Tá Javascript díchumasaithe i do bhrabhsálaí faoi láthair. Ní oibreoidh roinnt gnéithe den suíomh Gréasáin seo nuair a bhíonn Javascript díchumasaithe.
Cláraigh le do shonraí sonracha agus an druga sonrach a bhfuil suim agat ann agus déanfaimid an fhaisnéis a sholáthraíonn tú a mheaitseáil le hairteagail inár mbunachar sonraí fairsing agus seolfaimid cóip PDF chugat trí ríomhphost láithreach.
作者 Stella S, Vitale SR, Martorana F, Massimino M, Pavone G, Lanzafame K, Bianca S, Barone C, Gorgone C, Fichera M, Manzella L
Stefania Stella, 1,2 Silvia Rita Vitale, 1,2 Federica Martorana, 1,2 Michele Massimino, 1,2 Giuliana Pavone, 3 Katia Lanzafame, 3 Sebastiano Bianca, 4 Chiara Barone, 5 Cristina Gorgone, 6 Marco Fichera, 6, 7 Roinn an Leighis Manzella, Experimental Clinic, 6, 7 Livia, Experimental Clinic, 6, 7 Roinn an Leighis agus Experimental Catania, Catania, 95123, an Iodáil;2 Ionad um Oinceolaíocht agus Haemaiteolaíocht Turgnamhach, AOU Policlinico “G.Rodolico – San Marco”, Catania , 95123, an Iodáil; 3 Oinceolaíocht Leighis, AOU Policlinico “G. Rodolico – San Marco”, Catania, 95123, an Iodáil; 4 Géineolaíocht Leighis, ARNAS Garibaldi, Catania, 95123, an Iodáil; 5 Géineolaíocht an Leighis, ASP, Syracuse, 96100, an Iodáil; 6 Roinn na nEolaíochtaí Bithleighis agus Biteicneolaíochta, Ollscoil Catania, Géineolaíocht Leighis, Catania, an Iodáil, 95123; 7Institiúid Taighde Oasi-IRCCS, Troina, 94018, an Iodáil Cumarsáid: Stefania Stella, teileafón +39 095 378 1946, ríomhphost [email protected]; [email protected] Cuspóir: Sócháin geirmlíne i BRCA1 agus BRCA2 agus ailse chíche (BC) seanbhunaithe, ailse ubhagáin (OC) agus ailse eile a bhaineann le riosca ailse ar feadh an tsaoil. Tá tástáil don ghéin BRCA ríthábhachtach chun riosca aonair a mheas, chomh maith le modhanna coisctheacha a aimsiú in iompróirí sláintiúla agus cóireálacha a oiriúnú d'othair ailse. Athraíonn leitheadúlacht athruithe BRCA1 agus BRCA2 go forleathan ar fud réigiún geografach, agus cé go bhfuil sonraí ann maidir le hathróga pataigineacha BRCA i dteaghlaigh Shicileacha, tá easpa staidéar a dhíríonn go sonrach ar dhaonraí in oirthear na Sicile. Ba é aidhm ár staidéir imscrúdú a dhéanamh ar mhinicíocht agus dáileadh athruithe geirmlíne pataigineacha BRCA i gcohórt othar BC ó oirthear na Sicile agus a gcomhlachas le tréithe sonracha BC a mheas ag baint úsáide as seicheamhú an chéad ghlúin eile. Bhí baint ag láithreacht athruithe le grád meall agus innéacs iomadú. TORTHAÍ: Tríd is tríd, bhí athraitheach pataigineach BRCA ag 35 othar (9%), 17 (49%) i BRCA1 agus 18 (51%) i BRCA2. Tá athruithe BRCA1 coitianta in othair BC trí-dhiúltacha, ach tá sócháin BRCA2 níos coitianta in othair BC luminal. I gcomparáid le I gcás daoine nach n-iompróirí iad, bhí gráid meall agus innéacs iomadúcháin i bhfad níos airde ag ábhair a raibh malairtí BRCA1 acu. Conclúidí: Tugann ár dtorthaí forbhreathnú ar stádas sócháin BRCA in othair BC ó oirthear na Sicile agus dearbhaíonn siad ról anailíse NGS maidir le hothair a bhfuil BC oidhreachtúil orthu a aithint. Tríd is tríd, tá na sonraí seo comhsheasmhach le fianaise roimhe seo a thacaíonn le scagthástáil BRCA chun cosc ​​agus cóireáil chuí ailse in iompróirí sócháin a dhéanamh.
