«Ойлы, адал азаматтардың шағын тобы әлемді өзгерте алатынына ешқашан күмәнданбаңыз. Шын мәнінде, бұл жалғыз топ».
Cureus компаниясының миссиясы - медициналық басылымдардың ұзақ уақыт бойы қалыптасқан моделін өзгерту, онда зерттеулерді ұсыну қымбат, күрделі және уақытты қажет етуі мүмкін.
Тромбоциттерге бай плазма/PRP, тіндердің регенерациясы, тромбоциттердің белсенділігі, глюкоза пролиферативті терапиясы, тромбоциттер, пролиферативті терапия
Бұл мақаланы келесідей дәйексөз ретінде келтіріңіз: Харрисон Т.Е., Боулер Дж., Ривз К. және т.б. (17 мамыр, 2022 ж.) Глюкозаның тромбоциттер саны мен көлеміне әсері: регенеративті медицинаға әсері. Cure 14(5): e25081. doi:10.7759/cureus.25081
Тромбоциттерге бай плазма (PRP) және гипертониялық глюкоза ерітінділері регенеративті медицинада инъекция үшін жиі қолданылады, кейде бірге. Гипертониялық глюкозаның тромбоциттердің лизисі мен белсенділігіне әсері бұрын хабарланбаған. Біз глюкоза концентрациясының жоғарылауының тромбоциттер мен эритроциттер санына, сондай-ақ PRP мен тұтас қандағы (WB) жасуша көлеміне әсерін тексердік. PRP немесе тұтас қанмен араласқан барлық глюкоза қоспаларында тромбоциттер санының тез ішінара төмендеуі байқалды, бұл ішінара лизиске сәйкес келеді. Бірінші минуттан кейін тромбоциттер саны тұрақты болып қалды, бұл қалдық тромбоциттердің экстремалды (>2000 мОсм) гипертониялық деңгейге дейін тез орналасуын көрсетеді. Бірінші минуттан кейін тромбоциттер саны тұрақты болып қалды, бұл қалдық тромбоциттердің экстремалды (>2000 мОсм) гипертониялық деңгейге дейін тез орналасуын көрсетеді. После первой минуты количество тромбоцитов оставалось стабилді, бұл тұрақты аккомодацию остаточных тромбоцитов в стремального (>2000 мОсм) гипертонуса. Бірінші минуттан кейін тромбоциттер саны тұрақты болып қалды, бұл қалдық тромбоциттердің гипертониялық деңгейге (>2000 мОсм) тез көтерілгенін көрсетеді.第一分钟后，血小板计数保持稳定，表明残余血小板迅速适应极端（> 2000 mOsm）高渗状态、2000 мОсм）高渗状态。 После первой минуты количество тромбоцитов оставалось стабильным, бұл стремального бейімделу остаточных тромбоцитов к экстремалном (>2000 мОсм) гиперосмолярном состоянию. Бірінші минуттан кейін тромбоциттер саны тұрақты болып қалды, бұл қалдық тромбоциттердің экстремалды (>2000 мОсм) гиперосмолярлық күйге тез бейімделуін көрсетеді.Глюкоза концентрациясының 25% және одан жоғары болуы тромбоциттер орташа көлемінің (MPV) айтарлықтай артуына әкелді, бұл тромбоциттердің белсенділігінің ерте кезеңін көрсетеді. Тромбоциттердің лизисі немесе белсенділігінің орын алатынын және гипертониялық глюкоза инъекциясының өзі немесе PRP-мен бірге қосымша клиникалық пайда әкелуі мүмкін екенін анықтау үшін қосымша зерттеулер қажет.
1950 жылдары американдық хирург Джордж Хакетт сіңірлер мен байламдарға пролиферативті ерітінді енгізу арқылы көптеген науқастардағы буын және арқа ауырсынуын біржолата басуға болатынын анықтады. Оның қояндарға жүргізген тәжірибелері пролиферативті терапия деп атаған емнің сіңірлердің ұлғаюына және күшеюіне әкелетінін көрсетті. Гистологиялық зерттеулер бұл процесс кезінде жаңа коллагеннің өндірілетінін растады [1].
Алғашқы бірнеше онжылдықта көптеген әртүрлі тарату шешімдері қолданылды. 1990 жылдарға қарай көптеген мамандар глюкозаның жоғары концентрациясын ең қауіпсіз және тиімді әдіс деп санады. Дегенмен, әсер ету механизмі әлі күнге дейін түсініксіз.
Хакетттің жұмысынан кейін 20 ғасырда клиникалық зерттеулер аз жүргізілді. Дегенмен, 2000 жылдары қызығушылық қайта жанданды және белдің төменгі бөлігіндегі ауырсынуды [2], тізе остеоартритін [3] және бүйірлік эпикондилит [4] емдеу үшін пролиферативті терапияның бірнеше сәтті клиникалық сынақтары аяқталды.
Тіндердің регенерациясы бағаналы жасушалардың қатысуын қажет етеді. Сондықтан глюкозаның жоғары концентрациясы бағаналы жасушалардың миграциясын, репликациясын және дифференциациясын қандай да бір жолмен тудыруы керек. Біз тромбоциттер хабаршы ретінде әрекет етуі мүмкін және глюкозаның жоғары концентрациясы тромбоциттердің цитокиндер мен өсу факторларын босатуына себеп болуы мүмкін, осылайша регенеративті процестерді, әсіресе бағаналы жасушалардың глюкозаның жоғары концентрациясы бар аймақтарға миграциясын ынталандырады деп болжаймыз.
Тромбоциттердің белсенділігі әрқашан жасушаішілік кальцийдің жоғарылауынан бұрын болады [5]. Liu және т.б. 2008 жылы глюкозаның жоғары деңгейі плазмалық мембранадағы өтпелі рецепторлық потенциал канондық 6 типті (TRPC6) арналарының белсенділігін арттыратынын, бұл тромбоциттерге кальций иондарының ағынына әкелетінін көрсетті [6]. Тағы бір зерттеу микротүтікшелердің шеткі аймағына кальций иондарының әсер етуі шеткі аймақтың релаксациясын, кеңеюін және деформациясын тудыратынын, бұл өз кезегінде диск пішінінің сфералық пішінге өзгеруіне әкелетінін, нәтижесінде тромбоциттердің орташа көлемінің (MPV) пайда болатынын көрсетті [7].
Бұл зерттеудегі біздің болжамымыз бойынша, тромбоциттерге глюкозаның жоғары концентрациясының әсер етуі микротүтікшелердің шеткі аймағына және жасушаішілік ортаға әсер етеді, бұл MPV жоғарылауына әкеледі.
Зерттеудің егжей-тегжейлері түсіндірілгеннен кейін және үлгілерді алмас бұрын барлық қатысушылар хабардар етілген келісім нысанына қол қойды. Бұл зерттеуде салыстыру үшін эритроциттер (эритроциттер) саны мен эритроциттердің орташа корпускулярлық көлемін (MCV) қосуға болатындай етіп, гематокриті 2%-дан асатын PRP үлгілері ғана пайдаланылды.
Зерттеу төрт фазада жүргізілді, бірінші фаза PRP, ал қалған фазалар тұтас қан болды (1-кесте). Бұрын сипатталғандай [8], барлық салыстырмалы центрифугалық күштер (RCF, g-күш) центрифугалық шприцтегі қан бағанының ортаңғы нүктесінен (Rmid, см) есептелді. Біз MPV-ны тромбоциттер сезімталдығының маркері ретінде және тромбоциттер санын ықтимал тромбоциттер лизисінің индикаторы ретінде пайдалануды таңдадық, екеуін де стандартты гематологиялық анализаторларда оңай өлшеуге болады.
Бірінші кезеңде 47 ерікті қан үлгілерін берді — этилендиаминтетрасірке қышқылының (ЭДТА) бір түтігі және бір PRP тұтас қан үлгісі (натрий цитратымен (NaCl, 3%) антикоагуляцияланған) (1-кесте). Тербелмелі түтікке дереу салыңыз. EDTA үлгілерінде толық қан анализі (CBC) үш рет жасалды, ал NaCl үлгілері CBC талдауы үшін үш рет талданды, содан кейін PRP жоғарыда сипатталған әртүрлі әдістермен дайындалды [8]. Барлық PRP үлгілері 900–1000 г-да центрифугалау арқылы дайындалды. Әрбір PRP үлгісін құйынды араластырғышта 5–10 секунд араластырыңыз, содан кейін бес 0,5 мл аликвотты түтіктерге бөліңіз.
Тромбоциттерге әсер етудің глюкоза концентрациясының жоғарылауына әсерін бағалау үшін тромбоцит үлгілерімен судағы 0%, 5%, 12,5%, 25% және 50% глюкозаның тең мөлшері (0,5 мл) араластырылып, глюкоза қоспасының 0%, 2,5%, 6,25%, 12,5% және 25% концентрациялары алынды және пробиркаларды пробирка шайқағышында 15 минут араластырды. Әрбір қоспаның TAC мәні 15 минуттан кейін үш рет талданды. Әрбір пробирка үшін тромбоциттер саны (PLT), эритроциттер саны, MCV және MPV орташаланды, ал барлық PRP үлгілері үшін тромбоциттер санының, эритроциттер санының, MCV және MPV орташа мәндері есептелді.
Деректерді жинаудың бірінші кезеңі аяқталғаннан кейін, D50W қосқаннан кейін PRP тромбоциттеріндегі тромбоциттер көлемінің айтарлықтай артқанын байқадық. PRP тромбоциттері қандағы барлық тромбоциттерді міндетті түрде білдірмейді, ал PRP ортасы WB ортасынан ерекшеленеді. Сондықтан біз D50W-ны тұтас қанға қосудың әсерін зерттеудің екінші кезеңінде сынақ жүргізуді шештік.
Екінші раунд үшін біз «Талдау» бөлімінде сипатталғандай, бірінші серияның нәтижелеріне негізделген 30 үлгі мөлшерін таңдадық. Бұл серияда 20 ерікті қан үлгілерін тапсырды (1-кесте). Тұтас қан (1,8 мл) 3 мл шприцке салынып, 0,2 мл 40% NaCl ерітіндісімен антикоагуляцияланды. Тұтас қан шприці құйынды араластырғышпен бес секунд бойы араластырылды және қанның жалпы талдауы үш рет талданды. Талдау аяқталғаннан кейін антикоагуляцияланған қан 5 мл шприцтегі 2 мл 50% глюкозаға қосылды (глюкозаның соңғы концентрациясы шамамен 25% (D25) болды және 30 минут бойы шайқау түтігіне салынды). 30 минуттан кейін WB шприцтеріндегі D25/CBC үш рет талданды. Әр шприцтегі тромбоциттер саны, эритроциттер саны, MCV және MPV орташаланды, ал глюкозаны қосқанға дейін және қосқаннан кейін әрбір үлгі үшін PLT, эритроциттер саны, MCV және MPV орташа мәндері есептелді.
Қандағы тромбоциттер пролиферативті глюкоза терапиясы кезінде минималды инвазивтік инъекцияға байланысты гипертониялық глюкозаға жиі ұшырайтындықтан және инъекция алдында PRP-ны гипертониялық глюкозамен біріктіру жиі кездесетіндіктен, біз 1-бөлімде гипертониялық глюкозаны WB-мен бірге зерттеуді шештік. Үшінші және төртінші қадамдар. Әр кезеңде 20 ерікті қан антикоагулянттары үшін 7-8 мл ACD-A (құрамында тринатрий цитраты (22,0 г/л), лимон қышқылы (8,0 г/л) және глюкоза (24,5 г/л), декстроза цитраты ерітіндісі) берді (1-кесте). MPV жоғарылауымен байланысты шекті пайызды анықтау үшін тек 12,5%-дан жоғары глюкоза қоспалары ғана пайдаланылды. Үшінші кезеңде пробиркаға 1 мл қан салынады. Содан кейін қанды құйынды араластырғышта 10 секунд бойы араластырыңыз, түтікке 1 мл 30% глюкоза, 40% глюкоза немесе 50% глюкоза қосып, глюкозаның соңғы концентрациясын сәйкесінше 15%, 20% және 25% алыңыз. Глюкозаның қан үлгілері араластырғаннан кейін бірден қанның жалпы талдауына талданды және 30 минут бойы екі минут сайын қайталанды.
Бастапқы араластыру кезінде 1:1 гипертониялық глюкоза мен WB немесе PRP қосу тромбоциттерді бірнеше секунд бойы 25%-дан жоғары концентрацияға ұшыратады. Төртінші кезеңде гипертониялық глюкозаның бастапқы шың концентрацияларының минималды әсерін бағалау және глюкоза әсерінің жоғарғы шегін тексеру үшін біз D25W немесе D50W-ға аз мөлшерде қан қостық. Түтікке 1 мл D25W немесе D50W салып, үлгіні 10 секунд бойы араластыра отырып, 0,2 мл WB қосыңыз. Бұл жағдайларда қан 3-фазадағыдай соңғы концентрациядан 50%-ға жоғары емес, соңғы концентрациядан шамамен 20%-ға жоғары концентрацияда глюкозаға ұшырады, нәтижесінде соңғы глюкоза концентрациясы 20,8% және 41,6% болды. Аралас үлгілер 3-қадамдағыдай уақыт аралығында талданды.
Әрбір глюкозаны сұйылту сериясының бірінші қадамында 30 үлгі алынды, себебі бұл пилоттық зерттеу үшін тиісті үлгі өлшемі болды [9]. Әр фазаның соңында (бірінші фазаны қоса алғанда) бір популяциядағы үздіксіз нәтиже айнымалысының орташа мәнін бағалау үшін қажетті үлгі өлшемін анықтау үшін қолданылатын формуланы пайдаланып, үлгі өлшемінің жеткіліктілігін бағалаңыз. Формула n = Z2 x SD2 /E2. Бұл теңдеуде Z - Z-ұпай, SD - стандартты ауытқу, ал E - қажетті қателік [10]. Біздің альфамыз 0,05, бұл 1,96 Z мәніне сәйкес келеді және біз 5 қателік күтеміз (пайызбен). Сондықтан біз n = (1,962 x SD2)/52 теңдеуін шешеміз. Нәтижелер әр кезең үшін қажетті үлгі өлшемі жиналған нақты саннан аз екенін көрсетті.
1, 3 және 4 кезеңдерде бірнеше глюкоза концентрациясын қолданған кезде, әртүрлі глюкоза концентрацияларының әсері 0 уақыты мен әрбір келесі уақыт (1-фаза 15 минутта, 3-фаза 15 минутта) және төрт 15 секундта, содан кейін әр екі минут сайын фракциялық өзгерісті салыстыру арқылы талданды.) Әрбір уақыт кезеңі үшін өзгеріс жылдамдығы Манн-Уитни U-тестін қолдану арқылы салыстырылды, себебі деректер Шапиро-Уилк қалыптылық сынағымен анықталғандай қалыпты үлестірімді ұстанбады. Бірінші, үшінші және төртінші қадамдарда (барлығы бес) бірнеше топтың (бесеу) 1-ден 1-ге дейінгі талдауы жүргізілгендіктен, қажетті альфа мәнін ≤0,01-ге дейін, бірақ ≤0,05-ке емес, түзету үшін Бонферрони түзетуі жүргізілді.
Гипертониялық декстрозаның барлық концентрацияларында тромбоциттер санының азаюы және декстроза концентрациясының >12,5% кезінде PRP тромбоциттерінде MPV жоғарылауы: PRP тромбоциттер саны бастапқы қанмен салыстырғанда концентрацияның бір еседен бес есеге дейін өсті, бұл әдіске байланысты өзгереді (суретте көрсетілмеген). Гипертониялық декстрозаның барлық концентрацияларында тромбоциттер санының азаюы және декстроза концентрациясының >12,5% кезінде PRP тромбоциттерінде MPV жоғарылауы: PRP тромбоциттер саны бастапқы қанмен салыстырғанда концентрацияның бір еседен бес есеге дейін өсті, бұл әдіске байланысты өзгереді (суретте көрсетілмеген). Барлық бақылаудың гипертониялық декстрозы және MPV-де тромбоциттердің жоғарылауы > 12,5%: PRP тромбоциттерінің 1-5 разрядта 1-5 разрядтағы тромбоциттердің жойылуы. Декстрозаның барлық гипертониялық концентрацияларында тромбоциттер санының төмендеуі және декстроза концентрациясының >12,5% кезінде PRP тромбоциттерінде MPV жоғарылауы: PRP тромбоциттер саны бастапқы қанмен салыстырғанда әдіске байланысты 1-5 есеге артты (көрсетілмеген). ).在> 12,5% 的葡萄糖浓度下，所有浓度的高渗葡萄糖降低血小板计数，PRP 血V增加：与基线全血相比，PRP 血小板计数从浓度的1 倍上升到5 倍，因方泂＂＀而 Глюкоза концентрациясы >12,5% болғанда, глюкозаның жоғары концентрациясы қан құрамын төмендетеді, PRP қанындағы MPV артады: 与基线全血-мен салыстырғанда, PRP қан құрамы концентрациядан 1-ден 5 есеге дейін артады (сипатталмаған). Платформалардағы глюкоздар >12,5% жалпы концентрациядағы гипертониялық глюкоздар, а MPV тромбоциттерімен ауырады PRP: 1-ден 5-к-ге дейінгі әдістерді сақтау арқылы бақылауды жүзеге асыруға мүмкіндік береді. ). Глюкоза концентрациясы >12,5% болған кезде, барлық гипертониялық глюкоза концентрациялары тромбоциттер санын азайтты және PRP тромбоциттерінде MPV жоғарылауына әкелді: PRP тромбоциттер саны бастапқы қан концентрациясымен салыстырғанда әдіске байланысты (сипатталғандай) 1-ден 5 есеге дейін өсті.1-суретте тромбоциттер санының суда сұйылтылғаннан кейін шамамен 75%-ға, ал глюкозаның әртүрлі концентрацияларымен 15 минут сұйылтылғаннан кейін бастапқы PRP және көлемге түзетілген 1:1 сұйылтумен (1-к1 көлем түзетуімен) салыстырғанда 20-30%-ға төмендегені көрсетілген. k -1 өсіру).1 өсіру).
Әрбір сұйылтудағы жасушалар саны сұйылтуға дейінгі бастапқы санның бөлшек бөлігі ретінде көрсетіледі.
MPV PRP өндірісі кезінде минималды түрде төмендеді, суда немесе глюкозада (25% PRP глюкоза қоспаларын қоса алғанда) сұйылту концентрациялары 12,5%-ға дейін өзгермеді және 50% глюкоза ерітіндісінде сұйылтылғаннан кейін 20%-дан астамға артты (2-сурет). Керісінше, эритроциттер H2O-дан басқа кез келген сұйылту кезінде көлемде айтарлықтай өзгеріс байқамады.
Әрбір сұйылтудағы жасушалардың орташа көлемі сұйылтуға дейінгі бастапқы көлемнің пайызы ретінде көрсетіледі.
50% глюкоза әсеріне ұшыраған (25% глюкозамен формулалау үшін) БЦ-да тромбоциттер санының ұқсас, бірақ онша айқын емес төмендеуі және CVR жоғарылауы байқалды. 2-кестеде 50% декстрозада сұйылтылған қандағы жасушалар саны мен жасуша көлемі 50% декстрозада сұйылтылған 1-фаза PRP деректерімен салыстырылады. Эритроциттер саны мен эритроциттердің MCV ​​өзгерістері айқын болған жоқ және біздің назарымызды аударған жоқ.
SD = стандартты ауытқу, MD = топтар арасындағы орташа айырмашылық, SE = орташа айырмашылықтың стандартты ауытқуы, RBC = эритроциттер, PLT = тромбоциттер, PRP = тромбоциттерге бай плазма, WB = тұтас қан
D50W-ны WB-ға қосқаннан кейін, пайыздық сұйылтуға бейімделген тромбоциттердің жоғалуы 7,7% құрады (310±73 vs. 286±96), ал D50W-дағы PRP сұйылтуы үшін бұл көрсеткіш 17,8% болды (664±348 vs. 544±277). MPV WB 16,8%-ға өсті (10,1 ± 0,5-тен 11,8 ± 0,6-ға дейін), ал MPV PRP 26%-ға өсті (9,2 ± 0,8 vs. 11,6 ± 0,7). Тромбоциттер санының азаюы мен MPV жоғарылауының орташа айырмашылықтары PRP кезінде айтарлықтай көп болғанымен, WB ішіндегі тромбоциттер санының азаюындағы өзгерістер айтарлықтай болды (310 ± 73-тен 286 ± 96-ға дейін (-7,7%); p = .06) және MPV жоғарылауы айтарлықтай болды (10,1 ± 0,5-тен 11,8 ± 0,6-ға дейін (+16,8) p < .001). Тромбоциттер санының азаюы мен MPV жоғарылауының орташа айырмашылықтары PRP кезінде айтарлықтай көп болғанымен, WB ішіндегі тромбоциттер санының азаюындағы өзгерістер айтарлықтай болды (310 ± 73-тен 286 ± 96-ға дейін (-7,7%); p = .06) және MPV жоғарылауы айтарлықтай болды (10,1 ± 0,5-тен 11,8 ± 0,6-ға дейін (+16,8) p < .001).Тромбоциттер санының азаюы мен CVR жоғарылауының орташа айырмашылықтары PRP кезінде айтарлықтай үлкен болғанымен, WB ішіндегі тромбоциттер санының азаюындағы өзгерістер айтарлықтай болды (310 ± 73-тен 286 ± 96-ға дейін (-7,7%); p = 0,06).увеличение MPV было значительным (от 10,1 ± 0,5 до 11,8 ± 0,6 (+16,8) p < 0,001). MPV жоғарылауы айтарлықтай болды (10,1 ± 0,5-тен 11,8 ± 0,6-ға дейін (+16,8) p < 0,001).尽管PRP 在血小板计数减少和MPV 增加方面的平均差异显着更大，但WB内血小板计数减少的变化几乎是显着的（310 ± 73 至286 ± 96 (-7,7%)；p = .06）和V的增加是显着的（10,1 ± 0,5 到11,8 ± 0,6 (+16,8) p < ,001）。尽管 PRP 在 血小板 计数 和 和 增加 方面 的 平均 差异 显着 大 ， 但 杀 大 ， 但 杕 内减少 的 几乎 是 显着 的 （（（310 ± 73 至 286 ± 96 (-7,7%) ； p = .06）和MPV 的墀昈着 的墀是1. ± 0,5 到11,8 ± 0,6 (+16,8) p < ,001）。WB ішіндегі тромбоциттер санының азаюындағы өзгеріс айтарлықтай болды (310 ± 73-тен 286 ± 96-ға дейін (-7,7%); p = 0,06), дегенмен PRP тромбоциттер санының төмендеуі мен MPV жоғарылауында орташа айырмашылықтарды айтарлықтай үлкен деп көрсетті, ал MPV жоғарылауы айтарлықтай болды.(от 10,1 ± 0,5 до 11,8 ± 0,6 (+16,8) р < 0,001). (10,1 ± 0,5-тен 11,8 ± 0,6-ға дейін (+16,8) p < 0,001).
MPV-де айтарлықтай өзгерісті көру үшін 20% глюкозаның соңғы концентрациясы қажет болды, бірақ MPV-дегі өзгеріс 25% соңғы концентрацияда айқынырақ болды. Тромбоциттер жоғалуы бастапқы төмендеуден кейін тұрақтанды. Біз CVR-дің бастапқы күрт төмендеуін байқадық, дегенмен, CVR 25% соңғы глюкоза концентрациясында тез қалпына келді, бұл 20% және 15% соңғы глюкоза концентрацияларында байқалған CVR деңгейінен айтарлықтай жоғары болды (3-сурет және 3-кестенің сол жағында; көлеңкелі қораптар). Бонферрони түзетуі 0,01 болатын p-мәндерін ≤ альфа деп көрсетіңіз). Сондай-ақ, PLT санының бастапқы күрт төмендеуі байқалды, ол 0-15 с бастапқы фазасында байқалды, содан кейін тұрақты болып қалды (15 с-тан 30 мин-ке дейін; 4-кестенің сол жағында).
Қанға әртүрлі концентрациядағы глюкозаны қосу MPV-нің бастапқыда тез төмендеуіне әкелді, содан кейін концентрацияға тәуелді қалпына келу 20%-дан астамды құрады. Аңыз бойынша сұйылтылғаннан кейінгі глюкоза концентрациясы көрсетілген. D15, D20 және D25 1:1 сұйылтумен жүргізілді. D21 және D41 1:5 сұйылтумен жүргізілді.
4-кестеде гипертониялық глюкозада сұйылтылған кездегі тромбоциттер санының өзгеруі көрсетілген. Біз 1:1 сұйылту кезіндегі және 1:5 сұйылту кезіндегі PLT санының бірден төмендеуі арасындағы дозаға тәуелді байланысты байқадық. Жеке топ ретіндегі 1:1 сұйылтуларды 1:5 сұйылтулармен салыстыра отырып, 1:1 тобында тромбоциттер санының бірден төмендеуі 1:5 тобынан 66±48000 (23%) төмен болды, ал 1:5 тобында 99±69000 (37%). , p = 0,014). Бірінші өлшеу нүктесінде бастапқы төмендеуден кейін тромбоциттер саны глюкозаның пайыздық үлесі ретінде тұрақтанды (4-сурет).
Қанды глюкозаға 1:1 қатынасында қосқанда, тромбоциттер саны шамамен 25%-ға азаяды. Дегенмен, қанды 1:5 қатынасында қосқанда, азаю әлдеқайда көп болды – шамамен 50%.
41% глюкоза MPV-ны 25% немесе 21%-ға қарағанда тезірек және күрт арттырды. MPV нәтижелері 3-суретте көрсетілген. Барлық басқа сұйылтуларда 50% глюкоза қосқаннан кейін MPV-ның бастапқыда бірден төмендеуі байқалмады. 25% глюкозаны қолданған кезде (соңғы сұйылтуда глюкоза концентрациясы 20,8%), MPV-ның өзгеруі 1:1 сұйылтудағы 20% глюкозаның өзгеруімен салыстырмалы болды (3-сурет). MPV өзгерістері бастапқыда 41% аралас концентрацияда 25%-ға қарағанда көбірек болғанымен, 16 минуттан кейін 41% және 25% арасындағы MPV айырмашылығы енді маңызды болмады (3-кесте, оң жақта). Сондай-ақ, 25% глюкоза MPV-ны 20,8%-ға қарағанда тиімдірек арттырғаны қызықты.
Бұл in vitro зерттеу біздің гипотезамызды ішінара растады. Декстроза қоспасымен тромбоциттердің ішінара лизисі, тромбоциттердің гипертониялық деңгейге дейін тез орналасуы және гипертониялық декстрозаның > 25%-ға концентрациясына жауап ретінде MPV айтарлықтай жоғарылауы байқалды. Декстроза қоспасымен тромбоциттердің ішінара лизисі, тромбоциттердің гипертониялық деңгейге дейін тез орналасуы және гипертониялық декстрозаның > 25%-ға концентрациясына жауап ретінде MPV айтарлықтай жоғарылауы байқалды. Бұл показал потенциальный частичный лизис тромбоцитов примечается декстрозы, бросую аккомодацию тромбоцитов дейін экстремального гипертонуса және значительное повышение MPV в ответ на гипертонической локализация декстрозы > 25%. Декстрозамен тромбоциттердің ішінара лизисі, тромбоциттердің гипертониялық деңгейге дейін тез орналасуы және декстрозаның гипертониялық деңгейі >25%-ға жауап ретінде MPV айтарлықтай жоғарылауы байқалды.它显示出通过葡萄糖混合物潜在的部分血小板溶解，血小板快速适应极端高渗，以及响应> 25% 浓度的高渗葡萄糖时MPV 显着上升。它 显示 出 通过 葡萄糖 潜在 的 部分 血小板 溶解 血小板 快速 适应 快速 适应 极市响应> 25% 浓度 高渗 葡萄糖 时 时 mpv 显着。。。。。 Ол глюкозды потенциальды лизис тромбоцитов смесями, жылдам бейімделу тромбоцитов к экстремальді гипертонусы және значительное увеличение MPV в ответ на локирования гипертониялық глюкозы > 25%. Бұл глюкоза қоспаларымен тромбоциттердің ішінара лизисін, тромбоциттердің шамадан тыс гипертониялыққа тез бейімделуін және гипертониялық глюкоза >25% болғанда MPV айтарлықтай жоғарылауын көрсетеді.Бастапқы өсім глюкоза әсеріне 41,6% жеткенде максималды болды, бірақ MPV жоғарылауы әсер етуден шамамен 20 минуттан кейін глюкоза әсеріне 25% жетті.
Тромбоциттердің концентрациясына глюкоза әсер етеді. Біз глюкозаның барлық сұйылтуларында PLT мөлшерінің төмендегенін байқадық. PRP сериясының H2O (0%) сұйылтуларындағы тромбоциттер санының күрт төмендеуі осмостық лизиспен байланысты болуы мүмкін. Немесе, бұл тромбоциттердің жиналуынан туындаған артефакт болуы мүмкін, бірақ бұл сұйылту кезінде MPV өзгерісінің болмауына қарама-қайшы. Бұл жаңалық кейбір тромбоциттердің гипоосмолярлыққа өте сезімтал екенін білдіреді.
Глюкозаның барлық 1:1 сұйылтуларында PLT мөлшері тіпті D5W-қа (252 мОсм гипотониялық) 20-30%-ға төмендеді, бұл глюкозаның ерекше осмостық емес әсерін көрсетуі мүмкін, себебі PLT да, MPV да глюкоза концентрациясының үш есе жоғарылауында өзгеріссіз қалды. D5W-дан D25W-ға дейін. Шын мәнінде, PLT концентрациясы осмолярлықтың жоғарылауымен аздап артуға бейім болды.
PLT-нің 1:1 және 1:5 сұйылтулары арасындағы төмендеуі еру әсері бастапқы және соңғы глюкоза концентрациясына байланысты екенін білдіреді. Егер ол тек бастапқы концентрацияға тәуелді болса, онда PLT-нің 1:1 концентрациялары арасындағы төмендеуінде айырмашылық болады деп күтуге болады. Бірақ бізде олай емес. Егер лизис әсері тек соңғы глюкоза концентрациясына байланысты болса, онда біз 20% 1:1 сұйылту мен 20,8% 1:5 сұйылту арасында үлкен айырмашылық күтпейміз. Соған қарамастан, біз мұны істедік.
Егер тромбоциттердің жоғалуы тромбоциттердің лизисіне байланысты болса, ішінара лизат түзіледі, содан кейін цитокиндер мен өсу факторлары жасушадан тыс ортаға шығарылады. Бірнеше зерттеулер тромбоцит лизатының пролиферация ерітіндісі ретінде PRP сияқты тиімді екенін көрсетті [11]. PRP өзі пролиферацияны емдеу үшін тиімді шешім екені дәлелденді [12-14].
Белсенді емес тромбоциттер бірнеше ішкі құрылымдармен күшейтілген диск түрінде айналады. Белсенділік кезінде олар сфералық немесе амеба пішінін алады, нәтижесінде көлем ұлғаяды. Көлемнің ұлғаюы беткі ауданның ұлғаюын талап етеді, бұл ашық түтікше жүйесінің (OCS) экструзиясының және мембранаға экзоциттік түйіршіктердің қосылуының нәтижесі болып табылады. Гипертониялық глюкоза тудыратын MPV жоғарылауы осы механизмдердің біріне немесе екеуіне де қатысты ма, жоқ па, әлі анықталған жоқ, бірақ егер соңғысы болса, онда MPV жоғарылауы дегрануляцияны көрсетеді.
Бұл зерттеу PRP немесе қан тромбоциттеріндегі глюкозаның жоғары концентрациясына ұшырау MPV-нің 15 минут ішінде жоғарылауына, глюкоза концентрациясының сәйкесінше 25% және 41,6% құрайтынын көрсетті.
Тромбоциттер MPV жоғарылауы кальций ағынына жауап ретінде қоршаған микротүтікшелердің шатасқан жерлерінің кеңеюіне байланысты болуы мүмкін. Liu және т.б. Глюкозаның тромбоциттер TRPC6 арнасы арқылы кальций ағынын делдал ететіні көрсетілген [6]. Біздің болжамымыз бойынша, глюкоза микротүтікшелердің шатасқан жерлерінің босаңсуын тудырады, бұл MPV жоғарылауына және тромбоциттер сезімталдығына және/немесе белсенділігіне әкеледі. Дегенмен, біздің нәтижелерімізге қарағанда, бұл тек бір бөлігі ғана. Біздің сынақтарымызда D25W-тан төмен концентрация MPV жоғарылауына әкелмеді. Біз 12,5% және 25% аралығындағы глюкоза концентрациясының әсеріне ұшырамағандықтан, біздің 1-фаза нәтижелері глюкоза концентрациясының бұл диапазонында MPV жоғарылауына әкелетін шекті мән болуы мүмкін екенін көрсетеді. 3 және 4-сатылардағы қосымша сынақтар 20-25% глюкозаның бұл үшін шекті мән болып көрінетінін көрсетті, бірақ неге екені белгісіз.
Біз сондай-ақ центрифугалаудан кейін MPV-нің шамамен 9%-ға төмендегенін байқадық. MPV-нің бұл төмендеуі центрифуганың эритроциттер қабатында қалып қойған үлкенірек және тығыз тромбоциттермен байланысты ма, жоқ па, белгісіз. Бұл бақылау клиниктер үшін маңызды болуы мүмкін, себебі бұл PRP тромбоциттерінің WB тромбоциттерінің кішірек және тығыздығы азырақ жиынтығы екенін білдіруі мүмкін.
Алдыңғы зерттеуде біз PRP-ны қолмен дайындаудың арзан екенін көрсеттік [8]. Егер глюкоза тін тромбоциттерін немесе PRP-ны сезімтал етсе, оларды белсендіруге сезімтал етсе немесе PRP ішінара лизат қасиеттерімен өндірілсе, бұл регенерацияны күшейтіп, терапия қажеттілігін азайтуы мүмкін. Сондықтан, PRP мен жоғары концентрацияланған глюкозаның үйлесімі PRP немесе глюкозаның өзін-өзі қолданудан гөрі тиімдірек болуы мүмкін.
Біздің зерттеуімізде бірнеше кемшіліктер бар. Біріншіден, біз бірнеше түрлі әдістерден алынған PRP қолданамыз. Бұл қарама-қайшы нәтижелерге әкелуі мүмкін. Екіншіден, тромбоциттердің белсендірілуінің орын алғанын дәлірек анықтау үшін біз үлгілеріміздің ешқайсысына биохимиялық талдау жасай алмадық. Альфа түйіршіктерінің дегрануляция дәрежесін немесе болуын жақсырақ түсіну үшін біз P-селектинді, тромбоцит факторы 4-ті, моноцитарлық тромбоцит агрегаттарын немесе тромбоциттердің белсендірілуінің басқа маркерлерін өлшегіміз келеді, бірақ бұл зерттеудің шеңберінен тыс. Үшіншіден, біз глюкозаға ұшыраған тромбоциттерде MPV жоғарылауы микротүтікшелердің шатасуына әсер етуіне байланысты екенін электронды микроскопия немесе басқа әдістер арқылы растай алмадық.
25% глюкозасы бар WB немесе PRP қоспалары MPV-ны арттырды, бұл тромбоциттердің белсенділігінің басталуын білдіреді, дегенмен бұл зерттеу агрегацияның немесе дегрануляцияның дамуын көрсетпеді. Гипертониялық глюкоза қоспасы тромбоциттердің жоғалуына әкелді, бұл литикалық әсерді білдіруі мүмкін. Тромбоциттердің ішінара белсенділігі немесе лизисі тромбоциттерді инъекциядан кейін тіндердің регенерациясын тудыруы мүмкін. Бұл өзгерістер қандай клиникалық салдарға әкелуі мүмкін екені белгісіз. Әрі қарай зерттеулер белсенділіктің немесе лизистің дәлірек өлшемдерін көрсетті және WB немесе PRP-мен гипертониялық глюкоза қоспаларының әртүрлі клиникалық әсерлерін бағалады.
Глюкоза пролиферативті терапиясы - клиникалық зерттеулерді тез кеңейтіп, қолдайтын қарапайым және арзан регенеративті терапия. Бұл зерттеу расталған жағдайда пролиферативті терапияның регенеративті механизмінің бір бөлігін түсінуге көмектесетін физиологиялық механизмді ұсынады.
АҚШ, Канзас-Сити, Канзас-Сити медицина мектебіндегі Миссури университетіндегі биомедициналық және денсаулық сақтау информатикасы
Адам субъектілері: Осы зерттеуге қатысушылардың барлығы келісім берді немесе бермеді. Халықаралық жасушалық медицина қоғамы ICMS-2017-003 мақұлдауын берді. Халықаралық жасушалық медицина қоғамының институционалдық шолу кеңесі келесі хаттаманы одан әрі пайдалану үшін мақұлдады: Тақырыбы: Бастапқы CBC тромбоциттер санына негізделген тромбоциттерге бай плазмалық дәрілік заттардың шығымын есептеу. Жануарлар субъектілері: Барлық авторлар бұл зерттеуге ешқандай жануарлар немесе тіндер қатыспағанын растады. Мүдделер қақтығысы: ICMJE бірыңғай ақпарат нысанына сәйкес, барлық авторлар келесіні мәлімдейді: Төлем/қызмет туралы ақпарат: Барлық авторлар ұсынылған жұмыс үшін ешқандай ұйымнан қаржылық қолдау алмағанын мәлімдейді. Қаржылық қатынастар: Барлық авторлар қазіргі уақытта немесе соңғы үш жыл ішінде ұсынылған жұмысқа қызығушылық танытуы мүмкін кез келген ұйыммен қаржылық қатынастары жоқ екенін мәлімдейді. Басқа қатынастар: Барлық авторлар ұсынылған жұмысқа әсер етуі мүмкін басқа қатынастар немесе әрекеттер жоқ екенін мәлімдейді.
Харрисон Т.Е., Боулер Дж., Ривз К. және т.б. (17 мамыр 2022 ж.) Глюкозаның тромбоциттер саны мен көлеміне әсері: регенеративті медицинаға әсері. Cure 14(5): e25081. doi:10.7759/cureus.25081
© Авторлық құқық 2022 Харрисон және т.б. Бұл Creative Commons Attribution лицензиясының CC-BY 4.0 шарттары бойынша таратылатын ашық қолжетімді мақала. Бастапқы автор мен дереккөз көрсетілген жағдайда кез келген құралда шектеусіз пайдалануға, таратуға және көшіруге рұқсат етіледі.