Twijfel er nooit aan dat een kleine groep bedachtzame, toegewijde burgers de wereld kan veranderen. Sterker nog, het is de enige die er is.
De missie van Cureus is om het aloude model van medisch publiceren te veranderen, waarin het indienen van onderzoeksresultaten duur, complex en tijdrovend kan zijn.
Bloedplaatjesrijk plasma/PRP, weefselregeneratie, bloedplaatjesactivering, glucoseproliferatieve therapie, bloedplaatjes, proliferatieve therapie
Citeer dit artikel als: Harrison TE, Bowler J, Reeves K, et al. (17 mei 2022) Het effect van glucose op het aantal en volume van bloedplaatjes: implicaties voor regeneratieve geneeskunde. Cure 14(5): e25081. doi:10.7759/cureus.25081
Bloedplaatjesrijk plasma (PRP) en hypertone glucoseoplossingen worden vaak gebruikt voor injectie in de regeneratieve geneeskunde, soms samen. Het effect van hypertone glucose op de lysis en activatie van bloedplaatjes is nog niet eerder gerapporteerd. We hebben het effect van verhoogde glucoseconcentraties op het aantal bloedplaatjes en rode bloedcellen getest, evenals op het celvolume in PRP en volbloed (WB). Een snelle gedeeltelijke daling van het aantal bloedplaatjes trad op bij alle glucosemengsels gemengd met PRP of volbloed, wat consistent is met gedeeltelijke lysis. Na de eerste minuut bleef het aantal bloedplaatjes stabiel, wat duidt op een snelle aanpassing van de resterende bloedplaatjes aan extreme (>2000 mOsm) hypertoniciteit. Na de eerste minuut bleef het aantal bloedplaatjes stabiel, wat duidt op een snelle aanpassing van de resterende bloedplaatjes aan extreme (>2000 mOsm) hypertoniciteit. Als u een van de beste manieren vindt om dit te doen, kunt u dit doen быструю аккомодацию остаточных тромбоцитов до экстремального (>2000 мОсм) гипертонуса. Na de eerste minuut bleef het aantal bloedplaatjes stabiel, wat duidt op een snelle aanpassing van de resterende bloedplaatjes aan extreme (>2000 mOsm) hypertoniciteit.2000 mOsm）高渗状态。2000 mOsm）高渗状态。 Als u een van de beste manieren vindt om dit te doen, kunt u dit doen быструю адаптацию остаточных тромбоцитов к экстремальному (>2000 мОсм) гиперосмолярному состоянию. Na de eerste minuut bleef het aantal bloedplaatjes stabiel, wat duidt op een snelle aanpassing van de resterende bloedplaatjes aan de extreme (>2000 mOsm) hyperosmolaire toestand.Glucoseconcentraties van 25% en hoger resulteerden in een significante toename van het gemiddelde bloedplaatjesvolume (MPV), wat wijst op een vroeg stadium van bloedplaatjesactivatie. Verder onderzoek is nodig om te bepalen of er lysis of activatie van bloedplaatjes optreedt en of hypertone glucose-injectie, alleen of in combinatie met PRP, extra klinisch voordeel kan opleveren.
In de jaren vijftig ontdekte de Amerikaanse chirurg George Hackett dat hij gewrichts- en rugpijn bij veel patiënten permanent kon verlichten door een proliferatieve oplossing in pezen en ligamenten te injecteren. Zijn experimenten met konijnen toonden aan dat de behandeling, die hij proliferatieve therapie noemde, ervoor zorgde dat de pezen groter en sterker werden. Histologisch onderzoek heeft bevestigd dat er tijdens dit proces nieuw collageen wordt aangemaakt [1].
In de eerste decennia werden veel verschillende distributiemethoden geprobeerd. In de jaren negentig beschouwden de meeste artsen hoge glucoseconcentraties als de veiligste en meest effectieve methode. Het werkingsmechanisme blijft echter onduidelijk.
Er werden in de 20e eeuw weinig klinische studies uitgevoerd naar aanleiding van Hacketts werk. In de jaren 2000 ontstond er echter hernieuwde belangstelling en werden verschillende succesvolle klinische onderzoeken naar proliferatieve therapie afgerond voor de behandeling van lage rugpijn [2], artrose van de knie [3] en laterale epicondylitis [4].
Weefselregeneratie vereist de deelname van stamcellen. Hoge glucoseconcentraties moeten daarom op de een of andere manier migratie, replicatie en differentiatie van stamcellen induceren. Onze hypothese is dat bloedplaatjes mogelijk als boodschappers fungeren en dat hoge glucoseconcentraties ervoor kunnen zorgen dat bloedplaatjes cytokines en groeifactoren vrijgeven, waardoor regeneratieve processen worden bevorderd, met name de migratie van stamcellen naar gebieden met hoge glucoseconcentraties.
De activering van bloedplaatjes gaat altijd vooraf aan een toename van intracellulair calcium [5]. Liu et al. toonden in 2008 aan dat hoge glucosespiegels de activiteit van transient receptor potential canonical type 6 (TRPC6)-kanalen in het plasmamembraan verhogen, wat leidt tot een instroom van calciumionen in bloedplaatjes [6]. Een andere studie toonde aan dat blootstelling van de marginale zone van microtubuli aan calciumionen leidt tot relaxatie, expansie en vervorming van de marginale zone, wat op zijn beurt een vormverandering van schijf naar bolvormig veroorzaakt, wat resulteert in een gemiddeld bloedplaatjesvolume (MPV) [7].
Onze hypothese in deze studie is dat blootstelling van bloedplaatjes aan hoge concentraties glucose de marginale zone van de microtubuli en de intracellulaire omgeving beïnvloedt, wat leidt tot een toename van de MPV.
Alle deelnemers ondertekenden een informed consent-formulier nadat de details van het onderzoek waren uitgelegd en vóór ontvangst van de monsters. In dit onderzoek werden alleen PRP-monsters met een hematocrietwaarde hoger dan 2% gebruikt, zodat het aantal erytrocyten (erytrocyten) en het gemiddelde corpusculaire volume van rode bloedcellen (MCV) ter vergelijking konden worden meegenomen.
Het onderzoek werd uitgevoerd in vier fasen, de eerste fase betrof PRP en de overige fasen waren volbloed (tabel 1). Zoals eerder beschreven [8], werden alle relatieve centrifugale krachten (RCF, g-kracht) berekend vanaf het middelpunt (Rmid, in cm) van de bloedkolom in de centrifugaalspuit. We kozen ervoor om MPV te gebruiken als marker voor bloedplaatjessensibilisatie en het aantal bloedplaatjes als indicator voor mogelijke bloedplaatjeslysis. Beide kunnen eenvoudig worden gemeten met standaard hematologieanalysatoren.
In de eerste fase doneerden 47 vrijwilligers bloedmonsters: één buisje ethyleendiaminetetra-azijnzuur (EDTA) en één PRP-volbloedmonster (ontstold met natriumcitraat (NaCl, 3%)) (tabel 1). Plaats de schudder direct in het buisje. Een volledig bloedbeeld (CBC) werd in drievoud uitgevoerd op EDTA-monsters, en NaCl-monsters werden in drievoud geanalyseerd voor CBC-analyse. Vervolgens werd PRP bereid met behulp van verschillende methoden die hierboven zijn beschreven [8]. Alle PRP-monsters werden bereid door middel van centrifugatie bij 900-1000 g. Meng elk PRP-monster 5-10 seconden op een vortexmixer en verdeel vervolgens vijf aliquots van 0,5 ml over de buisjes.
Om het effect van blootstelling aan bloedplaatjes op verhoogde glucoseconcentraties te evalueren, werden gelijke hoeveelheden (0,5 ml) van 0%, 5%, 12,5%, 25% en 50% glucose in water gemengd met bloedplaatjesmonsters om concentraties van 0%, 2,5%, 6,25%, 12,5% en 25% van het glucosemengsel te verkrijgen. De buisjes werden gedurende 15 minuten geschud op een reageerbuisschudder. De TAC van elk mengsel werd na 15 minuten in drievoud geanalyseerd. Het aantal bloedplaatjes (PLT), het aantal rode bloedcellen, de MCV en de MPV werden voor elk buisje gemiddeld, en het gemiddelde aantal bloedplaatjes, het aantal rode bloedcellen, de MCV en de MPV werden berekend voor alle PRP-monsters.
Nadat de eerste fase van de dataverzameling was afgerond, zagen we een significante toename van het bloedplaatjesvolume in PRP-bloedplaatjes na toevoeging van D50W. PRP-bloedplaatjes vertegenwoordigen niet noodzakelijkerwijs alle bloedplaatjes in het bloed, en PRP-medium verschilt van WB-medium. Daarom besloten we een tweede fase-onderzoek uit te voeren naar het effect van de toevoeging van D50W aan volbloed.
Voor de tweede ronde kozen we een steekproefgrootte van 30 op basis van de resultaten van de eerste reeks, zoals beschreven in het gedeelte Analyse. In deze reeks doneerden 20 vrijwilligers bloedmonsters (tabel 1). Volbloed (1,8 ml) werd opgezogen in een 3 ml-spuit en ontstold met 0,2 ml 40% NaCl. De volbloedspuit werd vijf seconden gemengd met een vortexmixer en de CBC werd in drievoud geanalyseerd. Na analyse werd ontstold bloed toegevoegd aan 2 ml 50% glucose in een 5 ml-spuit (de uiteindelijke glucoseconcentratie was ongeveer 25% (D25)) en gedurende 30 minuten in een schudbuis geplaatst. Na 30 minuten werd D25/CBC in WB-spuiten in drievoud geanalyseerd. Het aantal bloedplaatjes, het aantal rode bloedcellen, de MCV en de MPV per spuit werden gemiddeld, en de gemiddelde PLT, het aantal rode bloedcellen, de MCV en de MPV werden voor elk monster berekend vóór en na het toevoegen van glucose.
Omdat bloedplaatjes in volbloed vaak worden blootgesteld aan hypertone glucose tijdens proliferatieve glucosetherapie als gevolg van minimaal invasieve injecties, en het niet gebruikelijk is om PRP te combineren met hypertone glucose vlak voor de injectie, besloten we in sectie 1 hypertone glucose in combinatie met WB te bestuderen. Stap drie en vier. In elke fase doneerden 20 vrijwilligers 7-8 ml ACD-A (zuur dat trinatriumcitraat (22,0 g/l), citroenzuur (8,0 g/l) en glucose (24,5 g/l) bevat, oplossing van dextrosecitraat) als bloedanticoagulantia (tabel 1). Alleen mengsels met glucose van meer dan 12,5% werden gebruikt om het drempelpercentage te bepalen dat geassocieerd is met een toename van de MPV. In de derde fase wordt 1 ml bloed in een reageerbuis gebracht. Meng het bloed vervolgens 10 seconden op een vortexmixer door 1 ml 30% glucose, 40% glucose of 50% glucose aan het buisje toe te voegen tot een uiteindelijke glucoseconcentratie van respectievelijk 15%, 20% en 25%. De glucosebloedmonsters werden direct na het mengen geanalyseerd op CBC en gedurende 30 minuten elke twee minuten herhaald.
Tijdens de eerste menging worden de bloedplaatjes door de toevoeging van 1:1 hypertone glucose en WB of PRP gedurende enkele seconden blootgesteld aan concentraties boven 25%. In de vierde stap, om het effect van hypertone glucose met minimale initiële piekconcentraties te evalueren en de bovengrens van het effect van glucose te testen, voegden we slechts een kleine hoeveelheid bloed toe aan D25W of D50W. Doe 1 ml D25W of D50W in een buisje en voeg 0,2 ml WB toe terwijl u het monster 10 seconden vortex. In deze gevallen werd het bloed blootgesteld aan glucose in een concentratie die ongeveer 20% boven de uiteindelijke concentratie lag, in plaats van 50% boven de uiteindelijke concentratie zoals in fase 3, wat resulteerde in uiteindelijke glucoseconcentraties van 20,8% en 41,6%. Gemengde monsters werden geanalyseerd met hetzelfde tijdsinterval als in stap 3.
Nederlands In de eerste stap van elke glucoseverdunningsserie werden 30 monsters genomen, aangezien dit de juiste steekproefgrootte was voor de pilotstudie [9]. Aan het einde van elke fase (inclusief de eerste fase), evalueer de adequaatheid van de steekproefgrootte met behulp van de formule die is gebruikt om de steekproefgrootte te bepalen die nodig is om het gemiddelde van de continue uitkomstvariabele in één populatie te schatten. Formule n = Z2 x SD2 /E2. In deze vergelijking is Z de Z-score, SD de standaarddeviatie en E de gewenste fout [10]. Onze alfa is 0,05, wat overeenkomt met een Z-waarde van 1,96, en we verwachten een fout van 5 (in procenten). Daarom lossen we op voor n = (1,962 x SD2)/52. De resultaten toonden aan dat de steekproefgrootte die nodig was voor elke fase kleiner was dan het daadwerkelijk verzamelde aantal.
Tijdens de perioden 1, 3 en 4, waarin meer dan één glucoseconcentratie werd gebruikt, werd het effect van verschillende glucoseconcentraties geanalyseerd door de fractionele verandering tussen tijdstip 0 en elk volgend tijdstip (fase 1 na 15 minuten, periode 3 na 15 minuten) te vergelijken. De veranderingssnelheden voor elke periode werden vergeleken met behulp van de Mann-Whitney U-toets, omdat de gegevens geen normale verdeling volgden zoals bepaald met de Shapiro-Wilk normaliteitstoets. Omdat in de eerste, derde en vierde stap een 1-op-1-analyse van verschillende groepen (vijf) werd uitgevoerd (vijf in totaal), werd een Bonferroni-correctie uitgevoerd om de gewenste alfawaarde aan te passen naar ≤0,01, maar niet ≤0,05.
Vermindering van het aantal bloedplaatjes bij alle concentraties hypertone dextrose en een toename van de MPV in PRP-bloedplaatjes bij een dextroseconcentratie van > 12,5%: het aantal PRP-bloedplaatjes steeg van één tot vijf keer de concentratie vergeleken met de uitgangswaarde van het volledige bloed, afhankelijk van de methode (niet afgebeeld). Vermindering van het aantal bloedplaatjes bij alle concentraties hypertone dextrose en een toename van de MPV in PRP-bloedplaatjes bij een dextroseconcentratie van > 12,5%: het aantal PRP-bloedplaatjes steeg van één tot vijf keer de concentratie vergeleken met de uitgangswaarde van het volledige bloed, afhankelijk van de methode (niet afgebeeld). Gebruik een van de beste manieren om uw geld te verdienen en MPV in PRP-modus percentages > 12,5%: percentage PRP in 1-5 jaar цельной кровью, in зависимости uit метода (niet показано). Verlaagd aantal bloedplaatjes bij alle hypertone dextroseconcentraties en verhoogd MPV in PRP-bloedplaatjes bij een dextroseconcentratie van > 12,5%: het aantal PRP-bloedplaatjes steeg 1-5 keer vergeleken met het basisbloed, afhankelijk van de methode (niet weergegeven). ).MPV > 12,5%增加:与基线全血相比，PRP 血小板计数从浓度的1 倍上升到5 倍，因方法而异（未描述）。 Bij een glucoseconcentratie van > 12,5% zorgt de hoge glucoseconcentratie ervoor dat het bloedbeeld daalt en de PRP-bloed-MPV stijgt: vergeleken met 与基线全血 stijgt het PRP-bloedbeeld 1 tot 5 keer zo hoog als de concentratie (niet beschreven). Hogere rentepercentages >12,5% тромбоцитов, een MPV-motor in тромбоцитах PRP: количество тромбоцитов PRP увеличивалось от 1- до 5-кратных концентраций по сравнению с исходными концентрациями цельной крови, в зависимости от метода (niet описано ). Bij glucoseconcentraties > 12,5% zorgden alle hypertensieve glucoseconcentraties voor een afname van het aantal bloedplaatjes en een toename van de MPV in PRP-bloedplaatjes: het aantal PRP-bloedplaatjes steeg 1- tot 5-voudig vergeleken met de uitgangsconcentraties in volbloed, afhankelijk van de methode (zoals beschreven).Uit figuur 1 blijkt dat het aantal bloedplaatjes met bijna 75% afnam na verdunning in water en met 20-30% na 15 minuten verdunning met verschillende glucoseconcentraties vergeleken met de uitgangswaarde van PRP en een 1:1-verdunning aangepast voor volume (1-k1 met volumecorrectie).k-1-fokkerij).1-fokkerij).
Het aantal cellen in elke verdunning wordt uitgedrukt als een fractie van het oorspronkelijke aantal vóór de verdunning.
MPV daalde minimaal tijdens de PRP-productie, zonder verdere verandering in verdunningsconcentraties tot 12,5% in water of glucose (inclusief 25% PRP-glucosemengsels) en steeg met meer dan 20% na verdunning in 50% glucose-oplossing (Fig. .2). Daarentegen vertoonden erytrocyten geen significante volumeverandering bij een andere verdunning dan H2O.
Het gemiddelde volume van cellen in elke verdunning wordt uitgedrukt als een percentage van het oorspronkelijke volume vóór verdunning.
Een vergelijkbare, maar minder uitgesproken daling van het aantal bloedplaatjes en een toename van de CVR werden waargenomen bij borstkanker blootgesteld aan 50% glucose (om te formuleren met 25% glucose). Tabel 2 vergelijkt het aantal cellen en de celvolumes in volbloed verdund in 50% dextrose met fase 1 PRP-gegevens verdund in 50% dextrose. Veranderingen in het aantal rode bloedcellen en de MCV van rode bloedcellen waren niet duidelijk zichtbaar en stonden niet centraal in onze aandacht.
SD = standaarddeviatie, MD = gemiddeld verschil tussen groepen, SE = standaarddeviatie van gemiddeld verschil, RBC = erytrocyten, PLT = bloedplaatjes, PRP = bloedplaatjesrijk plasma, WB = volbloed
Na toevoeging van D50W aan WB bedroeg het percentage bloedplaatjesverlies, gecorrigeerd voor verdunning, 7,7% (310 ± 73 versus 286 ± 96), vergeleken met 17,8% voor PRP-verdunning in D50W (664 ± 348 versus 544 ± 277). De MPV WB nam toe met 16,8% (van 10,1 ± 0,5 naar 11,8 ± 0,6), terwijl de MPV PRP toenam met 26% (9,2 ± 0,8 versus 11,6 ± 0,7). Hoewel de gemiddelde verschillen in zowel de verlaging van het bloedplaatjesaantal als de toename van de MPV significant groter waren bij PRP, waren de veranderingen in de verlaging van het bloedplaatjesaantal binnen WB bijna significant (310 ± 73 tot 286 ± 96 (-7,7%); p = .06) en was de toename in MPV significant (10,1 ± 0,5 tot 11,8 ± 0,6 (+16,8) p < .001). Hoewel de gemiddelde verschillen in zowel de verlaging van het bloedplaatjesaantal als de toename van de MPV significant groter waren bij PRP, waren de veranderingen in de verlaging van het bloedplaatjesaantal binnen WB bijna significant (310 ± 73 tot 286 ± 96 (-7,7%); p = .06) en was de toename in MPV significant (10,1 ± 0,5 tot 11,8 ± 0,6 (+16,8) p < .001).Hoewel de gemiddelde verschillen in zowel de verlaging van het aantal bloedplaatjes als de toename van de CVR significant groter waren bij PRP, waren de veranderingen in de daling van het aantal bloedplaatjes binnen WB bijna significant (310 ± 73 tot 286 ± 96 (-7,7%); p = 0,06).увеличение MPV-kwaliteit (van 10,1 ± 0,5 tot 11,8 ± 0,6 (+16,8) p < 0,001). de toename van de MPV was significant (van 10,1 ± 0,5 tot 11,8 ± 0,6 (+16,8) p < 0,001).尽管PRP 在血小板计数减少和MPV 增加方面的平均差异显着更大，但WB MPV (310 ± 73 ± 286 ± 96 (-7,7%); p = 0,06的增加是显着的（10,1 ± 0,5 到11,8 ± 0,6 (+16,8) p < .001）。尽管 PRP 在 血小板 计数 和 和 增加 方面 的 平均 差异 显着 大 , 但 但 内血小板 计数减少 的 几乎 是 显着 的 (（（310 ± 73 至 286 ± 96 (-7,7%); p = .06）和MPV 的增加是显着的（10,1 ± 0,5 到11,8 ± 0,6 (+16,8) p < 0,001）。De verandering in de reductie van het aantal bloedplaatjes binnen de WB was bijna significant (van 310 ± 73 naar 286 ± 96 (-7,7%); p = 0,06), hoewel PRP significant grotere gemiddelde verschillen had in de afname van het aantal bloedplaatjes en de toename van MPV, en de toename van MPV was significant.(van 10,1 ± 0,5 tot 11,8 ± 0,6 (+16,8) р < 0,001). (van 10,1 ± 0,5 tot 11,8 ± 0,6 (+16,8) p < 0,001).
Een eindconcentratie van 20% glucose was nodig om een ​​significante verandering in MPV te zien, maar de verandering in MPV was meer uitgesproken bij een eindconcentratie van 25%. Het bloedplaatjesverlies stabiliseerde na de initiële daling. We merkten een aanvankelijke scherpe daling van de CVR op, maar de CVR herstelde zich snel bij een eindconcentratie van 25% glucose, wat significant hoger was dan de CVR-niveaus die werden waargenomen bij de eindconcentraties van 20% en 15% glucose (Fig. 3 en links in Tabel 3; gearceerde vakken). geven p-waarden ≤ alfa aan met een Bonferroni-correctie van 0,01). Er was ook een aanvankelijke scherpe daling in het aantal PLT's, waargenomen in de beginfase van 0-15 s, en bleef vervolgens stabiel (van 15 s tot 30 min; links in Tabel 4).
De toevoeging van verschillende glucoseconcentraties aan volbloed resulteerde in een aanvankelijke snelle daling van de MPV, gevolgd door een concentratieafhankelijk herstel van meer dan 20%. De legenda toont de glucoseconcentratie na verdunning. D15, D20 en D25 werden uitgevoerd met een 1:1 verdunning. D21 en D41 werden uitgevoerd met een 1:5 verdunning.
Tabel 4 toont de verandering in het aantal bloedplaatjes bij verdunning in hypertone glucose. We observeerden een dosisafhankelijke relatie tussen de onmiddellijke daling van het aantal PLT's bij de 1:1-verdunning en bij de 1:5-verdunning. Bij vergelijking van de 1:1-verdunningen als enkele groep met de 1:5-verdunningen, had de 1:1-groep een onmiddellijke daling van het aantal bloedplaatjes, minder dan de 1:5-groep: 66±48.000 (23%) versus 99±69.000 (37%) (p = 0,014) in de 1:5-groep. Na een initiële daling bij het eerste meetpunt stabiliseerde het aantal bloedplaatjes als percentage van glucose (fig. 4).
Wanneer volbloed in een verhouding van 1:1 aan glucose wordt toegevoegd, daalt het aantal bloedplaatjes met ongeveer 25%. Wanneer volbloed echter in een verhouding van 1:5 werd toegevoegd, was de daling veel groter – ongeveer 50%.
41% glucose verhoogde de MPV sneller en dramatischer dan 25% of 21%. De MPV-resultaten worden weergegeven in figuur 3. Bij alle andere verdunningen werd geen onmiddellijke initiële daling van de MPV waargenomen na toevoeging van 50% glucose. Bij gebruik van 25% glucose (glucoseconcentratie 20,8% bij de uiteindelijke verdunning) was de verandering in MPV vergelijkbaar met de verandering in 20% glucose bij een 1:1-verdunning (figuur 3). Hoewel de veranderingen in MPV aanvankelijk groter waren bij de gemengde concentratie van 41% dan bij 25%, was het verschil in MPV tussen 41% en 25% na 16 minuten niet langer significant (tabel 3, rechts). Het is ook interessant dat 25% glucose de MPV effectiever verhoogde dan 20,8%.
Deze in vitro-studie bevestigde gedeeltelijk onze hypothese. Er werd aangetoond dat er sprake kan zijn van gedeeltelijke lysis van bloedplaatjes door een dextrosemengsel, dat bloedplaatjes zich snel aanpassen aan extreme hypertoniciteit en dat de MPV aanzienlijk stijgt als reactie op concentraties van hypertone dextrose van > 25%. Er werd aangetoond dat er sprake kan zijn van gedeeltelijke lysis van bloedplaatjes door een dextrosemengsel, dat bloedplaatjes zich snel aanpassen aan extreme hypertoniciteit en dat de MPV aanzienlijk stijgt als reactie op concentraties van hypertone dextrose van > 25%. Als u een probleem met het gebruik van een product wilt, kunt u dit doen аккомодацию тромбоцитов экстремального MPV-vermogen en vermogen van MPV met een vermogen van > 25%. Er werd aangetoond dat er sprake kan zijn van gedeeltelijke bloedplaatjeslysis bij gebruik van dextrose, dat de bloedplaatjes zich snel aanpassen aan extreme hypertoniciteit en dat de MPV significant toeneemt als reactie op hypertone dextrosegehaltes >25%.它显示出通过葡萄糖混合物潜在的部分血小板> 25% MPV-producten voor MPV's它 显示 出 通过 葡萄糖 潜在 的 部分 血小板 溶解 血小板 快速 适应 极端 高渗, 以及响应> 25% 浓度 高渗 葡萄糖 时 时 mpv 显着。。。。。 Het gebruik van een product met een hoge resolutie адаптацию тромбоцитов кэкстремальному MPV-vermogen en vermogen van MPV met een vermogen van > 25%. Er is sprake van potentiële gedeeltelijke bloedplaatjeslysis door glucosemengsels, snelle aanpassing van bloedplaatjes aan extreme hypertoniciteit en een significante toename van de MPV als reactie op hypertone glucose > 25%.De initiële toename was maximaal bij een blootstelling aan glucose van 41,6%, maar de toename in MPV naderde ongeveer 20 minuten na de blootstelling de 25% glucoseblootstelling.
De concentratie bloedplaatjes wordt beïnvloed door glucose. We merkten dat de hoeveelheid PLT afnam bij alle glucoseverdunningen. Een scherpe daling van het aantal bloedplaatjes in H₂O (0%)-verdunningen van de PRP-serie kan verband houden met osmotische lysis. Een andere mogelijkheid is dat dit een artefact is, veroorzaakt door bloedplaatjesklontering, maar dit staat in contrast met het gebrek aan MPV-verandering bij deze verdunning. Deze bevinding betekent dat sommige bloedplaatjes zeer gevoelig zijn voor hypo-osmolariteit.
In alle 1:1-verdunningen van glucose nam de hoeveelheid PLT met 20-30% af, zelfs bij D5W (hypotonisch bij 252 mOsm). Dit kan wijzen op een specifiek niet-osmotisch effect van glucose, aangezien zowel PLT als MPV onveranderd bleven bij een drievoudige concentratieverhoging. glucose. van D5W naar D25W. Sterker nog, de PLT-concentraties hadden de neiging licht toe te nemen met toenemende osmolariteit.
De afname van PLT tussen 1:1 en 1:5 verdunningen betekent dat het oplossingseffect afhangt van de initiële en uiteindelijke glucoseconcentratie. Als het alleen van de initiële concentratie afhing, zou men een verschil in PLT-reductie verwachten tussen 1:1 concentraties. Maar dat is niet het geval. Als het lysiseffect alleen afhangt van de uiteindelijke glucoseconcentratie, verwachten we niet veel verschil tussen een 20% 1:1 verdunning en een 20,8% 1:5 verdunning. En toch is het ons gelukt.
Als bloedplaatjesverlies optreedt als gevolg van bloedplaatjeslysis, wordt een gedeeltelijk lysaat gevormd, waarna cytokines en groeifactoren vrijkomen in de extracellulaire omgeving. Verschillende studies hebben aangetoond dat bloedplaatjeslysaat bijna net zo effectief is als PRP als proliferatieoplossing [11]. PRP zelf is aangetoond een effectieve oplossing te zijn voor de behandeling van proliferatie [12-14].
Inactieve bloedplaatjes circuleren in de vorm van een schijf, versterkt met verschillende interne structuren. Tijdens activering nemen ze een meer bolvormige of amoebevorm aan, wat resulteert in een toename van het volume. Deze volumetoename vereist een groter oppervlak, wat het gevolg is van de extrusie van het open tubulisysteem (OCS) en de toevoeging van exocytische granula aan het membraan. Het is nog de vraag of de toename van de MPV, veroorzaakt door hypertone glucose, een of beide van deze mechanismen betreft. In het laatste geval zou een toename van de MPV wijzen op degranulatie.
Uit dit onderzoek bleek dat blootstelling aan hoge concentraties glucose op PRP of bloedplaatjes binnen 15 minuten leidde tot een toename van de MPV, met een glucoseconcentratie van respectievelijk 25% en 41,6%.
De toename van de MPV van bloedplaatjes kan te wijten zijn aan dilatatie van de omliggende microtubuli-kluwens als reactie op de calciuminstroom. Liu et al. Glucose is aangetoond om calciuminstroom via het TRPC6-kanaal van bloedplaatjes te bemiddelen [6]. Onze hypothese is dat glucose de relaxatie van microtubuli-kluwens induceert, wat leidt tot een toename van de MPV en sensibilisatie en/of activering van bloedplaatjes. Echter, afgaande op onze resultaten, is dit slechts een deel van het verhaal. In onze testen resulteerde geen enkele concentratie onder D25W in een toename van de MPV. Aangezien we geen blootstelling aan glucoseconcentraties tussen 12,5% en 25% hebben getest, suggereren onze fase 1-resultaten dat er mogelijk een drempelwaarde is in dit bereik van glucoseconcentraties die leidt tot een toename van de MPV. Verdere testen in fase 3 en 4 toonden aan dat 20-25% glucose de drempelwaarde hiervoor lijkt te zijn, maar het blijft onduidelijk waarom.
We observeerden ook een afname van ~9% in MPV na centrifugatie. Het is niet duidelijk of deze afname in MPV te wijten is aan grotere en dichtere bloedplaatjes die vastzitten in de RBC-laag van de centrifuge. Deze observatie kan belangrijk zijn voor clinici, omdat het zou kunnen impliceren dat PRP-bloedplaatjes een kleinere en minder dichte subgroep vormen van WB-bloedplaatjes.
In een eerdere studie hebben we aangetoond dat handmatige PRP-bereiding goedkoop is [8]. Als glucose weefselbloedplaatjes of PRP gevoeliger maakt voor activering, of als PRP wordt geproduceerd met gedeeltelijke lysaateigenschappen, kan dit de regeneratie bevorderen en de behoefte aan therapie verminderen. Daarom kan de combinatie van PRP en sterk geconcentreerde glucose kosteneffectiever zijn dan PRP of glucose alleen.
Onze studie kent verschillende tekortkomingen. Ten eerste gebruiken we PRP dat via verschillende methoden is verkregen. Dit kan leiden tot tegenstrijdige resultaten. Ten tweede konden we geen van onze monsters biochemisch analyseren om nauwkeuriger te bepalen of er bloedplaatjesactivatie had plaatsgevonden. We zouden graag P-selectine, bloedplaatjesfactor 4, monocytische bloedplaatjesaggregaten of andere markers van bloedplaatjesactivatie meten om de mate of aanwezigheid van alfagranule-degranulatie beter te begrijpen, maar dit valt buiten het bestek van deze studie. Ten derde konden we met behulp van elektronenmicroscopie of andere methoden niet bevestigen dat de toename van de MPV in aan glucose blootgestelde bloedplaatjes te wijten was aan het effect op microtubuli-kluwens.
Mengsels van WB of PRP met 25% glucose verhoogden de MPV, wat het begin van bloedplaatjesactivatie aangaf, hoewel deze studie geen progressie van aggregatie of degranulatie aantoonde. Het hypertone glucosemengsel resulteerde in bloedplaatjesverlies, wat mogelijk een lytisch effect vertegenwoordigt. Gedeeltelijke activering of lysis van bloedplaatjes kan weefselregeneratie veroorzaken na bloedplaatjesinjectie. Het is niet duidelijk tot welke klinische gevolgen deze veranderingen kunnen leiden. Verdere studies hebben nauwkeurigere metingen van activering of lysis aangetoond en de verschillende klinische effecten van hypertone glucosemengsels met WB of PRP geëvalueerd.
Glucoseproliferatieve therapie is een eenvoudige en goedkope regeneratieve therapie die snel groeit en klinisch onderzoek ondersteunt. Deze studie suggereert een fysiologisch mechanisme dat, indien bevestigd, ons zou kunnen helpen een deel van het regeneratieve mechanisme van proliferatieve therapie te begrijpen.
Biomedische en gezondheidsinformatica aan de University of Missouri, Kansas City School of Medicine, Kansas City, VS
Menselijke proefpersonen: Alle deelnemers aan deze studie gaven wel of geen toestemming. De International Society for Cellular Medicine heeft ICMS-2017-003 goedkeuring afgegeven. Het volgende protocol is goedgekeurd voor verder gebruik door de Institutional Review Board van de International Society for Cellular Medicine: Titel: Berekening van de opbrengst van bloedplaatjesrijk plasmageneesmiddel op basis van het basale CBC-bloedplaatjestelling. Dierlijke proefpersonen: Alle auteurs hebben bevestigd dat er geen dieren of weefsels bij deze studie betrokken waren. Belangenconflicten: In overeenstemming met het ICMJE Uniform Disclosure Form verklaren alle auteurs het volgende: Betalings-/service-informatie: Alle auteurs verklaren dat zij geen financiële steun hebben ontvangen van enige organisatie voor het ingediende werk. Financiële relaties: Alle auteurs verklaren dat zij momenteel of in de afgelopen drie jaar geen financiële relaties hebben gehad met enige organisatie die mogelijk geïnteresseerd is in het ingediende werk. Andere relaties: Alle auteurs verklaren dat er geen andere relaties of activiteiten zijn die van invloed kunnen zijn op het ingediende werk.
Harrison TE, Bowler J, Reeves K et al. (17 mei 2022) Het effect van glucose op het aantal en volume van bloedplaatjes: implicaties voor regeneratieve geneeskunde. Cure 14(5): e25081. doi:10.7759/cureus.25081
© Copyright 2022 Harrison et al. Dit is een open access-artikel, verspreid onder de voorwaarden van de Creative Commons Naamsvermelding-licentie CC-BY 4.0. Onbeperkt gebruik, distributie en reproductie in elk medium is toegestaan, mits de oorspronkelijke auteur en bron worden vermeld.