உங்கள் உலாவியில் ஜாவாஸ்கிரிப்ட் தற்போது முடக்கப்பட்டுள்ளது. ஜாவாஸ்கிரிப்ட் முடக்கப்பட்டிருக்கும்போது, ​​இந்த வலைத்தளத்தின் சில அம்சங்கள் செயல்படாது.
உங்களின் குறிப்பிட்ட விவரங்கள் மற்றும் நீங்கள் விரும்பும் குறிப்பிட்ட மருந்துடன் பதிவு செய்யுங்கள். நீங்கள் வழங்கும் தகவல்களை எங்கள் விரிவான தரவுத்தளத்தில் உள்ள கட்டுரைகளுடன் நாங்கள் பொருத்தி, அதன் PDF நகலை உடனடியாக உங்களுக்கு மின்னஞ்சல் செய்வோம்.
作者 ஸ்டெல்லா எஸ், விட்டேல் எஸ்ஆர், மார்டோரானா எஃப், மாசிமினோ எம், பாவோன் ஜி, லான்சாஃபேம் கே, பியான்கா எஸ், பரோன் சி, கோர்கோன் சி, பிச்செரா எம், மான்செல்லா எல்
ஸ்டெபானியா ஸ்டெல்லா, 1,2 சில்வியா ரீட்டா விட்டேல், 1,2 ஃபெடெரிகா மார்டோரானா, 1,2 மைக்கேல் மாசிமினோ, 1,2 கியுலியானா பாவோன், 3 கட்டியா லான்சாஃபேம், 3 செபாஸ்டியானோ பியான்கா, 4 சியாரா பரோன், 5 கிறிஸ்டினா கோர்கோன், ஃபிச்செராவி, 76, Manzella1,21 மருத்துவ மற்றும் பரிசோதனை மருத்துவத் துறை, கேடானியா பல்கலைக்கழகம், கேடானியா, 95123, இத்தாலி;2 பரிசோதனை புற்றுநோயியல் மற்றும் ஹீமாட்டாலஜி மையம், AOU Policlinico "G.Rodolico - San Marco", Catania , 95123, இத்தாலி; 3 மருத்துவ புற்றுநோயியல், AOU பாலிக்ளினிகோ "ஜி. ரோடோலிகோ - சான் மார்கோ", கேடானியா, 95123, இத்தாலி; 4 மருத்துவ மரபியல், ARNAS கரிபால்டி, கேடானியா, 95123, இத்தாலி; 5 மருத்துவ மரபியல், ASP, சிராகூஸ், 96100, இத்தாலி; 6 உயிர்மருத்துவம் மற்றும் உயிரித்தொழில்நுட்ப அறிவியல் துறை, கட்டானியா பல்கலைக்கழகம், மருத்துவ மரபியல், கட்டானியா, இத்தாலி, 95123; 7 ஓஆஸி ஆராய்ச்சி நிறுவனம்-IRCCS, ட்ரோய்னா, 94018, இத்தாலி தொடர்புகள்: ஸ்டெஃபானியா ஸ்டெல்லா, தொலைபேசி +39 095 378 1946, மின்னஞ்சல் [email protected]; நோக்கம்: BRCA1 மற்றும் BRCA2 மரபணுக்களில் ஏற்படும் மரபுவழிப் பிறழ்வுகள், மார்பகப் புற்றுநோய் (BC), கருப்பை புற்றுநோய் (OC) மற்றும் பிற புற்றுநோய்களை வாழ்நாள் முழுவதும் ஏற்படும் அபாயத்துடன் தொடர்புபடுத்துகின்றன. BRCA மரபணுவைச் சோதிப்பது, தனிநபரின் அபாயத்தை மதிப்பிடுவதற்கும், ஆரோக்கியமான மரபணுக்கடத்திகளிடம் தடுப்பு முறைகளைக் கண்டறிவதற்கும், புற்றுநோயாளிகளுக்கு சிகிச்சைகளைத் தனிப்பயனாக்குவதற்கும் முக்கியமானது. BRCA1 மற்றும் BRCA2 மாற்றங்களின் பரவல் புவியியல் ரீதியாகப் பரவலாக வேறுபடுகிறது. சிசிலியக் குடும்பங்களில் BRCA நோய்க்காரணி மாறுபாடுகள் குறித்த தரவுகள் இருந்தாலும், குறிப்பாக கிழக்கு சிசிலியில் உள்ள மக்களை இலக்காகக் கொண்ட ஆய்வுகள் குறைவாகவே உள்ளன. கிழக்கு சிசிலியைச் சேர்ந்த மார்பகப் புற்றுநோய் நோயாளிகளின் ஒரு குழுவில் BRCA நோய்க்காரணி மரபுவழிப் பிறழ்வுகளின் நிகழ்வு மற்றும் பரவலை ஆராய்வதும், அடுத்த தலைமுறை வரிசைப்படுத்தலைப் பயன்படுத்தி குறிப்பிட்ட மார்பகப் புற்றுநோய் பண்புகளுடன் அவற்றின் தொடர்பை மதிப்பிடுவதும் எங்கள் ஆய்வின் நோக்கமாக இருந்தது. பிறழ்வுகளின் இருப்பு, கட்டியின் தரம் மற்றும் பெருக்கக் குறியீட்டுடன் தொடர்புடையதாக இருந்தது. முடிவுகள்: ஒட்டுமொத்தமாக, 35 நோயாளிகளுக்கு (9%) BRCA நோய்க்காரணி மாறுபாடு இருந்தது; அவர்களில் 17 பேருக்கு (49%) BRCA1-லும், 18 பேருக்கு (51%) BRCA2-லும் இருந்தது. டிரிபிள்-நெகட்டிவ் மார்பகப் புற்றுநோயில் BRCA1 பிறழ்வுகள் பரவலாகக் காணப்படுகின்றன. நோயாளிகளில், BRCA2 பிறழ்வுகள் லுமினல் மார்பகப் புற்றுநோய் நோயாளிகளிடையே மிகவும் பொதுவானவை. பிறழ்வு இல்லாதவர்களுடன் ஒப்பிடும்போது, ​​BRCA1 மாறுபாடுகளைக் கொண்ட நபர்கள் கணிசமாக அதிக கட்டி தரம் மற்றும் பெருக்கக் குறியீட்டைக் கொண்டிருந்தனர். முடிவுகள்: எங்கள் கண்டுபிடிப்புகள் கிழக்கு சிசிலியைச் சேர்ந்த மார்பகப் புற்றுநோய் நோயாளிகளின் BRCA பிறழ்வு நிலை குறித்த ஒரு கண்ணோட்டத்தை வழங்குகின்றன மற்றும் பரம்பரை மார்பகப் புற்றுநோய் நோயாளிகளை அடையாளம் காண்பதில் NGS பகுப்பாய்வின் பங்கை உறுதிப்படுத்துகின்றன. ஒட்டுமொத்தமாக, இந்தத் தரவுகள், பிறழ்வு தாங்கியவர்களில் புற்றுநோயை முறையாகத் தடுப்பதற்கும் சிகிச்சையளிப்பதற்கும் BRCA பரிசோதனையை ஆதரிக்கும் முந்தைய சான்றுகளுடன் ஒத்துப்போகின்றன.
