"Jangan sekali-kali ragu bahawa sekumpulan kecil warganegara yang bertimbang rasa dan berdedikasi boleh mengubah dunia. Malah, ia adalah satu-satunya yang ada."
Misi Cureus adalah untuk mengubah model penerbitan perubatan yang telah lama wujud, di mana penyerahan penyelidikan boleh menjadi mahal, kompleks dan memakan masa.
Plasma/prp kaya platelet, regenerasi tisu, pengaktifan platelet, terapi proliferatif glukosa, platelet, terapi proliferatif
Petik artikel ini sebagai: Harrison TE, Bowler J, Reeves K, dsb. (17 Mei 2022) Kesan glukosa terhadap kiraan dan isipadu platelet: implikasi untuk perubatan regeneratif. Cure 14(5): e25081. doi:10.7759/cureus.25081
Larutan plasma kaya platelet (PRP) dan glukosa hipertonik biasanya digunakan untuk suntikan dalam perubatan regeneratif, kadangkala digunakan bersama. Kesan glukosa hipertonik terhadap lisis dan pengaktifan platelet belum pernah dilaporkan sebelum ini. Kami menguji kesan kepekatan glukosa yang tinggi terhadap kiraan platelet dan eritrosit, serta isipadu sel dalam PRP dan darah penuh (WB). Pengurangan separa yang cepat dalam kiraan platelet berlaku dengan semua campuran glukosa dicampurkan dengan PRP atau darah penuh, selaras dengan lisis separa. Selepas minit pertama, kiraan platelet kekal stabil, menunjukkan penempatan platelet baki yang cepat kepada hipertonik yang melampau (>2000 mOsm). Selepas minit pertama, kiraan platelet kekal stabil, menunjukkan penempatan platelet baki yang cepat kepada hipertonik yang melampau (>2000 mOsm). После первой минуты количество тромбоцитов оставалось стабильным, что указывает на быструю акктомодоциромбхдхдх экстремального (>2000 мОсм) гипертонуса. Selepas minit pertama, kiraan platelet kekal stabil, menunjukkan penempatan platelet baki yang cepat kepada hipertonik yang melampau (>2000 mOsm).第一分钟后，血小板计数保持稳定，表明残余血小板迅速适应极端（> 2000 mOsm。2000 mOsm）高渗状态。 После первой минуты количество тромбоцитов оставалось стабильным, что указывает на быструю адаптацитов оставалось стабильным экстремальному (>2000 мОсм) гиперосмолярному состоянию. Selepas minit pertama, kiraan platelet kekal stabil, menunjukkan penyesuaian pesat platelet baki kepada keadaan hiperosmolar yang ekstrem (>2000 mOsm).Kepekatan glukosa sebanyak 25% dan ke atas mengakibatkan peningkatan ketara dalam purata isipadu platelet (MPV), menunjukkan peringkat awal pengaktifan platelet. Kajian lanjut diperlukan untuk menentukan sama ada lisis atau pengaktifan platelet berlaku dan sama ada suntikan glukosa hipertonik sahaja atau digabungkan dengan PRP boleh memberikan manfaat klinikal tambahan.
Pada tahun 1950-an, pakar bedah Amerika George Hackett mendapati bahawa beliau boleh melegakan sakit sendi dan belakang secara kekal dalam kalangan ramai pesakit dengan menyuntik larutan proliferatif ke dalam tendon dan ligamen. Eksperimennya ke atas arnab menunjukkan bahawa rawatan tersebut, yang dipanggilnya terapi proliferatif, menyebabkan tendon membesar dan menguatkan. Kajian histologi telah mengesahkan bahawa kolagen baharu dihasilkan semasa proses ini [1].
Dalam beberapa dekad pertama, pelbagai penyelesaian pengedaran telah dicuba. Menjelang tahun 1990-an, kebanyakan pengamal menganggap kepekatan glukosa yang tinggi sebagai kaedah yang paling selamat dan berkesan. Walau bagaimanapun, mekanisme tindakannya masih tidak jelas.
Beberapa kajian klinikal telah dijalankan pada abad ke-20 susulan hasil kerja Hackett. Walau bagaimanapun, pada tahun 2000-an terdapat minat yang diperbaharui dan beberapa ujian klinikal terapi proliferatif yang berjaya telah diselesaikan untuk rawatan sakit belakang bawah [2], osteoartritis lutut [3], dan epikondilitis lateral [4].
