“कभी भी इस बात पर संदेह न करें कि विचारशील और समर्पित नागरिकों का एक छोटा समूह दुनिया को बदल सकता है। वास्तव में, यही एकमात्र समूह है जो दुनिया को बदल सकता है।”
क्युरियस का मिशन चिकित्सा प्रकाशन के लंबे समय से चले आ रहे मॉडल को बदलना है, जिसमें शोध प्रस्तुत करना महंगा, जटिल और समय लेने वाला हो सकता है।
प्लेटलेट-समृद्ध प्लाज्मा/पीआरपी, ऊतक पुनर्जनन, प्लेटलेट सक्रियण, ग्लूकोज प्रोलिफेरेटिव थेरेपी, प्लेटलेट्स, प्रोलिफेरेटिव थेरेपी
इस लेख को इस प्रकार उद्धृत करें: हैरिसन टीई, बॉलर जे, रीव्स के, एट अल. (17 मई, 2022) प्लेटलेट संख्या और आयतन पर ग्लूकोज का प्रभाव: पुनर्योजी चिकित्सा के लिए निहितार्थ। क्योर 14(5): e25081. doi:10.7759/cureus.25081
प्लेटलेट-रिच प्लाज्मा (पीआरपी) और हाइपरटोनिक ग्लूकोज घोल का उपयोग पुनर्योजी चिकित्सा में इंजेक्शन के लिए आमतौर पर किया जाता है, कभी-कभी इन्हें एक साथ भी दिया जाता है। प्लेटलेट के विघटन और सक्रियण पर हाइपरटोनिक ग्लूकोज के प्रभाव के बारे में पहले कोई रिपोर्ट नहीं की गई है। हमने पीआरपी और संपूर्ण रक्त (डब्ल्यूबी) में प्लेटलेट और एरिथ्रोसाइट की संख्या के साथ-साथ कोशिका आयतन पर ग्लूकोज की बढ़ी हुई सांद्रता के प्रभाव का परीक्षण किया। पीआरपी या संपूर्ण रक्त के साथ मिश्रित सभी ग्लूकोज मिश्रणों के साथ प्लेटलेट की संख्या में तेजी से आंशिक कमी देखी गई, जो आंशिक विघटन के अनुरूप है। पहले मिनट के बाद, प्लेटलेट की संख्या स्थिर रही, जो यह दर्शाता है कि अवशिष्ट प्लेटलेट्स ने अत्यधिक (>2000 mOsm) हाइपरटोनिसिटी के साथ तेजी से तालमेल बिठा लिया। पहले मिनट के बाद, प्लेटलेट की संख्या स्थिर रही, जो यह दर्शाता है कि अवशिष्ट प्लेटलेट्स ने अत्यधिक (>2000 mOsm) हाइपरटोनिसिटी के साथ तेजी से तालमेल बिठा लिया। अधिक जानकारी के लिए, इस लेख में एक लेख पढ़ें экстремального (>2000 мОсм) гипертонуса. पहले मिनट के बाद, प्लेटलेट की संख्या स्थिर रही, जो यह दर्शाता है कि शेष प्लेटलेट्स ने अत्यधिक (>2000 mOsm) हाइपरटोनिसिटी के साथ तेजी से तालमेल बिठा लिया।第一分钟后,血小板计数保持稳定,表明残余血小板迅速适应极端（> 2000 mOsm）高渗状态.2000 mOsm) अधिक जानकारी के लिए, यह एक आसान समाधान है кстремальному (>2000 мОсм) гиперосмолярному состоянию. पहले मिनट के बाद, प्लेटलेट की संख्या स्थिर रही, जो यह दर्शाता है कि शेष प्लेटलेट्स ने अत्यधिक (>2000 mOsm) हाइपरोस्मोलर स्थिति के लिए तेजी से अनुकूलन कर लिया है।25% और उससे अधिक ग्लूकोज सांद्रता के परिणामस्वरूप औसत प्लेटलेट आयतन (एमपीवी) में उल्लेखनीय वृद्धि हुई, जो प्लेटलेट सक्रियण के प्रारंभिक चरण को इंगित करती है। यह निर्धारित करने के लिए आगे के अध्ययन की आवश्यकता है कि क्या प्लेटलेट का विघटन या सक्रियण होता है और क्या हाइपरटोनिक ग्लूकोज इंजेक्शन अकेले या पीआरपी के साथ संयोजन में अतिरिक्त नैदानिक ​​लाभ प्रदान कर सकता है।
1950 के दशक में, अमेरिकी सर्जन जॉर्ज हैकेट ने पाया कि वे टेंडन और लिगामेंट्स में एक प्रोलिफ़ेरेटिव घोल इंजेक्ट करके कई रोगियों के जोड़ों और पीठ के दर्द को स्थायी रूप से कम कर सकते हैं। खरगोशों पर किए गए उनके प्रयोगों से पता चला कि इस उपचार, जिसे उन्होंने प्रोलिफ़ेरेटिव थेरेपी कहा, से टेंडन बड़े और मजबूत हो जाते हैं। ऊतकीय अध्ययनों ने पुष्टि की है कि इस प्रक्रिया के दौरान नए कोलेजन का उत्पादन होता है [1]।
आरंभिक कुछ दशकों के दौरान, वितरण के कई अलग-अलग तरीके आजमाए गए। 1990 के दशक तक, अधिकांश चिकित्सकों ने ग्लूकोज की उच्च सांद्रता को सबसे सुरक्षित और प्रभावी विधि माना। हालांकि, इसकी कार्यप्रणाली अभी भी स्पष्ट नहीं है।
हैकेट के काम के बाद 20वीं सदी में कुछ नैदानिक ​​अध्ययन किए गए। हालाँकि, 2000 के दशक में नए सिरे से रुचि पैदा हुई और पीठ के निचले हिस्से में दर्द [2], घुटने के ऑस्टियोआर्थराइटिस [3], और पार्श्व एपिकॉन्डिलाइटिस [4] के उपचार के लिए प्रोलिफेरेटिव थेरेपी के कई सफल नैदानिक ​​परीक्षण पूरे किए गए।
ऊतक पुनर्जनन के लिए स्टेम कोशिकाओं की भागीदारी आवश्यक है। इसलिए, ग्लूकोज की उच्च सांद्रता किसी न किसी रूप में स्टेम कोशिकाओं के प्रवास, प्रतिकृति और विभेदन को प्रेरित करती है। हमारा मानना ​​है कि प्लेटलेट्स संदेशवाहक के रूप में कार्य कर सकते हैं और ग्लूकोज की उच्च सांद्रता के कारण प्लेटलेट्स साइटोकाइन और वृद्धि कारक स्रावित कर सकते हैं, जिससे पुनर्जनन प्रक्रियाओं, विशेष रूप से स्टेम कोशिकाओं के उच्च ग्लूकोज सांद्रता वाले क्षेत्रों में प्रवास को बढ़ावा मिलता है।
प्लेटलेट सक्रियण हमेशा इंट्रासेल्युलर कैल्शियम में वृद्धि से पहले होता है [5]। लियू एट अल. ने 2008 में दिखाया कि उच्च ग्लूकोज स्तर प्लाज्मा झिल्ली में ट्रांजिएंट रिसेप्टर पोटेंशियल कैनोनिकल टाइप 6 (टीआरपीसी6) चैनलों की गतिविधि को बढ़ाता है, जिससे प्लेटलेट्स में कैल्शियम आयनों का प्रवाह होता है [6]। एक अन्य अध्ययन से पता चला है कि माइक्रोट्यूब्यूल मार्जिनल ज़ोन का कैल्शियम आयनों के संपर्क में आने से मार्जिनल ज़ोन में शिथिलता, विस्तार और विरूपण होता है, जिसके परिणामस्वरूप डिस्क से गोलाकार आकार में परिवर्तन होता है, जिसके परिणामस्वरूप औसत प्लेटलेट आयतन (एमपीवी) होता है [7]।
इस अध्ययन में हमारी परिकल्पना यह है कि प्लेटलेट्स को ग्लूकोज की उच्च सांद्रता के संपर्क में लाने से माइक्रोट्यूब्यूल मार्जिनल ज़ोन और इंट्रासेलुलर वातावरण प्रभावित होता है, जिससे एमपीवी में वृद्धि होती है।
सभी प्रतिभागियों को अध्ययन के विवरण समझाने के बाद और नमूने प्राप्त करने से पहले एक सहमति पत्र पर हस्ताक्षर किए गए। इस अध्ययन में, केवल 2% से अधिक हीमोग्लोबिन स्तर वाले पीआरपी नमूनों का उपयोग किया गया ताकि तुलना के लिए लाल रक्त कोशिकाओं की संख्या (एरिथ्रोसाइट काउंट) और औसत कॉर्पस्कुलर वॉल्यूम (एमसीवी) को शामिल किया जा सके।
यह अध्ययन चार चरणों में किया गया था, पहला चरण पीआरपी था और शेष चरण संपूर्ण रक्त पर आधारित थे (तालिका 1)। जैसा कि पहले बताया गया है [8], सभी सापेक्ष अपकेंद्री बल (आरसीएफ, जी-बल) की गणना अपकेंद्री सिरिंज में रक्त स्तंभ के मध्यबिंदु (आरएमआईडी, सेमी में) से की गई थी। हमने प्लेटलेट संवेदनशीलता के सूचक के रूप में एमपीवी और संभावित प्लेटलेट लिसिस के संकेतक के रूप में प्लेटलेट गणना का उपयोग करने का विकल्प चुना, इन दोनों को मानक हेमेटोलॉजी विश्लेषकों पर आसानी से मापा जा सकता है।
पहले चरण में, 47 स्वयंसेवकों ने रक्त के नमूने दान किए—एक ट्यूब एथिलीनडायमाइनटेट्राएसिटिक एसिड (EDTA) की और एक PRP संपूर्ण रक्त का नमूना (सोडियम साइट्रेट (NaCl, 3%) से एंटीकोएगुलेटेड) (तालिका 1)। ट्यूब में तुरंत रॉकर डालें। EDTA नमूनों पर तीन बार और NaCl नमूनों पर तीन बार CBC विश्लेषण के लिए पूर्ण रक्त गणना (CBC) की गई, और फिर ऊपर वर्णित विभिन्न विधियों द्वारा PRP तैयार किया गया [8]। सभी PRP नमूनों को 900–1000 g पर सेंट्रीफ्यूगेशन द्वारा तैयार किया गया। प्रत्येक PRP नमूने को वर्टेक्स मिक्सर पर 5–10 सेकंड के लिए मिलाएं, फिर पांच 0.5 मिलीलीटर के भाग ट्यूबों में विभाजित करें।
प्लेटलेट के संपर्क में आने से ग्लूकोज की बढ़ी हुई सांद्रता पर पड़ने वाले प्रभाव का मूल्यांकन करने के लिए, पानी में घुले 0%, 5%, 12.5%, 25% और 50% ग्लूकोज की समान मात्रा (0.5 मिली) को प्लेटलेट के नमूनों के साथ मिलाकर ग्लूकोज मिश्रण की 0%, 2.5%, 6.25%, 12.5% ​​और 25% सांद्रता प्राप्त की गई और ट्यूबों को 15 मिनट के लिए टेस्ट ट्यूब शेकर पर हिलाया गया। प्रत्येक मिश्रण के TAC का 15 मिनट बाद तीन बार विश्लेषण किया गया। प्रत्येक ट्यूब के लिए प्लेटलेट काउंट (PLT), RBC काउंट, MCV और MPV का औसत निकाला गया, और सभी PRP नमूनों के लिए औसत प्लेटलेट काउंट, RBC काउंट, MCV और MPV की गणना की गई।
डेटा संग्रह के पहले चरण के पूरा होने के बाद, हमने D50W मिलाने के बाद PRP प्लेटलेट्स में प्लेटलेट की मात्रा में उल्लेखनीय वृद्धि देखी। PRP प्लेटलेट्स जरूरी नहीं कि रक्त में मौजूद सभी प्लेटलेट्स का प्रतिनिधित्व करें, और PRP माध्यम WB माध्यम से भिन्न होता है। इसलिए, हमने संपूर्ण रक्त में D50W मिलाने के प्रभाव का दूसरे चरण का परीक्षण करने का निर्णय लिया।