மார்பகப் புற்றுநோய் (BC) உலகளவில் மிகவும் பொதுவான வீரியம் மிக்க நோயாகவும், பெண்களிடையே மிகவும் கொடிய புற்றுநோயாகவும் உள்ளது.¹ மார்பகப் புற்றுநோயின் முன்கணிப்பு மற்றும் மருத்துவ நடத்தையைத் தீர்மானிக்கும் உயிரியல் அம்சங்கள் காலப்போக்கில் விரிவாக ஆய்வு செய்யப்பட்டு, ஓரளவு தெளிவுபடுத்தப்பட்டுள்ளன. உண்மையில், மார்பகப் புற்றுநோயை வெவ்வேறு மூலக்கூறு துணை வகைகளாக வகைப்படுத்த தற்போது பல மாற்று குறிப்பான்கள் பயன்படுத்தப்படுகின்றன. அவை ஈஸ்ட்ரோஜன் (ER) மற்றும்/அல்லது புரோஜெஸ்ட்டிரோன் ஏற்பி (PgR), மனித மேல்தோல் வளர்ச்சி காரணி ஏற்பி 2 (HER2) பெருக்கம், பெருக்கக் குறியீடு Ki-67 மற்றும் கட்டி தரம் (G) ஆகும்.² இந்த மாறிகளின் கலவையானது பின்வரும் மார்பகப் புற்றுநோய் வகைகளை அடையாளம் கண்டது: 1) ER மற்றும்/அல்லது PgR வெளிப்பாட்டைக் காட்டும் லுமினல் கட்டிகள், மார்பகப் புற்றுநோய்களில் 75% ஆக இருந்தன. இந்தக் கட்டிகள் மேலும் லுமினல் A எனப் பிரிக்கப்பட்டன, இதில் Ki-67 20% க்கும் குறைவாகவும் HER2 எதிர்மறையாகவும் இருந்தது, மற்றும் லுமினல் B எனப் பிரிக்கப்பட்டன, இதில் பெருக்கக் குறியீட்டைப் பொருட்படுத்தாமல், Ki-67 20% க்கு சமமாகவோ அல்லது அதிகமாகவோ இருந்து HER2 பெருக்கம் இருந்தது; 2) ER மற்றும் PgR எதிர்மறையாக இருந்து, ஆனால் HER2 பெருக்கத்தைக் காட்டும் HER2+ கட்டிகள். இந்தக் குழு அனைத்து மார்பகக் கட்டிகளிலும் 10% ஆகும்; 3) மும்மை-எதிர்மறை மார்பகப் புற்றுநோய் (TNBC), இது ER மற்றும் PgR வெளிப்பாடு மற்றும் HER2 பெருக்கத்தைக் காட்டாது, மார்பகப் புற்றுநோய்களில் சுமார் 15% ஆகும்.2-4
இந்த மார்பகப் புற்றுநோய் துணை வகைகளில், கட்டியின் தரம் மற்றும் பெருக்கக் குறியீடு ஆகியவை கட்டியின் தீவிரத்தன்மை மற்றும் முன்கணிப்புடன் நேரடியாகவும் சுயாதீனமாகவும் தொடர்புடைய குறுக்குவெட்டு உயிர் குறிப்பான்களாகும்.5,6
மேற்கூறிய உயிரியல் அம்சங்களுடன் கூடுதலாக, மார்பகப் புற்றுநோய் (BC) உருவாவதற்கு வழிவகுக்கும் பரம்பரை மரபணு மாற்றங்களின் பங்கு கடந்த சில ஆண்டுகளாக மிகவும் முக்கியத்துவம் பெற்று வருகிறது.7 குறிப்பிட்ட மரபணுக்களில் ஏற்படும் கருவழி மாற்றங்கள் காரணமாக, சுமார் 10 மார்பகக் கட்டிகளில் ஒன்று பரம்பரையாக வருகிறது.8 ​​180,000-க்கும் மேற்பட்ட பெண்களை உள்ளடக்கிய இரண்டு பெரிய நோய்ப்பரவல் ஆய்வுகள், பரம்பரை மார்பகப் புற்றுநோய்க்கு முதன்மையாகக் காரணமான எட்டு மரபணுக்களின் (அதாவது, ATM, BARD1, BRCA1, BRCA2, CHK2, PALB2, RAD51C, மற்றும் RAD51D) ஒரு குழுவை சமீபத்தில் அடையாளம் கண்டுள்ளன. இந்த மரபணுக்களில், BRCA1 மற்றும் BRCA2 (இனி BRCA1/2 எனக் குறிப்பிடப்படும்) மார்பகக் கட்டிகளின் வளர்ச்சியுடன் வலுவான தொடர்பைக் காட்டின.9-12 உண்மையில், கருவழி BRCA1/2 பிறழ்வுகள், வாழ்நாள் முழுவதும் மார்பகப் புற்றுநோய் மற்றும் கருப்பை, புரோஸ்டேட், கணையம், பெருங்குடல் மற்றும் மெலனோமா உள்ளிட்ட பிற வீரியம் மிக்க கட்டிகளுக்கான அபாயத்தை கணிசமாக அதிகரிக்கின்றன. 13 முதல் 80 வயது வரை, மார்பகப் புற்றுநோய் உள்ள பெண்களில் அதன் ஒட்டுமொத்த பாதிப்பு விகிதம் 72% ஆகும். BRCA1 நோய்க்காரணி மாறுபாடு (PV) உள்ள பெண்களில் 69% பேருக்கும், BRCA2 PV உள்ள பெண்களில் 69% பேருக்கும் இது காணப்படுகிறது.¹⁴
குறிப்பாக, சமீபத்திய வெளியீடு ஒன்று, மார்பகப் புற்றுநோய் அபாயம் பாலிசைதீமியா வெரா (PV) வகையைச் சார்ந்துள்ளது என்று கூறுகிறது. உண்மையில், நோயை உண்டாக்கும் ட்ரங்கேட்டிங் வேரியன்ட்களுடன் ஒப்பிடும்போது, ​​வெளிப்படையான மிஸ்ஸென்ஸ் வேரியன்ட்கள், குறிப்பாக BRCA1 மரபணுவில் உள்ளவை, மார்பகப் புற்றுநோய் அபாயத்தைக் குறைப்பதோடு தொடர்புடையவை, அதிலும் குறிப்பாக வயதான பெண்களிடம்.¹⁵
BRCA1 அல்லது BRCA2 PV-யின் இருப்பு, பல்வேறு உயிரியல் மற்றும் மருத்துவ நோயியல் அம்சங்களுடன் தொடர்புடையதாக இருந்தது.¹⁶,¹⁷ BRCA1-தொடர்புடைய மார்பகப் புற்றுநோய்கள் மருத்துவ ரீதியாக ஆக்ரோஷமானவையாகவும், மோசமாக வேறுபடுத்தப்பட்டவையாகவும், அதிக அளவில் பெருகும் தன்மை கொண்டவையாகவும் இருக்கின்றன. இந்தக் கட்டிகள் பொதுவாக டிரிபிள் நெகட்டிவ் வகையைச் சேர்ந்தவை மற்றும் இளம் வயதிலேயே தொடங்குகின்றன. BRCA2-பிறழ்வுள்ள நோயாளிகளுக்கு ஏற்படும் கட்டிகள், பொதுவாக மிதமானது முதல் நன்கு வேறுபடுத்தப்பட்ட தரங்களையும், மாறுபட்ட பெருக்கக் குறியீடுகளையும் வெளிப்படுத்துகின்றன. இந்தக் கட்டிகள் லூமன் B-யில் மிகவும் பொதுவானவை மற்றும் பொதுவாக வயதானவர்களுக்கு ஏற்படுகின்றன.¹⁶-¹⁸ குறிப்பிடத்தக்க வகையில், BRCA1 மற்றும் BRCA2-வில் ஏற்படும் பிறழ்வுகள், பிளாட்டினம் உப்புகள் மற்றும் பாலி(ADP-ரிபோஸ்) பாலிமரேஸ் தடுப்பான்கள் (PARPi) போன்ற இலக்கு மருந்துகள் உள்ளிட்ட குறிப்பிட்ட சிகிச்சைகளுக்கான உணர்திறனை அதிகரிக்கின்றன.¹⁹,²⁰
கடந்த சில ஆண்டுகளில், மருத்துவப் பயன்பாட்டில் அடுத்த தலைமுறை வரிசைப்படுத்தல் (NGS) நடைமுறைப்படுத்தப்பட்டதன் மூலம், BRCA1/2 உள்ளிட்ட புற்றுநோய் பாதிப்பு நோய்க்குறிகளுக்கான மூலக்கூறு பரிசோதனையை மேற்கொள்ளும் மார்பகப் புற்றுநோயாளிகளின் எண்ணிக்கை அதிகரித்து வருகிறது.21 அதே நேரத்தில், BRCA1/2 பரிசோதனைக்குத் தகுதியான நபர்களைச் சிறப்பாக அடையாளம் காண்பதற்காக, குடும்ப வரலாறு, மக்கள்தொகை மற்றும் மருத்துவ நோயியல் பண்புகள் தொடர்பான துல்லியமான அளவுகோல்களின் அடிப்படையில் வரையறைகள் உருவாக்கப்பட்டுள்ளன.22,23 இந்தச் சூழலில், குறிப்பிட்ட மக்கள் தொகையில் BRCA1/2 பரிசோதனை குறித்த சான்றுகள் பெருகி வருகின்றன, இது புவியியல் பிராந்தியங்களுக்கிடையேயான வேறுபாடுகளை எடுத்துக்காட்டுகிறது.24–27 மேற்கு சிசிலியில் உள்ள மார்பகப் புற்றுநோய்க் குழுமம் குறித்த அறிக்கைகள் இருந்தாலும், கிழக்கு சிசிலி மக்கள் தொகையில் BRCA1/2 பரிசோதனை குறித்த தரவுகள் குறைவாகவே உள்ளன.28,29
கிழக்கு சிசிலியைச் சேர்ந்த மார்பகப் புற்றுநோய் நோயாளிகளிடம் மேற்கொள்ளப்பட்ட மரபணுவழி BRCA1/2 பரிசோதனையின் முடிவுகளை இங்கு விவரிக்கிறோம்; மேலும், BRCA1 அல்லது BRCA2 மரபணு மாற்றங்களின் இருப்பை, இந்தக் கட்டிகளின் முக்கிய மருத்துவ நோயியல் அம்சங்களுடன் தொடர்புபடுத்துகிறோம்.
கட்டானியாவில் உள்ள ரோடோலிகோ – சான் மார்கோ போலிக்ளினிகோ மருத்துவமனையில் அமைந்துள்ள “பரிசோதனை புற்றுநோயியல் மற்றும் இரத்தவியல் மையத்தில்” ஒரு பின்னோக்கு ஆய்வு மேற்கொள்ளப்பட்டது. ஜனவரி 2017 முதல் மார்ச் 2021 வரை, மார்பக மற்றும் கருப்பை, மெலனோமா, கணையம் அல்லது புரோஸ்டேட் புற்றுநோயால் பாதிக்கப்பட்ட மொத்தம் 455 நோயாளிகள் BRCA/2 மரபணுப் பரிசோதனைக்காக எங்கள் மூலக்கூறு நோயறிதல் ஆய்வகத்திற்குப் பரிந்துரைக்கப்பட்டனர். இந்த ஆய்வு ஹெல்சிங்கி பிரகடனத்திற்கு இணங்க நடத்தப்பட்டது, மேலும் மூலக்கூறு பகுப்பாய்விற்கு முன்னர் அனைத்து பங்கேற்பாளர்களும் எழுத்துப்பூர்வமான தகவலறிந்த ஒப்புதலை வழங்கினர்.
