"Jangan ragu-ragu bahawa sekumpulan kecil rakyat yang prihatin dan berdedikasi boleh mengubah dunia. Malah, ia adalah satu-satunya di sana."
Misi Cureus adalah untuk menukar model lama penerbitan perubatan, di mana penyerahan penyelidikan boleh mahal, kompleks dan memakan masa.
Plasma/prp yang kaya dengan platelet, penjanaan semula tisu, pengaktifan platelet, terapi proliferatif glukosa, platelet, terapi proliferatif
Petik artikel ini sebagai: Harrison TE, Bowler J, Reeves K, et al. (17 Mei 2022) Kesan glukosa pada kiraan dan isipadu platelet: implikasi untuk ubat regeneratif. Penawar 14(5): e25081. doi:10.7759/cureus.25081
Plasma kaya platelet (PRP) dan larutan glukosa hipertonik biasanya digunakan untuk suntikan dalam perubatan regeneratif, kadangkala bersama-sama. Kesan glukosa hipertonik pada lisis dan pengaktifan platelet tidak pernah dilaporkan sebelum ini. Kami menguji kesan kepekatan glukosa yang tinggi pada kiraan platelet dan eritrosit, serta jumlah sel dalam PRP dan darah keseluruhan (WB). Pengurangan separa pesat dalam kiraan platelet berlaku dengan semua campuran glukosa bercampur dengan PRP atau darah keseluruhan, konsisten dengan lisis separa. Selepas minit pertama, kiraan platelet kekal stabil, mencadangkan penginapan pantas platelet sisa kepada hipertonisitas melampau (>2000 mOsm). Selepas minit pertama, kiraan platelet kekal stabil, mencadangkan penginapan pantas platelet sisa kepada hipertonisitas melampau (>2000 mOsm). После первой минуты количество тромбоцитов оставалось стабильным, что указывает на быструю акктомодоциромбхдхдх экстремального (>2000 мОсм) гипертонуса. Selepas minit pertama, kiraan platelet kekal stabil, menunjukkan penginapan pantas platelet sisa kepada hipertonisitas melampau (>2000 mOsm).第一分钟后，血小板计数保持稳定，表明残余血小板迅速适应极端（> 2000 mOsm。2000 mOsm）高渗状态。 После первой минуты количество тромбоцитов оставалось стабильным, что указывает на быструю адаптацитов оставалось стабильным экстремальному (>2000 мОсм) гиперосмолярному состоянию. Selepas minit pertama, kiraan platelet kekal stabil, menunjukkan penyesuaian pantas platelet sisa kepada keadaan hiperosmolar yang melampau (>2000 mOsm).Kepekatan glukosa 25% dan ke atas mengakibatkan peningkatan ketara dalam jumlah purata platelet (MPV), menunjukkan peringkat awal pengaktifan platelet. Kajian lanjut diperlukan untuk menentukan sama ada lisis atau pengaktifan platelet berlaku dan sama ada suntikan glukosa hipertonik sahaja atau digabungkan dengan PRP boleh memberikan manfaat klinikal tambahan.
Pada tahun 1950-an, pakar bedah Amerika George Hackett mendapati bahawa dia boleh melegakan sakit sendi dan belakang secara kekal pada kebanyakan pesakit dengan menyuntik penyelesaian proliferatif ke dalam tendon dan ligamen. Eksperimennya terhadap arnab menunjukkan bahawa rawatan, yang dipanggil terapi proliferatif, menyebabkan tendon membesar dan menguatkan. Kajian histologi telah mengesahkan bahawa kolagen baru dihasilkan semasa proses ini [1].
Dalam beberapa dekad pertama, banyak penyelesaian pengedaran yang berbeza telah dicuba. Menjelang 1990-an, kebanyakan pengamal menganggap kepekatan glukosa yang tinggi sebagai kaedah paling selamat dan berkesan. Walau bagaimanapun, mekanisme tindakan masih tidak jelas.
Beberapa kajian klinikal telah dijalankan pada abad ke-20 berikutan kerja Hackett. Walau bagaimanapun, pada tahun 2000-an terdapat minat yang diperbaharui dan beberapa ujian klinikal yang berjaya untuk terapi proliferatif telah diselesaikan untuk rawatan sakit pinggang [2], osteoarthritis lutut [3], dan epicondylitis sisi [4].
Penjanaan semula tisu memerlukan penyertaan sel stem. Oleh itu, kepekatan glukosa yang tinggi entah bagaimana mesti mendorong penghijrahan, replikasi, dan pembezaan sel stem. Kami membuat hipotesis bahawa platelet boleh bertindak sebagai utusan dan bahawa kepekatan glukosa yang tinggi boleh menyebabkan platelet melepaskan sitokin dan faktor pertumbuhan, dengan itu menggalakkan proses regeneratif, terutamanya penghijrahan sel stem ke kawasan kepekatan glukosa tinggi.
Pengaktifan platelet sentiasa mendahului peningkatan kalsium intraselular [5]. Liu et al. pada tahun 2008 menunjukkan bahawa tahap glukosa yang tinggi meningkatkan aktiviti saluran jenis kanonik berpotensi reseptor sementara 6 (TRPC6) dalam membran plasma, yang membawa kepada kemasukan ion kalsium ke dalam platelet [6]. Kajian lain menunjukkan bahawa pendedahan zon marginal mikrotubulus kepada ion kalsium menyebabkan kelonggaran, pengembangan, dan ubah bentuk zon marginal, yang seterusnya menyebabkan perubahan bentuk dari cakera kepada sfera, menghasilkan min isipadu platelet (MPV) [7].
Hipotesis kami dalam kajian ini ialah pendedahan platelet kepada kepekatan glukosa yang tinggi menjejaskan zon marginal mikrotubul dan persekitaran intrasel, yang membawa kepada peningkatan MPV.
Semua peserta menandatangani borang persetujuan termaklum selepas butiran kajian dijelaskan dan sebelum menerima sampel. Dalam kajian ini, hanya sampel PRP dengan hematokrit lebih daripada 2% digunakan supaya kiraan eritrosit (eritrosit) dan min isipadu korpuskular sel darah merah (MCV) boleh dimasukkan sebagai perbandingan.
Kajian ini dijalankan dalam empat fasa, fasa pertama ialah PRP dan fasa selebihnya adalah darah keseluruhan (Jadual 1). Seperti yang diterangkan sebelum ini [8], semua daya emparan relatif (RCF, g-force) dikira dari titik tengah (Rmid, dalam cm) lajur darah dalam picagari emparan. Kami memilih untuk menggunakan MPV sebagai penanda pemekaan platelet dan kiraan platelet sebagai penunjuk lisis platelet yang berpotensi, kedua-duanya boleh diukur dengan mudah pada penganalisis hematologi standard.
Dalam fasa pertama, 47 sukarelawan menderma sampel darah-satu tiub asid ethylenediaminetetraacetic (EDTA) dan satu sampel darah keseluruhan PRP (antikoagulasi dengan natrium sitrat (NaCl, 3%)) (Jadual 1). Letakkan rocker di dalam tiub dengan segera. Kiraan darah lengkap (CBC) dilakukan pada sampel EDTA dalam tiga kali ganda, dan sampel NaCl dianalisis dalam tiga kali ganda untuk analisis CBC, dan kemudian PRP disediakan dengan pelbagai kaedah yang diterangkan di atas [8]. Semua sampel PRP disediakan dengan sentrifugasi pada 900-1000 g. Campurkan setiap sampel PRP pada pengadun vorteks selama 5–10 saat, kemudian bahagikan lima aliquot 0.5 ml ke dalam tiub.
Untuk menilai kesan pendedahan platelet pada kepekatan glukosa yang tinggi, jumlah yang sama (0.5 ml) 0%, 5%, 12.5%, 25%, dan 50% glukosa dalam air dicampurkan dengan sampel platelet untuk mendapatkan 0%, 2.5 % 6.25%, 12.5% ​​​​dan 25% kepekatan campuran glukosa dalam tabung uji untuk tabung uji 5. TAC setiap campuran dianalisis dalam tiga kali ganda selepas 15 minit. Kiraan platelet (PLT), kiraan RBC, MCV, dan MPV dipuratakan untuk setiap tiub, dan kiraan purata platelet, kiraan RBC, MCV, dan MPV dikira untuk semua sampel PRP.
Selepas fasa pertama pengumpulan data selesai, kami mendapati peningkatan ketara dalam jumlah platelet dalam platelet PRP selepas penambahan D50W. Platelet PRP tidak semestinya mewakili semua platelet dalam darah, dan medium PRP berbeza daripada medium WB. Oleh itu, kami memutuskan untuk menjalankan percubaan fasa kedua kesan penambahan D50W kepada darah keseluruhan.
