"사려 깊고 헌신적인 시민들로 구성된 작은 집단이 세상을 바꿀 수 있다는 사실을 절대 의심하지 마십시오. 사실, 세상에는 그들만이 존재합니다."
Cureus의 사명은 연구 논문 제출이 비용이 많이 들고, 복잡하고, 시간이 많이 걸리는 의학 출판의 오랜 모델을 바꾸는 것입니다.
혈소판이 풍부한 혈장/PRP, 조직 재생, 혈소판 활성화, 포도당 증식 치료, 혈소판, 증식 치료
이 논문을 다음과 같이 인용합니다: Harrison TE, Bowler J, Reeves K 외 (2022년 5월 17일) 포도당이 혈소판 수와 용적에 미치는 영향: 재생 의학에 대한 함의. Cure 14(5): e25081. doi:10.7759/cureus.25081
혈소판 풍부 혈장(PRP)과 고장성 포도당 용액은 재생 의학 주사에 흔히 사용되며, 때로는 함께 사용하기도 합니다. 고장성 포도당이 혈소판 용해 및 활성화에 미치는 영향은 이전에 보고된 바 없습니다. 본 연구에서는 고농도 포도당이 혈소판 및 적혈구 수, 그리고 PRP와 전혈(WB)의 세포 용적에 미치는 영향을 시험했습니다. PRP 또는 전혈과 혼합된 모든 포도당 혼합물에서 혈소판 수가 빠르게 부분적으로 감소했으며, 이는 부분 용해와 일치합니다. 첫 번째 분 이후에도 혈소판 수치는 안정적으로 유지되었는데, 이는 잔류 혈소판이 극도의(>2000 mOsm) 고장성에 빠르게 적응했음을 시사합니다. 첫 번째 분 이후에도 혈소판 수치는 안정적으로 유지되었는데, 이는 잔류 혈소판이 극도의(>2000 mOsm) 고장성에 빠르게 적응했음을 시사합니다. После первой минуты количество тромбоцитов оставалось стабильным, что указывает на быструу аккомодация остаточных тромбоцитов до экстремального (>2000mm) гипертонуса. 첫 번째 분 후, 혈소판 수치는 안정적으로 유지되었는데, 이는 잔류 혈소판이 극도의(>2000 mOsm) 고장성에 빠르게 적응했음을 나타냅니다.第一分钟后, 血small板计数保持稳定, 表明残余血small板迅速适应极端（> 2000 mOsm） 高渗状态.2000mOsm) 높은 발열량. После первой minуты количество тромбоцитов оставалось стабильным, что указывает на быструу адаптация остаточных тромбоцитов к экстремальному (>2000 мОсм) гиперосмолярному состояниу. 첫 번째 분 이후에도 혈소판 수치는 안정적으로 유지되었는데, 이는 잔류 혈소판이 극한(>2000 mOsm) 고삼투압 상태로 빠르게 적응했음을 나타냅니다.25% 이상의 포도당 농도는 평균 혈소판 용적(MPV)의 유의미한 증가를 초래하여 혈소판 활성화의 초기 단계를 시사합니다. 혈소판 용해 또는 활성화가 발생하는지, 그리고 고장성 포도당 주사 단독 또는 PRP와 병용 투여가 추가적인 임상적 이점을 제공할 수 있는지 확인하기 위해서는 추가 연구가 필요합니다.
1950년대, 미국의 외과의사 조지 해킷은 힘줄과 인대에 증식성 용액을 주입하여 많은 환자의 관절 및 허리 통증을 영구적으로 완화할 수 있다는 것을 발견했습니다. 그는 토끼를 대상으로 한 실험에서 증식 요법이라고 명명한 이 치료법이 힘줄을 확장하고 강화하는 것을 확인했습니다. 조직학적 연구를 통해 이 과정에서 새로운 콜라겐이 생성된다는 것이 확인되었습니다[1].
처음 수십 년 동안 다양한 분배 솔루션이 시도되었습니다. 1990년대에 이르러 대부분의 의사들은 고농도의 포도당을 가장 안전하고 효과적인 방법으로 여겼습니다. 그러나 그 작용 기전은 아직 불분명합니다.
Hackett의 연구 이후 20세기에는 임상 연구가 거의 수행되지 않았습니다. 그러나 2000년대에 들어 증식 치료에 대한 관심이 다시 높아졌고, 요통[2], 무릎 골관절염[3], 외측 상과염[4] 치료를 위한 증식 치료에 대한 여러 임상 시험이 성공적으로 완료되었습니다.
조직 재생에는 줄기세포의 참여가 필수적입니다. 따라서 고농도의 포도당은 줄기세포의 이동, 복제, 그리고 분화를 어떻게든 유도해야 합니다. 혈소판이 전달자 역할을 할 수 있으며, 고농도의 포도당은 혈소판에서 사이토카인과 성장인자를 분비하게 하여 재생 과정, 특히 포도당 농도가 높은 부위로의 줄기세포 이동을 촉진할 수 있다는 가설을 세웠습니다.
혈소판 활성화는 항상 세포 내 칼슘 증가에 선행합니다[5]. Liu 등은 2008년에 고혈당 수치가 세포막의 TRPC6(transient receptor potential canonical type 6) 채널의 활성을 증가시켜 혈소판으로 칼슘 이온이 유입됨을 보였습니다[6]. 또 다른 연구에서는 미세소관 변연대가 칼슘 이온에 노출되면 변연대가 이완, 팽창, 변형되어 원반 모양에서 구형으로 변하고, 이로 인해 평균 혈소판 용적(MPV)이 증가한다는 것을 보여주었습니다[7].
이 연구에서 우리의 가설은 혈소판을 고농도의 포도당에 노출시키면 미세소관 변연부와 세포 내 환경에 영향을 미쳐 MPV가 증가한다는 것입니다.
모든 참가자는 연구 세부 사항에 대한 설명을 듣고 샘플을 받기 전에 사전 동의서에 서명했습니다. 본 연구에서는 적혈구 수와 평균 적혈구 용적(MCV)을 비교 대상으로 포함하기 위해 헤마토크릿 수치가 2% 이상인 PRP 샘플만 사용했습니다.
이 연구는 4단계로 진행되었으며, 첫 번째 단계는 PRP였고 나머지 단계는 전혈이었습니다(표 1). 이전에 설명한 바와 같이[8], 모든 상대 원심력(RCF, g-force)은 원심 주사기 내 혈액 컬럼의 중간점(Rmid, cm)에서 계산되었습니다. 본 연구에서는 혈소판 감작 지표로 MPV를, 잠재적 혈소판 용해 지표로 혈소판 수를 선택했습니다. 두 지표 모두 표준 혈액 분석기에서 쉽게 측정할 수 있습니다.
첫 번째 단계에서는 47명의 자원봉사자가 혈액 샘플을 기증했습니다.에틸렌디아민테트라아세트산(EDTA) 한 튜브와 PRP 전혈 샘플 한 개(구연산나트륨(NaCl, 3%)으로 항응고 처리)입니다(표 1). 로커를 튜브에 즉시 넣습니다. EDTA 샘플에 대해 3회 반복하여 완전 혈구 측정(CBC)을 수행했고, CBC 분석을 위해 NaCl 샘플에 대해 3회 반복하여 분석한 다음 PRP는 위에 설명된 다양한 방법으로 준비했습니다[8]. 모든 PRP 샘플은 900~1000g에서 원심분리하여 준비했습니다. 각 PRP 샘플을 5~10초 동안 볼텍스 믹서에서 혼합한 다음 0.5ml씩 5개 튜브에 나눕니다.
혈소판 노출이 포도당 농도 상승에 미치는 영향을 평가하기 위해, 물에 녹인 0%, 5%, 12.5%, 25%, 50% 포도당 용액을 0.5ml씩 혈소판 시료와 혼합하여 0%, 2.5%, 6.25%, 12.5%, 25% 농도의 포도당 혼합물을 만들고, 시험관 진탕기에서 15분간 혼합하였다. 각 혼합물의 총활성농도(TAC)는 15분 후 3회 반복 분석하였다. 각 시험관의 혈소판 수(PLT), 적혈구 수, MCV, MPV의 평균을 구하고, 모든 PRP 시료의 평균 혈소판 수, 적혈구 수, MCV, MPV를 계산하였다.
1단계 데이터 수집이 완료된 후, D50W를 첨가한 후 PRP 혈소판의 혈소판 양이 유의미하게 증가하는 것을 확인했습니다. PRP 혈소판이 혈액 내 모든 혈소판을 대표하는 것은 아니며, PRP 배지는 WB 배지와 다릅니다. 따라서 전혈에 D50W를 첨가했을 때의 효과에 대한 2단계 임상시험을 진행하기로 결정했습니다.
두 번째 라운드의 경우 분석 섹션에서 설명한 대로 첫 번째 시리즈의 결과를 기반으로 30의 샘플 크기를 선택했습니다. 이 시리즈에서 20명의 자원봉사자가 혈액 샘플을 기증했습니다(표 1). 전혈(1.8ml)을 3ml 주사기로 채취하고 0.2ml 40% NaCl로 항응고시켰습니다. 전혈 주사기를 보텍스 믹서로 5초 동안 혼합하고 CBC를 3회 반복해서 분석했습니다. 분석 후, 항응고된 혈액을 5ml 주사기에 있는 50% 포도당 2ml에 첨가하고(최종 포도당 농도는 약 25%(D25)) 30분 동안 쉐이크 튜브에 두었습니다. 30분 후, WB 주사기의 D25/CBC를 3회 반복해서 분석했습니다. 주사기당 혈소판 수, 적혈구 수, MCV 및 MPV를 평균화하고 포도당을 첨가하기 전과 후에 각 샘플의 평균 PLT, 적혈구 수, MCV 및 MPV를 계산했습니다.
전혈의 혈소판은 최소 침습 주사로 인한 증식성 포도당 치료 동안 고장성 포도당에 노출되는 경우가 흔하고, 주사 직전에 고장성 포도당과 PRP를 병용하는 것이 일반적이지 않기 때문에, 1절의 3단계와 4단계에서 고장성 포도당과 WB를 병용하여 연구하기로 결정했습니다. 각 단계에서 20명의 자원 봉사자가 혈액 항응고제(표 1)를 위해 ACD-A(트리소듐 시트레이트(22.0 g/l), 구연산(8.0 g/l) 및 포도당(24.5 g/l)을 함유한 산, 덱스트로스 시트레이트 용액) 7-8 ml를 기증했습니다. MPV 증가와 관련된 역치 백분율을 결정하기 위해 12.5% ​​이상의 포도당 혼합물만 사용되었습니다. 세 번째 단계에서 1 ml의 혈액을 시험관에 넣습니다. 그런 다음, 30% 포도당, 40% 포도당 또는 50% 포도당 용액 1ml를 튜브에 넣고 10초 동안 볼텍스 믹서로 혈액을 혼합하여 최종 포도당 농도가 각각 15%, 20%, 25%가 되도록 합니다. 혼합 직후 포도당 혈액 샘플을 CBC로 분석하고 30분 동안 2분 간격으로 반복합니다.
초기 혼합 과정에서 고장성 포도당과 백혈구(WB) 또는 혈소판 응집소(PRP)를 1:1 비율로 첨가하면 혈소판이 수 초 동안 25% 이상의 농도에 노출됩니다. 네 번째 단계에서는 초기 피크 농도가 최소인 고장성 포도당의 효과를 평가하고 포도당 효과의 상한을 시험하기 위해 D25W 또는 D50W에 소량의 혈액만 첨가했습니다. D25W 또는 D50W 1ml를 튜브에 넣고 백혈구(WB) 0.2ml를 첨가하면서 10초 동안 샘플을 볼텍싱했습니다. 이 경우, 혈액은 최종 농도의 약 20% 높은 농도의 포도당에 노출되었는데, 이는 3단계에서처럼 최종 농도의 50%를 초과하는 농도가 아니었습니다. 결과적으로 최종 포도당 농도는 각각 20.8%와 41.6%였습니다. 혼합된 샘플은 3단계와 동일한 시간 간격으로 분석했습니다.
각 포도당 희석 시리즈의 첫 번째 단계에서 30개의 샘플을 채취했는데, 이는 파일럿 연구에 적합한 샘플 크기였습니다[9]. 각 단계(첫 번째 단계 포함)가 끝나면 한 모집단에서 연속형 결과 변수의 평균을 추정하는 데 필요한 샘플 크기를 결정하는 데 사용된 공식을 사용하여 샘플 크기의 적절성을 평가합니다. 공식 n = Z² x SD² /E². 이 방정식에서 Z는 Z-점수, SD는 표준 편차, E는 원하는 오차입니다[10]. 알파는 0.05로 Z 값 1.96에 해당하며 오차는 5(백분율)로 예상됩니다. 따라서 n = (1.962 x SD²)/52로 풉니다. 결과는 각 단계에 필요한 샘플 크기가 실제로 수집된 수보다 작았음을 보여주었습니다.
기간 1, 3 및 4 동안 두 가지 이상의 포도당 농도를 사용하여 시간 0과 이후 각 시간(단계 1은 15분, 기간 3은 15분) 사이의 분수 변화를 비교하여 다른 포도당 농도의 효과를 분석했습니다. 그리고 4개는 15초, 그 후 2분마다.) 각 기간의 변화율은 Shapiro-Wilk 정규성 검정에서 결정된 대로 데이터가 정규 분포를 따르지 않았기 때문에 Mann-Whitney U-검정을 사용하여 비교했습니다. 1, 3 및 4 단계(총 5개)에서 여러 그룹(5개)에 대한 1:1 분석이 수행되었으므로 Bonferroni 수정을 수행하여 원하는 알파 값을 ≤0.01로 조정했지만 ≤0.05는 조정하지 않았습니다.
고장성 포도당의 모든 농도에서 혈소판 수가 감소하고 포도당 농도가 12.5% ​​이상일 때 PRP 혈소판의 MPV가 증가합니다. PRP 혈소판 수는 기준 전혈과 비교하여 농도가 1배에서 5배로 증가했으며, 이는 방법에 따라 다릅니다(그림에 표시되지 않음). 고장성 포도당의 모든 농도에서 혈소판 수가 감소하고 포도당 농도가 12.5% ​​이상일 때 PRP 혈소판의 MPV가 증가합니다. PRP 혈소판 수는 기준 전혈과 비교하여 농도가 1배에서 5배로 증가했으며, 이는 방법에 따라 다릅니다(그림에 표시되지 않음). Уменьшение количества tромбоцитов при всех концентрациях гипертонической декстрозы и увеличение MPV в тромбоцитах PRP при концентрации декстрозы > 12,5%: количество тромбоцитов PRP увеличилось в 1-5 раз по сравнения с исходной цельной Кровьù, в зависимости от 메토다(Ne показано). 모든 고장성 포도당 농도에서 혈소판 수가 감소하고, 포도당 농도가 12.5% ​​이상일 때 PRP 혈소판의 MPV가 증가했습니다. 방법에 따라 PRP 혈소판 수가 기준 전혈에 비해 1~5배 증가했습니다(표시되지 않음). ).에서> 12.5%의 葡萄糖浓비율이 낮고, 所有浓비율이 높은 高渗葡萄糖降低血小板计数，PRP 血small板中MPV 增加：与基线全血比，PRP血小板计数从浓degree는 1倍上升到5倍，因方法而异（未描述）입니다. 포도당 농도가 12.5% ​​이상일 때, 포도당 농도가 높으면 혈구 수치가 감소하고 PRP 혈액 MPV가 증가합니다. 혈구 전혈과 비교했을 때, PRP 혈구 수치는 농도(설명하지 않음)의 1~5배 증가합니다. При концентрациях глукозы >12,5% все концентрации гипертонической глукозы снижали количество тромбоцитов, а MPV повышали в тромбоцитах PRP: количество тромбоцитов PRP увеличивалось от 1- до 5-кратных концеntраций по сравнения с исходными концентрациями цельной 크로비, в зависимости от metода (не описано). 포도당 농도가 12.5% ​​이상일 때, 모든 고혈압 포도당 농도는 혈소판 수를 감소시키고 PRP 혈소판의 MPV를 증가시켰습니다. PRP 혈소판 수는 방법에 따라(설명된 대로) 기준 전혈 농도와 비교하여 1~5배 증가했습니다.그림 1은 물에 희석한 후 혈소판 수가 약 75% 감소했고, 포도당 농도를 다르게 하여 15분간 희석한 후에는 기준 PRP와 부피를 조정한 1:1 희석(부피 보정을 적용한 1:1 희석)에 비해 20-30% 감소한 것을 보여줍니다(k1).1 번식).
각 희석액의 세포 수는 희석 전 원래 세포 수의 분수로 표현됩니다.
MPV는 PRP 생산 중 최소한으로 감소했으며, 물이나 포도당(25% PRP 포도당 혼합물 포함)에서 12.5% ​​희석 농도로 추가 변화 없이 유지되었고, 50% 포도당 용액으로 희석 후 20% 이상 증가했습니다(그림 2). 반면, 적혈구는 H2O 이외의 다른 희석 농도에서 부피에 유의미한 변화를 보이지 않았습니다.
각 희석액에서 세포의 평균 부피는 희석 전 원래 부피의 백분율로 표현됩니다.
50% 포도당(25% 포도당으로 제조)에 노출된 BC에서 유사하지만 덜 뚜렷한 혈소판 수 감소와 CVR 증가가 관찰되었습니다. 표 2는 50% 포도당으로 희석한 전혈의 세포 수와 용적을 50% 포도당으로 희석한 1상 PRP 데이터와 비교합니다. 적혈구 수와 적혈구 평균 용적(MCV)의 변화는 명확하지 않았으며, 본 연구의 초점이 아니었습니다.
SD = 표준편차, MD = 군 간 평균차, SE = 평균차의 표준편차, RBC = 적혈구, PLT = 혈소판, PRP = 혈소판이 풍부한 혈장, WB = 전혈
D50W를 WB에 첨가한 후 희석 조정된 혈소판 손실률은 7.7%(310±73 대 286±96)였으며, 이는 D50W에 PRP를 희석한 경우 17.8%(664±348 대 544±277)와 비교되는 수치입니다. MPV WB는 16.8%(10.1±0.5에서 11.8±0.6으로) 증가한 반면, MPV PRP는 26%(9.2±0.8 대 11.6±0.7) 증가했습니다. 혈소판 수 감소와 MPV 증가의 평균 차이는 PRP에서 유의하게 더 컸지만, WB 내 혈소판 수 감소의 변화는 거의 유의미했습니다(310±73에서 286±96(-7.7%); p = .06). 그리고 MPV 증가도 유의미했습니다(10.1±0.5에서 11.8±0.6(+16.8) p < .001). 혈소판 수 감소와 MPV 증가의 평균 차이는 PRP에서 유의하게 더 컸지만, WB 내 혈소판 수 감소의 변화는 거의 유의미했습니다(310±73에서 286±96(-7.7%); p = .06). 그리고 MPV 증가도 유의미했습니다(10.1±0.5에서 11.8±0.6(+16.8) p < .001).혈소판 수 감소와 CVR 증가의 평균 차이는 PRP에서 유의하게 더 컸지만, WB 내 혈소판 수 감소의 변화는 거의 유의했습니다(310±73에서 286±96(-7.7%); p=0.06).увеличение MPV было значительным (от 10,1 ± 0,5 до 11,8 ± 0,6 (+16,8) p < 0,001). MPV의 증가는 유의미했습니다(10.1±0.5에서 11.8±0.6으로 (+16.8) p < 0.001).尽管PRP는 血small板计数减少및MPV 增加方face的平均差异显着更大，但WB 内血小板计数减少的变化几乎是显着的(310±) 73 至286 ± 96 (-7.7%); p = .06) 및 MPV 적(10.1 ± 0.5 ± 11.8 ± 0.6 (+16.8) p < .001).尽管 PRP 는 血小板 计数 와 와 增加 方face 的 平均 差异 显着 大 ， 但 但 内血작은板 计数 减少 的 几乎 是显着 的 ((310 ± 73 至 286 ± 96 (-7.7%) ; p = .06) 및 MPV 의 增加是显着 的 (10.1 ± 0.5 ± 11.8 ± 0.6 (+16.8) p < .001).WB 내 혈소판 수 감소 변화는 거의 유의미했습니다(310±73에서 286±96(-7.7%), p=0.06). 하지만 PRP는 혈소판 수 감소와 MPV 증가에서 평균 차이가 유의미하게 더 컸고 MPV 증가도 유의미했습니다.(от 10,1 ± 0,5 до 11,8 ± 0,6 (+16,8) р < 0,001). (10.1 ± 0.5에서 11.8 ± 0.6(+16.8) p < 0.001).
MPV에서 유의미한 변화를 보기 위해서는 최종 포도당 농도가 20%가 되어야 했지만, MPV의 변화는 최종 농도가 25%일 때 더욱 두드러졌습니다. 혈소판 손실은 초기 감소 후 안정화되었습니다. CVR에서 초기의 급격한 감소를 관찰했지만, 최종 포도당 농도가 25%일 때 CVR이 빠르게 회복되었으며, 이는 최종 포도당 농도가 20%와 15%일 때 관찰된 CVR 수치보다 상당히 높았습니다(그림 3 및 표 3의 왼쪽, 음영 처리된 상자). 는 Bonferroni 보정 0.01을 적용한 p-값 ≤ 알파를 나타냅니다. 또한 초기 0~15초 동안 PLT 수가 급격히 감소한 후 안정적으로 유지되었습니다(15초에서 30분, 표 4의 왼쪽).
전혈에 다양한 농도의 포도당을 첨가하자 MPV가 초기에 빠르게 감소한 후 농도 의존적으로 20% 이상 회복되었습니다. 희석 후 포도당 농도는 표에 표시되어 있습니다. D15, D20, D25는 1:1 희석하여, D21과 D41은 1:5 희석하여 측정했습니다.
표 4는 고장성 포도당에 희석했을 때 혈소판 수의 변화를 보여줍니다. 1:1 희석과 1:5 희석에서 PLT 수치의 즉각적인 감소 사이에 용량 의존적 관계가 관찰되었습니다. 1:1 희석액과 1:5 희석액을 단일군으로 비교했을 때, 1:1군은 1:5군보다 혈소판 수의 즉각적인 감소가 적었습니다(66±48,000(23%), 1:5군은 99±69,000(37%)). 1:5군에서는 p = 0.014). 첫 번째 측정 지점에서 초기 감소 후, 포도당 대비 혈소판 수는 안정화되었습니다(그림 4).
전혈과 포도당을 1:1 비율로 첨가하면 혈소판 수가 약 25% 감소합니다. 그러나 전혈을 1:5 비율로 첨가하면 감소 폭이 훨씬 더 커서 약 50%에 달했습니다.
41% 포도당은 25% 또는 21%보다 MPV를 더 빠르고 극적으로 증가시켰습니다. MPV 결과는 그림 3에 나와 있습니다. 다른 모든 희석에서 50% 포도당을 첨가한 후 MPV의 즉각적인 초기 감소는 관찰되지 않았습니다. 25% 포도당(최종 희석에서 포도당 농도 20.8%)을 사용했을 때 MPV의 변화는 1:1 희석에서 20% 포도당의 변화와 비슷했습니다(그림 3). MPV의 변화는 처음에는 41% 혼합 농도에서 25%보다 컸지만 16분 후 41%와 25% 사이의 MPV 차이는 더 이상 유의하지 않았습니다(표 3, 오른쪽). 또한 25% 포도당이 20.8%보다 MPV를 더 효과적으로 증가시켰다는 점도 흥미롭습니다.
이 시험관 연구는 우리의 가설을 부분적으로 확인시켜 주었습니다. 이 연구에서는 포도당 혼합물에 의한 잠재적인 부분적 혈소판 용해, 극도의 고장성에 대한 혈소판의 빠른 적응, 고장성 포도당 농도가 25% 이상일 때 MPV의 상당한 증가가 나타났습니다. 이 연구에서는 포도당 혼합물에 의한 잠재적인 부분적 혈소판 용해, 극도의 고장성에 대한 혈소판의 빠른 적응, 고장성 포도당 농도가 25% 이상일 때 MPV의 상당한 증가가 나타났습니다. Он показал потенциальный частичный лизис тромбоцитов primесьу декстрозы, быструу аккомодация тромбоцитов до экстремального гипертоного гипертонуса и значительное повышение MPV в ответ на гипертоническуу концентрация декстрозы > 25%. 이 연구에서는 포도당을 투여하면 혈소판이 부분적으로 용해될 가능성이 있고, 극도의 고장성에 대한 혈소판의 빠른 적응이 나타났으며, 고장성 포도당 수치가 25% 이상일 때 MPV가 상당히 증가하는 것으로 나타났습니다.它显示가 발행하는 매체는 25%입니다. 최고의 고품질 MPV 显着上升.它 显示 atur 过 葡萄糖 潜在 的 PART分 血小板 溶解 血小板 快速 适应 极端 高渗 , 以及 响应> 25% 浓titude高渗 葡萄糖 时 时 mpv 显着。。。。 Он показывает потенциальный частичный лизис тромбоцитов смесями с глукозой, быструу аadaptацив тромбоцитов к экстремальному гипертонусу и значительное увеличение MPV в ответ на концентрациу гипертонической глукозы > 25%. 포도당 혼합물에 의한 잠재적인 부분적 혈소판 용해, 극도의 고장성에 대한 빠른 혈소판 적응, 고장성 포도당 >25%에 대한 반응으로 MPV의 상당한 증가를 보여줍니다.초기 증가는 포도당 노출의 41.6%에서 최대였지만, MPV의 증가는 노출 후 약 20분 만에 포도당 노출의 25%에 근접했습니다.
혈소판 농도는 포도당의 영향을 받습니다. 모든 포도당 희석에서 PLT의 양이 감소하는 것을 확인했습니다. PRP 계열의 H2O(0%) 희석액에서 혈소판 수가 급격히 감소한 것은 삼투압 용해와 관련이 있을 수 있습니다. 또는 혈소판 응집으로 인한 인공물일 수도 있지만, 이는 이 희석액에서 MPV 변화가 없는 것과는 대조적입니다. 이러한 결과는 일부 혈소판이 저삼투압에 매우 민감함을 시사합니다.
포도당 1:1 희석액 모두에서 PLT의 양은 D5W(저장성 용액 252 mOsm)에서도 20~30% 감소했습니다. 이는 포도당의 특정 비삼투압 효과를 시사하는 것으로 보입니다. 농도가 3배 증가해도 PLT와 MPV는 변하지 않았기 때문입니다. 포도당. D5W에서 D25W로. 실제로 PLT 농도는 삼투압이 증가함에 따라 약간 증가하는 경향을 보였습니다.
1:1과 1:5 희석에서 PLT가 감소하는 것은 용해 효과가 초기 및 최종 포도당 농도에 따라 달라진다는 것을 의미합니다. 만약 초기 농도에만 의존한다면 1:1 농도에서 PLT 감소에 차이가 있을 것으로 예상할 수 있습니다. 하지만 실제로는 그렇지 않습니다. 용해 효과가 최종 포도당 농도에만 의존한다면 20% 1:1 희석과 20.8% 1:5 희석 사이에 큰 차이가 없을 것으로 예상됩니다. 그런데도 우리는 그 결과를 얻었습니다.
혈소판 용해로 인해 혈소판 손실이 발생하면 부분 용해물이 형성되고, 이후 사이토카인과 성장인자가 세포외 환경으로 방출됩니다. 여러 연구에서 혈소판 용해물이 증식 용액으로서 PRP만큼 효과적이라는 것이 밝혀졌습니다[11]. PRP 자체는 증식 치료에 효과적인 용액으로 알려져 있습니다[12-14].
비활성 혈소판은 여러 내부 구조로 강화된 원반 형태로 순환합니다. 활성화되는 동안 혈소판은 더 구형 또는 아메바 형태를 띠게 되어 부피가 증가합니다. 부피 증가는 표면적 증가를 필요로 하는데, 이는 개방 세뇨관계(OCS)의 돌출과 세포외 과립의 막으로의 이동에 따른 결과입니다. 고장성 포도당에 의해 유도되는 MPV의 증가가 이 두 가지 기전 중 하나 또는 둘 다를 수반하는지 여부는 아직 밝혀지지 않았지만, 만약 후자라면 MPV의 증가는 탈과립을 시사합니다.
이 연구에서는 PRP 또는 전혈소판에 고농도의 포도당이 노출되면 포도당 농도가 각각 25%와 41.6%일 때 15분 이내에 MPV가 증가하는 것으로 나타났습니다.
혈소판 MPV의 증가는 칼슘 유입에 대한 반응으로 주변 미세소관 엉킴이 확장되었기 때문일 수 있습니다.Liu et al. 포도당은 혈소판 TRPC6 채널을 통해 칼슘 유입을 매개하는 것으로 나타났습니다[6]. 저희의 가설은 포도당이 미세소관 엉킴의 이완을 유도하여 MPV와 혈소판 감작 및/또는 활성화를 증가시킨다는 것입니다.그러나 저희의 결과를 보면 이것은 이야기의 일부일 뿐입니다.저희의 시험에서 D25W 이하의 농도는 MPV의 증가를 초래하지 않았습니다.12.5%와 25% 사이의 포도당 농도에 대한 노출을 시험하지 않았다는 점을 감안할 때, 저희의 1상 결과는 이 포도당 농도 범위에서 MPV의 증가로 이어지는 임계값이 있을 수 있음을 시사합니다.3단계와 4단계의 추가 시험에서 20-25% 포도당이 이에 대한 임계값인 것으로 나타났지만 그 이유는 아직 불분명합니다.
원심분리 후 MPV가 약 9% 감소하는 것을 관찰했습니다. 이러한 MPV 감소가 원심분리기 적혈구층에 더 크고 밀도가 높은 혈소판이 포집되었기 때문인지는 명확하지 않습니다. 이러한 관찰 결과는 PRP 혈소판이 백혈구 혈소판의 더 작고 밀도가 낮은 부분집합임을 시사하므로 임상의에게 중요할 수 있습니다.
이전 연구에서는 수작업으로 PRP를 제조하는 것이 비용이 저렴하다는 것을 보여주었습니다[8]. 포도당이 조직 혈소판이나 PRP를 민감하게 만들어 활성화에 더 취약하게 만들거나, PRP가 부분 용해물 특성을 가지도록 제조된다면 재생을 촉진하고 치료 필요성을 줄일 수 있습니다. 따라서 PRP와 고농축 포도당을 병용하는 것이 PRP 또는 포도당을 단독으로 사용하는 것보다 비용 효율적일 수 있습니다.
본 연구에는 몇 가지 단점이 있습니다. 첫째, 여러 가지 다른 방법으로 얻은 PRP를 사용했기 때문에 상충되는 결과가 나올 수 있습니다. 둘째, 혈소판 활성화 여부를 더욱 정확하게 판단하기 위해 어떤 샘플에도 생화학적 분석을 수행할 수 없었습니다. 알파 과립 탈과립의 정도나 존재 여부를 더 잘 이해하기 위해 P-셀렉틴, 혈소판 인자 4, 단핵구 혈소판 응집체, 또는 기타 혈소판 활성화 지표를 측정하고 싶지만, 이는 본 연구의 범위를 벗어납니다. 셋째, 포도당에 노출된 혈소판에서 MPV 증가가 미세소관 엉킴에 대한 영향 때문인지 전자현미경이나 다른 방법으로 확인할 수 없었습니다.
WB 또는 PRP와 25% 포도당의 혼합물은 MPV를 증가시켜 혈소판 활성화의 시작을 알렸지만, 이 연구에서는 응집이나 탈과립의 진행을 입증하지 못했습니다. 고장성 포도당 혼합물은 혈소판 손실을 초래했는데, 이는 용해 효과를 나타낼 가능성이 있습니다. 혈소판의 부분적인 활성화 또는 용해는 혈소판 주사 후 조직 재생을 유발할 수 있습니다. 이러한 변화가 어떤 임상적 결과를 초래할지는 아직 명확하지 않습니다. 추가 연구에서는 활성화 또는 용해를 더욱 정확하게 측정할 수 있음을 보여주었으며, WB 또는 PRP를 첨가한 고장성 포도당 혼합물의 다양한 임상적 효과를 평가했습니다.
포도당 증식 치료는 간단하고 저렴한 재생 치료로, 빠르게 확대되고 임상 연구를 뒷받침하고 있습니다. 이 연구는 생리학적 기전을 제시하며, 만약 이 기전이 확인된다면 증식 치료의 재생 기전의 일부를 이해하는 데 도움이 될 수 있습니다.
미국 캔자스시티 미주리대학교 의과대학 생물의학 및 건강정보학
인간 피험자: 이 연구에 참여한 모든 참가자는 동의하거나 동의하지 않았습니다.국제 세포의학 학회는 ICMS-2017-003 승인을 발행했습니다.다음 프로토콜은 국제 세포의학 학회의 기관 검토 위원회에서 추가 사용을 승인했습니다.제목: 기준 CBC 혈소판 수를 기반으로 한 혈소판이 풍부한 혈장 약물 수율 계산.동물 피험자: 모든 저자는 이 연구에 동물이나 조직이 관여하지 않았음을 확인했습니다.이해 상충: ICMJE 통일 공개 양식에 따라 모든 저자는 다음을 선언합니다.지불/서비스 정보: 모든 저자는 제출된 작업에 대해 어떤 기관으로부터도 재정적 지원을 받지 않았음을 선언합니다.재정 관계: 모든 저자는 현재 또는 지난 3년 동안 제출된 작업에 관심이 있을 수 있는 어떤 기관과도 재정적 관계가 없음을 선언합니다.기타 관계: 모든 저자는 제출된 작업에 영향을 줄 수 있는 다른 관계나 활동이 없음을 선언합니다.
Harrison TE, Bowler J, Reeves K 외 (2022년 5월 17일) 포도당이 혈소판 수 및 혈소판 용적에 미치는 영향: 재생 의학에 대한 함의. Cure 14(5): e25081. doi:10.7759/cureus.25081
© 저작권 2022 Harrison et al. 본 저작물은 크리에이티브 커먼즈 저작자표시 라이선스(CC-BY 4.0)에 따라 배포되는 오픈 액세스 저작물입니다. 원저자 및 출처를 명시하는 경우, 어떠한 매체에서든 무제한 사용, 배포 및 복제가 허용됩니다.