សូមអរគុណសម្រាប់ការចូលមើល Nature.com.កំណែកម្មវិធីរុករកតាមអ៊ីនធឺណិតដែលអ្នកកំពុងប្រើមានកម្រិតគាំទ្រសម្រាប់ CSS។ សម្រាប់បទពិសោធន៍ដ៏ល្អបំផុត យើងសូមណែនាំឱ្យអ្នកប្រើកម្មវិធីរុករកតាមអ៊ីនធឺណិតដែលបានអាប់ដេត (ឬបិទមុខងារដែលត្រូវគ្នានៅក្នុង Internet Explorer)។ ក្នុងពេលជាមួយគ្នានេះ ដើម្បីធានាបាននូវការគាំទ្របន្ត យើងនឹងបង្ហាញគេហទំព័រដោយគ្មានរចនាប័ទ្ម និង JavaScript ។
ភាគល្អិតស៊ីលីកា porous ត្រូវបានរៀបចំដោយវិធីសាស្ត្រ sol-gel ជាមួយនឹងការកែប្រែមួយចំនួន ដើម្បីទទួលបានភាគល្អិត macroporous។ ភាគល្អិតទាំងនេះត្រូវបានទាញយកមកពីការផ្ទេរខ្សែសង្វាក់បន្ថែមដែលអាចបញ្ច្រាស់បាន (RAFT) polymerization ជាមួយ N-phenylmaleimide-methylvinylisocyanate (PMI) និង styrene ដើម្បីរៀបចំ N-phenylmaleimide stationation intermediate of polyMP (PMI) ។ ដំណាក់កាល។ ជួរឈរដែកអ៊ីណុកតូចចង្អៀត (លេខសម្គាល់ 100 × 1.8 ម.ម) ត្រូវបានខ្ចប់ដោយការវេចខ្ចប់សារធាតុរអិល។ ការវាយតំលៃការបំបែកជួរឈរ PMP នៃល្បាយ peptide ដែលមានសារធាតុ peptides ចំនួនប្រាំ (Gly-Tyr, Gly-Leu-Tyr, Gly-Gly-Tyr-Arg, Tyr-Ile-Gly-Service) និង អ៊ីលរ៉ូម-ហ្គេលីន ការរំលាយអាហារ trypsin នៃអាល់ប៊ុមសេរ៉ូមរបស់មនុស្ស (HAS)។ នៅក្រោមលក្ខខណ្ឌនៃការ elution ដ៏ល្អប្រសើរ ចំនួនចានទ្រឹស្តីនៃល្បាយ peptide គឺខ្ពស់រហូតដល់ 280,000 plates/m²។ បើប្រៀបធៀបដំណើរការបំបែកនៃជួរឈរដែលបានអភិវឌ្ឍជាមួយនឹងពាណិជ្ជកម្ម Ascentis Express RP-Amide ជួរឈរ វាត្រូវបានគេសង្កេតឃើញថា ប្រសិទ្ធភាពនៃការបំបែកនៃជួរឈរដាច់ដោយឡែក និងប្រសិទ្ធភាពនៃជួរឈរ PMP គឺប្រសើរជាង។
ក្នុងប៉ុន្មានឆ្នាំថ្មីៗនេះ ឧស្សាហកម្មជីវឱសថបានក្លាយជាទីផ្សារពិភពលោកដែលកំពុងពង្រីកជាមួយនឹងការកើនឡើងយ៉ាងខ្លាំងនៃចំណែកទីផ្សារ។ ជាមួយនឹងការរីកចម្រើនយ៉ាងខ្លាំងនៃឧស្សាហកម្មជីវឱសថ1,2,3 ការវិភាគនៃ peptides និងប្រូតេអ៊ីនគឺត្រូវបានគេចង់បានយ៉ាងខ្លាំង។ បន្ថែមពីលើ peptide គោលដៅ ភាពមិនបរិសុទ្ធជាច្រើនត្រូវបានបង្កើតឡើងកំឡុងពេលសំយោគ peptide ដើម្បីទទួលបានការបន្សុតសារធាតុ peptide ដូច្នេះតម្រូវការ។ ការវិភាគ និងការកំណត់លក្ខណៈនៃប្រូតេអ៊ីននៅក្នុងសារធាតុរាវក្នុងរាងកាយ ជាលិកា និងកោសិកាគឺជាកិច្ចការដ៏លំបាកបំផុតមួយ ដោយសារចំនួនដ៏ច្រើននៃប្រភេទសត្វដែលអាចរកឃើញបានក្នុងគំរូតែមួយ។ ទោះបីជាម៉ាស់ spectrometry គឺជាឧបករណ៍ដ៏មានប្រសិទ្ធភាពសម្រាប់ការរៀបចំលំដាប់ peptide និងប្រូតេអ៊ីនក៏ដោយ ប្រសិនបើគំរូទាំងនោះត្រូវបានចាក់ចូលទៅក្នុងម៉ាស់ spectrometer ក្នុងមួយឆ្លងកាត់ ការបំបែកនេះនឹងមិនមានបញ្ហាអ្វីឡើយ (ការអនុវត្តន៍ LC) ការបំបែកមុនពេលការវិភាគ MS ដែលនឹងកាត់បន្ថយចំនួននៃការវិភាគដែលចូលក្នុងម៉ាស់ spectrometer នៅពេលវេលាដែលបានកំណត់ 4,5,6. លើសពីនេះទៀតក្នុងអំឡុងពេលនៃការបំបែកដំណាក់កាលរាវ ការវិភាគអាចត្រូវបានផ្តោតលើតំបន់តូចចង្អៀត ដោយហេតុនេះការប្រមូលផ្តុំការវិភាគទាំងនេះ និងធ្វើអោយប្រសើរឡើងនូវភាពរសើបនៃការរកឃើញរបស់ MS ។ Liquid chromatography (LC) បានរីកចម្រើនយ៉ាងខ្លាំងនៅក្នុងបច្ចេកវិទ្យាអតីតកាល។ ការវិភាគ ៧, ៨, ៩, ១០ ។
Reversed-phase liquid chromatography (RP-LC) ត្រូវបានគេប្រើយ៉ាងទូលំទូលាយសម្រាប់ការបន្សុត និងការបំបែកនៃល្បាយ peptide ដោយប្រើ octadecyl-modified silica (ODS) ជាដំណាក់កាលស្ថានី 11,12,13។ទោះជាយ៉ាងណាក៏ដោយ ដំណាក់កាលស្ថានី RP មិនផ្តល់នូវការបំបែកដ៏គួរឱ្យពេញចិត្តនៃ peptides និងប្រូតេអ៊ីនដោយសារតែរចនាសម្ព័ន្ធពិសេស 15 ស្មុគស្មាញ amphi របស់ពួកគេ។ ដំណាក់កាលស្ថានីដែលបានរចនាឡើងគឺតម្រូវឱ្យធ្វើការវិភាគ peptides និងប្រូតេអ៊ីនដែលមាន polar និងមិន polar moieties ដើម្បីធ្វើអន្តរកម្មជាមួយ និងរក្សាទុកការវិភាគទាំងនេះ 16.Mixed-mode chromatography ដែលផ្តល់នូវអន្តរកម្មចម្រុះអាចជាជម្រើសមួយសម្រាប់ RP-LC សម្រាប់ការបំបែក peptides ប្រូតេអ៊ីន និងល្បាយស្មុគស្មាញផ្សេងទៀត។ ជួរឈរចម្រុះជាច្រើនត្រូវបានរៀបចំជាដំណាក់កាល និងដំណាក់កាលស្ថានី។ ការបំបែក peptide និងប្រូតេអ៊ីន17,18,19,20,21.ដំណាក់កាលស្ថានីចម្រុះរបៀប (WAX/RPLC, HILIC/RPLC, polar intercalation/RPLC) គឺសមរម្យសម្រាប់ការបំបែក peptide និងប្រូតេអ៊ីនដោយសារតែវត្តមានរបស់ប៉ូលទាំងពីរ និងមិនប៉ូលជាក្រុម 22,23,24,25,26,27,27 ក្រុមប៉ូលដែលភ្ជាប់ដោយកូវ៉ាឡេន បង្ហាញពីថាមពលបំបែកដ៏ល្អ និងការជ្រើសរើសតែមួយគត់សម្រាប់ការវិភាគប៉ូល និងមិនមែនប៉ូល ដោយសារការបំបែកអាស្រ័យលើអន្តរកម្មរវាងដំណាក់កាលវិភាគ និងស្ថានី។ អន្តរកម្មពហុមុខងារ 29, 30, 31, 32.Recently, Zhang et al ។ 30 បានរៀបចំដំណាក់កាលស្ថានីយប៉ូលីមីនដែលត្រូវបានបញ្ចប់ដោយ dodecyl និងបំបែកដោយជោគជ័យនូវអ៊ីដ្រូកាបូន ថ្នាំប្រឆាំងនឹងជំងឺធ្លាក់ទឹកចិត្ត សារធាតុ flavonoids nucleosides អ័រម៉ូនអេស្ត្រូសែន និងការវិភាគផ្សេងៗទៀត។ ប៉ូលីម័រ intercalator មានទាំងក្រុមប៉ូលនិងមិនប៉ូល ដូច្នេះវាអាចប្រើដើម្បីបំបែក peptides និងប្រូតេអ៊ីនដែលមានទាំង hydrophobic columns និង hydrophilic ។ amide-embedded C18 columns) អាចរកបានពាណិជ្ជកម្មក្រោមឈ្មោះពាណិជ្ជកម្ម Ascentis Express RP-Amide columns ប៉ុន្តែជួរឈរទាំងនេះត្រូវបានប្រើសម្រាប់ការវិភាគនៃ amine 33 ប៉ុណ្ណោះ។
នៅក្នុងការសិក្សាបច្ចុប្បន្ន ដំណាក់កាលស្ថានីដែលបង្កប់ដោយប៉ូល (N-phenylmaleimide-embedded polystyrene) ត្រូវបានរៀបចំ និងវាយតម្លៃសម្រាប់ការបំបែកសារធាតុ peptides និង trypsin digests នៃ HSA។ ដំណាក់កាលស្ថានីត្រូវបានរៀបចំដោយប្រើយុទ្ធសាស្រ្តដូចខាងក្រោម។ ភាគល្អិតស៊ីលីកា porous ត្រូវបានរៀបចំតាមនីតិវិធីដែលបានផ្តល់ឱ្យនៅក្នុងការបោះពុម្ពផ្សាយពីមុនរបស់យើងជាមួយនឹងការរៀបចំមួយចំនួននៃ protocolenea ។ (PEG), TMOS, ទឹកអាស៊ីតអាសេទិកត្រូវបានកែតម្រូវដើម្បីរៀបចំភាគល្អិតស៊ីលីកាដែលមានទំហំរន្ធញើសធំ។ ទីពីរ លីហ្គែនថ្មី phenylmaleimide-methyl vinyl isocyanate ត្រូវបានសំយោគ និងប្រើដើម្បីទាញយកភាគល្អិតស៊ីលីកា ដើម្បីរៀបចំប៉ូលដែលបង្កប់ក្នុងដំណាក់កាលស្ថានី។ លទ្ធផលទៅជាដែកអ៊ីណុក 1 ដំណាក់កាល 10 មីលីម៉ែត្រ។ គ្រោងការណ៍វេចខ្ចប់ដែលបានធ្វើឱ្យប្រសើរឡើង។ ការវេចខ្ចប់ជួរឈរត្រូវបានជួយជាមួយនឹងរំញ័រមេកានិចដើម្បីធានាថាគ្រែដូចគ្នាត្រូវបានបង្កើតឡើងនៅក្នុងជួរឈរ។ វាយតម្លៃការបំបែកជួរឈរដែលបានវេចខ្ចប់នៃល្បាយ peptide ដែលមានសារធាតុ peptides ប្រាំ។ (Gly-Tyr, Gly-Leu-Tyr, Gly-Gly-Tyr-Arg, Tyr-Ile-Gly-Ser-Arg, Leucine Enkephalin) និង Trypsin digest of human serum albumin (HAS)។ល្បាយ peptide និង trypsin digest របស់ HSA ត្រូវបានគេសង្កេតឃើញដើម្បីបំបែកជាមួយនឹងគុណភាពបង្ហាញល្អ និងប្រសិទ្ធភាព។ ការបំបែក PMP គឺការប្រៀបធៀបទៅនឹងការបំបែក PMP ដូចការប្រៀបធៀបរវាង Express-columide ។ column.ទាំង peptides និងប្រូតេអ៊ីនត្រូវបានគេសង្កេតឃើញថាត្រូវបានដោះស្រាយបានយ៉ាងល្អ និងមានប្រសិទ្ធភាពនៅលើជួរឈរ PMP ដែលមានប្រសិទ្ធភាពជាងជួរឈរ Ascentis Express RP-Amide ។
PEG (Polyethylene Glycol), អ៊ុយ, អាស៊ីតអាសេទិក, Trimethoxy Orthosilicate (TMOS), Trimethyl Chlorosilane (TMCS), Trypsin, Human Serum Albumin (HSA), Ammonium Chloride, Urea, Hexane Methyldisilazane (HMDS), Methacryloyl Chloride (MC), Benethane, Steryroxy, (BPO), HPLC Grade Acetonitrile (ACN), Methanol, 2-Propanol, និង Acetone បានទិញពី Sigma-Aldrich (St. Louis, MO, USA)។
ល្បាយនៃអ៊ុយ (8 ក្រាម) ប៉ូលីអេទីឡែន glycol (8 ក្រាម) និង 8 មីលីលីត្រនៃ 0.01 N អាស៊ីតអាសេទិកត្រូវបានកូររយៈពេល 10 នាទី ហើយបន្ទាប់មក 24 មីលីលីត្រនៃ TMOS ត្រូវបានបន្ថែមនៅទីនោះក្រោមលក្ខខណ្ឌត្រជាក់ទឹកកក។ ល្បាយប្រតិកម្មត្រូវបានកំដៅនៅសីតុណ្ហភាព 40 អង្សាសេរយៈពេល 6 ម៉ោង ហើយបន្ទាប់មកនៅសីតុណ្ហភាព 120 អង្សារ។ ដែកអ៊ីណុកត្រូវបានចាក់ទឹកដោយស្វ័យប្រវត្តិរយៈពេល 8 ម៉ោង។ សម្ភារៈដែលនៅសេសសល់ត្រូវបានសម្ងួតនៅសីតុណ្ហភាព 70°C រយៈពេល 12 ម៉ោង។ ម៉ាស់ទន់ស្ងួតត្រូវបានកិនដោយដីរលោងនៅក្នុងឡ ហើយត្រូវបានដុតនៅសីតុណ្ហភាព 550°C រយៈពេល 12 ម៉ោង។ បីបាច់ត្រូវបានរៀបចំ និងកំណត់លក្ខណៈដើម្បីពិនិត្យមើលការបន្តពូជក្នុងទំហំភាគល្អិត ទំហំរន្ធញើស និងផ្ទៃ។
ដោយការកែប្រែផ្ទៃនៃភាគល្អិតស៊ីលីកាជាមួយនឹង ligand phenylmaleimide-methylvinylisocyanate (PCMP) ដែលបានសំយោគមុនដោយវត្ថុធាតុ polymerization រ៉ាឌីកាល់ជាមួយ styrene សមាសធាតុដែលមានក្រុមប៉ូលត្រូវបានរៀបចំ។ ដំណាក់កាលស្ថានីសម្រាប់ការប្រមូលផ្តុំ និងសង្វាក់ polystyrene។ ដំណើរការរៀបចំត្រូវបានពិពណ៌នាខាងក្រោម។
N-phenylmaleimide (200 mg) និង methyl vinyl isocyanate (100 mg) ត្រូវបានរំលាយនៅក្នុង toluene ស្ងួត ហើយ 0.1 mL នៃ 2,2′-azoisobutyronitrile (AIBN) ត្រូវបានបន្ថែមទៅក្នុងដបប្រតិកម្មដើម្បីរៀបចំល្បាយ phenylmaleimide-methyl vinyl isocyanate CPPM (3 CPPM) ។ ម៉ោង, ត្រងនិងស្ងួតនៅក្នុង oven នៅ 40 ° C រយៈពេល 3 ម៉ោង។
ភាគល្អិតស៊ីលីកាស្ងួត (2 ក្រាម) ត្រូវបានបំបែកនៅក្នុង toluene ស្ងួត (100 mL) កូរនិង sonicated ក្នុងដប 500 mL បាតជុំសម្រាប់ 10 min.PMCP (10 mg) ត្រូវបានរំលាយនៅក្នុង toluene និងបន្ថែម dropwise ទៅ flask ប្រតិកម្មតាមរយៈ funnel ទម្លាក់មួយ។ ល្បាយនេះត្រូវបាន refluxed នៅ 100 ម៉ោង តម្រងនិងស្ងួតនៅ 100°C ។ 60°C រយៈពេល 3 ម៉ោង។បន្ទាប់មក ភាគល្អិតស៊ីលីកាដែលជាប់ចំណង PMCP (100 ក្រាម) ត្រូវបានរំលាយនៅក្នុង toluene (200 ml) និង 4-hydroxy-TEMPO (2 mL) ត្រូវបានបន្ថែមក្នុងវត្តមាន 100 µL នៃ dibutyltin dilaurate ជាកាតាលីករ។ ល្បាយនេះត្រូវបានកូរនៅ 50°C រយៈពេល 8 ម៉ោង ត្រងស្ងួត 8°C ។
Styrene (1 mL), benzoyl peroxide BPO (0.5 mL) និងភាគល្អិតស៊ីលីកាដែលភ្ជាប់មកជាមួយ TEMPO-PMCP (1.5 ក្រាម) ត្រូវបានបែកខ្ចាត់ខ្ចាយនៅក្នុង toluene និងបន្សុតដោយអាសូត។ វត្ថុធាតុ polymerization នៃ styrene ត្រូវបានអនុវត្តនៅ 100 ° C សម្រាប់រយៈពេល 12 ម៉ោង។ ផលិតផលលទ្ធផលត្រូវបានលាងសម្អាតជាមួយនឹងប្រតិកម្ម 60°C នៅយប់។ រូបភាពទី 1 ។
សំណាកត្រូវបានរំលាយនៅ 393 K សម្រាប់រយៈពេល 1 ម៉ោង ដើម្បីទទួលបានសម្ពាធសំណល់តិចជាង 10-3 Torr។ បរិមាណ N2 adsorbed នៅសម្ពាធដែលទាក់ទងនៃ P/P0 = 0.99 ត្រូវបានប្រើដើម្បីកំណត់បរិមាណរន្ធញើសសរុប។ សរីរវិទ្យានៃភាគល្អិតស៊ីលីកាទទេ និង ligand-bonded ត្រូវបានពិនិត្យដោយ electron micrologita, បច្ចេកវិទ្យាស្កែន។ ប្រទេសជប៉ុន)។សំណាកស្ងួត (ភាគល្អិតស៊ីលីកាទទេ និងលីហ្គែនដែលជាប់ចំណង) ត្រូវបានដាក់នៅលើជួរឈរអាលុយមីញ៉ូមដោយប្រើកាបោនស្អិត។ មាសត្រូវបានលាបលើសំណាកដោយប្រើឧបករណ៍លាបម្សៅ Q150T ហើយស្រទាប់ 5 nm Au ត្រូវបានដាក់នៅលើសំណាក។ នេះជួយបង្កើនប្រសិទ្ធភាពដំណើរការដោយប្រើវ៉ុលទាប និងផ្តល់នូវគ្រាប់ធញ្ញជាតិល្អ ការផ្លុំផ្លុំ MA របស់សហរដ្ឋអាមេរិក (Flash Sputtering) សហរដ្ឋអាមេរិក។ ឧបករណ៍វិភាគធាតុ EA1112 ត្រូវបានប្រើសម្រាប់ការវិភាគធាតុ។A Malvern (Worcestershire, UK) ឧបករណ៍វិភាគទំហំភាគល្អិត Mastersizer 2000 ត្រូវបានប្រើដើម្បីទទួលបានការចែកចាយទំហំភាគល្អិត។ ភាគល្អិតស៊ីលីកាអាក្រាត និងភាគល្អិតស៊ីលីកាដែលមានចំណងលីហ្គែន (5 មីលីក្រាមនីមួយៗ) ត្រូវបានបែកខ្ញែកក្នុង 5 mL នៃ isopropanol forvort, 10sonic និង mined កៅអីអុបទិកនៃ Mastersizer. ការវិភាគទែរម៉ូក្រាវីម៉ែត្រត្រូវបានអនុវត្តក្នុងអត្រា 5 ° C ក្នុងមួយនាទីលើជួរសីតុណ្ហភាពពី 30 ទៅ 800 ° C ។
សសររាងតូចចង្អៀតដែកអ៊ីណុកដែលស្រោបដោយកញ្ចក់ (លេខសម្គាល់ 100 × 1.8 ម.ម) ត្រូវបានខ្ចប់ដោយប្រើប្រាស់វិធីសាស្ត្រវេចខ្ចប់សារធាតុរអិល ដោយអនុវត្តនីតិវិធីដូចគ្នាដែលបានប្រើក្នុង ឯកសារយោង។ 31. ជួរឈរដែកអ៊ីណុក (កញ្ចក់ 100 × 1.8 ម.ម. សារធាតុរំលាយ slurry ក៏ដូចជាសារធាតុរំលាយជំរុញ។ បំពេញជួរឈរតាមលំដាប់លំដោយដោយដាក់សម្ពាធ 100 MP រយៈពេល 10 នាទី 80 MP សម្រាប់ 15 នាទី និង 60 MP សម្រាប់ 30 នាទី។ កំឡុងពេលវេចខ្ចប់ ការរំញ័រមេកានិចត្រូវបានអនុវត្តជាមួយនឹងម៉ាស៊ីនក្រឡុកជួរឈរ GC ពីរ (Alltech, Deerfield, IL, USA) ដើម្បីធានាបាននូវឯកសណ្ឋាននៃធុងទឹកក្រឡុក។ យឺតៗដើម្បីការពារការខូចខាតណាមួយនៅក្នុងជួរឈរ។ ផ្តាច់ជួរឈរចេញពីអង្គភាពវេចខ្ចប់សារធាតុរអិល ហើយភ្ជាប់ឧបករណ៍ភ្ជាប់ផ្សេងទៀតទៅនឹងច្រកចូល និងប្រព័ន្ធ LC ដើម្បីពិនិត្យមើលដំណើរការរបស់វា។
ម៉ាស៊ីនបូម LC (10AD Shimadzu ប្រទេសជប៉ុន) ប្រដាប់ចាក់ (Valco (USA) C14 W.05) ជាមួយនឹងរង្វិលជុំចាក់ 50nL ភ្នាស degasser (Shimadzu DGU-14A) បង្អួច capillary UV-VIS ត្រូវបានសាងសង់ឧបករណ៍ចាប់ឧបករណ៍ µLC ពិសេស (UV-2075) និងកញ្ចក់ដែលមានប្រសិទ្ធិភាពនៃខ្សែបន្ទាត់តូចចង្អៀតនៃផ្នែកបន្ថែមនៃបំពង់ និងខ្សែភ្ជាប់។ ពង្រីក។ បន្ទាប់ពីការវេចខ្ចប់ សរសៃឈាមតូចៗ (50 μm id 365 និងកាត់បន្ថយ union capillaries (50 μm) ត្រូវបានដំឡើងនៅច្រកចេញ 1/16″ នៃ union កាត់បន្ថយ។ ការប្រមូលទិន្នន័យ និងដំណើរការ chromatographic ត្រូវបានធ្វើឡើងដោយប្រើកម្មវិធី Multichro 2000 ។ ការត្រួតពិនិត្យនៅ 254 nm Analytes ឬការស្រូបទាញទិន្នន័យកាំរស្មី UV ត្រូវបានសាកល្បង (Northampton, MA) ។
Albumin ពីសេរ៉ូមមនុស្ស ម្សៅ lyophilized ≥ 96% (agarose gel electrophoresis) 3 mg លាយជាមួយ trypsin (1.5 mg), 4.0 M urea (1 mL) និង 0.2 M ammonium bicarbonate (1 mL)។ដំណោះស្រាយត្រូវបានកូររយៈពេល 10 នាទី ហើយរក្សាទុកក្នុងទឹកងូតទឹកនៅសីតុណ្ហភាព 37°C បន្ទាប់មក 1 ម. TFA.ត្រងសូលុយស្យុង ហើយទុកក្រោម 4°C។
ការបំបែកល្បាយ peptide និង HSA trypsin digests ត្រូវបានវាយតម្លៃដោយឡែកពីគ្នានៅលើជួរឈរ PMP ។ ពិនិត្យមើលការបំបែកនៃល្បាយ peptide និង trypsin digest របស់ HSA ដោយជួរឈរ PMP ហើយប្រៀបធៀបលទ្ធផលទៅនឹងជួរឈរ Ascentis Express RP-Amide ។ លេខចានទ្រឹស្តីត្រូវបានគណនាដូចខាងក្រោម:
រូបភាព SEM នៃភាគល្អិតស៊ីលីកាទទេ និងភាគល្អិតស៊ីលីកាដែលមានចំណងលីហ្គែន ត្រូវបានបង្ហាញនៅក្នុងរូបភព។ 2 .រូបភាព SEM នៃភាគល្អិតស៊ីលីកាទទេ (A, B) បង្ហាញថា ផ្ទុយទៅនឹងការសិក្សាពីមុនរបស់យើង ភាគល្អិតទាំងនេះមានរាងស្វ៊ែរ ដែលភាគល្អិតត្រូវបានពន្លូត ឬមានភាពស៊ីមេទ្រីមិនទៀងទាត់។ ផ្ទៃនៃភាគល្អិតស៊ីលីកាដែលជាប់ចំណងលីហ្គែន (C, D) គឺរលោងជាងនៃភាគល្អិតស៊ីលីកាទទេ ដែលអាចជាខ្សែសង្វាក់នៃសារធាតុស៊ីលីកា។ ផ្ទៃនៃភាគល្អិតស៊ីលីកា។
ការស្កែនរូបភាពមីក្រូទស្សន៍អេឡិចត្រុងនៃភាគល្អិតស៊ីលីកាទទេ (A, B) និងភាគល្អិតស៊ីលីកាដែលមានចំណងលីហ្គែន (C, D)។
ការចែកចាយទំហំភាគល្អិតនៃភាគល្អិតស៊ីលីកាទទេ និងភាគល្អិតស៊ីលីកាដែលជាប់ចំណងត្រូវបានបង្ហាញក្នុងរូបភាពទី 3(A) ខ្សែកោងនៃការចែកចាយទំហំភាគល្អិតផ្អែកលើបរិមាណបានបង្ហាញថាទំហំនៃភាគល្អិតស៊ីលីកាបានកើនឡើងបន្ទាប់ពីការកែប្រែគីមី (រូបភាពទី 3A) ទិន្នន័យការបែងចែកទំហំភាគល្អិតនៃភាគល្អិតស៊ីលីកាពីការសិក្សាគឺប្រៀបធៀបទំហំទី 1 និងទំហំភាគល្អិតស៊ីលីកាពីការសិក្សាពីមុន។ d(0.5) នៃ PMP គឺ 3.36 μm បើប្រៀបធៀបទៅនឹងការសិក្សាមុនរបស់យើងជាមួយនឹងតម្លៃ ad(0.5) នៃ 3.05 μm (ភាគល្អិតស៊ីលីកាដែលចងភ្ជាប់ polystyrene) 34. បាច់នេះមានការបែងចែកទំហំភាគល្អិតតូចជាងបើប្រៀបធៀបទៅនឹងការសិក្សាពីមុនរបស់យើង ដោយសារសមាមាត្រខុសគ្នានៃ PEG, អ៊ុយ, ល្បាយនៃ ticarticle អាស៊ីតនៅក្នុងដំណាក់កាលនៃប្រតិកម្ម TMOS ។ ធំជាងដំណាក់កាលនៃភាគល្អិតស៊ីលីកដែលចងភ្ជាប់ polystyrene ដែលយើងធ្លាប់សិក្សាពីមុនមក។ នេះមានន័យថា មុខងារផ្ទៃនៃភាគល្អិតស៊ីលីកជាមួយនឹង styrene បានដាក់ស្រទាប់ polystyrene (0.97 µm) នៅលើផ្ទៃស៊ីលីកា ចំណែកនៅដំណាក់កាល PMP កម្រាស់ស្រទាប់គឺ 1.38 µm ។
ការចែកចាយទំហំភាគល្អិត (A) និងការចែកចាយទំហំរន្ធញើស (B) នៃភាគល្អិតស៊ីលីកាទទេ និងភាគល្អិតស៊ីលីកាដែលចងភ្ជាប់ដោយលីហ្គែន។
ទំហំរន្ធញើស បរិមាណរន្ធញើស និងផ្ទៃនៃភាគល្អិតស៊ីលីកានៃការសិក្សាបច្ចុប្បន្នត្រូវបានផ្តល់ឱ្យក្នុងតារាងទី 1(B)។ ទម្រង់ PSD នៃភាគល្អិតស៊ីលីកាទទេ និងភាគល្អិតស៊ីលីកាដែលភ្ជាប់ដោយលីហ្គែនត្រូវបានបង្ហាញក្នុងរូបភាពទី 3(B)។ លទ្ធផលគឺអាចប្រៀបធៀបទៅនឹងការសិក្សាពីមុនរបស់យើង។ ទំហំរន្ធញើសនៃសារធាតុស៊ីលីកាទទេ និងភាគល្អិត 10 និង 2 លីហ្គែនគឺ 2 រៀងគ្នា ដែលបង្ហាញថាទំហំរន្ធញើសថយចុះ 69 បន្ទាប់ពីការកែប្រែគីមី ដូចបង្ហាញក្នុងតារាងទី 1(B) ហើយការផ្លាស់ប្តូរនៃខ្សែកោងត្រូវបានបង្ហាញក្នុងរូបភាពទី 3(B)។ ស្រដៀងគ្នានេះដែរ បរិមាណរន្ធញើសនៃភាគល្អិតស៊ីលីកាបានថយចុះពី 0.67 ទៅ 0.58 cm3/g បន្ទាប់ពីការកែប្រែផ្នែកគីមីបច្ចុប្បន្នគឺ 1 ផ្ទៃនៃសារធាតុស៊ីលីកា។ m2/g ដែលអាចប្រៀបធៀបទៅនឹងការសិក្សាពីមុនរបស់យើង (124 m2/g)។ ដូចដែលបានបង្ហាញក្នុងតារាងទី 1(B) ផ្ទៃដី (m2/g) នៃភាគល្អិតស៊ីលីកាក៏បានថយចុះពី 116 m2/g ទៅ 105 m2/g បន្ទាប់ពីការកែប្រែគីមី។
លទ្ធផលនៃការវិភាគធាតុនៃដំណាក់កាលស្ថានីត្រូវបានបង្ហាញក្នុងតារាងទី 2. ការផ្ទុកកាបូននៃដំណាក់កាលស្ថានីបច្ចុប្បន្នគឺ 6.35% ដែលទាបជាងការផ្ទុកកាបូននៃការសិក្សាពីមុនរបស់យើង (ភាគល្អិតស៊ីលីកាដែលជាប់ស្អិត polystyrene, 7.93% 35 និង 10.21% រៀងគ្នា) 42. ដោយសារតែការផ្ទុកកាបូននៃដំណាក់កាលស្ថានីបច្ចុប្បន្ន SP នៃការរៀបចំបច្ចុប្បន្នគឺទាប។ លីហ្គែនប៉ូលមួយចំនួនដូចជា phenylmaleimide-methylvinylisocyanate (PCMP) និង 4-hydroxy-TEMPO ត្រូវបានប្រើប្រាស់។ ភាគរយនៃទម្ងន់អាសូតនៃដំណាក់កាលស្ថានីបច្ចុប្បន្នគឺ 2.21% បើប្រៀបធៀបទៅនឹង 0.1735 និង 0.85% ដោយទម្ងន់នៃអាសូតក្នុងការសិក្សាពីមុនរៀងៗខ្លួន។ នេះមានន័យថា wt% នៃដំណាក់កាលបច្ចុប្បន្ននៃអាសូតគឺខ្ពស់ជាង។ phenylmaleimide.ស្រដៀងគ្នានេះដែរ ការផ្ទុកកាបូននៃផលិតផល (4) និង (5) គឺ 2.7% និង 2.9% រៀងគ្នា ខណៈពេលដែលការផ្ទុកកាបូននៃផលិតផលចុងក្រោយ (6) គឺ 6.35% ដូចដែលបានបង្ហាញក្នុងតារាង 2.ការសម្រកទម្ងន់ត្រូវបានពិនិត្យដោយ PMP ដំណាក់កាលស្ថានី ហើយខ្សែកោង TGA ត្រូវបានបង្ហាញក្នុង TGAs 6% ដែលល្អ។ ជាមួយនឹងការផ្ទុកកាបូន (6.35%) ដោយសារតែ ligands មិនត្រឹមតែមាន C ប៉ុណ្ណោះទេប៉ុន្តែក៏មាន N, O និង H ។
សារធាតុ phenylmaleimide-methylvinylisocyanate ligand ត្រូវបានជ្រើសរើសសម្រាប់ការកែប្រែផ្ទៃនៃភាគល្អិតស៊ីលីកាព្រោះវាមានក្រុម phenylmaleimide ប៉ូល និងក្រុម vinylisocyanate ។ ក្រុម Vinyl isocyanate អាចប្រតិកម្មបន្ថែមទៀតជាមួយ styrene ដោយសារធាតុ polymerization រ៉ាឌីកាល់រស់នៅ។ មូលហេតុទីពីរគឺការបញ្ចូលក្រុមដែលមានអន្តរកម្មកម្រិតមធ្យមរវាងអេឡិចត្រូត និងមិនមានអន្តរកម្មខ្លាំងរវាងស្ថានីយ analyte ទេ។ phenylmaleimide moiety មិនមានបន្ទុកនិម្មិតនៅ pH ធម្មតាទេ។ បន្ទាត់រាងប៉ូលនៃដំណាក់កាលស្ថានីអាចត្រូវបានគ្រប់គ្រងដោយបរិមាណដ៏ល្អប្រសើរនៃ styrene និងពេលវេលាប្រតិកម្មនៃវត្ថុធាតុ polymerization រ៉ាឌីកាល់សេរី។ ជំហានចុងក្រោយនៃប្រតិកម្ម (វត្ថុធាតុ polymerization រ៉ាឌីកាល់សេរី) គឺមានសារៈសំខាន់ និងអាចផ្លាស់ប្តូរបន្ទាត់រាងប៉ូលនៃដំណាក់កាលស្ថានី។ ការវិភាគធាតុត្រូវបានអនុវត្តដើម្បីពិនិត្យមើលបរិមាណកាបូនដែលកើនឡើងនៃដំណាក់កាលស្ថានី។ ពេលវេលាប្រតិកម្មបានបង្កើនការផ្ទុកកាបូននៃដំណាក់កាលស្ថានី និងផ្ទុយមកវិញ។ SPs ដែលរៀបចំដោយកំហាប់ផ្សេងគ្នានៃ styrene មានការផ្ទុកកាបូនខុសៗគ្នា។ ជាថ្មីម្តងទៀត ផ្ទុកដំណាក់កាលស្ថានីទាំងនេះទៅក្នុងជួរឈរដែកអ៊ីណុក ហើយពិនិត្យមើលដំណើរការនៃក្រូម៉ាទីតរបស់វា (ការជ្រើសរើស គុណភាពបង្ហាញ តម្លៃ N ជាដើម)។ ដោយផ្អែកលើការពិសោធន៍ទាំងនេះ ការបង្កើតដ៏ប្រសើរមួយត្រូវបានជ្រើសរើសដើម្បីរៀបចំ PMP stationary polar phase និងធានាបាននូវការគ្រប់គ្រងបានល្អ។
ល្បាយ peptide ប្រាំ (Gly-Tyr, Gly-Leu-Tyr, Gly-Gly-Tyr-Arg, Tyr-Ile-Gly-Ser-Arg, leucine enkephalin) ក៏ត្រូវបានវាយតម្លៃដោយប្រើជួរឈរ PMP ដោយប្រើដំណាក់កាលចល័ត។ 60/40 (v/v) acetonitrile/water (0.1% TFA) នៅអត្រាលំហូរ 80 μL/min. នៅក្រោមលក្ខខណ្ឌនៃការ elution ដ៏ល្អប្រសើរ លេខផ្លាកទ្រឹស្តី (N) ក្នុងមួយជួរ (100 × 1.8 mm id) គឺ 20,000 ± 100 (200,000 T plates)។ ជួរឈរ PMP ចំនួនបី និងក្រូម៉ាតូក្រាមត្រូវបានបង្ហាញក្នុងរូបភាពទី 5A. ការវិភាគរហ័សនៅលើជួរឈរ PMP ក្នុងអត្រាលំហូរខ្ពស់ (700 μL/min) peptides ចំនួន 5 ត្រូវបានបញ្ចេញក្នុងរយៈពេលមួយនាទី តម្លៃ N គឺល្អណាស់ 13,500 ± 330 ក្នុងមួយជួរ (100 × 1.5mm / 0,000 × 1 plates) ។ 4. ភាពអាចផលិតឡើងវិញបាននៃជួរឈរ PMP មានទំនាក់ទំនងល្អជាមួយនឹងតម្លៃ % RSD ទាបបំផុត ដូចដែលបានបង្ហាញក្នុងតារាងទី 3 ។
ការបំបែកល្បាយ peptide នៅលើជួរឈរ PMP (B) និងជួរឈរ Ascentis Express RP-Amide (A); ដំណាក់កាលចល័ត 60/40 ACN/H2O (TFA 0.1%) វិមាត្រជួរឈរ PMP (100 × 1.8 mm លេខសម្គាល់); ការវិភាគលំដាប់លំដោយនៃសមាសធាតុ៖ 1 (Gly-Tyr), 2 (Gly-Leu-Tyr), 3 (Gly-Gly-Tyr-Arg), 4 (Tyr-Ile-Gly-Ser-Arg) និង 5 (leucine) acid enkephalin))។
ជួរឈរ PMP (100 × 1.8 mm id) ត្រូវបានវាយតម្លៃសម្រាប់ការបំបែកការរំលាយអាហារ tryptic នៃ albumin សេរ៉ូមរបស់មនុស្សនៅក្នុង chromatography រាវដែលមានប្រសិទ្ធភាពខ្ពស់។ ក្រូម៉ាតូក្រាមក្នុងរូបភាពទី 6 បង្ហាញថាគំរូត្រូវបានបំបែកយ៉ាងល្អ ហើយគុណភាពបង្ហាញគឺល្អណាស់។ ការរំលាយអាហារ HSA ត្រូវបានវិភាគដោយប្រើអត្រាលំហូរ 100 µL ទឹក 70 តោន/នាទី និងចល័តដំណាក់កាល 0.1% TFA.ដូចដែលបានបង្ហាញក្នុងក្រូម៉ាតូក្រាម (រូបភាពទី 6) ការរំលាយអាហារ HSA ត្រូវបានបំបែកជា 17 កំពូលដែលត្រូវគ្នាទៅនឹង 17 peptides។ ប្រសិទ្ធភាពបំបែកនៃកំពូលនីមួយៗនៅក្នុងការរំលាយអាហារ HSA ត្រូវបានគណនា ហើយតម្លៃត្រូវបានផ្តល់ឱ្យក្នុងតារាង 5 ។
ការរំលាយអាហារ tryptic នៃ HSA (100 × 1.8 mm id) ត្រូវបានបំបែកនៅលើជួរឈរ PMP; អត្រាលំហូរ (100 μL / នាទី), ដំណាក់កាលចល័ត 60/40 acetonitrile / ទឹកជាមួយនឹង 0.1% TFA ។
ដែល L ជាប្រវែងជួរឈរ η គឺជា viscosity នៃដំណាក់កាលចល័ត ΔP គឺជាសម្ពាធខាងក្រោយជួរឈរ ហើយ u គឺជាល្បឿនលីនេអ៊ែរនៃដំណាក់កាលចល័ត។ ភាពជ្រាបចូលនៃជួរឈរ PMP គឺ 2.5 × 10-14 m2 អត្រាលំហូរគឺ 25 μL / នាទី និង 60/40 v/v ជួរ ACN / ទឹកត្រូវបានប្រើប្រាស់ 10MP ។ mm id) គឺស្រដៀងគ្នាទៅនឹងការសិក្សាពីមុនរបស់យើង Ref.34.The permeability of the column packed with superficly porous particles is: 1.7 × 10-15 for 1.3 μm particles, 3.1 × 10-15 for 1.7 μm particles, 5.2 × 102.45 និង 1.7 μm ភាគល្អិត μm ភាគល្អិតសម្រាប់ភាគល្អិត 5 μm 43. ដូច្នេះ ការជ្រាបចូលនៃដំណាក់កាល PMP គឺស្រដៀងគ្នាទៅនឹងភាគល្អិតស្នូល 5 μm។
ដែល Wx គឺជាទម្ងន់នៃជួរឈរដែលផ្ទុកដោយសារធាតុក្លរ៉ូហ្វម Wy គឺជាទម្ងន់នៃជួរឈរដែលផ្ទុកដោយមេតាណុល ហើយ ρ គឺជាដង់ស៊ីតេនៃសារធាតុរំលាយ។ ដង់ស៊ីតេនៃមេតាណុល (ρ = 0.7866) និង chloroform (ρ = 1.484)។ porosity សរុបនៃជួរឈរ SILICA PARTICLES (108 × 100) ។ និងជួរឈរ C18-Urea 31 ដែលយើងសិក្សាពីមុនគឺ 0.63 និង 0.55 រៀងគ្នា។ នេះមានន័យថាវត្តមានរបស់ urea ligands កាត់បន្ថយការ permeability នៃដំណាក់កាលស្ថានី។ ម្យ៉ាងវិញទៀត porosity សរុបនៃជួរឈរ PMP (100 × 1.8 mm id) គឺទាបជាង 0.60 ជួរឈរនៃ PMP ដែលភាពធន់នៃជួរឈរ។ ភាគល្អិតស៊ីលីកាដែលជាប់ចំណង C18 ដោយសារតែនៅក្នុងដំណាក់កាលស្ថានីប្រភេទ C18 លីហ្គែន C18 ត្រូវបានភ្ជាប់ទៅនឹងភាគល្អិតស៊ីលីកាជាខ្សែសង្វាក់លីនេអ៊ែរ ខណៈពេលដែលនៅក្នុងដំណាក់កាលស្ថានីប្រភេទ polystyrene ស្រទាប់ប៉ូលីមែរក្រាស់ដែលទាក់ទងគ្នាត្រូវបានបង្កើតឡើងនៅជុំវិញវា។ នៅក្នុងការពិសោធន៍ធម្មតា porosity ជួរឈរត្រូវបានគណនាដូចជា៖
រូបភាព 7A,B បង្ហាញជួរឈរ PMP (100 × 1.8 mm id) និង Ascentis Express RP-Amide column (100 × 1.8 mm id) ដោយប្រើលក្ខខណ្ឌ elution ដូចគ្នា (ឧទាហរណ៍ 60/40 ACN/H2O និង 0.1% TFA)។ ) នៃគ្រោង Van Deemter ។ ល្បាយ peptide ដែលបានជ្រើសរើស (Gly-Tyr, Gly-Leu-Tyr, Gly-Gly-Tyr-Arg, Tyr-Ile-Gly-Ser-Arg, Leucine Enkephalin) ត្រូវបានរៀបចំក្នុង 20 µL/ អត្រាលំហូរអប្បបរមាសម្រាប់ជួរឈរទាំងពីរគឺ 800 µL/min។ តម្លៃអប្បបរមា HETP អត្រាលំហូរអតិបរមា µMP L/min ។ និងជួរឈរ Ascentis Express RP-Amide មាន 2.6 µm និង 3.9 µm រៀងគ្នា។ តម្លៃ HETP បង្ហាញថាប្រសិទ្ធភាពបំបែកនៃជួរឈរ PMP (100 × 1.8 mm id) គឺប្រសើរជាង Ascentis Express RP-Amide ដែលមានលក់ក្នុងពាណិជ្ជកម្មបង្ហាញជួរឈរ (100 × 7Amide) ។ ការថយចុះនៃតម្លៃ N ជាមួយនឹងការកើនឡើងនៃលំហូរគឺមិនសំខាន់ទេបើប្រៀបធៀបទៅនឹងការសិក្សាពីមុនរបស់យើង។ ប្រសិទ្ធភាពបំបែកខ្ពស់នៃជួរឈរ PMP (100 × 1.8 mm id) បើប្រៀបធៀបទៅនឹងជួរឈរ Ascentis Express RP-Amide គឺផ្អែកលើការធ្វើឱ្យប្រសើរឡើងនូវរូបរាងភាគល្អិត ទំហំ និងនីតិវិធីវេចខ្ចប់ជួរឈរស្មុគស្មាញដែលប្រើក្នុងការងារបច្ចុប្បន្ន 34 ។
(A) van Deemter plot (HETP ធៀបនឹងល្បឿនលីនេអ៊ែរដំណាក់កាលចល័ត) ទទួលបានដោយប្រើជួរឈរ PMP (100 × 1.8 mm id) ក្នុង 60/40 ACN/H2O ជាមួយ 0.1% TFA.(B) van Deemter plot (HETP ធៀបនឹងល្បឿនលីនេអ៊ែរដំណាក់កាលចល័ត) ទទួលបានដោយប្រើជួរឈរ Ascentis Express (10 mm. x RP-8) 60/40 ACN/H2O ជាមួយ 0.1% TFA ។
ដំណាក់កាលស្ថានី polystyrene បង្កប់ប៉ូលត្រូវបានរៀបចំ និងវាយតម្លៃសម្រាប់ការបំបែកល្បាយ peptide សំយោគ និងការរំលាយអាហារ trypsin នៃ albumin សេរ៉ូមមនុស្ស (HAS) ក្នុងដំណើរការ chromatography រាវដែលមានប្រសិទ្ធភាពខ្ពស់។ ដំណើរការ chromatographic នៃជួរឈរ PMP សម្រាប់ល្បាយ peptide គឺល្អឥតខ្ចោះក្នុងប្រសិទ្ធភាពនៃការបំបែក និងដំណោះស្រាយ។ ការធ្វើឱ្យប្រសើរឡើងនៃដំណើរការបំបែកនៃ PMP នៃទំហំ និងហេតុផលបែបនេះ។ ភាគល្អិតស៊ីលីកា ការសំយោគដែលបានគ្រប់គ្រងនៃដំណាក់កាលស្ថានី និងការវេចខ្ចប់ជួរឈរស្មុគស្មាញ។ បន្ថែមពីលើប្រសិទ្ធភាពបំបែកខ្ពស់ សម្ពាធថយក្រោយជួរឈរទាបក្នុងអត្រាលំហូរខ្ពស់គឺជាអត្ថប្រយោជន៍មួយទៀតនៃដំណាក់កាលស្ថានីនេះ។ ជួរឈរ PMP បង្ហាញភាពអាចបន្តពូជបានល្អ ហើយអាចត្រូវបានប្រើសម្រាប់ការវិភាគនៃល្បាយ peptide និងការរំលាយអាហារ trypsin នៃប្រូតេអ៊ីនផ្សេងៗ។ ក្រូម៉ូសូមរាវ។នៅពេលអនាគត ជួរឈរ PMP ក៏នឹងត្រូវបានវាយតម្លៃសម្រាប់ការបំបែកប្រូតេអ៊ីន និងអង្គបដិប្រាណ monoclonal ផងដែរ។
Field, JK, Euerby, MR, Lau, J., Thøgersen, H. & Petersson, P. ការស្រាវជ្រាវលើប្រព័ន្ធបំបែក Peptide ដោយ Reversed Phase Chromatography ផ្នែកទី I: ការអភិវឌ្ឍន៍នៃ Column Characterization Protocol.J. Chromatography.1603, 113–129.https://doi.org/10.1016/j.chroma.2019.05.038 (2019)។
Gomez, B. et al.Improved active peptides បានរចនាឡើងសម្រាប់ការព្យាបាលជំងឺឆ្លង។Biotechnology.Advanced.36(2), 415-429.https://doi.org/10.1016/j.biotechadv.2018.01.004 (2018)។
Vlieghe, P., Lisowski, V., Martinez, J. & Khrestchatisky, M. Synthetic therapeutic peptides: science and the market.drug discovery.15 (1-2) today, 40-56.https://doi.org/10.1016/j.drudis.2009.10.10.
Xie, F., Smith, RD & Shen, Y. Advanced Proteomic Liquid Chromatography.J. Chromatography.A 1261, 78–90 (2012) ។
Liu, W. et al.Advanced liquid chromatography-mass spectrometry អនុញ្ញាតឱ្យមានការបញ្ចូលសារធាតុរំលាយអាហារគោលដៅទូលំទូលាយ និង proteomics.anus.Chim.Acta 1069, 89-97 (2019)។
Chesnut, SM & Salisbury, JJ តួនាទីរបស់ UHPLC ក្នុងការអភិវឌ្ឍន៍ថ្នាំ។ ខែ កញ្ញា Sci.30(8), 1183-1190 (2007)។
Wu, N. & Clausen, AM ទិដ្ឋភាពជាមូលដ្ឋាន និងជាក់ស្តែងនៃ chromatography រាវសម្ពាធខ្ពស់សម្រាប់ការបំបែកយ៉ាងឆាប់រហ័ស។ ខែកញ្ញា Sci.30(8), 1167-1182.https://doi.org/10.1002/jssc.200700026 (2007)។
Wren, SA & Tchelitcheff, P. ការអនុវត្តនៃ chromatography រាវដែលមានប្រសិទ្ធភាពខ្ពស់ក្នុងការអភិវឌ្ឍន៍ថ្នាំ។ Chromatography.1119(1-2), 140-146.https://doi.org/10.1016/j.chroma.2006.02.052 (2006)។
Gu, H. et al.Monolithic macroporous hydrogels រៀបចំពីសារធាតុ emulsion ដំណាក់កាលខាងក្នុងកម្រិតខ្ពស់នៃប្រេងក្នុងទឹក សម្រាប់ការបន្សុតប្រកបដោយប្រសិទ្ធភាពនៃមេរោគ enteroviruses.Chemical.Britain.J. 401, 126051 (2020)។
Shi, Y., Xiang, R., Horváth, C. & Wilkins, JA តួនាទីនៃក្រូម៉ាតរាវក្នុង proteomics.J. Chromatography.A 1053(1-2), 27-36 (2004)។
Fekete, S., Veuthey, J.-L.&Guillarme, D. និន្នាការដែលកំពុងកើតមាននៅក្នុងការបំបែកក្រូម៉ាតូក្រាមរាវដំណាក់កាលបញ្ច្រាសនៃ peptides និងប្រូតេអ៊ីនព្យាបាល៖ ទ្រឹស្តី និងកម្មវិធី។ Pharmacy.Biomedical Science.anus.69, 9-27 (2012)។
Gilar, M., Olivova, P., Daly, AE & Gebler, JC ការបំបែកពីរវិមាត្រនៃ peptides ដោយប្រើប្រព័ន្ធ RP-RP-HPLC ដោយប្រើតម្លៃ pH ផ្សេងគ្នានៅក្នុងវិមាត្របំបែកទីមួយ និងទីពីរ។J. កញ្ញា Sci.28(14), 1694-1703 (2005)។
Feletti, S. et al. លក្ខណៈនៃការផ្ទេរម៉ាស់ និងដំណើរការ kinetic នៃជួរឈរ chromatographic ប្រសិទ្ធភាពខ្ពស់ packed ជាមួយ C18 sub-2 μm ភាគល្អិត porous យ៉ាងពេញលេញ និង superficially ត្រូវបានស៊ើបអង្កេត.J. កញ្ញា Sci.43 (9-10), 1737-1745 (2020)។
Piovesana, S. et al. និន្នាការថ្មីៗ និងបញ្ហាប្រឈមក្នុងការវិភាគក្នុងភាពឯកោ ការកំណត់អត្តសញ្ញាណ និងសុពលភាពនៃរុក្ខជាតិ bioactive peptides.anus.biological anus.Chemical.410(15), 3425–3444.https://doi.org/10.1007/s0018x.
Mueller, JB et al.ទេសភាពដ៏ប្រណិតនៃនគរជីវិត។ ធម្មជាតិ 582(7813), 592-596.https://doi.org/10.1038/s41586-020-2402-x (2020)។
DeLuca, C. et al.Downstream processing of therapeutic peptides by preparative liquid chromatography.Molecule (Basel, Switzerland) 26(15), 4688(2021)។
Yang, Y. & Geng, X. Mixed-mode chromatography និងកម្មវិធីរបស់វាចំពោះ biopolymers.J. Chromatography.A 1218(49), 8813–8825 (2011)។
Zhao, G., Dong, X.-Y.& Sun, Y. Ligands សម្រាប់ chromatography ប្រូតេអ៊ីន របៀបចម្រុះ៖ គោលការណ៍ លក្ខណៈ និងការរចនា.J. Biotechnology.144(1), 3-11 (2009)។