Penjanaan semula tisu memerlukan penyertaan sel stem. Oleh itu, kepekatan glukosa yang tinggi mesti mendorong migrasi, replikasi dan pembezaan sel stem. Kami membuat hipotesis bahawa platelet boleh bertindak sebagai utusan dan kepekatan glukosa yang tinggi boleh menyebabkan platelet melepaskan sitokin dan faktor pertumbuhan, sekali gus menggalakkan proses regeneratif, terutamanya migrasi sel stem ke kawasan yang mempunyai kepekatan glukosa yang tinggi.
Pengaktifan platelet sentiasa mendahului peningkatan kalsium intraselular [5]. Liu et al. pada tahun 2008 menunjukkan bahawa tahap glukosa yang tinggi meningkatkan aktiviti saluran jenis kanonik berpotensi reseptor sementara 6 (TRPC6) dalam membran plasma, yang membawa kepada kemasukan ion kalsium ke dalam platelet [6]. Satu lagi kajian menunjukkan bahawa pendedahan zon marginal mikrotubul kepada ion kalsium menyebabkan pengenduran, pengembangan dan ubah bentuk zon marginal, yang seterusnya menyebabkan perubahan bentuk daripada cakera kepada sfera, menghasilkan isipadu platelet purata (MPV) [7].
Hipotesis kami dalam kajian ini adalah bahawa pendedahan platelet kepada kepekatan glukosa yang tinggi mempengaruhi zon marginal mikrotubul dan persekitaran intraselular, yang membawa kepada peningkatan MPV.
Semua peserta menandatangani borang persetujuan termaklum selepas butiran kajian dijelaskan dan sebelum menerima sampel. Dalam kajian ini, hanya sampel PRP dengan hematokrit lebih besar daripada 2% digunakan supaya kiraan eritrosit (eritrosit) dan purata isipadu korpuskular sel darah merah (MCV) boleh dimasukkan untuk perbandingan.
Kajian ini dijalankan dalam empat fasa, fasa pertama adalah PRP dan fasa yang selebihnya adalah darah penuh (Jadual 1). Seperti yang diterangkan sebelum ini [8], semua daya emparan relatif (RCF, daya-g) dikira dari titik tengah (Rmid, dalam cm) lajur darah dalam picagari emparan. Kami memilih untuk menggunakan MPV sebagai penanda pemekaan platelet dan kiraan platelet sebagai penunjuk potensi lisis platelet, yang kedua-duanya boleh diukur dengan mudah pada penganalisis hematologi standard.
Dalam fasa pertama, 47 sukarelawan menderma sampel darah—satu tiub asid etilenadiaminatetraasetik (EDTA) dan satu sampel darah penuh PRP (antikoagulasi dengan natrium sitrat (NaCl, 3%)) (Jadual 1). Letakkan rocker di dalam tiub dengan segera. Kiraan darah lengkap (CBC) dilakukan pada sampel EDTA dalam tiga kali ganda, dan sampel NaCl dianalisis dalam tiga kali ganda untuk analisis CBC, dan kemudian PRP disediakan dengan pelbagai kaedah yang diterangkan di atas [8]. Semua sampel PRP disediakan melalui sentrifugasi pada 900–1000 g. Campurkan setiap sampel PRP pada pengadun vorteks selama 5–10 saat, kemudian bahagikan lima alikuot 0.5 ml ke dalam tiub.
Untuk menilai kesan pendedahan platelet terhadap kepekatan glukosa yang tinggi, jumlah yang sama (0.5 ml) glukosa 0%, 5%, 12.5%, 25%, dan 50% dalam air dicampurkan dengan sampel platelet untuk mendapatkan kepekatan campuran glukosa 0%, 2.5%, 6.25%, 12.5% ​​dan 25% dan campurkan tiub di atas penggoncang tiub uji selama 15 minit. TAC setiap campuran dianalisis dalam tiga kali ganda selepas 15 minit. Kiraan platelet (PLT), kiraan RBC, MCV, dan MPV dirata-ratakan untuk setiap tiub, dan purata kiraan platelet, kiraan RBC, MCV, dan MPV dikira untuk semua sampel PRP.
Selepas fasa pertama pengumpulan data selesai, kami mendapati peningkatan yang ketara dalam isipadu platelet dalam platelet PRP selepas penambahan D50W. Platelet PRP tidak semestinya mewakili semua platelet dalam darah, dan medium PRP berbeza daripada medium WB. Oleh itu, kami memutuskan untuk menjalankan percubaan fasa kedua tentang kesan penambahan D50W kepada darah penuh.