Is í ailse chíche (BC) an ailse is coitianta ar fud an domhain agus an ailse is marfaí i measc na mban.1 Rinneadh staidéar fairsing ar na gnéithe bitheolaíocha a chinneann prognóis agus iompar cliniciúil BC agus rinneadh soiléiriú páirteach orthu le himeacht ama. Déanta na fírinne, úsáidtear roinnt marcóirí ionaid faoi láthair chun BC a aicmiú i bhfochineálacha móilíneacha éagsúla. Is iad sin gabhdóir estrogen (ER) agus/nó progesterone (PgR), aimpliú gabhdóra fachtóra fáis eipideirmeach daonna 2 (HER2), innéacs iomadú Ki-67 agus grád meall (G).2 Aithin teaglaim na n-athróg seo na catagóirí BC seo a leanas: 1) B'ionann meall luminal, a léirigh léiriú ER agus/nó PgR, agus 75% de BCanna. Roinneadh na meall seo ina Luminal A, nuair a bhí Ki-67 faoi bhun 20% agus HER2 diúltach, agus Luminal B, nuair a bhí Ki-67 cothrom le nó os cionn 20% agus i láthair aimpliú HER2, beag beann ar innéacs iomadú; 2) Siadaí HER2+ atá ER agus PgR diúltach ach a thaispeánann aimpliú HER2. Is ionann an grúpa seo agus 10% de na siadaí cíche go léir; 3) Ailse chíche trí-dhiúltach (TNBC), nach léiríonn léiriú ER agus PgR ná aimpliú HER2, is ionann í agus thart ar 15% d'ailse chíche.2-4
I measc na bhfochineálacha BC seo, is ionann grád meall agus innéacs iomadúcháin agus bithmharcóirí tras-rannacha a bhfuil baint dhíreach agus neamhspleách acu le hionsaitheacht agus prognóis an meall.5,6
Chomh maith leis na gnéithe bitheolaíocha thuasluaite, tá ról na n-athruithe géiniteacha oidhreachtúla a eascraíonn i bhforbairt BC ag éirí níos tábhachtaí le blianta beaga anuas.7 Faigheann thart ar 1 as gach 10 meall cíche oidhreacht mar gheall ar athruithe ar an líne gheirmeach i ngéinte sonracha.8 D'aithin dhá staidéar eipidéimeolaíocha móra a raibh níos mó ná 180,000 bean páirteach iontu grúpa d'ocht ngéin (i.e., ATM, BARD1, BRCA1, BRCA2, CHK2, PALB2, RAD51C, agus RAD51D) le déanaí atá freagrach go príomha as BC oidhreachtúil. I measc na ngéinte seo, léirigh BRCA1 agus BRCA2 (dá ngairtear BRCA1/2 anseo feasta) an comhghaol is láidre le forbairt meall cíche.9-12 Go deimhin, méadaíonn sócháin BRCA1/2 sa líne gheirmeach an riosca saoil a bhaineann le BC chomh maith le mailíseachtaí eile, lena n-áirítear ubhagán, próstatach, pancreatic, coloiniceach, agus meileanóma go suntasach. Ó 13 bliana d'aois go 80 bliain d'aois, is é 72% minicíocht charnach BC i measc na mban a bhfuil malairt pataigineach BRCA1 (PV) acu agus 69% i measc na mban a bhfuil BRCA2 acu. PV.14
Is suntasach go dtugann foilseachán le déanaí le fios go mbraitheann riosca BC ar an gcineál PV atá i gceist. Déanta na fírinne, i gcomparáid le hathróga gearrthacha pataigineacha, tá baint ag hathróga soiléire míchiall, go háirithe sa ghéin BRCA1, le riosca laghdaithe BC, go háirithe i measc na mban níos sine.15
Bhí baint ag láithreacht BRCA1 nó BRCA2 PV le gnéithe bitheolaíocha agus clinice-phaiteolaíocha éagsúla.16,17 Is gnách go mbíonn BCanna a bhaineann le BRCA1 ionsaitheach go cliniciúil, difreáilte go dona, agus an-iomadúil. De ghnáth bíonn na siadaí seo trí dhiúltach agus bíonn aois óg acu ag tosú. De ghnáth, taispeánann siadaí a tharlaíonn in othair a bhfuil sóchán BRCA2 orthu gráid mheasartha go dea-dhifreáilte agus innéacsanna iomadúla athraitheacha. Tá na siadaí seo níos coitianta i lumen B agus is gnách go dtarlaíonn siad i measc daoine fásta níos sine.16-18 Is suntasach go méadaíonn sócháin i BRCA1 agus BRCA2 íogaireacht do chóireálacha sonracha, lena n-áirítear salainn platanam agus drugaí spriocdhírithe amhail coscairí polaiméaráise polai(ADP-ribose) (PARPi).19,20
Le blianta beaga anuas, tá cur i bhfeidhm seicheamhú an chéad ghlúin eile (NGS) sa chleachtas cliniciúil tar éis cur ar chumas líon méadaitheach othar BC tástáil mhóilíneach a dhéanamh le haghaidh siondróim so-ghabhálachta ailse, lena n-áirítear BRCA1/2.21 Ag an am céanna, tá sainmhínithe bunaithe ar chritéir bheachta maidir le stair theaghlaigh, tréithe déimeagrafacha agus clinice-phaiteolaíocha chun daoine aonair atá fiúntach tástáil BRCA1/2 a aithint níos fearr.22,23 Sa chomhthéacs seo, tá fianaise ag carnadh ar scagthástáil BRCA1/2 i ndaonraí sonracha, ag béim ar dhifríochtaí trasna réigiún geografach.24–27 Cé go bhfuil tuarascálacha ar an gcohórt BC in iarthar na Sicile, tá níos lú sonraí ar fáil ar scagthástáil BRCA1/2 i ndaonra oirthear na Sicile.28,29
Déanaimid cur síos anseo ar thorthaí scagthástála BRCA1/2 ar líne gheirmeach in othair BC ó oirthear na Sicile, ag déanamh nasc breise idir láithreacht sócháin BRCA1 nó BRCA2 agus príomhghnéithe clinice-phaiteolaíocha na meall seo.
Rinneadh staidéar cúlghabhálach ag an “Ionad um Oncolaíocht agus Haemaiteolaíocht Thurgnamhach” in Ospidéal Policlinico.Rodolico – San Marco i Catania.Ó Eanáir 2017 go Márta 2021, atreoraíodh 455 othar san iomlán a raibh ailse chíche agus ubhagánach, meileanoma, paincréasach nó próstatach orthu chuig ár saotharlann diagnóiseach mhóilíneach le haghaidh tástála géiniteach BRCA/2.Rinneadh an staidéar seo de réir Dhearbhú Heilsincí, agus thug na rannpháirtithe go léir toiliú feasach i scríbhinn roimh an anailís mhóilíneach.
Rinneadh measúnú ar thréithe histolaíocha agus bitheolaíocha (ER, PgR, stádas HER2, Ki-67, agus grád) de BC ar shamplaí bithóipse croí nó máinliachta, agus comhpháirteanna ionsaitheacha meall amháin á gcur san áireamh. Bunaithe ar na tréithe seo, aicmíodh BCanna mar seo a leanas: luminal A (ER+ agus/nó PgR+, HER2-, Ki-67<20%), luminal B (ER+ agus/nó PgR+, HER2-, Ki-67≥20%), luminal B-HER2+ (ER agus/nó PgR+, HER2+), HER2+ (ER agus PgR-, HER2+) nó triple diúltach (ER agus PgR-, HER2-).
Sula ndearnadh measúnú ar stádas sócháin BRCA1 agus BRCA2, rinne foireann ildisciplíneach, lena n-áirítear oncolaí, géineolaí, agus síceolaí, comhairliúchán géineolaíochta meall do gach othar chun láithreacht BRCA1 agus/nó BRCA1 a chinneadh, nó do dhaoine aonair a bhfuil ardriosca PV acu sa ghéin BRCA2. Rinneadh roghnú othar de réir threoirlínte Chumann Oncolaíochta Leighis na hIodáile (AIOM) agus moltaí áitiúla na Sicile.30,31 Áirítear leis na critéir seo: (i) stair teaghlaigh d'athróga pataigineacha aitheanta i ngéinte so-ghabhálachta (m.sh., BRCA1, BRCA2, TP53, PTEN); (ii) fireannaigh le breac-chnoc (BC); (iii) iad siúd le breac-chnoc agus OC; (iv) mná le breac-chnoc <36 bliana, TNBC <60 bliana, nó breac-chnoc déthaobhach <50 bliana; (v) stair leighis phearsanta de breac-chnoc <50 bliana agus gaol céadchéime amháin ar a laghad: (a) breac-chnoc < 50 bliana; (b) OC neamh-mhúcasach agus neamh-teorann d'aon aois; (c) breac-chnoc déthaobhach; (d) breac-chnoc fireann; (e) ailse paincréasach; (f) ailse próstatach; (vi) dhá cheann nó níos mó Stair phearsanta ailse paincréasach > 50 bliain agus stair theaghlaigh ailse paincréasach, ailse paincréasach (OC), nó ailse paincréasach i gcás gaolta ar gaolta céadchéime iad dá chéile (lena n-áirítear gaolta ar gaolta céadchéime iad); (vii) Stair phearsanta ailse paincréasach agus gaol céadchéime amháin ar a laghad: (a) ailse paincréasach <50 bliain; (b) ailse gan OC; (c) ailse paincréasach déthaobhach; (d) ailse paincréasach fireann; (vii) baineann le OC serónach ardghráid.
Fuarthas sampla fola imeallach 20 mL ó gach othar agus bailíodh é i bhfeadáin EDTA (BD Biosciences). Aonraíodh DNA geanómach ó shamplaí fola iomláin 0.7 mL ag baint úsáide as an QIAsymphony DSP DNA Midi Isolation Kit (QIAGEN, Hilden, an Iodáil) de réir threoracha an mhonaróra agus cuireadh trí Fluairiméadar Qubit® 3.0 (Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA, SAM) é. Déan cainníochtú. Déantar saibhriú sprice agus ullmhú leabharlainne ag an Oncomine™ BRCA Research Assay Chef, réidh le luchtú isteach sa Ion AmpliSeq™ Chef Reagents DL8 Kit le haghaidh ullmhú leabharlainne uathoibrithe de réir threoracha an mhonaróra. Tá dhá linn ilphléacsach primer PCR sa trealamh ar féidir iad a úsáid chun gach géinte BRCA1 (NM_007300.3) agus BRCA2 (NM_000059.3) a staidéar. Go hachomair, cuireadh 15 µL de gach sampla DNA caolaithe (10 ng) le plátaí barrachódaithe le haghaidh ullmhú leabharlainne agus luchtaíodh na himoibrithe agus na tomhaltáin go léir ar an ionstraim Ion Chef™. Ansin rinneadh ullmhú leabharlainne uathoibrithe agus comhthiomsú leabharlainne samplach barrachódaithe ar an ionstraim Ion Chef™. Ansin rinneadh measúnú ar líon na leabharlann ullmhaithe le Qubit® 3.0 Fluaraiméadar (Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA, SAM) de réir threoracha an mhonaróra. Ar deireadh, cuirtear leabharlanna le chéile i gcóimheasa coibhéiseacha mólaracha i bhfeadáin shampla leabharlainne Ion Chef™ (barachódaithe). feadáin) agus luchtaithe ar an ionstraim Ion Chef™. Rinneadh an seicheamhú ag baint úsáide as ionstraim Ion Torrent S5 (Thermo Fisher Scientific) (Thermo Fisher Scientific) ag baint úsáide as sliseanna Ion 510 (Thermo Fisher Scientific). Rinneadh anailís sonraí le Amplicon Suite (SmartSeq srl) agus Ion Reporter Software.
Lean gach ainmníocht athraitheach treoirlínte reatha Chomhdháil Éagsúlachta an Ghéanóim Dhaonna, atá ar fáil ar líne (HGVS, http://www.hgvs.org/mutnomen). Sainmhíníodh tábhacht chliniciúil athraitheacha BRCA1/2 trí úsáid a bhaint as aicmiú Chomhdháil Idirnáisiúnta ENIGMA (Líonra Bunaithe ar Fhianaise chun Ailéilí Só-ghineacha Geirmeacha a Léirmhíniú, https://enigmaconsortium.org/) agus trí bhunachair shonraí éagsúla ar nós ARUP, BRCAEXCHANGE, ClinVar, IARC_LOVD, agus UMD. Cuimsíonn an t-aicmiú cúig chatagóir riosca ar leith: neamhurchóideach (catagóir I), dócha neamhurchóideach (catagóir II), athraitheach de shuntasacht neamhchinnte (VUS, catagóir III), dócha pataigineach (catagóir IV), agus pataigineach (catagóir V). Rinne VarSome anailís freisin ar éifeacht sócháin ar struchtúr agus feidhm próitéine, uirlis faisnéiseach le rochtain ar 30 bunachar sonraí.32
Chun suntasacht chliniciúil fhéideartha a shannadh do gach VUS, úsáideadh na halgartaim réamhaisnéise próitéine ríomhaireachtúla seo a leanas: MUTATION TASTER, 33 PROVEAN-SIFT (http://provean.jcvi.org/index.php), POLYPHEN-2 (http:///genetics.bwh.harvard.edu/pph2/) agus Align-GVGD (http://agvgd.hci.utah.edu/agvgd_input.php). Measadh gur cineál fiáin iad na hathróga a aicmíodh mar rang 1 agus 2.
Dheimhnigh seicheamhú Sanger láithreacht gach athraitheach pataigineach. Go hachomair, dearadh péire tosaitheoirí sonracha do gach athraitheach a braitheadh ​​trí úsáid a bhaint as na seichimh tagartha géine BRCA1 agus BRCA2 (NG_005905.2, NM_007294.3 agus NG_012772.3, NM_000059.3, faoi seach). Dá bhrí sin, rinneadh PCR spriocdhírithe agus seicheamhú Sanger ina dhiaidh sin.
Rinneadh tástáil ar othair a raibh tástáil dhiúltach acu don ghéin BRCA1/2 trí aimpliú tóireadóir ilphléacsach atá ag brath ar ligation (MLPA) de réir threoracha an mhonaróra chun measúnú a dhéanamh ar láithreacht athchóirithe móra geanómacha (LGR). Go hachomair, déantar samplaí DNA a dhínádúrú agus úsáidtear suas le 60 tóireadóir géin-shonrach BRCA1 agus BRCA2, agus gach ceann acu ag brath seicheamh DNA sonrach atá thart ar 60 núicléatíd ar fhad. Ansin rinneadh anailís ar tháirgí aimpliúcháin tóireadóir, arb éard atá iontu sraith uathúil aimplicón PCR, trí leictreafóiréis ribeach agus trí bhogearraí Cofalyser.Net i gcomhar leis na táblaí Cofalyser baisce-shonracha cuí (www.mrcholland.com).
Bhí athróga clinice-phaiteolaíocha roghnaithe (grád histeolaíoch agus innéacs iomadú Ki-67%) bainteach le láithreacht PV BRCA1/2, arna ríomh ag baint úsáide as bogearraí Prism v. 8.4 ag baint úsáide as tástáil chruinn Fisher ag glacadh leis go raibh luach p <0.05 suntasach.
Idir Eanáir 2017 agus Márta 2021, rinneadh scagthástáil ar 455 othar le haghaidh sócháin BRCA1/2 sa líne gheirme. Rinneadh tástáil sócháin ag Ionad Oncolaíochta agus Haemaiteolaíochta Turgnamhaí Ospidéal Policlinico. De réir threoirlíne na Sicile (http://www.gurs.regione.sicilia.it/Indicep1.htm, N. 02-Venerdì 10 Gennaio 2020), i Rodolico de Catania – San Marco, bhí 389 othar san iomlán. Bhí ailse chíche, 37 ailse ubhagáin, 16 ailse paincréasach, 8 ailse próstatach agus 5 meileanóma. Taispeántar dáileadh na n-othar de réir cineál ailse agus torthaí na hanailíse i bhFíor 1.
Taispeánann Fíor 1 cairt sreafa a thugann forbhreathnú ar an staidéar. Rinneadh tástáil ar othair a raibh siadaí cíche, meileanoma, pancreatic, próstatach nó ubhagánacha orthu le haghaidh sócháin sna géinte BRCA1 agus BRCA2.
Giorrúcháin: PVanna, athraitheach pataigineach; VUS, athraitheach de shuntasacht neamhchinnte; WT, seicheamh BRCA1/2 de chineál fiáin.
Dhírigh muid ár staidéir go roghnach ar chohóirt ailse chíche. Bhí meánaois 49 bliain ag na hothair (raon 23-89) agus ba mhná den chuid is mó iad (n=376, nó 97%).
As na hábhair seo, bhí sócháin BRCA1/2 ag 64 (17%) agus ba mhná iad uile. Bhí PV ag tríocha cúig (9%) agus bhí VUS ag 29 (7.5%). Tharla seacht ndéag (48.6%) de na 35 athraitheach pataigineach i BRCA1 agus 18 (51.4%) i BRCA2, agus tharla 5 VUS i BRCA1 (17.2%) agus 24 (82.8%) i BRCA2 (Fíor 1 agus 2). Ní ​​raibh LGR i láthair san anailís MLPA.
Fíor 2. Anailís ar mhútáin BRCA1 agus BRCA2 i 389 othar ailse chíche. (A) Dáileadh athróga pataigineacha (PV) (dearg), athróga de shuntasacht neamhchinnte (VUS) (oráiste), agus WT (gorm) i 389 othar ailse chíche; (B) 389 othar ailse chíche Bhí athróga pataigineacha (PVanna) BRCA1/2 ag tríocha cúigear (9%). Ina measc, bhí 17 (48.6%) ina n-iompróirí PV BRCA1 (dearg dorcha) agus 18 (51.4%) ina n-iompróirí BRCA2 (dearg éadrom); (C) Bhí VUS ag 29 (7.5%) de 389 ábhar, 5 (17.2%) géinte BRCA1 (oráiste dorcha) agus 24 (82.8%) géinte BRCA2 (oráiste éadrom).
Giorrúcháin: PVanna, athraitheach pataigineach; VUS, athraitheach de shuntasacht neamhchinnte; WT, seicheamh BRCA1/2 de chineál fiáin.
Ansin rinneamar imscrúdú ar leitheadúlacht fhochineálacha móilíneacha BC in othair a raibh BRCA1/2 PV orthu. Áiríodh sa dáileadh 2 (5.7%) othar le luminal A, 15 (42.9%) le luminal B, 3 (8.6%) le luminal B-HER2+, 2 (5.7%) le HER2+ agus 13 (37.1%) othar le TNBC. I measc na n-othar a raibh BRCA1 dearfach orthu, bhí BC luminal B ag 5 (29.4%), bhí galar HER2+ ag 2 (11.8%), agus bhí TNBC ag 10 (58.8%). Ba luminal A nó luminal B-HER2+ iad na siadaí gan sócháin BRCA1 (Fíor 3). Sa fhoghrúpa BRCA2-dearfach, ba luminal B iad 10 (55.6%) siadaí, ba luminal B-HER2+ iad 3 (16.7%), ba TNBC iad 3 (16.7%) agus ba luminal A iad 2 (11.1%) (Fíor 3).Ní raibh aon siadaí HER2+ i láthair sa ghrúpa seo.Dá bhrí sin, is coitianta sócháin BRCA1 in othair TNBC, ach is iad athruithe BRCA2 is mó a bhíonn i measc daoine le lumen B.
Fíor 3 Forleithne fhochineálacha ailse chíche in othair a bhfuil athróga pataigineacha acu i BRCA1 agus BRCA2. Histogramaí a thaispeánann dáileadh PVanna BRCA1- (dearg dorcha) agus BRCA2- (dearg éadrom) i measc fochineálacha móilíneacha othair ailse chíche. Léiríonn na huimhreacha a tuairiscíodh i ngach bosca céatadán na n-othar a bhfuil PV BRCA1 agus BRCA2 acu do gach fochineál ailse chíche.
Giorrúcháin: PVanna, athraitheach pataigineach; HER2+, gabhdóir fachtóra fáis eipideirmeach daonna 2 dearfach; TNBC, ailse chíche trí-dhiúltach.
Ina dhiaidh sin, rinneamar measúnú ar chineál agus ar shuíomh géine PVanna BRCA1 agus BRCA2. I PV BRCA1, thugamar faoi deara 7 malairt núicléatíde aonair (SNVanna), 6 scriosadh, 3 dhúbláil agus 1 iontráil. Ní léiríonn ach sóchán amháin (c.5522delG) fionnachtain nua. Ba é c.5035_5039delCTAAT an PV BRCA1 is coitianta a braitheadh ​​sa dá ábhar. Baineann an t-athrú seo le scriosadh cúig núicléatíde (CTAAT) in eiscón 15 BRCA1, rud a eascraíonn in ionad an aimínaigéid leucine le tyrosine ag códon 1679, agus mar gheall ar aistriú fráma aistriúcháin le códon stad malartach tuartha, bhí giorrachadh roimh am próitéine mar thoradh air. Ní bhraitear na hathruithe eile go léir ach i gcás amháin. Is suntasach go raibh ceann de na PVanna tuairiscithe suite i réigiún comhthola an tsuímh splice (c.4357+1G>T) (Tábla 1).
Maidir le BRCA2 PV, thugamar faoi deara 6 scriosadh, 6 SNV agus 2 dhúbailt. Níl aon cheann de na hathruithe a fuarthas úrnua. Tharla trí mhútacht arís inár ndaonra, c.428dup agus c.8487+1G>A a breathnaíodh i 3 ábhar, agus ina dhiaidh sin c.5851_5854delAGTT a aisghabhadh i ndá chás. Baineann an t-athrú c.428dup le hathrá C in eacsón 5 de BRCA2, a réamh-mheastar a chódálann próitéin ghiorraithe, neamhfheidhmiúil. Tarlaíonn an mhútacht c.8487+1G>A i réigiún intrónach intrón 19 BRCA2 (± 1,2) agus bíonn tionchar aige ar an seicheamh comhaontaithe splaisithe, rud a fhágann go mbíonn splaiseadh athraithe ann a fhágann próitéin neamhghnácha nó as láthair. Tá an t-athrú pataigineach c.5851_5854delAGTT mar gheall ar scriosadh 4-núicléatíde ó shuíomhanna núicléatíde 5851 go 5854 san eacsón códaithe 10 den ghéin BRCA2 agus bíonn sé mar thoradh air... aistriú fráma aistriúcháin le códón stad malartach tuartha (p.S1951WfsTer). Is suntasach, mar a tuairiscíodh roimhe seo, gur braitheadh ​​an dá athrú c.631G>A agus c.7008-2A>T san othar céanna.34 Baineann an chéad mhútacht le hathsholáthar adenosine (A) in eacsón 7 BRCA2 le núicléatíde ina bhfuil guanine (G) rud a eascraíonn i n-athrú vailín go isoleucine ag códón 211, is aimínaigéad é isoleucine a bhfuil airíonna an-chosúla aige. Bíonn tionchar ag an athrú seo ar splaiseadh mRNA gnáth. Tá an dara malairt suite i réigiún intrónach agus bíonn ionadú dúbailte A go tímín (T) mar thoradh air roimh eacsón 13 den ghéin a ionchódaíonn BRCA2. Féadfaidh an t-athrú c.7008-2A>T il-trascríbhinní de fhaid éagsúla a ghiniúint. Ina theannta sin, sa ghrúpa PVanna BRCA2, bhí 4 as 18 athrú (22.2%) intrónach.
Ansin rinneamar mapáil ar mhútais dhíobhálacha BRCA1/2 i bhfearann ​​​​fheidhmiúla agus i réigiúin cheangailteach próitéine (Fíor 4). Sa ghéin BRCA1, bhí 50% de na PVanna suite i réigiún braisle ailse chíche (BCCR), agus bhí 22% de na mútais suite i réigiún braisle ailse ubhagáin (OCCR) (Fíor 4A). I ​​BRCA2 PV, bhí 35.7% de na hathróga suite i réigiún BCCR agus bhí 42.8% de na mútais suite san OCCR (Fíor 4B). Ansin, rinneamar measúnú ar shuíomh PV laistigh de na fearainn próitéine BRCA1 agus BRCA2. Maidir leis an bpróitéin BRCA1, fuaireamar trí PV sna fearainn lúb agus coilithe, agus dhá mhútais i bhfearann ​​​​BRCT (Fíor 4A). Maidir leis an bpróitéin BRCA2, mapáladh 4 PV chuig an bhfearann ​​​​athrá BRC, agus braitheadh ​​​​3 athrú intronic agus 3 athrú exonic sna fearainn cheangailteach oligo/oligosacaride (OB) agus túr (T) (Fíor 4B).
Fíor 4 Léiriú sceimiteach ar phróitéiní BRCA1 agus BRCA2 agus suíomh na n-athróg pataigineach. Taispeánann an figiúr seo dáileadh na n-athróg pataigineach BRCA1 (A) agus BRCA2 (B) in othair ailse chíche. Taispeántar sócháin eisónacha i ngorm, agus taispeántar athróga intronacha i n-oráiste. Léiríonn airde an bharra líon na gcásanna. Tuairiscítear na próitéiní BRCA1 agus BRCA2 agus a bhfearann ​​​​fheidhmiúla. (A) Tá fearann ​​​​lúb (RING) agus seicheamh logánaithe núicléach (NLS), fearann ​​​​coiled-corn, fearann ​​​​braisle SQ / TQ (SCD), agus fearann ​​​​C-críochfoirt BRCA1 (BRCT) sa phróitéin BRCA1. (B) Tá ocht n-athrá BRC, fearann ​​​​ceangailteach DNA le fearann ​​​​héilicseach (Héilicseach), trí fhilleadh ceangailteach oligonucleotide / oligosaccharide (OB), fearann ​​​​túir (T), agus NLS ar an taobh C sa phróitéin BRCA2. Taispeántar limistéir ar a dtugtar Réigiún Braisle Ailse Chíche (BCCR) agus Réigiún Braisle Ailse Ubhagáin (OCCR) ag an mbun. *Léiríonn sé sócháin a chinneann stad cóidíní.
Ansin rinneamar imscrúdú ar ghnéithe clinice-phaiteolaíocha BC a d'fhéadfadh a bheith comhghaolmhar le láithreacht BRCA1/2 PV. Bhí taifid chliniciúla iomlána ar fáil do 181 othar BRCA1/2-dhiúltach (neamh-iompróirí) agus do na hiompróirí uile (n = 35). Bhí comhghaol idir ráta iomadú meall agus grád.
Rinneamar ríomh ar dháileadh Ki-67 bunaithe ar mheán ár gcohórt (25%, raon <10-90%). Sainmhíníodh ábhair le Ki-67 < 25% mar “Ki-67 íseal”, agus measadh gur “Ki-67 ard” a bhí in aonáin le luachanna ≥ 25%. Fuarthas difríochtaí suntasacha Ki-67 (p<0.01) idir neamh-iompróirí agus iompróirí BRCA1 PV (Fíor 5A).
Fíor 5 Comhghaol Ki-67 le dáileadh gráid i measc na mban ailse chíche le agus gan PVanna BRCA1 agus BRCA2. (A) Boscaplota a thaispeánann meánluachanna Ki-67 i 181 othar BC neamh-iompróra i gcomparáid le hothair PV BRCA1 (18) nó BRCA2 (17). Measadh go raibh luachanna P faoi bhun 0.5 suntasach go staitistiúil. (B) Histogram a léiríonn sannadh othair ailse BC i ngrúpaí gráid histolaíochta (G2 agus G3) de réir stádas sóchán BRCA1 agus BRCA2 (ábhair WT, iompróirí PVanna BRCA1 agus BRCA2).
Mar an gcéanna, rinneamar scrúdú ar cé acu an raibh gaol idir grád an meall agus láithreacht BRCA1/2 PV. Ós rud é nach raibh G1 BC inár ndaonra, roinneamar na hothair ina dhá ghrúpa (G2 nó G3). Ag teacht leis na torthaí Ki-67, léirigh an anailís comhghaol suntasach ó thaobh staitisticí de idir grád an meall agus sóchán BRCA1, le cion níos airde de mheall G3 in iompróirí BRCA1 i gcomparáid le neamh-iompróirí (p<0.005) (Fíor 5B).
A bhuí le dul chun cinn i dteicneolaíocht seicheamhú DNA, tá dul chun cinn gan fasach déanta i dtástáil ghéiniteach BRCA1/2, agus tá impleachtaí ríthábhachtacha aige seo d’othair a bhfuil stair ailse sa teaghlach acu. Go dtí seo, tá thart ar 20,000 athraitheach BRCA1/2 aitheanta agus aicmithe de réir Chumann Meiriceánach na Géineolaíochta Leighis 35 agus chóras ENIGMA. 35,36 Is eol go maith go n-athraíonn speictream sóchán BRCA1/2 go forleathan ar fud réigiún geografach. 37 Laistigh den Iodáil, bhí ráta PVanna BRCA1/2 idir 8% agus 37%, rud a léiríonn athraitheacht leathan laistigh den tír. 38,39 Le daonra de bheagnach 5 mhilliún, is í an tSicil an cúigiú réigiún is mó san Iodáil i dtéarmaí líon na n-áitritheoirí. Cé go bhfuil sonraí ann maidir le dáileadh BRCA1/2 in iarthar na Sicile, níl aon fhianaise fhairsing ann in oirthear an oileáin.
Tá ár staidéar ar cheann de na chéad tuarascálacha ar mhinicíocht BRCA1/2 PV in othair BC in oirthear na Sicile.28 Dhírigh muid ár n-anailís ar BC, toisc gurb é seo an galar is coitianta inár gcohórt gan dabht.
Agus 389 othar ailse chíche á dtástáil, bhí PVanna BRCA1/2 ag 9% díobh, dáilte go cothrom idir BRCA1 agus BRCA2. Tá na torthaí seo comhsheasmhach leis na torthaí a tuairiscíodh roimhe seo i measc dhaonra na hIodáile.28 Is suimiúil gur fhir a bhí i 3% (13/389) dár gcohórt. Tá an ráta seo níos airde ná mar a bhíothas ag súil leis i gcás ailse chíche fireann (1% de na BCanna uile),40 rud a léiríonn ár rogha daonraí bunaithe ar riosca sócháin BRCA1/2. Mar sin féin, níor fhorbair aon cheann de na fir seo PV BRCA1/2, mar sin bhí siad ina n-iarrthóirí le haghaidh tuilleadh anailíse móilíneach chun láithreacht sócháin níos neamhchoitianta amhail PALB2, RAD51C agus D, i measc nithe eile, a chur as an áireamh. Aisghabhadh athróga de shuntasacht neamhchinnte i 7% de na hábhair ina raibh VUS BRCA2 soiléir. Tá an toradh seo féin comhsheasmhach le fianaise atá ann cheana féin.28,41,42
Nuair a rinneamar anailís ar dháileadh fochineálacha móilíneacha BC i measc na mban le sóchán BRCA1/2, dheimhnigh muid naisc aitheanta idir TNBC agus BRCA1 PV (58.8%) agus idir BC luminal B agus BRCA2 PV (55.6%).16,43 Tá na siadaí luminal A agus HER2+ in iompróirí BRCA1 agus BRCA2 PV comhsheasmhach le sonraí litríochta atá ann cheana féin.16,43
Dírímid ansin ar chineál agus suíomh an PV BRCA1/2. Inár gcomhort, ba é c.5035_5039delCTAAT an PV BRCA1 is coitianta. Cé gur aithin Incorvaia et al. Níor chuir údair eile síos ar an athraitheach seo ina gcohórt Sicileach, thuairiscigh údair eile é mar BRCA1 PV geirmlíne.34 Fuarthas roinnt PVanna BRCA1 inár gcohórt – m.sh. c.181T>G, c.514del, c.3253dupA agus c.5266dupC – a breathnaíodh sa tSicil.28 Díobh seo, is coitianta dhá mhútacht bunaitheora BRCA1 (c.181T>G agus c.5266dupC) i nGiúdaigh Ashkenazi in Oirthear agus Lár na hEorpa (an Pholainn, an tSeicis), an tSlóivéinis, na hOstaire, na hUngáire, na Bealarúise agus na Gearmáine), 44,45 agus, sna Stáit Aontaithe agus san Airgintín, sainmhíníodh é le déanaí mar “athraitheach geirmlíne athfhillteach” in othair Iodálacha le BC agus OC. Aithníodh an athraitheach 34c.514del roimhe seo in 8 n-othar ailse chíche ó thuaisceart na Sicile i Palermo agus Messina. Is suimiúil é, fiú Incorvaia et al. fuarthas an athraitheach c.3253dupA i roinnt teaghlach i gCatania.28 Is iad na PVanna BRCA2 is ionadaíche ná c.428dup, c.5851_5854delAGTT agus an athraitheach intronic c.8487+1G>A, a tuairiscíodh níos mine 28 in othar i bPalermo le c.428dup, c.5851_5854delAGTT Breathnaíodh PV i dteaghlaigh in iarthuaisceart na Sicile, go príomha i réigiúin Trapani agus Palermo, ach breathnaíodh PV c.5851_5854delAGTT i dteaghlaigh in iarthuaisceart na Sicile. Bhí an athraitheach 8487+1G>A níos coitianta i measc daoine ó Messina, Palermo, agus Caltanissetta.28 Rebbeck et al. rinneadh cur síos roimhe seo ar an athrú c.5851_5854delAGTT sa Cholóim.37 Fuarthas BRCA2 PV eile, c.631+1G>A, in othair BC agus OC ón tSicil (Agrigento, Siracusa agus Ragusa).28 Is suntasach gur thugamar faoi deara comhbhaint dhá athraitheach BRCA2 (BRCA2 c.631G>A agus c.7008-2A>T) san othar céanna, a ghlacamar leis a bheith scartha i mód cis, mar a tuairiscíodh roimhe seo ar an gcaoi sin.34,46 Breathnaítear go minic ar na sócháin dúbailte BRCA2 seo i réigiún na hIodáile agus fuarthas amach go dtugann siad isteach códóin stad roimh am, rud a théann i bhfeidhm ar splaiseadh RNA teachtaire agus a fhágann go dteipeann ar an bpróitéin BRCA2.47,48
Rinneamar mapáil freisin ar fhéinfhiaclóirí BRCA1 agus BRCA2 i réigiúin ionchasacha OCCR agus BCCR de fhearainn agus géinte próitéine. Rinne Rebbeck et al. cur síos ar na réigiúin seo mar limistéir riosca chun ailse ubhagánach agus chíche a fhorbairt, faoi seach.49 Mar sin féin, tá an fhianaise maidir leis an nasc idir suíomh na n-athróga geirmlíne agus riosca ailse chíche nó ubhagánach fós conspóideach.28,50-52 Inár ndaonra, bhí féaclóirí BRCA1 suite den chuid is mó i réigiún BCCR, ach bhí féaclóirí BRCA2 suite den chuid is mó i réigiún OCCR. Mar sin féin, ní raibh muid in ann aon nasc a fháil idir réigiúin ionchasacha OCCR agus BCCR agus gnéithe BC. D’fhéadfadh sé seo a bheith mar gheall ar an líon teoranta othar a bhfuil sócháin BRCA1/2 acu. Ó pheirspictíocht fhearainn próitéine, tá féaclóirí BRCA1 dáilte feadh an phróitéine ar fad, agus is fearr athruithe BRCA2 a fháil i bhfearann ​​​​athrá BRC.
Ar deireadh, rinneamar comhghaol idir gnéithe clinice-phaiteolaíocha BC agus PV BRCA1/2. Mar gheall ar an líon teoranta othar a bhí san áireamh, ní bhfuaireamar ach comhghaol suntasach idir Ki-67 agus grád an meall. Cé go bhfuil measúnú agus léirmhíniú Ki-67 fós beagáinín conspóideach, is cinnte go bhfuil baint ag rátaí arda iomadúcháin le riosca méadaithe athfhillteach galair agus laghdú ar mharthanas. Go dtí seo, is é 20% an teorainn chun idirdhealú a dhéanamh idir Ki-67 “ard” agus “íseal”. Mar sin féin, ní bhaineann an tairseach seo lenár ndaonra othar sóchán BRCA1/2, a bhfuil meánluach Ki-67 de 25% aige. Is féidir an treocht seo i rátaí arda Ki-67 a mhíniú leis an leitheadúlacht inár gcohórt luminal B agus TNBC, agus ní raibh mórán meall luminal A i láthair. Mar sin féin, is cosúil go dtugann roinnt fianaise le fios go bhféadfadh teorainn Ki-67 níos airde (25–30%) othair a strátrú níos fearr de réir a bprognóis.53,54 Ó thorthaí ár n-anailíse, ní haon ionadh é comhghaol suntasach. Tarlaíonn idir Ki-67 ard agus gráid agus láithreacht BRCA1 PV. Déanta na fírinne, is gnách go mbíonn siadaí a bhaineann le BRCA1 tipiciúil de TNBC agus taispeánann siad gnéithe níos ionsaithí.16,17
Mar fhocal scoir, cuireann an staidéar seo tuarascáil ar fáil ar stádas sócháin BRCA1/2 i gcohórt BC ó oirthear na Sicile. Tríd is tríd, tá ár dtorthaí comhsheasmhach le fianaise atá ann cheana féin, i dtéarmaí leitheadúlacht sócháin agus gnéithe cliniciúla-phaiteolaíocha i BC araon. Tá gá le níos mó staidéar i ndaonraí níos mó d'othair BC le sócháin BRCA1/2, amhail úsáid a bhaint as anailís sócháin leathnaithe ilghéanóim, chun measúnú a dhéanamh ar láithreacht PVanna atá difriúil agus níos lú minice ná BRCA1/2. Cuirfidh sé seo ar chumas an líon méadaitheach ábhar atá i mbaol méadaithe ailse mar gheall ar shócháin ghéiniteacha a aithint agus a bhainistiú i gceart.
Dheimhnigh muid gur shínigh othair toiliú feasach chun a gcuid samplaí meall a scaoileadh go hanaithnid chun críocha taighde. Shínigh gach othar toiliú feasach i scríbhinn de réir Dhearbhú Heilsincí. De réir bheartas AOU Policlinico “G.Rodolico – S.Marco”, díolmhaíodh an staidéar seo ó athbhreithniú eiticiúil toisc gur rinneadh an anailís BRCA1/2 de réir cleachtais chliniciúil agus thug gach othar toiliú feasach i scríbhinn. Toilíonn othair freisin le húsáid a gcuid sonraí chun críocha taighde.
Gabhaimid buíochas leis an Ollamh Paolo Vigneri as a chúnamh i gcúram othar ailse chíche mar a d'iarr an Coiste Eitice.
Tuairiscíonn Federica Martorana onóracha ó Istituto Gentili, Eli Lilly, Novartis, Pfizer. Ní dhearbhaíonn na húdair eile aon choinbhleachtaí leasa sa saothar seo.
1. Sung H, Ferlay J, Siegel RL, et al. Staitisticí Ailse Domhanda 2020: Meastar i GLOBOCAN minicíocht agus básmhaireacht 36 ailse i 185 tír ar fud an domhain. CA Cancer J Clin. 2021;71(3):209-249.doi: 10.3322/caac.21660