"Ùn dubitate mai chì un picculu gruppu di citadini riflessivi è dedicati pò cambià u mondu. In fatti, hè l'unicu chì ci hè."
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Plasma riccu di piastrine/prp, rigenerazione tissutale, attivazione piastrinica, terapia proliferativa di glucosiu, piastrine, terapia proliferativa
Cità ​​questu articulu cum'è: Harrison TE, Bowler J, Reeves K, et al. (17 di maghju 2022) L'effettu di u glucosiu nantu à u numeru è u vulume di e piastrine: implicazioni per a medicina rigenerativa. Cure 14(5): e25081. doi:10.7759/cureus.25081
U plasma riccu di piastrine (PRP) è e soluzioni di glucosiu ipertonicu sò cumunamente aduprate per l'iniezione in medicina rigenerativa, qualchì volta inseme. L'effettu di u glucosiu ipertonicu nantu à a lisi è l'attivazione di e piastrine ùn hè statu signalatu prima. Avemu testatu l'effettu di concentrazioni elevate di glucosiu nantu à u numeru di piastrine è eritrociti, è ancu i volumi cellulari in PRP è sangue interu (WB). Una rapida riduzione parziale di u numeru di piastrine si hè verificata cù tutte e miscele di glucosiu mischiate cù PRP o sangue interu, coerente cù a lisi parziale. Dopu à u primu minutu, a conta di e piastrine hè rimasta stabile, ciò chì suggerisce una rapida accomodazione di e piastrine residue à una ipertonicità estrema (> 2000 mOsm). Dopu à u primu minutu, a conta di e piastrine hè rimasta stabile, ciò chì suggerisce una rapida accomodazione di e piastrine residue à una ipertonicità estrema (> 2000 mOsm). После первой минуты количество тромбоцитов оставалось стабильным, что указывает на зывает на цо боцитов остаточных тромбоцитов до экстремального (>2000 мОсм) гипертонуса. Dopu à u primu minutu, u numeru di piastrine hè restatu stabile, ciò chì indica una rapida accomodazione di e piastrine residue à una ipertonicità estrema (> 2000 mOsm).第一分钟后，血小板计数保持稳定，表明残余血小板迅速适应极端（> 2000 mOsm）高渗状态。2000 mOsm）高渗状态。 После первой минуты количество тромбоцитов оставалось стабильным, что указывает на зывает на ююпы остаточных тромбоцитов к экстремальному (>2000 мОсм) гиперосмолярному состоянию. Dopu à u primu minutu, u numeru di piastrine hè restatu stabile, ciò chì indica una rapida adattazione di e piastrine residue à u statu iperosmolare estremu (> 2000 mOsm).E concentrazioni di glucosiu di 25% è più anu risultatu in un aumentu significativu di u vulume mediu di e piastrine (MPV), chì indica una fase iniziale di l'attivazione di e piastrine. Ulteriori studii sò necessarii per determinà se si verifica a lisi o l'attivazione di e piastrine è se l'iniezione ipertonica di glucosiu sola o in cumbinazione cù PRP pò furnisce un benefiziu clinicu supplementu.
In l'anni 1950, u chirurgu americanu George Hackett hà scupertu ch'ellu pudia alleviare permanentemente u dolore articulariu è di schiena in parechji pazienti iniettendu una suluzione proliferativa in i tendini è i ligamenti. I so esperimenti nantu à i cunigli anu dimustratu chì u trattamentu, ch'ellu chjamava terapia proliferativa, hà fattu chì i tendini si ingrandessinu è si rinfurzassinu. Studi istologichi anu cunfirmatu chì u novu collagene hè pruduttu durante stu prucessu [1].
Durante i primi decennii, sò state pruvate parechje suluzioni di distribuzione diverse. À partesi da l'anni 1990, a maiò parte di i praticanti cunsideravanu chì alte concentrazioni di glucosiu eranu u metudu u più sicuru è u più efficace. Tuttavia, u mecanismu d'azione ferma pocu chjaru.
Pochi studii clinichi sò stati realizati in u XXu seculu dopu à u travagliu di Hackett. Tuttavia, in l'anni 2000 ci hè statu un interessu rinnuvatu è parechji studii clinichi riesciuti di terapia proliferativa sò stati cumpletati per u trattamentu di u dolore lombare [2], l'artrosi di u ghjinochju [3] è l'epicondilite laterale [4].
A rigenerazione tissutale richiede a participazione di e cellule staminali. Dunque, alte concentrazioni di glucosiu devenu in qualchì modu induce a migrazione, a replicazione è a differenziazione di e cellule staminali. Facemu l'ipotesi chì e piastrine possinu agisce cum'è messaggeri è chì alte concentrazioni di glucosiu possinu fà chì e piastrine liberinu citochine è fattori di crescita, prumovendu cusì i prucessi rigenerativi, in particulare a migrazione di e cellule staminali in zone cù alte concentrazioni di glucosiu.
L'attivazione di e piastrine precede sempre un aumentu di u calciu intracellulare [5]. Liu et al. in u 2008 anu dimustratu chì i livelli elevati di glucosiu aumentanu l'attività di i canali di u receptore transitoriu potenziale di tipu canonicu 6 (TRPC6) in a membrana plasmatica, ciò chì porta à un afflussu di ioni di calciu in e piastrine [6]. Un altru studiu hà dimustratu chì l'esposizione di a zona marginale di i microtubuli à l'ioni di calciu provoca rilassamentu, espansione è deformazione di a zona marginale, chì à u so tornu provoca un cambiamentu di forma da discu à sferica, risultendu in un vulume mediu di piastrine (MPV) [7].
A nostra ipotesi in questu studiu hè chì l'esposizione di e piastrine à alte concentrazioni di glucosiu affetta a zona marginale di i microtubuli è l'ambiente intracellulare, purtendu à un aumentu di u MPV.
Tutti i participanti anu firmatu un furmulariu di cunsensu infurmatu dopu chì i dettagli di u studiu sò stati spiegati è prima di riceve i campioni. In questu studiu, solu i campioni di PRP cun un ematocritu superiore à 2% sò stati aduprati in modu chì u numeru di eritrociti (eritrociti) è u vulume corpusculare mediu di globuli rossi (MCV) puderanu esse inclusi per paragone.
U studiu hè statu realizatu in quattru fasi, a prima fase era PRP è e fasi rimanenti eranu sangue interu (Tavula 1). Cum'è descrittu prima [8], tutte e forze centrifughe relative (RCF, forza g) sò state calculate da u puntu mediu (Rmid, in cm) di a colonna di sangue in a siringa centrifuga. Avemu sceltu di utilizà MPV cum'è marcatore di sensibilizazione piastrinica è u conteggio piastrinico cum'è indicatore di putenziale lisi piastrinica, tramindui ponu esse facilmente misurati nantu à analizzatori ematologichi standard.
In a prima fase, 47 vuluntarii anu donatu campioni di sangue - un tubu d'acidu etilendiamminotetraaceticu (EDTA) è un campione di sangue interu PRP (anticoagulatu cù citratu di sodiu (NaCl, 3%)) (Tavula 1). Pone subitu u rocker in u tubu. L'emocromu cumpletu (CBC) hè statu realizatu nantu à i campioni EDTA in triplicatu, è i campioni di NaCl sò stati analizati in triplicatu per l'analisi CBC, è dopu u PRP hè statu preparatu cù diversi metudi descritti sopra [8]. Tutti i campioni PRP sò stati preparati per centrifugazione à 900-1000 g. Mischiate ogni campione PRP nantu à un miscelatore vortex per 5-10 secondi, dopu dividite cinque aliquote di 0,5 ml in tubi.
Per valutà l'effettu di l'esposizione à e piastrine nantu à e concentrazioni elevate di glucosiu, quantità uguali (0,5 ml) di glucosiu 0%, 5%, 12,5%, 25% è 50% in acqua sò state mischiate cù campioni di piastrine per ottene concentrazioni 0%, 2,5% 6,25%, 12,5% è 25% di a mistura di glucosiu è mischjà i tubi nantu à un agitatore per tubi di prova per 15 minuti. U TAC di ogni mistura hè statu analizatu in triplicatu dopu à 15 minuti. A conta piastrinica (PLT), a conta RBC, l'MCV è l'MPV sò stati mediati per ogni tubu, è a conta piastrinica media, a conta RBC, l'MCV è l'MPV sò stati calculati per tutti i campioni di PRP.
Dopu à a fine di a prima fase di raccolta di dati, avemu nutatu un aumentu significativu di u vulume di piastrine in e piastrine PRP dopu l'aghjunta di D50W. E piastrine PRP ùn rapprisentanu micca necessariamente tutte e piastrine in u sangue, è u mediu PRP hè diversu da u mediu WB. Dunque, avemu decisu di realizà una seconda fase di prova di l'effettu di l'aghjunta di D50W à u sangue interu.
