Javascript учурда браузериңизде өчүрүлгөн. Бул веб-сайттын кээ бир функциялары JavaScript өчүрүлгөндө иштебейт.
Өзүңүздүн конкреттүү маалыматыңыз жана кызыктырган дары-дармекиңиз менен катталыңыз, биз сиз берген маалыматты биздин кеңири маалымат базасындагы макалалар менен дал келтиребиз жана дароо PDF көчүрмөсүн электрондук почта аркылуу жөнөтөбүз.
作者 Stella S, Vitale SR, Martorana F, Massimino M, Pavone G, Lanzafame K, Bianca S, Barone C, Gorgone C, Fichera M, Manzella L
Стефания Стелла, 1,2 Сильвия Рита Витале, 1,2 Федерика Марторана, 1,2 Мишель Массимино, 1,2 Джулиана Павоне, 3 Катя Ланзафаме, 3 Себастьяно Бианка, 4 Чиара Бароне, 5 Кристина Горгоне, 6 Марко Фичера Лицелина, 6, Департамент Си612, жана Эксперименттик Медицина, Катания университети, Катания, 95123, Италия;2 Эксперименталдык онкология жана гематология борбору, AOU Policlinico “G.Rodolico – San Marco”, Катания, 95123, Италия; 3 Медициналык онкология, AOU Policlinico “G. Rodolico – San Marco”, Катания, 95123, Италия; 4 Медициналык генетика, ARNAS Garibaldi, Катания, 95123, Италия; 5 Medicine Genetics, ASP, Syracuse, 96100, Италия; 6 Биомедициналык жана биотехнологиялык илимдер бөлүмү, Катания университети, Медициналык генетика, Катания, Италия, 95123; 7Oasi изилдөө институту-IRCCS, Троина, 94018, Италия Байланыш: Стефания Стелла, тел +39 095 378 1946, электрондук почта [email protected]; [email protected] Максаты: BRCA1 жана BRCA2 жана аныкталган эмчек рагы (BC), энелик без (OC) жана башка рактын өмүр бою коркунучу менен байланышкан урук линиясынын мутациялары. BRCA генин тестирлөө жеке тобокелдикти баалоо үчүн, ошондой эле дени сак ташуучуларда алдын алуу ыкмаларын табуу жана рак менен ооругандарды дарылоо ыкмаларын тандоо үчүн негизги болуп саналат. региондордо жана Сицилиянын үй-бүлөлөрүндөгү BRCA патогендик варианттары боюнча маалыматтар бар болсо да, Сицилиянын чыгышындагы популяцияларга багытталган изилдөөлөр жетишсиз. Биздин изилдөөбүздүн максаты Сицилиянын чыгышынан келген BC пациенттеринин когортундагы BRCA патогендик урук линиясынын өзгөрүүлөрүнүн таралышын жана таралышын изилдөө жана алардын кийинки генерациялар менен байланышын баалоо. шишик даражасы жана пролиферация индекси менен корреляцияланган. НАТЫЙЖАЛАР: Жалпысынан, 35 бейтапта (9%) BRCA патогендик варианты болгон, BRCA1де 17 (49%) жана BRCA2де 18 (51%). BRCA1 өзгөртүүлөр үч эсе терс BC бейтаптарында кеңири таралган, ал эми BRCA2 менен ооругандардын Comcar-карардуу эмес мутациялары кеңири таралган. BRCA1 варианттары менен субъекттер шишик даражасы жана пролиферативдик индекси бир кыйла жогору болгон. Корутундулар: Биздин жыйынтыктар Сицилия чыгышындагы BC бейтаптарындагы BRCA мутациялык абалына сереп салып берет жана тукум куучулук BC.Overall менен ооругандарды аныктоодо NGS анализинин ролун тастыктайт.