दूसरे चरण के लिए, हमने विश्लेषण अनुभाग में वर्णित पहले चरण के परिणामों के आधार पर 30 नमूनों का चयन किया। इस चरण में, 20 स्वयंसेवकों ने रक्त के नमूने दान किए (तालिका 1)। 3 मिलीलीटर की सिरिंज में 1.8 मिलीलीटर संपूर्ण रक्त निकाला गया और उसमें 0.2 मिलीलीटर 40% NaCl मिलाकर एंटीकोएगुलेशन किया गया। संपूर्ण रक्त से भरी सिरिंज को वर्टेक्स मिक्सर से पाँच सेकंड के लिए मिलाया गया और सीबीसी का तीन बार विश्लेषण किया गया। विश्लेषण के बाद, एंटीकोएगुलेटेड रक्त को 5 मिलीलीटर की सिरिंज में 2 मिलीलीटर 50% ग्लूकोज में मिलाया गया (अंतिम ग्लूकोज सांद्रता लगभग 25% (D25) थी) और इसे 30 मिनट के लिए शेक ट्यूब में रखा गया। 30 मिनट के बाद, डब्ल्यूबी सिरिंज में D25/सीबीसी का तीन बार विश्लेषण किया गया। प्रत्येक सिरिंज में प्लेटलेट काउंट, आरबीसी काउंट, एमसीवी और एमपीवी का औसत निकाला गया, और ग्लूकोज मिलाने से पहले और बाद में प्रत्येक नमूने के लिए औसत प्लेटलेट काउंट, आरबीसी काउंट, एमसीवी और एमपीवी की गणना की गई।
क्योंकि न्यूनतम इनवेसिव इंजेक्शन के कारण प्रोलिफेरेटिव ग्लूकोज थेरेपी के दौरान संपूर्ण रक्त में प्लेटलेट्स आमतौर पर हाइपरटोनिक ग्लूकोज के संपर्क में आते हैं, और इंजेक्शन से ठीक पहले पीआरपी को हाइपरटोनिक ग्लूकोज के साथ मिलाना आम बात नहीं है, इसलिए हमने खंड 1 के तीसरे और चौथे चरण में डब्ल्यूबी के साथ हाइपरटोनिक ग्लूकोज के संयोजन का अध्ययन करने का निर्णय लिया। प्रत्येक चरण में, 20 स्वयंसेवकों ने रक्त के एंटीकोएगुलेंट के रूप में 7-8 मिलीलीटर एसीडी-ए (ट्राइसोडियम साइट्रेट (22.0 ग्राम/लीटर), साइट्रिक एसिड (8.0 ग्राम/लीटर) और ग्लूकोज (24.5 ग्राम/लीटर) युक्त एसिड, डेक्सट्रोज साइट्रेट घोल) दान किया (तालिका 1)। एमपीवी में वृद्धि से संबंधित थ्रेशोल्ड प्रतिशत निर्धारित करने के लिए केवल 12.5% ​​से अधिक ग्लूकोज के मिश्रण का उपयोग किया गया। तीसरे चरण में, 1 मिलीलीटर रक्त को एक टेस्ट ट्यूब में रखा जाता है। इसके बाद, ट्यूब में 1 मिलीलीटर 30% ग्लूकोज, 40% ग्लूकोज या 50% ग्लूकोज मिलाकर रक्त को वर्टेक्स मिक्सर पर 10 सेकंड के लिए अच्छी तरह से मिक्स करें, ताकि ग्लूकोज की अंतिम सांद्रता क्रमशः 15%, 20% और 25% हो जाए। ग्लूकोज युक्त रक्त के नमूनों का सीबीसी विश्लेषण मिश्रण के तुरंत बाद किया गया और फिर 30 मिनट तक हर दो मिनट में दोहराया गया।
प्रारंभिक मिश्रण के दौरान, 1:1 अनुपात में हाइपरटोनिक ग्लूकोज और WB या PRP मिलाने से प्लेटलेट्स कुछ सेकंड के लिए 25% से अधिक सांद्रता के संपर्क में आते हैं। चौथे चरण में, न्यूनतम प्रारंभिक पीक सांद्रता के साथ हाइपरटोनिक ग्लूकोज के प्रभाव का मूल्यांकन करने और ग्लूकोज के प्रभाव की ऊपरी सीमा का परीक्षण करने के लिए, हमने D25W या D50W में केवल थोड़ी मात्रा में रक्त मिलाया। एक ट्यूब में 1 मिलीलीटर D25W या D50W डालें और नमूने को 10 सेकंड तक हिलाते हुए 0.2 मिलीलीटर WB मिलाएं। इन मामलों में, रक्त अंतिम सांद्रता से लगभग 20% अधिक सांद्रता पर ग्लूकोज के संपर्क में आया, न कि चरण 3 की तरह अंतिम सांद्रता से 50% अधिक पर, जिसके परिणामस्वरूप अंतिम ग्लूकोज सांद्रता 20.8% और 41.6% रही। मिश्रित नमूनों का विश्लेषण चरण 3 के समान समय अंतराल पर किया गया।
प्रत्येक ग्लूकोज तनुकरण श्रृंखला के पहले चरण में, 30 नमूने लिए गए क्योंकि यह पायलट अध्ययन के लिए उपयुक्त नमूना आकार था [9]। प्रत्येक चरण के अंत में (पहले चरण सहित), एक जनसंख्या में निरंतर परिणाम चर के माध्य का अनुमान लगाने के लिए आवश्यक नमूना आकार निर्धारित करने के लिए उपयोग किए जाने वाले सूत्र का उपयोग करके नमूना आकार की पर्याप्तता का मूल्यांकन करें। सूत्र n = Z² x SD² / E²। इस समीकरण में, Z, Z-स्कोर है, SD मानक विचलन है, और E वांछित त्रुटि है [10]। हमारा अल्फा 0.05 है, जो 1.96 के Z मान के अनुरूप है, और हम 5 (प्रतिशत में) की त्रुटि की अपेक्षा करते हैं। इसलिए हम n = (1.96² x SD²) / 5² के लिए हल करते हैं। परिणामों से पता चला कि प्रत्येक चरण के लिए आवश्यक नमूना आकार एकत्रित की गई वास्तविक संख्या से छोटा था।
