Niha Javascript di geroka te de neçalak e. Dema ku javascript neçalak be, hin taybetmendiyên vê malperê dê nexebitin.
Bi hûrguliyên xwe yên taybet û dermanê taybetî yê balkêş qeyd bikin û em ê agahdariya ku hûn peyda dikin bi gotarên di databasa meya berfireh de bidin hev û di cih de kopiyek PDF-ê ji we re bişînin.
作者 Stella S, Vitale SR, Martorana F, Massimino M, Pavone G, Lanzafame K, Bianca S, Barone C, Gorgone C, Fichera M, Manzella L
Stefania Stella, 1,2 Silvia Rita Vitale, 1,2 Federica Martorana, 1,2 Michele Massimino, 1,2 Giuliana Pavone, 3 Katia Lanzafame, 3 Sebastiano Bianca, 4 Chiara Barone, 5 Cristina Gorgone, 6 Marco Ficheraze ji Wezareta Lichea11, û Dermanê Ezmûnî, Zanîngeha Catania, Catania, 95123, Italytalya;2 Navenda Onkolojî û Hematolojiyê ya Ezmûnî, AOU Policlinico "G.Rodolico - San Marco", Catania, 95123, Îtalya; 3 Onkolojiya Bijîjkî, AOU Policlinico "G. Rodolico - San Marco", Catania, 95123, Îtalya; 4 Genetics Medical, ARNAS Garibaldi, Catania, 95123, Îtalya; 5 Medicine Genetics, ASP, Syracuse, 96100, Îtalya; 6 Beşa Zanistên Biyopizîşkî û Biyoteknolojiyê, Zanîngeha Catania, Genetics Pizîşkî, Catania, Îtalya, 95123; 7Oasi Research Institute-IRCCS, Troina, 94018, Îtalya Peywendî: Stefania Stella, tel +39 095 378 1946, email [email protected]; [email protected] Armanc: Mutasyonên xêza germî di BRCA1 û BRCA2 û kansera pêsîrê (BC), hêkdankê (OC) ya damezrandî û yên din ên ku bi rîska penceşêrê ya jiyanê ve girêdayî ne. Testkirina gena BRCA ji bo nirxandina rîska takekesî, û her weha ji bo dîtina rêbazên pêşîlêgirtinê di hilgirên saxlem de û amadekirina dermankirinê di nexweşên penceşêrê de girîng e. Belavbûna guhertinên BRCA1 û BRCA2 li herêmên cografîk pir diguhere, û her çend daneyên li ser guhertoyên patojen ên BRCA di malbatên Sîcîlyayî de hene jî, lêkolînên ku bi taybetî nifûsa li rojhilatê Sîcîlyayê hedef digirin kêm in.Armanca lêkolîna me lêkolîna bûyer û belavbûna guhertinên xêza germî ya patojen a BRCA di komek nexweşên BC ji rojhilatê Sîcîlyayê de bû û nirxandina têkiliya wan bi taybetmendiyên BC yên taybetî re bi karanîna rêzkirina nifşê din.Hebûna guhertinan bi pileya tumor û endeksa zêdebûnê ve girêdayî ye.ENCAM: Bi tevahî, 35 nexweş (9%) guhertoyek patojen a BRCA hebû, 17 (49%) di BRCA1 de û 18 (51%) di BRCA2 de.Guhertinên BRCA1 di nexweşên BC yên sê-neyînî de belav in, lê mutasyonên BRCA2 di BC ya luminal de pirtir in. nexweş. Li gorî kesên ku guhertoyên BRCA1 hene, pileya tumor û endeksa proliferasyonê ya wan pir bilindtir bû. Encam: Dîtina me nihêrînek giştî li ser rewşa mutasyona BRCA ya nexweşên BC yên ji rojhilatê Sîcîlyayê peyda dike û rola analîza NGS di destnîşankirina nexweşên bi BC ya mîratî de piştrast dike. Bi tevahî, ev dane li gorî delîlên berê yên ku piştgirî didin ceribandina BRCA ji bo pêşîlêgirtin û dermankirina rast a penceşêrê li hilgirên mutasyonê ne.
Penceşêra pêsîrê (PK) nexweşiya herî berbelav a cîhanê û penceşêra herî kujer a jinan e.1 Taybetmendiyên biyolojîkî yên ku pêşbîniya PK û tevgera klînîkî diyar dikin bi demê re bi berfirehî hatine lêkolîn kirin û qismî hatine zelal kirin. Bi rastî, çend nîşankerên cîgir niha ji bo dabeşkirina PK di bin cureyên molekulî yên cûda de têne bikar anîn. Ew wergirê estrogen (ER) û/an progesteron (PgR), zêdekirina wergirê faktora mezinbûna epidermal a mirovan 2 (HER2), endeksa zêdebûnê Ki-67 û pileya tumor (G) ne.2 Têkeliya van guherbaran kategoriyên PK yên jêrîn destnîşan kir: 1) Tumorên luminal, ku îfadeya ER û/an PgR nîşan didin, ji sedî 75ê PK-yan pêk tînin. Ev tumor bêtir li Luminal A, dema ku Ki-67 di bin 20% de û HER2 neyînî bû, û Luminal B, dema ku Ki-67 wekhev an jî ji 20% jortir bû û di hebûna zêdekirina HER2 de bû, bêyî ku endeksa zêdebûnê çi be, hatin dabeş kirin; 2) Tûmorên HER2+ ku ER û PgR neyînî ne lê amplîfîkasyona HER2 nîşan didin. Ev kom ji sedî 10ê hemî tûmorên pêsîrê pêk tîne; 3) Kansera pêsîrê ya sê-neyînî (TNBC), ku îfadeya ER û PgR û amplîfîkasyona HER2 nîşan nade, ji sedî 15ê kanserên pêsîrê pêk tîne.2-4
Di nav van bincureyên BC de, pileya tumor û endeksa zêdebûnê nîşaneyên biyolojîk ên xaçerêyî temsîl dikin ku rasterast û serbixwe bi êrîşkariya tumor û pêşbîniyê ve girêdayî ne.5,6
Ji bilî taybetmendiyên biyolojîkî yên jorîn, di van çend salên dawî de rola guhertinên genetîkî yên mîrasî yên ku dibin sedema pêşveçûna BC girîngtir bûye.7 Nêzîkî 1 ji 10 tumorên memikê ji ber guhertinên germinal ên di genên taybetî de mîras digirin.8 Du lêkolînên mezin ên epidemiolojîk ku zêdetirî 180,000 jinan tê de ne, vê dawiyê komek ji heşt genan (ango, ATM, BARD1, BRCA1, BRCA2, CHK2, PALB2, RAD51C, û RAD51D) destnîşan kirine ku bi giranî berpirsiyarê BC ya mîrasî ne. Di nav van genan de, BRCA1 û BRCA2 (ku ji vir û pê ve wekî BRCA1/2 têne binavkirin) têkiliya herî xurt bi pêşveçûna tumorên memikê re nîşan dan.9-12 Bi rastî, mutasyonên germinal ên BRCA1/2 xetera BC ya jiyanê û her weha nexweşiyên din ên xerab, di nav de hêkdank, prostat, pankreas, kolorektal, û melanoma, bi girîngî zêde dikin. Ji 13 heta 80 salî, rêjeya berhevkirî ya BC di jinên bi guhertoya patogenîk a BRCA1 (PV) de 72% û di jinên bi BRCA2 de 69% e. PV.14
Bi taybetî, weşaneke dawî nîşan dide ku rîska BC bi celebê PV ve girêdayî ye. Bi rastî, li gorî guhertoyên kurtkirî yên patogenîk, guhertoyên şaş ên eşkere, nemaze di gena BRCA1 de, bi rîska kêmkirî ya BC ve girêdayî ne, nemaze di jinên pîr de.15
Hebûna BRCA1 an BRCA2 PV bi taybetmendiyên biyolojîk û klînîkopatolojîk ên cûda ve girêdayî bû.16,17 BC-yên bi BRCA1 ve girêdayî bi gelemperî ji hêla klînîkî ve êrîşkar, kêm cûdakirî û pir zêde belav dibin. Ev tumor bi gelemperî sê caran neyînî ne û temenê destpêka wan zû ye. Tumorên ku di nexweşên bi mutasyona BRCA2 de çêdibin bi gelemperî pileyên navîn heta baş-cûdakirî û nîşaneyên zêdebûna guherbar nîşan didin. Ev tumor di lumen B de pirtir in û bi gelemperî di mezinên pîr de çêdibin.16-18 Bi taybetî, mutasyonên di BRCA1 û BRCA2 de hesasiyeta li hember dermankirinên taybetî, di nav de xwêyên platîn û dermanên hedefgirtî yên wekî astengkerên polîmerazê polî(ADP-rîboz) (PARPi) zêde dikin.19,20
Di çend salên borî de, bicîhanîna rêzkirina nifşê pêşerojê (NGS) di pratîka klînîkî de rê daye hejmareke zêde ya nexweşên BC ku ji bo sendromên hesasiyeta penceşêrê, di nav de BRCA1/2, ceribandina molekulî bikin.21 Di heman demê de, pênaseyên li ser bingeha pîvanên rast ên di derbarê dîroka malbatê, demografîk û taybetmendiyên klînîkopatolojîk de ji bo destnîşankirina çêtir a kesên ku hêjayî ceribandina BRCA1/2 ne, hatine çêkirin.22,23 Di vê çarçoveyê de, delîl li ser ceribandina BRCA1/2 di nifûsên taybetî de kom dibin, ku cûdahiyên di navbera herêmên erdnîgarî de ronî dikin.24–27 Her çend raporên li ser koma BC li rojavayê Sîcîlyayê hene jî, daneyên kêmtir li ser ceribandina BRCA1/2 di nifûsa rojhilatê Sîcîlyayê de hene.28,29
Em li vir encamên ceribandina BRCA1/2 ya xeta germî li nexweşên BC ji rojhilatê Sîcîlyayê diyar dikin, û hebûna mutasyonên BRCA1 an BRCA2 bi taybetmendiyên sereke yên klînîkî û patholojîk ên van tumoran re bêtir têkildar dikin.
Lêkolîneke paşverû li "Navenda Onkolojî û Hematolojiya Ceribandinî" ya li Nexweşxaneya Policlinico.Rodolico – San Marco li Catania hate kirin. Ji Çileya 2017an heta Adara 2021an, bi tevahî 455 nexweşên bi penceşêra memik û hêkdank, melanoma, pankreas an prostatê ji bo testa genetîkî ya BRCA/2 ji bo laboratûara me ya teşhîsa molekulî hatin şandin. Ev lêkolîn li gorî Danezana Helsînkî hate kirin, û hemî beşdaran berî analîza molekulî razîbûna xwe ya agahdar a nivîskî dan.
Taybetmendiyên hîstolojîk û biyolojîk (ER, PgR, rewşa HER2, Ki-67, û pileya) ya BC li ser biyopsiya bingehîn an nimûneyên cerrahî hatin nirxandin, tenê pêkhateyên tumorê yên êrîşkar hatin hesibandin. Li ser bingeha van taybetmendiyan, BC wiha hatin dabeşkirin: luminal A (ER+ û/an PgR+, HER2-, Ki-67<20%), luminal B (ER+ û/an PgR+, HER2-, Ki-67≥20%), luminal B-HER2+ (ER û/an PgR+, HER2+), HER2+ (ER û PgR-, HER2+) an sêqat neyînî (ER û PgR-, HER2-).
Berî nirxandina rewşa mutasyonên BRCA1 û BRCA2, tîmek pirdisîplîn ku onkolog, genetîkolog û psîkologek di nav de bûn, ji bo her nexweşek şêwirmendiya genetîka tumorê pêk anî da ku hebûna BRCA1 û/an BRCA1 an jî kesên ku xetera wan a PV di gena BRCA2 de heye diyar bikin. Hilbijartina nexweşan li gorî rêbernameyên Komeleya Onkolojiya Pizîşkî ya Îtalyayê (AIOM) û pêşniyarên herêmî yên Sîcîlyayî hate kirin.30,31 Ev pîvan ev in: (i) dîroka malbatî ya guhertoyên nexweşî yên naskirî di genên hesasiyetê de (mînak, BRCA1, BRCA2, TP53, PTEN); (ii) mêrên bi BC; (iii) yên bi BC û OC; (iv) jinên bi BC <36 salî, TNBC <60 salî, an BC du alî <50 salî; (v) dîroka bijîşkî ya kesane ya BC <50 salî û herî kêm yek xizmek pileya yekem: (a) BC < 50 salî; (b) OC ne-mucînoz û ne-sînor a her temenî; (c) BC du alî; (d) BC mêr; (e) kansera pankreasê; (f) kansera prostatê; (vi) du an zêdetir Dîroka kesane ya BC > 50 sal û dîroka malbatî ya BC, OC, an kansera pankreasê ji bo xizmên ku xizmên pileya yekem ên hev in (tevî xizmên ku ew bi wan re xizmên pileya yekem e); (vii) Dîroka kesane ya OC û herî kêm yek xizmek pileya yekem: (a) BC <50 sal; (b) NOC; (c) BC du alî; (d) BC ya mêr; (vii) jin bi OC ya seroz a pileya bilind.
Ji her nexweşek nimûneyek xwîna periferîk a 20 mL hat wergirtin û di lûleyên EDTA (BD Biosciences) de hat berhevkirin. DNAya genomîk ji nimûneyên xwîna tevahî yên 0.7 mL bi karanîna QIAsymphony DSP DNA Midi kit Isolation Kit (QIAGEN, Hilden, Îtalya) li gorî rêwerzên çêker hat veqetandin û di nav Qubit® 3.0 Fluorometer (Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA, DYA) re hat derbaskirin. Perform quantification. Dewlemendkirina hedef û amadekirina pirtûkxaneyê ji hêla Oncomine™ BRCA Research Assay Chef ve têne kirin, amade ne ku di Kîta Ion AmpliSeq™ Chef Reagents DL8 de ji bo amadekirina pirtûkxaneyê ya otomatîk li gorî rêwerzên çêker werin barkirin. Kît ji du komên primerên PCR yên piralî pêk tê ku dikarin ji bo lêkolîna hemî genên BRCA1 (NM_007300.3) û BRCA2 (NM_000059.3) werin bikar anîn. Bi kurtasî, 15 µL ji her DNA-ya nimûneya ziravkirî (10 ng) ji bo amadekirina pirtûkxaneyê li plakayên barkodkirî hatin zêdekirin û hemî reagent û madeyên xerckirinê li ser amûra Ion Chef™ hatin barkirin. Piştre amadekirina pirtûkxaneyê ya otomatîk û komkirina pirtûkxaneya nimûneya barkodkirî li ser amûra Ion Chef™ hatin kirin. Piştre hejmara pirtûkxaneyên amadekirî ji hêla Qubit® 3.0 Fluorometer (Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA, USA) ve li gorî rêwerzên çêker hate nirxandin. Di dawiyê de, pirtûkxane di rêjeyên ekîmolar de di lûleyên nimûneya pirtûkxaneya Ion Chef™ (lûleyên barkodkirî) de têne hev kirin û têne barkirin. li ser amûra Ion Chef™. Rêzkirin bi karanîna amûrek Ion Torrent S5 (Thermo Fisher Scientific) (Thermo Fisher Scientific) û çîpek Ion 510 (Thermo Fisher Scientific) hate kirin. Analîza daneyan ji hêla Amplicon Suite (SmartSeq srl) û Nermalava Ion Reporter ve hate kirin.
Hemû navên varyantan rêbernameyên heyî yên Konsorsiyûma Guherîna Genoma Mirovan, ku li ser înternetê hene (HGVS, http://www.hgvs.org/mutnomen), dişopandin. Girîngiya klînîkî ya varyantên BRCA1/2 bi karanîna dabeşkirina Konsorsiyûma Navneteweyî ENIGMA (Tora Li ser Delîlan ji bo Şîrovekirina Alelên Mutant ên Germline, https://enigmaconsortium.org/) û şêwirmendiya databasên cûda yên wekî ARUP, BRCAEXCHANGE, ClinVar, IARC_LOVD, û UMD, hate destnîşankirin. Dabeşkirin pênc kategoriyên rîskê yên cihêreng dihewîne: benîgn (kategoriya I), muhtemelen benîgn (kategoriya II), varyanta bi girîngiya nediyar (VUS, kategoriya III), muhtemelen patogen (kategoriya IV), û patogen (kategoriya V). VarSome her weha bandora mutasyonan li ser avahî û fonksiyona proteînê analîz kir, amûrek agahdar bi gihîştina 30 databasan.32
Ji bo destnîşankirina girîngiya klînîkî ya potansiyel ji bo her VUS-ê, algorîtmayên pêşbîniya proteîna hesabkerî yên jêrîn hatin bikar anîn: MUTATION TASTER, 33 PROVEAN-SIFT (http://provean.jcvi.org/index.php), POLYPHEN-2 (http:// /genetics.bwh.harvard.edu/pph2/) û Align-GVGD (http://agvgd.hci.utah.edu/agvgd_input.php). Guhertoyên ku wekî pola 1 û 2 hatine dabeş kirin wekî celebê kovî hatin hesibandin.
Rêzkirina Sanger hebûna her guhertoyek patojenîk piştrast kir. Bi kurtasî, ji bo her guhertoyek tespîtkirî cotek prîmerên taybetî bi karanîna rêzikên referansê yên gena BRCA1 û BRCA2 (bi rêzê ve NG_005905.2, NM_007294.3 û NG_012772.3, NM_000059.3) hate sêwirandin. Ji ber vê yekê, PCR-ya hedefgirtî û dûv re rêzkirina Sanger hate kirin.
Nexweşên ku testa wan ji bo gena BRCA1/2 neyînî bû, li gorî rêwerzên çêker, bi amplifikasyona probê ya girêdayî girêdana piralî (MLPA) hatin ceribandin da ku hebûna ji nû ve rêzkirinên genomîk ên mezin (LGR) were nirxandin. Bi kurtasî, nimûneyên DNA têne denatûrkirin û heta 60 probên taybetî yên gena BRCA1 û BRCA2 têne bikar anîn, ku her yek rêzek DNA-ya taybetî bi qasî 60 nukleotîd dirêj tespît dike. Berhemên amplifikasyona probê, ku ji komek bêhempa ya amplîkonên PCR pêk tên, dûv re bi elektroforeza kapîlar û bi nermalava Cofalyser.Net re bi hevkariya tabloyên Cofalyser ên taybetî yên koma guncan (www.mrcholland.com) hatin analîzkirin.
Guhêrbarên klînîkî-patolojîk ên bijartî (pileya hîstolojîk û endeksa zêdebûna Ki-67%) bi hebûna BRCA1/2 PV ve girêdayî bûn, ku bi karanîna nermalava Prism v. 8.4 bi karanîna testa rastîn a Fisher hate hesab kirin, bi texmîna ku nirxa p <0.05 girîng e.
Di navbera Çileya 2017 û Adara 2021an de, 455 nexweş ji bo mutasyonên BRCA1/2 yên xeta germî hatin kontrolkirin. Testa mutasyonê li Navenda Onkolojiya Ceribandinî û Hematolojiyê ya Nexweşxaneya Policlinico hate kirin. Li gorî rêbernameya Sîcîlyayî (http://www.gurs.regione.sicilia.it/Indicep1.htm, N. 02-Venerdì 10 Gennaio 2020), "Rodolico ya Catania - San Marco" bi tevahî 389 nexweş hene. 37 nexweşên penceşêra memikê, 16 nexweşên penceşêra hêkdankê, 8 nexweşên penceşêra pankreasê, 8 nexweşên penceşêra prostatê û 5 nexweşên melanoma hebûn. Belavbûna nexweşan li gorî celebê penceşêrê û encamên analîzê di Wêne 1 de tê nîşandan.
Wêne 1 nexşeyek herikînê nîşan dide ku nihêrînek giştî ya lêkolînê nîşan dide. Nexweşên bi tumorên pêsîran, melanoma, pankreasê, prostatê, an jî hêkdankê ji bo mutasyonên di genên BRCA1 û BRCA2 de hatin ceribandin.
Kurtenav: PV, varyanta patogenîk; VUS, varyanta bi girîngiya nediyar; WT, rêza BRCA1/2 ya cureya kovî.
Me lêkolînên xwe bi awayekî bijartî li ser komên penceşêra memikê hûr kirin. Temenê navîn ê nexweşan 49 salî bû (di navbera 23-89 de) û bi piranî jin bûn (n=376, an jî %97).
Ji van mijaran, 64 (17%) mutasyonên BRCA1/2 hebûn û hemî jî jin bûn. Sî û pênc (9%) PV û 29 (7.5%) VUS hebûn. Ji 35 guhertoyên patogenîk hevdeh (48.6%) di BRCA1 û 18 (51.4%) di BRCA2 de çêbûn, di heman demê de 5 VUS di BRCA1 (17.2%) û 24 (82.8%) di BRCA2 de çêbûn (Wêne 1 û 2). LGR di analîza MLPA de tune bû.
Wêne 2. Analîza mutasyonên BRCA1 û BRCA2 li 389 nexweşên penceşêra memikê. (A) Belavbûna guhertoyên patogenîk (PV) (sor), guhertoyên bê girîngî (VUS) (porteqalî), û WT (şîn) li 389 nexweşên penceşêra memikê; (B) 389 nexweşên penceşêra memikê Sî û pênc (9%) guhertoyên patogenîk (PV) yên BRCA1/2 hebûn. Di nav wan de, 17 (48.6%) hilgirên PV yên BRCA1 (sorê tarî) û 18 (51.4%) hilgirên BRCA2 (sorê sivik) bûn; (C) Ji 389 kesan 29 (7.5%) hilgirên VUS, 5 (17.2%) genên BRCA1 (porteqalî tarî) û 24 (82.8%) genên BRCA2 (porteqalî sivik) hilgirtibûn.
Kurtenav: PV, varyanta patogenîk; VUS, varyanta bi girîngiya nediyar; WT, rêza BRCA1/2 ya cureya kovî.
Piştre me rêjeya belavbûna jêr-tîpên molekulî yên BC li nexweşên bi BRCA1/2 PV lêkolîn kir. Belavbûn 2 (5.7%) luminal A, 15 (42.9%) luminal B, 3 (8.6%) luminal B-HER2+, 2 (5.7%) HER2+ û 13 (37.1%) nexweşên TNBC dihewîne. Di nav nexweşên BRCA1-pozîtîf de, 5 (29.4%) luminal B BC, 2 (11.8%) nexweşiya HER2+ hebûn, û 10 (58.8%) TNBC hebûn. Tumorên bê mutasyonên BRCA1 an luminal A an jî luminal B-HER2+ bûn (Wêne 3). Di binkoma BRCA2-pozîtîf de, 10 (55.6%) tumor luminal B, 3 (16.7%) luminal B-HER2+, 3 (16.7%) TNBC û 2 (11.1%) luminal A bûn (Wêne 3). Di vê komê de tumorên HER2+ tunebûn. Ji ber vê yekê, mutasyonên BRCA1 di nexweşên TNBC de pir in, lê guhertinên BRCA2 di kesên lumen B de serdest in.
Wêne 3 Belavbûna bincureyên penceşêra memikê li nexweşên bi guhertoyên patogenîk di BRCA1 û BRCA2 de. Hîstogramên ku belavbûna PV-yên BRCA1- (sorê tarî) û BRCA2- (sorê vekirî) di navbera bincureyên molekulî yên nexweşên penceşêra memikê de nîşan didin. Hejmarên ku di her qutiyê de hatine ragihandin rêjeya nexweşên bi PV-ya BRCA1 û BRCA2 ji bo her bincureya penceşêra memikê temsîl dikin.
Kurtenav: PV, varyanta patogenîk; HER2+, wergirê faktora mezinbûna epidermal a mirovî 2 pozîtîf; TNBC, kansera pêsîrê ya sêqat-neyînî.
Piştre, me celeb û cihê genê yê PV-yên BRCA1 û BRCA2 nirxand. Di BRCA1 PV de, me 7 guhertoyên yek nukleotîd (SNV), 6 jêbirin, 3 dubarekirin û 1 danîn dît. Tenê yek mutasyon (c.5522delG) vedîtinek nû temsîl dike. PV-ya BRCA1-ê ya herî gelemperî ku di her du mijaran de hatî tespît kirin c.5035_5039delCTAAT bû. Ev guhertin jêbirina pênc nukleotîdan (CTAAT) di eksona 15-an a BRCA1 de vedihewîne, ku di encamê de leucine asîda amînî bi tîrozîn li kodona 1679-an guheztiye, û ji ber guheztina çarçoveya wergerê bi kodona rawestandina alternatîf a pêşbînîkirî rê li ber qutkirina proteîna zû vekiriye. Hemî guhertinên din tenê di yek rewşê de têne tespît kirin. Bi taybetî, yek ji PV-yên hatine ragihandin di herêma lihevkirina cihê splice de cih girt (c.4357+1G>T) (Tabloya 1).
Derbarê BRCA2 PV de, me 6 jêbirin, 6 SNV û 2 dubarekirin dîtin. Ti ji guhertinên ku hatine dîtin nû nînin. Sê mutasyon di nifûsa me de dubare bûn, c.428dup û c.8487+1G>A di 3 kesan de hatin dîtin, û piştre c.5851_5854delAGTT di du rewşan de hat dîtin. Guhertina c.428dup dubarekirina C di exon 5 a BRCA2 de vedihewîne, ku tê texmîn kirin ku proteînek kurtkirî û ne-fonksiyonel kod dike. Mutasyona c.8487+1G>A di herêma întronîk a întron 19 a BRCA2 (± 1,2) de çêdibe û bandorê li rêza konsensusê ya splicing dike, di encamê de splicing guherî ye ku dibe sedema proteînek anormal an jî tune. Guhertoya patogenîk a c.5851_5854delAGTT ji ber jêbirina 4-nûkleotîd ji pozîsyonên nukleotîd 5851 heta 5854 di exon 10 a kodkirina gena BRCA2 de ye û dibe sedema... guherîna çarçoveya wergerandinê bi kodonek rawestandina alternatîf a pêşbînîkirî (p.S1951WfsTer). Bi taybetî, wekî ku berê hatiye ragihandin, her du guhertinên c.631G>A û c.7008-2A>T di heman nexweş de hatine tespît kirin.34 Mutasyona yekem guhertina adenosine (A) di eksona 7-an a BRCA2 de bi guanîn (G) ku nukleotîd tê de heye vedihewîne ku di encamê de valîn bo îzoleucîn li kodona 211-an, îzoleucîn Asîda amînî asîdek amînî ye ku xwedî taybetmendiyên pir dişibin hev e. Ev guhertin bandorê li ser splicing-a normal a mRNA dike. Guhertoya duyemîn di herêmek întronîk de ye û dibe sedema guhertina ducarî ya A bo tîmîn (T) berî eksona 13-an a gena ku BRCA2 kod dike. Guhertina c.7008-2A>T dikare gelek transkrîptên bi dirêjahiyên cûda çêbike. Wekî din, di koma PV-yên BRCA2 de, 4 ji 18 guhertinan (22.2%) întronîk bûn.
Piştre me mutasyonên zirardar ên BRCA1/2 di warên fonksiyonel û herêmên girêdana proteînê de nexşandin (Wêne 4). Di gena BRCA1 de, %50ê PVyan di herêma koma penceşêra memikê (BCCR) de cih girtin, di heman demê de %22ê mutasyonan di herêma koma penceşêra hêkdankê (OCCR) de cih girtin (Wêne 4A). Di BRCA2 PV de, %35.7ê varyantan di herêma BCCR de cih girtin û %42.8ê mutasyonan di OCCR de cih girtin (Wêne 4B). Piştre, me cihê PV di nav warên proteîna BRCA1 û BRCA2 de nirxand. Ji bo proteîna BRCA1, me sê PV di warên xelek û xelekên pêçayî de, û du mutasyon di warê BRCT de dîtin (Wêne 4A). Ji bo proteîna BRCA2, 4 PV li ser warê dubarekirina BRC hatine nexşandin, di heman demê de 3 guhertinên întronîk û 3 guhertinên eksonîk di warên girêdana olîgo/olîgosakarîd (OB) û bircê (T) de hatine tespîtkirin (Wêne 4B).
Wêne 4 Nûnertiya şematîk a proteînên BRCA1 û BRCA2 û cihêbûna guhertoyên patogenîk. Ev wêne belavbûna guhertoyên patogenîk ên BRCA1 (A) û BRCA2 (B) di nexweşên penceşêra memikê de nîşan dide. Mutasyonên eksonîk bi şîn têne nîşandan, lê guhertoyên întronîk bi porteqalî têne nîşandan. Bilindahiya xêzê hejmara bûyeran temsîl dike. Proteînên BRCA1 û BRCA2 û qadên wan ên fonksiyonel têne ragihandin. (A) Proteîna BRCA1 domainek xelekê (RING) û ​​rêzek cihêbûna navokî (NLS), domainek pêçayî-pelî, domainek klustera SQ/TQ (SCD), û domainek C-termînal a BRCA1 (BRCT) dihewîne. (B) Proteîna BRCA2 heşt dubareyên BRC, domainek girêdana DNA-yê bi domainek helîkal (Helical), sê qatên girêdana olîgonukleotîd/olîgosakarîd (OB), domainek bircê (T), û NLSek li aliyê C dihewîne. Herêmên ku jê re Herêma Klustera Penceşêra Memikê (BCCR) û Herêma Klustera Penceşêra Ovarian (OCCR) tê gotin li binî têne nîşandan. *Mutasyonên ku rawestandinê diyar dikin temsîl dike. kodon.
Piştre me taybetmendiyên klînîkopatolojîk ên BC lêkolîn kirin ku dibe ku bi hebûna PV-ya BRCA1/2 re têkildar bin. Tomarên klînîkî yên bêkêmasî ji bo 181 nexweşên BRCA1/2-neyînî (ne hilgir) û hemî hilgir (n = 35) hebûn. Di navbera rêjeya zêdebûna tumor û pileya wê de têkiliyek hebû.
Me belavbûna Ki-67 li gorî medyana koma xwe (%25, rêz <10-90%) hesab kir. Mijarên bi Ki-67 <%25 wekî "Ki-67 nizm" hatin pênasekirin, lê kesên bi nirxên ≥%25 wekî "Ki-67 bilind" hatin hesibandin. Cudahiyên girîng ên Ki-67 (p<0.01) di navbera hilgirên BRCA1 PV û hilgirên ne-hilgir de hatin dîtin (Wêne 5A).
Wêne 5 Têkiliya Ki-67 bi belavbûna pileya di jinên kansera pêsîrê de bi û bêyî PV-yên BRCA1 û BRCA2. (A) Qutxart nirxên navînî yên Ki-67 di 181 nexweşên BC yên bê hilgir de li hember nexweşên PV yên BRCA1 (18) an BRCA2 (17) nîşan dide. Nirxên P yên li jêr 0.5 wekî girîng ên îstatîstîkî hatin hesibandin. (B) Hîstograma ku dabeşkirina nexweşên kansera BC di nav komên pileya hîstolojîk (G2 û G3) de li gorî rewşa mutasyona BRCA1 û BRCA2 (mijarên WT, hilgirên PV-yên BRCA1 û BRCA2) temsîl dike.
Bi heman awayî, me lêkolîn kir ka pileya tumorê bi hebûna BRCA1/2 PV ve girêdayî ye an na. Ji ber ku G1 BC di nifûsa me de tune bû, me nexweşan li du koman dabeş kirin (G2 an G3). Li gorî encamên Ki-67, analîzê têkiliyek girîng a îstatîstîkî di navbera pileya tumorê û mutasyona BRCA1 de eşkere kir, bi rêjeyek bilindtir a tumorên G3 di hilgirên BRCA1 de li gorî ne-hilgir (p<0.005) (Wêne 5B).
Pêşketinên di teknolojiya rêzkirina DNAyê de, di ceribandina genetîkî ya BRCA1/2 de pêşketinên bêhempa çêkirine, ku bandorên girîng li ser nexweşên ku di malbata wan de dîroka penceşêrê heye dikin. Heta niha, nêzîkî 20.000 guhertoyên BRCA1/2 li gorî Civaka Amerîkî ya Genetîkên Bijîşkî 35 û pergala ENIGMA hatine destnîşankirin û dabeşkirin.35,36 Baş tê zanîn ku spektruma mutasyonê ya BRCA1/2 li herêmên erdnîgarî pir diguhere.37 Di nav Îtalyayê de, rêjeya PV-yên BRCA1/2 ji% 8 heta% 37 diguhere, ku guherbariyek berfireh a nav-welat nîşan dide.38,39 Bi nifûsa nêzîkî 5 mîlyonî, Sîcîlya ji hêla hejmara niştecihan ve pêncemîn herêma herî mezin a Îtalyayê ye. Her çend daneyên li ser belavbûna BRCA1/2 li rojavayê Sîcîlyayê hene jî, li beşa rojhilatê giravê delîlên berfireh tune ne.
Lêkolîna me yek ji raporên pêşîn e li ser rêjeya BRCA1/2 PV li nexweşên BC li rojhilatê Sîcîlyayê.28 Me analîza xwe li ser BC kir, ji ber ku ev nexweşiya herî gelemperî di koma me de ye.
Dema ku 389 nexweşên BC hatin ceribandin, %9 ji wan PV-yên BRCA1/2 hildigirtin, ku di navbera BRCA1 û BRCA2 de bi awayekî wekhev belav bûn. Ev encam bi yên ku berê di nifûsa Îtalyayê de hatine ragihandin re lihevhatî ne.28 Bi balkêşî, %3 (13/389) ji koma me mêr bûn. Ev rêje ji bo kansera pêsîrê ya mêran (%1 ji hemî BC) ji ya ku tê hêvîkirin bilindtir e,40 hilbijartina me ya nifûsê li gorî rîska mutasyona BRCA1/2 nîşan dide. Lêbelê, yek ji van mêran PV-ya BRCA1/2 pêş nexist, ji ber vê yekê ew ji bo analîza molekulî ya bêtir namzet bûn da ku hebûna mutasyonên kêmtir hevpar ên wekî PALB2, RAD51C û D, di nav yên din de, were derxistin. Guhertoyên bi girîngiya nediyar di %7ê mijarên ku BRCA2 VUS diyar bû de hatin dîtin. Heta ev encam bi delîlên berê re lihevhatî ye.28,41,42
Dema ku me belavbûna bintîpên molekulî yên BC di jinên mutant BRCA1/2 de analîz kir, me têkiliyên naskirî di navbera TNBC û BRCA1 PV (%58.8) û di navbera luminal B BC û BRCA2 PV (%55.6) de piştrast kir.16,43 Tumorên luminal A û HER2+ di hilgirên BRCA1 û BRCA2 PV de bi daneyên wêjeya heyî re lihevhatî ne.16,43
Paşê em li ser celeb û cihê PV-ya BRCA1/2 disekinin. Di koma me de, PV-ya BRCA1 ya herî gelemperî c.5035_5039delCTAAT bû. Her çend Incorvaia et al. ev varyant di kohorta xwe ya Sîcîlyayî de rave nekirine, nivîskarên din ew wekî PV-ya BRCA1-ya germî rapor kirine.34 Di kohorta me de çend PV-yên BRCA1 hatin dîtin - mînak c.181T>G, c.514del, c.3253dupA û c.5266dupC - ku li Sîcîlyayê hatine dîtin.28 Ji van, du mutasyonên damezrîner ên BRCA1 (c.181T>G û c.5266dupC) bi gelemperî di Cihûyên Aşkenazî yên Ewropaya Rojhilat û Navîn (Polonya, Çek), Slovenî, Awistirya, Macaristan, Belarûs û Alman de têne dîtin, 44,45 û, li Dewletên Yekbûyî û Arjantînê, vê dawiyê wekî "varyantek germî ya dubare" di nexweşên Îtalî yên bi BC û OC de hate pênase kirin. Varyanta 34c.514del berê di 8 nexweşên penceşêra memikê ji bakurê Sîcîlyayê li Palermo û Messina de hatibû nas kirin. Balkêş e, heta Incorvaia et al. varyanta c.3253dupA di hin malbatên li Catania de dît.28 PV-yên BRCA2 yên herî nûner c.428dup, c.5851_5854delAGTT û varyanta întronîk c.8487+1G>A ne, ku bi hûrgilî 28 di nexweşek li Palermo de bi c.428dup hatine ragihandin, c.5851_5854delAGTT PV di malbatên li bakur-rojavayê Sîcîlyayê, bi taybetî li herêmên Trapani û Palermo de hate dîtin, lê c.5851_5854delAGTT PV di malbatên li bakur-rojavayê Sîcîlyayê de hate dîtin. Varyanta 8487+1G>A di mijarên ji Messina, Palermo, û Caltanissetta de gelemperîtir bû.28 Rebbeck û yên din. berê guhertina c.5851_5854delAGTT li Kolombiyayê vegot.37 PV-ya BRCA2-ya din, c.631+1G>A, di nexweşên BC û OC yên ji Sicilyayê (Agrigento, Siracusa û Ragusa) de hatiye dîtin.28 Bi taybetî, me hevjiyaniya du guhertoyên BRCA2 (BRCA2 c.631G>A û c.7008-2A>T) di heman nexweş de dît, ku me texmîn kir ku di moda cis de ji hev veqetandî ne, wekî ku berê wisa hatibû ragihandin.34,46 Ev mutasyonên uble yên BRCA2 bi rastî jî pir caran li herêma Îtalyayê têne dîtin û hatiye dîtin ku kodonên rawestandina zû didin destpêkirin, bandorê li ser girêdana RNA-ya peyamber dikin û dibin sedema têkçûna proteîna BRCA2.47,48
Her wiha me nexşeya PV-yên BRCA1 û BRCA2 di herêmên OCCR û BCCR yên texmînkirî yên domainên proteîn û genan de jî nîşan da. Ev herêm ji hêla Rebbeck et al. ve wekî deverên rîskê ji bo pêşxistina kansera hêkdank û memikê hatine wesifandin.49 Lêbelê, delîlên di derbarê têkiliya di navbera cihê guhertoyên xeta germ û rîska kansera memik an hêkdankê de hîn jî nakokî ne.28,50-52 Di nifûsa me de, PV-yên BRCA1 bi piranî li herêma BCCR-ê cih digirin, lê PV-yên BRCA2 bi piranî li herêma OCCR-ê cih digirin. Lêbelê, em nekarîn ti têkiliyek di navbera herêmên OCCR û BCCR yên texmînkirî û taybetmendiyên BC-ê de bibînin. Ev dibe ku ji ber hejmarek sînorkirî ya nexweşên bi mutasyonên BRCA1/2 be. Ji perspektîfa domaina proteînê ve, PV-yên BRCA1 li seranserê proteînê belav dibin, û guhertinên BRCA2 bi tercîhî di domaina dubarekirina BRC-ê de têne dîtin.
Di dawiyê de, me taybetmendiyên klînîkopatolojîk ên BC bi PV ya BRCA1/2 re hevber kir. Ji ber hejmara sînorkirî ya nexweşên ku tê de bûn, me tenê têkiliyek girîng di navbera Ki-67 û pileya tumor de dît. Her çend nirxandin û şîrovekirina Ki-67 hinekî nakok be jî, bê guman rêjeyên bilind ên zêdebûnê bi zêdebûna xetera dubarebûna nexweşiyê û kêmbûna jiyanê ve girêdayî ne. Heta niha, sînor ji bo cudakirina di navbera Ki-67 "bilind" û "nizm" de %20 e. Lêbelê, ev eşik ji bo nifûsa nexweşên me yên mutasyona BRCA1/2 derbas nabe, ku nirxa navînî ya Ki-67 %25 e. Ev meyla di rêjeyên bilind ên Ki-67 de dikare bi belavbûna di komên me yên luminal B û TNBC de were ravekirin, ku çend tumorên luminal A hebûn. Lêbelê, hin delîl xuya dikin ku pêşniyar dikin ku sînorek Ki-67 ya bilindtir (%25-30) dibe ku nexweşan li gorî prognoza wan çêtir dabeş bike.53,54 Ji encamên analîza me, têkiliyek girîng ne ecêb e. Di navbera Ki-67 û pileyên bilind û hebûna BRCA1 PV. Bi rastî, tumorên bi BRCA1 ve girêdayî tîpîkên TNBC ne û taybetmendiyên êrîşkartir nîşan didin.16,17
Di encamê de, ev lêkolîn raporek li ser rewşa mutasyonê ya BRCA1/2 di komeke BC ji rojhilatê Sîcîlyayê de pêşkêş dike. Bi tevayî, dîtinên me bi delîlên berê re lihevhatî ne, hem di warê belavbûna mutasyonê de û hem jî di warê taybetmendiyên klînîkopatolojîk ên li BC de. Ji bo nirxandina hebûna PV-yên ku ji BRCA1/2 cuda û kêmtir pir in, lêkolînên bêtir li ser nifûsên mezintir ên nexweşên BC yên bi mutasyona BRCA1/2, wekî karanîna analîza mutasyonê ya berfirehkirî ya pirgenom, pêwîst in. Ev ê rê bide naskirin û birêvebirina rast a hejmara zêde ya mijarên ku ji ber mutasyonên genetîkî di xetereya penceşêrê ya zêde de ne.
Me piştrast kir ku nexweşan razîbûna agahdar îmze kirine da ku nimûneyên tumorên xwe bi awayekî anonîm ji bo armancên lêkolînê bidin. Hemû nexweşan li gorî Danezana Helsînkî razîbûna agahdar a nivîskî îmze kirine. Li gorî polîtîkaya AOU Policlinico "G.Rodolico - S.Marco", ev lêkolîn ji nirxandina etîkî hate azad kirin ji ber ku analîza BRCA1/2 li gorî pratîka klînîkî hate kirin û hemû nexweşan razîbûna agahdar a nivîskî dan. Nexweş her wiha razîbûna xwe didin ku daneyên xwe ji bo armancên lêkolînê bikar bînin.
Em spasiya Prof. Paolo Vigneri dikin ji bo alîkariya wî di lênêrîna nexweşên penceşêra memikê de, wekî ku ji hêla Komîteya Etîkê ve hatî xwestin.
Federica Martorana ji Istituto Gentili, Eli Lilly, Novartis, û Pfizer xelatên honorarî radigihîne. Nivîskarên din îlan dikin ku di vê xebatê de ti nakokiyên berjewendiyê nînin.
1. Sung H, Ferlay J, Siegel RL, û yên din. Statîstîkên Penceşêrê yên Cîhanî 2020: GLOBOCAN rêjeya bûyer û mirina 36 penceşêran li 185 welatên cîhanê texmîn dike. CA Cancer J Clin.2021;71(3):209-249.doi: 10.3322/caac.21660