तपाईंको ब्राउजरमा जाभास्क्रिप्ट हाल असक्षम पारिएको छ।जाभास्क्रिप्ट असक्षम पारिएको बेला यस वेबसाइटका केही सुविधाहरूले काम गर्ने छैनन्।
आफ्नो विशिष्ट विवरण र रुचिको विशेष औषधिको साथ दर्ता गर्नुहोस् र हामी तपाईंले प्रदान गर्नुभएको जानकारीलाई हाम्रो विस्तृत डाटाबेसमा रहेका लेखहरूसँग मिलाउनेछौं र तुरुन्तै तपाईंलाई PDF प्रतिलिपि इमेल गर्नेछौं।
作者 Stella S, Vitale SR, Martorana F, Massimino M, Pavone G, Lanzafame K, Bianca S, Barone C, Gorgone C, Fichera M, Manzella L
स्टेफानिया स्टेला, १,२ सिल्भिया रीटा भिटाले, १,२ फेडेरिका मार्टोराना, १,२ मिशेल मासिमिनो, १,२ जिउलियाना पाभोन, ३ काटिया लान्जाफेम, ३ सेबास्टियानो बियान्का, ४ चियारा ब्यारोन, ५ क्रिस्टिना गोर्गोन, ६ मार्को फिचेरा, सी७ डिपार्टमेन्टका ली १,२ र एक्स्पोलेरी १,२ लि. मेडिसिन, क्याटानिया विश्वविद्यालय, क्याटानिया, 95123, इटाली;2 प्रयोगात्मक ओन्कोलोजी र हेमाटोलोजी केन्द्र, AOU Policlinico “G.Rodolico – San Marco”, Catania , 95123, Italy; ३ मेडिकल ओन्कोलोजी, AOU Policlinico “G. Rodolico – San Marco”, Catania, 95123, Italy; 4 मेडिकल जेनेटिक्स, ARNAS Garibaldi, Catania, 95123, इटाली; ५ मेडिसिन जेनेटिक्स, एएसपी, सिराक्यूज, ९६१००, इटाली; ६ बायोमेडिकल र बायोटेक्नोलोजी विज्ञान विभाग, क्याटानिया विश्वविद्यालय, मेडिकल जेनेटिक्स, क्याटानिया, इटाली, ९५१२३; ७ओएसी रिसर्च इन्स्टिच्युट-आईआरसीसीएस, ट्रोइना, ९४०१८, इटाली सञ्चार: स्टेफानिया स्टेला, टेलिफोन +३९ ०९५ ३७८ १९४६, इमेल [email protected]; [email protected] उद्देश्य: BRCA1 र BRCA2 मा जर्मलाइन उत्परिवर्तन र स्थापित स्तन क्यान्सर (BC), अंडाशय (OC) र क्यान्सरको जीवनभरको जोखिमसँग सम्बन्धित अन्य। BRCA जीनको लागि परीक्षण व्यक्तिगत जोखिमको मूल्याङ्कन गर्न, साथै स्वस्थ वाहकहरूमा रोकथाम विधिहरू फेला पार्न र क्यान्सर बिरामीहरूमा उपचारहरू मिलाउनको लागि महत्वपूर्ण छ। BRCA1 र BRCA2 परिवर्तनहरूको व्यापकता भौगोलिक क्षेत्रहरूमा व्यापक रूपमा भिन्न हुन्छ, र यद्यपि सिसिलियन परिवारहरूमा BRCA रोगजनक भेरियन्टहरूमा डेटा अवस्थित छ, पूर्वी सिसिलीमा जनसंख्यालाई विशेष रूपमा लक्षित गर्ने अध्ययनहरूको अभाव छ। हाम्रो अध्ययनको उद्देश्य पूर्वी सिसिलीबाट BC बिरामीहरूको समूहमा BRCA रोगजनक जर्मलाइन परिवर्तनहरूको घटना र वितरणको अनुसन्धान गर्नु र अर्को पुस्ताको अनुक्रमण प्रयोग गरेर विशिष्ट BC विशेषताहरूसँग तिनीहरूको सम्बन्धको मूल्याङ्कन गर्नु थियो। ट्युमर ग्रेड र प्रसार सूचकांकसँग सम्बन्धित परिवर्तनहरूको उपस्थिति। परिणामहरू: समग्रमा, 35 बिरामीहरू (9%) मा BRCA रोगजनक भेरियन्ट थियो, BRCA1 मा 17 (49%) र BRCA2 मा 18 (51%)। BRCA1 परिवर्तनहरू ट्रिपल-नेगेटिभ BC बिरामीहरूमा प्रचलित छन्, जबकि BRCA2 उत्परिवर्तनहरू बढी सामान्य छन्। लुमिनल बीसी बिरामीहरूमा। गैर-वाहकहरूको तुलनामा, BRCA1 भेरियन्ट भएका विषयहरूमा ट्युमर ग्रेड र प्रोलिफेरेटिभ इन्डेक्स उल्लेखनीय रूपमा उच्च थियो। निष्कर्ष: हाम्रा निष्कर्षहरूले पूर्वी सिसिलीका बीसी बिरामीहरूमा BRCA उत्परिवर्तन स्थितिको सिंहावलोकन प्रदान गर्दछ र वंशानुगत बीसी भएका बिरामीहरू पहिचान गर्न NGS विश्लेषणको भूमिका पुष्टि गर्दछ। समग्रमा, यी डेटा उत्परिवर्तन वाहकहरूमा क्यान्सरको उचित रोकथाम र उपचारको लागि BRCA स्क्रिनिङलाई समर्थन गर्ने अघिल्लो प्रमाणहरूसँग मिल्दोजुल्दो छ।
स्तन क्यान्सर (BC) विश्वव्यापी रूपमा सबैभन्दा सामान्य घातक रोग हो र महिलाहरूमा हुने सबैभन्दा घातक क्यान्सर हो। १ BC रोगको निदान र क्लिनिकल व्यवहार निर्धारण गर्ने जैविक विशेषताहरूको व्यापक रूपमा अध्ययन गरिएको छ र समयसँगै आंशिक रूपमा स्पष्ट पारिएको छ। वास्तवमा, धेरै सरोगेट मार्करहरू हाल BC लाई विभिन्न आणविक उपप्रकारहरूमा वर्गीकृत गर्न प्रयोग गरिन्छ। तिनीहरू एस्ट्रोजेन (ER) र/वा प्रोजेस्टेरोन रिसेप्टर (PgR), मानव एपिडर्मल वृद्धि कारक रिसेप्टर २ (HER2) प्रवर्धन, प्रसार सूचकांक Ki-67 र ट्युमर ग्रेड (G) हुन्।२ यी चरहरूको संयोजनले निम्न BC कोटीहरू पहिचान गर्‍यो: १) ER र/वा PgR अभिव्यक्ति देखाउने लुमिनल ट्युमरहरू, BC को ७५% का लागि जिम्मेवार थिए।यी ट्युमरहरूलाई थप Luminal A मा विभाजित गरिएको थियो, जब Ki-67 २०% भन्दा कम थियो र HER2 नकारात्मक थियो, र Luminal B मा, जब Ki-67 २०% बराबर वा माथि थियो र HER2 प्रवर्धनको उपस्थितिमा, प्रसार सूचकांकको पर्वाह नगरी; २) HER2+ ट्युमरहरू जुन ER र PgR नेगेटिभ छन् तर HER2 एम्प्लिफिकेशन देखाउँछन्। यो समूहले सबै स्तन ट्युमरहरूको १०% ओगटेको छ; ३) ट्रिपल-नेगेटिभ ब्रेस्ट क्यान्सर (TNBC), जसले ER र PgR अभिव्यक्ति र HER2 एम्प्लिफिकेशन देखाउँदैन, स्तन क्यान्सरहरूको लगभग १५% ओगटेको छ।२-४