Untuk pusingan kedua, kami memilih saiz sampel sebanyak 30 berdasarkan keputusan daripada siri pertama, seperti yang diterangkan dalam bahagian Analisis. Dalam siri ini, 20 sukarelawan menderma sampel darah (Jadual 1). Darah penuh (1.8 ml) telah diambil ke dalam picagari 3 ml dan diantikoagulasi dengan 0.2 ml 40% NaCl. Picagari darah penuh dicampur selama lima saat dengan pengadun vorteks dan CBC dianalisis dalam tiga kali ganda. Selepas analisis, darah antikoagulan telah ditambah kepada 2 ml glukosa 50% dalam picagari 5 ml (kepekatan glukosa akhir adalah kira-kira 25% (D25) dan diletakkan di dalam tiub goncang selama 30 minit. Selepas 30 minit, D25/CBC dalam picagari WB dianalisis dalam tiga kali ganda. Kiraan platelet, kiraan RBC, MCV dan MPV setiap picagari dirata-ratakan, dan purata PLT, kiraan RBC, MCV dan MPV dikira untuk setiap sampel sebelum dan selepas menambah glukosa.
Oleh kerana platelet dalam darah penuh biasanya terdedah kepada glukosa hipertonik semasa terapi glukosa proliferatif disebabkan oleh suntikan invasif minimum, dan tidak lazim untuk menggabungkan PRP dengan glukosa hipertonik sejurus sebelum suntikan, kami memutuskan untuk mengkaji glukosa hipertonik dalam kombinasi dengan WB dalam Bahagian 1. Langkah Tiga dan empat. Pada setiap peringkat, 20 sukarelawan mendermakan 7-8 ml ACD-A (asid yang mengandungi trisodium sitrat (22.0 g/l), asid sitrik (8.0 g/l) dan glukosa (24.5 g/l), larutan dekstrosa sitrat) untuk antikoagulan darah (Jadual 1). Hanya campuran glukosa yang lebih besar daripada 12.5% ​​​​digunakan untuk menentukan peratusan ambang yang berkaitan dengan peningkatan MPV. Pada peringkat ketiga, 1 ml darah diletakkan di dalam tabung uji. Kemudian campurkan darah di atas pengadun vorteks selama 10 saat dengan menambah 1 ml glukosa 30%, glukosa 40%, atau glukosa 50% ke dalam tiub untuk mendapatkan kepekatan glukosa akhir masing-masing sebanyak 15%, 20%, dan 25%. Sampel darah glukosa dianalisis untuk CBC sejurus selepas pencampuran dan diulang setiap dua minit selama 30 minit.
Semasa pencampuran awal, penambahan glukosa hipertonik 1:1 dan WB atau PRP mendedahkan platelet kepada kepekatan melebihi 25% selama beberapa saat. Dalam langkah keempat, untuk menilai kesan glukosa hipertonik dengan kepekatan puncak awal yang minimum dan menguji had atas kesan glukosa, kami hanya menambah sedikit darah kepada D25W atau D50W. Letakkan 1 ml D25W atau D50W ke dalam tiub dan tambahkan 0.2 ml WB sambil memusingkan sampel selama 10 saat. Dalam kes ini, darah didedahkan kepada glukosa pada kepekatan kira-kira 20% di atas kepekatan akhir, bukannya 50% di atas kepekatan akhir seperti dalam Fasa 3, menghasilkan kepekatan glukosa akhir sebanyak 20.8% dan 41.6%. Sampel campuran dianalisis pada selang masa yang sama seperti dalam langkah 3.
Dalam langkah pertama setiap siri pencairan glukosa, 30 sampel telah diambil kerana ini adalah saiz sampel yang sesuai untuk kajian rintis [9]. Pada akhir setiap fasa (termasuk fasa pertama), nilaikan kecukupan saiz sampel menggunakan formula yang digunakan untuk menentukan saiz sampel yang diperlukan untuk menganggarkan min bagi pembolehubah hasil berterusan dalam satu populasi. Formula n = Z2 x SD2 /E2. Dalam persamaan ini, Z ialah skor-Z, SD ialah sisihan piawai, dan E ialah ralat yang diingini [10]. Alpha kami ialah 0.05, yang sepadan dengan nilai Z 1.96, dan kami menjangkakan ralat 5 (dalam peratus). Oleh itu, kami menyelesaikan n = (1.962 x SD2)/52. Keputusan menunjukkan bahawa saiz sampel yang diperlukan untuk setiap peringkat adalah lebih kecil daripada bilangan sebenar yang dikumpul.
Semasa tempoh 1, 3 dan 4 menggunakan lebih daripada satu kepekatan glukosa, kesan kepekatan glukosa yang berbeza dianalisis dengan membandingkan perubahan pecahan antara masa 0 dan setiap masa berikutnya (fasa 1 pada 15 minit, tempoh 3 pada 15 minit). dan empat pada 15 saat, kemudian setiap dua minit.) Kadar perubahan untuk setiap tempoh masa dibandingkan menggunakan ujian-U Mann-Whitney kerana data tidak mengikuti taburan normal seperti yang ditentukan oleh ujian normal Shapiro-Wilk. Memandangkan analisis 1-ke-1 bagi beberapa kumpulan (lima) telah dilakukan dalam langkah pertama, ketiga dan keempat (lima secara keseluruhan), pembetulan Bonferroni telah dilakukan untuk melaraskan nilai alfa yang dikehendaki kepada ≤0.01 tetapi bukan ≤0.05.
Pengurangan kiraan platelet dengan semua kepekatan dekstrosa hipertonik dan peningkatan MPV dalam platelet PRP pada kepekatan dekstrosa >12.5%: Kiraan platelet PRP meningkat daripada satu hingga lima kali ganda kepekatan berbanding darah penuh asas, berbeza mengikut kaedah (tidak digambarkan). Pengurangan kiraan platelet dengan semua kepekatan dekstrosa hipertonik dan peningkatan MPV dalam platelet PRP pada kepekatan dekstrosa >12.5%: Kiraan platelet PRP meningkat daripada satu hingga lima kali ganda kepekatan berbanding darah penuh asas, berbeza mengikut kaedah (tidak digambarkan). Уменьшение количества тромбоцитов при всех концентрациях гипертонической декстрозы dan увеличение MPV di тромбRPо циприцрациях декстрозы > 12.5%: количество тромбоцитов PRP увеличилось dalam 1-5 раз по сравнению с исходной цельното кровьзаю, трмид (tidak показано). Kiraan platelet menurun pada semua kepekatan dekstrosa hipertonik dan peningkatan MPV dalam platelet PRP pada kepekatan dekstrosa >12.5%: Kiraan platelet PRP meningkat 1-5 kali ganda berbanding darah penuh asas, bergantung pada kaedah (tidak ditunjukkan). ).在> 12.5% ​​的葡萄糖浓度下，所有浓度的高渗葡萄糖降低血小板计数，PRP 血小MP板中增加：与基线全血相比，PRP 血小板计数从浓度的1 倍上升到5 倍，因方法而异／／。 Pada kepekatan glukosa >12.5%, kepekatan glukosa yang tinggi mengurangkan kiraan darah, MPV darah PRP meningkat: berbanding dengan 与基线全血, kiraan darah PRP meningkat daripada 1 hingga 5 kali ganda kepekatan (tidak diterangkan). При концентрациях глюкозы >12.5% ​​все концентрации гипертонической глюкозы снижали количество тромбоца MPVлив тромбоцитах PRP: количество тромбоцитов PRP увеличивалось dari 1- до 5-кратных концентраций по сравнению с исхотдрация цельной крови, в зависимости от метода (не описано ). Pada kepekatan glukosa >12.5%, semua kepekatan glukosa hipertensi menurunkan kiraan platelet dan meningkatkan MPV dalam platelet PRP: Kiraan platelet PRP meningkat 1 hingga 5 kali ganda berbanding kepekatan darah keseluruhan asas, bergantung pada kaedah (seperti yang diterangkan).Rajah 1 menunjukkan bahawa bilangan platelet menurun hampir 75% selepas pencairan dalam air dan sebanyak 20-30% selepas 15 minit pencairan dengan kepekatan glukosa yang berbeza berbanding PRP asas dan pencairan 1:1 yang diselaraskan untuk isipadu (1-k1 dengan pembetulan isipadu). pembiakan k-1).1 pembiakan).
Bilangan sel dalam setiap pencairan dinyatakan sebagai pecahan daripada bilangan asal sebelum pencairan.
MPV menurun secara minimum semasa penghasilan PRP, tanpa perubahan selanjutnya dalam kepekatan pencairan kepada 12.5% ​​​​dalam air atau glukosa (termasuk 25% campuran glukosa PRP) dan meningkat lebih daripada 20% selepas pencairan dalam larutan glukosa 50% (Rajah .2). Sebaliknya, eritrosit tidak menunjukkan perubahan isipadu yang ketara pada sebarang pencairan selain H2O.
Purata isipadu sel dalam setiap pencairan dinyatakan sebagai peratusan isipadu asal sebelum pencairan.
Pengurangan kiraan platelet dan peningkatan CVR yang serupa tetapi kurang ketara diperhatikan dalam BC yang terdedah kepada 50% glukosa (untuk diformulasikan dengan 25% glukosa). Jadual 2 membandingkan bilangan sel dan isipadu sel dalam darah penuh yang dicairkan dalam 50% dekstrosa dengan data PRP fasa 1 yang dicairkan dalam 50% dekstrosa. Perubahan dalam kiraan RBC dan MCV RBC tidak jelas dan bukan tumpuan perhatian kami.
SD = sisihan piawai, MD = perbezaan min antara kumpulan, SE = sisihan piawai perbezaan min, RBC = eritrosit, PLT = platelet, PRP = plasma kaya platelet, WB = darah penuh
Selepas menambah D50W kepada WB, peratusan kehilangan platelet terlaras pencairan adalah 7.7% (310±73 vs. 286±96) berbanding 17.8% untuk pencairan PRP dalam D50W (664±348 vs. 544±277). WB MPV meningkat sebanyak 16.8% (daripada 10.1 ± 0.5 kepada 11.8 ± 0.6), manakala MPV PRP meningkat sebanyak 26% (9.2 ± 0.8 vs. 11.6 ± 0.7). Walaupun perbezaan min dalam pengurangan kiraan platelet dan peningkatan MPV adalah jauh lebih ketara dengan PRP, perubahan dalam pengurangan kiraan platelet dalam WB adalah hampir ketara (310 ± 73 hingga 286 ± 96 (-7.7%); p = .06) dan peningkatan MPV adalah ketara (10.1 ± 0.5 hingga 11.8 ± 0.6 (+16.8) p < .001). Walaupun perbezaan min dalam pengurangan kiraan platelet dan peningkatan MPV adalah jauh lebih ketara dengan PRP, perubahan dalam pengurangan kiraan platelet dalam WB adalah hampir ketara (310 ± 73 hingga 286 ± 96 (-7.7%); p = .06) dan peningkatan MPV adalah ketara (10.1 ± 0.5 hingga 11.8 ± 0.6 (+16.8) p < .001).Walaupun perbezaan min dalam pengurangan kiraan platelet dan peningkatan CVR adalah jauh lebih besar dengan PRP, perubahan dalam penurunan kiraan platelet dalam WB adalah hampir ketara (310 ± 73 hingga 286 ± 96 (-7.7%); p = 0.06).увеличение MPV было значительным (daripada 10,1 ± 0,5 hingga 11,8 ± 0,6 (+16,8) p < 0,001). Peningkatan MPV adalah ketara (daripada 10.1 ± 0.5 kepada 11.8 ± 0.6 (+16.8) p < 0.001).尽管PRP 在血小板计数减少和MPV 增加方面的平均差异显着更大，但WB内血小板计数减少的变化几乎是显着的（310 ± 73 至286 ± 96 (-7.7%)；p = .06）和MPV的增加是显着的（10.1 ± 0.5 到11.8 ± 0.6 (+16.8) p < .001）。尽管 PRP 在 血小板 计数 和 和 增加 方面 的 平均 差异 显着 大 ， 但 但 内杀家的 几乎 是 显着 的 （（（310 ± 73 至 286 ± 96 (-7.7%) ； p = .06）和MPV 的增加是显着的1（1 ± 0.5 0.6 (+16.8) p <.001）。Perubahan dalam pengurangan kiraan platelet dalam WB adalah hampir ketara (daripada 310 ± 73 kepada 286 ± 96 (-7.7%); p = 0.06), walaupun PRP mempunyai perbezaan min yang jauh lebih besar dalam penurunan kiraan platelet dan peningkatan MPV, dan peningkatan MPV adalah ketara.(dari 10,1 ± 0,5 hingga 11,8 ± 0,6 (+16,8) р < 0,001). (daripada 10.1 ± 0.5 hingga 11.8 ± 0.6 (+16.8) p < 0.001).
Kepekatan akhir glukosa sebanyak 20% diperlukan untuk melihat perubahan ketara dalam MPV, tetapi perubahan dalam MPV lebih ketara pada kepekatan akhir 25%. Kehilangan platelet menjadi stabil selepas penurunan awal. Kami mendapati penurunan mendadak awal dalam CVR, namun, CVR dipulihkan dengan cepat pada kepekatan glukosa akhir 25%, yang jauh lebih tinggi daripada tahap CVR yang diperhatikan pada kepekatan glukosa akhir 20% dan 15% (Rajah 3 dan di sebelah kiri Jadual 3; kotak berlorek). menunjukkan nilai-p ≤ alfa dengan pembetulan Bonferroni sebanyak 0.01). Terdapat juga penurunan mendadak awal dalam bilangan PLT, yang diperhatikan pada fasa awal 0-15 saat, dan kemudian kekal stabil (dari 15 saat hingga 30 minit; kiri jadual 4).
Penambahan pelbagai kepekatan glukosa ke dalam darah penuh mengakibatkan penurunan MPV yang pesat pada awal diikuti dengan pemulihan yang bergantung kepada kepekatan lebih daripada 20%. Legenda menunjukkan kepekatan glukosa selepas pencairan. D15, D20 dan D25 dijalankan dalam pencairan 1:1. D21 dan D41 dijalankan pada pencairan 1:5.
Jadual 4 menunjukkan perubahan dalam kiraan platelet apabila dicairkan dalam glukosa hipertonik. Kami memerhatikan hubungan yang bergantung kepada dos antara penurunan serta-merta dalam bilangan PLT pada pencairan 1:1 dan pada pencairan 1:5. Membandingkan pencairan 1:1 sebagai satu kumpulan dengan pencairan 1:5, kumpulan 1:1 mempunyai penurunan serta-merta dalam kiraan platelet kurang daripada kumpulan 1:5 iaitu 66±48,000 (23%) berbanding 99±69,000 (37%), p = 0.014) dalam kumpulan 1:5. Selepas penurunan awal pada titik pengukuran pertama, kiraan platelet sebagai peratusan glukosa menjadi stabil (Rajah 4).
Apabila darah penuh ditambah kepada glukosa dalam nisbah 1:1, kiraan platelet berkurangan sebanyak kira-kira 25%. Walau bagaimanapun, apabila darah penuh ditambah pada nisbah 1:5, pengurangannya jauh lebih besar – kira-kira 50%.
Glukosa 41% meningkatkan MPV lebih cepat dan lebih dramatik daripada 25% atau 21%. Keputusan MPV ditunjukkan dalam Rajah 3. Pada semua pencairan lain, tiada penurunan awal segera dalam MPV diperhatikan selepas penambahan 50% glukosa. Apabila menggunakan glukosa 25% (kepekatan glukosa 20.8% pada pencairan akhir), perubahan dalam MPV adalah setanding dengan perubahan dalam glukosa 20% pada pencairan 1:1 (Rajah 3). Walaupun perubahan dalam MPV pada mulanya lebih besar pada kepekatan campuran 41% berbanding pada 25%, perbezaan dalam MPV antara 41% dan 25% selepas 16 minit tidak lagi ketara (Jadual 3, kanan). Menarik juga bahawa glukosa 25% meningkatkan MPV dengan lebih berkesan daripada 20.8%.
Kajian in vitro ini sebahagiannya mengesahkan hipotesis kami. Ia menunjukkan potensi lisis platelet separa melalui campuran dekstrosa, penyesuaian platelet yang pantas kepada hipertonik yang melampau, dan peningkatan MPV yang ketara sebagai tindak balas kepada kepekatan > 25% dekstrosa hipertonik. Ia menunjukkan potensi lisis platelet separa melalui campuran dekstrosa, penyesuaian platelet yang pantas kepada hipertonik yang melampau, dan peningkatan MPV yang ketara sebagai tindak balas kepada kepekatan > 25% dekstrosa hipertonik. Он показал потенциальный частичный лизис тромбоцитов примесью декстрозы, быструю аккомодацню тромбоцитов для гипертонуса и значительное повышение MPV di ответ на гипертоническую концентрацию декстрозы > 25%. Ia menunjukkan potensi lisis platelet separa dengan dekstrosa, akomodasi platelet yang cepat hingga hipertonik yang melampau, dan peningkatan MPV yang ketara sebagai tindak balas kepada tahap dekstrosa hipertonik >25%.它显示出通过葡萄糖混合物潜在的部分血小板溶解，血小板快速适应极端速适应极端圍哘板溶解。浓度的高渗葡萄糖时MPV 显着上升。它 显示 出 通过 葡萄糖 潜在 的 部分 血小板 溶解 血小板 快速 适应 极端 ，响应> 25% 浓度 高渗 葡萄糖 时 时 mpv 显着。。。。。 Он показывает потенциальный частичный лизис тромбоцитов смесями с глюкозой, быструю адаптацию тромбоцитов смесями с глюкозой, быструю адаптацию тромболиктов гипертонусу и значительное увеличение MPV di ответ на концентрацию гипертонической глюкозы > 25%. Ia menunjukkan potensi lisis platelet separa oleh campuran glukosa, penyesuaian platelet yang cepat terhadap hipertonik yang melampau, dan peningkatan MPV yang ketara sebagai tindak balas kepada glukosa hipertonik >25%.Peningkatan awal adalah maksimum pada pendedahan glukosa 41.6%, tetapi peningkatan MPV menghampiri pendedahan glukosa 25% kira-kira 20 minit selepas pendedahan.
Kepekatan platelet dipengaruhi oleh glukosa. Kami mendapati bahawa jumlah PLT menurun pada semua pencairan glukosa. Penurunan mendadak dalam bilangan platelet dalam pencairan H2O (0%) siri PRP mungkin dikaitkan dengan lisis osmotik. Secara alternatif, ini mungkin merupakan artifak yang disebabkan oleh penggumpalan platelet, tetapi ini berbeza dengan kekurangan perubahan MPV pada pencairan ini. Penemuan ini bermakna bahawa sesetengah platelet sangat sensitif terhadap hipoosmolariti.
Dalam semua pencairan glukosa 1:1, jumlah PLT menurun sebanyak 20-30%, walaupun pada D5W (hipotonik pada 252 mOsm), yang mungkin menunjukkan kesan bukan osmotik khusus glukosa, kerana kedua-dua PLT dan MPV kekal tidak berubah pada peningkatan kepekatan tiga kali ganda. glukosa. daripada D5W kepada D25W. Malah, kepekatan PLT cenderung meningkat sedikit dengan peningkatan osmolariti.
Penurunan PLT antara pencairan 1:1 dan 1:5 bermakna kesan pembubaran bergantung pada kepekatan glukosa awal dan akhir. Jika ia hanya bergantung pada kepekatan awal, maka seseorang akan menjangkakan perbezaan dalam pengurangan PLT antara kepekatan 1:1. Tetapi kita tidak. Jika kesan lisis hanya bergantung pada kepekatan glukosa akhir, maka kita tidak menjangkakan banyak perbezaan antara pencairan 20% 1:1 dan pencairan 20.8% 1:5. Namun begitu, kita berjaya melakukannya.
Jika kehilangan platelet berlaku disebabkan oleh lisis platelet, lisat separa terbentuk, selepas itu sitokin dan faktor pertumbuhan dilepaskan ke persekitaran ekstraselular. Beberapa kajian telah menunjukkan bahawa lisat platelet hampir sama berkesannya dengan PRP sebagai larutan percambahan [11]. PRP itu sendiri telah terbukti sebagai larutan yang berkesan untuk rawatan percambahan [12-14].
Platelet tidak aktif beredar dalam bentuk cakera yang diperkukuh dengan beberapa struktur dalaman. Semasa pengaktifan, ia mengambil bentuk yang lebih sfera atau amuba, mengakibatkan peningkatan isipadu. Peningkatan isipadu memerlukan peningkatan luas permukaan, yang merupakan hasil daripada penyemperitan sistem tubul terbuka (OCS) dan penambahan granul eksositik pada membran. Masih belum ditentukan sama ada peningkatan MPV yang disebabkan oleh glukosa hipertonik melibatkan satu atau kedua-dua mekanisme ini, tetapi jika yang kedua, maka peningkatan MPV akan menunjukkan degranulasi.
Kajian ini menunjukkan bahawa pendedahan kepada kepekatan glukosa yang tinggi pada PRP atau platelet darah penuh mengakibatkan peningkatan MPV dalam masa 15 minit dengan kepekatan glukosa masing-masing sebanyak 25% dan 41.6%.
Peningkatan MPV platelet mungkin disebabkan oleh dilatasi kusut mikrotubul di sekelilingnya sebagai tindak balas kepada kemasukan kalsium. Liu et al. Glukosa telah terbukti menjadi perantara kemasukan kalsium melalui saluran TRPC6 platelet [6]. Hipotesis kami ialah glukosa mendorong pengenduran kusut mikrotubul, yang membawa kepada peningkatan MPV dan pemekaan dan/atau pengaktifan platelet. Walau bagaimanapun, berdasarkan keputusan kami, ini hanya sebahagian daripada cerita. Dalam ujian kami, tiada kepekatan di bawah D25W yang mengakibatkan peningkatan MPV. Memandangkan kami belum menguji pendedahan kepada kepekatan glukosa antara 12.5% ​​​​dan 25%, keputusan fasa 1 kami menunjukkan bahawa mungkin terdapat ambang dalam julat kepekatan glukosa ini yang membawa kepada peningkatan MPV. Ujian lanjut pada peringkat 3 dan 4 menunjukkan bahawa glukosa 20-25% nampaknya merupakan ambang untuk ini, tetapi masih tidak jelas mengapa.
Kami juga memerhatikan penurunan ~9% dalam MPV selepas sentrifugasi. Tidak jelas sama ada penurunan MPV ini disebabkan oleh platelet yang lebih besar dan lebih padat yang terperangkap dalam lapisan RBC emparan. Pemerhatian ini mungkin penting kepada doktor kerana ia mungkin menunjukkan bahawa platelet PRP adalah subset platelet WB yang lebih kecil dan kurang padat.
Dalam kajian terdahulu, kami menunjukkan bahawa penyediaan PRP melalui kaedah manual adalah murah [8]. Jika glukosa menyenitasi platelet tisu atau PRP, menjadikannya lebih mudah terdedah kepada pengaktifan, atau jika PRP dihasilkan dengan sifat lisat separa, ini boleh meningkatkan pertumbuhan semula dan mengurangkan keperluan untuk terapi. Oleh itu, gabungan PRP dan glukosa yang sangat pekat mungkin lebih menjimatkan kos berbanding PRP atau glukosa sahaja.
Kajian kami mempunyai beberapa kekurangan. Pertama, kami menggunakan PRP yang diperoleh daripada beberapa kaedah yang berbeza. Ini boleh menyebabkan keputusan yang bercanggah. Kedua, kami tidak dapat menjalankan analisis biokimia terhadap mana-mana sampel kami untuk menentukan dengan lebih tepat sama ada pengaktifan platelet telah berlaku. Kami ingin mengukur P-selectin, faktor platelet 4, agregat platelet monositik atau penanda pengaktifan platelet lain untuk lebih memahami tahap atau kehadiran degranulasi granul alfa, tetapi ini di luar skop kajian ini. Ketiga, kami tidak dapat mengesahkan melalui mikroskop elektron atau kaedah lain bahawa peningkatan MPV dalam platelet yang terdedah kepada glukosa adalah disebabkan oleh kesan pada kekusutan mikrotubul.
Campuran WB atau PRP dengan glukosa 25% meningkatkan MPV, menandakan permulaan pengaktifan platelet, walaupun kajian ini tidak menunjukkan perkembangan agregasi atau degranulasi. Campuran glukosa hipertonik mengakibatkan kehilangan platelet, mungkin mewakili kesan litik. Pengaktifan separa atau lisis platelet boleh menyebabkan pertumbuhan semula tisu selepas suntikan platelet. Tidak jelas apakah akibat klinikal yang mungkin disebabkan oleh perubahan ini. Kajian lanjut telah menunjukkan pengukuran pengaktifan atau lisis yang lebih tepat dan telah menilai kesan klinikal yang berbeza bagi campuran glukosa hipertonik dengan WB atau PRP.
Terapi proliferatif glukosa merupakan terapi regeneratif yang mudah dan murah yang berkembang pesat dan menyokong penyelidikan klinikal. Kajian ini mencadangkan mekanisme fisiologi yang, jika disahkan, dapat membantu kita memahami sebahagian daripada mekanisme regeneratif terapi proliferatif.
Informatik Bioperubatan dan Kesihatan di Universiti Missouri, Sekolah Perubatan Kansas City, Kansas City, Amerika Syarikat
Subjek Manusia: Semua peserta dalam kajian ini memberi atau tidak memberi persetujuan. Persatuan Perubatan Selular Antarabangsa telah mengeluarkan kelulusan ICMS-2017-003. Protokol berikut telah diluluskan untuk kegunaan selanjutnya oleh Lembaga Semakan Institusi Persatuan Perubatan Selular Antarabangsa: Tajuk: Pengiraan hasil ubat plasma kaya platelet berdasarkan kiraan platelet CBC asas. Subjek Haiwan: Semua penulis mengesahkan bahawa tiada haiwan atau tisu yang terlibat dalam kajian ini. Konflik Kepentingan: Selaras dengan Borang Pendedahan Seragam ICMJE, semua penulis mengisytiharkan perkara berikut: Maklumat pembayaran/perkhidmatan: Semua penulis mengisytiharkan bahawa mereka tidak menerima sokongan kewangan daripada mana-mana organisasi untuk kerja yang dihantar. Hubungan Kewangan: Semua penulis mengisytiharkan bahawa mereka tidak mempunyai hubungan kewangan dengan mana-mana organisasi yang mungkin berminat dengan kerja yang dihantar pada masa ini atau dalam tempoh tiga tahun yang lalu. Hubungan Lain: Semua penulis mengisytiharkan bahawa tiada hubungan atau aktiviti lain yang boleh menjejaskan kerja yang dihantar.
Harrison TE, Bowler J, Reeves K dkk. (17 Mei 2022) Kesan glukosa terhadap kiraan dan isipadu platelet: implikasi untuk perubatan regeneratif. Cure 14(5): e25081. doi:10.7759/cureus.25081
© Hak Cipta 2022 Harrison et al. Ini adalah artikel akses terbuka yang diedarkan di bawah terma Lesen Atribusi Creative Commons CC-BY 4.0. Penggunaan, pengedaran dan penghasilan semula tanpa had dalam sebarang medium dibenarkan, dengan syarat pengarang dan sumber asal dikreditkan.