தீவிரமான கட்டிக் கூறுகளை மட்டும் கருத்தில் கொண்டு, மார்பகப் புற்றுநோயின் (BC) திசுவியல் மற்றும் உயிரியல் பண்புகள் (ER, PgR, HER2 நிலை, Ki-67 மற்றும் தரம்) கோர் பயாப்ஸி அல்லது அறுவை சிகிச்சை மாதிரிகளில் மதிப்பிடப்பட்டன. இந்தப் பண்புகளின் அடிப்படையில், மார்பகப் புற்றுநோய்கள் பின்வருமாறு வகைப்படுத்தப்பட்டன: லூமினல் A (ER+ மற்றும்/அல்லது PgR+, HER2-, Ki-67<20%), லூமினல் B (ER+ மற்றும்/அல்லது PgR+, HER2-, Ki-67≥20%), லூமினல் B-HER2+ (ER மற்றும்/அல்லது PgR+, HER2+), HER2+ (ER மற்றும் PgR-, HER2+) அல்லது டிரிபிள் நெகட்டிவ் (ER மற்றும் PgR-, HER2-).
BRCA1 மற்றும் BRCA2 மரபணு மாற்ற நிலையை மதிப்பிடுவதற்கு முன்பு, ஒரு புற்றுநோயியல் நிபுணர், ஒரு மரபியல் நிபுணர் மற்றும் ஒரு உளவியலாளர் அடங்கிய பல்துறை குழு, ஒவ்வொரு நோயாளிக்கும் BRCA1 மற்றும்/அல்லது BRCA2 மரபணுவில் PV (பாலிசோமாடிக் என்செஃபலோபதி) உள்ளதா என்பதைத் தீர்மானிக்க ஒரு கட்டி மரபியல் ஆலோசனையை நடத்தியது. நோயாளி தேர்வு இத்தாலிய மருத்துவ புற்றுநோயியல் சங்கத்தின் (AIOM) வழிகாட்டுதல்கள் மற்றும் உள்ளூர் சிசிலியன் பரிந்துரைகளின்படி செய்யப்பட்டது.30,31 இந்த அளவுகோல்களில் அடங்குபவை: (i) பாதிப்புக்குள்ளாகும் மரபணுக்களில் (எ.கா., BRCA1, BRCA2, TP53, PTEN) அறியப்பட்ட நோய்க்கிருமி மாறுபாடுகளின் குடும்ப வரலாறு; (ii) மார்பகப் புற்றுநோய் (BC) உள்ள ஆண்கள்; (iii) மார்பகப் புற்றுநோய் மற்றும் கருப்பை புற்றுநோய் (OC) உள்ளவர்கள்; (iv) 36 வயதுக்குட்பட்ட மார்பகப் புற்றுநோய், 60 வயதுக்குட்பட்ட TNBC (டிரான்ஸ்நியூரோபிளாஸ்டிக் என்செஃபலோபதி) அல்லது 50 வயதுக்குட்பட்ட இருபக்க மார்பகப் புற்றுநோய் உள்ள பெண்கள்; (v) 50 வயதுக்குட்பட்ட மார்பகப் புற்றுநோயின் தனிப்பட்ட மருத்துவ வரலாறு மற்றும் குறைந்தது ஒரு முதல் நிலை உறவினர்: (அ) 50 வயதுக்குட்பட்ட மார்பகப் புற்றுநோய்; (ஆ) எந்த வயதினராக இருந்தாலும் மியூசினஸ் அல்லாத மற்றும் பார்டர்லைன் அல்லாத கருப்பை புற்றுநோய்; (இ) இருபக்க மார்பகப் புற்றுநோய்; (d) ஆண் மார்பகப் புற்றுநோய்; (e) கணையப் புற்றுநோய்; (f) புரோஸ்டேட் புற்றுநோய்; (vi) 50 ஆண்டுகளுக்கு மேல் மார்பகப் புற்றுநோயின் தனிப்பட்ட வரலாறு மற்றும் ஒருவருக்கொருவர் முதல் நிலை உறவினர்களாக உள்ள உறவினர்களுக்கான (அவளுடன் முதல் நிலை உறவினர்களாக உள்ள உறவினர்கள் உட்பட) மார்பகப் புற்றுநோய், கருப்பை புற்றுநோய் அல்லது கணையப் புற்றுநோயின் குடும்ப வரலாறு ஆகிய இரண்டு அல்லது அதற்கு மேற்பட்டவை; (vii) கருப்பை புற்றுநோயின் தனிப்பட்ட வரலாறு மற்றும் குறைந்தது ஒரு முதல் நிலை உறவினர்: (a) 50 வயதுக்குக் குறைவான மார்பகப் புற்றுநோய்; (b) தொடர்பற்ற கருப்பை புற்றுநோய்; (c) இருபக்க மார்பகப் புற்றுநோய்; (d) ஆண் மார்பகப் புற்றுநோய்; (vii) உயர் தர சீரஸ் கருப்பை புற்றுநோய் உள்ள பெண்.
ஒவ்வொரு நோயாளியிடமிருந்தும் 20 மிலி புற இரத்த மாதிரி பெறப்பட்டு, EDTA குழாய்களில் (BD பயோசயின்சஸ்) சேகரிக்கப்பட்டது. உற்பத்தியாளரின் அறிவுறுத்தல்களின்படி, QIAsymphony DSP DNA Midi kit ஐசோலேஷன் கிட்டை (QIAGEN, ஹில்டன், இத்தாலி) பயன்படுத்தி 0.7 மிலி முழு இரத்த மாதிரிகளிலிருந்து மரபணு டி.என்.ஏ பிரித்தெடுக்கப்பட்டு, Qubit® 3.0 ஃப்ளூரோமீட்டர் (தெர்மோ ஃபிஷர் சயின்டிஃபிக், வால்டாம், எம்.ஏ, அமெரிக்கா) வழியாகச் செலுத்தப்பட்டு அளவு நிர்ணயம் செய்யப்பட்டது. இலக்கு செறிவூட்டல் மற்றும் லைப்ரரி தயாரிப்பு ஆகியவை ஆன்கோமைன்™ BRCA ரிசர்ச் அஸ்ஸே செஃப் மூலம் செய்யப்படுகின்றன. உற்பத்தியாளரின் அறிவுறுத்தல்களின்படி தானியங்கி லைப்ரரி தயாரிப்பிற்காக, இவை அயன் ஆம்ப்ளிசீக்™ செஃப் ரியேஜென்ட்ஸ் DL8 கிட்டில் ஏற்றப்படுவதற்குத் தயாராக உள்ளன. இந்த கிட், அனைத்து BRCA1 (NM_007300.3) மற்றும் BRCA2 (NM_000059.3) மரபணுக்களையும் ஆய்வு செய்யப் பயன்படுத்தக்கூடிய இரண்டு மல்டிபிளக்ஸ் PCR பிரைமர் பூல்களைக் கொண்டுள்ளது. சுருக்கமாக, நீர்த்தப்பட்ட ஒவ்வொரு மாதிரி டிஎன்ஏ-விலிருந்தும் (10 ng) 15 µL, லைப்ரரி தயாரிப்பிற்காக பார்கோடு இடப்பட்ட தட்டுகளில் சேர்க்கப்பட்டது. மேலும், அனைத்து ரியேஜென்ட்களும் நுகர்பொருட்களும் அயன் செஃப்™ கருவியில் ஏற்றப்பட்டன. பின்னர், அயன் செஃப்™ கருவியில் தானியங்கி லைப்ரரி தயாரிப்பு மற்றும் பார்கோடு இடப்பட்ட மாதிரி லைப்ரரி பூலிங் ஆகியவை செய்யப்பட்டன. தயாரிக்கப்பட்ட லைப்ரரிகளின் எண்ணிக்கை, உற்பத்தியாளரின் அறிவுறுத்தல்களின்படி க்யூபிட்® 3.0 ஃப்ளூரோமீட்டர் (தெர்மோ ஃபிஷர் சயின்டிஃபிக், வால்டாம், MA, USA) மூலம் மதிப்பிடப்பட்டது. இறுதியாக, லைப்ரரிகள் ஒன்றிணைக்கப்படுகின்றன. Ion Chef™ லைப்ரரி மாதிரிக் குழாய்களில் (பார்கோடு இடப்பட்ட குழாய்கள்) உள்ள சமமோலார் விகிதங்கள், Ion Chef™ கருவியில் ஏற்றப்பட்டன. வரிசைப்படுத்துதல், Ion 510 சிப்பைப் (Thermo Fisher Scientific) பயன்படுத்தி, Ion Torrent S5 (Thermo Fisher Scientific) கருவி மூலம் செய்யப்பட்டது. தரவுப் பகுப்பாய்வு, Amplicon Suite (SmartSeq srl) மற்றும் Ion Reporter மென்பொருள் மூலம் செய்யப்பட்டது.
அனைத்து மாறுபாடுகளின் பெயரிடலும், இணையத்தில் கிடைக்கும் (HGVS, http://www.hgvs.org/mutnomen) மனித மரபணு மாறுபாடு கூட்டமைப்பின் (Human Genome Variation Consortium) தற்போதைய வழிகாட்டுதல்களைப் பின்பற்றியது. BRCA1/2 மாறுபாடுகளின் மருத்துவ முக்கியத்துவம், சர்வதேச கூட்டமைப்பான ENIGMA-வின் (Evidence-Based Network for Interpreting Germline Mutant Alleles, https://enigmaconsortium.org/) வகைப்பாட்டைப் பயன்படுத்தியும், ARUP, BRCAEXCHANGE, ClinVar, IARC_LOVD, மற்றும் UMD போன்ற பல்வேறு தரவுத்தளங்களைக் கலந்தாலோசித்தும் வரையறுக்கப்பட்டது. இந்த வகைப்பாட்டில் ஐந்து தனித்துவமான இடர் பிரிவுகள் உள்ளன: தீங்கற்றது (பிரிவு I), தீங்கற்றதாக இருக்கலாம் (பிரிவு II), நிச்சயமற்ற முக்கியத்துவம் வாய்ந்த மாறுபாடு (VUS, பிரிவு III), நோயை உண்டாக்கக்கூடியதாக இருக்கலாம் (பிரிவு IV), மற்றும் நோயை உண்டாக்கும் (பிரிவு V). VarSome, புரதத்தின் அமைப்பு மற்றும் செயல்பாட்டின் மீதான பிறழ்வுகளின் விளைவையும் பகுப்பாய்வு செய்தது; இது 30 தரவுத்தளங்களை அணுகக்கூடிய ஒரு தகவல் தரும் கருவியாகும்.32
ஒவ்வொரு VUS-க்கும் சாத்தியமான மருத்துவ முக்கியத்துவத்தை ஒதுக்க, பின்வரும் கணக்கீட்டுப் புரத முன்கணிப்பு வழிமுறைகள் பயன்படுத்தப்பட்டன: MUTATION TASTER, 33 PROVEAN-SIFT (http://provean.jcvi.org/index.php), POLYPHEN-2 (http:// /genetics.bwh.harvard.edu/pph2/) மற்றும் Align-GVGD (http://agvgd.hci.utah.edu/agvgd_input.php). வகுப்பு 1 மற்றும் 2 என வகைப்படுத்தப்பட்ட மாறுபாடுகள் இயல்பு வகையாகக் கருதப்பட்டன.
சாங்கர் வரிசைமுறைப்படுத்தல் ஒவ்வொரு நோய்க்கிருமி மாறுபாட்டின் இருப்பையும் உறுதிப்படுத்தியது. சுருக்கமாக, BRCA1 மற்றும் BRCA2 மரபணு குறிப்பு வரிசைமுறைகளை (முறையே NG_005905.2, NM_007294.3 மற்றும் NG_012772.3, NM_000059.3) பயன்படுத்தி, கண்டறியப்பட்ட ஒவ்வொரு மாறுபாட்டிற்கும் ஒரு ஜோடி குறிப்பிட்ட பிரைமர்கள் வடிவமைக்கப்பட்டன. எனவே, இலக்கு PCR செய்யப்பட்டது, அதனைத் தொடர்ந்து சாங்கர் வரிசைமுறைப்படுத்தல் மேற்கொள்ளப்பட்டது.
BRCA1/2 மரபணுப் பரிசோதனையில் எதிர்மறை முடிவு பெற்ற நோயாளிகள், பெரிய மரபணு மறுசீரமைப்புகள் (LGR) இருப்பதைக் கண்டறிய, உற்பத்தியாளரின் அறிவுறுத்தல்களின்படி மல்டிபிளக்ஸ் லிகேஷன்-டிபென்டன்ட் புரோப் ஆம்ப்ளிஃபிகேஷன் (MLPA) மூலம் பரிசோதிக்கப்பட்டனர். சுருக்கமாக, டிஎன்ஏ மாதிரிகள் சிதைக்கப்பட்டு, சுமார் 60 நியூக்ளியோடைடுகள் நீளமுள்ள ஒரு குறிப்பிட்ட டிஎன்ஏ வரிசையைக் கண்டறியும் 60 வரையிலான BRCA1 மற்றும் BRCA2 மரபணு-சார்ந்த புரோப்கள் பயன்படுத்தப்படுகின்றன. ஒரு தனித்துவமான பிசிஆர் ஆம்ப்ளிகான்களின் தொகுப்பைக் கொண்ட புரோப் பெருக்க விளைபொருட்கள், பின்னர் நுண்குழாய் மின்புலப் பிரிப்பு மற்றும் Cofalyser.Net மென்பொருள் மூலம், பொருத்தமான தொகுதி-சார்ந்த Cofalyser அட்டவணைகளுடன் (www.mrcholland.com) இணைந்து பகுப்பாய்வு செய்யப்பட்டன.
தேர்ந்தெடுக்கப்பட்ட மருத்துவ நோயியல் மாறிகள் (திசுவியல் தரம் மற்றும் Ki-67% பெருக்கக் குறியீடு) BRCA1/2 PV இருப்பதோடு தொடர்புடையவை என, p-மதிப்பு <0.05 குறிப்பிடத்தக்கதாகக் கருதி, ஃபிஷரின் துல்லியச் சோதனையைப் பயன்படுத்தி பிரிசம் மென்பொருள் பதிப்பு 8.4 மூலம் கணக்கிடப்பட்டது.
ஜனவரி 2017 மற்றும் மார்ச் 2021-க்கு இடையில், 455 நோயாளிகள் மரபுவழி BRCA1/2 மரபணு மாற்றங்களுக்காகப் பரிசோதிக்கப்பட்டனர். இந்த மரபணு மாற்றப் பரிசோதனையானது, பாலிக்ளினிகோ மருத்துவமனையின் சோதனைமுறை புற்றுநோயியல் மற்றும் இரத்தவியல் மையத்தில் மேற்கொள்ளப்பட்டது. சிசிலிய வழிகாட்டுதலின்படி (http://www.gurs.regione.sicilia.it/Indicep1.htm, எண். 02-வெள்ளிக்கிழமை 10 ஜனவரி 2020), கட்டானியா – சான் மார்கோ ரோடோலிகோவில் ஒட்டுமொத்தமாக, 389 நோயாளிகளுக்கு மார்பகப் புற்றுநோயும், 37 பேருக்கு கருப்பை புற்றுநோயும், 16 பேருக்கு கணையப் புற்றுநோயும், 8 பேருக்கு புரோஸ்டேட் புற்றுநோயும் மற்றும் 5 பேருக்கு மெலனோமாவும் இருந்தன. புற்றுநோய் வகை மற்றும் பகுப்பாய்வு முடிவுகளின்படி நோயாளிகளின் பரவல் படம் 1-இல் காட்டப்பட்டுள்ளது.
படம் 1, ஆய்வின் ஒரு மேலோட்டத்தைக் காட்டும் செயல் விளக்க வரைபடத்தைக் காட்டுகிறது. மார்பக, மெலனோமா, கணைய, புரோஸ்டேட் அல்லது கருப்பைக் கட்டிகளைக் கொண்ட நோயாளிகள், BRCA1 மற்றும் BRCA2 மரபணுக்களில் உள்ள பிறழ்வுகளுக்காகப் பரிசோதிக்கப்பட்டனர்.
சுருக்கங்கள்: PVs, நோயுண்டாக்கும் மரபணு மாறுபாடு; VUS, முக்கியத்துவம் அறியப்படாத மரபணு மாறுபாடு; WT, இயல்புவகை BRCA1/2 வரிசைமுறை.
நாங்கள் எங்கள் ஆய்வுகளை மார்பகப் புற்றுநோய்க் குழுக்களில் தேர்ந்தெடுத்துக் கவனம் செலுத்தினோம். நோயாளிகளின் சராசரி வயது 49 ஆண்டுகள் (வரம்பு 23-89) ஆக இருந்தது, மேலும் அவர்கள் பெரும்பாலும் பெண்களாக இருந்தனர் (n=376, அல்லது 97%).
இந்த ஆய்வுக்குட்பட்டவர்களில், 64 (17%) பேருக்கு BRCA1/2 மரபணு மாற்றங்கள் இருந்தன, மேலும் அவர்கள் அனைவரும் பெண்கள். முப்பத்தைந்து (9%) பேருக்கு PV-யும், 29 (7.5%) பேருக்கு VUS-ம் இருந்தன. 35 நோய்க்காரணி மரபணு மாற்றங்களில், பதினேழு (48.6%) BRCA1-லும், 18 (51.4%) BRCA2-லும் ஏற்பட்டன. அதே சமயம், 5 VUS-கள் BRCA1-லும் (17.2%), 24 (82.8%) BRCA2-லும் ஏற்பட்டன (படம் 1 மற்றும் 2). MLPA பகுப்பாய்வில் LGR காணப்படவில்லை.
