Javascript imezimwa katika kivinjari chako kwa sasa.Baadhi ya vipengele vya tovuti hii havitafanya kazi wakati javascript imezimwa.
Sajili kwa maelezo yako mahususi na dawa mahususi inayokuvutia na tutalingana na maelezo unayotoa na makala katika hifadhidata yetu pana na kukutumia nakala ya PDF mara moja.
作者 Stella S, Vitale SR, Martorana F, Massimino M, Pavone G, Lanzafame K, Bianca S, Barone C, Gorgone C, Fichera M, Manzella L
Stefania Stella, 1,2 Silvia Rita Vitale, 1,2 Federica Martorana, 1,2 Michele Massimino, 1,2 Giuliana Pavone, 3 Katia Lanzafame, 3 Sebastiano Bianca, 4 Chiara Barone, 5 Cristina Gorgone, 6 Marco Ficheravia 2, 16 Idara ya Tiba ya Maperinze, 16 ya kliniki ya Maperinze na 16 ya kliniki ya Maperinze. Chuo Kikuu cha Catania, Catania, 95123, Italia;2 Kituo cha Oncology ya Majaribio na Hematology, AOU Policlinico "G.Rodolico - San Marco", Catania , 95123, Italia; 3 Oncology ya Matibabu, AOU Policlinico "G. Rodolico - San Marco", Catania, 95123, Italia; 4 Medical Genetics, ARNAS Garibaldi, Catania, 95123, Italia; 5 Dawa Genetics, ASP, Syracuse, 96100, Italia; 6 Idara ya Sayansi ya Biomedical na Bioteknolojia, Chuo Kikuu cha Catania, Jenetiki ya Matibabu, Catania, Italia, 95123; Taasisi ya Utafiti ya 7Oasi-IRCS, Troina, 94018, Italia Mawasiliano: Stefania Stella, simu +39 095 378 1946, barua pepe [email protected]; [email protected] Kusudi: Mabadiliko ya vijidudu katika BRCA1 na BRCA2 na kuanzisha saratani ya matiti (BC), ovari (OC) na nyingine zinazohusiana na hatari ya maisha yote ya saratani. Upimaji wa jeni la BRCA ni muhimu katika kutathmini hatari ya mtu binafsi, pamoja na kutafuta mbinu za kuzuia katika wabebaji wa afya na urekebishaji wa matibabu kwa wagonjwa wa saratani. ingawa kuna data kuhusu lahaja za BRCA za pathogenic katika familia za Sisilia, tafiti zinazolenga hasa watu katika Sicily ya mashariki hazipo. Lengo la utafiti wetu lilikuwa kuchunguza matukio na usambazaji wa mabadiliko ya viini vya pathogenic ya BRCA katika kundi la wagonjwa wa BC kutoka Sicily mashariki na kutathmini uhusiano wao na sifa maalum za BC kwa kutumia urekebishaji wa kizazi kijacho na upanuzi wa kizazi kijacho. index.RESULTS: Kwa ujumla, wagonjwa 35 (9%) walikuwa na lahaja ya BRCA ya pathogenic, 17 (49%) katika BRCA1 na 18 (51%) katika BRCA2.BRCA1 mabadiliko yameenea kwa wagonjwa wa BC tatu-hasi, ambapo mabadiliko ya BRCA2 ni ya kawaida zaidi kwa wagonjwa wa luminal BC. proliferative index.Hitimisho: Matokeo yetu yanatoa muhtasari wa hali ya mabadiliko ya BRCA kwa wagonjwa wa BC kutoka mashariki mwa Sicily na kuthibitisha jukumu la uchambuzi wa NGS katika kutambua wagonjwa wenye BC ya urithi. Kwa ujumla, data hizi zinalingana na ushahidi wa awali unaounga mkono uchunguzi wa BRCA kwa ajili ya kuzuia sahihi na matibabu ya saratani katika wabebaji wa mabadiliko.
Saratani ya matiti (BC) ndiyo ugonjwa mbaya zaidi duniani kote na saratani hatari zaidi kwa wanawake.1 Vipengele vya kibaiolojia vinavyoamua ubashiri wa BC na tabia ya kimatibabu vimechunguzwa kwa kina na kufafanuliwa kwa muda baada ya muda. Kwa kweli, viashirio kadhaa vya urithi vinatumika kwa sasa kuainisha BC katika aina ndogo tofauti za molekuli. amplification, proliferation index Ki-67 na tumor grade (G) .2 Mchanganyiko wa vigezo hivi vilibainisha makundi ya BC yafuatayo: 1) Tumors ya Luminal, inayoonyesha ER na / au PgR kujieleza, ilichangia 75% ya BCs. Uvimbe huu uligawanywa zaidi katika Luminal A, wakati Ki-67 ilikuwa chini ya 20% na HER2 juu ya hasi wakati wa kuwepo kwa Ki-6 na B-6 na 62 ya Luminal. ukuzaji wa HER2, bila kujali index ya kuenea; 2) uvimbe wa HER2+ ambao ni ER na PgR hasi lakini huonyesha ukuzaji wa HER2. Kikundi hiki kinachukua 10% ya uvimbe wote wa matiti; 3) Saratani ya matiti-hasi mara tatu (TNBC), ambayo haionyeshi usemi wa ER na PgR na ukuzaji wa HER2, huchangia takriban 15% ya saratani za matiti.2-4
Miongoni mwa aina hizi ndogo za BC, daraja la tumor na fahirisi ya kuenea huwakilisha alama za kibayolojia ambazo zinahusishwa moja kwa moja na kwa kujitegemea na ukali wa tumor na ubashiri.5,6
Mbali na vipengele vya kibiolojia vilivyotajwa hapo juu, jukumu la mabadiliko ya urithi wa urithi na kusababisha maendeleo ya BC imekuwa muhimu zaidi katika miaka michache iliyopita.7 Takriban 1 kati ya uvimbe wa matiti 10 hurithi kutokana na mabadiliko ya vijidudu katika jeni maalum.8 Masomo mawili makubwa ya epidemiological yanayohusisha zaidi ya 180,000 ya wanawake wa genes hivi karibuni, BCA, kundi la A. BRCA2, CHK2, PALB2, RAD51C, na RAD51D) ambayo kimsingi inawajibika kwa urithi wa BC.Kati ya jeni hizi, BRCA1 na BRCA2 (ambayo baadaye inajulikana kama BRCA1/2) ilionyesha uhusiano mkubwa zaidi na ukuzaji wa uvimbe wa matiti.9-12 Kwa kweli, hatari za wakati wa kijidudu na BRCA2 pia huongeza hatari ya maisha ya BRCA1 ikiwa ni pamoja na ovari, prostate, kongosho, colorectal, na melanoma.Kuanzia umri wa miaka 13 hadi 80, matukio ya BC ni 72% kwa wanawake walio na lahaja ya pathogenic ya BRCA1 (PV) na 69% kwa wanawake walio na BRCA2 PV.14.
Hasa, uchapishaji wa hivi majuzi unapendekeza kuwa hatari ya BC inategemea aina ya PV. Kwa kweli, ikilinganishwa na tofauti za upunguzaji wa pathogenic, lahaja za missense zinazong'aa, haswa katika jeni la BRCA1, zinahusishwa na hatari iliyopunguzwa ya BC, haswa kwa wanawake wazee.15
Uwepo wa BRCA1 au BRCA2 PV ulihusishwa na vipengele tofauti vya kibaolojia na kiafya.16,17 BC zinazohusishwa na BRCA1 huwa na uchokozi wa kimatibabu, hazitofautianishwi sana, na huenea sana. Uvimbe huu kwa kawaida huwa na hasi mara tatu na huwa na umri mdogo wa kuanza. Vivimbe vinavyotokea kwa wagonjwa vilivyobadilika-badilika kwa kawaida hutofautiana kwa kiwango cha kawaida cha BRCA2. fahirisi za uenezaji. Uvimbe huu hupatikana zaidi katika lumen B na kwa kawaida hutokea kwa watu wazima.16-18 Hasa, mabadiliko katika BRCA1 na BRCA2 huongeza usikivu kwa matibabu mahususi, ikiwa ni pamoja na chumvi za platinamu na dawa zinazolengwa kama vile vizuizi vya poly(ADP-ribose) polymerase (PARPi).19,20
Katika kipindi cha miaka michache iliyopita, utekelezaji wa mpangilio wa kizazi kijacho (NGS) katika mazoezi ya kimatibabu umewezesha idadi inayoongezeka ya wagonjwa wa BC kufanyiwa upimaji wa molekuli kwa dalili za kuathiriwa na saratani, ikiwa ni pamoja na BRCA1/2.21 Sanjari na hayo, ufafanuzi unaozingatia vigezo sahihi kuhusu historia ya familia , demografia na sifa za kiafya ili kutambua vyema watu binafsi23/BR22 katika muktadha huu wa upimaji. kusanyiko la uchunguzi wa BRCA1/2 katika makundi maalum, ikionyesha tofauti katika maeneo ya kijiografia.24–27 Ingawa kuna ripoti kuhusu kundi la BC katika Sicily ya magharibi, data chache zinapatikana kuhusu uchunguzi wa BRCA1/2 katika wakazi wa Sicily mashariki.28,29
Tunaelezea hapa matokeo ya uchunguzi wa viini vya BRCA1/2 kwa wagonjwa wa BC kutoka mashariki mwa Sicily, ikihusisha zaidi uwepo wa mabadiliko ya BRCA1 au BRCA2 na sifa kuu za kiafya za uvimbe huu.
Utafiti wa rejea ulifanyika katika "Kituo cha Majaribio ya Oncology na Hematology" katika Hospitali ya Policlinico.Rodolico - San Marco huko Catania.Kuanzia Januari 2017 hadi Machi 2021, jumla ya wagonjwa 455 wenye saratani ya matiti na ovari, melanoma, kongosho au tezi dume walitumwa kwa uchunguzi wetu wa uchunguzi wa kijenetiki kwa uchunguzi wa kimaabara ya BRCA2. Azimio la Helsinki, na washiriki wote walitoa idhini iliyoandikwa kabla ya uchambuzi wa Masi.
Sifa za kihistoria na kibiolojia (ER, PgR, hadhi ya HER2, Ki-67, na daraja) za BC zilitathminiwa kwa sampuli za msingi za biopsy au upasuaji, kwa kuzingatia vipengele vya uvimbe vikali pekee.Kulingana na sifa hizi, BC ziliainishwa kama ifuatavyo: luminal A (ER+ na/au PgR+, HER2-, BER20, PERG+, 7, HER2-, Ki+R-6, HER2-, PER20, PERG, HER2-, Ki-67≥20%), mwangaza wa B-HER2+ (ER na/au PgR+, HER2+), HER2+ (ER na PgR-, HER2+) au hasi mara tatu (ER na PgR-, HER2-).
Kabla ya kutathmini hali ya mabadiliko ya BRCA1 na BRCA2, timu ya taaluma mbalimbali ikiwa ni pamoja na daktari wa saratani, mtaalamu wa maumbile, na mwanasaikolojia walifanya mashauriano ya kinasaba ya uvimbe kwa kila mgonjwa ili kubaini kuwepo kwa BRCA1 na/au BRCA1. au watu walio na hatari kubwa ya PV katika jeni la BRCA2.Uteuzi wa mgonjwa ulifanywa kulingana na miongozo ya Jumuiya ya Kiitaliano ya Oncology ya Matibabu (AIOM) na mapendekezo ya eneo la Sicilian.30,31 Vigezo hivi ni pamoja na: (i) historia ya familia ya lahaja zinazojulikana za pathogenic katika jeni za kuathiriwa (kwa mfano, BRCA1, BRCA2, TP53, PTEN); (ii) wanaume walio na BC; (iii) wale walio na BC na OC; (iv) wanawake walio na BC chini ya miaka 36, ​​TNBC chini ya miaka 60, au BC baina ya miaka 50; (v) historia ya matibabu ya kibinafsi ya KK chini ya miaka 50 na angalau jamaa mmoja wa shahada ya kwanza: (a) KK chini ya miaka 50; (b) OC asiye na mucinous na asiye na mipaka wa umri wowote; (c) BC baina ya nchi mbili; (d) BC kiume; (e) saratani ya kongosho; (f) saratani ya tezi dume; (vi) mbili au zaidi Historia ya kibinafsi ya BC > miaka 50 na historia ya familia ya BC, OC, au saratani ya kongosho kwa jamaa ambao ni jamaa wa daraja la kwanza (pamoja na jamaa ambao yeye ni jamaa wa daraja la kwanza); (vii) Historia ya kibinafsi ya OC na angalau jamaa mmoja wa shahada ya kwanza: (a) KK chini ya miaka 50; (b) NOC; (c) BC baina ya nchi mbili; (d) BC kiume; (vii) mwanamke aliye na OC ya hali ya juu ya serous.
Sampuli ya damu ya pembeni ya mililita 20 ilipatikana kutoka kwa kila mgonjwa na kukusanywa katika mirija ya EDTA (BD Biosciences). DNA ya jenasi ilitengwa kutoka kwa sampuli za damu nzima za mililita 0.7 kwa kutumia Kifurushi cha Kutenga cha QIAsymphony DSP DNA Midi (QIAGEN, Hilden, Italia) kulingana na maagizo ya mtengenezaji na kupitishwa kwa 3rometer ya Fishing®. Kisayansi, Waltham, MA, USA) Fanya upimaji. Uboreshaji unaolengwa na utayarishaji wa maktaba unafanywa na Mpishi wa Uchunguzi wa Utafiti wa Oncomine™ BRCA, tayari kupakiwa kwenye Kifaa cha Ion AmpliSeq™ Chef Reagents DL8 kwa ajili ya utayarishaji wa maktaba otomatiki kulingana na maagizo ya mtengenezaji. Seti hii ina vidimbwi viwili vya utangulizi vya PCR ambavyo vinaweza kutumika kusoma BRCA7300_030 zote. (NM_000059.3) jeni. Kwa ufupi, 15 µL ya kila sampuli iliyoyeyushwa ya DNA (10 ng) iliongezwa kwenye sahani zenye barcode kwa ajili ya utayarishaji wa maktaba na vitendanishi vyote na vifaa vya matumizi vilipakiwa kwenye chombo cha Ion Chef™. Utayarishaji wa maktaba otomatiki na ujumuishaji wa sampuli za maktaba yenye mikoba ulitayarishwa kwa kutumia kifaa cha Ion™. Qubit® 3.0 Fluorometer (Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA, USA) kulingana na maagizo ya mtengenezaji. Hatimaye, maktaba huunganishwa kwa uwiano sawa katika sampuli za sampuli za mirija ya maktaba ya Ion Chef™ (mirija yenye mipau) na kupakiwa kwenye chombo cha Ion Chef™. Ufuataji ulifanyika kwa kutumia Ion Torrent Fisher (Thermo Fisher Scientific) kwa kutumia Ion 510 Chip (Thermo Fisher Scientific).Uchambuzi wa data ulifanywa na Amplicon Suite (SmartSeq srl) na Ion Reporter Software.
Aina zote za majina zilifuata miongozo ya sasa ya Muungano wa Tofauti wa Jeni za Binadamu, unaopatikana mtandaoni (HGVS, http://www.hgvs.org/mutnomen). Umuhimu wa kimatibabu wa vibadala vya BRCA1/2 ulifafanuliwa kwa kutumia uainishaji wa Muungano wa Kimataifa wa ENIGMA (Mtandao Unaotegemea Ushahidi wa Kutafsiri Vijidudu vya Mutantenium/org). kushauriana na hifadhidata tofauti kama vile ARUP, BRCAEXCHANGE , ClinVar, IARC_LOVD, na UMD. Uainishaji unajumuisha kategoria tano tofauti za hatari: benign (aina ya I), ambayo inaweza kuwa mbaya (aina ya II), lahaja la umuhimu usio na uhakika (VUS, kitengo cha III), uwezekano wa pathogenic (aina ya IV), na athari ya mabadiliko ya VUS (aina ya IV), na athari ya kubadilika. muundo wa protini na kazi, chombo cha taarifa na upatikanaji wa hifadhidata 30.32
Ili kuangazia umuhimu wa kiafya unaowezekana kwa kila VUS, algoriti zifuatazo za utabiri wa hesabu za protini zilitumika: MUTATION TASTER, 33 PROVEAN-SIFT (http://provean.jcvi.org/index.php), POLYPHEN-2 (http:// /genetics.bwh.harvard.edu/pph2/) na Align-GVG (http://agvgd.hci.utah.edu/agvgd_input.php). Vibadala vilivyoainishwa kama darasa la 1 na 2 vilizingatiwa kuwa ni aina ya pori.
Mfuatano wa Sanger ulithibitisha kuwepo kwa kila kigezo cha pathogenic. Kwa ufupi, jozi ya vianzio mahususi viliundwa kwa kila kibadala kilichogunduliwa kwa kutumia BRCA1 na BRCA2 mfuatano wa marejeleo ya jeni (NG_005905.2, NM_007294.3 na NG_012772.3, NM9.000, NM9.000, ilifuatwa kwa mtiririko huo). kwa mpangilio wa Sanger.
Wagonjwa waliobainika kuwa hawana jeni la BRCA1/2 walijaribiwa kwa ukuzaji wa uchunguzi unaotegemea ligation kwa wingi (MLPA) kulingana na maagizo ya mtengenezaji ili kutathmini uwepo wa upangaji upya wa jeni kubwa (LGR). Kwa ufupi, sampuli za DNA hazibadilishwi na hadi 60 BRCA1 na BRCA2 zinatumika kuchunguza jeni mahususi. mlolongo wa takriban nyukleotidi 60 kwa urefu.Bidhaa za ukuzaji wa probe, zinazojumuisha seti ya kipekee ya amplikoni za PCR, kisha zilichanganuliwa kwa electrophoresis ya kapilari na programu ya Cofalyser.Net kwa kushirikiana na jedwali zinazofaa za kundi mahususi za Cofalyser (www.mrcholland.com).
Vigezo vilivyochaguliwa vya kiafya (daraja la histolojia na faharasa ya uenezi wa Ki-67%) vilihusishwa na kuwepo kwa BRCA1/2 PV, iliyokokotwa kwa kutumia programu ya Prism v. 8.4 kwa kutumia jaribio kamili la Fisher ikichukua kuwa thamani ya p <0.05 ni muhimu.
Kati ya Januari 2017 na Machi 2021, wagonjwa 455 walichunguzwa ili kubaini mabadiliko ya viini vya BRCA1/2. Upimaji wa mabadiliko ulifanywa katika Kituo cha Majaribio cha Oncology na Hematology cha Hospitali ya Policlinico. Kulingana na mwongozo wa Sicilian (http://www.gurs.regione.sicilia.it.it/Indicep. Gennaio 2020), the Rodolico of Catania – San Marco” kwa ujumla, wagonjwa 389 Kulikuwa na saratani ya matiti, saratani ya ovari 37, saratani ya kongosho 16, saratani ya tezi dume 8 na melanoma 5. Mgawanyo wa wagonjwa kulingana na aina ya saratani na matokeo ya uchambuzi umeonyeshwa kwenye Mchoro 1.
Kielelezo cha 1 kinaonyesha chati ya mtiririko inayoonyesha muhtasari wa utafiti. Wagonjwa wenye uvimbe wa matiti, melanoma, kongosho, kibofu, au ovari walijaribiwa kubaini mabadiliko katika jeni za BRCA1 na BRCA2.
Vifupisho: PVs, tofauti ya pathogenic; VUS, lahaja ya umuhimu usio na uhakika; WT, mlolongo wa aina ya mwitu BRCA1/2.
Tuliangazia masomo yetu kuhusu vikundi vya saratani ya matiti. Wagonjwa walikuwa na umri wa wastani wa miaka 49 (miaka 23-89) na wengi wao walikuwa wanawake (n=376, au 97%).
Kati ya masomo haya, 64 (17%) walikuwa na mabadiliko ya BRCA1/2 na wote walikuwa wanawake. Thelathini na tano (9%) walikuwa na PV na 29 (7.5%) walikuwa na VUS. Kumi na Saba (48.6%) ya lahaja 35 za pathogenic zilitokea katika BRCA1 na 18 (51.4%) katika BRCA2, wakati 51.2% BRCA18 (7%) na . katika BRCA2 (Takwimu 1 na 2). LGR haikuwepo katika uchanganuzi wa MLPA.
Kielelezo 2. Uchambuzi wa mabadiliko ya BRCA1 na BRCA2 katika wagonjwa wa saratani ya matiti 389. (A) Usambazaji wa anuwai za pathogenic (PV) (nyekundu), anuwai za umuhimu usio na uhakika (VUS) (machungwa), na WT (bluu) katika wagonjwa 389 wa saratani ya matiti; (B) Wagonjwa 389 wa saratani ya matiti Thelathini na tano (9%) walikuwa na BRCA1/2 variants pathogenic (PVs).Kati yao, 17 (48.6%) walikuwa BRCA1 PV flygbolag (nyekundu nyeusi) na 18 (51.4%) walikuwa BRCA2 flygbolag (nyekundu nyekundu); (C) 29 (7.5%) ya masomo 389 yalibeba VUS, 5 (17.2%) jeni za BRCA1 (rangi ya chungwa) na 24 (82.8%) jeni za BRCA2 (chungwa nyepesi).
Vifupisho: PVs, tofauti ya pathogenic; VUS, lahaja ya umuhimu usio na uhakika; WT, mlolongo wa aina ya mwitu BRCA1/2.
Tulichunguza tena kuenea kwa aina ndogo za molekuli za BC kwa wagonjwa walio na BRCA1/2 PV. Usambazaji ulijumuisha mwangaza wa A 2 (5.7%), 15 (42.9%) luminal B, 3 (8.6%) luminal B-HER2+, 2 (5.7%) HER2+ na 13 (37.1%) kati ya wagonjwa wa TNBC 2 (5%) - 2% BRCA. luminal B BC, 2 (11.8%) walikuwa na ugonjwa wa HER2+, na 10 (58.8%) walikuwa na TNBC.Tumors bila mabadiliko ya BRCA1 yalikuwa ama luminal A au luminal B-HER2+ (Kielelezo 3).Katika kikundi cha BRCA2-chanya, 10 (55.6%) uvimbe ulikuwa luminal B.3+72%, 3 B-72%, 3 (3%) (16.7%) TNBC na 2 (11.1%) zilikuwa luminal A (Kielelezo 3).Hakuna uvimbe wa HER2+ uliokuwepo katika kundi hili. Kwa hivyo, mabadiliko ya BRCA1 yameenea kwa wagonjwa wa TNBC, ilhali mabadiliko ya BRCA2 yanaonekana zaidi katika watu binafsi wa lumen B.
Kielelezo 3 Kuenea kwa aina ndogo za saratani ya matiti kwa wagonjwa walio na tofauti za pathogenic katika BRCA1 na BRCA2.Histograms zinazoonyesha usambazaji wa BRCA1- (nyekundu nyeusi) na BRCA2- (nyekundu nyepesi) PVs kati ya aina ndogo za molekuli za wagonjwa wa saratani ya matiti.Nambari zilizoripotiwa ndani ya kila sanduku zinawakilisha asilimia ya wagonjwa wenye BRCA1 ya saratani ya matiti PV1 na BRCA2 ya kila aina ya saratani ya matiti.
Vifupisho: PVs, tofauti ya pathogenic; HER2+, kipokezi cha ukuaji wa epidermal ya binadamu 2 chanya; TNBC, saratani ya matiti-hasi mara tatu.
Baadaye, tulitathmini aina na ujanibishaji wa jeni wa BRCA1 na BRCA2 PVs.Katika BRCA1 PV, tuliona lahaja 7 za nyukleotidi (SNVs), ufutaji 6, urudufishaji 3 na uingizaji 1. Ubadilishaji mmoja tu (c.5522delG) unawakilisha ugunduzi mpya wa kawaida uliogunduliwa katika PCA1. c.5035_5039delCTAAT.Mabadiliko haya yanahusisha ufutaji wa nyukleotidi tano (CTAAT) katika BRCA1 exon 15, na kusababisha uingizwaji wa leucine ya amino asidi na tyrosine kwenye kodoni 1679, na kutokana na mabadiliko ya fremu yenye mseto mbadala uliotabiriwa, mabadiliko mengine yote katika kodoni ya proteni hugunduliwa kwa trun trun moja tu. kesi.Hasa, moja ya PVs zilizoripotiwa ilikuwa katika eneo la makubaliano ya tovuti ya viungo (c.4357+1G>T) (Jedwali 1).
Kuhusu BRCA2 PV, tuliona ufutaji 6, SNV 6 na marudio 2. Hakuna mabadiliko yoyote kati ya hayo yaliyopatikana ni riwaya. Mabadiliko matatu yalijirudia katika idadi ya watu wetu, c.428dup na c.8487+1G>A iliyozingatiwa katika masomo 3, ikifuatiwa na c.5851_5854marekebisho ya mara mbili ya c. C katika exon 5 ya BRCA2, iliyotabiriwa kusimba protini iliyopunguzwa, isiyofanya kazi. Mabadiliko ya c.8487+1G>Mabadiliko hutokea katika eneo la utangulizi la BRCA2 intron 19 (± 1,2) na huathiri mfuatano wa makubaliano ya kuunganisha, na kusababisha utengamano wa protini. c.5851_5854delAGTT lahaja ya pathogenic inatokana na ufutaji wa nyukleotidi 4 kutoka nafasi za nyukleotidi 5851 hadi 5854 katika exoni ya 10 ya jeni ya BRCA2 na kusababisha mabadiliko ya kiutafsiri na kodoni ya kusimamisha mbadala iliyotabiriwa (p.S1951W kama ilivyoripotiwa hapo awali). c.631G>A na c.7008-2A>T ziligunduliwa kwa mgonjwa yuleyule.34 Mabadiliko ya kwanza yanahusisha uingizwaji wa adenosine (A) katika BRCA2 exon 7 na guanini (G) iliyo na nyukleotidi na kusababisha mabadiliko ya valine hadi isoleusini kwenye kodoni 211, asidi ya amino inaathiri sana aminoR asidi. splicing.Lahaja ya pili iko katika eneo la intronic na husababisha uingizwaji wa A hadi thymine (T) mara mbili kabla ya exon 13 ya usimbaji wa jeni BRCA2. Mabadiliko ya c.7008-2A>T yanaweza kutoa nakala nyingi za urefu tofauti. Zaidi ya hayo, katika kundi la BRCA2 PVs, mabadiliko 8 yalikuwa nje ya 22%.
Kisha tuliweka ramani za mabadiliko mabaya ya BRCA1/2 katika vikoa vya kazi na mikoa inayofunga protini (Mchoro 4). Katika jeni la BRCA1, 50% ya PVs zilipatikana katika eneo la nguzo ya saratani ya matiti (BCCR), wakati 22% ya mabadiliko yalikuwa katika eneo la kansa ya ovari (OCCR) (Mchoro 30 BRCA52 katika PV 4A). eneo la BCCR na 42.8% ya mabadiliko yalipatikana katika OCCR (Kielelezo 4B). Kisha, tulitathmini eneo la PV ndani ya BRCA1 na BRCA2 vikoa vya protini. Kwa protini ya BRCA1, tulipata PV tatu kwenye kitanzi na vikoa vya coil, na mabadiliko mawili katika kikoa cha BRCT4 PCAV, mag. kwa kikoa cha kurudia cha BRC, wakati mabadiliko 3 ya utangulizi na 3 ya kigeni yaligunduliwa katika vikoa vya oligo/oligosaccharide-binding (OB) na mnara (T) (Mchoro 4B).
Mchoro wa 4 Uwakilishi wa kiratibu wa protini za BRCA1 na BRCA2 na ujanibishaji wa anuwai za pathogenic. Takwimu hii inaonyesha usambazaji wa BRCA1 (A) na BRCA2 (B) lahaja za pathogenic kwa wagonjwa wa saratani ya matiti. Mabadiliko ya kigeni yanaonyeshwa kwa rangi ya samawati, huku vibadala vya intronic vinaonyeshwa kwa rangi ya chungwa. Urefu wa pau unawakilisha idadi ya kesi. Kikoa cha BRCA21 kilichoripotiwa. Protini ya BRCA1 ina kikoa cha kitanzi (RING) na mfuatano wa ujanibishaji wa nyuklia (NLS), kikoa-coil iliyoviringwa, kikoa cha nguzo cha SQ/TQ (SCD), na kikoa cha BRCA1 C-terminal (BRCT).(B) Protini ya BRCA2 ina marudio manane ya BRC, kikoa kinachofunga DNA chenye kikoa cha helikali/oligobinding tatu (Heligobinding tatu). mikunjo, kikoa cha mnara (T), na An NLS upande wa C. Maeneo yanayoitwa Eneo la Nguzo la Saratani ya Matiti (BCCR) na Eneo la Nguzo la Saratani ya Ovari (OCCR) yanaonyeshwa chini.*Inawakilisha mabadiliko yanayoamua kodoni za kuacha.
Kisha tukachunguza vipengele vya kiafya vya BC ambavyo vinaweza kuhusiana na kuwepo kwa BRCA1/2 PV. Rekodi za kliniki kamili zilipatikana kwa wagonjwa 181 BRCA1/2-hasi (wasio wabebaji) na wabebaji wote (n = 35). Kulikuwa na uwiano kati ya kiwango cha kuenea kwa tumor na daraja.
Tulikokotoa usambazaji wa Ki-67 kulingana na wastani wa kundi letu (25%, masafa <10-90%). Mada zilizo na Ki-67 <25% zilifafanuliwa kuwa "chini Ki-67″, ilhali watu walio na thamani ≥ 25% walizingatiwa "Ki-67" ya juu ilizingatiwa "Ki-67″.Tofauti muhimu00 (Ki-60) ilipatikana. Wafanyabiashara wa BRCA1 PV (Mchoro 5A).
Kielelezo cha 5 Uwiano wa Ki-67 na usambazaji wa daraja kwa wanawake wa saratani ya matiti walio na BRCA1 na BRCA2 PVs. mgawo wa wagonjwa wa saratani ya BC katika vikundi vya daraja la histolojia (G2 na G3) kulingana na hali ya mabadiliko ya BRCA1 na BRCA2 (masomo ya WT, BRCA1 na BRCA2 wabebaji wa PVs).
Vile vile, tulikagua ikiwa daraja la uvimbe linahusiana na kuwepo kwa BRCA1/2 PV. Kwa kuwa G1 BC haikuwepo katika idadi ya watu wetu, tuligawanya wagonjwa katika makundi mawili (G2 au G3). Kulingana na matokeo ya Ki-67, uchanganuzi ulifichua uwiano muhimu wa kitakwimu kati ya daraja la uvimbe na mabadiliko ya BRCA1, na uwiano wa juu zaidi wa vibeba uvimbe wa G3 ikilinganishwa na BRCA (p<0.005) (Kielelezo 5B).
Maendeleo katika teknolojia ya kupanga DNA yamewezesha maendeleo ambayo hayajawahi kufanywa katika upimaji wa kijeni wa BRCA1/2, kukiwa na athari muhimu kwa wagonjwa walio na historia ya familia ya saratani. Hadi sasa, takriban lahaja 20.000 za BRCA1/2 zimetambuliwa na kuainishwa kulingana na Jumuiya ya Kiamerika ya Jenetiki ya Kimatibabu 35 na mfumo wa ENIGMA unaojulikana BRCA136 vizuri. kwa upana katika maeneo ya kijiografia.37 Ndani ya Italia, kiwango cha BRCA1/2 PVs kilianzia 8% hadi 37%, ikionyesha tofauti kubwa ya ndani ya nchi.38,39 Ikiwa na wakazi karibu milioni 5, Sicily ni eneo la tano kwa ukubwa nchini Italia kwa idadi ya wakazi. kisiwa hicho.
Utafiti wetu ni mojawapo ya ripoti za kwanza kuhusu matukio ya BRCA1/2 PV kwa wagonjwa wa BC mashariki mwa Sicily.28 Tuliangazia uchanganuzi wetu kwenye BC, kwa kuwa huu ndio ugonjwa unaojulikana zaidi katika kundi letu.
Wakati wa kupima wagonjwa wa 389 BC, 9% walibeba BRCA1/2 PVs, zilizosambazwa sawasawa kati ya BRCA1 na BRCA2. Matokeo haya yanawiana na yale yaliyoripotiwa hapo awali katika idadi ya watu wa Italia.28 Inashangaza, 3% (13/389) ya kundi letu walikuwa wanaume. Kiwango hiki ni cha juu zaidi kuliko inavyotarajiwa kwa saratani ya matiti ya wanaume BC (1% ya 40% ya idadi ya watu waliochaguliwa kulingana na saratani ya matiti ya BC) Hatari ya mabadiliko ya BRCA1/2. Hata hivyo, hakuna hata mmoja wa wanaume hawa aliyeanzisha BRCA1/2 PV, kwa hivyo walikuwa watahiniwa wa uchanganuzi zaidi wa molekuli ili kuondoa uwepo wa mabadiliko yasiyo ya kawaida sana kama vile PALB2, RAD51C na D, miongoni mwa mengine. Ainisho za umuhimu usio na uhakika zilipatikana katika 7% ya masomo ambayo matokeo ya BRCA2 yaliyokuwa na matokeo haya yalikuwepo. ushahidi.28,41,42
Tulipochanganua usambazaji wa aina ndogo za molekuli za BC katika wanawake waliobadilikabadilika BRCA1/2, tulithibitisha uhusiano unaojulikana kati ya TNBC na BRCA1 PV (58.8%) na kati ya B BC na BRCA2 PV (55.6%).
Kisha tunazingatia aina na eneo la BRCA1/2 PV.Katika kundi letu, BRCA1 PV ya kawaida ilikuwa c.5035_5039delCTAAT.Ingawa Incorvaia et al. haikuelezea lahaja hii katika kundi lao la Sicilian, waandishi wengine wameiripoti kama kijidudu BRCA1 PV.34 PV kadhaa za BRCA1 zilipatikana katika kundi letu - kwa mfano c.181T>G, c.514del, c.3253dupA na c.5266dupC - ambazo mbili zimezingatiwa katika 2BR1 za Sici. (c.181T>G na c.5266dupC) hupatikana kwa kawaida katika Wayahudi wa Ashkenazi wa Ulaya Mashariki na Kati (Poland, Czech), Kislovenia, Austria, Hungarian, Belarusi na Ujerumani ), 44,45 na, Marekani na Argentina, hivi karibuni ilifafanuliwa kuwa "lahaja ya vijidudu vya kawaida" katika OCdel ya 4 ya wagonjwa wa Kiitaliano 4 BC hapo awali ilitambuliwa. katika wagonjwa 8 wa saratani ya matiti kutoka kaskazini mwa Sicily huko Palermo na Messina. Inashangaza, hata Incorvaia et al. ilipata lahaja ya c.3253dupA katika baadhi ya familia huko Catania.28 PVs za BRCA2 zinazowakilisha zaidi ni c.428dup, c.5851_5854delAGTT na lahaja ya intronic c.8487+1G>A, ambazo zimeripotiwa kwa undani zaidi 28 kwa mgonjwa katika Palermo na c.528AG C. ilionekana katika kaya kaskazini-magharibi mwa Sicily, hasa katika maeneo ya Trapani na Palermo, ilhali c.5851_5854delAGTT PV ilizingatiwa katika kaya za kaskazini-magharibi mwa Sicily.Lahaja ya 8487+1G>A ilikuwa ya kawaida zaidi katika masomo kutoka Messina, Palermo, na Caltanissetta.28 Rebbeck et al. ilielezea hapo awali mabadiliko ya c.5851_5854delAGTT nchini Kolombia.37 Nyingine BRCA2 PV, c.631+1G>A, imepatikana katika BC na wagonjwa wa OC kutoka Sicily (Agrigento, Siracusa na Ragusa).28 Hasa, tuliona kuwepo kwa aina mbili za BRCA2 na 312>A za BRCA2 (BRCA2>A). c.7008-2A>T) katika mgonjwa sawa, ambayo tulidhani kuwa imetengwa katika hali ya cis, kama ilivyoripotiwa hapo awali kama hivyo.34,46 Mabadiliko haya ya uble ya BRCA2 yanazingatiwa mara kwa mara katika eneo la Italia na imepatikana kuanzisha kodoni za kusimama kabla ya wakati, na kuathiri mgawanyiko wa RNA ya messenger na kusababisha kushindwa kwa protini ya BRCA2,8.
Pia tulichora ramani za BRCA1 na BRCA2 PVs katika maeneo ya kuweka OCCR na BCCR ya vikoa vya protini na jeni. Maeneo haya yalielezewa na Rebbeck et al. kama maeneo hatarishi ya kupata saratani ya ovari na ya matiti, mtawalia.49 Hata hivyo, ushahidi kuhusu uhusiano kati ya eneo la lahaja za viini na hatari ya saratani ya matiti au ovari bado ni ya utata.28,50-52 Katika idadi yetu ya watu, PV za BRCA1 zilipatikana zaidi katika eneo la BCCR, ilhali PV za BRCA2 hazikuweza kupatikana katika eneo lolote. maeneo ya kuweka OCCR na BCCR na vipengele vya BC. Hii inaweza kuwa kutokana na idadi ndogo ya wagonjwa walio na mabadiliko ya BRCA1/2. Kwa mtazamo wa kikoa cha protini, BRCA1 PVs husambazwa pamoja na protini nzima, na mabadiliko ya BRCA2 yanapatikana kwa upendeleo katika kikoa cha kurudia cha BRC.
Hatimaye, tuliunganisha vipengele vya kiafya vya BC na BRCA1/2 PV. Kutokana na idadi ndogo ya wagonjwa iliyojumuishwa, tulipata tu uwiano mkubwa kati ya Ki-67 na daraja la uvimbe. Ijapokuwa tathmini na tafsiri ya Ki-67 inasalia na utata, ni hakika kwamba viwango vya juu vya kuenea vinahusishwa na ongezeko la hatari ya kupunguzwa kwa ugonjwa huo na kupungua kwa ugonjwa huo. "juu" na "chini" Ki-67 ni 20%.Hata hivyo, kizingiti hiki hakitumiki kwa idadi yetu ya wagonjwa wa mabadiliko ya BRCA1/2, ambayo ina thamani ya wastani ya Ki-67 ya 25%.Mtindo huu wa viwango vya juu vya Ki-67 unaweza kuelezewa na kuenea kwa vikundi vyetu vya mwanga vya B na TNBC, ambavyo vinaonyesha ushahidi mdogo wa A-6 unaonyesha kuwa uvimbe wa Ki-6 ulikuwa mkubwa zaidi. (25-30%) inaweza kuwaweka wagonjwa vizuri zaidi kulingana na ubashiri wao.53,54 Kutokana na matokeo ya uchanganuzi wetu, uwiano mkubwa haushangazi.Hutokea kati ya alama za juu za Ki-67 na uwepo wa BRCA1 PV. Kwa kweli, uvimbe unaohusiana na BRCA1 ni mfano wa TNBC na huonyesha vipengele vya ukatili zaidi.16,17,17.
Kwa kumalizia, utafiti huu unatoa ripoti kuhusu hali ya mabadiliko ya BRCA1/2 katika kundi la BC kutoka mashariki mwa Sicily. Kwa ujumla, matokeo yetu yanawiana na ushahidi uliokuwepo hapo awali, katika suala la kuenea kwa mabadiliko na vipengele vya kiafya katika BC. Tafiti zaidi katika idadi kubwa ya BRCA1/2-mutant BC, uchanganuzi uliopanuliwa wa mabadiliko ya BC, kama vile uchanganuzi uliopanuliwa. ya PV ambazo ni tofauti na mara chache kuliko BRCA1/2. Hii itaruhusu utambuzi na usimamizi sahihi wa idadi inayoongezeka ya masomo katika hatari kubwa ya saratani kutokana na mabadiliko ya kijeni.
Tulithibitisha kuwa wagonjwa walitia saini kibali cha ufahamu cha kutoa sampuli zao za uvimbe bila kujulikana kwa madhumuni ya utafiti. Wagonjwa wote walitia saini idhini iliyoandikwa kulingana na Azimio la Helsinki. Kulingana na sera ya AOU Policlinico "G.Rodolico - S.Marco", utafiti huu haukuondolewa kwenye ukaguzi wa kimaadili kwa sababu uchambuzi wa BRCA1/2 ulifanywa kulingana na mazoezi ya kimatibabu ya wagonjwa na pia idhini yao ilifanywa kulingana na mazoezi ya kimatibabu. data kwa madhumuni ya utafiti.
Tunamshukuru Prof. Paolo Vigneri kwa msaada wake katika kuhudumia wagonjwa wa saratani ya matiti kama ilivyoombwa na Kamati ya Maadili.
Federica Martorana anaripoti heshima kutoka kwa Istituto Gentili, Eli Lilly, Novartis, Pfizer. Waandishi wengine wanatangaza hakuna migongano ya maslahi katika kazi hii.
1. Sung H, Ferlay J, Siegel RL, et al.Global Cancer Statistics 2020: GLOBOCAN inakadiria matukio na vifo vya saratani 36 katika nchi 185 duniani kote.CA Cancer J Clin.2021;71(3):209-249.3ca32:16