Nature.com نى زىيارەت قىلغىنىڭىزغا رەھمەت. سىز ئىشلىتىۋاتقان توركۆرگۈچ نۇسخىسىنىڭ CSS نى چەكلىك قوللىشى بار. ئەڭ ياخشى تەجرىبە ئۈچۈن ، يېڭىلانغان توركۆرگۈچنى ئىشلىتىشىڭىزنى تەۋسىيە قىلىمىز (ياكى Internet Explorer دىكى ماسلىشىش ھالىتىنى ئېتىۋېتىڭ). بۇ جەرياندا ، داۋاملىق قوللاشقا كاپالەتلىك قىلىش ئۈچۈن ، ئۇسلۇب ۋە JavaScript بولمىغان تور بېكەتنى كۆرسىتىمىز.
يىرىك سىلىتسىي زەررىچىلىرى بىر قىسىم ئۆزگەرتىشلەر ئارقىلىق ئېرىتكۈچى گېلى ئۇسۇلى ئارقىلىق تەييارلانغان بولۇپ ، ماكرو زەررىچىلەرگە ئېرىشىدۇ. بۇ زەررىچىلەر تەتۈر يۆنىلىشلىك پارچىلىنىش زەنجىرىنى يۆتكەش (RAFT) نى N فېنىلمالىئېمىد-مېتىلۋىنىلىسكويانات (PMI) ۋە ستېرېن بىلەن ھاسىل قىلىپ ، N-فېنىلمالىئىمىدنىڭ ئۆز-ئارا ئارىلىشىشىنى ئىلگىرى سۈرىدۇ. . پېپتىد ئارىلاشمىسىنىڭ يۇقىرىلىقى 280،000 تەخسە / m².
يېقىنقى يىللاردىن بۇيان ، بىئو دورىگەرلىك سانائىتى بازار ئۈلۈشىنىڭ زور دەرىجىدە ئېشىشى بىلەن كېڭىيىۋاتقان دۇنيا بازىرىغا ئايلاندى. بىئو دورىگەرلىك سانائىتىنىڭ پارتلاش خاراكتېرلىك ئېشىشى بىلەن 1،2،3 ، پېپتىد ۋە ئاقسىلنى ئانالىز قىلىش ئىنتايىن ئارزۇ قىلىنىدۇ. نىشان پېپتىدتىن باشقا ، پېپتىد بىرىكتۈرۈش جەريانىدا بىر نەچچە خىل پاسكىنا ماددىلار پەيدا بولىدۇ ، شۇڭا خروماتوگرافىك ساپلاشتۇرۇشنى تەلەپ قىلىدۇ. يەككە ئەۋرىشكىدە بايقىغىلى بولىدىغان تۈرلەر. گەرچە ماسسا سپېكترومېتىرى پېپتىد ۋە ئاقسىلنى تەرتىپكە سېلىشنىڭ ئۈنۈملۈك قورالى بولسىمۇ ، ئەمما بۇ خىل ئەۋرىشكەلەر ماسسى سپېكترىغا بىر ئۆتكەلدە ئوكۇل قىلىنسا ، ئايرىش كۆڭۈلدىكىدەك بولمايدۇ. بۇ مەسىلىنى MS ئانالىز قىلىشتىن ئىلگىرى سۇيۇق خروموگرافىيە (LC) ئايرىشنى يولغا قويۇش ئارقىلىق پەسەيتكىلى بولىدۇ ، بۇ ئارقىلىق ماس كېلىدىغان سپېكترىغا ئايرىلىدۇ. بۇ ئانالىزلارنى مەركەزلەشتۈرۈپ ، MS بايقاش سەزگۈرلۈكىنى يۇقىرى كۆتۈرىدۇ. سۇيۇق خروموگرافىيە (LC) ئۆتكەن ئون يىلدا كۆرۈنەرلىك تەرەققىي قىلىپ ، ئاقسىل ئانالىزىدىكى مودا تېخنىكىغا ئايلاندى 7،8،9،10.
تەتۈر فازىلىق سۇيۇقلۇق خروموگرافىيىسى (RP-LC) ئوكتادېكسىل ئۆزگەرتىلگەن سىلىتسىي (ODS) ئارقىلىق پېپتىد ئارىلاشمىسىنى تازىلاش ۋە ئايرىشتا كەڭ كۆلەمدە ئىشلىتىلىدۇ ، 12،12،13. قانداقلا بولمىسۇن ، RP تۇراقلىق باسقۇچلىرى پېپتىد ۋە ئاقسىلنىڭ قانائەتلىنەرلىك ئايرىلىشىنى تەمىنلىمەيدۇ ، چۈنكى ئۇلار مۇرەككەپ قۇرۇلما ۋە ئامفىفىللىق تەبىئىتىنى ئاساس قىلىدۇ. بۇ ئانالىزلار بىلەن ئۆز-ئارا تەسىر كۆرسىتىش ۋە ساقلاپ قېلىش ئۈچۈن ھەرىكەتلەر 16. كۆپ خىل ئۆز-ئارا تەسىر كۆرسىتىدىغان ئارىلاشما ھالەتتىكى خروموگرافىيە پېپتىد ، ئاقسىل ۋە باشقا مۇرەككەپ ئارىلاشمىلارنى ئايرىشنىڭ RP-LC نىڭ ئورنىنى ئالالايدۇ. ھەرخىل ئارىلاشما ھالەتتىكى تۇراقلىق باسقۇچلار تەييارلاندى ، بۇ باسقۇچلار قاچىلانغان تۈۋرۈكلەر پېپتىد ۋە ئاقسىلنىڭ ئايرىلىشى ئۈچۈن ئىشلىتىلدى. HILIC / RPLC ، قۇتۇپ ئارىلىقى / RPLC) ئىككى قۇتۇپ ۋە قۇتۇپسىز گۇرۇپپىلارنىڭ مەۋجۇتلۇقى سەۋەبىدىن پېپتىد ۋە ئاقسىلنىڭ ئايرىلىشىغا ماس كېلىدۇ .22،23،24،25،26،27،28. ئوخشاش. كۆپ خىل ئۆز-ئارا تەسىر كۆرسىتىش 29 ، 30 ، 31 ، 32. يېقىنقى ۋاقىتلاردا ، جاڭ قاتارلىقلار. 30 دودسىلىن ئاخىرلاشقان پولىئامىن تۇراقلىق باسقۇچىنى تەييارلاپ ، ھىدرو كاربون ، ئوكسىدلىنىشقا قارشى تۇرغۇچى ، فلاۋونوئىد ، يادرو ، ئېستروگېن ۋە باشقا بىر قانچە ئانالىزنى مۇۋەپپەقىيەتلىك ئايرىپ چىقتى. قۇتۇپ ئارىلىقىدا ئىككى قۇتۇپلۇق ۋە قۇتۇپسىز گۇرۇپپىلار بار ، شۇڭا ئۇنى ھىدروفوبىك ۋە گىدروفىللىق نەملىك بار بولغان پېپتىد ۋە ئاقسىلنى ئايرىشقا ئىشلىتىشكە بولىدۇ. ئىسمى Ascentis Express RP-Amide تۈۋرۈكى ، ئەمما بۇ ئىستونلار پەقەت ئامىنە 33 نى تەھلىل قىلىشقا ئىشلىتىلىدۇ.
نۆۋەتتىكى تەتقىقاتتا ، HSA نىڭ پېپتىد ۋە تىرىپسىن ھەزىملىرىنى ئايرىش ئۈچۈن قۇتۇپقا ئورنىتىلغان تۇراقلىق باسقۇچ (N-fenylmaleimide قىستۇرۇلغان پولىستىرېن) تەييارلىنىپ باھالاندى. تۇراقلىق باسقۇچ تۆۋەندىكى ئىستراتېگىيىدىن پايدىلىنىپ تەييارلاندى. چوڭ تۆشۈكچىلەرنىڭ چوڭلۇقىدىكى سىلىتسىي زەررىچىلىرى. ئىككىنچىدىن ، يېڭى لەگلەك ، فېنىلمالىمىد-مېتىل ۋىنىل ئىزوكيانات بىرىكتۈرۈلۈپ ، سىلىتسىي زەررىچىلىرىنى ھاسىل قىلىپ ، قۇتۇپ سىڭدۈرۈلگەن تۇراقلىق باسقۇچنى تەييارلاشقا ئىشلىتىلىدۇ. ستون. بەش پېپتىدتىن تەركىب تاپقان پېپتىد ئارىلاشمىسىنىڭ ئورالغان ستون ئايرىلىشىنى باھالاڭ. . پېپتىد ۋە ئاقسىلنىڭ PMP تۈۋرۈكىدە ياخشى ھەل قىلىنغان ۋە ئۈنۈملۈك ئىكەنلىكى بايقالغان ، بۇ Ascentis Express RP-Amide ئىستونىغا قارىغاندا تېخىمۇ ئۈنۈملۈك بولغان.
PEG. 4-Hydroxy-TEMPO ، Benzoyl Peroxide (BPO) ، HPLC Grade Acetonitrile (ACN) ، مېتانول ، 2-پروپانول ۋە ئاتسېتون سىگما-ئالدرىچتىن سېتىۋېلىندى (سانت لۇئىس ، MO ، ئامېرىكا).
ئۇرېيە (8 گرام) ، پولىئېتىلېن گلىكول (8 گرام) ۋە 0.01 مىللىلىتىرلىق كىسلاتانىڭ 8 مىللىلىتىر ئارىلاشمىسى 10 مىنۇت ئارىلاشتۇرۇلدى ، ئاندىن مۇز سوغۇق شارائىتتا ئۇنىڭغا 24 مىللىلىتىر TMOS قوشۇلدى. ئوچاقتىكى سىلىق يەر ۋە 550 سېلسىيە گرادۇستا 12 سائەت ھېسابلىنىدۇ. ئۈچ تۈركۈم تەييارلىنىپ ، زەررىچە چوڭلۇقى ، تۆشۈكچىلەرنىڭ چوڭلۇقى ۋە يەر يۈزىدىكى كۆپىيىشچانلىقىنى تەكشۈردى.
سىلىتسىي زەررىچىلىرىنى ئالدىن بىرىكتۈرۈلگەن لىگېن فېننىلمامىد-مېتىلۋىنىلىسوكيانات (PCMP) بىلەن يەر يۈزىگە ئۆزگەرتىش ئارقىلىق ، ستېرېن بىلەن رادىئاتسىيە پولىمېرلىشىش ئارقىلىق ، قۇتۇپ گۇرۇپپىسىنى ئۆز ئىچىگە ئالغان بىرىكمە تەييارلانغان. يىغىلىش ۋە پولىستىرېن زەنجىرىنىڭ تۇراقلىق باسقۇچى. تەييارلىق جەريانى تۆۋەندە بايان قىلىنغان.
N-fenylmaleimide (200 mg) ۋە مېتىل ۋىنىل ئىزوكيانات (100 مىللىگىرام) قۇرۇق تولىندا ئېرىپ ، 2،2 ′ azoisobutyronitrile (AIBN) نىڭ 0.1 مىللىلىتىر رېئاكسىيە پلاستىنكىسىغا فېننىلمالىئىمىد-مېتىل ۋىنىل ئىزويانات كوپولمېر (60 سائەت) قۇرۇتۇلدى. 40 سېلسىيە گرادۇستا 3 سائەت.
قۇرۇتۇلغان سىلىتسىي زەررىچىلىرى (2 گرام) قۇرۇق تولۇئېن (100 مىللىلىتىر) غا تارقاقلاشتۇرۇلۇپ ، 500 مىللىمېتىرلىق يۇمىلاق ئۈستەل تاختىسىدا 10 مىنۇت ئارىلاشتۇرۇلدى ۋە سونىكلاشتۇرۇلدى. سىلىتسىي زەررىچىلىرى (100 گرام) تولۇئېندا (200 مىللىمېتىر) ئېرىپ ، 4 µ گىدروكىسسى- TEMPO (2 مىللىمېتىر) كاتالىزاتور سۈپىتىدە 100 µL لىك دىبۇتىلتىن دىلاۋاتنىڭ قوشۇلۇشىغا قوشۇلدى.
ستېرېن (1 مىللىمېتىر) ، بېنزولىن ئوكسىد BPO (0.5 مىللىمېتىر) ۋە TEMPO-PMCP ئۇلانغان سىلىتسىي زەررىچىلىرى (1.5 گرام) تولۇئېنغا تارقىلىپ ئازوت بىلەن ساپلاشتۇرۇلدى. ستېرېننىڭ پولىمېرلىشىشى 100 سېلسىيە گرادۇستا 12 سائەت ئېلىپ بېرىلدى.
ئەۋرىشكە 393 K دە 1 سائەت تۆۋەنلەپ ، 10-3 توردىن تۆۋەن قالدۇق بېسىمغا ئېرىشتى. P / P0 = 0.99 نىڭ نىسپىي بېسىمىدا ئېلان قىلىنغان N2 نىڭ مىقدارى تۆشۈكچىلەرنىڭ ئومۇمىي مىقدارىنى ئېنىقلاشقا ئىشلىتىلدى. يېپىشقاق كاربون لېنتا ئارقىلىق تۈۋرۈك. ئەۋرىشكە Q150T پۈركۈگۈچ چاپلاق ئىشلىتىپ ، ئەۋرىشكە ئۈستىگە 5 nm Au قەۋىتى قويۇلدى. بۇ تۆۋەن بېسىملىق توك ئارقىلىق جەريان ئۈنۈمىنى ئۆستۈرۈپ ، ئېسىل دان ، سوغۇق پۈركۈش بىلەن تەمىنلەيدۇ. تېرمو ئېلېكترون (Waltham, MA, USA) Flash EA1112 ئېلېمېنت ئانالىزچىسى ئىشلىتىلگەن. زەررىچە چوڭلۇقتا تەقسىملەش. يالىڭاچ سىلىتسىي زەررىچىلىرى ۋە لەگلەك بىلەن باغلانغان سىلىتسىي زەررىچىلىرى (ھەر بىرى 5 مىللىگىرام) 5 مىللىمېتىر ئىزوپروپانولدا تارقاقلاشتۇرۇلدى ، 10 مىنۇتتا سوقۇلدى ، 5 مىنۇت قاينام-تاشقىنلىققا چۆمدى ۋە ماستېرزېرنىڭ ئوپتىكىلىق ئورۇندۇقىغا قويۇلدى.
ئەينەك تىزىلغان داتلاشماس پولات تار دائىرىلىك چوڭلۇقتىكى تۈۋرۈكلەر (100 × 1.8 مىللىمېتىر id) پاتقاق ئوراش ئۇسۇلى ئارقىلىق ئورالغان بولۇپ ، رېفتا قوللىنىلغان ئوخشاش تەرتىپنى قوللانغان. 31. داتلاشماس پولات تۈۋرۈك (ئەينەك تىزىلغان ، 100 × 1.8 مىللىمېتىرلىق id) ئېغىزىغا 1 µm لىق قورۇما ئورنىتىلغان بولۇپ ، پاتقاق ئورالمىسىغا ئۇلىنىدۇ (ئامېرىكا IL ، ئامېرىكا ILtech Deerfield). 100 MP لىق بېسىم 10 مىنۇت ، 80 MP 15 مىنۇت ، 60 MP 30 مىنۇت.
LC پومپىسى (ياپونىيەنىڭ 10AD Shimadzu) ، ئوكۇل ئۇرغۇچى (ۋالكو (ئامېرىكا) C14 W.05) 50nL ئوكۇل ھالقىسى ، پەردىنىڭ بۇزۇلۇشى (Shimadzu DGU-14A) ، UV-VIS قىل قان تومۇر كۆزنىكى ئالاھىدە µLC ئۈسكۈنىسىنى تەكشۈرۈش ئۈسكۈنىسى (UV-2075) ۋە ئەينەك تىزىلغان مىكرو تۈۋرۈكلەرنى ئىشلىتىڭ. 365 ۋە كېمەيتىش بىرلەشمىسىنىڭ كاپالىتى (50 مىللىمېتىر) كېمەيتىش بىرلەشمىسىنىڭ 1/16 ″ چىقىش ئېغىزىغا ئورنىتىلدى ، سانلىق مەلۇمات توپلاش ۋە خروموگرافىك بىر تەرەپ قىلىش 254 nm ئانالىز قىلىش ئارقىلىق ئۇلترا بىنەپشە نۇرنىڭ سۈمۈرۈلۈشى ئۈچۈن سىناق قىلىندى.
ئالبۇمىن ئىنسانلارنىڭ قان زەردابىدىن ، لىيوفىللانغان پاراشوك ، ≥ 96% (ئاگاروزا گېلى ئېلېكتروفورىسى) 3 مىللىگىرام تىرىپسىن (1.5 مىللىگىرام) ، 4.0 M ئۇرېيە (1 مىللىمېتىر) ۋە 0.2 M ئاممونىي ئىككى كاربونات (1 مىللىلېتىر) ئارىلاشتۇرۇلغان.
پېپتىد ئارىلاشمىسى ۋە HSA تىرىپسىننىڭ ھەزىم قىلىنىشى PMP تۈۋرۈكىدە ئايرىم باھالاندى. HSA نىڭ پېپتىد ئارىلاشمىسى ۋە ترىپسىن ھەزىمنىڭ PMP ئىستونى بىلەن ئايرىلىشىنى تەكشۈرۈپ ، نەتىجىنى Ascentis Express RP-Amide ئىستونى بىلەن سېلىشتۇرۇڭ. نەزەرىيەۋى نومۇر تاختىسى تۆۋەندىكىدەك ھېسابلىنىدۇ:
يالىڭاچ سىلىتسىي زەررىچىلىرى ۋە لەگلەك باغلانغان سىلىتسىي زەررىچىلىرىنىڭ SEM رەسىملىرى FIG دا كۆرسىتىلدى. 2. يالىڭاچ سىلىتسىي زەررىچىلىرى (A, B) نىڭ SEM تەسۋىرىدە كۆرسىتىلىشىچە ، بىزنىڭ ئىلگىرىكى تەتقىقاتىمىزغا سېلىشتۇرغاندا ، بۇ زەررىچىلەر شارسىمان بولۇپ ، بۇ زەررىچىلەر ئۇزۇنغا سوزۇلغان ياكى تەرتىپسىز سىممېترىك بولىدۇ.
يالىڭاچ سىلىتسىي زەررىچىلىرى (A, B) ۋە لەگلەك باغلانغان سىلىتسىي زەررىچىلىرى (C ، D) نىڭ ئېلېكترونلۇق مىكروسكوپ تەسۋىرىنى سىكاننېرلاش.
يالىڭاچ سىلىتسىي زەررىچىلىرى ۋە لەگلەك بىلەن باغلانغان سىلىتسىي زەررىچىلىرىنىڭ زەررىچە چوڭ-كىچىكلىكى تەقسىملىنىشى 3-رەسىمدە كۆرسىتىلدى. ئېلان (0.5) قىممىتى 3.05 μ mm (پولىستىرېن بىلەن باغلانغان سىلىتسىي زەررىچىسى) 34. بۇ گۇرۇپپىنىڭ رېئاكسىيە ئارىلاشمىسىدىكى PEG ، ئۇرېيە ، TMOS ۋە كىسلاتا كىسلاتاسىنىڭ ئوخشىمىغان نىسبىتى سەۋەبىدىن ئىلگىرىكى تەتقىقاتىمىزغا سېلىشتۇرغاندا تار زەررىچە چوڭلۇقتا تارقىلىشچانلىقى بار. سىلىتسىي يۈزىگە پولىستىرېن قەۋىتى (0.97 µm) قويدى ، PMP باسقۇچىدا قەۋەت قېلىنلىقى 1.38 µm.
يالىڭاچ سىلىتسىي زەررىچىلىرى ۋە لەگلەك بىلەن باغلانغان سىلىتسىي زەررىچىلىرىنىڭ چوڭ-كىچىكلىكىنى تەقسىملەش (A) ۋە تۆشۈكچىلەرنىڭ چوڭ-كىچىكلىكىنى تەقسىملەش (B).
نۆۋەتتىكى تەتقىقاتتىكى سىلىتسىي زەررىچىلىرىنىڭ تۆشۈكچىلەرنىڭ چوڭ-كىچىكلىكى ، تۆشۈكچىلىرىنىڭ ھەجىمى ۋە يەر يۈزى 1-جەدۋەلدە كۆرسىتىلدى. ئەگرى سىزىقنىڭ ئۆزگىرىشى 3-رەسىمدە كۆرسىتىلدى. خىمىيىلىك ئۆزگەرتىشتىن كېيىن m2 / g.
تۇراقلىق باسقۇچنىڭ ئېلېمېنتلىق ئانالىز نەتىجىسى 2-جەدۋەلدە كۆرسىتىلدى. نۆۋەتتىكى تۇراقلىق باسقۇچنىڭ كاربون قاچىلاش نىسبىتى% 6.35 بولۇپ ، بۇ بىزنىڭ ئىلگىرىكى تەتقىقاتىمىزنىڭ (پولىستىرېن باغلانغان سىلىتسىي زەررىچىسى ئايرىم-ئايرىم ھالدا% 7.93 ۋە% 10.21) كاربون يۈكلىنىشىدىن تۆۋەن. فېنىلمالىئىمىد-مېتىلۋىنىلىسوكيانات (PCMP) ۋە 4-گىدروكىسسى- TEMPO ئىشلىتىلگەن. ھازىرقى تۇراقلىق باسقۇچتىكى ئازوتنىڭ ئېغىرلىقى ئايرىم-ئايرىم ھالدا% 2.21 بولۇپ ، ئالدىنقى تەتقىقاتلاردا ئازوتنىڭ ئېغىرلىقى 0.1735 ۋە% 0.85 بولغان. (5) ئايرىم-ئايرىم ھالدا% 2.7 ۋە% 2.9 بولدى ، 2-جەدۋەلدە كۆرسىتىلگەندەك ، ئاخىرقى مەھسۇلاتنىڭ (6) كاربون قاچىلاش نىسبىتى% 6.35 بولدى ، ئورۇقلاش PMP تۇراقلىق باسقۇچى بىلەن تەكشۈرۈلدى ، TGA ئەگرى سىزىقى 4-رەسىمدە كۆرسىتىلدى.
فېنىلمالىئىمىد-مېتىلۋىنىلىسوكيانات لەگلەك سىلىتسىي زەررىچىلىرىنى يەر يۈزىگە ئۆزگەرتىش ئۈچۈن تاللانغان ، چۈنكى ئۇنىڭدا قۇتۇپ فېنىلمالىئېمىد گۇرۇپپىسى ۋە ۋىنىلوسوكيانات گۇرۇپپىسى بار. فېنىلمالىئىمىدنىڭ نورمال pH دا مەۋھۇم توك يوق. تۇراقلىق باسقۇچنىڭ قۇتۇپلىقىنى ئەڭ ياخشى مىقداردا ستېرېن ۋە ئەركىن رادىكال پولىمېرلىشىشنىڭ رېئاكسىيە ۋاقتى ئارقىلىق كونترول قىلغىلى بولىدۇ. رېئاكسىيەنىڭ ئاخىرقى باسقۇچى (ئەركىن رادىكال پولىمېرلىشىش) ئىنتايىن مۇھىم بولۇپ ، تۇراقلىق باسقۇچنىڭ كاربون يۈك مىقدارىنى تەكشۈرۈش ئۈچۈن ئېلىپ بېرىلغان. تۇراقلىق باسقۇچ ۋە ئەكسىچە. ئوخشىمىغان قويۇقلۇقتىكى ستېرېن بىلەن تەييارلانغان PSP نىڭ كاربون يۈكى ئوخشىمايدۇ. يەنە كېلىپ ، بۇ تۇراقلىق باسقۇچلارنى داتلاشماس پولات تۈۋرۈككە قاچىلاپ ، ئۇلارنىڭ خروموگرافىك ئىپادىسىنى تەكشۈرۈڭ (تاللاشچانلىقى ، ئېنىقلىق دەرىجىسى ، N قىممىتى قاتارلىقلار). بۇ سىناقلارغا ئاساسەن ، ئەلالاشتۇرۇلغان فورمۇلا تاللىنىپ ، PMP تۇراقلىق باسقۇچى ۋە ياخشى ئانالىزنىڭ ساقلىنىشىغا كاپالەتلىك قىلىندى.
بەش پېپتىد ئارىلاشمىسى (Gly-Tyr ، Gly-Leu-Tyr ، Gly-Gly-Tyr-Arg ، Tyr-Ile-Gly-Ser-Arg ، لېۋىن ئېنكېفالىن) مۇ كۆچمە باسقۇچ ئارقىلىق PMP ئىستونى ئارقىلىق باھالانغان. 60/40 (v / v) ئاتسېتىنىترىل / سۇ (% 0.1 TFA) ئېقىش سۈرئىتى 80 μL / min. پېپتىدلار بىر مىنۇت ئىچىدە چىقىرىۋېتىلدى ، N قىممىتى ئىنتايىن ياخشى ، ھەر بىر ئىستوندا 13،500 ± 330 (100 × 1.8 مىللىمېتىر id) ، 135،000 تەخسە / m (5B رەسىم) گە ماس كېلىدۇ. ئۈچ خىل ئوخشاش چوڭلۇقتىكى تۈۋرۈك (100 × 1.8 مىللىمېتىر id) ئوخشىمىغان ئۈچ خىل PMP تۇراقلىق باسقۇچقا قاچىلانغان بولۇپ ، ھەر بىر ئىستوندىكى ئانالىز قويۇقلۇقى ئەڭ ياخشى بولغان تاللاش تەخسىسى ۋە خاتىرىلەنگەن. PMP ستونلىرىنىڭ كۆپىيىش سانلىق مەلۇماتلىرى 4-جەدۋەلدە كۆرسىتىلدى. PMP ستوننىڭ كۆپىيىشچانلىقى 3-جەدۋەلدە كۆرسىتىلگەندەك ، ئىنتايىن تۆۋەن% RSD قىممىتى بىلەن ناھايىتى ياخشى مۇناسىۋەتلىك.
PMP ئىستونى (B) ۋە Ascentis Express RP-Amide تۈۋرۈكىدىكى پېپتىد ئارىلاشمىسىنى ئايرىش. كۆچمە باسقۇچ 60/40 ACN / H2O (TFA 0.1%) ، PMP ئىستون ئۆلچىمى (100 × 1.8 مىللىمېتىر id); ئانالىز بىرىكمىلەرنىڭ يوقىتىش تەرتىپى: 1 (Gly-Tyr) ، 2 (Gly-Leu-Tyr) ، 3 (Gly-Gly-Tyr-Arg) ، 4 (Tyr-Ile-Gly-Ser-Arg) ۋە 5 (لېۋىن) كىسلاتا ئېنكېفالىن).
PMP تۈۋرۈكى (100 × 1.8 مىللىمېتىر id) يۇقىرى ئۈنۈملۈك سۇيۇقلۇق خروموگرافىيەدە ئىنسانلارنىڭ قان زەردابى ئالبومىننىڭ تىرىپتىك ھەزىملىرىنى ئايرىش ئۈچۈن باھالاندى. 6-رەسىمدىكى خروموگرامما ئەۋرىشكىنىڭ ياخشى ئايرىلغانلىقى ۋە ئېنىقلىق دەرىجىسىنىڭ ناھايىتى ياخشى ئىكەنلىكىنى كۆرسىتىپ بەردى. 17 پېپتىد.
PMP ئىستونىدا HSA (100 × 1.8 مىللىمېتىر id) نىڭ ئۈچ ئۆلچەملىك ھەزىم قىلىنىشى ئايرىلدى. ئېقىش نىسبىتى (100 µL / min) ، كۆچمە باسقۇچ 60/40 ئاتسېتىنىترىل / سۇ% 0.1 TFA.
بۇ يەردە L بولسا تۈۋرۈك ئۇزۇنلۇقى ، η كۆچمە باسقۇچنىڭ يېپىشقاقلىقى ، ΔP بولسا ئىستون ئارقا بېسىمى ، u بولسا كۆچمە باسقۇچنىڭ سىزىقلىق تېزلىكى. PMP تۈۋرۈكىنىڭ ئۆتكۈزۈشچانلىقى 2.5 × 10-14 m2 ، ئېقىش سۈرئىتى 25 μL / min ، 60/40 v / v ACN / سۇ ئىشلىتىلگەن. يۈزەكى شارسىمان زەررىچىلەر بىلەن ئورالغان تۈۋرۈك: 1.3 مىللىمېتىر زەررىچىلەر ئۈچۈن 1.7 × 10-15 ، 1.7 مىللىمېتىر زەررىچىلەر ئۈچۈن 3.1 × 10-15 ، 5.6 × 10-15 ۋە 2.5 × 10-14 m2 2.6 مىللىمېتىر زەررىچىلەر ئۈچۈن 5 مىللىمېتىر زەررىچىلەر ئۈچۈن 43. شۇڭلاشقا ، PMP باسقۇچىنىڭ ئۆتكۈزۈشچانلىقى 5 مىللىمېتىرلىق يادرولۇق قاپ زەررىچىسى بىلەن ئوخشاش.
بۇ يەردە Wx خلوروفورم قاچىلانغان تۈۋرۈكنىڭ ئېغىرلىقى ، Wy بولسا مېتانول بىلەن ئورالغان تۈۋرۈكنىڭ ئېغىرلىقى ، ρ بولسا ئېرىتكۈچىنىڭ زىچلىقى. مېتانولنىڭ زىچلىقى (ρ = 0.7866) ۋە خلوروفورم (ρ = 1.484). ئىلگىرى بىز تەتقىق قىلغان SILICA PARTICLES-C18 تۈۋرۈكنىڭ ئومۇمىي كەڭلىكى (100 × 1.8 mm id). ئايرىم-ئايرىم ھالدا. ئۇنىڭ ئەتراپىدا نىسبەتەن قېلىن پولىمېر قەۋىتى شەكىللەنگەن. تىپىك تەجرىبىدە ، تۈۋرۈكنىڭ جاراڭلىقى مۇنداق ھېسابلىنىدۇ:
7A ، B رەسىمدە PMP ستون (100 × 1.8 مىللىمېتىر id) ۋە Ascentis Express RP-Amide ستون (100 × 1.8 مىللىمېتىر id) ئوخشاش يوقىتىش شارائىتىنى ئىشلىتىپ كۆرسىتىلدى (يەنى 60/40 ACN / H2O ۋە% 0.1 TFA). ) van Deemter نىڭ پىلانى. تاللانغان پېپتىد ئارىلاشمىسى (Gly-Tyr, Gly-Leu-Tyr, Gly-Gly-Tyr-Arg, Tyr-Ile-Gly-Ser-Arg, Leucine Enkephalin) 20 µL / ھەر ئىككى ئىستوننىڭ ئەڭ تۆۋەن ئېقىش سۈرئىتى 800 µL / min. HETP قىممىتى PMP تۈۋرۈكىنىڭ (100 × 1.8 مىللىمېتىرلىق id) ئايرىش ئۈنۈمىنىڭ سودا خاراكتېرلىك Ascentis Express RP-Amide تۈۋرۈكى (100 × 1.8 مىللىمېتىر id) دىن كۆپ ياخشى ئىكەنلىكىنى كۆرسىتىپ بېرىدۇ. RP-Amide ستون نۆۋەتتىكى خىزمەتتە ئىشلىتىلگەن زەررىچە شەكلى ، چوڭ-كىچىكلىكى ۋە مۇرەككەپ تۈۋرۈك ئوراش تەرتىپىنىڭ ياخشىلىنىشىنى ئاساس قىلىدۇ.
.
قۇتۇپقا قىستۇرۇلغان پولىستىرېننىڭ تۇراقلىق باسقۇچى يۇقىرى ئۈنۈملۈك سۇيۇقلۇق خروموگرافىيەدە ئىنسانلارنىڭ قان زەردابى پىلاستىنكىسى (HAS) نىڭ بىرىكتۈرۈلگەن پېپتىد ئارىلاشمىسى ۋە ترىپسىن ھەزىملىرىنى ئايرىش ئۈچۈن تەييارلىنىپ باھالاندى. مۇرەككەپ تۈۋرۈك ئوراش. يۇقىرى ئايرىش ئۈنۈمىدىن باشقا ، يۇقىرى ئېقىش نىسبىتىدىكى تۆۋەن تۈۋرۈك ئارقا بېسىمى بۇ تۇراقلىق باسقۇچنىڭ يەنە بىر ئەۋزەللىكى. PP تۈۋرۈكى ياخشى كۆپىيىشچانلىقىنى نامايەن قىلىدۇ ھەمدە ھەر خىل ئاقسىللارنىڭ پېپتىد ئارىلاشمىسى ۋە تىرىپسىننىڭ ھەزىم قىلىنىشىنى ئانالىز قىلىشقا ئىشلىتىلىدۇ. ئانتىتېلا.
Field, JK, Euerby, MR, Lau, J., Thøgersen, H. & Petersson, P خىروموگرافىيە .1603 ، 113 - 129.https: //doi.org/10.1016/j.chroma.2019.05.038 (2019).
گومېز ، B. قاتارلىقلار يۇقۇملۇق كېسەللىكلەرنى داۋالاش ئۈچۈن لايىھەلەنگەن ئاكتىپ پېپتىدلار. بىئوتېخنىكا. كۈچەيتىلگەن .36 (2) ، 415-429.https: //doi.org/10.1016/j.biotechadv.2018.01.004 (2018).
Vlieghe, P., Lisowski, V., Martinez, J. & Khrestchatisky, M. سىنتېتىك داۋالاش پېپتىدلىرى: ئىلىم-پەن ۋە بازار. زەھەرلىك چېكىملىك ​​بايقاش .15 (1-2) بۈگۈن ، 40-56. Http:
Xie, F., Smith, RD & Shen, Y. Advanced Proteomic Liquid Chromatography.J. خىروموگرافىيە. A 1261 ، 78–90 (2012).
ليۇ ، ۋ.
Chesnut, SM & Salisbury, JJ UHPLC نىڭ دورا تەرەققىياتىدىكى رولى .J. Sci.30 (8) ، 1183-1190 (2007).
ۋۇ ، ن. Sci.30 (8) ، 1167-1182.https: //doi.org/10.1002/jssc.200700026 (2007).
Wren, SA & Tchelitcheff, P. دەرىجىدىن تاشقىرى يۇقىرى ئىقتىدارلىق سۇيۇقلۇق خروموگرافىيەنىڭ دورا تەرەققىياتىدا قوللىنىلىشى. Chromatography.1119 (1-2), 140-146.https: //doi.org/10.1016/j.chroma.2006.02.052 (2006).
گۇ ، H. قاتارلىقلار مونولىت ماكرو شەكىللىك ھىدروگېل ئېنتېرو ۋىرۇسىنى ئۈنۈملۈك ساپلاشتۇرۇش ئۈچۈن مايدىكى سۇنىڭ يۇقىرى ئىچكى فازىلىق ئېمۇلسىيسىيىسىدىن تەييارلانغان. خىمىيىلىك. ئەنگىلىيە.ج. 401 ، 126051 (2020).
Shi, Y., Xiang, R., Horváth, C. & Wilkins, JA سۇيۇق خروموگرافىيەنىڭ ئاقسىلدىكى رولى. خىروموگرافىيە. A 1053 (1-2) ، 27-36 (2004).
Fekete, S., Veuthey, J.L. دورىگەرلىك. بىئولوگىيەلىك ئىلىم. Anus.69 ، 9-27 (2012).
Gilar, M., Olivova, P., Daly, AE & Gebler, JC بىرىنچى ۋە ئىككىنچى ئايرىش ئۆلچىمىدە ئوخشىمىغان pH قىممىتى ئارقىلىق RP-RP-HPLC سىستېمىسى ئارقىلىق پېپتىدلارنى ئىككى ئۆلچەملىك ئايرىش .J. Sci.28 (14) ، 1694-1703 (2005).
Feletti, S. قاتارلىقلار. C18 تارماق 2 μ mm لىق تولۇق ۋە يۈزەكى شارسىمان زەررىچىلەر قاچىلانغان يۇقىرى ئۈنۈملۈك خروموگرافىك تۈۋرۈكلەرنىڭ تۈركۈملەپ يۆتكەش ئالاھىدىلىكى ۋە ھەرىكەت ئىقتىدارى تەكشۈرۈلدى. Sci.43 (9-10) ، 1737-1745 (2020).
Piovesana, S. قاتارلىقلار. ئۆسۈملۈك بىئو ئاكتىپلىق پېپتىدلارنى ئايرىش ، پەرقلەندۈرۈش ۋە دەلىللەشتىكى يېقىنقى يۈزلىنىش ۋە ئانالىز خىرىسلىرى. خىمىيىلىك.410 (15) ، 3425–3444.
مۇئېللېر ، JB قاتارلىقلار. ھاياتلىق پادىشاھلىقىنىڭ ئاقسىل مەنزىرىسى. تەبىئىي 582 (7813) ، 592-596.https: //doi.org/10.1038/s41586-020-2402-x (2020).
DeLuca, C. قاتارلىقلار. تەييار سۇيۇقلۇق خروموگرافىيە ئارقىلىق داۋالاش پېپتىدلىرىنى پىششىقلاپ ئىشلەش. مولېكۇلا (باسېل ، شىۋىتسارىيە) 26 (15) ، 4688 (2021).
ياڭ ، Y. & Geng ، X. ئارىلاشما ھالەتتىكى خروموگرافىيە ۋە ئۇنىڭ بىئوپولىمېرغا قوللىنىلىشى .J. خىروموگرافىيە. A 1218 (49) ، 8813–8825 (2011).
جاۋ ، گ. ، دوڭ ، X.-Y. & Sun ، Y. Biotechnology.144 (1), 3-11 (2009).