ጃቫስክሪፕት በአሁኑ ጊዜ በአሳሽዎ ውስጥ ተሰናክሏል። ጃቫስክሪፕት ሲሰናከል የዚህ ድህረ ገጽ አንዳንድ ባህሪያት አይሰሩም።
የተወሰኑ ዝርዝሮችዎን እና የፍላጎትዎን ልዩ መድሃኒት በመጠቀም ይመዝገቡ እና የሚያቀርቡትን መረጃ በሰፊው የውሂብ ጎታችን ውስጥ ካሉ መጣጥፎች ጋር እናዛምዳለን እና ወዲያውኑ የፒዲኤፍ ቅጂ በኢሜል እንልክልዎታለን።
作者 ስቴላ ኤስ፣ ቪታሌ ኤስአር፣ ማርቶራና ኤፍ፣ ማሲሚኖ ኤም፣ ፓቮን ጂ፣ ላንዛፋሜ ኬ፣ ቢያንካ ኤስ፣ ባሮን ሲ፣ ጎርጎኔ ሲ፣ ፊቸራ ኤም፣ ማንዜላ ኤል
Stefania Stella, 1,2 Silvia Rita Vitale, 1,2 Federica Martorana, 1,2 Michele Massimino, 1,2 Giuliana Pavone, 3 Katia Lanzafame, 3 Sebastiano Bianca, 3 Sebastiano Bianca, 4 Chiara Barone, 5 Cristina Gorgone, 6Marco Fichera, 12,Liviamental Clinical ሕክምና, የካታኒያ ዩኒቨርሲቲ, ካታኒያ, 95123, ጣሊያን; 2 የሙከራ ኦንኮሎጂ እና የደም ህክምና ማዕከል, AOU Policlinico "G.Rodolico - ሳን ማርኮ", ካታኒያ, 95123, ጣሊያን; 3 የሕክምና ኦንኮሎጂ, AOU Policlinico "ጂ. ሮዶሊኮ - ሳን ማርኮ", ካታኒያ, 95123, ጣሊያን; 4 የሕክምና ጄኔቲክስ, ARNAS Garibaldi, Catania, 95123, ጣሊያን; 5 የሕክምና ጄኔቲክስ፣ ASP፣ ሲራኩስ፣ 96100፣ ጣሊያን፤ 6 የባዮሜዲካል እና ባዮቴክኖሎጂ ሳይንስ ክፍል፣ የካታኒያ ዩኒቨርሲቲ፣ የሕክምና ጄኔቲክስ፣ ካታኒያ፣ ጣሊያን፣ 95123፤ 7ኦአሲ የምርምር ተቋም-IRCCS፣ ትሮይና፣ 94018፣ ጣሊያን ኮሙኒኬሽንስ፡ እስቴፋኒያ ስቴላ፣ ስልክ +39 095 378 1946፣ ኢሜይል [email protected]፤ [email protected] ዓላማ፡ በBRCA1 እና BRCA2 ውስጥ የሚገኙ የጀርምላይን ሚውቴሽን እና የተቋቋመ የጡት ካንሰር (BC)፣ ኦቫሪ (OC) እና ሌሎች ከዕድሜ ልክ ካንሰር ጋር ተያይዘው የሚመጡ ሌሎች የጀርምላይን ሚውቴሽን። የBRCA ጂን ምርመራ የግለሰብን አደጋ ለመገምገም እንዲሁም በጤናማ ተሸካሚዎች ላይ የመከላከያ ዘዴዎችን ለማግኘት እና በካንሰር በሽተኞች ላይ ሕክምናዎችን ለማበጀት ቁልፍ ነው። የBRCA1 እና BRCA2 ለውጦች ስርጭት በጂኦግራፊያዊ ክልሎች በስፋት ይለያያል፣ እና በሲሲሊ ቤተሰቦች ውስጥ ስለ BRCA በሽታ አምጪ ልዩነቶች መረጃ ቢኖርም፣ በምስራቅ ሲሲሊ ውስጥ በተለይ ህዝቦችን ያነጣጠሩ ጥናቶች የሉም። የጥናታችን ዓላማ ከምስራቅ ሲሲሊ የመጡ የBC ታካሚዎች ቡድን ውስጥ የBRCA በሽታ አምጪ የጀርምላይን ለውጦችን ክስተት እና ስርጭት መመርመር እና ከሚቀጥለው ትውልድ ቅደም ተከተል ጋር ያላቸውን ግንኙነት መገምገም ነበር። የለውጦች መኖር ከዕጢ ደረጃ እና ከእድገት መረጃ ጠቋሚ ጋር የተቆራኘ ነው። ውጤቶች፡ በአጠቃላይ፣ 35 ታካሚዎች (9%) የBRCA በሽታ አምጪ ተለዋጭ ... ታካሚዎች። ከሌሎቹ ተሸካሚዎች ጋር ሲነጻጸር፣ የBRCA1 ልዩነቶች ያሏቸው ሰዎች በከፍተኛ ሁኔታ ከፍ ያለ የቲዩመር ደረጃ እና የመራቢያ መረጃ ጠቋሚ ነበራቸው። መደምደሚያዎች፡- ግኝቶቻችን በምስራቅ ሲሲሊ በሚገኙ የBC ታካሚዎች ውስጥ የBRCA ሚውቴሽን ሁኔታ አጠቃላይ እይታ ይሰጣሉ እና የNGS ትንተና በዘር የሚተላለፍ BC ያለባቸውን ታካሚዎች በመለየት ረገድ ያለውን ሚና ያረጋግጣሉ። በአጠቃላይ፣ እነዚህ መረጃዎች በሚውቴሽን ተሸካሚዎች ላይ የካንሰርን ትክክለኛ መከላከል እና ህክምና ለማረጋገጥ የBRCA ምርመራን የሚደግፉ ቀደም ሲል ከተረጋገጡ ማስረጃዎች ጋር የሚጣጣሙ ናቸው።
የጡት ካንሰር (BC) በዓለም ዙሪያ በጣም የተለመደ አደገኛ እና በሴቶች ላይ ገዳይ የሆነ የካንሰር አይነት ነው።1 የBC ትንበያ እና ክሊኒካዊ ባህሪን የሚወስኑት ባዮሎጂያዊ ባህሪያት በስፋት የተጠኑ እና በጊዜ ሂደት በከፊል የተብራሩ ናቸው። እንደ እውነቱ ከሆነ፣ በአሁኑ ጊዜ በርካታ ምትክ ማርከሮች BCን በተለያዩ ሞለኪውላዊ ንዑስ ዓይነቶች ለመመደብ ያገለግላሉ። እነሱም ኢስትሮጅን (ER) እና/ወይም ፕሮጄስትሮን ተቀባይ (PgR)፣ የሰው ኤፒደርማል የእድገት ፋክተር ተቀባይ 2 (HER2) ማጉያ፣ የፕሮብሌሽን ኢንዴክስ Ki-67 እና የቲሞር ደረጃ (G) ናቸው።2 የእነዚህ ተለዋዋጮች ጥምረት የሚከተሉትን የBC ምድቦች ለይቷል፡ 1) የER እና/ወይም PgR አገላለጽ የሚያሳዩ የሉሚናል ዕጢዎች 75% BCs ነበሩ። እነዚህ ዕጢዎች Ki-67 ከ20% በታች እና HER2 አሉታዊ በሆነበት ጊዜ Luminal B እና Ki-67 ከ20% በላይ እና HER2 ማጉያ በሚኖርበት ጊዜ Luminal B ተከፍለዋል። 2) የER እና PgR አሉታዊ የሆኑ ነገር ግን የHER2 ማጉላትን የሚያሳዩ የHER2+ ዕጢዎች። ይህ ቡድን ከሁሉም የጡት ዕጢዎች 10% ይይዛል፤ 3) የER እና PgR አገላለጽ እና የHER2 ማጉላትን የማያሳይ ሶስትዮሽ አሉታዊ የጡት ካንሰር (TNBC) 15% የሚሆኑትን የጡት ካንሰሮችን ይይዛል።2-4