Эмчек рагы (BC) дүйнө жүзү боюнча эң кеңири тараган залалдуу оору жана аялдардагы эң өлүмгө алып келген рак.1 BC прогнозун жана клиникалык жүрүм-турумун аныктаган биологиялык өзгөчөлүктөр убакыттын өтүшү менен кеңири изилденген жана жарым-жартылай ачыкталган. Чындыгында, учурда бир нече суррогат маркерлер БКны ар кандай молекулярдык субтиптерге классификациялоо үчүн колдонулат. Алар адамдык рецептор жана эстроген (ERRR) жана прогноздор (РР)), эпидермалдык өсүү факторунун рецепторунун 2 (HER2) күчөшү, көбөйүү индекси Ki-67 жана шишик даражасы (G).2 Бул өзгөрмөлөрдүн айкалышы төмөнкү BC категорияларын аныктады: 1) ER жана/же PgR экспрессиясын көрсөткөн люминалдык шишиктер BCs 75% түздү. Бул шишиктер андан ары LuH27ге бөлүндү. терс, жана Luminal B, качан Ki-67 барабар же 20% жогору болгон жана HER2 күчөшүнүн алдында, пролиферация индексине карабастан; 2) ER жана PgR терс, бирок HER2 күчөшүн көрсөткөн HER2+ шишиктери. Бул топ бардык эмчек шишиктеринин 10% түзөт; 3) ER жана PgR экспрессиясын жана HER2 күчөшүн көрсөтпөгөн Triple-терс эмчек рагы (TNBC), эмчек рактарынын болжол менен 15% түзөт.2-4
Бул BC түрчөлөрүнүн арасында шишик даражасы жана пролиферация индекси шишиктин агрессивдүүлүгү жана прогнозу менен түздөн-түз жана өз алдынча байланышкан кесилиштүү биомаркерлерди билдирет.5,6
Жогоруда айтылган биологиялык өзгөчөлүктөрдөн тышкары, BCтин өнүгүшүнө алып келген тукум кууган генетикалык өзгөрүүлөрдүн ролу акыркы бир нече жылда барган сайын маанилүү болуп калды.7 Эмчектин 10 шишигинин 1 спецификалык гендердеги урук линиясынын өзгөрүүсүнөн улам тукум куушат.8 Эки чоң эпидемиологиялык изилдөө 180,000ден ашык аялдарды камтыган. BRCA1, BRCA2, CHK2, PALB2, RAD51C жана RAD51D) биринчи кезекте тукум куучулук BC үчүн жооптуу. Бул гендердин арасында BRCA1 жана BRCA2 (мындан ары BRCA1/2) эмчек шишиктеринин өнүгүшү менен эң күчтүү корреляцияны көрсөттү. Өмүр бою BC жана башка залалдуу оорулар, анын ичинде энелик без, простата, уйку бези, колоректалдык жана меланома. 13 жаштан 80 жашка чейинки курактагы BC оорусунун жыйындысы BRCA1 патогендик варианты (PV) бар аялдарда 72% жана BRCA42 бар аялдарда 69% түзөт.
Белгилей кетчү нерсе, акыркы басылма BC коркунучу PV түрүнөн көз каранды деп болжолдойт. Чындыгында, патогендик кыскартуучу варианттарга салыштырмалуу, жаркыраган missense варианттары, айрыкча BRCA1 генинде, BC коркунучунун төмөндөшү менен байланышкан, айрыкча улгайган аялдарда.15
BRCA1 же BRCA2 PV болушу ар кандай биологиялык жана клиникопатологиялык өзгөчөлүктөр менен байланышкан. 16,17 BRCA1 менен байланышкан BCs клиникалык жактан агрессивдүү, начар дифференцияланган жана жогорку пролиферативдик болуп саналат. Бул шишиктер, адатта, үч эсе терс жана эрте башталууга ээ. жакшы дифференциацияланган класстар жана өзгөрүлмө пролиферативдик индекстер. Бул шишиктер В люменинде көбүрөөк кездешет жана көбүнчө улгайган кишилерде кездешет.16-18 Белгилей кетчү нерсе, BRCA1 жана BRCA2 мутациялары конкреттүү дарылоого, анын ичинде платина туздарына жана поли(ADP1-рибоза) полимераза (PAR2 ингибиторлору, PAR2 ингибиторлары) сыяктуу максаттуу дарыларга сезимталдыкты жогорулатат.
Акыркы бир нече жыл ичинде, кийинки муундагы секвенирлөөнүн (NGS) клиникалык практикада ишке ашырылышы BC пациенттеринин көбөйүп бараткан санын рак сезгичтик синдромдоруна, анын ичинде BRCA1 / 2.21 үчүн молекулярдык тестирлөөдөн өтүүгө мүмкүндүк берди. Ошол эле учурда, үй-бүлөлүк тарыхка, демографиялык жана клиникалык патологиялык мүнөздөмөлөргө негизделген так критерийлерге негизделген аныктамалар. тестирлөө.22,23 Бул контекстте географиялык аймактардагы айырмачылыктарды баса белгилеген белгилүү бир популяцияларда BRCA1/2 скринингинде далилдер топтолууда.24–27 Сицилиянын батышында BC когорты боюнча отчеттор бар болгону менен, Сицилиянын чыгыш калкында BRCA1/2 скрининги боюнча маалыматтар азыраак.28,29
Биз бул жерде Сицилиянын чыгышындагы BC бейтаптарындагы урук линиясынын BRCA1/2 скринингинин натыйжаларын сүрөттөп, BRCA1 же BRCA2 мутацияларынын болушун бул шишиктердин негизги клиникопатологиялык өзгөчөлүктөрү менен байланыштырабыз.
Катаниядагы Родолико – Сан-Марко ооруканасынын “Эксперименталдык онкология жана гематология борборунда” ретроспективдүү изилдөө жүргүзүлдү. 2017-жылдын январынан 2021-жылдын мартына чейин көкүрөк жана жумурткалык без, меланома, уйку бези же простата безинин рагы менен ооруган жалпы 455 бейтап биздин CABR диагностикасына жөнөтүлгөн. генетикалык тестирлөө. Бул изилдөө Хельсинки Декларациясына ылайык жүргүзүлүп, бардык катышуучулар молекулярдык анализге чейин жазуу жүзүндөгү маалымдалган макулдук беришкен.
