Nature.com 'ਤੇ ਜਾਣ ਲਈ ਧੰਨਵਾਦ। ਤੁਹਾਡੇ ਦੁਆਰਾ ਵਰਤੇ ਜਾ ਰਹੇ ਬ੍ਰਾਊਜ਼ਰ ਸੰਸਕਰਣ ਵਿੱਚ CSS ਲਈ ਸੀਮਤ ਸਮਰਥਨ ਹੈ। ਸਭ ਤੋਂ ਵਧੀਆ ਅਨੁਭਵ ਲਈ, ਅਸੀਂ ਸਿਫ਼ਾਰਿਸ਼ ਕਰਦੇ ਹਾਂ ਕਿ ਤੁਸੀਂ ਇੱਕ ਅੱਪਡੇਟ ਕੀਤੇ ਬ੍ਰਾਊਜ਼ਰ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰੋ (ਜਾਂ ਇੰਟਰਨੈੱਟ ਐਕਸਪਲੋਰਰ ਵਿੱਚ ਅਨੁਕੂਲਤਾ ਮੋਡ ਬੰਦ ਕਰੋ)। ਇਸ ਦੌਰਾਨ, ਨਿਰੰਤਰ ਸਹਾਇਤਾ ਨੂੰ ਯਕੀਨੀ ਬਣਾਉਣ ਲਈ, ਅਸੀਂ ਸਾਈਟ ਨੂੰ ਸਟਾਈਲ ਅਤੇ ਜਾਵਾ ਸਕ੍ਰਿਪਟ ਤੋਂ ਬਿਨਾਂ ਪ੍ਰਦਰਸ਼ਿਤ ਕਰਾਂਗੇ।
ਪੋਰਸ ਸਿਲਿਕਾ ਕਣਾਂ ਨੂੰ ਸੋਲ-ਜੈੱਲ ਵਿਧੀ ਦੁਆਰਾ ਕੁਝ ਸੋਧਾਂ ਨਾਲ ਤਿਆਰ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ ਤਾਂ ਜੋ ਮੈਕਰੋਪੋਰਸ ਕਣ ਪ੍ਰਾਪਤ ਕੀਤੇ ਜਾ ਸਕਣ। ਇਹਨਾਂ ਕਣਾਂ ਨੂੰ N-ਫੀਨਾਈਲਮਲੇਮਾਈਡ-ਮਿਥਾਈਲਵਿਨਾਇਲਿਸੋਸਾਈਨੇਟ (PMI) ਅਤੇ ਸਟਾਇਰੀਨ ਨਾਲ ਰਿਵਰਸੀਬਲ ਐਡੀਸ਼ਨ ਫ੍ਰੈਗਮੈਂਟੇਸ਼ਨ ਚੇਨ ਟ੍ਰਾਂਸਫਰ (RAFT) ਪੋਲੀਮਰਾਈਜ਼ੇਸ਼ਨ ਦੁਆਰਾ ਡੈਰੀਵੇਟਾਈਜ਼ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ ਤਾਂ ਜੋ ਪੋਲੀਸਟਾਈਰੀਨ (PMP) ਸਟੇਸ਼ਨਰੀ ਪੜਾਅ ਦੇ N-ਫੀਨਾਈਲਮਲੇਮਾਈਡ ਇੰਟਰਕੈਲੇਸ਼ਨ ਨੂੰ ਤਿਆਰ ਕੀਤਾ ਜਾ ਸਕੇ। ਤੰਗ-ਬੋਰ ਸਟੇਨਲੈਸ ਸਟੀਲ ਕਾਲਮ (100 × 1.8 mm id) ਨੂੰ ਸਲਰੀ ਪੈਕਿੰਗ ਦੁਆਰਾ ਪੈਕ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ। ਪੰਜ ਪੇਪਟਾਇਡ (Gly-Tyr, Gly-Leu-Tyr, Gly-Gly-Tyr-Arg, Tyr-Ile-Gly-Ser-Arg, leucine enkephalin) ਕ੍ਰੋਮੈਟੋਗ੍ਰਾਫਿਕ ਪ੍ਰਦਰਸ਼ਨ) ਅਤੇ ਮਨੁੱਖੀ ਸੀਰਮ ਐਲਬਿਊਮਿਨ (HAS) ਦੇ ਟ੍ਰਾਈਪਸਿਨ ਪਾਚਨ ਵਾਲੇ ਪੇਪਟਾਇਡ ਮਿਸ਼ਰਣ ਦੇ PMP ਕਾਲਮ ਵਿਭਾਜਨ ਦਾ ਮੁਲਾਂਕਣ ਕੀਤਾ ਗਿਆ। ਅਨੁਕੂਲ ਐਲੂਸ਼ਨ ਹਾਲਤਾਂ ਦੇ ਤਹਿਤ, ਪੇਪਟਾਇਡ ਮਿਸ਼ਰਣ ਦੀ ਸਿਧਾਂਤਕ ਪਲੇਟ ਗਿਣਤੀ 280,000 ਪਲੇਟਾਂ/m² ਜਿੰਨੀ ਉੱਚੀ ਹੈ। ਵਿਕਸਤ ਕਾਲਮ ਦੇ ਵਿਭਾਜਨ ਪ੍ਰਦਰਸ਼ਨ ਦੀ ਤੁਲਨਾ N-ਫੀਨਾਈਲਮਲੇਮਾਈਡ-ਮਿਥਾਈਲਵਿਨਾਇਲਿਸੋਸਾਈਨੇਟ (PMI) ਅਤੇ ਸਟਾਈਰੀਨ ਨਾਲ ਕੀਤੀ ਗਈ ਸੀ। ਵਪਾਰਕ ਐਸੈਂਟਿਸ ਐਕਸਪ੍ਰੈਸ ਆਰਪੀ-ਐਮਾਈਡ ਕਾਲਮ, ਇਹ ਦੇਖਿਆ ਗਿਆ ਕਿ ਪੀਐਮਪੀ ਕਾਲਮ ਦੀ ਵੱਖ ਕਰਨ ਦੀ ਕਾਰਗੁਜ਼ਾਰੀ ਵੱਖ ਕਰਨ ਦੀ ਕੁਸ਼ਲਤਾ ਅਤੇ ਰੈਜ਼ੋਲਿਊਸ਼ਨ ਦੇ ਮਾਮਲੇ ਵਿੱਚ ਵਪਾਰਕ ਕਾਲਮ ਨਾਲੋਂ ਉੱਤਮ ਸੀ।
ਹਾਲ ਹੀ ਦੇ ਸਾਲਾਂ ਵਿੱਚ, ਬਾਇਓਫਾਰਮਾਸਿਊਟੀਕਲ ਉਦਯੋਗ ਇੱਕ ਵਿਸਤ੍ਰਿਤ ਗਲੋਬਲ ਬਾਜ਼ਾਰ ਬਣ ਗਿਆ ਹੈ ਜਿਸਦੇ ਨਾਲ ਮਾਰਕੀਟ ਸ਼ੇਅਰ ਵਿੱਚ ਕਾਫ਼ੀ ਵਾਧਾ ਹੋਇਆ ਹੈ। ਬਾਇਓਫਾਰਮਾਸਿਊਟੀਕਲ ਉਦਯੋਗ 1,2,3 ਦੇ ਵਿਸਫੋਟਕ ਵਾਧੇ ਦੇ ਨਾਲ, ਪੇਪਟਾਇਡਸ ਅਤੇ ਪ੍ਰੋਟੀਨ ਦਾ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ ਬਹੁਤ ਜ਼ਿਆਦਾ ਲੋੜੀਂਦਾ ਹੈ। ਟਾਰਗੇਟ ਪੇਪਟਾਇਡ ਤੋਂ ਇਲਾਵਾ, ਪੇਪਟਾਇਡ ਸੰਸਲੇਸ਼ਣ ਦੌਰਾਨ ਕਈ ਅਸ਼ੁੱਧੀਆਂ ਪੈਦਾ ਹੁੰਦੀਆਂ ਹਨ, ਇਸ ਤਰ੍ਹਾਂ ਲੋੜੀਂਦੀ ਸ਼ੁੱਧਤਾ ਦੇ ਪੇਪਟਾਇਡਸ ਪ੍ਰਾਪਤ ਕਰਨ ਲਈ ਕ੍ਰੋਮੈਟੋਗ੍ਰਾਫਿਕ ਸ਼ੁੱਧੀਕਰਨ ਦੀ ਲੋੜ ਹੁੰਦੀ ਹੈ। ਇੱਕ ਨਮੂਨੇ ਵਿੱਚ ਸੰਭਾਵੀ ਤੌਰ 'ਤੇ ਖੋਜਣ ਯੋਗ ਪ੍ਰਜਾਤੀਆਂ ਦੀ ਵੱਡੀ ਗਿਣਤੀ ਦੇ ਕਾਰਨ ਸਰੀਰ ਦੇ ਤਰਲ ਪਦਾਰਥਾਂ, ਟਿਸ਼ੂਆਂ ਅਤੇ ਸੈੱਲਾਂ ਵਿੱਚ ਪ੍ਰੋਟੀਨ ਦਾ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ ਅਤੇ ਵਿਸ਼ੇਸ਼ਤਾ ਇੱਕ ਬਹੁਤ ਹੀ ਚੁਣੌਤੀਪੂਰਨ ਕੰਮ ਹੈ। ਹਾਲਾਂਕਿ ਪੁੰਜ ਸਪੈਕਟ੍ਰੋਮੈਟਰੀ ਪੇਪਟਾਇਡ ਅਤੇ ਪ੍ਰੋਟੀਨ ਕ੍ਰਮ ਲਈ ਇੱਕ ਪ੍ਰਭਾਵਸ਼ਾਲੀ ਸਾਧਨ ਹੈ, ਜੇਕਰ ਅਜਿਹੇ ਨਮੂਨਿਆਂ ਨੂੰ ਇੱਕ ਪਾਸ ਵਿੱਚ ਪੁੰਜ ਸਪੈਕਟ੍ਰੋਮੀਟਰ ਵਿੱਚ ਟੀਕਾ ਲਗਾਇਆ ਜਾਂਦਾ ਹੈ, ਤਾਂ ਵਿਭਾਜਨ ਆਦਰਸ਼ ਨਹੀਂ ਹੋਵੇਗਾ। ਇਸ ਸਮੱਸਿਆ ਨੂੰ MS ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ ਤੋਂ ਪਹਿਲਾਂ ਤਰਲ ਕ੍ਰੋਮੈਟੋਗ੍ਰਾਫੀ (LC) ਵਿਭਾਜਨ ਨੂੰ ਲਾਗੂ ਕਰਕੇ ਘੱਟ ਕੀਤਾ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ, ਜੋ ਇੱਕ ਦਿੱਤੇ ਸਮੇਂ 'ਤੇ ਪੁੰਜ ਸਪੈਕਟ੍ਰੋਮੀਟਰ ਵਿੱਚ ਦਾਖਲ ਹੋਣ ਵਾਲੇ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਕਾਂ ਦੀ ਗਿਣਤੀ ਨੂੰ ਘਟਾ ਦੇਵੇਗਾ 4,5,6। ਇਸ ਤੋਂ ਇਲਾਵਾ, ਤਰਲ ਪੜਾਅ ਵਿਭਾਜਨ ਦੌਰਾਨ, ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਕਾਂ ਨੂੰ ਤੰਗ ਖੇਤਰਾਂ ਵਿੱਚ ਕੇਂਦ੍ਰਿਤ ਕੀਤਾ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ, ਜਿਸ ਨਾਲ ਇਹਨਾਂ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਕਾਂ ਨੂੰ ਕੇਂਦਰਿਤ ਕੀਤਾ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ ਅਤੇ MS ਖੋਜ ਸੰਵੇਦਨਸ਼ੀਲਤਾ ਵਿੱਚ ਸੁਧਾਰ ਹੋ ਸਕਦਾ ਹੈ। ਤਰਲ ਕ੍ਰੋਮੈਟੋਗ੍ਰਾਫੀ (LC) ਪਿਛਲੇ ਦਹਾਕੇ ਵਿੱਚ ਕਾਫ਼ੀ ਅੱਗੇ ਵਧਿਆ ਹੈ ਅਤੇ ਪ੍ਰੋਟੀਓਮਿਕ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ ਵਿੱਚ ਇੱਕ ਪ੍ਰਸਿੱਧ ਤਕਨੀਕ ਬਣ ਗਿਆ ਹੈ7,8,9,10।
ਰਿਵਰਸਡ-ਫੇਜ਼ ਲਿਕਵਿਡ ਕ੍ਰੋਮੈਟੋਗ੍ਰਾਫੀ (RP-LC) ਨੂੰ ਪੇਪਟਾਇਡ ਮਿਸ਼ਰਣਾਂ ਦੇ ਸ਼ੁੱਧੀਕਰਨ ਅਤੇ ਵੱਖ ਕਰਨ ਲਈ ਵਿਆਪਕ ਤੌਰ 'ਤੇ ਵਰਤਿਆ ਜਾਂਦਾ ਹੈ, ਜੋ ਕਿ ਔਕਟਾਡੇਸਿਲ-ਮੋਡੀਫਾਈਡ ਸਿਲਿਕਾ (ODS) ਨੂੰ ਸਟੇਸ਼ਨਰੀ ਪੜਾਅ 11,12,13 ਵਜੋਂ ਵਰਤਦੇ ਹਨ। ਹਾਲਾਂਕਿ, RP ਸਟੇਸ਼ਨਰੀ ਪੜਾਅ ਪੇਪਟਾਇਡਾਂ ਅਤੇ ਪ੍ਰੋਟੀਨਾਂ ਨੂੰ ਉਹਨਾਂ ਦੀ ਗੁੰਝਲਦਾਰ ਬਣਤਰ ਅਤੇ ਐਂਫੀਫਿਲਿਕ ਪ੍ਰਕਿਰਤੀ 14,15 ਦੇ ਕਾਰਨ ਤਸੱਲੀਬਖਸ਼ ਵੱਖਰਾ ਪ੍ਰਦਾਨ ਨਹੀਂ ਕਰਦੇ ਹਨ। ਇਸ ਲਈ, ਇਹਨਾਂ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣਾਂ ਨਾਲ ਪਰਸਪਰ ਪ੍ਰਭਾਵ ਪਾਉਣ ਅਤੇ ਬਰਕਰਾਰ ਰੱਖਣ ਲਈ ਧਰੁਵੀ ਅਤੇ ਗੈਰ-ਧਰੁਵੀ ਮੋਇਟੀਆਂ ਵਾਲੇ ਪੇਪਟਾਇਡਾਂ ਅਤੇ ਪ੍ਰੋਟੀਨਾਂ ਦਾ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ ਕਰਨ ਲਈ ਵਿਸ਼ੇਸ਼ ਤੌਰ 'ਤੇ ਤਿਆਰ ਕੀਤੇ ਸਟੇਸ਼ਨਰੀ ਪੜਾਵਾਂ ਦੀ ਲੋੜ ਹੁੰਦੀ ਹੈ। ਮਿਸ਼ਰਤ-ਮੋਡ ਕ੍ਰੋਮੈਟੋਗ੍ਰਾਫੀ, ਜੋ ਮਲਟੀਮੋਡਲ ਪਰਸਪਰ ਪ੍ਰਭਾਵ ਪ੍ਰਦਾਨ ਕਰਦੀ ਹੈ, ਪੇਪਟਾਇਡਾਂ, ਪ੍ਰੋਟੀਨਾਂ ਅਤੇ ਹੋਰ ਗੁੰਝਲਦਾਰ ਮਿਸ਼ਰਣਾਂ ਨੂੰ ਵੱਖ ਕਰਨ ਲਈ RP-LC ਦਾ ਵਿਕਲਪ ਹੋ ਸਕਦੀ ਹੈ। ਕਈ ਮਿਸ਼ਰਤ-ਮੋਡ ਸਟੇਸ਼ਨਰੀ ਪੜਾਅ ਤਿਆਰ ਕੀਤੇ ਗਏ ਹਨ, ਅਤੇ ਇਹਨਾਂ ਪੜਾਵਾਂ ਨਾਲ ਭਰੇ ਕਾਲਮ ਪੇਪਟਾਇਡ ਅਤੇ ਪ੍ਰੋਟੀਨ ਵੱਖ ਕਰਨ ਲਈ ਵਰਤੇ ਗਏ ਹਨ 17,18,19,20,21। ਮਿਸ਼ਰਤ-ਮੋਡ ਸਟੇਸ਼ਨਰੀ ਪੜਾਅ (WAX/RPLC, HILIC/RPLC, ਪੋਲਰ ਇੰਟਰਕੈਲੇਸ਼ਨ/RPLC) ਪੇਪਟਾਇਡ ਅਤੇ ਪ੍ਰੋਟੀਨ ਲਈ ਢੁਕਵੇਂ ਹਨ। ਧਰੁਵੀ ਅਤੇ ਗੈਰ-ਧਰੁਵੀ ਸਮੂਹਾਂ ਦੀ ਮੌਜੂਦਗੀ ਦੇ ਕਾਰਨ ਵੱਖ ਹੋਣਾ 22,23,24,25,26,27,28 .ਇਸੇ ਤਰ੍ਹਾਂ, ਸਹਿ-ਸੰਯੋਜਕ ਤੌਰ 'ਤੇ ਬੰਧਨ ਵਾਲੇ ਧਰੁਵੀ ਸਮੂਹਾਂ ਦੇ ਨਾਲ ਧਰੁਵੀ ਇੰਟਰਕਲੇਟਿੰਗ ਸਟੇਸ਼ਨਰੀ ਪੜਾਅ ਧਰੁਵੀ ਅਤੇ ਗੈਰ-ਧਰੁਵੀ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਕਾਂ ਲਈ ਚੰਗੀ ਵਿਭਾਜਨ ਸ਼ਕਤੀ ਅਤੇ ਵਿਲੱਖਣ ਚੋਣਤਮਕਤਾ ਦਿਖਾਉਂਦੇ ਹਨ, ਕਿਉਂਕਿ ਵਿਭਾਜਨ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਕ ਅਤੇ ਸਥਿਰ ਪੜਾਅ ਵਿਚਕਾਰ ਪਰਸਪਰ ਪ੍ਰਭਾਵ 'ਤੇ ਨਿਰਭਰ ਕਰਦਾ ਹੈ। ਮਲਟੀਮੋਡਲ ਪਰਸਪਰ ਪ੍ਰਭਾਵ 29, 30, 31, 32. ਹਾਲ ਹੀ ਵਿੱਚ, ਝਾਂਗ ਅਤੇ ਹੋਰ। 30 ਨੇ ਇੱਕ ਡੋਡੇਸਿਲ-ਟਰਮੀਨੇਟਡ ਪੋਲੀਅਮਾਈਨ ਸਟੇਸ਼ਨਰੀ ਪੜਾਅ ਤਿਆਰ ਕੀਤਾ ਅਤੇ ਹਾਈਡਰੋਕਾਰਬਨ, ਐਂਟੀਡਿਪ੍ਰੈਸੈਂਟਸ, ਫਲੇਵੋਨੋਇਡਜ਼, ਨਿਊਕਲੀਓਸਾਈਡਜ਼, ਐਸਟ੍ਰੋਜਨ ਅਤੇ ਕਈ ਹੋਰ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਕ ਨੂੰ ਸਫਲਤਾਪੂਰਵਕ ਵੱਖ ਕੀਤਾ। ਪੋਲਰ ਇੰਟਰਕਲੇਟਰ ਵਿੱਚ ਧਰੁਵੀ ਅਤੇ ਗੈਰ-ਧਰੁਵੀ ਦੋਵੇਂ ਸਮੂਹ ਹੁੰਦੇ ਹਨ, ਇਸਲਈ ਇਸਨੂੰ ਪੇਪਟਾਇਡਸ ਅਤੇ ਪ੍ਰੋਟੀਨ ਨੂੰ ਵੱਖ ਕਰਨ ਲਈ ਵਰਤਿਆ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ ਜਿਨ੍ਹਾਂ ਵਿੱਚ ਹਾਈਡ੍ਰੋਫੋਬਿਕ ਅਤੇ ਹਾਈਡ੍ਰੋਫਿਲਿਕ ਮੋਇਟੀ ਦੋਵੇਂ ਹੁੰਦੇ ਹਨ। ਪੋਲਰ-ਏਮਬੈਡਡ ਕਾਲਮ (ਜਿਵੇਂ ਕਿ, ਐਮਾਈਡ-ਏਮਬੈਡਡ C18 ਕਾਲਮ) ਵਪਾਰਕ ਤੌਰ 'ਤੇ ਐਸੈਂਟਿਸ ਐਕਸਪ੍ਰੈਸ RP-ਐਮਾਈਡ ਕਾਲਮ ਦੇ ਵਪਾਰਕ ਨਾਮ ਹੇਠ ਉਪਲਬਧ ਹਨ, ਪਰ ਇਹ ਕਾਲਮ ਸਿਰਫ ਐਮਾਈਨ 33 ਦੇ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ ਲਈ ਵਰਤੇ ਜਾਂਦੇ ਹਨ।
ਮੌਜੂਦਾ ਅਧਿਐਨ ਵਿੱਚ, HSA ਦੇ ਪੇਪਟਾਇਡਸ ਅਤੇ ਟ੍ਰਾਈਪਸਿਨ ਡਾਈਜੈਸਟ ਨੂੰ ਵੱਖ ਕਰਨ ਲਈ ਇੱਕ ਪੋਲਰ-ਏਮਬੈਡਡ ਸਟੇਸ਼ਨਰੀ ਪੜਾਅ (N-ਫੀਨਾਈਲਮਲੇਮਾਈਡ-ਏਮਬੈਡਡ ਪੋਲੀਸਟਾਈਰੀਨ) ਤਿਆਰ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ ਅਤੇ ਮੁਲਾਂਕਣ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ। ਸਟੇਸ਼ਨਰੀ ਪੜਾਅ ਹੇਠ ਲਿਖੀ ਰਣਨੀਤੀ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਕੇ ਤਿਆਰ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ। ਪੋਰਸ ਸਿਲਿਕਾ ਕਣਾਂ ਨੂੰ ਸਾਡੇ ਪਿਛਲੇ ਪ੍ਰਕਾਸ਼ਨ ਵਿੱਚ ਦਿੱਤੀ ਗਈ ਪ੍ਰਕਿਰਿਆ ਦੇ ਅਨੁਸਾਰ ਤਿਆਰ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ ਜਿਸ ਵਿੱਚ ਤਿਆਰੀ ਪ੍ਰੋਟੋਕੋਲ ਵਿੱਚ ਕੁਝ ਸੋਧਾਂ ਕੀਤੀਆਂ ਗਈਆਂ ਸਨ। ਯੂਰੀਆ, ਪੋਲੀਥੀਲੀਨ ਗਲਾਈਕੋਲ (PEG), TMOS, ਪਾਣੀ ਦੇ ਐਸੀਟਿਕ ਐਸਿਡ ਦੇ ਅਨੁਪਾਤ ਨੂੰ ਵੱਡੇ ਪੋਰ ਆਕਾਰ ਵਾਲੇ ਸਿਲਿਕਾ ਕਣਾਂ ਨੂੰ ਤਿਆਰ ਕਰਨ ਲਈ ਐਡਜਸਟ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ। ਦੂਜਾ, ਇੱਕ ਨਵਾਂ ਲਿਗੈਂਡ, ਫੀਨਾਈਲਮਲੇਮਾਈਡ-ਮਿਥਾਈਲ ਵਿਨਾਇਲ ਆਈਸੋਸਾਈਨੇਟ, ਸੰਸ਼ਲੇਸ਼ਿਤ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ ਅਤੇ ਇੱਕ ਪੋਲਰ ਏਮਬੈਡਡ ਸਟੇਸ਼ਨਰੀ ਪੜਾਅ ਤਿਆਰ ਕਰਨ ਲਈ ਸਿਲਿਕਾ ਕਣਾਂ ਨੂੰ ਡੈਰੀਵੇਟਾਈਜ਼ ਕਰਨ ਲਈ ਵਰਤਿਆ ਗਿਆ ਸੀ। ਨਤੀਜੇ ਵਜੋਂ ਸਟੇਸ਼ਨਰੀ ਪੜਾਅ ਨੂੰ ਅਨੁਕੂਲਿਤ ਪੈਕਿੰਗ ਸਕੀਮ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਦੇ ਹੋਏ ਇੱਕ ਸਟੇਨਲੈਸ ਸਟੀਲ ਕਾਲਮ (100 × 1.8 ਮਿਲੀਮੀਟਰ ਆਈਡੀ) ਵਿੱਚ ਪੈਕ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ। ਕਾਲਮ ਪੈਕਿੰਗ ਨੂੰ ਮਕੈਨੀਕਲ ਵਾਈਬ੍ਰੇਸ਼ਨ ਨਾਲ ਸਹਾਇਤਾ ਕੀਤੀ ਜਾਂਦੀ ਹੈ ਤਾਂ ਜੋ ਇਹ ਯਕੀਨੀ ਬਣਾਇਆ ਜਾ ਸਕੇ ਕਿ ਕਾਲਮ ਦੇ ਅੰਦਰ ਇੱਕ ਸਮਰੂਪ ਬੈੱਡ ਬਣਾਇਆ ਗਿਆ ਹੈ। ਪੰਜ ਪੇਪਟਾਇਡਸ ਵਾਲੇ ਪੇਪਟਾਇਡ ਮਿਸ਼ਰਣਾਂ ਦੇ ਪੈਕਡ ਕਾਲਮ ਵੱਖ ਕਰਨ ਦਾ ਮੁਲਾਂਕਣ ਕਰੋ; (Gly-Tyr, Gly-Leu-Tyr, Gly-Gly-Tyr-Arg, Tyr-Ile-Gly-Ser-Arg, Leucine Enkephalin) ਅਤੇ ਮਨੁੱਖੀ ਸੀਰਮ ਐਲਬਿਊਮਿਨ (HAS) ਦਾ ਟ੍ਰਾਈਪਸਿਨ ਡਾਇਜੈਸਟ। HSA ਦੇ ਪੇਪਟਾਇਡ ਮਿਸ਼ਰਣ ਅਤੇ ਟ੍ਰਾਈਪਸਿਨ ਡਾਇਜੈਸਟ ਨੂੰ ਚੰਗੀ ਰੈਜ਼ੋਲਿਊਸ਼ਨ ਅਤੇ ਕੁਸ਼ਲਤਾ ਨਾਲ ਵੱਖਰਾ ਦੇਖਿਆ ਗਿਆ। PMP ਕਾਲਮ ਦੇ ਵੱਖ ਕਰਨ ਦੇ ਪ੍ਰਦਰਸ਼ਨ ਦੀ ਤੁਲਨਾ Ascentis Express RP-Amide ਕਾਲਮ ਨਾਲ ਕੀਤੀ ਗਈ। PMP ਕਾਲਮ 'ਤੇ ਪੇਪਟਾਇਡ ਅਤੇ ਪ੍ਰੋਟੀਨ ਦੋਵੇਂ ਚੰਗੀ ਤਰ੍ਹਾਂ ਹੱਲ ਕੀਤੇ ਗਏ ਅਤੇ ਕੁਸ਼ਲ ਦੇਖੇ ਗਏ, ਜੋ Ascentis Express RP-Amide ਕਾਲਮ ਨਾਲੋਂ ਵਧੇਰੇ ਕੁਸ਼ਲ ਸੀ।
ਪੀਈਜੀ (ਪੋਲੀਥੀਲੀਨ ਗਲਾਈਕੋਲ), ਯੂਰੀਆ, ਐਸੀਟਿਕ ਐਸਿਡ, ਟ੍ਰਾਈਮੇਥੋਕਸੀ ਆਰਥੋਸਿਲੀਕੇਟ (ਟੀਐਮਓਐਸ), ਟ੍ਰਾਈਮੇਥਾਈਲ ਕਲੋਰੋਸੀਲੇਨ (ਟੀਐਮਸੀਐਸ), ਟ੍ਰਾਈਪਸਿਨ, ਹਿਊਮਨ ਸੀਰਮ ਐਲਬਿਊਮਿਨ (ਐਚਐਸਏ), ਅਮੋਨੀਅਮ ਕਲੋਰਾਈਡ, ਯੂਰੀਆ, ਹੈਕਸੇਨ ਮਿਥਾਈਲਡਿਸਿਲਾਜ਼ੇਨ (ਐਚਐਮਡੀਐਸ), ਮੈਥਾਕ੍ਰੀਲੋਇਲ ਕਲੋਰਾਈਡ (ਐਮਸੀ), ਸਟਾਇਰੀਨ, 4-ਹਾਈਡ੍ਰੋਕਸੀ-ਟੈਂਪੋ, ਬੈਂਜੋਇਲ ਪੇਰੋਕਸਾਈਡ (ਬੀਪੀਓ), ਐਚਪੀਐਲਸੀ ਗ੍ਰੇਡ ਐਸੀਟੋਨਾਈਟਰਾਈਲ (ਏਸੀਐਨ), ਮਿਥੇਨੌਲ, 2-ਪ੍ਰੋਪਾਨੋਲ, ਅਤੇ ਐਸੀਟੋਨ ਸਿਗਮਾ-ਐਲਡਰਿਚ (ਸੇਂਟ ਲੂਈਸ, ਐਮਓ, ਯੂਐਸਏ) ਤੋਂ ਖਰੀਦਿਆ ਗਿਆ।
ਯੂਰੀਆ (8 ਗ੍ਰਾਮ), ਪੋਲੀਥੀਲੀਨ ਗਲਾਈਕੋਲ (8 ਗ੍ਰਾਮ), ਅਤੇ 0.01 N ਐਸੀਟਿਕ ਐਸਿਡ ਦੇ 8 ਮਿ.ਲੀ. ਦੇ ਮਿਸ਼ਰਣ ਨੂੰ 10 ਮਿੰਟਾਂ ਲਈ ਹਿਲਾਇਆ ਗਿਆ, ਅਤੇ ਫਿਰ ਬਰਫ਼-ਠੰਡੇ ਹਾਲਾਤਾਂ ਵਿੱਚ ਇਸ ਵਿੱਚ 24 ਮਿ.ਲੀ. TMOS ਮਿਲਾਇਆ ਗਿਆ। ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਮਿਸ਼ਰਣ ਨੂੰ 40°C 'ਤੇ 6 ਘੰਟਿਆਂ ਲਈ ਅਤੇ ਫਿਰ 120°C 'ਤੇ 8 ਘੰਟਿਆਂ ਲਈ ਇੱਕ ਸਟੇਨਲੈਸ ਸਟੀਲ ਆਟੋਕਲੇਵ ਵਿੱਚ ਗਰਮ ਕੀਤਾ ਗਿਆ। ਪਾਣੀ ਡੋਲ੍ਹਿਆ ਗਿਆ ਅਤੇ ਬਚੀ ਹੋਈ ਸਮੱਗਰੀ ਨੂੰ 12 ਘੰਟਿਆਂ ਲਈ 70°C 'ਤੇ ਸੁਕਾਇਆ ਗਿਆ। ਸੁੱਕੇ ਨਰਮ ਪੁੰਜ ਨੂੰ ਇੱਕ ਓਵਨ ਵਿੱਚ ਨਿਰਵਿਘਨ ਪੀਸਿਆ ਗਿਆ ਅਤੇ 12 ਘੰਟਿਆਂ ਲਈ 550°C 'ਤੇ ਕੈਲਸਾਈਨ ਕੀਤਾ ਗਿਆ। ਕਣਾਂ ਦੇ ਆਕਾਰ, ਪੋਰ ਆਕਾਰ ਅਤੇ ਸਤਹ ਖੇਤਰ ਵਿੱਚ ਪ੍ਰਜਨਨਯੋਗਤਾ ਦੀ ਜਾਂਚ ਕਰਨ ਲਈ ਤਿੰਨ ਬੈਚ ਤਿਆਰ ਕੀਤੇ ਗਏ ਅਤੇ ਵਿਸ਼ੇਸ਼ਤਾ ਦਿੱਤੀ ਗਈ।
ਸਿਲਿਕਾ ਕਣਾਂ ਦੀ ਸਤ੍ਹਾ ਸੋਧ, ਪ੍ਰੀ-ਸਿੰਥੇਸਾਈਜ਼ਡ ਲਿਗੈਂਡ ਫਿਨਾਈਲਮੈਲੇਮਾਈਡ-ਮਿਥਾਈਲਵਿਨਾਇਲਿਸੋਸਾਈਨੇਟ (ਪੀਸੀਐਮਪੀ) ਨਾਲ, ਜਿਸ ਤੋਂ ਬਾਅਦ ਸਟਾਈਰੀਨ ਨਾਲ ਰੇਡੀਅਲ ਪੋਲੀਮਰਾਈਜ਼ੇਸ਼ਨ ਕੀਤਾ ਗਿਆ, ਦੁਆਰਾ, ਇੱਕ ਧਰੁਵੀ ਸਮੂਹ-ਯੁਕਤ ਮਿਸ਼ਰਣ ਤਿਆਰ ਕੀਤਾ ਗਿਆ। ਸਮੂਹਾਂ ਅਤੇ ਪੋਲੀਸਟਾਈਰੀਨ ਚੇਨਾਂ ਲਈ ਸਟੇਸ਼ਨਰੀ ਪੜਾਅ। ਤਿਆਰੀ ਪ੍ਰਕਿਰਿਆ ਦਾ ਵਰਣਨ ਹੇਠਾਂ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਹੈ।
ਐਨ-ਫੀਨਾਈਲਮਲੇਮਾਈਡ (200 ਮਿਲੀਗ੍ਰਾਮ) ਅਤੇ ਮਿਥਾਈਲ ਵਿਨਾਇਲ ਆਈਸੋਸਾਈਨੇਟ (100 ਮਿਲੀਗ੍ਰਾਮ) ਨੂੰ ਸੁੱਕੇ ਟੋਲੂਇਨ ਵਿੱਚ ਘੋਲਿਆ ਗਿਆ ਸੀ, ਅਤੇ ਫੀਨਾਈਲਮਲੇਮਾਈਡ-ਮਿਥਾਈਲ ਵਿਨਾਇਲ ਆਈਸੋਸਾਈਨੇਟ ਕੋਪੋਲੀਮਰ (PMPC) ਤਿਆਰ ਕਰਨ ਲਈ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਫਲਾਸਕ ਵਿੱਚ 0.1 ਮਿ.ਲੀ. 2,2′-ਅਜ਼ੋਇਸੋਬਿਊਟੀਰੋਨਾਈਟ੍ਰਾਈਲ (AIBN) ਜੋੜਿਆ ਗਿਆ ਸੀ। ਮਿਸ਼ਰਣ ਨੂੰ 60°C 'ਤੇ 3 ਘੰਟਿਆਂ ਲਈ ਗਰਮ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ, ਫਿਲਟਰ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ ਅਤੇ 40°C 'ਤੇ 3 ਘੰਟਿਆਂ ਲਈ ਇੱਕ ਓਵਨ ਵਿੱਚ ਸੁਕਾਇਆ ਗਿਆ ਸੀ।
ਸੁੱਕੇ ਸਿਲਿਕਾ ਕਣਾਂ (2 ਗ੍ਰਾਮ) ਨੂੰ ਸੁੱਕੇ ਟੋਲਿਊਨ (100 ਮਿ.ਲੀ.) ਵਿੱਚ ਖਿੰਡਾਇਆ ਗਿਆ, 500 ਮਿ.ਲੀ. ਗੋਲ ਤਲ ਫਲਾਸਕ ਵਿੱਚ 10 ਮਿੰਟ ਲਈ ਹਿਲਾਇਆ ਅਤੇ ਸੋਨਿਕੇਟ ਕੀਤਾ ਗਿਆ। PMPC (10 ਮਿਲੀਗ੍ਰਾਮ) ਨੂੰ ਟੋਲਿਊਨ ਵਿੱਚ ਘੁਲਿਆ ਗਿਆ ਅਤੇ ਇੱਕ ਡ੍ਰੌਪਿੰਗ ਫਨਲ ਰਾਹੀਂ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਫਲਾਸਕ ਵਿੱਚ ਡ੍ਰੌਪਵਾਈਜ਼ ਜੋੜਿਆ ਗਿਆ। ਮਿਸ਼ਰਣ ਨੂੰ 8 ਘੰਟਿਆਂ ਲਈ 100°C 'ਤੇ ਰਿਫਲਕਸ ਕੀਤਾ ਗਿਆ, ਐਸੀਟੋਨ ਨਾਲ ਫਿਲਟਰ ਕੀਤਾ ਅਤੇ ਧੋਤਾ ਗਿਆ ਅਤੇ 60°C 'ਤੇ 3 ਘੰਟਿਆਂ ਲਈ ਸੁਕਾਇਆ ਗਿਆ। ਫਿਰ, PMCP-ਬੰਧਿਤ ਸਿਲਿਕਾ ਕਣਾਂ (100 ਗ੍ਰਾਮ) ਨੂੰ ਟੋਲਿਊਨ (200 ਮਿ.ਲੀ.) ਵਿੱਚ ਘੁਲਿਆ ਗਿਆ ਅਤੇ 100 µL ਡਿਬਿਊਟਿਲਟਿਨ ਡਾਇਲੌਰੇਟ ਦੀ ਮੌਜੂਦਗੀ ਵਿੱਚ ਇੱਕ ਉਤਪ੍ਰੇਰਕ ਵਜੋਂ 4-ਹਾਈਡ੍ਰੋਕਸੀ-ਟੈਂਪੋ (2 ਮਿ.ਲੀ.) ਜੋੜਿਆ ਗਿਆ। ਮਿਸ਼ਰਣ ਨੂੰ 8 ਘੰਟਿਆਂ ਲਈ 50°C 'ਤੇ ਹਿਲਾਇਆ ਗਿਆ, 3 ਘੰਟਿਆਂ ਲਈ 50°C 'ਤੇ ਫਿਲਟਰ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਅਤੇ ਸੁੱਕਾਇਆ ਗਿਆ।
ਸਟਾਇਰੀਨ (1 ਮਿ.ਲੀ.), ਬੈਂਜੋਇਲ ਪਰਆਕਸਾਈਡ ਬੀ.ਪੀ.ਓ. (0.5 ਮਿ.ਲੀ.), ਅਤੇ ਟੈਂਪੋ-ਪੀ.ਐਮ.ਸੀ.ਪੀ. ਨਾਲ ਜੁੜੇ ਸਿਲਿਕਾ ਕਣਾਂ (1.5 ਗ੍ਰਾਮ) ਨੂੰ ਟੋਲੂਇਨ ਵਿੱਚ ਖਿੰਡਾਇਆ ਗਿਆ ਅਤੇ ਨਾਈਟ੍ਰੋਜਨ ਨਾਲ ਸਾਫ਼ ਕੀਤਾ ਗਿਆ। ਸਟਾਇਰੀਨ ਦਾ ਪੋਲੀਮਰਾਈਜ਼ੇਸ਼ਨ 100°C 'ਤੇ 12 ਘੰਟਿਆਂ ਲਈ ਕੀਤਾ ਗਿਆ। ਨਤੀਜੇ ਵਜੋਂ ਉਤਪਾਦ ਨੂੰ ਮੀਥੇਨੌਲ ਨਾਲ ਧੋਤਾ ਗਿਆ ਅਤੇ ਰਾਤ ਭਰ 60°C 'ਤੇ ਸੁਕਾਇਆ ਗਿਆ। ਸਮੁੱਚੀ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਯੋਜਨਾ ਚਿੱਤਰ 1 ਵਿੱਚ ਦਿਖਾਈ ਗਈ ਹੈ।
ਨਮੂਨਿਆਂ ਨੂੰ 10-3 ਟੌਰ ਤੋਂ ਘੱਟ ਦਾ ਬਕਾਇਆ ਦਬਾਅ ਪ੍ਰਾਪਤ ਕਰਨ ਲਈ 1 ਘੰਟੇ ਲਈ 393 K 'ਤੇ ਡੀਗੈਸ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ। ਕੁੱਲ ਪੋਰ ਵਾਲੀਅਮ ਨੂੰ ਨਿਰਧਾਰਤ ਕਰਨ ਲਈ P/P0 = 0.99 ਦੇ ਸਾਪੇਖਿਕ ਦਬਾਅ 'ਤੇ ਸੋਖਣ ਵਾਲੀ N2 ਦੀ ਮਾਤਰਾ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕੀਤੀ ਗਈ ਸੀ। ਸਕੈਨਿੰਗ ਇਲੈਕਟ੍ਰੌਨ ਮਾਈਕ੍ਰੋਸਕੋਪੀ (ਹਿਟਾਚੀ ਹਾਈ ਟੈਕਨਾਲੋਜੀਜ਼, ਟੋਕੀਓ, ਜਾਪਾਨ) ਨਾਲ ਨੰਗੇ ਅਤੇ ਲਿਗੈਂਡ-ਬੰਧਿਤ ਸਿਲਿਕਾ ਕਣਾਂ ਦੀ ਰੂਪ ਵਿਗਿਆਨ ਦੀ ਜਾਂਚ ਕੀਤੀ ਗਈ ਸੀ। ਸੁੱਕੇ ਨਮੂਨੇ (ਨੰਗੇ ਸਿਲਿਕਾ ਅਤੇ ਲਿਗੈਂਡ-ਬੰਧਿਤ ਸਿਲਿਕਾ ਕਣ) ਨੂੰ ਚਿਪਕਣ ਵਾਲੇ ਕਾਰਬਨ ਟੇਪ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਕੇ ਇੱਕ ਐਲੂਮੀਨੀਅਮ ਕਾਲਮ 'ਤੇ ਰੱਖਿਆ ਗਿਆ ਸੀ। Q150T ਸਪਟਰ ਕੋਟਰ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਕੇ ਨਮੂਨਿਆਂ 'ਤੇ ਸੋਨੇ ਦੀ ਪਲੇਟ ਲਗਾਈ ਗਈ ਸੀ, ਅਤੇ ਨਮੂਨਿਆਂ 'ਤੇ 5 nm Au ਪਰਤ ਜਮ੍ਹਾ ਕੀਤੀ ਗਈ ਸੀ। ਇਹ ਘੱਟ ਵੋਲਟੇਜ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਕੇ ਪ੍ਰਕਿਰਿਆ ਕੁਸ਼ਲਤਾ ਵਿੱਚ ਸੁਧਾਰ ਕਰਦਾ ਹੈ ਅਤੇ ਬਾਰੀਕ ਅਨਾਜ, ਠੰਡਾ ਸਪਟਰਿੰਗ ਪ੍ਰਦਾਨ ਕਰਦਾ ਹੈ। ਐਲੀਮੈਂਟਲ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ ਲਈ ਇੱਕ ਥਰਮੋ ਇਲੈਕਟ੍ਰੌਨ (ਵਾਲਥਮ, MA, USA) ਫਲੈਸ਼ EA1112 ਐਲੀਮੈਂਟਲ ਐਨਾਲਾਈਜ਼ਰ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕੀਤੀ ਗਈ ਸੀ। ਕਣ ਆਕਾਰ ਦੀ ਵੰਡ ਪ੍ਰਾਪਤ ਕਰਨ ਲਈ ਇੱਕ ਮਾਲਵਰਨ (ਵਰਸੇਸਟਰਸ਼ਾਇਰ, UK) ਮਾਸਟਰਾਈਜ਼ਰ 2000 ਕਣ ਆਕਾਰ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਕ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕੀਤੀ ਗਈ ਸੀ। ਨੰਗੇ ਸਿਲਿਕਾ ਕਣ ਅਤੇ ਲਿਗੈਂਡ-ਬੰਧਿਤ ਸਿਲਿਕਾ ਕਣਾਂ (ਹਰੇਕ 5 ਮਿਲੀਗ੍ਰਾਮ) ਨੂੰ 5 ਮਿਲੀਲੀਟਰ ਆਈਸੋਪ੍ਰੋਪਾਨੋਲ ਵਿੱਚ ਖਿੰਡਾਇਆ ਗਿਆ, 10 ਮਿੰਟ ਲਈ ਸੋਨਿਕੇਟ ਕੀਤਾ ਗਿਆ, 5 ਮਿੰਟ ਲਈ ਵੌਰਟੈਕਸ ਕੀਤਾ ਗਿਆ, ਅਤੇ ਮਾਸਟਰਾਈਜ਼ਰ ਦੇ ਆਪਟੀਕਲ ਬੈਂਚ 'ਤੇ ਰੱਖਿਆ ਗਿਆ। ਥਰਮੋਗ੍ਰਾਵੀਮੈਟ੍ਰਿਕ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ 30 ਤੋਂ 800 °C ਦੇ ਤਾਪਮਾਨ ਸੀਮਾ 'ਤੇ 5 °C ਪ੍ਰਤੀ ਮਿੰਟ ਦੀ ਦਰ ਨਾਲ ਕੀਤਾ ਗਿਆ।
ਕੱਚ-ਕਤਾਰਬੱਧ ਸਟੇਨਲੈਸ ਸਟੀਲ ਦੇ ਤੰਗ-ਬੋਰ ਵਾਲੇ ਕਾਲਮ (100 × 1.8 ਮਿਲੀਮੀਟਰ ਆਈਡੀ) ਨੂੰ ਸਲਰੀ ਪੈਕਿੰਗ ਵਿਧੀ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਕੇ ਪੈਕ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ, ਰੈਫ ਵਿੱਚ ਵਰਤੀ ਗਈ ਉਹੀ ਪ੍ਰਕਿਰਿਆ ਲਾਗੂ ਕਰਦੇ ਹੋਏ। 31. ਇੱਕ ਸਟੇਨਲੈੱਸ ਸਟੀਲ ਕਾਲਮ (ਸ਼ੀਸ਼ੇ ਦੀ ਕਤਾਰ ਵਾਲਾ, 100 × 1.8 ਮਿਲੀਮੀਟਰ ਆਈਡੀ) ਜਿਸ ਵਿੱਚ 1 µm ਫਰਿਟ ਵਾਲੀ ਆਊਟਲੈੱਟ ਫਿਟਿੰਗ ਸੀ, ਇੱਕ ਸਲਰੀ ਪੈਕਰ (ਆਲਟੈਕ ਡੀਅਰਫੀਲਡ, ਆਈਐਲ, ਯੂਐਸਏ) ਨਾਲ ਜੁੜਿਆ ਹੋਇਆ ਸੀ। 1.2 ਐਮਐਲ ਮੀਥੇਨੌਲ ਵਿੱਚ 150 ਮਿਲੀਗ੍ਰਾਮ ਸਟੇਸ਼ਨਰੀ ਫੇਜ਼ ਨੂੰ ਮੁਅੱਤਲ ਕਰਕੇ ਇੱਕ ਸਟੇਸ਼ਨਰੀ ਫੇਜ਼ ਸਲਰੀ ਤਿਆਰ ਕਰੋ ਅਤੇ ਇਸਨੂੰ ਸਟੋਰੇਜ ਕਾਲਮ ਵਿੱਚ ਭੇਜੋ। ਮੀਥੇਨੌਲ ਨੂੰ ਸਲਰੀ ਘੋਲਕ ਦੇ ਨਾਲ-ਨਾਲ ਪ੍ਰੋਪੈਲਿੰਗ ਘੋਲਕ ਵਜੋਂ ਵਰਤਿਆ ਗਿਆ ਸੀ। 10 ਮਿੰਟਾਂ ਲਈ 100 ਐਮਪੀ, 15 ਮਿੰਟਾਂ ਲਈ 80 ਐਮਪੀ, ਅਤੇ 30 ਮਿੰਟਾਂ ਲਈ 60 ਐਮਪੀ ਦੇ ਦਬਾਅ ਨੂੰ ਲਾਗੂ ਕਰਕੇ ਕਾਲਮ ਨੂੰ ਕ੍ਰਮਵਾਰ ਭਰੋ। ਪੈਕਿੰਗ ਦੌਰਾਨ, ਕਾਲਮ ਦੀ ਇਕਸਾਰ ਪੈਕਿੰਗ ਨੂੰ ਯਕੀਨੀ ਬਣਾਉਣ ਲਈ ਦੋ ਜੀਸੀ ਕਾਲਮ ਸ਼ੇਕਰਾਂ (ਆਲਟੈਕ, ਡੀਅਰਫੀਲਡ, ਆਈਐਲ, ਯੂਐਸਏ) ਨਾਲ ਮਕੈਨੀਕਲ ਵਾਈਬ੍ਰੇਸ਼ਨ ਲਾਗੂ ਕੀਤੀ ਗਈ ਸੀ। ਸਲਰੀ ਪੈਕਰ ਨੂੰ ਬੰਦ ਕਰੋ ਅਤੇ ਕਾਲਮ ਦੇ ਅੰਦਰ ਕਿਸੇ ਵੀ ਨੁਕਸਾਨ ਨੂੰ ਰੋਕਣ ਲਈ ਦਬਾਅ ਨੂੰ ਹੌਲੀ-ਹੌਲੀ ਛੱਡੋ। ਸਲਰੀ ਪੈਕਿੰਗ ਯੂਨਿਟ ਤੋਂ ਕਾਲਮ ਨੂੰ ਡਿਸਕਨੈਕਟ ਕਰੋ ਅਤੇ ਇਸਦੀ ਕਾਰਗੁਜ਼ਾਰੀ ਦੀ ਜਾਂਚ ਕਰਨ ਲਈ ਇੱਕ ਹੋਰ ਫਿਟਿੰਗ ਨੂੰ ਇਨਲੇਟ ਅਤੇ ਐਲਸੀ ਸਿਸਟਮ ਨਾਲ ਜੋੜੋ।
ਇੱਕ LC ਪੰਪ (10AD Shimadzu, ਜਪਾਨ), 50nL ਇੰਜੈਕਸ਼ਨ ਲੂਪ ਵਾਲਾ ਇੰਜੈਕਟਰ (Valco (USA) C14 W.05), ਝਿੱਲੀ ਡੀਗੈਸਰ (Shimadzu DGU-14A), UV-VIS ਕੇਸ਼ੀਲ ਵਿੰਡੋ ਬਣਾਈ ਗਈ ਸੀ। ਵਿਸ਼ੇਸ਼ µLC ਡਿਵਾਈਸ ਡਿਟੈਕਟਰ (UV-2075) ਅਤੇ ਕੱਚ-ਕਤਾਰਬੱਧ ਮਾਈਕ੍ਰੋਕਾਲਮ। ਵਾਧੂ ਕਾਲਮ ਬੈਂਡ ਚੌੜਾ ਕਰਨ ਦੇ ਪ੍ਰਭਾਵ ਨੂੰ ਘੱਟ ਕਰਨ ਲਈ ਬਹੁਤ ਤੰਗ ਅਤੇ ਛੋਟੀ ਕਨੈਕਟਿੰਗ ਟਿਊਬਿੰਗ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰੋ। ਪੈਕਿੰਗ ਤੋਂ ਬਾਅਦ, ਰੀਡਿਊਸਿੰਗ ਯੂਨੀਅਨ ਦੇ 1/16″ ਆਊਟਲੈੱਟ 'ਤੇ ਕੇਸ਼ੀਲਾਂ (50 μm id 365 ਅਤੇ ਰੀਡਿਊਸਿੰਗ ਯੂਨੀਅਨ ਕੇਸ਼ੀਲਾਂ (50 μm) ਸਥਾਪਿਤ ਕੀਤੀਆਂ ਗਈਆਂ ਸਨ। ਮਲਟੀਕ੍ਰੋ 2000 ਸੌਫਟਵੇਅਰ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਕੇ ਡੇਟਾ ਇਕੱਠਾ ਕਰਨ ਅਤੇ ਕ੍ਰੋਮੈਟੋਗ੍ਰਾਫਿਕ ਪ੍ਰੋਸੈਸਿੰਗ ਕੀਤੀ ਗਈ ਸੀ। UV ਸੋਖਣ ਲਈ 254 nm ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣਾਂ 'ਤੇ ਨਿਗਰਾਨੀ ਦੀ ਜਾਂਚ ਕੀਤੀ ਗਈ ਸੀ। ਕ੍ਰੋਮੈਟੋਗ੍ਰਾਫਿਕ ਡੇਟਾ ਦਾ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ OriginPro8 (Northampton, MA) ਦੁਆਰਾ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ।
ਮਨੁੱਖੀ ਸੀਰਮ ਤੋਂ ਐਲਬਿਊਮਿਨ, ਲਾਇਓਫਿਲਾਈਜ਼ਡ ਪਾਊਡਰ, ≥ 96% (ਐਗਰੋਜ਼ ਜੈੱਲ ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਫੋਰੇਸਿਸ) 3 ਮਿਲੀਗ੍ਰਾਮ ਟ੍ਰਾਈਪਸਿਨ (1.5 ਮਿਲੀਗ੍ਰਾਮ), 4.0 ਮਿਲੀਗ੍ਰਾਮ ਯੂਰੀਆ (1 ਮਿ.ਲੀ.), ਅਤੇ 0.2 ਮਿਲੀਗ੍ਰਾਮ ਅਮੋਨੀਅਮ ਬਾਈਕਾਰਬੋਨੇਟ (1 ਮਿ.ਲੀ.) ਦੇ ਨਾਲ ਮਿਲਾਇਆ ਗਿਆ। ਘੋਲ ਨੂੰ 10 ਮਿੰਟਾਂ ਲਈ ਹਿਲਾਇਆ ਗਿਆ ਅਤੇ 37°C 'ਤੇ 6 ਘੰਟਿਆਂ ਲਈ ਪਾਣੀ ਦੇ ਇਸ਼ਨਾਨ ਵਿੱਚ ਰੱਖਿਆ ਗਿਆ, ਫਿਰ 0.1% TFA ਦੇ 1 ਮਿ.ਲੀ. ਨਾਲ ਬੁਝਾਇਆ ਗਿਆ। ਘੋਲ ਨੂੰ ਫਿਲਟਰ ਕਰੋ ਅਤੇ 4°C ਤੋਂ ਹੇਠਾਂ ਸਟੋਰ ਕਰੋ।
ਪੇਪਟਾਇਡ ਮਿਸ਼ਰਣਾਂ ਅਤੇ HSA ਟ੍ਰਾਈਪਸਿਨ ਡਾਈਜੈਸਟਾਂ ਦੇ ਵੱਖ ਹੋਣ ਦਾ ਮੁਲਾਂਕਣ PMP ਕਾਲਮਾਂ 'ਤੇ ਵੱਖਰੇ ਤੌਰ 'ਤੇ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ। PMP ਕਾਲਮ ਦੁਆਰਾ ਪੇਪਟਾਇਡ ਮਿਸ਼ਰਣ ਅਤੇ HSA ਦੇ ਟ੍ਰਾਈਪਸਿਨ ਡਾਈਜੈਸਟ ਦੇ ਵੱਖ ਹੋਣ ਦੀ ਜਾਂਚ ਕਰੋ ਅਤੇ ਨਤੀਜਿਆਂ ਦੀ ਤੁਲਨਾ Ascentis Express RP-Amide ਕਾਲਮ ਨਾਲ ਕਰੋ। ਸਿਧਾਂਤਕ ਪਲੇਟ ਨੰਬਰ ਦੀ ਗਣਨਾ ਇਸ ਤਰ੍ਹਾਂ ਕੀਤੀ ਗਈ ਹੈ:
ਨੰਗੇ ਸਿਲਿਕਾ ਕਣਾਂ ਅਤੇ ਲਿਗੈਂਡ-ਬੰਧਿਤ ਸਿਲਿਕਾ ਕਣਾਂ ਦੀਆਂ SEM ਤਸਵੀਰਾਂ ਚਿੱਤਰ 2 ਵਿੱਚ ਦਿਖਾਈਆਂ ਗਈਆਂ ਹਨ। ਨੰਗੇ ਸਿਲਿਕਾ ਕਣਾਂ (A, B) ਦੀਆਂ SEM ਤਸਵੀਰਾਂ ਦਰਸਾਉਂਦੀਆਂ ਹਨ ਕਿ, ਸਾਡੇ ਪਿਛਲੇ ਅਧਿਐਨਾਂ ਦੇ ਉਲਟ, ਇਹ ਕਣ ਗੋਲਾਕਾਰ ਹਨ ਜਿਸ ਵਿੱਚ ਕਣ ਲੰਬੇ ਹਨ ਜਾਂ ਅਨਿਯਮਿਤ ਸਮਰੂਪਤਾ ਹੈ। ਲਿਗੈਂਡ-ਬੰਧਿਤ ਸਿਲਿਕਾ ਕਣਾਂ (C, D) ਦੀ ਸਤ੍ਹਾ ਨੰਗੇ ਸਿਲਿਕਾ ਕਣਾਂ ਨਾਲੋਂ ਨਿਰਵਿਘਨ ਹੈ, ਜੋ ਕਿ ਸਿਲਿਕਾ ਕਣਾਂ ਦੀ ਸਤ੍ਹਾ 'ਤੇ ਪੋਲੀਸਟਾਈਰੀਨ ਚੇਨਾਂ ਦੀ ਪਰਤ ਦੇ ਕਾਰਨ ਹੋ ਸਕਦੀ ਹੈ।
ਨੰਗੇ ਸਿਲਿਕਾ ਕਣਾਂ (A, B) ਅਤੇ ਲਿਗੈਂਡ-ਬੰਧਿਤ ਸਿਲਿਕਾ ਕਣਾਂ (C, D) ਦੀਆਂ ਇਲੈਕਟ੍ਰੌਨ ਮਾਈਕ੍ਰੋਸਕੋਪ ਤਸਵੀਰਾਂ ਨੂੰ ਸਕੈਨ ਕਰਨਾ।
ਨੰਗੇ ਸਿਲਿਕਾ ਕਣਾਂ ਅਤੇ ਲਿਗੈਂਡ-ਬੰਧਿਤ ਸਿਲਿਕਾ ਕਣਾਂ ਦੇ ਕਣ ਆਕਾਰ ਵੰਡ ਚਿੱਤਰ 3(A) ਵਿੱਚ ਦਰਸਾਏ ਗਏ ਹਨ। ਵਾਲੀਅਮ-ਅਧਾਰਿਤ ਕਣ ਆਕਾਰ ਵੰਡ ਵਕਰਾਂ ਨੇ ਦਿਖਾਇਆ ਕਿ ਰਸਾਇਣਕ ਸੋਧ (ਚਿੱਤਰ 3A) ਤੋਂ ਬਾਅਦ ਸਿਲਿਕਾ ਕਣਾਂ ਦਾ ਆਕਾਰ ਵਧਿਆ ਹੈ। ਮੌਜੂਦਾ ਅਧਿਐਨ ਅਤੇ ਪਿਛਲੇ ਅਧਿਐਨ ਤੋਂ ਸਿਲਿਕਾ ਕਣਾਂ ਦੇ ਕਣ ਆਕਾਰ ਵੰਡ ਡੇਟਾ ਦੀ ਤੁਲਨਾ ਸਾਰਣੀ 1(A) ਵਿੱਚ ਕੀਤੀ ਗਈ ਹੈ। PMP ਦਾ ਵਾਲੀਅਮ-ਅਧਾਰਿਤ ਕਣ ਆਕਾਰ, d(0.5), 3.36 μm ਹੈ, ਸਾਡੇ ਪਿਛਲੇ ਅਧਿਐਨ ਦੇ ਮੁਕਾਬਲੇ ad(0.5) ਮੁੱਲ 3.05 μm (ਪੋਲੀਸਟਾਇਰੀਨ-ਬੰਧਿਤ ਸਿਲਿਕਾ ਕਣ)34। ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਮਿਸ਼ਰਣ ਵਿੱਚ PEG, ਯੂਰੀਆ, TMOS, ਅਤੇ ਐਸੀਟਿਕ ਐਸਿਡ ਦੇ ਵੱਖੋ-ਵੱਖਰੇ ਅਨੁਪਾਤ ਦੇ ਕਾਰਨ ਇਸ ਬੈਚ ਵਿੱਚ ਸਾਡੇ ਪਿਛਲੇ ਅਧਿਐਨ ਦੇ ਮੁਕਾਬਲੇ ਇੱਕ ਛੋਟਾ ਕਣ ਆਕਾਰ ਵੰਡ ਸੀ। PMP ਪੜਾਅ ਦਾ ਕਣ ਆਕਾਰ ਪੋਲੀਸਟਾਇਰੀਨ-ਬੰਧਿਤ ਸਿਲਿਕਾ ਕਣ ਪੜਾਅ ਨਾਲੋਂ ਥੋੜ੍ਹਾ ਵੱਡਾ ਹੈ ਜਿਸਦਾ ਅਸੀਂ ਪਹਿਲਾਂ ਅਧਿਐਨ ਕੀਤਾ ਸੀ। ਇਸਦਾ ਮਤਲਬ ਹੈ ਕਿ ਸਟਾਈਰੀਨ ਨਾਲ ਸਿਲਿਕਾ ਕਣਾਂ ਦੇ ਸਤਹ ਕਾਰਜਸ਼ੀਲਤਾ ਨੇ ਸਿਲਿਕਾ ਸਤਹ 'ਤੇ ਸਿਰਫ ਇੱਕ ਪੋਲੀਸਟਾਇਰੀਨ ਪਰਤ (0.97 µm) ਜਮ੍ਹਾ ਕੀਤੀ, ਜਦੋਂ ਕਿ PMP ਵਿੱਚ ਪੜਾਅ ਦੌਰਾਨ ਪਰਤ ਦੀ ਮੋਟਾਈ 1.38 µm ਸੀ।
ਨੰਗੇ ਸਿਲਿਕਾ ਕਣਾਂ ਅਤੇ ਲਿਗੈਂਡ-ਬਾਊਂਡ ਸਿਲਿਕਾ ਕਣਾਂ ਦੀ ਕਣ ਆਕਾਰ ਵੰਡ (A) ਅਤੇ ਪੋਰ ਆਕਾਰ ਵੰਡ (B)।
ਮੌਜੂਦਾ ਅਧਿਐਨ ਦੇ ਸਿਲਿਕਾ ਕਣਾਂ ਦੇ ਪੋਰ ਦਾ ਆਕਾਰ, ਪੋਰ ਵਾਲੀਅਮ ਅਤੇ ਸਤਹ ਖੇਤਰਫਲ ਸਾਰਣੀ 1(B) ਵਿੱਚ ਦਿੱਤਾ ਗਿਆ ਹੈ। ਬੇਅਰ ਸਿਲਿਕਾ ਕਣਾਂ ਅਤੇ ਲਿਗੈਂਡ-ਬੌਂਡਡ ਸਿਲਿਕਾ ਕਣਾਂ ਦੇ PSD ਪ੍ਰੋਫਾਈਲ ਚਿੱਤਰ 3(B) ਵਿੱਚ ਦਿਖਾਏ ਗਏ ਹਨ। ਨਤੀਜੇ ਸਾਡੇ ਪਿਛਲੇ ਅਧਿਐਨ ਦੇ ਮੁਕਾਬਲੇ ਹਨ। ਬੇਅਰ ਅਤੇ ਲਿਗੈਂਡ-ਬੌਂਡਡ ਸਿਲਿਕਾ ਕਣਾਂ ਦੇ ਪੋਰ ਆਕਾਰ ਕ੍ਰਮਵਾਰ 310 ਅਤੇ 241 ਹਨ, ਜੋ ਦਰਸਾਉਂਦਾ ਹੈ ਕਿ ਰਸਾਇਣਕ ਸੋਧ ਤੋਂ ਬਾਅਦ ਪੋਰ ਦਾ ਆਕਾਰ 69 ਤੱਕ ਘਟਦਾ ਹੈ, ਜਿਵੇਂ ਕਿ ਸਾਰਣੀ 1(B) ਵਿੱਚ ਦਿਖਾਇਆ ਗਿਆ ਹੈ, ਅਤੇ ਵਕਰ ਦੀ ਤਬਦੀਲੀ ਚਿੱਤਰ 3(B) ਵਿੱਚ ਦਿਖਾਈ ਗਈ ਹੈ। ਇਸੇ ਤਰ੍ਹਾਂ, ਰਸਾਇਣਕ ਸੋਧ ਤੋਂ ਬਾਅਦ ਸਿਲਿਕਾ ਕਣਾਂ ਦਾ ਪੋਰ ਵਾਲੀਅਮ 0.67 ਤੋਂ 0.58 cm3/g ਤੱਕ ਘਟ ਗਿਆ। ਵਰਤਮਾਨ ਵਿੱਚ ਅਧਿਐਨ ਕੀਤੇ ਗਏ ਸਿਲਿਕਾ ਕਣਾਂ ਦਾ ਖਾਸ ਸਤਹ ਖੇਤਰਫਲ 116 m2/g ਹੈ, ਜੋ ਕਿ ਸਾਡੇ ਪਿਛਲੇ ਅਧਿਐਨ (124 m2/g) ਦੇ ਮੁਕਾਬਲੇ ਹੈ। ਜਿਵੇਂ ਕਿ ਸਾਰਣੀ 1(B) ਵਿੱਚ ਦਿਖਾਇਆ ਗਿਆ ਹੈ, ਸਿਲਿਕਾ ਕਣਾਂ ਦਾ ਸਤਹ ਖੇਤਰਫਲ (m2/g) ਵੀ 116 m2/g ਤੋਂ ਘਟ ਕੇ ਰਸਾਇਣਕ ਸੋਧ ਤੋਂ ਬਾਅਦ 105 ਵਰਗ ਮੀਟਰ/ਗ੍ਰਾ.
ਸਟੇਸ਼ਨਰੀ ਪੜਾਅ ਦੇ ਤੱਤ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ ਦੇ ਨਤੀਜੇ ਸਾਰਣੀ 2 ਵਿੱਚ ਦਰਸਾਏ ਗਏ ਹਨ। ਮੌਜੂਦਾ ਸਟੇਸ਼ਨਰੀ ਪੜਾਅ ਦੀ ਕਾਰਬਨ ਲੋਡਿੰਗ 6.35% ਹੈ, ਜੋ ਕਿ ਸਾਡੇ ਪਿਛਲੇ ਅਧਿਐਨ ਦੇ ਕਾਰਬਨ ਲੋਡਿੰਗ ਨਾਲੋਂ ਘੱਟ ਹੈ (ਪੋਲੀਸਟਾਇਰੀਨ ਬਾਂਡਡ ਸਿਲਿਕਾ ਕਣ, ਕ੍ਰਮਵਾਰ 7.93%35 ਅਤੇ 10.21%) 42. ਮੌਜੂਦਾ ਸਟੇਸ਼ਨਰੀ ਪੜਾਅ ਦੀ ਕਾਰਬਨ ਲੋਡਿੰਗ ਘੱਟ ਹੈ, ਕਿਉਂਕਿ ਮੌਜੂਦਾ SP ਦੀ ਤਿਆਰੀ ਵਿੱਚ, ਸਟਾਇਰੀਨ ਤੋਂ ਇਲਾਵਾ, ਕੁਝ ਧਰੁਵੀ ਲਿਗੈਂਡ ਜਿਵੇਂ ਕਿ ਫੀਨੀਲਮੈਲੇਮਾਈਡ-ਮਿਥਾਈਲਵਿਨਾਇਲਿਸੋਸਾਈਨੇਟ (PCMP) ਅਤੇ 4-ਹਾਈਡ੍ਰੋਕਸੀ-ਟੈਂਪੋ ਵਰਤੇ ਗਏ ਸਨ। ਮੌਜੂਦਾ ਸਟੇਸ਼ਨਰੀ ਪੜਾਅ ਦਾ ਨਾਈਟ੍ਰੋਜਨ ਭਾਰ ਪ੍ਰਤੀਸ਼ਤ 2.21% ਹੈ, ਪਿਛਲੇ ਅਧਿਐਨਾਂ ਵਿੱਚ ਨਾਈਟ੍ਰੋਜਨ ਦੇ ਭਾਰ ਦੁਆਰਾ ਕ੍ਰਮਵਾਰ 0.1735 ਅਤੇ 0.85% ਦੇ ਮੁਕਾਬਲੇ। ਇਸਦਾ ਮਤਲਬ ਹੈ ਕਿ ਫੀਨੀਲਮੈਲੇਮਾਈਡ ਦੇ ਕਾਰਨ ਮੌਜੂਦਾ ਸਟੇਸ਼ਨਰੀ ਪੜਾਅ ਵਿੱਚ ਨਾਈਟ੍ਰੋਜਨ ਦਾ wt % ਵੱਧ ਹੈ। ਇਸੇ ਤਰ੍ਹਾਂ, ਉਤਪਾਦਾਂ (4) ਅਤੇ (5) ਦੇ ਕਾਰਬਨ ਲੋਡਿੰਗ ਕ੍ਰਮਵਾਰ 2.7% ਅਤੇ 2.9% ਸਨ, ਜਦੋਂ ਕਿ ਅੰਤਿਮ ਉਤਪਾਦ (6) ਦੀ ਕਾਰਬਨ ਲੋਡਿੰਗ 6.35% ਸੀ, ਜਿਵੇਂ ਕਿ ਸਾਰਣੀ 2 ਵਿੱਚ ਦਿਖਾਇਆ ਗਿਆ ਹੈ। ਭਾਰ ਘਟਾਉਣ ਦੀ ਜਾਂਚ PMP ਸਟੇਸ਼ਨਰੀ ਪੜਾਅ ਨਾਲ ਕੀਤੀ ਗਈ ਸੀ, ਅਤੇ TGA ਕਰਵ ਚਿੱਤਰ 4 ਵਿੱਚ ਦਿਖਾਇਆ ਗਿਆ ਹੈ। TGA ਕਰਵ 8.6% ਦਾ ਭਾਰ ਘਟਾਉਣਾ ਦਰਸਾਉਂਦਾ ਹੈ, ਜੋ ਕਿ ਕਾਰਬਨ ਲੋਡਿੰਗ (6.35%) ਨਾਲ ਚੰਗੀ ਤਰ੍ਹਾਂ ਸਹਿਮਤ ਹੈ ਕਿਉਂਕਿ ਲਿਗੈਂਡਾਂ ਵਿੱਚ ਸਿਰਫ਼ C ਹੀ ਨਹੀਂ ਸਗੋਂ N, O, ਅਤੇ H ਵੀ ਹੁੰਦੇ ਹਨ।
ਸਿਲਿਕਾ ਕਣਾਂ ਦੀ ਸਤ੍ਹਾ ਸੋਧ ਲਈ ਫਿਨਾਈਲਮਲੇਮਾਈਡ-ਮਿਥਾਈਲਵਿਨਾਇਲਿਸੋਸਾਈਨੇਟ ਲਿਗੈਂਡ ਨੂੰ ਚੁਣਿਆ ਗਿਆ ਸੀ ਕਿਉਂਕਿ ਇਸ ਵਿੱਚ ਪੋਲਰ ਫਿਨਾਈਲਮਲੇਮਾਈਡ ਗਰੁੱਪ ਅਤੇ ਵਿਨਾਇਲਿਸੋਸਾਈਨੇਟ ਗਰੁੱਪ ਹਨ।ਵਿਨਾਇਲ ਆਈਸੋਸਾਈਨੇਟ ਗਰੁੱਪ ਜੀਵਤ ਰੈਡੀਕਲ ਪੋਲੀਮਰਾਈਜ਼ੇਸ਼ਨ ਦੁਆਰਾ ਸਟਾਈਰੀਨ ਨਾਲ ਹੋਰ ਪ੍ਰਤੀਕਿਰਿਆ ਕਰ ਸਕਦੇ ਹਨ।ਦੂਜਾ ਕਾਰਨ ਇੱਕ ਅਜਿਹੇ ਸਮੂਹ ਨੂੰ ਸ਼ਾਮਲ ਕਰਨਾ ਹੈ ਜਿਸਦਾ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਕ ਨਾਲ ਇੱਕ ਮੱਧਮ ਪਰਸਪਰ ਪ੍ਰਭਾਵ ਹੋਵੇ ਅਤੇ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਕ ਅਤੇ ਸਟੇਸ਼ਨਰੀ ਪੜਾਅ ਵਿਚਕਾਰ ਕੋਈ ਮਜ਼ਬੂਤ ​​ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਸਟੈਟਿਕ ਪਰਸਪਰ ਪ੍ਰਭਾਵ ਨਾ ਹੋਵੇ, ਕਿਉਂਕਿ ਫੀਨਾਈਲਮਲੇਮਾਈਡ ਮੋਇਟੀ ਦਾ ਆਮ pH 'ਤੇ ਕੋਈ ਵਰਚੁਅਲ ਚਾਰਜ ਨਹੀਂ ਹੁੰਦਾ।ਸਟੇਸ਼ਨਰੀ ਪੜਾਅ ਦੀ ਧਰੁਵੀਤਾ ਨੂੰ ਸਟਾਈਰੀਨ ਦੀ ਅਨੁਕੂਲ ਮਾਤਰਾ ਅਤੇ ਫ੍ਰੀ ਰੈਡੀਕਲ ਪੋਲੀਮਰਾਈਜ਼ੇਸ਼ਨ ਦੇ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਸਮੇਂ ਦੁਆਰਾ ਨਿਯੰਤਰਿਤ ਕੀਤਾ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ।ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਦਾ ਆਖਰੀ ਪੜਾਅ (ਫ੍ਰੀ-ਰੈਡੀਕਲ ਪੋਲੀਮਰਾਈਜ਼ੇਸ਼ਨ) ਮਹੱਤਵਪੂਰਨ ਹੈ ਅਤੇ ਸਟੇਸ਼ਨਰੀ ਪੜਾਅ ਦੀ ਧਰੁਵੀਤਾ ਨੂੰ ਬਦਲ ਸਕਦਾ ਹੈ।ਇਨ੍ਹਾਂ ਸਟੇਸ਼ਨਰੀ ਪੜਾਵਾਂ ਦੇ ਕਾਰਬਨ ਲੋਡਿੰਗ ਦੀ ਜਾਂਚ ਕਰਨ ਲਈ ਐਲੀਮੈਂਟਲ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ।ਇਹ ਦੇਖਿਆ ਗਿਆ ਕਿ ਸਟਾਈਰੀਨ ਦੀ ਮਾਤਰਾ ਅਤੇ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਸਮਾਂ ਵਧਾਉਣ ਨਾਲ ਸਟੇਸ਼ਨਰੀ ਪੜਾਅ ਦੀ ਕਾਰਬਨ ਲੋਡਿੰਗ ਵਧ ਗਈ ਅਤੇ ਇਸਦੇ ਉਲਟ।ਸਟਾਈਰੀਨ ਦੀ ਵੱਖ-ਵੱਖ ਗਾੜ੍ਹਾਪਣ ਨਾਲ ਤਿਆਰ ਕੀਤੇ ਗਏ SP ਵਿੱਚ ਵੱਖ-ਵੱਖ ਕਾਰਬਨ ਲੋਡਿੰਗ ਹੁੰਦੇ ਹਨ।ਦੁਬਾਰਾ, ਇਹਨਾਂ ਸਟੇਸ਼ਨਰੀ ਪੜਾਵਾਂ ਨੂੰ ਸਟੇਨਲੈਸ ਸਟੀਲ ਕਾਲਮਾਂ ਵਿੱਚ ਲੋਡ ਕਰੋ ਅਤੇ ਉਹਨਾਂ ਦੀ ਜਾਂਚ ਕਰੋ ਕ੍ਰੋਮੈਟੋਗ੍ਰਾਫਿਕ ਪ੍ਰਦਰਸ਼ਨ (ਚੋਣਯੋਗਤਾ, ਰੈਜ਼ੋਲਿਊਸ਼ਨ, N ਮੁੱਲ, ਆਦਿ)। ਇਹਨਾਂ ਪ੍ਰਯੋਗਾਂ ਦੇ ਆਧਾਰ 'ਤੇ, ਨਿਯੰਤਰਿਤ ਪੋਲਰਿਟੀ ਅਤੇ ਚੰਗੀ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ ਧਾਰਨਾ ਨੂੰ ਯਕੀਨੀ ਬਣਾਉਣ ਲਈ PMP ਸਟੇਸ਼ਨਰੀ ਪੜਾਅ ਤਿਆਰ ਕਰਨ ਲਈ ਇੱਕ ਅਨੁਕੂਲਿਤ ਫਾਰਮੂਲੇਸ਼ਨ ਚੁਣਿਆ ਗਿਆ ਸੀ।
ਪੰਜ ਪੇਪਟਾਇਡ ਮਿਸ਼ਰਣਾਂ (ਗਲਾਈ-ਟਾਇਰ, ਗਲਾਈ-ਲਿਊ-ਟਾਇਰ, ਗਲਾਈ-ਗਲਾਈ-ਟਾਇਰ-ਆਰਗ, ਟਾਇਰ-ਇਲੇ-ਗਲਾਈ-ਸਰ-ਆਰਗ, ਲਿਊਸੀਨ ਐਨਕੇਫਾਲਿਨ) ਦਾ ਵੀ ਮੋਬਾਈਲ ਪੜਾਅ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਦੇ ਹੋਏ ਪੀਐਮਪੀ ਕਾਲਮ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਕੇ ਮੁਲਾਂਕਣ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ; 60/40 (v/v) ਐਸੀਟੋਨਾਈਟ੍ਰਾਈਲ/ਪਾਣੀ (0.1% TFA) 80 μL/ਮਿੰਟ ਦੀ ਪ੍ਰਵਾਹ ਦਰ 'ਤੇ। ਅਨੁਕੂਲ ਐਲੂਸ਼ਨ ਹਾਲਤਾਂ ਦੇ ਤਹਿਤ, ਪ੍ਰਤੀ ਕਾਲਮ (100 × 1.8 mm id) ਸਿਧਾਂਤਕ ਪਲੇਟ ਨੰਬਰ (N) 20,000 ± 100 (200,000 ਪਲੇਟਾਂ/m²) ਹੈ। ਸਾਰਣੀ 3 ਤਿੰਨ PMP ਕਾਲਮਾਂ ਲਈ N ਮੁੱਲ ਦਿੰਦੀ ਹੈ ਅਤੇ ਕ੍ਰੋਮੈਟੋਗ੍ਰਾਮ ਚਿੱਤਰ 5A ਵਿੱਚ ਦਿਖਾਏ ਗਏ ਹਨ। ਉੱਚ ਪ੍ਰਵਾਹ ਦਰ (700 μL/ਮਿੰਟ) 'ਤੇ ਇੱਕ PMP ਕਾਲਮ 'ਤੇ ਤੇਜ਼ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ, ਇੱਕ ਮਿੰਟ ਦੇ ਅੰਦਰ ਪੰਜ ਪੇਪਟਾਇਡ ਐਲੂਟ ਕੀਤੇ ਗਏ ਸਨ, N ਮੁੱਲ ਬਹੁਤ ਵਧੀਆ ਸਨ, 13,500 ± 330 ਪ੍ਰਤੀ ਕਾਲਮ (100 × 1.8 mm id), 135,000 ਪਲੇਟਾਂ/m (ਚਿੱਤਰ 5B) ਦੇ ਅਨੁਸਾਰੀ ਹਨ। ਤਿੰਨ ਇੱਕੋ ਜਿਹੇ ਆਕਾਰ ਦੇ ਕਾਲਮ (100 × 1.8 mm id) ਜਾਂਚ ਕਰਨ ਲਈ PMP ਸਟੇਸ਼ਨਰੀ ਪੜਾਅ ਦੇ ਤਿੰਨ ਵੱਖ-ਵੱਖ ਲਾਟਾਂ ਨਾਲ ਪੈਕ ਕੀਤੇ ਗਏ ਸਨ। ਪ੍ਰਜਨਨਯੋਗਤਾ। ਹਰੇਕ ਕਾਲਮ ਲਈ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣਾਤਮਕ ਗਾੜ੍ਹਾਪਣ ਨੂੰ ਅਨੁਕੂਲ ਐਲੂਸ਼ਨ ਹਾਲਤਾਂ ਅਤੇ ਸਿਧਾਂਤਕ ਪਲੇਟਾਂ ਦੀ ਗਿਣਤੀ N ਅਤੇ ਧਾਰਨ ਸਮੇਂ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਕੇ ਹਰੇਕ ਕਾਲਮ 'ਤੇ ਇੱਕੋ ਟੈਸਟ ਮਿਸ਼ਰਣ ਨੂੰ ਵੱਖ ਕਰਨ ਲਈ ਰਿਕਾਰਡ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ। PMP ਕਾਲਮਾਂ ਲਈ ਪ੍ਰਜਨਨਯੋਗਤਾ ਡੇਟਾ ਸਾਰਣੀ 4 ਵਿੱਚ ਦਿਖਾਇਆ ਗਿਆ ਹੈ। PMP ਕਾਲਮ ਦੀ ਪ੍ਰਜਨਨਯੋਗਤਾ ਬਹੁਤ ਘੱਟ %RSD ਮੁੱਲਾਂ ਨਾਲ ਚੰਗੀ ਤਰ੍ਹਾਂ ਸੰਬੰਧਿਤ ਹੈ, ਜਿਵੇਂ ਕਿ ਸਾਰਣੀ 3 ਵਿੱਚ ਦਿਖਾਇਆ ਗਿਆ ਹੈ।
ਪੀਐਮਪੀ ਕਾਲਮ (ਬੀ) ਅਤੇ ਐਸੈਂਟਿਸ ਐਕਸਪ੍ਰੈਸ ਆਰਪੀ-ਐਮਾਈਡ ਕਾਲਮ (ਏ) 'ਤੇ ਪੇਪਟਾਇਡ ਮਿਸ਼ਰਣ ਦਾ ਵੱਖਰਾ ਹੋਣਾ; ਮੋਬਾਈਲ ਫੇਜ਼ 60/40 ਏਸੀਐਨ/ਐਚ2ਓ (ਟੀਐਫਏ 0.1%), ਪੀਐਮਪੀ ਕਾਲਮ ਮਾਪ (100 × 1.8 ਮਿਲੀਮੀਟਰ ਆਈਡੀ); ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣਾਤਮਕ ਮਿਸ਼ਰਣਾਂ ਦਾ ਐਲਿਊਸ਼ਨ ਕ੍ਰਮ: 1 (ਗਲਾਈ-ਟਾਇਰ), 2 (ਗਲਾਈ-ਲਿਊ-ਟਾਇਰ), 3 (ਗਲਾਈ-ਗਲਾਈ-ਟਾਇਰ-ਆਰਗ), 4 (ਟਾਇਰ-ਇਲੇ-ਗਲਾਈ-ਸਰ-ਆਰਗ) ਅਤੇ 5 (ਲਿਊਸੀਨ) ਐਸਿਡ ਐਨਕੇਫਾਲਿਨ))।
ਉੱਚ ਪ੍ਰਦਰਸ਼ਨ ਵਾਲੇ ਤਰਲ ਕ੍ਰੋਮੈਟੋਗ੍ਰਾਫੀ ਵਿੱਚ ਮਨੁੱਖੀ ਸੀਰਮ ਐਲਬਿਊਮਿਨ ਦੇ ਟ੍ਰਾਈਪਟਿਕ ਡਾਈਜੈਸਟ ਨੂੰ ਵੱਖ ਕਰਨ ਲਈ ਇੱਕ PMP ਕਾਲਮ (100 × 1.8 mm id) ਦਾ ਮੁਲਾਂਕਣ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ। ਚਿੱਤਰ 6 ਵਿੱਚ ਕ੍ਰੋਮੈਟੋਗ੍ਰਾਮ ਦਰਸਾਉਂਦਾ ਹੈ ਕਿ ਨਮੂਨਾ ਚੰਗੀ ਤਰ੍ਹਾਂ ਵੱਖ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਹੈ ਅਤੇ ਰੈਜ਼ੋਲਿਊਸ਼ਨ ਬਹੁਤ ਵਧੀਆ ਹੈ। HSA ਡਾਈਜੈਸਟ ਦਾ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ 100 µL/ਮਿੰਟ ਦੀ ਪ੍ਰਵਾਹ ਦਰ, ਮੋਬਾਈਲ ਪੜਾਅ 70/30 ਐਸੀਟੋਨਾਈਟ੍ਰਾਈਲ/ਪਾਣੀ ਅਤੇ 0.1% TFA ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਕੇ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ। ਜਿਵੇਂ ਕਿ ਕ੍ਰੋਮੈਟੋਗ੍ਰਾਮ (ਚਿੱਤਰ 6) ਵਿੱਚ ਦਿਖਾਇਆ ਗਿਆ ਹੈ, HSA ਡਾਈਜੈਸਟ ਨੂੰ 17 ਪੇਪਟਾਇਡਸ ਦੇ ਅਨੁਸਾਰੀ 17 ਸਿਖਰਾਂ ਵਿੱਚ ਵੰਡਿਆ ਗਿਆ ਹੈ। HSA ਡਾਈਜੈਸਟ ਵਿੱਚ ਹਰੇਕ ਸਿਖਰ ਦੀ ਵੱਖ ਕਰਨ ਦੀ ਕੁਸ਼ਲਤਾ ਦੀ ਗਣਨਾ ਕੀਤੀ ਗਈ ਸੀ ਅਤੇ ਮੁੱਲ ਸਾਰਣੀ 5 ਵਿੱਚ ਦਿੱਤੇ ਗਏ ਹਨ।
HSA (100 × 1.8 mm id) ਦਾ ਇੱਕ ਟ੍ਰਾਈਪਟਿਕ ਡਾਇਜੈਸਟ ਇੱਕ PMP ਕਾਲਮ 'ਤੇ ਵੱਖ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ; ਪ੍ਰਵਾਹ ਦਰ (100 µL/ਮਿੰਟ), ਮੋਬਾਈਲ ਪੜਾਅ 60/40 ਐਸੀਟੋਨਾਈਟ੍ਰਾਈਲ/ਪਾਣੀ 0.1% TFA ਦੇ ਨਾਲ।
ਜਿੱਥੇ L ਕਾਲਮ ਦੀ ਲੰਬਾਈ ਹੈ, η ਮੋਬਾਈਲ ਪੜਾਅ ਦੀ ਲੇਸ ਹੈ, ΔP ਕਾਲਮ ਬੈਕ ਪ੍ਰੈਸ਼ਰ ਹੈ, ਅਤੇ u ਮੋਬਾਈਲ ਪੜਾਅ ਦੀ ਰੇਖਿਕ ਵੇਗ ਹੈ। PMP ਕਾਲਮ ਦੀ ਪਾਰਦਰਸ਼ਤਾ 2.5 × 10-14 m2 ਸੀ, ਪ੍ਰਵਾਹ ਦਰ 25 μL/ਮਿੰਟ ਸੀ, ਅਤੇ 60/40 v/v ACN/ਪਾਣੀ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕੀਤੀ ਗਈ ਸੀ। PMP ਕਾਲਮ (100 × 1.8 mm id) ਦੀ ਪਾਰਦਰਸ਼ਤਾ ਸਾਡੇ ਪਿਛਲੇ ਅਧਿਐਨ ਦੇ ਸਮਾਨ ਸੀ। ਰੈਫ.34. ਸਤਹੀ ਤੌਰ 'ਤੇ ਪੋਰਸ ਕਣਾਂ ਨਾਲ ਭਰੇ ਕਾਲਮ ਦੀ ਪਾਰਦਰਸ਼ਤਾ ਹੈ: 1.3 μm ਕਣਾਂ ਲਈ 1.7 × 10-15, 1.7 μm ਕਣਾਂ ਲਈ 3.1 × 10-15, 5.2 × 10-15 ਅਤੇ 2.6 μm ਕਣਾਂ ਲਈ 2.5 × 10-14 m2 5 μm ਕਣਾਂ ਲਈ 43. ਇਸ ਲਈ, PMP ਪੜਾਅ ਦੀ ਪਾਰਦਰਸ਼ਤਾ 5 μm ਦੇ ਸਮਾਨ ਹੈ। ਕੋਰ-ਸ਼ੈੱਲ ਕਣ।
ਜਿੱਥੇ Wx ਕਲੋਰੋਫਾਰਮ ਨਾਲ ਭਰੇ ਕਾਲਮ ਦਾ ਭਾਰ ਹੈ, Wy ਮੀਥੇਨੌਲ ਨਾਲ ਭਰੇ ਕਾਲਮ ਦਾ ਭਾਰ ਹੈ, ਅਤੇ ρ ਘੋਲਕ ਦੀ ਘਣਤਾ ਹੈ। ਮੀਥੇਨੌਲ ਦੀ ਘਣਤਾ (ρ = 0.7866) ਅਤੇ ਕਲੋਰੋਫਾਰਮ (ρ = 1.484)। SILICA PARICLES-C18 ਕਾਲਮ (100 × 1.8 mm id) 34 ਅਤੇ C18-ਯੂਰੀਆ ਕਾਲਮ 31 ਦੀ ਕੁੱਲ ਪੋਰੋਸਿਟੀ, ਜਿਸਦਾ ਅਸੀਂ ਪਹਿਲਾਂ ਅਧਿਐਨ ਕੀਤਾ ਸੀ, ਕ੍ਰਮਵਾਰ 0.63 ਅਤੇ 0.55 ਸੀ। ਇਸਦਾ ਮਤਲਬ ਹੈ ਕਿ ਯੂਰੀਆ ਲਿਗੈਂਡਸ ਦੀ ਮੌਜੂਦਗੀ ਸਟੇਸ਼ਨਰੀ ਪੜਾਅ ਦੀ ਪਾਰਦਰਸ਼ੀਤਾ ਨੂੰ ਘਟਾਉਂਦੀ ਹੈ। ਦੂਜੇ ਪਾਸੇ, PMP ਕਾਲਮ (100 × 1.8 mm id) ਦੀ ਕੁੱਲ ਪੋਰੋਸਿਟੀ 0.60 ਹੈ। PMP ਕਾਲਮਾਂ ਦੀ ਪਾਰਦਰਸ਼ੀਤਾ C18-ਬੰਧਿਤ ਸਿਲਿਕਾ ਕਣਾਂ ਨਾਲ ਭਰੇ ਕਾਲਮਾਂ ਨਾਲੋਂ ਘੱਟ ਹੈ ਕਿਉਂਕਿ C18-ਕਿਸਮ ਦੇ ਸਟੇਸ਼ਨਰੀ ਪੜਾਵਾਂ ਵਿੱਚ C18 ਲਿਗੈਂਡਸ ਸਿਲਿਕਾ ਕਣਾਂ ਨਾਲ ਰੇਖਿਕ ਚੇਨਾਂ ਦੇ ਰੂਪ ਵਿੱਚ ਜੁੜੇ ਹੁੰਦੇ ਹਨ, ਜਦੋਂ ਕਿ ਪੋਲੀਸਟਾਈਰੀਨ-ਕਿਸਮ ਦੇ ਸਟੇਸ਼ਨਰੀ ਪੜਾਵਾਂ ਵਿੱਚ, ਇਸਦੇ ਆਲੇ-ਦੁਆਲੇ ਇੱਕ ਮੁਕਾਬਲਤਨ ਮੋਟੀ ਪੋਲੀਮਰ ਪਰਤ ਬਣਦੀ ਹੈ। ਇੱਕ ਆਮ ਪ੍ਰਯੋਗ ਵਿੱਚ, ਕਾਲਮ ਪੋਰੋਸਿਟੀ ਦੀ ਗਣਨਾ ਇਸ ਤਰ੍ਹਾਂ ਕੀਤੀ ਜਾਂਦੀ ਹੈ:
ਚਿੱਤਰ 7A,B ਵੈਨ ਡੀਮਟਰ ਪਲਾਟ ਦੇ ਉਹੀ ਐਲੂਸ਼ਨ ਹਾਲਤਾਂ (ਭਾਵ, 60/40 ACN/H2O ਅਤੇ 0.1% TFA) ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਦੇ ਹੋਏ PMP ਕਾਲਮ (100 × 1.8 mm id) ਅਤੇ Ascentis Express RP-Amide ਕਾਲਮ (100 × 1.8 mm id) ਦਿਖਾਉਂਦੇ ਹਨ। ਚੁਣੇ ਹੋਏ ਪੇਪਟਾਇਡ ਮਿਸ਼ਰਣ (Gly-Tyr, Gly-Leu-Tyr, Gly-Gly-Tyr-Arg, Tyr-Ile-Gly-Ser-Arg, Leucine Enkephalin) 20 µL/ ਵਿੱਚ ਤਿਆਰ ਕੀਤੇ ਗਏ ਸਨ। ਦੋਵਾਂ ਕਾਲਮਾਂ ਲਈ ਘੱਟੋ-ਘੱਟ ਪ੍ਰਵਾਹ ਦਰ 800 µL/ਮਿੰਟ ਹੈ। PMP ਕਾਲਮ ਅਤੇ Ascentis Express RP-Amide ਕਾਲਮ ਲਈ ਅਨੁਕੂਲ ਪ੍ਰਵਾਹ ਦਰ (80 µL/ਮਿੰਟ) 'ਤੇ ਘੱਟੋ-ਘੱਟ HETP ਮੁੱਲ ਕ੍ਰਮਵਾਰ 2.6 µm ਅਤੇ 3.9 µm ਸਨ। HETP ਮੁੱਲ ਦਰਸਾਉਂਦੇ ਹਨ ਕਿ PMP ਕਾਲਮ (100 × 1.8 mm id) ਦੀ ਵੱਖ ਕਰਨ ਦੀ ਕੁਸ਼ਲਤਾ ਵਪਾਰਕ ਤੌਰ 'ਤੇ ਉਪਲਬਧ Ascentis Express RP-Amide ਕਾਲਮ (100 × 1.8 mm id) ਨਾਲੋਂ ਬਹੁਤ ਵਧੀਆ ਹੈ। ਚਿੱਤਰ 7(A) ਵਿੱਚ ਵੈਨ ਡੀਮਟਰ ਪਲਾਟ ਦਰਸਾਉਂਦਾ ਹੈ ਕਿ ਵਧਦੇ ਪ੍ਰਵਾਹ ਦੇ ਨਾਲ N ਮੁੱਲ ਵਿੱਚ ਕਮੀ ਸਾਡੇ ਪਿਛਲੇ ਅਧਿਐਨ ਦੇ ਮੁਕਾਬਲੇ ਮਹੱਤਵਪੂਰਨ ਨਹੀਂ ਹੈ। PMP ਕਾਲਮ ਦੀ ਉੱਚ ਵੱਖ ਕਰਨ ਦੀ ਕੁਸ਼ਲਤਾ (100 × 1.8 mm id) ਐਸੈਂਟਿਸ ਐਕਸਪ੍ਰੈਸ RP-Amide ਕਾਲਮ ਦੇ ਮੁਕਾਬਲੇ ਮੌਜੂਦਾ ਕੰਮ34 ਵਿੱਚ ਵਰਤੀਆਂ ਗਈਆਂ ਕਣਾਂ ਦੀ ਸ਼ਕਲ, ਆਕਾਰ ਅਤੇ ਗੁੰਝਲਦਾਰ ਕਾਲਮ ਪੈਕਿੰਗ ਪ੍ਰਕਿਰਿਆਵਾਂ ਵਿੱਚ ਸੁਧਾਰਾਂ 'ਤੇ ਅਧਾਰਤ ਹੈ।
(A) ਵੈਨ ਡੀਮਟਰ ਪਲਾਟ (HETP ਬਨਾਮ ਮੋਬਾਈਲ ਫੇਜ਼ ਲੀਨੀਅਰ ਵੇਗ) 0.1% TFA ਦੇ ਨਾਲ 60/40 ACN/H2O ਵਿੱਚ ਇੱਕ PMP ਕਾਲਮ (100 × 1.8 mm id) ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਕੇ ਪ੍ਰਾਪਤ ਕੀਤਾ ਗਿਆ। (B) ਵੈਨ ਡੀਮਟਰ ਪਲਾਟ (HETP ਬਨਾਮ ਮੋਬਾਈਲ ਫੇਜ਼ ਲੀਨੀਅਰ ਵੇਗ) 0.1% TFA ਦੇ ਨਾਲ 60/40 ACN/H2O ਵਿੱਚ ਇੱਕ Ascentis Express RP-Amide ਕਾਲਮ (100 × 1.8 mm id) ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਕੇ ਪ੍ਰਾਪਤ ਕੀਤਾ ਗਿਆ।
ਉੱਚ ਪ੍ਰਦਰਸ਼ਨ ਵਾਲੇ ਤਰਲ ਕ੍ਰੋਮੈਟੋਗ੍ਰਾਫੀ ਵਿੱਚ ਮਨੁੱਖੀ ਸੀਰਮ ਐਲਬਿਊਮਿਨ (HAS) ਦੇ ਸਿੰਥੈਟਿਕ ਪੇਪਟਾਇਡ ਮਿਸ਼ਰਣਾਂ ਅਤੇ ਟ੍ਰਾਈਪਸਿਨ ਪਾਚਨ ਨੂੰ ਵੱਖ ਕਰਨ ਲਈ ਇੱਕ ਪੋਲਰ-ਏਮਬੈਡਡ ਪੋਲੀਸਟਾਈਰੀਨ ਸਟੇਸ਼ਨਰੀ ਪੜਾਅ ਤਿਆਰ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ ਅਤੇ ਮੁਲਾਂਕਣ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ। ਪੇਪਟਾਇਡ ਮਿਸ਼ਰਣਾਂ ਲਈ PMP ਕਾਲਮਾਂ ਦੀ ਕ੍ਰੋਮੈਟੋਗ੍ਰਾਫਿਕ ਕਾਰਗੁਜ਼ਾਰੀ ਵੱਖ ਕਰਨ ਦੀ ਕੁਸ਼ਲਤਾ ਅਤੇ ਰੈਜ਼ੋਲਿਊਸ਼ਨ ਵਿੱਚ ਸ਼ਾਨਦਾਰ ਹੈ। PMP ਕਾਲਮਾਂ ਦੀ ਬਿਹਤਰ ਵਿਭਾਜਨ ਪ੍ਰਦਰਸ਼ਨ ਕਈ ਕਾਰਨਾਂ ਕਰਕੇ ਹੈ, ਜਿਵੇਂ ਕਿ ਸਿਲਿਕਾ ਕਣਾਂ ਦੇ ਕਣ ਦਾ ਆਕਾਰ ਅਤੇ ਪੋਰ ਆਕਾਰ, ਸਟੇਸ਼ਨਰੀ ਪੜਾਅ ਦਾ ਨਿਯੰਤਰਿਤ ਸੰਸਲੇਸ਼ਣ, ਅਤੇ ਗੁੰਝਲਦਾਰ ਕਾਲਮ ਪੈਕਿੰਗ। ਉੱਚ ਵਿਭਾਜਨ ਕੁਸ਼ਲਤਾ ਤੋਂ ਇਲਾਵਾ, ਉੱਚ ਪ੍ਰਵਾਹ ਦਰਾਂ 'ਤੇ ਘੱਟ ਕਾਲਮ ਬੈਕ ਪ੍ਰੈਸ਼ਰ ਇਸ ਸਥਿਰ ਪੜਾਅ ਦਾ ਇੱਕ ਹੋਰ ਫਾਇਦਾ ਹੈ। PMP ਕਾਲਮ ਚੰਗੀ ਪ੍ਰਜਨਨਯੋਗਤਾ ਪ੍ਰਦਰਸ਼ਿਤ ਕਰਦੇ ਹਨ ਅਤੇ ਪੇਪਟਾਇਡ ਮਿਸ਼ਰਣਾਂ ਦੇ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ ਅਤੇ ਵੱਖ-ਵੱਖ ਪ੍ਰੋਟੀਨਾਂ ਦੇ ਟ੍ਰਾਈਪਸਿਨ ਪਾਚਨ ਲਈ ਵਰਤੇ ਜਾ ਸਕਦੇ ਹਨ। ਅਸੀਂ ਇਸ ਕਾਲਮ ਨੂੰ ਤਰਲ ਕ੍ਰੋਮੈਟੋਗ੍ਰਾਫੀ ਵਿੱਚ ਕੁਦਰਤੀ ਉਤਪਾਦਾਂ, ਔਸ਼ਧੀ ਪੌਦਿਆਂ ਤੋਂ ਬਾਇਓਐਕਟਿਵ ਮਿਸ਼ਰਣਾਂ ਅਤੇ ਫੰਗਲ ਐਬਸਟਰੈਕਟ ਨੂੰ ਵੱਖ ਕਰਨ ਲਈ ਵਰਤਣ ਦਾ ਇਰਾਦਾ ਰੱਖਦੇ ਹਾਂ। ਭਵਿੱਖ ਵਿੱਚ, PMP ਕਾਲਮਾਂ ਦਾ ਪ੍ਰੋਟੀਨ ਅਤੇ ਮੋਨੋਕਲੋਨਲ ਐਂਟੀਬਾਡੀਜ਼ ਨੂੰ ਵੱਖ ਕਰਨ ਲਈ ਵੀ ਮੁਲਾਂਕਣ ਕੀਤਾ ਜਾਵੇਗਾ।
ਫੀਲਡ, ਜੇ.ਕੇ., ਯੂਅਰਬੀ, ਐਮ.ਆਰ., ਲੌ, ਜੇ., ਥੌਗਰਸਨ, ਐਚ. ਅਤੇ ਪੀਟਰਸਨ, ਪੀ. ਰਿਵਰਸਡ ਫੇਜ਼ ਕ੍ਰੋਮੈਟੋਗ੍ਰਾਫੀ ਭਾਗ I ਦੁਆਰਾ ਪੇਪਟਾਈਡ ਸੈਪਰੇਸ਼ਨ ਸਿਸਟਮ 'ਤੇ ਖੋਜ: ਇੱਕ ਕਾਲਮ ਚਰਿੱਤਰੀਕਰਨ ਪ੍ਰੋਟੋਕੋਲ ਦਾ ਵਿਕਾਸ। ਜੇ. ਕ੍ਰੋਮੈਟੋਗ੍ਰਾਫੀ.1603, 113–129.https://doi.org/10.1016/j.chroma.2019.05.038 (2019)।
ਗੋਮੇਜ਼, ਬੀ. ਐਟ ਅਲ। ਛੂਤ ਦੀਆਂ ਬਿਮਾਰੀਆਂ ਦੇ ਇਲਾਜ ਲਈ ਤਿਆਰ ਕੀਤੇ ਗਏ ਸੁਧਾਰੇ ਹੋਏ ਕਿਰਿਆਸ਼ੀਲ ਪੇਪਟਾਇਡ। ਬਾਇਓਟੈਕਨਾਲੋਜੀ। ਐਡਵਾਂਸਡ। 36(2), 415-429। https://doi.org/10.1016/j.biotechadv.2018.01.004 (2018)।
ਵਲੀਘੇ, ਪੀ., ਲਿਸੋਵਸਕੀ, ਵੀ., ਮਾਰਟੀਨੇਜ਼, ਜੇ. ਅਤੇ ਖਰੇਸਟਚੈਟਿਸਕੀ, ਐਮ. ਸਿੰਥੈਟਿਕ ਥੈਰੇਪੀਟਿਕ ਪੇਪਟਾਇਡਸ: ਵਿਗਿਆਨ ਅਤੇ ਬਾਜ਼ਾਰ। ਡਰੱਗ ਖੋਜ।15 (1-2) ਅੱਜ, 40-56।https://doi.org/10.1016/j.drudis.2009.10.009 (2010)।
ਜ਼ੀ, ਐੱਫ., ਸਮਿਥ, ਆਰਡੀ ਅਤੇ ਸ਼ੇਨ, ਵਾਈ. ਐਡਵਾਂਸਡ ਪ੍ਰੋਟੀਓਮਿਕ ਲਿਕਵਿਡ ਕ੍ਰੋਮੈਟੋਗ੍ਰਾਫੀ। ਜੇ. ਕ੍ਰੋਮੈਟੋਗ੍ਰਾਫੀ। ਏ 1261, 78–90 (2012)।
ਲਿਊ, ਡਬਲਯੂ. ਐਟ ਅਲ। ਐਡਵਾਂਸਡ ਲਿਕਵਿਡ ਕ੍ਰੋਮੈਟੋਗ੍ਰਾਫੀ-ਮਾਸ ਸਪੈਕਟ੍ਰੋਮੈਟਰੀ ਵਿਆਪਕ ਤੌਰ 'ਤੇ ਨਿਸ਼ਾਨਾ ਬਣਾਏ ਗਏ ਮੈਟਾਬੋਲੋਮਿਕਸ ਅਤੇ ਪ੍ਰੋਟੀਓਮਿਕਸ ਨੂੰ ਸ਼ਾਮਲ ਕਰਨ ਦੇ ਯੋਗ ਬਣਾਉਂਦੀ ਹੈ। ਐਨਸ। ਚਿਮ। ਐਕਟਾ 1069, 89–97 (2019)।
ਚੈਸਨਟ, ਐਸਐਮ ਅਤੇ ਸੈਲਿਸਬਰੀ, ਜੇਜੇ ਡਰੱਗ ਵਿਕਾਸ ਵਿੱਚ ਯੂਐਚਪੀਐਲਸੀ ਦੀ ਭੂਮਿਕਾ। ਜੇ. ਸਤੰਬਰ. ਵਿਗਿਆਨ.30(8), 1183-1190 (2007)।
ਵੂ, ਐਨ. ਅਤੇ ਕਲੌਸੇਨ, ਏਐਮ ਤੇਜ਼ ਵਿਛੋੜੇ ਲਈ ਅਤਿ-ਉੱਚ ਦਬਾਅ ਵਾਲੇ ਤਰਲ ਕ੍ਰੋਮੈਟੋਗ੍ਰਾਫੀ ਦੇ ਬੁਨਿਆਦੀ ਅਤੇ ਵਿਹਾਰਕ ਪਹਿਲੂ। ਜੇ. ਸਤੰਬਰ. ਵਿਗਿਆਨ.30(8), 1167-1182. https://doi.org/10.1002/jssc.200700026 (2007)।
ਰੇਨ, ਐਸਏ ਅਤੇ ਚੇਲਿਚੈਫ, ਪੀ. ਡਰੱਗ ਵਿਕਾਸ ਵਿੱਚ ਅਤਿ-ਉੱਚ ਪ੍ਰਦਰਸ਼ਨ ਤਰਲ ਕ੍ਰੋਮੈਟੋਗ੍ਰਾਫੀ ਦੀ ਵਰਤੋਂ। ਜੇ. ਕ੍ਰੋਮੈਟੋਗ੍ਰਾਫੀ.1119(1-2), 140-146.https://doi.org/10.1016/j.chroma.2006.02.052 (2006)।
ਗੂ, ਐੱਚ. ਆਦਿ। ਐਂਟਰੋਵਾਇਰਸ ਦੀ ਕੁਸ਼ਲ ਸ਼ੁੱਧੀਕਰਨ ਲਈ ਤੇਲ-ਇਨ-ਵਾਟਰ ਹਾਈ ਇੰਟਰਨਲ ਫੇਜ਼ ਇਮਲਸ਼ਨ ਤੋਂ ਤਿਆਰ ਮੋਨੋਲਿਥਿਕ ਮੈਕਰੋਪੋਰਸ ਹਾਈਡ੍ਰੋਜੇਲ। ਕੈਮੀਕਲ।ਬ੍ਰਿਟੇਨ।ਜੇ. 401, 126051 (2020)।
ਸ਼ੀ, ਵਾਈ., ਜ਼ਿਆਂਗ, ਆਰ., ਹੋਰਵਾਥ, ਸੀ. ਅਤੇ ਵਿਲਕਿੰਸ, ਜੇ.ਏ. ਪ੍ਰੋਟੀਓਮਿਕਸ ਵਿੱਚ ਤਰਲ ਕ੍ਰੋਮੈਟੋਗ੍ਰਾਫੀ ਦੀ ਭੂਮਿਕਾ। ਜੇ. ਕ੍ਰੋਮੈਟੋਗ੍ਰਾਫੀ। ਏ 1053(1-2), 27-36 (2004)।
ਫੇਕੇਟ, ਐਸ., ਵੂਥੇ, ਜੇ.-ਐਲ. ਅਤੇ ਗਿਲਾਰਮ, ਡੀ. ਥੈਰੇਪਿਊਟਿਕ ਪੇਪਟਾਇਡਸ ਅਤੇ ਪ੍ਰੋਟੀਨ ਦੇ ਉਲਟ-ਪੜਾਅ ਤਰਲ ਕ੍ਰੋਮੈਟੋਗ੍ਰਾਫੀ ਵਿਭਾਜਨ ਵਿੱਚ ਉੱਭਰ ਰਹੇ ਰੁਝਾਨ: ਸਿਧਾਂਤ ਅਤੇ ਉਪਯੋਗ। ਜੇ. ਫਾਰਮੇਸੀ.ਬਾਇਓਮੈਡੀਕਲ ਸਾਇੰਸ.ਐਨਸ.69, 9-27 (2012)।
ਗਿਲਰ, ਐਮ., ਓਲੀਵੋਵਾ, ਪੀ., ਡੇਲੀ, ਏ.ਈ. ਅਤੇ ਗੇਬਲਰ, ਜੇ.ਸੀ. ਪਹਿਲੇ ਅਤੇ ਦੂਜੇ ਵਿਭਾਜਨ ਮਾਪਾਂ ਵਿੱਚ ਵੱਖ-ਵੱਖ pH ਮੁੱਲਾਂ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਦੇ ਹੋਏ ਇੱਕ RP-RP-HPLC ਸਿਸਟਮ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਦੇ ਹੋਏ ਪੇਪਟਾਇਡਸ ਦਾ ਦੋ-ਅਯਾਮੀ ਵਿਭਾਜਨ।ਜੇ. ਸਤੰਬਰ. ਵਿਗਿਆਨ.28(14), 1694-1703 (2005)।
ਫੇਲੇਟੀ, ਐਸ. ਅਤੇ ਹੋਰ। C18 ਸਬ-2 μm ਪੂਰੀ ਤਰ੍ਹਾਂ ਅਤੇ ਸਤਹੀ ਤੌਰ 'ਤੇ ਪੋਰਸ ਕਣਾਂ ਨਾਲ ਭਰੇ ਉੱਚ-ਕੁਸ਼ਲਤਾ ਵਾਲੇ ਕ੍ਰੋਮੈਟੋਗ੍ਰਾਫਿਕ ਕਾਲਮਾਂ ਦੇ ਪੁੰਜ ਟ੍ਰਾਂਸਫਰ ਵਿਸ਼ੇਸ਼ਤਾਵਾਂ ਅਤੇ ਗਤੀਸ਼ੀਲ ਪ੍ਰਦਰਸ਼ਨ ਦੀ ਜਾਂਚ ਕੀਤੀ ਗਈ। ਜੇ. ਸਤੰਬਰ. ਵਿਗਿਆਨ.43 (9-10), 1737-1745 (2020)।
ਪਿਓਵੇਸਾਨਾ, ਐਸ. ਐਟ ਅਲ। ਪੌਦਿਆਂ ਦੇ ਬਾਇਓਐਕਟਿਵ ਪੇਪਟਾਇਡਸ ਦੇ ਅਲੱਗ-ਥਲੱਗ, ਪਛਾਣ ਅਤੇ ਪ੍ਰਮਾਣਿਕਤਾ ਵਿੱਚ ਹਾਲੀਆ ਰੁਝਾਨ ਅਤੇ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣਾਤਮਕ ਚੁਣੌਤੀਆਂ। anus.biological anus.Chemical.410(15), 3425–3444.https://doi.org/10.1007/s00216-018-0852-x (2018)।
ਮੂਲਰ, ਜੇ.ਬੀ. ਅਤੇ ਹੋਰ। ਜੀਵਨ ਦੇ ਰਾਜ ਦਾ ਪ੍ਰੋਟੀਓਮਿਕ ਲੈਂਡਸਕੇਪ। ਕੁਦਰਤ 582(7813), 592-596। https://doi.org/10.1038/s41586-020-2402-x (2020)।
ਡੀਲੂਕਾ, ਸੀ. ਐਟ ਅਲ। ਪ੍ਰੈਪਰੇਟਿਵ ਲਿਕਵਿਡ ਕ੍ਰੋਮੈਟੋਗ੍ਰਾਫੀ ਦੁਆਰਾ ਥੈਰੇਪੀਟਿਕ ਪੇਪਟਾਇਡਸ ਦੀ ਡਾਊਨਸਟ੍ਰੀਮ ਪ੍ਰੋਸੈਸਿੰਗ। ਅਣੂ (ਬੇਸਲ, ਸਵਿਟਜ਼ਰਲੈਂਡ) 26(15), 4688(2021)।
ਯਾਂਗ, ਵਾਈ. ਅਤੇ ਗੇਂਗ, ਐਕਸ. ਮਿਕਸਡ-ਮੋਡ ਕ੍ਰੋਮੈਟੋਗ੍ਰਾਫੀ ਅਤੇ ਬਾਇਓਪੋਲੀਮਰਾਂ ਲਈ ਇਸਦਾ ਉਪਯੋਗ। ਜੇ. ਕ੍ਰੋਮੈਟੋਗ੍ਰਾਫੀ। ਏ 1218(49), 8813–8825 (2011)।
ਝਾਓ, ਜੀ., ਡੋਂਗ, ਐਕਸ.-ਵਾਈ. ਅਤੇ ਸਨ, ਵਾਈ. ਮਿਕਸਡ-ਮੋਡ ਪ੍ਰੋਟੀਨ ਕ੍ਰੋਮੈਟੋਗ੍ਰਾਫੀ ਲਈ ਲਿਗੈਂਡਸ: ਸਿਧਾਂਤ, ਵਿਸ਼ੇਸ਼ਤਾ, ਅਤੇ ਡਿਜ਼ਾਈਨ। ਜੇ. ਬਾਇਓਟੈਕਨਾਲੋਜੀ.144(1), 3-11 (2009)।