Per a seconda volta, avemu sceltu una dimensione di campione di 30 basatu annantu à i risultati di a prima serie, cum'è descrittu in a sezione Analisi. In questa serie, 20 vuluntarii anu donatu campioni di sangue (Tavula 1). U sangue interu (1,8 ml) hè statu aspiratu in una siringa di 3 ml è anticoagulatu cù 0,2 ml di NaCl à 40%. A siringa di sangue interu hè stata mischiata per cinque secondi cù un miscelatore vortex è u CBC hè statu analizatu in triplicatu. Dopu l'analisi, u sangue anticoagulatu hè statu aghjuntu à 2 ml di glucosiu à 50% in una siringa di 5 ml (a cuncentrazione finale di glucosiu era di circa 25% (D25) è piazzatu in un tubu agitatore per 30 minuti. Dopu à 30 minuti, i D25/CBC in siringhe WB sò stati analizati in triplicatu. A conta piastrinica, a conta RBC, u MCV è u MPV per siringa sò stati mediati, è a media di PLT, conta RBC, MCV è MPV sò stati calculati per ogni campione prima è dopu l'aghjunta di glucosiu.
Siccomu e piastrine in u sangue interu sò cumunamente esposte à u glucosiu ipertonicu durante a terapia proliferativa di glucosiu per via di l'iniezione minimamente invasiva, è ùn hè micca cumunu di cumminà u PRP cù u glucosiu ipertonicu ghjustu prima di l'iniezione, avemu decisu di studià u glucosiu ipertonicu in cumminazione cù WB in a Sezione 1. Passi trè è quattru. In ogni tappa, 20 vuluntarii anu donatu 7-8 ml di ACD-A (acidu chì cuntene citratu di trisodiu (22,0 g/l), acidu citricu (8,0 g/l) è glucosiu (24,5 g/l), soluzione di citratu di destrosio) per anticoagulanti di u sangue (Tavula 1). Solu e miscele di glucosiu superiore à 12,5% sò state aduprate per determinà a percentuale di soglia assuciata à un aumentu di MPV. In a terza tappa, 1 ml di sangue hè piazzatu in una provetta. Dopu, mischiate u sangue in un miscelatore vortex per 10 secondi aghjunghjendu 1 ml di glucosiu à 30%, glucosiu à 40%, o glucosiu à 50% à u tubu per ottene una cuncentrazione finale di glucosiu di 15%, 20% è 25%, rispettivamente. I campioni di sangue di glucosiu sò stati analizati per a CBC subitu dopu a miscelazione è ripetuti ogni dui minuti per 30 minuti.
Durante a miscelazione iniziale, l'aghjunta di glucosiu ipertonicu 1:1 è WB o PRP espone e piastrine à concentrazioni superiori à 25% per parechji secondi. In u quartu passu, per valutà l'effettu di u glucosiu ipertonicu cù concentrazioni di piccu iniziali minime è testà u limite superiore di l'effettu di u glucosiu, avemu aghjuntu solu una piccula quantità di sangue à D25W o D50W. Pone 1 ml di D25W o D50W in un tubu è aghjunghje 0,2 ml di WB mentre vortexemu u campione per 10 secondi. In questi casi, u sangue hè statu espostu à u glucosiu à una concentrazione circa 20% sopra a concentrazione finale, invece di 50% sopra a concentrazione finale cum'è in a Fase 3, risultendu in concentrazioni finali di glucosiu di 20,8% è 41,6%. I campioni mischiati sò stati analizati à u listessu intervallu di tempu cum'è in u passu 3.
In u primu passu di ogni seria di diluzione di glucosiu, sò stati prelevati 30 campioni, postu chì questu era a dimensione di campione adatta per u studiu pilotu [9]. À a fine di ogni fase (cumprendu a prima fase), valutate l'adeguatezza di a dimensione di u campione utilizendu a formula aduprata per determinà a dimensione di u campione necessaria per stimà a media di a variabile di risultatu cuntinua in una pupulazione. Formula n = Z2 x SD2 /E2. In questa equazione, Z hè u puntu Z, SD hè a deviazione standard, è E hè l'errore desideratu [10]. U nostru alfa hè 0,05, chì currisponde à un valore Z di 1,96, è aspittemu un errore di 5 (in percentuale). Dunque, risolvemu per n = (1,962 x SD2) / 52. I risultati anu dimustratu chì a dimensione di u campione necessaria per ogni tappa era più chjuca di u numeru reale raccoltu.
Durante i periodi 1, 3 è 4 aduprendu più di una cuncentrazione di glucosiu, l'effettu di diverse cuncentrazioni di glucosiu hè statu analizatu paragunendu u cambiamentu frazziunale trà u tempu 0 è ogni tempu successivu (fase 1 à 15 minuti, periodu 3 à 15 minuti). è quattru à 15 secondi, dopu ogni dui minuti.) I tassi di cambiamentu per ogni periodu di tempu sò stati paragunati aduprendu u test U di Mann-Whitney perchè i dati ùn seguitavanu micca una distribuzione nurmale cum'è determinata da u test di nurmalità di Shapiro-Wilk. Siccomu hè stata realizata un'analisi 1 à 1 di parechji gruppi (cinque) in i primi, terzi è quarti passi (cinque in tutale), hè stata realizata una currezzione di Bonferroni per aghjustà u valore alfa desideratu à ≤0,01 ma micca ≤0,05.
Riduzione di u numeru di piastrine cù tutte e concentrazioni di destrosio ipertonicu è un aumentu di MPV in e piastrine PRP à una concentrazione di destrosio > 12,5%: u numeru di piastrine PRP hè aumentatu da una à cinque volte a concentrazione paragunata à u sangue interu di basa, variendu secondu u metudu (micca rapprisintatu). Riduzione di u numeru di piastrine cù tutte e concentrazioni di destrosio ipertonicu è un aumentu di MPV in e piastrine PRP à una concentrazione di destrosio > 12,5%: u numeru di piastrine PRP hè aumentatu da una à cinque volte a concentrazione paragunata à u sangue interu di basa, variendu secondu u metudu (micca rapprisintatu). Уменьшение количества тромбоцитов при всех концентрациях гипертонической декстроцитов MP3 тромбоцитах PRP при концентрации декстрозы > 12,5%: количество тромбоцитов PRP увеличило строзы 12,5% сравнению с исходной цельной кровью, в зависимости от метода (не показано). Diminuzione di u numeru di piastrine à tutte e concentrazioni ipertoniche di destrosio è aumentu di MPV in e piastrine PRP à una concentrazione di destrosio > 12,5%: u numeru di piastrine PRP hè aumentatu da 1 à 5 volte paragunatu à u sangue interu di basa, secondu u metudu (micca mostratu). ).在> 12.5% ​​的葡萄糖浓度下，所有浓度的高渗葡萄糖降低血小板计数，中度有浓度的高渗葡萄糖降低血小板计数，中孏数，PRP 血帀增加：与基线全血相比，PRP 血小板计数从浓度的1 倍上升到5 倍，因方法，张方法／而氏浓度的1 À una cuncentrazione di glucosiu > 12,5%, l'alta cuncentrazione di glucosiu riduce a conta di sangue, u PRP MPV in sangue aumenta: paragunatu à 与基线全血, a conta di sangue di PRP aumenta da 1 à 5 volte quella di a cuncentrazione (micca descritta). При концентрациях глюкозы >12,5% все концентрации гипертонической глюкозы снижтали ксолиции тромбоцитов, а MPV повышали в тромбоцитах PRP: количество тромбоцитов PRP увеличивалось от51-кра от51 концентраций по сравнению с исходными концентрациями цельной крови, в зависимости от мосто (micca descrittu). À cuncentrazioni di glucosiu > 12,5%, tutte e cuncentrazioni di glucosiu ipertensivu anu diminuitu u numeru di piastrine è aumentatu l'MPV in e piastrine PRP: u numeru di piastrine PRP hè aumentatu da 1 à 5 volte paragunatu à e cuncentrazioni di sangue interu di basa, secondu u metudu (cum'è descrittu).A figura 1 mostra chì u numeru di piastrine hè diminuitu di quasi u 75% dopu a diluzione in acqua è di 20-30% dopu à 15 minuti di diluzione cù diverse concentrazioni di glucosiu paragunatu à u PRP di basa è una diluzione 1:1 aghjustata per u vulume (1-k1 cù currezzione di u vulume). k -1 ripruduzzione).1 ripruduzzione).
U numeru di cellule in ogni diluzione hè espressu cum'è una frazzione di u numeru uriginale prima di a diluzione.
U MPV hè diminuitu minimamente durante a pruduzzione di PRP, senza ulteriori cambiamenti in e concentrazioni di diluzione à 12,5% ​​in acqua o glucosiu (cumprese e miscele di glucosiu PRP à 25%) è hè aumentatu di più di 20% dopu a diluzione in una soluzione di glucosiu à 50% (Fig. .2). In cuntrastu, l'eritrociti ùn anu mostratu alcun cambiamentu significativu di vulume à alcuna diluzione diversa da H2O.
U vulume mediu di e cellule in ogni diluzione hè espressu cum'è percentuale di u vulume originale prima di a diluzione.
Una riduzione simile, ma menu pronunciata, di u numeru di piastrine è un aumentu di u CVR sò stati osservati in BC esposti à 50% di glucosiu (per formulà cù 25% di glucosiu). A Tavula 2 paraguna i numeri di cellule è i volumi cellulari in u sangue interu diluitu in 50% di destrosio cù i dati PRP di fase 1 diluiti in 50% di destrosio. I cambiamenti in u numeru di globuli rossi è in u MCV di globuli rossi ùn eranu micca evidenti è ùn eranu micca u centru di a nostra attenzione.
SD = deviazione standard, MD = differenza media trà i gruppi, SE = deviazione standard di a differenza media, RBC = eritrociti, PLT = piastrine, PRP = plasma riccu di piastrine, WB = sangue intero
Dopu avè aghjuntu D50W à WB, a percentuale di perdita di piastrine adattata à a diluzione era di 7,7% (310 ± 73 vs. 286 ± 96) paragunata à 17,8% per a diluzione PRP in D50W (664 ± 348 vs. 544 ± 277). MPV WB hè aumentatu di 16,8% (da 10,1 ± 0,5 à 11,8 ± 0,6), mentre chì MPV PRP hè aumentatu di 26% (9,2 ± 0,8 vs. 11,6 ± 0,7). Benchì e differenze medie in a riduzione di u conte di piastrine è in l'aumentu di MPV eranu significativamente più cù PRP, i cambiamenti in a riduzione di u conte di piastrine in WB eranu guasi significativi (310 ± 73 à 286 ± 96 (-7,7%); p = 0,06) è l'aumentu di MPV era significativu (10,1 ± 0,5 à 11,8 ± 0,6 (+16,8) p < 0,001). Benchì e differenze medie in a riduzione di u conte di piastrine è in l'aumentu di MPV eranu significativamente più cù PRP, i cambiamenti in a riduzione di u conte di piastrine in WB eranu guasi significativi (310 ± 73 à 286 ± 96 (-7,7%); p = 0,06) è l'aumentu di MPV era significativu (10,1 ± 0,5 à 11,8 ± 0,6 (+16,8) p < 0,001).Ancu s'è e differenze medie in a riduzione di u numeru di piastrine è in l'aumentu di u CVR eranu significativamente più grande cù PRP, i cambiamenti in a diminuzione di u numeru di piastrine in WB eranu guasi significativi (310 ± 73 à 286 ± 96 (-7,7%); p = 0,06).увеличение MPV было значительным (от 10,1 ± 0,5 до 11,8 ± 0,6 (+16,8) p < 0,001). L'aumentu di u MPV era significativu (da 10,1 ± 0,5 à 11,8 ± 0,6 (+16,8) p < 0,001).尽管PRP 在血小板计数减少和MPV 增加方面的平均差异显着更大，但WB内血小板计数减少的变化几乎是显着的（310 ± 73 至286 ± 96 (-7.7%)；p = .06）和MPV的增加是显着的（10.1 ± 0.5 到11.8 ± 0.6 (+16.8) p < .001）。尽管 PRP 在 血小板 计数 和 和 增加 方面 的 平均 差异 显着 大 ， 但 但 内 轆 冮揮板减少 的 几乎 是 显着 的 （（（310 ± 73 至 286 ± 96 (-7.7%) ； p = .06）和MPV 的增昊的增昊（1. ± 0,5 到 11,8 ± 0,6 (+16,8) p < 0,001).U cambiamentu in a riduzione di u numeru di piastrine in u WB era guasi significativu (da 310 ± 73 à 286 ± 96 (-7,7%); p = 0,06), ancu s'è u PRP avia differenze medie significativamente più grande in a diminuzione di u numeru di piastrine è in l'aumentu di u MPV, è l'aumentu di u MPV era significativu.(от 10,1 ± 0,5 до 11,8 ± 0,6 (+16,8) р < 0,001). (da 10,1 ± 0,5 à 11,8 ± 0,6 (+16,8) p < 0,001).
Una cuncentrazione finale di glucosiu à 20% era necessaria per vede un cambiamentu significativu in u MPV, ma u cambiamentu in u MPV era più pronunciatu à a cuncentrazione finale di 25%. A perdita di piastrine si hè stabilizzata dopu à u calu iniziale. Avemu nutatu una forte diminuzione iniziale di u CVR, tuttavia, u CVR hè statu rapidamente restauratu à a cuncentrazione finale di glucosiu à 25%, chì era significativamente più altu ch'è i livelli di CVR osservati à e cuncentrazioni finali di glucosiu di 20% è 15% (Fig. 3 è à manca di a Tavula 3; caselle ombreggiate). indicanu valori p ≤ alfa cù una currezzione di Bonferroni di 0,01). Ci hè stata ancu una forte diminuzione iniziale di u numeru di PLT, osservata in a fase iniziale di 0-15 s, è dopu hè rimasta stabile (da 15 s à 30 min; à manca di a tavula 4).
L'aghjunta di diverse concentrazioni di glucosiu à u sangue interu hà risultatu in una diminuzione rapida iniziale di u MPV seguita da una ripresa dipendente da a concentrazione di più di u 20%. A legenda mostra a concentrazione di glucosiu dopu a diluzione. D15, D20 è D25 sò stati realizati in una diluzione 1:1. D21 è D41 sò stati realizati à una diluzione 1:5.
A Tavula 4 mostra u cambiamentu di u numeru di piastrine quandu hè diluitu in glucosiu ipertonicu. Avemu osservatu una relazione dipendente da a dosa trà a calata immediata di i numeri di PLT à a diluzione 1:1 è à a diluzione 1:5. Paragunendu e diluizioni 1:1 cum'è un solu gruppu cù e diluizioni 1:5, u gruppu 1:1 hà avutu una diminuzione immediata di u numeru di piastrine menu di u gruppu 1:5 66±48.000 (23%) versus 99±69.000 (37%). , p = 0,014) in u gruppu 1:5. Dopu una calata iniziale à u primu puntu di misurazione, u numeru di piastrine cum'è percentuale di glucosiu s'hè stabilizatu (Fig. 4).
Quandu u sangue interu hè aghjuntu à u glucosiu in un rapportu 1:1, u numeru di piastrine hè riduttu di circa 25%. Tuttavia, quandu u sangue interu hè statu aghjuntu à un rapportu di 1:5, a riduzione era assai più grande - circa 50%.
U glucosiu à 41% hà aumentatu u MPV più rapidamente è più dramaticamente chè u glucosiu à 25% o u 21%. I risultati di u MPV sò mostrati in a Figura 3. À tutte l'altre diluizioni, ùn hè stata osservata alcuna diminuzione iniziale immediata di u MPV dopu l'aghjunta di glucosiu à 50%. Quandu si usa glucosiu à 25% (cuncentrazione di glucosiu 20,8% à a diluzione finale), u cambiamentu di u MPV era paragunabile à u cambiamentu di u glucosiu à 20% à una diluzione 1:1 (Fig. 3). Ancu s'è i cambiamenti in u MPV eranu inizialmente più grandi à a cuncentrazione mista à 41% chè à 25%, a differenza in u MPV trà 41% è 25% dopu à 16 minuti ùn era più significativa (Tavula 3, à diritta). Hè ancu interessante chì u glucosiu à 25% hà aumentatu u MPV più efficacemente chè u 20,8%.
Questu studiu in vitro hà cunfirmatu parzialmente a nostra ipotesi. Hà mostratu una putenziale lisi parziale di e piastrine per miscela di destrosio, una rapida accomodazione di e piastrine à l'ipertonicità estrema, è un aumentu significativu di u MPV in risposta à concentrazioni > 25% di destrosio ipertonicu. Hà mostratu una putenziale lisi parziale di e piastrine per miscela di destrosio, una rapida accomodazione di e piastrine à l'ipertonicità estrema, è un aumentu significativu di u MPV in risposta à concentrazioni > 25% di destrosio ipertonicu. Он показал потенциальный частичный лизис тромбоцитов примесью декстрозы, быструю дакцитов тромбоцитов до экстремального гипертонуса и значительное повышение MPV в ответ на гипюерток концентрацию декстрозы > 25%. Hà mostratu una putenziale lisi parziale di e piastrine cù a destrosio, una rapida accomodazione piastrinica à ipertonicità estrema, è un aumentu significativu di u MPV in risposta à livelli di destrosio ipertonici > 25%.它显示出通过葡萄糖混合物潜在的部分血小板溶解，血小板快速适应极端高渗，以及响应> 25% 浓度的高渗葡萄糖时MPV 显着上升。它 显示 出 通过 葡萄糖 潜在 的 部分 血小板 溶解 血小板 快速 适应 在 适庯 枫 枫滏响应> 25% 浓度 高渗 葡萄糖 时 时 mpv 显着。。。。。 Он показывает потенциальный частичный лизис тромбоцитов смесями с глюкозой, бтастрауюп тромбоцитов к экстремальному гипертонусу и значительное увеличение MPV в ответ на конценценчительное гипертонической глюкозы > 25%. Mostra una putenziale lisi parziale di e piastrine da e miscele di glucosiu, un adattamentu rapidu di e piastrine à l'ipertonicità estrema, è un aumentu significativu di u MPV in risposta à u glucosiu ipertonicu > 25%.L'aumentu iniziale hè statu massimu à 41,6% di esposizione à u glucosiu, ma l'aumentu di u MPV s'hè avvicinatu à 25% di esposizione à u glucosiu circa 20 minuti dopu l'esposizione.
A cuncentrazione di piastrine hè affettata da u glucosiu. Avemu nutatu chì a quantità di PLT hè diminuita à tutte e diluizioni di glucosiu. Una forte calata di u numeru di piastrine in diluizioni H2O (0%) di a serie PRP pò esse assuciata à a lisi osmotica. In alternativa, questu puderia esse un artefattu causatu da l'agglomerazione di piastrine, ma questu hè in cuntrastu cù a mancanza di cambiamentu di MPV à sta diluizione. Questa scuperta significa chì alcune piastrine sò assai sensibili à l'ipoosmularità.
In tutte e diluizioni 1:1 di glucosiu, a quantità di PLT hè diminuita di 20-30%, ancu da D5W (ipotonica à 252 mOsm), ciò chì pò indicà un effettu non osmoticu specificu di u glucosiu, postu chì sia PLT sia MPV sò rimasti invariati à un aumentu di trè volte di a cuncentrazione di glucosiu da D5W à D25W. In fatti, e concentrazioni di PLT tendevanu à aumentà ligeramente cù l'aumentu di l'osmularità.
A diminuzione di u PLT trà e diluizioni 1:1 è 1:5 significa chì l'effettu di dissoluzione dipende da a cuncentrazione iniziale è finale di glucosiu. S'ellu dipendesse solu da a cuncentrazione iniziale, allora ci si aspetterebbe di vede una differenza in a riduzione di u PLT trà e cuncentrazioni 1:1. Ma ùn a vedemu micca. Se l'effettu di lisi dipende solu da a cuncentrazione finale di glucosiu, allora ùn ci aspettemu micca molta differenza trà una diluizione 1:1 di 20% è una diluizione 1:5 di 20,8%. Eppuru l'avemu fattu.
Sè a perdita di piastrine si verifica per via di a lisi piastrinica, si forma un lisatu parziale, dopu à quale e citochine è i fattori di crescita sò liberati in l'ambiente extracellulare. Parechji studii anu dimustratu chì u lisatu piastrinicu hè guasi altrettantu efficace cum'è u PRP cum'è una suluzione di proliferazione [11]. U PRP stessu hè statu dimustratu cum'è una suluzione efficace per u trattamentu di a proliferazione [12-14].
E piastrine inattive circulanu in forma di discu rinforzatu cù parechje strutture interne. Durante l'attivazione, piglianu una forma più sferica o d'ameba, risultendu in un aumentu di vulume. L'aumentu di vulume richiede un aumentu di a superficia, chì hè u risultatu di l'estrusione di u sistema di tubuli aperti (OCS) è l'aghjunta di granuli esocitici à a membrana. Resta da determinà se l'aumentu di MPV induttu da u glucosiu ipertonicu implica unu o entrambi questi meccanismi, ma se hè quest'ultimu, allora un aumentu di MPV indicherebbe una degranulazione.
Questu studiu hà dimustratu chì l'esposizione à alte concentrazioni di glucosiu nantu à u PRP o e piastrine di u sangue interu hà risultatu in un aumentu di u MPV in 15 minuti cù una concentrazione di glucosiu di 25% è 41,6%, rispettivamente.
L'aumentu di u MPV di e piastrine pò esse duvutu à a dilatazione di i grovigli di microtubuli circundanti in risposta à l'influx di calciu. Liu et al. Hè statu dimustratu chì u glucosiu media l'influx di calciu attraversu u canale TRPC6 di e piastrine [6]. A nostra ipotesi hè chì u glucosiu induce u rilassamentu di i grovigli di microtubuli, purtendu à un aumentu di u MPV è à a sensibilizazione è/o attivazione di e piastrine. Tuttavia, à ghjudicà da i nostri risultati, questu hè solu una parte di a storia. In i nostri testi, nisuna cuncentrazione sottu à D25W hà risultatu in un aumentu di u MPV. Datu chì ùn avemu micca testatu l'esposizione à cuncentrazioni di glucosiu trà 12,5% è 25%, i nostri risultati di a fase 1 suggerenu chì ci pò esse una soglia in questu intervallu di cuncentrazioni di glucosiu chì porta à un aumentu di u MPV. Ulteriori testi in e tappe 3 è 4 anu dimustratu chì u 20-25% di glucosiu pare esse a soglia per questu, ma ùn hè micca chjaru perchè.
Avemu ancu osservatu una diminuzione di ~9% in MPV dopu a centrifugazione. Ùn hè chjaru se sta diminuzione di MPV hè dovuta à piastrine più grande è più dense intrappulate in u stratu RBC di a centrifuga. Questa osservazione pò esse impurtante per i clinichi postu chì pò implicà chì e piastrine PRP sò un sottoinsieme più chjucu è menu densu di piastrine WB.
In un studiu precedente, avemu dimustratu chì a preparazione di PRP per metudi manuali hè economica [8]. Sè u glucosiu sensibilizeghja e piastrine tissutali o u PRP, rendenduli più suscettibili à l'attivazione, o sè u PRP hè pruduttu cù proprietà di lisatu parziale, questu pò migliurà a rigenerazione è riduce a necessità di terapia. Dunque, a cumminazione di PRP è glucosiu altamente concentratu pò esse più efficace in termini di costi chè PRP o glucosiu solu.
U nostru studiu hà parechje carenze. Prima, usemu PRP ottenutu da parechji metudi diversi. Questu pò purtà à risultati cuntradittori. Siconda, ùn simu stati capaci di fà un'analisi biochimica di alcunu di i nostri campioni per determinà più precisamente se l'attivazione piastrinica era accaduta. Ci piacerebbe misurà a P-selectina, u fattore piastrinicu 4, l'aggregati piastrinici monocitici, o altri marcatori di attivazione piastrinica per capisce megliu u gradu o a presenza di degranulazione di granuli alfa, ma questu hè fora di u scopu di questu studiu. Terzu, ùn simu stati capaci di cunfirmà per microscopia elettronica o altri metudi chì l'aumentu di MPV in e piastrine esposte à u glucosiu era duvutu à l'effettu nantu à i grovigli di microtubuli.
E miscele di WB o PRP cù 25% di glucosiu anu aumentatu u MPV, signalendu l'iniziu di l'attivazione piastrinica, ancu s'è questu studiu ùn hà micca dimustratu a progressione di l'aggregazione o di a degranulazione. A miscela di glucosiu ipertonica hà risultatu in a perdita di piastrine, chì forse rapprisenta un effettu liticu. L'attivazione parziale o a lisi di e piastrine pò causà a rigenerazione di i tessuti dopu l'iniezione di piastrine. Ùn hè chjaru à quali cunsequenze cliniche questi cambiamenti ponu purtà. Ulteriori studii anu dimustratu misurazioni più precise di attivazione o lisi è anu valutatu i diversi effetti clinichi di e miscele di glucosiu ipertonicu cù WB o PRP.
A terapia proliferativa di u glucosiu hè una terapia rigenerativa simplice è economica chì si espande rapidamente è sustene a ricerca clinica. Stu studiu suggerisce un mecanismu fisiologicu chì, s'ellu hè cunfirmatu, puderia aiutà ci à capisce una parte di u mecanismu rigenerativu di a terapia proliferativa.
Informatica Biomedica è Sanitaria à l'Università di Missouri, Kansas City School of Medicine, Kansas City, USA
Sughjetti Umani: Tutti i participanti à questu studiu anu datu o ùn anu datu u so accunsentu. A Società Internaziunale per a Medicina Cellulare hà emessu l'approvazione ICMS-2017-003. U protocolu seguente hè statu appruvatu per un usu ulteriore da u Cunsigliu di Revisione Istituzionale di a Società Internaziunale per a Medicina Cellulare: Titulu: Calculu di u rendimentu di i medicinali in u plasma riccu di piastrine basatu annantu à u conteggio di piastrine CBC di basa. Sughjetti Animali: Tutti l'autori anu cunfirmatu chì nisun animale o tissutu era implicatu in questu studiu. Cunflitti d'interessi: In cunfurmità cù u Formulariu Uniforme di Divulgazione ICMJE, tutti l'autori dichjaranu i seguenti: Informazioni di pagamentu / serviziu: Tutti l'autori dichjaranu chì ùn anu micca ricevutu sustegnu finanziariu da alcuna urganizazione per u travagliu presentatu. Relazioni Finanziarie: Tutti l'autori dichjaranu chì ùn anu micca attualmente o in l'ultimi trè anni relazioni finanziarie cù alcuna urganizazione chì puderia esse interessata à u travagliu presentatu. Altre Relazioni: Tutti l'autori dichjaranu chì ùn ci sò micca altre relazioni o attività chì puderanu influenzà u travagliu presentatu.
Harrison TE, Bowler J, Reeves K et al. (17 di maghju 2022) L'effettu di u glucosiu nantu à u numeru è u vulume di e piastrine: implicazioni per a medicina rigenerativa. Cure 14(5): e25081. doi:10.7759/cureus.25081
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