BC гистологиялык жана биологиялык мүнөздөмөлөрү (ER, PgR, HER2 статусу, Ki-67, жана класс) негизги биопсия же хирургиялык үлгүлөр боюнча бааланган, бир гана агрессивдүү шишик компоненттерин эске алуу менен, BCs төмөнкүдөй классификацияланган: luminal A (ER+ жана/же PgR+, HER2-, HER2- %) жана B 0% - PgR+, HER2-, Ki-67≥20%), люминалдык B-HER2+ (ER жана/же PgR+, HER2+), HER2+ (ER жана PgR-, HER2+) же үч эсе терс (ER жана PgR-, HER2-).
BRCA1 жана BRCA2 мутациясынын абалын баалоодон мурун, онкологду, генетикти жана психологду камтыган мультидисциплинардык команда BRCA1 жана/же BRCA1 бар экендигин аныктоо үчүн ар бир пациентке шишик генетикасы боюнча консультация өткөрдү. же BRCA2 генинде PV коркунучу жогору болгон адамдар. Пациентти тандоо Италиянын медициналык онкология коомунун (AIOM) көрсөтмөлөрүнө жана жергиликтүү Сицилия сунуштарына ылайык аткарылган. (ii) BC менен эркектер; (iii) BC жана OC барлар; (iv) BC <36 жашта, TNBC <60 жашта, же эки тараптуу BC <50 жашта аялдар; (v) BC <50 жыл жана эң аз дегенде бир биринчи даражадагы тууганы: (а) BC < 50 жыл; (б) ар кандай курактагы муциндүү эмес жана чек арасыз ОК; (в) эки тараптуу BC; (г) эркек BC; (е) уйку безинин рагы; (е) простата безинин рагы; (vi) эки же андан ашык жеке тарыхы BC > 50 жыл жана үй-бүлөлүк тарыхы BC, OC же уйку безинин рагы бири-бирине биринчи даражадагы туугандар (анын ичинде ал биринчи даражадагы тууганы болгон туугандары); (vii) ОКтун жеке тарыхы жана жок дегенде бир биринчи даражадагы тууганы: (а) BC <50 жыл; (б) УОК; (в) эки тараптуу BC; (г) эркек BC; (vii) жогорку даражадагы сероздук ОК бар аял.
Ар бир пациенттен 20 мл перифериялык кан үлгүсү алынды жана EDTA түтүкчөлөрүнө (BD Biosciences) чогултулду. Геномдук ДНК QIAsymphony DSP DNA Midi комплект изоляциялык комплектинин (QIAGEN, Хилден, Италия) жардамы менен 0,7 мл толук кан үлгүлөрүнөн бөлүнүп алынды (QIAGEN, Хилден, Италия). Scientific, Waltham, MA, USA) Сандык аныктоону жүргүзүңүз. Максатты байытуу жана китепкананы даярдоо Oncomine™ BRCA Research Assay Chef тарабынан аткарылып, Ion AmpliSeq™ Chef Reagents DL8 комплектине жүктөөгө даяр, өндүрүүчүнүн көрсөтмөлөрүнө ылайык автоматташтырылган китепкананы даярдоо үчүн. Комплект бардык BRCA1 жана NMCA02 изилдөө үчүн колдонула турган эки мультиплекстүү ПТР праймер бассейнинен турат. (NM_000059.3) гендер. Кыскача, ар бир суюлтулган үлгүдөгү ДНКнын 15 мкл (10 нг) китепкананы даярдоо үчүн штрих-коддуу пластинкаларга кошулду жана бардык реагенттер менен сарпталуучу материалдар Ion Chef™ аспабына жүктөлдү. Автоматташтырылган китепкананы даярдоо жана штрих-коддуу үлгү китепканасын бириктирүү андан соң Ion Library ™ тарабынан бааланган номерлер даярдалды. Qubit® 3.0 Флюорометр (Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA, АКШ) өндүрүүчүнүн нускамаларына ылайык. Акырында, китепканалар Ion Chef™ китепкана үлгү түтүктөрүндө (штрих коддуу түтүктөр) эквимолярдык катышта бириктирилип, Ion Chef™ аспабына жүктөлөт. (Thermo Fisher Scientific) Ion 510 Chip (Thermo Fisher Scientific) жардамы менен. Маалыматтарды талдоо Amplicon Suite (SmartSeq srl) жана Ion Reporter Software тарабынан аткарылган.
Бардык вариант номенклатурасы онлайн режиминде жеткиликтүү (HGVS, http://www.hgvs.org/mutnomen) Адам геномунун өзгөрүү консорциумунун учурдагы көрсөтмөлөрүнө ылайык келген. BRCA1/2 варианттарынын клиникалык мааниси Эл аралык ENIGMA консорциумунун классификациясын колдонуу менен аныкталган (Evidence-Based Germline Network for Interpreting All Mutan) https://enigmaconsortium.org/) жана ARUP, BRCAEXCHANGE, ClinVar, IARC_LOVD жана UMD сыяктуу ар кандай маалымат базаларына консультация берүү. Классификация тобокелдиктин беш категориясын камтыйт: зыянсыз (I категория), ыктымалдуу зыянсыз (II категория), белгисиз маанидеги вариант (VUS, категория (III категория), патогендик категория (III), ыктымал патогендик). V).VarSome ошондой эле мутациялардын белоктун түзүлүшүнө жана функциясына тийгизген таасирин талдоого алган.
