جاوا سکرېپټ اوس مهال ستاسو په براوزر کې غیر فعال دی. د دې ویب پاڼې ځینې ځانګړتیاوې به کار ونکړي کله چې جاوا سکرېپټ غیر فعال وي.
د خپلو ځانګړو جزئیاتو او د علاقې وړ درملو سره راجستر کړئ او موږ به هغه معلومات چې تاسو یې چمتو کوئ زموږ په پراخه ډیټابیس کې مقالو سره پرتله کړو او ژر تر ژره به تاسو ته د PDF کاپي بریښنالیک واستوو.
作者 Stella S، Vitale SR، Martorana F، Massimino M، Pavone G، Lanzafame K، Bianca S، Barone C، Gorgone C، Fichera M، Manzella L
Stefania Stella, 1,2 Silvia Rita Vitale, 1,2 Federica Martorana, 1,2 Michele Massimino, 1,2 Giuliana Pavone, 3 Katia Lanzafame, 3 Sebastiano Bianca, 4 Chiara Barone, 5 Cristina Gorgone, 6 Marco Fichera, 6 Marco Fichera, 1,2 of Experimental Manzella and 6. طب، د کاتانیا پوهنتون، کاتانیا، 95123، ایټالیا؛ 2 د تجربوي آنکولوژي او هیماتولوژي مرکز، AOU Policlinico "G. Rodolico – San Marco"، Catania، 95123، ایټالیا؛ 3 طبي آنکولوژي، AOU Policlinico "G. Rodolico - San Marco"، Catania، 95123، ایټالیا؛ 4 طبي جینیات، ARNAS Garibaldi، Catania، 95123، ایټالیا؛ ۵ طب جینیات، ASP، سیراکوز، ۹۶۱۰۰، ایټالیا؛ ۶ د بایومیډیکل او بایو ټیکنالوژۍ علومو څانګه، د کاتانیا پوهنتون، طبي جینیات، کاتانیا، ایټالیا، ۹۵۱۲۳؛ ۷ د اواسي څیړنیز انسټیټیوټ-IRCCS، ټروینا، ۹۴۰۱۸، ایټالیا اړیکې: سټیفنیا سټیلا، ټیلیفون +۳۹ ۰۹۵ ۳۷۸ ۱۹۴۶، بریښنالیک [email protected]؛ [email protected] موخه: په BRCA1 او BRCA2 کې د جراثیمو تغیرات او د سینې سرطان (BC)، تخمدان (OC) او نورو کې د سرطان د ژوند خطر سره تړاو لري. د BRCA جین لپاره ازموینه د انفرادي خطر ارزولو لپاره کلیدي ده، او همدارنګه د سرطان ناروغانو کې د صحي کیریرونو او ګنډلو درملنې کې د مخنیوي میتودونو موندلو لپاره. د BRCA1 او BRCA2 بدلونونو خپریدل په جغرافیایي سیمو کې په پراخه کچه توپیر لري، او که څه هم په سیسیلین کورنیو کې د BRCA رنځجنیک ډولونو په اړه معلومات شتون لري، په ځانګړي ډول په ختیځ سیسیلین کې نفوس په نښه کولو مطالعات کم دي. زموږ د مطالعې هدف دا و چې د ختیځ سیسیلین څخه د BC ناروغانو په ډله کې د BRCA رنځجنیک جراثیمو بدلونونو پیښې او ویش وڅیړل شي او د راتلونکي نسل ترتیب په کارولو سره د ځانګړو BC ځانګړتیاو سره د دوی تړاو ارزونه وشي. د بدلونونو شتون د تومور درجې او د خپریدو شاخص سره تړاو لري. پایلې: په ټولیز ډول، 35 ناروغانو (9٪) د BRCA رنځجنیک ډول درلود، 17 (49٪) په BRCA1 کې او 18 (51٪) په BRCA2 کې. د BRCA1 بدلونونه په درې ګوني منفي BC ناروغانو کې عام دي، پداسې حال کې چې BRCA2 بدلونونه ډیر عام دي. په لومینل BC ناروغانو کې. د غیر کیریرانو په پرتله، د BRCA1 ډولونو سره مضامین د تومور درجه او د خپریدو شاخص د پام وړ لوړ درلود. پایلې: زموږ موندنې د ختیځ سیسلي څخه د BC ناروغانو کې د BRCA بدلون حالت عمومي کتنه وړاندې کوي او د میراثي BC ناروغانو پیژندلو کې د NGS تحلیل رول تاییدوي. په ټولیز ډول، دا معلومات د پخوانیو شواهدو سره مطابقت لري چې د بدلون وړ وړونکو کې د سرطان د مناسب مخنیوي او درملنې لپاره د BRCA سکرینینګ ملاتړ کوي.
د سینې سرطان (BC) په ټوله نړۍ کې تر ټولو عام ناوړه ناروغي او په ښځو کې تر ټولو وژونکی سرطان دی. ۱ هغه بیولوژیکي ځانګړتیاوې چې د BC تشخیص او کلینیکي چلند ټاکي په پراخه کچه مطالعه شوي او د وخت په تیریدو سره په جزوي ډول روښانه شوي دي. په حقیقت کې، ډیری سروګیټ مارکرونه اوس مهال د BC په مختلفو مالیکولي فرعي ډولونو طبقه بندي کولو لپاره کارول کیږي. دوی د ایسټروجن (ER) او/یا پروګیسټرون ریسیپټر (PgR)، د انسان د ایپیډرمل ودې فاکتور ریسیپټر 2 (HER2) امپلیفیکیشن، د تکثیر شاخص Ki-67 او د تومور درجه (G) دي.۲ د دې متغیرونو ترکیب لاندې BC کټګورۍ پیژندلي: ۱) د لومینل تومورونه، چې د ER او/یا PgR څرګندونه ښیې، د BCs ۷۵٪ لپاره حساب شوي. دا تومورونه نور په لومینل A ویشل شوي وو، کله چې Ki-67 د ۲۰٪ څخه ښکته او HER2 منفي و، او لومینل B، کله چې Ki-67 د ۲۰٪ سره مساوي یا پورته و او د HER2 امپلیفیکیشن په شتون کې، د تکثیر شاخص په پام کې نیولو پرته؛ ۲) د HER2+ تومورونه چې ER او PgR منفي دي مګر د HER2 امپلیفیکیشن ښیې. دا ګروپ د ټولو سینې تومورونو ۱۰٪ جوړوي؛ ۳) د سینې درې ګونی منفي سرطان (TNBC)، کوم چې د ER او PgR څرګندونه او د HER2 امپلیفیکیشن نه ښیې، د سینې سرطان شاوخوا ۱۵٪ جوړوي.۲-۴
د دې BC فرعي ډولونو په منځ کې، د تومور درجه او د خپریدو شاخص د کراس سیکشنل بایو مارکرونو استازیتوب کوي چې په مستقیم او خپلواک ډول د تومور د تیري او تشخیص سره تړاو لري.5,6
د پورته ذکر شویو بیولوژیکي ځانګړتیاوو سربیره، د میراثي جینیاتي بدلونونو رول چې د BC پراختیا لامل کیږي په تیرو څو کلونو کې ډیر مهم شوی دی. ۷ د سینې تومورونه په هرو لسو کې ۱ د ځانګړو جینونو کې د جراثیمو بدلونونو له امله میراثي کیږي. ۸ دوه لوی ایپیډیمولوژیکي مطالعات چې له ۱۸۰،۰۰۰ څخه زیاتو میرمنو سره تړاو لري پدې وروستیو کې د اتو جینونو یوه ډله پیژندلې ده (د بیلګې په توګه، ATM، BARD1، BRCA1، BRCA2، CHK2، PALB2، RAD51C، او RAD51D) چې په عمده توګه د میراثي BC لپاره مسؤل دي. د دې جینونو په منځ کې، BRCA1 او BRCA2 (له دې وروسته د BRCA1/2 په نوم یادیږي) د سینې تومورونو د پراختیا سره خورا قوي اړیکه ښودلې. ۹-۱۲ په حقیقت کې، د جراثیمو BRCA1/2 بدلونونه د BC او همدارنګه د نورو ناوړه ناروغیو د ژوند خطر د پام وړ زیاتوي، پشمول د تخمدان، پروستات، پانقراس، کولوریکټل، او میلانوما. د ۱۳ څخه تر ۸۰ کلونو پورې، د BC مجموعي پیښې په هغو میرمنو کې ۷۲٪ دي چې د BRCA1 رنځجنیک ډول لري. (PV) او په هغو ښځو کې چې BRCA2 PV لري 69٪.14
د یادونې وړ ده چې یوه وروستۍ خپرونه وړاندیز کوي چې د BC خطر د PV ډول پورې اړه لري. په حقیقت کې، د رنځجنیک ټرنکیټینګ ډولونو په پرتله، د غلط فهمۍ څرګند ډولونه، په ځانګړې توګه په BRCA1 جین کې، د BC د کم خطر سره تړاو لري، په ځانګړې توګه په زړو میرمنو کې.15
د BRCA1 یا BRCA2 PV شتون د مختلفو بیولوژیکي او کلینیکوپیتولوژیکي ځانګړتیاو سره تړاو درلود. 16,17 د BRCA1 سره تړلي BCs په کلینیکي ډول تیریدونکي، ضعیف توپیر لرونکي، او خورا پراخونکي دي. دا تومورونه معمولا درې ځله منفي وي او د پیل عمر یې کم وي. هغه تومورونه چې د BRCA2 بدل شوي ناروغانو کې پیښیږي معمولا د منځنۍ کچې څخه تر ښه توپیر لرونکي درجې او متغیر پراخونکي شاخصونه ښیې. دا تومورونه په لومین B کې ډیر عام دي او معمولا په زړو لویانو کې پیښیږي. 16-18 د پام وړ، په BRCA1 او BRCA2 کې بدلونونه د ځانګړو درملنو لپاره حساسیت زیاتوي، پشمول د پلاټینیم مالګې او هدف لرونکي درمل لکه پولی (ADP-ribose) پولیمریز مخنیوی کونکي (PARPi). 19,20
په تیرو څو کلونو کې، په کلینیکي عمل کې د راتلونکي نسل ترتیب (NGS) پلي کول د BC ناروغانو زیاتیدونکي شمیر ته اجازه ورکړې چې د سرطان حساسیت سنډرومونو لپاره مالیکولر ازموینې ترسره کړي، په شمول د BRCA1/2.21 په ورته وخت کې، د کورنۍ تاریخ، ډیموګرافیک، او کلینیکوپیتولوژیکي ځانګړتیاو په اړه د دقیق معیارونو پراساس تعریفونه ترڅو د BRCA1/2 ازموینې وړ اشخاص په ښه توګه وپیژني. 22,23 پدې شرایطو کې، شواهد په ځانګړو نفوسو کې د BRCA1/2 سکرینینګ په اړه راټولیږي، چې په جغرافیایي سیمو کې توپیرونه په ګوته کوي. 24-27 که څه هم په لویدیځ سیسلي کې د BC کوهورټ په اړه راپورونه شتون لري، د ختیځ سیسلي نفوس کې د BRCA1/2 سکرینینګ په اړه لږ معلومات شتون لري. 28,29
موږ دلته د ختیځ سیسلي څخه د BC ناروغانو کې د جرم لاین BRCA1/2 سکرینینګ پایلې تشریح کوو، چې د BRCA1 یا BRCA2 بدلونونو شتون د دې تومورونو اصلي کلینیکوپیتولوژیکي ځانګړتیاو سره نور هم تړاو لري.
د پولیکلینیکو روغتون "د تجربوي آنکولوژي او هیماتولوژي مرکز" کې د کاتانیا په روډولیکو - سان مارکو کې یوه پخوانۍ مطالعه ترسره شوه. د جنوري 2017 څخه تر مارچ 2021 پورې، د سینې او تخمدان، میلانوما، پانقراص یا پروستات سرطان سره ټول 455 ناروغان زموږ د مالیکولر تشخیصي لابراتوار ته د BRCA/2 جینیاتي ازموینې لپاره راجع شوي. دا څیړنه د هیلسنکي د اعلامیې سره سم ترسره شوه، او ټولو ګډونوالو د مالیکولر تحلیل دمخه لیکلي باخبره رضایت چمتو کړ.
