"Düşüncəli, fədakar vətəndaşlardan ibarət kiçik bir qrupun dünyanı dəyişə biləcəyinə heç vaxt şübhə etməyin. Əslində, orada yeganə olan budur."
Cureus-un missiyası, tədqiqat təqdimatının bahalı, mürəkkəb və vaxt aparan ola biləcəyi uzun müddətdir mövcud olan tibbi nəşriyyat modelini dəyişdirməkdir.
Trombositlərlə zəngin plazma/PRP, toxuma regenerasiyası, trombositlərin aktivləşməsi, qlükoza proliferativ terapiya, trombositlər, proliferativ terapiya
Bu məqaləni belə sitat gətirin: Harrison TE, Bowler J, Reeves K və b. (17 may 2022) Qlükozanın trombosit sayına və həcminə təsiri: regenerativ tibb üçün nəticələr. Cure 14(5): e25081. doi:10.7759/cureus.25081
Trombositlərlə zəngin plazma (PRP) və hipertonik qlükoza məhlulları regenerativ tibbdə inyeksiya üçün adətən, bəzən birlikdə istifadə olunur. Hipertonik qlükozanın trombosit lizisinə və aktivləşməsinə təsiri əvvəllər bildirilməmişdir. Yüksək qlükoza konsentrasiyasının trombosit və eritrosit sayına, eləcə də PRP və tam qanda (WB) hüceyrə həcmlərinə təsirini sınaqdan keçirdik. PRP və ya tam qanla qarışdırılmış bütün qlükoza qarışıqlarında trombosit sayında sürətli qismən azalma baş verdi, bu da qismən lizisə uyğundur. İlk dəqiqədən sonra trombosit sayı sabit qaldı, bu da qalıq trombositlərin sürətlə ekstremal (>2000 mOsm) hipertonikliyə qədər yerləşdiyini göstərir. İlk dəqiqədən sonra trombosit sayı sabit qaldı, bu da qalıq trombositlərin sürətlə ekstremal (>2000 mOsm) hipertonikliyə qədər yerləşdiyini göstərir. Posle pervoy dəqiqələr kolichestvo trombositov stavalosy stabilnim, o, strokostatochnыh trombositov ilə sürətli akkomodatyyu strokemalnoy (>2000 mOsm) hipertonus. İlk dəqiqədən sonra trombosit sayı sabit qaldı və bu da qalıq trombositlərin sürətlə ekstremal (>2000 mOsm) hipertonikliyə qədər yerləşdiyini göstərir.第一分钟后，血小板计数保持稳定，表明残余血小板迅速适应极端（> 2000 mOsm）高渗状态、.2000 mOsm）高渗状态、. Posle pervoy minutы kolichestvo trombositov stavalosy sabitlik, o, stotalochnыh trombositov k ekstremalnomu (>2000 mOsm) hiperosmolyarnomu sostoyanuyu sürətli adaptasiya. İlk dəqiqədən sonra trombosit sayı sabit qaldı ki, bu da qalıq trombositlərin həddindən artıq (>2000 mOsm) hiperosmolyar vəziyyətə sürətli uyğunlaşmasını göstərir.25% və daha yüksək qlükoza konsentrasiyası orta trombosit həcmində (MPV) əhəmiyyətli dərəcədə artıma səbəb oldu ki, bu da trombosit aktivləşməsinin erkən mərhələsini göstərir. Trombosit lizisinin və ya aktivləşməsinin baş verib-vermədiyini və hipertonik qlükoza inyeksiyasının tək başına və ya PRP ilə birlikdə əlavə klinik fayda verə biləcəyini müəyyən etmək üçün əlavə tədqiqatlar tələb olunur.
1950-ci illərdə amerikalı cərrah Corc Hekket vətərlərə və bağlara proliferativ məhlul yeritməklə bir çox xəstədə oynaq və bel ağrısını birdəfəlik aradan qaldıra biləcəyini kəşf etdi. Dovşanlar üzərində apardığı təcrübələr göstərdi ki, proliferativ terapiya adlandırdığı müalicə vətərlərin böyüməsinə və güclənməsinə səbəb olub. Histoloji tədqiqatlar bu proses zamanı yeni kollagenin istehsal olunduğunu təsdiqləyib [1].
İlk bir neçə onillik ərzində bir çox fərqli paylama həlləri sınaqdan keçirilmişdir. 1990-cı illərə qədər əksər praktiklər yüksək konsentrasiyalı qlükoza qəbulunu ən təhlükəsiz və ən təsirli üsul hesab edirdilər. Lakin təsir mexanizmi hələ də aydın deyil.
Hekketin işindən sonra 20-ci əsrdə az sayda klinik tədqiqat aparılmışdır. Lakin, 2000-ci illərdə yenidən maraq yaranmış və bel ağrısı [2], diz osteoartriti [3] və lateral epikondilitin [4] müalicəsi üçün proliferativ terapiyanın bir neçə uğurlu klinik sınağı başa çatdırılmışdır.
Toxumaların bərpası kök hüceyrələrinin iştirakını tələb edir. Buna görə də, yüksək konsentrasiyalı qlükoza kök hüceyrələrinin miqrasiyasına, replikasiyasına və differensiasiyasına səbəb olmalıdır. Biz fərz edirik ki, trombositlər xəbərçi rolunu oynaya bilər və yüksək qlükoza konsentrasiyaları trombositlərin sitokinləri və böyümə faktorlarını buraxmasına səbəb ola bilər və bununla da regenerativ prosesləri, xüsusən də kök hüceyrələrinin yüksək qlükoza konsentrasiyalı sahələrə miqrasiyasını təşviq edə bilər.
Trombositlərin aktivləşməsi həmişə hüceyrədaxili kalsiumun artmasından əvvəl olur [5]. Liu və digərləri 2008-ci ildə yüksək qlükoza səviyyələrinin plazma membranında keçici reseptor potensialı kanonik tip 6 (TRPC6) kanallarının aktivliyini artırdığını və bu da kalsium ionlarının trombositlərə axınına səbəb olduğunu göstərdi [6]. Başqa bir tədqiqat göstərdi ki, mikrotübül marjinal zonasının kalsium ionlarına məruz qalması marjinal zonanın relaksasiyasına, genişlənməsinə və deformasiyasına səbəb olur ki, bu da öz növbəsində diskdən sferik formaya dəyişikliyə səbəb olur və nəticədə orta trombosit həcmi (MPV) yaranır [7].
Bu tədqiqatdakı hipotezimiz ondan ibarətdir ki, trombositlərin yüksək konsentrasiyalı qlükoza məruz qalması mikrotübül marjinal zonasına və hüceyrədaxili mühitə təsir göstərir və MPV-nin artmasına səbəb olur.
Bütün iştirakçılar tədqiqatın təfərrüatları izah edildikdən və nümunələri almadan əvvəl məlumatlı razılıq formasını imzaladılar. Bu tədqiqatda yalnız hematokriti 2%-dən çox olan PRP nümunələri istifadə edilmişdir ki, müqayisə üçün eritrositlərin (eritrositlərin) sayı və qırmızı qan hüceyrələrinin orta korpuskulyar həcmi (MCV) daxil edilə bilsin.
Tədqiqat dörd mərhələdə aparılmışdır, birinci mərhələ PRP, qalan mərhələlər isə tam qan olmuşdur (Cədvəl 1). Əvvəllər təsvir edildiyi kimi [8], bütün nisbi mərkəzdənqaçma qüvvələri (RCF, g-qüvvəsi) mərkəzdənqaçma şprisindəki qan sütununun orta nöqtəsindən (Rmid, sm) hesablanmışdır. Biz MPV-ni trombosit həssaslığının markeri və potensial trombosit lizisinin göstəricisi kimi trombosit sayından istifadə etməyi seçdik, bunların hər ikisi standart hematoloji analizatorlarda asanlıqla ölçülə bilər.
Birinci mərhələdə 47 könüllü qan nümunələri bağışladı — bir boru etilendiamintetrasirkə turşusu (EDTA) və bir PRP tam qan nümunəsi (natrium sitratla (NaCl, 3%) antikoaqulyasiya olunmuş) (Cədvəl 1). Rokeri dərhal boruya yerləşdirin. EDTA nümunələrində üçqat qan analizi (CBC) aparıldı və CBC analizi üçün NaCl nümunələri üçqat analiz edildi və sonra PRP yuxarıda təsvir edilən müxtəlif üsullarla hazırlandı [8]. Bütün PRP nümunələri 900–1000 q-da santrifüqləmə yolu ilə hazırlanmışdır. Hər bir PRP nümunəsini vorteks qarışdırıcıda 5-10 saniyə qarışdırın, sonra beş 0,5 ml alikvotu borulara bölün.
Trombositlərə məruz qalmanın yüksək qlükoza konsentrasiyalarına təsirini qiymətləndirmək üçün suda bərabər miqdarda (0,5 ml) 0%, 5%, 12,5%, 25% və 50% qlükoza trombosit nümunələri ilə qarışdırılaraq qlükoza qarışığının 0%, 2,5%, 6,25%, 12,5% və 25% konsentrasiyaları əldə edildi və borular sınaq şüşəsi çalkalayıcısında 15 dəqiqə qarışdırıldı. Hər qarışığın TAC-ı 15 dəqiqədən sonra üçqat təhlil edildi. Hər boru üçün trombosit sayı (PLT), eritrosit sayı, MCV və MPV ortalaması alındı ​​və bütün PRP nümunələri üçün orta trombosit sayı, eritrosit sayı, MCV və MPV hesablandı.
Məlumat toplamasının birinci mərhələsi başa çatdıqdan sonra, D50W əlavə edildikdən sonra PRP trombositlərində trombosit həcmində əhəmiyyətli bir artım müşahidə etdik. PRP trombositləri mütləq qandakı bütün trombositləri təmsil etmir və PRP mühiti WB mühitindən fərqlənir. Buna görə də, D50W-nin tam qana əlavə edilməsinin təsirinin ikinci mərhələli sınağını aparmaq qərarına gəldik.
İkinci tur üçün, Təhlil bölməsində təsvir edildiyi kimi, birinci seriyanın nəticələrinə əsasən 30 nümunə ölçüsü seçdik. Bu seriyada 20 könüllü qan nümunələri bağışladı (Cədvəl 1). Bütöv qan (1,8 ml) 3 ml şprisə çəkildi və 0,2 ml 40% NaCl ilə antikoaqulyasiya edildi. Bütöv qan şprisi beş saniyə ərzində vorteks qarışdırıcı ilə qarışdırıldı və CBC üçqat təhlil edildi. Təhlildən sonra antikoaqulyasiya edilmiş qan 5 ml şprisdəki 2 ml 50% qlükozaya əlavə edildi (son qlükoza konsentrasiyası təxminən 25% (D25) idi və 30 dəqiqə çalxalama borusuna yerləşdirildi). 30 dəqiqədən sonra WB şprislərindəki D25/CBC üçqat təhlil edildi. Hər şpris üçün trombosit sayı, eritrosit sayı, MCV və MPV orta hesablandı və qlükoza əlavə etməzdən əvvəl və sonra hər nümunə üçün orta PLT, eritrosit sayı, MCV və MPV hesablandı.
Minimal invaziv inyeksiya səbəbindən proliferativ qlükoza terapiyası zamanı bütün qandakı trombositlər tez-tez hipertonik qlükozaya məruz qaldığından və inyeksiyadan dərhal əvvəl PRP-nin hipertonik qlükoza ilə birləşdirilməsi geniş yayılmadığından, 1-ci bölmədə WB ilə birlikdə hipertonik qlükozanı öyrənməyə qərar verdik. Üçüncü və dördüncü addımlar. Hər mərhələdə 20 könüllü qan antikoaqulyantları üçün 7-8 ml ACD-A (trisodyum sitrat (22.0 q/l), limon turşusu (8.0 q/l) və qlükoza (24.5 q/l), dekstroza sitrat məhlulu) bağışladı (Cədvəl 1). MPV-nin artması ilə əlaqəli həddi faizi təyin etmək üçün yalnız 12.5%-dən çox qlükoza qarışıqlarından istifadə edilmişdir. Üçüncü mərhələdə 1 ml qan test borusuna yerləşdirilir. Daha sonra qanı vorteks mikserində 10 saniyə qarışdıraraq, müvafiq olaraq 15%, 20% və 25% son qlükoza konsentrasiyası əldə etmək üçün boruya 1 ml 30%, 40% və ya 50% qlükoza əlavə edin. Qlükoza qan nümunələri qarışdırıldıqdan dərhal sonra qanın ümumi analizi üçün təhlil edildi və 30 dəqiqə ərzində hər iki dəqiqədən bir təkrarlandı.
İlkin qarışdırma zamanı 1:1 nisbətində hipertonik qlükoza və WB və ya PRP əlavə edilməsi trombositləri bir neçə saniyə ərzində 25%-dən yuxarı konsentrasiyalara məruz qoyur. Dördüncü addımda, minimal ilkin pik konsentrasiyaları ilə hipertonik qlükozanın təsirini qiymətləndirmək və qlükozanın təsirinin yuxarı həddini sınaqdan keçirmək üçün D25W və ya D50W-yə yalnız az miqdarda qan əlavə etdik. Bir boruya 1 ml D25W və ya D50W qoyun və nümunəni 10 saniyə qarışdıraraq 0,2 ml WB əlavə edin. Bu hallarda, qan 3-cü mərhələdəki kimi son konsentrasiyadan 50% yuxarı deyil, son konsentrasiyadan təxminən 20% yuxarı konsentrasiyada qlükozaya məruz qaldı və nəticədə son qlükoza konsentrasiyaları 20,8% və 41,6% oldu. Qarışıq nümunələr 3-cü addımdakı kimi eyni vaxt intervalında təhlil edildi.
Hər qlükoza durulaşdırma seriyasının ilk addımında 30 nümunə götürülmüşdür, çünki bu, pilot tədqiqat üçün uyğun nümunə ölçüsü idi [9]. Hər mərhələnin sonunda (birinci mərhələ daxil olmaqla), bir populyasiyada davamlı nəticə dəyişəninin orta qiymətini qiymətləndirmək üçün lazım olan nümunə ölçüsünü təyin etmək üçün istifadə edilən düsturdan istifadə edərək nümunə ölçüsünün adekvatlığını qiymətləndirin. Düstur n = Z2 x SD2 /E2. Bu tənlikdə Z Z-bal, SD standart sapma və E istənilən xətadır [10]. Alfa dəyərimiz 0,05-dir, bu da 1,96 Z dəyərinə uyğundur və 5 xəta gözləyirik (faizlə). Beləliklə, n = (1,962 x SD2)/52 üçün həll edirik. Nəticələr göstərdi ki, hər mərhələ üçün tələb olunan nümunə ölçüsü toplanan faktiki saydan kiçikdir.
Birdən çox qlükoza konsentrasiyasından istifadə edilən 1, 3 və 4-cü dövrlərdə, müxtəlif qlükoza konsentrasiyalarının təsiri 0 vaxtı ilə hər sonrakı vaxt (1-ci mərhələ 15 dəqiqədə, 3-cü dövr 15 dəqiqədə) və 15 saniyədə dörd, sonra isə hər iki dəqiqədən bir arasındakı fraksiya dəyişikliyini müqayisə etməklə təhlil edilmişdir.) Hər zaman dövrü üçün dəyişiklik nisbətləri Mann-Whitney U-testi istifadə edilərək müqayisə edilmişdir, çünki məlumatlar Şapiro-Wilk normallıq testi ilə müəyyən edilmiş normal paylanmanı izləmirdi. Birinci, üçüncü və dördüncü addımlarda (cəmi beş) bir neçə qrupun (beş) 1-dən 1-ə təhlili aparıldığından, istənilən alfa dəyərini ≤0.05 deyil, ≤0.01-ə uyğunlaşdırmaq üçün Bonferroni korreksiyası aparılmışdır.
>12.5% ​​dekstroz konsentrasiyasında PRP trombositlərində hipertonik dekstrozun bütün konsentrasiyaları ilə trombosit sayının azalması və MPV-nin artması: PRP trombosit sayı metoddan asılı olaraq dəyişən ilkin qan konsentrasiyasının birdən beş qatına qədər artmışdır (təsvir olunmayıb). >12.5% ​​​​dekstroz konsentrasiyasında PRP trombositlərində hipertonik dekstrozun bütün konsentrasiyalarında trombosit sayının azalması və MPV-nin artması: PRP trombosit sayı metoddan asılı olaraq dəyişən ilkin qan konsentrasiyasının bir qatından beş qatına qədər artmışdır (təsvir olunmayıb). Hüceyrələrin yığılması üçün bütün trombositlər və MPV-də trombositlər PRP əməliyyatları üçün > 12,5%: 1-5-ci mərhələdən 1-5-ə qədər qan təzyiqinə məruz qalır. Bütün hipertonik dekstroz konsentrasiyalarında trombosit sayının azalması və >12.5% ​​​​dekstroz konsentrasiyasında PRP trombositlərində MPV-nin artması: Metoddan asılı olaraq (göstərilməyib) PRP trombosit sayı ilkin qanla müqayisədə 1-5 dəfə artmışdır. ).在> 12.5% ​​的葡萄糖浓度下，所有浓度的高渗葡萄糖降低血小板计数，PRP 血下V增加：与基线全血相比，PRP 血小板计数从浓度的1 倍上升到5 倍，因方泂＂（而 >12.5% ​​​​qlükoza konsentrasiyasında yüksək qlükoza konsentrasiyası qan sayını azaldır, PRP qan MPV artır: 与基线全血 ilə müqayisədə PRP qan sayı konsentrasiyanın 1-dən 5 dəfəsinə qədər artır (təsvir olunmayıb). Prikoliyah glyukozları >12,5% bütün mərkəzi idarə olunan hipertoniches qlyukozları snijali kolichestvo trombositov, a MPV povyshali on trombositax PRP: 1-dən 5-kratlı metodların saxlanması üçün sravneniyu əməliyyatı, cəmləşdirici cəmləşməni aradan qaldırır. ). Qlükoza konsentrasiyaları >12,5%-də bütün hipertonik qlükoza konsentrasiyaları PRP trombositlərində trombosit sayını azaltmış və MPV-ni artırmışdır: PRP trombosit sayı metoddan asılı olaraq (təsvir edildiyi kimi) ilkin qan konsentrasiyaları ilə müqayisədə 1-5 dəfə artmışdır.Şəkil 1 göstərir ki, trombositlərin sayı suda durulaşdırıldıqdan sonra təxminən 75%, müxtəlif konsentrasiyalı qlükoza ilə 15 dəqiqə durulaşdırıldıqdan sonra isə baza PRP və həcmə görə tənzimlənmiş 1:1 durulaşdırma (həcm korreksiyası ilə 1- k1) ilə müqayisədə 20-30% azalıb. k -1 yetişdirmə).1 yetişdirmə).
Hər durulaşdırmadakı hüceyrələrin sayı durulaşdırmadan əvvəlki orijinal sayın bir hissəsi kimi ifadə olunur.
MPV, suda və ya qlükozada (25% PRP qlükoza qarışıqları daxil olmaqla) durulaşdırma konsentrasiyalarında 12,5%-ə qədər dəyişiklik olmadan PRP istehsalı zamanı minimal dərəcədə azalmış və 50% qlükoza məhlulunda durulaşdırıldıqdan sonra 20%-dən çox artmışdır (Şəkil .2). Əksinə, eritrositlər H2O xaricində heç bir durulaşdırmada həcmdə əhəmiyyətli bir dəyişiklik göstərməmişdir.
Hər durulaşdırmada hüceyrələrin orta həcmi durulaşdırmadan əvvəlki orijinal həcmin faizi kimi ifadə olunur.
50% qlükozaya məruz qalan BC-də (25% qlükoza ilə formulasiya etmək üçün) trombosit sayında oxşar, lakin daha az nəzərə çarpan azalma və CVR-də artım müşahidə edilmişdir. Cədvəl 2-də 50% dekstrozda durulaşdırılmış qanda hüceyrə sayıları və hüceyrə həcmləri 50% dekstrozda durulaşdırılmış 1-ci faza PRP məlumatları ilə müqayisə edilir. RBC sayında və RBC MCV-də dəyişikliklər aşkar deyildi və diqqətimizin mərkəzində deyildi.
SD = standart sapma, MD = qruplar arasında orta fərq, SE = orta fərqin standart sapması, RBC = eritrositlər, PLT = trombositlər, PRP = trombositlərlə zəngin plazma, WB = tam qan
D50W WB-yə əlavə edildikdən sonra, faizlə seyreltmə ilə tənzimlənən trombosit itkisi D50W-də PRP seyreltməsində 17,8% (664±348 vs. 544±277) ilə müqayisədə 7,7% (310±73 vs. 286±96) təşkil etmişdir. MPV WB 16,8% artmışdır (10,1 ± 0,5-dən 11,8 ± 0,6-ya qədər), MPV PRP isə 26% artmışdır (9,2 ± 0,8 vs. 11,6 ± 0,7). PRP ilə həm trombosit sayının azalması, həm də MPV artımındakı orta fərqlər əhəmiyyətli dərəcədə daha çox olsa da, WB daxilində trombosit sayının azalmasında dəyişikliklər demək olar ki, əhəmiyyətli idi (310 ± 73 - 286 ± 96 (-7.7%); p = .06) və MPV-də artım əhəmiyyətli idi (10.1 ± 0.5 - 11.8 ± 0.6 (+16.8) p < .001). PRP ilə həm trombosit sayının azalması, həm də MPV artımındakı orta fərqlər əhəmiyyətli dərəcədə daha çox olsa da, WB daxilində trombosit sayının azalmasında dəyişikliklər demək olar ki, əhəmiyyətli idi (310 ± 73 - 286 ± 96 (-7.7%); p = .06) və MPV-də artım əhəmiyyətli idi (10.1 ± 0.5 - 11.8 ± 0.6 (+16.8) p < .001).PRP ilə həm trombosit sayının azalması, həm də CVR artımındakı orta fərqlər əhəmiyyətli dərəcədə daha böyük olsa da, WB daxilində trombosit sayının azalmasında dəyişikliklər demək olar ki, əhəmiyyətli idi (310 ± 73 ilə 286 ± 96 (-7.7%); p = 0.06).увеличение MPV - dan 10,1 ± 0,5 ilə 11,8 ± 0,6 (+16,8) p < 0,001). MPV-də artım əhəmiyyətli idi (10.1 ± 0.5-dən 11.8 ± 0.6-ya (+16.8) p < 0.001-ə qədər).尽管PRP 在血小板计数减少和MPV 增加方面的平均差异显着更大，但WB内血小板计数减少的变化几乎是显着的（310 ± 73 至286 ± 96 (-7,7%)；p = .06）和MPV的增加是显着的（10,1 ± 0,5 到11,8 ± 0,6 (+16,8) p < .001）。尽管 PRP 在 血小板 计数 和 和 增加 方面 的 平均 差异 显着 大 ， 但 杀 大 ， 但 杕 内减少 的 几乎 是 显着 的 （（（310 ± 73 至 286 ± 96 (-7.7%) ； p = .06）和MPV 的墀是 的墀是. ± 0,5 到11,8 ± 0,6 (+16,8) p < ,001）。WB daxilində trombosit sayının azalmasında dəyişiklik demək olar ki, əhəmiyyətli idi (310 ± 73-dən 286 ± 96-ya (-7.7%); p = 0.06), baxmayaraq ki, PRP trombosit sayının azalması və MPV artımında əhəmiyyətli dərəcədə daha böyük orta fərqlərə malik idi və MPV artımı əhəmiyyətli idi.(от 10,1 ± 0,5 ilə 11,8 ± 0,6 (+16,8) р < 0,001). (10.1 ± 0.5-dən 11.8 ± 0.6-ya (+16.8) p < 0.001-ə qədər).
MPV-də əhəmiyyətli bir dəyişiklik görmək üçün 20% qlükoza konsentrasiyası tələb olunurdu, lakin MPV-də dəyişiklik 25% son konsentrasiyada daha çox nəzərə çarpırdı. İlkin azalmadan sonra trombosit itkisi sabitləşdi. CVR-də ilkin kəskin azalma müşahidə etdik, lakin CVR 25% son qlükoza konsentrasiyasında sürətlə bərpa olundu ki, bu da 20% və 15% son qlükoza konsentrasiyalarında müşahidə edilən CVR səviyyələrindən xeyli yüksək idi (Şəkil 3 və Cədvəl 3-ün solunda; kölgəli qutular). p-dəyərlərini ≤ alfa ilə göstərir, Bonferroni korreksiyası 0,01). PLT sayında da ilkin kəskin azalma müşahidə edildi, 0-15 saniyəlik ilkin fazada müşahidə edildi və sonra sabit qaldı (15 saniyədən 30 dəqiqəyə qədər; cədvəl 4-ün solunda).
Müxtəlif konsentrasiyalı qlükozaların bütün qana əlavə edilməsi MPV-nin əvvəlcə sürətli azalmasına, ardınca isə konsentrasiyadan asılı olaraq 20%-dən çox bərpa olunmasına səbəb oldu. Əfsanə durulaşdırmadan sonra qlükoza konsentrasiyasını göstərir. D15, D20 və D25 1:1 durulaşdırmada, D21 və D41 isə 1:5 durulaşdırmada aparıldı.
Cədvəl 4-də hipertonik qlükozada durulaşdırıldıqda trombosit sayının dəyişməsi göstərilir. 1:1 durulaşdırmada və 1:5 durulaşdırmada PLT sayının dərhal düşməsi arasında dozadan asılı əlaqə müşahidə etdik. Tək bir qrup olaraq 1:1 durulaşdırmaları 1:5 durulaşdırmalarla müqayisə etdikdə, 1:1 qrupunda trombosit sayında 1:5 qrupundakı 66±48.000 (23%) ilə müqayisədə 1:5 qrupundakı 99±69.000 (37%) ilə müqayisədə dərhal azalma müşahidə edildi. , p = 0.014). İlk ölçmə nöqtəsində ilkin azalmadan sonra qlükozanın faizi kimi trombosit sayı sabitləşdi (Şəkil 4).
Tam qan qlükozaya 1:1 nisbətində əlavə edildikdə, trombositlərin sayı təxminən 25% azalır. Lakin, tam qan 1:5 nisbətində əlavə edildikdə, azalma daha çox - təxminən 50% olmuşdur.
41% qlükoza MPV-ni 25% və ya 21% -dən daha sürətli və daha kəskin şəkildə artırdı. MPV nəticələri Şəkil 3-də göstərilmişdir. Bütün digər durulaşdırmalarda 50% qlükoza əlavə edildikdən sonra MPV-də dərhal ilkin azalma müşahidə edilməmişdir. 25% qlükoza istifadə edildikdə (son durulaşdırmada qlükoza konsentrasiyası 20,8%), MPV-dəki dəyişiklik 1:1 durulaşdırmada 20% qlükozadakı dəyişikliklə müqayisə edilə bilərdi (Şəkil 3). MPV-dəki dəyişikliklər əvvəlcə 41% qarışıq konsentrasiyada 25%-dən daha böyük olsa da, 16 dəqiqədən sonra 41% ilə 25% arasındakı MPV fərqi artıq əhəmiyyətli deyildi (Cədvəl 3, sağda). Həmçinin maraqlıdır ki, 25% qlükoza MPV-ni 20,8%-dən daha təsirli şəkildə artırdı.
Bu in vitro tədqiqat hipotezimizi qismən təsdiqlədi. Dekstroz qarışığı ilə potensial qismən trombosit lizisi, trombositlərin həddindən artıq hipertonikliyə qədər sürətli yerləşməsi və hipertonik dekstrozun >25% konsentrasiyasına cavab olaraq MPV-də əhəmiyyətli dərəcədə artım müşahidə edilmişdir. Dekstroz qarışığı ilə potensial qismən trombosit lizisi, trombositlərin həddindən artıq hipertonikliyə qədər sürətli yerləşməsi və hipertonik dekstrozun >25% konsentrasiyasına cavab olaraq MPV-də əhəmiyyətli dərəcədə artım müşahidə edilmişdir. O, potensial potensial çastiçlı lizis trombositləri qıcıqlandırır, həddindən artıq akkomodatsiyu trombositlərə və ekstremal hipertonuslara səbəb olur və MPV-yə cavab verən hipertonik trombositlər > 25%. Dekstrozla potensial qismən trombosit lizisi, trombositlərin sürətli yerləşməsinin həddindən artıq hipertonikliyə qədər və hipertonik dekstroz səviyyələrinin >25%-ə cavab olaraq MPV-də əhəmiyyətli dərəcədə artım müşahidə edilmişdir.它显示出通过葡萄糖混合物潜在的部分血小板溶解，血小板快速适应极端高渗，以及响应> 25% 浓度的高渗葡萄糖时MPV 显着上升。它 显示 出 通过 葡萄糖 潜在 的 部分 血小板 溶解 血小板 快速 适应 快速 适应 极天响应> 25% 浓度 高渗 葡萄糖 时 时 mpv 显着。。。。。 O, potensial çatışan liziz trombositləri ilə qlükozlar, sürətli adaptasiya trombositləri və ekstremal hipertonusu və yüksək təsirli MPV ilə cavabdeh olan hipertonik qlükozları > 25% azaldır. Bu, qlükoza qarışıqları tərəfindən potensial qismən trombosit lizisini, trombositlərin həddindən artıq hipertonikliyə sürətli adaptasiyasını və hipertonik qlükoza >25%-ə cavab olaraq MPV-də əhəmiyyətli dərəcədə artımı göstərir.İlkin artım 41,6% qlükoza məruz qalmasında maksimum olub, lakin MPV-də artım məruz qalmadan təxminən 20 dəqiqə sonra 25% qlükoza məruz qalmasına yaxınlaşıb.
Trombositlərin konsentrasiyası qlükozadan təsirlənir. Biz qlükozanın bütün durulaşdırılmasında PLT miqdarının azaldığını müşahidə etdik. PRP seriyasının H2O (0%) durulaşdırılmasında trombositlərin sayının kəskin azalması osmotik lizislə əlaqələndirilə bilər. Alternativ olaraq, bu, trombositlərin toplaşmasının yaratdığı artefakt ola bilər, lakin bu, bu durulaşdırmada MPV dəyişikliyinin olmaması ilə ziddiyyət təşkil edir. Bu tapıntı o deməkdir ki, bəzi trombositlər hipoosmolyarlığa çox həssasdır.
Qlükozanın bütün 1:1 durulaşdırılmasında PLT miqdarı hətta D5W (252 mOsm-də hipotonik) səviyyəsində belə 20-30% azalıb ki, bu da qlükozanın spesifik qeyri-osmotik təsirini göstərə bilər, çünki həm PLT, həm də MPV konsentrasiyanın üçqat artmasında dəyişməz qalıb. qlükoza. D5W-dən D25W-yə qədər. Əslində, PLT konsentrasiyaları osmolyarlıq artdıqca bir qədər artmağa meyllidir.
PLT-nin 1:1 və 1:5 nisbətində durulaşdırmalar arasında azalması o deməkdir ki, həllolma effekti ilkin və son qlükoza konsentrasiyasından asılıdır. Əgər bu, yalnız ilkin konsentrasiyadan asılı olsaydı, onda 1:1 konsentrasiyaları arasında PLT azalmasında fərq gözləmək olardı. Amma biz bunu gözləmirik. Əgər lizis effekti yalnız son qlükoza konsentrasiyasından asılıdırsa, onda 20% 1:1 durulaşdırma ilə 20,8% 1:5 durulaşdırma arasında çox fərq gözləmirik. Və yenə də biz bunu etdik.
Əgər trombosit itkisi trombosit lizisi səbəbindən baş verərsə, qismən lizat əmələ gəlir və bundan sonra sitokinlər və böyümə faktorları hüceyrədənkənar mühitə buraxılır. Bir neçə tədqiqat göstərib ki, trombosit lizatı proliferasiya məhlulu kimi PRP qədər təsirlidir [11]. PRP-nin özünün proliferasiyanın müalicəsi üçün təsirli bir həll olduğu göstərilib [12-14].
Aktiv olmayan trombositlər bir neçə daxili strukturla möhkəmləndirilmiş disk şəklində dövran edirlər. Aktivləşmə zamanı onlar daha sferik və ya amöb forması alır və nəticədə həcm artır. Həcmin artması səth sahəsinin artmasını tələb edir ki, bu da açıq boru sisteminin (OCS) ekstruziyası və membrana ekzosit qranullarının əlavə edilməsinin nəticəsidir. Hipertonik qlükoza tərəfindən induksiya edilən MPV artımının bu mexanizmlərdən birini və ya hər ikisini əhatə edib-etmədiyi hələ müəyyən edilməmişdir, lakin əgər sonuncudursa, MPV-nin artması deqranulyasiyanı göstərər.
Bu tədqiqat göstərdi ki, PRP və ya tam qan trombositlərində yüksək konsentrasiyalı qlükoza qəbulu 15 dəqiqə ərzində MPV-nin artmasına və müvafiq olaraq 25% və 41,6% qlükoza konsentrasiyasının artmasına səbəb olur.
Trombosit MPV-nin artması, kalsium axınına cavab olaraq ətrafdakı mikrotübül dolaşıqlarının genişlənməsi ilə əlaqəli ola bilər. Liu və digərləri. Qlükozanın trombosit TRPC6 kanalı vasitəsilə kalsium axınını vasitəçilik etdiyi göstərilmişdir [6]. Bizim hipotezimiz budur ki, qlükoza mikrotübül dolaşıqlarının relaksasiyasına səbəb olur və bu da MPV-nin artmasına və trombosit həssaslığına və/və ya aktivləşməsinə səbəb olur. Lakin, nəticələrimizə əsasən, bu, hekayənin yalnız bir hissəsidir. Testlərimizdə D25W-dən aşağı heç bir konsentrasiya MPV-nin artmasına səbəb olmadı. 12,5% ilə 25% arasında qlükoza konsentrasiyalarına məruz qalma testini aparmadığımızı nəzərə alsaq, 1-ci mərhələ nəticələrimiz göstərir ki, bu qlükoza konsentrasiyaları diapazonunda MPV-nin artmasına səbəb olan bir eşik ola bilər. 3-cü və 4-cü mərhələlərdə aparılan əlavə testlər göstərdi ki, 20-25% qlükoza bunun üçün eşik kimi görünür, lakin niyə olduğu hələ də məlum deyil.
Həmçinin, santrifüqdən sonra MPV-də təxminən 9% azalma müşahidə etdik. MPV-də bu azalmanın santrifüqənin eritrosit təbəqəsində ilişib qalmış daha böyük və daha sıx trombositlərdən qaynaqlanıb-keçmədiyi aydın deyil. Bu müşahidə klinisyenlər üçün vacib ola bilər, çünki PRP trombositlərinin WB trombositlərinin daha kiçik və daha az sıx bir alt qrupu olduğunu göstərə bilər.
Əvvəlki bir araşdırmada, əl ilə PRP hazırlanmasının ucuz olduğunu göstərmişdik [8]. Əgər qlükoza toxuma trombositlərini və ya PRP-ni həssaslaşdırırsa, onları aktivləşməyə daha həssas edirsə və ya PRP qismən lizat xüsusiyyətləri ilə istehsal olunursa, bu, regenerasiyanı gücləndirə və terapiyaya ehtiyacı azalda bilər. Buna görə də, PRP və yüksək konsentrasiyalı qlükozanın kombinasiyası PRP və ya tək başına qlükozadan daha səmərəli ola bilər.
Tədqiqatımızın bir neçə çatışmazlığı var. Birincisi, biz bir neçə fərqli metoddan əldə edilən PRP-dən istifadə edirik. Bu, ziddiyyətli nəticələrə səbəb ola bilər. İkincisi, trombosit aktivləşməsinin baş verib-vermədiyini daha dəqiq müəyyən etmək üçün nümunələrimizin heç birinin biokimyəvi analizini apara bilmədik. Alfa qranul deqranulyasiyasının dərəcəsini və ya mövcudluğunu daha yaxşı başa düşmək üçün P-selektin, trombosit faktoru 4, monosit trombosit aqreqatları və ya trombosit aktivləşməsinin digər markerlərini ölçmək istərdik, lakin bu, bu tədqiqatın əhatə dairəsindən kənardır. Üçüncüsü, qlükozaya məruz qalan trombositlərdə MPV-nin artmasının mikrotübül dolaşıqlarına təsirindən qaynaqlandığını elektron mikroskopiya və ya digər üsullarla təsdiq edə bilmədik.
25% qlükoza ilə WB və ya PRP qarışıqları MPV-ni artırdı və bu da trombosit aktivləşməsinin başlanğıcını göstərir, baxmayaraq ki, bu tədqiqat aqreqasiya və ya deqranulyasiyanın irəliləməsini göstərmədi. Hipertonik qlükoza qarışığı trombosit itkisinə səbəb oldu ki, bu da, ehtimal ki, litik təsir göstərir. Trombositlərin qismən aktivləşməsi və ya lizisi trombosit inyeksiyasından sonra toxuma regenerasiyasına səbəb ola bilər. Bu dəyişikliklərin hansı klinik nəticələrə səbəb ola biləcəyi aydın deyil. Əlavə tədqiqatlar aktivləşmə və ya lizisin daha dəqiq ölçmələrini nümayiş etdirdi və WB və ya PRP ilə hipertonik qlükoza qarışıqlarının müxtəlif klinik təsirlərini qiymətləndirdi.
Qlükoza proliferativ terapiyası, sürətlə genişlənən və klinik tədqiqatları dəstəkləyən sadə və ucuz bir regenerativ terapiyadır. Bu tədqiqat, təsdiqlənərsə, proliferativ terapiyanın regenerativ mexanizminin bir hissəsini anlamağımıza kömək edə biləcək bir fizioloji mexanizm təklif edir.
ABŞ-ın Kanzas-Siti şəhərindəki Missuri Universitetinin Biotibbi və Sağlamlıq İnformatikası fakültəsi, Kanzas-Siti Tibb Məktəbi
İnsanlar: Bu tədqiqatın bütün iştirakçıları razılıq verib və ya verməyiblər. Beynəlxalq Hüceyrə Təbabəti Cəmiyyəti ICMS-2017-003 təsdiqini verib. Aşağıdakı protokol Beynəlxalq Hüceyrə Təbabəti Cəmiyyətinin İnstitusional İcmal Şurası tərəfindən sonrakı istifadə üçün təsdiq edilib: Başlıq: İlkin CBC trombosit sayına əsasən trombositlərlə zəngin plazma dərman məhsuldarlığının hesablanması. Heyvanlar: Bütün müəlliflər bu tədqiqatda heç bir heyvan və ya toxumanın iştirak etmədiyini təsdiqləyiblər. Maraqların Toqquşması: ICMJE Vahid Açıqlama Formasına uyğun olaraq, bütün müəlliflər aşağıdakıları bəyan edirlər: Ödəniş/xidmət məlumatı: Bütün müəlliflər təqdim olunmuş iş üçün heç bir təşkilatdan maliyyə dəstəyi almadıqlarını bəyan edirlər. Maliyyə münasibətləri: Bütün müəlliflər təqdim olunmuş işdə maraqlı ola biləcək heç bir təşkilatla hazırda və ya son üç il ərzində maliyyə münasibətləri olmadığını bəyan edirlər. Digər münasibətlər: Bütün müəlliflər təqdim olunmuş işə təsir edə biləcək heç bir başqa münasibət və ya fəaliyyət olmadığını bəyan edirlər.
Harrison TE, Bowler J, Reeves K və b. (17 may 2022) Qlükozanın trombosit sayına və həcminə təsiri: regenerativ tibb üçün nəticələr. Cure 14(5): e25081. doi:10.7759/cureus.25081
© Müəllif hüquqları 2022 Harrison və digərləri. Bu, Creative Commons Attribution Lisenziyası CC-BY 4.0 şərtləri altında paylanan açıq girişli məqalədir. Orijinal müəllif və mənbə göstərilmək şərti ilə istənilən mediada məhdudiyyətsiz istifadəyə, yayılmaya və çoxaldılmaya icazə verilir.