Ар бир VUSга потенциалдуу клиникалык маани берүү үчүн төмөнкү эсептөөчү протеинди болжолдоо алгоритмдери колдонулган: MUTATION TASTER, 33 PROVEAN-SIFT (http://provean.jcvi.org/index.php), POLYPHEN-2 (http:///genetics.bwh.harvard.edu/pph-DG) жана Align-DG (http://agvgd.hci.utah.edu/agvgd_input.php). 1 жана 2-класс катары классификацияланган варианттар жапайы тип деп эсептелген.
Сэнгер секвенциясы ар бир патогендик варианттын бар экенин тастыктады. Кыскача айтканда, BRCA1 жана BRCA2 ген шилтеме ырааттуулугун (NG_005905.2, NM_007294.3 жана NG_012772.3, NM9.030, PC5 үчүн максаттуу, NM_030) колдонуу менен ар бир табылган вариант үчүн атайын праймерлердин жуптары иштелип чыккан. Сэнгер секвенциясы менен аткарылган.
BRCA1/2 гени үчүн терс сыналган бейтаптар өндүрүүчүнүн нускамаларына ылайык, чоң геномдук кайра түзүмдөрдүн (LGR) бар экендигин баалоо үчүн мультиплекстик лигацияга көз каранды зонд күчөтүү (MLPA) менен сыналган. Кыскача айтканда, ДНК үлгүлөрү денатуратталган жана 60 BRCA1 жана BRCA2 генине болжолдуу түрдө ар бир спецификалык спецификация колдонулат, DNA60 Узундуктагы нуклеотиддер. ПТР ампликондорунун уникалдуу топтомунан турган зонд күчөтүү продуктулары, андан кийин капиллярдык электрофорез жана Cofalyser.Net программасы менен тиешелүү партияга тиешелүү Cofalyser таблицалары (www.mrcholland.com) менен бирге талдоого алынган.
Тандалган клиникопатологиялык өзгөрмөлөр (гистологиялык даража жана Ki-67% пролиферация индекси) BRCA1/2 PV бар болушу менен байланышкан, Prism программалык камсыздоосу v. 8.4 Фишердин так тестинин жардамы менен эсептелген, p-бааны <0.05 маанилүү деп эсептейт.
2017-жылдын январынан 2021-жылдын мартына чейин 455 бейтап урук линиясынын BRCA1/2 мутацияларына скринингден өткөн. Мутация тести Policlinico ооруканасынын Эксперименталдык онкология жана гематология борборунда жүргүзүлгөн. 02-Venerdì 10 Gennaio 2020), Катаниянын Родоликосу – Сан-Марко” жалпысынан 389 бейтап эмчек рагы, 37 энелик бездин рагы, 16 уйку безинин рагы, 8 простата рагы жана 5 меланома. Оорулуулардын рак түрүнө жараша бөлүштүрүлүшү жана анализ жыйынтыгы 1-сүрөттө көрсөтүлгөн.
1-сүрөттө изилдөөгө жалпы көз карашты көрсөткөн агым диаграммасы көрсөтүлгөн. Эмчек, меланома, уйку бези, простата же жумуртка безинин шишиктери бар бейтаптар BRCA1 жана BRCA2 гендериндеги мутацияларга сыналган.
Аббревиатуралар: PVs, патогендик вариант; VUS, белгисиз маанидеги вариант; WT, жапайы типтеги BRCA1/2 ырааттуулугу.
Биз изилдөөлөрүбүздү көкүрөк рагы когорттарына тандадык. Бейтаптардын орточо жашы 49 жашта (диапазон 23-89) жана негизинен аялдар (n=376 же 97%) болгон.
Бул субъекттердин 64 (17%) BRCA1/2 мутацияга ээ болгон жана бардыгы аял болгон. Отуз бешинде (9%) PV жана 29да (7,5%) VUS бар. (82,8%) BRCA2 (Сүрөт 1 жана 2) .LGR MLPA талдоо болгон эмес.
Сүрөт 2. эмчек рагы менен ооруган 389 бейтаптын BRCA1 жана BRCA2 мутацияларынын анализи. (A) 389 эмчек рагы менен ооруган бейтаптарда патогендик варианттардын (PV) (кызыл), белгисиз маанидеги варианттарынын (VUS) (кызгылт сары) жана WT (көк) бөлүштүрүлүшү; (B) 389 эмчек рагы менен ооруган бейтаптар Отуз беш (9%) BRCA1 / 2 патогендик Variantlar (PVs) болгон .Алардын арасында, 17 (48,6%) BRCA1 PV алып жүрүүчүлөр (кочкул кызыл) жана 18 (51,4%) BRCA2 (ачык кызыл) болгон; (C) 389 субъекттердин 29 (7,5%) VUS, 5 (17,2%) BRCA1 гени (кара кызгылт сары) жана 24 (82,8%) BRCA2 гени (ачык кызгылт сары) алып жүрүшкөн.