ከእነዚህ የቢሲ ንዑስ ዓይነቶች መካከል የቲዩመር ደረጃ እና የፕሮፓጋንዳ ኢንዴክስ በቀጥታ እና በተናጥል ከቲዩመር ጠበኛነት እና ትንበያ ጋር የተያያዙ የመስቀለኛ ክፍል ባዮማርከሮችን ይወክላሉ።5,6
ከላይ ከተጠቀሱት ባዮሎጂያዊ ባህሪያት በተጨማሪ፣ ባለፉት ጥቂት ዓመታት ውስጥ ወደ ቢሲ እድገት የሚያመሩ የወረሱ የጄኔቲክ ለውጦች ሚና እየጨመረ መጥቷል።7 ከ10 የጡት ዕጢዎች ውስጥ 1 የሚሆኑት በተወሰኑ ጂኖች ውስጥ ባሉ የጀርም ለውጦች ምክንያት ይወርሳሉ።8 ከ180,000 በላይ ሴቶችን ያካተቱ ሁለት ትላልቅ ኤፒዲሚዮሎጂያዊ ጥናቶች በቅርቡ ለዘር የሚተላለፍ BC ተጠያቂ የሆኑትን ስምንት ጂኖች (ማለትም ATM፣ BARD1፣ BRCA1፣ BRCA2፣ CHK2፣ PALB2፣ RAD51C፣ እና RAD51D) ቡድን ለይተዋል። ከእነዚህ ጂኖች መካከል፣ BRCA1 እና BRCA2 (ከዚህ በኋላ BRCA1/2 ተብለው ይጠራሉ) ከጡት ዕጢዎች እድገት ጋር በጣም ጠንካራ ትስስር አሳይተዋል።9-12 እንደ እውነቱ ከሆነ፣ የጀርምላይን BRCA1/2 ሚውቴሽን የቢሲ እንዲሁም ሌሎች አደገኛ ዕጢዎችን ጨምሮ የዕድሜ ልክ አደጋን በእጅጉ ይጨምራል፣ ኦቫሪያን፣ ፕሮስቴት፣ ፓንጀራክቲክ፣ ኮሎሬክታል እና ሜላኖማን። ከ13 እስከ 80 ዓመት ዕድሜ ባለው ጊዜ ውስጥ፣ የቢሲ ድምር ክስተት በBRCA1 በሽታ አምጪ ተለዋጭ (PV) ባላቸው ሴቶች ላይ 72% እና በሴቶች ላይ 69% ነው። BRCA2 PV.14
በተለይም፣ በቅርቡ የወጣ አንድ ህትመት የቢሲ አደጋ በ PV አይነት ላይ የተመሰረተ መሆኑን ይጠቁማል። እንዲያውም፣ ከተዛማጅ በሽታ አምጪ ተለዋዋጮች ጋር ሲነጻጸር፣ በተለይም በ BRCA1 ጂን ውስጥ የሚታዩት ግልጽ የሆኑ የስህተት ልዩነቶች፣ በተለይም በአረጋውያን ሴቶች ላይ፣ የቢሲ የመያዝ እድልን ከመቀነስ ጋር የተቆራኙ ናቸው።15
የBRCA1 ወይም BRCA2 PV መኖር ከተለያዩ ባዮሎጂያዊ እና ክሊኒካዊ የፓቶሎጂ ባህሪያት ጋር የተያያዘ ነበር።16,17 ከBRCA1 ጋር የተያያዙ BCs ክሊኒካዊ ጠበኛ፣ ደካማ ልዩነት ያላቸው እና በከፍተኛ ሁኔታ የሚባዙ ናቸው። እነዚህ ዕጢዎች ብዙውን ጊዜ ሶስት ጊዜ አሉታዊ ናቸው እና የመጀመሪያ እድሜ አላቸው። በBRCA2 በተለወጡ ታካሚዎች ላይ የሚከሰቱ ዕጢዎች በተለምዶ መካከለኛ እና በደንብ የተለዩ ደረጃዎች እና ተለዋዋጭ የፕሮሊፈሬሽን ኢንዴክሶችን ያሳያሉ። እነዚህ ዕጢዎች በሉመን ቢ ውስጥ በብዛት የሚገኙ ሲሆን ብዙውን ጊዜ በአረጋውያን ላይ ይከሰታሉ።16-18 በተለይም በBRCA1 እና BRCA2 ውስጥ ያሉ ሚውቴሽኖች ለተወሰኑ ሕክምናዎች ስሜታዊነትን ይጨምራሉ፣ ይህም የፕላቲነም ጨዎችን እና እንደ ፖሊ(ADP-ribose) polymerase inhibitors (PARPi) ያሉ የታለሙ መድኃኒቶችን ያካትታል።19,20
ባለፉት ጥቂት ዓመታት ውስጥ፣ በክሊኒካዊ ልምምድ ውስጥ የሚቀጥለው ትውልድ ቅደም ተከተል (NGS) መተግበር ቁጥራቸው እየጨመረ የመጣ የቢሲ ታካሚዎች ለካንሰር ተጋላጭነት ሲንድሮም ሞለኪውላዊ ምርመራ እንዲያደርጉ አስችሏቸዋል፣ ይህም BRCA1/2.21ን ጨምሮ። በተመሳሳይ ጊዜ፣ የቤተሰብ ታሪክን፣ የስነሕዝብ እና የክሊኒካዊ ፓቶሎጂ ባህሪያትን በተመለከተ ትክክለኛ መስፈርቶች ላይ የተመሰረቱ ትርጓሜዎች ለBRCA1/2 ምርመራ ብቁ የሆኑ ግለሰቦችን በተሻለ ሁኔታ ለመለየት።22,23 በዚህ አውድ፣ በተወሰኑ ህዝቦች ላይ በBRCA1/2 ምርመራ ላይ ማስረጃዎች እየተከማቹ ነው፣ ይህም በጂኦግራፊያዊ ክልሎች ውስጥ ልዩነቶችን ያጎላል።24–27 በምዕራባዊ ሲሲሊ ውስጥ ስለ BC ቡድን ሪፖርቶች ቢኖሩም፣ በምስራቃዊ ሲሲሊ ህዝብ ላይ በBRCA1/2 ምርመራ ላይ ጥቂት መረጃዎች ይገኛሉ።28,29
እዚህ ላይ ከምስራቅ ሲሲሊ በመጡ የቢሲ ታካሚዎች ላይ የጀርምላይን BRCA1/2 ምርመራ ውጤቶችን እንገልፃለን፣ ይህም የBRCA1 ወይም BRCA2 ሚውቴሽን መኖር ከእነዚህ ዕጢዎች ዋና ዋና ክሊኒካዊ የፓቶሎጂ ባህሪያት ጋር የበለጠ ይዛመዳል።
በፖሊክሊኒኮ ሆስፒታል ሮዶሊኮ - ሳን ማርኮ በሚገኘው “የሙከራ ኦንኮሎጂ እና ሄማቶሎጂ ማዕከል” ላይ የኋላ ጥናታዊ ጥናት ተካሂዷል። ከጥር 2017 እስከ መጋቢት 2021 ድረስ፣ በጡት እና ኦቫሪያን፣ ሜላኖማ፣ የፓንጀራ ወይም የፕሮስቴት ካንሰር ያለባቸው በአጠቃላይ 455 ታካሚዎች ለBRCA/2 የጄኔቲክ ምርመራ ወደ ሞለኪውላር የምርመራ ላቦራቶሪያችን ተልከዋል። ይህ ጥናት የተካሄደው በሄልሲንኪ መግለጫ መሠረት ሲሆን ሁሉም ተሳታፊዎች ከሞለኪውላር ትንተና በፊት በጽሑፍ የተረጋገጠ ፈቃድ ሰጥተዋል።
የቢሲ ሂስቶሎጂካል እና ባዮሎጂካል ባህሪያት (ER፣ PgR፣ HER2 ሁኔታ፣ Ki-67 እና ደረጃ) በዋና ባዮፕሲ ወይም በቀዶ ጥገና ናሙናዎች ላይ ተገምግመዋል፣ ኃይለኛ የቲዩመር ክፍሎችን ብቻ ከግምት ውስጥ በማስገባት። በእነዚህ ባህሪያት ላይ በመመስረት፣ BCs እንደሚከተለው ተመድበዋል፡- ሉሚናል ኤ (ER+ እና/ወይም PgR+፣ HER2-፣ Ki-67<20%)፣ ሉሚናል ቢ (ER+ እና/ወይም PgR+፣ HER2-፣ Ki-67≥20%)፣ ሉሚናል ቢ-HER2+ (ER እና/ወይም PgR+፣ HER2+)፣ HER2+ (ER እና PgR-፣ HER2+) ወይም ሶስትዮሽ ኔጌቲቭ (ER እና PgR-፣ HER2-)።
የBRCA1 እና የBRCA2 ሚውቴሽን ሁኔታን ከመገምገሙ በፊት፣ ኦንኮሎጂስት፣ የጄኔቲክስ ባለሙያ እና የሥነ ልቦና ባለሙያን ጨምሮ ባለብዙ ዘርፍ ቡድን ለእያንዳንዱ ታካሚ የBRCA1 እና/ወይም BRCA1 መኖርን ወይም በBRCA2 ጂን ውስጥ ከፍተኛ የ PV ተጋላጭነት ላላቸው ግለሰቦች የቲዩመር ጄኔቲክስ ምክክር አካሂዷል። የታካሚዎች ምርጫ የተከናወነው በጣሊያን የሕክምና ኦንኮሎጂ ማህበር (AIOM) መመሪያዎች እና በአካባቢው የሲሲሊያን ምክሮች መሠረት ነው።30,31 እነዚህ መስፈርቶች የሚከተሉትን ያካትታሉ፡ (i) በተጋላጭነት ጂኖች ውስጥ የታወቁ በሽታ አምጪ ተለዋጮች የቤተሰብ ታሪክ (ለምሳሌ፣ BRCA1፣ BRCA2፣ TP53፣ PTEN)፤ (ii) BC ያላቸው ወንዶች፤ (iii) BC እና OC ያላቸው፤ (iv) BC እና OC ያላቸው ሴቶች <36 ዓመት፣ TNBC <60 ዓመት ወይም የሁለትዮሽ BC <50 ዓመት፤ (v) BC <50 ዓመት የግል የህክምና ታሪክ እና ቢያንስ አንድ የመጀመሪያ ደረጃ ዘመድ፡ (a) BC < 50 ዓመት፤ (ለ) በማንኛውም ዕድሜ ላይ ያለ ጭስ የማያስከትል እና ድንበር የሌለው OC፤ (ሐ) የሁለትዮሽ BC፤ (መ) ወንድ BC፤ (ሠ) የፓንክሪያስ ካንሰር፤ (ረ) የፕሮስቴት ካንሰር፤ (vi) ሁለት ወይም ከዚያ በላይ የ BC ከ50 ዓመት በላይ የግል ታሪክ እና የ BC፣ OC ወይም የፓንክሪያስ ካንሰር የቤተሰብ ታሪክ እርስ በርስ የመጀመሪያ ደረጃ ዘመዶች ለሆኑ ዘመዶች (እሷ የመጀመሪያ ደረጃ ዘመዶች የሆኑ ዘመዶችን ጨምሮ)፤ (vii) የ OC የግል ታሪክ እና ቢያንስ አንድ የመጀመሪያ ደረጃ ዘመድ፡ (ሀ) BC <50 ዓመት፤ (ለ) NOC፤ (ሐ) የሁለትዮሽ BC፤ (መ) ወንድ BC፤ (vii) ከፍተኛ ደረጃ serous OC ያላት ሴት።
ከእያንዳንዱ ታካሚ 20 ሚሊ ሊትር የደም ናሙና ተወስዶ ወደ EDTA ቱቦዎች (BD Biosciences) ተሰብስቧል። የጂኖሚክ ዲኤንኤ በአምራቹ መመሪያ መሰረት ከ0.7 ሚሊ ሊትር ሙሉ የደም ናሙናዎች QIAsymphony DSP DNA Midi kit Isolation Kit (QIAGEN፣ Hilden፣ Italy) በመጠቀም ተለይቷል እና በQubit® 3.0 Fluorometer (Thermo Fisher Scientific፣ Waltham፣ MA፣ USA) በኩል አልፏል። የዒላማ ማበልጸጊያ እና የቤተ-መጽሐፍት ዝግጅት የሚከናወኑት በ Oncomine™ BRCA የምርምር ሙከራ ሼፍ ሲሆን በአምራቹ መመሪያ መሰረት በራስ-ሰር የቤተ-መጽሐፍት ዝግጅት ለማድረግ ወደ Ion AmpliSeq™ Chef Reagents DL8 ኪት ለመጫን ዝግጁ ነው። ኪቱ ሁሉንም BRCA1 (NM_007300.3) እና BRCA2 (NM_000059.3) ጂኖችን ለማጥናት የሚያገለግሉ ሁለት ባለብዙ ፒሲአር ፕሪመር ገንዳዎችን ያካትታል። በአጭሩ፣ ለቤተ-መጽሐፍት ዝግጅት 15 µL ከእያንዳንዱ የተሟሟ ናሙና ዲኤንኤ (10 ng) ወደ ባርኮድ ሰሌዳዎች ተጨምሮ ሁሉም ሬጀንቶች እና ፍጆታዎች በ Ion Chef™ መሳሪያ ላይ ተጭነዋል። በራስ-ሰር የቤተ-መጽሐፍት ዝግጅት እና ባርኮድ የተደረገ የናሙና ቤተ-መጽሐፍት ክምችት በ Ion Chef™ መሳሪያ ላይ ተካሂዷል። ከዚያም የተዘጋጁ ቤተ-መጽሐፍት ብዛት በአምራቹ መመሪያ መሠረት በ Qubit® 3.0 Fluorometer (Thermo Fisher Scientific፣ Waltham፣ MA፣ USA) ተገምግሟል። በመጨረሻም፣ ቤተ-መጽሐፍት በ Ion Chef™ ቤተ-መጽሐፍት ናሙና ቱቦዎች (ባርኮድ የተደረገባቸው) ውስጥ በእኩል መጠን ጥምርታዎች ይጣመራሉ። ቱቦዎች) እና በ Ion Chef™ መሳሪያ ላይ ተጭነዋል። ቅደም ተከተላቸው የተከናወነው Ion Torrent S5 (Thermo Fisher Scientific) መሳሪያ (Thermo Fisher Scientific) በመጠቀም Ion 510 ቺፕ (Thermo Fisher Scientific) በመጠቀም ነው። የውሂብ ትንተና የተከናወነው በአምፒሊኮን ስዊት (SmartSeq srl) እና በ Ion Reporter ሶፍትዌር ነው።