यी BC उपप्रकारहरू मध्ये, ट्युमर ग्रेड र प्रसार सूचकांकले क्रस-सेक्शनल बायोमार्करहरू प्रतिनिधित्व गर्दछ जुन ट्युमर आक्रामकता र रोगको निदानसँग प्रत्यक्ष र स्वतन्त्र रूपमा सम्बन्धित छन्।5,6
माथि उल्लेखित जैविक विशेषताहरूका अतिरिक्त, BC को विकासमा नेतृत्व गर्ने वंशानुगत आनुवंशिक परिवर्तनहरूको भूमिका विगत केही वर्षहरूमा बढ्दो रूपमा महत्त्वपूर्ण हुँदै गएको छ।७ १० मध्ये १ स्तन ट्युमर विशिष्ट जीनहरूमा जर्मलाइन परिवर्तनहरूको कारणले वंशानुगत हुन्छ।८ १८०,००० भन्दा बढी महिलाहरू समावेश गर्ने दुई ठूला महामारी विज्ञान अध्ययनहरूले हालै आठ जीनहरूको समूह (जस्तै, ATM, BARD1, BRCA1, BRCA2, CHK2, PALB2, RAD51C, र RAD51D) पहिचान गरेका छन् जुन मुख्यतया वंशानुगत BC को लागि जिम्मेवार छन्। यी जीनहरू मध्ये, BRCA1 र BRCA2 (यसपछि BRCA1/2 भनेर चिनिन्छ) ले स्तन ट्युमरको विकाससँग सबैभन्दा बलियो सम्बन्ध देखायो।९-१२ वास्तवमा, जर्मलाइन BRCA1/2 उत्परिवर्तनले BC को जीवनकाल जोखिम साथै डिम्बग्रंथि, प्रोस्टेट, प्यान्क्रियाटिक, कोलोरेक्टल, र मेलानोमा सहित अन्य घातक रोगहरूको उल्लेखनीय रूपमा वृद्धि गर्दछ।१३ देखि ८० वर्षको उमेरसम्म, BRCA1 रोगजनक भेरियन्ट (PV) भएका महिलाहरूमा BC को संचयी घटना ७२% छ। र BRCA2 PV भएका महिलाहरूमा ६९%।१४
उल्लेखनीय रूपमा, हालैको प्रकाशनले सुझाव दिन्छ कि BC जोखिम PV को प्रकारमा निर्भर गर्दछ। वास्तवमा, रोगजनक ट्रंकेटिङ भेरियन्टहरूको तुलनामा, स्पष्ट गलत अर्थ लाग्ने भेरियन्टहरू, विशेष गरी BRCA1 जीनमा, BC को कम जोखिमसँग सम्बन्धित छन्, विशेष गरी वृद्ध महिलाहरूमा।15
BRCA1 वा BRCA2 PV को उपस्थिति विभिन्न जैविक र क्लिनिकोप्याथोलोजिकल विशेषताहरूसँग सम्बन्धित थियो। १६,१७ BRCA1-सम्बन्धित BC हरू क्लिनिकली आक्रामक, कमजोर रूपमा भिन्न, र अत्यधिक फैलावट हुने हुन्छन्। यी ट्युमरहरू सामान्यतया ट्रिपल नेगेटिभ हुन्छन् र प्रारम्भिक उमेरमा सुरु हुन्छन्। BRCA2-उत्परिवर्तित बिरामीहरूमा हुने ट्युमरहरूले सामान्यतया मध्यम देखि राम्रोसँग भिन्न ग्रेड र परिवर्तनशील फैलावट सूचकांकहरू प्रदर्शन गर्छन्। यी ट्युमरहरू लुमेन B मा बढी सामान्य हुन्छन् र सामान्यतया वृद्ध वयस्कहरूमा हुन्छन्। १६-१८ उल्लेखनीय रूपमा, BRCA1 र BRCA2 मा उत्परिवर्तनहरूले प्लेटिनम लवण र पोली(ADP-ribose) पोलिमरेज इनहिबिटरहरू (PARPi) जस्ता लक्षित औषधिहरू सहित विशिष्ट उपचारहरू प्रति संवेदनशीलता बढाउँछन्। १९,२०
विगत केही वर्षहरूमा, क्लिनिकल अभ्यासमा अर्को पुस्ताको अनुक्रमण (NGS) को कार्यान्वयनले BRCA1/2.21 सहित क्यान्सर संवेदनशीलता सिन्ड्रोमहरूको लागि आणविक परीक्षणबाट गुज्रन BC बिरामीहरूको बढ्दो संख्यालाई सक्षम बनाएको छ। साथसाथै, BRCA1/2 परीक्षणको योग्य व्यक्तिहरूलाई राम्रोसँग पहिचान गर्न पारिवारिक इतिहास, जनसांख्यिकीय, र क्लिनिकोप्याथोलोजिकल विशेषताहरू सम्बन्धी सटीक मापदण्डहरूमा आधारित परिभाषाहरू।22,23 यस सन्दर्भमा, विशिष्ट जनसंख्यामा BRCA1/2 स्क्रिनिङमा प्रमाणहरू जम्मा भइरहेका छन्, जसले भौगोलिक क्षेत्रहरूमा भिन्नताहरू हाइलाइट गर्दछ।24-27 पश्चिमी सिसिलीमा BC समूहको बारेमा रिपोर्टहरू भए तापनि, पूर्वी सिसिली जनसंख्यामा BRCA1/2 स्क्रिनिङमा कम डेटा उपलब्ध छ।28,29
हामी यहाँ पूर्वी सिसिलीका बीसी बिरामीहरूमा जर्मलाइन BRCA1/2 स्क्रिनिङको नतिजाहरू वर्णन गर्छौं, जसले यी ट्युमरहरूको मुख्य क्लिनिकोप्याथोलोजिकल विशेषताहरूसँग BRCA1 वा BRCA2 उत्परिवर्तनको उपस्थितिलाई थप सहसम्बन्धित गर्दछ।
क्याटानियाको पोलिक्लिनिको अस्पताल रोडोलिको - सान मार्कोमा रहेको "प्रयोगात्मक ओन्कोलोजी र हेमाटोलोजी केन्द्र" मा एक पूर्वव्यापी अध्ययन गरिएको थियो। जनवरी २०१७ देखि मार्च २०२१ सम्म, स्तन र डिम्बग्रंथि, मेलानोमा, प्यान्क्रियाटिक वा प्रोस्टेट क्यान्सर भएका कुल ४५५ बिरामीहरूलाई BRCA/2 आनुवंशिक परीक्षणको लागि हाम्रो आणविक निदान प्रयोगशालामा पठाइएको थियो। यो अध्ययन हेलसिंकीको घोषणापत्र अनुसार गरिएको थियो, र सबै सहभागीहरूले आणविक विश्लेषण गर्नु अघि लिखित सूचित सहमति प्रदान गरेका थिए।
BC को हिस्टोलोजिकल र जैविक विशेषताहरू (ER, PgR, HER2 स्थिति, Ki-67, र ग्रेड) कोर बायोप्सी वा सर्जिकल नमूनाहरूमा मूल्याङ्कन गरिएको थियो, केवल आक्रामक ट्युमर घटकहरूलाई विचार गर्दै। यी विशेषताहरूको आधारमा, BC हरूलाई निम्न रूपमा वर्गीकृत गरिएको थियो: लुमिनल A (ER+ र/वा PgR+, HER2-, Ki-67<२०%), लुमिनल B (ER+ र/वा PgR+, HER2-, Ki-67≥२०%), लुमिनल B-HER2+ (ER र/वा PgR+, HER2+), HER2+ (ER र PgR-, HER2+) वा ट्रिपल नेगेटिभ (ER र PgR-, HER2-)।
BRCA1 र BRCA2 उत्परिवर्तन स्थितिको मूल्याङ्कन गर्नु अघि, एक क्यान्सर विशेषज्ञ, एक आनुवंशिकीविद्, र एक मनोवैज्ञानिक सहितको बहु-अनुशासनात्मक टोलीले प्रत्येक बिरामीको लागि BRCA1 र/वा BRCA1 को उपस्थिति निर्धारण गर्न ट्युमर आनुवंशिकी परामर्श सञ्चालन गर्‍यो। वा BRCA2 जीनमा PV को उच्च जोखिम भएका व्यक्तिहरू। बिरामी छनोट इटालियन सोसाइटी अफ मेडिकल ओन्कोलोजी (AIOM) दिशानिर्देशहरू र स्थानीय सिसिलियन सिफारिसहरू अनुसार गरिएको थियो।30,31 यी मापदण्डहरूमा समावेश छन्: (i) संवेदनशीलता जीनहरूमा ज्ञात रोगजनक भेरियन्टहरूको पारिवारिक इतिहास (जस्तै, BRCA1, BRCA2, TP53, PTEN); (ii) BC भएका पुरुषहरू; (iii) BC र OC भएकाहरू; (iv) BC <36 वर्ष, TNBC <60 वर्ष, वा द्विपक्षीय BC <50 वर्ष; (v) BC <50 वर्ष र कम्तिमा एक पहिलो-डिग्री नातेदारको व्यक्तिगत चिकित्सा इतिहास: (a) BC <50 वर्ष; (b) कुनै पनि उमेरका गैर-श्लेष्मल र गैर-सीमा रेखा OC भएका महिलाहरू; (c) द्विपक्षीय BC; (घ) पुरुष BC; (ङ) प्यान्क्रियाटिक क्यान्सर; (च) प्रोस्टेट क्यान्सर; (vi) दुई वा सोभन्दा बढी BC को व्यक्तिगत इतिहास >५० वर्ष र BC, OC, वा प्यान्क्रियाटिक क्यान्सरको पारिवारिक इतिहास जो एकअर्काको प्रथम-डिग्री नातेदार हुन् (उनी प्रथम-डिग्री नातेदार हुन्) आफन्तहरूको लागि; (vii) OC र कम्तिमा एक प्रथम-डिग्री नातेदारको व्यक्तिगत इतिहास: (क) BC <५० वर्ष; (ख) NOC; (ग) द्विपक्षीय BC; (घ) पुरुष BC; (vii) उच्च-ग्रेड सेरस OC भएको महिला।
प्रत्येक बिरामीबाट २० एमएल परिधीय रगतको नमूना लिइयो र EDTA ट्यूबहरूमा सङ्कलन गरियो (BD बायोसाइन्सेस)। निर्माताको निर्देशन अनुसार QIAsymphony DSP DNA Midi किट आइसोलेसन किट (QIAGEN, Hilden, इटाली) प्रयोग गरेर ०.७ एमएल सम्पूर्ण रगतको नमूनाबाट जीनोमिक डीएनए अलग गरियो र Qubit® 3.0 फ्लोरोमिटर (थर्मो फिशर साइन्टिफिक, वाल्थम, एमए, संयुक्त राज्य अमेरिका) मार्फत परिमाण निर्धारण गरियो। लक्ष्य संवर्धन र पुस्तकालय तयारी Oncomine™ BRCA अनुसन्धान परख शेफ द्वारा गरिन्छ, निर्माताको निर्देशन अनुसार स्वचालित पुस्तकालय तयारीको लागि Ion AmpliSeq™ शेफ अभिकर्मक DL8 किटमा लोड गर्न तयार छ। किटमा दुई मल्टिप्लेक्स PCR प्राइमर पूलहरू छन् जुन सबै BRCA1 (NM_007300.3) र BRCA2 (NM_000059.3) जीनहरू अध्ययन गर्न प्रयोग गर्न सकिन्छ। संक्षेपमा, प्रत्येक पातलो नमूना DNA (10 ng) को 15 µL पुस्तकालय तयारीको लागि बारकोड गरिएको प्लेटहरूमा थपिएको थियो र सबै अभिकर्मकहरू र उपभोग्य वस्तुहरू Ion Chef™ उपकरणमा लोड गरिएको थियो। त्यसपछि स्वचालित पुस्तकालय तयारी र बारकोड गरिएको नमूना पुस्तकालय पूलिङ Ion Chef™ उपकरणमा गरिएको थियो। त्यसपछि निर्माताको निर्देशन अनुसार Qubit® 3.0 फ्लोरोमिटर (थर्मो फिशर साइन्टिफिक, वाल्थम, MA, USA) द्वारा तयार पुस्तकालयहरूको संख्या मूल्याङ्कन गरिएको थियो। अन्तमा, पुस्तकालयहरू Ion Chef™ पुस्तकालय नमूनामा समतुल्य अनुपातमा संयुक्त छन्। ट्यूबहरू (बारकोड गरिएको ट्यूबहरू) र Ion Chef™ उपकरणमा लोड गरियो। Ion 510 चिप (Thermo Fisher Scientific) प्रयोग गरेर Ion Torrent S5 (Thermo Fisher Scientific) उपकरण (Thermo Fisher Scientific) प्रयोग गरेर अनुक्रमण गरिएको थियो। डेटा विश्लेषण Amplicon Suite (SmartSeq srl) र Ion Reporter Software द्वारा गरिएको थियो।
सबै भेरियन्ट नामकरणले मानव जीनोम भेरियसन कन्सोर्टियमको हालको दिशानिर्देशहरू पालना गर्‍यो, जुन अनलाइन उपलब्ध छ (HGVS, http://www.hgvs.org/mutnomen)। BRCA1/2 भेरियन्टहरूको क्लिनिकल महत्त्व अन्तर्राष्ट्रिय कन्सोर्टियम ENIGMA (जर्मलाइन म्युटेन्ट एलिलहरूको व्याख्याको लागि प्रमाण-आधारित नेटवर्क, https://enigmaconsortium.org/) को वर्गीकरण प्रयोग गरेर र ARUP, BRCAEXCHANGE, ClinVar, IARC_LOVD, र UMD जस्ता विभिन्न डाटाबेसहरू परामर्श गरेर परिभाषित गरिएको थियो। वर्गीकरणमा पाँच फरक जोखिम कोटीहरू समावेश छन्: सौम्य (श्रेणी I), सम्भवतः सौम्य (श्रेणी II), अनिश्चित महत्त्वको भेरियन्ट (VUS, श्रेणी III), सम्भावित रोगजनक (श्रेणी IV), र रोगजनक (श्रेणी V)। VarSome ले प्रोटीन संरचना र कार्यमा उत्परिवर्तनको प्रभावको पनि विश्लेषण गरे, 30 डाटाबेसहरूमा पहुँच भएको जानकारीमूलक उपकरण।32
प्रत्येक VUS लाई सम्भावित क्लिनिकल महत्व तोक्न, निम्न कम्प्युटेसनल प्रोटीन भविष्यवाणी एल्गोरिदमहरू प्रयोग गरिएको थियो: MUTATION TASTER, 33 PROVEAN-SIFT (http://provean.jcvi.org/index.php), POLYPHEN-2 (http:// /genetics.bwh.harvard.edu/pph2/) र Align-GVGD (http://agvgd.hci.utah.edu/agvgd_input.php)। वर्ग १ र २ को रूपमा वर्गीकृत भेरियन्टहरूलाई जंगली प्रकार मानिन्थ्यो।
सेन्जर सिक्वेन्सिङले प्रत्येक रोगजनक भेरियन्टको उपस्थिति पुष्टि गर्‍यो। संक्षेपमा, BRCA1 र BRCA2 जीन सन्दर्भ अनुक्रमहरू (क्रमशः NG_005905.2, NM_007294.3 र NG_012772.3, NM_000059.3) प्रयोग गरेर प्रत्येक पत्ता लागेको भेरियन्टको लागि विशिष्ट प्राइमरहरूको एक जोडी डिजाइन गरिएको थियो। त्यसकारण, लक्षित PCR पछि सेन्जर सिक्वेन्सिङ गरिएको थियो।
BRCA1/2 जीनको लागि नकारात्मक परीक्षण गर्ने बिरामीहरूलाई ठूला जीनोमिक पुनर्संरचनाहरू (LGR) को उपस्थिति मूल्याङ्कन गर्न निर्माताको निर्देशन अनुसार मल्टिप्लेक्स लिगेसन-निर्भर प्रोब एम्प्लिफिकेशन (MLPA) द्वारा परीक्षण गरिएको थियो। संक्षेपमा, DNA नमूनाहरू विकृत हुन्छन् र 60 BRCA1 र BRCA2 जीन-विशिष्ट प्रोबहरू प्रयोग गरिन्छ, प्रत्येकले लगभग 60 न्यूक्लियोटाइडहरू लम्बाइमा एक विशिष्ट DNA अनुक्रम पत्ता लगाउँछन्। PCR एम्प्लिकनहरूको एक अद्वितीय सेट मिलेर बनेको प्रोब एम्प्लिफिकेशन उत्पादनहरू, त्यसपछि केशिका इलेक्ट्रोफोरेसिस र Cofalyser.Net सफ्टवेयर द्वारा उपयुक्त ब्याच-विशिष्ट Cofalyser तालिकाहरू (www.mrcholland.com) सँग संयोजनमा विश्लेषण गरिएको थियो।
चयन गरिएका क्लिनिकोप्याथोलोजिकल चरहरू (हिस्टोलोजिकल ग्रेड र Ki-67% प्रसार सूचकांक) BRCA1/2 PV को उपस्थितिसँग सम्बन्धित थिए, जुन प्रिज्म सफ्टवेयर v. 8.4 प्रयोग गरेर फिशरको सटीक परीक्षण प्रयोग गरेर p-मान <0.05 लाई महत्त्वपूर्ण मानेर गणना गरिएको थियो।
जनवरी २०१७ र मार्च २०२१ को बीचमा, ४५५ बिरामीहरूको जर्मलाइन BRCA1/2 उत्परिवर्तनको लागि जाँच गरिएको थियो। पोलिक्लिनिको अस्पतालको प्रयोगात्मक ओन्कोलोजी र हेमाटोलोजी केन्द्रमा उत्परिवर्तन परीक्षण गरिएको थियो। सिसिलियन दिशानिर्देश (http://www.gurs.regione.sicilia.it/Indicep1.htm, N. 02-Venerdì 10 Gennaio 2020) अनुसार, क्याटानियाको रोडोलिको - सान मार्को" समग्रमा, ३८९ बिरामीहरू स्तन क्यान्सर, ३७ डिम्बग्रंथि क्यान्सर, १६ प्यान्क्रियाटिक क्यान्सर, ८ प्रोस्टेट क्यान्सर र ५ मेलानोमा थिए। क्यान्सरको प्रकार र विश्लेषण परिणाम अनुसार बिरामीहरूको वितरण चित्र १ मा देखाइएको छ।
चित्र १ ले अध्ययनको सिंहावलोकन देखाउने फ्लो चार्ट देखाउँछ। स्तन, मेलानोमा, प्यान्क्रियाटिक, प्रोस्टेट, वा डिम्बग्रंथि ट्युमर भएका बिरामीहरूलाई BRCA1 र BRCA2 जीनमा उत्परिवर्तनको लागि परीक्षण गरिएको थियो।
संक्षिप्त रूपहरू: PVs, रोगजनक रूप; VUS, अनिश्चित महत्त्वको रूप; WT, जंगली-प्रकार BRCA1/2 अनुक्रम।
हामीले हाम्रा अध्ययनहरूलाई स्तन क्यान्सर समूहहरूमा छनौट रूपमा केन्द्रित गर्यौं। बिरामीहरूको औसत उमेर ४९ वर्ष (दायरा २३-८९) थियो र तिनीहरू मुख्यतया महिला थिए (n=३७६, वा ९७%)।
यी विषयहरू मध्ये, ६४ (१७%) मा BRCA1/2 उत्परिवर्तनहरू थिए र सबै महिला थिए। पैंतीस (९%) मा PV थियो र २९ (७.५%) मा VUS थियो। ३५ रोगजनक भेरियन्टहरू मध्ये सत्र (४८.६%) BRCA1 मा र १८ (५१.४%) BRCA2 मा देखा पर्‍यो, जबकि BRCA1 (१७.२%) मा ५ VUS र BRCA2 मा २४ (८२.८%) देखा पर्‍यो (चित्र १ र २)। MLPA विश्लेषणमा LGR उपस्थित थिएन।
चित्र २. ३८९ स्तन क्यान्सर बिरामीहरूमा BRCA1 र BRCA2 उत्परिवर्तनको विश्लेषण। (A) ३८९ स्तन क्यान्सर बिरामीहरूमा रोगजनक भेरियन्टहरू (PV) (रातो), अनिश्चित महत्त्वका भेरियन्टहरू (VUS) (सुन्तला), र WT (नीलो) को वितरण; (B) ३८९ स्तन क्यान्सर बिरामीहरूमा पैंतीस (९%) मा BRCA1/2 रोगजनक भेरियन्टहरू (PVs) थिए। ती मध्ये, १७ (४८.६%) BRCA1 PV वाहकहरू (गाढा रातो) र १८ (५१.४%) BRCA2 वाहकहरू (हल्का रातो) थिए; (C) ३८९ विषयहरूमध्ये २९ (७.५%) VUS, ५ (१७.२%) BRCA1 जीन (गाढा सुन्तला) र २४ (८२.८%) BRCA2 जीन (हल्का सुन्तला) बोकेका थिए।
संक्षिप्त रूपहरू: PVs, रोगजनक रूप; VUS, अनिश्चित महत्त्वको रूप; WT, जंगली-प्रकार BRCA1/2 अनुक्रम।
हामीले त्यसपछि BRCA1/2 PV भएका बिरामीहरूमा BC आणविक उपप्रकारहरूको व्यापकताको अनुसन्धान गर्यौं। वितरणमा २ (५.७%) लुमिनल A, १५ (४२.९%) लुमिनल B, ३ (८.६%) लुमिनल B-HER2+, २ (५.७%) HER2+ र १३ (३७.१%) TNBC बिरामीहरू समावेश थिए। BRCA1-पोजिटिभ बिरामीहरू मध्ये, ५ (२९.४%) मा लुमिनल B BC थियो, २ (११.८%) मा HER2+ रोग थियो, र १० (५८.८%) मा TNBC थियो। BRCA1 उत्परिवर्तन बिनाका ट्युमरहरू या त लुमिनल A वा लुमिनल B-HER2+ थिए (चित्र ३)। BRCA2-पोजिटिभ उपसमूहमा, १० (५५.६%) ट्युमरहरू लुमिनल B थिए, ३ (१६.७%) लुमिनल B-HER2+ थिए, ३ (१६.७%) TNBC थिए र २ (११.१%) थिए। लुमिनल ए (चित्र ३)। यस समूहमा कुनै पनि HER2+ ट्युमर थिएनन्। यसरी, TNBC बिरामीहरूमा BRCA1 उत्परिवर्तनहरू प्रचलित छन्, जबकि लुमेन B व्यक्तिहरूमा BRCA2 परिवर्तनहरू प्रमुख छन्।
चित्र ३ BRCA1 र BRCA2 मा रोगजनक भेरियन्ट भएका बिरामीहरूमा स्तन क्यान्सर उपप्रकारहरूको व्यापकता। स्तन क्यान्सरका बिरामीहरूको आणविक उपप्रकारहरूमा BRCA1- (गाढा रातो) र BRCA2- (हल्का रातो) PVs को वितरण देखाउने हिस्टोग्रामहरू। प्रत्येक बक्स भित्र रिपोर्ट गरिएका संख्याहरूले प्रत्येक स्तन क्यान्सर उपप्रकारको लागि BRCA1 र BRCA2 PV भएका बिरामीहरूको प्रतिशतलाई प्रतिनिधित्व गर्दछ।
संक्षिप्त रूपहरू: PVs, रोगजनक प्रकार; HER2+, मानव एपिडर्मल वृद्धि कारक रिसेप्टर 2 सकारात्मक; TNBC, ट्रिपल-नेगेटिभ स्तन क्यान्सर।
त्यसपछि, हामीले BRCA1 र BRCA2 PVs को प्रकार र जीन स्थानीयकरणको मूल्याङ्कन गर्यौं। BRCA1 PV मा, हामीले ७ एकल न्यूक्लियोटाइड भेरियन्टहरू (SNVs), ६ मेटाउने, ३ डुप्लिकेशनहरू र १ सम्मिलन अवलोकन गर्यौं। केवल एउटा उत्परिवर्तन (c.5522delG) ले नयाँ खोजलाई प्रतिनिधित्व गर्दछ। दुबै विषयहरूमा पत्ता लागेको सबैभन्दा सामान्य BRCA1 PV c.5035_5039delCTAAT थियो। यो परिवर्तनमा BRCA1 एक्सोन १५ मा पाँच न्यूक्लियोटाइडहरू (CTAAT) को मेटाउने समावेश छ, जसको परिणामस्वरूप कोडोन १६७९ मा टायरोसिनद्वारा एमिनो एसिड ल्युसिनको प्रतिस्थापन भयो, र अनुमानित वैकल्पिक स्टप कोडोनको साथ अनुवाद फ्रेमशिफ्टको कारणले गर्दा समयपूर्व प्रोटीन ट्रंकेशन हुन्छ। अन्य सबै परिवर्तनहरू केवल एक अवस्थामा पत्ता लगाइन्छ। उल्लेखनीय रूपमा, रिपोर्ट गरिएको PVs मध्ये एक स्प्लिस साइट सहमति क्षेत्रमा अवस्थित थियो (c.4357+1G>T) (तालिका १)।
BRCA2 PV को सन्दर्भमा, हामीले ६ मेटाउने, ६ SNV र २ डुप्लिकेशनहरू अवलोकन गर्यौं। फेला परेका कुनै पनि परिवर्तनहरू नयाँ छैनन्। हाम्रो जनसंख्यामा तीन उत्परिवर्तनहरू पुनरावृत्त भए, c.428dup र c.8487+1G>A ३ विषयहरूमा अवलोकन गरियो, त्यसपछि c.5851_5854delAGTT दुई अवस्थामा प्राप्त गरियो। c.428dup परिवर्तनमा BRCA2 को एक्सोन ५ मा C को पुनरावृत्ति समावेश छ, जसले काटिएको, गैर-कार्यात्मक प्रोटीनलाई एन्कोड गर्ने भविष्यवाणी गरिएको छ। c.8487+1G> उत्परिवर्तन BRCA2 इन्ट्रोन १९ (± १,२) को इन्ट्रोनिक क्षेत्रमा हुन्छ र स्प्लिसिङ सहमति अनुक्रमलाई असर गर्छ, जसको परिणामस्वरूप परिवर्तन गरिएको स्प्लिसिङ असामान्य वा अनुपस्थित प्रोटीन निम्त्याउँछ। c.5851_5854delAGTT रोगजनक भेरियन्ट कोडिङ एक्सोन १० मा न्यूक्लियोटाइड स्थिति ५८५१ देखि ५८५४ सम्म ४-न्यूक्लियोटाइड मेटाउने कारणले हो। BRCA2 जीन र परिणामस्वरूप अनुमानित वैकल्पिक स्टप कोडोन (p.S1951WfsTer) सँग ट्रान्सलेशनल फ्रेमशिफ्ट हुन्छ। उल्लेखनीय रूपमा, पहिले रिपोर्ट गरिएझैं, c.631G>A र c.7008-2A>T दुवै परिवर्तनहरू एउटै बिरामीमा पत्ता लागेका थिए।34 पहिलो उत्परिवर्तनमा BRCA2 एक्सोन ७ मा एडेनोसिन (A) को प्रतिस्थापन समावेश छ जसमा न्यूक्लियोटाइड भएको गुआनिन (G) हुन्छ जसको परिणामस्वरूप कोडोन २११ मा भ्यालिन आइसोल्युसिनमा परिवर्तन हुन्छ, आइसोल्युसिन एमिनो एसिड अत्यधिक समान गुणहरू भएको एमिनो एसिड हो। यो परिवर्तनले सामान्य mRNA स्प्लिसिङलाई असर गर्छ। दोस्रो भेरियन्ट एक इन्ट्रोनिक क्षेत्रमा अवस्थित छ र BRCA2 एन्कोडिङ गर्ने जीनको एक्सोन १३ अघि दोहोरो A देखि थाइमिन (T) प्रतिस्थापनमा परिणाम दिन्छ। c.7008-2A>T परिवर्तनले फरक लम्बाइका धेरै ट्रान्सक्रिप्टहरू उत्पन्न गर्न सक्छ। यसबाहेक, BRCA2 PVs को समूहमा, १८ मध्ये ४ परिवर्तनहरू (२२.२%) थिए अन्तर्मुखी।
त्यसपछि हामीले कार्यात्मक डोमेन र प्रोटीन-बाइन्डिङ क्षेत्रहरूमा BRCA1/2 हानिकारक उत्परिवर्तनहरू म्याप गर्यौं (चित्र 4)। BRCA1 जीनमा, 50% PVs स्तन क्यान्सर क्लस्टर क्षेत्र (BCCR) मा अवस्थित थिए, जबकि 22% उत्परिवर्तनहरू डिम्बग्रंथि क्यान्सर क्लस्टर क्षेत्र (OCCR) मा अवस्थित थिए (चित्र 4A)। BRCA2 PV मा, 35.7% भेरियन्टहरू BCCR क्षेत्रमा अवस्थित थिए र 42.8% उत्परिवर्तनहरू OCCR (चित्र 4B) मा अवस्थित थिए। अर्को, हामीले BRCA1 र BRCA2 प्रोटीन डोमेन भित्र PV को स्थान मूल्याङ्कन गर्यौं। BRCA1 प्रोटीनको लागि, हामीले लूप र कोइल्ड कोइल डोमेनमा तीन PVs, र BRCT डोमेनमा दुई उत्परिवर्तनहरू फेला पार्यौं (चित्र 4A)। BRCA2 प्रोटीनको लागि, 4 PVs BRC दोहोरिने डोमेनमा म्याप गरियो, जबकि 3 इन्ट्रोनिक र 3 एक्सोनिक परिवर्तनहरू ओलिगो/ओलिगोसाकराइड-बाइन्डिङ (OB) र टावर (T) डोमेनहरूमा पत्ता लगाइयो (चित्र) ४ख)।
चित्र ४ BRCA1 र BRCA2 प्रोटीनहरूको योजनाबद्ध प्रतिनिधित्व र रोगजनक भेरियन्टहरूको स्थानीयकरण। यो चित्रले स्तन क्यान्सरका बिरामीहरूमा BRCA1 (A) र BRCA2 (B) रोगजनक भेरियन्टहरूको वितरण देखाउँछ। एक्सोनिक उत्परिवर्तनहरू नीलो रंगमा देखाइएका छन्, जबकि इन्ट्रोनिक भेरियन्टहरू सुन्तला रंगमा देखाइएका छन्। बार उचाइले केसहरूको संख्यालाई प्रतिनिधित्व गर्दछ। BRCA1 र BRCA2 प्रोटीनहरू र तिनीहरूको कार्यात्मक डोमेनहरू रिपोर्ट गरिएका छन्।(A) BRCA1 प्रोटीनमा लूप डोमेन (RING) र न्यूक्लियर लोकलाइजेसन अनुक्रम (NLS), एक कोइल्ड-कोइल डोमेन, एक SQ/TQ क्लस्टर डोमेन (SCD), र एक BRCA1 C-टर्मिनल डोमेन (BRCT) हुन्छ।(B) BRCA2 प्रोटीनमा आठ BRC दोहोरिने, एक हेलिकल डोमेन (हेलिकल), तीन ओलिगोन्यूक्लियोटाइड/ओलिगोसाकराइड-बाइन्डिङ (OB) फोल्डहरू, एक टावर डोमेन (T), र C साइडमा एक NLS हुन्छ। स्तन क्यान्सर क्लस्टर क्षेत्र (BCCR) र डिम्बग्रंथि क्यान्सर क्लस्टर क्षेत्र (OCCR) भनिने क्षेत्रहरू देखाइएका छन्। तल।* स्टप कोडनहरू निर्धारण गर्ने उत्परिवर्तनहरूलाई प्रतिनिधित्व गर्दछ।
त्यसपछि हामीले BRCA1/2 PV को उपस्थितिसँग सम्बन्धित हुन सक्ने BC क्लिनिकोप्याथोलोजिकल सुविधाहरूको अनुसन्धान गर्यौं। १८१ BRCA1/2-नेगेटिभ बिरामीहरू (गैर-वाहक) र सबै वाहकहरू (n = ३५) को लागि पूर्ण क्लिनिकल रेकर्डहरू उपलब्ध थिए। ट्युमर प्रसार दर र ग्रेड बीचको सम्बन्ध थियो।
हामीले हाम्रो समूहको मध्यक (२५%, दायरा <१०-९०%) को आधारमा Ki-६७ को वितरण गणना गर्यौं। Ki-६७ < २५% भएका विषयहरूलाई "कम Ki-६७" को रूपमा परिभाषित गरिएको थियो, जबकि मानहरू ≥ २५% भएका व्यक्तिहरूलाई "उच्च Ki-६७" मानिएको थियो। गैर-वाहकहरू र BRCA1 PV वाहकहरू (चित्र ५A) बीच महत्त्वपूर्ण Ki-६७ भिन्नताहरू (p <०.०१) फेला पर्यो।
चित्र ५ BRCA1 र BRCA2 PV भएका र नभएका स्तन क्यान्सर भएका महिलाहरूमा ग्रेड वितरणसँग Ki-67 को सहसम्बन्ध। (A) BRCA1 (18) वा BRCA2 (17) PV बिरामीहरूको तुलनामा १८१ गैर-वाहक BC बिरामीहरूमा मध्य Ki-67 मानहरू देखाउने बक्सप्लट। ०.५ भन्दा कम P मानहरूलाई सांख्यिकीय रूपमा महत्त्वपूर्ण मानिएको थियो। (B) BRCA1 र BRCA2 उत्परिवर्तन स्थिति (WT विषयहरू, BRCA1 र BRCA2 PV वाहकहरू) अनुसार हिस्टोलोजिकल ग्रेड समूहहरू (G2 र G3) मा BC क्यान्सर बिरामीहरूको असाइनमेन्ट प्रतिनिधित्व गर्ने हिस्टोग्राम।
त्यस्तै गरी, हामीले ट्युमर ग्रेड BRCA1/2 PV को उपस्थितिसँग सम्बन्धित छ कि छैन भनेर जाँच गर्यौं। हाम्रो जनसंख्यामा G1 BC अनुपस्थित भएकोले, हामीले बिरामीहरूलाई दुई समूहमा विभाजन गर्यौं (G2 वा G3)। Ki-67 नतिजाहरूसँग मिल्दोजुल्दो, विश्लेषणले ट्युमर ग्रेड र BRCA1 उत्परिवर्तन बीचको तथ्याङ्कीय रूपमा महत्त्वपूर्ण सम्बन्ध प्रकट गर्‍यो, गैर-वाहकहरूको तुलनामा BRCA1 वाहकहरूमा G3 ट्युमरको उच्च अनुपातको साथ (p<0.005) (चित्र 5B)।
डीएनए अनुक्रमण प्रविधिमा भएको प्रगतिले BRCA1/2 आनुवंशिक परीक्षणमा अभूतपूर्व प्रगतिलाई सक्षम बनाएको छ, जसको पारिवारिक इतिहास क्यान्सर भएका बिरामीहरूको लागि महत्त्वपूर्ण प्रभावहरू छन्। आजसम्म, लगभग २०,००० BRCA1/2 भेरियन्टहरू पहिचान र अमेरिकन सोसाइटी अफ मेडिकल जेनेटिक्स ३५ र ENIGMA प्रणाली अनुसार वर्गीकृत गरिएको छ। ३५,३६ यो सबैलाई थाहा छ कि BRCA1/2 उत्परिवर्ती स्पेक्ट्रम भौगोलिक क्षेत्रहरूमा व्यापक रूपमा भिन्न हुन्छ। ३७ इटाली भित्र, BRCA1/2 PVs को दर ८% देखि ३७% सम्म थियो, जसले व्यापक अन्तर-देश परिवर्तनशीलता देखाउँछ। ३८,३९ लगभग ५० लाख जनसंख्या भएको सिसिली बासिन्दाहरूको संख्याको हिसाबले इटालीको पाँचौं ठूलो क्षेत्र हो। यद्यपि पश्चिमी सिसिलीमा BRCA1/2 को वितरणमा डेटा अवस्थित छ, टापुको पूर्वी भागमा कुनै व्यापक प्रमाण छैन।
हाम्रो अध्ययन पूर्वी सिसिलीमा BC बिरामीहरूमा BRCA1/2 PV को घटनाको बारेमा पहिलो रिपोर्टहरू मध्ये एक हो।28 हामीले हाम्रो विश्लेषण BC मा केन्द्रित गर्यौं, किनकि यो हाम्रो समूहमा अहिलेसम्मको सबैभन्दा सामान्य रोग हो।
३८९ BC बिरामीहरूको परीक्षण गर्दा, ९% ले BRCA1/2 PV बोकेका थिए, जुन BRCA1 र BRCA2 बीच समान रूपमा वितरित थिए। यी नतिजाहरू इटालियन जनसंख्यामा पहिले रिपोर्ट गरिएकाहरूसँग मिल्दोजुल्दो छन्।२८ चाखलाग्दो कुरा के छ भने, हाम्रो समूहको ३% (१३/३८९) पुरुष थिए। यो दर पुरुष स्तन क्यान्सरको लागि अपेक्षित भन्दा बढी छ (सबै BC को १%),४० BRCA1/2 उत्परिवर्तन जोखिममा आधारित जनसंख्याको हाम्रो चयनलाई प्रतिबिम्बित गर्दछ।यद्यपि, यी मध्ये कुनै पनि पुरुषले BRCA1/2 PV विकास गरेनन्, त्यसैले तिनीहरू PALB2, RAD51C र D जस्ता कम सामान्य उत्परिवर्तनहरूको उपस्थितिलाई अस्वीकार गर्न थप आणविक विश्लेषणको लागि उम्मेदवार थिए। BRCA2 VUS स्पष्ट भएको ७% विषयहरूमा अनिश्चित महत्त्वका भेरियन्टहरू प्राप्त गरियो। यो नतिजा पनि पहिले नै अवस्थित प्रमाणहरूसँग मिल्दोजुल्दो छ।२८,४१,४२
जब हामीले BRCA1/2 उत्परिवर्ती महिलाहरूमा BC आणविक उपप्रकारहरूको वितरणको विश्लेषण गर्यौं, हामीले TNBC र BRCA1 PV (58.8%) र luminal B BC र BRCA2 PV (55.6%) बीचको ज्ञात सम्बन्ध पुष्टि गर्यौं।16,43 BRCA1 र BRCA2 PV वाहकहरूमा luminal A र HER2+ ट्युमरहरू अवस्थित साहित्य डेटासँग मिल्दोजुल्दो छन्।16,43
त्यसपछि हामी BRCA1/2 PV को प्रकार र स्थानमा ध्यान केन्द्रित गर्छौं। हाम्रो समूहमा, सबैभन्दा सामान्य BRCA1 PV c.5035_5039delCTAAT थियो। यद्यपि Incorvaia et al. आफ्नो सिसिलियन समूहमा यो भेरियन्टको वर्णन गरेनन्, अन्य लेखकहरूले यसलाई जर्मलाइन BRCA1 PV को रूपमा रिपोर्ट गरेका छन्।34 हाम्रो समूहमा धेरै BRCA1 PV हरू फेला परेका थिए - जस्तै c.181T>G, c.514del, c.3253dupA र c.5266dupC - जुन सिसिलीमा अवलोकन गरिएको छ।28 यी मध्ये, दुई BRCA1 संस्थापक उत्परिवर्तनहरू (c.181T>G र c.5266dupC) सामान्यतया पूर्वी र मध्य युरोप (पोल्याण्ड, चेक), स्लोभेनियाली, अस्ट्रियाली, हंगेरी, बेलारूसी र जर्मन) का अश्केनाजी यहूदीहरूमा पाइन्छन्, 44,45 र, संयुक्त राज्य अमेरिका र अर्जेन्टिनामा, हालै BC र OC भएका इटालियन बिरामीहरूमा "पुनरावर्ती जर्मलाइन भेरियन्ट" को रूपमा परिभाषित गरिएको थियो। 34c.514del भेरियन्ट पहिले पालेर्मो र मेसिनाको उत्तरी सिसिलीका 8 स्तन क्यान्सर बिरामीहरूमा पहिचान गरिएको थियो। रोचक कुरा के छ भने, इन्कोर्भिया एट अल पनि। क्याटानियाका केही परिवारहरूमा c.3253dupA भेरियन्ट फेला पर्यो।28 सबैभन्दा प्रतिनिधि BRCA2 PV हरू c.428dup, c.5851_5854delAGTT र इन्ट्रोनिक भेरियन्ट c.8487+1G>A हुन्, जुन c.428dup, c.5851_5854delAGTT भएका पालेर्मोका एक बिरामीमा थप विस्तृत रूपमा रिपोर्ट गरिएको छ। PV उत्तरपश्चिमी सिसिलीका घरपरिवारहरूमा, मुख्यतया ट्रापानी र पालेर्मो क्षेत्रहरूमा अवलोकन गरिएको थियो, जबकि c.5851_5854delAGTT PV उत्तरपश्चिमी सिसिलीका घरपरिवारहरूमा अवलोकन गरिएको थियो।8487+1G>A भेरियन्ट मेसिना, पालेर्मो र क्याल्टानिसेटाका विषयहरूमा बढी सामान्य थियो।28 रेबेक एट अल। पहिले कोलम्बियामा c.5851_5854delAGTT परिवर्तनको वर्णन गरिएको छ।37 अर्को BRCA2 PV, c.631+1G>A, सिसिली (एग्रीजेन्टो, सिराकुसा र रागुसा) का BC र OC बिरामीहरूमा फेला परेको छ।28 उल्लेखनीय रूपमा, हामीले एउटै बिरामीमा दुई BRCA2 भेरियन्टहरू (BRCA2 c.631G>A र c.7008-2A>T) को सहअस्तित्व अवलोकन गर्यौं, जुन हामीले पहिले रिपोर्ट गरिएझैं cis मोडमा अलग गरिएको मानेका थियौं।34,46 यी BRCA2 uble उत्परिवर्तनहरू वास्तवमा इटालियन क्षेत्रमा बारम्बार अवलोकन गरिन्छन् र समयपूर्व स्टप कोडनहरू परिचय गराएको पाइएको छ, जसले मेसेन्जर RNA स्प्लिसिङलाई असर गर्छ र BRCA2 प्रोटीन असफल बनाउँछ।47,48
