നിങ്ങളുടെ ബ്രൗസറിൽ നിലവിൽ ജാവാസ്ക്രിപ്റ്റ് പ്രവർത്തനരഹിതമാക്കിയിരിക്കുന്നു. ജാവാസ്ക്രിപ്റ്റ് പ്രവർത്തനരഹിതമാക്കിയിരിക്കുമ്പോൾ ഈ വെബ്സൈറ്റിലെ ചില സവിശേഷതകൾ പ്രവർത്തിക്കില്ല.
നിങ്ങളുടെ നിർദ്ദിഷ്ട വിശദാംശങ്ങളും താൽപ്പര്യമുള്ള നിർദ്ദിഷ്ട മരുന്നും ഉപയോഗിച്ച് രജിസ്റ്റർ ചെയ്യുക, നിങ്ങൾ നൽകുന്ന വിവരങ്ങൾ ഞങ്ങളുടെ വിപുലമായ ഡാറ്റാബേസിലെ ലേഖനങ്ങളുമായി ഞങ്ങൾ പൊരുത്തപ്പെടുത്തുകയും ഒരു PDF പകർപ്പ് നിങ്ങൾക്ക് ഉടൻ ഇമെയിൽ ചെയ്യുകയും ചെയ്യും.
作者 സ്റ്റെല്ല എസ്, വിറ്റേൽ എസ്ആർ, മാർട്ടോറാന എഫ്, മാസിമിനോ എം, പാവോൺ ജി, ലാൻസഫേം കെ, ബിയാൻക എസ്, ബാരോൺ സി, ഗോർഗോൺ സി, ഫിഷെറ എം, മാൻസെല്ല എൽ
സ്റ്റെഫാനിയ സ്റ്റെല്ല, 1,2 സിൽവിയ റീറ്റ വിറ്റലെ, 1,2 ഫെഡറിക്ക മാർട്ടോറാന, 1,2 മിഷേൽ മാസിമിനോ, 1,2 ജിയുലിയാന പാവോൺ, 3 കാറ്റിയ ലാൻസഫേം, 3 സെബാസ്റ്റ്യാനോ ബിയാങ്ക, 4 ചിയാര ബറോൺ, 5 ക്രിസ്റ്റീന ഗോർഗോൺ, ഫിഷെറ 6, 76 Manzella1,21 ക്ലിനിക്കൽ ആൻഡ് എക്സ്പിരിമെൻ്റൽ മെഡിസിൻ വകുപ്പ്, കാറ്റാനിയ യൂണിവേഴ്സിറ്റി, കാറ്റാനിയ, 95123, ഇറ്റലി;2 എക്സ്പിരിമെൻ്റൽ ഓങ്കോളജി ആൻഡ് ഹെമറ്റോളജി സെൻ്റർ, AOU പോളിക്ലിനിക്കോ "G.Rodolico - San Marco", Catania , 95123, ഇറ്റലി; 3 മെഡിക്കൽ ഓങ്കോളജി, AOU പോളിക്ലിനിക്കോ "ജി. റോഡോലിക്കോ - സാൻ മാർക്കോ", കാറ്റാനിയ, 95123, ഇറ്റലി; 4 മെഡിക്കൽ ജനിതകശാസ്ത്രം, ARNAS ഗരിബാൾഡി, കാറ്റാനിയ, 95123, ഇറ്റലി; 5 മെഡിസിൻ ജനിറ്റിക്സ്, എഎസ്പി, സിറാക്കൂസ്, 96100, ഇറ്റലി; 6 ഡിപ്പാർട്ട്മെന്റ് ഓഫ് ബയോമെഡിക്കൽ ആൻഡ് ബയോടെക്നോളജി സയൻസസ്, കാറ്റാനിയ യൂണിവേഴ്സിറ്റി, മെഡിക്കൽ ജനിറ്റിക്സ്, കാറ്റാനിയ, ഇറ്റലി, 95123; 7ഒയാസി റിസർച്ച് ഇൻസ്റ്റിറ്റ്യൂട്ട്-ഐആർസിസിഎസ്, ട്രോയിന, 94018, ഇറ്റലി ആശയവിനിമയങ്ങൾ: സ്റ്റെഫാനിയ സ്റ്റെല്ല, ഫോൺ +39 095 378 1946, ഇമെയിൽ [email protected]; [email protected] ഉദ്ദേശ്യം: BRCA1, BRCA2 എന്നിവയിലെ ജെർംലൈൻ മ്യൂട്ടേഷനുകളും സ്തനാർബുദം (BC), അണ്ഡാശയം (OC) എന്നിവയിലും കാൻസറിനുള്ള ആജീവനാന്ത അപകടസാധ്യതയുമായി ബന്ധപ്പെട്ട മറ്റ് രോഗങ്ങളും കണ്ടെത്തി. വ്യക്തിഗത അപകടസാധ്യത വിലയിരുത്തുന്നതിനും, ആരോഗ്യകരമായ വാഹകരിൽ പ്രതിരോധ രീതികൾ കണ്ടെത്തുന്നതിനും കാൻസർ രോഗികളിൽ ചികിത്സകൾ ക്രമീകരിക്കുന്നതിനും BRCA ജീൻ പരിശോധന പ്രധാനമാണ്. ഭൂമിശാസ്ത്രപരമായ പ്രദേശങ്ങളിൽ BRCA1, BRCA2 വ്യതിയാനങ്ങളുടെ വ്യാപനം വ്യാപകമായി വ്യത്യാസപ്പെട്ടിരിക്കുന്നു, സിസിലിയൻ കുടുംബങ്ങളിലെ BRCA രോഗകാരി വകഭേദങ്ങളെക്കുറിച്ചുള്ള ഡാറ്റ നിലവിലുണ്ടെങ്കിലും, കിഴക്കൻ സിസിലിയിലെ ജനസംഖ്യയെ പ്രത്യേകമായി ലക്ഷ്യം വച്ചുള്ള പഠനങ്ങൾ കുറവാണ്. കിഴക്കൻ സിസിലിയിലെ ഒരു കൂട്ടം BC രോഗികളിൽ BRCA രോഗകാരിയായ ജേംലൈൻ വ്യതിയാനങ്ങളുടെ സംഭവവികാസവും വിതരണവും അന്വേഷിക്കുകയും അടുത്ത തലമുറ സീക്വൻസിംഗ് ഉപയോഗിച്ച് നിർദ്ദിഷ്ട BC സ്വഭാവങ്ങളുമായുള്ള അവരുടെ ബന്ധം വിലയിരുത്തുകയും ചെയ്യുക എന്നതായിരുന്നു ഞങ്ങളുടെ പഠനത്തിന്റെ ലക്ഷ്യം. ട്യൂമർ ഗ്രേഡും വ്യാപന സൂചികയുമായി ബന്ധപ്പെട്ട മാറ്റങ്ങളുടെ സാന്നിധ്യം. ഫലങ്ങൾ: മൊത്തത്തിൽ, 35 രോഗികൾക്ക് (9%) ഒരു BRCA രോഗകാരി വകഭേദം ഉണ്ടായിരുന്നു, BRCA1 ൽ 17 (49%) ഉം BRCA2 ൽ 18 (51%) ഉം. ട്രിപ്പിൾ-നെഗറ്റീവ് BC രോഗികളിൽ BRCA1 മാറ്റങ്ങൾ വ്യാപകമാണ്, അതേസമയം ലുമിനൽ BC യിൽ BRCA2 മ്യൂട്ടേഷനുകൾ കൂടുതൽ സാധാരണമാണ്. രോഗികൾ. വാഹകരല്ലാത്തവരുമായി താരതമ്യപ്പെടുത്തുമ്പോൾ, BRCA1 വകഭേദങ്ങളുള്ള വിഷയങ്ങൾക്ക് ട്യൂമർ ഗ്രേഡും പ്രോലിഫെറേറ്റീവ് സൂചികയും ഗണ്യമായി ഉയർന്നതായിരുന്നു. നിഗമനങ്ങൾ: കിഴക്കൻ സിസിലിയിലെ BC രോഗികളിൽ BRCA മ്യൂട്ടേഷണൽ സ്റ്റാറ്റസിന്റെ ഒരു അവലോകനം ഞങ്ങളുടെ കണ്ടെത്തലുകൾ നൽകുന്നു, പാരമ്പര്യ BC ഉള്ള രോഗികളെ തിരിച്ചറിയുന്നതിൽ NGS വിശകലനത്തിന്റെ പങ്ക് സ്ഥിരീകരിക്കുന്നു. മൊത്തത്തിൽ, മ്യൂട്ടേഷൻ വാഹകരിൽ കാൻസർ ശരിയായ പ്രതിരോധത്തിനും ചികിത്സയ്ക്കുമായി BRCA സ്ക്രീനിംഗിനെ പിന്തുണയ്ക്കുന്ന മുൻ തെളിവുകളുമായി ഈ ഡാറ്റ പൊരുത്തപ്പെടുന്നു.
സ്തനാർബുദം (BC) ലോകമെമ്പാടും ഏറ്റവും സാധാരണമായ മാരകമായ കാൻസറാണ്, സ്ത്രീകളിലെ ഏറ്റവും മാരകമായ കാൻസറും.1 BC രോഗനിർണയവും ക്ലിനിക്കൽ സ്വഭാവവും നിർണ്ണയിക്കുന്ന ജൈവശാസ്ത്രപരമായ സവിശേഷതകൾ കാലക്രമേണ വിപുലമായി പഠിക്കുകയും ഭാഗികമായി വ്യക്തമാക്കുകയും ചെയ്തിട്ടുണ്ട്. വാസ്തവത്തിൽ, BC യെ വ്യത്യസ്ത തന്മാത്രാ ഉപവിഭാഗങ്ങളായി തരംതിരിക്കാൻ നിലവിൽ നിരവധി സറോഗേറ്റ് മാർക്കറുകൾ ഉപയോഗിക്കുന്നു. അവ ഈസ്ട്രജൻ (ER) കൂടാതെ/അല്ലെങ്കിൽ പ്രൊജസ്ട്രോൺ റിസപ്റ്റർ (PgR), ഹ്യൂമൻ എപ്പിഡെർമൽ ഗ്രോത്ത് ഫാക്ടർ റിസപ്റ്റർ 2 (HER2) ആംപ്ലിഫിക്കേഷൻ, പ്രൊലിഫറേഷൻ ഇൻഡക്സ് Ki-67, ട്യൂമർ ഗ്രേഡ് (G) എന്നിവയാണ്.2 ഈ വേരിയബിളുകളുടെ സംയോജനം ഇനിപ്പറയുന്ന BC വിഭാഗങ്ങളെ തിരിച്ചറിഞ്ഞു: 1) ER ഉം/അല്ലെങ്കിൽ PgR എക്സ്പ്രഷനും കാണിക്കുന്ന ലുമിനൽ ട്യൂമറുകൾ BC കളുടെ 75% വും ഉൾക്കൊള്ളുന്നു. ഈ ട്യൂമറുകൾ പിന്നീട് ലുമിനൽ എ ആയി വിഭജിക്കപ്പെട്ടു, കി-67 20% ൽ താഴെയും HER2 നെഗറ്റീവും ആയിരുന്നപ്പോൾ, കി-67 20% ന് തുല്യമോ അതിൽ കൂടുതലോ ആയിരുന്നപ്പോൾ, HER2 ആംപ്ലിഫിക്കേഷന്റെ സാന്നിധ്യത്തിൽ; 2) ER, PgR നെഗറ്റീവ് ആണെങ്കിലും HER2 ആംപ്ലിഫിക്കേഷൻ കാണിക്കുന്ന HER2+ ട്യൂമറുകൾ. എല്ലാ സ്തനാർബുദങ്ങളുടെയും 10% ഈ ഗ്രൂപ്പിൽ ഉൾപ്പെടുന്നു; 3) ER, PgR എക്സ്പ്രഷനും HER2 ആംപ്ലിഫിക്കേഷനും കാണിക്കാത്ത ട്രിപ്പിൾ-നെഗറ്റീവ് സ്തനാർബുദം (TNBC), സ്തനാർബുദങ്ങളിൽ ഏകദേശം 15% വരും.2-4
ഈ ബിസി ഉപവിഭാഗങ്ങളിൽ, ട്യൂമർ ഗ്രേഡും വ്യാപന സൂചികയും ട്യൂമർ ആക്രമണാത്മകതയും രോഗനിർണയവുമായി നേരിട്ടും സ്വതന്ത്രമായും ബന്ധപ്പെട്ടിരിക്കുന്ന ക്രോസ്-സെക്ഷണൽ ബയോമാർക്കറുകളെ പ്രതിനിധീകരിക്കുന്നു.5,6
മുകളിൽ പറഞ്ഞ ജൈവശാസ്ത്രപരമായ സവിശേഷതകൾക്ക് പുറമേ, ബിസിയുടെ വികാസത്തിലേക്ക് നയിക്കുന്ന പാരമ്പര്യ ജനിതക വ്യതിയാനങ്ങളുടെ പങ്ക് കഴിഞ്ഞ കുറച്ച് വർഷങ്ങളായി കൂടുതൽ പ്രാധാന്യമർഹിക്കുന്നു.7 10 ൽ 1 സ്തനാർബുദം പ്രത്യേക ജീനുകളിലെ ജെംലൈൻ മാറ്റങ്ങൾ മൂലമാണ് പാരമ്പര്യമായി ലഭിക്കുന്നത്.8 180,000-ത്തിലധികം സ്ത്രീകളെ ഉൾപ്പെടുത്തി നടത്തിയ രണ്ട് വലിയ എപ്പിഡെമിയോളജിക്കൽ പഠനങ്ങൾ അടുത്തിടെ എട്ട് ജീനുകളുടെ ഒരു കൂട്ടം (അതായത്, ATM, BARD1, BRCA1, BRCA2, CHK2, PALB2, RAD51C, RAD51D) പാരമ്പര്യ ബിസിക്ക് കാരണമായതായി തിരിച്ചറിഞ്ഞു. ഈ ജീനുകളിൽ, BRCA1, BRCA2 (ഇനി മുതൽ BRCA1/2 എന്ന് വിളിക്കുന്നു) എന്നിവ സ്തനാർബുദത്തിന്റെ വികാസവുമായി ഏറ്റവും ശക്തമായ ബന്ധം കാണിച്ചു.9-12 വാസ്തവത്തിൽ, ജെംലൈൻ BRCA1/2 മ്യൂട്ടേഷനുകൾ ബിസിയുടെയും അണ്ഡാശയം, പ്രോസ്റ്റേറ്റ്, പാൻക്രിയാറ്റിക്, കൊളോറെക്ടൽ, മെലനോമ എന്നിവയുൾപ്പെടെയുള്ള മറ്റ് മാരകമായ മുഴകളുടെയും ആയുഷ്കാല അപകടസാധ്യത ഗണ്യമായി വർദ്ധിപ്പിക്കുന്നു. 13 മുതൽ 80 വയസ്സ് വരെ, BRCA1 രോഗകാരിയായ വേരിയന്റ് (PV) ഉള്ള സ്ത്രീകളിൽ BC യുടെ സഞ്ചിത സംഭവങ്ങൾ 72% ഉം BRCA2 PV.14 ഉള്ള സ്ത്രീകൾ
ശ്രദ്ധേയമായി, അടുത്തിടെ പ്രസിദ്ധീകരിച്ച ഒരു പ്രസിദ്ധീകരണം സൂചിപ്പിക്കുന്നത് ബിസി അപകടസാധ്യത പിവിയുടെ തരത്തെ ആശ്രയിച്ചിരിക്കുന്നു എന്നാണ്. വാസ്തവത്തിൽ, രോഗകാരിയായ വെട്ടിച്ചുരുക്കൽ വകഭേദങ്ങളുമായി താരതമ്യപ്പെടുത്തുമ്പോൾ, പ്രത്യേകിച്ച് BRCA1 ജീനിൽ, തിളങ്ങുന്ന മിസെൻസ് വകഭേദങ്ങൾ, പ്രത്യേകിച്ച് പ്രായമായ സ്ത്രീകളിൽ ബിസിയുടെ അപകടസാധ്യത കുറയ്ക്കുന്നതുമായി ബന്ധപ്പെട്ടിരിക്കുന്നു.15
BRCA1 അല്ലെങ്കിൽ BRCA2 PV യുടെ സാന്നിധ്യം വ്യത്യസ്ത ജൈവശാസ്ത്രപരവും ക്ലിനിക്കൽ പാത്തോളജിക്കൽ സവിശേഷതകളുമായി ബന്ധപ്പെട്ടിരിക്കുന്നു.16,17 BRCA1-അനുബന്ധ BC-കൾ ക്ലിനിക്കലി ആക്രമണാത്മകവും, മോശമായി വ്യത്യാസപ്പെട്ടതും, ഉയർന്ന തോതിൽ വ്യാപിക്കുന്നതുമാണ്. ഈ മുഴകൾ സാധാരണയായി ട്രിപ്പിൾ നെഗറ്റീവും, ആദ്യകാല പ്രായത്തിലുള്ളവയുമാണ്. BRCA2-മ്യൂട്ടേഷൻ ലഭിച്ച രോഗികളിൽ ഉണ്ടാകുന്ന മുഴകൾ സാധാരണയായി മിതമായത് മുതൽ നന്നായി വ്യത്യാസപ്പെട്ട ഗ്രേഡുകളും വേരിയബിൾ വ്യാപിക്കുന്ന സൂചികകളും കാണിക്കുന്നു. ഈ മുഴകൾ ല്യൂമെൻ ബിയിൽ കൂടുതലായി കാണപ്പെടുന്നു, സാധാരണയായി പ്രായമായവരിലാണ് ഇത് സംഭവിക്കുന്നത്.16-18 BRCA1, BRCA2 എന്നിവയിലെ മ്യൂട്ടേഷനുകൾ പ്ലാറ്റിനം ലവണങ്ങൾ, പോളി (ADP-റൈബോസ്) പോളിമറേസ് ഇൻഹിബിറ്ററുകൾ (PARPi) പോലുള്ള ടാർഗെറ്റുചെയ്‌ത മരുന്നുകൾ എന്നിവയുൾപ്പെടെയുള്ള നിർദ്ദിഷ്ട ചികിത്സകളോടുള്ള സംവേദനക്ഷമത വർദ്ധിപ്പിക്കുന്നു എന്നത് ശ്രദ്ധേയമാണ്.19,20
കഴിഞ്ഞ കുറച്ച് വർഷങ്ങളായി, ക്ലിനിക്കൽ പ്രാക്ടീസിൽ നെക്സ്റ്റ്-ജനറേഷൻ സീക്വൻസിംഗ് (NGS) നടപ്പിലാക്കിയത്, BRCA1/2.21 ഉൾപ്പെടെയുള്ള കാൻസർ സംവേദനക്ഷമത സിൻഡ്രോമുകൾക്കായി തന്മാത്രാ പരിശോധനയ്ക്ക് വിധേയരാകാൻ BC രോഗികളെ പ്രാപ്തമാക്കിയിട്ടുണ്ട്. അതേസമയം, കുടുംബ ചരിത്രം, ജനസംഖ്യാശാസ്‌ത്രം, ക്ലിനിക്കോപാത്തോളജിക്കൽ സവിശേഷതകൾ എന്നിവയെക്കുറിച്ചുള്ള കൃത്യമായ മാനദണ്ഡങ്ങളെ അടിസ്ഥാനമാക്കിയുള്ള നിർവചനങ്ങൾ BRCA1/2 പരിശോധനയ്ക്ക് യോഗ്യരായ വ്യക്തികളെ നന്നായി തിരിച്ചറിയുന്നു.22,23 ഈ സാഹചര്യത്തിൽ, ഭൂമിശാസ്ത്രപരമായ പ്രദേശങ്ങളിലുടനീളമുള്ള വ്യത്യാസങ്ങൾ എടുത്തുകാണിക്കുന്ന നിർദ്ദിഷ്ട ജനസംഖ്യയിൽ BRCA1/2 സ്‌ക്രീനിംഗിനെക്കുറിച്ച് തെളിവുകൾ ശേഖരിക്കപ്പെടുന്നു.24–27 പടിഞ്ഞാറൻ സിസിലിയിലെ BC കോഹോർട്ടിനെക്കുറിച്ച് റിപ്പോർട്ടുകൾ ഉണ്ടെങ്കിലും, കിഴക്കൻ സിസിലി ജനസംഖ്യയിൽ BRCA1/2 സ്‌ക്രീനിംഗിനെക്കുറിച്ച് കുറച്ച് ഡാറ്റ മാത്രമേ ലഭ്യമാകൂ.28,29
കിഴക്കൻ സിസിലിയിലെ ബിസി രോഗികളിൽ നടത്തിയ ജെർംലൈൻ BRCA1/2 സ്ക്രീനിംഗിന്റെ ഫലങ്ങൾ ഞങ്ങൾ ഇവിടെ വിവരിക്കുന്നു, BRCA1 അല്ലെങ്കിൽ BRCA2 മ്യൂട്ടേഷനുകളുടെ സാന്നിധ്യത്തെ ഈ ട്യൂമറുകളുടെ പ്രധാന ക്ലിനിക്കോപാത്തോളജിക്കൽ സവിശേഷതകളുമായി കൂടുതൽ ബന്ധപ്പെടുത്തുന്നു.