ሁሉም የተለያዩ ስያሜዎች በመስመር ላይ የሚገኘውን የሰው ጂኖም ልዩነት ኮንሰርቲየም የአሁኑን መመሪያዎች ተከትለዋል (HGVS፣ http://www.hgvs.org/mutnomen)። የBRCA1/2 ልዩነቶች ክሊኒካዊ ጠቀሜታ የተገለጸው በዓለም አቀፍ ኮንሰርቲየም ENIGMA (የጀርምላይን ሚውታንት አሌሎችን ለመተርጎም በማስረጃ ላይ የተመሠረተ አውታረ መረብ፣ https://enigmaconsortium.org/) እና እንደ ARUP፣ BRCAEXCHANGE፣ ClinVar፣ IARC_LOVD እና UMD ያሉ የተለያዩ የውሂብ ጎታዎችን በማማከር ነው። ምደባው አምስት የተለያዩ የአደጋ ምድቦችን ያካትታል፡- ጤናማ (ምድብ I)፣ ምናልባትም ጤናማ (ምድብ II)፣ እርግጠኛ ያልሆነ ጠቀሜታ ልዩነት (VUS፣ ምድብ III)፣ ሊሆን የሚችል በሽታ አምጪ (ምድብ IV) እና በሽታ አምጪ (ምድብ V)። VarSome እንዲሁም ሚውቴሽን በፕሮቲን መዋቅር እና ተግባር ላይ ያለውን ተጽእኖ ተንትኗል፣ ይህም ወደ 30 የውሂብ ጎታዎች መዳረሻ ያለው መረጃ ሰጪ መሣሪያ ነው።32
ለእያንዳንዱ VUS እምቅ ክሊኒካዊ ጠቀሜታ ለመመደብ፣ የሚከተሉት የስሌት ፕሮቲን ትንበያ ስልተ ቀመሮች ጥቅም ላይ ውለዋል፡ MUTATION TASTER፣ 33 PROVEAN-SIFT (http://provean.jcvi.org/index.php)፣ POLYPHEN-2 (http:///genetics.bwh.harvard.edu/pph2/) እና Align-GVGD (http://agvgd.hci.utah.edu/agvgd_input.php)። እንደ ክፍል 1 እና 2 የተመደቡ ልዩነቶች የዱር አይነት እንደሆኑ ተደርገው ይቆጠሩ ነበር።
የሳንገር ቅደም ተከተል የእያንዳንዱን በሽታ አምጪ ተለዋጭ መኖሩን አረጋግጧል። በአጭሩ፣ ለእያንዳንዱ ለተገኘው ተለዋጭ ጥንድ የተወሰኑ ፕሪመሮች የተነደፉት የBRCA1 እና የBRCA2 ጂን ማጣቀሻ ቅደም ተከተሎችን (NG_005905.2፣ NM_007294.3 እና NG_012772.3፣ NM_000059.3 በቅደም ተከተል) በመጠቀም ነው። ስለዚህ፣ የታለመ PCR ከዚያም የሳንገር ቅደም ተከተል ተከናውኗል።
ለBRCA1/2 ጂን አሉታዊ ምርመራ የተደረገላቸው ታካሚዎች በአምራቹ መመሪያ መሠረት በባለብዙ ligation-dependent probe amplification (MLPA) ተፈትነዋል። ባጭሩ የዲኤንኤ ናሙናዎች ዲናቱሬሽን ተደርገዋል እና እስከ 60 የሚደርሱ BRCA1 እና BRCA2 ጂን-ተኮር መመርመሪያዎች ጥቅም ላይ ይውላሉ፣ እያንዳንዳቸው በግምት 60 ኑክሊዮታይዶች ርዝመት ያላቸውን የተወሰኑ የዲኤንኤ ቅደም ተከተሎችን ያገኛሉ። ልዩ የPCR አምፒኮኖችን ስብስብ ያካተቱ የፕሮቤ አምፕሊፊኬሽን ምርቶች ከዚያም በካፒላሪ ኤሌክትሮፎረሲስ እና በCofalyser.Net ሶፍትዌር ከተገቢው የባች-ተኮር Cofalyser ሰንጠረዦች ጋር በመተባበር ተተነተኑ (www.mrcholland.com)።
የተመረጡ የክሊኒካዊ ፓቶሎጂካል ተለዋዋጮች (ሂስቶሎጂካል ደረጃ እና የኪ-67% ፕሮብሌሽን ኢንዴክስ) ከ BRCA1/2 PV መኖር ጋር ተያይዘዋል፣ የፊሸርን ትክክለኛ ሙከራ በመጠቀም የፕሪዝም ሶፍትዌር ቁ. 8.4 በመጠቀም የተሰላው የ p-እሴት <0.05 ጉልህ እንደሆነ በመገመት ነው።
ከጥር 2017 እስከ መጋቢት 2021 ባለው ጊዜ ውስጥ 455 ታካሚዎች የጀርምላይን BRCA1/2 ሚውቴሽን ምርመራ ተደርጎላቸዋል። የሚውቴሽን ምርመራ በፖሊክሊኒኮ ሆስፒታል የሙከራ ኦንኮሎጂ እና ሄማቶሎጂ ማዕከል ተካሂዷል። በሲሲሊያን መመሪያ (http://www.gurs.regione.sicilia.it/Indicep1.htm, N. 02-Venerdì 10 Gennaio 2020) መሠረት፣ ሮዶሊኮ ኦፍ ካታኒያ - ሳን ማርኮ በአጠቃላይ 389 ታካሚዎች የጡት ካንሰር፣ 37 የኦቫሪያን ካንሰር፣ 16 የፓንጀራ ካንሰር፣ 8 የፕሮስቴት ካንሰር እና 5 ሜላኖማ ነበሩ። የታካሚዎች ስርጭት በካንሰር አይነት እና በትንተና ውጤቶች መሠረት በምስል 1 ላይ ይታያል።
ምስል 1 የጥናቱን አጠቃላይ እይታ የሚያሳይ የፍሰት ገበታ ያሳያል። የጡት፣ የሜላኖማ፣ የፓንጀራ፣ የፕሮስቴት ወይም የኦቫሪያን እጢዎች ያለባቸው ታካሚዎች በBRCA1 እና BRCA2 ጂኖች ውስጥ ለሚውቴሽን ምርመራ ተደርገዋል።
ምህፃረ ቃላት፡- PVs፣ በሽታ አምጪ ተለዋጭ፤ VUS፣ እርግጠኛ ያልሆነ ጠቀሜታ ልዩነት፤ WT፣ የዱር አይነት BRCA1/2 ቅደም ተከተል።
ጥናቶቻችንን በጡት ካንሰር ቡድኖች ላይ ብቻ አተኩረን ነበር። ታካሚዎቹ አማካይ የዕድሜ ክልል 49 ዓመት (ከ23-89) ሲሆን በአብዛኛው ሴቶች (n=376፣ ወይም 97%) ነበሩ።
ከእነዚህ ታካሚዎች ውስጥ 64ቱ (17%) የBRCA1/2 ሚውቴሽን ነበራቸው እና ሁሉም ሴት ነበሩ። ሠላሳ አምስት (9%) የPV በሽታ ነበራቸው እና 29 (7.5%) የVUS በሽታ ነበራቸው። ከ35ቱ በሽታ አምጪ ተህዋሲያን ልዩነቶች ውስጥ አስራ ሰባት (48.6%) በBRCA1 እና 18 (51.4%) በBRCA2፣ 5 VUS ደግሞ በBRCA1 (17.2%) እና 24 (82.8%) በBRCA2 ተከስተዋል (ምስል 1 እና 2)።LGR በMLPA ትንተና ውስጥ አልተገኘም።
ምስል 2. በ389 የጡት ካንሰር ታማሚዎች ላይ የBRCA1 እና የBRCA2 ሚውቴሽን ትንተና።(ሀ) በ389 የጡት ካንሰር ታማሚዎች ላይ የበሽታ አምጪ ተለዋጮች (PV) (ቀይ)፣ እርግጠኛ ያልሆነ ጠቀሜታ ያላቸው ተለዋጮች (VUS) (ብርቱካናማ) እና WT (ሰማያዊ) ስርጭት፤ (ለ) 389 የጡት ካንሰር ታማሚዎች ሠላሳ አምስት (9%) የBRCA1/2 በሽታ አምጪ ተለዋጮች (PVs) ነበሯቸው። ከእነዚህም መካከል 17 (48.6%) የBRCA1 PV ተሸካሚዎች (ጥቁር ቀይ) እና 18 (51.4%) የBRCA2 ተሸካሚዎች (ቀላል ቀይ) ነበሩ፤ (ሐ) ከ389 ታማሚዎች ውስጥ 29 (7.5%) VUS፣ 5 (17.2%) የBRCA1 ጂኖች (ጥቁር ብርቱካናማ) እና 24 (82.8%) የBRCA2 ጂኖች (ቀላል ብርቱካናማ) ተሸክመዋል።
ምህፃረ ቃላት፡- PVs፣ በሽታ አምጪ ተለዋጭ፤ VUS፣ እርግጠኛ ያልሆነ ጠቀሜታ ልዩነት፤ WT፣ የዱር አይነት BRCA1/2 ቅደም ተከተል።
በመቀጠልም የBRCA1/2 PV ባለባቸው ታካሚዎች ላይ የቢሲ ሞለኪውላዊ ንዑስ ዓይነቶች ስርጭትን መርምረናል። ስርጭቱ 2 (5.7%) ሉሚናል ኤ፣ 15 (42.9%) ሉሚናል ቢ፣ 3 (8.6%) ሉሚናል ቢ-HER2+፣ 2 (5.7%) HER2+ እና 13 (37.1%) TNBC ታካሚዎችን ያካትታል። ከBRCA1-ፖዘቲቭ ታካሚዎች መካከል 5 (29.4%) ሉሚናል ቢ BC፣ 2 (11.8%) HER2+ በሽታ እና 10 (58.8%) TNBC ነበራቸው። የBRCA1 ሚውቴሽን የሌላቸው ዕጢዎች ሉሚናል ኤ ወይም ሉሚናል ቢ-HER2+ ነበሩ (ምስል 3)። በBRCA2-ፖዘቲቭ ንዑስ ቡድን ውስጥ 10 (55.6%) ዕጢዎች ሉሚናል ቢ፣ 3 (16.7%) ሉሚናል ቢ-HER2+፣ 3 (16.7%) TNBC እና 2 (11.1%) ሉሚናል ኤ ነበሩ። (ምስል 3)። በዚህ ቡድን ውስጥ ምንም የHER2+ ዕጢዎች አልነበሩም። ስለዚህ፣ የBRCA1 ሚውቴሽን በTNBC ታካሚዎች ላይ የተለመደ ሲሆን የBRCA2 ለውጦች ደግሞ በሉመን ቢ ግለሰቦች ላይ በብዛት ይገኛሉ።
ምስል 3 በBRCA1 እና BRCA2 ውስጥ በሽታ አምጪ ተለዋዋጮች ባላቸው ታካሚዎች ላይ የጡት ካንሰር ንዑስ ዓይነቶች ስርጭት። በጡት ካንሰር በሽተኞች ሞለኪውላዊ ንዑስ ዓይነቶች መካከል የBRCA1- (ጥቁር ቀይ) እና የBRCA2- (ቀላል ቀይ) PVs ስርጭትን የሚያሳዩ ሂስቶግራሞች። በእያንዳንዱ ሳጥን ውስጥ የተዘገቡት ቁጥሮች ለእያንዳንዱ የጡት ካንሰር ንዑስ ዓይነት የBRCA1 እና የBRCA2 PV በሽተኞች መቶኛን ይወክላሉ።
ምህፃረ ቃላት፡- PVs፣ በሽታ አምጪ ተለዋጭ፤ HER2+፣ የሰው ኤፒደርማል እድገት ፋክተር ተቀባይ 2 ፖዘቲቭ፤ TNBC፣ ሶስትዮሽ-ኔጌቲቭ የጡት ካንሰር።
በመቀጠልም፣ የBRCA1 እና የBRCA2 PVs አይነት እና የጂን አካባቢያዊነት ገምግመናል። በBRCA1 PV ውስጥ፣ 7 ነጠላ ኑክሊዮታይድ ልዩነቶችን (SNVs)፣ 6 ስረዛዎች፣ 3 ድግግሞሽ እና 1 ማስገቢያ አይተናል። አንድ ሚውቴሽን (c.5522delG) ብቻ አዲስ ግኝትን ይወክላል። በሁለቱም ጉዳዮች ላይ የተገኘው በጣም የተለመደው የBRCA1 PV c.5035_5039delCTAAT ነበር። ይህ ለውጥ በBRCA1 exon 15 ውስጥ አምስት ኑክሊዮታይዶችን (CTAAT) መሰረዝን ያካትታል፣ ይህም የአሚኖ አሲድ ሉሲን በኮዶን 1679 በታይሮሲን መተካትን ያስከትላል፣ እና በተነበየ አማራጭ የማቆሚያ ኮዶን ወደ ያለጊዜው የፕሮቲን መቆረጥ የሚያመራ የትርጉም ፍሬም ለውጥ ምክንያት ነው። ሌሎች ሁሉም ለውጦች በአንድ ጉዳይ ላይ ብቻ ተገኝተዋል። በተለይም ከተዘገቡት PVs አንዱ በስፕሊስ ጣቢያ የጋራ ስምምነት ክልል (c.4357+1G>T) ውስጥ ይገኛል (ሠንጠረዥ 1)።
ስለ BRCA2 PV፣ 6 ስረዛዎችን፣ 6 SNVዎችን እና 2 ድግግሞሽዎችን ተመልክተናል። ከተገኙት ለውጦች ውስጥ አንዳቸውም አዲስ አይደሉም። በሕዝባችን ውስጥ ሶስት ሚውቴሽኖች ተደጋጋሚ ናቸው፣ c.428dup እና c.8487+1G>A በ3 ርዕሰ ጉዳዮች ላይ ታይቷል፣ ከዚያም c.5851_5854delAGTT በሁለት ጉዳዮች ተገኝቷል። የc.428dup ለውጥ በBRCA2 exon 5 ውስጥ የC ድግግሞሽን ያካትታል፣ ይህም የተቆረጠ፣ የማይሰራ ፕሮቲን እንደሚመሰርት ይገመታል። c.8487+1G>በBRCA2 intron 19 (± 1,2) ውስጣዊ ክልል ውስጥ አንድ ሚውቴሽን ይከሰታል እና የስፕላይንግ ኮንሰንስ ቅደም ተከተልን ይነካል፣ ይህም ያልተለመደ ወይም የጠፋ ፕሮቲን ያስከትላል። c.5851_5854delAGTT በሽታ አምጪ ተለዋጭ የሚከሰተው በBRCA2 ጂን እና በኮድ exon 10 ውስጥ ከኑክሊዮታይድ ቦታዎች 5851 እስከ 5854 በ4-ኑክሊዮታይድ መሰረዝ ምክንያት ነው። በተገመተው አማራጭ የማቆሚያ ኮዶን (p.S1951WfsTer) የትርጉም ፍሬም ሺፍት ያስከትላል። በተለይም፣ ቀደም ሲል እንደተገለጸው፣ ሁለቱም c.631G>A እና c.7008-2A>T ለውጦች በተመሳሳይ ታካሚ ውስጥ ተገኝተዋል።34 የመጀመሪያው ሚውቴሽን በBRCA2 exon 7 ውስጥ አዴኖሲን (A) በጓኒን (G) ውስጥ መተካትን ያካትታል፣ በዚህም ምክንያት በኮዶን 211 ላይ ቫሊን ወደ ኢሶሉሲን እንዲቀየር ያደርጋል። ኢሶሉሲን አሚኖ አሲድ በጣም ተመሳሳይ ባህሪያት ያሉት አሚኖ አሲድ ነው። ይህ ለውጥ መደበኛውን mRNA ስፒሊንግ ይነካል። ሁለተኛው ልዩነት በውስጣዊ ክልል ውስጥ የሚገኝ ሲሆን BRCA2 ን ከሚቀየረው ጂን exon 13 በፊት ድርብ A ወደ ታይሚን (T) መተካትን ያስከትላል። የc.7008-2A>T ለውጥ የተለያዩ ርዝመቶች ያላቸውን በርካታ ቅጂዎችን ሊያመነጭ ይችላል። በተጨማሪም፣ በBRCA2 PVs ቡድን ውስጥ፣ ከ18 ለውጦች 4ቱ (22.2%) ውስጣዊ ነበሩ።
ከዚያም በተግባራዊ ጎራዎች እና በፕሮቲን-ማስተሳሰር ክልሎች ውስጥ የBRCA1/2 ጎጂ ሚውቴሽኖችን ካርታ ሰራን (ምስል 4)። በBRCA1 ጂን ውስጥ፣ 50% የሚሆኑት PVዎች በጡት ካንሰር ክላስተር ክልል (BCCR) ውስጥ የሚገኙ ሲሆን 22% የሚሆኑት ሚውቴሽኖች ደግሞ በኦቫሪያን ካንሰር ክላስተር ክልል (OCCR) ውስጥ የሚገኙ ነበሩ (ምስል 4A)። በBRCA2 PV ውስጥ፣ 35.7% የሚሆኑት ልዩነቶች በBCCR ክልል ውስጥ የሚገኙ ሲሆን 42.8% የሚሆኑት ሚውቴሽኖች በOCCR ውስጥ ይገኛሉ (ምስል 4B)። በመቀጠል፣ በBRCA1 እና BRCA2 የፕሮቲን ጎራዎች ውስጥ የPV ቦታን ገምግመናል። ለBRCA1 ፕሮቲን፣ በሉፕ እና በተጠመጠሙ የኮል ጎራዎች ውስጥ ሶስት PVዎችን እና በBRCT ጎራ ውስጥ ሁለት ሚውቴሽኖችን አግኝተናል (ምስል 4A)። ለBRCA2 ፕሮቲን፣ 4 PVዎች ከBRC ተደጋጋሚ ጎራ ጋር የተሳሰሩ ሲሆኑ፣ 3 ኢንትሮኒክ እና 3 ኤክሶኒክ ለውጦች በኦሊጎስካርዴድ-ማስተሳሰር (OB) እና ታወር (T) ጎራዎች ውስጥ ተገኝተዋል (ምስል 4ለ)።
ምስል 4 የBRCA1 እና BRCA2 ፕሮቲኖች ንድፍ ውክልና እና የበሽታ አምጪ ተለዋዋጮችን አካባቢያዊነት ያሳያል። ይህ ምስል በጡት ካንሰር በሽተኞች ውስጥ የBRCA1 (A) እና BRCA2 (B) በሽታ አምጪ ተለዋዋጮችን ስርጭት ያሳያል። ውጫዊ ሚውቴሽኖች በሰማያዊ ይታያሉ፣ ውስጣዊ ተለዋዋጮች ደግሞ በብርቱካናማ ይታያሉ። የአሞሌው ቁመት የጉዳዮቹን ብዛት ይወክላል። የBRCA1 እና BRCA2 ፕሮቲኖች እና ተግባራዊ ጎራዎቻቸው ሪፖርት ተደርገዋል።(A) የBRCA1 ፕሮቲን የሉፕ ጎራ (RING) እና የኑክሌር አካባቢያዊ ቅደም ተከተል (NLS)፣ የተጠቀለለ-ኮይል ጎራ፣ የSQ/TQ ክላስተር ጎራ (SCD) እና የBRCA1 C-ተርሚናል ጎራ (BRCT) ይዟል።(B) የBRCA2 ፕሮቲን ስምንት የBRC ድግግሞሾችን፣ ሄሊካል ጎራ (ሄሊካል) ያለው የዲኤንኤ-ማሰሪያ ጎራ፣ ሶስት ኦሊጎኑክሊዮታይድ/ኦሊጎሳክሳክራይድ-ማሰሪያ (OB) እጥፎችን፣ የታወር ጎራ (T) እና በC በኩል ኤን ኤልኤስ ይዟል። የጡት ካንሰር ክላስተር ክልል (BCCR) እና የኦቫሪያን ካንሰር ክላስተር ክልል (OCCR) የሚባሉት ቦታዎች ከታች ይታያሉ።**ይወክላል የኮዶኖችን ማቆም የሚወስኑ ሚውቴሽኖች።
ከዚያም ከ BRCA1/2 PV መኖር ጋር ሊዛመዱ የሚችሉ የቢሲ ክሊኒካዊ የፓቶሎጂ ባህሪያትን መርምረናል። ለ181 BRCA1/2-ኔጌቲቭ ታካሚዎች (ተሸካሚ ያልሆኑ) እና ለሁሉም ተሸካሚዎች (n = 35) የተሟላ ክሊኒካዊ መዝገቦች ተገኝተዋል። በቲዩመር መስፋፋት መጠን እና በደረጃ መካከል ትስስር ነበር።
የኪ-67 ስርጭትን በቡድናችን መካከለኛ (25%፣ ክልል <10-90%) ላይ በመመስረት አሰላለን። ኪ-67 < 25% ያላቸው ሰዎች "ዝቅተኛ ኪ-67" ተብለው ሲገለጹ፣ እሴት ≥ 25% ያላቸው ግለሰቦች ደግሞ "ከፍተኛ ኪ-67" ተብለው ተወስደዋል። ጉልህ የሆኑ የኪ-67 ልዩነቶች (p<0.01) በሽቦ ተሸካሚዎች እና በBRCA1 PV ተሸካሚዎች መካከል ተገኝተዋል (ምስል 5A)።
ምስል 5 የኪ-67 ከBRCA1 እና BRCA2 PVs ጋር እና የሌላቸው የጡት ካንሰር ሴቶች ከደረጃ ስርጭት ጋር ያለው ትስስር።(ሀ) በ181 ተሸካሚ ያልሆኑ የBC ታካሚዎች ላይ አማካይ የኪ-67 እሴቶችን የሚያሳይ የቦክስፕሎት ከBRCA1 (18) ወይም BRCA2 (17) የPV ታካሚዎች ጋር ሲነጻጸር። ከ0.5 በታች ያሉት የP እሴቶች በስታቲስቲክስ ጉልህ እንደሆኑ ተደርገው ተቆጥረዋል።(ለ) በBRCA1 እና BRCA2 ሚውቴሽን ሁኔታ (WT ተገዢዎች፣ BRCA1 እና BRCA2 PVs ተሸካሚዎች) መሠረት የBC ካንሰር ታካሚዎችን ወደ ሂስቶሎጂካል ክፍል ቡድኖች (G2 እና G3) መመደብን የሚወክለው ሂስቶግራም።
በተመሳሳይ፣ የቲዩመር ደረጃ ከ BRCA1/2 PV መኖር ጋር የተያያዘ መሆኑን መርምረናል። G1 BC በሕዝባችን ውስጥ ስላልነበረ፣ ታካሚዎቹን በሁለት ቡድኖች (G2 ወይም G3) ከፍለናቸዋል። ከ Ki-67 ውጤቶች ጋር በሚስማማ መልኩ፣ ትንታኔው በቲዩመር ደረጃ እና በ BRCA1 ሚውቴሽን መካከል በስታቲስቲክስ ደረጃ ላይ ጉልህ የሆነ ትስስር አሳይቷል፣ በ BRCA1 ተሸካሚዎች ውስጥ ከማይሸከሙት ጋር ሲነጻጸር ከፍተኛ የ G3 ዕጢዎች ድርሻ (p<0.005) (ምስል 5B)።
በዲኤንኤ ቅደም ተከተል ቴክኖሎጂ ውስጥ የተደረጉ እድገቶች በBRCA1/2 የጄኔቲክ ምርመራ ታይቶ የማይታወቅ እድገትን አስችለዋል፣ ይህም በቤተሰብ የካንሰር ታሪክ ላላቸው ታካሚዎች ወሳኝ አንድምታ አለው። እስካሁን ድረስ፣ በአሜሪካ የህክምና ጄኔቲክስ ማህበር 35 እና በENIGMA ስርዓት መሠረት ወደ 20,000 የሚጠጉ የBRCA1/2 ልዩነቶች ተለይተው ተመድበዋል።35,36 የBRCA1/2 ሚውቴሽን ስፔክትረም በጂኦግራፊያዊ ክልሎች በስፋት እንደሚለያይ በደንብ ይታወቃል።37 በጣሊያን ውስጥ፣ የBRCA1/2 PVs መጠን ከ8% እስከ 37% ይደርሳል፣ ይህም ሰፊ የአገር ውስጥ ተለዋዋጭነት ያሳያል።38,39 ወደ 5 ሚሊዮን የሚጠጋ ህዝብ ያላት ሲሲሊ በጣሊያን ውስጥ በነዋሪዎች ብዛት አምስተኛው ትልቁ ክልል ነች። ምንም እንኳን በምዕራባዊ ሲሲሊ የBRCA1/2 ስርጭት ላይ መረጃ ቢኖርም፣ በደሴቲቱ ምስራቃዊ ክፍል ሰፊ ማስረጃ የለም።
ጥናታችን በምስራቅ ሲሲሊ በሚገኙ የቢሲ ታካሚዎች ላይ የBRCA1/2 PV መከሰትን በተመለከተ ከተመዘገቡት የመጀመሪያ ሪፖርቶች አንዱ ነው።28 ይህ በቡድናችን ውስጥ በጣም የተለመደ በሽታ ስለሆነ ትንታኔያችንን በቢሲ ላይ አተኩረናል።
389 የBC ታካሚዎችን ሲመረምሩ፣ 9% የሚሆኑት BRCA1/2 PVs ተሸክመዋል፣ በBRCA1 እና BRCA2 መካከል በእኩል መጠን ተሰራጭተዋል። እነዚህ ውጤቶች ቀደም ሲል በጣሊያን ህዝብ ውስጥ ከተዘገቡት ጋር የሚጣጣሙ ናቸው።28 የሚገርመው፣ ከቡድናችን ውስጥ 3% (13/389) ወንዶች ነበሩ። ይህ መጠን ለወንዶች የጡት ካንሰር ከሚጠበቀው በላይ ነው (ከሁሉም BCs 1%)፣40 በBRCA1/2 ሚውቴሽን ስጋት ላይ የተመሰረተውን የህዝብ ምርጫችንን ያንፀባርቃል። ሆኖም፣ ከእነዚህ ወንዶች ውስጥ አንዳቸውም ቢሆኑ BRCA1/2 PV አላገኙም፣ ስለዚህ እንደ PALB2፣ RAD51C እና D ያሉ ብዙም ያልተለመዱ ሚውቴሽኖች መኖራቸውን ለማስቀረት ለተጨማሪ ሞለኪውላዊ ትንተና እጩዎች ነበሩ። BRCA2 VUS በግልጽ በታየባቸው 7% ጉዳዮች ላይ እርግጠኛ ያልሆኑ ጠቀሜታ ያላቸው ልዩነቶች ተገኝተዋል። ይህ ውጤት እንኳን ከቀድሞ ማስረጃዎች ጋር የሚጣጣም ነው።28,41,42
በBRCA1/2 ሚውቴሽን ሴቶች ላይ የBC ሞለኪውላዊ ንዑስ ዓይነቶችን ስርጭት ስንመረምር፣ በTNBC እና BRCA1 PV (58.8%) እና በብርሃን ቢ BC እና BRCA2 PV (55.6%) መካከል የታወቁ ግንኙነቶችን አረጋግጠናል።16,43 በBRCA1 እና BRCA2 PV ተሸካሚዎች ውስጥ ያሉት የብርሃን A እና HER2+ ዕጢዎች ከነባር የስነ-ጽሑፍ መረጃዎች ጋር የሚጣጣሙ ናቸው።16,43
ከዚያም በBRCA1/2 PV ዓይነት እና ቦታ ላይ እናተኩራለን። በቡድናችን ውስጥ በጣም የተለመደው የBRCA1 PV መጠን c.5035_5039delCTAAT ነበር። ምንም እንኳን ኢንኮርቫያ እና ሌሎችም። ይህንን ልዩነት በሲሲሊያዊ ቡድናቸው ውስጥ ባያብራሩም፣ ሌሎች ደራሲዎች እንደ ጀርም መስመር BRCA1 PV.34 ሪፖርት አድርገዋል። በቡድናችን ውስጥ በርካታ የBRCA1 PVs ተገኝተዋል - ለምሳሌ c.181T>G፣ c.514del፣ c.3253dupA እና c.5266dupC - እነዚህም በሲሲሊ ውስጥ ታይተዋል።28 ከእነዚህ ውስጥ ሁለት የBRCA1 መስራች ሚውቴሽን (c.181T>G እና c.5266dupC) በምስራቅ እና መካከለኛው አውሮፓ (ፖላንድ፣ ቼክ)፣ ስሎቬኒያ፣ ኦስትሪያ፣ ሃንጋሪ፣ ቤላሩስኛ እና ጀርመንኛ)፣ 44,45 እና በዩናይትድ ስቴትስ እና አርጀንቲና በቅርቡ በቢሲ እና ኦሲ በጣሊያን ታካሚዎች ላይ “ተደጋጋሚ የጀርም መስመር ልዩነት” ተብሎ ተገልጿል። የ34c.514del ልዩነት ቀደም ሲል በፓሌርሞ እና ሜሲና ከሰሜን ሲሲሊ በመጡ 8 የጡት ካንሰር ታካሚዎች ላይ ተለይቷል። የሚገርመው ነገር፣ ኢንኮርቫያ እና ሌሎችም ጭምር። በካታኒያ ውስጥ በአንዳንድ ቤተሰቦች ውስጥ የc.3253dupA ልዩነትን አግኝተዋል።28 በጣም የሚወክሉት የBRCA2 PVዎች c.428dup፣ c.5851_5854delAGTT እና ውስጣዊው ልዩነት c.8487+1G>A ሲሆኑ፣ እነዚህም በዝርዝር ሪፖርት ተደርገዋል 28 በፓሌርሞ ውስጥ በሴ.428dup ባለበት ታካሚ ላይ፣ ሴ.5851_5854delAGTT PV በሰሜን ምዕራብ ሲሲሊ ውስጥ በተለይም በትራፓኒ እና በፓሌርሞ ክልሎች ውስጥ ታይቷል፣ ሴ.5851_5854delAGTT PV ደግሞ በሰሜን ምዕራብ ሲሲሊ በሚገኙ ቤተሰቦች ላይ ታይቷል። 8487+1G>አንድ ልዩነት ከሜሲና፣ ፓሌርሞ እና ካልታኒሴታ በተገኙ ሰዎች ላይ የተለመደ ነበር።28 ሬቤክ እና ሌሎችም። ቀደም ሲል በኮሎምቢያ ውስጥ የc.5851_5854delAGTT ለውጥን ገልጸናል።37 ሌላ የBRCA2 PV፣ c.631+1G>A፣ ከሲሲሊ (አግሪገንቶ፣ ሲራኩሳ እና ራጉሳ) በቢሲ እና ኦሲ ታካሚዎች ላይ ተገኝቷል።28 በተለይም፣ በተመሳሳይ ታካሚ ውስጥ ሁለት የBRCA2 ልዩነቶች (BRCA2 c.631G>A እና c.7008-2A>T) አብረው መኖራቸውን አስተውለናል፣ ይህም ቀደም ሲል እንደተገለጸው በሲሲስ ሁነታ ተለያይቷል ብለን ገምተናል።34,46 እነዚህ የBRCA2 uble ሚውቴሽን በጣሊያን ክልል ውስጥ በተደጋጋሚ የሚታዩ ሲሆን ያለጊዜው የማቆሚያ ኮዶኖችን እንደሚያስተዋውቁ ተረጋግጧል፣ ይህም የመልእክተኛ RNA ስፕሊንግ ላይ ተጽዕኖ ያሳድራል እና የBRCA2 ፕሮቲን እንዲበላሽ ያደርጋል።47,48
እንዲሁም የፕሮቲን ጎራዎች እና ጂኖች በተቀመጡት የOCCR እና BCCR ክልሎች ውስጥ BRCA1 እና BRCA2 PVsን ካርታ ሰጥተናል። እነዚህ ክልሎች በሬቤክ እና ባልደረቦቻቸው በቅደም ተከተል የኦቫሪያን እና የጡት ካንሰርን ለማዳከም እንደ አደጋ አካባቢዎች ተገልጸዋል።49 ሆኖም፣ የጀርምላይን ልዩነቶች ባሉበት ቦታ እና በጡት ወይም በኦቫሪያን ካንሰር ስጋት መካከል ስላለው ግንኙነት የሚገልጸው ማስረጃ አከራካሪ ሆኖ ቀጥሏል።28,50-52 በሕዝባችን ውስጥ፣ BRCA1 PVs በዋናነት በBCCR ክልል ውስጥ የሚገኙ ሲሆኑ፣ BRCA2 PVs ደግሞ በዋናነት በOCCR ክልል ውስጥ የሚገኙ ነበሩ። ሆኖም፣ በተቀመጡት የOCCR እና የBCCR ክልሎች እና በBC ባህሪያት መካከል ምንም አይነት ግንኙነት ማግኘት አልቻልንም። ይህ ሊሆን የሚችለው የBRCA1/2 ሚውቴሽን ባላቸው ታካሚዎች ውስን ቁጥር ምክንያት ሊሆን ይችላል። ከፕሮቲን ጎራ አንፃር፣ BRCA1 PVs በጠቅላላው ፕሮቲን ላይ ይሰራጫሉ፣ እና የBRCA2 ለውጦች በBRC ተደጋጋሚ ጎራ ውስጥ በተመረጠ ሁኔታ ይገኛሉ።
በመጨረሻም፣ የቢሲ ክሊኒካዊ የፓቶሎጂ ባህሪያትን ከBRCA1/2 PV ጋር አዛምደናል። በተካተቱት ታካሚዎች ቁጥር ውስን በመሆኑ፣ በኪ-67 እና በቲሞር ደረጃ መካከል ጉልህ የሆነ ትስስር ብቻ አግኝተናል። የኪ-67 ግምገማ እና ትርጓሜ በተወሰነ ደረጃ አወዛጋቢ ቢሆንም፣ ከፍተኛ የመራባት መጠኖች ከበሽታ ተደጋጋሚነት እና ከመዳን መቀነስ ጋር የተቆራኙ መሆናቸው እርግጠኛ ነው። እስካሁን ድረስ፣ በ"ከፍተኛ" እና "ዝቅተኛ" ኪ-67 መካከል ያለውን ለመለየት ያለው ገደብ 20% ነው። ሆኖም፣ ይህ ገደብ በ BRCA1/2 ሚውቴሽን ታካሚዎቻችን ላይ አይተገበርም፣ ይህም አማካይ ኪ-67 እሴት 25% ነው። ይህ በከፍተኛ ኪ-67 መጠን ላይ ያለው አዝማሚያ በብርሃን ቢ እና ቲኤንቢሲ ቡድኖቻችን ውስጥ ባለው ስርጭት ሊብራራ ይችላል፣ ከእነዚህም ውስጥ ጥቂት የብርሃን ኤ ዕጢዎች ነበሩ። ሆኖም፣ አንዳንድ ማስረጃዎች ከፍ ያለ ኪ-67 መቆረጥ (25-30%) ታካሚዎችን እንደ ትንበያቸው በተሻለ ሁኔታ ሊያስተላልፍ እንደሚችል የሚጠቁሙ ይመስላል።53,54 ከትንታኔያችን ውጤቶች በመነሳት፣ ጉልህ የሆነ ትስስር አያስደንቅም። በከፍተኛ ኪ-67 እና በደረጃዎች እና በ BRCA1 PV. እንደ እውነቱ ከሆነ፣ ከ BRCA1 ጋር የተያያዙ ዕጢዎች የ TNBC ዓይነተኛ ሲሆኑ የበለጠ ኃይለኛ ባህሪያትን ያሳያሉ።16,17
ለማጠቃለል ያህል፣ ይህ ጥናት ከምስራቅ ሲሲሊ በተገኘ የቢሲ ቡድን ውስጥ የBRCA1/2 ሚውቴሽን ሁኔታ ላይ ሪፖርት ያቀርባል። በአጠቃላይ፣ ግኝቶቻችን ከቀድሞው ማስረጃ ጋር የሚጣጣሙ ናቸው፣ በሁለቱም በቢሲ ውስጥ በሚውቴሽን ስርጭት እና በክሊኒካዊ የፓቶሎጂ ባህሪያት። እንደ ባለብዙ ጂኖም የተስፋፋ ሚውቴሽን ትንተናን በመጠቀም ባሉ ትላልቅ የቢሲ ታካሚዎች ላይ ተጨማሪ ጥናቶች፣ እንደ ባለብዙ ጂኖም የተስፋፋ ሚውቴሽን ትንተናን በመጠቀም፣ ከ BRCA1/2 የተለዩ እና ብዙም የማይደጋገሙ የ PVs መኖርን ለመገምገም አስፈላጊ ናቸው። ይህም በጄኔቲክ ሚውቴሽን ምክንያት እየጨመረ የመጣውን የካንሰር ተጋላጭነት ያላቸውን ሰዎች ቁጥር ለመለየት እና በአግባቡ ለማስተዳደር ያስችላል።
ታካሚዎች ለምርምር ዓላማዎች የቲሞር ናሙናዎቻቸውን ስም-አልባ በሆነ መልኩ ለመልቀቅ በመረጃ ላይ የተመሠረተ ፈቃድ መፈረማቸውን አረጋግጠናል። ሁሉም ታካሚዎች በሄልሲንኪ መግለጫ መሠረት በጽሑፍ የተረጋገጠ ፈቃድ ፈርመዋል። በAOU Policlinico “G.Rodolico – S.Marco” ፖሊሲ መሠረት፣ ይህ ጥናት ከሥነ ምግባር ግምገማ ነፃ ሆኗል ምክንያቱም የBRCA1/2 ትንተና በክሊኒካዊ ልምምድ መሠረት የተከናወነ እና ሁሉም ታካሚዎች በጽሑፍ የተረጋገጠ ፈቃድ ስለሰጡ። ታካሚዎችም መረጃቸውን ለምርምር ዓላማዎች ለመጠቀም ተስማምተዋል።
የሥነ ምግባር ኮሚቴው በጠየቀው መሰረት የጡት ካንሰር ታማሚዎችን በመንከባከብ ላደረጉት እገዛ ፕሮፌሰር ፓኦሎ ቪግኔሪን እናመሰግናለን።
ፌዴሪካ ማርቶራና ከኢስቲቱቶ ጌንቲሊ፣ ኤሊ ሊሊ፣ ኖቫርትስ እና ፋይዘር የተሰጡ የክብር መዝገቦችን ሪፖርት አድርጋለች። ሌሎቹ ደራሲዎች በዚህ ሥራ ላይ ምንም ዓይነት የጥቅም ግጭት እንደሌለባቸው አስታውቀዋል።
1. ሱንግ ኤች፣ ፌርላይ ጄ፣ ሲግል አርኤል፣ እና ሌሎችም። ግሎባል የካንሰር ስታቲስቲክስ 2020፡ ግሎቦካን በዓለም ዙሪያ በ185 አገሮች ውስጥ የ36 ካንሰሮችን የመከሰት እና የሞት መጠን ይገምታል። CA Cancer J Clin.2021;71(3):209-249.doi: 10.3322/caac.21660