படம் 2. 389 மார்பகப் புற்றுநோயாளிகளில் BRCA1 மற்றும் BRCA2 மரபணு மாற்றங்களின் பகுப்பாய்வு. (A) 389 மார்பகப் புற்றுநோயாளிகளில் நோய்க்காரணி மரபணு மாறுபாடுகள் (PV) (சிவப்பு), நிச்சயமற்ற முக்கியத்துவம் வாய்ந்த மரபணு மாறுபாடுகள் (VUS) (ஆரஞ்சு), மற்றும் WT (நீலம்) ஆகியவற்றின் பரவல்; (B) 389 மார்பகப் புற்றுநோயாளிகளில் முப்பத்தைந்து (9%) பேருக்கு BRCA1/2 நோய்க்காரணி மரபணு மாறுபாடுகள் (PVs) இருந்தன. அவர்களில், 17 (48.6%) பேர் BRCA1 PV தாங்கிகளாகவும் (அடர் சிவப்பு) மற்றும் 18 (51.4%) பேர் BRCA2 தாங்கிகளாகவும் (இளம் சிவப்பு) இருந்தனர்; (C) 389 நபர்களில் 29 (7.5%) பேர் VUS-ஐயும், 5 (17.2%) பேர் BRCA1 மரபணுக்களையும் (அடர் ஆரஞ்சு) மற்றும் 24 (82.8%) பேர் BRCA2 மரபணுக்களையும் (இளம் ஆரஞ்சு) கொண்டிருந்தனர்.
சுருக்கங்கள்: PVs, நோயுண்டாக்கும் மரபணு மாறுபாடு; VUS, முக்கியத்துவம் அறியப்படாத மரபணு மாறுபாடு; WT, இயல்புவகை BRCA1/2 வரிசைமுறை.
அடுத்து, BRCA1/2 PV உள்ள நோயாளிகளிடம் மார்பகப் புற்றுநோயின் மூலக்கூறு துணை வகைகளின் பரவலை நாங்கள் ஆராய்ந்தோம். இந்தப் பரவலில் 2 (5.7%) லூமினல் A, 15 (42.9%) லூமினல் B, 3 (8.6%) லூமினல் B-HER2+, 2 (5.7%) HER2+ மற்றும் 13 (37.1%) TNBC நோயாளிகள் அடங்குவர். BRCA1-பாசிட்டிவ் நோயாளிகளில், 5 (29.4%) பேருக்கு லூமினல் B மார்பகப் புற்றுநோயும், 2 (11.8%) பேருக்கு HER2+ நோயும், 10 (58.8%) பேருக்கு TNBC-யும் இருந்தது. BRCA1 பிறழ்வுகள் இல்லாத கட்டிகள் லூமினல் A அல்லது லூமினல் B-HER2+ ஆக இருந்தன (படம் 3). BRCA2-பாசிட்டிவ் துணைக்குழுவில், 10 (55.6%) கட்டிகள் லூமினல் B ஆகவும், 3 (16.7%) லூமினல் B-HER2+ ஆகவும், 3 (16.7%) TNBC ஆகவும் மற்றும் 2 (11.1%) லூமினல் A ஆகவும் இருந்தன (படம் 3). HER2+ கட்டிகள் எதுவும் இல்லை. இந்தக் குழுவில் இருந்தன. எனவே, TNBC நோயாளிகளிடம் BRCA1 பிறழ்வுகள் பரவலாகக் காணப்படுகின்றன, அதேசமயம் லூமன் B வகை நபர்களிடம் BRCA2 மாற்றங்கள் மேலோங்கி இருக்கின்றன.
படம் 3 BRCA1 மற்றும் BRCA2-வில் நோய்க்காரணி மாறுபாடுகளைக் கொண்ட நோயாளிகளிடையே மார்பகப் புற்றுநோயின் துணை வகைகளின் பரவல். மார்பகப் புற்றுநோய் நோயாளிகளின் மூலக்கூறு துணை வகைகளிடையே BRCA1- (அடர் சிவப்பு) மற்றும் BRCA2- (வெளிர் சிவப்பு) நோய்க்காரணி மாறுபாடுகளின் பரவலைக் காட்டும் வரைபடங்கள். ஒவ்வொரு பெட்டிக்குள்ளும் குறிப்பிடப்பட்டுள்ள எண்கள், ஒவ்வொரு மார்பகப் புற்றுநோய் துணை வகைக்கும் BRCA1 மற்றும் BRCA2 நோய்க்காரணி மாறுபாடுகளைக் கொண்ட நோயாளிகளின் சதவீதத்தைக் குறிக்கின்றன.
சுருக்கங்கள்: PVs, நோயுண்டாக்கும் மாறுபாடு; HER2+, மனித புறத்தோல் வளர்ச்சி காரணி ஏற்பி 2 நேர்மறை; TNBC, மும்மை-எதிர்மறை மார்பகப் புற்றுநோய்.
பின்னர், BRCA1 மற்றும் BRCA2 PV-களின் வகை மற்றும் மரபணு இருப்பிடத்தை நாங்கள் மதிப்பிட்டோம். BRCA1 PV-இல், நாங்கள் 7 ஒற்றை நியூக்ளியோடைடு மாறுபாடுகள் (SNVs), 6 நீக்கங்கள், 3 இரட்டிப்புகள் மற்றும் 1 செருகலைக் கண்டறிந்தோம். ஒரே ஒரு சடுதிமாற்றம் (c.5522delG) மட்டுமே ஒரு புதிய கண்டுபிடிப்பாகும். இரண்டு நபர்களிடமும் கண்டறியப்பட்ட மிகவும் பொதுவான BRCA1 PV, c.5035_5039delCTAAT ஆகும். இந்த மாற்றமானது BRCA1 எக்ஸான் 15-இல் ஐந்து நியூக்ளியோடைடுகளின் (CTAAT) நீக்கத்தை உள்ளடக்கியது. இதன் விளைவாக, கோடான் 1679-இல் உள்ள லூசின் என்ற அமினோ அமிலம், டைரோசினால் பதிலீடு செய்யப்படுகிறது. மேலும், கணிக்கப்பட்ட மாற்று நிறுத்தக் கோடானுடன் ஏற்படும் மொழிபெயர்ப்பு ஃபிரேம்ஷிஃப்ட் காரணமாக, இது புரதத்தின் முன்கூட்டிய துண்டிப்பிற்கு வழிவகுக்கிறது. மற்ற அனைத்து மாற்றங்களும் ஒரே ஒரு நபரிடம் மட்டுமே கண்டறியப்பட்டன. குறிப்பிடத்தக்க வகையில், அறிவிக்கப்பட்ட PV-களில் ஒன்று, ஸ்ப்ளைஸ் சைட் கன்சென்சஸ் பகுதியில் (c.4357+1G>T) அமைந்திருந்தது (அட்டவணை 1).
BRCA2 PV தொடர்பாக, நாங்கள் 6 நீக்கங்கள், 6 SNV-கள் மற்றும் 2 இரட்டிப்புகளைக் கண்டறிந்தோம். கண்டறியப்பட்ட மாற்றங்களில் எதுவும் புதியதல்ல. எங்கள் மக்கள் தொகையில் மூன்று பிறழ்வுகள் மீண்டும் மீண்டும் ஏற்பட்டன; c.428dup மற்றும் c.8487+1G>A ஆகியவை 3 நபர்களிடம் காணப்பட்டன, அதனைத் தொடர்ந்து c.5851_5854delAGTT இரண்டு நபர்களிடம் கண்டறியப்பட்டது. c.428dup மாற்றமானது BRCA2-இன் எக்ஸான் 5-இல் உள்ள C-இன் மீண்டும் மீண்டும் வரும் வரிசையை உள்ளடக்கியது, இது ஒரு துண்டிக்கப்பட்ட, செயல்படாத புரதத்தை குறியீடு செய்யும் என கணிக்கப்பட்டுள்ளது. c.8487+1G>A பிறழ்வானது BRCA2 இன்ட்ரான் 19 (± 1,2)-இன் இன்ட்ரானிக் பகுதியில் ஏற்படுகிறது மற்றும் பிணைப்பு ஒருமித்த வரிசையைப் பாதிக்கிறது, இதன் விளைவாக மாற்றப்பட்ட பிணைப்பு ஏற்பட்டு அசாதாரண அல்லது புரதம் இல்லாமல் போகிறது. c.5851_5854delAGTT நோய்க்காரணி மாறுபாடானது BRCA2 மரபணுவின் குறியீட்டு எக்ஸான் 10-இல் உள்ள நியூக்ளியோடைடு நிலைகள் 5851 முதல் 5854 வரை 4-நியூக்ளியோடைடு நீக்கத்தால் ஏற்படுகிறது. இது, கணிக்கப்பட்ட மாற்று நிறுத்தக் குறியீட்டுடன் (p.S1951WfsTer) ஒரு மொழிபெயர்ப்பு ஃபிரேம்ஷிஃப்டை விளைவிக்கிறது. குறிப்பிடத்தக்க வகையில், முன்பு அறிவிக்கப்பட்டபடி, c.631G>A மற்றும் c.7008-2A>T ஆகிய இரண்டு மாற்றங்களும் ஒரே நோயாளிக்குக் கண்டறியப்பட்டன.34 முதல் பிறழ்வானது, BRCA2 எக்ஸான் 7-இல் உள்ள அடினோசின் (A) ஒரு குவானைன் (G) கொண்ட நியூக்ளியோடைடால் மாற்றப்படுவதை உள்ளடக்கியது, இதன் விளைவாக கோடான் 211-இல் வாலின் ஐசோலூசினாக மாறுகிறது. ஐசோலூசின் அமினோ அமிலம் என்பது மிகவும் ஒத்த பண்புகளைக் கொண்ட ஒரு அமினோ அமிலமாகும். இந்த மாற்றம் சாதாரண mRNA பிணைப்பைப் பாதிக்கிறது. இரண்டாவது மாறுபாடு ஒரு இன்ட்ரானிக் பகுதியில் அமைந்துள்ளது மற்றும் BRCA2-ஐ குறியிடும் மரபணுவின் எக்ஸான் 13-க்கு முன்பு A-க்கு பதிலாக தைமின் (T) இரட்டை மாற்றீட்டை விளைவிக்கிறது. c.7008-2A>T மாற்றமானது வெவ்வேறு நீளங்களைக் கொண்ட பல டிரான்ஸ்கிரிப்டுகளை உருவாக்கக்கூடும். மேலும், BRCA2 PV-களின் குழுவில், 18 மாற்றங்களில் 4 (22.2%) இன்ட்ரானிக் ஆக இருந்தன.
பின்னர், செயல்பாட்டு டொமைன்கள் மற்றும் புரத-பிணைப்புப் பகுதிகளில் BRCA1/2 தீங்கான மரபணு மாற்றங்களை நாங்கள் வரைபடமாக்கினோம் (படம் 4). BRCA1 மரபணுவில், 50% PV-கள் மார்பகப் புற்றுநோய் கொத்துப் பகுதியில் (BCCR) அமைந்திருந்தன, அதே நேரத்தில் 22% மரபணு மாற்றங்கள் கருப்பை புற்றுநோய் கொத்துப் பகுதியில் (OCCR) அமைந்திருந்தன (படம் 4A). BRCA2 PV-யில், 35.7% மாறுபாடுகள் BCCR பகுதியிலும், 42.8% மரபணு மாற்றங்கள் OCCR பகுதியிலும் அமைந்திருந்தன (படம் 4B). அடுத்து, BRCA1 மற்றும் BRCA2 புரத டொமைன்களுக்குள் PV-களின் இருப்பிடத்தை நாங்கள் மதிப்பிட்டோம். BRCA1 புரதத்தைப் பொறுத்தவரை, லூப் மற்றும் காயில்டு காயில் டொமைன்களில் மூன்று PV-களையும், BRCT டொமைனில் இரண்டு மரபணு மாற்றங்களையும் நாங்கள் கண்டறிந்தோம் (படம் 4A). BRCA2 புரதத்தைப் பொறுத்தவரை, 4 PV-கள் BRC ரிப்பீட் டொமைனில் வரைபடமாக்கப்பட்டன, அதே நேரத்தில் 3 இன்ட்ரானிக் மற்றும் 3 எக்ஸானிக் மாற்றங்கள் ஒலிகோ/ஒலிகோசாக்கரைடு-பிணைப்பு (OB) மற்றும் டவர் டொமைன்களில் கண்டறியப்பட்டன. (T) டொமைன்கள் (படம் 4B).
படம் 4 BRCA1 மற்றும் BRCA2 புரதங்களின் திட்டவட்டமான சித்தரிப்பு மற்றும் நோய்க்காரணி மாறுபாடுகளின் இருப்பிடம். இந்தப் படம் மார்பகப் புற்றுநோயாளிகளிடம் காணப்படும் BRCA1 (A) மற்றும் BRCA2 (B) நோய்க்காரணி மாறுபாடுகளின் பரவலைக் காட்டுகிறது. எக்ஸானிக் சடுதி மாற்றங்கள் நீல நிறத்திலும், இன்ட்ரானிக் மாறுபாடுகள் ஆரஞ்சு நிறத்திலும் காட்டப்பட்டுள்ளன. பட்டையின் உயரம் நோயாளிகளின் எண்ணிக்கையைக் குறிக்கிறது. BRCA1 மற்றும் BRCA2 புரதங்களும் அவற்றின் செயல்பாட்டு டொமைன்களும் இங்கு விவரிக்கப்பட்டுள்ளன. (A) BRCA1 புரதத்தில் ஒரு லூப் டொமைன் (RING), ஒரு நியூக்ளியர் லோகலைசேஷன் சீக்வென்ஸ் (NLS), ஒரு காயில்டு-காயில் டொமைன், ஒரு SQ/TQ கிளஸ்டர் டொமைன் (SCD) மற்றும் ஒரு BRCA1 C-டெர்மினல் டொமைன் (BRCT) ஆகியவை உள்ளன. (B) BRCA2 புரதத்தில் எட்டு BRC ரிப்பீட்கள், ஒரு ஹெலிகல் டொமைனுடன் கூடிய DNA-பிணைப்பு டொமைன் (Helical), மூன்று ஒலிகோநியூக்ளியோடைடு/ஒலிகோசாக்கரைடு-பிணைப்பு (OB) மடிப்புகள், ஒரு டவர் டொமைன் (T) மற்றும் C பக்கத்தில் ஒரு NLS ஆகியவை உள்ளன. மார்பகப் புற்றுநோய் கிளஸ்டர் பகுதி (BCCR) மற்றும் கருப்பை புற்றுநோய் கிளஸ்டர் பகுதி எனப்படும் பகுதிகளும் இதில் அடங்கும். (OCCR) கீழே காட்டப்பட்டுள்ளன.*நிறுத்தக் குறியீடுகளைத் தீர்மானிக்கும் சடுதி மாற்றங்களைக் குறிக்கிறது.
பின்னர், BRCA1/2 PV இருப்பதோடு தொடர்புபடுத்தக்கூடிய மார்பகப் புற்றுநோயின் மருத்துவ நோயியல் அம்சங்களை நாங்கள் ஆராய்ந்தோம். 181 BRCA1/2-எதிர்மறை நோயாளிகள் (மரபணு கடத்திகள் அல்லாதவர்கள்) மற்றும் அனைத்து மரபணு கடத்திகளுக்கும் (n = 35) முழுமையான மருத்துவப் பதிவுகள் கிடைத்தன. கட்டிப் பெருக்க விகிதத்திற்கும் அதன் தரத்திற்கும் இடையே ஒரு தொடர்பு இருந்தது.
எங்கள் குழுவின் இடைநிலையை (25%, வரம்பு <10-90%) அடிப்படையாகக் கொண்டு Ki-67 இன் பரவலை நாங்கள் கணக்கிட்டோம். Ki-67 < 25% கொண்டவர்கள் "குறைந்த Ki-67" என வரையறுக்கப்பட்டனர், அதே சமயம் மதிப்புகள் ≥ 25% கொண்ட நபர்கள் "அதிக Ki-67" எனக் கருதப்பட்டனர். BRCA1 PV அல்லாதவர்களுக்கும் கேரியர்களுக்கும் இடையே குறிப்பிடத்தக்க Ki-67 வேறுபாடுகள் (p<0.01) கண்டறியப்பட்டன (படம் 5A).
படம் 5 BRCA1 மற்றும் BRCA2 PV-கள் உள்ள மற்றும் இல்லாத மார்பகப் புற்றுநோய் பெண்களில் கிரேடு பரவலுடன் Ki-67-இன் தொடர்பு. (A) 181 கேரியர் அல்லாத BC நோயாளிகளுக்கும் BRCA1 (18) அல்லது BRCA2 (17) PV நோயாளிகளுக்கும் இடையிலான மீடியன் Ki-67 மதிப்புகளைக் காட்டும் பாக்ஸ்பிளாட். 0.5-க்குக் குறைவான P மதிப்புகள் புள்ளிவிவர ரீதியாக குறிப்பிடத்தக்கவையாகக் கருதப்பட்டன. (B) BRCA1 மற்றும் BRCA2 பிறழ்வு நிலையின்படி (WT நபர்கள், BRCA1 மற்றும் BRCA2 PV கேரியர்கள்) BC புற்றுநோய் நோயாளிகளை ஹிஸ்டாலஜிக்கல் கிரேடு குழுக்களாக (G2 மற்றும் G3) வகைப்படுத்துவதைக் குறிக்கும் ஹிஸ்டோகிராம்.
அதேபோல், கட்டியின் தரம் BRCA1/2 PV இருப்புடன் தொடர்புடையதா என்பதையும் நாங்கள் ஆராய்ந்தோம். எங்கள் ஆய்வுக்குட்பட்ட மக்களிடையே G1 மார்பகப் புற்றுநோய் இல்லாததால், நோயாளிகளை இரண்டு குழுக்களாக (G2 அல்லது G3) பிரித்தோம். Ki-67 முடிவுகளுக்கு இணங்க, இந்த பகுப்பாய்வு கட்டியின் தரம் மற்றும் BRCA1 பிறழ்வுக்கு இடையே புள்ளிவிவர ரீதியாக குறிப்பிடத்தக்க தொடர்பை வெளிப்படுத்தியது. BRCA1 இல்லாதவர்களுடன் ஒப்பிடும்போது, ​​BRCA1 உள்ளவர்களிடையே G3 கட்டிகளின் விகிதம் அதிகமாக இருந்தது (p<0.005) (படம் 5B).
டிஎன்ஏ வரிசைப்படுத்தல் தொழில்நுட்பத்தில் ஏற்பட்டுள்ள முன்னேற்றங்கள், BRCA1/2 மரபணு சோதனையில் முன்னெப்போதும் இல்லாத முன்னேற்றங்களை சாத்தியமாக்கியுள்ளன. இது, புற்றுநோய் குடும்ப வரலாறு கொண்ட நோயாளிகளுக்கு மிக முக்கியமான தாக்கங்களைக் கொண்டுள்ளது. இன்றுவரை, அமெரிக்க மருத்துவ மரபியல் சங்கம் 35 மற்றும் ENIGMA அமைப்பு 35,36 ஆகியவற்றின்படி சுமார் 20,000 BRCA1/2 மரபணு மாறுபாடுகள் அடையாளம் காணப்பட்டு வகைப்படுத்தப்பட்டுள்ளன. BRCA1/2 மரபணு மாற்றங்களின் வீச்சு, புவியியல் பிராந்தியங்கள் முழுவதும் பரவலாக வேறுபடுகிறது என்பது அனைவரும் அறிந்ததே.37 இத்தாலிக்குள், BRCA1/2 PV-களின் விகிதம் 8% முதல் 37% வரை இருந்தது, இது நாட்டிற்குள் பரந்த மாறுபாட்டைக் காட்டுகிறது.38,39 ஏறக்குறைய 5 மில்லியன் மக்கள்தொகையுடன், சிசிலி இத்தாலியில் மக்கள் தொகையின் அடிப்படையில் ஐந்தாவது பெரிய பிராந்தியமாகும். மேற்கு சிசிலியில் BRCA1/2-இன் பரவல் குறித்த தரவுகள் இருந்தாலும், தீவின் கிழக்குப் பகுதியில் விரிவான சான்றுகள் எதுவும் இல்லை.
கிழக்கு சிசிலியில் உள்ள மார்பகப் புற்றுநோய் நோயாளிகளிடையே BRCA1/2 PV பாதிப்பு விகிதம் குறித்த முதல் அறிக்கைகளில் எங்கள் ஆய்வும் ஒன்றாகும்.²⁸ எங்கள் ஆய்வுக் குழுவில் மிகவும் பொதுவான நோயாக மார்பகப் புற்றுநோய் இருப்பதால், நாங்கள் எங்கள் பகுப்பாய்வை அதன் மீது கவனம் செலுத்தினோம்.
389 மார்பகப் புற்றுநோயாளிகளைப் பரிசோதித்தபோது, ​​அவர்களில் 9% பேர் BRCA1/2 PV-களைக் கொண்டிருந்தனர், அவை BRCA1 மற்றும் BRCA2-க்கு இடையில் சமமாகப் பரவியிருந்தன. இந்த முடிவுகள், இத்தாலிய மக்களிடையே முன்னர் அறிவிக்கப்பட்டவற்றுடன் ஒத்துப்போகின்றன.28 சுவாரஸ்யமாக, எங்கள் ஆய்வுக் குழுவில் 3% (13/389) பேர் ஆண்களாக இருந்தனர். இந்த விகிதம், ஆண் மார்பகப் புற்றுநோய்க்கு எதிர்பார்க்கப்பட்டதை விட (அனைத்து மார்பகப் புற்றுநோய்களிலும் 1%) அதிகமாகும்,40 இது BRCA1/2 பிறழ்வு அபாயத்தின் அடிப்படையில் நாங்கள் மக்களைத் தேர்ந்தெடுத்ததைப் பிரதிபலிக்கிறது. இருப்பினும், இந்த ஆண்களில் எவருக்கும் BRCA1/2 PV உருவாகவில்லை, எனவே PALB2, RAD51C மற்றும் D போன்ற அரிதான பிறழ்வுகள் இருப்பதைக் கண்டறிய, அவர்கள் மேலதிக மூலக்கூறு பகுப்பாய்விற்குத் தகுதியானவர்களாக இருந்தனர். BRCA2 VUS தெளிவாகத் தெரிந்தவர்களில் 7% பேரிடம் நிச்சயமற்ற முக்கியத்துவம் வாய்ந்த மாறுபாடுகள் கண்டறியப்பட்டன. இந்த முடிவு கூட ஏற்கனவே உள்ள சான்றுகளுடன் ஒத்துப்போகிறது.28,41,42
BRCA1/2 மரபணு மாற்றமடைந்த பெண்களில் மார்பகப் புற்றுநோயின் மூலக்கூறு துணை வகைகளின் பரவலை நாங்கள் பகுப்பாய்வு செய்தபோது, ​​TNBC மற்றும் BRCA1 PV (58.8%) ஆகியவற்றுக்கு இடையேயான அறியப்பட்ட தொடர்புகளையும், லூமினல் B மார்பகப் புற்றுநோய் மற்றும் BRCA2 PV (55.6%) ஆகியவற்றுக்கு இடையேயான தொடர்புகளையும் உறுதிப்படுத்தினோம்.¹⁶,⁴³ BRCA1 மற்றும் BRCA2 PV கேரியர்களில் உள்ள லூமினல் A மற்றும் HER2+ கட்டிகள், ஏற்கனவே உள்ள இலக்கியத் தரவுகளுடன் ஒத்துப்போகின்றன.¹⁶,⁴³
பின்னர் நாங்கள் BRCA1/2 PV-யின் வகை மற்றும் இருப்பிடத்தில் கவனம் செலுத்துகிறோம். எங்கள் ஆய்வுக் குழுவில், மிகவும் பொதுவான BRCA1 PV ஆனது c.5035_5039delCTAAT ஆக இருந்தது. இன்கோர்வையா மற்றும் பலர். அவர்கள் தங்கள் சிசிலியன் குழுவில் இந்த மாறுபாட்டை விவரிக்கவில்லை, மற்ற ஆசிரியர்கள் இதை ஒரு ஜெர்ம்லைன் BRCA1 PV ஆகப் பதிவு செய்துள்ளனர்.34 எங்கள் குழுவில் பல BRCA1 PVகள் காணப்பட்டன – எ.கா. c.181T>G, c.514del, c.3253dupA மற்றும் c.5266dupC – இவை சிசிலியில் காணப்பட்டுள்ளன.28 இவற்றில், இரண்டு BRCA1 நிறுவனர் பிறழ்வுகள் (c.181T>G மற்றும் c.5266dupC) கிழக்கு மற்றும் மத்திய ஐரோப்பாவின் (போலந்து, செக்), ஸ்லோவேனியன், ஆஸ்திரியன், ஹங்கேரியன், பெலாரஷ்யன் மற்றும் ஜெர்மன் ஆகிய நாடுகளின் அஷ்கெனாசி யூதர்களிடையே பொதுவாகக் காணப்படுகின்றன.44,45 மேலும், அமெரிக்கா மற்றும் அர்ஜென்டினாவில், சமீபத்தில் மார்பகப் புற்றுநோய் (BC) மற்றும் கருப்பை புற்றுநோய் (OC) உள்ள இத்தாலிய நோயாளிகளிடம் இது "மீண்டும் மீண்டும் வரும் ஜெர்ம்லைன் மாறுபாடு" என வரையறுக்கப்பட்டது. 34c.514del மாறுபாடு முன்னர் பலேர்மோ மற்றும் மெசினாவில் உள்ள வடக்கு சிசிலியைச் சேர்ந்த 8 மார்பகப் புற்றுநோய் நோயாளிகளிடம் கண்டறியப்பட்டது. சுவாரஸ்யமாக, இன்கோர்வையா மற்றும் பலர் கூட. கட்டானியாவில் உள்ள சில குடும்பங்களில் c.3253dupA மாறுபாடு கண்டறியப்பட்டது.28 மிகவும் பிரதிநிதித்துவமான BRCA2 PV-கள் c.428dup, c.5851_5854delAGTT மற்றும் இன்ட்ரானிக் மாறுபாடு c.8487+1G>A ஆகும், இவை c.428dup கொண்ட பலேர்மோவில் உள்ள ஒரு நோயாளிக்கு 28 மேலும் விரிவாகப் பதிவு செய்யப்பட்டுள்ளன. c.5851_5854delAGTT PV வடமேற்கு சிசிலியில் உள்ள வீடுகளில், முக்கியமாக டிராபானி மற்றும் பலேர்மோ பகுதிகளில் காணப்பட்டது, அதேசமயம் c.5851_5854delAGTT PV வடமேற்கு சிசிலியில் உள்ள வீடுகளில் காணப்பட்டது. 8487+1G>A மாறுபாடு மெசினா, பலேர்மோ மற்றும் கல்டானிசெட்டாவைச் சேர்ந்த நபர்களிடையே மிகவும் பொதுவானதாக இருந்தது.28 ரெபெக் மற்றும் பலர். கொலம்பியாவில் c.5851_5854delAGTT மாற்றம் முன்னர் விவரிக்கப்பட்டுள்ளது.37 மற்றொரு BRCA2 PV, c.631+1G>A, சிசிலியைச் சேர்ந்த (அக்ரிஜென்டோ, சிராகுசா மற்றும் ரகுசா) மார்பகப் புற்றுநோய் மற்றும் கருப்பை புற்றுநோய் நோயாளிகளிடம் கண்டறியப்பட்டுள்ளது.28 குறிப்பிடத்தக்க வகையில், ஒரே நோயாளிக்கு இரண்டு BRCA2 மாறுபாடுகள் (BRCA2 c.631G>A மற்றும் c.7008-2A>T) இணைந்து இருப்பதை நாங்கள் கண்டறிந்தோம், முன்னர் அறிவிக்கப்பட்டதைப் போலவே, அவை சிஸ் முறையில் பிரிக்கப்பட்டதாக நாங்கள் கருதினோம்.34,46 இந்த BRCA2 இரட்டை மரபணு மாற்றங்கள் உண்மையில் இத்தாலியப் பகுதியில் அடிக்கடி காணப்படுகின்றன, மேலும் அவை முன்கூட்டியே நிறுத்தக் குறியீடுகளை அறிமுகப்படுத்தி, தூதுவர் ஆர்.என்.ஏ பிணைப்பைப் பாதித்து, BRCA2 புரதத்தைச் செயலிழக்கச் செய்வதாகக் கண்டறியப்பட்டுள்ளது.47,48
புரத டொமைன்கள் மற்றும் மரபணுக்களின் சாத்தியமான OCCR மற்றும் BCCR பகுதிகளில் BRCA1 மற்றும் BRCA2 PV-களையும் நாங்கள் வரைபடமாக்கினோம். இந்தப் பகுதிகள் முறையே கருப்பை மற்றும் மார்பகப் புற்றுநோயை உருவாக்கும் அபாயப் பகுதிகளாக ரெபெக் மற்றும் பலரால் விவரிக்கப்பட்டன.49 இருப்பினும், ஜெர்ம்லைன் மாறுபாடுகளின் இருப்பிடத்திற்கும் மார்பக அல்லது கருப்பை புற்றுநோய் அபாயத்திற்கும் இடையிலான தொடர்பு குறித்த சான்றுகள் சர்ச்சைக்குரியதாகவே உள்ளன.28,50-52 எங்கள் மக்கள் தொகையில், BRCA1 PV-கள் பெரும்பாலும் BCCR பகுதியிலும், BRCA2 PV-கள் பெரும்பாலும் OCCR பகுதியிலும் அமைந்திருந்தன. இருப்பினும், சாத்தியமான OCCR மற்றும் BCCR பகுதிகளுக்கும் மார்பகப் புற்றுநோய் அம்சங்களுக்கும் இடையே எந்தத் தொடர்பையும் எங்களால் கண்டறிய முடியவில்லை. BRCA1/2 பிறழ்வுகள் உள்ள நோயாளிகளின் எண்ணிக்கை குறைவாக இருப்பதே இதற்குக் காரணமாக இருக்கலாம். ஒரு புரத டொமைன் கண்ணோட்டத்தில், BRCA1 PV-கள் முழு புரதத்திலும் பரவியுள்ளன, மேலும் BRCA2 மாற்றங்கள் BRC ரிப்பீட் டொமைனில் முன்னுரிமையுடன் காணப்படுகின்றன.
இறுதியாக, மார்பகப் புற்றுநோயின் மருத்துவ நோயியல் அம்சங்களை BRCA1/2 PV உடன் தொடர்புபடுத்தினோம். சேர்க்கப்பட்ட நோயாளிகளின் எண்ணிக்கை குறைவாக இருந்ததால், Ki-67 மற்றும் கட்டியின் தரம் ஆகியவற்றுக்கு இடையே மட்டுமே ஒரு குறிப்பிடத்தக்க தொடர்பைக் கண்டறிந்தோம். Ki-67-இன் மதிப்பீடும் விளக்கமும் ஓரளவு சர்ச்சைக்குரியதாக இருந்தாலும், அதிக பெருக்க விகிதங்கள் நோய் மீண்டும் வருவதற்கான அதிக ஆபத்து மற்றும் குறைந்த உயிர்வாழ்வு ஆகியவற்றுடன் தொடர்புடையவை என்பது உறுதியாகிறது. இன்றுவரை, "அதிக" மற்றும் "குறைந்த" Ki-67-ஐ வேறுபடுத்துவதற்கான வரம்பு 20% ஆகும். இருப்பினும், இந்த வரம்பு நமது BRCA1/2 பிறழ்வு நோயாளி குழுவிற்குப் பொருந்தாது, இதில் சராசரி Ki-67 மதிப்பு 25% ஆகும். அதிக Ki-67 விகிதங்களில் உள்ள இந்த போக்கை, நமது லூமினல் B மற்றும் TNBC குழுக்களில் உள்ள பரவலால் விளக்க முடியும், அவற்றில் சில லூமினல் A கட்டிகளே இருந்தன. இருப்பினும், அதிக Ki-67 வரம்பு (25-30%) நோயாளிகளை அவர்களின் முன்கணிப்பின்படி சிறப்பாக வகைப்படுத்தக்கூடும் என்று சில சான்றுகள் தெரிவிக்கின்றன.53,54 எங்கள் பகுப்பாய்வின் முடிவுகளிலிருந்து, ஒரு குறிப்பிடத்தக்க தொடர்பு ஆச்சரியப்படுவதற்கில்லை. அதிக Ki-67 மற்றும் தரங்களுக்கு இடையே இது நிகழ்கிறது. BRCA1 PV-யின் இருப்பு. உண்மையில், BRCA1-தொடர்புடைய கட்டிகள் TNBC-யின் பொதுவான அறிகுறிகளாகும், மேலும் அவை மிகவும் தீவிரமான அம்சங்களைக் காட்டுகின்றன.16,17
முடிவாக, இந்த ஆய்வு கிழக்கு சிசிலியைச் சேர்ந்த மார்பகப் புற்றுநோயாளிகள் குழுவில் BRCA1/2-இன் மரபணு மாற்ற நிலை குறித்த ஒரு அறிக்கையை வழங்குகிறது. ஒட்டுமொத்தமாக, மார்பகப் புற்றுநோயில் மரபணு மாற்றங்களின் பரவல் மற்றும் மருத்துவ-நோயியல் அம்சங்கள் ஆகிய இரண்டின் அடிப்படையிலும், எங்கள் கண்டுபிடிப்புகள் ஏற்கனவே உள்ள சான்றுகளுடன் ஒத்துப்போகின்றன. BRCA1/2-ஐ விடத் தனித்துவமான மற்றும் அரிதான PV-களின் இருப்பை மதிப்பிடுவதற்கு, பல மரபணு விரிவாக்கப்பட்ட மரபணு மாற்றப் பகுப்பாய்வைப் பயன்படுத்துவது போன்ற, BRCA1/2-மரபணு மாற்றம் கொண்ட மார்பகப் புற்றுநோயாளிகளின் பெரிய மக்கள் தொகையில் கூடுதல் ஆய்வுகள் அவசியமாகின்றன. இது, மரபணு மாற்றங்கள் காரணமாகப் புற்றுநோய் ஏற்படும் அபாயம் அதிகரித்து வரும் நபர்களை அடையாளம் காணவும், அவர்களுக்கு முறையான சிகிச்சை அளிக்கவும் வழிவகுக்கும்.
ஆராய்ச்சி நோக்கங்களுக்காகத் தங்களின் கட்டி மாதிரிகளை அநாமதேயமாக வெளியிடுவதற்கு நோயாளிகள் தகவலறிந்த ஒப்புதலில் கையெழுத்திட்டதை நாங்கள் உறுதிசெய்தோம். ஹெல்சிங்கி பிரகடனத்தின்படி அனைத்து நோயாளிகளும் எழுத்துப்பூர்வமான தகவலறிந்த ஒப்புதலில் கையெழுத்திட்டனர். AOU பாலிக்ளினிகோ “ஜி. ரோடோலிகோ – எஸ். மார்கோ”வின் கொள்கையின்படி, BRCA1/2 பகுப்பாய்வானது மருத்துவ நடைமுறையின்படி மேற்கொள்ளப்பட்டதாலும், அனைத்து நோயாளிகளும் எழுத்துப்பூர்வமான தகவலறிந்த ஒப்புதலை வழங்கியதாலும், இந்த ஆய்விற்கு நெறிமுறை மதிப்பாய்விலிருந்து விலக்கு அளிக்கப்பட்டது. ஆராய்ச்சி நோக்கங்களுக்காகத் தங்களின் தரவுகளைப் பயன்படுத்தவும் நோயாளிகள் ஒப்புதல் அளிக்கின்றனர்.
நெறிமுறைக் குழுவின் வேண்டுகோளுக்கு இணங்க, மார்பகப் புற்றுநோயாளிகளின் பராமரிப்பில் உதவியளித்த பேராசிரியர் பாவ்லோ விக்னேரிக்கு நாங்கள் நன்றி தெரிவித்துக் கொள்கிறோம்.
ஃபெடெரிகா மார்டோரானா, இஸ்டிடியூட்டோ ஜென்டிலி, எலி லில்லி, நோவார்டிஸ், ஃபைசர் ஆகிய நிறுவனங்களிடமிருந்து கௌரவ ஊதியம் பெற்றதாகத் தெரிவிக்கிறார். மற்ற ஆசிரியர்கள் இந்தப் படைப்பில் தங்களுக்கு எந்தவிதமான நல முரண்பாடுகளும் இல்லை என்று அறிவிக்கின்றனர்.
1. சங் எச், ஃபெர்லே ஜே, சீகல் ஆர்எல், மற்றும் பலர். உலகளாவிய புற்றுநோய் புள்ளிவிவரங்கள் 2020: குளோபோகான் உலகெங்கிலும் உள்ள 185 நாடுகளில் 36 புற்றுநோய்களின் பாதிப்பு மற்றும் இறப்பு விகிதங்களை மதிப்பிடுகிறது. சிஏ கேன்சர் ஜே க்ளின். 2021;71(3):209-249. doi: 10.3322/caac.21660