আপনার ব্রাউজারে জাভাস্ক্রিপ্ট বর্তমানে অক্ষম করা আছে। জাভাস্ক্রিপ্ট অক্ষম করা থাকলে এই ওয়েবসাইটের কিছু বৈশিষ্ট্য কাজ করবে না।
আপনার নির্দিষ্ট বিবরণ এবং আগ্রহের নির্দিষ্ট ওষুধ দিয়ে নিবন্ধন করুন এবং আমরা আপনার প্রদত্ত তথ্য আমাদের বিস্তৃত ডাটাবেসের নিবন্ধগুলির সাথে মিলিয়ে দেব এবং দ্রুত আপনাকে একটি পিডিএফ কপি ইমেল করব।
作者 Stella S, Vitale SR, Martorana F, Massimino M, Pavone G, Lanzafame K, Bianca S, Barone C, Gorgone C, Fichera M, Manzella L
স্টেফানিয়া স্টেলা, 1,2 সিলভিয়া রিটা ভিটালে, 1,2 ফেদেরিকা মার্টোরানা, 1,2 মিশেল ম্যাসিমিনো, 1,2 গিউলিয়ানা পাভোনে, 3 কাতিয়া ল্যানজাফেম, 3 সেবাস্তিয়ানো বিয়াঙ্কা, 4 চিয়ারা ব্যারোন, 5 ক্রিস্টিনা গর্গোন, 6 মার্কো ফিচেরা, 6 জন সিলভিয়া ম্যানজেলা, 7 ডিপার্টমেন্টের সিলভিয়া 1, 2 জন। মেডিসিন, ইউনিভার্সিটি অফ ক্যাটানিয়া, ক্যাটানিয়া, 95123, ইতালি;2 সেন্টার ফর এক্সপেরিমেন্টাল অনকোলজি অ্যান্ড হেমাটোলজি, AOU Policlinico “G. Rodolico – San Marco”, Catania , 95123, Italy; 3 মেডিকেল অনকোলজি, AOU Policlinico “G. Rodolico – San Marco”, Catania, 95123, Italy; 4 মেডিকেল জেনেটিক্স, ARNAS Garibaldi, Catania, 95123, Italy; ৫ মেডিসিন জেনেটিক্স, এএসপি, সিরাকিউজ, ৯৬১০০, ইতালি; ৬ বায়োমেডিকেল এবং বায়োটেকনোলজি সায়েন্সেস বিভাগ, ক্যাটানিয়া বিশ্ববিদ্যালয়, মেডিকেল জেনেটিক্স, ক্যাটানিয়া, ইতালি, ৯৫১২৩; ৭ওসি রিসার্চ ইনস্টিটিউট-আইআরসিসিএস, ট্রোইনা, ৯৪০১৮, ইতালি যোগাযোগ: স্টেফানিয়া স্টেলা, টেলিফোন +৩৯ ০৯৫ ৩৭৮ ১৯৪৬, ইমেল [email protected]; [email protected] উদ্দেশ্য: BRCA1 এবং BRCA2-তে জীবাণু পরিবর্তন এবং প্রতিষ্ঠিত স্তন ক্যান্সার (BC), ডিম্বাশয় (OC) এবং অন্যান্য ক্যান্সারের আজীবন ঝুঁকির সাথে সম্পর্কিত। BRCA জিনের পরীক্ষা করা ব্যক্তিগত ঝুঁকি মূল্যায়নের পাশাপাশি সুস্থ বাহকদের প্রতিরোধ পদ্ধতি খুঁজে বের করার এবং ক্যান্সার রোগীদের ক্ষেত্রে সেলাইয়ের চিকিৎসার জন্য গুরুত্বপূর্ণ। BRCA1 এবং BRCA2 পরিবর্তনের প্রকোপ ভৌগোলিক অঞ্চল জুড়ে ব্যাপকভাবে পরিবর্তিত হয়, এবং যদিও সিসিলিয়ান পরিবারগুলিতে BRCA প্যাথোজেনিক রূপের উপর তথ্য বিদ্যমান, পূর্ব সিসিলির জনসংখ্যাকে বিশেষভাবে লক্ষ্য করে করা গবেষণায় অভাব রয়েছে। আমাদের গবেষণার লক্ষ্য ছিল পূর্ব সিসিলির BC রোগীদের একটি দলে BRCA প্যাথোজেনিক জীবাণু পরিবর্তনের ঘটনা এবং বিতরণ তদন্ত করা এবং পরবর্তী প্রজন্মের সিকোয়েন্সিং ব্যবহার করে নির্দিষ্ট BC বৈশিষ্ট্যের সাথে তাদের সম্পর্ক মূল্যায়ন করা। টিউমার গ্রেড এবং প্রসারণ সূচকের সাথে সম্পর্কিত পরিবর্তনের উপস্থিতি। ফলাফল: সামগ্রিকভাবে, 35 জন রোগীর (9%) একটি BRCA প্যাথোজেনিক রূপ ছিল, BRCA1-তে 17 (49%) এবং BRCA2-তে 18 (51%)। BRCA1 পরিবর্তনগুলি ট্রিপল-নেগেটিভ BC রোগীদের মধ্যে প্রচলিত, যেখানে BRCA2 রূপান্তরগুলি বেশি সাধারণ। লুমিনাল BC রোগীদের ক্ষেত্রে। নন-ক্যারিয়ারদের তুলনায়, BRCA1 ভেরিয়েন্টের রোগীদের টিউমার গ্রেড এবং প্রোলিফারেটিভ সূচক উল্লেখযোগ্যভাবে বেশি ছিল। উপসংহার: আমাদের অনুসন্ধানগুলি পূর্ব সিসিলির BC রোগীদের মধ্যে BRCA মিউটেশনাল অবস্থার একটি সংক্ষিপ্তসার প্রদান করে এবং বংশগত BC রোগীদের সনাক্তকরণে NGS বিশ্লেষণের ভূমিকা নিশ্চিত করে। সামগ্রিকভাবে, এই তথ্যগুলি মিউটেশন বাহকদের ক্যান্সারের সঠিক প্রতিরোধ এবং চিকিৎসার জন্য BRCA স্ক্রিনিংকে সমর্থনকারী পূর্ববর্তী প্রমাণের সাথে সামঞ্জস্যপূর্ণ।
স্তন ক্যান্সার (BC) বিশ্বব্যাপী সবচেয়ে সাধারণ ম্যালিগন্যান্সি এবং মহিলাদের মধ্যে সবচেয়ে মারাত্মক ক্যান্সার। BC পূর্বাভাস এবং ক্লিনিকাল আচরণ নির্ধারণকারী জৈবিক বৈশিষ্ট্যগুলি ব্যাপকভাবে অধ্যয়ন করা হয়েছে এবং সময়ের সাথে সাথে আংশিকভাবে ব্যাখ্যা করা হয়েছে। প্রকৃতপক্ষে, বর্তমানে BC কে বিভিন্ন আণবিক উপপ্রকারে শ্রেণীবদ্ধ করার জন্য বেশ কয়েকটি সারোগেট মার্কার ব্যবহার করা হয়। এগুলি হল ইস্ট্রোজেন (ER) এবং/অথবা প্রোজেস্টেরন রিসেপ্টর (PgR), মানব এপিডার্মাল গ্রোথ ফ্যাক্টর রিসেপ্টর 2 (HER2) অ্যামপ্লিফিকেশন, প্রসারণ সূচক Ki-67 এবং টিউমার গ্রেড (G)।2 এই ভেরিয়েবলগুলির সংমিশ্রণ নিম্নলিখিত BC বিভাগগুলি চিহ্নিত করেছে: 1) ER এবং/অথবা PgR এক্সপ্রেশন দেখানো লুমিনাল টিউমারগুলি BC-এর 75% এর জন্য দায়ী। এই টিউমারগুলিকে আরও Luminal A-তে ভাগ করা হয়েছিল, যখন Ki-67 20% এর নিচে এবং HER2 নেগেটিভ ছিল, এবং Luminal B-তে, যখন Ki-67 20% এর সমান বা তার বেশি ছিল এবং HER2 অ্যামপ্লিফিকেশনের উপস্থিতিতে, প্রসারণ সূচক নির্বিশেষে; ২) HER2+ টিউমার যা ER এবং PgR নেতিবাচক কিন্তু HER2 পরিবর্ধন দেখায়। এই গ্রুপটি সমস্ত স্তন টিউমারের ১০% জন্য দায়ী; ৩) ট্রিপল-নেগেটিভ স্তন ক্যান্সার (TNBC), যা ER এবং PgR প্রকাশ এবং HER2 পরিবর্ধন দেখায় না, স্তন ক্যান্সারের প্রায় ১৫% জন্য দায়ী।২-৪
এই BC উপপ্রকারগুলির মধ্যে, টিউমার গ্রেড এবং প্রসারণ সূচক ক্রস-সেকশনাল বায়োমার্কারগুলিকে প্রতিনিধিত্ব করে যা সরাসরি এবং স্বাধীনভাবে টিউমার আক্রমণাত্মকতা এবং পূর্বাভাসের সাথে যুক্ত।5,6
উপরে উল্লিখিত জৈবিক বৈশিষ্ট্যগুলি ছাড়াও, গত কয়েক বছরে BC-এর বিকাশের জন্য উত্তরাধিকারসূত্রে প্রাপ্ত জেনেটিক পরিবর্তনের ভূমিকা ক্রমশ গুরুত্বপূর্ণ হয়ে উঠেছে। 7 প্রতি 10 জনের মধ্যে 1 জন স্তন টিউমার নির্দিষ্ট জিনের জার্মলাইন পরিবর্তনের কারণে উত্তরাধিকারসূত্রে প্রাপ্ত হয়। 8 180,000 জনেরও বেশি মহিলার সাথে জড়িত দুটি বৃহৎ মহামারী সংক্রান্ত গবেষণায় সম্প্রতি আটটি জিনের একটি গ্রুপ (যেমন, ATM, BARD1, BRCA1, BRCA2, CHK2, PALB2, RAD51C, এবং RAD51D) সনাক্ত করা হয়েছে যা মূলত বংশগত BC-এর জন্য দায়ী। এই জিনগুলির মধ্যে, BRCA1 এবং BRCA2 (এরপর থেকে BRCA1/2 হিসাবে উল্লেখ করা হয়েছে) স্তন টিউমারের বিকাশের সাথে সবচেয়ে শক্তিশালী সম্পর্ক দেখিয়েছে। 9-12 প্রকৃতপক্ষে, জার্মলাইন BRCA1/2 মিউটেশনগুলি BC-এর জীবনকালের ঝুঁকির পাশাপাশি ডিম্বাশয়, প্রোস্টেট, অগ্ন্যাশয়, কোলোরেক্টাল এবং মেলানোমা সহ অন্যান্য ম্যালিগন্যান্সির ঝুঁকি উল্লেখযোগ্যভাবে বৃদ্ধি করে। 13 থেকে 80 বছর বয়স পর্যন্ত, BRCA1 প্যাথোজেনিক ভেরিয়েন্ট (PV) সহ মহিলাদের মধ্যে BC-এর ক্রমবর্ধমান ঘটনা 72%। এবং BRCA2 PV সহ মহিলাদের মধ্যে 69%।14
উল্লেখযোগ্যভাবে, একটি সাম্প্রতিক প্রকাশনা পরামর্শ দেয় যে BC ঝুঁকি PV-এর ধরণের উপর নির্ভর করে। প্রকৃতপক্ষে, প্যাথোজেনিক ট্রাঙ্কেটিং ভেরিয়েন্টের তুলনায়, স্পষ্ট ভুল ধারণার ধরণগুলি, বিশেষ করে BRCA1 জিনে, BC-এর ঝুঁকি হ্রাসের সাথে যুক্ত, বিশেষ করে বয়স্ক মহিলাদের ক্ষেত্রে।15
BRCA1 বা BRCA2 PV-এর উপস্থিতি বিভিন্ন জৈবিক এবং ক্লিনিকোপ্যাথোলজিকাল বৈশিষ্ট্যের সাথে যুক্ত ছিল। 16,17 BRCA1-সম্পর্কিত BC-গুলি ক্লিনিক্যালি আক্রমণাত্মক, দুর্বলভাবে পার্থক্যযুক্ত এবং অত্যন্ত প্রসারণশীল হতে থাকে। এই টিউমারগুলি সাধারণত ট্রিপল নেগেটিভ হয় এবং তাদের শুরুর বয়স কম থাকে। BRCA2-পরিবর্তিত রোগীদের মধ্যে যে টিউমারগুলি দেখা যায় সেগুলি সাধারণত মাঝারি থেকে ভাল-পরিবর্তিত গ্রেড এবং পরিবর্তনশীল প্রসারণশীল সূচক প্রদর্শন করে। এই টিউমারগুলি লুমেন B-তে বেশি দেখা যায় এবং সাধারণত বয়স্ক প্রাপ্তবয়স্কদের মধ্যে দেখা যায়। 16-18 উল্লেখযোগ্যভাবে, BRCA1 এবং BRCA2-এর মিউটেশনগুলি প্ল্যাটিনাম লবণ এবং পলি(ADP-রাইবোজ) পলিমারেজ ইনহিবিটর (PARPi) এর মতো লক্ষ্যযুক্ত ওষুধ সহ নির্দিষ্ট চিকিৎসার প্রতি সংবেদনশীলতা বৃদ্ধি করে। 19,20
গত কয়েক বছর ধরে, ক্লিনিক্যাল অনুশীলনে পরবর্তী প্রজন্মের সিকোয়েন্সিং (NGS) বাস্তবায়নের ফলে ক্রমবর্ধমান সংখ্যক BC রোগী ক্যান্সার সংবেদনশীলতা সিন্ড্রোমের জন্য আণবিক পরীক্ষার মধ্য দিয়ে যেতে সক্ষম হয়েছেন, যার মধ্যে রয়েছে BRCA1/2.21। একই সাথে, পারিবারিক ইতিহাস, জনসংখ্যাতাত্ত্বিক এবং ক্লিনিকোপ্যাথোলজিক্যাল বৈশিষ্ট্য সম্পর্কিত সুনির্দিষ্ট মানদণ্ডের উপর ভিত্তি করে সংজ্ঞাগুলি BRCA1/2 পরীক্ষার যোগ্য ব্যক্তিদের আরও ভালভাবে সনাক্ত করতে পারে।22,23 এই প্রেক্ষাপটে, নির্দিষ্ট জনসংখ্যার মধ্যে BRCA1/2 স্ক্রিনিংয়ের উপর প্রমাণ জমা হচ্ছে, যা ভৌগোলিক অঞ্চল জুড়ে পার্থক্য তুলে ধরে।24-27 যদিও পশ্চিম সিসিলিতে BC কোহর্ট সম্পর্কে রিপোর্ট রয়েছে, পূর্ব সিসিলি জনসংখ্যায় BRCA1/2 স্ক্রিনিংয়ের উপর কম তথ্য পাওয়া যায়।28,29
আমরা এখানে পূর্ব সিসিলির বিসি রোগীদের জার্মলাইন BRCA1/2 স্ক্রিনিংয়ের ফলাফল বর্ণনা করছি, যা এই টিউমারগুলির প্রধান ক্লিনিকোপ্যাথোলজিকাল বৈশিষ্ট্যগুলির সাথে BRCA1 বা BRCA2 মিউটেশনের উপস্থিতির আরও সম্পর্ক স্থাপন করে।
ক্যাটানিয়ার রোডোলিকো - সান মার্কোতে অবস্থিত পলিক্লিনিকো হাসপাতালের "সেন্টার ফর এক্সপেরিমেন্টাল অনকোলজি অ্যান্ড হেমাটোলজি"-তে একটি পূর্ববর্তী গবেষণা করা হয়েছিল। জানুয়ারী ২০১৭ থেকে মার্চ ২০২১ পর্যন্ত, স্তন এবং ডিম্বাশয়, মেলানোমা, অগ্ন্যাশয় বা প্রোস্টেট ক্যান্সারে আক্রান্ত মোট ৪৫৫ জন রোগীকে BRCA/2 জেনেটিক পরীক্ষার জন্য আমাদের আণবিক ডায়াগনস্টিক ল্যাবরেটরিতে রেফার করা হয়েছিল। এই গবেষণাটি হেলসিঙ্কির ঘোষণাপত্র অনুসারে পরিচালিত হয়েছিল এবং সমস্ত অংশগ্রহণকারী আণবিক বিশ্লেষণের আগে লিখিতভাবে অবহিত সম্মতি প্রদান করেছিলেন।
BC-এর হিস্টোলজিক্যাল এবং জৈবিক বৈশিষ্ট্য (ER, PgR, HER2 স্ট্যাটাস, Ki-67, এবং গ্রেড) কোর বায়োপসি বা অস্ত্রোপচারের নমুনার উপর মূল্যায়ন করা হয়েছিল, শুধুমাত্র আক্রমণাত্মক টিউমার উপাদান বিবেচনা করে। এই বৈশিষ্ট্যগুলির উপর ভিত্তি করে, BC-গুলিকে নিম্নরূপ শ্রেণীবদ্ধ করা হয়েছিল: লুমিনাল A (ER+ এবং/অথবা PgR+, HER2-, Ki-67<20%), লুমিনাল B (ER+ এবং/অথবা PgR+, HER2-, Ki-67≥20%), লুমিনাল B-HER2+ (ER এবং/অথবা PgR+, HER2+), HER2+ (ER এবং PgR-, HER2+) অথবা ট্রিপল নেগেটিভ (ER এবং PgR-, HER2-)।
BRCA1 এবং BRCA2 মিউটেশনের অবস্থা মূল্যায়ন করার আগে, একজন অনকোলজিস্ট, একজন জেনেটিসিস্ট এবং একজন মনোবিজ্ঞানী সহ একটি বহুবিষয়ক দল প্রতিটি রোগীর জন্য BRCA1 এবং/অথবা BRCA1 এর উপস্থিতি নির্ধারণের জন্য একটি টিউমার জেনেটিক্স পরামর্শ পরিচালনা করে। অথবা BRCA2 জিনে PV এর উচ্চ ঝুঁকিযুক্ত ব্যক্তিরা। রোগী নির্বাচন ইতালীয় সোসাইটি অফ মেডিকেল অনকোলজি (AIOM) নির্দেশিকা এবং স্থানীয় সিসিলিয়ান সুপারিশ অনুসারে করা হয়েছিল। 30,31 এই মানদণ্ডগুলির মধ্যে রয়েছে: (i) সংবেদনশীলতা জিনে পরিচিত প্যাথোজেনিক রূপগুলির পারিবারিক ইতিহাস (যেমন, BRCA1, BRCA2, TP53, PTEN); (ii) BC সহ পুরুষ; (iii) BC এবং OC সহ পুরুষ; (iv) BC <36 বছর, TNBC <60 বছর, অথবা দ্বিপাক্ষিক BC <50 বছর; (v) BC <50 বছর এবং কমপক্ষে একজন প্রথম-ডিগ্রি আত্মীয়ের ব্যক্তিগত চিকিৎসা ইতিহাস: (a) BC < 50 বছর; (b) যেকোনো বয়সের অ-মিউসিনাস এবং অ-সীমান্তরেখা OC সহ মহিলারা; (c) দ্বিপাক্ষিক BC; (d) পুরুষ BC; (e) অগ্ন্যাশয়ের ক্যান্সার; (f) প্রোস্টেট ক্যান্সার; (vi) 50 বছরেরও বেশি বয়সের BC এর দুই বা ততোধিক ব্যক্তিগত ইতিহাস এবং পারিবারিক ইতিহাস BC, OC, অথবা অগ্ন্যাশয়ের ক্যান্সারের ক্ষেত্রে যারা একে অপরের প্রথম-ডিগ্রি আত্মীয় (যাদের সাথে তিনি প্রথম-ডিগ্রি আত্মীয়) তাদের ক্ষেত্রে; (vii) OC এবং কমপক্ষে একজন প্রথম-ডিগ্রি আত্মীয়ের ব্যক্তিগত ইতিহাস: (a) BC <50 বছর; (b) NOC; (g) দ্বিপাক্ষিক BC; (d) পুরুষ BC; (vii) উচ্চ-গ্রেড সিরাস OC সহ মহিলা।
প্রতিটি রোগীর কাছ থেকে ২০ মিলি পেরিফেরাল রক্তের নমুনা সংগ্রহ করা হয়েছিল এবং EDTA টিউবে (BD Biosciences) সংগ্রহ করা হয়েছিল। প্রস্তুতকারকের নির্দেশ অনুসারে QIAsymphony DSP DNA Midi কিট আইসোলেশন কিট (QIAGEN, Hilden, Italy) ব্যবহার করে ০.৭ মিলি সম্পূর্ণ রক্তের নমুনা থেকে জিনোমিক ডিএনএ আলাদা করা হয়েছিল এবং একটি Qubit® 3.0 ফ্লুরোমিটার (থার্মো ফিশার সায়েন্টিফিক, ওয়ালথাম, এমএ, মার্কিন যুক্তরাষ্ট্র) এর মাধ্যমে পরিমাপ করা হয়েছিল। লক্ষ্য সমৃদ্ধকরণ এবং লাইব্রেরি প্রস্তুতি Oncomine™ BRCA রিসার্চ অ্যাসে শেফ দ্বারা সঞ্চালিত হয়, যা প্রস্তুতকারকের নির্দেশ অনুসারে স্বয়ংক্রিয় লাইব্রেরি প্রস্তুতির জন্য Ion AmpliSeq™ শেফ রিএজেন্টস DL8 কিটে লোড করার জন্য প্রস্তুত। কিটটিতে দুটি মাল্টিপ্লেক্স PCR প্রাইমার পুল রয়েছে যা সমস্ত BRCA1 (NM_007300.3) এবং BRCA2 (NM_000059.3) জিন অধ্যয়ন করতে ব্যবহার করা যেতে পারে। সংক্ষেপে, লাইব্রেরি প্রস্তুতির জন্য বারকোডেড প্লেটে প্রতিটি মিশ্রিত নমুনা DNA (10 ng) এর 15 µL যোগ করা হয়েছিল এবং সমস্ত রিএজেন্ট এবং ভোগ্যপণ্য Ion Chef™ যন্ত্রে লোড করা হয়েছিল। এরপর Ion Chef™ যন্ত্রে স্বয়ংক্রিয় লাইব্রেরি প্রস্তুতি এবং বারকোডেড নমুনা লাইব্রেরি পুলিং করা হয়েছিল। প্রস্তুতকারকের নির্দেশ অনুসারে Qubit® 3.0 ফ্লুরোমিটার (থার্মো ফিশার সায়েন্টিফিক, ওয়ালথাম, এমএ, মার্কিন যুক্তরাষ্ট্র) দ্বারা প্রস্তুত লাইব্রেরির সংখ্যা মূল্যায়ন করা হয়েছিল। অবশেষে, Ion Chef™ লাইব্রেরি নমুনায় লাইব্রেরিগুলিকে সমতুল্য অনুপাতে একত্রিত করা হয়। টিউব (বারকোডেড টিউব) এবং Ion Chef™ যন্ত্রে লোড করা হয়েছে। একটি Ion Torrent S5 (থার্মো ফিশার সায়েন্টিফিক) যন্ত্র (থার্মো ফিশার সায়েন্টিফিক) ব্যবহার করে একটি Ion 510 চিপ (থার্মো ফিশার সায়েন্টিফিক) ব্যবহার করে সিকোয়েন্সিং করা হয়েছে। ডেটা বিশ্লেষণ Amplicon Suite (SmartSeq srl) এবং Ion Reporter সফটওয়্যার দ্বারা সম্পাদিত হয়েছে।
সমস্ত ভেরিয়েন্ট নামকরণ হিউম্যান জিনোম ভ্যারিয়েশন কনসোর্টিয়ামের বর্তমান নির্দেশিকা অনুসরণ করে, যা অনলাইনে পাওয়া যায় (HGVS, http://www.hgvs.org/mutnomen)। BRCA1/2 ভেরিয়েন্টের ক্লিনিকাল তাৎপর্য আন্তর্জাতিক কনসোর্টিয়াম ENIGMA (Evidence-Based Network for Interpreting Germline Mutant Alleles, https://enigmaconsortium.org/) এর শ্রেণীবিভাগ এবং ARUP, BRCAEXCHANGE, ClinVar, IARC_LOVD, এবং UMD এর মতো বিভিন্ন ডাটাবেসের পরামর্শ ব্যবহার করে সংজ্ঞায়িত করা হয়েছিল। শ্রেণীবিভাগে পাঁচটি স্বতন্ত্র ঝুঁকির বিভাগ রয়েছে: সৌম্য (বিভাগ I), সম্ভাব্য সৌম্য (বিভাগ II), অনিশ্চিত তাৎপর্যের ভেরিয়েন্ট (VUS, বিভাগ III), সম্ভাব্য রোগজীবাণু (বিভাগ IV), এবং রোগজীবাণু (বিভাগ V)। VarSome প্রোটিন গঠন এবং কার্যকারিতার উপর মিউটেশনের প্রভাব বিশ্লেষণ করেছেন, 30 টি ডাটাবেসে অ্যাক্সেস সহ একটি তথ্যবহুল হাতিয়ার।32
প্রতিটি VUS-কে সম্ভাব্য ক্লিনিক্যাল তাৎপর্য নির্ধারণের জন্য, নিম্নলিখিত গণনামূলক প্রোটিন পূর্বাভাস অ্যালগরিদমগুলি ব্যবহার করা হয়েছিল: MUTATION TASTER, 33 PROVEAN-SIFT (http://provean.jcvi.org/index.php), POLYPHEN-2 (http:// /genetics.bwh.harvard.edu/pph2/) এবং Align-GVGD (http://agvgd.hci.utah.edu/agvgd_input.php)। ক্লাস 1 এবং 2 হিসাবে শ্রেণীবদ্ধ ভেরিয়েন্টগুলিকে ওয়াইল্ড টাইপ হিসাবে বিবেচনা করা হয়েছিল।
স্যাঙ্গার সিকোয়েন্সিং প্রতিটি প্যাথোজেনিক ভ্যারিয়েন্টের উপস্থিতি নিশ্চিত করেছে। সংক্ষেপে, BRCA1 এবং BRCA2 জিন রেফারেন্স সিকোয়েন্স (যথাক্রমে NG_005905.2, NM_007294.3 এবং NG_012772.3, NM_000059.3) ব্যবহার করে প্রতিটি সনাক্ত করা ভ্যারিয়েন্টের জন্য এক জোড়া নির্দিষ্ট প্রাইমার ডিজাইন করা হয়েছিল। অতএব, লক্ষ্যযুক্ত পিসিআর সঞ্চালিত হয়েছিল এবং তারপরে স্যাঙ্গার সিকোয়েন্সিং করা হয়েছিল।
যেসব রোগীর BRCA1/2 জিনের জন্য নেতিবাচক পরীক্ষা করা হয়েছিল, তাদের নির্মাতার নির্দেশ অনুসারে মাল্টিপ্লেক্স লিগেশন-নির্ভর প্রোব অ্যামপ্লিফিকেশন (MLPA) দ্বারা পরীক্ষা করা হয়েছিল যাতে বৃহৎ জিনোমিক পুনর্বিন্যাসের (LGR) উপস্থিতি মূল্যায়ন করা যায়। সংক্ষেপে, ডিএনএ নমুনাগুলি বিকৃত করা হয় এবং 60টি পর্যন্ত BRCA1 এবং BRCA2 জিন-নির্দিষ্ট প্রোব ব্যবহার করা হয়, প্রতিটিতে প্রায় 60টি নিউক্লিওটাইড দৈর্ঘ্যের একটি নির্দিষ্ট DNA ক্রম সনাক্ত করা হয়। PCR অ্যামপ্লিকনের একটি অনন্য সেট সমন্বিত প্রোব অ্যামপ্লিফিকেশন পণ্যগুলি তারপর ক্যাপিলারি ইলেক্ট্রোফোরেসিস এবং Cofalyser.Net সফ্টওয়্যার দ্বারা উপযুক্ত ব্যাচ-নির্দিষ্ট Cofalyser টেবিল (www.mrcholland.com) এর সাথে একত্রে বিশ্লেষণ করা হয়েছিল।
নির্বাচিত ক্লিনিকোপ্যাথোলজিক্যাল ভেরিয়েবলগুলি (হিস্টোলজিক্যাল গ্রেড এবং Ki-67% প্রসারণ সূচক) BRCA1/2 PV-এর উপস্থিতির সাথে যুক্ত ছিল, যা Prism সফ্টওয়্যার v. 8.4 ব্যবহার করে গণনা করা হয়েছিল ফিশারের সঠিক পরীক্ষা ব্যবহার করে, p-মান <0.05 তাৎপর্যপূর্ণ বলে ধরে নিয়ে।
জানুয়ারী ২০১৭ থেকে মার্চ ২০২১ সালের মধ্যে, ৪৫৫ জন রোগীর জার্মলাইন BRCA1/2 মিউটেশনের জন্য স্ক্রিনিং করা হয়েছিল। পলিক্লিনিকো হাসপাতালের সেন্টার ফর এক্সপেরিমেন্টাল অনকোলজি অ্যান্ড হেমাটোলজিতে মিউটেশন পরীক্ষা করা হয়েছিল। সিসিলিয়ান নির্দেশিকা (http://www.gurs.regione.sicilia.it/Indicep1.htm, N. 02-Venerdì 10 Gennaio 2020), ক্যাটানিয়ার রোডোলিকো - সান মার্কো" অনুসারে, মোট ৩৮৯ জন রোগী স্তন ক্যান্সার, ৩৭ জন ডিম্বাশয়ের ক্যান্সার, ১৬ জন অগ্ন্যাশয়ের ক্যান্সার, ৮ জন প্রোস্টেট ক্যান্সার এবং ৫ জন মেলানোমা ছিলেন। ক্যান্সারের ধরণ এবং বিশ্লেষণের ফলাফল অনুসারে রোগীদের বন্টন চিত্র ১ এ দেখানো হয়েছে।
চিত্র ১-এ গবেষণার একটি সারসংক্ষেপ দেখানো একটি ফ্লো চার্ট দেখানো হয়েছে। স্তন, মেলানোমা, অগ্ন্যাশয়, প্রোস্টেট বা ডিম্বাশয়ের টিউমারযুক্ত রোগীদের BRCA1 এবং BRCA2 জিনের মিউটেশনের জন্য পরীক্ষা করা হয়েছিল।
সংক্ষেপণ: PVs, প্যাথোজেনিক রূপ; VUS, অনিশ্চিত তাৎপর্যের রূপ; WT, বন্য-প্রকার BRCA1/2 ক্রম।
আমরা আমাদের গবেষণাকে বেছে বেছে স্তন ক্যান্সারের দলগুলির উপর কেন্দ্রীভূত করেছি। রোগীদের গড় বয়স ছিল ৪৯ বছর (পরিসীমা ২৩-৮৯) এবং প্রধানত মহিলা ছিলেন (n=৩৭৬, অথবা ৯৭%)।
এই বিষয়গুলির মধ্যে, 64 (17%) তে BRCA1/2 মিউটেশন ছিল এবং তারা সকলেই মহিলা ছিল। পঁয়ত্রিশ (9%) তে PV ছিল এবং 29 (7.5%) তে VUS ছিল। 35টি প্যাথোজেনিক রূপের মধ্যে সতেরোটি (48.6%) BRCA1 তে এবং 18টি (51.4%) BRCA2 তে দেখা গেছে, যেখানে BRCA1 তে 5টি VUS (17.2%) এবং BRCA2 তে 24টি (82.8%) VUS দেখা গেছে (চিত্র 1 এবং 2)। MLPA বিশ্লেষণে LGR উপস্থিত ছিল না।
চিত্র ২. ৩৮৯ জন স্তন ক্যান্সার রোগীর BRCA1 এবং BRCA2 মিউটেশনের বিশ্লেষণ। (A) ৩৮৯ জন স্তন ক্যান্সার রোগীর মধ্যে প্যাথোজেনিক ভ্যারিয়েন্ট (PV) (লাল), অনিশ্চিত তাৎপর্যের ভ্যারিয়েন্ট (VUS) (কমলা) এবং WT (নীল) এর বিতরণ; (B) ৩৮৯ জন স্তন ক্যান্সার রোগীর পঁয়ত্রিশ (৯%) জনের BRCA1/2 প্যাথোজেনিক ভ্যারিয়েন্ট (PV) ছিল। তাদের মধ্যে, ১৭ জন (৪৮.৬%) ছিলেন BRCA1 PV বাহক (গাঢ় লাল) এবং ১৮ জন (৫১.৪%) ছিলেন BRCA2 বাহক (হালকা লাল); (C) ৩৮৯ জন রোগীর মধ্যে ২৯ জন (৭.৫%) ছিলেন VUS, ৫ জন (১৭.২%) ছিলেন BRCA1 জিন (গাঢ় কমলা) এবং ২৪ জন (৮২.৮%) ছিলেন BRCA2 জিন (হালকা কমলা)।
সংক্ষেপণ: PVs, প্যাথোজেনিক রূপ; VUS, অনিশ্চিত তাৎপর্যের রূপ; WT, বন্য-প্রকার BRCA1/2 ক্রম।
আমরা পরবর্তীতে BRCA1/2 PV রোগীদের মধ্যে BC আণবিক উপপ্রকারের প্রাদুর্ভাব তদন্ত করেছি। বিতরণে 2 (5.7%) লুমিনাল A, 15 (42.9%) লুমিনাল B, 3 (8.6%) লুমিনাল B-HER2+, 2 (5.7%) HER2+ এবং 13 (37.1%) TNBC রোগী অন্তর্ভুক্ত ছিল। BRCA1-পজিটিভ রোগীদের মধ্যে, 5 (29.4%) লুমিনাল B BC ছিল, 2 (11.8%) HER2+ রোগ ছিল এবং 10 (58.8%) TNBC ছিল। BRCA1 মিউটেশন ছাড়া টিউমারগুলি হয় লুমিনাল A অথবা লুমিনাল B-HER2+ ছিল (চিত্র 3)। BRCA2-পজিটিভ উপগোষ্ঠীতে, 10 (55.6%) টিউমার ছিল লুমিনাল B, 3 (16.7%) লুমিনাল B-HER2+, 3 (16.7%) TNBC এবং 2 (11.1%) ছিল লুমিনাল A (চিত্র 3)। এই গ্রুপে কোনও HER2+ টিউমার উপস্থিত ছিল না। সুতরাং, TNBC রোগীদের মধ্যে BRCA1 মিউটেশন প্রচলিত, যেখানে লুমেন B ব্যক্তিদের মধ্যে BRCA2 পরিবর্তনগুলি প্রধানত দেখা যায়।
চিত্র ৩: BRCA1 এবং BRCA2-তে প্যাথোজেনিক ভ্যারিয়েন্টযুক্ত রোগীদের মধ্যে স্তন ক্যান্সারের উপপ্রকারের প্রাদুর্ভাব। স্তন ক্যান্সার রোগীদের আণবিক উপপ্রকারের মধ্যে BRCA1- (গাঢ় লাল) এবং BRCA2- (হালকা লাল) PV-এর বিতরণ দেখানো হিস্টোগ্রাম। প্রতিটি বাক্সের মধ্যে রিপোর্ট করা সংখ্যা প্রতিটি স্তন ক্যান্সার উপপ্রকারের জন্য BRCA1 এবং BRCA2 PV আক্রান্ত রোগীদের শতাংশকে প্রতিনিধিত্ব করে।
সংক্ষেপণ: PVs, প্যাথোজেনিক রূপ; HER2+, মানুষের এপিডার্মাল গ্রোথ ফ্যাক্টর রিসেপ্টর 2 পজিটিভ; TNBC, ট্রিপল-নেগেটিভ স্তন ক্যান্সার।
পরবর্তীতে, আমরা BRCA1 এবং BRCA2 PV-এর ধরণ এবং জিন স্থানীয়করণ মূল্যায়ন করেছি। BRCA1 PV-তে, আমরা 7টি একক নিউক্লিওটাইড রূপ (SNV), 6টি মুছে ফেলা, 3টি অনুলিপি এবং 1টি সন্নিবেশ লক্ষ্য করেছি। শুধুমাত্র একটি মিউটেশন (c.5522delG) একটি নতুন আবিষ্কারের প্রতিনিধিত্ব করে। উভয় বিষয়ে সনাক্ত করা সবচেয়ে সাধারণ BRCA1 PV ছিল c.5035_5039delCTAAT। এই পরিবর্তনের মধ্যে BRCA1 এক্সন 15-এ পাঁচটি নিউক্লিওটাইড (CTAAT) মুছে ফেলা জড়িত, যার ফলে কোডন 1679-এ টাইরোসিন দ্বারা অ্যামিনো অ্যাসিড লিউসিন প্রতিস্থাপন করা হয়েছিল এবং একটি পূর্বাভাসিত বিকল্প স্টপ কোডন সহ একটি অনুবাদ ফ্রেমশিফ্টের কারণে অকাল প্রোটিন ছাঁটাই হয়। অন্যান্য সমস্ত পরিবর্তন শুধুমাত্র একটি ক্ষেত্রে সনাক্ত করা হয়েছে। উল্লেখযোগ্যভাবে, রিপোর্ট করা PV-গুলির মধ্যে একটি স্প্লাইস সাইট কনসেনসাস অঞ্চলে অবস্থিত ছিল (c.4357+1G>T) (সারণী 1)।
BRCA2 PV সম্পর্কে, আমরা 6টি মুছে ফেলা, 6টি SNV এবং 2টি অনুলিপি লক্ষ্য করেছি। পাওয়া কোনও পরিবর্তনই নতুন নয়। আমাদের জনসংখ্যায় তিনটি মিউটেশন পুনরাবৃত্তি হয়েছে, c.428dup এবং c.8487+1G>A 3টি বিষয়ে পর্যবেক্ষণ করা হয়েছে, তারপরে c.5851_5854delAGTT দুটি ক্ষেত্রে পুনরুদ্ধার করা হয়েছে। c.428dup পরিবর্তনের সাথে BRCA2 এর এক্সন 5 এ C এর পুনরাবৃত্তি জড়িত, যা একটি কাটা, অ-কার্যক্ষম প্রোটিন এনকোড করার পূর্বাভাস দেয়। c.8487+1G> একটি মিউটেশন BRCA2 ইন্ট্রন 19 (± 1,2) এর অন্তর্নিহিত অঞ্চলে ঘটে এবং স্প্লিসিং কনসেনসাস সিকোয়েন্সকে প্রভাবিত করে, যার ফলে পরিবর্তিত স্প্লিসিং ঘটে যার ফলে অস্বাভাবিক বা অনুপস্থিত প্রোটিন তৈরি হয়। c.5851_5854delAGTT প্যাথোজেনিক ভেরিয়েন্টটি কোডিং এক্সন 10-এ নিউক্লিওটাইড অবস্থান 5851 থেকে 5854 পর্যন্ত 4-নিউক্লিওটাইড মুছে ফেলার কারণে হয়। BRCA2 জিন এবং এর ফলে একটি পূর্বাভাসিত বিকল্প স্টপ কোডন (p.S1951WfsTer) সহ একটি অনুবাদমূলক ফ্রেমশিফ্ট তৈরি হয়। উল্লেখযোগ্যভাবে, পূর্বে রিপোর্ট করা হয়েছে, c.631G>A এবং c.7008-2A>T উভয় পরিবর্তন একই রোগীর মধ্যে সনাক্ত করা হয়েছিল।34 প্রথম মিউটেশনে BRCA2 এক্সন 7-এ অ্যাডেনোসিন (A) এর প্রতিস্থাপন জড়িত যা নিউক্লিওটাইড ধারণকারী গুয়ানিন (G) দিয়ে প্রতিস্থাপন করা হয় যার ফলে কোডন 211-এ ভ্যালাইন আইসোলিউসিনে পরিবর্তিত হয়, আইসোলিউসিন অ্যামিনো অ্যাসিড হল একটি অ্যামিনো অ্যাসিড যার বৈশিষ্ট্য অত্যন্ত অনুরূপ। এই পরিবর্তন স্বাভাবিক mRNA স্প্লাইসিংকে প্রভাবিত করে। দ্বিতীয় রূপটি একটি অন্তর্নিহিত অঞ্চলে অবস্থিত এবং BRCA2 এনকোডিং জিনের এক্সন 13-এর আগে দ্বিগুণ A থেকে থাইমিন (T) প্রতিস্থাপনের ফলে ঘটে। c.7008-2A>T পরিবর্তন বিভিন্ন দৈর্ঘ্যের একাধিক ট্রান্সক্রিপ্ট তৈরি করতে পারে। অধিকন্তু, BRCA2 PV-এর গ্রুপে, 18টি পরিবর্তনের মধ্যে 4টি (22.2%) ছিল অন্তর্নিহিত।
এরপর আমরা কার্যকরী ডোমেইন এবং প্রোটিন-বাইন্ডিং অঞ্চলে BRCA1/2 ক্ষতিকারক মিউটেশন ম্যাপ করেছি (চিত্র 4)। BRCA1 জিনে, 50% PV স্তন ক্যান্সার ক্লাস্টার অঞ্চলে (BCCR) অবস্থিত ছিল, যেখানে 22% মিউটেশন ডিম্বাশয়ের ক্যান্সার ক্লাস্টার অঞ্চলে (OCCR) অবস্থিত ছিল (চিত্র 4A)। BRCA2 PV-তে, 35.7% রূপগুলি BCCR অঞ্চলে অবস্থিত ছিল এবং 42.8% মিউটেশন OCCR-তে অবস্থিত ছিল (চিত্র 4B)। এরপর, আমরা BRCA1 এবং BRCA2 প্রোটিন ডোমেনের মধ্যে PV-এর অবস্থান মূল্যায়ন করেছি। BRCA1 প্রোটিনের জন্য, আমরা লুপ এবং কয়েলড কয়েল ডোমেনে তিনটি PV এবং BRCT ডোমেনে দুটি মিউটেশন পেয়েছি (চিত্র 4A)। BRCA2 প্রোটিনের জন্য, 4টি PV BRC রিপিট ডোমেনে ম্যাপ করা হয়েছে, যেখানে অলিগো/অলিগোস্যাকারাইড-বাইন্ডিং (OB) এবং টাওয়ার (T) ডোমেনে 3টি ইন্ট্রোনিক এবং 3টি এক্সোনিক পরিবর্তন সনাক্ত করা হয়েছে (চিত্র 4B)।
চিত্র ৪ BRCA1 এবং BRCA2 প্রোটিনের পরিকল্পিত উপস্থাপনা এবং প্যাথোজেনিক রূপগুলির স্থানীয়করণ। এই চিত্রটি স্তন ক্যান্সার রোগীদের মধ্যে BRCA1 (A) এবং BRCA2 (B) প্যাথোজেনিক রূপগুলির বিতরণ দেখায়। এক্সোনিক মিউটেশনগুলি নীল রঙে দেখানো হয়েছে, যখন ইন্ট্রোনিক রূপগুলি কমলা রঙে দেখানো হয়েছে। বারের উচ্চতা কেসের সংখ্যা প্রতিনিধিত্ব করে। BRCA1 এবং BRCA2 প্রোটিন এবং তাদের কার্যকরী ডোমেনগুলি রিপোর্ট করা হয়েছে। (A) BRCA1 প্রোটিনে একটি লুপ ডোমেন (RING) এবং একটি নিউক্লিয়ার লোকালাইজেশন সিকোয়েন্স (NLS), একটি কয়েলড-কয়েল ডোমেন, একটি SQ/TQ ক্লাস্টার ডোমেন (SCD), এবং একটি BRCA1 C-টার্মিনাল ডোমেন (BRCT) রয়েছে। (B) BRCA2 প্রোটিনে আটটি BRC পুনরাবৃত্তি, একটি হেলিকাল ডোমেন (হেলিকাল), তিনটি অলিগোনিউক্লিওটাইড/অলিগোস্যাকারাইড-বাইন্ডিং (OB) ভাঁজ, একটি টাওয়ার ডোমেন (T), এবং C পাশে একটি NLS রয়েছে। স্তন ক্যান্সার ক্লাস্টার অঞ্চল (BCCR) এবং ওভারিয়ান ক্যান্সার ক্লাস্টার অঞ্চল (OCCR) নামক অঞ্চলগুলি দেখানো হয়েছে নীচে।* স্টপ কোডন নির্ধারণকারী মিউটেশনগুলিকে প্রতিনিধিত্ব করে।
এরপর আমরা BC ক্লিনিকোপ্যাথোলজিক্যাল বৈশিষ্ট্যগুলি অনুসন্ধান করি যা BRCA1/2 PV-এর উপস্থিতির সাথে সম্পর্কিত হতে পারে। 181 জন BRCA1/2-নেতিবাচক রোগী (অ-বাহক) এবং সমস্ত বাহকের (n = 35) জন্য সম্পূর্ণ ক্লিনিকাল রেকর্ড পাওয়া যায়। টিউমার বিস্তার হার এবং গ্রেডের মধ্যে একটি সম্পর্ক ছিল।
আমাদের দলের (২৫%, পরিসর <১০-৯০%) মধ্যমার উপর ভিত্তি করে আমরা Ki-৬৭ এর বন্টন গণনা করেছি। Ki-৬৭ < ২৫% সহ বিষয়গুলিকে "নিম্ন Ki-৬৭" হিসাবে সংজ্ঞায়িত করা হয়েছিল, যেখানে ≥ ২৫% মান সহ ব্যক্তিদের "উচ্চ Ki-৬৭" হিসাবে বিবেচনা করা হয়েছিল। নন-ক্যারিয়ার এবং BRCA1 PV বাহকদের মধ্যে উল্লেখযোগ্য Ki-৬৭ পার্থক্য (p<0.01) পাওয়া গেছে (চিত্র ৫A)।
চিত্র ৫: BRCA1 এবং BRCA2 PV সহ এবং ছাড়া স্তন ক্যান্সারের মহিলাদের মধ্যে গ্রেড বিতরণের সাথে Ki-67 এর সম্পর্ক। (A) BRCA1 (18) বা BRCA2 (17) PV রোগীদের তুলনায় 181 জন নন-ক্যারিয়ার BC রোগীর মধ্যে মাঝারি Ki-67 মান দেখানো বক্সপ্লট। 0.5 এর নিচে P মান পরিসংখ্যানগতভাবে তাৎপর্যপূর্ণ বলে বিবেচিত হয়েছিল। (B) BRCA1 এবং BRCA2 মিউটেশন স্ট্যাটাস (WT বিষয়, BRCA1 এবং BRCA2 PV বাহক) অনুসারে হিস্টোলজিক্যাল গ্রেড গ্রুপে (G2 এবং G3) BC ক্যান্সার রোগীদের অ্যাসাইনমেন্টের প্রতিনিধিত্বকারী হিস্টোগ্রাম।
একইভাবে, আমরা পরীক্ষা করেছিলাম যে টিউমার গ্রেড BRCA1/2 PV এর উপস্থিতির সাথে সম্পর্কিত কিনা। যেহেতু আমাদের জনসংখ্যায় G1 BC অনুপস্থিত ছিল, তাই আমরা রোগীদের দুটি গ্রুপে ভাগ করেছি (G2 বা G3)। Ki-67 ফলাফলের সাথে সামঞ্জস্যপূর্ণ, বিশ্লেষণটি টিউমার গ্রেড এবং BRCA1 মিউটেশনের মধ্যে একটি পরিসংখ্যানগতভাবে গুরুত্বপূর্ণ সম্পর্ক প্রকাশ করেছে, যেখানে নন-ক্যারিয়ারদের তুলনায় BRCA1 ক্যারিয়ারে G3 টিউমারের অনুপাত বেশি (p<0.005) (চিত্র 5B)।
ডিএনএ সিকোয়েন্সিং প্রযুক্তির অগ্রগতি BRCA1/2 জেনেটিক পরীক্ষার ক্ষেত্রে অভূতপূর্ব অগ্রগতি সাধন করেছে, যার ফলে ক্যান্সারের পারিবারিক ইতিহাস রয়েছে এমন রোগীদের জন্য গুরুত্বপূর্ণ প্রভাব রয়েছে। আজ অবধি, আমেরিকান সোসাইটি অফ মেডিকেল জেনেটিক্স 35 এবং ENIGMA সিস্টেম অনুসারে প্রায় 20,000 BRCA1/2 রূপ চিহ্নিত এবং শ্রেণীবদ্ধ করা হয়েছে। 35,36 এটা সুপরিচিত যে BRCA1/2 মিউটেশনাল স্পেকট্রাম ভৌগোলিক অঞ্চলে ব্যাপকভাবে পরিবর্তিত হয়। 37 ইতালির মধ্যে, BRCA1/2 PV-এর হার 8% থেকে 37% পর্যন্ত ছিল, যা দেশ-বিদেশের মধ্যে ব্যাপক পরিবর্তনশীলতা দেখায়। 38,39 প্রায় 5 মিলিয়ন জনসংখ্যার সাথে, সিসিলি বাসিন্দার সংখ্যার দিক থেকে ইতালির পঞ্চম বৃহত্তম অঞ্চল। যদিও পশ্চিম সিসিলিতে BRCA1/2 এর বিতরণ সম্পর্কে তথ্য বিদ্যমান, দ্বীপের পূর্ব অংশে কোনও বিস্তৃত প্রমাণ নেই।
আমাদের গবেষণাটি পূর্ব সিসিলিতে BC রোগীদের মধ্যে BRCA1/2 PV-এর ঘটনা সম্পর্কে প্রথম প্রতিবেদনগুলির মধ্যে একটি।28 আমরা আমাদের বিশ্লেষণ BC-এর উপর কেন্দ্রীভূত করেছি, কারণ এটি আমাদের দলে এখন পর্যন্ত সবচেয়ে সাধারণ রোগ।
৩৮৯ জন BC রোগীর পরীক্ষা করার সময়, ৯% BRCA1/2 PV বহন করেছিলেন, যা BRCA1 এবং BRCA2 এর মধ্যে সমানভাবে বিতরণ করা হয়েছিল। এই ফলাফলগুলি ইতালীয় জনসংখ্যার পূর্বে রিপোর্ট করা ফলাফলের সাথে সামঞ্জস্যপূর্ণ।28 মজার বিষয় হল, আমাদের দলটির ৩% (১৩/৩৮৯) পুরুষ ছিলেন। পুরুষ স্তন ক্যান্সারের ক্ষেত্রে এই হার প্রত্যাশার চেয়ে বেশি (সমস্ত BC এর ১%),40 BRCA1/2 মিউটেশন ঝুঁকির উপর ভিত্তি করে আমাদের জনসংখ্যার নির্বাচন প্রতিফলিত করে।যাইহোক, এই পুরুষদের মধ্যে কেউই BRCA1/2 PV বিকাশ করেনি, তাই তারা PALB2, RAD51C এবং D এর মতো কম সাধারণ মিউটেশনের উপস্থিতি বাতিল করার জন্য আরও আণবিক বিশ্লেষণের জন্য প্রার্থী ছিলেন। অনিশ্চিত তাৎপর্যের রূপগুলি ৭% বিষয়ের মধ্যে পুনরুদ্ধার করা হয়েছিল যেখানে BRCA2 VUS স্পষ্ট ছিল। এমনকি এই ফলাফলটি পূর্ববর্তী প্রমাণের সাথে সামঞ্জস্যপূর্ণ।28,41,42
যখন আমরা BRCA1/2 মিউট্যান্ট মহিলাদের মধ্যে BC আণবিক উপপ্রকারের বন্টন বিশ্লেষণ করেছি, তখন আমরা TNBC এবং BRCA1 PV (58.8%) এবং লুমিনাল B BC এবং BRCA2 PV (55.6%) এর মধ্যে পরিচিত সম্পর্ক নিশ্চিত করেছি। 16,43 BRCA1 এবং BRCA2 PV বাহকদের মধ্যে লুমিনাল A এবং HER2+ টিউমার বিদ্যমান সাহিত্যের তথ্যের সাথে সামঞ্জস্যপূর্ণ। 16,43
এরপর আমরা BRCA1/2 PV-এর ধরণ এবং অবস্থানের উপর ফোকাস করি। আমাদের দলে, সবচেয়ে সাধারণ BRCA1 PV ছিল c.5035_5039delCTAAT। যদিও Incorvaia et al. তাদের সিসিলিয়ান কোহর্টে এই রূপটি বর্ণনা করেননি, অন্যান্য লেখকরা এটিকে একটি জার্মলাইন BRCA1 PV হিসাবে রিপোর্ট করেছেন।34 আমাদের কোহর্টে বেশ কয়েকটি BRCA1 PV পাওয়া গেছে - যেমন c.181T>G, c.514del, c.3253dupA এবং c.5266dupC - যা সিসিলিতে পর্যবেক্ষণ করা হয়েছে।28 এর মধ্যে, দুটি BRCA1 প্রতিষ্ঠাতা মিউটেশন (c.181T>G এবং c.5266dupC) সাধারণত পূর্ব ও মধ্য ইউরোপের (পোল্যান্ড, চেক), স্লোভেনীয়, অস্ট্রিয়ান, হাঙ্গেরিয়ান, বেলারুশিয়ান এবং জার্মান) আশকেনাজি ইহুদিদের মধ্যে পাওয়া যায়, 44,45 এবং, মার্কিন যুক্তরাষ্ট্র এবং আর্জেন্টিনায়, সম্প্রতি BC এবং OC আক্রান্ত ইতালীয় রোগীদের মধ্যে "পুনরাবৃত্ত জার্মলাইন রূপ" হিসাবে সংজ্ঞায়িত করা হয়েছে। 34c.514del রূপটি পূর্বে পালের্মো এবং মেসিনার উত্তর সিসিলির 8 জন স্তন ক্যান্সার রোগীর মধ্যে সনাক্ত করা হয়েছিল। মজার বিষয় হল, এমনকি ইনকোরভাইয়া এবং অন্যান্যরাও। ক্যাটানিয়ার কিছু পরিবারে c.3253dupA ভ্যারিয়েন্টটি পাওয়া গেছে।28 সবচেয়ে প্রতিনিধিত্বকারী BRCA2 PV হল c.428dup, c.5851_5854delAGTT এবং অন্তর্নিহিত ভ্যারিয়েন্ট c.8487+1G>A, যা পালেরমোতে c.428dup, c.5851_5854delAGTT আক্রান্ত একজন রোগীর ক্ষেত্রে আরও বিস্তারিতভাবে রিপোর্ট করা হয়েছে 28। উত্তর-পশ্চিম সিসিলির পরিবারগুলিতে, প্রধানত ট্রাপানি এবং পালেরমো অঞ্চলে PV দেখা গেছে, যেখানে c.5851_5854delAGTT PV উত্তর-পশ্চিম সিসিলির পরিবারগুলিতে দেখা গেছে।8487+1G>A ভ্যারিয়েন্টটি মেসিনা, পালেরমো এবং ক্যালটানিসেট্টার বিষয়গুলিতে বেশি দেখা গেছে।28 রেবেক এবং অন্যান্যরা। পূর্বে কলম্বিয়ায় c.5851_5854delAGTT পরিবর্তনের বর্ণনা দেওয়া হয়েছে। 37 সিসিলির (Agrigento, Siracusa এবং Ragusa) BC এবং OC রোগীদের মধ্যে আরেকটি BRCA2 PV, c.631+1G>A পাওয়া গেছে।28 উল্লেখযোগ্যভাবে, আমরা একই রোগীর মধ্যে দুটি BRCA2 রূপের (BRCA2 c.631G>A এবং c.7008-2A>T) সহাবস্থান লক্ষ্য করেছি, যা আমরা ধরে নিয়েছিলাম যে cis মোডে পৃথক করা হয়েছে, যেমনটি পূর্বে রিপোর্ট করা হয়েছিল।34,46 এই BRCA2 uble মিউটেশনগুলি প্রায়শই ইতালীয় অঞ্চলে পরিলক্ষিত হয় এবং অকাল স্টপ কোডন প্রবর্তন করতে দেখা গেছে, যা মেসেঞ্জার RNA স্প্লিসিংকে প্রভাবিত করে এবং BRCA2 প্রোটিনকে ব্যর্থ করে।47,48
আমরা প্রোটিন ডোমেন এবং জিনের সম্ভাব্য OCCR এবং BCCR অঞ্চলে BRCA1 এবং BRCA2 PV গুলিকে ম্যাপ করেছি। রেবেক এবং অন্যান্যরা এই অঞ্চলগুলিকে যথাক্রমে ডিম্বাশয় এবং স্তন ক্যান্সারের ঝুঁকিপূর্ণ ক্ষেত্র হিসাবে বর্ণনা করেছেন।49 তবে, জার্মলাইন রূপের অবস্থান এবং স্তন বা ডিম্বাশয়ের ক্যান্সারের ঝুঁকির মধ্যে সম্পর্ক সম্পর্কিত প্রমাণ বিতর্কিত রয়ে গেছে।28,50-52 আমাদের জনসংখ্যায়, BRCA1 PV গুলি মূলত BCCR অঞ্চলে অবস্থিত ছিল, যেখানে BRCA2 PV গুলি মূলত OCCR অঞ্চলে অবস্থিত ছিল।যাইহোক, আমরা সম্ভাব্য OCCR এবং BCCR অঞ্চল এবং BC বৈশিষ্ট্যগুলির মধ্যে কোনও সম্পর্ক খুঁজে পাইনি। এটি BRCA1/2 মিউটেশনের সীমিত সংখ্যক রোগীর কারণে হতে পারে।প্রোটিন ডোমেনের দৃষ্টিকোণ থেকে, BRCA1 PV গুলি সম্পূর্ণ প্রোটিন বরাবর বিতরণ করা হয় এবং BRCA2 পরিবর্তনগুলি অগ্রাধিকারমূলকভাবে BRC পুনরাবৃত্তি ডোমেনে পাওয়া যায়।
অবশেষে, আমরা BRCA1/2 PV-এর সাথে BC ক্লিনিকোপ্যাথলজিকাল বৈশিষ্ট্যগুলিকে সম্পর্কযুক্ত করেছি। সীমিত সংখ্যক রোগী অন্তর্ভুক্ত থাকার কারণে, আমরা Ki-67 এবং টিউমার গ্রেডের মধ্যে কেবল একটি উল্লেখযোগ্য সম্পর্ক খুঁজে পেয়েছি। যদিও Ki-67-এর মূল্যায়ন এবং ব্যাখ্যা কিছুটা বিতর্কিত রয়ে গেছে, এটি নিশ্চিত যে উচ্চ প্রসারণ হার রোগের পুনরাবৃত্তির ঝুঁকি বৃদ্ধি এবং বেঁচে থাকার হ্রাসের সাথে সম্পর্কিত। আজ অবধি, "উচ্চ" এবং "নিম্ন" Ki-67-এর মধ্যে পার্থক্য করার জন্য কাটঅফ হল 20%। যাইহোক, এই থ্রেশহোল্ড আমাদের BRCA1/2 মিউটেশন রোগীর জনসংখ্যার ক্ষেত্রে প্রযোজ্য নয়, যার গড় Ki-67 মান 25%। উচ্চ Ki-67 হারের এই প্রবণতা আমাদের লুমিনাল B এবং TNBC কোহর্টগুলিতে প্রসার দ্বারা ব্যাখ্যা করা যেতে পারে, যার মধ্যে কয়েকটি লুমিনাল A টিউমার উপস্থিত ছিল। যাইহোক, কিছু প্রমাণ থেকে মনে হচ্ছে যে একটি উচ্চতর Ki-67 কাটঅফ (25-30%) রোগীদের তাদের পূর্বাভাস অনুসারে আরও ভালভাবে স্তরবদ্ধ করতে পারে।53,54 আমাদের বিশ্লেষণের ফলাফল থেকে, একটি উল্লেখযোগ্য সম্পর্ক আশ্চর্যজনক নয়। উচ্চ Ki-67 এবং গ্রেড এবং BRCA1 PV এর উপস্থিতি। প্রকৃতপক্ষে, BRCA1-সম্পর্কিত টিউমারগুলি TNBC-এর বৈশিষ্ট্য এবং আরও আক্রমণাত্মক বৈশিষ্ট্য প্রদর্শন করে।16,17
উপসংহারে, এই গবেষণাটি পূর্ব সিসিলির একটি BC কোহর্টে BRCA1/2 এর মিউটেশনাল স্ট্যাটাস সম্পর্কে একটি প্রতিবেদন প্রদান করে। সামগ্রিকভাবে, আমাদের ফলাফলগুলি পূর্ব-বিদ্যমান প্রমাণের সাথে সামঞ্জস্যপূর্ণ, উভয় ক্ষেত্রেই মিউটেশনের প্রাদুর্ভাব এবং BC-তে ক্লিনিকোপ্যাথলজিকাল বৈশিষ্ট্য। BRCA1/2-মিউট্যান্ট BC রোগীদের বৃহত্তর জনসংখ্যার উপর আরও গবেষণা, যেমন মাল্টিজেনোম এক্সপেন্ডেড মিউটেশনাল বিশ্লেষণ ব্যবহার করে, BRCA1/2 এর তুলনায় স্বতন্ত্র এবং কম ঘন ঘন PV-এর উপস্থিতি মূল্যায়ন করার জন্য প্রয়োজনীয়। এটি জেনেটিক মিউটেশনের কারণে ক্যান্সারের ঝুঁকিতে থাকা বিষয়গুলির ক্রমবর্ধমান সংখ্যা সনাক্তকরণ এবং সঠিক ব্যবস্থাপনার অনুমতি দেবে।
আমরা নিশ্চিত করেছি যে রোগীরা গবেষণার উদ্দেশ্যে তাদের টিউমারের নমুনা বেনামে প্রকাশ করার জন্য অবহিত সম্মতিতে স্বাক্ষর করেছেন। হেলসিঙ্কির ঘোষণাপত্র অনুসারে সমস্ত রোগী লিখিত অবহিত সম্মতিতে স্বাক্ষর করেছেন। AOU Policlinico “G.Rodolico – S.Marco” এর নীতি অনুসারে, এই গবেষণাটি নীতিগত পর্যালোচনা থেকে অব্যাহতিপ্রাপ্ত ছিল কারণ BRCA1/2 বিশ্লেষণ ক্লিনিকাল অনুশীলন অনুসারে সম্পাদিত হয়েছিল এবং সমস্ত রোগী লিখিত অবহিত সম্মতি দিয়েছিলেন। রোগীরাও গবেষণার উদ্দেশ্যে তাদের ডেটা ব্যবহারের জন্য সম্মতি দেন।
নীতিশাস্ত্র কমিটির অনুরোধ অনুসারে স্তন ক্যান্সার রোগীদের যত্নে সহায়তার জন্য আমরা অধ্যাপক পাওলো ভিগনেরিকে ধন্যবাদ জানাই।
ফেদেরিকা মার্টোরানা ইস্তিতুতো জেন্টিলি, এলি লিলি, নোভার্টিস, ফাইজার থেকে সম্মাননা প্রতিবেদন করেছেন। অন্যান্য লেখকরা এই কাজের ক্ষেত্রে কোনও স্বার্থের দ্বন্দ্ব ঘোষণা করেননি।
১. সুং এইচ, ফেরলে জে, সিগেল আরএল, প্রমুখ। গ্লোবাল ক্যান্সার পরিসংখ্যান ২০২০: গ্লোবোকান বিশ্বের ১৮৫টি দেশে ৩৬টি ক্যান্সারের ঘটনা এবং মৃত্যুহার অনুমান করে। সিএ ক্যান্সার জে ক্লিন.২০২১;৭১(৩):২০৯-২৪৯.ডোই: ১০.৩৩২২/সিএএসি.২১৬৬০