तुमच्या ब्राउझरमध्ये सध्या जावास्क्रिप्ट अक्षम आहे. जावास्क्रिप्ट अक्षम केल्यावर या वेबसाइटची काही वैशिष्ट्ये कार्य करणार नाहीत.
तुमच्या विशिष्ट तपशीलांसह आणि आवडीच्या विशिष्ट औषधांसह नोंदणी करा आणि आम्ही तुम्ही प्रदान केलेली माहिती आमच्या विस्तृत डेटाबेसमधील लेखांशी जुळवू आणि तुम्हाला त्वरित एक PDF प्रत ईमेल करू.
作者 Stella S, Vitale SR, Martorana F, Massimino M, Pavone G, Lanzafame K, Bianca S, Barone C, Gorgone C, Fichera M, Manzella L
स्टेफानिया स्टेला, 1,2 सिल्व्हिया रीटा व्हिटाले, 1,2 फेडेरिका मार्टोराना, 1,2 मिशेल मॅसिमिनो, 1,2 जिउलियाना पावोने, 3 कटिया लॅन्झाफेम, 3 सेबॅस्टियानो बियान्का, 4 चियारा बॅरोन, 5 क्रिस्टिना गोर्गोन, 6 मार्को फिचेरा, 6 मार्को फिचेरा, सी 7 डिपार्टमेंटचे 1,2 लि. मेडिसिन, कॅटानिया विद्यापीठ, कॅटानिया, 95123, इटली;2 प्रायोगिक ऑन्कोलॉजी आणि रक्तविज्ञान केंद्र, AOU पॉलिक्लिनको “G.Rodolico – San Marco”, Catania , 95123, Italy; 3 मेडिकल ऑन्कोलॉजी, AOU Policlinico “G. Rodolico – San Marco”, Catania, 95123, Italy; 4 मेडिकल जेनेटिक्स, ARNAS Garibaldi, Catania, 95123, Italy; ५ मेडिसिन जेनेटिक्स, एएसपी, सिराक्यूज, ९६१००, इटली; ६ बायोमेडिकल आणि बायोटेक्नॉलॉजी सायन्सेस विभाग, कॅटानिया विद्यापीठ, मेडिकल जेनेटिक्स, कॅटानिया, इटली, ९५१२३; ७ओएसी रिसर्च इन्स्टिट्यूट-आयआरसीसीएस, ट्रोइना, ९४०१८, इटली संप्रेषण: स्टेफानिया स्टेला, दूरध्वनी +३९ ०९५ ३७८ १९४६, ईमेल [email protected]; [email protected] उद्देश: BRCA1 आणि BRCA2 मध्ये जर्मलाइन उत्परिवर्तन आणि स्थापित स्तनाचा कर्करोग (BC), अंडाशय (OC) आणि कर्करोगाच्या आयुष्यभराच्या जोखमीशी संबंधित इतर. BRCA जनुकाची चाचणी वैयक्तिक जोखीम मूल्यांकन करण्यासाठी तसेच कर्करोगाच्या रुग्णांमध्ये निरोगी वाहकांमध्ये प्रतिबंध पद्धती शोधण्यासाठी आणि उपचारांसाठी महत्त्वाची आहे. BRCA1 आणि BRCA2 बदलांचा प्रसार भौगोलिक प्रदेशांमध्ये मोठ्या प्रमाणात बदलतो आणि जरी सिसिलियन कुटुंबांमध्ये BRCA रोगजनक प्रकारांवर डेटा अस्तित्वात असला तरी, पूर्व सिसिलीमधील लोकसंख्येला विशेषतः लक्ष्यित करणाऱ्या अभ्यासांमध्ये कमतरता आहे. आमच्या अभ्यासाचे उद्दिष्ट पूर्व सिसिलीमधील BC रुग्णांच्या गटात BRCA रोगजनक जर्मलाइन बदलांच्या घटना आणि वितरणाची तपासणी करणे आणि पुढील पिढीच्या अनुक्रमणाचा वापर करून विशिष्ट BC वैशिष्ट्यांशी त्यांचा संबंध मूल्यांकन करणे होते. ट्यूमर ग्रेड आणि प्रसार निर्देशांकाशी संबंधित बदलांची उपस्थिती. परिणाम: एकूण, 35 रुग्णांमध्ये (9%) BRCA रोगजनक प्रकार होता, 17 (49%) BRCA1 मध्ये आणि 18 (51%) BRCA2 मध्ये. BRCA1 बदल ट्रिपल-नकारात्मक BC रुग्णांमध्ये प्रचलित आहेत, तर BRCA2 उत्परिवर्तन अधिक सामान्य आहेत. ल्युमिनल बीसी रुग्णांमध्ये. नॉन-कॅरियर्सच्या तुलनेत, बीआरसीए१ व्हेरिएंट असलेल्या रुग्णांमध्ये ट्यूमर ग्रेड आणि प्रोलिफेरेटिव्ह इंडेक्स लक्षणीयरीत्या जास्त होता. निष्कर्ष: आमचे निष्कर्ष पूर्व सिसिलीमधील बीसी रुग्णांमध्ये बीआरसीए उत्परिवर्तन स्थितीचा आढावा देतात आणि आनुवंशिक बीसी असलेल्या रुग्णांना ओळखण्यात एनजीएस विश्लेषणाच्या भूमिकेची पुष्टी करतात. एकूणच, हे डेटा उत्परिवर्तन वाहकांमध्ये कर्करोगाच्या योग्य प्रतिबंध आणि उपचारांसाठी बीआरसीए स्क्रीनिंगला समर्थन देणाऱ्या मागील पुराव्यांशी सुसंगत आहेत.
स्तनाचा कर्करोग (BC) हा जगभरातील सर्वात सामान्य घातक कर्करोग आहे आणि महिलांमध्ये सर्वात घातक कर्करोग आहे.1 BC रोगनिदान आणि क्लिनिकल वर्तन निश्चित करणारी जैविक वैशिष्ट्ये कालांतराने विस्तृतपणे अभ्यासली गेली आहेत आणि अंशतः स्पष्ट केली गेली आहेत.खरं तर, सध्या BC चे वेगवेगळ्या आण्विक उपप्रकारांमध्ये वर्गीकरण करण्यासाठी अनेक सरोगेट मार्कर वापरले जातात.ते इस्ट्रोजेन (ER) आणि/किंवा प्रोजेस्टेरॉन रिसेप्टर (PgR), मानवी एपिडर्मल ग्रोथ फॅक्टर रिसेप्टर 2 (HER2) प्रवर्धन, प्रसार निर्देशांक Ki-67 आणि ट्यूमर ग्रेड (G) आहेत.2 या चलांच्या संयोजनाने खालील BC श्रेणी ओळखल्या: 1) ER आणि/किंवा PgR अभिव्यक्ती दर्शविणारे ल्युमिनल ट्यूमर BC च्या 75% साठी जबाबदार होते.या ट्यूमरला पुढे Luminal A मध्ये विभागले गेले, जेव्हा Ki-67 20% पेक्षा कमी आणि HER2 निगेटिव्ह होता, आणि Luminal B मध्ये, जेव्हा Ki-67 20% च्या समान किंवा त्याहून अधिक होता आणि HER2 प्रवर्धनाच्या उपस्थितीत, प्रसार निर्देशांक काहीही असो; २) HER2+ ट्यूमर जे ER आणि PgR निगेटिव्ह आहेत परंतु HER2 प्रवर्धन दर्शवितात. हा गट सर्व स्तनाच्या ट्यूमरपैकी १०% आहे; ३) ट्रिपल-निगेटिव्ह ब्रेस्ट कॅन्सर (TNBC), जो ER आणि PgR अभिव्यक्ती आणि HER2 प्रवर्धन दर्शवत नाही, तो स्तनाच्या कर्करोगाच्या सुमारे १५% आहे.२-४
या बीसी उपप्रकारांमध्ये, ट्यूमर ग्रेड आणि प्रसार निर्देशांक हे क्रॉस-सेक्शनल बायोमार्कर दर्शवतात जे ट्यूमरच्या आक्रमकतेशी आणि रोगनिदानाशी थेट आणि स्वतंत्रपणे संबंधित आहेत.5,6
वर उल्लेख केलेल्या जैविक वैशिष्ट्यांव्यतिरिक्त, गेल्या काही वर्षांत BC च्या विकासास कारणीभूत असलेल्या वारशाने मिळालेल्या अनुवांशिक बदलांची भूमिका अधिकाधिक महत्त्वाची बनली आहे. ७ विशिष्ट जनुकांमधील जर्मलाइन बदलांमुळे सुमारे १० पैकी १ स्तन ट्यूमर वारशाने मिळतात. ८ १८०,००० हून अधिक महिलांचा समावेश असलेल्या दोन मोठ्या महामारीविज्ञान अभ्यासात अलीकडेच आठ जनुकांचा एक गट (म्हणजेच, ATM, BARD1, BRCA1, BRCA2, CHK2, PALB2, RAD51C आणि RAD51D) आढळला आहे जो प्रामुख्याने वंशानुगत BC साठी जबाबदार आहे. या जनुकांपैकी, BRCA1 आणि BRCA2 (यापुढे BRCA1/2 म्हणून संदर्भित) स्तन ट्यूमरच्या विकासाशी सर्वात मजबूत संबंध दर्शवितात. ९-१२ खरं तर, जर्मलाइन BRCA1/2 उत्परिवर्तनांमुळे BC तसेच अंडाशय, प्रोस्टेट, स्वादुपिंड, कोलोरेक्टल आणि मेलेनोमासह इतर घातक आजारांचा आजीवन धोका लक्षणीयरीत्या वाढतो. १३ ते ८० वर्षे वयोगटातील, BRCA1 रोगजनक प्रकार (PV) असलेल्या महिलांमध्ये BC ची एकत्रित घटना ७२% आहे. आणि BRCA2 PV असलेल्या महिलांमध्ये 69%.14
उल्लेखनीय म्हणजे, अलीकडील एका प्रकाशनातून असे सूचित होते की बीसीचा धोका पीव्हीच्या प्रकारावर अवलंबून असतो. खरं तर, रोगजनक ट्रंकेटिंग प्रकारांच्या तुलनेत, स्पष्ट चुकीचे अर्थ असलेले प्रकार, विशेषतः बीआरसीए१ जनुकातील, बीसीच्या कमी जोखमीशी संबंधित आहेत, विशेषतः वृद्ध महिलांमध्ये.१५
BRCA1 किंवा BRCA2 PV ची उपस्थिती वेगवेगळ्या जैविक आणि क्लिनिकोपॅथॉलॉजिकल वैशिष्ट्यांशी संबंधित होती.16,17 BRCA1-संबंधित BC हे वैद्यकीयदृष्ट्या आक्रमक, कमी प्रमाणात वेगळे केलेले आणि अत्यंत वाढणारे असतात. हे ट्यूमर सहसा तिहेरी नकारात्मक असतात आणि त्यांची सुरुवात लवकर होते. BRCA2-उत्परिवर्तित रुग्णांमध्ये आढळणारे ट्यूमर सामान्यतः मध्यम ते चांगल्या प्रकारे वेगळे केलेले ग्रेड आणि परिवर्तनशील वाढणारे निर्देशांक दर्शवतात. हे ट्यूमर लुमेन B मध्ये अधिक सामान्य आहेत आणि सामान्यतः वृद्ध प्रौढांमध्ये आढळतात.16-18 उल्लेखनीय म्हणजे, BRCA1 आणि BRCA2 मधील उत्परिवर्तन प्लॅटिनम क्षार आणि पॉली(ADP-ribose) पॉलिमरेज इनहिबिटर (PARPi) सारख्या लक्ष्यित औषधांसह विशिष्ट उपचारांसाठी संवेदनशीलता वाढवतात.19,20
गेल्या काही वर्षांत, क्लिनिकल प्रॅक्टिसमध्ये नेक्स्ट-जनरेशन सिक्वेन्सिंग (NGS) च्या अंमलबजावणीमुळे BRCA1/2.21 सह कर्करोग संवेदनशीलता सिंड्रोमसाठी आण्विक चाचणी घेण्यास BC रुग्णांची संख्या वाढत आहे. त्याच वेळी, BRCA1/2 चाचणीसाठी पात्र असलेल्या व्यक्तींना चांगल्या प्रकारे ओळखण्यासाठी कुटुंब इतिहास, लोकसंख्याशास्त्रीय आणि क्लिनिकोपॅथॉलॉजिकल वैशिष्ट्यांसंबंधी अचूक निकषांवर आधारित व्याख्या.22,23 या संदर्भात, विशिष्ट लोकसंख्येमध्ये BRCA1/2 स्क्रीनिंगवर पुरावे जमा होत आहेत, जे भौगोलिक प्रदेशांमधील फरक अधोरेखित करतात.24-27 पश्चिम सिसिलीमधील BC गटाबद्दल अहवाल असले तरी, पूर्व सिसिली लोकसंख्येमध्ये BRCA1/2 स्क्रीनिंगवर कमी डेटा उपलब्ध आहे.28,29
आम्ही येथे पूर्व सिसिलीमधील बीसी रुग्णांमध्ये जर्मलाइन BRCA1/2 स्क्रीनिंगच्या निकालांचे वर्णन करतो, जे या ट्यूमरच्या मुख्य क्लिनिकोपॅथॉलॉजिकल वैशिष्ट्यांसह BRCA1 किंवा BRCA2 उत्परिवर्तनांच्या उपस्थितीशी आणखी संबंधित आहे.
कॅटानिया येथील रोडोलिको - सॅन मार्को येथील पॉलीक्लिनिको हॉस्पिटलमधील "सेंटर फॉर एक्सपेरिमेंटल ऑन्कोलॉजी अँड हेमॅटोलॉजी" येथे एक पूर्वलक्षी अभ्यास करण्यात आला. जानेवारी २०१७ ते मार्च २०२१ पर्यंत, स्तन आणि अंडाशय, मेलेनोमा, स्वादुपिंड किंवा प्रोस्टेट कर्करोग असलेल्या एकूण ४५५ रुग्णांना BRCA/2 अनुवांशिक चाचणीसाठी आमच्या आण्विक निदान प्रयोगशाळेत पाठवण्यात आले. हा अभ्यास हेलसिंकीच्या घोषणेनुसार करण्यात आला आणि सर्व सहभागींनी आण्विक विश्लेषणापूर्वी लेखी माहितीपूर्ण संमती दिली.
BC च्या हिस्टोलॉजिकल आणि बायोलॉजिकल वैशिष्ट्यांचे (ER, PgR, HER2 स्थिती, Ki-67 आणि ग्रेड) मूल्यांकन कोर बायोप्सी किंवा सर्जिकल नमुन्यांवर केले गेले, फक्त आक्रमक ट्यूमर घटकांचा विचार केला गेला. या वैशिष्ट्यांवर आधारित, BC चे वर्गीकरण खालीलप्रमाणे केले गेले: ल्युमिनल A (ER+ आणि/किंवा PgR+, HER2-, Ki-67<20%), ल्युमिनल B (ER+ आणि/किंवा PgR+, HER2-, Ki-67≥20%), ल्युमिनल B-HER2+ (ER आणि/किंवा PgR+, HER2+), HER2+ (ER आणि PgR-, HER2+) किंवा ट्रिपल निगेटिव्ह (ER आणि PgR-, HER2-).
BRCA1 आणि BRCA2 उत्परिवर्तन स्थितीचे मूल्यांकन करण्यापूर्वी, ऑन्कोलॉजिस्ट, अनुवंशशास्त्रज्ञ आणि मानसशास्त्रज्ञ असलेल्या बहुविद्याशाखीय पथकाने प्रत्येक रुग्णासाठी BRCA1 आणि/किंवा BRCA1. किंवा BRCA2 जनुकामध्ये PV चा उच्च धोका असलेल्या व्यक्तींची उपस्थिती निश्चित करण्यासाठी ट्यूमर अनुवंशशास्त्र सल्लामसलत केली. रुग्णांची निवड इटालियन सोसायटी ऑफ मेडिकल ऑन्कोलॉजी (AIOM) मार्गदर्शक तत्त्वांनुसार आणि स्थानिक सिसिलियन शिफारसींनुसार करण्यात आली.30,31 या निकषांमध्ये हे समाविष्ट आहे: (i) संवेदनशीलता जनुकांमध्ये ज्ञात रोगजनक प्रकारांचा कौटुंबिक इतिहास (उदा., BRCA1, BRCA2, TP53, PTEN); (ii) BC असलेले पुरुष; (iii) BC आणि OC असलेले लोक; (iv) BC <36 वर्षे, TNBC <60 वर्षे, किंवा द्विपक्षीय BC <50 वर्षे; (v) BC <50 वर्षे आणि किमान एक प्रथम-पदवी नातेवाईकांचा वैयक्तिक वैद्यकीय इतिहास: (a) BC <36 वर्षे, TNBC <60 वर्षे, किंवा कोणत्याही वयोगटातील नॉन-बॉर्डरलाइन OC असलेल्या महिला; (c) द्विपक्षीय BC; (ड) पुरुष बीसी; (इ) स्वादुपिंडाचा कर्करोग; (फ) प्रोस्टेट कर्करोग; (vi) दोन किंवा अधिक बीसीचा वैयक्तिक इतिहास >५० वर्षांचा आणि बीसी, ओसीचा कौटुंबिक इतिहास किंवा एकमेकांचे प्रथम श्रेणीचे नातेवाईक असलेल्या नातेवाईकांसाठी स्वादुपिंडाचा कर्करोग (ज्यांच्याशी ती प्रथम श्रेणीची नातेवाईक आहे त्यांच्यासह); (vii) ओसीचा वैयक्तिक इतिहास आणि किमान एक प्रथम श्रेणीचा नातेवाईक: (अ) बीसी <५० वर्षे; (ब) एनओसी; (क) द्विपक्षीय बीसी; (ड) पुरुष बीसी; (vii) उच्च श्रेणीचे सेरस ओसी असलेली महिला.
प्रत्येक रुग्णाकडून २० मिली परिधीय रक्ताचा नमुना घेण्यात आला आणि तो EDTA ट्यूबमध्ये (BD बायोसायन्सेस) गोळा करण्यात आला. उत्पादकाच्या सूचनांनुसार QIAsymphony DSP DNA Midi किट आयसोलेशन किट (QIAGEN, Hilden, इटली) वापरून ०.७ मिली संपूर्ण रक्ताच्या नमुन्यांमधून जीनोमिक डीएनए वेगळे करण्यात आले आणि क्यूबिट® ३.० फ्लुरोमीटर (थर्मो फिशर सायंटिफिक, वॉल्थम, एमए, यूएसए) द्वारे प्रमाणीकरण केले गेले. लक्ष्य समृद्धीकरण आणि ग्रंथालय तयारी Oncomine™ BRCA संशोधन परख शेफ द्वारे केली जाते, जी उत्पादकाच्या सूचनांनुसार स्वयंचलित ग्रंथालय तयारीसाठी Ion AmpliSeq™ शेफ अभिकर्मक DL8 किटमध्ये लोड करण्यास तयार आहे. किटमध्ये दोन मल्टीप्लेक्स PCR प्राइमर पूल आहेत जे सर्व BRCA1 (NM_007300.3) आणि BRCA2 (NM_000059.3) जनुकांचा अभ्यास करण्यासाठी वापरले जाऊ शकतात. थोडक्यात, प्रत्येक पातळ नमुना DNA (10 ng) चे 15 µL लायब्ररी तयारीसाठी बारकोडेड प्लेट्समध्ये जोडले गेले आणि सर्व अभिकर्मक आणि उपभोग्य वस्तू Ion Chef™ उपकरणावर लोड केल्या गेल्या. त्यानंतर Ion Chef™ उपकरणावर स्वयंचलित ग्रंथालय तयारी आणि बारकोडेड नमुना लायब्ररी पूलिंग केले गेले. त्यानंतर उत्पादकाच्या सूचनांनुसार Qubit® 3.0 फ्लोरोमीटर (थर्मो फिशर सायंटिफिक, वॉल्थम, एमए, यूएसए) द्वारे तयार ग्रंथालयांची संख्या मूल्यांकन केली गेली. शेवटी, Ion Chef™ लायब्ररीमध्ये ग्रंथालये समतुल्य गुणोत्तरांमध्ये एकत्रित केली जातात. नमुना नळ्या (बारकोडेड नळ्या) घेतल्या आणि आयन शेफ™ उपकरणावर लोड केल्या. आयन 510 चिप (थर्मो फिशर सायंटिफिक) वापरून आयन टोरेंट S5 (थर्मो फिशर सायंटिफिक) उपकरण (थर्मो फिशर सायंटिफिक) वापरून अनुक्रमण केले गेले. डेटा विश्लेषण अ‍ॅम्प्लिकॉन सूट (स्मार्टसेक एसआरएल) आणि आयन रिपोर्टर सॉफ्टवेअरद्वारे केले गेले.
सर्व प्रकारांचे नामकरण ह्युमन जीनोम व्हेरिएशन कन्सोर्टियमच्या सध्याच्या मार्गदर्शक तत्त्वांचे पालन करते, जे ऑनलाइन उपलब्ध आहे (HGVS, http://www.hgvs.org/mutnomen). BRCA1/2 प्रकारांचे क्लिनिकल महत्त्व इंटरनॅशनल कन्सोर्टियम ENIGMA (Evidence-Based Network for Interpreting Germline Mutant Alleles, https://enigmaconsortium.org/) च्या वर्गीकरणाचा वापर करून आणि ARUP, BRCAEXCHANGE, ClinVar, IARC_LOVD, आणि UMD सारख्या वेगवेगळ्या डेटाबेसचा सल्ला घेऊन परिभाषित केले गेले. वर्गीकरणात पाच वेगळ्या जोखीम श्रेणी समाविष्ट आहेत: सौम्य (श्रेणी I), संभाव्य सौम्य (श्रेणी II), अनिश्चित महत्त्वाचे प्रकार (VUS, श्रेणी III), संभाव्य रोगजनक (श्रेणी IV), आणि रोगजनक (श्रेणी V). VarSome ने प्रथिने संरचना आणि कार्यावर उत्परिवर्तनांच्या प्रभावाचे विश्लेषण देखील केले, 30 डेटाबेसमध्ये प्रवेश असलेले एक माहितीपूर्ण साधन.32
प्रत्येक VUS ला संभाव्य क्लिनिकल महत्त्व देण्यासाठी, खालील संगणकीय प्रथिने अंदाज अल्गोरिदम वापरले गेले: MUTATION TASTER, 33 PROVEAN-SIFT (http://provean.jcvi.org/index.php), POLYPHEN-2 (http:// /genetics.bwh.harvard.edu/pph2/) आणि Align-GVGD (http://agvgd.hci.utah.edu/agvgd_input.php). वर्ग १ आणि २ म्हणून वर्गीकृत केलेले प्रकार वाइल्ड टाइप मानले गेले.
सेंगर सिक्वेन्सिंगने प्रत्येक रोगजनक प्रकाराची उपस्थिती पुष्टी केली. थोडक्यात, BRCA1 आणि BRCA2 जनुक संदर्भ अनुक्रम (अनुक्रमे NG_005905.2, NM_007294.3 आणि NG_012772.3, NM_000059.3) वापरून प्रत्येक शोधलेल्या प्रकारासाठी विशिष्ट प्रायमरची जोडी डिझाइन करण्यात आली. म्हणून, लक्ष्यित PCR नंतर सेंगर सिक्वेन्सिंग करण्यात आले.
ज्या रुग्णांची BRCA1/2 जनुकाची चाचणी नकारात्मक आली त्यांची उत्पादकाच्या सूचनांनुसार मल्टीप्लेक्स लिगेशन-डिपेंडेंट प्रोब अॅम्प्लिफिकेशन (MLPA) द्वारे मोठ्या जीनोमिक पुनर्रचना (LGR) च्या उपस्थितीचे मूल्यांकन करण्यासाठी चाचणी करण्यात आली. थोडक्यात, डीएनए नमुने विकृत केले जातात आणि 60 पर्यंत BRCA1 आणि BRCA2 जनुक-विशिष्ट प्रोब वापरले जातात, प्रत्येकी सुमारे 60 न्यूक्लियोटाइड्स लांबीचा विशिष्ट DNA अनुक्रम शोधतो. PCR अॅम्प्लिकॉनचा एक अद्वितीय संच असलेल्या प्रोब अॅम्प्लिफिकेशन उत्पादनांचे विश्लेषण नंतर केशिका इलेक्ट्रोफोरेसीस आणि Cofalyser.Net सॉफ्टवेअरद्वारे योग्य बॅच-विशिष्ट Cofalyser टेबल्स (www.mrcholland.com) द्वारे केले गेले.
निवडलेले क्लिनिकोपॅथॉलॉजिकल व्हेरिएबल्स (हिस्टोलॉजिकल ग्रेड आणि Ki-67% प्रसार निर्देशांक) BRCA1/2 PV च्या उपस्थितीशी संबंधित होते, ज्याची गणना प्रिझम सॉफ्टवेअर v. 8.4 वापरून फिशरच्या अचूक चाचणीचा वापर करून केली गेली, p-मूल्य <0.05 लक्षणीय असल्याचे गृहीत धरले.
जानेवारी २०१७ ते मार्च २०२१ दरम्यान, ४५५ रुग्णांची जर्मलाइन BRCA1/2 उत्परिवर्तनांसाठी तपासणी करण्यात आली. पॉलीक्लिनिको हॉस्पिटलच्या एक्सपेरिमेंटल ऑन्कोलॉजी अँड हेमॅटोलॉजी सेंटरमध्ये उत्परिवर्तन चाचणी करण्यात आली. सिसिलियन मार्गदर्शक तत्त्वानुसार (http://www.gurs.regione.sicilia.it/Indicep1.htm, N. 02-Venerdì 10 Gennaio 2020), कॅटानियाच्या रोडोलिको - सॅन मार्को" मध्ये एकूण ३८९ रुग्णांमध्ये स्तनाचा कर्करोग, ३७ गर्भाशयाचा कर्करोग, १६ स्वादुपिंडाचा कर्करोग, ८ प्रोस्टेट कर्करोग आणि ५ मेलेनोमा होते. कर्करोगाच्या प्रकार आणि विश्लेषणाच्या निकालांनुसार रुग्णांचे वितरण आकृती १ मध्ये दर्शविले आहे.
आकृती १ मध्ये अभ्यासाचा आढावा दाखवणारा फ्लो चार्ट दाखवला आहे. स्तन, मेलेनोमा, स्वादुपिंड, प्रोस्टेट किंवा गर्भाशयाच्या ट्यूमर असलेल्या रुग्णांची BRCA1 आणि BRCA2 जनुकांमधील उत्परिवर्तनांसाठी चाचणी करण्यात आली.
संक्षेप: पीव्ही, रोगजनक प्रकार; व्हीयूएस, अनिश्चित महत्त्वाचा प्रकार; डब्ल्यूटी, वाइल्ड-टाइप बीआरसीए१/२ अनुक्रम.
आम्ही आमच्या अभ्यासात स्तनाच्या कर्करोगाच्या गटांवर निवडकपणे लक्ष केंद्रित केले. रुग्णांचे सरासरी वय ४९ वर्षे (श्रेणी २३-८९) होते आणि ते प्रामुख्याने महिला होत्या (n=३७६, किंवा ९७%).
या विषयांपैकी, ६४ (१७%) मध्ये BRCA1/2 उत्परिवर्तन होते आणि ते सर्व महिला होते. पस्तीस (९%) मध्ये PV होते आणि २९ (७.५%) मध्ये VUS होते. ३५ रोगजनक प्रकारांपैकी सतरा (४८.६%) BRCA1 मध्ये आणि १८ (५१.४%) BRCA2 मध्ये आढळले, तर BRCA1 मध्ये ५ VUS (१७.२%) आणि BRCA2 मध्ये २४ (८२.८%) आढळले (आकृती १ आणि २). MLPA विश्लेषणात LGR उपस्थित नव्हता.
आकृती २. ३८९ स्तनाच्या कर्करोगाच्या रुग्णांमध्ये BRCA1 आणि BRCA2 उत्परिवर्तनांचे विश्लेषण. (A) ३८९ स्तनाच्या कर्करोगाच्या रुग्णांमध्ये रोगजनक प्रकार (PV) (लाल), अनिश्चित महत्त्वाचे प्रकार (VUS) (नारिंगी) आणि WT (निळा) यांचे वितरण; (B) ३८९ स्तनाच्या कर्करोगाच्या रुग्णांमध्ये पस्तीस (९%) मध्ये BRCA1/2 रोगजनक प्रकार (PV) होते. त्यापैकी १७ (४८.६%) BRCA1 PV वाहक (गडद लाल) आणि १८ (५१.४%) BRCA2 वाहक (हलका लाल) होते; (C) ३८९ विषयांपैकी २९ (७.५%) VUS, ५ (१७.२%) BRCA1 जनुके (गडद नारिंगी) आणि २४ (८२.८%) BRCA2 जनुके (हलका नारिंगी) वाहक होते.
संक्षेप: पीव्ही, रोगजनक प्रकार; व्हीयूएस, अनिश्चित महत्त्वाचा प्रकार; डब्ल्यूटी, वाइल्ड-टाइप बीआरसीए१/२ अनुक्रम.
आम्ही पुढे BRCA1/2 PV असलेल्या रुग्णांमध्ये BC आण्विक उपप्रकारांच्या प्रसाराची तपासणी केली. वितरणात 2 (5.7%) ल्युमिनल A, 15 (42.9%) ल्युमिनल B, 3 (8.6%) ल्युमिनल B-HER2+, 2 (5.7%) HER2+ आणि 13 (37.1%) TNBC रुग्णांचा समावेश होता. BRCA1-पॉझिटिव्ह रुग्णांपैकी, 5 (29.4%) मध्ये ल्युमिनल B BC, 2 (11.8%) मध्ये HER2+ रोग होता आणि 10 (58.8%) मध्ये TNBC होता. BRCA1 उत्परिवर्तन नसलेले ट्यूमर एकतर ल्युमिनल A किंवा ल्युमिनल B-HER2+ होते (आकृती 3). BRCA2-पॉझिटिव्ह उपसमूहात, 10 (55.6%) ट्यूमर ल्युमिनल B होते, 3 (16.7%) ल्युमिनल B-HER2+ होते, 3 (16.7%) TNBC होते आणि 2 (11.1%) होते. ल्युमिनल ए (आकृती ३). या गटात HER2+ ट्यूमर नव्हते. अशाप्रकारे, TNBC रुग्णांमध्ये BRCA1 उत्परिवर्तन प्रचलित आहे, तर BRCA2 बदल लुमेन B व्यक्तींमध्ये प्रामुख्याने आहेत.
आकृती ३ BRCA1 आणि BRCA2 मध्ये रोगजनक प्रकार असलेल्या रुग्णांमध्ये स्तनाच्या कर्करोगाच्या उपप्रकारांचा प्रसार. स्तनाच्या कर्करोगाच्या रुग्णांच्या आण्विक उपप्रकारांमध्ये BRCA1- (गडद लाल) आणि BRCA2- (हलका लाल) PV चे वितरण दर्शविणारे हिस्टोग्राम. प्रत्येक बॉक्समध्ये नोंदवलेली संख्या प्रत्येक स्तनाच्या कर्करोगाच्या उपप्रकारासाठी BRCA1 आणि BRCA2 PV असलेल्या रुग्णांची टक्केवारी दर्शवते.
संक्षेप: पीव्ही, रोगजनक प्रकार; एचईआर२+, मानवी एपिडर्मल ग्रोथ फॅक्टर रिसेप्टर २ पॉझिटिव्ह; टीएनबीसी, ट्रिपल-निगेटिव्ह ब्रेस्ट कॅन्सर.
त्यानंतर, आम्ही BRCA1 आणि BRCA2 PVs च्या प्रकार आणि जनुक स्थानिकीकरणाचे मूल्यांकन केले. BRCA1 PV मध्ये, आम्ही 7 सिंगल न्यूक्लियोटाइड प्रकार (SNVs), 6 डिलीशन, 3 डुप्लिकेशन आणि 1 इन्सर्शन पाहिले. फक्त एक उत्परिवर्तन (c.5522delG) एक नवीन शोध दर्शवते. दोन्ही विषयांमध्ये आढळलेला सर्वात सामान्य BRCA1 PV c.5035_5039delCTAAT होता. या बदलामध्ये BRCA1 एक्सॉन 15 मध्ये पाच न्यूक्लियोटाइड्स (CTAAT) डिलीशनचा समावेश आहे, परिणामी कोडॉन 1679 वर टायरोसिनने अमीनो अॅसिड ल्युसीनची जागा घेतली आणि अंदाजित पर्यायी स्टॉप कोडॉनसह ट्रान्सलेशन फ्रेमशिफ्टमुळे अकाली प्रथिने ट्रंकेशन होते. इतर सर्व बदल फक्त एकाच प्रकरणात आढळतात. उल्लेखनीय म्हणजे, नोंदवलेल्या PVs पैकी एक स्प्लिस साइट कॉन्सेन्सस प्रदेशात (c.4357+1G>T) स्थित होता (तक्ता 1).
BRCA2 PV बद्दल, आम्हाला 6 डिलीशन, 6 SNV आणि 2 डुप्लिकेशन आढळले. आढळलेले कोणतेही बदल नवीन नाहीत. आमच्या लोकसंख्येमध्ये तीन उत्परिवर्तन पुनरावृत्ती झाले, c.428dup आणि c.8487+1G>A 3 विषयांमध्ये आढळले, त्यानंतर c.5851_5854delAGTT दोन प्रकरणांमध्ये पुनर्प्राप्त केले गेले. c.428dup बदलामध्ये BRCA2 च्या एक्सॉन 5 मध्ये C ची पुनरावृत्ती समाविष्ट आहे, ज्यामुळे कापलेल्या, नॉन-फंक्शनल प्रोटीनला एन्कोड करण्याचा अंदाज आहे. c.8487+1G> उत्परिवर्तन BRCA2 इंट्रॉन 19 (± 1,2) च्या इंट्रोनिक प्रदेशात होते आणि स्प्लिसिंग कॉन्सेन्सिस अनुक्रमावर परिणाम करते, परिणामी बदललेले स्प्लिसिंग होते ज्यामुळे असामान्य किंवा अनुपस्थित प्रथिने होतात. c.5851_5854delAGTT रोगजनक प्रकार हा कोडिंग एक्सॉन 10 मधील न्यूक्लियोटाइड पोझिशन्स 5851 ते 5854 पर्यंत 4-न्यूक्लियोटाइड डिलीशनमुळे होतो. BRCA2 जनुक आणि परिणामी अंदाजित पर्यायी स्टॉप कोडॉन (p.S1951WfsTer) सह ट्रान्सलेशनल फ्रेमशिफ्ट होते. उल्लेखनीय म्हणजे, आधी सांगितल्याप्रमाणे, c.631G>A आणि c.7008-2A>T हे दोन्ही बदल एकाच रुग्णात आढळले.34 पहिल्या उत्परिवर्तनात BRCA2 एक्सॉन 7 मधील अॅडेनोसिन (A) ची जागा ग्वानिन (G) असलेल्या न्यूक्लियोटाइडने घेतली जाते ज्यामुळे कोडॉन 211 वर व्हॅलिन आयसोल्युसीनमध्ये बदलते, आयसोल्युसीन अमिनो आम्ल हे अत्यंत समान गुणधर्म असलेले अमिनो आम्ल आहे. हा बदल सामान्य mRNA स्प्लिसिंगवर परिणाम करतो. दुसरा प्रकार एका अंतर्निहित प्रदेशात स्थित आहे आणि BRCA2 एन्कोड करणाऱ्या जनुकाच्या एक्सॉन 13 च्या आधी थायमिन (T) च्या दुहेरी A प्रतिस्थापनात परिणाम करतो. c.7008-2A>T बदल वेगवेगळ्या लांबीच्या अनेक ट्रान्सक्रिप्ट्स निर्माण करू शकतो. शिवाय, BRCA2 PVs च्या गटात, 18 पैकी 4 बदल (22.2%) होते अंतर्मुखी.
त्यानंतर आम्ही कार्यात्मक डोमेन आणि प्रथिने-बंधन क्षेत्रांमध्ये BRCA1/2 हानिकारक उत्परिवर्तनांचे मॅपिंग केले (आकृती 4). BRCA1 जनुकामध्ये, 50% PV स्तनाच्या कर्करोगाच्या क्लस्टर प्रदेशात (BCCR) स्थित होते, तर 22% उत्परिवर्तन गर्भाशयाच्या कर्करोगाच्या क्लस्टर प्रदेशात (OCCR) स्थित होते (आकृती 4A). BRCA2 PV मध्ये, 35.7% प्रकार BCCR प्रदेशात आणि 42.8% उत्परिवर्तन OCCR मध्ये स्थित होते (आकृती 4B). पुढे, आम्ही BRCA1 आणि BRCA2 प्रोटीन डोमेनमधील PV चे स्थान मूल्यांकन केले. BRCA1 प्रथिनासाठी, आम्हाला लूप आणि कॉइल केलेल्या कॉइल डोमेनमध्ये तीन PV आणि BRCT डोमेनमध्ये दोन उत्परिवर्तन आढळले (आकृती 4A). BRCA2 प्रथिनासाठी, 4 PV BRC रिपीट डोमेनमध्ये मॅप केले गेले, तर 3 इंट्रोनिक आणि 3 एक्सोनिक बदल ऑलिगो/ऑलिगोसॅकराइड-बंधन (OB) आणि टॉवर (T) डोमेनमध्ये आढळले (आकृती 4B).
आकृती ४ BRCA1 आणि BRCA2 प्रथिनांचे योजनाबद्ध प्रतिनिधित्व आणि रोगजनक प्रकारांचे स्थानिकीकरण. ही आकृती स्तनाच्या कर्करोगाच्या रुग्णांमध्ये BRCA1 (A) आणि BRCA2 (B) रोगजनक प्रकारांचे वितरण दर्शवते. एक्सोनिक उत्परिवर्तन निळ्या रंगात दाखवले आहेत, तर इंट्रोनिक प्रकार नारंगी रंगात दाखवले आहेत. बारची उंची प्रकरणांची संख्या दर्शवते. BRCA1 आणि BRCA2 प्रथिने आणि त्यांचे कार्यात्मक डोमेन नोंदवले आहेत.(A) BRCA1 प्रथिनमध्ये लूप डोमेन (RING) आणि न्यूक्लियर लोकलायझेशन सिक्वेन्स (NLS), कॉइल-कॉइल डोमेन, एक SQ/TQ क्लस्टर डोमेन (SCD) आणि एक BRCA1 C-टर्मिनल डोमेन (BRCT) असते.(B) BRCA2 प्रथिनमध्ये आठ BRC रिपीट्स, हेलिकल डोमेन (हेलिकल) असलेले DNA-बाइंडिंग डोमेन, तीन ऑलिगोन्यूक्लियोटाइड/ऑलिगोसॅकराइड-बाइंडिंग (OB) फोल्ड्स, एक टॉवर डोमेन (T) आणि C बाजूला एक NLS असतात. ब्रेस्ट कॅन्सर क्लस्टर रीजन (BCCR) आणि ओव्हेरियन कॅन्सर क्लस्टर रीजन (OCCR) नावाचे क्षेत्र येथे दाखवले आहेत. तळाशी.* स्टॉप कोडॉन निश्चित करणारे उत्परिवर्तन दर्शवते.
त्यानंतर आम्ही बीसी क्लिनिकोपॅथॉलॉजिकल वैशिष्ट्यांचा तपास केला जे बीआरसीए१/२ पीव्हीच्या उपस्थितीशी संबंधित असू शकतात. १८१ बीआरसीए१/२-निगेटिव्ह रुग्ण (वाहक नसलेले) आणि सर्व वाहकांसाठी (n = ३५) संपूर्ण क्लिनिकल रेकॉर्ड उपलब्ध होते. ट्यूमर प्रसार दर आणि ग्रेड यांच्यात एक संबंध होता.
आमच्या गटाच्या मध्यकाच्या आधारे आम्ही Ki-67 चे वितरण मोजले (25%, श्रेणी <10-90%). Ki-67 < 25% असलेल्या विषयांना "कमी Ki-67" म्हणून परिभाषित केले गेले, तर ≥ 25% मूल्य असलेल्या व्यक्तींना "उच्च Ki-67" मानले गेले. नॉन-वाहक आणि BRCA1 PV वाहकांमध्ये महत्त्वपूर्ण Ki-67 फरक (p<0.01) आढळले (आकृती 5A).
आकृती ५ BRCA1 आणि BRCA2 PV असलेल्या आणि नसलेल्या स्तनाच्या कर्करोगाच्या महिलांमध्ये ग्रेड वितरणाशी Ki-67 चा सहसंबंध. (A) BRCA1 (18) किंवा BRCA2 (17) PV रुग्णांच्या तुलनेत 181 नॉन-कॅरियर BC रुग्णांमध्ये मध्यवर्ती Ki-67 मूल्ये दर्शविणारा बॉक्सप्लॉट. 0.5 पेक्षा कमी P मूल्ये सांख्यिकीयदृष्ट्या महत्त्वपूर्ण मानली गेली. (B) BRCA1 आणि BRCA2 उत्परिवर्तन स्थिती (WT विषय, BRCA1 आणि BRCA2 PV वाहक) नुसार BC कर्करोगाच्या रुग्णांना हिस्टोलॉजिकल ग्रेड गटांमध्ये (G2 आणि G3) नियुक्त करण्याचे प्रतिनिधित्व करणारा हिस्टोग्राम.
त्याचप्रमाणे, आम्ही ट्यूमर ग्रेड BRCA1/2 PV च्या उपस्थितीशी संबंधित आहे का ते तपासले. आमच्या लोकसंख्येत G1 BC अनुपस्थित असल्याने, आम्ही रुग्णांना दोन गटांमध्ये विभागले (G2 किंवा G3). Ki-67 निकालांशी सुसंगत, विश्लेषणाने ट्यूमर ग्रेड आणि BRCA1 उत्परिवर्तन यांच्यातील सांख्यिकीयदृष्ट्या महत्त्वपूर्ण सहसंबंध उघड केला, ज्यामध्ये नॉन-वाहकांच्या तुलनेत BRCA1 वाहकांमध्ये G3 ट्यूमरचे प्रमाण जास्त होते (p<0.005) (आकृती 5B).
डीएनए सिक्वेन्सिंग तंत्रज्ञानातील प्रगतीमुळे BRCA1/2 अनुवांशिक चाचणीमध्ये अभूतपूर्व प्रगती झाली आहे, ज्याचे कर्करोगाचा कौटुंबिक इतिहास असलेल्या रुग्णांसाठी महत्त्वपूर्ण परिणाम आहेत. आजपर्यंत, अमेरिकन सोसायटी ऑफ मेडिकल जेनेटिक्स 35 आणि ENIGMA प्रणालीनुसार अंदाजे 20,000 BRCA1/2 प्रकार ओळखले गेले आहेत आणि त्यांचे वर्गीकरण केले गेले आहे.35,36 हे सर्वज्ञात आहे की BRCA1/2 उत्परिवर्तन स्पेक्ट्रम भौगोलिक प्रदेशांमध्ये मोठ्या प्रमाणात बदलतो.37 इटलीमध्ये, BRCA1/2 PVs चा दर 8% ते 37% पर्यंत होता, जो देशांतर्गत व्यापक परिवर्तनशीलता दर्शवितो.38,39 जवळजवळ 5 दशलक्ष लोकसंख्येसह, सिसिली हा रहिवाशांच्या संख्येच्या बाबतीत इटलीतील पाचवा सर्वात मोठा प्रदेश आहे. पश्चिम सिसिलीमध्ये BRCA1/2 च्या वितरणाबद्दल डेटा अस्तित्वात असला तरी, बेटाच्या पूर्वेकडील भागात कोणतेही विस्तृत पुरावे नाहीत.
आमचा अभ्यास पूर्व सिसिलीमधील बीसी रुग्णांमध्ये बीआरसीए१/२ पीव्हीच्या घटनांवरील पहिल्या अहवालांपैकी एक आहे.२८ आम्ही आमचे विश्लेषण बीसीवर केंद्रित केले, कारण हा आमच्या गटातील सर्वात सामान्य आजार आहे.
३८९ बीसी रुग्णांची चाचणी करताना, ९% रुग्णांमध्ये BRCA1/2 PV होते, जे BRCA1 आणि BRCA2 मध्ये समान प्रमाणात वितरित केले गेले. हे निकाल इटालियन लोकसंख्येमध्ये पूर्वी नोंदवलेल्या निकालांशी सुसंगत आहेत.२८ मनोरंजक म्हणजे, आमच्या गटातील ३% (१३/३८९) पुरुष होते. पुरुष स्तनाच्या कर्करोगासाठी हा दर अपेक्षेपेक्षा जास्त आहे (सर्व बीसींपैकी १%),४० बीआरसीए१/२ उत्परिवर्तन जोखमीवर आधारित आमच्या लोकसंख्येच्या निवडीचे प्रतिबिंब. तथापि, यापैकी कोणत्याही पुरुषात BRCA1/2 PV विकसित झाला नाही, म्हणून ते PALB2, RAD51C आणि D सारख्या कमी सामान्य उत्परिवर्तनांची उपस्थिती नाकारण्यासाठी पुढील आण्विक विश्लेषणासाठी उमेदवार होते. BRCA2 VUS स्पष्ट असलेल्या ७% विषयांमध्ये अनिश्चित महत्त्वाचे प्रकार पुनर्प्राप्त केले गेले. हा निकाल देखील पूर्व-अस्तित्वात असलेल्या पुराव्यांशी सुसंगत आहे.२८,४१,४२
जेव्हा आम्ही BRCA1/2 उत्परिवर्ती महिलांमध्ये BC आण्विक उपप्रकारांच्या वितरणाचे विश्लेषण केले तेव्हा आम्हाला TNBC आणि BRCA1 PV (58.8%) आणि ल्युमिनल B BC आणि BRCA2 PV (55.6%) यांच्यातील ज्ञात संबंधांची पुष्टी झाली.16,43 BRCA1 आणि BRCA2 PV वाहकांमधील ल्युमिनल A आणि HER2+ ट्यूमर विद्यमान साहित्य डेटाशी सुसंगत आहेत.16,43
त्यानंतर आपण BRCA1/2 PV च्या प्रकार आणि स्थानावर लक्ष केंद्रित करतो. आमच्या गटात, सर्वात सामान्य BRCA1 PV c.5035_5039delCTAAT होता. जरी Incorvaia et al. त्यांच्या सिसिलियन गटात या प्रकाराचे वर्णन केले नाही, इतर लेखकांनी ते जर्मलाइन BRCA1 PV म्हणून नोंदवले आहे.34 आमच्या गटात अनेक BRCA1 PV आढळले - उदा. c.181T>G, c.514del, c.3253dupA आणि c.5266dupC - जे सिसिलीमध्ये आढळले आहेत.28 यापैकी, दोन BRCA1 संस्थापक उत्परिवर्तन (c.181T>G आणि c.5266dupC) सामान्यतः पूर्व आणि मध्य युरोप (पोलंड, चेक), स्लोव्हेनियन, ऑस्ट्रियन, हंगेरियन, बेलारूसी आणि जर्मन) मधील अश्केनाझी ज्यूंमध्ये आढळतात, 44,45 आणि, युनायटेड स्टेट्स आणि अर्जेंटिनामध्ये, अलीकडेच BC आणि OC असलेल्या इटालियन रुग्णांमध्ये "पुनरावर्ती जर्मलाइन प्रकार" म्हणून परिभाषित केले गेले. 34c.514del प्रकार पूर्वी उत्तर सिसिलीमधील पालेर्मो आणि मेसिना येथील 8 स्तनाच्या कर्करोगाच्या रुग्णांमध्ये ओळखला गेला होता. मनोरंजक म्हणजे, अगदी इंकोर्व्हाया आणि इतर. कॅटानियामधील काही कुटुंबांमध्ये c.3253dupA प्रकार आढळला.28 सर्वात जास्त प्रतिनिधित्व करणारे BRCA2 PVs म्हणजे c.428dup, c.5851_5854delAGTT आणि अंतर्निहित प्रकार c.8487+1G>A, जे अधिक तपशीलवार नोंदवले गेले आहेत 28 पालेर्मोमधील c.428dup, c.5851_5854delAGTT असलेल्या रुग्णात वायव्य सिसिलीमधील घरांमध्ये, प्रामुख्याने ट्रापानी आणि पालेर्मो प्रदेशांमध्ये PV आढळून आला, तर c.5851_5854delAGTT PV वायव्य सिसिलीमधील घरांमध्ये आढळून आला.8487+1G>A प्रकार मेसिना, पालेर्मो आणि कॅल्टनिसेटा येथील विषयांमध्ये अधिक सामान्य होता.28 रेबेक आणि इतर. कोलंबियामध्ये c.5851_5854delAGTT बदलाचे पूर्वी वर्णन केले आहे.37 सिसिली (अ‍ॅग्रिजेंटो, सिराकुसा आणि रगुसा) येथील BC आणि OC रुग्णांमध्ये आणखी एक BRCA2 PV, c.631+1G>A आढळला आहे.28 उल्लेखनीय म्हणजे, आम्ही त्याच रुग्णात दोन BRCA2 प्रकारांचे (BRCA2 c.631G>A आणि c.7008-2A>T) सहअस्तित्व पाहिले, जे आम्ही पूर्वी नोंदवल्याप्रमाणे cis मोडमध्ये वेगळे केले असल्याचे गृहीत धरले होते.34,46 हे BRCA2 uble उत्परिवर्तन खरोखरच इटालियन प्रदेशात वारंवार पाहिले जातात आणि अकाली स्टॉप कोडॉन सादर करताना आढळले आहेत, ज्यामुळे मेसेंजर RNA स्प्लिसिंगवर परिणाम होतो आणि BRCA2 प्रथिने अयशस्वी होतात.47,48
आम्ही प्रथिने डोमेन आणि जीन्सच्या संभाव्य OCCR आणि BCCR क्षेत्रांमध्ये BRCA1 आणि BRCA2 PVs देखील मॅप केले. रेबेक आणि इतरांनी या क्षेत्रांचे वर्णन अनुक्रमे डिम्बग्रंथि आणि स्तनाच्या कर्करोगासाठी जोखीम क्षेत्र म्हणून केले होते.49 तथापि, जर्मलाइन प्रकारांचे स्थान आणि स्तन किंवा गर्भाशयाच्या कर्करोगाच्या जोखमीमधील संबंधांबद्दलचे पुरावे वादग्रस्त आहेत.28,50-52 आमच्या लोकसंख्येमध्ये, BRCA1 PVs प्रामुख्याने BCCR प्रदेशात स्थित होते, तर BRCA2 PVs प्रामुख्याने OCCR प्रदेशात स्थित होते.तथापि, आम्हाला संभाव्य OCCR आणि BCCR प्रदेश आणि BC वैशिष्ट्यांमध्ये कोणताही संबंध सापडला नाही. हे BRCA1/2 उत्परिवर्तन असलेल्या रुग्णांच्या मर्यादित संख्येमुळे असू शकते.प्रथिन डोमेनच्या दृष्टिकोनातून, BRCA1 PVs संपूर्ण प्रथिनांसह वितरित केले जातात आणि BRCA2 बदल प्राधान्याने BRC पुनरावृत्ती डोमेनमध्ये आढळतात.
शेवटी, आम्ही बीसी क्लिनिकोपॅथॉलॉजिकल वैशिष्ट्यांचा बीआरसीए१/२ पीव्हीशी संबंध जोडला. मर्यादित संख्येतील रुग्णांमुळे, आम्हाला केआय-६७ आणि ट्यूमर ग्रेडमध्ये फक्त एक महत्त्वाचा सहसंबंध आढळला. की-६७ चे मूल्यांकन आणि व्याख्या काहीशी वादग्रस्त राहिली असली तरी, हे निश्चित आहे की उच्च प्रजनन दर रोगाच्या पुनरावृत्तीच्या वाढीव जोखमीशी आणि जगण्याच्या घटण्याशी संबंधित आहेत. आजपर्यंत, "उच्च" आणि "कमी" की-६७ मध्ये फरक करण्यासाठी कटऑफ २०% आहे. तथापि, हा उंबरठा आमच्या बीआरसीए१/२ उत्परिवर्तन रुग्णांच्या लोकसंख्येवर लागू होत नाही, ज्याचे सरासरी केआय-६७ मूल्य २५% आहे. उच्च केआय-६७ दरांमधील हा ट्रेंड आमच्या ल्युमिनल बी आणि टीएनबीसी गटांमधील प्रचलिततेद्वारे स्पष्ट केला जाऊ शकतो, ज्यापैकी काही ल्युमिनल ए ट्यूमर उपस्थित होते. तथापि, काही पुरावे असे सूचित करतात की उच्च केआय-६७ कटऑफ (२५-३०%) रुग्णांना त्यांच्या रोगनिदानानुसार चांगले स्तरीकृत करू शकते.५३,५४ आमच्या विश्लेषणाच्या निकालांवरून, एक महत्त्वपूर्ण सहसंबंध आश्चर्यकारक नाही. उच्च दरम्यान उद्भवते Ki-67 आणि ग्रेड आणि BRCA1 PV ची उपस्थिती. खरं तर, BRCA1-संबंधित ट्यूमर हे TNBC चे वैशिष्ट्यपूर्ण आहेत आणि अधिक आक्रमक वैशिष्ट्ये प्रदर्शित करतात.16,17
शेवटी, हा अभ्यास पूर्व सिसिलीमधील बीसी गटात बीआरसीए१/२ च्या उत्परिवर्तन स्थितीचा अहवाल प्रदान करतो. एकूणच, आमचे निष्कर्ष बीसीमध्ये उत्परिवर्तनाच्या प्रसाराच्या आणि क्लिनिकोपॅथॉलॉजिकल वैशिष्ट्यांच्या बाबतीत, पूर्वी अस्तित्वात असलेल्या पुराव्यांशी सुसंगत आहेत. बीआरसीए१/२-उत्परिवर्तित बीसी रुग्णांच्या मोठ्या लोकसंख्येमध्ये अधिक अभ्यास, जसे की मल्टीजीनोम एक्सपांडेड म्युटेशनल विश्लेषण वापरणे, बीआरसीए१/२ पेक्षा वेगळ्या आणि कमी वारंवार असलेल्या पीव्हीच्या उपस्थितीचे मूल्यांकन करण्यासाठी आवश्यक आहे. यामुळे अनुवांशिक उत्परिवर्तनांमुळे कर्करोगाचा धोका वाढणाऱ्या विषयांची ओळख पटवणे आणि योग्य व्यवस्थापन करणे शक्य होईल.
आम्ही पुष्टी केली की रुग्णांनी त्यांच्या ट्यूमरचे नमुने संशोधनाच्या उद्देशाने गुप्तपणे जाहीर करण्यासाठी सूचित संमतीवर स्वाक्षरी केली. हेलसिंकीच्या घोषणेनुसार सर्व रुग्णांनी लेखी सूचित संमतीवर स्वाक्षरी केली. AOU Policlinico “G.Rodolico – S.Marco” च्या धोरणानुसार, या अभ्यासाला नैतिक पुनरावलोकनातून सूट देण्यात आली कारण BRCA1/2 विश्लेषण क्लिनिकल प्रॅक्टिसनुसार केले गेले होते आणि सर्व रुग्णांनी लेखी सूचित संमती दिली होती. रुग्ण त्यांच्या डेटाचा संशोधनाच्या उद्देशाने वापर करण्यास देखील संमती देतात.
नीतिमत्ता समितीने विनंती केल्यानुसार स्तनाच्या कर्करोगाच्या रुग्णांच्या काळजीसाठी प्रो. पाओलो विग्नेरी यांनी केलेल्या मदतीबद्दल आम्ही त्यांचे आभार मानतो.
फेडेरिका मार्टोराना इस्टिटुटो जेंटिली, एली लिली, नोव्हार्टिस, फायझर यांच्याकडून मानधनाची तक्रार करतात. इतर लेखकांनी या कामात कोणतेही हितसंबंधांचे संघर्ष नसल्याचे जाहीर केले आहे.
१. सुंग एच, फेर्ले जे, सिगेल आरएल, इत्यादी. जागतिक कर्करोग सांख्यिकी २०२०: ग्लोबोकॅन जगभरातील १८५ देशांमध्ये ३६ कर्करोगांच्या घटना आणि मृत्युदराचा अंदाज लावतो. सीए कर्करोग जे क्लिन.२०२१;७१(३):२०९-२४९.डोई: १०.३३२२/सीएएसी.२१६६०