हामीले प्रोटिन डोमेन र जीनको अनुमानित OCCR र BCCR क्षेत्रहरूमा BRCA1 र BRCA2 PVs लाई पनि म्याप गर्यौं। यी क्षेत्रहरूलाई रेबेक एट अल द्वारा क्रमशः डिम्बग्रंथि र स्तन क्यान्सर विकासको लागि जोखिम क्षेत्रहरूको रूपमा वर्णन गरिएको थियो।49 यद्यपि, जर्मलाइन भेरियन्टहरूको स्थान र स्तन वा डिम्बग्रंथि क्यान्सर जोखिम बीचको सम्बन्धको बारेमा प्रमाण विवादास्पद छ।28,50-52 हाम्रो जनसंख्यामा, BRCA1 PVs मुख्यतया BCCR क्षेत्रमा अवस्थित थिए, जबकि BRCA2 PVs मुख्यतया OCCR क्षेत्रमा अवस्थित थिए।यद्यपि, हामीले अनुमानित OCCR र BCCR क्षेत्रहरू र BC सुविधाहरू बीच कुनै सम्बन्ध फेला पार्न सकेनौं।यो BRCA1/2 उत्परिवर्तन भएका बिरामीहरूको सीमित संख्याको कारणले हुन सक्छ।प्रोटिन डोमेनको दृष्टिकोणबाट, BRCA1 PVs सम्पूर्ण प्रोटीनमा वितरित हुन्छन्, र BRCA2 परिवर्तनहरू प्राथमिकतामा BRC दोहोरिने डोमेनमा पाइन्छ।
अन्तमा, हामीले BC क्लिनिकोप्याथोलोजिकल सुविधाहरूलाई BRCA1/2 PV सँग सहसम्बन्धित गर्यौं। समावेश गरिएका बिरामीहरूको सीमित संख्याको कारणले गर्दा, हामीले Ki-67 र ट्युमर ग्रेड बीच मात्र महत्त्वपूर्ण सम्बन्ध फेला पार्यौं। यद्यपि Ki-67 को मूल्याङ्कन र व्याख्या केही हदसम्म विवादास्पद छ, यो निश्चित छ कि उच्च प्रसार दरहरू रोग पुनरावृत्तिको बढ्दो जोखिम र बाँच्नको कमीसँग सम्बन्धित छन्। आजसम्म, "उच्च" र "कम" Ki-67 बीचको भिन्नताको लागि कटअफ २०% छ। यद्यपि, यो थ्रेसहोल्ड हाम्रो BRCA1/2 उत्परिवर्तन बिरामी जनसंख्यामा लागू हुँदैन, जसको औसत Ki-67 मान २५% छ। उच्च Ki-67 दरहरूमा यो प्रवृत्ति हाम्रो ल्युमिनल B र TNBC समूहहरूमा प्रचलनद्वारा व्याख्या गर्न सकिन्छ, जसमध्ये केही ल्युमिनल A ट्युमरहरू उपस्थित थिए। यद्यपि, केही प्रमाणहरूले सुझाव दिन्छ कि उच्च Ki-67 कटअफ (२५-३०%) ले बिरामीहरूलाई उनीहरूको पूर्वानुमान अनुसार राम्रोसँग स्तरीकृत गर्न सक्छ।५३,५४ हाम्रो विश्लेषणको नतिजाबाट, महत्त्वपूर्ण सहसम्बन्ध आश्चर्यजनक छैन।उच्च बीचमा हुन्छ Ki-67 र ग्रेडहरू र BRCA1 PV को उपस्थिति। वास्तवमा, BRCA1-सम्बन्धित ट्युमरहरू TNBC को विशिष्ट हुन् र अधिक आक्रामक विशेषताहरू प्रदर्शन गर्छन्।16,17
निष्कर्षमा, यो अध्ययनले पूर्वी सिसिलीबाट BC समूहमा BRCA1/2 को उत्परिवर्तन स्थितिको बारेमा रिपोर्ट प्रदान गर्दछ। समग्रमा, हाम्रा निष्कर्षहरू BC मा उत्परिवर्तन प्रसार र क्लिनिकोप्याथोलोजिकल सुविधाहरू दुवैको सन्दर्भमा पहिले नै अवस्थित प्रमाणहरूसँग मिल्दोजुल्दो छन्। BRCA1/2- उत्परिवर्तनशील BC बिरामीहरूको ठूलो जनसंख्यामा थप अध्ययनहरू, जस्तै बहु-जीनोम विस्तारित उत्परिवर्तन विश्लेषण प्रयोग गर्ने, BRCA1/2 भन्दा फरक र कम बारम्बार हुने PVs को उपस्थिति मूल्याङ्कन गर्न वारेन्टी गरिएको छ। यसले आनुवंशिक उत्परिवर्तनका कारण क्यान्सरको बढ्दो जोखिममा रहेका विषयहरूको बढ्दो संख्याको पहिचान र उचित व्यवस्थापनलाई अनुमति दिनेछ।
हामीले पुष्टि गर्यौं कि बिरामीहरूले अनुसन्धान उद्देश्यका लागि आफ्नो ट्युमर नमूनाहरू गुमनाम रूपमा जारी गर्न सूचित सहमतिमा हस्ताक्षर गरे। हेलसिंकीको घोषणापत्र अनुसार सबै बिरामीहरूले लिखित सूचित सहमतिमा हस्ताक्षर गरे। AOU Policlinico “G.Rodolico – S.Marco” को नीति अनुसार, यो अध्ययनलाई नैतिक समीक्षाबाट छुट दिइएको थियो किनभने BRCA1/2 विश्लेषण क्लिनिकल अभ्यास अनुसार गरिएको थियो र सबै बिरामीहरूले लिखित सूचित सहमति दिएका थिए। बिरामीहरूले अनुसन्धान उद्देश्यका लागि आफ्नो डेटा प्रयोग गर्न पनि सहमति जनाउँछन्।
नैतिक समितिले अनुरोध गरे अनुसार स्तन क्यान्सरका बिरामीहरूको हेरचाहमा सहयोग गर्नुभएकोमा हामी प्रो. पाओलो भिग्नेरीलाई धन्यवाद दिन्छौं।
फेडेरिका मार्टोरानाले इस्टिटुटो जेन्टिली, एली लिली, नोभार्टिस, फाइजरबाट मानार्थ पुरस्कारको रिपोर्ट गर्छिन्। अन्य लेखकहरूले यस कार्यमा कुनै पनि स्वार्थको द्वन्द्व नभएको घोषणा गर्छन्।
१. सुङ एच, फेर्ले जे, सिगेल आरएल, एट अल। ग्लोबल क्यान्सर स्ट्याटिस्टिक्स २०२०: ग्लोबोकनले विश्वभरका १८५ देशहरूमा ३६ क्यान्सरको घटना र मृत्युदर अनुमान गरेको छ। CA क्यान्सर जे क्लिन.२०२१;७१(३):२०९-२४९.doi: १०.३३२२/caac.२१६६०