Η Javascript είναι απενεργοποιημένη αυτήν τη στιγμή στο πρόγραμμα περιήγησής σας. Ορισμένες λειτουργίες αυτού του ιστότοπου δεν θα λειτουργούν όταν η Javascript είναι απενεργοποιημένη.
Εγγραφείτε με τα συγκεκριμένα στοιχεία σας και το συγκεκριμένο φάρμακο που σας ενδιαφέρει και θα αντιστοιχίσουμε τις πληροφορίες που παρέχετε με άρθρα στην εκτεταμένη βάση δεδομένων μας και θα σας στείλουμε άμεσα ένα αντίγραφο σε μορφή PDF μέσω email.
作者 Stella S, Vitale SR, Martorana F, Massimino M, Pavone G, Lanzafame K, Bianca S, Barone C, Gorgone C, Fichera M, Manzella L
Stefania Stella, 1,2 Silvia Rita Vitale, 1,2 Federica Martorana, 1,2 Michele Massimino, 1,2 Giuliana Pavone, 3 Katia Lanzafame, 3 Sebastiano Bianca, 4 Chiara Barone, 5 Cristina Gorgone, 6 Marco Ficherazein of Licheravi1,1,6, Experimental Medicine, University of Catania, Catania, 95123, Italy;2 Center for Experimental Oncology and Hematology, AOU Policlinico “G.Rodolico – San Marco”, Catania , 95123, Italy; 3 Medical Oncology, AOU Policlinico “G. Rodolico – San Marco”, Catania, 95123, Italy; 4 Medical Genetics, ARNAS Garibaldi, Κατάνια, 95123, Ιταλία; 5 Ιατρική Γενετική, ASP, Συρακούσες, 96100, Ιταλία· 6 Τμήμα Βιοϊατρικών και Βιοτεχνολογικών Επιστημών, Πανεπιστήμιο της Κατάνια, Ιατρική Γενετική, Κατάνια, Ιταλία, 95123· 7 Oasi Research Institute-IRCCS, Troina, 94018, Ιταλία Επικοινωνία: Stefania Stella, τηλ. +39 095 378 1946, email [email protected]· [email protected] Σκοπός: Μεταλλάξεις βλαστικής γραμμής στα BRCA1 και BRCA2 και εγκατεστημένος καρκίνος του μαστού (BC), των ωοθηκών (OC) και άλλα που σχετίζονται με κίνδυνο καρκίνου καθ' όλη τη διάρκεια της ζωής. Η εξέταση για το γονίδιο BRCA είναι το κλειδί για την αξιολόγηση του ατομικού κινδύνου, καθώς και για την εύρεση μεθόδων πρόληψης σε υγιείς φορείς και την προσαρμογή των θεραπειών σε ασθενείς με καρκίνο. Η συχνότητα εμφάνισης αλλοιώσεων BRCA1 και BRCA2 ποικίλλει σημαντικά μεταξύ των γεωγραφικών περιοχών και, παρόλο που υπάρχουν δεδομένα για τις παθογόνες παραλλαγές BRCA σε οικογένειες της Σικελίας, δεν υπάρχουν μελέτες που να στοχεύουν ειδικά τους πληθυσμούς στην ανατολική Σικελία. Στόχος της μελέτης μας ήταν να διερευνήσουμε τη συχνότητα εμφάνισης και την κατανομή των παθογόνων αλλοιώσεων βλαστικής γραμμής BRCA σε μια ομάδα ασθενών με BC από την ανατολική Σικελία και να αξιολογήσουμε τη συσχέτισή τους με συγκεκριμένα χαρακτηριστικά BC χρησιμοποιώντας αλληλούχιση επόμενης γενιάς. Η παρουσία αλλοιώσεων συσχετίστηκε με τον βαθμό όγκου και τον δείκτη πολλαπλασιασμού. ΑΠΟΤΕΛΕΣΜΑΤΑ: Συνολικά, 35 ασθενείς (9%) είχαν μια παθογόνο παραλλαγή BRCA, 17 (49%) σε BRCA1 και 18 (51%) σε BRCA2. Οι αλλοιώσεις BRCA1 είναι διαδεδομένες σε ασθενείς με τριπλά αρνητικό BC, ενώ οι μεταλλάξεις BRCA2 είναι πιο συχνές σε αυλικό BC. ασθενείς. Σε σύγκριση με τους μη φορείς, τα άτομα με παραλλαγές BRCA1 είχαν σημαντικά υψηλότερο βαθμό όγκου και δείκτη πολλαπλασιασμού. Συμπεράσματα: Τα ευρήματά μας παρέχουν μια επισκόπηση της κατάστασης μετάλλαξης BRCA σε ασθενείς με καρκίνο του μαστού από την ανατολική Σικελία και επιβεβαιώνουν τον ρόλο της ανάλυσης NGS στην αναγνώριση ασθενών με κληρονομικό καρκίνο του μαστού. Συνολικά, αυτά τα δεδομένα συμφωνούν με προηγούμενα στοιχεία που υποστηρίζουν τον έλεγχο BRCA για την ορθή πρόληψη και θεραπεία του καρκίνου σε φορείς μετάλλαξης.
Ο καρκίνος του μαστού (BC) είναι η πιο συχνή κακοήθεια παγκοσμίως και ο πιο θανατηφόρος καρκίνος στις γυναίκες.1 Τα βιολογικά χαρακτηριστικά που καθορίζουν την πρόγνωση και την κλινική συμπεριφορά του BC έχουν μελετηθεί εκτενώς και έχουν διευκρινιστεί εν μέρει με την πάροδο του χρόνου. Στην πραγματικότητα, αρκετοί υποκατάστατοι δείκτες χρησιμοποιούνται σήμερα για την ταξινόμηση του BC σε διαφορετικούς μοριακούς υποτύπους. Αυτοί είναι ο υποδοχέας οιστρογόνων (ER) και/ή προγεστερόνης (PgR), η ενίσχυση του υποδοχέα ανθρώπινου επιδερμικού αυξητικού παράγοντα 2 (HER2), ο δείκτης πολλαπλασιασμού Ki-67 και ο βαθμός όγκου (G).2 Ο συνδυασμός αυτών των μεταβλητών προσδιόρισε τις ακόλουθες κατηγορίες BC: 1) Οι όγκοι του αυλού, που εμφανίζουν έκφραση ER και/ή PgR, αντιπροσώπευαν το 75% των BC. Αυτοί οι όγκοι χωρίστηκαν περαιτέρω σε αυλό Α, όταν το Ki-67 ήταν κάτω από 20% και HER2 αρνητικό, και αυλό Β, όταν το Ki-67 ήταν ίσο ή πάνω από 20% και παρουσία ενίσχυσης HER2, ανεξάρτητα από τον δείκτη πολλαπλασιασμού. 2) Όγκοι HER2+ που είναι αρνητικοί σε ER και PgR αλλά εμφανίζουν ενίσχυση HER2. Αυτή η ομάδα αντιπροσωπεύει το 10% όλων των όγκων του μαστού. 3) Ο τριπλά αρνητικός καρκίνος του μαστού (TNBC), ο οποίος δεν εμφανίζει έκφραση ER και PgR και ενίσχυση HER2, αντιπροσωπεύει περίπου το 15% των καρκίνων του μαστού.2-4
Μεταξύ αυτών των υποτύπων BC, ο βαθμός όγκου και ο δείκτης πολλαπλασιασμού αντιπροσωπεύουν διατομεακούς βιοδείκτες που σχετίζονται άμεσα και ανεξάρτητα με την επιθετικότητα και την πρόγνωση του όγκου.5,6
Εκτός από τα προαναφερθέντα βιολογικά χαρακτηριστικά, ο ρόλος των κληρονομικών γενετικών αλλοιώσεων που οδηγούν στην ανάπτυξη καρκίνου του μαστού (BC) έχει αποκτήσει ολοένα και μεγαλύτερη σημασία τα τελευταία χρόνια.7 Περίπου 1 στους 10 όγκους του μαστού κληρονομούνται λόγω αλλοιώσεων της βλαστικής γραμμής σε συγκεκριμένα γονίδια.8 Δύο μεγάλες επιδημιολογικές μελέτες που αφορούσαν περισσότερες από 180.000 γυναίκες έχουν πρόσφατα εντοπίσει μια ομάδα οκτώ γονιδίων (δηλαδή, ATM, BARD1, BRCA1, BRCA2, CHK2, PALB2, RAD51C και RAD51D) που ευθύνονται κυρίως για την κληρονομική BC. Μεταξύ αυτών των γονιδίων, τα BRCA1 και BRCA2 (εφεξής αναφερόμενα ως BRCA1/2) έδειξαν την ισχυρότερη συσχέτιση με την ανάπτυξη όγκων του μαστού.9-12 Στην πραγματικότητα, οι μεταλλάξεις της βλαστικής γραμμής BRCA1/2 αυξάνουν σημαντικά τον κίνδυνο εμφάνισης BC, καθώς και άλλων κακοηθειών, συμπεριλαμβανομένων των ωοθηκών, του προστάτη, του παγκρέατος, του παχέος εντέρου και του μελανώματος, σε όλη τη ζωή. Από την ηλικία των 13 έως των 80 ετών, η συνολική συχνότητα εμφάνισης BC είναι 72% σε γυναίκες με παθογόνο παραλλαγή (PV) BRCA1 και 69% σε γυναίκες με BRCA2. ΦΒ.14
Αξίζει να σημειωθεί ότι μια πρόσφατη δημοσίευση υποδηλώνει ότι ο κίνδυνος εμφάνισης καρκίνου του μαστού εξαρτάται από τον τύπο της PV. Στην πραγματικότητα, σε σύγκριση με τις παθογόνες περικομμένες παραλλαγές, οι κραυγαλέες παραλλαγές missense, ειδικά στο γονίδιο BRCA1, σχετίζονται με μειωμένο κίνδυνο εμφάνισης καρκίνου του μαστού, ειδικά σε μεγαλύτερες γυναίκες.15
Η παρουσία του BRCA1 ή του BRCA2 PV συσχετίστηκε με διαφορετικά βιολογικά και κλινικοπαθολογικά χαρακτηριστικά.16,17 Τα σχετιζόμενα με BRCA1 BCs τείνουν να είναι κλινικά επιθετικά, ελάχιστα διαφοροποιημένα και ιδιαίτερα πολλαπλασιαστικά. Αυτοί οι όγκοι είναι συνήθως τριπλά αρνητικοί και έχουν πρώιμη ηλικία έναρξης. Οι όγκοι που εμφανίζονται σε ασθενείς με μετάλλαξη BRCA2 εμφανίζουν συνήθως μέτριους έως καλά διαφοροποιημένους βαθμούς και μεταβλητούς δείκτες πολλαπλασιασμού. Αυτοί οι όγκοι είναι πιο συνηθισμένοι στον αυλό Β και συνήθως εμφανίζονται σε ηλικιωμένους ενήλικες.16-18 Αξίζει να σημειωθεί ότι οι μεταλλάξεις στο BRCA1 και BRCA2 αυξάνουν την ευαισθησία σε συγκεκριμένες θεραπείες, συμπεριλαμβανομένων των αλάτων πλατίνας και στοχευμένων φαρμάκων όπως οι αναστολείς της πολυ(ADP-ριβόζης) πολυμεράσης (PARPi).19,20
Τα τελευταία χρόνια, η εφαρμογή της αλληλούχισης επόμενης γενιάς (NGS) στην κλινική πράξη έχει επιτρέψει σε έναν αυξανόμενο αριθμό ασθενών με καρκίνο του μαστού (BC) να υποβληθούν σε μοριακές εξετάσεις για σύνδρομα ευαισθησίας στον καρκίνο, συμπεριλαμβανομένων των BRCA1/2.21 Ταυτόχρονα, ορισμοί που βασίζονται σε ακριβή κριτήρια σχετικά με το οικογενειακό ιστορικό, τα δημογραφικά και τα κλινικοπαθολογικά χαρακτηριστικά για την καλύτερη αναγνώριση ατόμων που αξίζουν εξέταση BRCA1/2.22,23 Σε αυτό το πλαίσιο, συσσωρεύονται στοιχεία για τον έλεγχο BRCA1/2 σε συγκεκριμένους πληθυσμούς, επισημαίνοντας διαφορές μεταξύ γεωγραφικών περιοχών.24–27 Παρόλο που υπάρχουν αναφορές για την ομάδα BC στη δυτική Σικελία, λιγότερα δεδομένα είναι διαθέσιμα για τον έλεγχο BRCA1/2 στον πληθυσμό της ανατολικής Σικελίας.28,29
Περιγράφουμε εδώ τα αποτελέσματα του ελέγχου βλαστικής γραμμής BRCA1/2 σε ασθενείς με καρκίνο του μαστού από την ανατολική Σικελία, συσχετίζοντας περαιτέρω την παρουσία μεταλλάξεων BRCA1 ή BRCA2 με τα κύρια κλινικοπαθολογικά χαρακτηριστικά αυτών των όγκων.
Μια αναδρομική μελέτη πραγματοποιήθηκε στο «Κέντρο Πειραματικής Ογκολογίας και Αιματολογίας» στο Νοσοκομείο Policlinico.Rodolico – San Marco στην Κατάνια. Από τον Ιανουάριο του 2017 έως τον Μάρτιο του 2021, συνολικά 455 ασθενείς με καρκίνο του μαστού και των ωοθηκών, μελάνωμα, παγκρέατος ή προστάτη παραπέμφθηκαν στο μοριακό διαγνωστικό μας εργαστήριο για γενετικό έλεγχο BRCA/2. Η μελέτη αυτή διεξήχθη σύμφωνα με τη Διακήρυξη του Ελσίνκι και όλοι οι συμμετέχοντες παρείχαν γραπτή ενημερωμένη συγκατάθεση πριν από τη μοριακή ανάλυση.
Ιστολογικά και βιολογικά χαρακτηριστικά (ER, PgR, κατάσταση HER2, Ki-67 και βαθμός) του καρκίνου του μαστού αξιολογήθηκαν σε δείγματα βιοψίας πυρήνα ή χειρουργικά δείγματα, λαμβάνοντας υπόψη μόνο τα επιθετικά συστατικά του όγκου. Με βάση αυτά τα χαρακτηριστικά, τα καρκινικά βλάβες ταξινομήθηκαν ως εξής: αυλικό Α (ER+ και/ή PgR+, HER2-, Ki-67<20%), αυλικό Β (ER+ και/ή PgR+, HER2-, Ki-67≥20%), αυλικό Β-HER2+ (ER και/ή PgR+, HER2+), HER2+ (ER και PgR-, HER2+) ή τριπλά αρνητικά (ER και PgR-, HER2-).
Πριν από την αξιολόγηση της κατάστασης των μεταλλάξεων BRCA1 και BRCA2, μια διεπιστημονική ομάδα που περιλάμβανε έναν ογκολόγο, έναν γενετιστή και έναν ψυχολόγο διεξήγαγε μια γενετική συμβουλευτική όγκων για κάθε ασθενή για να προσδιορίσει την παρουσία BRCA1 ή/και BRCA1 ή άτομα με υψηλό κίνδυνο PV στο γονίδιο BRCA2. Η επιλογή των ασθενών πραγματοποιήθηκε σύμφωνα με τις κατευθυντήριες γραμμές της Ιταλικής Εταιρείας Ιατρικής Ογκολογίας (AIOM) και τις τοπικές συστάσεις της Σικελίας.30,31 Αυτά τα κριτήρια περιλαμβάνουν: (i) οικογενειακό ιστορικό γνωστών παθογόνων παραλλαγών σε γονίδια ευαισθησίας (π.χ., BRCA1, BRCA2, TP53, PTEN)· (ii) άνδρες με καρκίνο του μαστού· (iii) άτομα με καρκίνο του μαστού και οστεοαρθρίτιδα· (iv) γυναίκες με καρκίνο του μαστού <36 ετών, TNBC <60 ετών ή αμφοτερόπλευρο καρκίνο του μαστού <50 ετών· (v) προσωπικό ιατρικό ιστορικό καρκίνου του μαστού <50 ετών και τουλάχιστον έναν συγγενή πρώτου βαθμού: (α) καρκίνο του μαστού < 50 ετών· (β) μη βλεννογόνο και μη οριακό οστεοαρθρίτιδα οποιασδήποτε ηλικίας· (γ) αμφοτερόπλευρο καρκίνο του μαστού· (δ) άνδρα καρκίνο του μαστού· (ε) καρκίνος του παγκρέατος· (στ) καρκίνος του προστάτη· (vi) δύο ή περισσότερα άτομα. Προσωπικό ιστορικό καρκίνου του παγκρέατος > 50 έτη και οικογενειακό ιστορικό καρκίνου του παγκρέατος, καρκίνου του παγκρέατος ή καρκίνου του παγκρέατος για συγγενείς που είναι συγγενείς πρώτου βαθμού μεταξύ τους (συμπεριλαμβανομένων συγγενών με τους οποίους είναι συγγενείς πρώτου βαθμού)· (vii) Προσωπικό ιστορικό καρκίνου του παγκρέατος και τουλάχιστον ένας συγγενής πρώτου βαθμού: (α) καρκίνος του παγκρέατος <50 έτη· (β) μη καρκίνος του παγκρέατος· (γ) αμφοτερόπλευρος καρκίνος του παγκρέατος· (δ) καρκίνος του παγκρέατος άνδρας· (vii) γυναίκα με υψηλού βαθμού ορώδες καρκίνο του παγκρέατος.
Ένα δείγμα περιφερικού αίματος 20 mL ελήφθη από κάθε ασθενή και συλλέχθηκε σε σωλήνες EDTA (BD Biosciences). Το γονιδιωματικό DNA απομονώθηκε από δείγματα ολικού αίματος 0,7 mL χρησιμοποιώντας το κιτ απομόνωσης QIAsymphony DSP DNA Midi (QIAGEN, Hilden, Ιταλία) σύμφωνα με τις οδηγίες του κατασκευαστή και διήλθε από ένα φθοριόμετρο Qubit® 3.0 (Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA, ΗΠΑ). Εκτελέστε ποσοτικοποίηση. Ο εμπλουτισμός στόχου και η προετοιμασία της βιβλιοθήκης εκτελούνται από το Oncomine™ BRCA Research Assay Chef, έτοιμο για φόρτωση στο κιτ Ion AmpliSeq™ Chef Reagents DL8 για αυτοματοποιημένη προετοιμασία βιβλιοθήκης σύμφωνα με τις οδηγίες του κατασκευαστή. Το κιτ αποτελείται από δύο ομάδες πολλαπλών εκκινητών PCR που μπορούν να χρησιμοποιηθούν για τη μελέτη όλων των γονιδίων BRCA1 (NM_007300.3) και BRCA2 (NM_000059.3). Εν συντομία, 15 µL από κάθε αραιωμένο δείγμα DNA (10 ng) προστέθηκαν σε πλάκες με γραμμωτό κώδικα για την προετοιμασία της βιβλιοθήκης και όλα τα αντιδραστήρια και τα αναλώσιμα φορτώθηκαν στο όργανο Ion Chef™. Στη συνέχεια, πραγματοποιήθηκε αυτοματοποιημένη προετοιμασία βιβλιοθήκης και συγκέντρωση βιβλιοθήκης δειγμάτων με γραμμωτό κώδικα στο όργανο Ion Chef™. Ο αριθμός των παρασκευασμένων βιβλιοθηκών αξιολογήθηκε στη συνέχεια με ένα φθοριόμετρο Qubit® 3.0 (Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA, ΗΠΑ) σύμφωνα με τις οδηγίες του κατασκευαστή. Τέλος, οι βιβλιοθήκες συνδυάζονται σε ισομοριακές αναλογίες σε σωλήνες δειγμάτων βιβλιοθήκης Ion Chef™ (σωλήνες με γραμμωτό κώδικα) και φορτώνονται. στο όργανο Ion Chef™. Η αλληλούχιση πραγματοποιήθηκε χρησιμοποιώντας ένα όργανο Ion Torrent S5 (Thermo Fisher Scientific) (Thermo Fisher Scientific) χρησιμοποιώντας ένα τσιπ Ion 510 (Thermo Fisher Scientific). Η ανάλυση δεδομένων πραγματοποιήθηκε από το Amplicon Suite (SmartSeq srl) και το λογισμικό Ion Reporter.