Untuk pusingan kedua, kami memilih saiz sampel 30 berdasarkan keputusan daripada siri pertama, seperti yang diterangkan dalam bahagian Analisis. Dalam siri ini, 20 sukarelawan menderma sampel darah (Jadual 1). Darah keseluruhan (1.8 ml) ditarik ke dalam picagari 3 ml dan antikoagulasi dengan 0.2 ml 40% NaCl. Seluruh picagari darah dicampur selama lima saat dengan pengadun vorteks dan CBC dianalisis dalam tiga kali ganda. Selepas analisis, darah antikoagulasi ditambah kepada 2 ml glukosa 50% dalam picagari 5 ml (kepekatan glukosa akhir adalah lebih kurang 25% (D25) dan diletakkan di dalam tiub goncang selama 30 minit. Selepas 30 minit, D25/CBC dalam picagari WB dianalisis dalam tiga kali ganda. Kiraan platelet, kiraan RBC setiap PLTV, syringe purata, dan RBC adalah purata MPV, MCV, dan RBC. kiraan, MCV, dan MPV dikira untuk setiap sampel sebelum dan selepas menambah glukosa.
Oleh kerana platelet dalam darah keseluruhan lazimnya terdedah kepada glukosa hipertonik semasa terapi glukosa proliferatif disebabkan oleh suntikan invasif minimum, dan tidak lazim untuk menggabungkan PRP dengan glukosa hipertonik sejurus sebelum suntikan, kami memutuskan untuk mengkaji glukosa hipertonik dalam kombinasi dengan WB dalam Bahagian 1. Langkah Tiga dan empat. Pada setiap peringkat, 20 sukarelawan menderma 7-8 ml ACD-A (asid yang mengandungi trisodium sitrat (22.0 g/l), asid sitrik (8.0 g/l) dan glukosa (24.5 g/l), larutan dextrose citrate) untuk antikoagulan darah (Jadual 1). Hanya campuran glukosa lebih daripada 12.5% ​​digunakan untuk menentukan peratusan ambang yang dikaitkan dengan peningkatan dalam MPV. Pada peringkat ketiga, 1 ml darah dimasukkan ke dalam tabung uji. Kemudian campurkan darah pada pengadun vorteks selama 10 saat dengan menambah 1 ml 30% glukosa, 40% glukosa, atau 50% glukosa ke dalam tiub untuk mendapatkan kepekatan glukosa akhir masing-masing 15%, 20%, dan 25%. Sampel darah glukosa dianalisis untuk CBC sejurus selepas pencampuran dan diulang setiap dua minit selama 30 minit.
Semasa pencampuran awal, penambahan glukosa hipertonik 1:1 dan WB atau PRP mendedahkan platelet kepada kepekatan melebihi 25% selama beberapa saat. Dalam langkah keempat, untuk menilai kesan glukosa hipertonik dengan kepekatan puncak awal yang minimum dan menguji had atas kesan glukosa, kami hanya menambah sedikit darah kepada D25W atau D50W. Letakkan 1 ml D25W atau D50W ke dalam tiub dan tambah 0.2 ml WB sambil memvorteks sampel selama 10 saat. Dalam kes ini, darah terdedah kepada glukosa pada kepekatan lebih kurang 20% ​​melebihi kepekatan akhir, dan bukannya 50% melebihi kepekatan akhir seperti dalam Fasa 3, menghasilkan kepekatan glukosa akhir sebanyak 20.8% dan 41.6%. Sampel campuran dianalisis pada selang masa yang sama seperti dalam langkah 3.
Dalam langkah pertama setiap siri pencairan glukosa, 30 sampel telah diambil kerana ini adalah saiz sampel yang sesuai untuk kajian rintis [9]. Pada akhir setiap fasa (termasuk fasa pertama), nilaikan kecukupan saiz sampel menggunakan formula yang digunakan untuk menentukan saiz sampel yang diperlukan untuk menganggarkan min pembolehubah hasil berterusan dalam satu populasi. Formula n = Z2 x SD2 /E2. Dalam persamaan ini, Z ialah skor Z, SD ialah sisihan piawai, dan E ialah ralat yang dikehendaki [10]. Alfa kami ialah 0.05, yang sepadan dengan nilai Z 1.96, dan kami menjangkakan ralat 5 (dalam peratus). Oleh itu kita selesaikan untuk n = (1.962 x SD2)/52. Keputusan menunjukkan saiz sampel yang diperlukan bagi setiap peringkat adalah lebih kecil daripada bilangan sebenar yang dikumpul.
Semasa tempoh 1, 3 dan 4 menggunakan lebih daripada satu kepekatan glukosa, kesan kepekatan glukosa yang berbeza dianalisis dengan membandingkan perubahan pecahan antara masa 0 dan setiap masa berikutnya (fasa 1 pada 15 minit, tempoh 3 pada 15 minit). dan empat pada 15 saat, kemudian setiap dua minit.) Kadar perubahan bagi setiap tempoh masa dibandingkan menggunakan ujian Mann-Whitney U kerana data tidak mengikut taburan normal seperti yang ditentukan oleh ujian normaliti Shapiro-Wilk. Oleh kerana analisis 1-ke-1 beberapa kumpulan (lima) dilakukan pada langkah pertama, ketiga dan keempat (lima jumlahnya), pembetulan Bonferroni dilakukan untuk melaraskan nilai alfa yang dikehendaki kepada ≤0.01 tetapi bukan ≤0.05.
Pengurangan kiraan platelet dengan semua kepekatan dekstrosa hipertonik dan peningkatan MPV dalam platelet PRP pada kepekatan dextrose >12.5%: Kiraan platelet PRP meningkat daripada satu hingga lima kali kepekatan berbanding dengan darah keseluruhan asas, berbeza mengikut kaedah (tidak digambarkan). Pengurangan kiraan platelet dengan semua kepekatan dextrose hipertonik dan peningkatan MPV dalam platelet PRP pada kepekatan dextrose >12.5%: Kiraan platelet PRP meningkat daripada satu hingga lima kali kepekatan berbanding dengan darah keseluruhan asas, berbeza mengikut kaedah (tidak digambarkan). Уменьшение количества тромбоцитов при всех концентрациях гипертонической декстрозы dan увеличение MPV di тромбRPо циприцрациях декстрозы > 12.5%: количество тромбоцитов PRP увеличилось dalam 1-5 раз по сравнению с исходной цельното кровьзаю, трмид (tidak показано). Pengurangan kiraan platelet pada semua kepekatan dextrose hipertonik dan peningkatan MPV dalam platelet PRP pada kepekatan dextrose >12.5%: Kiraan platelet PRP meningkat 1-5 kali berbanding dengan darah keseluruhan asas, bergantung kepada kaedah (tidak ditunjukkan). ).在> 12.5% ​​的葡萄糖浓度下，所有浓度的高渗葡萄糖降低血小板计数，PRP 血小MP板中增加：与基线全血相比，PRP 血小板计数从浓度的1 倍上升到5 倍，因方法而异／／。 Pada kepekatan glukosa >12.5%, kepekatan glukosa yang tinggi mengurangkan kiraan darah, MPV darah PRP meningkat: berbanding 与基线全血, kiraan darah PRP meningkat daripada 1 hingga 5 kali ganda daripada kepekatan (tidak diterangkan). При концентрациях глюкозы >12.5% ​​все концентрации гипертонической глюкозы снижали количество тромбоца MPVлив тромбоцитах PRP: количество тромбоцитов PRP увеличивалось dari 1- до 5-кратных концентраций по сравнению с исхотдрация цельной крови, в зависимости от метода (не описано ). Pada kepekatan glukosa >12.5%, semua kepekatan glukosa hipertensi menurunkan kiraan platelet dan peningkatan MPV dalam platelet PRP: Kiraan platelet PRP meningkat 1- hingga 5 kali ganda berbanding kepekatan darah keseluruhan asas, bergantung pada kaedah (seperti yang diterangkan ).Rajah 1 menunjukkan bahawa bilangan platelet berkurangan hampir 75% selepas pencairan dalam air dan sebanyak 20-30% selepas 15 minit pencairan dengan kepekatan glukosa yang berbeza berbanding PRP asas dan pencairan 1:1 diselaraskan untuk isipadu (1- k1 dengan pembetulan isipadu). k -1 pembiakan).1 pembiakan).
Bilangan sel dalam setiap pencairan dinyatakan sebagai pecahan daripada nombor asal sebelum pencairan.
MPV menurun secara minimum semasa pengeluaran PRP, tanpa perubahan lanjut dalam kepekatan pencairan kepada 12.5% ​​​​dalam air atau glukosa (termasuk 25% campuran glukosa PRP) dan meningkat lebih daripada 20% selepas pencairan dalam larutan glukosa 50% (Gamb. 2). ). Sebaliknya, eritrosit tidak menunjukkan perubahan ketara dalam isipadu pada sebarang pencairan selain H2O.
Purata isipadu sel dalam setiap pencairan dinyatakan sebagai peratusan isipadu asal sebelum pencairan.
Pengurangan yang serupa tetapi kurang ketara dalam kiraan platelet dan peningkatan CVR diperhatikan dalam BC yang terdedah kepada 50% glukosa (untuk merumuskan dengan 25% glukosa). Jadual 2 membandingkan nombor sel dan isipadu sel dalam darah keseluruhan yang dicairkan dalam 50% dekstrosa dengan data PRP fasa 1 yang dicairkan dalam 50% dekstrosa. Perubahan dalam kiraan RBC dan RBC MCV tidak jelas dan tidak menjadi tumpuan perhatian kami.
SD = sisihan piawai, MD = perbezaan min antara kumpulan, SE = sisihan piawai perbezaan min, RBC = eritrosit, PLT = platelet, PRP = plasma kaya platelet, WB = darah keseluruhan
Selepas menambah D50W kepada WB, peratusan kehilangan platelet terlaras pencairan ialah 7.7% (310±73 lwn. 286±96) berbanding 17.8% untuk pencairan PRP dalam D50W (664±348 lwn. 544±277). MPV WB meningkat sebanyak 16.8% (daripada 10.1 ± 0.5 kepada 11.8 ± 0.6), manakala MPV PRP meningkat sebanyak 26% (9.2 ± 0.8 berbanding 11.6 ± 0. 7). Walaupun perbezaan min dalam kedua-dua pengurangan kiraan platelet dan peningkatan MPV adalah lebih ketara dengan PRP, perubahan dalam pengurangan kiraan platelet dalam WB adalah hampir ketara (310 ± 73 hingga 286 ± 96 (-7.7%); p = .06) dan peningkatan dalam MPV adalah ketara (10.1 ± 0.8) (+ 10.8) (+ 6.8) .001). Walaupun perbezaan min dalam kedua-dua pengurangan kiraan platelet dan peningkatan MPV adalah lebih ketara dengan PRP, perubahan dalam pengurangan kiraan platelet dalam WB adalah hampir ketara (310 ± 73 hingga 286 ± 96 (-7.7%); p = .06) dan peningkatan dalam MPV adalah ketara (10.1 ± 0.8) (+ 10.8) (+ 6.8) .001).Walaupun perbezaan min dalam kedua-dua pengurangan kiraan platelet dan peningkatan CVR adalah lebih ketara dengan PRP, perubahan dalam penurunan kiraan platelet dalam WB adalah hampir ketara (310 ± 73 hingga 286 ± 96 (-7.7%); p = 0.06).увеличение MPV было значительным (daripada 10,1 ± 0,5 hingga 11,8 ± 0,6 (+16,8) p < 0,001). peningkatan MPV adalah ketara (daripada 10.1 ± 0.5 kepada 11.8 ± 0.6 (+16.8) p < 0.001).尽管PRP 在血小板计数减少和MPV 增加方面的平均差异显着更大，但WB内血小板计数减少的变化几乎是显着的（310 ± 73 至286 ± 96 (-7.7%)；p = .06）和MPV的增加是显着的（10.1 ± 0.5 到11.8 ± 0.6 (+16.8) p < .001）。尽管 PRP 在 血小板 计数 和 和 增加 方面 的 平均 差异 显着 大 ， 但 但 内杀家的 几乎 是 显着 的 （（（310 ± 73 至 286 ± 96 (-7.7%) ； p = .06）和MPV 的增加是显着的1（1 ± 0.5 0.6 (+16.8) p < .001）。Perubahan dalam pengurangan kiraan platelet dalam WB adalah hampir ketara (daripada 310 ± 73 kepada 286 ± 96 (-7.7%); p = 0.06), walaupun PRP mempunyai perbezaan min yang jauh lebih besar dalam penurunan kiraan platelet dan peningkatan MPV. dan peningkatan dalam MPV adalah ketara.(dari 10,1 ± 0,5 hingga 11,8 ± 0,6 (+16,8) р < 0,001). (dari 10.1 ± 0.5 hingga 11.8 ± 0.6 (+16.8) p < 0.001).
Kepekatan akhir 20% glukosa diperlukan untuk melihat perubahan ketara dalam MPV, tetapi perubahan dalam MPV lebih ketara pada kepekatan akhir 25%. Kehilangan platelet stabil selepas penurunan awal. Kami mencatatkan penurunan mendadak awal dalam CVR, bagaimanapun, CVR telah dipulihkan dengan pantas pada kepekatan glukosa akhir 25%, yang jauh lebih tinggi daripada tahap CVR yang diperhatikan pada kepekatan glukosa akhir 20% dan 15% (Rajah 3 dan di sebelah kiri Jadual 3; kotak berlorek). menunjukkan nilai-p ≤ alfa dengan pembetulan Bonferroni 0.01). Terdapat juga penurunan mendadak awal dalam bilangan PLT, diperhatikan dalam fasa awal 0-15 s, dan kemudian kekal stabil (dari 15 s hingga 30 min; kiri jadual 4).
Penambahan pelbagai kepekatan glukosa ke dalam darah keseluruhan mengakibatkan penurunan pesat awal dalam MPV diikuti oleh pemulihan yang bergantung kepada kepekatan lebih daripada 20%. Legenda menunjukkan kepekatan glukosa selepas pencairan. D15, D20 dan D25 telah dijalankan dalam pencairan 1:1. D21 dan D41 telah dijalankan pada pencairan 1:5.
Jadual 4 menunjukkan perubahan dalam kiraan platelet apabila dicairkan dalam glukosa hipertonik. Kami memerhatikan hubungan bergantung kepada dos antara kejatuhan segera dalam nombor PLT pada pencairan 1:1 dan pada pencairan 1:5. Membandingkan pencairan 1:1 sebagai satu kumpulan dengan pencairan 1:5, kumpulan 1:1 mempunyai penurunan serta-merta dalam kiraan platelet kurang daripada kumpulan 1:5 66±48,000 (23%) berbanding 99±69,000 (37%). , p = 0.014) dalam kumpulan 1:5. Selepas penurunan awal pada titik pengukuran pertama, kiraan platelet sebagai peratusan glukosa stabil (Rajah 4).
Apabila darah keseluruhan ditambah kepada glukosa dalam nisbah 1:1, kiraan platelet berkurangan kira-kira 25%. Walau bagaimanapun, apabila keseluruhan darah ditambah pada nisbah 1:5, pengurangan adalah lebih besar - kira-kira 50%.
41% glukosa meningkat MPV lebih cepat dan lebih mendadak daripada 25% atau 21%. Keputusan MPV ditunjukkan dalam Rajah 3. Pada semua pencairan lain, tiada penurunan awal serta-merta dalam MPV diperhatikan selepas penambahan 50% glukosa. Apabila menggunakan glukosa 25% (kepekatan glukosa 20.8% pada pencairan akhir), perubahan dalam MPV adalah setanding dengan perubahan dalam glukosa 20% pada pencairan 1:1 (Rajah 3). Walaupun perubahan dalam MPV pada mulanya lebih besar pada kepekatan campuran 41% berbanding 25%, perbezaan dalam MPV antara 41% dan 25% selepas 16 minit tidak lagi ketara (Jadual 3, kanan). Ia juga menarik bahawa 25% glukosa meningkatkan MPV dengan lebih berkesan daripada 20.8%.
Kajian in vitro ini sebahagiannya mengesahkan hipotesis kami. Ia menunjukkan potensi lisis platelet separa oleh campuran dekstrosa, akomodasi pantas platelet kepada hipertonisitas melampau, dan peningkatan ketara dalam MPV sebagai tindak balas kepada> 25% kepekatan dekstrosa hipertonik. Ia menunjukkan potensi lisis platelet separa oleh campuran dekstrosa, akomodasi pantas platelet kepada hipertonisitas melampau, dan peningkatan ketara dalam MPV sebagai tindak balas kepada> 25% kepekatan dekstrosa hipertonik. Он показал потенциальный частичный лизис тромбоцитов примесью декстрозы, быструю аккомодацню тромбоцитов для гипертонуса и значительное повышение MPV di ответ на гипертоническую концентрацию декстрозы > 25%. Ia menunjukkan potensi lisis platelet separa dengan dekstrosa, penginapan platelet yang cepat kepada hipertonisitas yang melampau, dan peningkatan ketara dalam MPV sebagai tindak balas kepada tahap dekstrosa hipertonik> 25%.它显示出通过葡萄糖混合物潜在的部分血小板溶解，血小板快速适应极端速适应极端圍哘板溶解。浓度的高渗葡萄糖时MPV 显着上升。它 显示 出 通过 葡萄糖 潜在 的 部分 血小板 溶解 血小板 快速 适应 极端 ，响应> 25% 浓度 高渗 葡萄糖 时 时 mpv 显着。。。。。 Он показывает потенциальный частичный лизис тромбоцитов смесями с глюкозой, быструю адаптацию тромбоцитов смесями с глюкозой, быструю адаптацию тромболиктов гипертонусу и значительное увеличение MPV di ответ на концентрацию гипертонической глюкозы > 25%. Ia menunjukkan potensi lisis platelet separa oleh campuran glukosa, penyesuaian platelet yang cepat kepada hipertonik yang melampau, dan peningkatan ketara dalam MPV sebagai tindak balas kepada glukosa hipertonik> 25%.Peningkatan awal adalah maksimum pada 41.6% pendedahan glukosa, tetapi peningkatan dalam MPV menghampiri 25% pendedahan glukosa kira-kira 20 minit selepas pendedahan.
Kepekatan platelet dipengaruhi oleh glukosa. Kami mendapati bahawa jumlah PLT menurun pada semua pencairan glukosa. Penurunan mendadak dalam bilangan platelet dalam pencairan H2O (0%) siri PRP mungkin dikaitkan dengan lisis osmotik. Sebagai alternatif, ini boleh menjadi artifak yang disebabkan oleh penggumpalan platelet, tetapi ini berbeza dengan kekurangan perubahan MPV pada pencairan ini. Penemuan ini bermakna bahawa sesetengah platelet sangat sensitif terhadap hypoosmolariti.
Dalam semua 1:1 pencairan glukosa, jumlah PLT berkurangan sebanyak 20-30%, walaupun dengan D5W (hipotonik pada 252 mOsm), yang mungkin menunjukkan kesan bukan osmotik khusus glukosa, kerana kedua-dua PLT dan MPV kekal tidak berubah pada peningkatan tiga kali ganda dalam kepekatan. glukosa. daripada D5W kepada D25W. Malah, kepekatan PLT cenderung meningkat sedikit dengan peningkatan osmolariti.
Penurunan PLT antara pencairan 1:1 dan 1:5 bermakna kesan pembubaran bergantung pada kepekatan glukosa awal dan akhir. Jika ia hanya bergantung pada kepekatan awal, maka seseorang akan menjangkakan untuk melihat perbezaan dalam pengurangan PLT antara kepekatan 1:1. Tetapi kita tidak. Jika kesan lisis hanya bergantung pada kepekatan glukosa akhir, maka kami tidak menjangkakan banyak perbezaan antara pencairan 20% 1:1 dan pencairan 20.8% 1:5. Namun kami melakukannya.
Jika kehilangan platelet berlaku akibat lisis platelet, lisat separa terbentuk, selepas itu sitokin dan faktor pertumbuhan dilepaskan ke persekitaran ekstraselular. Beberapa kajian telah menunjukkan bahawa lisat platelet hampir sama berkesan dengan PRP sebagai penyelesaian percambahan [11]. PRP sendiri telah ditunjukkan sebagai penyelesaian yang berkesan untuk rawatan percambahan [12-14].
Platlet tidak aktif beredar dalam bentuk cakera yang diperkuat dengan beberapa struktur dalaman. Semasa pengaktifan, mereka mengambil bentuk yang lebih sfera atau amuba, mengakibatkan peningkatan dalam jumlah. Peningkatan isipadu memerlukan pertambahan luas permukaan, yang merupakan hasil daripada penyemperitan sistem tubul terbuka (OCS) dan penambahan butiran eksosit ke membran. Ia masih perlu ditentukan sama ada peningkatan dalam MPV yang disebabkan oleh glukosa hipertonik melibatkan satu atau kedua-dua mekanisme ini, tetapi jika yang kedua, maka peningkatan dalam MPV akan menunjukkan degranulasi.
Kajian ini menunjukkan bahawa pendedahan kepada kepekatan glukosa yang tinggi pada PRP atau platelet darah keseluruhan menyebabkan peningkatan MPV dalam masa 15 minit dengan kepekatan glukosa masing-masing 25% dan 41.6%.
Peningkatan MPV platelet mungkin disebabkan oleh dilatasi kusut mikrotubulu di sekeliling sebagai tindak balas kepada kemasukan kalsium. Liu et al. Glukosa telah ditunjukkan sebagai pengantara kemasukan kalsium melalui saluran TRPC6 platelet [6]. Hipotesis kami ialah glukosa mendorong kelonggaran kusut mikrotubulus, yang membawa kepada peningkatan dalam MPV dan pemekaan platelet dan/atau pengaktifan. Walau bagaimanapun, berdasarkan keputusan kami, ini hanyalah sebahagian daripada cerita. Dalam ujian kami, tiada kepekatan di bawah D25W menyebabkan peningkatan dalam MPV. Memandangkan kami belum menguji pendedahan kepada kepekatan glukosa antara 12.5% ​​dan 25%, keputusan fasa 1 kami menunjukkan bahawa mungkin terdapat ambang dalam julat kepekatan glukosa ini yang membawa kepada peningkatan dalam MPV. Ujian lanjut dalam peringkat 3 dan 4 menunjukkan bahawa 20-25% glukosa nampaknya menjadi ambang untuk ini, tetapi masih tidak jelas mengapa.
Kami juga melihat penurunan ~ 9% dalam MPV selepas sentrifugasi. Tidak jelas sama ada penurunan dalam MPV ini disebabkan oleh platelet yang lebih besar dan lebih padat yang terperangkap dalam lapisan RBC emparan. Pemerhatian ini mungkin penting kepada doktor kerana ia mungkin membayangkan bahawa platelet PRP adalah subset platelet WB yang lebih kecil dan kurang padat.
Dalam kajian terdahulu, kami menunjukkan bahawa penyediaan PRP dengan kaedah manual adalah murah [8]. Jika glukosa memekakan platelet tisu atau PRP, menjadikannya lebih mudah terdedah kepada pengaktifan, atau jika PRP dihasilkan dengan sifat lisat separa, ini boleh meningkatkan penjanaan semula dan mengurangkan keperluan untuk terapi. Oleh itu, gabungan PRP dan glukosa sangat pekat mungkin lebih kos efektif daripada PRP atau glukosa sahaja.
Kajian kami mempunyai beberapa kelemahan. Pertama, kami menggunakan PRP yang diperoleh daripada beberapa kaedah yang berbeza. Ini boleh membawa kepada hasil yang bercanggah. Kedua, kami tidak dapat melakukan analisis biokimia mana-mana sampel kami untuk menentukan dengan lebih tepat sama ada pengaktifan platelet telah berlaku. Kami ingin mengukur P-selectin, faktor platelet 4, agregat platelet monocytic, atau penanda lain pengaktifan platelet untuk lebih memahami tahap atau kehadiran degranulasi granul alfa, tetapi ini di luar skop kajian ini. Ketiga, kami tidak dapat mengesahkan melalui mikroskop elektron atau kaedah lain bahawa peningkatan MPV dalam platelet yang terdedah kepada glukosa adalah disebabkan oleh kesan pada kusut mikrotubule.
Campuran WB atau PRP dengan 25% glukosa meningkatkan MPV, menandakan permulaan pengaktifan platelet, walaupun kajian ini tidak menunjukkan perkembangan pengagregatan atau degranulasi. Campuran glukosa hipertonik mengakibatkan kehilangan platelet, mungkin mewakili kesan litik. Pengaktifan separa atau lisis platelet boleh menyebabkan pertumbuhan semula tisu selepas suntikan platelet. Tidak jelas apakah akibat klinikal yang boleh ditimbulkan oleh perubahan ini. Kajian lanjut telah menunjukkan ukuran pengaktifan atau lisis yang lebih tepat dan telah menilai kesan klinikal berbeza campuran glukosa hipertonik dengan WB atau PRP.
Terapi proliferatif glukosa ialah terapi regeneratif yang mudah dan murah yang berkembang pesat dan menyokong penyelidikan klinikal. Kajian ini mencadangkan mekanisme fisiologi yang, jika disahkan, boleh membantu kita memahami sebahagian daripada mekanisme regeneratif terapi proliferatif.
Bioperubatan dan Informatik Kesihatan di Universiti Missouri, Pusat Pengajian Perubatan Kansas City, Kansas City, Amerika Syarikat
Subjek Manusia: Semua peserta dalam kajian ini memberi atau tidak memberi kebenaran. Persatuan Perubatan Selular Antarabangsa telah mengeluarkan kelulusan ICMS-2017-003. Protokol berikut telah diluluskan untuk kegunaan selanjutnya oleh Lembaga Kajian Institusi Persatuan Perubatan Selular Antarabangsa: Tajuk: Pengiraan hasil ubat plasma kaya platelet berdasarkan kiraan platelet CBC asas. Subjek Haiwan: Semua penulis mengesahkan bahawa tiada haiwan atau tisu terlibat dalam kajian ini. Konflik Kepentingan: Selaras dengan Borang Pendedahan Seragam ICMJE, semua pengarang mengisytiharkan perkara berikut: Maklumat pembayaran/perkhidmatan: Semua pengarang mengisytiharkan bahawa mereka tidak menerima sokongan kewangan daripada mana-mana organisasi untuk kerja yang diserahkan. Hubungan Kewangan: Semua pengarang mengisytiharkan bahawa mereka pada masa ini atau dalam tempoh tiga tahun yang lalu tidak mempunyai hubungan kewangan dengan mana-mana organisasi yang mungkin berminat dengan karya yang diserahkan. Hubungan Lain: Semua pengarang mengisytiharkan bahawa tiada hubungan atau aktiviti lain yang boleh menjejaskan kerja yang diserahkan.
Harrison TE, Bowler J, Reeves K et al. (17 Mei 2022) Kesan glukosa pada kiraan dan isipadu platelet: implikasi untuk ubat regeneratif. Penawar 14(5): e25081. doi:10.7759/cureus.25081
© Hak Cipta 2022 Harrison et al. Ini ialah artikel akses terbuka yang diedarkan di bawah syarat Lesen Atribusi Creative Commons CC-BY 4.0. Penggunaan tanpa had, pengedaran dan pengeluaran semula dalam mana-mana medium dibenarkan, dengan syarat pengarang dan sumber asal dikreditkan.