പോളിക്ലിനിക്കോ ആശുപത്രിയിലെ "സെന്റർ ഫോർ എക്സ്പിരിമെന്റൽ ഓങ്കോളജി ആൻഡ് ഹെമറ്റോളജി"യിൽ ഒരു മുൻകാല പഠനം നടത്തി. കാറ്റാനിയയിലെ റൊഡോളിക്കോ - സാൻ മാർക്കോ. 2017 ജനുവരി മുതൽ 2021 മാർച്ച് വരെ, സ്തന, അണ്ഡാശയ, മെലനോമ, പാൻക്രിയാറ്റിക് അല്ലെങ്കിൽ പ്രോസ്റ്റേറ്റ് കാൻസർ എന്നിവയുള്ള ആകെ 455 രോഗികളെ BRCA/2 ജനിതക പരിശോധനയ്ക്കായി ഞങ്ങളുടെ മോളിക്യുലാർ ഡയഗ്നോസ്റ്റിക് ലബോറട്ടറിയിലേക്ക് റഫർ ചെയ്തു. ഹെൽസിങ്കിയുടെ പ്രഖ്യാപനത്തിന് അനുസൃതമായാണ് ഈ പഠനം നടത്തിയത്, കൂടാതെ എല്ലാ പങ്കാളികളും തന്മാത്രാ വിശകലനത്തിന് മുമ്പ് രേഖാമൂലമുള്ള സമ്മതം നൽകി.
ആക്രമണാത്മക ട്യൂമർ ഘടകങ്ങൾ മാത്രം പരിഗണിച്ച്, കോർ ബയോപ്സി അല്ലെങ്കിൽ സർജിക്കൽ സാമ്പിളുകളിൽ BC യുടെ ഹിസ്റ്റോളജിക്കൽ, ബയോളജിക്കൽ സവിശേഷതകൾ (ER, PgR, HER2 സ്റ്റാറ്റസ്, Ki-67, ഗ്രേഡ്) വിലയിരുത്തി. ഈ സ്വഭാവസവിശേഷതകളെ അടിസ്ഥാനമാക്കി, BC കളെ ഇനിപ്പറയുന്ന രീതിയിൽ തരംതിരിച്ചു: ലുമിനൽ A (ER+ കൂടാതെ/അല്ലെങ്കിൽ PgR+, HER2-, Ki-67<20%), ലുമിനൽ B (ER+ കൂടാതെ/അല്ലെങ്കിൽ PgR+, HER2-, Ki-67≥20%), ലുമിനൽ B-HER2+ (ER കൂടാതെ/അല്ലെങ്കിൽ PgR+, HER2+), HER2+ (ER, PgR-, HER2+) അല്ലെങ്കിൽ ട്രിപ്പിൾ നെഗറ്റീവ് (ER, PgR-, HER2-).
BRCA1, BRCA2 മ്യൂട്ടേഷൻ നില വിലയിരുത്തുന്നതിന് മുമ്പ്, ഒരു ഓങ്കോളജിസ്റ്റ്, ഒരു ജനിതകശാസ്ത്രജ്ഞൻ, ഒരു മനഃശാസ്ത്രജ്ഞൻ എന്നിവരടങ്ങുന്ന ഒരു മൾട്ടി ഡിസിപ്ലിനറി ടീം ഓരോ രോഗിക്കും BRCA1, അല്ലെങ്കിൽ BRCA1 എന്നിവയുടെ സാന്നിധ്യം നിർണ്ണയിക്കാൻ ഒരു ട്യൂമർ ജനിതകശാസ്ത്ര കൺസൾട്ടേഷൻ നടത്തി. അല്ലെങ്കിൽ BRCA2 ജീനിൽ PV യുടെ ഉയർന്ന അപകടസാധ്യതയുള്ള വ്യക്തികൾ. ഇറ്റാലിയൻ സൊസൈറ്റി ഓഫ് മെഡിക്കൽ ഓങ്കോളജി (AIOM) മാർഗ്ഗനിർദ്ദേശങ്ങളും പ്രാദേശിക സിസിലിയൻ ശുപാർശകളും അനുസരിച്ചാണ് രോഗിയെ തിരഞ്ഞെടുത്തത്. 30,31 ഈ മാനദണ്ഡങ്ങളിൽ ഇവ ഉൾപ്പെടുന്നു: (i) സംവേദനക്ഷമതയുള്ള ജീനുകളിലെ അറിയപ്പെടുന്ന രോഗകാരി വകഭേദങ്ങളുടെ കുടുംബ ചരിത്രം (ഉദാ. BRCA1, BRCA2, TP53, PTEN); (ii) BC ഉള്ള പുരുഷന്മാർ; (iii) BC യും OC യും ഉള്ളവർ; (iv) BC 36 വയസ്സ്, TNBC <60 വയസ്സ്, അല്ലെങ്കിൽ ബൈലാറ്ററൽ BC <50 വയസ്സ്, കുറഞ്ഞത് ഒരു ഫസ്റ്റ്-ഡിഗ്രി ബന്ധു: (a) BC < 50 വയസ്സ്; (b) ഏതെങ്കിലും പ്രായത്തിലുള്ള നോൺ-മ്യൂസിനസ്, നോൺ-ബോർഡർലൈൻ OC; (c) ബൈലാറ്ററൽ BC; (d) പുരുഷ ബിസി; (e) പാൻക്രിയാറ്റിക് കാൻസർ; (f) പ്രോസ്റ്റേറ്റ് കാൻസർ; (vi) 50 വർഷത്തിലധികം പഴക്കമുള്ള ബിസിയുടെയോ അതിൽ കൂടുതലോ വ്യക്തിഗത ചരിത്രവും പരസ്പരം ഫസ്റ്റ്-ഡിഗ്രി ബന്ധുക്കളായ ബന്ധുക്കൾക്ക് (അവർ ഫസ്റ്റ്-ഡിഗ്രി ബന്ധുക്കളായ ബന്ധുക്കൾ ഉൾപ്പെടെ) ബിസി, ഒസി, അല്ലെങ്കിൽ പാൻക്രിയാറ്റിക് കാൻസറിന്റെ കുടുംബ ചരിത്രവും; (vii) ഒസിയുടെയും കുറഞ്ഞത് ഒരു ഫസ്റ്റ്-ഡിഗ്രി ബന്ധുവിന്റെയും വ്യക്തിഗത ചരിത്രം: (a) ബിസി <50 വയസ്സ്; (b) NOC; (c) ദ്വിമുഖ ബിസി; (d) പുരുഷ ബിസി; (vii) ഉയർന്ന ഗ്രേഡ് സീറസ് OC ഉള്ള സ്ത്രീ.
ഓരോ രോഗിയിൽ നിന്നും 20 മില്ലി പെരിഫറൽ രക്ത സാമ്പിൾ എടുത്ത് EDTA ട്യൂബുകളിലേക്ക് (BD ബയോസയൻസസ്) ശേഖരിച്ചു. നിർമ്മാതാവിന്റെ നിർദ്ദേശങ്ങൾക്കനുസൃതമായി QIA സിംഫണി DSP DNA മിഡി കിറ്റ് ഐസൊലേഷൻ കിറ്റ് (QIAGEN, ഹിൽഡൻ, ഇറ്റലി) ഉപയോഗിച്ച് 0.7 മില്ലി മുഴുവൻ രക്ത സാമ്പിളുകളിൽ നിന്ന് ജീനോമിക് DNA വേർതിരിച്ചെടുക്കുകയും ഒരു Qubit® 3.0 ഫ്ലൂറോമീറ്ററിലൂടെ (തെർമോ ഫിഷർ സയന്റിഫിക്, വാൾത്താം, MA, USA) കടത്തിവിടുകയും ചെയ്തു. അളവ് നിർണ്ണയിക്കൽ നടത്തുക. നിർമ്മാതാവിന്റെ നിർദ്ദേശങ്ങൾക്കനുസൃതമായി ഓട്ടോമേറ്റഡ് ലൈബ്രറി തയ്യാറെടുപ്പിനായി അയോൺ ആംപ്ലിസെക്™ ഷെഫ് റീജന്റ്സ് DL8 കിറ്റിലേക്ക് ലോഡ് ചെയ്യാൻ തയ്യാറായ ഓങ്കോമൈൻ™ BRCA റിസർച്ച് അസ്സേ ഷെഫാണ് ലക്ഷ്യ സമ്പുഷ്ടീകരണവും ലൈബ്രറി തയ്യാറെടുപ്പും നടത്തുന്നത്. എല്ലാ BRCA1 (NM_007300.3), BRCA2 (NM_000059.3) ജീനുകളും പഠിക്കാൻ ഉപയോഗിക്കാവുന്ന രണ്ട് മൾട്ടിപ്ലക്സ് PCR പ്രൈമർ പൂളുകൾ കിറ്റിൽ അടങ്ങിയിരിക്കുന്നു. ചുരുക്കത്തിൽ, ലൈബ്രറി തയ്യാറാക്കലിനായി ബാർകോഡ് ചെയ്ത പ്ലേറ്റുകളിൽ ഓരോ നേർപ്പിച്ച സാമ്പിൾ DNA (10 ng) യുടെയും 15 µL ചേർത്തു, കൂടാതെ എല്ലാ റിയാക്ടറുകളും ഉപഭോഗവസ്തുക്കളും അയോൺ ഷെഫ്™ ഉപകരണത്തിൽ ലോഡ് ചെയ്തു. തുടർന്ന് അയോൺ ഷെഫ്™ ഉപകരണത്തിൽ ഓട്ടോമേറ്റഡ് ലൈബ്രറി തയ്യാറാക്കലും ബാർകോഡ് ചെയ്ത സാമ്പിൾ ലൈബ്രറി പൂളിംഗും നടത്തി. തുടർന്ന് നിർമ്മാതാവിന്റെ നിർദ്ദേശങ്ങൾക്കനുസൃതമായി ഒരു Qubit® 3.0 ഫ്ലൂറോമീറ്റർ (തെർമോ ഫിഷർ സയന്റിഫിക്, വാൾത്താം, MA, USA) തയ്യാറാക്കിയ ലൈബ്രറികളുടെ എണ്ണം വിലയിരുത്തി. ഒടുവിൽ, അയോൺ ഷെഫ്™ ലൈബ്രറി സാമ്പിളിൽ തുല്യ അനുപാതത്തിൽ ലൈബ്രറികൾ സംയോജിപ്പിക്കുന്നു. ട്യൂബുകൾ (ബാർകോഡ് ചെയ്ത ട്യൂബുകൾ) ഉപയോഗിച്ച് അയോൺ ഷെഫ്™ ഉപകരണത്തിലേക്ക് ലോഡ് ചെയ്തു. അയോൺ 510 ചിപ്പ് (തെർമോ ഫിഷർ സയന്റിഫിക്) ഉപയോഗിച്ച് അയോൺ ടോറന്റ് എസ് 5 (തെർമോ ഫിഷർ സയന്റിഫിക്) ഉപകരണം (തെർമോ ഫിഷർ സയന്റിഫിക്) ഉപയോഗിച്ച് സീക്വൻസിങ് നടത്തി. ആംപ്ലിക്കോൺ സ്യൂട്ട് (സ്മാർട്ട്സെക് എസ്ആർഎൽ) ഉം അയോൺ റിപ്പോർട്ടർ സോഫ്റ്റ്‌വെയറും ചേർന്നാണ് ഡാറ്റ വിശകലനം നടത്തിയത്.