د BC هسټولوژیکي او بیولوژیکي ځانګړتیاوې (ER، PgR، HER2 حالت، Ki-67، او درجه) د اصلي بایوپسي یا جراحي نمونو په پام کې نیولو سره ارزول شوي، یوازې د تومور تیریدونکي اجزا په پام کې نیولو سره. د دې ځانګړتیاو پراساس، BCs په لاندې ډول طبقه بندي شوي: لومینل A (ER+ او/یا PgR+، HER2-، Ki-67<20%)، لومینل B (ER+ او/یا PgR+، HER2-، Ki-67≥20%)، لومینل B-HER2+ (ER او/یا PgR+، HER2+)، HER2+ (ER او PgR-، HER2+) یا درې ګونی منفي (ER او PgR-، HER2-).
د BRCA1 او BRCA2 د بدلون حالت ارزولو دمخه، د انکولوژیست، جینیات پوه او ارواپوه په ګډون یو څو اړخیز ټیم د هر ناروغ لپاره د تومور جینیات مشوره ترسره کړه ترڅو د BRCA1 او/یا BRCA1 شتون یا هغه اشخاص چې د BRCA2 جین کې د PV لوړ خطر لري مشخص کړي. د ناروغانو انتخاب د ایټالیا د طبي آنکولوژي ټولنې (AIOM) لارښوونو او سیمه ایز سیسیلین سپارښتنو سره سم ترسره شو. 30,31 پدې معیارونو کې شامل دي: (i) د حساسیت جینونو کې د پیژندل شوي رنځجنیک ډولونو کورنۍ تاریخ (د مثال په توګه، BRCA1، BRCA2، TP53، PTEN)؛ (ii) د BC سره نارینه؛ (iii) هغه کسان چې BC او OC لري؛ (iv) د BC سره میرمنې <36 کاله، TNBC <60 کاله، یا دوه اړخیز BC <50 کاله؛ (v) د BC شخصي طبي تاریخ <50 کاله او لږترلږه یو د لومړۍ درجې خپلوان: (a) BC <50 کاله؛ (b) د هر عمر غیر بلغمي او غیر سرحدي OC؛ (c) دوه اړخیز BC؛ (d) نارینه BC؛ (e) د پانقراس سرطان؛ (f) د پروستات سرطان؛ (vi) د BC څخه ډیر دوه یا ډیر شخصي تاریخ او د BC، OC، یا د پانقراس سرطان کورنۍ تاریخ د هغو خپلوانو لپاره چې د یو بل سره د لومړۍ درجې خپلوان دي (پشمول د هغو خپلوانو چې هغه ورسره د لومړۍ درجې خپلوان ده)؛ (vii) د OC او لږترلږه د لومړۍ درجې یو شخصي تاریخ: (a) BC <50 کاله؛ (b) NOC؛ (c) دوه اړخیز BC؛ (d) نارینه BC؛ (vii) د لوړې درجې سیروس OC سره ښځینه.
د هر ناروغ څخه د 20 ملی لیتره د وینې نمونه اخیستل شوې او د EDTA ټیوبونو (BD بایوسینس) ته راټوله شوې. جینومیک DNA د QIAsymphony DSP DNA Midi کټ Isolation Kit (QIAGEN، Hilden، ایټالیا) په کارولو سره د 0.7 ملی لیتره بشپړ وینې نمونو څخه جلا شو او د جوړونکي لارښوونو سره سم د Qubit® 3.0 فلورومیټر (ترمو فشر ساینسي، والټم، MA، USA) له لارې تیر شو. اندازه کول ترسره شول. د هدف غني کول او د کتابتون چمتو کول د Oncomine™ BRCA Research Assay Chef لخوا ترسره کیږي، چې د جوړونکي لارښوونو سره سم د اتوماتیک کتابتون چمتو کولو لپاره د Ion AmpliSeq™ Chef Reagents DL8 Kit کې د بارولو لپاره چمتو دی. دا کټ دوه ملټي پلیکس PCR پرائمر حوضونه لري چې د ټولو BRCA1 (NM_007300.3) او BRCA2 (NM_000059.3) جینونو مطالعې لپاره کارول کیدی شي. په لنډه توګه، د هر حل شوي نمونې DNA (10 ng) 15 µL د کتابتون چمتو کولو لپاره بارکوډ شوي پلیټونو ته اضافه شو او ټول ریجنټونه او مصرفي توکي په Ion Chef™ وسیله کې بار شول. بیا د کتابتون اتومات چمتو کول او د بارکوډ شوي نمونې کتابتون پول کول په Ion Chef™ وسیله کې ترسره شول. بیا د چمتو شوي کتابتونونو شمیر د Qubit® 3.0 فلورومیټر (ترمو فشر ساینسي، والټم، MA، USA) لخوا د جوړونکي لارښوونو سره سم ارزول شو. په پای کې، کتابتونونه په Ion Chef™ کتابتون کې په مساوي تناسب کې سره یوځای کیږي. د نمونې ټیوبونه (بارکوډ شوي ټیوبونه) ​​او د آیون شیف ™ وسیلې ته بار شوي. ترتیب د آیون ټورنټ S5 (ترمو فشر ساینسي) وسیلې (ترمو فشر ساینسي) په کارولو سره د آیون 510 چپ (ترمو فشر ساینسي) په کارولو سره ترسره شو. د معلوماتو تحلیل د امپلیکون سویټ (سمارټ سیک srl) او آیون راپور ورکوونکي سافټویر لخوا ترسره شو.