Όλη η ονοματολογία των παραλλαγών ακολούθησε τις τρέχουσες οδηγίες της Κοινοπραξίας Παραλλαγών του Ανθρώπινου Γονιδιώματος, οι οποίες είναι διαθέσιμες στο διαδίκτυο (HGVS, http://www.hgvs.org/mutnomen). Η κλινική σημασία των παραλλαγών BRCA1/2 ορίστηκε χρησιμοποιώντας την ταξινόμηση της Διεθνούς Κοινοπραξίας ENIGMA (Δίκτυο Βασισμένο σε Αποδεικτικά Στοιχεία για την Ερμηνεία των Μεταλλαγμένων Αλλελίων Γενετικής Γραμμής, https://enigmaconsortium.org/) και συμβουλευόμενη διάφορες βάσεις δεδομένων όπως οι ARUP, BRCAEXCHANGE, ClinVar, IARC_LOVD και UMD. Η ταξινόμηση περιλαμβάνει πέντε διακριτές κατηγορίες κινδύνου: καλοήθης (κατηγορία Ι), πιθανώς καλοήθης (κατηγορία II), παραλλαγή αβέβαιης σημασίας (VUS, κατηγορία III), πιθανώς παθογόνος (κατηγορία IV) και παθογόνος (κατηγορία V). Η VarSome ανέλυσε επίσης την επίδραση των μεταλλάξεων στη δομή και τη λειτουργία των πρωτεϊνών, ένα ενημερωτικό εργαλείο με πρόσβαση σε 30 βάσεις δεδομένων.32
Για την απονομή πιθανής κλινικής σημασίας σε κάθε VUS, χρησιμοποιήθηκαν οι ακόλουθοι αλγόριθμοι υπολογιστικής πρόβλεψης πρωτεϊνών: MUTATION TASTER, 33 PROVEAN-SIFT (http://provean.jcvi.org/index.php), POLYPHEN-2 (http:// /genetics.bwh.harvard.edu/pph2/) και Align-GVGD (http://agvgd.hci.utah.edu/agvgd_input.php). Οι παραλλαγές που ταξινομήθηκαν ως κατηγορίας 1 και 2 θεωρήθηκαν άγριου τύπου.
Η αλληλούχιση Sanger επιβεβαίωσε την παρουσία κάθε παθογόνου παραλλαγής. Εν συντομία, σχεδιάστηκε ένα ζεύγος ειδικών εκκινητών για κάθε ανιχνευμένη παραλλαγή χρησιμοποιώντας τις αλληλουχίες αναφοράς γονιδίων BRCA1 και BRCA2 (NG_005905.2, NM_007294.3 και NG_012772.3, NM_000059.3, αντίστοιχα). Συνεπώς, πραγματοποιήθηκε στοχευμένη PCR ακολουθούμενη από αλληλούχιση Sanger.
Οι ασθενείς που βρέθηκαν αρνητικοί στο γονίδιο BRCA1/2 εξετάστηκαν με πολλαπλή ενίσχυση ανιχνευτή που εξαρτάται από την απολίνωση (MLPA) σύμφωνα με τις οδηγίες του κατασκευαστή για την αξιολόγηση της παρουσίας μεγάλων γονιδιωματικών αναδιατάξεων (LGR). Εν συντομία, δείγματα DNA μετουσιώνονται και χρησιμοποιούνται έως και 60 ανιχνευτές ειδικοί για τα γονίδια BRCA1 και BRCA2, καθένας από τους οποίους ανιχνεύει μια συγκεκριμένη αλληλουχία DNA μήκους περίπου 60 νουκλεοτιδίων. Τα προϊόντα ενίσχυσης ανιχνευτή, που αποτελούνται από ένα μοναδικό σύνολο αμπλικονίων PCR, αναλύθηκαν στη συνέχεια με τριχοειδή ηλεκτροφόρηση και με το λογισμικό Cofalyser.Net σε συνδυασμό με τους κατάλληλους πίνακες Cofalyser ειδικούς για κάθε παρτίδα (www.mrcholland.com).
Επιλεγμένες κλινικοπαθολογικές μεταβλητές (ιστολογικός βαθμός και δείκτης πολλαπλασιασμού Ki-67%) συσχετίστηκαν με την παρουσία BRCA1/2 PV, υπολογιζόμενες χρησιμοποιώντας το λογισμικό Prism έκδοση 8.4 χρησιμοποιώντας το Fisher's exact test υποθέτοντας ότι η τιμή p <0,05 είναι σημαντική.
Μεταξύ Ιανουαρίου 2017 και Μαρτίου 2021, 455 ασθενείς υποβλήθηκαν σε έλεγχο για μεταλλάξεις βλαστικής γραμμής BRCA1/2. Ο έλεγχος μεταλλάξεων πραγματοποιήθηκε στο Κέντρο Πειραματικής Ογκολογίας και Αιματολογίας του Νοσοκομείου Policlinico. Σύμφωνα με την κατευθυντήρια γραμμή της Σικελίας (http://www.gurs.regione.sicilia.it/Indicep1.htm, N. 02-Venerdì 10 Gennaio 2020), στο Rodolico της Κατάνιας - Άγιος Μάρκος συνολικά, 389 ασθενείς παρουσίασαν καρκίνο του μαστού, 37 καρκίνο των ωοθηκών, 16 καρκίνο του παγκρέατος, 8 καρκίνο του προστάτη και 5 μελάνωμα. Η κατανομή των ασθενών ανάλογα με τον τύπο καρκίνου και τα αποτελέσματα της ανάλυσης φαίνεται στο Σχήμα 1.
Το Σχήμα 1 δείχνει ένα διάγραμμα ροής που δείχνει μια επισκόπηση της μελέτης. Ασθενείς με όγκους μαστού, μελάνωμα, παγκρέατος, προστάτη ή ωοθηκών εξετάστηκαν για μεταλλάξεις στα γονίδια BRCA1 και BRCA2.
Συντομογραφίες: PVs, παθογόνος παραλλαγή· VUS, παραλλαγή αβέβαιης σημασίας· WT, αλληλουχία BRCA1/2 άγριου τύπου.
Επικεντρώσαμε επιλεκτικά τις μελέτες μας σε ομάδες καρκίνου του μαστού. Οι ασθενείς είχαν μέση ηλικία 49 έτη (εύρος 23-89) και ήταν κυρίως γυναίκες (n=376 ή 97%).
Από αυτά τα άτομα, 64 (17%) είχαν μεταλλάξεις BRCA1/2 και ήταν όλες γυναίκες. Τριάντα πέντε (9%) είχαν PV και 29 (7,5%) είχαν VUS. Δεκαεπτά (48,6%) από τις 35 παθογόνες παραλλαγές εμφανίστηκαν στο BRCA1 και 18 (51,4%) στο BRCA2, ενώ 5 VUS εμφανίστηκαν στο BRCA1 (17,2%) και 24 (82,8%) στο BRCA2 (Σχήματα 1 και 2). Το LGR δεν υπήρχε στην ανάλυση MLPA.
Σχήμα 2. Ανάλυση των μεταλλάξεων BRCA1 και BRCA2 σε 389 ασθενείς με καρκίνο του μαστού. (Α) Κατανομή παθογόνων παραλλαγών (PV) (κόκκινο), παραλλαγών αβέβαιης σημασίας (VUS) (πορτοκαλί) και WT (μπλε) σε 389 ασθενείς με καρκίνο του μαστού. (Β) 389 ασθενείς με καρκίνο του μαστού. Τριάντα πέντε (9%) είχαν παθογόνες παραλλαγές (PV) BRCA1/2. Μεταξύ αυτών, 17 (48,6%) ήταν φορείς BRCA1 PV (σκούρο κόκκινο) και 18 (51,4%) ήταν φορείς BRCA2 (ανοιχτό κόκκινο). (Γ) 29 (7,5%) από τα 389 άτομα έφεραν VUS, 5 (17,2%) γονίδια BRCA1 (σκούρο πορτοκαλί) και 24 (82,8%) γονίδια BRCA2 (ανοιχτό πορτοκαλί).
Συντομογραφίες: PVs, παθογόνος παραλλαγή· VUS, παραλλαγή αβέβαιης σημασίας· WT, αλληλουχία BRCA1/2 άγριου τύπου.
Στη συνέχεια, διερευνήσαμε την επικράτηση των μοριακών υποτύπων BC σε ασθενείς με BRCA1/2 PV. Η κατανομή περιελάμβανε 2 (5,7%) ασθενείς με αυλό Α, 15 (42,9%) αυλό Β, 3 (8,6%) αυλό Β-HER2+, 2 (5,7%) HER2+ και 13 (37,1%) ασθενείς με TNBC. Μεταξύ των ασθενών με BRCA1-θετικό, 5 (29,4%) είχαν αυλό Β BC, 2 (11,8%) είχαν νόσο HER2+ και 10 (58,8%) είχαν TNBC. Οι όγκοι χωρίς μεταλλάξεις BRCA1 ήταν είτε αυλό Α είτε αυλό Β-HER2+ (Σχήμα 3). Στην υποομάδα BRCA2-θετικού, 10 (55,6%) όγκοι ήταν αυλό Β, 3 (16,7%) ήταν αυλό Β-HER2+, 3 (16,7%) TNBC και 2 (11,1%) ήταν αυλό Α (Σχήμα 3). Δεν υπήρχαν όγκοι HER2+ σε αυτήν την ομάδα. Έτσι, οι μεταλλάξεις BRCA1 είναι συχνές σε ασθενείς με TNBC, ενώ οι αλλοιώσεις BRCA2 είναι κυρίαρχες σε άτομα με αυλό Β.
Σχήμα 3 Επιπολασμός υποτύπων καρκίνου του μαστού σε ασθενείς με παθογόνες μεταλλάξεις στα BRCA1 και BRCA2. Ιστογράμματα που δείχνουν την κατανομή των PV BRCA1- (σκούρο κόκκινο) και BRCA2- (ανοιχτό κόκκινο) μεταξύ των μοριακών υποτύπων ασθενών με καρκίνο του μαστού. Οι αριθμοί που αναφέρονται σε κάθε πλαίσιο αντιπροσωπεύουν το ποσοστό των ασθενών με PV BRCA1 και BRCA2 για κάθε υποτύπο καρκίνου του μαστού.
Συντομογραφίες: PVs, παθογόνος παραλλαγή· HER2+, θετικός στον υποδοχέα 2 του ανθρώπινου επιδερμικού αυξητικού παράγοντα· TNBC, τριπλά αρνητικός καρκίνος του μαστού.
Στη συνέχεια, αξιολογήσαμε τον τύπο και την εντόπιση των PV BRCA1 και BRCA2. Στο BRCA1 PV, παρατηρήσαμε 7 μονονουκλεοτιδικές παραλλαγές (SNV), 6 διαγραφές, 3 διπλασιασμούς και 1 εισαγωγή. Μόνο μία μετάλλαξη (c.5522delG) αντιπροσωπεύει μια νέα ανακάλυψη. Η πιο συχνή PV BRCA1 που ανιχνεύθηκε και στα δύο άτομα ήταν το c.5035_5039delCTAAT. Αυτή η αλλοίωση περιλαμβάνει μια διαγραφή πέντε νουκλεοτιδίων (CTAAT) στο εξόνιο 15 του BRCA1, με αποτέλεσμα την αντικατάσταση του αμινοξέος λευκίνη από τυροσίνη στο κωδικόνιο 1679, και λόγω μιας μετατόπισης πλαισίου μετάφρασης με ένα προβλεπόμενο εναλλακτικό κωδικόνιο λήξης οδήγησε σε πρόωρη περικοπή πρωτεΐνης. Όλες οι άλλες αλλαγές ανιχνεύονται μόνο σε μία περίπτωση. Αξιοσημείωτα, ένα από τα αναφερόμενα PV εντοπίστηκε στην περιοχή συναίνεσης της θέσης συρραφής (c.4357+1G>T) (Πίνακας 1).
Όσον αφορά το BRCA2 PV, παρατηρήσαμε 6 διαγραφές, 6 SNVs και 2 διπλασιασμούς. Καμία από τις αλλαγές που βρέθηκαν δεν είναι νέα. Τρεις μεταλλάξεις επανεμφανίστηκαν στον πληθυσμό μας, οι c.428dup και c.8487+1G>A παρατηρήθηκαν σε 3 άτομα, ακολουθούμενες από c.5851_5854delAGTT που ανακτήθηκε σε δύο περιπτώσεις. Η αλλοίωση c.428dup περιλαμβάνει μια επανάληψη του C στο εξόνιο 5 του BRCA2, η οποία προβλέπεται να κωδικοποιεί μια κολοβωμένη, μη λειτουργική πρωτεΐνη. Η μετάλλαξη c.8487+1G>A εμφανίζεται στην ιντρονική περιοχή του ιντρονίου 19 του BRCA2 (± 1,2) και επηρεάζει την αλληλουχία συναίνεσης συρραφής, με αποτέλεσμα αλλοιωμένη συρραφή που οδηγεί σε ανώμαλη ή απουσία πρωτεΐνης. Η παθογόνος παραλλαγή c.5851_5854delAGTT οφείλεται σε μια διαγραφή 4 νουκλεοτιδίων από τις θέσεις νουκλεοτιδίων 5851 έως 5854 στο κωδικοποιητικό εξόνιο 10 του γονιδίου BRCA2 και έχει ως αποτέλεσμα ένα Μετατόπιση μεταφραστικού πλαισίου με ένα προβλεπόμενο εναλλακτικό κωδικόνιο λήξης (p.S1951WfsTer). Αξιοσημείωτα, όπως αναφέρθηκε προηγουμένως, ανιχνεύθηκαν και οι δύο αλλοιώσεις c.631G>A και c.7008-2A>T στον ίδιο ασθενή.34 Η πρώτη μετάλλαξη περιλαμβάνει την αντικατάσταση της αδενοσίνης (A) στο εξόνιο 7 του BRCA2 με ένα νουκλεοτίδιο που περιέχει γουανίνη (G) με αποτέλεσμα την αλλαγή της βαλίνης σε ισολευκίνη στο κωδικόνιο 211, η ισολευκίνη. Το αμινοξύ είναι ένα αμινοξύ με πολύ παρόμοιες ιδιότητες. Αυτή η αλλαγή επηρεάζει την κανονική συρραφή του mRNA. Η δεύτερη παραλλαγή βρίσκεται σε μια ιντρονική περιοχή και έχει ως αποτέλεσμα μια διπλή υποκατάσταση Α προς θυμίνη (T) πριν από το εξόνιο 13 του γονιδίου που κωδικοποιεί το BRCA2. Η αλλαγή c.7008-2A>T μπορεί να δημιουργήσει πολλαπλά αντίγραφα διαφορετικών μηκών. Επιπλέον, στην ομάδα των BRCA2 PV, 4 από τις 18 αλλαγές (22,2%) ήταν ιντρονικές.
