"لا تشكوا أبداً في أن مجموعة صغيرة من المواطنين المفكرين والمخلصين يمكنهم تغيير العالم. في الواقع، إنها المجموعة الوحيدة الموجودة."
تتمثل مهمة كيوريوس في تغيير النموذج القديم للنشر الطبي، والذي يمكن أن يكون فيه تقديم الأبحاث مكلفًا ومعقدًا ويستغرق وقتًا طويلاً.
البلازما الغنية بالصفائح الدموية/PRP، تجديد الأنسجة، تنشيط الصفائح الدموية، العلاج التكاثري بالجلوكوز، الصفائح الدموية، العلاج التكاثري
يُرجى الاستشهاد بهذه المقالة على النحو التالي: هاريسون تي إي، بولر جيه، ريفز كيه، وآخرون. (17 مايو 2022). تأثير الجلوكوز على عدد الصفائح الدموية وحجمها: دلالات على الطب التجديدي. مجلة كيور 14(5): e25081. doi:10.7759/cureus.25081
يُستخدم البلازما الغنية بالصفائح الدموية (PRP) ومحاليل الجلوكوز عالية التركيز بشكل شائع في الحقن في الطب التجديدي، وأحيانًا معًا. لم يُبلغ سابقًا عن تأثير الجلوكوز عالي التركيز على تحلل الصفائح الدموية وتنشيطها. اختبرنا تأثير تركيزات الجلوكوز المرتفعة على عدد الصفائح الدموية وكريات الدم الحمراء، بالإضافة إلى أحجام الخلايا في البلازما الغنية بالصفائح الدموية والدم الكامل. لوحظ انخفاض جزئي سريع في عدد الصفائح الدموية مع جميع مخاليط الجلوكوز الممزوجة بالبلازما الغنية بالصفائح الدموية أو الدم الكامل، وهو ما يتوافق مع التحلل الجزئي. بعد الدقيقة الأولى، ظلت أعداد الصفائح الدموية مستقرة، مما يشير إلى تكيف سريع للصفائح الدموية المتبقية مع فرط التوتر الشديد (>2000 ملي أوزمول). بعد الدقيقة الأولى، ظلت أعداد الصفائح الدموية مستقرة، مما يشير إلى تكيف سريع للصفائح الدموية المتبقية مع فرط التوتر الشديد (>2000 ملي أوزمول). بعد الدقائق الأولى، أدى العديد من الترومبون إلى الاستقرار الذي يوفر إقامة جيدة في الترومبوسا إلى أقصى درجة (>2000 ميكرومتر) gipertonusas. بعد الدقيقة الأولى، ظل عدد الصفائح الدموية مستقرًا، مما يشير إلى تكيف سريع للصفائح الدموية المتبقية مع فرط التوتر الشديد (>2000 ملي أوزمول).في هذه الحالة، يجب أن يكون حجمها أكبر من 2000 مللي أوسمول (> 2000 ملي أوسمال).2000 ملي أوسمال. بعد الدقائق الأولى، أدى عدد كبير من الترومبون إلى استقرار ما يؤدي إلى التكيف التام مع الترومبون القديم أقصى (> 2000 ميكرومتر) giperosmolularnomu состоянию. بعد الدقيقة الأولى، ظل عدد الصفائح الدموية مستقرًا، مما يشير إلى تكيف سريع للصفائح الدموية المتبقية مع حالة فرط الأسمولية الشديدة (>2000 ملي أوزمول).أدت تركيزات الجلوكوز التي تبلغ 25% فأكثر إلى زيادة ملحوظة في متوسط ​​حجم الصفائح الدموية، مما يشير إلى مرحلة مبكرة من تنشيط الصفائح. ولا تزال هناك حاجة إلى مزيد من الدراسات لتحديد ما إذا كان يحدث تحلل للصفائح الدموية أو تنشيط لها، وما إذا كان حقن الجلوكوز عالي التركيز وحده أو بالاشتراك مع البلازما الغنية بالصفائح الدموية قد يوفر فائدة سريرية إضافية.
في خمسينيات القرن العشرين، اكتشف الجراح الأمريكي جورج هاكيت أنه يستطيع تخفيف آلام المفاصل والظهر بشكل دائم لدى العديد من المرضى عن طريق حقن محلول محفز لتكاثر الخلايا في الأوتار والأربطة. وأظهرت تجاربه على الأرانب أن هذا العلاج، الذي أطلق عليه اسم العلاج التكاثري، أدى إلى تضخم الأوتار وتقويتها. وقد أكدت الدراسات النسيجية إنتاج الكولاجين الجديد خلال هذه العملية [1].
خلال العقود القليلة الأولى، جُرِّبت العديد من حلول التوزيع المختلفة. وبحلول التسعينيات، اعتبر معظم الممارسين أن التركيزات العالية من الجلوكوز هي الطريقة الأكثر أمانًا وفعالية. ومع ذلك، لا تزال آلية عملها غير واضحة.
أُجريت دراسات سريرية قليلة في القرن العشرين في أعقاب أعمال هاكيت. ومع ذلك، في العقد الأول من القرن الحادي والعشرين، تجدد الاهتمام بهذا المجال، وأُجريت العديد من التجارب السريرية الناجحة للعلاج التكاثري لعلاج آلام أسفل الظهر [2]، والتهاب مفصل الركبة [3]، والتهاب اللقيمة الوحشية [4].
يتطلب تجديد الأنسجة مشاركة الخلايا الجذعية. لذا، لا بد أن تحفز التركيزات العالية من الجلوكوز هجرة الخلايا الجذعية وتكاثرها وتمايزها. نفترض أن الصفائح الدموية قد تعمل كناقلات، وأن التركيزات العالية من الجلوكوز قد تحفز الصفائح الدموية على إطلاق السيتوكينات وعوامل النمو، مما يعزز عمليات التجديد، وخاصة هجرة الخلايا الجذعية إلى مناطق ذات تركيزات عالية من الجلوكوز.
يسبق تنشيط الصفائح الدموية دائمًا ارتفاع مستوى الكالسيوم داخل الخلايا [5]. وقد أظهرت دراسة أجراها ليو وآخرون عام 2008 أن ارتفاع مستويات الجلوكوز يزيد من نشاط قنوات مستقبلات الجهد العابر من النوع 6 (TRPC6) في غشاء البلازما، مما يؤدي إلى تدفق أيونات الكالسيوم إلى داخل الصفائح الدموية [6]. كما أظهرت دراسة أخرى أن تعرض المنطقة الهامشية للأنابيب الدقيقة لأيونات الكالسيوم يُسبب استرخاءً وتمددًا وتشوهًا في هذه المنطقة، مما يؤدي بدوره إلى تغيير شكلها من قرصي إلى كروي، وبالتالي تغير متوسط ​​حجم الصفيحة الدموية (MPV) [7].
تتمثل فرضيتنا في هذه الدراسة في أن تعرض الصفائح الدموية لتركيزات عالية من الجلوكوز يؤثر على المنطقة الهامشية للأنابيب الدقيقة والبيئة داخل الخلايا، مما يؤدي إلى زيادة في متوسط ​​حجم الصفائح الدموية.
وقّع جميع المشاركين على نموذج الموافقة المستنيرة بعد شرح تفاصيل الدراسة وقبل استلام العينات. في هذه الدراسة، استُخدمت فقط عينات البلازما الغنية بالصفائح الدموية (PRP) التي يزيد فيها الهيماتوكريت عن 2%، وذلك لإتاحة إمكانية تضمين عدد كريات الدم الحمراء (عدد الكريات الحمراء) ومتوسط ​​حجم الكرية الحمراء (MCV) للمقارنة.
أُجريت الدراسة على أربع مراحل، كانت المرحلة الأولى هي البلازما الغنية بالصفائح الدموية (PRP)، أما المرحلتان المتبقيتان فكانتا باستخدام الدم الكامل (الجدول 1). وكما ذُكر سابقًا [8]، حُسبت جميع قوى الطرد المركزي النسبية (RCF، قوة g) من نقطة المنتصف (Rmid، بالسنتيمتر) لعمود الدم في المحقنة الطاردة المركزية. وقد اخترنا استخدام متوسط ​​حجم الصفائح الدموية (MPV) كمؤشر على تحسس الصفائح الدموية، وعدد الصفائح الدموية كمؤشر على احتمالية تحللها، وكلاهما يُمكن قياسه بسهولة باستخدام أجهزة تحليل الدم القياسية.
في المرحلة الأولى، تبرع 47 متطوعًا بعينات دم - أنبوب واحد يحتوي على حمض الإيثيلين ديامين رباعي الأسيتيك (EDTA) وعينة دم كاملة واحدة من البلازما الغنية بالصفائح الدموية (PRP) (مضادة للتخثر باستخدام سترات الصوديوم (NaCl، 3%)) (الجدول 1). ضع جهاز الخلط في الأنبوب فورًا. أُجريَ تعداد الدم الكامل (CBC) على عينات EDTA ثلاث مرات، وحُلِّلت عينات NaCl ثلاث مرات لتحليل تعداد الدم الكامل، ثم حُضِّرت البلازما الغنية بالصفائح الدموية (PRP) باستخدام الطرق المختلفة المذكورة أعلاه [8]. حُضِّرت جميع عينات البلازما الغنية بالصفائح الدموية (PRP) بالطرد المركزي عند قوة 900-1000 غرام. امزج كل عينة من عينات البلازما الغنية بالصفائح الدموية (PRP) على جهاز الخلط الدوامي لمدة 5-10 ثوانٍ، ثم قسّمها إلى خمسة أجزاء متساوية حجم كل منها 0.5 مل في أنابيب.
لتقييم تأثير تعرض الصفائح الدموية على ارتفاع تركيز الجلوكوز، تم مزج كميات متساوية (0.5 مل) من محاليل الجلوكوز المائية بتركيزات 0%، 5%، 12.5%، 25%، و50% مع عينات الصفائح الدموية للحصول على تراكيز 0%، 2.5%، 6.25%، 12.5%، و25% من خليط الجلوكوز، ثم خُلطت الأنابيب على جهاز رجّ الأنابيب لمدة 15 دقيقة. تم تحليل إجمالي القدرة المضادة للأكسدة (TAC) لكل خليط ثلاث مرات بعد 15 دقيقة. تم حساب متوسط ​​عدد الصفائح الدموية (PLT)، وعدد كريات الدم الحمراء (RBC)، ومتوسط ​​حجم الكرية (MCV)، ومتوسط ​​حجم الصفائح الدموية (MPV) لكل أنبوب، كما تم حساب متوسط ​​عدد الصفائح الدموية، وعدد كريات الدم الحمراء، ومتوسط ​​حجم الكرية، ومتوسط ​​حجم الصفائح الدموية لجميع عينات البلازما الغنية بالصفائح الدموية (PRP).
بعد اكتمال المرحلة الأولى من جمع البيانات، لاحظنا زيادة ملحوظة في حجم الصفائح الدموية في صفائح البلازما الغنية بالصفائح الدموية (PRP) بعد إضافة محلول دكستروز بتركيز ٥٠٪ (D50W). لا تمثل صفائح البلازما الغنية بالصفائح الدموية بالضرورة جميع الصفائح الدموية في الدم، كما أن وسط البلازما الغنية بالصفائح الدموية يختلف عن وسط الدم الكامل. لذلك، قررنا إجراء تجربة ثانية لدراسة تأثير إضافة محلول دكستروز بتركيز ٥٠٪ (D50W) إلى الدم الكامل.
في الجولة الثانية، اخترنا حجم عينة يبلغ 30 بناءً على نتائج السلسلة الأولى، كما هو موضح في قسم التحليل. في هذه السلسلة، تبرع 20 متطوعًا بعينات دم (الجدول 1). سُحبت عينة من الدم الكامل (1.8 مل) في محقنة سعة 3 مل، وتم منع تخثرها بإضافة 0.2 مل من محلول كلوريد الصوديوم بتركيز 40%. خُلطت عينة الدم الكاملة في المحقنة لمدة خمس ثوانٍ باستخدام جهاز الخلط الدوامي، ثم حُللت نتائج تعداد الدم الكامل ثلاث مرات. بعد التحليل، أُضيف الدم المعالج بمضادات التخثر إلى 2 مل من محلول جلوكوز بتركيز 50% في محقنة سعة 5 مل (كان تركيز الجلوكوز النهائي حوالي 25%)، ووُضعت العينة في أنبوب رجّ لمدة 30 دقيقة. بعد 30 دقيقة، تم تحليل عينات الدم الكامل (WB) في محاقن D25/CBC ثلاث مرات. حُسب متوسط ​​عدد الصفائح الدموية، وعدد كريات الدم الحمراء، ومتوسط ​​حجم الكرية (MCV)، ومتوسط ​​حجم الصفائح الدموية (MPV) لكل محقنة، كما حُسب متوسط ​​عدد الصفائح الدموية، وعدد كريات الدم الحمراء، ومتوسط ​​حجم الكرية (MCV)، ومتوسط ​​حجم الصفائح الدموية (MPV) لكل عينة قبل وبعد إضافة الجلوكوز.
نظرًا لأن الصفائح الدموية في الدم الكامل تتعرض عادةً للجلوكوز عالي التركيز أثناء العلاج بالجلوكوز التكاثري نتيجةً للحقن طفيف التوغل، ولأن الجمع بين البلازما الغنية بالصفائح الدموية والجلوكوز عالي التركيز قبل الحقن مباشرةً ليس شائعًا، فقد قررنا دراسة الجلوكوز عالي التركيز مع الدم الكامل في القسم 1، الخطوتين الثالثة والرابعة. في كل مرحلة، تبرع 20 متطوعًا بـ 7-8 مل من محلول ACD-A (حمض يحتوي على سترات الصوديوم (22.0 جم/لتر)، وحمض الستريك (8.0 جم/لتر)، والجلوكوز (24.5 جم/لتر)، ومحلول سترات الدكستروز) كمضادات لتخثر الدم (الجدول 1). استُخدمت فقط مخاليط الجلوكوز التي تزيد نسبتها عن 12.5% ​​لتحديد النسبة المئوية العتبية المرتبطة بزيادة متوسط ​​حجم الصفائح الدموية. في المرحلة الثالثة، وُضع 1 مل من الدم في أنبوب اختبار. ثم يُخلط الدم على جهاز الخلط الدوامي لمدة 10 ثوانٍ بإضافة 1 مل من محلول الجلوكوز بتركيز 30% أو 40% أو 50% إلى الأنبوب للحصول على تركيز نهائي للجلوكوز بنسبة 15% أو 20% أو 25% على التوالي. تم تحليل عينات الدم المحتوية على الجلوكوز باستخدام تعداد الدم الكامل (CBC) مباشرةً بعد الخلط، وتكرر التحليل كل دقيقتين لمدة 30 دقيقة.
أثناء الخلط الأولي، يؤدي إضافة محلول الجلوكوز عالي التركيز بنسبة 1:1 مع الدم الكامل أو البلازما الغنية بالصفائح الدموية إلى تعريض الصفائح الدموية لتركيزات أعلى من 25% لعدة ثوانٍ. في الخطوة الرابعة، ولتقييم تأثير الجلوكوز عالي التركيز بأقل تركيزات ذروة أولية واختبار الحد الأعلى لتأثير الجلوكوز، أضفنا كمية صغيرة فقط من الدم إلى محلول دكستروز 25% أو 50%. نضع 1 مل من محلول دكستروز 25% أو 50% في أنبوب ونضيف 0.2 مل من الدم الكامل مع رجّ العينة لمدة 10 ثوانٍ. في هذه الحالات، تعرض الدم للجلوكوز بتركيز أعلى بنسبة 20% تقريبًا من التركيز النهائي، بدلًا من 50% كما في المرحلة الثالثة، مما أدى إلى تركيزات نهائية للجلوكوز بلغت 20.8% و41.6%. تم تحليل العينات المخلوطة في نفس الفترة الزمنية كما في الخطوة الثالثة.
في الخطوة الأولى من كل سلسلة تخفيف للجلوكوز، تم أخذ 30 عينة، حيث كان هذا الحجم مناسبًا للدراسة التجريبية [9]. في نهاية كل مرحلة (بما في ذلك المرحلة الأولى)، يتم تقييم مدى كفاية حجم العينة باستخدام الصيغة المستخدمة لتحديد حجم العينة اللازم لتقدير متوسط ​​متغير النتيجة المستمر في مجتمع واحد. الصيغة: n = Z² × SD² / E². في هذه المعادلة، Z هي قيمة Z، وSD هو الانحراف المعياري، وE هو الخطأ المطلوب [10]. قيمة ألفا لدينا هي 0.05، والتي تقابل قيمة Z تساوي 1.96، ونتوقع خطأً بنسبة 5%. لذا، نحسب n = (1.96² × SD²) / 52. أظهرت النتائج أن حجم العينة المطلوب لكل مرحلة كان أصغر من العدد الفعلي للعينات التي تم جمعها.