د ټولو ډولونو نومول د انساني جینوم تغیراتو کنسورشیم اوسني لارښوونې تعقیب کړې، چې آنلاین شتون لري (HGVS، http://www.hgvs.org/mutnomen). د BRCA1/2 ډولونو کلینیکي اهمیت د نړیوال کنسورشیم ENIGMA (د جرم لاین میوټینټ ایلیلونو تشریح کولو لپاره د شواهدو پر بنسټ شبکه، https://enigmaconsortium.org/) طبقه بندي او د مختلفو ډیټابیسونو لکه ARUP، BRCAEXCHANGE، ClinVar، IARC_LOVD، او UMD سره مشوره کولو په کارولو سره تعریف شوی. په طبقه بندي کې پنځه جلا خطر کټګورۍ شاملې دي: بې نظیر (کټګورۍ I)، احتمالي بې نظیر (کټګورۍ II)، د ناڅرګند اهمیت ډول (VUS، کټګورۍ III)، احتمالي رنځجن (کټګورۍ IV)، او رنځجن (کټګورۍ V). VarSome د پروټین جوړښت او فعالیت باندې د بدلونونو اغیز هم تحلیل کړ، یو معلوماتي وسیله چې 30 ډیټابیسونو ته لاسرسی لري.32
د هر VUS لپاره د احتمالي کلینیکي اهمیت ټاکلو لپاره، لاندې محاسباتي پروټین وړاندوینې الګوریتمونه کارول شوي: MUTATION TASTER، 33 PROVEAN-SIFT (http://provean.jcvi.org/index.php)، POLYPHEN-2 (http:// /genetics.bwh.harvard.edu/pph2/) او Align-GVGD (http://agvgd.hci.utah.edu/agvgd_input.php). هغه ډولونه چې د لومړي او دوهم ټولګي په توګه طبقه بندي شوي وو وحشي ډول ګڼل شوي وو.
د سنجر ترتیب د هر رنځوریک ډول شتون تایید کړ. په لنډه توګه، د BRCA1 او BRCA2 جین حوالې ترتیبونو (NG_005905.2، NM_007294.3 او NG_012772.3، NM_000059.3، په ترتیب سره) په کارولو سره د هر کشف شوي ډول لپاره د ځانګړو پرائمرونو یوه جوړه ډیزاین شوه. له همدې امله، هدفمند PCR د سنجر ترتیب وروسته ترسره شو.
هغه ناروغان چې د BRCA1/2 جین لپاره یې منفي ازموینه کړې وه د جوړونکي د لارښوونو سره سم د ملټي پلیکس لیګیشن پورې تړلي پروب امپلیفیکیشن (MLPA) لخوا ازموینه وشوه ترڅو د لوی جینومیک بیا تنظیم (LGR) شتون ارزونه وکړي. په لنډه توګه، د DNA نمونې بې برخې شوي او تر 60 پورې BRCA1 او BRCA2 جین ځانګړي پروبونه کارول کیږي، هر یو یې د DNA ځانګړی ترتیب کشف کوي چې شاوخوا 60 نیوکلیوټایډونه اوږدوالی لري. د پروب امپلیفیکیشن محصولات، چې د PCR امپلیکونز یو ځانګړی سیټ لري، بیا د کیپلیري الیکټروفوریسس او د Cofalyser.Net سافټویر لخوا د مناسب بیچ ځانګړي Cofalyser جدولونو (www.mrcholland.com) سره په ګډه تحلیل شوي.
ټاکل شوي کلینیکوپیتولوژیکي متغیرات (هسټولوژیکي درجه او د Ki-67٪ د خپریدو شاخص) د BRCA1/2 PV شتون سره تړاو درلود، چې د پریزم سافټویر v. 8.4 په کارولو سره د فشر دقیق ازموینې په کارولو سره محاسبه شوي چې د p-value <0.05 د پام وړ ګڼل کیږي.
د ۲۰۱۷ کال د جنوري او ۲۰۲۱ کال د مارچ ترمنځ، ۴۵۵ ناروغان د جراثیم BRCA1/2 بدلونونو لپاره معاینه شول. د پولیکلینیکو روغتون د تجربوي آنکولوژي او هیماتولوژي مرکز کې د بدلون ازموینه ترسره شوه. د سیسیلین لارښود (http://www.gurs.regione.sicilia.it/Indicep1.htm, N. 02-Venerdì 10 Gennaio 2020) سره سم، د کاتانیا روډولیکو - سان مارکو" په ټولیز ډول، ۳۸۹ ناروغان د سینې سرطان، ۳۷ د تخمدان سرطان، ۱۶ د پانقراس سرطان، ۸ د پروستات سرطان او ۵ میلانوما وو. د سرطان ډول او تحلیل پایلو سره سم د ناروغانو ویش په ۱ شکل کې ښودل شوی.
شکل ۱ د مطالعې عمومي کتنه ښیي چې د جریان چارټ ښیي. هغه ناروغان چې د سینې، میلانوما، پانقراس، پروستات، یا تخمدان تومورونه لري د BRCA1 او BRCA2 جینونو کې د بدلونونو لپاره معاینه شوي.
لنډیزونه: PVs، د ناروغۍ ډول؛ VUS، د نامعلوم اهمیت ډول؛ WT، د وحشي ډول BRCA1/2 ترتیب.
موږ خپلې مطالعې په انتخابي ډول د سینې سرطان ډلو باندې متمرکزې کړې. د ناروغانو منځنۍ عمر 49 کاله و (حد 23-89) او په عمده توګه ښځینه وې (n=376، یا 97٪).
د دې مضامینو څخه، ۶۴ (۱۷٪) د BRCA1/2 بدلونونه درلودل او ټولې یې ښځینه وې. پنځه دیرش (۹٪) PV درلودې او ۲۹ (۷.۵٪) VUS درلودې. د ۳۵ رنځجنیک ډولونو څخه اوولس (۴۸.۶٪) په BRCA1 کې او ۱۸ (۵۱.۴٪) په BRCA2 کې پیښ شوي، پداسې حال کې چې ۵ VUS په BRCA1 (۱۷.۲٪) او ۲۴ (۸۲.۸٪) په BRCA2 کې پیښ شوي (شکلونه ۱ او ۲). LGR په MLPA تحلیل کې شتون نه درلود.
شکل ۲. د ۳۸۹ سینې سرطان ناروغانو کې د BRCA1 او BRCA2 بدلونونو تحلیل. (الف) د ۳۸۹ سینې سرطان ناروغانو کې د رنځوریک ډولونو (PV) (سور)، د نامعلوم اهمیت ډولونو (VUS) (نارنج)، او WT (نیلي) ویش؛ (ب) د سینې سرطان ۳۸۹ ناروغان پنځه دیرش (۹٪) د BRCA1/2 رنځوریک ډولونو (PVs) درلودل. د دوی په منځ کې، ۱۷ (۴۸.۶٪) د BRCA1 PV وړونکي (تیاره سور) او ۱۸ (۵۱.۴٪) د BRCA2 وړونکي (روښانه سور) وو؛ (ج) د ۳۸۹ ناروغانو څخه ۲۹ (۷.۵٪) VUS، ۵ (۱۷.۲٪) BRCA1 جینونه (تیاره نارنجي) او ۲۴ (۸۲.۸٪) BRCA2 جینونه (روښانه نارنجي) درلودل.
لنډیزونه: PVs، د ناروغۍ ډول؛ VUS، د نامعلوم اهمیت ډول؛ WT، د وحشي ډول BRCA1/2 ترتیب.
موږ بیا د BRCA1/2 PV ناروغانو کې د BC مالیکولر فرعي ډولونو خپریدو څیړنه وکړه. په ویش کې 2 (5.7٪) luminal A، 15 (42.9٪) luminal B، 3 (8.6٪) luminal B-HER2+، 2 (5.7٪) HER2+ او 13 (37.1٪) TNBC ناروغان شامل وو. د BRCA1 مثبت ناروغانو په منځ کې، 5 (29.4٪) luminal B BC درلود، 2 (11.8٪) HER2+ ناروغي درلوده، او 10 (58.8٪) TNBC درلود. د BRCA1 بدلونونو پرته تومورونه یا luminal A یا luminal B-HER2+ وو (شکل 3). د BRCA2 مثبت فرعي ګروپ کې، 10 (55.6٪) تومورونه luminal B وو، 3 (16.7٪) luminal B-HER2+ وو، 3 (16.7٪) TNBC وو او 2 (11.1٪) وو لومین A (شکل 3). پدې ګروپ کې هیڅ HER2+ تومور شتون نه درلود. په دې توګه، د TNBC ناروغانو کې د BRCA1 بدلونونه شتون لري، پداسې حال کې چې د BRCA2 بدلونونه د لومین B اشخاصو کې غالب دي.
شکل ۳ د BRCA1 او BRCA2 په ناروغانو کې د سینې سرطان فرعي ډولونو خپریدل. هسټوګرامونه د سینې سرطان ناروغانو د مالیکولي فرعي ډولونو ترمنځ د BRCA1- (تیاره سور) او BRCA2- (روښانه سور) PV ویش ښیې. په هر بکس کې راپور شوي شمیرې د هر سینې سرطان فرعي ډول لپاره د BRCA1 او BRCA2 PV ناروغانو سلنه استازیتوب کوي.
لنډیزونه: PVs، د ناروغۍ ډول؛ HER2+، د انسان د ایپیډرمل ودې فکتور ریسیپټر 2 مثبت؛ TNBC، درې ګونی منفي د سینې سرطان.
وروسته، موږ د BRCA1 او BRCA2 PVs ډول او جین ځایی کول ارزولي دي. په BRCA1 PV کې، موږ د 7 واحد نیوکلیوټایډ ډولونه (SNVs)، 6 حذف کول، 3 نقلونه او 1 داخلول ولیدل. یوازې یو بدلون (c.5522delG) د نوي کشف استازیتوب کوي. په دواړو مضامینو کې ترټولو عام BRCA1 PV کشف شوی c.5035_5039delCTAAT و. دا بدلون په BRCA1 ایکسون 15 کې د پنځو نیوکلیوټایډونو (CTAAT) حذف کول شامل دي، چې پایله یې د کوډون 1679 کې د ټایروسین لخوا د امینو اسید لیوسین ځای ناستی دی، او د وړاندوینې شوي بدیل سټاپ کوډون سره د ژباړې چوکاټ بدلون له امله د پروټین وخت دمخه کمیدو لامل کیږي. نور ټول بدلونونه یوازې په یوه قضیه کې کشف شوي. د پام وړ، د راپور شوي PVs څخه یو د سپلایس سایټ موافقې سیمې (c.4357+1G>T) کې موقعیت درلود (جدول 1).
د BRCA2 PV په اړه، موږ د 6 حذف کولو، 6 SNVs او 2 نقلونو مشاهده وکړه. هیڅ یو موندل شوی بدلون نوی نه دی. زموږ په نفوس کې درې بدلونونه تکرار شوي، c.428dup او c.8487+1G>A په 3 مضامینو کې لیدل شوي، ورپسې c.5851_5854delAGTT په دوو قضیو کې ترلاسه شوی. د c.428dup بدلون د BRCA2 په ایکسون 5 کې د C تکرار شامل دی، چې وړاندوینه کیږي چې یو لنډ شوی، غیر فعال پروټین کوډ کړي. c.8487+1G> یو بدلون د BRCA2 انټرون 19 (± 1,2) په داخلي سیمه کې پیښیږي او د سپلیسینګ موافقې ترتیب اغیزه کوي، چې په پایله کې بدل شوی سپلیسینګ غیر معمولي یا غیر حاضر پروټین رامینځته کوي. د c.5851_5854delAGTT رنځجنیک ډول د کوډینګ ایکسون 10 کې د نیوکلیوټایډ موقعیت 5851 څخه 5854 ته د 4-نیوکلیوټایډ حذف کیدو له امله دی. د BRCA2 جین او د وړاندوینې شوي بدیل سټاپ کوډون (p.S1951WfsTer) سره د ژباړې چوکاټ بدلون پایله لري. د پام وړ، لکه څنګه چې مخکې راپور ورکړل شوی، دواړه بدلونونه c.631G>A او c.7008-2A>T په ورته ناروغ کې کشف شوي.34 لومړی بدلون د اډینوسین (A) په BRCA2 ایکسون 7 کې د ګوانین (G) سره بدلول شامل دي چې نیوکلیوټایډ لري چې پایله یې د کوډون 211 کې ویلین ایزولیسین ته بدلیږي، ایزولیسین امینو اسید یو امینو اسید دی چې خورا ورته ملکیتونه لري. دا بدلون د نورمال mRNA سپلیسینګ اغیزه کوي. دوهم ډول په داخلي سیمه کې موقعیت لري او د BRCA2 کوډ کولو جین د ایکسون 13 دمخه د تایمین (T) دوه ګونی A بدیل پایله لري. د c.7008-2A>T بدلون ممکن د مختلف اوږدوالي ډیری لیږدونه رامینځته کړي. سربیره پردې، د BRCA2 PVs په ګروپ کې، د 18 بدلونونو څخه 4 (22.2٪) وو داخلي.
بیا موږ په فعالو ډومینونو او پروټین-بندولو سیمو کې د BRCA1/2 زیان رسونکي بدلونونه نقشه کړل (انځور 4). په BRCA1 جین کې، 50٪ PVs د سینې سرطان کلستر سیمه (BCCR) کې موقعیت درلود، پداسې حال کې چې 22٪ بدلونونه د تخمدان سرطان کلستر سیمه (OCCR) کې موقعیت درلود (انځور 4A). په BRCA2 PV کې، 35.7٪ ډولونه د BCCR سیمه کې موقعیت درلود او 42.8٪ بدلونونه په OCCR (انځور 4B) کې موقعیت درلود. بیا، موږ د BRCA1 او BRCA2 پروټین ډومینونو کې د PV موقعیت ارزونه وکړه. د BRCA1 پروټین لپاره، موږ په لوپ او کویل شوي کویل ډومینونو کې درې PVs وموندل، او په BRCT ډومین کې دوه بدلونونه (انځور 4A). د BRCA2 پروټین لپاره، 4 PVs د BRC تکرار ډومین سره نقشه شوي، پداسې حال کې چې 3 داخلي او 3 خارجي بدلونونه په oligo/oligosaccharide-binding (OB) او برج (T) ډومینونو کې کشف شوي (انځور ۴ ب).
شکل ۴ د BRCA1 او BRCA2 پروټینونو سکیماتیک استازیتوب او د رنځوریک ډولونو ځایی کول. دا شکل د سینې سرطان ناروغانو کې د BRCA1 (A) او BRCA2 (B) رنځوریک ډولونو ویش ښیې. خارجي بدلونونه په نیلي رنګ کې ښودل شوي، پداسې حال کې چې داخلي ډولونه په نارنجي رنګ کې ښودل شوي. د بار لوړوالی د قضیو شمیر څرګندوي. د BRCA1 او BRCA2 پروټینونه او د دوی فعال ډومینونه راپور شوي. (A) د BRCA1 پروټین د لوپ ډومین (RING) او د اټومي ځایی کولو ترتیب (NLS)، یو کویل شوی کویل ډومین، یو SQ/TQ کلستر ډومین (SCD)، او د BRCA1 C-ټرمینل ډومین (BRCT) لري. (B) د BRCA2 پروټین اته BRC تکرارونه لري، د DNA سره تړلی ډومین د هیلیکل ډومین (هیلیکل) سره، درې اولیګونیوکلیوټایډ/اولیګوساکرایډ-بانډینګ (OB) فولډونه، یو برج ډومین (T)، او د C اړخ کې یو NLS. هغه سیمې چې د سینې سرطان کلستر سیمه (BCCR) او د تخمدان سرطان کلستر سیمه (OCCR) په نوم یادیږي په لاندې ډول ښودل شوي دي. ښکته.* هغه بدلونونه څرګندوي چې د سټاپ کوډونونه ټاکي.
بیا موږ د BC کلینیکوپیتولوژیکي ځانګړتیاوې وڅیړلې چې ممکن د BRCA1/2 PV شتون سره تړاو ولري. د 181 BRCA1/2-منفي ناروغانو (غیر کیریر) او ټولو کیریرونو (n = 35) لپاره بشپړ کلینیکي ریکارډونه شتون درلود. د تومور د خپریدو کچه او درجې ترمنځ اړیکه وه.
موږ د Ki-67 ویش د خپل ګروپ د میډیا (25٪، رینج <10-90٪) پر بنسټ محاسبه کړ. هغه موضوعات چې Ki-67 <25٪ لري د "ټيټ Ki-67" په توګه تعریف شوي، پداسې حال کې چې هغه اشخاص چې ارزښتونه یې ≥ 25٪ دي "لوړ Ki-67" ګڼل شوي. د غیر کیریرونو او BRCA1 PV کیریرونو ترمنځ د Ki-67 مهم توپیرونه (p <0.01) وموندل شول (انځور 5A).
شکل ۵ د BRCA1 او BRCA2 PVs سره او پرته د سینې سرطان میرمنو کې د درجې ویش سره د Ki-67 اړیکه. (A) بکسپلاټ د BRCA1 (18) یا BRCA2 (17) PV ناروغانو په پرتله په 181 غیر کیریر BC ناروغانو کې د Ki-67 منځنۍ ارزښتونه ښیې. د 0.5 څخه ښکته P ارزښتونه د احصایوي پلوه مهم ګڼل شوي. (B) هسټوګرام د BRCA1 او BRCA2 بدلون حالت (WT مضامین، BRCA1 او BRCA2 PVs کیریر) سره سم د هسټولوژیکي درجې ګروپونو (G2 او G3) کې د BC سرطان ناروغانو د ګمارنې استازیتوب کوي.
په ورته ډول، موږ معاینه کړه چې ایا د تومور درجه د BRCA1/2 PV شتون سره تړاو لري. څرنګه چې زموږ په نفوس کې G1 BC غیر حاضر و، موږ ناروغان په دوو ډلو وویشلو (G2 یا G3). د Ki-67 پایلو سره سم، تحلیل د تومور درجې او BRCA1 بدلون ترمنځ د احصایوي پلوه د پام وړ اړیکه څرګنده کړه، د غیر کیریرونو په پرتله په BRCA1 کیریرونو کې د G3 تومورونو لوړ تناسب سره (p <0.005) (شکل 5B).
د DNA ترتیب کولو ټیکنالوژۍ کې پرمختګونو د BRCA1/2 جینیاتي ازموینې کې بې ساري پرمختګونه رامینځته کړي دي، چې د سرطان د کورنۍ تاریخ لرونکو ناروغانو لپاره مهمې اغیزې لري. تر اوسه پورې، نږدې 20.000 BRCA1/2 ډولونه د امریکایی طبي جینیات ټولنې 35 او ENIGMA سیسټم سره سم پیژندل شوي او طبقه بندي شوي دي. 35,36 دا ښه پیژندل شوي چې د BRCA1/2 بدلون سپیکٹرم په جغرافیایي سیمو کې په پراخه کچه توپیر لري. 37 په ایټالیا کې، د BRCA1/2 PVs کچه له 8٪ څخه تر 37٪ پورې وه، چې د هیواد دننه پراخه بدلون ښیې. 38,39 د نږدې 5 ملیون نفوس سره، سیسلي د اوسیدونکو د شمیر له مخې په ایټالیا کې پنځمه لویه سیمه ده. که څه هم په لویدیځ سیسلي کې د BRCA1/2 د ویش په اړه معلومات شتون لري، د ټاپو په ختیځه برخه کې هیڅ پراخه شواهد شتون نلري.
زموږ مطالعه د ختیځ سیسلي کې د BC ناروغانو کې د BRCA1/2 PV د پیښو په اړه د لومړنیو راپورونو څخه یوه ده. 28 موږ خپل تحلیل په BC تمرکز کړ، ځکه چې دا زموږ په ډله کې تر ټولو عام ناروغي ده.
کله چې د BC 389 ناروغانو ازموینه وشوه، 9٪ BRCA1/2 PVs درلودل، چې په مساوي ډول د BRCA1 او BRCA2 ترمنځ ویشل شوي. دا پایلې د هغو سره مطابقت لري چې مخکې د ایټالیا په نفوس کې راپور شوي.28 په زړه پورې خبره دا ده چې زموږ د ډلې 3٪ (13/389) نارینه وو. دا کچه د نارینه وو د سینې سرطان لپاره د تمې څخه لوړه ده (د ټولو BCs 1٪)، 40 د BRCA1/2 د بدلون خطر پراساس زموږ د نفوس انتخاب منعکس کوي. په هرصورت، د دې نارینه وو څخه هیڅ یو BRCA1/2 PV رامینځته نه کړ، نو دوی د نورو مالیکولي تحلیل لپاره نوماندان وو ترڅو د PALB2، RAD51C او D په څیر د لږ عام بدلونونو شتون رد کړي، د نورو په منځ کې. د نامعلوم اهمیت ډولونه په 7٪ مضامینو کې ترلاسه شوي چې پکې BRCA2 VUS څرګند و. حتی دا پایله د پخوانیو شواهدو سره مطابقت لري.28,41,42
کله چې موږ په BRCA1/2 میوټینټ میرمنو کې د BC مالیکولر فرعي ډولونو ویش تحلیل کړ، موږ د TNBC او BRCA1 PV (58.8٪) او د لومینل B BC او BRCA2 PV (55.6٪) ترمنځ پیژندل شوي اړیکې تایید کړې. 16,43 په BRCA1 او BRCA2 PV کیریرونو کې لومینل A او HER2+ تومورونه د موجوده ادبیاتو معلوماتو سره مطابقت لري. 16,43
بیا موږ د BRCA1/2 PV ډول او موقعیت باندې تمرکز کوو. زموږ په ډله کې، تر ټولو عام BRCA1 PV c.5035_5039delCTAAT و. که څه هم Incorvaia et al. دا ډول یې په خپل سیسیلي ګروپ کې نه دی تشریح کړی، نورو لیکوالانو دا د جراثیم BRCA1 PV په توګه راپور ورکړی دی. 34 زموږ په ګروپ کې ډیری BRCA1 PVs موندل شوي - د بیلګې په توګه c.181T>G، c.514del، c.3253dupA او c.5266dupC - کوم چې په سیسیلي کې لیدل شوي دي. 28 له دې څخه، دوه BRCA1 بنسټ ایښودونکي بدلونونه (c.181T>G او c.5266dupC) معمولا د ختیځ او مرکزي اروپا (پولینډ، چک)، سلووینیا، اتریش، هنګري، بیلاروس او جرمني) په اشکنازي یهودانو کې موندل کیږي، 44,45 او په متحده ایالاتو او ارجنټاین کې، پدې وروستیو کې د BC او OC سره د ایټالوي ناروغانو کې د "تکراري جراثیم ډول" په توګه تعریف شوي. د 34c.514del ډول دمخه د شمالي سیسیلي څخه د پالرمو او میسینا په 8 د سینې سرطان ناروغانو کې پیژندل شوی و. په زړه پورې خبره دا ده چې حتی انکورویا او نور. په کاتانیا کې په ځینو کورنیو کې د c.3253dupA ډول وموندل شو.28 ترټولو نماینده BRCA2 PVs c.428dup، c.5851_5854delAGTT او داخلي ډول c.8487+1G>A دي، کوم چې په پالرمو کې د c.428dup سره په یوه ناروغ کې په ډیر تفصیل سره راپور شوي، c.5851_5854delAGTT PV د شمال لویدیز سیسلي په کورنیو کې لیدل شوی، په عمده توګه په ټراپاني او پالرمو سیمو کې، پداسې حال کې چې c.5851_5854delAGTT PV د شمال لویدیز سیسلي په کورنیو کې لیدل شوی.8487+1G>A ډول د میسینا، پالرمو، او کالټانیسیټا څخه د مضامینو کې ډیر عام و.28 ریبیک او نور. مخکې په کولمبیا کې د c.5851_5854delAGTT بدلون تشریح شوی. 37 یو بل BRCA2 PV، c.631+1G>A، د سیسلي (Agrigento، Siracusa او Ragusa) څخه د BC او OC ناروغانو کې موندل شوی. 28 د پام وړ، موږ په ورته ناروغ کې د دوه BRCA2 ډولونو (BRCA2 c.631G>A او c.7008-2A>T) ګډ شتون ولید، کوم چې موږ په cis حالت کې جلا شوي ګڼل، لکه څنګه چې مخکې راپور ورکړل شوی و. 34,46 دا BRCA2 uble بدلونونه په حقیقت کې په ایټالیا سیمه کې ډیری وختونه لیدل کیږي او موندل شوي چې د وخت دمخه بند کوډونونه معرفي کوي، د میسنجر RNA جلا کول اغیزمن کوي ​​او د BRCA2 پروټین ناکاموي. 47,48
موږ د پروټین ډومینونو او جینونو په احتمالي OCCR او BCCR سیمو کې BRCA1 او BRCA2 PVs هم نقشه کړل. دا سیمې د ربیک او نورو لخوا په ترتیب سره د تخمدان او سینې سرطان د پراختیا لپاره د خطر ساحو په توګه تشریح شوي. 49 په هرصورت، د جراثیمو ډولونو موقعیت او د سینې یا تخمدان د سرطان خطر ترمنځ د اړیکو په اړه شواهد متنازع پاتې دي. 28,50-52 زموږ په نفوس کې، BRCA1 PVs په عمده توګه د BCCR په سیمه کې موقعیت درلود، پداسې حال کې چې BRCA2 PVs په عمده توګه د OCCR په سیمه کې موقعیت درلود. په هرصورت، موږ نشو کولی د احتمالي OCCR او BCCR سیمو او BC ځانګړتیاو ترمنځ هیڅ اړیکه ومومو. دا ممکن د BRCA1/2 بدلونونو سره د ناروغانو محدود شمیر له امله وي. د پروټین ډومین له نظره، BRCA1 PVs په ټول پروټین کې ویشل شوي، او BRCA2 بدلونونه په غوره توګه د BRC تکرار ډومین کې موندل کیږي.
په پای کې، موږ د BC کلینیکوپیتولوژیکي ځانګړتیاوې د BRCA1/2 PV سره تړاو ورکړ. د محدود شمیر ناروغانو شاملولو له امله، موږ یوازې د Ki-67 او تومور درجې ترمنځ د پام وړ اړیکه وموندله. که څه هم د Ki-67 ارزونه او تفسیر یو څه جنجالي پاتې دی، دا ډاډه ده چې د لوړ خپریدو کچه د ناروغۍ د بیا راګرځیدو او د ژوندي پاتې کیدو د کمښت سره تړاو لري. تر نن نیټې پورې، د "لوړ" او "ټیټ" Ki-67 ترمنځ توپیر کولو لپاره کټ آف 20٪ دی. په هرصورت، دا حد زموږ د BRCA1/2 بدلون ناروغانو نفوس باندې نه پلي کیږي، کوم چې د Ki-67 منځنۍ ارزښت 25٪ لري. د لوړ Ki-67 نرخونو کې دا رجحان زموږ د لومینل B او TNBC کوهورټونو کې د خپریدو له لارې تشریح کیدی شي، چې له هغې څخه لږ لومینل A تومورونه شتون درلود. په هرصورت، ځینې شواهد داسې ښکاري چې وړاندیز کوي چې د Ki-67 لوړ کټ آف (25-30٪) ممکن د دوی د تشخیص سره سم ناروغان په ښه توګه طبقه بندي کړي.53,54 زموږ د تحلیل له پایلو څخه، د پام وړ اړیکه د حیرانتیا خبره نده. د لوړ ترمنځ واقع کیږي د Ki-67 او درجې او د BRCA1 PV شتون. په حقیقت کې، د BRCA1 پورې اړوند تومورونه د TNBC ځانګړتیا ده او ډیر تیریدونکي ځانګړتیاوې ښیې.16,17
په پایله کې، دا څیړنه د ختیځ سیسلي څخه د BC ډلې کې د BRCA1/2 د بدلون حالت په اړه راپور چمتو کوي. په ټولیز ډول، زموږ موندنې د پخوانیو شواهدو سره مطابقت لري، دواړه د بدلون خپریدو او په BC کې د کلینیکوپیتولوژیکي ځانګړتیاو له مخې. د BRCA1/2- بدلون BC ناروغانو په لوی نفوس کې ډیرې مطالعې، لکه د ملټي جینوم پراخ شوي بدلون تحلیل کارول، د PVs شتون ارزولو لپاره تضمین شوي چې د BRCA1/2 په پرتله توپیر لري او لږ ځله. دا به د جینیاتي بدلونونو له امله د سرطان د زیاتوالي خطر سره د مخ په زیاتیدونکي شمیر موضوعاتو پیژندنه او مناسب مدیریت ته اجازه ورکړي.
موږ تایید کړه چې ناروغانو د څیړنې موخو لپاره د خپل تومور نمونې په نامعلوم ډول خپرولو لپاره باخبره رضایت لاسلیک کړی. ټولو ناروغانو د هیلسنکي د اعلامیې سره سم لیکلي باخبره رضایت لاسلیک کړی. د AOU Policlinico "G.Rodolico - S.Marco" د پالیسۍ سره سم، دا څیړنه د اخلاقي بیاکتنې څخه معاف وه ځکه چې د BRCA1/2 تحلیل د کلینیکي عمل سره سم ترسره شوی و او ټولو ناروغانو لیکلي باخبره رضایت ورکړی و. ناروغان هم د څیړنې موخو لپاره د دوی د معلوماتو کارولو سره موافق دي.
موږ د پروفیسور پاولو ویګنري څخه مننه کوو چې د اخلاقو کمیټې لخوا غوښتنه شوې د سینې سرطان ناروغانو پاملرنې کې یې مرسته وکړه.
فیدریکا مارټورانا د استیتوتو جینټیلي، ایلي لیلي، نوارټیس، فایزر څخه د اعزاز راپور ورکوي. نور لیکوالان پدې کار کې د ګټو ټکر نه اعلانوي.
۱. سونګ ایچ، فیرلي جي، سیګل آر ایل، او نور. د نړیوال سرطان احصایې ۲۰۲۰: ګلوبوکان د نړۍ په ۱۸۵ هیوادونو کې د ۳۶ سرطانونو پیښې او مړینې اټکل کوي. CA Cancer J Clin.2021;71(3):209-249.doi: 10.3322/caac.21660