अवधि 1, 3 और 4 के दौरान एक से अधिक ग्लूकोज सांद्रता का उपयोग करते हुए, विभिन्न ग्लूकोज सांद्रताओं के प्रभाव का विश्लेषण समय 0 और प्रत्येक बाद के समय (चरण 1 15 मिनट पर, अवधि 3 15 मिनट पर, और अवधि 4 15 सेकंड पर, फिर हर दो मिनट पर) के बीच आंशिक परिवर्तन की तुलना करके किया गया। प्रत्येक समय अवधि के लिए परिवर्तन दरों की तुलना मैन-व्हिटनी यू-टेस्ट का उपयोग करके की गई क्योंकि डेटा शैपिरो-विल्क सामान्यता परीक्षण द्वारा निर्धारित सामान्य वितरण का पालन नहीं करता था। चूंकि पहले, तीसरे और चौथे चरण में कई समूहों (पांच) का 1-से-1 विश्लेषण किया गया था (कुल पांच), वांछित अल्फा मान को ≤0.01 तक समायोजित करने के लिए बोनफेरोनी सुधार किया गया था, लेकिन ≤0.05 तक नहीं।
हाइपरटोनिक डेक्सट्रोज की सभी सांद्रताओं के साथ प्लेटलेट काउंट में कमी और 12.5% ​​से अधिक डेक्सट्रोज सांद्रता पर पीआरपी प्लेटलेट्स में एमपीवी में वृद्धि: पीआरपी प्लेटलेट काउंट आधारभूत संपूर्ण रक्त की तुलना में एक से पांच गुना सांद्रता तक बढ़ गया, जो विधि के अनुसार भिन्न था (चित्रित नहीं)। हाइपरटोनिक डेक्सट्रोज की सभी सांद्रताओं के साथ प्लेटलेट काउंट में कमी और 12.5% ​​से अधिक डेक्सट्रोज सांद्रता पर पीआरपी प्लेटलेट्स में एमपीवी में वृद्धि: पीआरपी प्लेटलेट काउंट आधारभूत संपूर्ण रक्त की तुलना में एक से पांच गुना सांद्रता तक बढ़ गया, जो विधि के अनुसार भिन्न होता है (चित्रित नहीं)। मोबाइल फोनों की सूची гипертонической декстрозы и увеличение MPV в тромбоцитах PRP при концентрации декстрозы > 12,5%: количество тромбоцитов PRP увеличилось в 1-5 раз по сравнению с исходной цельной кровью, в зависимости от метода (नहीं) показано). सभी हाइपरटोनिक डेक्सट्रोज सांद्रता पर प्लेटलेट की संख्या में कमी और 12.5% ​​से अधिक डेक्सट्रोज सांद्रता पर पीआरपी प्लेटलेट्स में एमपीवी में वृद्धि: पीआरपी प्लेटलेट की संख्या आधारभूत संपूर्ण रक्त की तुलना में 1-5 गुना बढ़ गई, जो विधि पर निर्भर करती है (दिखाया नहीं गया है)। ).> 12.5% ​​的葡萄糖浓度下,所有浓度的高渗葡萄糖降低血小板计数,PRP 血小板中MPV उत्तर: 与基线全血相比，PRP 血小板计数从浓度的1 倍上升到5倍, 因方法而异（未描述）。 >12.5% ​​ग्लूकोज सांद्रता पर, ग्लूकोज की उच्च सांद्रता रक्त गणना को कम करती है, पीआरपी रक्त एमपीवी बढ़ता है: 与基线全血 की तुलना में, पीआरपी रक्त गणना सांद्रता की तुलना में 1 से 5 गुना बढ़ जाती है (वर्णित नहीं)। При концентрациях глюкозы >12,5% все концентрации гипертонической глюкозы снижали количество тромбоцитов, а MPV повышали в тромбоцитах PRP: количество тромбоцитов PRP увеличивалось от 1- 5-кратных концентраций पर по сравнению с исходными концентрациями цельной крови, в зависимости от метода (नहीं описано)। ग्लूकोज की सांद्रता >12.5% ​​पर, सभी उच्च रक्तचाप संबंधी ग्लूकोज सांद्रता ने प्लेटलेट की संख्या को कम कर दिया और पीआरपी प्लेटलेट्स में एमपीवी को बढ़ा दिया: पीआरपी प्लेटलेट की संख्या आधारभूत संपूर्ण रक्त सांद्रता की तुलना में 1 से 5 गुना बढ़ गई, जो विधि पर निर्भर करता है (जैसा कि वर्णित है)।चित्र 1 दर्शाता है कि पानी में घोलने के बाद प्लेटलेट्स की संख्या में लगभग 75% की कमी आई और ग्लूकोज की विभिन्न सांद्रताओं के साथ 15 मिनट तक घोलने के बाद बेसलाइन पीआरपी और आयतन के लिए समायोजित 1:1 तनुकरण (आयतन सुधार के साथ 1-k1) की तुलना में 20-30% की कमी आई।
प्रत्येक तनुकरण में कोशिकाओं की संख्या को तनुकरण से पहले की मूल संख्या के अंश के रूप में व्यक्त किया जाता है।
पीआरपी उत्पादन के दौरान एमपीवी में न्यूनतम कमी आई, पानी या ग्लूकोज (जिसमें 25% पीआरपी ग्लूकोज मिश्रण शामिल है) में 12.5% ​​तक तनुकरण सांद्रता में कोई और परिवर्तन नहीं हुआ और 50% ग्लूकोज घोल में तनुकरण के बाद इसमें 20% से अधिक की वृद्धि हुई (चित्र 2)। इसके विपरीत, एरिथ्रोसाइट्स ने H2O के अलावा किसी भी तनुकरण पर आयतन में कोई महत्वपूर्ण परिवर्तन नहीं दिखाया।
प्रत्येक तनुकरण में कोशिकाओं की औसत मात्रा को तनुकरण से पहले की मूल मात्रा के प्रतिशत के रूप में व्यक्त किया जाता है।
50% ग्लूकोज (25% ग्लूकोज के साथ तैयार करने के लिए) के संपर्क में आने वाले BC में प्लेटलेट काउंट में इसी तरह की, लेकिन कम स्पष्ट कमी और CVR में वृद्धि देखी गई। तालिका 2, 50% डेक्सट्रोज में पतला किए गए संपूर्ण रक्त में कोशिका संख्या और कोशिका आयतन की तुलना, 50% डेक्सट्रोज में पतला किए गए चरण 1 PRP डेटा से करती है। RBC काउंट और RBC MCV में परिवर्तन स्पष्ट नहीं थे और ये हमारे ध्यान का केंद्र बिंदु नहीं थे।
SD = मानक विचलन, MD = समूहों के बीच माध्य अंतर, SE = माध्य अंतर का मानक विचलन, RBC = एरिथ्रोसाइट्स, PLT = प्लेटलेट्स, PRP = प्लेटलेट युक्त प्लाज्मा, WB = संपूर्ण रक्त
WB में D50W मिलाने के बाद, तनुकरण-समायोजित प्लेटलेट हानि का प्रतिशत 7.7% (310±73 बनाम 286±96) था, जबकि D50W में PRP तनुकरण के लिए यह 17.8% (664±348 बनाम 544±277) था। MPV WB में 16.8% (10.1 ± 0.5 से 11.8 ± 0.6 तक) की वृद्धि हुई, जबकि MPV PRP में 26% (9.2 ± 0.8 बनाम 11.6 ± 0.7) की वृद्धि हुई। हालांकि प्लेटलेट काउंट में कमी और एमपीवी में वृद्धि दोनों में औसत अंतर पीआरपी के साथ काफी अधिक था, डब्ल्यूबी के भीतर प्लेटलेट काउंट में कमी में परिवर्तन लगभग महत्वपूर्ण था (310 ± 73 से 286 ± 96 (-7.7%); पी = .06) और एमपीवी में वृद्धि महत्वपूर्ण थी (10.1 ± 0.5 से 11.8 ± 0.6 (+16.8) पी < .001)। हालांकि प्लेटलेट काउंट में कमी और एमपीवी में वृद्धि दोनों में औसत अंतर पीआरपी के साथ काफी अधिक था, डब्ल्यूबी के भीतर प्लेटलेट काउंट में कमी में परिवर्तन लगभग महत्वपूर्ण था (310 ± 73 से 286 ± 96 (-7.7%); पी = .06) और एमपीवी में वृद्धि महत्वपूर्ण थी (10.1 ± 0.5 से 11.8 ± 0.6 (+16.8) पी < .001)।हालांकि प्लेटलेट काउंट में कमी और सीवीआर में वृद्धि दोनों में औसत अंतर पीआरपी के साथ काफी अधिक था, डब्ल्यूबी के भीतर प्लेटलेट काउंट में गिरावट में परिवर्तन लगभग महत्वपूर्ण था (310 ± 73 से 286 ± 96 (-7.7%); पी = 0.06)।увеличение MPV было значительным (от 10,1 ± 0,5 до 11,8 ± 0,6 (+16,8) p < 0,001). एमपीवी में वृद्धि महत्वपूर्ण थी (10.1 ± 0.5 से 11.8 ± 0.6 (+16.8) पी < 0.001)।尽管PRP 在血小板计数减少和MPV 增加方面的平均差异显着更大,但WB 310 ± 73 ± 286 ± 96 (-7.7%)；p = .06） और MPV的增加是显着的（10.1 ± 0.5 और 11.8 ± 0.6 (+16.8) पी < .001)।पीआरपी के बारे में अधिक जानें （（（310 ± 73 ± 286 ± 96 (-7.7%) ； p = .06） और MPV अधिकतम मूल्य सीमा (10.1 ± 0.5) 11.8 ± 0.6 (+16.8) पी < .001）。डब्ल्यूबी के भीतर प्लेटलेट काउंट में कमी का परिवर्तन लगभग महत्वपूर्ण था (310 ± 73 से 286 ± 96 (-7.7%); पी = 0.06), हालांकि पीआरपी में प्लेटलेट काउंट में गिरावट और एमपीवी में वृद्धि में काफी बड़ा औसत अंतर था। और एमपीवी में वृद्धि महत्वपूर्ण थी।(10,1 ± 0,5 से लेकर 11,8 ± 0,6 (+16,8) р < 0,001). (10.1 ± 0.5 से 11.8 ± 0.6 (+16.8) p < 0.001 तक)।
MPV में महत्वपूर्ण परिवर्तन देखने के लिए ग्लूकोज की अंतिम सांद्रता 20% आवश्यक थी, लेकिन MPV में परिवर्तन 25% की अंतिम सांद्रता पर अधिक स्पष्ट था। प्रारंभिक गिरावट के बाद प्लेटलेट हानि स्थिर हो गई। हमने CVR में प्रारंभिक तीव्र गिरावट देखी, हालांकि, 25% की अंतिम ग्लूकोज सांद्रता पर CVR तेजी से बहाल हो गया, जो 20% और 15% की अंतिम ग्लूकोज सांद्रता पर देखे गए CVR स्तरों से काफी अधिक था (चित्र 3 और तालिका 3 के बाईं ओर; छायांकित बॉक्स)। (p-मान ≤ अल्फा को 0.01 के बोनफेरोनी सुधार के साथ इंगित करता है)। 0-15 सेकंड के प्रारंभिक चरण में PLT की संख्या में भी प्रारंभिक तीव्र गिरावट देखी गई, और फिर यह स्थिर रही (15 सेकंड से 30 मिनट तक; तालिका 4 के बाईं ओर)।
संपूर्ण रक्त में ग्लूकोज की विभिन्न सांद्रता मिलाने पर MPV में प्रारंभ में तीव्र कमी देखी गई, जिसके बाद सांद्रता के आधार पर 20% से अधिक की रिकवरी हुई। चित्र में तनुकरण के बाद ग्लूकोज की सांद्रता दर्शाई गई है। D15, D20 और D25 प्रयोग 1:1 के अनुपात में किए गए। D21 और D41 प्रयोग 1:5 के अनुपात में किए गए।
तालिका 4 हाइपरटोनिक ग्लूकोज में तनुकरण करने पर प्लेटलेट संख्या में परिवर्तन दर्शाती है। हमने 1:1 तनुकरण और 1:5 तनुकरण पर प्लेटलेट संख्या में तत्काल गिरावट के बीच खुराक-निर्भर संबंध देखा। 1:1 तनुकरण और 1:5 तनुकरण की तुलना करने पर, 1:1 समूह में प्लेटलेट संख्या में तत्काल गिरावट 1:5 समूह की तुलना में कम थी (66±48,000 (23%) बनाम 99±69,000 (37%), p = 0.014)। पहले माप बिंदु पर प्रारंभिक गिरावट के बाद, ग्लूकोज के प्रतिशत के रूप में प्लेटलेट संख्या स्थिर हो गई (चित्र 4)।
जब संपूर्ण रक्त को ग्लूकोज में 1:1 के अनुपात में मिलाया जाता है, तो प्लेटलेट की संख्या लगभग 25% कम हो जाती है। हालांकि, जब संपूर्ण रक्त को 1:5 के अनुपात में मिलाया जाता है, तो यह कमी कहीं अधिक – लगभग 50% – होती है।
41% ग्लूकोज ने 25% या 21% की तुलना में MPV को अधिक तेज़ी से और प्रभावी ढंग से बढ़ाया। MPV के परिणाम चित्र 3 में दिखाए गए हैं। अन्य सभी तनुकरणों पर, 50% ग्लूकोज मिलाने के बाद MPV में कोई तत्काल प्रारंभिक कमी नहीं देखी गई। 25% ग्लूकोज (अंतिम तनुकरण पर ग्लूकोज सांद्रता 20.8%) का उपयोग करने पर, MPV में परिवर्तन 1:1 तनुकरण पर 20% ग्लूकोज के परिवर्तन के बराबर था (चित्र 3)। यद्यपि MPV में परिवर्तन प्रारंभ में 41% मिश्रित सांद्रता पर 25% की तुलना में अधिक था, 16 मिनट के बाद 41% और 25% के बीच MPV का अंतर महत्वपूर्ण नहीं रह गया (तालिका 3, दाएँ)। यह भी दिलचस्प है कि 25% ग्लूकोज ने 20.8% की तुलना में MPV को अधिक प्रभावी ढंग से बढ़ाया।
इस इन विट्रो अध्ययन ने हमारी परिकल्पना की आंशिक रूप से पुष्टि की। इससे डेक्सट्रोज मिश्रण द्वारा प्लेटलेट्स के आंशिक विघटन की संभावना, अत्यधिक हाइपरटोनिसिटी के प्रति प्लेटलेट्स का तेजी से अनुकूलन और हाइपरटोनिक डेक्सट्रोज की 25% से अधिक सांद्रता के जवाब में एमपीवी में महत्वपूर्ण वृद्धि देखी गई। इससे डेक्सट्रोज मिश्रण द्वारा प्लेटलेट्स के आंशिक विघटन की संभावना, अत्यधिक हाइपरटोनिसिटी के प्रति प्लेटलेट्स का तेजी से अनुकूलन और हाइपरटोनिक डेक्सट्रोज की 25% से अधिक सांद्रता के जवाब में एमपीवी में महत्वपूर्ण वृद्धि देखी गई। इस पोस्ट को खरीदने के लिए आपको क्या करना चाहिए उत्पाद विवरण ऑपरेटिंग सिस्टम पर एक एमपीवी और एक लोकप्रिय एमपीवी की मरम्मत концентрацию декстрозы > 25%. इससे डेक्सट्रोज के साथ संभावित आंशिक प्लेटलेट लिसिस, अत्यधिक हाइपरटोनिसिटी के लिए तेजी से प्लेटलेट अनुकूलन, और 25% से अधिक हाइपरटोनिक डेक्सट्रोज स्तरों के जवाब में एमपीवी में महत्वपूर्ण वृद्धि दिखाई दी।它显示出通过葡萄糖混合物潜在的部分血小板溶解,血小板快速适应极端高渗,以及响应> 25% अतिरिक्त शुल्क एमपीवी शुल्क।它 显示 出 通过 葡萄糖 潜在 的 部分 血小板 溶解 血小板 快速 适应 极端 高渗 ， 以及शुल्क> 25% अतिरिक्त शुल्क एमपीवी मूल्य निर्धारण। एक और पोस्ट देखें अधिक पढ़ें एक और अधिक पढ़ें वृद्धि दर > 25%। यह ग्लूकोज मिश्रणों द्वारा संभावित आंशिक प्लेटलेट लिसिस, अत्यधिक हाइपरटोनिसिटी के लिए प्लेटलेट का तीव्र अनुकूलन, और 25% से अधिक हाइपरटोनिक ग्लूकोज के जवाब में एमपीवी में महत्वपूर्ण वृद्धि को दर्शाता है।प्रारंभिक वृद्धि 41.6% ग्लूकोज एक्सपोजर पर अधिकतम थी, लेकिन एक्सपोजर के लगभग 20 मिनट बाद एमपीवी में वृद्धि 25% ग्लूकोज एक्सपोजर के करीब पहुंच गई।
प्लेटलेट्स की सांद्रता ग्लूकोज से प्रभावित होती है। हमने देखा कि ग्लूकोज के सभी तनुकरणों पर प्लेटलेट्स की मात्रा कम हो गई। पीआरपी श्रृंखला के H2O (0%) तनुकरणों में प्लेटलेट्स की संख्या में अचानक गिरावट ऑस्मोटिक लाइसिस से संबंधित हो सकती है। वैकल्पिक रूप से, यह प्लेटलेट क्लंपिंग के कारण उत्पन्न त्रुटि हो सकती है, लेकिन यह इस तनुकरण पर एमपीवी में परिवर्तन न होने के विपरीत है। इस निष्कर्ष का अर्थ है कि कुछ प्लेटलेट्स हाइपोऑस्मोलैरिटी के प्रति बहुत संवेदनशील होते हैं।
ग्लूकोज़ के सभी 1:1 तनुकरणों में, PLT की मात्रा 20-30% तक कम हो गई, यहाँ तक कि D5W (252 mOsm पर हाइपोटोनिक) पर भी, जो ग्लूकोज़ के एक विशिष्ट गैर-परासरण प्रभाव को इंगित कर सकता है, क्योंकि सांद्रता में तीन गुना वृद्धि होने पर भी PLT और MPV दोनों अपरिवर्तित रहे। वास्तव में, परासरण में वृद्धि के साथ PLT की सांद्रता में थोड़ी वृद्धि देखी गई।
1:1 और 1:5 तनुकरणों के बीच पीएलटी में कमी का अर्थ है कि विघटन प्रभाव प्रारंभिक और अंतिम ग्लूकोज सांद्रता पर निर्भर करता है। यदि यह केवल प्रारंभिक सांद्रता पर निर्भर करता, तो 1:1 सांद्रताओं के बीच पीएलटी में कमी का अंतर देखने की उम्मीद होती। लेकिन हमें ऐसा अंतर नहीं दिखता। यदि लिसिस प्रभाव केवल अंतिम ग्लूकोज सांद्रता पर निर्भर करता है, तो 20% 1:1 तनुकरण और 20.8% 1:5 तनुकरण के बीच बहुत अधिक अंतर की उम्मीद नहीं होती। फिर भी हमने यह कर दिखाया।
यदि प्लेटलेट लाइसिस के कारण प्लेटलेट की हानि होती है, तो आंशिक लाइसैट बनता है, जिसके बाद साइटोकाइन और वृद्धि कारक बाह्यकोशिकीय वातावरण में मुक्त होते हैं। कई अध्ययनों से पता चला है कि प्लेटलेट लाइसैट, प्रोलिफरेशन सॉल्यूशन के रूप में पीआरपी जितना ही प्रभावी है [11]। पीआरपी स्वयं प्रोलिफरेशन के उपचार के लिए एक प्रभावी समाधान सिद्ध हुआ है [12-14]।
निष्क्रिय प्लेटलेट्स कई आंतरिक संरचनाओं से मजबूत एक डिस्क के रूप में परिसंचरण करते हैं। सक्रियण के दौरान, वे अधिक गोलाकार या अमीबा जैसा आकार ले लेते हैं, जिसके परिणामस्वरूप आयतन में वृद्धि होती है। आयतन में वृद्धि के लिए सतह क्षेत्र में वृद्धि आवश्यक है, जो खुली नलिका प्रणाली (OCS) के निष्कासन और झिल्ली में बाह्य कणिकाओं के जुड़ने का परिणाम है। यह निर्धारित किया जाना बाकी है कि हाइपरटोनिक ग्लूकोज द्वारा प्रेरित MPV में वृद्धि में इनमें से एक या दोनों तंत्र शामिल हैं या नहीं, लेकिन यदि बाद वाला तंत्र शामिल है, तो MPV में वृद्धि डीग्रेन्युलेशन का संकेत देगी।
इस अध्ययन से पता चला कि पीआरपी या संपूर्ण रक्त प्लेटलेट्स पर ग्लूकोज की उच्च सांद्रता के संपर्क में आने से क्रमशः 25% और 41.6% की ग्लूकोज सांद्रता के साथ 15 मिनट के भीतर एमपीवी में वृद्धि हुई।
प्लेटलेट एमपीवी में वृद्धि कैल्शियम प्रवाह के परिणामस्वरूप आसपास के माइक्रोट्यूब्यूल टेंगल्स के फैलाव के कारण हो सकती है। लियू एट अल. ने दिखाया है कि ग्लूकोज प्लेटलेट टीआरपीसी6 चैनल के माध्यम से कैल्शियम प्रवाह को नियंत्रित करता है [6]। हमारी परिकल्पना यह है कि ग्लूकोज माइक्रोट्यूब्यूल टेंगल्स को शिथिल करता है, जिससे एमपीवी में वृद्धि होती है और प्लेटलेट संवेदनशीलता और/या सक्रियता बढ़ती है। हालांकि, हमारे परिणामों के आधार पर, यह कहानी का केवल एक हिस्सा है। हमारे परीक्षणों में, डी25डब्ल्यू से कम किसी भी सांद्रता के कारण एमपीवी में वृद्धि नहीं हुई। यह देखते हुए कि हमने 12.5% ​​और 25% के बीच ग्लूकोज सांद्रता के संपर्क का परीक्षण नहीं किया है, हमारे चरण 1 के परिणाम बताते हैं कि ग्लूकोज सांद्रता की इस सीमा में एक सीमा हो सकती है जो एमपीवी में वृद्धि का कारण बनती है। चरण 3 और 4 में आगे के परीक्षणों से पता चला कि 20-25% ग्लूकोज इसके लिए सीमा प्रतीत होती है, लेकिन इसका कारण अभी भी स्पष्ट नहीं है।
हमने सेंट्रीफ्यूगेशन के बाद एमपीवी में लगभग 9% की कमी भी देखी। यह स्पष्ट नहीं है कि एमपीवी में यह कमी सेंट्रीफ्यूज की आरबीसी परत में फंसे बड़े और सघन प्लेटलेट्स के कारण है या नहीं। यह अवलोकन चिकित्सकों के लिए महत्वपूर्ण हो सकता है क्योंकि इससे यह संकेत मिल सकता है कि पीआरपी प्लेटलेट्स, डब्ल्यूबी प्लेटलेट्स का एक छोटा और कम सघन उपसमूह हैं।
पिछले एक अध्ययन में, हमने दिखाया था कि मैन्युअल तरीकों से पीआरपी तैयार करना सस्ता है [8]। यदि ग्लूकोज ऊतक प्लेटलेट्स या पीआरपी को संवेदनशील बनाता है, जिससे वे सक्रियण के प्रति अधिक संवेदनशील हो जाते हैं, या यदि पीआरपी आंशिक लाइसैट गुणों के साथ उत्पादित होता है, तो यह पुनर्जनन को बढ़ा सकता है और उपचार की आवश्यकता को कम कर सकता है। इसलिए, पीआरपी और उच्च सांद्रता वाले ग्लूकोज का संयोजन केवल पीआरपी या ग्लूकोज की तुलना में अधिक लागत प्रभावी हो सकता है।
हमारे अध्ययन में कई कमियां हैं। पहली बात, हमने कई अलग-अलग तरीकों से प्राप्त पीआरपी का उपयोग किया है। इससे विरोधाभासी परिणाम सामने आ सकते हैं। दूसरी बात, प्लेटलेट सक्रियण हुआ था या नहीं, इसका सटीक निर्धारण करने के लिए हम अपने किसी भी नमूने का जैव रासायनिक विश्लेषण नहीं कर पाए। हम अल्फा ग्रेन्यूल डीग्रेन्युलेशन की मात्रा या उपस्थिति को बेहतर ढंग से समझने के लिए पी-सेलेक्टिन, प्लेटलेट फैक्टर 4, मोनोसाइटिक प्लेटलेट एग्रीगेट्स या प्लेटलेट सक्रियण के अन्य मार्करों को मापना चाहते थे, लेकिन यह इस अध्ययन के दायरे से बाहर है। तीसरी बात, हम इलेक्ट्रॉन माइक्रोस्कोपी या अन्य तरीकों से यह पुष्टि नहीं कर पाए कि ग्लूकोज के संपर्क में आए प्लेटलेट्स में एमपीवी में वृद्धि माइक्रोट्यूब्यूल टेंगल्स पर प्रभाव के कारण थी।
25% ग्लूकोज के साथ डब्ल्यूबी या पीआरपी के मिश्रण ने एमपीवी को बढ़ाया, जो प्लेटलेट सक्रियण की शुरुआत का संकेत था, हालांकि इस अध्ययन में एकत्रीकरण या डीग्रेन्युलेशन की प्रगति प्रदर्शित नहीं हुई। हाइपरटोनिक ग्लूकोज मिश्रण के परिणामस्वरूप प्लेटलेट्स की हानि हुई, जो संभवतः एक लैटिक प्रभाव को दर्शाती है। प्लेटलेट्स के आंशिक सक्रियण या लिसिस से प्लेटलेट इंजेक्शन के बाद ऊतक पुनर्जनन हो सकता है। यह स्पष्ट नहीं है कि इन परिवर्तनों के क्या नैदानिक ​​परिणाम हो सकते हैं। आगे के अध्ययनों ने सक्रियण या लिसिस के अधिक सटीक माप प्रदर्शित किए हैं और डब्ल्यूबी या पीआरपी के साथ हाइपरटोनिक ग्लूकोज मिश्रण के विभिन्न नैदानिक ​​प्रभावों का मूल्यांकन किया है।
ग्लूकोज प्रोलिफेरेटिव थेरेपी एक सरल और किफायती पुनर्योजी चिकित्सा है जो तेजी से फैल रही है और नैदानिक ​​अनुसंधान को बढ़ावा दे रही है। यह अध्ययन एक शारीरिक क्रियाविधि का सुझाव देता है, जिसकी पुष्टि होने पर हमें प्रोलिफेरेटिव थेरेपी की पुनर्योजी क्रियाविधि के एक भाग को समझने में मदद मिल सकती है।
मिसौरी विश्वविद्यालय, कैनसस सिटी स्कूल ऑफ मेडिसिन, कैनसस सिटी, संयुक्त राज्य अमेरिका में बायोमेडिकल और स्वास्थ्य सूचना विज्ञान विभाग।
मानव विषय: इस अध्ययन में सभी प्रतिभागियों ने सहमति दी या नहीं दी। इंटरनेशनल सोसाइटी फॉर सेलुलर मेडिसिन ने ICMS-2017-003 अनुमोदन जारी किया है। इंटरनेशनल सोसाइटी फॉर सेलुलर मेडिसिन के संस्थागत समीक्षा बोर्ड द्वारा निम्नलिखित प्रोटोकॉल को आगे उपयोग के लिए अनुमोदित किया गया है: शीर्षक: बेसलाइन सीबीसी प्लेटलेट गणना के आधार पर प्लेटलेट-समृद्ध प्लाज्मा दवा उपज की गणना। पशु विषय: सभी लेखकों ने पुष्टि की है कि इस अध्ययन में किसी भी पशु या ऊतक का उपयोग नहीं किया गया था। हितों का टकराव: ICMJE यूनिफॉर्म डिस्क्लोजर फॉर्म के अनुसार, सभी लेखक निम्नलिखित घोषणा करते हैं: भुगतान/सेवा जानकारी: सभी लेखक घोषणा करते हैं कि उन्हें प्रस्तुत कार्य के लिए किसी भी संगठन से कोई वित्तीय सहायता प्राप्त नहीं हुई है। वित्तीय संबंध: सभी लेखक घोषणा करते हैं कि वर्तमान में या पिछले तीन वर्षों के भीतर उनका किसी भी ऐसे संगठन के साथ कोई वित्तीय संबंध नहीं है जो प्रस्तुत कार्य में रुचि रखता हो। अन्य संबंध: सभी लेखक घोषणा करते हैं कि कोई अन्य संबंध या गतिविधियाँ नहीं हैं जो प्रस्तुत कार्य को प्रभावित कर सकती हैं।
हैरिसन टी.ई., बॉलर जे., रीव्स के. एट अल. (17 मई, 2022) प्लेटलेट की संख्या और आयतन पर ग्लूकोज का प्रभाव: पुनर्योजी चिकित्सा के लिए निहितार्थ। क्योर 14(5): e25081. doi:10.7759/cureus.25081
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