خلال الفترات 1 و3 و4، وباستخدام أكثر من تركيز واحد للجلوكوز، تم تحليل تأثير تراكيز الجلوكوز المختلفة بمقارنة التغير النسبي بين الزمن 0 وكل زمن لاحق (المرحلة 1 عند 15 دقيقة، والفترة 3 عند 15 دقيقة، ثم كل دقيقتين). قورنت معدلات التغير لكل فترة زمنية باستخدام اختبار مان-ويتني U، لأن البيانات لم تتبع التوزيع الطبيعي وفقًا لاختبار شابيرو-ويلك. ولأن تحليلًا فرديًا لعدة مجموعات (خمس مجموعات) أُجري في الخطوات الأولى والثالثة والرابعة (خمس مجموعات إجمالًا)، فقد تم تطبيق تصحيح بونفيروني لضبط قيمة ألفا المطلوبة لتكون ≤ 0.01، ولكن ليس ≤ 0.05.
انخفاض عدد الصفائح الدموية مع جميع تركيزات الدكستروز مفرط التوتر وزيادة في متوسط ​​حجم الصفائح الدموية في الصفائح الدموية PRP عند تركيز الدكستروز >12.5%: ارتفع عدد الصفائح الدموية PRP من مرة إلى خمس مرات مقارنة بالدم الكامل الأساسي، ويختلف ذلك باختلاف الطريقة (غير موضح). انخفاض عدد الصفائح الدموية مع جميع تركيزات الدكستروز مفرط التوتر وزيادة في متوسط ​​حجم الصفائح الدموية في الصفائح الدموية PRP عند تركيز الدكستروز >12.5%: ارتفع عدد الصفائح الدموية PRP من مرة إلى خمس مرات مقارنة بالدم الكامل الأساسي، ويختلف ذلك باختلاف الطريقة (غير موضح). تقليل كمية الترومبونات مع جميع تركيزات دكسترون الجبرتون وMPV المتفوق في الترومبون PRP مع التركيزات المواد الغذائية > 12,5%: مجموعة من البلازما من البلازما الغنية بالصفائح الدموية (PRP) تنمو خلال 1-5 مرات على الأقل مع نتيجة نهائية حسنًا ، في إدراك الطريقة (غير واضحة). انخفاض عدد الصفائح الدموية عند جميع تركيزات الدكستروز المفرط التوتر وزيادة متوسط ​​حجم الصفائح الدموية في الصفائح الدموية PRP عند تركيز الدكستروز >12.5%: زاد عدد الصفائح الدموية PRP من 1 إلى 5 مرات مقارنة بالدم الكامل الأساسي، اعتمادًا على الطريقة (غير موضح). ).أكثر من 12.5% ​​من التخفيضات في أسعار الفائدة على المركبات، وفحص PRP لـ MPV على سبيل المثال: قد يستغرق الأمر وقتًا طويلاً، حيث يتم إجراء عملية PRP في 1 إلى 5 أيام، ويتم إجراء هذا الاختبار. عند تركيز الجلوكوز >12.5%، يؤدي التركيز العالي للجلوكوز إلى انخفاض عدد خلايا الدم، ويزداد متوسط ​​حجم الصفائح الدموية في البلازما الغنية بالصفائح الدموية: بالمقارنة مع حجم الدم الطبيعي، يزداد عدد خلايا الدم في البلازما الغنية بالصفائح الدموية من 1 إلى 5 أضعاف التركيز (غير موضح). عند تركيزات الجلوكوز> 12,5%، أدت جميع تركيزات الجلوكوز الجبرتونية إلى زيادة عدد الترومبونات، مما أدى إلى ارتفاع MPV في ترومبيتات PRP: يتم زيادة عدد الترومبيتات PRP من 1 إلى 5 تركيزات دقيقة تركيزات منخفضة بشكل نهائي، وفقًا للطريقة (غير موصى بها). عند تركيزات الجلوكوز >12.5٪، أدت جميع تركيزات الجلوكوز المرتفعة إلى انخفاض عدد الصفائح الدموية وزيادة متوسط ​​حجم الصفائح الدموية في الصفائح الدموية PRP: زاد عدد الصفائح الدموية PRP من 1 إلى 5 أضعاف مقارنة بتركيزات الدم الكامل الأساسية، اعتمادًا على الطريقة (كما هو موضح).يوضح الشكل 1 أن عدد الصفائح الدموية انخفض بنسبة 75% تقريبًا بعد التخفيف بالماء، وبنسبة 20-30% بعد 15 دقيقة من التخفيف بتراكيز مختلفة من الجلوكوز، مقارنةً بالبلازما الغنية بالصفائح الدموية الأساسية وتخفيف 1:1 مع تعديل الحجم (1- k1 مع تصحيح الحجم).
يتم التعبير عن عدد الخلايا في كل تخفيف كجزء من العدد الأصلي قبل التخفيف.
انخفض متوسط ​​حجم الصفائح الدموية (MPV) بشكل طفيف أثناء إنتاج البلازما الغنية بالصفائح الدموية (PRP)، دون أي تغيير إضافي في تركيزات التخفيف إلى 12.5% ​​في الماء أو الجلوكوز (بما في ذلك مخاليط PRP-جلوكوز بنسبة 25%)، ثم ازداد بأكثر من 20% بعد التخفيف في محلول جلوكوز بنسبة 50% (الشكل 2). في المقابل، لم تُظهر كريات الدم الحمراء أي تغيير ملحوظ في الحجم عند أي تخفيف باستثناء الماء.
يتم التعبير عن متوسط ​​حجم الخلايا في كل تخفيف كنسبة مئوية من الحجم الأصلي قبل التخفيف.
لوحظ انخفاض مماثل، وإن كان أقل وضوحًا، في عدد الصفائح الدموية وزيادة في حجم الخلايا في الدم الكامل المخفف بمحلول جلوكوز 50% (لتحضيره بمحلول جلوكوز 25%). يقارن الجدول 2 أعداد الخلايا وأحجامها في الدم الكامل المخفف بمحلول دكستروز 50% مع بيانات المرحلة الأولى من اختبار البلازما الغنية بالصفائح الدموية المخففة بمحلول دكستروز 50%. لم تكن التغيرات في عدد كريات الدم الحمراء ومتوسط ​​حجمها واضحة، ولم تكن محور اهتمامنا.
SD = الانحراف المعياري، MD = متوسط ​​الفرق بين المجموعات، SE = الانحراف المعياري لمتوسط ​​الفرق، RBC = كريات الدم الحمراء، PLT = الصفائح الدموية، PRP = البلازما الغنية بالصفائح الدموية، WB = الدم الكامل
بعد إضافة محلول دكستروز ٥٠٪ إلى الدم الكامل، بلغت نسبة فقدان الصفائح الدموية المعدلة حسب التخفيف ٧٫٧٪ (٣١٠±٧٣ مقابل ٢٨٦±٩٦) مقارنةً بـ ١٧٫٨٪ لتخفيف البلازما الغنية بالصفائح الدموية في محلول دكستروز ٥٠٪ (٦٦٤±٣٤٨ مقابل ٥٤٤±٢٧٧). وازداد متوسط ​​حجم الصفائح الدموية في الدم الكامل بنسبة ١٦٫٨٪ (من ١٠٫١±٠٫٥ إلى ١١٫٨±٠٫٦)، بينما ازداد متوسط ​​حجم الصفائح الدموية في البلازما الغنية بالصفائح الدموية بنسبة ٢٦٪ (٩٫٢±٠٫٨ مقابل ١١٫٦±٠٫٧). على الرغم من أن متوسط ​​الفروق في كل من انخفاض عدد الصفائح الدموية وزيادة متوسط ​​حجم الصفائح الدموية كان أكبر بكثير مع PRP، إلا أن التغيرات في انخفاض عدد الصفائح الدموية داخل الدم الكامل كانت شبه ذات دلالة إحصائية (310 ± 73 إلى 286 ± 96 (-7.7٪)؛ p = 0.06) وكانت الزيادة في متوسط ​​حجم الصفائح الدموية ذات دلالة إحصائية (10.1 ± 0.5 إلى 11.8 ± 0.6 (+16.8) p < 0.001). على الرغم من أن متوسط ​​الفروق في كل من انخفاض عدد الصفائح الدموية وزيادة متوسط ​​حجم الصفائح الدموية كان أكبر بكثير مع PRP، إلا أن التغيرات في انخفاض عدد الصفائح الدموية داخل الدم الكامل كانت شبه ذات دلالة إحصائية (310 ± 73 إلى 286 ± 96 (-7.7٪)؛ p = 0.06) وكانت الزيادة في متوسط ​​حجم الصفائح الدموية ذات دلالة إحصائية (10.1 ± 0.5 إلى 11.8 ± 0.6 (+16.8) p < 0.001).على الرغم من أن متوسط ​​الفروق في كل من انخفاض عدد الصفائح الدموية وزيادة CVR كان أكبر بكثير مع PRP، إلا أن التغيرات في انخفاض عدد الصفائح الدموية داخل WB كانت شبه مهمة (310 ± 73 إلى 286 ± 96 (-7.7٪)؛ p = 0.06).كان увеличение MPV значительным (من 10,1 ± 0,5 إلى 11,8 ± 0,6 (+16,8) p <0,001). كانت الزيادة في MPV كبيرة (من 10.1 ± 0.5 إلى 11.8 ± 0.6 (+16.8) p < 0.001).يمكن استخدام تقنية PRP للتصوير بالرنين المغناطيسي وMPV للتصوير الفوتوغرافي من خلال WB عداد السرعة القصوى للمركبة (310 ± 73 ± 286 ± 96 (-7.7%) ； p = .06) وMPV的增加是显着的(10.1 ± 0.5 إلى 11.8 ± 0.6 (+16.8) ص < 0.001)يتم إجراء عملية PRP في وقت مبكر من أجل الحصول على نتائج أفضل، وهو أمر لا مفر منه الحد الأقصى لحجم السيارة （((310 ± 73 إلى 286 ± 96 (-7.7%) ； p = .06) وMPV 的增是显着的(10.1 ± 0.5) 11.8 ± 0.6 (+16.8) ف <.001).كان التغير في انخفاض عدد الصفائح الدموية ضمن الدم الكامل شبه دال إحصائياً (من 310 ± 73 إلى 286 ± 96 (-7.7%)؛ p = 0.06)، على الرغم من أن البلازما الغنية بالصفائح الدموية (PRP) أظهرت فروقاً متوسطة أكبر بشكل ملحوظ في انخفاض عدد الصفائح الدموية وزيادة متوسط ​​حجم الصفائح الدموية (MPV). وكانت الزيادة في متوسط ​​حجم الصفائح الدموية (MPV) دالة إحصائياً.(من 10,1 ± 0,5 إلى 11,8 ± 0,6 (+16,8) ص < 0,001). (من 10.1 ± 0.5 إلى 11.8 ± 0.6 (+16.8) p < 0.001).
تطلّب الأمر تركيزًا نهائيًا للجلوكوز بنسبة 20% لملاحظة تغيير ملحوظ في متوسط ​​حجم الصفائح الدموية (MPV)، إلا أن هذا التغيير كان أكثر وضوحًا عند التركيز النهائي البالغ 25%. استقرّ فقدان الصفائح الدموية بعد الانخفاض الأولي. لوحظ انخفاض حادّ في معدل استجابة الأوعية الدموية (CVR) في البداية، إلا أنه استعاد مستواه بسرعة عند التركيز النهائي للجلوكوز بنسبة 25%، والذي كان أعلى بكثير من مستويات CVR الملاحظة عند التركيزين النهائيين للجلوكوز بنسبة 20% و15% (الشكل 3 وإلى يسار الجدول 3؛ المربعات المظللة تشير إلى قيم p ≤ α مع تصحيح بونفيروني بقيمة 0.01). كما لوحظ انخفاض حادّ في عدد الصفائح الدموية في المرحلة الأولى (0-15 ثانية)، ثم استقرّ (من 15 ثانية إلى 30 دقيقة؛ يسار الجدول 4).
أدى إضافة تراكيز مختلفة من الجلوكوز إلى الدم الكامل إلى انخفاض سريع أولي في متوسط ​​حجم الصفائح الدموية، تلاه تعافٍ يعتمد على التركيز بنسبة تزيد عن 20%. يوضح مفتاح الرسم البياني تركيز الجلوكوز بعد التخفيف. أُجريت التجارب D15 وD20 وD25 بتخفيف 1:1، بينما أُجريت التجارب D21 وD41 بتخفيف 1:5.
يُبين الجدول 4 التغير في عدد الصفائح الدموية عند تخفيفها في محلول جلوكوز عالي التركيز. لوحظ وجود علاقة طردية بين الانخفاض الفوري في عدد الصفائح الدموية عند التخفيف بنسبة 1:1 والتخفيف بنسبة 1:5. عند مقارنة التخفيف بنسبة 1:1 كمجموعة واحدة مع التخفيف بنسبة 1:5، كان الانخفاض الفوري في عدد الصفائح الدموية في المجموعة 1:1 أقل منه في المجموعة 1:5 (66±48,000 (23%) مقابل 99±69,000 (37%)، p = 0.014). بعد انخفاض أولي عند نقطة القياس الأولى، استقر عدد الصفائح الدموية كنسبة مئوية من الجلوكوز (الشكل 4).
عند إضافة الدم الكامل إلى الجلوكوز بنسبة 1:1، ينخفض ​​عدد الصفائح الدموية بنحو 25%. أما عند إضافة الدم الكامل بنسبة 1:5، فكان الانخفاض أكبر بكثير، إذ بلغ نحو 50%.
أدى استخدام محلول جلوكوز بتركيز 41% إلى زيادة متوسط ​​حجم الصفائح الدموية (MPV) بشكل أسرع وأكثر وضوحًا من استخدام محلول بتركيز 25% أو 21%. يوضح الشكل 3 نتائج MPV. عند جميع التخفيفات الأخرى، لم يُلاحظ أي انخفاض أولي فوري في MPV بعد إضافة محلول جلوكوز بتركيز 50%. عند استخدام محلول جلوكوز بتركيز 25% (تركيز الجلوكوز 20.8% عند التخفيف النهائي)، كان التغير في MPV مماثلاً للتغير في محلول جلوكوز بتركيز 20% عند تخفيفه بنسبة 1:1 (الشكل 3). على الرغم من أن التغيرات في MPV كانت أكبر في البداية عند التركيز المختلط 41% مقارنةً بتركيز 25%، إلا أن الفرق في MPV بين التركيزين 41% و25% بعد 16 دقيقة لم يعد ذا دلالة إحصائية (الجدول 3، على اليمين). ومن المثير للاهتمام أيضًا أن محلول الجلوكوز بتركيز 25% زاد من MPV بشكل أكثر فعالية من محلول 20.8%.
أكدت هذه الدراسة المختبرية جزئياً فرضيتنا. وقد أظهر ذلك تحللًا جزئيًا محتملاً للصفائح الدموية عن طريق مزج الدكستروز، وتكيفًا سريعًا للصفائح الدموية مع فرط التوتر الشديد، وارتفاعًا كبيرًا في متوسط ​​حجم الصفائح الدموية استجابة لتركيزات > 25٪ من الدكستروز مفرط التوتر. وقد أظهر ذلك تحللًا جزئيًا محتملاً للصفائح الدموية عن طريق مزج الدكستروز، وتكيفًا سريعًا للصفائح الدموية مع فرط التوتر الشديد، وارتفاعًا كبيرًا في متوسط ​​حجم الصفائح الدموية استجابة لتركيزات > 25٪ من الدكستروز مفرط التوتر. عرض لجزء محتمل من إجازة الترومبونات الأساسية من خلال الإقامة المريحة في الترومبوت إلى أقصى الحدود الجيبرتونوس و MPV الأكثر فعالية في الكشف عن تركيز الجبرتونيك > 25%. وقد أظهر تحلل جزئي محتمل للصفائح الدموية مع الدكستروز، وتكيف سريع للصفائح الدموية مع فرط التوتر الشديد، وزيادة كبيرة في متوسط ​​حجم الصفائح الدموية استجابة لمستويات الدكستروز المفرط التوتر >25%.قد يكون من الصعب على أي شخص أن يتخيل ما إذا كانت هذه هي الطريقة التي يجب أن يكون بها هذا المنتج> احصل على 25% من سعر السيارة MPV.قد يكون من الصعب العثور على أي شيء في المنزل في أي وقت من الأوقات.响应> 25% من إجمالي قيمة السيارة هو MPV. من خلال إظهار الجرعات الجزئية المحتملة من جلسات الجلوكوز التي تتكيف بشكل جيد مع الجرعات الهايبرتونوز الشديد والزيادة الكبيرة في مستوى MPV يتجاوز تركيز جلوكوز الجيبرتون > 25%. يُظهر ذلك احتمالية حدوث تحلل جزئي للصفائح الدموية بواسطة مخاليط الجلوكوز، والتكيف السريع للصفائح الدموية مع فرط التوتر الشديد، وزيادة كبيرة في متوسط ​​حجم الصفائح الدموية استجابة للجلوكوز عالي التوتر >25%.كانت الزيادة الأولية قصوى عند التعرض للجلوكوز بنسبة 41.6٪، لكن الزيادة في متوسط ​​حجم الصفائح الدموية اقتربت من التعرض للجلوكوز بنسبة 25٪ بعد حوالي 20 دقيقة من التعرض.
يتأثر تركيز الصفائح الدموية بالجلوكوز. لاحظنا انخفاضًا في عدد الصفائح الدموية عند جميع تراكيز الجلوكوز. قد يرتبط الانخفاض الحاد في عدد الصفائح الدموية عند تركيز الماء (0%) في سلسلة البلازما الغنية بالصفائح الدموية (PRP) بالتحلل الأسموزي. أو قد يكون هذا الانخفاض ناتجًا عن تكتل الصفائح الدموية، وهو ما يتناقض مع عدم تغير متوسط ​​حجم الصفائح الدموية (MPV) عند هذا التركيز. تشير هذه النتيجة إلى أن بعض الصفائح الدموية شديدة الحساسية لانخفاض الأسمولية.
في جميع تخفيفات الجلوكوز بنسبة 1:1، انخفضت كمية الصفائح الدموية بنسبة 20-30%، حتى مع محلول الجلوكوز بتركيز 5 ملي أوزمول (D5W)، وهو محلول منخفض التوتر عند 252 ملي أوزمول، مما قد يشير إلى تأثير غير تناضحي محدد للجلوكوز، حيث لم تتغير كل من الصفائح الدموية ومتوسط ​​حجم الصفائح الدموية عند زيادة تركيز الجلوكوز ثلاثة أضعاف من D5W إلى D25W. في الواقع، تميل تركيزات الصفائح الدموية إلى الزيادة الطفيفة مع زيادة الأسمولية.
انخفاض عدد الصفائح الدموية بين التخفيفين 1:1 و1:5 يعني أن تأثير التحلل يعتمد على تركيز الجلوكوز الابتدائي والنهائي. لو كان يعتمد فقط على التركيز الابتدائي، لكان من المتوقع رؤية فرق في انخفاض عدد الصفائح الدموية بين تركيزي 1:1. لكن هذا لم يحدث. لو كان تأثير التحلل يعتمد فقط على تركيز الجلوكوز النهائي، لما توقعنا فرقًا كبيرًا بين تخفيف 20% بنسبة 1:1 وتخفيف 20.8% بنسبة 1:5. ومع ذلك، فقد حققنا ذلك.
في حال حدوث فقدان للصفائح الدموية نتيجة تحللها، يتشكل مستخلص جزئي، تُطلق بعده السيتوكينات وعوامل النمو في البيئة خارج الخلوية. وقد أظهرت العديد من الدراسات أن مستخلص الصفائح الدموية فعال تقريبًا مثل البلازما الغنية بالصفائح الدموية (PRP) كمحلول لتحفيز تكاثر الخلايا [11]. كما ثبت أن البلازما الغنية بالصفائح الدموية (PRP) نفسها محلول فعال لعلاج تكاثر الخلايا [12-14].
تدور الصفائح الدموية غير النشطة على شكل قرص مُدعّم بعدة تراكيب داخلية. أثناء التنشيط، تتخذ شكلاً كروياً أو أميبياً، مما يؤدي إلى زيادة في حجمها. تتطلب هذه الزيادة في الحجم زيادة في مساحة السطح، وهي نتيجة لإخراج نظام الأنابيب المفتوحة وإضافة حبيبات إفرازية إلى الغشاء. لا يزال من غير المعروف ما إذا كانت الزيادة في متوسط ​​حجم الصفائح الدموية (MPV) الناتجة عن ارتفاع تركيز الجلوكوز تتضمن إحدى هاتين الآليتين أو كلتيهما، ولكن إذا كانت الأخيرة، فإن زيادة متوسط ​​حجم الصفائح الدموية ستشير إلى تحلل الحبيبات.
أظهرت هذه الدراسة أن التعرض لتركيزات عالية من الجلوكوز على البلازما الغنية بالصفائح الدموية أو صفائح الدم الكاملة أدى إلى زيادة في متوسط ​​حجم الصفائح الدموية في غضون 15 دقيقة مع تركيز الجلوكوز بنسبة 25٪ و 41.6٪ على التوالي.
قد يعود ارتفاع متوسط ​​حجم الصفائح الدموية (MPV) إلى تمدد تشابكات الأنيبيبات الدقيقة المحيطة استجابةً لتدفق الكالسيوم. وقد أظهرت دراسة ليو وآخرون أن الجلوكوز يُسهّل تدفق الكالسيوم عبر قناة TRPC6 في الصفائح الدموية [6]. نفترض أن الجلوكوز يُحفز استرخاء تشابكات الأنيبيبات الدقيقة، مما يؤدي إلى ارتفاع متوسط ​​حجم الصفائح الدموية (MPV) وتحسس الصفائح الدموية و/أو تنشيطها. مع ذلك، تشير نتائجنا إلى أن هذا ليس سوى جزء من الحقيقة. ففي اختباراتنا، لم يُسفر أي تركيز أقل من 25% من الجلوكوز (D25W) عن ارتفاع في متوسط ​​حجم الصفائح الدموية (MPV). ونظرًا لعدم اختبارنا التعرض لتركيزات الجلوكوز بين 12.5% ​​و25%، تُشير نتائج المرحلة الأولى إلى احتمال وجود عتبة في هذا النطاق من تركيزات الجلوكوز تؤدي إلى ارتفاع متوسط ​​حجم الصفائح الدموية (MPV). وأظهرت اختبارات إضافية في المرحلتين الثالثة والرابعة أن تركيز الجلوكوز بين 20% و25% يُمثل العتبة، ولكن يبقى السبب غير واضح.
لاحظنا أيضًا انخفاضًا بنسبة 9% تقريبًا في متوسط ​​حجم الصفائح الدموية بعد الطرد المركزي. ولا يزال من غير الواضح ما إذا كان هذا الانخفاض ناتجًا عن وجود صفائح دموية أكبر حجمًا وأكثر كثافة محصورة في طبقة كريات الدم الحمراء في جهاز الطرد المركزي. قد تكون هذه الملاحظة مهمة للأطباء، إذ قد تشير إلى أن صفائح الدم الغنية بالصفائح الدموية هي مجموعة فرعية أصغر حجمًا وأقل كثافة من صفائح الدم الكامل.
في دراسة سابقة، بيّنا أن تحضير البلازما الغنية بالصفائح الدموية (PRP) بالطرق اليدوية غير مكلف [8]. إذا كان الجلوكوز يزيد من حساسية الصفائح الدموية في الأنسجة أو البلازما الغنية بالصفائح الدموية، مما يجعلها أكثر عرضة للتنشيط، أو إذا تم إنتاج البلازما الغنية بالصفائح الدموية بخصائص مستخلص جزئي، فقد يُحسّن ذلك من عملية التجديد ويقلل الحاجة إلى العلاج. لذلك، قد يكون الجمع بين البلازما الغنية بالصفائح الدموية والجلوكوز عالي التركيز أكثر فعالية من حيث التكلفة من استخدام البلازما الغنية بالصفائح الدموية أو الجلوكوز وحده.
تتضمن دراستنا عدة أوجه قصور. أولًا، استخدمنا بلازما غنية بالصفائح الدموية (PRP) تم الحصول عليها بطرق مختلفة، مما قد يؤدي إلى نتائج متضاربة. ثانيًا، لم نتمكن من إجراء تحليل كيميائي حيوي لأي من عيناتنا لتحديد ما إذا كان قد حدث تنشيط للصفائح الدموية بدقة أكبر. كنا نود قياس بروتين P-selectin، وعامل الصفائح الدموية 4، وتجمعات الصفائح الدموية الوحيدة النواة، أو غيرها من مؤشرات تنشيط الصفائح الدموية لفهم درجة أو وجود تحلل حبيبات ألفا بشكل أفضل، لكن هذا خارج نطاق هذه الدراسة. ثالثًا، لم نتمكن من التأكد، باستخدام المجهر الإلكتروني أو غيره من الطرق، من أن الزيادة في متوسط ​​حجم الصفائح الدموية (MPV) في الصفائح الدموية المعرضة للجلوكوز ناتجة عن تأثيره على تشابكات الأنابيب الدقيقة.
أدى مزج الدم الكامل أو البلازما الغنية بالصفائح الدموية مع 25% جلوكوز إلى زيادة متوسط ​​حجم الصفائح الدموية، مما يشير إلى بدء تنشيطها، على الرغم من أن هذه الدراسة لم تُظهر تطورًا في التكتل أو تحلل الحبيبات. نتج عن مزيج الجلوكوز عالي التركيز فقدان الصفائح الدموية، وهو ما قد يُمثل تأثيرًا مُحللًا. يمكن أن يُسبب التنشيط الجزئي أو تحلل الصفائح الدموية تجدد الأنسجة بعد حقنها. ولا تزال العواقب السريرية لهذه التغيرات غير واضحة. وقد أظهرت دراسات لاحقة قياسات أكثر دقة للتنشيط أو التحلل، وقامت بتقييم التأثيرات السريرية المختلفة لمزيج الجلوكوز عالي التركيز مع الدم الكامل أو البلازما الغنية بالصفائح الدموية.
يُعدّ العلاج التكاثري بالجلوكوز علاجًا تجديديًا بسيطًا وغير مكلف، يشهد انتشارًا سريعًا ويدعم الأبحاث السريرية. تشير هذه الدراسة إلى آلية فيزيولوجية، إذا ما تأكدت، فقد تساعدنا على فهم جزء من آلية التجديد في العلاج التكاثري.
قسم المعلوماتية الطبية الحيوية والصحية في كلية الطب بجامعة ميسوري، مدينة كانساس، الولايات المتحدة الأمريكية
المشاركون من البشر: وافق جميع المشاركين في هذه الدراسة، سواءً أكانوا قد وافقوا أم لم يوافقوا. وقد أصدرت الجمعية الدولية للطب الخلوي الموافقة رقم ICMS-2017-003. تمت الموافقة على البروتوكول التالي للاستخدام من قبل لجنة المراجعة المؤسسية التابعة للجمعية الدولية للطب الخلوي: العنوان: حساب إنتاجية دواء البلازما الغنية بالصفائح الدموية بناءً على تعداد الصفائح الدموية الأساسي في تعداد الدم الكامل. الحيوانات: أكد جميع المؤلفين عدم استخدام أي حيوانات أو أنسجة في هذه الدراسة. تضارب المصالح: وفقًا لنموذج الإفصاح الموحد الصادر عن اللجنة الدولية لمحرري المجلات الطبية (ICMJE)، يُعلن جميع المؤلفين ما يلي: معلومات الدفع/الخدمة: يُعلن جميع المؤلفين أنهم لم يتلقوا أي دعم مالي من أي منظمة مقابل العمل المقدم. العلاقات المالية: يُعلن جميع المؤلفين أنه لا توجد لديهم حاليًا أو خلال السنوات الثلاث الماضية أي علاقات مالية مع أي منظمة قد تكون مهتمة بالعمل المقدم. علاقات أخرى: يُعلن جميع المؤلفين عدم وجود أي علاقات أو أنشطة أخرى قد تؤثر على العمل المقدم.
هاريسون تي إي، بولر جيه، ريفز كيه وآخرون. (17 مايو 2022) تأثير الجلوكوز على عدد الصفائح الدموية وحجمها: دلالات على الطب التجديدي. كيور 14(5): e25081. doi:10.7759/cureus.25081
© حقوق النشر محفوظة لهاريسون وآخرون، ٢٠٢٢. هذه مقالة متاحة للجميع بموجب شروط رخصة المشاع الإبداعي CC-BY 4.0. يُسمح بالاستخدام والتوزيع وإعادة الإنتاج غير المحدود في أي وسيلة، شريطة الإشارة إلى المؤلف الأصلي والمصدر.