Аббревиатуралар: PVs, патогендик вариант; VUS, белгисиз маанидеги вариант; WT, жапайы типтеги BRCA1/2 ырааттуулугу.
Биз кийинки BRCA1 / 2 PV.The бөлүштүрүү 2 (5,7%) luminal A, 15 (42,9%) luminal B, 3 (8,6%) luminal B-HER2+, 2 (5,7%) HER2+ жана 13 (5,7%) HER2+ жана 13 (37,7%) PV.The бөлүштүрүү менен ооруган бейтаптарда BC молекулярдык түрчөлөрүнүн таралышын изилдеген HER2+ жана 13 (37,7%) TBCN11mon.mon. бейтаптар, 5 (29,4%) luminal B BC, 2 (11,8%) HER2+ оорусу жана 10 (58,8%) TNBC бар болчу. BRCA1 мутациялары жок шишиктер luminal A же luminal B-HER2+ болгон (3-сүрөт). (16,7%) luminal B-HER2+, 3 (16,7%) TNBC жана 2 (11,1%) luminal A (3-сүрөт) .Бул группада HER2+ шишиктери болгон эмес.Ошентип, BRCA1 мутациялары TNBC бейтаптарында кеңири таралган, ал эми BRCA2 өзгөрүүлөрү Blumin басымдуу.
Figure 3 BRCA1 жана BRCA2 патогендик варианттары бар бейтаптарда эмчек рагы субтиптеринин таралышы. BRCA1- (кочкул кызыл) жана BRCA2- (ачык кызыл) PVs молекулярдык түрчөлөрүнүн арасында бөлүштүрүлүшүн көрсөткөн гистограммалар. Ар бир кутучанын ичинде билдирилген сандар BRCA21 жана эмчек рагы менен ооругандардын пайызын билдирет.
Аббревиатуралар: PVs, патогендик вариант; HER2+, адамдын эпидермалдык өсүү фактору рецептор 2 оң; TNBC, үч терс эмчек рагы.
Кийинчерээк, биз BRCA1 жана BRCA2 PVтердин түрүн жана генинин локализациясын бааладык. BRCA1 PVде биз 7 бир нуклеотиддик вариантты (SNV), 6 өчүрүүнү, 3 кайталоону жана 1 киргизүүнү байкадык. Бир гана мутация (c.5522delG) BRCA PVдогу жаңы ачылышты билдирет. c.5035_5039delCTAAT.Бул өзгөртүү BRCA1 15 экзонундагы беш нуклеотиддин (CTAAT) жок кылынышын камтыйт, натыйжада аминокислота лейцининин 1679-кодондогу тирозин менен алмаштырылышы жана кодондун рамкасынын өзгөрүшүнө байланыштуу алдын ала болжолдонгон альтернативалуу кодондун башка бир гана өзгөрүшү аныкталат. Белгилей кетчү нерсе, билдирилген PV'лердин бири кошулган жердин консенсус аймагында жайгашкан (c.4357+1G>T) (1-таблица).
BRCA2 PV боюнча, биз 6 жок кылууну, 6 SNV жана 2 кайталоону байкадык. Табылган өзгөрүүлөрдүн бири да жаңы эмес. Биздин популяцияда үч мутация кайталанган, c.428dup жана c.8487+1G>A 3 субъектте байкалган, андан кийин c.5851_5854delAGTT2 in recidition. BRCA2нин 5-экзонундагы С кайталанышын камтыйт, ал кесилген, иштебеген протеинди коддойт. c.8487+1G>A мутация BRCA2 интрон 19нун интрондук аймагында пайда болот (± 1,2) жана сплайсингдин консенсус ырааттуулугуна таасир этет, натыйжада протеин абнормалуу спликацияга алып келет. c.5851_5854delAGTT патогендик варианты BRCA2 генинин 10-кодтоочу экзонундагы 5851ден 5854кө чейинки нуклеотиддердин позицияларынан 4-нуклеотидди жок кылуу менен шартталган жана болжолдонгон альтернативалуу токтотуу кодону менен котормонун кадрдык жылышына алып келет (б. Ошол эле пациентте c.631G>A жана c.7008-2A>T табылган.34 Биринчи мутация BRCA2 экзон 7деги аденозинди (А) гуанинди (G) камтыган нуклеотид менен алмаштырууну камтыйт, натыйжада валин 211 кодондо изолейцинге өзгөрөт, изолейцин кислотасы нормалдуу өзгөрөт. mRNA splicing. Экинчи вариант интрондук аймакта жайгашкан жана BRCA2 коддоочу гендин 13 экзонуна чейин кош А тиминге (T) алмаштырууга алып келет. c.7008-2A>T өзгөрүүсү ар кандай узундуктагы бир нече транскрипттерди жаратышы мүмкүн. Мындан тышкары, BRCA2 тобунда PVs 200%, өзгөрүүлөр %).184 болгон.