Στη συνέχεια, χαρτογραφήσαμε τις επιβλαβείς μεταλλάξεις BRCA1/2 σε λειτουργικούς τομείς και περιοχές δέσμευσης πρωτεϊνών (Εικ. 4). Στο γονίδιο BRCA1, το 50% των PV εντοπίστηκαν στην περιοχή συσσωμάτωσης καρκίνου του μαστού (BCCR), ενώ το 22% των μεταλλάξεων εντοπίστηκαν στην περιοχή συσσωμάτωσης καρκίνου των ωοθηκών (OCCR) (Εικ. 4Α). Στο γονίδιο BRCA2 PV, το 35,7% των παραλλαγών εντοπίστηκαν στην περιοχή BCCR και το 42,8% των μεταλλάξεων εντοπίστηκαν στο OCCR (Εικ. 4Β). Στη συνέχεια, αξιολογήσαμε τη θέση του PV εντός των πρωτεϊνικών τομέων BRCA1 και BRCA2. Για την πρωτεΐνη BRCA1, βρήκαμε τρεις PV στις περιοχές βρόχου και σπειροειδούς σπείρας, και δύο μεταλλάξεις στην περιοχή BRCT (Εικ. 4Α). Για την πρωτεΐνη BRCA2, 4 PV χαρτογραφήθηκαν στην περιοχή επανάληψης BRC, ενώ ανιχνεύθηκαν 3 ιντρονικές και 3 εξονικές αλλαγές στις περιοχές δέσμευσης ολιγο/ολιγοσακχαριτών (OB) και πύργου (T) (Εικ. 4Β).
Σχήμα 4 Σχηματική αναπαράσταση των πρωτεϊνών BRCA1 και BRCA2 και εντοπισμός παθογόνων παραλλαγών. Αυτό το σχήμα δείχνει την κατανομή των παθογόνων παραλλαγών BRCA1 (A) και BRCA2 (B) σε ασθενείς με καρκίνο του μαστού. Οι εξονικές μεταλλάξεις εμφανίζονται με μπλε χρώμα, ενώ οι ιντρονικές παραλλαγές εμφανίζονται με πορτοκαλί χρώμα. Το ύψος της ράβδου αντιπροσωπεύει τον αριθμό των περιπτώσεων. Αναφέρονται οι πρωτεΐνες BRCA1 και BRCA2 και οι λειτουργικοί τους τομείς. (A) Η πρωτεΐνη BRCA1 περιέχει έναν τομέα βρόχου (RING) και μια αλληλουχία πυρηνικής εντοπισμού (NLS), έναν τομέα σπειροειδούς σπείρας, έναν τομέα συστάδας SQ/TQ (SCD) και έναν τομέα C-τελικού άκρου BRCA1 (BRCT). (B) Η πρωτεΐνη BRCA2 περιέχει οκτώ επαναλήψεις BRC, έναν τομέα δέσμευσης DNA με ελικοειδή τομέα (Helical), τρεις πτυχές δέσμευσης ολιγονουκλεοτιδίων/ολιγοσακχαριτών (OB), έναν τομέα πύργου (T) και ένα NLS στην πλευρά C. Οι περιοχές που ονομάζονται Περιοχή Συστήματος Καρκίνου του Μαστού (BCCR) και Περιοχή Συστήματος Καρκίνου των Ωοθηκών (OCCR) εμφανίζονται στο κάτω μέρος. *Αντιπροσωπεύει μεταλλάξεις που καθορίζουν το stop κωδικόνια.
Στη συνέχεια, διερευνήσαμε τα κλινικοπαθολογικά χαρακτηριστικά του BC που θα μπορούσαν να συσχετιστούν με την παρουσία BRCA1/2 PV. Πλήρη κλινικά αρχεία ήταν διαθέσιμα για 181 ασθενείς με BRCA1/2 αρνητικούς ασθενείς (μη φορείς) και για όλους τους φορείς (n = 35). Υπήρξε συσχέτιση μεταξύ του ρυθμού πολλαπλασιασμού του όγκου και του βαθμού κακοήθειας.
Υπολογίσαμε την κατανομή του Ki-67 με βάση τη διάμεση τιμή της ομάδας μας (25%, εύρος <10-90%). Τα άτομα με Ki-67 < 25% ορίστηκαν ως «χαμηλό Ki-67», ενώ τα άτομα με τιμές ≥ 25% θεωρήθηκαν «υψηλό Ki-67». Σημαντικές διαφορές Ki-67 (p <0,01) βρέθηκαν μεταξύ μη φορέων και φορέων BRCA1 PV (Εικ. 5Α).
Σχήμα 5 Συσχέτιση του Ki-67 με την κατανομή βαθμού σε γυναίκες με καρκίνο του μαστού με και χωρίς PV BRCA1 και BRCA2. (A) Πλαίσιο πλαισίου που δείχνει τις διάμεσες τιμές Ki-67 σε 181 ασθενείς με καρκίνο του μαστού χωρίς φορέα έναντι ασθενών με PV BRCA1 (18) ή BRCA2 (17). Οι τιμές P κάτω του 0,5 θεωρήθηκαν στατιστικά σημαντικές. (B) Ιστόγραμμα που αντιπροσωπεύει την ταξινόμηση ασθενών με καρκίνο του μαστού σε ομάδες ιστολογικού βαθμού (G2 και G3) σύμφωνα με την κατάσταση μετάλλαξης BRCA1 και BRCA2 (άτομα με WT, φορείς PV BRCA1 και BRCA2).
Ομοίως, εξετάσαμε εάν ο βαθμός κακοήθειας του όγκου συσχετίζεται με την παρουσία του BRCA1/2 PV. Δεδομένου ότι το G1 BC απουσίαζε από τον πληθυσμό μας, χωρίσαμε τους ασθενείς σε δύο ομάδες (G2 ή G3). Σύμφωνα με τα αποτελέσματα Ki-67, η ανάλυση αποκάλυψε μια στατιστικά σημαντική συσχέτιση μεταξύ του βαθμού κακοήθειας του όγκου και της μετάλλαξης BRCA1, με υψηλότερο ποσοστό όγκων G3 σε φορείς BRCA1 σε σύγκριση με μη φορείς (p<0,005) (Σχήμα 5Β).
Οι εξελίξεις στην τεχνολογία αλληλούχισης DNA έχουν επιτρέψει πρωτοφανείς εξελίξεις στις γενετικές εξετάσεις BRCA1/2, με κρίσιμες επιπτώσεις για ασθενείς με οικογενειακό ιστορικό καρκίνου. Μέχρι σήμερα, έχουν εντοπιστεί και ταξινομηθεί περίπου 20.000 παραλλαγές BRCA1/2 σύμφωνα με την Αμερικανική Εταιρεία Ιατρικής Γενετικής 35 και το σύστημα ENIGMA.35,36 Είναι γνωστό ότι το φάσμα μεταλλάξεων BRCA1/2 ποικίλλει σημαντικά μεταξύ των γεωγραφικών περιοχών.37 Εντός της Ιταλίας, το ποσοστό των PV BRCA1/2 κυμαινόταν από 8% έως 37%, παρουσιάζοντας μεγάλη μεταβλητότητα εντός της χώρας.38,39 Με πληθυσμό σχεδόν 5 εκατομμυρίων, η Σικελία είναι η πέμπτη μεγαλύτερη περιοχή στην Ιταλία όσον αφορά τον αριθμό των κατοίκων. Παρόλο που υπάρχουν δεδομένα σχετικά με την κατανομή του BRCA1/2 στη δυτική Σικελία, δεν υπάρχουν εκτεταμένα στοιχεία στο ανατολικό τμήμα του νησιού.
Η μελέτη μας είναι μία από τις πρώτες αναφορές σχετικά με τη συχνότητα εμφάνισης BRCA1/2 PV σε ασθενείς με καρκίνο του μαστού στην ανατολική Σικελία.28 Εστιάσαμε την ανάλυσή μας στο καρκίνο του μαστού, καθώς αυτή είναι μακράν η πιο συχνή ασθένεια στην ομάδα μας.
Κατά την εξέταση 389 ασθενών με καρκίνο του μαστού (BC), το 9% έφερε BRCA1/2 PVs, ομοιόμορφα κατανεμημένα μεταξύ BRCA1 και BRCA2. Αυτά τα αποτελέσματα συμφωνούν με εκείνα που αναφέρθηκαν προηγουμένως στον ιταλικό πληθυσμό.28 Είναι ενδιαφέρον ότι το 3% (13/389) της ομάδας μας ήταν άνδρες. Αυτό το ποσοστό είναι υψηλότερο από το αναμενόμενο για τον καρκίνο του μαστού στους άνδρες (1% όλων των BCs),40 αντανακλώντας την επιλογή των πληθυσμών μας με βάση τον κίνδυνο μετάλλαξης BRCA1/2. Ωστόσο, κανένας από αυτούς τους άνδρες δεν ανέπτυξε BRCA1/2 PV, επομένως ήταν υποψήφιοι για περαιτέρω μοριακή ανάλυση για να αποκλειστεί η παρουσία λιγότερο συχνών μεταλλάξεων όπως PALB2, RAD51C και D, μεταξύ άλλων. Παραλλαγές αβέβαιης σημασίας ανακτήθηκαν στο 7% των ατόμων στα οποία ήταν εμφανής η VUS BRCA2. Ακόμα και αυτό το αποτέλεσμα είναι σύμφωνο με προϋπάρχοντα στοιχεία.28,41,42
Όταν αναλύσαμε την κατανομή των μοριακών υποτύπων BC σε γυναίκες με μεταλλαγμένο γονίδιο BRCA1/2, επιβεβαιώσαμε γνωστές συσχετίσεις μεταξύ του TNBC και του BRCA1 PV (58,8%) και μεταξύ του αυλικού Β BC και του BRCA2 PV (55,6%).16,43 Οι όγκοι του αυλού Α και HER2+ σε φορείς BRCA1 και BRCA2 PV συμφωνούν με τα υπάρχοντα βιβλιογραφικά δεδομένα.16,43
Στη συνέχεια, εστιάζουμε στον τύπο και την τοποθεσία του PV BRCA1/2. Στην ομάδα μας, το πιο συνηθισμένο PV BRCA1 ήταν c.5035_5039delCTAAT. Αν και οι Incorvaia et al. δεν περιέγραψαν αυτήν την παραλλαγή στην ομάδα τους στη Σικελία, άλλοι συγγραφείς την έχουν αναφέρει ως PV BRCA1 βλαστικής σειράς.34 Αρκετά PV BRCA1 βρέθηκαν στην ομάδα μας - π.χ. c.181T>G, c.514del, c.3253dupA και c.5266dupC - τα οποία έχουν παρατηρηθεί στη Σικελία.28 Από αυτές, δύο ιδρυτικές μεταλλάξεις BRCA1 (c.181T>G και c.5266dupC) βρίσκονται συνήθως σε Εβραίους Ασκενάζι της Ανατολικής και Κεντρικής Ευρώπης (Πολωνία, Τσεχία), Σλοβένους, Αυστριακούς, Ούγγρους, Λευκορώσους και Γερμανούς), 44,45 και, στις Ηνωμένες Πολιτείες και την Αργεντινή, ορίστηκε πρόσφατα ως «επαναλαμβανόμενη παραλλαγή βλαστικής σειράς» σε Ιταλούς ασθενείς με καρκίνο του μαστού και οστεοαρθρίτιδα. Η παραλλαγή 34c.514del είχε προηγουμένως εντοπιστεί σε 8 ασθενείς με καρκίνο του μαστού από τη βόρεια Σικελία στο Παλέρμο και τη Μεσσήνη. Είναι ενδιαφέρον ότι ακόμη και οι Incorvaia et al. βρήκαν την παραλλαγή c.3253dupA σε ορισμένες οικογένειες στην Κατάνια.28 Τα πιο αντιπροσωπευτικά PV BRCA2 είναι τα c.428dup, c.5851_5854delAGTT και η ιντρονική παραλλαγή c.8487+1G>A, τα οποία έχουν αναφερθεί με περισσότερες λεπτομέρειες 28 σε έναν ασθενή στο Παλέρμο με c.428dup, c.5851_5854delAGTT. Η PV παρατηρήθηκε σε νοικοκυριά στη βορειοδυτική Σικελία, κυρίως στις περιοχές Τράπανι και Παλέρμο, ενώ η PV c.5851_5854delAGTT παρατηρήθηκε σε νοικοκυριά στη βορειοδυτική Σικελία. Η παραλλαγή 8487+1G>A ήταν πιο συχνή σε άτομα από τη Μεσσήνη, το Παλέρμο και την Καλτανισέτα.28 Οι Rebbeck et al. έχει περιγραφεί προηγουμένως η αλλοίωση c.5851_5854delAGTT στην Κολομβία.37 Μια άλλη PV BRCA2, c.631+1G>A, έχει βρεθεί σε ασθενείς με καρκίνο του μαστού και οστεοπόρωση από τη Σικελία (Αγκριτζέντο, Συρακούσες και Ραγκούσα).28 Αξίζει να σημειωθεί ότι παρατηρήσαμε τη συνύπαρξη δύο παραλλαγών BRCA2 (BRCA2 c.631G>A και c.7008-2A>T) στον ίδιο ασθενή, οι οποίες υποθέσαμε ότι ήταν διαχωρισμένες σε cis λειτουργία, όπως έχει αναφερθεί προηγουμένως.34,46 Αυτές οι μεταλλάξεις BRCA2 παρατηρούνται πράγματι συχνά στην ιταλική περιοχή και έχει βρεθεί ότι εισάγουν πρόωρα κωδικόνια τερματισμού, επηρεάζοντας τη συρραφή του αγγελιοφόρου RNA και προκαλώντας την αποτυχία της πρωτεΐνης BRCA2.47,48
Χαρτογραφήσαμε επίσης τα PV BRCA1 και BRCA2 σε πιθανές περιοχές OCCR και BCCR πρωτεϊνικών περιοχών και γονιδίων. Αυτές οι περιοχές περιγράφηκαν από τους Rebbeck et al. ως περιοχές κινδύνου για ανάπτυξη καρκίνου των ωοθηκών και του μαστού, αντίστοιχα.49 Ωστόσο, τα στοιχεία σχετικά με τη συσχέτιση μεταξύ της θέσης των παραλλαγών της βλαστικής γραμμής και του κινδύνου καρκίνου του μαστού ή των ωοθηκών παραμένουν αμφιλεγόμενα.28,50-52 Στον πληθυσμό μας, τα PV BRCA1 εντοπίστηκαν κυρίως στην περιοχή BCCR, ενώ τα PV BRCA2 εντοπίστηκαν κυρίως στην περιοχή OCCR. Ωστόσο, δεν μπορέσαμε να βρούμε καμία συσχέτιση μεταξύ των πιθανών περιοχών OCCR και BCCR και των χαρακτηριστικών του BC. Αυτό μπορεί να οφείλεται στον περιορισμένο αριθμό ασθενών με μεταλλάξεις BRCA1/2. Από την άποψη του πρωτεϊνικού τομέα, τα PV BRCA1 κατανέμονται κατά μήκος ολόκληρης της πρωτεΐνης και οι αλλοιώσεις BRCA2 βρίσκονται κατά προτίμηση στον τομέα επανάληψης BRC.
Τέλος, συσχετίσαμε τα κλινικοπαθολογικά χαρακτηριστικά του BC με το PV BRCA1/2. Λόγω του περιορισμένου αριθμού ασθενών που συμπεριλήφθηκαν, βρήκαμε μόνο μια σημαντική συσχέτιση μεταξύ του Ki-67 και του βαθμού κακοήθειας του όγκου. Αν και η αξιολόγηση και η ερμηνεία του Ki-67 παραμένει κάπως αμφιλεγόμενη, είναι βέβαιο ότι τα υψηλά ποσοστά πολλαπλασιασμού σχετίζονται με αυξημένο κίνδυνο υποτροπής της νόσου και μειωμένη επιβίωση. Μέχρι σήμερα, το όριο για τη διάκριση μεταξύ «υψηλού» και «χαμηλού» Ki-67 είναι 20%. Ωστόσο, αυτό το όριο δεν ισχύει για τον πληθυσμό ασθενών με μετάλλαξη BRCA1/2, ο οποίος έχει μέση τιμή Ki-67 25%. Αυτή η τάση σε υψηλά ποσοστά Ki-67 μπορεί να εξηγηθεί από την επικράτηση στις ομάδες μας αυλικού Β και TNBC, εκ των οποίων υπήρχαν λίγοι όγκοι αυλικού Α. Ωστόσο, ορισμένα στοιχεία φαίνεται να υποδηλώνουν ότι ένα υψηλότερο όριο Ki-67 (25-30%) μπορεί να διαστρωματώσει καλύτερα τους ασθενείς ανάλογα με την πρόγνωσή τους.53,54 Από τα αποτελέσματα της ανάλυσής μας, μια σημαντική συσχέτιση δεν αποτελεί έκπληξη. Εμφανίζεται μεταξύ υψηλών βαθμών κακοήθειας Ki-67 και της παρουσίας BRCA1 PV. Στην πραγματικότητα, οι όγκοι που σχετίζονται με το BRCA1 είναι τυπικοί για το TNBC και εμφανίζουν πιο επιθετικά χαρακτηριστικά.16,17
Συμπερασματικά, η παρούσα μελέτη παρέχει μια αναφορά σχετικά με την μεταλλακτική κατάσταση του BRCA1/2 σε μια ομάδα ασθενών με καρκίνο του μαστού (BC) από την ανατολική Σικελία. Συνολικά, τα ευρήματά μας συμφωνούν με προϋπάρχοντα στοιχεία, τόσο όσον αφορά την επικράτηση μεταλλάξεων όσο και τα κλινικοπαθολογικά χαρακτηριστικά του BC. Απαιτούνται περισσότερες μελέτες σε μεγαλύτερους πληθυσμούς ασθενών με καρκίνο του μαστού με μετάλλαξη BRCA1/2, όπως η χρήση πολυγονιδιωματικής διευρυμένης μεταλλακτική ανάλυσης, για την αξιολόγηση της παρουσίας PV που είναι διακριτά και λιγότερο συχνά από το BRCA1/2. Αυτό θα επιτρέψει την αναγνώριση και την ορθή διαχείριση του αυξανόμενου αριθμού ατόμων που διατρέχουν αυξημένο κίνδυνο καρκίνου λόγω γενετικών μεταλλάξεων.
Επιβεβαιώσαμε ότι οι ασθενείς υπέγραψαν ενημερωμένη συγκατάθεση για την ανώνυμη κοινοποίηση των δειγμάτων όγκου τους για ερευνητικούς σκοπούς. Όλοι οι ασθενείς υπέγραψαν γραπτή ενημερωμένη συγκατάθεση σύμφωνα με τη Διακήρυξη του Ελσίνκι. Σύμφωνα με την πολιτική του AOU Policlinico “G.Rodolico – S.Marco”, η παρούσα μελέτη εξαιρέθηκε από την ηθική αξιολόγηση επειδή η ανάλυση BRCA1/2 πραγματοποιήθηκε σύμφωνα με την κλινική πρακτική και όλοι οι ασθενείς έδωσαν γραπτή ενημερωμένη συγκατάθεση. Οι ασθενείς συναινούν επίσης στη χρήση των δεδομένων τους για ερευνητικούς σκοπούς.
Ευχαριστούμε τον καθηγητή Paolo Vigneri για τη βοήθειά του στη φροντίδα ασθενών με καρκίνο του μαστού, όπως ζητήθηκε από την Επιτροπή Δεοντολογίας.
Η Federica Martorana αναφέρει αμοιβές από το Istituto Gentili, την Eli Lilly, τη Novartis, την Pfizer. Οι άλλοι συγγραφείς δηλώνουν ότι δεν υπάρχει σύγκρουση συμφερόντων σε αυτό το έργο.
1. Sung H, Ferlay J, Siegel RL, et al. Παγκόσμιες Στατιστικές για τον Καρκίνο 2020: Το GLOBOCAN εκτιμά τη συχνότητα εμφάνισης και τη θνησιμότητα 36 καρκίνων σε 185 χώρες σε όλο τον κόσμο. CA Cancer J Clin.2021;71(3):209-249.doi: 10.3322/caac.21660