എല്ലാ വേരിയന്റ് നാമകരണങ്ങളും ഓൺലൈനിൽ ലഭ്യമായ ഹ്യൂമൻ ജീനോം വേരിയേഷൻ കൺസോർഷ്യത്തിന്റെ നിലവിലെ മാർഗ്ഗനിർദ്ദേശങ്ങൾ പാലിച്ചു (HGVS, http://www.hgvs.org/mutnomen). ഇന്റർനാഷണൽ കൺസോർഷ്യം ENIGMA (എവിഡൻസ്-ബേസ്ഡ് നെറ്റ്‌വർക്ക് ഫോർ ഇന്റർപ്രെറ്റിംഗ് ജെർംലൈൻ മ്യൂട്ടന്റ് അല്ലീലുകൾ, https://enigmaconsortium.org/) യുടെ വർഗ്ഗീകരണം ഉപയോഗിച്ചും ARUP, BRCAEXCHANGE, ClinVar, IARC_LOVD, UMD തുടങ്ങിയ വ്യത്യസ്ത ഡാറ്റാബേസുകൾ പരിശോധിച്ചും BRCA1/2 വേരിയന്റുകളുടെ ക്ലിനിക്കൽ പ്രാധാന്യം നിർവചിച്ചു. വർഗ്ഗീകരണത്തിൽ അഞ്ച് വ്യത്യസ്ത അപകടസാധ്യത വിഭാഗങ്ങൾ ഉൾപ്പെടുന്നു: ശൂന്യമായ (വിഭാഗം I), സാധ്യതയുള്ള ശൂന്യമായ (വിഭാഗം II), അനിശ്ചിത പ്രാധാന്യത്തിന്റെ വകഭേദം (VUS, വിഭാഗം III), സാധ്യതയുള്ള രോഗകാരി (വിഭാഗം IV), രോഗകാരി (വിഭാഗം V). 30 ഡാറ്റാബേസുകളിലേക്ക് ആക്‌സസ് ഉള്ള ഒരു വിവരദായക ഉപകരണമായ പ്രോട്ടീൻ ഘടനയിലും പ്രവർത്തനത്തിലും മ്യൂട്ടേഷനുകളുടെ സ്വാധീനവും VarSome വിശകലനം ചെയ്തു.32
ഓരോ VUS-നും സാധ്യതയുള്ള ക്ലിനിക്കൽ പ്രാധാന്യം നൽകുന്നതിന്, ഇനിപ്പറയുന്ന കമ്പ്യൂട്ടേഷണൽ പ്രോട്ടീൻ പ്രവചന അൽഗോരിതങ്ങൾ ഉപയോഗിച്ചു: MUTATION TASTER, 33 PROVEAN-SIFT (http://provean.jcvi.org/index.php), POLYPHEN-2 (http:// /genetics.bwh.harvard.edu/pph2/) and Align-GVGD (http://agvgd.hci.utah.edu/agvgd_input.php). ക്ലാസ് 1 ഉം 2 ഉം ആയി തരംതിരിച്ച വേരിയന്റുകളെ വൈൽഡ് ടൈപ്പായി കണക്കാക്കി.
സാംഗർ സീക്വൻസിംഗ് ഓരോ രോഗകാരി വകഭേദത്തിന്റെയും സാന്നിധ്യം സ്ഥിരീകരിച്ചു. ചുരുക്കത്തിൽ, BRCA1, BRCA2 ജീൻ റഫറൻസ് സീക്വൻസുകൾ (യഥാക്രമം NG_005905.2, NM_007294.3, NG_012772.3, NM_000059.3) ഉപയോഗിച്ച് കണ്ടെത്തിയ ഓരോ വകഭേദത്തിനും ഒരു ജോടി പ്രത്യേക പ്രൈമറുകൾ രൂപകൽപ്പന ചെയ്‌തു. അതിനാൽ, സാംഗർ സീക്വൻസിംഗിന് ശേഷം ടാർഗെറ്റുചെയ്‌ത PCR നടത്തി.
BRCA1/2 ജീനിന് നെഗറ്റീവ് ഫലം ലഭിച്ച രോഗികളെ, നിർമ്മാതാവിന്റെ നിർദ്ദേശങ്ങൾ അനുസരിച്ച്, മൾട്ടിപ്ലക്സ് ലിഗേഷൻ-ഡിപൻഡന്റ് പ്രോബ് ആംപ്ലിഫിക്കേഷൻ (MLPA) ഉപയോഗിച്ച് പരിശോധിച്ചു, വലിയ ജീനോമിക് പുനഃക്രമീകരണങ്ങളുടെ (LGR) സാന്നിധ്യം വിലയിരുത്താൻ. ചുരുക്കത്തിൽ, DNA സാമ്പിളുകൾ ഡീനേച്ചർ ചെയ്യുകയും 60 BRCA1, BRCA2 ജീൻ-നിർദ്ദിഷ്ട പ്രോബുകൾ വരെ ഉപയോഗിക്കുകയും ചെയ്യുന്നു, ഓരോന്നിനും ഏകദേശം 60 ന്യൂക്ലിയോടൈഡുകൾ നീളമുള്ള ഒരു പ്രത്യേക DNA ശ്രേണി കണ്ടെത്തുന്നു. PCR ആംപ്ലികോണുകളുടെ ഒരു അദ്വിതീയ സെറ്റ് അടങ്ങിയ പ്രോബ് ആംപ്ലിഫിക്കേഷൻ ഉൽപ്പന്നങ്ങൾ പിന്നീട് കാപ്പിലറി ഇലക്ട്രോഫോറെസിസ് ഉപയോഗിച്ചും ഉചിതമായ ബാച്ച്-നിർദ്ദിഷ്ട കോഫാലൈസർ പട്ടികകളുമായി (www.mrcholland.com) സംയോജിപ്പിച്ച് Cofalyser.Net സോഫ്റ്റ്‌വെയർ ഉപയോഗിച്ചും വിശകലനം ചെയ്തു.
തിരഞ്ഞെടുത്ത ക്ലിനിക്കോപാത്തോളജിക്കൽ വേരിയബിളുകൾ (ഹിസ്റ്റോളജിക്കൽ ഗ്രേഡും Ki-67% വ്യാപന സൂചികയും) BRCA1/2 PV യുടെ സാന്നിധ്യവുമായി ബന്ധപ്പെട്ടിരിക്കുന്നു, P- മൂല്യം <0.05 പ്രാധാന്യമർഹിക്കുന്നതായി ഫിഷറിന്റെ കൃത്യമായ പരിശോധന ഉപയോഗിച്ച് പ്രിസം സോഫ്റ്റ്‌വെയർ v. 8.4 ഉപയോഗിച്ച് ഇത് കണക്കാക്കി.
2017 ജനുവരി മുതൽ 2021 മാർച്ച് വരെ, 455 രോഗികളെ ജെർംലൈൻ BRCA1/2 മ്യൂട്ടേഷനുകൾക്കായി പരിശോധിച്ചു. പോളിക്ലിനിക്കോ ഹോസ്പിറ്റലിന്റെ സെന്റർ ഫോർ എക്സ്പിരിമെന്റൽ ഓങ്കോളജി ആൻഡ് ഹെമറ്റോളജിയിൽ മ്യൂട്ടേഷൻ പരിശോധന നടത്തി. സിസിലിയൻ മാർഗ്ഗനിർദ്ദേശം (http://www.gurs.regione.sicilia.it/Indicep1.htm, N. 02-Venerdì 10 Gennaio 2020) അനുസരിച്ച്, കാറ്റാനിയയിലെ റോഡോളിക്കോ - സാൻ മാർക്കോയിൽ മൊത്തത്തിൽ 389 രോഗികൾ ഉണ്ടായിരുന്നു. സ്തനാർബുദം, 37 അണ്ഡാശയ അർബുദം, 16 പാൻക്രിയാറ്റിക് കാൻസർ, 8 പ്രോസ്റ്റേറ്റ് കാൻസർ, 5 മെലനോമ എന്നിവ ഉണ്ടായിരുന്നു. കാൻസർ തരവും വിശകലന ഫലങ്ങളും അനുസരിച്ച് രോഗികളുടെ വിതരണം ചിത്രം 1 ൽ കാണിച്ചിരിക്കുന്നു.
ചിത്രം 1 പഠനത്തിന്റെ ഒരു അവലോകനം കാണിക്കുന്ന ഒരു ഫ്ലോ ചാർട്ട് കാണിക്കുന്നു. സ്തന, മെലനോമ, പാൻക്രിയാറ്റിക്, പ്രോസ്റ്റേറ്റ് അല്ലെങ്കിൽ അണ്ഡാശയ മുഴകൾ ഉള്ള രോഗികളെ BRCA1, BRCA2 ജീനുകളിലെ മ്യൂട്ടേഷനുകൾക്കായി പരിശോധിച്ചു.
ചുരുക്കെഴുത്തുകൾ: പിവികൾ, രോഗകാരിയായ വകഭേദം; അനിശ്ചിത പ്രാധാന്യമുള്ള വകഭേദം VUS; WT, വൈൽഡ്-ടൈപ്പ് BRCA1/2 ശ്രേണി.
സ്തനാർബുദ രോഗികളെ കേന്ദ്രീകരിച്ചാണ് ഞങ്ങൾ പഠനങ്ങൾ നടത്തിയത്. രോഗികളുടെ ശരാശരി പ്രായം 49 വയസ്സ് (23-89 പരിധി) ആയിരുന്നു, പ്രധാനമായും സ്ത്രീകളായിരുന്നു (n=376, അല്ലെങ്കിൽ 97%).
ഈ വിഷയങ്ങളിൽ, 64 (17%) പേർക്ക് BRCA1/2 മ്യൂട്ടേഷനുകൾ ഉണ്ടായിരുന്നു, എല്ലാവരും സ്ത്രീകളായിരുന്നു. മുപ്പത്തിയഞ്ച് (9%) പേർക്ക് PV ഉം 29 (7.5%) പേർക്ക് VUS ഉം ഉണ്ടായിരുന്നു. 35 രോഗകാരി വകഭേദങ്ങളിൽ പതിനേഴു (48.6%) BRCA1 ലും 18 (51.4%) BRCA2 ലും സംഭവിച്ചു, അതേസമയം BRCA1 ൽ 5 VUS (17.2%) ഉം BRCA2 ൽ 24 (82.8%) ഉം സംഭവിച്ചു (ചിത്രങ്ങൾ 1 ഉം 2 ഉം). MLPA വിശകലനത്തിൽ LGR ഉണ്ടായിരുന്നില്ല.
ചിത്രം 2. 389 സ്തനാർബുദ രോഗികളിൽ BRCA1, BRCA2 മ്യൂട്ടേഷനുകളുടെ വിശകലനം.(A) 389 സ്തനാർബുദ രോഗികളിൽ രോഗകാരി വകഭേദങ്ങൾ (PV) (ചുവപ്പ്), അനിശ്ചിത പ്രാധാന്യമുള്ള വകഭേദങ്ങൾ (VUS) (ഓറഞ്ച്), WT (നീല) എന്നിവയുടെ വിതരണം; (B) 389 സ്തനാർബുദ രോഗികൾ മുപ്പത്തിയഞ്ച് (9%) പേർക്ക് BRCA1/2 രോഗകാരി വകഭേദങ്ങൾ (PV-കൾ) ഉണ്ടായിരുന്നു. അവയിൽ, 17 (48.6%) പേർ BRCA1 PV വാഹകരായിരുന്നു (കടും ചുവപ്പ്) 18 (51.4%) പേർ BRCA2 വാഹകരായിരുന്നു (ഇളം ചുവപ്പ്); (C) 389 വിഷയങ്ങളിൽ 29 (7.5%) പേർ VUS വഹിച്ചു, 5 (17.2%) BRCA1 ജീനുകൾ (കടും ഓറഞ്ച്) 24 (82.8%) BRCA2 ജീനുകൾ (ഇളം ഓറഞ്ച്).
ചുരുക്കെഴുത്തുകൾ: പിവികൾ, രോഗകാരിയായ വകഭേദം; അനിശ്ചിത പ്രാധാന്യമുള്ള വകഭേദം VUS; WT, വൈൽഡ്-ടൈപ്പ് BRCA1/2 ശ്രേണി.
അടുത്തതായി ഞങ്ങൾ BRCA1/2 PV ഉള്ള രോഗികളിൽ BC തന്മാത്രാ ഉപവിഭാഗങ്ങളുടെ വ്യാപനം പരിശോധിച്ചു. വിതരണത്തിൽ 2 (5.7%) ലുമിനൽ A, 15 (42.9%) ലുമിനൽ B, 3 (8.6%) ലുമിനൽ B-HER2+, 2 (5.7%) HER2+, 13 (37.1%) TNBC രോഗികൾ എന്നിവ ഉൾപ്പെടുന്നു. BRCA1-പോസിറ്റീവ് രോഗികളിൽ, 5 (29.4%) പേർക്ക് ലുമിനൽ B BC ഉണ്ടായിരുന്നു, 2 (11.8%) പേർക്ക് HER2+ രോഗവും 10 (58.8%) പേർക്ക് TNBC യും ഉണ്ടായിരുന്നു. BRCA1 മ്യൂട്ടേഷനുകൾ ഇല്ലാത്ത മുഴകൾ ലുമിനൽ A അല്ലെങ്കിൽ ലുമിനൽ B-HER2+ ആയിരുന്നു (ചിത്രം 3). BRCA2-പോസിറ്റീവ് ഉപഗ്രൂപ്പിൽ, 10 (55.6%) മുഴകൾ ലുമിനൽ B ആയിരുന്നു, 3 (16.7%) ലുമിനൽ B-HER2+, 3 (16.7%) TNBC, 2 (11.1%) എന്നിവയായിരുന്നു. ലുമിനൽ എ (ചിത്രം 3). ഈ ഗ്രൂപ്പിൽ HER2+ ട്യൂമറുകൾ ഉണ്ടായിരുന്നില്ല. അതിനാൽ, TNBC രോഗികളിൽ BRCA1 മ്യൂട്ടേഷനുകൾ വ്യാപകമാണ്, അതേസമയം ലുമെൻ B വ്യക്തികളിൽ BRCA2 മാറ്റങ്ങൾ പ്രബലമാണ്.
ചിത്രം 3 BRCA1, BRCA2 എന്നിവയിലെ രോഗകാരി വകഭേദങ്ങളുള്ള രോഗികളിൽ സ്തനാർബുദ ഉപവിഭാഗങ്ങളുടെ വ്യാപനം. സ്തനാർബുദ രോഗികളുടെ തന്മാത്രാ ഉപവിഭാഗങ്ങൾക്കിടയിൽ BRCA1- (കടും ചുവപ്പ്) ഉം BRCA2- (ഇളം ചുവപ്പ്) ഉം PV-കളുടെ വിതരണം കാണിക്കുന്ന ഹിസ്റ്റോഗ്രാമുകൾ. ഓരോ ബോക്സിലും റിപ്പോർട്ട് ചെയ്തിരിക്കുന്ന സംഖ്യകൾ ഓരോ സ്തനാർബുദ ഉപവിഭാഗത്തിനും BRCA1, BRCA2 PV ഉള്ള രോഗികളുടെ ശതമാനത്തെ പ്രതിനിധീകരിക്കുന്നു.
ചുരുക്കെഴുത്തുകൾ: പിവികൾ, രോഗകാരി വകഭേദം; HER2+, ഹ്യൂമൻ എപ്പിഡെർമൽ ഗ്രോത്ത് ഫാക്ടർ റിസപ്റ്റർ 2 പോസിറ്റീവ്; TNBC, ട്രിപ്പിൾ-നെഗറ്റീവ് സ്തനാർബുദം.
തുടർന്ന്, BRCA1, BRCA2 PV-കളുടെ തരവും ജീൻ ലോക്കലൈസേഷനും ഞങ്ങൾ വിലയിരുത്തി. BRCA1 PV-യിൽ, 7 സിംഗിൾ ന്യൂക്ലിയോടൈഡ് വകഭേദങ്ങൾ (SNV-കൾ), 6 ഇല്ലാതാക്കലുകൾ, 3 ഡ്യൂപ്ലിക്കേഷനുകൾ, 1 ഇൻസേർഷൻ എന്നിവ ഞങ്ങൾ നിരീക്ഷിച്ചു. ഒരു മ്യൂട്ടേഷൻ (c.5522delG) മാത്രമാണ് പുതിയ കണ്ടെത്തലിനെ പ്രതിനിധീകരിക്കുന്നത്. രണ്ട് വിഷയങ്ങളിലും കണ്ടെത്തിയ ഏറ്റവും സാധാരണമായ BRCA1 PV c.5035_5039delCTAAT ആയിരുന്നു. ഈ മാറ്റത്തിൽ BRCA1 എക്സോൺ 15-ൽ അഞ്ച് ന്യൂക്ലിയോടൈഡുകൾ (CTAAT) ഇല്ലാതാക്കുന്നത് ഉൾപ്പെടുന്നു, ഇത് കോഡൺ 1679-ൽ ടൈറോസിൻ ഉപയോഗിച്ച് അമിനോ ആസിഡ് ല്യൂസിൻ മാറ്റിസ്ഥാപിക്കുന്നതിലേക്ക് നയിക്കുന്നു, കൂടാതെ പ്രവചിക്കപ്പെട്ട ഒരു ബദൽ സ്റ്റോപ്പ് കോഡണുള്ള ഒരു വിവർത്തന ഫ്രെയിംഷിഫ്റ്റ് കാരണം അകാല പ്രോട്ടീൻ വെട്ടിച്ചുരുക്കൽ സംഭവിക്കുന്നു. മറ്റ് എല്ലാ മാറ്റങ്ങളും ഒരു കേസിൽ മാത്രമേ കണ്ടെത്താനാകൂ. ശ്രദ്ധേയമായി, റിപ്പോർട്ട് ചെയ്യപ്പെട്ട PV-കളിൽ ഒന്ന് സ്പ്ലൈസ് സൈറ്റ് കൺസെൻസസ് മേഖലയിൽ (c.4357+1G>T) സ്ഥിതിചെയ്യുന്നു (പട്ടിക 1).
BRCA2 PV സംബന്ധിച്ച്, 6 ഇല്ലാതാക്കലുകളും 6 SNV-കളും 2 തനിപ്പകർപ്പുകളും ഞങ്ങൾ നിരീക്ഷിച്ചു. കണ്ടെത്തിയ മാറ്റങ്ങളൊന്നും പുതുമയുള്ളതല്ല. ഞങ്ങളുടെ ജനസംഖ്യയിൽ ആവർത്തിച്ച മൂന്ന് മ്യൂട്ടേഷനുകൾ ഉണ്ടായി, c.428dup, c.8487+1G>A എന്നിവ 3 വിഷയങ്ങളിൽ നിരീക്ഷിക്കപ്പെട്ടു, തുടർന്ന് c.5851_5854delAGTT രണ്ട് കേസുകളിൽ വീണ്ടെടുത്തു. c.428dup മാറ്റത്തിൽ BRCA2 ന്റെ എക്സോൺ 5 ൽ C യുടെ ആവർത്തനം ഉൾപ്പെടുന്നു, ഇത് വെട്ടിച്ചുരുക്കിയതും പ്രവർത്തനരഹിതവുമായ ഒരു പ്രോട്ടീനെ എൻകോഡ് ചെയ്യുമെന്ന് പ്രവചിക്കപ്പെടുന്നു. c.8487+1G>BRCA2 ഇൻട്രോൺ 19 (± 1,2) ന്റെ ഇൻട്രോണിക് മേഖലയിൽ ഒരു മ്യൂട്ടേഷൻ സംഭവിക്കുന്നു, ഇത് സ്പ്ലൈസിംഗ് കൺസെൻസസ് സീക്വൻസിനെ ബാധിക്കുന്നു, അതിന്റെ ഫലമായി മാറ്റം വരുത്തിയ സ്പ്ലൈസിംഗ് അസാധാരണമോ അഭാവമോ ആയ പ്രോട്ടീൻ ഉണ്ടാകുന്നു. c.5851_5854delAGTT രോഗകാരിയായ വകഭേദം ന്യൂക്ലിയോടൈഡ് സ്ഥാനങ്ങളിൽ നിന്ന് 5851 മുതൽ 5854 വരെയുള്ള 4-ന്യൂക്ലിയോടൈഡ് ഇല്ലാതാക്കൽ മൂലമാണ്. BRCA2 ജീനിന്റെ ഫലവും പ്രവചിക്കപ്പെട്ട ഒരു ബദൽ സ്റ്റോപ്പ് കോഡോൺ (p.S1951WfsTer) ഉള്ള ഒരു ട്രാൻസ്ലേഷണൽ ഫ്രെയിംഷിഫ്റ്റും ഒരേ രോഗിയിൽ കണ്ടെത്തി. മുമ്പ് റിപ്പോർട്ട് ചെയ്തതുപോലെ, c.631G> A, c.7008-2A> T എന്നീ രണ്ട് മാറ്റങ്ങളും കണ്ടെത്തി.34 ആദ്യത്തെ മ്യൂട്ടേഷനിൽ BRCA2 എക്സോൺ 7 ലെ അഡിനോസിൻ (A) നെ ന്യൂക്ലിയോടൈഡ് അടങ്ങിയ ഗ്വാനിൻ (G) ഉപയോഗിച്ച് മാറ്റിസ്ഥാപിക്കുന്നത് ഉൾപ്പെടുന്നു, ഇത് കോഡോൺ 211 ൽ വാലൈൻ ഐസോലൂസിനായി മാറുന്നതിന് കാരണമാകുന്നു, ഐസോലൂസിൻ അമിനോ ആസിഡ് വളരെ സമാനമായ ഗുണങ്ങളുള്ള ഒരു അമിനോ ആസിഡാണ്. ഈ മാറ്റം സാധാരണ mRNA സ്പ്ലൈസിംഗിനെ ബാധിക്കുന്നു. രണ്ടാമത്തെ വകഭേദം ഒരു ഇൻട്രോണിക് മേഖലയിലാണ് സ്ഥിതി ചെയ്യുന്നത്, കൂടാതെ BRCA2 എൻകോഡ് ചെയ്യുന്ന ജീനിന്റെ എക്സോൺ 13 ന് മുമ്പ് ഇരട്ട A മുതൽ തൈമിൻ (T) വരെ പകരമാകുന്നതിന് കാരണമാകുന്നു. c.7008-2A> T മാറ്റം വ്യത്യസ്ത നീളമുള്ള ഒന്നിലധികം ട്രാൻസ്ക്രിപ്റ്റുകൾ സൃഷ്ടിച്ചേക്കാം. കൂടാതെ, BRCA2 PV-കളുടെ ഗ്രൂപ്പിൽ, 18 മാറ്റങ്ങളിൽ 4 എണ്ണം (22.2%) ആന്തരിക.