Биз анда BRCA1 / 2 функционалдык домендерди жана протеин-байланыштуу аймактарда зыяндуу мутацияларды картага түшүрдүк (4-сүрөт). BRCA1 генинде, PV 50% эмчек рагы кластердик аймакта (BCCR) жайгашкан, ал эми мутациялардын 22% жумурткалык рагы кластердик аймакта жайгашкан (OCCR) (сүрөт. PVBR3 варианты 4A5. In). BCCR аймагында жайгашкан жана 42,8% мутациялар OCCR (сүрөт. 4B) жайгашкан .Кийинки, биз BRCA1 жана BRCA2 протеин домендердин ичинде PV жайгашкан баа.For BRCA1 белок, биз үч PVs табылган укурук жана катушка домендерди, жана эки мутация BRCT доменинде (BRCA PVA4 үчүн протеин. BRCA4 үчүн). BRC кайталоо доменине картага түшүрүлгөн, ал эми олиго/олигосахаридди байланыштыруучу (OB) жана мунара (T) домендеринде 3 интрондук жана 3 экзондук өзгөрүүлөр аныкталган (Figure 4B).
4-сүрөт BRCA1 жана BRCA2 белокторунун схемалык өкүлчүлүгү жана патогендик варианттардын локализациясы. Бул көрсөткүч эмчек рагы менен ооруган бейтаптарда BRCA1 (A) жана BRCA2 (B) патогендик варианттарынын бөлүштүрүлүшүн көрсөтөт. Экзондук мутациялар көк түстө, ал эми интрондук варианттар кызгылт сары түстө көрсөтүлөт. Бардын бийиктиги кызгылт сары түстө көрсөтүлөт. Бардын бийиктиги учурлардын санын жана алардын BRCA2 функциясын билдирет. BRCA1 протеинде укурук домени (RING) жана ядролук локализация ырааттуулугу (NLS), спиралданган домен, SQ/TQ кластердик домен (SCD) жана BRCA1 C-терминал домени (BRCT) бар.(B) BRCA2 протеининде сегиз BRC кайталануучу, ДНК-байланыштуу домен (H спиралдуу үч домен менен), олигонуклеотид/олигосахаридди байланыштыруучу (ОБ) бүктөмдөрү, мунара домени (T) жана C тарабындагы NLS. Эмчек рагы кластердик аймагы (BCCR) жана энелик бездин рагы кластердик аймагы (OCCR) деп аталган аймактар ​​төмөндө көрсөтүлгөн.*Токтоочу кодондорду аныктаган мутацияларды билдирет.
Биз андан кийин BRCA1 / 2 PV.Complete клиникалык жазуулар 181 BRCA1 / 2-терс бейтаптар (эмес алып жүрүүчүлөр) жана бардык ташыгычтар (n = 35) үчүн жеткиликтүү болгон болушу менен байланышта болушу мүмкүн BC clicopathological өзгөчөлүктөрүн изилдеп .Шиктер таралышынын ылдамдыгы жана класстын ортосунда корреляция бар болчу.
Биз Ki-67нин бөлүштүрүлүшүн биздин когорттун медианасынын негизинде эсептедик (25%, диапазону <10-90%). Ki-67 < 25% болгон субъекттер "төмөн Ki-67" деп аныкталды, ал эми ≥ 25% маанилери бар адамдар "жогорку Ki-67" деп табылды. BRCA1 PV алып жүрүүчүлөрү (сүрөт 5А).
5-сүрөт Ki-67нин BRCA1 жана BRCA2 PV бар жана аларсыз эмчек рагы менен ооруган аялдарда класстын бөлүштүрүлүшү менен корреляциясы.(A) BRCA1 (18) же BRCA2 (17) PV бейтаптарга каршы 181 BC бейтаптарындагы Ki-67 медианалык маанилерин көрсөткөн кутуча графиги. BC рак менен ооруган бейтаптар BRCA1 жана BRCA2 мутациясынын абалына ылайык гистологиялык класстык топторго (G2 жана G3) бөлүнөт (WT субъекттери, BRCA1 жана BRCA2 PVs алып жүрүүчүлөр).
Ошо сыяктуу эле, биз шишик даражасы BRCA1 / 2 PV катышуусу менен байланышы бар-жок экенин текшердик. G1 BC биздин популяцияда жок болгондуктан, биз бейтаптарды эки топко бөлдүк (G2 же G3). Ki-67 натыйжаларына ылайык, талдоо шишик даражасы менен BRCA1 пропорциясынын GBR 1 пропорциясынын GBR1 пропорциясындагы шишик даражасы менен статистикалык жактан маанилүү корреляцияны аныктады. ташыбагандарга салыштырмалуу (p<0.005) (Figure 5B).
ДНК секвенирлөө технологиясынын жетишкендиктери BRCA1/2 генетикалык тестирлөөдө болуп көрбөгөндөй жетишкендиктерди камсыз кылды, бул рактын үй-бүлөлүк тарыхы бар бейтаптар үчүн өтө маанилүү. Бүгүнкү күнгө чейин, болжол менен 20.000 BRCA1/2 варианттары аныкталган жана Американын Медициналык генетика коомунун 35 жана EN5CA3BR системасы боюнча классификацияланган. Мутация спектри географиялык аймактарда кеңири өзгөрүп турат.37 Италиянын ичинде BRCA1/2 PV ылдамдыгы 8%дан 37%га чейин өзгөрүп, өлкө ичиндеги ар түрдүүлүктү көрсөттү.38,39 Дээрлик 5 миллион калкы менен Сицилия Италиядагы калктын саны боюнча бешинчи ири аймак болуп саналат. аралдын чыгыш бөлүгүндө эч кандай кенен далилдер жок.
Биздин изилдөөбүз чыгыш Сицилияда BC бейтаптарындагы BRCA1/2 PV оорусуна байланыштуу алгачкы баяндамалардын бири.
BC 389 бейтапты сынап жатканда, 9% BRCA1/2 PVs алып, BRCA1 жана BRCA2 ортосунда бирдей бөлүштүрүлгөн. Бул жыйынтыктар италиялык популяцияда мурда билдирилгендерге дал келет.28 Кызыктуусу, биздин топтун 3% (13/389) эркектер болгон. BRCA1/2 мутация коркунучу. Бирок, бул адамдардын эч кимиси BRCA1/2 PV иштеп чыккан эмес, ошондуктан алар PALB2, RAD51C жана D сыяктуу азыраак таралган мутациялардын болушун жокко чыгаруу үчүн андан аркы молекулярдык анализге талапкер болушкан. Белгисиз маанидеги варианттар BRCA2 алдын ала аныкталган субъекттердин 7%да алынган. далил.28,41,42
Биз BRCA1/2 мутант аялдарда BC молекулярдык субтиптердин бөлүштүрүлүшүн талдап жатканда, биз TNBC жана BRCA1 PV (58,8%) жана luminal B BC жана BRCA2 PV (55,6%) ортосундагы белгилүү байланыштарды тастыктады. маалыматтар.16,43
Андан кийин биз BRCA1/2 PV түрүнө жана жайгашкан жерине көңүл бурабыз. Биздин когортто эң кеңири таралган BRCA1 PV c.5035_5039delCTAAT болгон. Бирок Incorvaia et although. Сицилия когортунда бул вариантты сүрөттөгөн эмес, башка авторлор аны BRCA1 PV.34 урук сызыгы катары билдиришкен. Биздин когортада бир нече BRCA1 PV табылган – мис. c.181T>G, c.514del, c.3253dupA жана c.5266dupC – бул эки мутация SBR28де байкалган. (c.181T>G жана c.5266dupC) көбүнчө Чыгыш жана Борбордук Европадагы (Польша, Чехия), Словениядагы, Австриялык, Венгриялык, Белоруссиядагы жана Германиядагы еврейлерде кездешет, 44,45 жана АКШ менен Аргентинада жакында эле “кайталануучу урук линиясынын варианты” катары аныкталган жана Италияда BC45c варианты болгон. мурда Палермо жана Messina.Interestingly түндүк Sicily келген 8 эмчек рагы менен ооруган аныкталган, ал тургай, Incorvaia et al. Катаниядагы кээ бир үй-бүлөлөрдө c.3253dupA вариантын табышкан.28 Эң өкүлү BRCA2 PVs болуп c.428dup, c.5851_5854delAGTT жана c.8487+1G>A интрондук варианты болуп саналат, алар Палермодогу бир пациентте c.428558, c.428458 болду. Сицилиянын түндүк-батышындагы үй чарбаларында, негизинен Трапани жана Палермо аймактарында байкалган, ал эми c.5851_5854delAGTT PV Сицилиянын түндүк-батышындагы үй чарбаларында байкалган. 8487+1G>A варианты Мессина, Палермо жана Кальтаниссетбек et al.28 субъекттеринде кеңири таралган. мурда Колумбияда c.5851_5854delAGTT өзгөрүшү сүрөттөлгөн.37 Дагы бир BRCA2 PV, c.631+1G>A, Сицилиядан (Агригенто, Сиракуза жана Рагуса) келген BC жана OC бейтаптарында табылган.28 Баса, биз эки BRCA2 жана BRCA2 cA1 варианттарынын чогуу жашашын байкадык. c.7008-2A>T) ошол эле пациентте, биз cis режиминде бөлүнгөн деп ойлогонбуз, буга чейин айтылгандай.34,46 Бул BRCA2 uble мутациялары чындыгында италиялык аймакта көп байкалат жана мессенжер РНКнын сплайсингине таасир этүүчү жана протеиндин бузулушуна алып келген мөөнөтүнөн мурда токтотуу кодондорун киргизери аныкталган.
