, AOU Policlinico “G.Rodolico – San Marco”, Катаниа, 95123, Итали; 3 Эрүүл мэндийн онкологи, AOU Policlinico “G. Rodolico – San Marco”, Катаниа, 95123, Итали; 4 Анагаах ухааны генетик, ARNAS Garibaldi, Катаниа, 95123, Итали; 5 Medicine Genetics, ASP, Syracuse, 96100, Итали; 6 Катаниагийн их сургуулийн Биоанагаах ухаан, биотехнологийн шинжлэх ухааны тэнхим, Анагаах ухааны генетик, Катаниа, Итали, 95123; 7Oasi Research Institute-IRCCS, Troina, 94018, Итали Харилцаа холбоо: Стефаниа Стелла, утас +39 095 378 1946, имэйл [имэйлээр хамгаалагдсан]; [имэйлээр хамгаалагдсан] Зорилго: BRCA1 ба BRCA2 дахь үр хөврөлийн мутаци ба хөхний хорт хавдар (BC), өндгөвч (OC) болон бусад хорт хавдрын насан туршийн эрсдэлтэй холбоотой. BRCA генийн шинжилгээ нь хувь хүний ​​эрсдлийг үнэлэх, түүнчлэн эрүүл тээгчдээс урьдчилан сэргийлэх аргуудыг олох, хорт хавдартай өвчтөнүүдэд тохирсон эмчилгээ хийх гол түлхүүр юм. бүс нутгуудад, мөн Сицилийн гэр бүлд BRCA-ийн эмгэг төрүүлэгч хувилбаруудын талаар мэдээлэл байгаа хэдий ч зүүн Сицилийн популяцид тусгайлан чиглэсэн судалгаа дутмаг байна. Бидний судалгааны зорилго нь зүүн Сицилийн МЭӨ өвчтнүүдийн бүлэгт BRCA-ийн эмгэг төрүүлэгч үр хөврөлийн өөрчлөлтийн тархалт, тархалтыг судалж, тэдний дараагийн BC-ийн өвөрмөц үүсэлтэй хамаарлыг үнэлэхэд оршино. Хавдрын зэрэг болон пролиферацийн индекстэй холбоотой. ҮР ДҮН: Нийт 35 өвчтөнд (9%) BRCA-ийн эмгэг төрүүлэгч хувилбар, BRCA1-д 17 (49%), BRCA2-д 18 (51%). BRCA1-ийн өөрчлөлтүүд гурвалсан сөрөг BC-тэй өвчтөнүүдэд зонхилон ажиглагддаг бол BRCA2-ийн мутаци нь илүү нийтлэг, BRCA2-ын бус мутацитай. BRCA1 хувилбартай хүмүүсийн хавдрын зэрэг болон пролифератив индекс илт өндөр байсан. Дүгнэлт: Бидний олдворууд Сицилийн зүүн нутгийн МЭӨ өвчтнүүдийн BRCA мутацийн төлөв байдлын ерөнхий тоймыг гаргаж, удамшлын BC-тэй өвчтөнүүдийг тодорхойлоход NGS шинжилгээний үүргийг баталж байна. Ерөнхийдөө эдгээр өгөгдөл нь BRCA-ийн мутацын скрининг болон хорт хавдраас урьдчилан сэргийлэх автомашины скринингийг дэмжсэн өмнөх нотолгоотой нийцэж байна.
Хөхний хорт хавдар (BC) нь дэлхий даяар хамгийн түгээмэл хорт хавдар бөгөөд эмэгтэйчүүдийн хамгийн үхэлд хүргэдэг хорт хавдар юм.1 BC-ийн прогноз болон эмнэлзүйн зан төлөвийг тодорхойлдог биологийн шинж чанаруудыг цаг хугацааны явцад нарийвчлан судалж, хэсэгчлэн тодруулсан. Үнэн хэрэгтээ одоогийн байдлаар BC-ийг өөр өөр молекулын дэд төрөлд ангилахад хэд хэдэн орлуулагч маркерууд ашиглагдаж байна. Эдгээр нь хүний ​​​​рецептор ба эстроген (ЭРРР) юм. эпидермисийн өсөлтийн хүчин зүйлийн рецептор 2 (HER2) олшрох, үржих индекс Ki-67 ба хавдрын зэрэг (G).2 Эдгээр хувьсагчийн хослол нь дараах BC ангиллыг тодорхойлсон: 1) ER ба/эсвэл PgR илэрхийлэлийг харуулсан гэрлийн хөндийн хавдар нь BCs-ийн 75%-ийг эзэлдэг. Эдгээр хавдар нь цаашлаад LuHER2, Ki-HER27-д хуваагдсан. сөрөг, мөн Luminal B, Ki-67 нь 20% ба түүнээс дээш байх үед болон HER2 олшруулалттай үед тархалтын индексээс үл хамааран; 2) ER ба PgR сөрөг боловч HER2 олшрох шинжтэй HER2+ хавдар. Энэ бүлэг нь хөхний бүх хавдрын 10%-ийг эзэлдэг; 3) Гурвалсан сөрөг хөхний хорт хавдар (TNBC) нь ER болон PgR илэрхийлэл, HER2 олшролтыг харуулдаггүй бөгөөд хөхний хорт хавдрын 15 орчим хувийг эзэлдэг.2-4
Эдгээр МЭӨ дэд хэвшинжүүдийн дотроос хавдрын зэрэг болон тархалтын индекс нь хавдрын түрэмгий байдал, прогнозтой шууд бөгөөд бие даасан хамааралтай хөндлөн огтлолын биомаркеруудыг төлөөлдөг.5,6
Дээр дурдсан биологийн онцлогоос гадна BC-ийн хөгжилд хүргэж буй удамшлын генетикийн өөрчлөлтийн үүрэг сүүлийн хэдэн жилд улам бүр чухал болж байна.7 Хөхний 10 хавдар тутмын 1 нь тодорхой генийн үр хөврөлийн өөрчлөлтөөс болж удамшдаг.8 Сүүлийн үед 180,000 гаруй эмэгтэйчүүдийг хамарсан тархвар судлалын хоёр том судалгаанд (AARD, 180,000 эмэгтэй, 180,000 эмэгтэй, 1800 гаруй генийн халдварт өвчин илэрсэн). BRCA1, BRCA2, CHK2, PALB2, RAD51C, RAD51D) нь удамшлын BC-ийг голчлон хариуцдаг. Эдгээр генүүдийн дотроос BRCA1 ба BRCA2 (цаашид BRCA1/2 гэх) нь хөхний хавдрын хөгжилтэй хамгийн хүчтэй хамааралтай болохыг харуулсан. Өндгөвч, түрүү булчирхай, нойр булчирхай, бүдүүн гэдэсний болон меланома зэрэг бусад хорт хавдрын насан туршийн эрсдэл.13-аас 80 хүртэлх насны BRCA1-ийн эмгэг төрүүлэгч хувилбар (PV)-тэй эмэгтэйчүүдэд BC-ийн хуримтлагдах тохиолдол 72%, BRCA42-тэй эмэгтэйчүүдэд 69% байдаг.
Сүүлийн үеийн хэвлэлд BC эрсдэл нь PV-ийн төрлөөс хамаардаг болохыг харуулж байна. Үнэн хэрэгтээ эмгэг төрүүлэгч тайрах хувилбаруудтай харьцуулахад, ялангуяа BRCA1 генийн тод алдаатай хувилбарууд нь ялангуяа өндөр настай эмэгтэйчүүдэд BC-ийн эрсдэлийг бууруулдагтай холбоотой байдаг.15
BRCA1 эсвэл BRCA2 PV байгаа нь биологийн болон клиникопатологийн өөр өөр шинж чанартай холбоотой байв.16,17 BRCA1-тэй холбоотой BC-ууд нь эмнэлзүйн хувьд түрэмгий, ялгарах шинж чанар муутай, өндөр пролифератив шинж чанартай байдаг. Эдгээр хавдар нь ихэвчлэн гурвалсан сөрөг шинж чанартай бөгөөд эрт эхэлдэг. Хавдар нь ихэвчлэн BRCA-тай өвчтөнүүдэд илэрдэг. сайн ялгаатай зэрэглэлүүд ба хувьсах пролифератив индексүүд. Эдгээр хавдар нь В хөндийд илүү түгээмэл байдаг ба ихэвчлэн өндөр настай хүмүүст тохиолддог.16-18 BRCA1 ба BRCA2-ийн мутаци нь цагаан алтны давс, поли(ADP-рибоз) полимераза (PAR29) дарангуйлагч (PAR29) зэрэг тусгай эмчилгээнд мэдрэмтгий байдлыг нэмэгдүүлдэг.
Сүүлийн хэдэн жилийн хугацаанд эмнэлзүйн практикт дараагийн үеийн дарааллыг (NGS) хэрэгжүүлснээр BRCA1/2.21 зэрэг хорт хавдрын мэдрэмтгий байдлын хам шинжийн молекулын шинжилгээнд хамрагдах BC-тэй өвчтөнүүдийн тоог нэмэгдүүлэх боломжтой болсон. туршилт.22,23 Энэ хүрээнд газарзүйн бүс нутгуудын ялгааг онцолсон тодорхой популяцид BRCA1/2 скрининг хийхэд нотлох баримтууд хуримтлагдаж байна.24–27 Баруун Сицилийн МЭӨ когортын тухай мэдээллүүд байгаа ч Сицилийн зүүн хэсгийн хүн амд BRCA1/2-ын скринингийн талаарх мэдээлэл цөөн байна.28,29
Бид энд Сицилийн зүүн нутгийн МЭӨ-ний өвчтөнүүдэд үр хөврөлийн BRCA1/2 скринингийн үр дүнг тайлбарлаж, BRCA1 эсвэл BRCA2 мутаци байгаа нь эдгээр хавдрын гол клиникопатологийн шинж чанаруудтай уялдуулах болно.
Катани улсын Родолико-Сан Марко хотын Поликлинико эмнэлгийн "Туршилтын хавдар судлал, цусны судлалын төв"-д ретроспектив судалгаа хийсэн. 2017 оны 1-р сараас 2021 оны 3-р сар хүртэл манай хөхний болон өндгөвч, меланома, нойр булчирхай, түрүү булчирхайн хорт хавдартай нийт 455 өвчтөнийг ХБНТ-д шилжүүлсэн. генетикийн шинжилгээ. Энэхүү судалгааг Хельсинкийн тунхаглалын дагуу явуулсан бөгөөд бүх оролцогчид молекулын шинжилгээ хийхээс өмнө бичгээр зөвшөөрөл авсан.
МЭӨ-ийн гистологи, биологийн шинж чанарыг (ER, PgR, HER2 төлөв, Ki-67, ба зэрэг) үндсэн биопси эсвэл мэс заслын дээж дээр зөвхөн хавдрын түрэмгий бүрэлдэхүүн хэсгүүдийг харгалзан үнэлэв. Эдгээр шинж чанарт үндэслэн BCs-ийг дараах байдлаар ангилсан: гэрэлтэгч A (ER+ ба/эсвэл PgR+, HER2-% ба Ki-2, HER2-%, B/0, PgR+, HER2-, Ki-67≥20%), гэрлийн B-HER2+ (ER ба/эсвэл PgR+, HER2+), HER2+ (ER ба PgR-, HER2+) эсвэл гурвалсан сөрөг (ER ба PgR-, HER2-).
BRCA1 ба BRCA2 мутацийн статусыг үнэлэхийн өмнө хавдар судлаач, генетикч, сэтгэл зүйч зэрэг олон талт баг өвчтөн бүрт BRCA1 ба/эсвэл BRCA1 байгаа эсэхийг тодорхойлохын тулд хавдрын генетикийн зөвлөгөөг явуулсан. эсвэл BRCA2 генд PV-ийн эрсдэл өндөртэй хүмүүс. Өвчтөнийг Италийн Анагаах ухааны онкологийн нийгэмлэгийн (AIOM) удирдамж болон орон нутгийн Сицилийн зөвлөмжийн дагуу сонгосон.30,31 Эдгээр шалгуурт: (i) мэдрэмтгий байдлын ген дэх эмгэг төрүүлэгч хувилбаруудын гэр бүлийн түүх (жишээлбэл, BRCA1, BRCA5TP, EN); (ii) BC-тэй эрэгтэй; (iii) BC болон OC-тэй хүмүүс; (iv) BC<36, TNBC<60, эсвэл хоёр талын BC<50 жилтэй эмэгтэйчүүд; (v) МЭӨ 50 жилээс доошгүй хувийн өвчний түүх, нэгээс доошгүй нэгдүгээр зэргийн хамаатан садан: (а) МЭӨ<50 жил; (б) ямар ч насны салстын бус ба хилийн бус ОК; (в) хоёр талын МЭӨ; (г) эрэгтэй МЭӨ; (д) нойр булчирхайн хорт хавдар; (е) түрүү булчирхайн хорт хавдар; (vi) хоёр ба түүнээс дээш хувийн түүх, МЭӨ-өөс дээш 50 жил, гэр бүлийн түүх, бие биетэйгээ нэгдүгээр зэрэглэлийн хамаатан садан (түүний нэгдүгээр зэрэглэлийн хамаатан садан болох хамаатан садан) нь МЭӨ, OC, эсвэл нойр булчирхайн хорт хавдартай байх; (vii) OC-ийн хувийн түүх ба хамгийн багадаа нэг нэгдүгээр зэргийн хамаатан садан: (a) МЭӨ <50 жил; (б) ҮОХ; (в) хоёр талын МЭӨ; (г) эрэгтэй МЭӨ; (vii) өндөр зэрэглэлийн сероз ОК-тэй эмэгтэй.
Өвчтөн бүрээс 20 мл захын цусны дээж авч, EDTA хуруу шилэнд (BD Biosciences) цуглуулсан. Геномын ДНХ-ийг QIAsymphony DSP DNA Midi тусгаарлах иж бүрдэл (QIAGEN, Хилден, Итали) ашиглан 0.7 мл цусны дээжээс үйлдвэрлэгчийн зааврын дагуу (Qubitlu ® 0 ) -ээр ялгаж, Fisher ®-ээр дамжуулсан. Scientific, Waltham, MA, USA) Тоо хэмжээ хийх. Зорилтот баяжуулалт болон номын сангийн бэлтгэлийг Oncomine™ BRCA Research Assay Chef гүйцэтгэдэг бөгөөд үйлдвэрлэгчийн зааврын дагуу автоматжуулсан номын санг бэлтгэхэд зориулагдсан Ion AmpliSeq™ Chef Reagents DL8 иж бүрдэлд ачаалахад бэлэн байдаг. Энэ хэрэгсэл нь бүх BRCA1 (NMCA_03)-ийг судлахад ашиглаж болох хоёр мультиплекс ПГУ праймер сангаас бүрдэнэ. (NM_000059.3) генүүд. Товчхондоо, шингэрүүлсэн дээж тус бүрээс 15 мкл ДНХ (10 нг)-ийг номын сан бэлтгэхийн тулд бар кодтой ялтсуудад нэмж, бүх урвалж болон хэрэглэгдэхүүнийг Ion Chef™ хэрэгсэлд ачсан. Автомат номын сан бэлтгэх, бар кодтой дээжийн санг цуглуулах ажлыг дараа нь Ion Chef™ багаж дээр хийсэн. Qubit® 3.0 флюрометр (Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA, USA) үйлдвэрлэгчийн зааврын дагуу. Эцэст нь номын сангуудыг Ion Chef™ номын сангийн дээжний хоолойд (бар кодтой хоолой) ижил молярын харьцаагаар нэгтгэж, Ion Chef™ хэрэгсэлд ачаална. (Thermo Fisher Scientific) нь Ion 510 Chip (Thermo Fisher Scientific) ашиглан хийсэн. Өгөгдлийн шинжилгээг Amplicon Suite (SmartSeq srl) болон Ion Reporter Software программууд хийсэн.
Бүх хувилбарын нэршил нь Хүний генийн өөрчлөлтийн консорциумын одоогийн удирдамжийг дагаж мөрдсөн бөгөөд үүнийг онлайнаар авах боломжтой (HGVS, http://www.hgvs.org/mutnomen). BRCA1/2 хувилбаруудын эмнэлзүйн ач холбогдлыг Олон улсын ENIGMA (Evidence-Based Germ Network for Interpreting All Germlines, Interpreting All Germ Network) консорциумын ангиллыг ашиглан тодорхойлсон. https://enigmaconsortium.org/) болон ARUP, BRCAEXCHANGE, ClinVar, IARC_LOVD, UMD зэрэг өөр өөр мэдээллийн сангаас зөвлөгөө авах. Ангилал нь хоргүй (I ангилал), хоргүй (II ангилал), тодорхойгүй ач холбогдол бүхий хувилбар (VUS, BRCAEXCHANGE, ClinVar, IARC_LOVD, UMD) зэрэг эрсдэлийн таван ангиллыг агуулдаг. V).VarSome мөн 30 мэдээллийн санд хандах боломжтой мэдээллийн хэрэгсэл болох уургийн бүтэц, үйл ажиллагаанд мутацийн нөлөөг шинжилжээ.32
VUS бүрт эмнэлзүйн боломжит ач холбогдлыг тодорхойлохын тулд дараах тооцооллын уургийн таамаглалын алгоритмыг ашигласан: MUTATION TASTER, 33 PROVEAN-SIFT (http://provean.jcvi.org/index.php), POLYPHEN-2 (http:// /genetics.bwh.harvard.edu/pph-DG) болон Align-DG (http://agvgd.hci.utah.edu/agvgd_input.php). 1 ба 2-р зэрэглэлийн хувилбаруудыг зэрлэг төрөл гэж үзсэн.
Сэнгерийн дараалал нь эмгэг төрүүлэгч хувилбар бүр байгаа эсэхийг баталгаажуулсан. Товчхондоо, BRCA1 ба BRCA2 генийн лавлагааны дарааллыг (NG_005905.2, NM_007294.3 болон NG_012772.3, NM_030, PC5-д зориулав). гүйцэтгэсэн, дараа нь Сэнгерийн дараалал.
BRCA1/2 генийн хувьд сөрөг гарсан өвчтөнүүдийг үйлдвэрлэгчийн зааврын дагуу геномын томоохон өөрчлөлтүүд (LGR) байгаа эсэхийг үнэлэхийн тулд мультиплекс холбосон датчик олшруулалтаар (MLPA) туршсан. Товчхондоо, ДНХ-ийн дээжүүд денатуратлагдсан бөгөөд ойролцоогоор 60 хүртэлх BRCA1 болон BRCA2 генийг тодорхой DNA60 илрүүлэхэд ашигладаг. урттай нуклеотидууд. ПГУ-ын ампликонуудын өвөрмөц багцаас бүрдэх датчик олшруулах бүтээгдэхүүнийг дараа нь капилляр электрофорез болон Cofalyser.Net программ хангамжаар багцад хамаарах Cofalyser хүснэгтүүдтэй (www.mrcholland.com) хамт шинжилсэн.
Сонгогдсон клиникопатологийн хувьсагчид (гистологийн зэрэг ба Ki-67% пролиферацийн индекс) BRCA1/2 PV байгаатай холбоотой байсан ба Prism программ хангамжийн v. 8.4-ийг ашиглан Фишерийн нарийн тестийг ашиглан p-утга <0.05 чухал ач холбогдолтой гэж үзсэн.
2017 оны 1-р сараас 2021 оны 3-р сарын хооронд 455 өвчтөнд үр хөврөлийн BRCA1/2 мутацийг илрүүлэх шинжилгээнд хамрагдсан. Мутацийн шинжилгээг Поликлинико эмнэлгийн Туршилтын онкологи, гематологийн төвд хийсэн. Сицилийн удирдамжийн дагуу (http://www.gurs.regione/itcilia.sidic.1,) 02-Venerdì 10 Gennaio 2020), Rodolico of Catania – San Marco” нийт 389 өвчтөн Хөхний хорт хавдар, 37 өндгөвчний хорт хавдар, 16 нойр булчирхайн хорт хавдар, 8 түрүү булчирхайн хорт хавдар, 5 меланома зэрэг өвчнөөр өвчилсөн байна. Хорт хавдрын төрлөөр өвчтнүүдийн хуваарилалт, шинжилгээний үр дүнг Зураг 1-д үзүүлэв.
Зураг 1-д судалгааны тоймыг харуулсан урсгалын диаграммыг үзүүлэв. Хөх, меланома, нойр булчирхай, түрүү булчирхай, өндгөвчний хавдартай өвчтөнүүдэд BRCA1 болон BRCA2 генийн мутаци байгаа эсэхийг шалгасан.
Товчлол: PVs, эмгэг төрүүлэгч хувилбар; VUS, тодорхойгүй ач холбогдолтой хувилбар; WT, зэрлэг төрлийн BRCA1/2 дараалал.
Бид судалгаагаа хөхний хорт хавдраар өвчилсөн бүлэгт анхаарлаа хандуулсан. Өвчтөнүүдийн дундаж нас 49 (23-89) ба голчлон эмэгтэйчүүд (n=376 буюу 97%) байв.
Эдгээрийн 64 (17%) нь BRCA1/2 мутацитай байсан ба бүгд эмэгтэй хүн байна. Гучин тав (9%) нь PV, 29 (7.5%) нь VUS-тай. Эмгэг төрүүлэгч 35 хувилбарын 17 (48.6%) нь BRCA1-д, 18 (51.4%) нь BRCA2-д (51.4%), 52-д нь (%12) тохиолдсон. (82.8%) BRCA2 (Зураг 1 ба 2). MLPA шинжилгээнд LGR байхгүй байна.
Зураг 2. Хөхний хорт хавдартай 389 өвчтөнд BRCA1 ба BRCA2 мутацийн шинжилгээ.(A) Хөхний хорт хавдартай 389 өвчтөнд эмгэг төрүүлэгч хувилбаруудын тархалт (PV) (улаан), тодорхойгүй ач холбогдолтой хувилбарууд (VUS) (улбар шар), WT (цэнхэр); (B) Хөхний хорт хавдартай 389 өвчтөн Гучин тав (9%) нь BRCA1/2 эмгэг төрүүлэгч хувилбарууд (PVs) байсан. Тэдний 17 (48.6%) нь BRCA1 PV тээгч (хар улаан), 18 (51.4%) нь BRCA2 (цайвар улаан) тээгч байсан; (C) 389 субъектийн 29 (7.5%) нь VUS, 5 (17.2%) нь BRCA1 ген (хар улбар шар), 24 (82.8%) BRCA2 (цайвар улбар шар) гентэй.
Товчлол: PVs, эмгэг төрүүлэгч хувилбар; VUS, тодорхойгүй ач холбогдолтой хувилбар; WT, зэрлэг төрлийн BRCA1/2 дараалал.
Дараа нь бид BRCA1/2 PV-тэй өвчтөнүүдэд BC молекулын дэд хэвшинжийн тархалтыг судалсан. Тархалт нь 2 (5.7%) гэрэлтэгч A, 15 (42.9%) гэрэлтэгч B, 3 (8.6%) гэрлийн B-HER2+, 2 (5.7%) HER2+, 13 (37%) TCA11-тэй өвчтөнүүдийг хамарсан. өвчтөнүүдэд 5 (29.4%) нь гэрлийн B BC, 2 (11.8%) нь HER2+ өвчтэй, 10 (58.8%) нь TNBC-тэй байсан. BRCA1 мутацигүй хавдар нь гэрэлтэгч А эсвэл гэрлийн B-HER2+ байсан (Зураг 3). BRCA2-эерэг хавдар нь B-1-ийн дэд бүлэгт (%0) luminal5,5, 6. (16.7%) нь гэрлийн B-HER2+, 3 (16.7%) нь TNBC, 2 (11.1%) нь гэрэлтэгч А (Зураг 3). Энэ бүлэгт HER2+ хавдар байхгүй. Иймээс TNBC-тэй өвчтөнүүдэд BRCA1 мутаци зонхилж, харин BRCA2-ийн өөрчлөлтүүд нь B хэлбэрийн өөрчлөлтүүд давамгайлж байна.
Зураг 3 BRCA1 ба BRCA2-ийн эмгэг төрүүлэгч хувилбартай өвчтөнүүдэд хөхний хорт хавдрын дэд хэв шинжийн тархалт. Хөхний хорт хавдартай өвчтөнүүдийн молекулын дэд төрлүүдийн дунд BRCA1- (хар улаан) ба BRCA2- (цайвар улаан) PV-ийн тархалтыг харуулсан гистограмм. Хайрцаг тус бүрийн дотор өгөгдсөн тоо нь BRCA1 болон BRCAPV дэд төрөл тус бүрийн хөхний хорт хавдартай өвчтөнүүдийн хувийг илэрхийлнэ.
Товчлол: PVs, эмгэг төрүүлэгч хувилбар; HER2+, хүний ​​эпидермисийн өсөлтийн хүчин зүйлийн рецептор 2 эерэг; TNBC, гурав дахин сөрөг хөхний хорт хавдар.
Дараа нь бид BRCA1 ба BRCA2 PV-ийн төрөл, генийн байршлыг үнэлэв. BRCA1 PV-д бид 7 дан нуклеотидын хувилбар (SNVs), 6 устгалт, 3 давхардал, 1 оруулгыг ажигласан. Зөвхөн нэг мутаци (c.5522delG) нь BRCA1-ийн шинэ нээлт юм. c.5035_5039delCTAAT. Энэ өөрчлөлт нь BRCA1 экзон 15 дахь таван нуклеотидыг (CTAAT) устгаж, 1679-р кодон дахь лейцин амин хүчлийг тирозиноор орлуулахад хүргэдэг бөгөөд орчуулгын хүрээний шилжилтийн улмаас 1679-р кодон дахь кодоны альтернатив протеин дахь өөр нэг өөрчлөлтийг илрүүлдэг. тохиолдол.Мэдэгдэж буй PV-ийн нэг нь залгах талбайн зөвшилцлийн бүсэд (c.4357+1G>T) байрлаж байсныг онцлон тэмдэглэв (Хүснэгт 1).
BRCA2 PV-ийн тухайд бид 6 устгалт, 6 SNV, 2 давхардал ажиглагдсан. Олдсон өөрчлөлтүүдийн аль нь ч шинэлэг биш байна. Манай популяцид c.428dup ба c.8487+1G>A гэсэн гурван мутаци давтагдсан ба дараа нь c.5851_5854delAGTT2 дахин тохиолдсон. Энэ нь BRCA2-ийн 5-р экзон дахь С-ийн давталтыг багтаасан бөгөөд энэ нь таслагдсан, функциональ бус уургийг кодлохоор таамаглаж байна. c.8487+1G>A мутаци нь BRCA2 интрон 19-ийн дотоод бүсэд (± 1,2) тохиолдож, залгах зөвшилцлийн дараалалд нөлөөлж, улмаар уургийн хэвийн бус хуваагдалд хүргэдэг. c.5851_5854delAGTT эмгэг төрүүлэгч хувилбар нь BRCA2 генийн кодлох экзон 10 дахь нуклеотидын 5851-ээс 5854 хүртэлх байрлалаас 4 нуклеотид устгагдсантай холбоотой бөгөөд урьдчилан таамагласан өөр зогсоох кодон бүхий орчуулгын хүрээний шилжилтийн үр дүнд (х.S1951Wff, өмнө нь мэдээлээгүй, аль аль нь байгаагүй). c.631G>A ба c.7008-2A>T нь нэг өвчтөнд илэрсэн.34 Эхний мутаци нь BRCA2 7-р экзон дахь аденозин (A)-ыг гуанин (G) агуулсан нуклеотидээр сольж, 211 кодон дээр валиныг изолейцин болгон өөрчилсөн, изолейцин хүчилтэй ижил төстэй амино хүчил их хэмжээгээр өөрчлөгддөг. мРНХ залгах. Хоёрдахь хувилбар нь интрон бүсэд байрладаг ба BRCA2-г кодлодог генийн 13-р экзоны өмнө А-д тимин (Т) давхар орлуулалтыг бий болгодог. c.7008-2A>T өөрчлөлт нь өөр өөр урттай олон транскрипт үүсгэж болно. Цаашилбал, BRCA2-ийн бүлэгт PVs-ийн өөрчлөлт 184% байна.
Дараа нь бид функциональ домэйн болон уураг холбох бүс нутагт BRCA1/2 хортой мутацийн зураглалыг хийсэн (Зураг 4). BRCA1 генийн хувьд PVs-ийн 50% нь хөхний хорт хавдрын кластерийн бүсэд (BCCR) байрлаж байсан бол мутацийн 22% нь өндгөвчний хорт хавдрын кластерийн бүсэд (OCCR) байршсан (Зураг. 4A7-ийн PVBR3-ийн хувилбар). BCCR бүсэд байрлах ба мутацийн 42.8% нь OCCR-д байршсан (Зураг 4B). Дараа нь бид BRCA1 ба BRCA2 уургийн домэйн доторх PV-ийн байршлыг үнэлэв. BRCA1 уургийн хувьд бид гогцоо болон ороомог ороомгийн домэйнд гурван PV, мөн BRCT PVA4, уургийн хувьд хоёр мутацийг BRCA1, BRCA2-ийн хувьд олсон. BRC давталтын домэйнд зурагдсан бол олиго/олигосахарид холбох (OB) болон цамхаг (T) домэйнд 3 интрон, 3 экзон өөрчлөлт илэрсэн (Зураг 4Б).
Зураг 4 BRCA1 ба BRCA2 уургуудын бүдүүвч дүрслэл ба эмгэг төрүүлэгч хувилбаруудын нутагшуулалт. Энэ зураг нь хөхний хорт хавдартай өвчтөнүүдийн эмгэг төрүүлэгч BRCA1 (A) ба BRCA2 (B) хувилбаруудын тархалтыг харуулж байна. Экзоник мутацуудыг цэнхэр өнгөөр, харин интрон хувилбаруудыг улбар шар өнгөөр ​​харуулсан. Барын өндөр нь тохиолдлын тоо болон мэдээлэгдсэн BRCA2-ын үйл ажиллагааны уураг. BRCA1 уураг нь давталтын домэйн (RING) ба цөмийн локалчлалын дараалал (NLS), ороомог-ороомог домэйн, SQ/TQ кластер домэйн (SCD) болон BRCA1 C-терминал домэйн (BRCT) агуулдаг.(B) BRCA2 уураг нь найман BRC давталт, ДНХ холбогч домэйн (H гурвалжин хэлбэртэй) агуулдаг. олигонуклеотид/олигосахарид холбогч (OB) атираа, цамхаг домэйн (T), C тал дахь NLS. Хөхний хорт хавдрын кластерийн бүс (BCCR) болон өндгөвчний хорт хавдрын кластерийн бүс (OCCR) гэж нэрлэгддэг хэсгүүдийг доор харуулав.* Зогсоох кодонуудыг тодорхойлдог мутацуудыг төлөөлдөг.
Дараа нь бид BRCA1/2 PV байгаатай холбоотой байж болох МЭӨ-ийн клиникопатологийн шинж чанарыг судалсан. BRCA1/2 сөрөг 181 өвчтөнд (нөөх тээгч бус) болон бүх тээгч (n = 35) эмнэлзүйн бүрэн бүртгэлийг авах боломжтой байсан. Хавдрын тархалтын түвшин болон зэрэглэл хоорондын хамаарал байсан.
Бид Ki-67-ийн тархалтыг манай бүлгийн дундаж (25%, хүрээ <10-90%) дээр үндэслэн тооцсон. Ki-67 < 25% -тай хүмүүсийг "бага Ki-67" гэж тодорхойлсон бол ≥ 25% утгатай хүмүүсийг "өндөр Ki-67" гэж тодорхойлсон. BRCA1 PV зөөгч (Зураг 5А).
Зураг 5 BRCA1 ба BRCA2 PVs-тэй болон үүсээгүй хөхний хорт хавдартай эмэгтэйчүүдийн зэрэглэлийн тархалттай Ki-67-ийн хамаарал.(A) BC-ийн тээгч бус 181 өвчтөнд BRCA1 (18) эсвэл BRCA2 (17) PV өвчтнүүдийн дундаж Ki-67 утгыг харуулсан хайрцагны график. Түүний 0.5 граммаас доош оноог (В) статистик ач холбогдолтой гэж үзсэн. МЭӨ хорт хавдартай өвчтөнүүдийг BRCA1 ба BRCA2 мутацийн төлөвийн дагуу гистологийн зэрэглэлд (G2 ба G3) хуваана (WT субъектууд, BRCA1 ба BRCA2 PVs тээвэрлэгчид).
Үүний нэгэн адил бид хавдрын зэрэг нь BRCA1/2 PV-тэй хамааралтай эсэхийг шалгасан. Манай популяцид G1 BC байхгүй байсан тул бид өвчтөнүүдийг хоёр бүлэгт (G2 эсвэл G3) хуваасан. Ki-67-ийн үр дүнтэй нийцүүлэн шинжилгээгээр хавдрын зэрэг болон BRCA1-ийн өндөр мутацитай GBR1-ийн мутацитай статистикийн ач холбогдолтой хамаарал илэрсэн. тээвэрлэгч бус хүмүүстэй харьцуулахад (p<0.005) (Зураг 5B).
ДНХ-ийн дараалал тогтоох технологийн дэвшил нь BRCA1/2 генетикийн шинжилгээнд урьд өмнө байгаагүй ахиц дэвшлийг бий болгосон бөгөөд энэ нь гэр бүлийн хорт хавдартай өвчтөнүүдэд чухал ач холбогдолтой юм. Өнөөдрийг хүртэл BRCA1/2-ийн 20,000 орчим хувилбарыг Америкийн Анагаах Ухааны Генетикийн Нийгэмлэг 35 болон EN5CA3BR системийн дагуу ангилж, ангилсан байна. Мутацийн спектр нь газарзүйн бүс нутгуудад ихээхэн харилцан адилгүй байдаг.37 Италид BRCA1/2 PV-ийн хувь хэмжээ 8%-37% хооронд хэлбэлзэж, улс хоорондын өргөн хэлбэлзлийг харуулсан.38,39 Бараг 5 сая хүн амтай Сицили нь оршин суугчдын тоогоор Итали дахь тав дахь том бүс нутаг юм. арлын зүүн хэсэгт өргөн хүрээтэй нотлох баримт байхгүй.
Бидний судалгаа бол Сицилийн зүүн хэсгийн BC-тэй өвчтөнүүдэд BRCA1/2 PV-ийн тохиолдлын талаархи анхны тайлангийн нэг юм.28 Энэ нь манай бүлэгт хамгийн түгээмэл тохиолддог өвчин тул бид шинжилгээндээ BC-д анхаарлаа хандуулсан.
МЭӨ 389 өвчтөнийг туршихад 9% нь BRCA1/2 PVs тээж, BRCA1 болон BRCA2 хооронд жигд тархсан байна. Эдгээр үр дүн нь Италийн популяцид өмнө нь мэдээлэгдсэнтэй нийцэж байна.28 Сонирхолтой нь манай бүлгийн 3% (13/389) нь эрэгтэй байсан. Энэ үзүүлэлт нь эрэгтэйчүүдийн хөхний хорт хавдраас хамаарч (14%) өндөр байна. BRCA1/2 мутацийн эрсдэлтэй. Гэсэн хэдий ч эдгээр эрчүүдийн хэн нь ч BRCA1/2 PV-ийг хөгжүүлээгүй тул PALB2, RAD51C, D зэрэг ховор тохиолддог мутаци байгаа эсэхийг үгүйсгэхийн тулд цаашдын молекулын шинжилгээнд нэр дэвшигчид байсан. Тодорхой бус ач холбогдолтой хувилбаруудыг BRCA2-ын өмнөх үр дүн илэрсэн өвчтөнүүдийн 7%-д нь олж авсан. нотлох баримт.28,41,42
Бид BRCA1/2 мутант эмэгтэйчүүдийн BC молекулын дэд хэвшинжийн тархалтад дүн шинжилгээ хийхдээ TNBC ба BRCA1 PV (58.8%) болон гэрлийн B BC болон BRCA2 PV (55.6%) хооронд мэдэгдэж буй холбоог баталгаажуулсан.16,43 Гэрэлтэгч A ба HER2+ хавдар нь BRCA1, PVCA1-д байдаг. өгөгдөл.16,43
Дараа нь бид BRCA1/2 PV-ийн төрөл, байршилд анхаарлаа хандуулдаг. Манай бүлэгт хамгийн түгээмэл BRCA1 PV нь c.5035_5039delCTAAT байсан. Хэдийгээр Incorvaia et al. Сицилийн бүлэгт энэ хувилбарыг тайлбарлаагүй, бусад зохиогчид үүнийг үр хөврөлийн BRCA1 PV гэж мэдээлсэн.34 Манай бүлэгт хэд хэдэн BRCA1 PV олдсон - жишээлбэл c.181T>G, c.514del, c.3253dupA ба c.5266dupC - эдгээрээс SBR28-аас хоёр мутаци илэрсэн. (c.181T>G ба c.5266dupC) нь ихэвчлэн Зүүн ба Төв Европын Ашкенази еврейчүүд (Польш, Чех), Словен, Австри, Унгар, Беларусь, Герман), 44,45 байдаг ба АНУ, Аргентинд саяхан "давтагдах үр хөврөлийн хувилбар" гэж тодорхойлсон ба Итали улсад BC43 OC-ийн хувилбар байсан. Өмнө нь Сицилийн хойд хэсгийн Палермо, Мессина дахь хөхний хорт хавдартай 8 өвчтөнд илэрсэн. Сонирхолтой нь, Incorvaia et al. Катани дахь зарим гэр бүлд c.3253dupA хувилбарыг олсон.28 Хамгийн их төлөөлөлтэй BRCA2 PV-ууд нь c.428dup, c.5851_5854delAGTT ба интрон хувилбар c.8487+1G>A бөгөөд эдгээрийг Палермогийн c.42848dup, c.42848dup-тэй өвчтөнд 28 илүү дэлгэрэнгүй мэдээлсэн байна. Баруун хойд Сицилийн өрхүүдэд, голчлон Трапани болон Палермо мужуудад ажиглагдсан бол c.5851_5854delAGTT PV баруун хойд Сицилийн өрхүүдэд ажиглагдсан. 8487+1G>A хувилбар нь Мессина, Палермо, Кальтаниссетбек нараас илүү түгээмэл байсан28. Колумбын c.5851_5854delAGTT өөрчлөлтийг өмнө нь тайлбарласан.37 Өөр нэг BRCA2 PV, c.631+1G>A нь Сицилийн (Агриженто, Сиракуса, Рагуса) BC болон OC-тэй өвчтөнүүдэд илэрсэн.28 Бид BRCA2 ба BRCA2 c>A1 хувилбаруудын зэрэгцэн оршиж байгааг анзаарсан. c.7008-2A>T) ижил өвчтөнд cis горимд тусгаарлагдсан гэж бид өмнө нь мэдээлсэн.34,46 Эдгээр BRCA2 uble мутаци нь үнэхээр Италийн бүс нутагт байнга ажиглагддаг бөгөөд дутуу зогсоох кодонуудыг нэвтрүүлж, элч РНХ-ийн залгалтад нөлөөлж, BRCA2, BR847, уураг задрахад хүргэдэг нь тогтоогдсон.
Бид мөн уургийн домэйн болон генийн OCCR ба BCCR бүсүүдэд BRCA1 ба BRCA2 PV-ийн зураглалыг хийсэн. Эдгээр мужуудыг Реббек нар тодорхойлсон. өндгөвч болон хөхний хорт хавдар үүсэх эрсдэлт бүс нутаг гэж тус тус тооцдог.49 Гэсэн хэдий ч үр хөврөлийн хувилбаруудын байршил болон хөхний эсвэл өндгөвчний хорт хавдрын эрсдэлийн хоорондын хамаарлын талаарх нотолгоо маргаантай хэвээр байна.28,50-52 Манай хүн амын дунд BRCA1 PVs BCCR бүсэд голчлон байрлаж байсан бол бид BRCA2-ийн өмнөх PVH-ийн бүс нутагт байрлаж байсан. таамагласан OCCR болон BCCR мужууд болон BC-ийн онцлогуудын хооронд ямар нэгэн хамаарлыг олж чадаагүй байна. Энэ нь BRCA1/2 мутацитай өвчтөнүүдийн хязгаарлагдмал тоотой холбоотой байж болох юм. Уургийн хүрээний үүднээс авч үзвэл, BRCA1 PV-ууд бүхэлдээ уургийн дагуу тархаж, BRCA2-ын өөрчлөлтүүд нь BRC давталтын домэйнд илүү ажиглагддаг.
Эцэст нь бид МЭӨ клиникопатологийн шинж чанарыг BRCA1/2 PV-тэй харьцуулсан. Хязгаарлагдмал тооны өвчтөнүүдийн улмаас бид зөвхөн Ki-67 болон хавдрын зэрэг хооронд мэдэгдэхүйц хамаарал байгааг олж мэдсэн. Хэдийгээр Ки-67-ийн үнэлгээ, тайлбар нь бага зэрэг маргаантай хэвээр байгаа ч өндөр пролифератив түвшин нь өвчний дахин давтагдах эрсдэлийг нэмэгдүүлж, дахин давтагдах хугацааг багасгахтай холбоотой байх нь гарцаагүй. "Өндөр" ба "бага" Ki-67-г ялгах нь 20% байна. Гэсэн хэдий ч энэ босго нь манай BRCA1/2 мутацитай өвчтөний популяцид хамаарахгүй бөгөөд энэ нь Ki-67-ийн дундаж утга нь 25% байна. Ки-67-ийн түвшин өндөр байгаа энэ хандлагыг манай гэрлийн B, TNBCH-ийн аль нь ч байсан тархалттай холбон тайлбарлаж болно. Зарим нотлох баримтууд нь өндөр Ki-67 (25-30%) нь өвчтөнүүдийн прогнозын дагуу илүү сайн давхраатай болохыг харуулж байна.53,54 Бидний шинжилгээний үр дүнгээс үзэхэд мэдэгдэхүйц хамаарал нь гайхмаар зүйл биш юм. Ki-67-ийн өндөр түвшин болон BRCA1 PV-ийн хооронд тохиолддог. Үнэн хэрэгтээ BRCA1-тэй холбоотой TBC-ийн хавдрууд илүү илэрдэг. онцлог.16,17
Дүгнэж хэлэхэд, энэхүү судалгаа нь зүүн Сицилийн МЭӨ когорт дахь BRCA1/2-ийн мутацын байдлын талаарх тайланг гаргажээ. Ерөнхийдөө бидний олдворууд нь МЭӨ-ийн мутацийн тархалт болон клиникопатологийн шинж чанарын хувьд урьд өмнө байсан нотлох баримтуудтай нийцэж байна. BRCA1/2-мутантын BCgeno-ийн шинжилгээг өргөжүүлэхийн тулд BRCA1/2-мутантын BCgeno-ийг үнэлэх зэрэг томоохон популяцид илүү олон судалгаа хийсэн. BRCA1/2-аас ялгаатай, давтамж багатай PV-ууд байгаа нь. Энэ нь удамшлын мутацийн улмаас хорт хавдар тусах эрсдэл нэмэгдэж буй субъектуудын тоог тодорхойлж, зөв ​​удирдах боломжийг олгоно.
Судалгааны зорилгоор хавдрын дээжийг нэрээ нууцлан гаргахыг зөвшөөрсөн зөвшөөрөлд өвчтөнүүд гарын үсэг зурсан болохыг бид баталж байна. Бүх өвчтөнүүд Хельсинкийн тунхаглалын дагуу бичгээр мэдээлэл өгсөн зөвшөөрөлд гарын үсэг зурсан. AOU Policlinico “G.Rodolico – S.Marco” бодлогын дагуу энэ судалгааг ёс зүйн хяналтаас чөлөөлсөн. зөвшөөрөл. Өвчтөнүүд мөн өөрийн өгөгдлийг судалгааны зорилгоор ашиглахыг зөвшөөрнө.
Бид Ёс зүйн хорооны хүсэлтийн дагуу хөхний хорт хавдартай өвчтөнүүдийн тусламж үйлчилгээнд туслалцаа үзүүлсэн профессор Паоло Вигнерид баярлалаа.
Федерика Марторана Istituto Gentili, Eli Lilly, Novartis, Pfizer нарын нэр хүндийн талаар мэдээлж байна. Бусад зохиогчид энэ ажилд ашиг сонирхлын зөрчилгүй гэж мэдэгдээгүй.
1. Sung H, Ferlay J, Siegel RL, et al. Global Cancer Statistics 2020: GLOBOCAN нь дэлхийн 185 оронд 36 хорт хавдрын өвчлөл, нас баралтыг тооцоолжээ.CA Cancer J Clin.2021;71(3):209-249.ca362.doi: