Javascript jẹ alaabo lọwọlọwọ ninu ẹrọ aṣawakiri rẹ. Diẹ ninu awọn ẹya ti oju opo wẹẹbu yii kii yoo ṣiṣẹ nigbati JavaScript jẹ alaabo.
Forukọsilẹ pẹlu awọn alaye rẹ pato ati oogun iwulo pato ati pe a yoo baamu alaye ti o pese pẹlu awọn nkan ninu ibi ipamọ data nla wa ati fi imeeli ranṣẹ ni kiakia ni ẹda PDF kan.
作者 Stella S, Vitale SR, Martorana F, Massimino M, Pavone G, Lanzafame K, Bianca S, Barone C, Gorgone C, Fichera M, Manzella L
Stefania Stella, 1,2 Silvia Rita Vitale, 1,2 Federica Martorana, 1,2 Michele Massimino, 1,2 Giuliana Pavone, 3 Katia Lanzafame, 3 Sebastiano Bianca, 4 Chiara Barone, 5 Cristina Gorgone, 6 Marco Fichera, Ẹka Liviazella 1, Ẹka Liviazella 1 Oogun, University of Catania, Catania, 95123, Italy;2 Center fun Experimental Oncology ati Hematology, AOU Policlinico "G.Rodolico - San Marco", Catania, 95123, Italy; 3 Oncology Medical, AOU Policlinico "G. Rodolico - San Marco", Catania, 95123, Italy; 4 Medical Genetics, ARNAS Garibaldi, Catania, 95123, Italy; 5 Medicine Genetics, ASP, Syracuse, 96100, Italy; 6 Ẹka ti Imọ-iṣe Imọ-jinlẹ ati Imọ-ẹrọ, Ile-ẹkọ giga ti Catania, Awọn Jiini Iṣoogun, Catania, Italy, 95123; 7Oasi Research Institute-IRCCS, Troina, 94018, Italy Communications: Stefania Stella, tel +39 095 378 1946, imeeli [imeeli & # 160; [imeeli & # 160; Idaabobo imeeli] Idi: Awọn iyipada Germline ni BRCA1 ati BRCA2 ati mulẹ akàn igbaya (BC), ovary (OC) ati awọn miiran ti o ni nkan ṣe pẹlu ewu igbesi aye ti akàn. Idanwo fun jiini BRCA jẹ bọtini lati ṣe ayẹwo ewu ẹni kọọkan, bakannaa fun wiwa awọn ọna idena ni awọn olutọju ilera ati awọn itọju ti o niiṣe ni awọn alaisan ti o ni ilera. tẹlẹ lori awọn iyatọ pathogenic BRCA ni awọn idile Sicily, awọn ijinlẹ pataki ti o fojusi awọn olugbe ni ila-oorun Sicily ko ni alaini. Ero ti ikẹkọ wa ni lati ṣe iwadii iṣẹlẹ ati pinpin awọn iyipada germline pathogenic BRCA ni ẹgbẹ kan ti awọn alaisan BC lati ila-oorun Sicily ati lati ṣe iṣiro ajọṣepọ wọn pẹlu awọn ami-ara BC kan pato nipa lilo igbekalẹ igbekalẹ igbekalẹ ti o tẹle ati igbekalẹ isọdi igbekalẹ. index.RESULTS: Iwoye, awọn alaisan 35 (9%) ni iyatọ pathogenic BRCA, 17 (49%) ni BRCA1 ati 18 (51%) ni BRCA2.BRCA1 awọn iyipada ti o pọju ni awọn alaisan BC mẹta-negative, lakoko ti awọn iyipada BRCA2 jẹ diẹ sii ni awọn luminal BC awọn alaisan ti kii-Comparants ti o ni awọn alaisan ti ko ni agbara BC. Iwọn tumo ti o ga julọ ati itọka proliferative.Awọn ipari: Awọn awari wa n pese apejuwe ti ipo iyipada BRCA ni awọn alaisan BC lati ila-oorun Sicily ati ki o jẹrisi ipa ti NGS onínọmbà ni idamo awọn alaisan pẹlu ajogun BC. Iwoye, awọn data wọnyi wa ni ibamu pẹlu awọn ẹri iṣaaju ti o ṣe atilẹyin ibojuwo BRCA fun idena to dara ati itọju ti akàn ni awọn ti nmu iyipada.
Arun igbaya (BC) jẹ ibajẹ ti o wọpọ julọ ni gbogbo agbaye ati akàn ti o ku julọ ninu awọn obirin.1 Awọn ẹya ara ẹrọ ti ara ẹni ti o ṣe ipinnu asọtẹlẹ BC ati ihuwasi iwosan ti ni iwadi ti o pọju ati ti o ni imọran ni akoko diẹ sii.Ni otitọ, ọpọlọpọ awọn ami-ami surrogate ti wa ni lilo lọwọlọwọ lati ṣe iyatọ BC si oriṣiriṣi awọn subtypes molikula.Wọn jẹ estrogen (ER) ati / tabi progesterone R receptor (PH) eniyan ti o ni ẹda (P H). ampilifaya, itọka afikun Ki-67 ati tumor grade (G) .2 Apapo awọn oniyipada wọnyi ṣe idanimọ awọn ẹka BC wọnyi: 1) Awọn èèmọ Luminal, ti o nfihan ER ati / tabi PgR ikosile, ṣe iṣiro fun 75% ti BCs. Awọn èèmọ wọnyi tun pin si Luminal A, nigbati Ki-67 wa labẹ 20% tabi HER60 ti odi, ati pe Luminal 2% jẹ dogba, ni iwaju HER2 ampilifaya, laibikita itọka afikun; 2) Awọn èèmọ HER2 + ti o jẹ ER ati PgR odi ṣugbọn ṣe afihan HER2 amplification. Ẹgbẹ yii jẹ 10% ti gbogbo awọn èèmọ igbaya; 3) Akàn igbaya igbaya mẹta (TNBC), ti ko ṣe afihan ER ati PgR ikosile ati HER2 amplification, awọn iroyin fun nipa 15% ti awọn aarun igbaya.2-4
Lara awọn wọnyi BC subtypes, tumo ite ati afikun atọka soju fun agbelebu-apakan biomarkers ti o wa ni taara ati ominira ni nkan ṣe pẹlu tumo aggressiveness ati piroginosis.5,6
Ni afikun si awọn ẹya ti ara ẹni ti a ti sọ tẹlẹ, ipa ti awọn iyipada jiini ti o jogun ti o yori si idagbasoke ti BC ti di pataki pupọ ni awọn ọdun diẹ sẹhin. BRCA2, CHK2, PALB2, RAD51C, ati RAD51D) nipataki lodidi fun hereditary BC.Lara awọn wọnyi Jiini, BRCA1 ati BRCA2 (eyi ti a tọka si bi BRCA1 / 2) fihan awọn Lágbára ibamu pẹlu awọn idagbasoke ti igbaya èèmọ.9-12 Ni o daju, germline mutation ti igbesi aye BRs / 2 miiran pọ si daradara bi CA1 / 2 igba miiran. awọn aarun buburu, pẹlu ovarian, prostate, pancreatic, colorectal, and melanoma.Lati ọjọ ori 13 si 80 ọdun, iṣẹlẹ ti o pọju ti BC jẹ 72% ninu awọn obirin ti o ni BRCA1 pathogenic variant (PV) ati 69% ninu awọn obirin pẹlu BRCA2 PV.14
Ni pataki, atẹjade laipe kan ni imọran pe ewu BC da lori iru PV. Ni otitọ, ni akawe pẹlu awọn iyatọ truncating pathogenic, awọn iyatọ ti o padanu, paapaa ninu jiini BRCA1, ni nkan ṣe pẹlu eewu ti o dinku ti BC, paapaa ni awọn obinrin agbalagba.15
Iwaju BRCA1 tabi BRCA2 PV ni o ni nkan ṣe pẹlu oriṣiriṣi awọn ẹya ara ẹrọ ti ibi-ara ati awọn ile-iwosan.16,17 BRCA1-sociated BCs maa n jẹ ibinu ti ile-iwosan, ti ko ni iyatọ, ati ti o ni ilọsiwaju pupọ.Awọn èèmọ wọnyi maa n ni odi mẹta ati ni ọjọ ori ibẹrẹ ti ibẹrẹ. awọn itọka proliferative.Awọn èèmọ wọnyi ni o wọpọ julọ ni lumen B ati nigbagbogbo waye ni awọn agbalagba agbalagba.16-18 Paapaa, awọn iyipada ninu BRCA1 ati BRCA2 mu ifamọ si awọn itọju kan pato, pẹlu awọn iyọ platinum ati awọn oogun ti a fojusi gẹgẹbi poly (ADP-ribose) inhibitors polymerase (PARPi).19,20
Ni awọn ọdun diẹ sẹhin, imuse ti atẹle-iran ti o tẹle (NGS) ni adaṣe ile-iwosan ti jẹ ki nọmba ti o pọ si ti awọn alaisan BC ṣe idanwo molikula fun awọn aarun alailagbara alakan, pẹlu BRCA1 / 2.21 Ni akoko kanna, awọn asọye ti o da lori awọn igbelewọn kongẹ nipa itan-akọọlẹ idile, ẹda eniyan, ati awọn abuda ile-iwosan lati ṣe idanimọ awọn ẹni kọọkan ti o yẹ fun idanwo ni CA212. lori ibojuwo BRCA1 / 2 ni awọn eniyan pato, ti o ṣe afihan awọn iyatọ laarin awọn agbegbe agbegbe.24-27 Bi o ti jẹ pe awọn iroyin wa lori ẹgbẹ ẹgbẹ BC ni iha iwọ-oorun Sicily, awọn data diẹ ti o wa lori BRCA1 / 2 ibojuwo ni awọn olugbe Sicily ila-oorun.28,29
A ṣe apejuwe nibi awọn abajade ti ibojuwo BRCA1/2 germline ni awọn alaisan BC lati ila-oorun Sicily, ni ibamu siwaju si wiwa ti BRCA1 tabi awọn iyipada BRCA2 pẹlu awọn ẹya akọkọ ti ile-iwosan ti awọn èèmọ wọnyi.
A ṣe iwadi ti o pada sẹhin ni "Center for Experimental Oncology and Hematology" ni Policlinico Hospital.Rodolico - San Marco in Catania.Lati January 2017 to March 2021, lapapọ 455 alaisan pẹlu igbaya ati ovarian, melanoma, pancreatic tabi prostate akàn ni a tọka si wa molikula CA2 akàn ti a npe ni molecule. ni ibamu pẹlu Ikede Helsinki, ati gbogbo awọn olukopa pese ifọkansi alaye ti a kọ ṣaaju iṣayẹwo molikula.
Awọn abuda itan-akọọlẹ ati ti ẹkọ-ara (ER, PgR, HER2 ipo, Ki-67, ati grade) ti BC ni a ṣe ayẹwo lori biopsy mojuto tabi awọn ayẹwo iṣẹ abẹ, ti o ṣe akiyesi awọn ẹya ara ti o ni ibinu nikan.Da lori awọn abuda wọnyi, awọn BC ti pin gẹgẹbi atẹle: luminal A (ER + and / or PgR +, HER2-, Ki-67/20%) HER2-, Ki-67≥20%), luminal B-HER2 + (ER ati / tabi PgR +, HER2 +), HER2 + (ER ati PgR-, HER2 +) tabi odi mẹta (ER ati PgR-, HER2-).
Ṣaaju ki o to ṣe ayẹwo ipo iyipada BRCA1 ati BRCA2, ẹgbẹ multidisciplinary pẹlu oncologist, onimọ-jiini, ati onisẹpọ-ọkan kan ṣe ijumọsọrọ jiini tumo fun alaisan kọọkan lati pinnu wiwa BRCA1 ati / tabi BRCA1. tabi awọn ẹni-kọọkan ti o ni ewu ti o ga julọ ti PV ni BRCA2 gene. Aṣayan alaisan ni a ṣe ni ibamu si awọn itọnisọna Italian Society of Medical Oncology (AIOM) ati awọn iṣeduro Sicilian agbegbe.30,31 Awọn ilana wọnyi pẹlu: (i) itan-ẹbi idile ti awọn iyatọ pathogenic ti a mọ ni awọn jiini ifaragba (fun apẹẹrẹ, BRCA1, BRCA2, TP53, PT); (ii) awọn ọkunrin pẹlu BC; (iii) awọn ti o ni BC ati OC; (iv) awọn obinrin pẹlu BC <36 ọdun, TNBC <60 ọdun, tabi ipinsimeji BC <50 ọdun; (v) itan-akọọlẹ iṣoogun ti ara ẹni ti BC <50 ọdun ati pe o kere ju ibatan ibatan-akọkọ kan: (a) BC <50 ọdun; (b) ti kii-mucinous ati ti kii-aala OC ti eyikeyi ọjọ ori; (c) BC meji-meji; (d) akọ BC; (e) akàn pancreatic; (f) arun jejere pirositeti; (vi) itan-akọọlẹ ti ara ẹni meji tabi diẹ sii ti BC> ọdun 50 ati itan-akọọlẹ ẹbi ti BC, OC, tabi akàn pancreatic fun awọn ibatan ti o jẹ ibatan ti o ni oye akọkọ si ara wọn (pẹlu awọn ibatan pẹlu ẹniti o jẹ ibatan akọkọ-akọkọ); (vii) Itan ti ara ẹni ti OC ati pe o kere ju ibatan kan-akọkọ: (a) BC <50 ọdun; (b) NOC; (c) BC meji-meji; (d) akọ BC; (vii) obinrin pẹlu ga-ite serous OC.
Ayẹwo ẹjẹ agbeegbe 20 milimita ti a gba lati ọdọ alaisan kọọkan ati pe a gba sinu awọn tubes EDTA (BD Biosciences) .Gnomic DNA ti ya sọtọ lati 0.7 mL gbogbo awọn ayẹwo ẹjẹ nipa lilo QIAsymphony DSP DNA Midi kit Isolation Kit (QIAGEN, Hilden, Italy) ni ibamu si awọn ilana olupese ati ki o kọja nipasẹ kan. Waltham, MA, USA) Ṣe iwọn. Imudara ibi-afẹde ati igbaradi ile-ikawe ni o ṣe nipasẹ Oncomine™ BRCA Research Assay Oluwanje, ti ṣetan lati kojọpọ sinu Ion AmpliSeq™ Chef Reagents DL8 Kit fun igbaradi ile-ikawe adaṣe adaṣe ni ibamu si awọn ilana ti olupese. Ohun elo naa ni awọn adagun adagun alakoko PCR multiplex meji ti o le ṣee lo lati ṣe iwadi gbogbo BRCA1 (NM_0307) (NM_000059.3) Jiini.Ni soki, 15 µL ti kọọkan ti fomi ayẹwo DNA (10 ng) ti a fi kun si barcoded farahan fun awọn ìkàwé igbaradi ati gbogbo reagents ati consumables ti wa ni kojọpọ lori awọn Ion Chef™. 3.0 Fluorometer (Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA, USA) ni ibamu si awọn ilana ti olupese. Nikẹhin, awọn ile-ikawe ti wa ni idapo ni awọn iwọn equimolar ni Ion Chef ™ awọn tubes apẹẹrẹ ile-ikawe (awọn tubes barcoded) ati ti kojọpọ sori ohun elo Ion Chef™. Sequencing ti ṣe ni lilo ohun elo Ion Torrent S5 (Thermo Scientifisher) ohun Ion 510 Chip (Thermo Fisher Scientific) .Data onínọmbà ti a ṣe nipasẹ Amplicon Suite (SmartSeq srl) ati Ion onirohin Software.
Gbogbo iyatọ nomenclature tẹle awọn itọnisọna lọwọlọwọ ti Ẹgbẹ Iyipada Iyipada Ẹda Eniyan, ti o wa lori ayelujara (HGVS, http://www.hgvs.org/mutnomen) .Itumọ isẹgun ti awọn iyatọ BRCA1/2 ni lilo ipinya ti International Consortium ENIGMA (Ẹri-orisun Nẹtiwọọki fun Itumọ Germa) https://www. ijumọsọrọ awọn apoti isura infomesonu oriṣiriṣi bii ARUP, BRCAEXCHANGE, ClinVar, IARC_LOVD, ati UMD. Ipinsi naa pẹlu awọn isọri eewu ọtọtọ marun: ko dara (ẹka I), ti o ṣeeṣe ko dara (Ẹka II), iyatọ ti pataki ti ko daju (VUS, ẹka III), o ṣeeṣe pathogenic (ẹka IV), ati ipa-ara ti o ni ipa lori amuaradagba VUS. iṣẹ, ohun elo alaye pẹlu wiwọle si 30 infomesonu.32
Lati fi pataki ile-iwosan ti o pọju si VUS kọọkan, awọn algorithms asọtẹlẹ amuaradagba iṣiro atẹle wọnyi ni a lo: MUTATION TASTER, 33 PROVEAN-SIFT (http://provean.jcvi.org/index.php), POLYPHEN-2 (http:// /genetics.bwh.harvard.edu/pph2/) ati Align-GVGD (http://agvgd.hci.utah.edu/agvgd_input.php) .Awọn iyatọ ti a pin si kilasi 1 ati 2 ni a kà si iru egan.
Sanger sequencing timo niwaju kọọkan pathogenic variant.Ni soki, a bata ti kan pato awọn alakoko ti a ṣe fun kọọkan ri iyatọ nipa lilo BRCA1 ati BRCA2 gene itọkasi lesese (NG_005905.2, NM_007294.3 ati NG_012772.3, NM_0300re afojusun PC). atẹle nipa Sanger lesese.
Awọn alaisan ti o ni idanwo odi fun jiini BRCA1/2 ni idanwo nipasẹ multiplex ligation-dependent probe amplification (MLPA) ni ibamu si awọn ilana olupese lati ṣe ayẹwo niwaju awọn atunto jiini nla (LGR) .Ni ṣoki, awọn ayẹwo DNA jẹ denatured ati pe o to 60 BRCA1 ati BRCA2 ni pato ti a lo DNA-specific prosecific 6 prosecific prosecific DNA. nucleotides in length.Probe amplification awọn ọja, ti o wa ninu otooto ti PCR amplicons, won ki o si atupale nipasẹ capillary electrophoresis ati nipasẹ Cofalyser.Net software ni apapo pẹlu awọn yẹ ipele-kan pato Cofalyser tabili (www.mrcholland.com).
Awọn oniyipada Clinicopathological ti a ti yan (ite itan-akọọlẹ ati Ki-67% itọka afikun) ni nkan ṣe pẹlu wiwa BRCA1/2 PV, ti a ṣe iṣiro nipa lilo sọfitiwia Prism v. 8.4 nipa lilo idanwo gangan Fisher ti o ro pe p-iye <0.05 lati jẹ pataki.
Laarin Oṣu Kini ọdun 2017 ati Oṣu Kẹta 2021, awọn alaisan 455 ni a ṣe ayẹwo fun awọn iyipada germline BRCA1/2. Ayẹwo iyipada ni a ṣe ni Ile-iṣẹ Ile-iwosan Policlinico fun Oncology Experimental ati Hematology.Gẹgẹbi itọsọna Sicilian (http://www.gurs.regione.sicilia.ith0i. 10 Gennaio 2020), Rodolico ti Catania - San Marco ”apapọ, awọn alaisan 389 Nibẹ ni akàn igbaya, 37 akàn ovarian, akàn pancreatic 16, akàn pirositeti 8 ati melanoma 5. Pipin awọn alaisan ni ibamu si iru akàn ati awọn abajade itupalẹ jẹ afihan ni Nọmba 1.
Nọmba 1 ṣe afihan iwe-iṣan ṣiṣan ti o nfihan apejuwe ti iwadi naa.
Awọn kukuru: PVs, iyatọ pathogenic; VUS, iyatọ ti aidaniloju; WT, egan-Iru BRCA1/2 ọkọọkan.
A yan awọn iwadi wa lori awọn ẹgbẹ alakan igbaya.Awọn alaisan ni ọjọ-ori agbedemeji ti ọdun 49 (ipin 23-89) ati pe o jẹ abo julọ (n=376, tabi 97%).
Ninu awọn koko-ọrọ wọnyi, 64 (17%) ni awọn iyipada BRCA1 / 2 ati pe gbogbo wọn jẹ obirin. Ọgbọn-marun (9%) ni PV ati 29 (7.5%) ni VUS.Seventeen (48.6%) ti awọn iyatọ pathogenic 35 waye ni BRCA1 ati 18 (51.4%) ni BRCA2, nigba ti 5CABR1 (82.8%) ni BRCA2 (Awọn eeya 1 ati 2) .LGR ko wa ninu itupalẹ MLPA.
Ṣe nọmba 2. Ayẹwo ti BRCA1 ati awọn iyipada BRCA2 ni awọn alaisan 389 aarun igbaya. (B) Awọn alaisan alakan igbaya 389 Ọgbọn-marun (9%) ni BRCA1 / 2 awọn iyatọ pathogenic (PVs) . Lara wọn, 17 (48.6%) ni awọn ọkọ ayọkẹlẹ BRCA1 PV (pupa dudu) ati 18 (51.4%) jẹ awọn ọkọ ayọkẹlẹ BRCA2 (pupa ina); (C) 29 (7.5%) ti awọn koko-ọrọ 389 gbe VUS, 5 (17.2%) BRCA1 Jiini (osan dudu) ati 24 (82.8%) BRCA2 awọn jiini (osan ina).
Awọn kukuru: PVs, iyatọ pathogenic; VUS, iyatọ ti aidaniloju; WT, egan-Iru BRCA1/2 ọkọọkan.
Nigbamii ti a ṣe iwadi lori itankalẹ ti awọn subtypes molikula BC ni awọn alaisan ti o ni BRCA1 / 2 PV. Awọn pinpin pẹlu 2 (5.7%) luminal A, 15 (42.9%) luminal B, 3 (8.6%) luminal B-HER2 +, 2 (5.7%) HER2 + ati 13 (37.1%) Tmopositive B. (29.4%) ni B BC luminal, 2 (11.8%) ni arun HER2 +, ati 10 (58.8%) ni TNBC. Awọn èèmọ laisi awọn iyipada BRCA1 jẹ boya luminal A tabi luminal B-HER2 + (Nọmba 3) .Ni BRCA2-positive subgroup, 10 (53%) 10 (53%) jẹ luminal 6 tumo. luminal B-HER2 +, 3 (16.7%) TNBC ati 2 (11.1%) jẹ luminal A (Nọmba 3) .Ko si awọn èèmọ HER2 + ti o wa ninu ẹgbẹ yii. Bayi, awọn iyipada BRCA1 ni o pọju ni awọn alaisan TNBC, lakoko ti awọn iyipada BRCA2 jẹ pataki julọ ni awọn eniyan lumen B.
Ṣe nọmba 3 Imudara ti awọn alakan aarun igbaya igbaya ni awọn alaisan ti o ni awọn iyatọ pathogenic ni BRCA1 ati BRCA2. Awọn itan-akọọlẹ ti o nfihan pinpin BRCA1- (pupa dudu) ati BRCA2- (pupa ina) PV laarin awọn ẹya-ara molikula ti awọn alaisan alakan igbaya. Awọn nọmba ti a royin laarin apoti kọọkan jẹ aṣoju ogorun awọn alaisan ti o ni BRCA1 ati BRPV kọọkan fun akàn BRCA2.
Awọn kukuru: PVs, iyatọ pathogenic; HER2 +, eda eniyan epidermal idagbasoke ifosiwewe receptor 2 rere; TNBC, akàn igbaya-odi-meta.
Lẹhinna, a ṣe ayẹwo iru ati agbegbe jiini ti BRCA1 ati BRCA2 PVs.Ni BRCA1 PV, a ṣe akiyesi awọn iyatọ nucleotide 7 nikan (SNVs), awọn piparẹ 6, 3 duplications ati 1 ifibọ. Nikan kan iyipada (c.5522delPV) duro fun awari titun kan. Awọn mejeeji ti o wọpọ julọ ni a ṣe awari ni 1 CA1 ti o wọpọ julọ ni Awari 1. c.5035_5039delCTAAT.Yi alteration je kan piparẹ marun nucleotides (CTAAT) ni BRCA1 exon 15, Abajade ni awọn fidipo ti awọn amino acid leucine nipa tyrosine ni codon 1679, ati nitori a translation frameshift pẹlu kan ti anro yiyan Duro codon asiwaju si tọjọ irú ti a ti sọ tẹlẹ ninu awọn miiran protein trun. Awọn PV ti o royin wa ni agbegbe agbegbe ipohunpo aaye splice (c.4357 + 1G> T) (Table 1).
Nipa BRCA2 PV, a ṣe akiyesi awọn piparẹ 6, 6 SNVs ati awọn duplications 2. Ko si ọkan ninu awọn iyipada ti a ri jẹ aramada. Awọn iyipada mẹta ti o tun waye ninu awọn eniyan wa, c.428dup ati c.8487 + 1G>A ṣe akiyesi ni awọn koko-ọrọ 3, ti o tẹle pẹlu c.5851_5854delAG ni awọn iṣẹlẹ c.5851_5854delAG2. tun ti C ni exon 5 ti BRCA2, ti a ti sọtẹlẹ lati ṣe koodu koodu kan truncated, protein ti kii ṣe iṣẹ-ṣiṣe.The c.8487 + 1G>Iyipada kan waye ni agbegbe intronic ti BRCA2 intron 19 (± 1,2) ati pe o ni ipa lori ilana ifọkanbalẹ splicing, ti o mu ki o ni iyipada splicormal tabi abajade amuaradagba absent. c.5851_5854delAGTT iyatọ pathogenic jẹ nitori piparẹ 4-nucleotide lati awọn ipo nucleotide 5851 si 5854 ninu ifaminsi exon 10 ti jiini BRCA2 ati awọn abajade ni fireemu itumọ kan pẹlu codon iduro yiyan ti asọtẹlẹ ti asọtẹlẹ (p.S1951Wfster 3), c. ati c.7008-2A>T ni a ti rii ni alaisan kanna.34 Iyipada akọkọ jẹ iyipada ti adenosine (A) ni BRCA2 exon 7 pẹlu guanine (G) ti o ni nucleotide ti o mu ki iyipada ti valine si isoleucine ni codon 211, isoleucine Amino acid jẹ amino acid ti o ni ipa ti o niiṣe deede ti o wa ni ipo keji. agbegbe intronic ati awọn abajade ni ilọpo meji A si thymine (T) fidipo ṣaaju ki exon 13 ti gene encoding BRCA2. Awọn c.7008-2A>T iyipada le ṣe agbekalẹ awọn iwe-kikọ ti o pọju ti awọn gigun oriṣiriṣi. Pẹlupẹlu, ninu ẹgbẹ ti BRCA2 PVs, 4 ninu awọn iyipada 18 (22.2%) jẹ intronic.
Lẹhinna a ya aworan BRCA1 / 2 awọn iyipada ti o npa ni awọn agbegbe iṣẹ-ṣiṣe ati awọn agbegbe amuaradagba-ara (Fig. 4) .Ninu BRCA1 pupọ, 50% ti awọn PV ti wa ni agbegbe iṣọn akàn igbaya (BCCR), nigba ti 22% ti awọn iyipada ti o wa ni agbegbe iṣan akàn ovarian (OCCR) (Ọpọtọ 4CA5A% ti o wa ni agbegbe). ni agbegbe BCCR ati 42.8% awọn iyipada ti o wa ni OCCR (Fig. 4B) .Niwaju, a ṣe ayẹwo ipo ti PV laarin awọn BRCA1 ati BRCA2 protein protein. si BRC tun-ašẹ, nigba ti 3 intronic ati 3 exonic ayipada ti a ri ni oligo / oligosaccharide-binding (OB) ati ẹṣọ (T) ibugbe (Nọmba 4B).
Ṣe nọmba 4 Awọn aṣoju apẹrẹ ti BRCA1 ati awọn ọlọjẹ BRCA2 ati isọdi agbegbe ti awọn iyatọ pathogenic.Eyi ṣe afihan pinpin BRCA1 (A) ati BRCA2 (B) awọn iyatọ pathogenic ni awọn alaisan alakan igbaya. Awọn iyipada ti o wa ni ita gbangba ni a fihan ni buluu, lakoko ti awọn iyatọ intronic ti han ni osan. Igi igi jẹ aṣoju nọmba ti awọn iṣẹlẹ. Awọn amuaradagba CA BRA ati iṣẹ wọn CA BRA. Awọn amuaradagba BRCA1 ni agbegbe loop (RING) ati ilana isọdi agbegbe iparun kan (NLS), agbegbe ti o ni iyipo-coil, agbegbe iṣupọ SQ/TQ kan (SCD), ati agbegbe BRCA1 C-terminal (BRCT) kan (BRCT) . folds, a tower domain (T), ati An NLS lori ẹgbẹ C. Awọn agbegbe ti a npe ni Breast Cancer Cluster Region (BCCR) ati Ovarian Cancer Cluster Region (OCCR) ni a fihan ni isalẹ. * Ṣe afihan awọn iyipada ti o pinnu awọn codons duro.
Lẹhinna a ṣe iwadii awọn ẹya ile-iwosan ti BC ti o le ni ibamu pẹlu wiwa BRCA1 / 2 PV. Awọn igbasilẹ ile-iwosan pipe wa fun awọn alaisan 181 BRCA1 / 2-negative (awọn ti kii ṣe awọn alaṣẹ) ati gbogbo awọn ti ngbe (n = 35) .Ibaṣepọ wa laarin oṣuwọn afikun ti tumo ati ite.
A ṣe iṣiro pinpin Ki-67 ti o da lori agbedemeji ti ẹgbẹ wa (25%, ibiti o <10-90%). Awọn koko-ọrọ pẹlu Ki-67 <25% ni a ṣe alaye bi "kekere Ki-67″, lakoko ti awọn ẹni-kọọkan pẹlu awọn iye ≥ 25% ni a kà "Ki-67 giga" giga. PV ẹjẹ (aworan 5A).
Nọmba 5 Ibaṣepọ ti Ki-67 pẹlu pinpin ite ni awọn obinrin alakan igbaya pẹlu ati laisi BRCA1 ati BRCA2 PVs. ti awọn alaisan alakan BC sinu awọn ẹgbẹ ipele itan-akọọlẹ (G2 ati G3) ni ibamu si BRCA1 ati ipo iyipada BRCA2 (awọn koko-ọrọ WT, BRCA1 ati awọn BRCA2 PVs).
Bakanna, a ṣe ayẹwo boya ipele tumo ti o ni ibamu pẹlu wiwa ti BRCA1 / 2 PV.Niwọn igba ti G1 BC ko si ninu awọn eniyan wa, a pin awọn alaisan si awọn ẹgbẹ meji (G2 tabi G3) .Ni ibamu pẹlu awọn esi Ki-67, iṣiro naa ṣe afihan iṣiro ti o ṣe pataki laarin awọn tumor grade ati BRCA1 iyipada, pẹlu iwọn ti o ga julọ ti awọn BRCA1 ti awọn ti o niiṣe ti awọn BRCA1 ti o ni ibamu si awọn ti o niiṣe ti GCA1. (p<0.005) (Aworan 5B).
Ilọsiwaju ni imọ-ẹrọ titele DNA ti jẹ ki awọn ilọsiwaju ti a ko tii ri tẹlẹ ninu idanwo jiini BRCA1/2, pẹlu awọn ipa pataki fun awọn alaisan ti o ni itan-akọọlẹ ẹbi ti akàn. Titi di oni, o fẹrẹ to 20.000 BRCA1/2 awọn iyatọ ti jẹ idanimọ ati pin ni ibamu si Awujọ Amẹrika ti Iṣoogun Jiini 35 ati eto ENIGMA ti a mọ daradara. kọja awọn ẹkun agbegbe.37 Laarin Ilu Italia, oṣuwọn BRCA1/2 PV wa lati 8% si 37%, ti o nfihan iyatọ laarin orilẹ-ede jakejado. erekusu.
Iwadii wa jẹ ọkan ninu awọn iroyin akọkọ lori iṣẹlẹ ti BRCA1 / 2 PV ni awọn alaisan BC ni ila-oorun Sicily.28 A ṣe ifojusi iwadi wa lori BC, nitori eyi jẹ eyiti o jẹ arun ti o wọpọ julọ ni ẹgbẹ wa.
Nigbati o ba ṣe idanwo awọn alaisan 389 BC, 9% gbe BRCA1 / 2 PVs, ti a pin ni deede laarin BRCA1 ati BRCA2. Awọn abajade wọnyi wa ni ibamu pẹlu awọn ti a ti sọ tẹlẹ ninu awọn olugbe Itali. ewu iyipada.Sibẹsibẹ, ko si ọkan ninu awọn ọkunrin wọnyi ti o ni idagbasoke BRCA1 / 2 PV, nitorina wọn jẹ oludije fun imọran molikula siwaju sii lati ṣe akoso ifarahan ti awọn iyipada ti ko wọpọ gẹgẹbi PALB2, RAD51C ati D, laarin awọn miiran. Awọn iyatọ ti ko ni idaniloju ni a gba pada ni 7% ti awọn koko-ọrọ ninu eyi ti BRCA2 VUS jẹ ẹri ti o ni ibamu pẹlu 24.
Nigba ti a ba ṣe ayẹwo pinpin awọn ẹya-ara ti molikula BC ni BRCA1 / 2 awọn obirin mutant, a ṣe idaniloju awọn ẹgbẹ ti a mọ laarin TNBC ati BRCA1 PV (58.8%) ati laarin luminal B BC ati BRCA2 PV (55.6%) .16,43 Awọn luminal A ati HER2 + awọn èèmọ ni BRCA1 ati awọn ọkọ ayọkẹlẹ BRers41.
Lẹhinna a fojusi lori iru ati ipo ti BRCA1/2 PV.Ninu ẹgbẹ wa, BRCA1 PV ti o wọpọ julọ jẹ c.5035_5039delCTAAT.Biotilẹjẹpe Incorvaia et al. ko ṣe apejuwe iyatọ yii ninu ẹgbẹ Sicilian wọn, awọn onkọwe miiran ti royin rẹ bi germline BRCA1 PV.34 Orisirisi awọn BRCA1 PV ni a ri ninu ẹgbẹ wa - fun apẹẹrẹ c.181T> G, c.514del, c.3253dupA ati c.5266dupC - eyi ti a ti ṣe akiyesi meji ni Sibri18s. (c.181T>G ati c.5266dupC) ni a ri ni awọn Juu Ashkenazi ti Ila-oorun ati Central Europe (Poland, Czech), Slovenian, Austrian, Hungarian, Belarusian and German ), 44,45 ati, ni Amẹrika ati Argentina, laipe ni asọye bi "iyatọ germline loorekoore" ati iyatọ 4 ti awọn alaisan Itali tẹlẹ.5. ni awọn alaisan alakan igbaya 8 lati ariwa Sicily ni Palermo ati Messina.O yanilenu, paapaa Incorvaia et al. ri iyatọ c.3253dupA ni diẹ ninu awọn idile ni Catania.28 Awọn aṣoju BRCA2 PV julọ jẹ c.428dup, c.5851_5854delAGTT ati iyatọ intronic c.8487+1G>A, eyiti a ti royin ni alaye diẹ sii 28 ni alaisan kan ni Palermo pẹlu c.458 A ṣe akiyesi PV ni awọn idile ni iha iwọ-oorun ariwa Sicily, paapaa ni awọn agbegbe Trapani ati Palermo, lakoko ti a ṣe akiyesi c.5851_5854delAGTT PV ni awọn idile ni ariwa iwọ-oorun Sicily. 8487+1G>Iyatọ kan jẹ diẹ wọpọ ni awọn koko-ọrọ lati Messina, Palermo, ati Caltanissetta.28 Rebbeck et al. tẹlẹ ṣapejuwe iyipada c.5851_5854delAGTT ni Columbia.37 BRCA2 PV miiran, c.631 + 1G>A, ni a ti rii ni BC ati awọn alaisan OC lati Sicily (Agrigento, Siracusa ati Ragusa) .28 Paapaa, a ṣe akiyesi ibagbepo ti awọn iyatọ BRCA2 meji (3172 c.8A) ati c. ninu alaisan kanna, eyiti a ro pe o ya sọtọ ni ipo cis, bi a ti sọ tẹlẹ bi iyẹn.34,46 Awọn iyipada BRCA2 uble wọnyi ni igbagbogbo ni a ṣe akiyesi nigbagbogbo ni agbegbe Ilu Italia ati pe a ti rii lati ṣafihan awọn codons iduro ti tọjọ, ti o ni ipa ti ojiṣẹ RNA splicing ati nfa amuaradagba BRCA2 lati kuna.47,48
A tun ya aworan BRCA1 ati BRCA2 PVs ni putative OCCR ati awọn agbegbe BCCR ti awọn ibugbe amuaradagba ati awọn Jiini.Awọn agbegbe wọnyi ni a ṣe apejuwe nipasẹ Rebbeck et al. bi awọn agbegbe eewu fun idagbasoke ovarian ati akàn igbaya, lẹsẹsẹ.49 Sibẹsibẹ, ẹri nipa ajọṣepọ laarin ipo ti awọn iyatọ germline ati igbaya tabi eewu akàn ovarian maa wa ni ariyanjiyan.28,50-52 Ninu olugbe wa, awọn BRCA1 PVs wa ni pataki julọ ni agbegbe BCCR, lakoko ti o jẹ pe BRCA2 PVs wa ni agbegbe ti ko ṣee ṣe tẹlẹ. ajọṣepọ laarin OCCR putative ati awọn agbegbe BCCR ati awọn ẹya BC. Eyi le jẹ nitori nọmba to lopin ti awọn alaisan ti o ni awọn iyipada BRCA1/2. Lati irisi agbegbe amuaradagba, awọn BRCA1 PV ti pin kaakiri pẹlu gbogbo amuaradagba, ati awọn iyipada BRCA2 ni a yan ni yiyan ni agbegbe atunwi BRC.
Nikẹhin, a ṣe atunṣe awọn ẹya ara ẹrọ iwosan BC pẹlu BRCA1 / 2 PV. Nitori nọmba ti o pọju ti awọn alaisan ti o wa pẹlu, a nikan ri iṣeduro pataki laarin Ki-67 ati tumo grade.Biotilẹjẹpe imọran ati itumọ ti Ki-67 jẹ diẹ ti ariyanjiyan, o jẹ daju pe awọn oṣuwọn proliferative giga ni o ni nkan ṣe pẹlu ewu ti o pọju ti aarun ayọkẹlẹ ti o pọju, ati idinku ti o dinku laarin awọn akoko ti o pọju ti aisan ati idinku ti o dinku. "kekere" Ki-67 jẹ 20%.Sibẹsibẹ, ẹnu-ọna yii ko kan si awọn eniyan alaisan iyipada BRCA1 / 2 wa, eyiti o ni iye agbedemeji Ki-67 ti 25% .Iṣafihan yii ni awọn oṣuwọn Ki-67 ti o ga julọ le ṣe alaye nipasẹ itankalẹ ninu awọn ẹgbẹ luminal B wa ati TNBC, eyiti diẹ ninu awọn luminal A èèmọ jẹ ẹri ti o ga julọ - Bi o ṣe le jẹ pe 6 jẹ ẹri ti o ga julọ. (25-30%) le dara si awọn alaisan ti o dara gẹgẹbi asọtẹlẹ wọn .53,54 Lati awọn abajade ti iṣiro wa, iṣeduro pataki kan kii ṣe iyanilenu.Wọ laarin giga Ki-67 ati awọn onipò ati niwaju BRCA1 PV.Ni otitọ, awọn èèmọ BRCA1-jẹmọ jẹ aṣoju ti TNBC ati ki o ṣe afihan awọn ẹya-ara ibinu diẹ sii.16,17
Ni ipari, iwadi yii n pese iroyin kan lori ipo iyipada ti BRCA1 / 2 ni ẹgbẹ BC lati ila-oorun Sicily. Iwoye, awọn awari wa wa ni ibamu pẹlu awọn ẹri ti o ti wa tẹlẹ, mejeeji ni awọn iṣeduro iyipada ati awọn ẹya ara ẹrọ iwosan ni BC. Awọn ẹkọ diẹ sii ni awọn eniyan ti o tobi ju ti BRCA1 / 2-mutant BC alaisan, gẹgẹbi lilo iṣeduro ti mutagenome ti awọn alaisan BC ti o gbooro sii, gẹgẹbi lilo iṣeduro ti mutagenome ti o pọju ti awọn alaisan BC ti o gbooro sii. ọtọtọ ati ti o kere ju loorekoore ju BRCA1 / 2. Eyi yoo gba idanimọ ati iṣakoso to dara ti nọmba ti o pọ sii ti awọn koko-ọrọ ni ewu ti o pọju ti akàn nitori awọn iyipada ti ẹda.
A fi idi rẹ mulẹ pe awọn alaisan ti fowo si ifitonileti ifitonileti lati tu awọn ayẹwo tumo wọn silẹ lainidii fun awọn idi iwadi.Gbogbo awọn alaisan ti fowo si iwe adehun iwe-aṣẹ ti a kọ silẹ gẹgẹbi Declaration of Helsinki.Gẹgẹbi eto imulo ti AOU Policlinico “G.Rodolico - S.Marco”, iwadi yii ko yọkuro lati atunyẹwo ihuwasi nitori pe awọn alaisan BRCA1 / 2 ni a kọ ni adaṣe ti a ṣe ni ibamu si awọn ilana iṣoogun ti a ṣe ni ibamu si gbogbo awọn alaisan. igbanilaaye si lilo data wọn fun awọn idi iwadi.
A dupẹ lọwọ Ọjọgbọn Paolo Vigneri fun iranlọwọ rẹ ni itọju awọn alaisan alakan igbaya bi Igbimọ Ethics ti beere.
Federica Martorana ṣe ijabọ honoraria lati Istituto Gentili, Eli Lilly, Novartis, Pfizer. Awọn onkọwe miiran sọ pe ko si awọn ija ti iwulo ninu iṣẹ yii.
1. Sung H, Ferlay J, Siegel RL, et al.Global Cancer Statistics 2020: GLOBOCAN ṣe iṣiro isẹlẹ ati iku ti awọn aarun 36 ni awọn orilẹ-ede 185 ni ayika agbaye.CA Cancer J Clin.2021;71(3):209-249.doi: 16/33222