Биз ошондой эле протеиндик домендердин жана гендердин болжолдуу OCCR жана BCCR аймактарында BRCA1 жана BRCA2 PVs картасын түздүк. Бул аймактар ​​Реббек жана башкалар тарабынан сүрөттөлгөн. тиешелүүлүгүнө жараша жумуртка жана эмчек рагын өнүктүрүү үчүн коркунучтуу аймактар ​​катары.49 Бирок, урук линиясынын варианттарынын жайгашкан жери менен эмчек же энелик бездин рагы коркунучунун ортосундагы байланышка байланыштуу далилдер талаштуу бойдон калууда.28,50-52 Биздин популяцияда BRCA1 PVs негизинен BCCR аймагында жайгашкан, ал эми биз BRCA2ге чейинки PV аймактарында жайгашканбыз. болжолдуу OCCR жана BCCR аймактарынын жана BC өзгөчөлүктөрүнүн ортосунда эч кандай байланышты таба албайбыз. Бул BRCA1/2 мутациялары бар бейтаптардын чектелген санына байланыштуу болушу мүмкүн. Белок доменинин көз карашынан алганда, BRCA1 PVs бүт протеин боюнча бөлүштүрүлөт, ал эми BRCA2 өзгөртүүлөрү артыкчылыктуу BRC кайталоо доменинде табылган.
Акыр-аягы, биз BC клиникопатологиялык өзгөчөлүктөрүн BRCA1/2 PV менен корреляцияладык. Бейтаптардын чектелген санына байланыштуу биз Ki-67 менен шишик даражасынын ортосундагы олуттуу корреляцияны гана таптык. Ki-67ди баалоо жана чечмелөө бир аз талаштуу бойдон калса да, пролиферациянын жогорку деңгээли оорунун кайталануу тобокелдигинин көбөйүшү менен байланышта экени талашсыз. "жогорку" жана "төмөн" Ki-67 ортосундагы айырма 20% түзөт. Бирок, бул босого биздин BRCA1/2 мутация менен ооруган популяцияга тиешелүү эмес, анын орточо Ki-67 мааниси 25%. Ки-67нин жогорку көрсөткүчтөрүнүн бул тенденциясы биздин люминалдык B жана TNBCH люминалынын таралышы менен түшүндүрүлөт. кээ бир далилдер жогорку Ki-67 кесүү (25-30%) жакшыраак алардын prognosis.53,54 ылайык бейтаптарды катмарлаштырып мүмкүн деп божомолдоого көрүнөт Биздин талдоо жыйынтыгы боюнча, олуттуу корреляция калыштуу эмес. жогорку Ki-67 жана класстардын жана BRCA1 PV. катышуусунун ортосунда пайда болот. өзгөчөлүктөрү.16,17
Жыйынтыктап айтканда, бул изилдөө Сицилиянын чыгышындагы BC когортундагы BRCA1/2 мутациясынын абалы жөнүндө отчетту берет. Жалпысынан алганда, биздин жыйынтыктар BCдеги мутациянын таралышы жана клиникопатологиялык өзгөчөлүктөрү боюнча мурда болгон далилдер менен шайкеш келет. BRCA1/2-мутанттык BC-ге каршы талдоо сыяктуу кеңейтилген BRCA1/2-мутанттык согуштук пациенттердин чоңураак популяцияларында жүргүзүлгөн изилдөөлөр. BRCA1/2ге караганда айырмаланган жана азыраак болгон PVs болушу. Бул генетикалык мутациялардан улам рак оорусуна чалдыгуу коркунучу жогору болгон субъекттердин санын аныктоого жана туура башкарууга мүмкүндүк берет.
Биз бейтаптар шишигинин үлгүлөрүн изилдөө максатында анонимдүү түрдө чыгарууга негизделген макулдукка кол коюшканын ырастадык. Бардык бейтаптар Хельсинки Декларациясына ылайык жазуу жүзүндөгү маалымдалган макулдукка кол коюшту. AOU Policlinico “G.Rodolico – S.Marco” саясатына ылайык, бул изилдөө этикалык кароодон бошотулган, анткени BRCA1/2 жазып берилген анализдин негизинде бардык бейтаптарга анализ тапшырды. макулдук. Пациенттер ошондой эле алардын маалыматтарын изилдөө максатында колдонууга макулдук беришет.
Профессор Паоло Вигнериге Этика боюнча комитеттин суроосу боюнча эмчек рагы менен ооруган бейтаптарга жардам көрсөткөндүгү үчүн ыраазычылык билдиребиз.
Федерика Марторана Иституто Джентили, Эли Лилли, Новартис, Пфайзерден гонорарларды билдирди. Башка авторлор бул эмгекте кызыкчылыктардын кагылышуусу жок деп жарыялашпайт.
1. Sung H, Ferlay J, Siegel RL, et al. Global Cancer Statistics 2020: GLOBOCAN дүйнө жүзү боюнча 185 өлкөдө 36 рактын оорусун жана өлүмүн болжолдойт.CA Cancer J Clin.2021;71(3):209-249.ca3632.doi: