Javascript қазір браузеріңізде өшірілген. Бұл веб-сайттың кейбір мүмкіндіктері JavaScript өшірілген кезде жұмыс істемейді.
Арнайы мәліметтерді және қызығушылық тудыратын нақты дәрі-дәрмекпен тіркеліңіз, біз сіз берген ақпаратты біздің кең дерекқорымыздағы мақалалармен сәйкестендіреміз және сізге PDF көшірмесін дереу электрондық пошта арқылы жібереміз.
Стелла С, Витале СР, Марторана Ф, Массимино М, Павоне Д, Ланзафаме К, Бианка С, Барон С, Горгоне С, Фичера М, Манзелла Л.
Стефания Стелла, 1,2 Сильвия Рита Витале, 1,2 Федерика Марторана, 1,2 Мишель Массимино, 1,2 Джулиана Павоне, 3 Катя Ланзафаме, 3 Себастьяно Бианка, 4 Чиара Бароне, 5 Кристина Горгоне, 6 Марко Фичера Лицелина және Эксперименттік медицина, Катания университеті, Катания, 95123, Италия;2 Эксперименттік онкология және гематология орталығы, AOU Policlinico «G.Rodolico – San Marco», Катания, 95123, Италия; 3 Медициналық онкология, AOU Policlinico «G. Rodolico – San Marco», Катания, 95123, Италия; 4 Медициналық генетика, ARNAS Garibaldi, Катания, 95123, Италия; 5 Medicine Genetics, ASP, Syracuse, 96100, Италия; 6 Биомедициналық және биотехнология ғылымдары бөлімі, Катания университеті, медициналық генетика, Катания, Италия, 95123; 7Oasi Research Institute-IRCCS, Троина, 94018, Италия Байланыс: Стефания Стелла, тел +39 095 378 1946, электрондық пошта [email protected]; [email protected] Мақсаты: BRCA1 және BRCA2 және анықталған сүт безі қатерлі ісігіндегі (BC), аналық бездегі (OC) және басқа да қатерлі ісік ауруының өмірлік қаупімен байланысты ұрық сызығының мутациялары. BRCA генін сынау жеке тәуекелді бағалаудың, сондай-ақ сау тасымалдаушыларда алдын алу әдістерін табудың және қатерлі ісікпен ауыратын науқастарда емдеу әдістерін таңдаудың кілті болып табылады. аймақтарда және Сицилиялық отбасылардағы BRCA патогендік нұсқалары туралы деректер бар болғанымен, шығыс Сицилияның популяцияларына арнайы бағытталған зерттеулер жетіспейді. Біздің зерттеуіміздің мақсаты шығыс Сицилиядан келген BC пациенттерінің когортында BRCA патогенді ұрық сызығының өзгерістерінің таралуын және таралуын зерттеу және олардың келесі генерациялану траекторияларымен байланысын бағалау болды. Ісік дәрежесімен және пролиферация индексімен корреляцияланған. НӘТИЖЕЛЕР: Жалпы, 35 пациентте (9%) BRCA патогенді нұсқасы болды, BRCA1-де 17 (49%) және BRCA2-де 18 (51%). BRCA1 өзгерістері үш есе теріс BC пациенттерінде жиі кездеседі, ал BRCA2-мен ауыратын науқастарда жиі кездеседі. BRCA1 нұсқалары бар субъектілердің ісік дәрежесі және пролиферативті индексі айтарлықтай жоғары болды. Қорытындылар: Біздің қорытындыларымыз шығыс Сицилияның BC пациенттеріндегі BRCA мутациялы күйіне шолу жасайды және тұқым қуалайтын BC бар науқастарды анықтаудағы NGS талдауының рөлін растайды. Жалпы алғанда, бұл деректер BRCA мутациясының профилактикалық скринингін қолдайтын алдыңғы дәлелдермен сәйкес келеді.
Сүт безі обыры (BC) дүние жүзінде ең көп таралған қатерлі ісік және әйелдердегі ең өлімге әкелетін қатерлі ісік болып табылады.1 BC болжамы мен клиникалық мінез-құлқын анықтайтын биологиялық ерекшеліктер уақыт өте кең көлемде зерттеліп, ішінара түсіндірілді. Іс жүзінде қазіргі уақытта БК-ны әртүрлі молекулалық кіші типтерге жіктеу үшін бірнеше суррогат маркерлер қолданылады. Олар адамда (ER) және эстроген (РР) процепторлары), эпидермальды өсу факторының рецепторы 2 (HER2) күшейту, Ki-67 пролиферация индексі және ісік дәрежесі (G). Бұл айнымалылардың комбинациясы келесі BC санаттарын анықтады: 1) ER және/немесе PgR экспрессиясын көрсететін люминальды ісіктер BCs 75% құрады. Бұл ісіктер әрі қарай Luminal A және Ki-HER27-ге бөлінген кезде- теріс, және Luminal B, Ki-67 20% тең немесе одан жоғары болған кезде және пролиферация индексіне қарамастан HER2 күшейту болған кезде; 2) ER және PgR теріс, бірақ HER2 күшейтуін көрсететін HER2+ ісіктері. Бұл топ барлық сүт безі ісіктерінің 10% құрайды; 3) ER және PgR экспрессиясын және HER2 күшейтуін көрсетпейтін үштік теріс сүт безі обыры (TNBC) сүт безі қатерлі ісігінің шамамен 15% құрайды.2-4
Осы BC қосалқы түрлерінің ішінде ісік дәрежесі мен пролиферация индексі ісік агрессивтілігімен және болжамымен тікелей және тәуелсіз байланысты болатын көлденең қималық биомаркерлерді білдіреді.5,6
Жоғарыда аталған биологиялық ерекшеліктерге қоса, соңғы бірнеше жылда BC дамуына әкелетін тұқым қуалайтын генетикалық өзгерістердің рөлі барған сайын маңызды бола бастады.7 Сүт безінің 10 ісігінің 1-ге жуығы нақты гендердегі ұрық сызықтарының өзгеруіне байланысты тұқым қуалайды.8 180 000-нан астам әйелдерді қамтитын екі үлкен эпидемиологиялық зерттеу (жақында анықталған, AARD, e. BRCA1, BRCA2, CHK2, PALB2, RAD51C және RAD51D) негізінен тұқым қуалайтын BC үшін жауапты. Осы гендердің ішінде BRCA1 және BRCA2 (бұдан әрі - BRCA1/2) сүт безі ісіктерінің дамуымен ең күшті корреляцияны көрсетті. BC, сондай-ақ аналық без, қуық асты безі, ұйқы безі, колоректальды және меланоманы қоса, басқа қатерлі ісіктердің өмір бойына қаупі. 13 жастан 80 жасқа дейін БК-ның жиынтық жиілігі BRCA1 патогенді нұсқасы (PV) бар әйелдерде 72% және BRCA142 бар әйелдерде 69% құрайды.
Атап айтқанда, жақында жарияланған BC қаупі PV түріне байланысты деп болжайды. Шындығында, патогенді қысқарту нұсқаларымен салыстырғанда, айқын қате нұсқалар, әсіресе BRCA1 генінде, әсіресе егде жастағы әйелдерде BC қаупінің төмендеуімен байланысты.15
BRCA1 немесе BRCA2 PV болуы әртүрлі биологиялық және клиникопатологиялық ерекшеліктермен байланысты болды.16,17 BRCA1-ассоциацияланған BCs әдетте клиникалық агрессивті, нашар сараланған және жоғары пролиферативті болып табылады. Бұл ісіктер әдетте үш есе теріс және ерте басталады. жақсы сараланған дәрежелер және ауыспалы пролиферативті индекстер. Бұл ісіктер В люменінде жиі кездеседі және әдетте егде жастағы адамдарда кездеседі.16-18 Атап айтқанда, BRCA1 және BRCA2 мутациялары арнайы емдеуге, соның ішінде платина тұздарына және поли(ADP-рибоза) полимераза (PAR19) тежегіштері (PAR29) сияқты мақсатты препараттарға сезімталдықты арттырады.
Соңғы бірнеше жыл ішінде клиникалық тәжірибеде келесі ұрпақ секвенциясын (NGS) енгізу BC пациенттерінің санының артуы қатерлі ісікке бейімділік синдромдарына, соның ішінде BRCA1/2.21-ге молекулалық тестілеуден өтуге мүмкіндік берді. Сонымен қатар, отбасылық тарихқа, демографиялық және клиникалық патологиялық сипаттамаларға сәйкес нақты критерийлерге негізделген анықтамалар BRCA12 жақсырақ анықтауға тұрарлық. тестілеу.22,23 Осы тұрғыда географиялық аймақтардағы айырмашылықтарды көрсететін нақты популяциялардағы BRCA1/2 скринингі бойынша дәлелдер жинақталуда.24–27 Сицилияның батысындағы BC когорты туралы есептер болғанымен, Сицилияның шығысындағы популяцияда BRCA1/2 скринингі туралы деректер азырақ.28,29
Біз мұнда шығыс Сицилияның BC пациенттеріндегі BRCA1/2 ұрық сызығы скринингінің нәтижелерін сипаттаймыз, BRCA1 немесе BRCA2 мутацияларының болуын осы ісіктердің негізгі клиникопатологиялық ерекшеліктерімен одан әрі корреляциялаймыз.
Катаниядағы Родолико-Сан-Марко поликлинико госпиталіндегі «Эксперименталды онкология және гематология орталығында» ретроспективті зерттеу жүргізілді. 2017 жылдың қаңтарынан 2021 жылдың наурызына дейін сүт безі мен аналық безі, меланомасы, ұйқы безі немесе қуық асты безі обыры бар барлығы 455 науқас біздің CABR диагностикасына жіберілді. генетикалық тестілеу. Бұл зерттеу Хельсинки Декларациясына сәйкес жүргізілді және барлық қатысушылар молекулалық талдау алдында жазбаша ақпараттандырылған келісімін берді.
BC гистологиялық және биологиялық сипаттамалары (ER, PgR, HER2 күйі, Ki-67 және дәрежесі) тек агрессивті ісік компоненттерін ескере отырып, негізгі биопсия немесе хирургиялық үлгілер бойынша бағаланды. Осы сипаттамалар негізінде BCs келесідей жіктеледі: люминальды A (ER+ және/немесе PgR+, HER2-% және Ki-ER, HER2-%, B/0-), PgR+, HER2-, Ki-67≥20%), люминальды B-HER2+ (ER және/немесе PgR+, HER2+), HER2+ (ER және PgR-, HER2+) немесе үштік теріс (ER және PgR-, HER2-).
BRCA1 және BRCA2 мутациясының күйін бағалау алдында онкологты, генетикті және психологты қамтитын мультидисциплинарлық топ BRCA1 және/немесе BRCA1 бар-жоғын анықтау үшін әрбір пациент үшін ісік генетикасы бойынша кеңес өткізді. немесе BRCA2 генінде PV қаупі жоғары адамдар. Пациенттерді таңдау Италия медициналық онкология қоғамының (AIOM) нұсқауларына және жергілікті сицилия ұсыныстарына сәйкес жүргізілді.30,31 Бұл критерийлерге мыналар кіреді: (i) сезімталдық гендеріндегі белгілі патогендік нұсқалардың отбасылық тарихы (мысалы, BRCA1, BRCA3TP, EN); (ii) BC бар еркектер; (iii) BC және OC барлар; (iv) BC <36 жаста, TNBC <60 жаста немесе екі жақты БК <50 жаста әйелдер; (v) БК <50 жыл және кем дегенде бір бірінші дәрежелі туысының жеке ауру тарихы: (а) БК < 50 жыл; (b) кез келген жастағы шырышты емес және шекаралық емес ОК; (c) екі жақты BC; (d) еркек BC; (е) ұйқы безінің қатерлі ісігі; (f) простата обыры; (vi) екі немесе одан да көп жеке анамнезінде BC > 50 жыл және отбасылық анамнезінде BC, OC немесе бір-бірімен бірінші дәрежелі туыстары (оның ішінде бірінші дәрежелі туыстары болып табылатын туыстары) үшін ұйқы безінің қатерлі ісігі; (vii) ОК және кем дегенде бір бірінші дәрежелі туысының жеке тарихы: (а) BC <50 жас; (b) ҰОК; (c) екі жақты BC; (d) еркек BC; (vii) жоғары дәрежелі серозды OC бар әйел.
Әрбір емделушіден 20 мл перифериялық қан үлгісі алынды және EDTA түтіктеріне (BD Biosciences) жиналды. Геномдық ДНҚ QIAsymphony DSP DNA Midi оқшаулау жинағы (QIAGEN, Hilden, Италия) арқылы өндірушінің нұсқауларына сәйкес 0,7 мл толық қан үлгілерінен бөлініп алынды және Fisher. Scientific, Waltham, MA, USA) Сандық анықтауды орындаңыз. Мақсатты байыту және кітапхананы дайындауды өндірушінің нұсқауларына сәйкес автоматтандырылған кітапхана дайындау үшін Ion AmpliSeq™ Chef Reagents DL8 жинағына жүктеуге дайын Oncomine™ BRCA Research Assay Chef жүзеге асырады. Жинақ барлық BRCA1 және (NMCA02) зерттеу үшін пайдалануға болатын екі мультиплексті ПТР праймер пулынан тұрады. (NM_000059.3) гендер. Қысқаша айтқанда, әрбір сұйылтылған ДНҚ үлгісінің 15 мкл (10 нг) кітапхананы дайындау үшін штрих-кодталған пластиналарға қосылды және барлық реагенттер мен шығын материалдары Ion Chef™ құралына жүктелді. Автоматтандырылған кітапхананы дайындау және штрих-кодталған үлгілер кітапханасын біріктіру, содан кейін Ion Library құралында бағаланған нөмірлер дайындалды. Qubit® 3.0 флюорометр (Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA, АҚШ) өндірушінің нұсқауларына сәйкес. Соңында, кітапханалар Ion Chef™ кітапханасының үлгі түтіктерінде (штрих-кодталған түтіктер) эквимолярлық қатынаста біріктіріліп, Ion Chef™ құралына жүктеледі. Секвенция Ion Chef™ құралына жүктеледі. (Thermo Fisher Scientific) Ion 510 чипін (Thermo Fisher Scientific) пайдаланып. Деректерді талдау Amplicon Suite (SmartSeq srl) және Ion Reporter Software арқылы орындалды.
Барлық нұсқа номенклатурасы Интернетте қолжетімді (HGVS, http://www.hgvs.org/mutnomen) Адам геномының өзгеру консорциумының ағымдағы нұсқауларына сәйкес болды. BRCA1/2 нұсқаларының клиникалық маңыздылығы ENIGMA халықаралық консорциумының (Evidence-Based Germ Network for Interpreting All Interpreting Germ Network) классификациясы арқылы анықталған. https://enigmaconsortium.org/) және ARUP, BRCAEXCHANGE, ClinVar, IARC_LOVD және UMD сияқты әртүрлі дерекқорларға кеңес беру. Жіктеу бес түрлі тәуекел санаттарын қамтиды: қатерсіз (I санат), ықтимал қатерсіз (II санат), белгісіз маңыздылық нұсқасы (VUS, BRCAEXCHANGE (санат III), ықтимал патогендік категория), V).VarSome сонымен қатар 30 дерекқорға кіру мүмкіндігі бар ақпараттық құрал - белок құрылымы мен қызметіне мутациялардың әсерін талдады.32
Әрбір VUS үшін әлеуетті клиникалық маңыздылықты тағайындау үшін келесі есептеуіш ақуызды болжау алгоритмдері пайдаланылды: MUTATION DASTER, 33 PROVEAN-SIFT (http://provean.jcvi.org/index.php), POLYPHEN-2 (http:// /genetics.bwh.harvard.edu/pph-DG) және Align-DG (http://agvgd.hci.utah.edu/agvgd_input.php). 1 және 2 класс ретінде жіктелген нұсқалар жабайы тип болып саналды.
Сэнгер секвенциясы әрбір патогендік нұсқаның болуын растады. Қысқаша айтқанда, BRCA1 және BRCA2 генінің анықтамалық тізбектерін (NG_005905.2, NM_007294.3 және NG_012772.3, NM_030, PC5 үшін нысаналы болды) пайдалану арқылы әрбір анықталған нұсқа үшін арнайы праймерлер жұбы құрастырылды. орындалады, одан кейін Сэнгер секвенциясы орындалады.
BRCA1/2 геніне теріс сыналған емделушілер өндірушінің нұсқауларына сәйкес үлкен геномдық қайта құрулардың (LGR) бар-жоғын бағалау үшін мультиплексті байланыстыруға тәуелді зонд күшейту (MLPA) арқылы сыналған. Қысқаша айтқанда, ДНҚ үлгілері денатуратталған және 60-қа дейін BRCA1 және BRCA2 гендері әр DNA60 спецификалық спецификасын анықтау үшін пайдаланылады. ұзындығы бойынша нуклеотидтер. ПТР ампликондарының бірегей жинағынан тұратын зонд күшейту өнімдері содан кейін капиллярлық электрофорез арқылы және Cofalyser.Net бағдарламалық құралымен сәйкес топтамаға тән Cofalyser кестелерімен (www.mrcholland.com) бірге талданды.
Таңдалған клиникопатологиялық айнымалылар (гистологиялық дәреже және Ki-67% пролиферация индексі) BRCA1/2 PV болуымен байланысты болды, Prism бағдарламалық құралының v. 8.4 көмегімен Фишердің p-мәні <0,05 мәнді деп болжайтын дәл сынағы арқылы есептелді.
2017 жылдың қаңтары мен 2021 жылдың наурызы аралығында 455 науқас ұрық сызығының BRCA1/2 мутациясына скринингтен өтті. Мутация сынағы Поликлинико ауруханасының Эксперименттік онкология және гематология орталығында жүргізілді. Сицилия нұсқаулығына сәйкес (http://www.gurs.regione/itcilia.sidic. 02-Venerdì 10 Gennaio 2020), Rodolico of Catania – San Marco» жалпы саны 389 науқас Сүт безі обыры, 37 аналық без обыры, 16 ұйқы безі обыры, 8 қуық асты безі обыры және 5 меланома. Пациенттердің ісік түріне және талдау нәтижелеріне қарай бөлінуі 1-суретте көрсетілген.
1-суретте зерттеуге шолу көрсетілген ағын диаграммасы көрсетілген. Сүт безі, меланома, ұйқы безі, простата немесе аналық без ісіктері бар емделушілер BRCA1 және BRCA2 гендерінің мутацияларына сыналған.
Қысқартулар: PVs, патогендік нұсқа; VUS, белгісіз мәнді нұсқа; WT, жабайы типті BRCA1/2 тізбегі.
Біз зерттеулерімізді сүт безі обыры когорттарына іріктеп бағыттадық. Пациенттердің орташа жасы 49 жас (диапазон 23-89) және негізінен әйелдер (n=376 немесе 97%) болды.
Осы субъектілердің 64-інде (17%) BRCA1/2 мутациялары болды және барлығы әйелдер болды. Отыз бесінде (9%) PV және 29-да (7,5%) VUS болды. 35 патогендік нұсқаның он жетеуі (48,6%) BRCA1-де және 18-де (51,4%) BRCA2-де (51,4%), ал 521-де (%12) кездеседі. (82,8%) BRCA2 (1 және 2-суреттер). LGR MLPA талдауында болған жоқ.
Сурет 2. Сүт безі обыры бар 389 емделушідегі BRCA1 және BRCA2 мутацияларының талдауы.(A) Сүт безі обыры бар 389 науқаста патогендік нұсқалардың (PV) (қызыл), белгісіз мәнді нұсқалардың (VUS) (қызғылт сары) және WT (көк) таралуы; (B) 389 сүт безі қатерлі ісігімен ауыратын науқастар Отыз бесінде (9%) BRCA1/2 патогендік нұсқалары (PVs) болды. Олардың ішінде 17 (48,6%) BRCA1 PV тасымалдаушылары (қара қызыл) және 18 (51,4%) BRCA2 тасымалдаушылары (ашық қызыл); (C) 389 субъектінің 29 (7,5%) VUS, 5 (17,2%) BRCA1 гендерін (қара қызғылт сары) және 24 (82,8%) BRCA2 гендерін (ашық қызғылт сары) тасымалдады.
Қысқартулар: PVs, патогендік нұсқа; VUS, белгісіз мәнді нұсқа; WT, жабайы типті BRCA1/2 тізбегі.
Келесі кезекте біз BRCA1/2 PV бар емделушілерде BC молекулалық субтиптерінің таралуын зерттедік. Бөлімге 2 (5,7%) люминальды А, 15 (42,9%) люминальды B, 3 (8,6%) люминальды B-HER2+, 2 (5,7%) HER2+ және 13 (37,7%) HER2+ және 13 (37,7%) TBC1BR позитивті пациенттер кірді. науқастарда 5 (29,4%) люминальды B BC, 2 (11,8%) - HER2+ ауруы және 10 (58,8%) TNBC болды. BRCA1 мутациялары жоқ ісіктер не люминальды А немесе люминальды B-HER2+ болды (3-сурет). BRCA2-оң топшасында 10 luminal5, B13 5,5 люминальды мутациялар. (16,7%) люминальды B-HER2+, 3 (16,7%) TNBC және 2 (11,1%) люминальды А болды (3-сурет ).Бұл топта HER2+ ісіктері болған жоқ. Осылайша, BRCA1 мутациялары TNBC пациенттерінде басым, ал BRCA2-нің жеке өзгерістері В люминдік.
3-сурет BRCA1 және BRCA2 патогендік нұсқалары бар емделушілерде сүт безі обырының қосалқы түрлерінің таралуы. Сүт безі обырына шалдыққан науқастардың молекулалық кіші түрлері арасында BRCA1- (қара қызыл) және BRCA2- (ашық қызыл) PVs таралуын көрсететін гистограммалар. Әр қорапта берілген сандар BRCA21 және әрбір BRCAPV субтипі үшін сүт безі обыры бар науқастардың пайызын білдіреді.
Қысқартулар: PVs, патогендік нұсқа; HER2+, адамның эпидермиялық өсу факторы рецепторы 2 оң; TNBC, үштік теріс сүт безі қатерлі ісігі.
Кейіннен біз BRCA1 және BRCA2 PVs түрі мен генінің локализациясын бағаладық. BRCA1 PV-де біз 7 жалғыз нуклеотидтік нұсқаны (SNV), 6 жоюды, 3 қайталауды және 1 кірістіруді байқадық. Тек бір мутация (c.5522delG) BRCA PV-да жаңа ашылымды көрсетеді. c.5035_5039delCTAAT. Бұл өзгеріс BRCA1 15 экзонындағы бес нуклеотидтің (CTAAT) жойылуын қамтиды, нәтижесінде амин қышқылы лейцинді 1679 кодонында тирозинмен алмастырады және трансляция шеңберінің ауысуына байланысты болжамды балама тоқтату кодондық протеиндерінде бір ғана басқа өзгерістер анықталады. Айта кетейік, хабарланған PV-лардың бірі қосылыс орнындағы консенсус аймағында (c.4357+1G>T) орналасқан (1-кесте).
BRCA2 PV қатысты, біз 6 жоюды, 6 SNV және 2 қайталауды байқадық. Табылған өзгерістердің ешқайсысы жаңа емес. Біздің популяцияда үш мутация қайталанды, c.428dup және c.8487+1G>A 3 субъектіде байқалды, одан кейін c.5851_5854delAGTT2-де екі қайталану. BRCA2-нің 5-экзонындағы C қайталануын қамтиды, кесілген, жұмыс істемейтін ақуызды кодтайды. c.8487+1G>A мутация BRCA2 интронының 19 интрондық аймағында (± 1,2) орын алады және сплайсинг консенсус тізбегіне әсер етеді, нәтижесінде аномальді спликацияға немесе ақуыздың өзгеруіне әкеледі. c.5851_5854delAGTT патогенді нұсқасы BRCA2 генінің 10 кодтау экзонындағы 5851-ден 5854-ке дейінгі нуклеотидтік позициялардан 4-нуклеотидті жоюға байланысты және болжамды балама тоқтату кодонымен трансляциялық фреймнің ауысуына әкеледі (p.S1951Wff, бұрын да хабарланған жоқ). c.631G>A және c.7008-2A>T бір емделушіде анықталды.34 Бірінші мутация BRCA2 7 экзонындағы аденозинді (A) құрамында нуклеотиді бар гуанинмен (G) ауыстыруды қамтиды, нәтижесінде валиннің 211 кодонында изолейцинге ауысуы, изолейцин қышқылдарының изолейциннің амино қышқылының қалыпты әсерінің жоғары өзгеруі. мРНҚ сплайсинг. Екінші нұсқа интрондық аймақта орналасқан және BRCA2 кодтайтын геннің 13 экзонына дейін қосарланған А-дан тиминді (T) ауыстыруға әкеледі. c.7008-2A>T өзгерісі әртүрлі ұзындықтағы бірнеше транскрипттерді тудыруы мүмкін. Сонымен қатар, BRCA2 тобында PV-дан %2, 184 өзгерістер болды.
Содан кейін біз функционалды домендерде және ақуызды байланыстыратын аймақтарда BRCA1/2 зиянды мутацияларын картаға түсірдік (4-сурет). BRCA1 генінде PV-ның 50% сүт безі обыры кластер аймағында (BCCR), мутациялардың 22% аналық без обыры кластері аймағында (OCCR) орналасқан (Cурет 4A3 нұсқасы, PVBR357). BCCR аймағында орналасқан және мутациялардың 42,8% OCCR (сур. 4B) орналасқан. Әрі қарай, біз BRCA1 және BRCA2 ақуыздық домендеріндегі PV орнын бағаладық. BRCA1 протеині үшін ілмекті және ширатылған катушкалар домендерінде үш PV және BRCT доменінде екі мутацияны таптық. BRC қайталау доменімен салыстырылды, ал олиго/олигосахаридпен байланыстыру (OB) және мұнара (T) домендерінде 3 интрондық және 3 экзоникалық өзгерістер анықталды (4В сурет).
4-сурет BRCA1 және BRCA2 ақуыздарының схемалық көрінісі және патогендік нұсқалардың локализациясы. Бұл сурет сүт безі қатерлі ісігімен ауыратын науқастардағы BRCA1 (A) және BRCA2 (B) патогендік нұсқаларының таралуын көрсетеді. Экзоникалық мутациялар көк түспен, ал интрондық нұсқалар қызғылт сары түспен көрсетілген. Жолақ биіктігі жағдайлардың санын және олардың хабарланған BRCA2 функциясын көрсетеді. BRCA2 домендік протеиндері. BRCA1 протеинінде циклдік домен (RING) және ядролық локализация тізбегі (NLS), орамдық домен, SQ/TQ кластерлік домен (SCD) және BRCA1 C-терминал домені (BRCT) бар.(B) BRCA2 ақуызында сегіз BRC қайталануы, ДНҚ-байланыстырушы домен (H спираль тәрізді үш домен) бар. олигонуклеотидті/олигосахаридті байланыстыратын (OB) қатпарлары, мұнара домені (T) және C жағындағы NLS. Сүт безі обыры кластерінің аймағы (BCCR) және аналық без обыры кластерінің аймағы (OCCR) деп аталатын аймақтар төменгі жағында көрсетілген.*Тоқтату кодондарын анықтайтын мутацияларды білдіреді.
Содан кейін біз BRCA1/2 PV бар болуымен байланысты болуы мүмкін BC клиникопатологиялық ерекшеліктерін зерттедік. Толық клиникалық жазбалар 181 BRCA1/2-теріс пациенттер (тасымалдаушылар емес) және барлық тасымалдаушылар (n = 35) үшін қол жетімді болды. Ісік пролиферациясының жылдамдығы мен дәрежесі арасында корреляция болды.
Біз Ki-67 таралуын біздің когорттың медианасы негізінде есептедік (25%, диапазоны <10-90%). Ki-67 < 25% бар субъектілер «төмен Ki-67» деп анықталса, ≥ 25% мәндері бар адамдар «жоғары Ki-67» болып саналды. BRCA1 PV тасымалдаушылары (Cурет 5А).
5-сурет BRCA1 және BRCA2 PVs бар және жоқ сүт безі обырының әйелдердегі дәрежесінің таралуымен Ki-67 корреляциясы.(A) BRCA1 (18) немесе BRCA2 (17) PV пациенттерімен салыстырғанда BC тасымалдаушы емес 181 емделушідегі Ki-67 медиандық мәндерін көрсететін қорап графигі. BC қатерлі ісігі бар науқастар BRCA1 және BRCA2 мутация күйіне сәйкес гистологиялық дәреже топтарына (G2 және G3) бөлінеді (WT субъектілері, BRCA1 және BRCA2 PVs тасымалдаушылары).
Сол сияқты, біз ісік дәрежесінің BRCA1/2 PV болуымен корреляциясы бар-жоғын зерттедік. Біздің популяцияда G1 BC болмағандықтан, біз пациенттерді екі топқа бөлдік (G2 немесе G3). Ki-67 нәтижелеріне сәйкес, талдау ісік дәрежесі мен BRCA3 пропорционалды GBR1 мутациясының жоғарырақ GBR мутациясының арасындағы статистикалық маңызды корреляцияны анықтады. тасымалдаушылармен салыстырғанда (p<0,005) (5В-сурет).
ДНҚ секвенирлеу технологиясының жетістіктері BRCA1/2 генетикалық тестілеуде бұрын-соңды болмаған жетістіктерге қол жеткізді, бұл отбасылық қатерлі ісік тарихы бар науқастар үшін маңызды салдары бар. Бүгінгі таңда Американдық медициналық генетика қоғамы 35 және EN5CA3BR жүйесіне сәйкес BRCA1/2-нің шамамен 20 000 нұсқасы анықталған және жіктелген. Бұл жақсы белгілі. Мутациялық спектр географиялық аймақтарда кеңінен өзгереді.37 Италияда BRCA1/2 PVs көрсеткіші 8%-дан 37%-ға дейін ауытқиды, бұл ел ішіндегі кең өзгергіштікті көрсетті.38,39 5 миллионға жуық халқы бар Сицилия тұрғындарының саны бойынша Италиядағы бесінші ірі аймақ болып табылады. аралдың шығыс бөлігінде кең көлемдегі дәлелдер жоқ.
Біздің зерттеуіміз шығыс Сицилиядағы BC пациенттерінде BRCA1/2 PV жиілігі туралы алғашқы есептердің бірі болып табылады.28 Біз талдауымызды BC-ге арнадық, өйткені бұл біздің когортадағы ең көп таралған ауру.
Біздің эрамызға дейінгі 389 пациентті сынаған кезде, 9% BRCA1/2 PV-ді алып жүрді, олар BRCA1 және BRCA2 арасында біркелкі бөлінген. Бұл нәтижелер итальяндық популяцияда бұрын хабарланған нәтижелерге сәйкес келеді.28 Бір қызығы, біздің топтың 3% (13/389) ер адамдар болды. Бұл көрсеткіш біздегі барлық сүт безі қатерлі ісігінің ер адамдары үшін күтілгеннен жоғары (14%). BRCA1/2 мутация қаупі. Дегенмен, бұл ерлердің ешқайсысы BRCA1/2 PV дамытпады, сондықтан олар PALB2, RAD51C және D сияқты азырақ таралған мутациялардың болуын жоққа шығару үшін әрі қарай молекулалық талдауға үміткер болды. Маңыздылығы белгісіз нұсқалар BRCA2 алдын-ала анықталған субъектілердің 7%-да табылды. дәлелдер.28,41,42
Біз BRCA1/2 мутантты әйелдерде BC молекулалық субтиптерінің таралуын талдаған кезде, біз TNBC және BRCA1 PV (58,8%) және люминальды B BC және BRCA2 PV (55,6%) арасындағы белгілі байланыстарды растадық.16,43 Люминальды A және HER2+ BRCA1 және PVBRCA1 ісіктері бар әдебиеттерден тұрады. деректер.16,43
Содан кейін біз BRCA1/2 PV түрі мен орнына назар аударамыз. Біздің когортада ең көп таралған BRCA1 PV c.5035_5039delCTAAT болды. Дегенмен Incorvaia және т.б. Сицилия когортында бұл нұсқаны сипаттамады, басқа авторлар оны BRCA1 PV ұрық сызығы ретінде хабарлады.34 Біздің когортада бірнеше BRCA1 PV табылды – мысалы, c.181T>G, c.514del, c.3253dupA және c.5266dupC – бұл екі мутациядан табылған SBR28. (c.181T>G және c.5266dupC) әдетте Шығыс және Орталық Еуропадағы (Польша, Чехия), словениялық, австриялық, венгриялық, беларусьтік және неміс еврейлеріндегі ашкеназиялық еврейлерде кездеседі, 44,45 және АҚШ пен Аргентинада жақында «қайталанатын ұрық сызығының нұсқасы» ретінде анықталды және итальяндық BC43c нұсқасы бар. бұрын Палермо мен Мессинадағы солтүстік Сицилияның 8 сүт безі қатерлі ісігімен ауыратын науқастарда анықталған. Бір қызығы, тіпті Incorvaia et al. Катаниядағы кейбір отбасыларда c.3253dupA нұсқасын тапты.28 Ең репрезентативті BRCA2 PVs c.428dup, c.5851_5854delAGTT және интрондық нұсқа c.8487+1G>A болып табылады, олар Палермодағы пациентте c.4258dup, c.5TT158 болды толығырақ хабарланған. Сицилияның солтүстік-батысындағы үй шаруашылықтарында, негізінен Трапани және Палермо аймақтарында байқалды, ал c.5851_5854delAGTT PV Сицилияның солтүстік-батысындағы үй шаруашылықтарында байқалды. 8487+1G>A нұсқасы Мессина, Палермо және Кальтаниссетта және басқалар.28 субъектілерінде жиі болды. Колумбиядағы c.5851_5854delAGTT өзгерісі бұрын сипатталған.37 Тағы бір BRCA2 PV, c.631+1G>A Сицилиядан келген (Агридженто, Сиракуса және Рагуса) BC және OC пациенттерінен табылған.28 Атап айтқанда, біз екі BRCA2 және c.36 нұсқаларының қатар өмір сүруін байқадық. c.7008-2A>T) біз cis режимінде бөлінген деп болжаған емделушіде.34,46 Бұл BRCA2 uble мутациялары итальяндық аймақта жиі байқалады және хабаршы РНҚ қосылуына әсер етіп, BRCA2, ақуыздың істен шығуына әкелетін мерзімінен бұрын тоқтату кодондарын енгізетіні анықталды.
Біз сондай-ақ протеин домендері мен гендерінің болжамды OCCR және BCCR аймақтарында BRCA1 және BRCA2 PV картасын жасадық. Бұл аймақтарды Реббек және т.б. сипаттаған. сәйкесінше аналық без және сүт безі қатерлі ісігінің даму қаупі аймақтары ретінде.49 Дегенмен, ұрық сызығының нұсқаларының орналасуы мен сүт безі немесе аналық без қатерлі ісігінің қаупі арасындағы байланысқа қатысты дәлелдер даулы болып қала береді.28,50-52 Біздің популяцияда BRCA1 PVs негізінен BCCR аймағында орналасқан, ал біз BRCA2-ге дейінгі PVCH аймағына қарамастан орналастық. болжамды OCCR және BCCR аймақтары мен BC ерекшеліктері арасында қандай да бір байланысты табу мүмкін емес. Бұл BRCA1/2 мутациялары бар пациенттердің шектеулі санына байланысты болуы мүмкін. Протеин домені тұрғысынан BRCA1 PVs бүкіл ақуыз бойына таралады және BRCA2 өзгерістері BRC қайталау доменінде жақсырақ кездеседі.
Ақырында, біз BC клиникопатологиялық ерекшеліктерін BRCA1/2 PV-мен корреляцияладық. Қамтылған пациенттердің шектеулі санына байланысты біз тек Ki-67 мен ісік дәрежесі арасындағы маңызды корреляцияны таптық. Ki-67 бағалауы мен интерпретациясы біршама даулы болып қала берсе де, жоғары пролиферативті көрсеткіштер аурудың қайталану қаупінің жоғарылауымен және қайталану мерзімінің төмендеуімен байланысты екені сөзсіз. «жоғары» және «төмен» Ki-67 арасындағы айырмашылық 20% құрайды. Дегенмен, бұл шекті Ki-67 орташа мәні 25% болатын BRCA1/2 мутация пациенттерінің популяциясына қолданылмайды. Ки-67 жоғары көрсеткіштерінің бұл тенденциясы біздің люминальды B және TNBCH тіндеріндегі таралуымен түсіндіруге болады. Кейбір дәлелдемелер Ki-67-нің жоғары шегі (25-30%) пациенттерді олардың болжамына сәйкес жақсырақ стратификациялауы мүмкін деп болжайды.53,54 Біздің талдау нәтижелерімізден айтарлықтай корреляция таңқаларлық емес. Жоғары Ki-67 және BRCA1 PV бар болуы таңқаларлық емес. Шындығында, BRCA1-ге байланысты ісіктердің көбірек эксгибиті және TBC-ге тән эксгибитті. ерекшеліктері.16,17
Қорытындылай келе, бұл зерттеу Сицилияның шығысындағы BC когортындағы BRCA1/2 мутациялы күйі туралы есеп береді. Жалпы алғанда, біздің қорытындыларымыз мутацияның таралуы тұрғысынан да, BC-дегі клиникопатологиялық ерекшеліктер бойынша да бұрыннан бар дәлелдемелерге сәйкес келеді. BRCA1/2-мутантты BC-ге қарсы талдауды кеңейту сияқты кеңейтілген BRCA1/2-мутантты BCgen талдауын қолдану сияқты үлкен популяцияларда жүргізілген зерттеулер. BRCA1/2-ге қарағанда ерекше және сирек болатын PV-ның болуы. Бұл генетикалық мутацияларға байланысты қатерлі ісік қаупі жоғары субъектілердің санын анықтауға және дұрыс басқаруға мүмкіндік береді.
Біз пациенттердің зерттеу мақсатында ісік үлгілерін жасырын түрде шығаруға ақпараттандырылған келісімге қол қойғанын растадық. Барлық емделушілер Хельсинки декларациясына сәйкес жазбаша ақпараттандырылған келісімге қол қойды. AOU Policlinico «G.Rodolico – S.Marco» саясатына сәйкес, бұл зерттеу этикалық тексеруден босатылды, өйткені BRCA12 сәйкес жазбаша түрде талдау жүргізілді және барлық пациенттерге талдау жасалды. келісім. Пациенттер де өз деректерін зерттеу мақсатында пайдалануға келісім береді.
Профессор Паоло Вигнериге Этика комитетінің сұрауы бойынша сүт безі қатерлі ісігімен ауыратын науқастарға көмек көрсеткені үшін алғыс айтамыз.
Федерика Марторана Istituto Gentili, Eli Lilly, Novartis, Pfizer компанияларының гонорарлары туралы хабарлайды. Басқа авторлар бұл жұмыста ешқандай мүдделер қақтығысын жарияламайды.
1. Sung H, Ferlay J, Siegel RL, et al. Global Cancer Statistics 2020: GLOBOCAN дүние жүзіндегі 185 елдегі 36 қатерлі ісік ауруының жиілігі мен өлімін бағалайды.CA Cancer J Clin.2021;71(3):209-249.ca362.doi: