א דאנק פארן באזוכן Nature.com. די בראַוזער ווערסיע וואָס איר ניצט האט באַגרענעצטע שטיצע פֿאַר CSS. פֿאַר דער בעסטער דערפאַרונג, מיר רעקאָמענדירן אַז איר ניצט אַן דערהייַנטיקטן בראַוזער (אָדער דיאַקטיווירן קאָמפּאַטאַבילאַטי מאָדע אין אינטערנעט עקספּלאָרער). אין דער דערווייל, צו ענשור קאַנטיניואַס שטיצע, וועלן מיר ווייַזן די וועבזייטל אָן סטיילז און דזשאַוואַסקריפּט.
גענע וועקטאָרן פֿאַר דער באַהאַנדלונג פון סיסטיק פיבראָסיס לונג קרענק זאָל צילן די קאַנדאַקטינג לופט וועגן ווייַל פּעריפעראַל לונג טראַנסדאַקשאַן גיט נישט קיין טעראַפּיוטיק נוץ. וויראַל טראַנסדאַקשאַן עפעקטיווקייַט איז גלייַך שייַכות צו וועקטאָר וווינאָרט צייט. אָבער, עקספּרעס פלוידס אַזאַ ווי גענע טרעגער נאַטירלעך דיפיוז אין די אַלוועאָלי בעשאַס ינספּיראַציע, און טעראַפּיוטיק פּאַרטיקאַלז פון קיין פאָרעם זענען ראַפּאַדלי קלירד דורך מוקאָסיליאַרי טראַנספּאָרט. פּראָלאָנגינג די וווינאָרט צייט פון גענע טרעגער אין די לופט וועגן איז וויכטיק אָבער שווער צו דערגרייכן. גענע טרעגער-קאָנדזשוגייטאַד מאַגנעטישע פּאַרטיקאַלז וואָס קענען זיין דירעקטעד צו די ייבערפלאַך פון די לופט וועגן קענען פֿאַרבעסערן רעגיאָנאַל טאַרגעטינג. רעכט צו די טשאַלאַנדזשיז פון אין וויוואָ וויזשוואַלאַזיישאַן, די נאַטור פון אַזאַ קליין מאַגנעטישע פּאַרטיקאַלז אויף די לופט וועג ייבערפלאַך אין די בייַזייַן פון אַ אַפּלייד מאַגנעטיק פעלד איז שוואַך פארשטאנען. די ציל פון דעם לערנען איז געווען צו נוצן סינטשראָטראָן ימאַגינג צו וויזשוואַלייז די אין וויוואָ באַוועגונג פון אַ סעריע פון ​​מאַגנעטישע פּאַרטיקאַלז אין די טראַכעאַ פון אַנעסטעזייזד ראַץ צו ונטערזוכן די דינאַמיק און פּאַטערנז פון יחיד און מאַסע פּאַרטיקל נאַטור אין וויוואָ. מיר דעמאָלט אויך אַססעססעד צי די עקספּרעס פון לענטיוויראַל מאַגנעטישע פּאַרטיקאַלז אין די בייַזייַן פון אַ מאַגנעטיק פעלד וואָלט פאַרגרעסערן טראַנסדאַקשאַן עפעקטיווקייַט אין די ראַץ. טראַכעאַ. סינקראָטראָן רענטגן בילדגעבונג אַנטפּלעקט דאָס נאַטור פון מאַגנעטישע פּאַרטיקלען אין סטאַציאָנערע און באַוועגלעכע מאַגנעטישע פעלדער אין וויטראָ און אין וויוואָ. פּאַרטיקלען קענען נישט לייכט געשלעפּט ווערן אויף דער ייבערפלאַך פון די לעבעדיקע לופטוועג מיט מאַגנעטן, אָבער בעת טראַנספּאָרט, די דעפּאַזאַץ זענען קאַנסאַנטרייטאַד אין דעם פעלד פון מיינונג וווּ די מאַגנעטישע פעלד איז שטאַרקסט. טראַנסדאַקשאַן עפעקטיווקייט איז אויך געוואקסן זעקספאַך ווען לענטיוויראַל מאַגנעטישע פּאַרטיקלען זענען איבערגעגעבן אין דער בייַזייַן פון אַ מאַגנעטישע פעלד. צוזאַמען, די רעזולטאַטן פֿאָרשלאָגן אַז לענטיוויראַל מאַגנעטישע פּאַרטיקלען און מאַגנעטישע פעלדער קען זיין ווערטפול אַפּראָוטשיז צו פֿאַרבעסערן דזשין וועקטאָר טאַרגעטינג און פאַרגרעסערן טראַנסדאַקשאַן לעוועלס אין קאַנדאַקטינג לופטוועג אין וויוואָ.
סיסטיק פיבראָסיס (CF) ווערט געפֿירט דורך וואַריאַציע אין אַן איינציקן גען גערופֿן דער CF טראַנסמעמבראַנע קאָנדוקטאַנס רעגולאַטאָר (CFTR). דער CFTR פּראָטעין איז אַן יאָן קאַנאַל וואָס איז פאָרשטעלן אין פילע עפּיטעליאַל צעלן איבערן גוף, אַרייַנגערעכנט די קאַנדאַקטינג לופט וועגן, אַ הויפּט אָרט פון CF פּאַטאָגענעסיס. CFTR חסרונות פירן צו אַבנאָרמאַל וואַסער טראַנספּאָרט, דעכיידרייטינג די לופט וועג ייבערפלאַך און רידוסינג די טיפקייַט פון די לופט וועג ייבערפלאַך פליסיק (ASL) שיכט. דאָס אויך שאַטן די פיייקייט פון די מוקאָסיליאַרי טראַנספּאָרט (MCT) סיסטעם צו רייניקן ינכיילד פּאַרטיקאַלז און פּאַטאַדזשאַנז פון די לופט וועגן. אונדזער ציל איז צו אַנטוויקלען אַ לענטיוויראַל (LV) גען טעראַפּיע צו צושטעלן די ריכטיק קאָפּיע פון ​​די CFTR גען און פֿאַרבעסערן ASL, MCT, און לונג געזונט, און צו פאָרזעצן אַנטוויקלען נייַע טעקנאַלאַדזשיז וואָס זענען טויגעוודיק צו מעסטן די פּאַראַמעטערס אין וויוואָ1.
LV וועקטאָרן זענען איינער פון די פירנדיקע קאַנדידאַטן פֿאַר CF לופֿטוועג דזשין טעראַפּיע, הויפּטזעכלעך ווייַל זיי קענען שטענדיק אינטעגרירן דעם טעראַפּעווטישן דזשין אין די לופֿטוועג באַזאַלע צעלן (לופֿטוועג סטעם צעלן). דאָס איז וויכטיק ווייַל זיי קענען צוריקשטעלן נאָרמאַלע כיידריישאַן און מוקוס קלעאַראַנס דורך דיפערענצירן אין פאַנגקשאַנאַל דזשין-קאָרעקטעד CF-פֿאַרבונדענע לופֿטוועג ייבערפלאַך צעלן, ריזאַלטינג אין לעבן לאַנג בענעפיץ. LV וועקטאָרן זאָל זיין דירעקטעד קעגן די קאַנדאַקטינג לופֿטוועג, ווייַל דאָס איז ווו CF לונג קרענק הייבט זיך אָן. עקספּרעס פון די וועקטאָר טיפֿער אין די לונג קען רעזולטאַט אין אַלוועאָלאַר טראַנסדוקציע, אָבער דאָס האט קיין טעראַפּעווטיש נוץ אין CF. אָבער, פלוידס אַזאַ ווי דזשין טרעגערס נאַטירלעך מיגרירן צו די אַלוועאָלי אויף ינספּיראַציע נאָך עקספּרעס 3,4 און טעראַפּעווטיש פּאַרטיקאַלז זענען ראַפּאַדלי קלירד אין די מויל קאַוואַטי דורך MCT. LV טראַנסדוקציע עפעקטיווקייַט איז גלייַך שייַכות צו די לענג פון צייט די וועקטאָר בלייבט לעבן ציל צעלן צו לאָזן סעליאַלער אַפּטייק - די "רעזידאַנס צייט" 5 - וואָס איז לייכט רידוסט דורך טיפּיש רעגיאָנאַל לופטפלאָו ווי געזונט ווי קאָואָרדאַנייטיד פּאַרטיקל מוקוס כאַפּן און MCT. פֿאַר CF, די פיייקייַט צו פאַרלענגערן די רעזידאַנס צייט פון די LV אין די לופֿטוועג איז וויכטיק צו דערגרייכן הויך לעוועלס פון טראַנסדוקציע אין דעם געגנט, אָבער איז ביז איצט געווען טשאַלאַנדזשינג.
כדי צו איבערקומען דעם שטערונג, פֿאָרשלאָגן מיר אַז LV מאַגנעטישע פּאַרטיקלען (MPs) קענען העלפֿן אין צוויי קאָמפּלעמענטאַרע וועגן. ערשטנס, קענען זיי מאַגנעטיש געפֿירט ווערן צו דער לופֿטוועג־איבערפֿלאַך צו פֿאַרבעסערן די ציל־געצילטע ריכטונג און העלפֿן די גענע־טרעגער־פּאַרטיקלען וווינען אין דער געוואונטשענער לופֿטוועג־געגנט; און ASL) זיך באַוועגן צו צעל־שיכט 6. MPs זענען ברייט געניצט געוואָרן ווי צילגעצילטע מעדיקאַמענט־ליפֿערונג־פֿאָרמיטלען ווען זיי בינדן זיך צו אַנטיקערפּערס, כעמאָטעראַפּעווטישע מעדיקאַמענטן, אָדער אַנדערע קליינע מאָלעקולן וואָס פֿאַרבינדן זיך צו צעל־מעמבראַנען אָדער בינדן זיך צו באַטייַטיקע צעל־איבערפֿלאַך־רעצעפּטאָרן און זיך אָנקלײַבן אויף טומאָר־פּלעצער אין דער אנוועזנהייט פֿון סטאַטישער עלעקטריע. מאַגנעטישע פעלדער פֿאַר ראַק באַהאַנדלונג 7. אַנדערע "היפּערטהערמאַל" טעקניקס צילן צו וואַרעמען MPs ווען זיי זענען אויסגעשטעלט צו אָסצילייטינג מאַגנעטישע פעלדער, דערמיט צעשטערן טומאָר סעלז. דער פּרינציפּ פון מאַגנעטישע טראַנספעקשאַן, אין וואָס אַ מאַגנעטישע פעלד איז געניצט ווי אַ טראַנספעקשאַן אַגענט צו פֿאַרבעסערן די אַריבערפירן פון DNA צו סעלז, איז קאַמאַנלי געניצט אין וויטראָ ניצן אַ קייט פון ניט-וויראַל און וויראַל דזשין וועקטאָרס פֿאַר שווער-צו-טראַנסדוס צעל שורות. די עפעקטיווקייַט פון LV מאַגנעטאָטראַנספעקשאַן איז געגרינדעט, מיט אין וויטראָ עקספּרעס פון LV-MPs צו אַ מענטשלעך בראָנטשיאַל עפּיטעליאַל צעל ליניע אין די בייַזייַן פון אַ סטאַטיש מאַגנעטישע פעלד, ינקריסינג טראַנסדאַקשאַן עפעקטיווקייַט דורך 186-פאַך קאַמפּערד צו LV וועקטאָר אַליין. LV-MP איז אויך געווען געווענדט צו אַ אין וויטראָ CF מאָדעל, ווו מאַגנעטישע טראַנספעקשאַן געוואקסן LV טראַנסדאַקשאַן אין לופט-פליסיק צובינד קולטורן דורך 20-פאַך אין די בייַזייַן פון CF שפּייַעכץ 10. אָבער, אין וויוואָ מאַגנעטאָטראַנספעקשאַן פון אָרגאַנס האט באקומען לעפיערעך קליין ופמערקזאַמקייט און איז בלויז עוואַלואַטעד אין אַ ביסל כייַע. שטודיעס11,12,13,14,15, ספּעציעל אין די לונגען16,17. דאך, די מעגלעכקייטן פֿאַר מאַגנעטישע טראַנספעקשאַן אין CF לונג טעראַפּיע זענען קלאָר. טאַן עט על. (2020) האָבן געזאָגט אַז "אַ באַווייַז-פון-קאָנסעפּט שטודיע פון ​​עפעקטיוו מאַגנעטישע נאַנאָפּאַרטיקל פּולמאַנערי עקספּרעס וועט באַפֿעסטיקן דעם וועג פֿאַר צוקונפֿטיקע CFTR ינאַליישאַן סטראַטעגיעס צו פֿאַרבעסערן קלינישע רעזולטאַטן אין CF פּאַטיענץ"6.
דאס אויפפירונג פון קליינע מאגנעטישע פארטיקלען אויף לופטוועג-איבערפלאַכן אין דער אנוועזנהייט פון אן אנגעווענדעטן מאגנעטישן פעלד איז שווער צו וויזואליזירן און שטודירן, און דעריבער שלעכט פארשטאנען. אין אנדערע שטודיעס, האבן מיר אנטוויקלט א סינטשראָטראָן-פארשפרייטונג-באזירטע פאזע-קאנטראסטר X-שטראַל בילדגעבונג (PB-PCXI) מעטאד צו נישט-אינוואזיווע וויזואליזירן און קוואַנטיפיצירן מינוט אין וויוואָ ענדערונגען אין ASL טיפקייט18 און MCT אויפפירונג19,20 צו דירעקט מעסטן גאז קאַנאַל ייבערפלאַך כיידריישאַן און געניצט ווי אַ פרי אינדיקאַטאָר פון באַהאַנדלונג עפיקאַסי. אין דערצו, אונדזער MCT עוואַלואַציע מעטאָד ניצט 10-35 µm דיאַמעטער פארטיקלען צוזאמענגעשטעלט פון אַלומינאַ אָדער הויך רעפראַקטיוו אינדעקס גלאז ווי MCT מאַרקערס קענטיק ניצן PB-PCXI21. ביידע טעקניקס זענען פּאַסיק פֿאַר וויזואַליזאַציע פון ​​אַ קייט פון פארטיקל טייפּס, אַרייַנגערעכנט MP.
צוליב איר הויכער ספעציעלער און צייטלעכער רעזאלוציע, זענען אונזערע PB-PCXI-באזירטע ASL און MCT אנאליז טעכניקן גוט פאסיג פארן אויספארשן די דינאמיק און מוסטערן פון איינצעלנע און גרויסע פארטיקל אויפפירונג אין וויווא, כדי צו העלפן אונז פארשטיין און אפטימיזירן MP גען ליפערונג טעכניקן. דער צוגאנג וואס מיר ניצן דא שטאמט פון אונזערע שטודיעס מיט די SPring-8 BL20B2 בימליין, אין וועלכער מיר האבן וויזואליזירט פליסיק באוועגונג נאך א שאם וועקטאָר דאזע ליפערונג אין די נאז און לונגען לופט וועגן פון מײַז, כדי צו העלפן דערקלערן אונזערע נישט-איינהייטלעכע גען אויסדרוק מוסטערן באמערקט אין אונזערע גען טרעגער דאזע חיה שטודיעס 3,4.
די ציל פון דעם שטודיע איז געווען צו נוצן דעם סינטשראָטראָן PB-PCXI צו וויזואַליזירן די אין וויוואָ באַוועגונגען פון אַ סעריע פון ​​MPs אין די טראַכעאַ פון לעבעדיקע ראַץ. די PB-PCXI בילדגעבונג שטודיעס זענען דיזיינד צו פּרובירן אַ קייט פון MPs, מאַגנעטישע פעלד שטאַרקייטן, און לאָוקיישאַנז צו באַשטימען זייער ווירקונג אויף MP באַוועגונג. מיר האָבן כייפּאַטאַסייזד אַז אַן עקסטערנאַלי געווענדט מאַגנעטיש פעלד וואָלט העלפֿן די איבערגעגעבן MP בלייבן אָדער מאַך צו די ציל געגנט. די שטודיעס אויך ערלויבט אונדז צו ידענטיפיצירן מאַגנעט קאַנפיגיעריישאַנז וואָס מאַקסאַמייז די נומער פון פּאַרטיקאַלז ריטיינד אין די טראַכעאַ נאָך דעפּאַזישאַן. אין אַ צווייטער סעריע פון ​​שטודיעס, מיר געזוכט צו נוצן דעם אָפּטימאַל קאַנפיגיעריישאַן צו דעמאָנסטרירן די טראַנסדאַקשאַן מוסטער ריזאַלטינג פון אין וויוואָ עקספּרעס פון LV-MPs צו די ראַט לופט וועג, באזירט אויף דער הנחה אַז די עקספּרעס פון LV-MPs אין דעם קאָנטעקסט פון לופט וועג טאַרגעטינג וואָלט ריזאַלטיד אין פֿאַרבעסערט LV טראַנסדאַקשאַן עפעקטיווקייַט.
אַלע שטודיעס אויף חיות זענען דורכגעפירט געוואָרן לויט די פּראָטאָקאָלן באַשטעטיקט דורך דער אוניווערסיטעט פון אַדעלאַידע (M-2019-060 און M-2020-022) און די SPring-8 סינטשראָטראָן חיות עטיק קאמיטעט. עקספּערימענטן זענען דורכגעפירט געוואָרן לויט די ARRIVE גיידליינז.
אלע X-שטראַל בילדער זענען דורכגעפירט געווארן ביי דער BL20XU שטראַל ליניע ביים SPring-8 סינטשראָטראָן אין יאַפּאַן, ניצנדיק א סעטאַפּ ענלעך צו דעם וואָס איז פריער באַשריבן געוואָרן21,22. בקיצור, די עקספּערימענטאַלע קעסטל איז געווען ליגן 245 מעטער פון דעם סינטשראָטראָן סטאָרידזש רינג. א מוסטער-צו-דעטעקטאָר דיסטאַנס פון 0.6 מעטער ווערט גענוצט פֿאַר פּאַרטיקל בילדער שטודיעס און 0.3 מעטער פֿאַר אין וויוואָ בילדער שטודיעס צו דזשענערירן פאַזע קאָנטראַסט עפֿעקטן. א מאָנאָטשראָמאַטיש שטראַל ענערגיע פון ​​25 keV איז גענוצט געוואָרן. בילדער זענען קאַפּטשערד מיט אַ הויך-רעזאָלוציע X-שטראַל קאָנווערטער (SPring-8 BM3) קאַפּאַלד צו אַ sCMOS דעטעקטאָר. דער קאָנווערטער קאָנווערטירט X-שטראַלן צו זעבאר ליכט מיט אַ 10 µm דיק סינטיללאַטאָר (Gd3Al2Ga3O12), וואָס ווערט דאַן דירעקטעד צו אַ sCMOS סענסאָר מיט אַ × 10 מיקראָסקאָפּ אָביעקטיוו (NA 0.3). דער sCMOS דעטעקטאָר איז געווען Orca-Flash4.0 (Hamamatsu Photonics, יאַפּאַן) מיט אַן אַרעי גרייס פון 2048 × 2048 פּיקסעלס און אַ רויע פּיקסעל גרייס פון 6.5 × 6.5 מיקראָמעטער. די סעטאַפּ גיט אַן עפעקטיווע איזאָטראָפּישע פּיקסעל גרייס פון 0.51 מיקראָמעטער און אַ פעלד פון קוק פון בעערעך 1.1 מם × 1.1 מם. אַן עקספּאָוזשער לענג פון 100 מיליסעקונדעס איז אויסגעקליבן צו מאַקסאַמייז די סיגנאַל-צו-ראַש פאַרהעלטעניש פון מאַגנעטישע פּאַרטיקאַלז אינעווייניק און אַרויס די לופֿטוועג בשעת מינימיזירן אָטעמען-ינדוסט באַוועגונג אַרטיפאַקץ. פֿאַר אין וויוואָ שטודיעס, אַ שנעל X-שטראַל שאַטער איז געשטעלט אין די X-שטראַל דרך צו באַגרענעצן ראַדיאַציע דאָזע דורך בלאָקירן די X-שטראַל שטראַל צווישן עקספּאָוזשערז.
דער LV טרעגער איז נישט גענוצט געוואָרן אין קיין SPring-8 PB-PCXI בילדגעבונג שטודיעס ווייל די BL20XU בילדגעבונג קאַמער איז נישט ביאָסאַפעטי לעוועל 2 סערטיפיצירט. אַנשטאָט, האָבן מיר אויסגעקליבן אַ קייט פון גוט-קעראַקטעריזירטע MPs פון צוויי קאמערציעלע סאַפּלייערז - וואָס דעקן אַ קייט פון סיזעס, מאַטעריאַלס, אייַזן קאַנסאַנטריישאַנז און אַפּלאַקיישאַנז - ערשט צו פֿאַרשטיין ווי מאַגנעטישע פעלדער ווירקן MP באַוועגונג אין גלאז קאַפּילאַרן, און דערנאָך אין לעבעדיקע לופט וועגן. אויף דער ייבערפלאך. מפּ'ס קענען זיין אין גרייס פון 0.25 ביז 18 מיקראָמעטער און זענען געמאכט פון פארשידענע מאַטעריאַלן (זע טאַבעלע 1), אָבער די קאָמפּאָזיציע פון ​​יעדן מוסטער, אַרייַנגערעכנט די גרייס פון די מאַגנעטישע פּאַרטיקלען אין די מפּ, איז אומבאַקאַנט. באַזירט אויף אונדזערע ברייטע MCT שטודיעס 19, 20, 21, 23, 24, ערוואַרטן מיר אַז מפּ'ס אַזוי קליין ווי 5 מיקראָמעטער קענען געזען ווערן אויף דער טראַכעאַלער לופטוועג ייבערפלאַך, למשל דורך אַראָפּרעכענען קאָנסעקוטיווע ראָמען צו זען פֿאַרבעסערטע זעאונג פון מפּ באַוועגונג. איין 0.25 מיקראָמעטער-גרייס מפּ איז קלענער ווי די רעזאָלוציע פון ​​די בילדגעבונג מיטל, אָבער PB-PCXI ווערט ערוואַרטעט צו דעטעקטירן זייער וואָלומען קאָנטראַסט און די באַוועגונג פון דער ייבערפלאך פליסיקייט אויף וועלכער זיי זענען דעפּאַזיטעד נאָך דעפּאַזישאַן.
מוסטערן פאר יעדן MP אין טאבעלע 1 זענען צוגעגרייט געווארן אין 20 μl גלאז קאפילארן (דראמאנד מיקראקעפס, פענסילוועניע, USA) מיט אן אינערלעכן דיאמעטער פון 0.63 מ"מ. קארפוסקולארע פארטיקלען זענען פאראן אין וואסער, בשעת קאמבימאג פארטיקלען זענען פאראן אין דעם פאבריקאנט'ס אייגענעם פליסיגקייט. יעדע רער איז האלב געפילט מיט פליסיגקייט (אומגעפער 11 μl) און געשטעלט אויפן מוסטער האלטער (זעה בילד 1). די גלאז קאפילארן זענען געשטעלט געווארן האריזאנטאל אויפן מוסטער סטאנציע אין דער בילדגעבונג קעסטל, ריספּעקטיוולי, און פאזיציאנירט די ברעגן פון דער פליסיגקייט. א 19 מ"מ דיאמעטער (28 מ"מ לאנג) ניקעל שאָל זעלטן ערד נעאָדימיום אייַזן באָר (NdFeB) מאַגנעט (N35, קאַט. נומ. LM1652, דזשייקאַר עלעקטראָניקס, אויסטראליע) מיט א רעזידועל מאַגנעטיזאַציע פון ​​1.17 טעסלאַ איז געווען אַטאַטשט צו א באַזונדער איבערזעצונג סטאנציע צו דערגרייכן ענדערונג פון זיין פּאָזיציע ווייטערהייט בעת בילדגעבונג. X-שטראַל בילד אַקוויזישאַן הייבט זיך אן ווען דער מאַגנעט איז פּאַזיציאנירט אומגעפער 30 מ"מ העכער דעם מוסטער, און בילדער ווערן אַקוויזיירט מיט א קורס פון 4 ראָמען פּער סעקונדע. בעת בילדגעבונג, איז דער מאַגנעט געווען... געבראַכט נאָענט צום גלאָז קאַפּילאַר רער (ארום 1 מ"מ אַוועק) און דערנאָך טראַנסלירט צוזאמען דעם רער צו אָפּשאַצן די ווירקונגען פון פעלד שטאַרקייט און פּאָזיציע.
אין וויטראָ בילדגעבונג סעטאַפּ מיט MP סאַמפּאַלז אין גלאָז קאַפּילאַרן אויף דער סאַמפּל xy טראַנסלאַציע בינע. דער וועג פון די X-שטראַל שטראַל איז געצייכנט מיט אַ רויטער געשטריכלטער ליניע.
אזוי שנעל ווי די אין וויטראָ זעבארקייט פון MPs איז געגרינדעט געווארן, איז א טייל פון זיי געטעסט געווארן אין וויוואָ אין ווילד-טיפּ ווייַבלעך אַלבינאָ וויסטאַר ראַץ (~12 וואָכן אַלט, ~200 ג). 0.24 מג/קג מעדעטאָמידין (Domitor®, Zenoaq, יאַפּאַן), 3.2 מג/קג מידאַזאָלאַם (Dormicum®, Astellas Pharma, יאַפּאַן) און 4 מג/קג בוטאָרפאַנאָל (Vetorphale®, Meiji Seika). די ראַץ זענען אַנעסטעזירט געוואָרן מיט אַ געמיש פון Pharma (Pharma), יאַפּאַן) דורך ינטראַפּעריטאָנעאַל ינדזשעקשאַן. נאָך אַנעסטעזיע, זענען זיי צוגעגרייט געוואָרן פֿאַר בילדגעבונג דורך אַראָפּנעמען די פוטער אַרום די טראַכעאַ, אַריינשטעלן אַן ענדאָטראַכעאַל רער (ET; 16 Ga iv קאַנולאַ, Terumo BCT) און ימאָובאַלייזינג זיי סופּיין אויף אַ מנהג-געמאַכט בילדגעבונג פּלאַטע מיט אַ טערמאַל זעקל צו האַלטן גוף טעמפּעראַטור 22. די בילדגעבונג פּלאַטע איז דעמאָלט אַטאַטשט צו די מוסטער טראַנסלאַציע בינע אין די בילדגעבונג קעסטל אין אַ קליין ווינקל צו ייַנרייען די טראַכעאַ האָריזאָנטאַל אין די X-שטראַל בילד, ווי געוויזן אין פיגור. 2א.
(א) אין וויוואָ בילדגעבונג סעטאַפּ אין דער SPring-8 בילדגעבונג קעסטל, דער וועג פון דעם X-שטראַל שטראַל איז געצייכנט מיט אַ רויטער געשטריכלטער ליניע. (ב,ג) מאַגנעט לאָקאַליזאַציע אויף דער טראַכעאַ איז דורכגעפירט געוואָרן ווייטנס מיט צוויי אָרטאָגאָנאַלי מאָנטירטע IP קאַמעראַס. אויף דער לינקער זייט פון דעם בילד, קען מען זען דעם דראָט שלייף וואָס האַלט דעם קאָפּ, און די קאַנולאַ וואָס ווערט צוגעשטעלט אין פּלאַץ אין דער ET רער.
א ווײַט-קאָנטראָלירטע שפּריץ פּאָמפּע סיסטעם (UMP2, World Precision Instruments, Sarasota, FL) ניצנדיק אַ 100 μl גלאָז שפּריץ איז געווען פארבונדן צו PE10 רער (OD 0.61 מם, ID 0.28 מם) דורך אַ 30 Ga נאָדל. מאַרקירט די רער צו זיכער מאַכן אַז די שפּיץ איז אין דער ריכטיקער פּאָזיציע אין דער טראַכעאַ ווען איר שטעלט אַרײַן די ET רער. ניצנדיק די מיקראָפּאָמפּע, איז דער שפּריץ פּלאַנדזשער אַרויסגעצויגן געוואָרן בשעת די שפּיץ פון דער רער איז געווען אײַנגעטובלט אין דעם MP מוסטער וואָס זאָל ווערן איבערגעגעבן. די געלאָדענע איבערגעבונג רער איז דאַן אַרײַנגעשטעקט געוואָרן אין דער ענדאָטראַכעאַלער רער, שטעלנדיק די שפּיץ אין דעם שטאַרקסטן טייל פון אונדזער ערוואַרטעטן אַפּליקירטן מאַגנעטישן פעלד. בילד אַקוויזיציע איז קאָנטראָלירט געוואָרן ניצנדיק אַ רעספּיראַציע דעטעקטאָר פארבונדן צו אונדזער Arduino באַזירטן טײַמינג קעסטל, און אַלע סיגנאַלן (למשל טעמפּעראַטור, רעספּיראַציע, שאַטער עפן/שליסן און בילד אַקוויזיציע) זענען רעקאָרדירט ​​געוואָרן ניצנדיק Powerlab און LabChart (AD Instruments, סידני, אויסטראַליע) 22. ווען מען האָט געמאַכט בילדער, ווען דער אָפּצוימונג איז געווען נישט צוטריטלעך, זענען צוויי IP קאַמעראַס (Panasonic BB-SC382) פּאַזיציאָנירט געוואָרן בײַ אַפּראָקסימאַטיוו 90° צו יעדער אַנדערער און זענען געניצט געוואָרן צו מאָניטאָרירן די פּאָזיציע פון ​​דער... מאַגנעט אין באַצוג צו דער טראַכעאַ בעת בילדגעבונג (פיגור 2ב,ג). כּדי צו מינימיזירן באַוועגונגס-אַרטיפֿאַקץ, איז איין בילד באַקומען געוואָרן פּער אָטעם בעת דעם ענד-טיידאַל פלוס פּלאַטאָ.
א מאַגנעט איז אַטאַטשט צו אַ צווייטן בינע וואָס קען זיין פּלאַצירט ווייט פֿון אַרויס דעם בילדגעבונג קעסטל. פֿאַרשידענע מאַגנעט פּאָזיציעס און קאָנפיגוראַציעס זענען געטעסט געוואָרן, אַרייַנגערעכנט: מאָנטירט אין אַ ווינקל פֿון בערך 30° העכער דער טראַכעאַ (קאָנפיגוראַציעס געוויזן אין פֿיגורן 2a און 3a); איין מאַגנעט העכער דעם חיה און דער אַנדערער אונטן, מיט פּאָולן געשטעלט צו צוציען (פֿיגור 3b); איין מאַגנעט העכער דעם חיה און דער אַנדערער אונטן, מיט די פּאָולן געשטעלט צו אָפּשטויסן (פֿיגור 3c); און איין מאַגנעט העכער און פּערפּענדיקולאַר צו דער טראַכעאַ (פֿיגור 3d). אַמאָל דאָס חיה און מאַגנעט זענען קאָנפיגורירט און דער MP וואָס דאַרף געטעסט ווערן איז אַרייַנגעלאָדן אין דער שפּריץ פּאָמפּע, גיט אַ 50 μl דאָזע מיט אַ קורס פֿון 4 μl/סעק בשעת מען נעמט בילדער. דער מאַגנעט ווערט דאַן באַוועגט אַהין און צוריק צוזאמען אָדער לאַטעראַל אַריבער דער טראַכעאַ בשעת מען פֿאָרזעצט צו נעמען בילדער.
מאַגנעט קאָנפיגוראַציע פֿאַר אין וויוואָ בילדגעבונג (א) אַן איינציקער מאַגנעט העכער דער טראַכעאַ אין אַ ווינקל פון אַרום 30°, (ב) צוויי מאַגנעטן געשטעלט צו צוציען, (ג) צוויי מאַגנעטן געשטעלט צו אָפּשטויסן, (ד) אַן איינציקער מאַגנעט העכער און פּערפּענדיקולאַר אין דער טראַכעאַ. דער באַאָבאַכטער האָט אַראָפּגעקוקט פֿון מויל צו די לונגען דורך דער טראַכעאַ, און דער X-שטראַל שטראַל איז דורכגעגאַנגען דורך דער לינקער זייט פֿון דער ראַץ און אַרויס פֿון דער רעכטער זייט. דער מאַגנעט ווערט אָדער באַוועגט צוזאמען דער לענג פֿון די לופֿטוועג אָדער לינקס און רעכטס העכער דער טראַכעאַ אין דער ריכטונג פֿון דעם X-שטראַל שטראַל.
מיר האָבן אויך געזוכט צו באַשטימען די זעבארקייט און נאַטור פון פּאַרטיקלען אין די לופֿטוועגן אָן קיין צעמישנדיקן אָטעמען און קאַרדיאַק באַוועגונג. דעריבער, אין סוף פֿון דער בילדגעבונג פּעריאָדע, זענען די חיות מענטשלעך געהרגעט געוואָרן פֿאַר אַ פּענטאָבאַרביטאַל איבערדאָז (סאָמנאָפּענטיל, פּיטמאַן-מור, וואַשינגטאָן קראָסינג, USA; ~65 מג/קג ip). עטלעכע חיות זענען געבליבן אויף דער בילדגעבונג פּלאַטפאָרמע, און אַמאָל דער אָטעמען און האַרץ קלאַפּן האָבן זיך אָפּגעשטעלט, איז דער בילדגעבונג פּראָצעס איבערגעחזרט געוואָרן, צולייגנדיק אַן נאָך דאָזע פֿון MP אויב קיין MP איז נישט געווען זעבאר אויף דער לופֿטוועג ייבערפלאַך.
די אויפגעכאפֿענע בילדער זענען געוואָרן פלאַך-פעלד און טונקל-פעלד קאָריגירט און דערנאָך צוזאַמענגעשטעלט אין אַ פֿילם (20 בילדער פּער סעקונדע; 15-25 × נאָרמאַלע גיכקייט דעפּענדינג אויף רעספּעראַטאָרישער ראַטע) ניצנדיק אַ מנהג-געמאַכטן סקריפּט געשריבן אין MATLAB (R2020a, The Mathworks).
אלע LV גענע וועקטאָר עקספּרעס שטודיעס זענען דורכגעפירט געוואָרן אין דער לאַבאָראַטאָריע אַנימאַל פאָרשונג פאַסיליטי ביי דער אוניווערסיטעט פון אַדעלאַידע און האָבן געהאַט די ציל צו נוצן די רעזולטאַטן פון די SPring-8 עקספּערימענט צו אַססעסס צי LV-MP עקספּרעס אין דער אנוועזנהייט פון אַ מאַגנעטיש פעלד קען פֿאַרבעסערן גענע טראַנספער אין וויוואָ. צו אַססעסס די ווירקונגען פון MP און מאַגנעטיש פעלד, זענען צוויי גרופּעס פון חיות באַהאַנדלט געוואָרן: איין גרופּע איז געגעבן געוואָרן LV-MP מיט אַ מאַגנעט געשטעלט, און די אַנדערע גרופּע האָט באַקומען אַ קאָנטראָל גרופּע מיט LV-MP אָן אַ מאַגנעט.
LV גענע וועקטאָרן זענען גענערירט געוואָרן מיט פֿריִער באַשריבענע מעטאָדן 25, 26. דער LacZ וועקטאָר אויסדריקט דעם נוקלעאַר-לאָקאַליזירטן ביתא-גאַלאַקטאָסידאַז גענע, געטריבן דורך דעם קאָנסטיטוטיוון MPSV פּראָמאָטער (LV-LacZ), וואָס פּראָדוצירט אַ בלויען רעאַקציע פּראָדוקט אין טראַנסדוסירטע צעלן, קענטיק אין לונג געוועב פֿראָנטן און געוועב סעקשאַנז. טיטראַציע איז דורכגעפֿירט געוואָרן אין צעל קולטורן דורך מאַנועל ציילן די צאָל LacZ פּאָזיטיווע צעלן מיט אַ העמאָציטאָמעטער צו רעכענען דעם טיטער אין TU/ml. טרעגערס זענען קריאָפּרעזערווירט ביי -80 °C, אויפֿגעטאָט פֿאַר נוצן, און געבונדן צו CombiMag דורך מישן אין אַ 1:1 פּראָפּאָרציע און אינקובירן אויף אייז פֿאַר לפּחות 30 מינוט פֿאַר עקספּרעס.
נאָרמאַלע ספּראַגע דאַולי ראַץ (n = 3/גרופּע, ~2-3 זענען אַנעסטעזירט געוואָרן אינטראַפּעריטאָנעאַל מיט אַ געמיש פון 0.4 מג/קג מעדעטאָמידין (דאָמיטאָר, איליום, אויסטראַליע) און 60 מג/קג קעטאַמין (איליום, אויסטראַליע) (חודש-אַלט) יפּ) ינדזשעקשאַן און ניט-כירורגישע מויל קאַנולאַציע מיט אַ 16 Ga iv קאַנולאַ. כּדי צו זיכער מאַכן אַז די טראַכעאַלע לופֿטוועג געוועב באַקומט LV טראַנסדאַקשאַן, איז עס קאָנדישאַנירט געוואָרן מיט אונדזער פריער באַשריבענע מעכאַנישע פּערטורבאַציע פּראָטאָקאָל, אין וועלכן די טראַכעאַלע לופֿטוועג ייבערפלאַך איז געריבן אַקסיאַל מיט אַ דראָט קאָרב (N-Circle, Nitinol Tipless Stone Extractor NTSE-022115) -UDH, Cook Medical, USA) 30 סעק. 28. טראַכעאַלע אַדמיניסטראַציע פון ​​LV-MP איז דעמאָלט דורכגעפירט געוואָרן אין אַ ביאָלאָגישן זיכערהייט קאַבינעט בערך 10 מינוט נאָך דער פּערטורבאַציע.
דאס מאַגנעטישע פעלד גענוצט אין דעם עקספּערימענט איז געווען קאָנפיגורירט אין אַ ענלעכן שטייגער צו דער אין וויוואָ X-שטראַל בילדגעבונג שטודיע, מיט די זעלבע מאַגנעטן געהאלטן העכער די טראַכעאַ ניצן דיסטילאַציע סטענט קליפּס (פיגור 4). א 50 μl באַנד (2 × 25 μl אַליקוואָץ) פון LV-MP איז געווען איבערגעגעבן אין די טראַכעאַ (n = 3 חיות) ניצן אַ פּיפּעטע מיט אַ געל שפּיץ ווי פריער באַשריבן. א קאָנטראָל גרופּע (n = 3 חיות) האָבן באַקומען די זעלבע LV-MPs אָן די נוצן פון אַ מאַגנעט. נאָך די ינפיוזשאַן איז געענדיקט, די קאַנולאַ איז אַוועקגענומען פון די ET רער און די חיה איז עקסטובייטיד. דער מאַגנעט בלייבט אין פּלאַץ פֿאַר 10 מינוט, דערנאָך עס איז אַוועקגענומען. ראַץ האָבן באַקומען אַ סובקוטאַנעאָוס דאָזע פון ​​מעלאָקסיקאַם (1 מל/קג) (Ilium, אויסטראַליע) נאכגעגאנגען דורך ריווערס פון אַנעסטעזיע דורך ip ינדזשעקשאַן פון 1 מג/קג אַטיפּאַמאַזאָל הידראָטשלאָריד (אַנטיסעדאַן, זאָעטיס, אויסטראַליע). ראַץ זענען געהאלטן וואַרעם און מאָניטאָרעד ביז פולשטענדיק אָפּזוך פון אַנעסטעזיע.
LV-MP אריינליפערונג מיטל אין א ביאלאגישן זיכערהייט קאבינעט. די ליכט גרויע לוער כאַב פון די ET רער קען געזען ווערן ארויסשטעקנדיק פון מויל און די געל שפּיץ פון די פּיפּעטטע געוויזן אין בילד ווערט אריינגעשטעלט דורך די ET רער צו דער געוואונטשענער טיפקייט אין די טראַכעאַ.
איין וואָך נאָך דער LV-MP דאָזירונג פּראָצעדור, זענען די חיות מענטשלעך געהרגעט געוואָרן דורך 100% CO2 ינאַליישאַן און LacZ אויסדרוק איז אַססעססעד מיט אונדזער נאָרמאַל X-gal באַהאַנדלונג. די דריי קאַודאַל מערסט קאַרטילאַדזשינאַס רינגען זענען אַוועקגענומען צו ענשור אַז קיין מעכאַניש שעדיקן אָדער פליסיק ריטענשאַן פון ענדאָטראַטשעאַל רער פּלייסמאַנט איז נישט אַרייַנגערעכנט אין די אַנאַליסיס. יעדער טראַכעאַ איז שנייַדן לאַנדזשאַטודאַנאַללי צו שאַפֿן צוויי העלפטן פֿאַר אַנאַליסיס, און זיי זענען ינסטאַנדיד אין אַ שיסל מיט סיליקאָנע גומע (Sylgard, Dow Inc) ניצן אַ מינוטיען נאָדל (Fine Science Tools) צו וויזשוואַלייז די לומינאַל ייבערפלאַך. די פאַרשפּרייטונג און מוסטער פון טראַנסדוסעד סעלז זענען באשטעטיקט דורך פראָנטאַל פאָטאָגראַפיע ניצן אַ ניקאָן מיקראָסקאָפּ (SMZ1500) מיט אַ DigiLite קאַמעראַ און TCapture ווייכווארג (Tucsen Photonics, טשיינאַ). בילדער זענען קונה בייַ 20x מאַגניפיקאַטיאָן (אַרייַנגערעכנט די העכסטן שטעלן פֿאַר די פול ברייט פון די טראַכעאַ), מיט די גאנצע לענג פון די טראַכעאַ ימאַדזשד שריט-דורך-שריט, ענשורינג גענוג אָוווערלאַפּ צווישן יעדער בילד צו לאָזן פֿאַר בילד "סטיטשינג". בילדער פון יעדער טראַכעאַ זענען דעמאָלט אַסעמבאַלד אין אן איינציק קאמפאזיט בילד ניצנדיק דעם בילד קאמפאזיט עדיטאר v2.0.3 (מייקראסאפט ריסערטש) ניצנדיק א פלאנער באוועגונג אלגאריטם. לאקז אויסדרוק געביטן אין קאמפאזיט בילדער פון די טראכעא פון יעדן חיה זענען קוואנטיפיצירט געווארן ניצנדיק אן אויטאמאטישן MATLAB סקריפט (R2020a, MathWorks) ווי פריער באשריבן, ניצנדיק סעטינגס פון 0.35 < כיו < 0.58, זעטיקונג > 0.15, און ווערט < 0.7. דורך טרעיסן די קאנטורן פון די געוועב, איז א מאסקע מאנועל גענערירט געווארן אין GIMP v2.10.24 פאר יעדן קאמפאזיט בילד כדי צו אידענטיפיצירן די געוועב געגנט און פארמיידן קיין פאלשע דעטעקציעס פון אינדרויסן פון די טראכעאל געוועב. די געפארבטע געביטן פון אלע קאמפאזיט בילדער פון יעדן חיה זענען צוזאמענגענומען געווארן צו שאפן די גאנצע געפארבטע געגנט פאר יענעם חיה. די געפארבטע געגנט איז דאן צעטיילט געווארן דורך די גאנצע מאסקע געגנט צו שאפן די נארמאליזירטע געגנט.
יעדע טראַכעאַ איז געווען איינגעבעטן אין פּאַראַפֿין און 5 מיקראָמעטער סעקשאַנז זענען געשניטן געוואָרן. די סעקשאַנז זענען קאַונטערסטיינד געוואָרן מיט נייטראַלן שנעלן רויט פֿאַר 5 מינוט און בילדער זענען געכאפט געוואָרן מיט אַ ניקאָן עקליפּס E400 מיקראָסקאָפּ, DS-Fi3 קאַמעראַ און NIS עלעמענט קאַפּטשער ווייכווארג (ווערסיע 5.20.00).
אלע סטאטיסטישע אנאליזן זענען דורכגעפירט געווארן אין GraphPad Prism v9 (GraphPad Software, Inc.). סטאטיסטישע באדייטונג איז געשטעלט געווארן ביי p ≤ 0.05. נארמאליטעט איז וועריפיצירט געווארן מיטן Shapiro-Wilk טעסט, און אונטערשיידן אין LacZ פארבונג זענען אפגעשאצט געווארן מיטן אומגעפארענעם t-טעסט.
די זעקס MPs באַשריבן אין טאַבעלע 1 זענען געפּrüפֿט געוואָרן מיט PCXI, און די זעבארקייט ווערט באַשריבן אין טאַבעלע 2. צוויי פּאָליסטירענע MPs (MP1 און MP2; 18 מיקראָמעטער און 0.25 מיקראָמעטער, בהתאמה) זענען נישט געווען זעבאר אונטער PCXI, אָבער די רעשט פון די מוסטערן זענען געווען אידענטיפיצירבאַר (ביישפילן ווערן געוויזן אין פיגור 5). MP3 און MP4 (10-15% Fe3O4; 0.25 מיקראָמעטער און 0.9 מיקראָמעטער, בהתאמה) זענען שוואַך זעבאר. כאָטש עס כּולל עטלעכע פון ​​די קלענסטע פּאַרטיקלען וואָס זענען געטעסט געוואָרן, איז MP5 (98% Fe3O4; 0.25 מיקראָמעטער) געווען די מערסט אויסגעשפּראָכן. דער CombiMag פּראָדוקט MP6 איז שווער צו דערקענען. אין אַלע פאַלן, איז אונדזער פיייקייט צו דעטעקטירן MP באַדייטנד פֿאַרבעסערט געוואָרן דורך איבערזעצן דעם מאַגנעט אַהין און צוריק פּאַראַלעל צו דער קאַפּילאַר. ווען די מאַגנעטן האָבן זיך אַוועקגערוקט פֿון דער קאַפּילאַר, האָבן די פּאַרטיקלען זיך אויסגעצויגן אין לאַנגע שטריקלעך, אָבער ווי די מאַגנעטן זענען געקומען נענטער און די מאַגנעטישע פֿעלד שטאַרקייט איז געוואַקסן, האָבן די פּאַרטיקל שטריקלעך זיך פֿאַרקירצט ווי די פּאַרטיקלען האָבן זיך מיגרירט צו דער אויבערפֿלאַך פֿון דער קאַפּילאַר (זען סאַפּלעמענטאַרי ווידעאָ S1: MP4), וואָס האָט פֿאַרגרעסערט די... טיילכעל געדיכטקייט פון דער ייבערפלאַך. פאַרקערט, ווען דער מאַגנעט ווערט אַוועקגענומען פון דער קאַפּילאַר, פאַרקלענערט זיך די פעלד שטאַרקייט און די MPs ריאָרדערן זיך אין לאַנגע סטרינגס וואָס ציען זיך פון דער אויבערשטער ייבערפלאַך פון דער קאַפּילאַר (זען סאַפּלעמענטאַרי ווידעא S2:MP4). נאָכדעם וואָס דער מאַגנעט הערט אויף צו רירן זיך, פאָרזעצן די טיילכלעך צו רירן זיך פֿאַר אַ קורצע צייט נאָך דערגרייכן די גלייכגעוויכט פּאָזיציע. ווען דער MP באַוועגט זיך צו און אַוועק פון דער אויבערשטער ייבערפלאַך פון דער קאַפּילאַר, שלעפּן די מאַגנעטישע טיילכלעך טיפּיש די דעבריס דורך דער פליסיקייט.
די זעבארקייט פון MP אונטער PCXI ווערירט באַדייטנד צווישן מוסטערן. (א) MP3, (ב) MP4, (ג) MP5 און (ד) MP6. אַלע בילדער וואָס ווערן דאָ געוויזן זענען גענומען מיט אַ מאַגנעט וואָס איז ליגן אַרום 10 מ"מ גלייך העכער די קאַפּילאַר. די קלאָרע גרויסע קרייזן זענען לופט בלאָזן וואָס זענען געכאפט אין די קאַפּילאַרן, וואָס ווײַזן קלאָר די שוואַרץ-ווײַסע ברעג פֿעיִקייטן פון פאַזע קאָנטראַסט בילדגעבונג. די רויטע קעסטל כּולל די קאָנטראַסט-פאַרשטאַרקנדיקע מאַגניפיקאַציע. באַמערקט אַז די דיאַמעטערס פון די מאַגנעט סכעמאַטיקס אין אַלע פיגורן זענען נישט צו וואָג און זענען אַרום 100 מאָל גרעסער ווי געוויזן.
ווען דער מאַגנעט ווערט טראַנסלירט לינקס און רעכטס צוזאמען דעם שפּיץ פון דער קאַפּילאַר, ענדערט זיך דער ווינקל פון דער MP שטריקל צו גלייכן מיטן מאַגנעט (זעה בילד 6), אזוי דעלינירנדיק די מאַגנעטישע פעלד ליניעס. פֿאַר MP3-5, נאָכדעם וואָס דער אַקאָרד דערגרייכט אַ שוועל ווינקל, ווערן די פּאַרטיקלען געשלעפּט צוזאמען דעם אויבערשטן ייבערפלאַך פון דער קאַפּילאַר. דאָס רעזולטאַט אָפט אין MPs קלאַסטערינג אין גרעסערע גרופּעס נאָענט צו ווו די מאַגנעטישע פעלד איז שטאַרקסט (זעה סאַפּלעמענטאַרי ווידעא S3:MP5). דאָס איז אויך ספּעציעל קלאָר ווען בילדגעבונג נאָענט צו די קאַפּילאַר סוף, וואָס ז MPs צו אַגרעגירן און קאַנסאַנטרייט ביי די פליסיק-לופט צובינד. פּאַרטיקלען אין MP6, וואָס זענען געווען שווערער צו דערקענען ווי MP3-5, זענען נישט געשלעפּט ווען דער מאַגנעט באַוועגט צוזאמען די קאַפּילאַר, אָבער די MP שטריקלען האָבן זיך דיסאָסיאַטעד, לאָזנדיק די פּאַרטיקלען אין די פעלד פון מיינונג (זעה סאַפּלעמענטאַרי ווידעא S4:MP6). אין עטלעכע פאלן, ווען די אַפּלייד מאַגנעטישע פעלד איז רידוסט דורך מאָווינג די מאַגנעט אַ גרויס ווייַטקייט פון די בילדגעבונג אָרט, קיין פארבליבענע MPs פּאַמעלעך אַראָפּ צו די דנאָ ייבערפלאַך פון די רער דורך גראַוויטאַציע בשעת פארבליבן אין די שטריקל (זעה סאַפּלעמענטאַרי ווידעא S5: MP3).
דער ווינקל פון דער MP שטריקל ענדערט זיך ווען דער מאַגנעט ווערט טראַנסלירט צו רעכטס איבער דער קאַפּילאַר. (א) MP3, (ב) MP4, (ג) MP5 און (ד) MP6. די רויטע קעסטל אנטהאלט די קאָנטראַסט-פאַרשטאַרקנדיקע פאַרגרעסערונג. באַמערקט אַז די צוגאב ווידיאס זענען אינפאָרמאַטיוו ווייל זיי אַנטפּלעקן וויכטיקע פּאַרטיקל סטרוקטור און דינאַמישע אינפאָרמאַציע וואָס קען נישט וויזואַליזירט ווערן אין די סטאַטישע בילדער.
אונדזערע טעסטן האבן געוויזן אז באוועגן דעם מאַגנעט לאַנגזאַם אַהין און צוריק צוזאמען די טראַכעאַ ערלייכטערט די וויזואַליזאַציע פון ​​MP אין דעם קאָנטעקסט פון קאָמפּלעקס באַוועגונג אין וויוואָ. אין וויוואָ טעסטינג איז נישט דורכגעפירט געוואָרן ווייל פּאָליסטירען קרעלן (MP1 און MP2) זענען נישט געווען קענטיק אין די קאַפּילאַר. יעדער פון די איבעריקע פיר MPs איז געטעסט געוואָרן אין וויוואָ מיטן מאַגנעט לאַנגן אַקס קאָנפיגורירט העכער די טראַכעאַ אין אַ ווינקל פון בערך 30° צו ווערטיקאַל (זען פיגורן 2ב און 3אַ), ווייל דאָס האָט רעזולטירט אין לענגערע MP קייטן און איז געווען מער עפעקטיוו ווי די מאַגנעט קאָנפיגוראַציע טערמינירט. MP3, MP4 און MP6 זענען נישט דעטעקטירט געוואָרן אין די טראַכעאַ פון קיין לעבעדיקע חיות. ווען די ראַץ לופטוועגן זענען געמאַכט געוואָרן נאָכדעם וואָס די חיות זענען מענטשלעך געהרגעט געוואָרן, זענען די פּאַרטיקלען געבליבן נישט קענטיק אפילו ווען נאָך באַנד איז צוגעגעבן געוואָרן מיט אַ שפּריץ פּאָמפּע. MP5 האָט געהאַט דעם העכסטן אייַזן אָקסייד אינהאַלט און איז געווען דער איינציקער קענטיקער פּאַרטיקל, און איז דעריבער געניצט געוואָרן צו אָפּשאַצן און כאַראַקטעריזירן די אין וויוואָ נאַטור פון MP.
שטעלן דעם מאַגנעט איבער דער טראַכעאַ בעת MP עקספּרעס האָט רעזולטירט אין פילע, אָבער נישט אַלע, MPs קאָנצענטרירט אין דעם זעאונגספעלד. פּאַרטיקלען וואָס אַרייַן די טראַכעאַ ווערן בעסטן באמערקט אין מענטשלעך געאָפפערטע חיות. פיגור 7 און סאַפּלעמענטאַרי ווידעא S6: MP5 ווייזט שנעל מאַגנעטיש כאַפּן און אַליינמאַנט פון פּאַרטיקלען אויף דער ייבערפלאַך פון דער ווענטראַל טראַכעאַ, וואָס ווייַזט אַז MPs קענען זיין דירעקטעד צו די געוואונטשע געגנטן פון דער טראַכעאַ. ווען מען זוכט מער דיסטאַללי צוזאמען די טראַכעאַ נאָך MP עקספּרעס, זענען עטלעכע MPs געפֿונען נעענטער צו דער קאַרינאַ, וואָס סאַגדזשעסט אַז די מאַגנעטישע פעלד שטאַרקייט איז געווען נישט גענוג צו זאַמלען און האַלטן אַלע MPs, ווייַל זיי זענען געווען איבערגעגעבן דורך די געגנט פון מאַקסימום מאַגנעטישע פעלד שטאַרקייט בעת דעם פליסיק פּראָצעס. דאָך, נאָך געבורט, MP קאָנצענטראַציעס זענען געווען העכער אַרום די ימאַדזשד געגנט, וואָס סאַגדזשעסט אַז פילע MPs זענען געבליבן אין די לופֿטוועג געגנטן וווּ די אַפּלייד מאַגנעטישע פעלד שטאַרקייט איז געווען העכסטן.
בילדער פון (א) פאר און (ב) נאך די אריינגעבונג פון MP5 אין די טראַכעאַ פון אַ לעצטנס גע'הרג'עטער ראַץ מיטן מאַגנעט פּאַזיציאָנירט גלייך איבער דעם בילדגעבונג געגנט. דער בילדגעבונג געגנט געפינט זיך צווישן די צוויי קאַרטאַלידזש רינגען. פאר דער אריינגעבונג פון MP, איז דא עטוואס פליסיקייט אין די לופטוועג. די רויטע קעסטל אנטהאלט די קאנטראסט-פארשטארקנדיקע פארגרעסערונג. די בילדער זענען פון דעם ווידעאָ געוויזן אין סאַפּלעמענטאַרי ווידעאָ S6:MP5.
איבערפירן דעם מאַגנעט צוזאמען די טראַכעאַ אין וויוואָ האָט געפֿירט צו דעם אַז די MP קייט זאָל טוישן דעם ווינקל אין דער לופטוועג־איבערפֿלאַך אויף אַ ענלעכן אופֿן ווי מען זעט אין קאַפּילאַרן (זעט בילד 8 און סאַפּלעמענטאַרי ווידעאָ S7:MP5). אָבער, אין אונדזער שטודיע, קען מען נישט שלעפּן MPs צוזאמען דער ייבערפלאַך פֿון די לעבעדיקע לופטוועג ווי מען קען מיט קאַפּילאַרן. אין עטלעכע פֿאַלן וועט די MP קייט ווערן לענגער ווען דער מאַגנעט באַוועגט זיך לינקס און רעכטס. אינטערעסאַנט, מיר האָבן אויך געפֿונען אַז די פּאַרטיקל־שטריקל ענדערט די טיפֿקייט פֿון דער אויבערפֿלאַך־פֿליסיק־שיכט ווען דער מאַגנעט ווערט באַוועגט לענגאויס צוזאמען די טראַכעאַ, און עס יקספּאַנדירט ווען דער מאַגנעט ווערט באַוועגט גלייך איבערן קאָפּ און די פּאַרטיקל־שטריקל ווערט ראָטירט צו אַ ווערטיקאַלער פּאָזיציע (זעט סאַפּלעמענטאַרי ווידעאָ S7). : MP5 ביי 0:09, אונטן רעכטס). דער כאַראַקטעריסטישער מוסטער פון באַוועגונג האָט זיך געביטן ווען דער מאַגנעט איז געוואָרן טראַנסלירט אַריבער די שפּיץ פון דער טראַכעאַ לאַטעראַל (דאָס הייסט, צו די לינקס אָדער רעכטס פון דעם חיה אלא ווי צוזאמען די לענג פון דער טראַכעאַ). די פּאַרטיקלען זענען נאָך קלאָר קענטיק געווען ווען זיי האָבן זיך באַוועגט, אָבער ווען דער מאַגנעט איז אַוועקגענומען געוואָרן פון דער טראַכעאַ, זענען די שפּיצן פון די פּאַרטיקל סטרינגס געוואָרן קענטיק (זען סאַפּלעמענטאַרי ווידעאָ S8:MP5, אָנהייבנדיק ביי 0:08). דאָס איז קאָנסיסטענט מיט די MP נאַטור וואָס מיר האָבן באמערקט אונטער אַן אַפּליצירט מאַגנעטיש פעלד אין אַ גלאז קאַפּילאַר.
בייַשפּיל בילדער וואָס ווייַזן MP5 אין דער טראַכעאַ פון אַ לעבעדיק אַנעסטעזירט ראַץ. (א) דער מאַגנעט ווערט גענוצט צו כאַפּן בילדער אויבן און צו די לינקס פון די טראַכעאַ, און דערנאָך (ב) נאָכדעם וואָס דער מאַגנעט איז באַוועגט צו די רעכט. די רויטע קעסטל כּולל די קאַנטראַסט-פאַרשטאַרקנדיקע מאַגניפיקאַציע. די בילדער זענען פון דעם ווידעאָ געוויזן אין סאַפּלעמענטאַרי ווידעאָ S7:MP5.
ווען די צוויי פּאָלן זענען קאָנפיגורירט געוואָרן אין אַ צפון-דרום אָריענטאַציע העכער און אונטער דער טראַכעאַ (ד.ה. צוציען; בילד 3ב), האָבן די MP קאָרדן אויסגעזען לענגער און זענען געווען ליגן אויף דער זייט-וואַנט פון דער טראַכעאַ אלא ווי אויף דער דאָרסאַלער טראַכעאַלער ייבערפלאַך (זען סאַפּלעמענטאַרי ווידעא S9:MP5). אָבער, הויכע קאָנצענטראַציעס פון פּאַרטיקלען אין איין אָרט (ד.ה., די דאָרסאַלע ייבערפלאַך פון דער טראַכעאַ) זענען נישט דעטעקטירט געוואָרן נאָך פליסיק צושטעלן ווען אַ צוויי-מאַגנעט מיטל איז געניצט געוואָרן, וואָס טיפּיש פּאַסירט ווען אַ איין-מאַגנעט מיטל ווערט געניצט. דערנאָך ווען איין מאַגנעט איז קאָנפיגורירט געוואָרן צו אָפּשטויסן די פּאָלן פאַרקערט (בילד 3ג), האָט די צאָל פּאַרטיקלען וואָס זענען קענטיק אין דעם פעלד פון מיינונג נישט אויסגעזען צו פאַרגרעסערן נאָך צושטעלן. די סעטאַפּ פון ביידע צוויי-מאַגנעט קאָנפיגוראַציעס איז טשאַלאַנדזשינג רעכט צו די הויכע מאַגנעטישע פעלד שטאַרקייטן וואָס ציען אָדער שטופּן די מאַגנעטן, ריספּעקטיוולי. די סעטאַפּ איז דעמאָלט געביטן צו אַ איין מאַגנעט פּאַראַלעל צו דער לופטוועג אָבער דורכגייענדיק דעם לופטוועג ביי 90 גראַד אַזוי אַז די פעלד ליניעס האָבן דורכגעשניטן די טראַכעאַלער וואַנט אָרטאָגאָנאַלי (בילד 3ד), אַן אָריענטאַציע דיזיינד צו באַשטימען אויב פּאַרטיקל אַגרעגאַציע אויף דער זייט-וואַנט קען זיין באמערקט. אָבער, אין מיט דעם קאנפיגוראציע, איז נישט געווען קיין אידענטיפיצירבארע באוועגונג פון MP אקומולאציע אדער מאגנעט באוועגונג. באזירט אויף אלע די רעזולטאטן, איז אן איינציק-מאגנעט, 30-גראד אריענטאציע קאנפיגוראציע (פיגור 3א) אויסגעקליבן געווארן פאר אין וויווא גען טרעגער שטודיעס.
ווען דאָס חיה איז געווען איבערגעחזרט פאָטאָגראַפֿירט גלייך נאָך מענטשלעכער טויט, האָט די אָפּוועזנהייט פֿון פֿאַרמישנדיקע געוועב באַוועגונג געמיינט אַז פֿײַנערע און קירצערע פּאַרטיקל ליניעס האָבן געקענט דערקענט ווערן אין דעם קלאָרן אינטערכאָנדראַלן פֿעלד, "וואָקלדיק" אין ליניע מיט דער טראַנסלאַציאָנאַלער באַוועגונג פֿון דעם מאַגנעט. דאָך קען מען נאָך אַלץ נישט קלאָר זען די אנוועזנהייט און באַוועגונג פֿון MP6 פּאַרטיקלען.
דער LV-LacZ טיטער איז געווען 1.8 × 108 TU/ml, און נאך 1:1 מישן מיט CombiMag MP (MP6), האבן די בעלי חיים באקומען א 50 μl טראַכעאַלע דאָזע פון ​​9 × 107 TU/ml LV וועהיקל (ד"ה 4.5 × 106 TU/ראַט). אין די שטודיעס, אנשטאט איבערצוזעצן דעם מאַגנעט בעת געבורט, האבן מיר פיקסירט דעם מאַגנעט אין איין פאזיציע צו באשטימען צי LV טראַנסדוקציע (א) קען ווערן פארבעסערט קאמפערד צו וועקטאָר דעליווערי אין דער אבוועזנהייט פון א מאַגנעטישן פעלד, און (ב) קען ווערן פאקוסירט. לופטוועג צעלן ווערן טראַנסדוסירט צו מאַגנעטישע ציל געגנטן פון די אויבערשטע לופטוועג.
די אנוועזנהייט פון מאַגנעטן און די נוצן פון CombiMag קאַמביינד מיט LV וועקטאָרן האט נישט אויסגעזען צו האָבן נעגאַטיווע ווירקונגען אויף כייַע געזונט, ווי אויך אונדזער נאָרמאַל LV וועקטאָר עקספּרעס פּראָטאָקאָל. פראָנטאַל בילדער פון די טראַכעאַל געגנט אונטערטעניק צו מעכאַניש פּערטורביישאַן (צוגאב בילד 1) האָבן געוויזן אַז עס זענען געווען באַדייטנד העכער לעוועלס פון טראַנסדאַקשאַן אין דער גרופּע פון ​​כייַע באהאנדלט מיט LV-MP ווען דער מאַגנעט איז געווען פאָרשטעלן (פיגור 9אַ). בלויז אַ קליין סומע פון ​​בלוי LacZ פֿאַרב איז געווען פאָרשטעלן אין דער קאָנטראָל גרופּע (פיגור 9ב). קוואַנטיפיקאַציע פון ​​נאָרמאַליזעד X-Gal פֿאַרבטע געביטן האט געוויזן אַז אַדמיניסטראַציע פון ​​LV-MP אין דער אנוועזנהייט פון אַ מאַגנעטיש פעלד האט פּראָדוצירט אַ בעערעך 6-פאַך פֿאַרבעסערונג (פיגור 9ק).
בייַשפּיל קאָמפּאָזיט בילדער וואָס ווייַזן טראַכעאַל טראַנסדוקציע דורך LV-MP (אַ) אין דער אנוועזנהייט פון אַ מאַגנעטישן פעלד און (ב) אין דער אָפּוועזנהייט פון אַ מאַגנעט. (ג) סטאַטיסטיש באַדייטנדיק פֿאַרבעסערונג אין נאָרמאַליזירט LacZ טראַנסדוקציע שטח אין דער טראַכעאַ ווען מען ניצט דעם מאַגנעט (*p = 0.029, t-טעסט, n = 3 פּער גרופּע, דורכשניט ± SEM).
נייטראלע שנעלע רויט-געפארבטע סעקשאַנז (ביישפיל געוויזן אין סאַפּלעמענטאַרי פיג. 2) האָבן געוויזן לאַקז-געפארבטע צעלן פאָרשטעלן אין אַ ענלעכן מוסטער און אָרט ווי פריער געמאלדן.
א שליסל אַרויסרופן פֿאַר לופֿטוועג דזשין טעראַפּיע בלייבט די פּינקטלעכע לאָקאַליזאַציע פון ​​טרעגער פּאַרטיקלען צו געביטן פון אינטערעס און דערגרייכן הויך לעוועלס פון טראַנסדאַקשאַן עפעקטיווקייַט אין די מאָווינג לונג אין די בייַזייַן פון לופט לויפן און אַקטיוו מוקוס קלעאַראַנסע. פֿאַר LV טרעגער דיזיינד צו מייַכל CF לופֿטוועג קרענק, ינקריסינג די וווינאָרט צייט פון טרעגער פּאַרטיקלען אין די קאַנדאַקטינג לופֿטוועגן איז געווען אַ ביז איצט אַרויסגעלאָזט ציל. ווי אנגעוויזן דורך קאַסטעלאַני עט על., די נוצן פון מאַגנעטישע פעלדער צו פֿאַרבעסערן טראַנסדאַקשאַן האט אַדוואַנידזשיז קאַמפּערד צו אנדערע דזשין עקספּרעס מעטהאָדס אַזאַ ווי עלעקטראָפּאָראַטיאָן, ווי עס קענען קאַמביינירן פּשוטקייט, קאָסטן-עפעקטיוונאַס, עקספּרעס לאָקאַליזאַטיאָן, געוואקסן עפעקטיווקייַט, און קירצער ינגקיוביישאַן צייטן, און מעגלעך אַ קלענערער טרעגער דאָזע. אָבער, די אין וויוואָ דעפּאָזיציע און נאַטור פון מאַגנעטישע פּאַרטיקלען אין די לופֿטוועגן אונטער דער השפּעה פון פונדרויסנדיק מאַגנעטישע כוחות איז קיינמאָל נישט דיסקרייבד, און אויך איז די מעגלעכקייט פון דעם אופֿן נישט דעמאַנסטרייטיד אין וויוואָ צו פֿאַרבעסערן דזשין עקספּרעססיאָן לעוועלס אין גאַנץ לעבעדיק לופֿטוועגן.
אונדזערע אין וויטראָ סינטשראָטראָן PCXI עקספּערימענטן האָבן געוויזן אַז אַלע פּאַרטיקלען וואָס מיר האָבן געטעסט, מיט דער אויסנאַם פון פּאָליסטירען MP, זענען געווען קענטיק אין דער בילדגעבונג סעטאַפּ וואָס מיר האָבן גענוצט. אין דער אנוועזנהייט פון אַ מאַגנעטיש פעלד, MPs פאָרמען סטרינגס וועמענס לענג זענען פֿאַרבונדן מיט פּאַרטיקל טיפּ און מאַגנעטיש פעלד שטאַרקייט (ד"ה נאָענטקייט און באַוועגונג פון די מאַגנעט). ווי געוויזן אין פיגור 10, די סטרינגס וואָס מיר באַאָבאַכטן זענען געשאפן רעכט צו יעדער יחיד פּאַרטיקל זייַענדיק מאַגנעטייזד און ינדוסינג זייַן אייגן היגע מאַגנעטיש פעלד. די באַזונדער פעלדער פאַרשאַפן אנדערע ענלעך פּאַרטיקאַלז צו אַגרעגאַט און פאַרבינדן, מיט גרופּע סטרינג-ווי מווומאַנץ רעכט צו היגע כוחות פון די היגע אַטראַקטיוו און אָפּשטויסנדיק כוחות פון אנדערע פּאַרטיקאַלז.
סכעמאטיש וואָס ווייזט (א,ב) פּאַרטיקל באַנען וואָס זענען גענערירט אין פליסיק-געפילטע קאַפּילאַרן און (ג,ד) לופט-געפילטע טראַכעאַ. באַמערקט אַז די קאַפּילאַרן און טראַכעאַ זענען נישט געצייכנט לויט מאָסשטאַב. טאַפליע (א) כּולל אויך אַ באַשרייַבונג פון די MP, וואָס כּולל Fe3O4 פּאַרטיקלען אויסגעשטעלט אין סטרינגס.
ווען דער מאַגנעט איז באַוועגט געוואָרן העכער דעם קאַפּילאַר, האָט דער ווינקל פון דער פּאַרטיקל-שטריקל דערגרייכט אַ קריטישן שוועל פֿאַר MP3-5 וואָס האָט ענטהאַלטן Fe3O4, נאָכדעם וואָס די פּאַרטיקל-שטריקל איז מער נישט געבליבן אין דער אָריגינעלער פּאָזיציע, נאָר האָט זיך באַוועגט אויף דער ייבערפלאַך צו אַ נייער פּאָזיציע. מאַגנעט. דער עפֿעקט וועט מסתּמא פּאַסירן ווייל די גלאָז קאַפּילאַר ייבערפלאַך איז גלאַט גענוג צו דערלויבן די באַוועגונג. אינטערעסאַנט, MP6 (CombiMag) האָט זיך נישט אַזוי אויפֿגעפֿירט, מעגלעך ווייל די פּאַרטיקלען זענען געווען קלענער, האָבן געהאַט אַנדערע קאָוטינגז אָדער ייבערפלאַך טשאַרדזשיז, אָדער אַ פּראָפּריעטאַרי טרעגער פליסיקייט האָט אַפֿעקטירט זייער פֿעיִקייט צו באַוועגן זיך. דער בילד קאָנטראַסט פון CombiMag פּאַרטיקלען איז אויך שוואַכער, וואָס סאַגדזשעסט אַז די פליסיקייט און פּאַרטיקלען קענען האָבן ענלעכע געדיכטקייטן און דעריבער נישט לייכט באַוועגן זיך צו יעדן אַנדערן. פּאַרטיקלען קענען אויך ווערן שטעקן אויב דער מאַגנעט באַוועגט זיך צו שנעל, וואָס סאַגדזשעסט אַז די מאַגנעטישע פֿעלד שטאַרקייט קען נישט שטענדיק איבערקומען די רייַבונג צווישן פּאַרטיקלען אין דער פליסיקייט, וואָס סאַגדזשעסט אַז אפשר איז עס נישט חידוש אַז די מאַגנעטישע פֿעלד שטאַרקייט און די דיסטאַנס צווישן דעם מאַגנעט און דער ציל געגנט זענען זייער וויכטיק. צוזאַמען גענומען, פֿאָרשלאָגן די רעזולטאַטן אויך אַז, כאָטש מאַגנעטן קענען כאַפּן פילע MPs וואָס פֿליסן דורך דער ציל געגנט, איז עס נישט מסתּמא אַז מען קען זיך פֿאַרלאָזן אויף מאַגנעטן צו באַוועגן זיך. קאָמבימאַג פּאַרטיקלען אויף דער ייבערפלאַך פון דער טראַכעאַ. דעריבער, קומען מיר צום אויספיר אַז אין וויוואָ LV-MP שטודיעס זאָלן נוצן סטאַטישע מאַגנעטישע פעלדער צו פיזיש צילן ספּעציפֿישע געגנטן פון דעם לופֿטוועג בוים.
ווען פּאַרטיקלען ווערן אריינגעגעבן אין דעם קערפּער, זענען זיי שווער צו אידענטיפיצירן אין דעם קאָנטעקסט פון קאָמפּלעקסע באַוועגלעכע קערפּער געוועבן, אָבער די מעגלעכקייט צו דעטעקטירן זיי איז פֿאַרבעסערט געוואָרן דורך איבערזעצן דעם מאַגנעט האָריזאָנטאַל העכער די טראַכעאַ צו "וויקלען" די MP סטרינגס. כאָטש לעבעדיקע בילדער זענען מעגלעך, איז עס גרינגער צו דערקענען פּאַרטיקל באַוועגונג אַמאָל די חיה איז מענטשלעך געהרגעט געוואָרן. MP קאָנצענטראַציעס זענען בכלל געווען העכסטן אין דעם אָרט ווען דער מאַגנעט איז געווען פּאַזישאַנד העכער די בילדגעבונג געגנט, כאָטש עטלעכע פּאַרטיקלען זענען געוויינטלעך געפֿונען ווייטער צוזאמען די טראַכעאַ. אין קאַנטראַסט צו אין וויטראָ שטודיעס, קענען פּאַרטיקלען נישט געשלעפּט ווערן צוזאמען די טראַכעאַ דורך איבערזעצן דעם מאַגנעט. די געפינס איז קאָנסיסטענט מיט ווי דער שלייַם וואָס באַדעקט די ייבערפלאַך פון דער טראַכעאַ טיפּיש פּראַסעסאַז ינכיילד פּאַרטיקלען, טראַפּינג זיי אין די שלייַם און דערנאָך קלירד דורך די מוקאָסיליאַרי קלירינג מעקאַניזאַם.
מיר האָבן געשטעלט די היפּאָטעזע אַז די נוצן פון מאַגנעטן פֿאַר אַטראַקציע העכער און אונטער דער טראַכעאַ (פיגור 3ב) קען רעזולטירן אין אַ מער איינהייטלעכן מאַגנעטישן פעלד, אַנשטאָט אַ מאַגנעטישן פעלד וואָס איז העכסט קאָנצענטרירט אין איין פונקט, וואָס קען פירן צו אַ מער איינהייטלעכער פאַרשפּרייטונג פון פּאַרטיקלען. אָבער, אונדזער פאָרלייפיקע שטודיע האָט נישט געפֿונען קלאָרע באַווייַזן צו שטיצן די היפּאָטעזע. אויך, קאָנפיגורירן אַ פּאָר מאַגנעטן צו אָפּשטויסן (פיגור 3ג) האָט נישט רעזולטירט אין מער פּאַרטיקל דעפּאַזישאַן אין דער בילדגעבונג געגנט. די צוויי געפינסן ווײַזן אַז די צוויי-מאַגנעט סעטאַפּ פֿאַרבעסערט נישט באַדײַטנדיק לאָקאַלע קאָנטראָל פון MP טאַרגעטינג, און אַז די רעזולטירנדיקע שטאַרקע מאַגנעטישע כוחות זענען שווער צו קאָנפיגורירן, מאַכנדיג דעם צוגאַנג ווייניקער פּראַקטיש. ענלעך, אָריענטירן דעם מאַגנעט העכער און דורך דער טראַכעאַ (פיגור 3ד) האָט אויך נישט געוואַקסן די צאָל פּאַרטיקלען וואָס זענען ריטיינד אין דער בילדגעבונג געגנט. עטלעכע פון ​​די אַלטערנאַטיווע קאָנפיגוראַציעס זענען מעגלעך נישט געראָטן ווייַל זיי רעזולטירן אין נידעריקערע מאַגנעטישע פעלד שטאַרקייטן אין דער דעפּאַזישאַן געגנט. דעריבער, די איין 30-גראַד ווינקל מאַגנעט קאָנפיגוראַציע (פיגור 3אַ) ווערט באַטראַכט ווי די גרינגסטע און מערסט עפֿעקטיווע מעטאָדע פֿאַר אין וויוואָ טעסטינג.
די LV-MP שטודיע האט געוויזן אז ווען LV וועקטאָרן זענען קאָמבינירט געוואָרן מיט CombiMag און איבערגעגעבן געוואָרן נאָך פיזישער פּערטורבאַציע אין דער אנוועזנהייט פון אַ מאַגנעטישן פעלד, זענען טראַנסדוקציע לעוועלס באַדייטנד געוואַקסן אין דער טראַכעאַ קאַמפּערד צו קאָנטראָלן. באַזירט אויף די סינטשראָטראָן בילדגעבונג שטודיעס און LacZ רעזולטאַטן, איז דער מאַגנעטישער פעלד געווען ביכולת צו באַוואָרענען די LV אין דער טראַכעאַ און רעדוצירן די צאָל וועקטאָר פּאַרטיקלען וואָס זענען גלייך דורכגעגאַנגען טיף אין דער לונג. אַזעלכע טאַרגעטינג פֿאַרבעסערונגען קענען פירן צו העכערע עפיקאַסי בשעת זיי רעדוצירן איבערגעגעבענע טיטערס, אָף-ציל טראַנסדוקציע, אָנצינדונג און ימיון זייַט יפעקס, און דזשין טרעגער קאָס. וויכטיק, לויטן פאַבריקאַנט, קען CombiMag גענוצט ווערן צוזאַמען מיט אַנדערע דזשין אַריבערפירן מעטהאָדס, אַרייַנגערעכנט מיט אַנדערע וויראַל וועקטאָרן (אַזאַ ווי AAV) און נוקלעיק זויערן.