തുടർന്ന് ഞങ്ങൾ ഫങ്ഷണൽ ഡൊമെയ്‌നുകളിലും പ്രോട്ടീൻ-ബൈൻഡിംഗ് മേഖലകളിലും BRCA1/2 മാരകമായ മ്യൂട്ടേഷനുകൾ മാപ്പ് ചെയ്തു (ചിത്രം 4). BRCA1 ജീനിൽ, 50% PV-കൾ സ്തനാർബുദ ക്ലസ്റ്റർ മേഖലയിലാണ് (BCCR), അതേസമയം 22% മ്യൂട്ടേഷനുകൾ അണ്ഡാശയ കാൻസർ ക്ലസ്റ്റർ മേഖലയിലാണ് (OCCR) സ്ഥിതി ചെയ്യുന്നത് (ചിത്രം 4A). BRCA2 PV-യിൽ, 35.7% വകഭേദങ്ങൾ BCCR മേഖലയിലും 42.8% മ്യൂട്ടേഷനുകൾ OCCR-ലും സ്ഥിതിചെയ്യുന്നു (ചിത്രം 4B). അടുത്തതായി, BRCA1, BRCA2 പ്രോട്ടീൻ ഡൊമെയ്‌നുകൾക്കുള്ളിലെ PV-യുടെ സ്ഥാനം ഞങ്ങൾ വിലയിരുത്തി. BRCA1 പ്രോട്ടീനിനായി, ലൂപ്പിലും കോയിൽഡ് കോയിൽ ഡൊമെയ്‌നുകളിലും മൂന്ന് PV-കളും BRCT ഡൊമെയ്‌നിലും രണ്ട് മ്യൂട്ടേഷനുകളും ഞങ്ങൾ കണ്ടെത്തി (ചിത്രം 4A). BRCA2 പ്രോട്ടീനിനായി, BRC റിപ്പീറ്റ് ഡൊമെയ്‌നിലേക്ക് 4 PV-കൾ മാപ്പ് ചെയ്തു, അതേസമയം ഒളിഗോ/ഒലിഗോസാക്കറൈഡ്-ബൈൻഡിംഗ് (OB), ടവർ (T) ഡൊമെയ്‌നുകളിൽ 3 ഇൻട്രോണിക്, 3 എക്സോണിക് മാറ്റങ്ങൾ കണ്ടെത്തി (ചിത്രം 4 ബി).
ചിത്രം 4 BRCA1, BRCA2 പ്രോട്ടീനുകളുടെ സ്കീമാറ്റിക് പ്രാതിനിധ്യവും രോഗകാരി വകഭേദങ്ങളുടെ പ്രാദേശികവൽക്കരണവും. സ്തനാർബുദ രോഗികളിൽ BRCA1 (A), BRCA2 (B) രോഗകാരി വകഭേദങ്ങളുടെ വിതരണം ഈ ചിത്രം കാണിക്കുന്നു. എക്സോണിക് മ്യൂട്ടേഷനുകൾ നീല നിറത്തിലും ഇൻട്രോണിക് വകഭേദങ്ങൾ ഓറഞ്ചിലും കാണിച്ചിരിക്കുന്നു. ബാർ ഉയരം കേസുകളുടെ എണ്ണത്തെ പ്രതിനിധീകരിക്കുന്നു. BRCA1, BRCA2 പ്രോട്ടീനുകളും അവയുടെ പ്രവർത്തനപരമായ ഡൊമെയ്‌നുകളും റിപ്പോർട്ട് ചെയ്‌തിരിക്കുന്നു.(A) BRCA1 പ്രോട്ടീനിൽ ഒരു ലൂപ്പ് ഡൊമെയ്‌നും (RING) ഒരു ന്യൂക്ലിയർ ലോക്കലൈസേഷൻ സീക്വൻസും (NLS), ഒരു കോയിൽഡ്-കോയിൽ ഡൊമെയ്‌നും, ഒരു SQ/TQ ക്ലസ്റ്റർ ഡൊമെയ്‌നും (SCD), ഒരു BRCA1 C-ടെർമിനൽ ഡൊമെയ്‌നും (BRCT) അടങ്ങിയിരിക്കുന്നു.(B) BRCA2 പ്രോട്ടീനിൽ എട്ട് BRC ആവർത്തനങ്ങൾ, ഒരു ഹെലിക്കൽ ഡൊമെയ്‌നുള്ള ഒരു DNA-ബൈൻഡിംഗ് ഡൊമെയ്‌ൻ (ഹെലിക്കൽ), മൂന്ന് ഒലിഗോ ന്യൂക്ലിയോടൈഡ്/ഒലിഗോസാക്കറൈഡ്-ബൈൻഡിംഗ് (OB) ഫോൾഡുകൾ, ഒരു ടവർ ഡൊമെയ്‌ൻ (T), C വശത്ത് ഒരു NLS എന്നിവ അടങ്ങിയിരിക്കുന്നു. സ്തനാർബുദ ക്ലസ്റ്റർ മേഖല (BCCR), അണ്ഡാശയ കാൻസർ ക്ലസ്റ്റർ മേഖല (OCCR) എന്നിങ്ങനെ വിളിക്കപ്പെടുന്ന പ്രദേശങ്ങൾ ഇവിടെ കാണിച്ചിരിക്കുന്നു. അടിഭാഗം.*സ്റ്റോപ്പ് കോഡണുകളെ നിർണ്ണയിക്കുന്ന മ്യൂട്ടേഷനുകളെ പ്രതിനിധീകരിക്കുന്നു.
തുടർന്ന് ഞങ്ങൾ BRCA1/2 PV യുടെ സാന്നിധ്യവുമായി ബന്ധപ്പെട്ടിരിക്കാവുന്ന BC ക്ലിനിക്കോപാത്തോളജിക്കൽ സവിശേഷതകൾ അന്വേഷിച്ചു. 181 BRCA1/2-നെഗറ്റീവ് രോഗികൾക്കും (വാഹകരല്ലാത്തവർ) എല്ലാ വാഹകർക്കും (n = 35) പൂർണ്ണമായ ക്ലിനിക്കൽ രേഖകൾ ലഭ്യമായിരുന്നു. ട്യൂമർ വ്യാപന നിരക്കും ഗ്രേഡും തമ്മിൽ ഒരു പരസ്പര ബന്ധമുണ്ടായിരുന്നു.
ഞങ്ങളുടെ കൂട്ടത്തിന്റെ ശരാശരി (25%, പരിധി <10-90%) അടിസ്ഥാനമാക്കിയാണ് ഞങ്ങൾ Ki-67 ന്റെ വിതരണം കണക്കാക്കിയത്. Ki-67 < 25% ഉള്ള വിഷയങ്ങളെ "കുറഞ്ഞ Ki-67" ആയി നിർവചിച്ചു, അതേസമയം ≥ 25% മൂല്യമുള്ള വ്യക്തികളെ "ഉയർന്ന Ki-67" ആയി കണക്കാക്കി. കാരിയറുകളല്ലാത്തവർക്കും BRCA1 PV കാരിയറുകൾക്കും ഇടയിൽ കാര്യമായ Ki-67 വ്യത്യാസങ്ങൾ (p<0.01) കണ്ടെത്തി (ചിത്രം 5A).
ചിത്രം 5 BRCA1, BRCA2 PV-കൾ ഉള്ളവരും ഇല്ലാത്തവരുമായ സ്തനാർബുദ സ്ത്രീകളിൽ ഗ്രേഡ് വിതരണവുമായി Ki-67 ന്റെ പരസ്പരബന്ധം.(A) BRCA1 (18) അല്ലെങ്കിൽ BRCA2 (17) PV രോഗികളെ അപേക്ഷിച്ച് 181 നോൺ-കാരിയർ BC രോഗികളിൽ ശരാശരി Ki-67 മൂല്യങ്ങൾ കാണിക്കുന്ന ബോക്സ്പ്ലോട്ട്. 0.5-ൽ താഴെയുള്ള P മൂല്യങ്ങൾ സ്ഥിതിവിവരക്കണക്കനുസരിച്ച് പ്രാധാന്യമുള്ളതായി കണക്കാക്കി.(B) BRCA1, BRCA2 മ്യൂട്ടേഷൻ സ്റ്റാറ്റസ് (WT വിഷയങ്ങൾ, BRCA1, BRCA2 PV-കൾ വാഹകർ) അനുസരിച്ച് BC കാൻസർ രോഗികളെ ഹിസ്റ്റോളജിക്കൽ ഗ്രേഡ് ഗ്രൂപ്പുകളിലേക്ക് (G2, G3) നിയോഗിക്കുന്നതിനെ പ്രതിനിധീകരിക്കുന്ന ഹിസ്റ്റോഗ്രാം.
അതുപോലെ, BRCA1/2 PV യുടെ സാന്നിധ്യവുമായി ട്യൂമർ ഗ്രേഡ് ബന്ധപ്പെട്ടിട്ടുണ്ടോ എന്ന് ഞങ്ങൾ പരിശോധിച്ചു. ഞങ്ങളുടെ ജനസംഖ്യയിൽ G1 BC ഇല്ലാതിരുന്നതിനാൽ, രോഗികളെ രണ്ട് ഗ്രൂപ്പുകളായി (G2 അല്ലെങ്കിൽ G3) വിഭജിച്ചു. Ki-67 ഫലങ്ങളുമായി പൊരുത്തപ്പെടുന്ന വിശകലനം, ട്യൂമർ ഗ്രേഡിനും BRCA1 മ്യൂട്ടേഷനും ഇടയിൽ സ്ഥിതിവിവരക്കണക്കനുസരിച്ച് പ്രധാനപ്പെട്ട ഒരു ബന്ധം വെളിപ്പെടുത്തി, വാഹകരല്ലാത്തവരെ അപേക്ഷിച്ച് BRCA1 കാരിയറുകളിൽ G3 ട്യൂമറുകളുടെ ഉയർന്ന അനുപാതം (p<0.005) (ചിത്രം 5B).
ഡിഎൻഎ സീക്വൻസിംഗ് സാങ്കേതികവിദ്യയിലെ പുരോഗതി BRCA1/2 ജനിതക പരിശോധനയിൽ അഭൂതപൂർവമായ പുരോഗതി സാധ്യമാക്കിയിട്ടുണ്ട്, ഇത് കുടുംബത്തിൽ കാൻസർ ചരിത്രമുള്ള രോഗികൾക്ക് നിർണായക പ്രത്യാഘാതങ്ങൾ സൃഷ്ടിക്കുന്നു. ഇന്നുവരെ, അമേരിക്കൻ സൊസൈറ്റി ഓഫ് മെഡിക്കൽ ജനിറ്റിക്സ് 35 ഉം ENIGMA സിസ്റ്റവും അനുസരിച്ച് ഏകദേശം 20.000 BRCA1/2 വകഭേദങ്ങൾ തിരിച്ചറിഞ്ഞ് തരംതിരിച്ചിട്ടുണ്ട്. 35,36 ഭൂമിശാസ്ത്രപരമായ പ്രദേശങ്ങളിൽ BRCA1/2 മ്യൂട്ടേഷണൽ സ്പെക്ട്രം വ്യാപകമായി വ്യത്യാസപ്പെടുന്നുണ്ടെന്ന് എല്ലാവർക്കും അറിയാം.37 ഇറ്റലിയിൽ, BRCA1/2 PV-കളുടെ നിരക്ക് 8% മുതൽ 37% വരെയാണ്, ഇത് വിശാലമായ ഇൻട്രാ-കൺട്രി വ്യതിയാനം കാണിക്കുന്നു.38,39 ഏകദേശം 5 ദശലക്ഷം ജനസംഖ്യയുള്ള സിസിലി, നിവാസികളുടെ എണ്ണത്തിൽ ഇറ്റലിയിലെ അഞ്ചാമത്തെ വലിയ പ്രദേശമാണ്. പടിഞ്ഞാറൻ സിസിലിയിൽ BRCA1/2 ന്റെ വിതരണത്തെക്കുറിച്ചുള്ള ഡാറ്റ നിലവിലുണ്ടെങ്കിലും, ദ്വീപിന്റെ കിഴക്കൻ ഭാഗത്ത് വിപുലമായ തെളിവുകളൊന്നുമില്ല.
കിഴക്കൻ സിസിലിയിലെ ബിസി രോഗികളിൽ BRCA1/2 PV യുടെ സംഭവവികാസങ്ങളെക്കുറിച്ചുള്ള ആദ്യ റിപ്പോർട്ടുകളിൽ ഒന്നാണ് ഞങ്ങളുടെ പഠനം.28 ഞങ്ങളുടെ സംഘത്തിലെ ഏറ്റവും സാധാരണമായ രോഗമായതിനാൽ, ബിസിയിലാണ് ഞങ്ങൾ ഞങ്ങളുടെ വിശകലനം കേന്ദ്രീകരിച്ചത്.
389 BC രോഗികളെ പരിശോധിച്ചപ്പോൾ, 9% പേർ BRCA1/2 PV-കൾ വഹിച്ചു, BRCA1 നും BRCA2 നും ഇടയിൽ തുല്യമായി വിതരണം ചെയ്തു. ഈ ഫലങ്ങൾ ഇറ്റാലിയൻ ജനസംഖ്യയിൽ മുമ്പ് റിപ്പോർട്ട് ചെയ്തവയുമായി പൊരുത്തപ്പെടുന്നു.28 രസകരമെന്നു പറയട്ടെ, ഞങ്ങളുടെ കൂട്ടത്തിൽ 3% (13/389) പുരുഷന്മാരായിരുന്നു. പുരുഷ സ്തനാർബുദത്തിന് (എല്ലാ BC-കളിലും 1%) ഈ നിരക്ക് പ്രതീക്ഷിച്ചതിലും കൂടുതലാണ്,40 BRCA1/2 മ്യൂട്ടേഷൻ അപകടസാധ്യതയെ അടിസ്ഥാനമാക്കിയുള്ള ഞങ്ങളുടെ ജനസംഖ്യാ തിരഞ്ഞെടുപ്പിനെ പ്രതിഫലിപ്പിക്കുന്നു. എന്നിരുന്നാലും, ഈ പുരുഷന്മാരിൽ ആർക്കും BRCA1/2 PV വികസിപ്പിച്ചിട്ടില്ല, അതിനാൽ PALB2, RAD51C, D തുടങ്ങിയ സാധാരണമല്ലാത്ത മ്യൂട്ടേഷനുകളുടെ സാന്നിധ്യം തള്ളിക്കളയാൻ കൂടുതൽ തന്മാത്രാ വിശകലനത്തിന് അവർ സ്ഥാനാർത്ഥികളായിരുന്നു. BRCA2 VUS പ്രകടമായ 7% വിഷയങ്ങളിൽ അനിശ്ചിത പ്രാധാന്യമുള്ള വകഭേദങ്ങൾ വീണ്ടെടുത്തു. ഈ ഫലം പോലും നിലവിലുള്ള തെളിവുകളുമായി പൊരുത്തപ്പെടുന്നു.28,41,42
BRCA1/2 മ്യൂട്ടന്റ് സ്ത്രീകളിലെ BC മോളിക്യുലാർ സബ്‌ടൈപ്പുകളുടെ വിതരണം ഞങ്ങൾ വിശകലനം ചെയ്തപ്പോൾ, TNBC യും BRCA1 PV യും (58.8%) തമ്മിലുള്ളതും ലുമിനൽ B BC യും BRCA2 PV യും (55.6%) തമ്മിലുള്ളതുമായ അറിയപ്പെടുന്ന ബന്ധങ്ങൾ ഞങ്ങൾ സ്ഥിരീകരിച്ചു.16,43 BRCA1, BRCA2 PV കാരിയറുകളിലെ ലുമിനൽ A, HER2+ ട്യൂമറുകൾ നിലവിലുള്ള സാഹിത്യ ഡാറ്റയുമായി പൊരുത്തപ്പെടുന്നു.16,43
തുടർന്ന് ഞങ്ങൾ BRCA1/2 PV യുടെ തരത്തിലും സ്ഥാനത്തിലും ശ്രദ്ധ കേന്ദ്രീകരിക്കുന്നു. ഞങ്ങളുടെ കൂട്ടത്തിൽ, ഏറ്റവും സാധാരണമായ BRCA1 PV c.5035_5039delCTAAT ആയിരുന്നു. എന്നിരുന്നാലും ഇൻകോർവായിയ തുടങ്ങിയവർ. ഈ വകഭേദത്തെ അവരുടെ സിസിലിയൻ കൂട്ടായ്മയിൽ വിവരിച്ചിട്ടില്ല, മറ്റ് എഴുത്തുകാർ ഇതിനെ ഒരു ജേംലൈൻ BRCA1 PV.34 ആയി റിപ്പോർട്ട് ചെയ്തിട്ടുണ്ട്. ഞങ്ങളുടെ കൂട്ടായ്മയിൽ നിരവധി BRCA1 PV-കൾ കണ്ടെത്തി - ഉദാ: c.181T>G, c.514del, c.3253dupA, c.5266dupC - ഇവ സിസിലിയിൽ നിരീക്ഷിക്കപ്പെട്ടിട്ടുണ്ട്.28 ഇതിൽ, രണ്ട് BRCA1 സ്ഥാപക മ്യൂട്ടേഷനുകൾ (c.181T>G, c.5266dupC) കിഴക്കൻ, മധ്യ യൂറോപ്പിലെ (പോളണ്ട്, ചെക്ക്), സ്ലോവേനിയൻ, ഓസ്ട്രിയൻ, ഹംഗേറിയൻ, ബെലാറഷ്യൻ, ജർമ്മൻ) അഷ്‌കെനാസി ജൂതന്മാരിൽ സാധാരണയായി കാണപ്പെടുന്നു, 44,45, യുണൈറ്റഡ് സ്റ്റേറ്റ്സിലും അർജന്റീനയിലും, അടുത്തിടെ BC, OC എന്നിവയുള്ള ഇറ്റാലിയൻ രോഗികളിൽ "ആവർത്തിച്ചുള്ള ജേംലൈൻ വകഭേദം" ആയി നിർവചിക്കപ്പെട്ടു. പലെർമോയിലും മെസ്സിനയിലും വടക്കൻ സിസിലിയിലെ 8 സ്തനാർബുദ രോഗികളിൽ 34c.514del വകഭേദം മുമ്പ് തിരിച്ചറിഞ്ഞിരുന്നു. രസകരമെന്നു പറയട്ടെ, ഇൻകോർവായിയ തുടങ്ങിയവർ പോലും. കാറ്റാനിയയിലെ ചില കുടുംബങ്ങളിൽ c.3253dupA വകഭേദം കണ്ടെത്തി.28 ഏറ്റവും കൂടുതൽ പ്രതിനിധീകരിക്കുന്ന BRCA2 PV-കൾ c.428dup, c.5851_5854delAGTT, ഇൻട്രോണിക് വേരിയന്റ് c.8487+1G>A എന്നിവയാണ്, ഇവ കൂടുതൽ വിശദമായി റിപ്പോർട്ട് ചെയ്തിട്ടുണ്ട് 28 പലേർമോയിലെ c.428dup, c.5851_5854delAGTT PV ഉള്ള ഒരു രോഗിയിൽ വടക്കുപടിഞ്ഞാറൻ സിസിലിയിലെ വീടുകളിൽ, പ്രധാനമായും ട്രപാനി, പലേർമോ മേഖലകളിൽ, c.5851_5854delAGTT PV നിരീക്ഷിക്കപ്പെട്ടു, അതേസമയം വടക്കുപടിഞ്ഞാറൻ സിസിലിയിലെ വീടുകളിൽ c.5851_5854delAGTT PV നിരീക്ഷിക്കപ്പെട്ടു. 8487+1G> മെസ്സിന, പലേർമോ, കാൽറ്റാനിസെറ്റ എന്നിവിടങ്ങളിൽ നിന്നുള്ള വിഷയങ്ങളിൽ A വകഭേദം കൂടുതൽ സാധാരണമായിരുന്നു.28 റെബ്ബെക്ക് തുടങ്ങിയവർ. കൊളംബിയയിലെ c.5851_5854delAGTT വ്യതിയാനത്തെക്കുറിച്ച് മുമ്പ് വിവരിച്ചിട്ടുണ്ട്.37 മറ്റൊരു BRCA2 PV, c.631+1G>A, സിസിലിയിലെ (അഗ്രിജെന്റോ, സിറാക്കൂസ, റഗുസ) BC, OC രോഗികളിൽ കണ്ടെത്തിയിട്ടുണ്ട്.28 ശ്രദ്ധേയമായി, ഒരേ രോഗിയിൽ രണ്ട് BRCA2 വകഭേദങ്ങളുടെ (BRCA2 c.631G>A, c.7008-2A>T) സഹവർത്തിത്വം ഞങ്ങൾ നിരീക്ഷിച്ചു, മുമ്പ് അങ്ങനെ റിപ്പോർട്ട് ചെയ്തതുപോലെ, സിസ് മോഡിൽ ഇത് വേർതിരിച്ചിരിക്കുന്നുവെന്ന് ഞങ്ങൾ അനുമാനിച്ചു.34,46 ഈ BRCA2 ഉബിൾ മ്യൂട്ടേഷനുകൾ ഇറ്റാലിയൻ മേഖലയിൽ പതിവായി നിരീക്ഷിക്കപ്പെടുന്നു, കൂടാതെ അകാല സ്റ്റോപ്പ് കോഡണുകൾ അവതരിപ്പിക്കുന്നതായി കണ്ടെത്തിയിട്ടുണ്ട്, ഇത് മെസഞ്ചർ RNA സ്പ്ലൈസിംഗിനെ ബാധിക്കുകയും BRCA2 പ്രോട്ടീൻ പരാജയപ്പെടാൻ കാരണമാവുകയും ചെയ്യുന്നു.47,48
പ്രോട്ടീൻ ഡൊമെയ്‌നുകളുടെയും ജീനുകളുടെയും സാധ്യതയുള്ള OCCR, BCCR മേഖലകളിൽ ഞങ്ങൾ BRCA1, BRCA2 PV-കൾ മാപ്പ് ചെയ്തു. റെബ്ബെക്ക് തുടങ്ങിയവർ ഈ പ്രദേശങ്ങളെ യഥാക്രമം അണ്ഡാശയ, സ്തനാർബുദം വികസിപ്പിക്കുന്നതിനുള്ള അപകടസാധ്യത മേഖലകളായി വിശേഷിപ്പിച്ചു.49 എന്നിരുന്നാലും, ജെംലൈൻ വകഭേദങ്ങളുടെ സ്ഥാനവും സ്തനാർബുദ സാധ്യതയും തമ്മിലുള്ള ബന്ധത്തെക്കുറിച്ചുള്ള തെളിവുകൾ വിവാദമായി തുടരുന്നു.28,50-52 ഞങ്ങളുടെ ജനസംഖ്യയിൽ, BRCA1 PV-കൾ പ്രധാനമായും BCCR മേഖലയിലായിരുന്നു സ്ഥിതി ചെയ്യുന്നത്, അതേസമയം BRCA2 PV-കൾ പ്രധാനമായും OCCR മേഖലയിലായിരുന്നു സ്ഥിതി ചെയ്യുന്നത്. എന്നിരുന്നാലും, സാധ്യതയുള്ള OCCR, BCCR മേഖലകളും BC സവിശേഷതകളും തമ്മിൽ ഒരു ബന്ധവും കണ്ടെത്താൻ ഞങ്ങൾക്ക് കഴിഞ്ഞില്ല. BRCA1/2 മ്യൂട്ടേഷനുകൾ ഉള്ള രോഗികളുടെ എണ്ണം പരിമിതമായതിനാലാകാം ഇത്.ഒരു പ്രോട്ടീൻ ഡൊമെയ്‌ൻ വീക്ഷണകോണിൽ നിന്ന്, BRCA1 PV-കൾ മുഴുവൻ പ്രോട്ടീനിലും വിതരണം ചെയ്യപ്പെടുന്നു, കൂടാതെ BRCA2 മാറ്റങ്ങൾ BRC ആവർത്തന ഡൊമെയ്‌നിൽ മുൻഗണനയോടെ കാണപ്പെടുന്നു.
ഒടുവിൽ, ബിസി ക്ലിനിക്കോപാത്തോളജിക്കൽ സവിശേഷതകളെ BRCA1/2 PV യുമായി ഞങ്ങൾ ബന്ധപ്പെടുത്തി. രോഗികളുടെ എണ്ണം പരിമിതമായതിനാൽ, കി-67 നും ട്യൂമർ ഗ്രേഡിനും ഇടയിൽ ഒരു പ്രധാന ബന്ധം മാത്രമേ ഞങ്ങൾ കണ്ടെത്തിയിട്ടുള്ളൂ. കി-67 ന്റെ വിലയിരുത്തലും വ്യാഖ്യാനവും ഇപ്പോഴും വിവാദപരമായി തുടരുന്നുവെങ്കിലും, ഉയർന്ന പ്രോലിഫെറേറ്റീവ് നിരക്കുകൾ രോഗം ആവർത്തിക്കാനുള്ള സാധ്യതയും അതിജീവനം കുറയുന്നതുമായി ബന്ധപ്പെട്ടിരിക്കുന്നുവെന്ന് ഉറപ്പാണ്. ഇന്നുവരെ, "ഉയർന്ന", "താഴ്ന്ന" കി-67 എന്നിവ തമ്മിൽ വേർതിരിച്ചറിയുന്നതിനുള്ള കട്ട് ഓഫ് 20% ആണ്. എന്നിരുന്നാലും, ഈ പരിധി ഞങ്ങളുടെ BRCA1/2 മ്യൂട്ടേഷൻ രോഗി ജനസംഖ്യയ്ക്ക് ബാധകമല്ല, അവർക്ക് ശരാശരി കി-67 മൂല്യം 25% ആണ്. ഉയർന്ന കി-67 നിരക്കുകളിലെ ഈ പ്രവണത ഞങ്ങളുടെ ലുമിനൽ ബി, ടിഎൻബിസി കൂട്ടങ്ങളിലെ വ്യാപനത്താൽ വിശദീകരിക്കാം, അവയിൽ കുറച്ച് ലുമിനൽ എ ട്യൂമറുകൾ മാത്രമേ ഉണ്ടായിരുന്നുള്ളൂ. എന്നിരുന്നാലും, ഉയർന്ന കി-67 കട്ട് ഓഫ് (25–30%) രോഗികളെ അവരുടെ രോഗനിർണയത്തിനനുസരിച്ച് മികച്ച രീതിയിൽ തരംതിരിച്ചേക്കാമെന്ന് ചില തെളിവുകൾ സൂചിപ്പിക്കുന്നു.53,54 ഞങ്ങളുടെ വിശകലനത്തിന്റെ ഫലങ്ങളിൽ നിന്ന്, ഒരു പ്രധാന പരസ്പരബന്ധം അതിശയിക്കാനില്ല. ഉയർന്ന കി-67 നും ഇടയിൽ സംഭവിക്കുന്നു. ഗ്രേഡുകളും BRCA1 PV യുടെ സാന്നിധ്യവും. വാസ്തവത്തിൽ, BRCA1-മായി ബന്ധപ്പെട്ട മുഴകൾ TNBC യുടെ സ്വഭാവമാണ്, കൂടാതെ കൂടുതൽ ആക്രമണാത്മക സവിശേഷതകൾ പ്രകടിപ്പിക്കുകയും ചെയ്യുന്നു.16,17
ഉപസംഹാരമായി, കിഴക്കൻ സിസിലിയിൽ നിന്നുള്ള ഒരു ബിസി കൂട്ടത്തിൽ BRCA1/2 ന്റെ മ്യൂട്ടേഷൻ അവസ്ഥയെക്കുറിച്ചുള്ള ഒരു റിപ്പോർട്ട് ഈ പഠനം നൽകുന്നു. മൊത്തത്തിൽ, ബിസിയിലെ മ്യൂട്ടേഷൻ വ്യാപനത്തിന്റെയും ക്ലിനിക്കോപാത്തോളജിക്കൽ സവിശേഷതകളുടെയും കാര്യത്തിൽ, ഞങ്ങളുടെ കണ്ടെത്തലുകൾ നിലവിലുള്ള തെളിവുകളുമായി പൊരുത്തപ്പെടുന്നു. മൾട്ടിജീനോം എക്സ്പാൻഡഡ് മ്യൂട്ടേഷൻ വിശകലനം ഉപയോഗിക്കുന്നതുപോലുള്ള BRCA1/2-മ്യൂട്ടന്റ് ബിസി രോഗികളുടെ വലിയ ജനസംഖ്യയിൽ കൂടുതൽ പഠനങ്ങൾ, BRCA1/2 നേക്കാൾ വ്യത്യസ്തവും ഇടയ്ക്കിടെയുള്ളതുമായ പിവികളുടെ സാന്നിധ്യം വിലയിരുത്തുന്നതിന് ആവശ്യമാണ്. ജനിതക മ്യൂട്ടേഷനുകൾ കാരണം കാൻസർ സാധ്യത കൂടുതലുള്ള വിഷയങ്ങളുടെ എണ്ണം തിരിച്ചറിയാനും ശരിയായ രീതിയിൽ കൈകാര്യം ചെയ്യാനും ഇത് അനുവദിക്കും.
ഗവേഷണ ആവശ്യങ്ങൾക്കായി അവരുടെ ട്യൂമർ സാമ്പിളുകൾ അജ്ഞാതമായി പുറത്തുവിടാൻ രോഗികൾ വിവരമറിയിച്ച സമ്മതപത്രം ഒപ്പിട്ടതായി ഞങ്ങൾ സ്ഥിരീകരിച്ചു. ഹെൽസിങ്കിയുടെ പ്രഖ്യാപനം അനുസരിച്ച് എല്ലാ രോഗികളും രേഖാമൂലമുള്ള വിവരമറിയിച്ച സമ്മതപത്രത്തിൽ ഒപ്പിട്ടു. AOU പോളിക്ലിനിക്കോ "G.Rodolico - S.Marco" യുടെ നയമനുസരിച്ച്, BRCA1/2 വിശകലനം ക്ലിനിക്കൽ പ്രാക്ടീസ് അനുസരിച്ച് നടത്തിയതിനാലും എല്ലാ രോഗികളും രേഖാമൂലമുള്ള സമ്മതപത്രം നൽകിയതിനാലും ഈ പഠനത്തെ ധാർമ്മിക അവലോകനത്തിൽ നിന്ന് ഒഴിവാക്കി. ഗവേഷണ ആവശ്യങ്ങൾക്കായി അവരുടെ ഡാറ്റ ഉപയോഗിക്കുന്നതിന് രോഗികൾ സമ്മതം നൽകുകയും ചെയ്യുന്നു.
എത്തിക്സ് കമ്മിറ്റി ആവശ്യപ്പെട്ടതനുസരിച്ച് സ്തനാർബുദ രോഗികളുടെ പരിചരണത്തിൽ സഹായിച്ചതിന് പ്രൊഫ. പൗലോ വിഗ്നേരിയോട് ഞങ്ങൾ നന്ദി പറയുന്നു.
ഇസ്റ്റിറ്റ്യൂട്ടോ ജെന്റിലി, എലി ലില്ലി, നൊവാർട്ടിസ്, ഫൈസർ എന്നിവരിൽ നിന്നുള്ള ഓണറേറിയങ്ങൾ ഫെഡറിക്ക മാർട്ടോറാന റിപ്പോർട്ട് ചെയ്യുന്നു. മറ്റ് രചയിതാക്കൾ ഈ കൃതിയിൽ താൽപ്പര്യ വൈരുദ്ധ്യങ്ങളൊന്നും പ്രഖ്യാപിക്കുന്നില്ല.
1. സങ് എച്ച്, ഫെർലേ ജെ, സീഗൽ ആർഎൽ, തുടങ്ങിയവർ. ആഗോള കാൻസർ സ്ഥിതിവിവരക്കണക്കുകൾ 2020: ലോകമെമ്പാടുമുള്ള 185 രാജ്യങ്ങളിലായി 36 കാൻസറുകളുടെ സംഭവവികാസവും മരണനിരക്കും ഗ്ലോബൊകാൻ കണക്കാക്കുന്നു. സിഎ കാൻസർ ജെ ക്ലിൻ.2021;71(3):209-249.doi: 10.3322/caac.21660