"Qatt tiddubita li grupp żgħir ta' ċittadini maħsubin u dedikati jistgħu jibdlu d-dinja. Fil-fatt, huwa l-uniku wieħed li hemm."
Il-missjoni ta' Cureus hija li tbiddel il-mudell li ilu jeżisti tal-pubblikazzjoni medika, fejn is-sottomissjoni tar-riċerka tista' tkun għalja, kumplessa, u tieħu ħafna ħin.
Plażma rikka fil-plejtlets/prp, riġenerazzjoni tat-tessuti, attivazzjoni tal-plejtlets, terapija proliferattiva tal-glukożju, plejtlets, terapija proliferattiva
Ikkwota dan l-artiklu bħala: Harrison TE, Bowler J, Reeves K, et al. (17 ta' Mejju, 2022) L-effett tal-glukożju fuq l-għadd u l-volum tal-plejtlits: implikazzjonijiet għall-mediċina riġenerattiva. Cure 14(5): e25081. doi:10.7759/cureus.25081
Soluzzjonijiet ta' plażma rikka fil-plejtlits (PRP) u glukożju ipertoniċi huma komunement użati għall-injezzjoni fil-mediċina riġenerattiva, xi kultant flimkien. L-effett tal-glukożju ipertoniku fuq il-liżi u l-attivazzjoni tal-plejtlits ma ġiex irrappurtat qabel. Aħna ttestjajna l-effett ta' konċentrazzjonijiet elevati ta' glukożju fuq l-għadd ta' plejtlits u eritroċiti, kif ukoll il-volumi taċ-ċelluli fil-PRP u fid-demm sħiħ (WB). Tnaqqis parzjali rapidu fl-għadd ta' plejtlits seħħ bit-taħlitiet kollha tal-glukożju mħallta ma' PRP jew demm sħiħ, konsistenti ma' liżi parzjali. Wara l-ewwel minuta, l-għadd tal-plejtlits baqa' stabbli, u dan jissuġġerixxi akkomodazzjoni rapida tal-plejtlits residwi għal ipertoniċità estrema (>2000 mOsm). Wara l-ewwel minuta, l-għadd tal-plejtlits baqa' stabbli, u dan jissuġġerixxi akkomodazzjoni rapida tal-plejtlits residwi għal ipertoniċità estrema (>2000 mOsm). После первой минуты количество тромбоцитов оставалось стабильным, что указывает на ставалось стабильным, что указывает на зывает на боцитов боставалось остаточных тромбоцитов до экстремального (>2000 мОсм) гипертонуса. Wara l-ewwel minuta, l-għadd tal-plejtlits baqa' stabbli, u dan jindika akkomodazzjoni rapida tal-plejtlits residwi għal ipertoniċità estrema (>2000 mOsm).第一分钟后，血小板计数保持稳定，表明残余血小板迅速适应极端（> 2000 mOsm）高渗状态。2000 mOsm）高渗状态。 После первой минуты количество тромбоцитов оставалось стабильным, что указывает на зывает на ююпы остаточных тромбоцитов к экстремальному (>2000 мОсм) гиперосмолярному состоянию. Wara l-ewwel minuta, l-għadd tal-plejtlits baqa' stabbli, u dan jindika adattament rapidu tal-plejtlits residwi għall-istat iperosmolari estrem (>2000 mOsm).Konċentrazzjonijiet ta' glukożju ta' 25% u aktar irriżultaw f'żieda sinifikanti fil-volum medju tal-plejtlits (MPV), li jindika stadju bikri ta' attivazzjoni tal-plejtlits. Huma meħtieġa aktar studji biex jiġi determinat jekk isseħħx lisi jew attivazzjoni tal-plejtlits u jekk l-injezzjoni ipertonika ta' glukożju waħedha jew flimkien ma' PRP tistax tipprovdi benefiċċju kliniku addizzjonali.
Fis-snin ħamsin, il-kirurgu Amerikan George Hackett skopra li seta’ jtaffi b’mod permanenti l-uġigħ fil-ġogi u fid-dahar f’ħafna pazjenti billi jinjetta soluzzjoni proliferattiva fit-tendini u l-ligamenti. L-esperimenti tiegħu fuq il-fniek urew li t-trattament, li sejjaħ terapija proliferattiva, ikkawża li t-tendini jikbru u jissaħħu. Studji istoloġiċi kkonfermaw li kollaġen ġdid jiġi prodott matul dan il-proċess [1].
Matul l-ewwel ftit deċennji, ġew ippruvati ħafna soluzzjonijiet differenti ta’ distribuzzjoni. Sas-snin disgħin, il-biċċa l-kbira tal-prattikanti kkunsidraw konċentrazzjonijiet għoljin ta’ glukożju bħala l-aktar metodu sikur u effettiv. Madankollu, il-mekkaniżmu ta’ azzjoni għadu mhux ċar.
Ftit studji kliniċi twettqu fis-seklu 20 wara x-xogħol ta' Hackett. Madankollu, fis-snin 2000 kien hemm interess imġedded u diversi provi kliniċi ta' suċċess ta' terapija proliferattiva tlestew għat-trattament ta' uġigħ fin-naħa t'isfel tad-dahar [2], osteoartrite tal-irkoppa [3], u epikondilite laterali [4].
Ir-riġenerazzjoni tat-tessuti teħtieġ il-parteċipazzjoni taċ-ċelloli staminali. Għalhekk, konċentrazzjonijiet għoljin ta' glukożju jridu b'xi mod jinduċu l-migrazzjoni, ir-replikazzjoni, u d-divrenzjar taċ-ċelloli staminali. Aħna nissoponu li l-plejtlits jistgħu jaġixxu bħala messaġġiera u li konċentrazzjonijiet għoljin ta' glukożju jistgħu jikkawżaw li l-plejtlits jirrilaxxaw ċitokini u fatturi tat-tkabbir, u b'hekk jippromwovu proċessi riġenerattivi, speċjalment il-migrazzjoni taċ-ċelloli staminali lejn żoni b'konċentrazzjonijiet għoljin ta' glukożju.
L-attivazzjoni tal-plejtlits dejjem tiġi qabel żieda fil-kalċju intraċellulari [5]. Liu et al. fl-2008 urew li livelli għoljin ta' glukożju jżidu l-attività tal-kanali tat-tip kanoniċi 6 tar-riċettur temporanju potenzjali (TRPC6) fil-membrana tal-plażma, li jwassal għal influss ta' joni tal-kalċju fil-plejtlits [6]. Studju ieħor wera li l-esponiment taż-żona marġinali tal-mikrotubuli għall-joni tal-kalċju jikkawża rilassament, espansjoni, u deformazzjoni taż-żona marġinali, li min-naħa tagħha tikkawża bidla fil-forma minn diska għal sferika, li tirriżulta f'volum medju tal-plejtlits (MPV) [7].
L-ipoteżi tagħna f'dan l-istudju hija li l-esponiment tal-plejtlits għal konċentrazzjonijiet għoljin ta' glukożju jaffettwa ż-żona marġinali tal-mikrotubuli u l-ambjent intraċellulari, u jwassal għal żieda fl-MPV.
Il-parteċipanti kollha ffirmaw formola ta’ kunsens infurmat wara li ġew spjegati d-dettalji tal-istudju u qabel ma rċevew il-kampjuni. F’dan l-istudju, intużaw biss kampjuni PRP b’ematokrit akbar minn 2% sabiex l-għadd ta’ eritroċiti (eritroċiti) u l-volum korpuskulari medju taċ-ċelluli ħomor tad-demm (MCV) setgħu jiġu inklużi għal tqabbil.
L-istudju twettaq f'erba' fażijiet, l-ewwel fażi kienet PRP u l-fażijiet li fadal kienu demm sħiħ (Tabella 1). Kif deskritt qabel [8], il-forzi ċentrifugali relattivi kollha (RCF, forza-g) ġew ikkalkulati mill-punt tan-nofs (Rmid, f'cm) tal-kolonna tad-demm fis-siringa ċentrifugali. Għażilna li nużaw l-MPV bħala indikatur tas-sensitizzazzjoni tal-plejtlits u l-għadd tal-plejtlits bħala indikatur tal-liżi potenzjali tal-plejtlits, li t-tnejn jistgħu jitkejlu faċilment fuq analizzaturi standard tal-ematoloġija.
Fl-ewwel fażi, 47 voluntier taw kampjuni tad-demm—tubu wieħed ta’ ethylenediaminetetraacetic acid (EDTA) u kampjun wieħed tad-demm sħiħ PRP (antikoagulat b’sodium citrate (NaCl, 3%)) (Tabella 1). Poġġi r-rocker fit-tubu immedjatament. L-għadd sħiħ tad-demm (CBC) sar fuq kampjuni EDTA fi tliet kopji, u l-kampjuni NaCl ġew analizzati fi tliet kopji għall-analiżi CBC, u mbagħad il-PRP ġie ppreparat b’diversi metodi deskritti hawn fuq [8]. Il-kampjuni kollha tal-PRP ġew ippreparati permezz ta’ ċentrifugazzjoni f’900–1000 g. Ħallat kull kampjun PRP fuq vortex mixer għal 5–10 sekondi, imbagħad aqsam ħames alikwoti ta’ 0.5 ml f’tubi.
Biex jiġi evalwat l-effett tal-espożizzjoni għall-plejtlits fuq konċentrazzjonijiet elevati ta' glukożju, ammonti ugwali (0.5 ml) ta' 0%, 5%, 12.5%, 25%, u 50% glukożju fl-ilma tħalltu ma' kampjuni ta' plejtlits biex jinkisbu konċentrazzjonijiet ta' 0%, 2.5%, 6.25%, 12.5% ​​u 25% tat-taħlita tal-glukożju u tħalltu t-tubi fuq shaker tat-test tube għal 15-il minuta. It-TAC ta' kull taħlita ġiet analizzata fi tliet kopji wara 15-il minuta. L-għadd tal-plejtlits (PLT), l-għadd ta' RBC, l-MCV, u l-MPV ġew medjati għal kull tubu, u l-għadd medju tal-plejtlits, l-għadd ta' RBC, l-MCV, u l-MPV ġew ikkalkulati għall-kampjuni kollha tal-PRP.
Wara li tlestiet l-ewwel fażi tal-ġbir tad-dejta, innotajna żieda sinifikanti fil-volum tal-plejtlits fil-plejtlits PRP wara ż-żieda ta' D50W. Il-plejtlits PRP mhux neċessarjament jirrappreżentaw il-plejtlits kollha fid-demm, u l-mezz PRP huwa differenti mill-mezz WB. Għalhekk, iddeċidejna li nwettqu prova tat-tieni fażi tal-effett taż-żieda ta' D50W mad-demm sħiħ.
Għat-tieni rawnd, għażilna daqs ta' kampjun ta' 30 ibbażat fuq ir-riżultati mill-ewwel serje, kif deskritt fit-taqsima tal-Analiżi. F'din is-serje, 20 voluntier taw kampjuni tad-demm (Tabella 1). Demm sħiħ (1.8 ml) ittieħed f'siringa ta' 3 ml u ġie antikoagulat b'0.2 ml 40% NaCl. Is-siringa tad-demm sħiħ tħalltet għal ħames sekondi b'mixer vortex u s-CBC ġie analizzat fi tliet kopji. Wara l-analiżi, id-demm antikoagulat ġie miżjud ma' 2 ml ta' 50% glukożju f'siringa ta' 5 ml (il-konċentrazzjoni finali tal-glukożju kienet ta' madwar 25% (D25) u tqiegħed f'tubu tat-tħawwid għal 30 minuta. Wara 30 minuta, D25/CBC f'siringi WB ġew analizzati fi tliet kopji. L-għadd tal-plejtlits, l-għadd ta' RBC, l-MCV, u l-MPV għal kull siringa ġew medjati, u l-medja tal-PLT, l-għadd ta' RBC, l-MCV, u l-MPV ġew ikkalkulati għal kull kampjun qabel u wara li żdied il-glukożju.
Minħabba li l-plejtlits fid-demm sħiħ huma komunement esposti għal glukożju ipertoniku waqt terapija proliferattiva tal-glukożju minħabba injezzjoni minimament invażiva, u mhux komuni li l-PRP jiġi kkombinat ma' glukożju ipertoniku eżatt qabel l-injezzjoni, iddeċidejna li nistudjaw il-glukożju ipertoniku flimkien ma' WB fit-Taqsima 1. Passi Tlieta u erbgħa. F'kull stadju, 20 voluntier taw 7-8 ml ta' ACD-A (aċidu li fih trisodium citrate (22.0 g/l), aċidu ċitriku (8.0 g/l) u glukożju (24.5 g/l), soluzzjoni dextrose citrate) għal antikoagulanti tad-demm (Tabella 1). Intużaw biss taħlitiet ta' glukożju akbar minn 12.5% ​​biex jiġi ddeterminat il-perċentwal limitu assoċjat ma' żieda fl-MPV. Fit-tielet stadju, 1 ml ta' demm jitqiegħed f'tubu tat-test. Imbagħad ħallat id-demm fuq vortex mixer għal 10 sekondi billi żżid 1 ml ta' 30% glukożju, 40% glukożju, jew 50% glukożju mat-tubu biex tikseb konċentrazzjoni finali ta' glukożju ta' 15%, 20%, u 25%, rispettivament. Il-kampjuni tad-demm bil-glukożju ġew analizzati għas-CBC immedjatament wara t-taħlit u ripetuti kull żewġ minuti għal 30 minuta.
Matul it-taħlit inizjali, iż-żieda ta' glukożju ipertoniku 1:1 u WB jew PRP tesponi l-plejtlits għal konċentrazzjonijiet 'il fuq minn 25% għal diversi sekondi. Fir-raba' pass, biex nevalwaw l-effett tal-glukożju ipertoniku b'konċentrazzjonijiet minimi tal-quċċata inizjali u nittestjaw il-limitu massimu tal-effett tal-glukożju, żidna biss ammont żgħir ta' demm ma' D25W jew D50W. Poġġi 1 ml ta' D25W jew D50W f'tubu u żid 0.2 ml ta' WB waqt li nħawwad il-kampjun għal 10 sekondi. F'dawn il-każijiet, id-demm kien espost għall-glukożju f'konċentrazzjoni ta' madwar 20% 'il fuq mill-konċentrazzjoni finali, aktar milli 50% 'il fuq mill-konċentrazzjoni finali bħal fil-Fażi 3, li rriżulta f'konċentrazzjonijiet finali tal-glukożju ta' 20.8% u 41.6%. Kampjuni mħallta ġew analizzati fl-istess intervall ta' ħin bħal fil-pass 3.
Fl-ewwel pass ta' kull serje ta' dilwizzjoni tal-glukożju, ittieħdu 30 kampjun peress li dan kien id-daqs xieraq tal-kampjun għall-istudju pilota [9]. Fi tmiem kull fażi (inkluża l-ewwel fażi), evalwa l-adegwatezza tad-daqs tal-kampjun billi tuża l-formula użata biex tiddetermina d-daqs tal-kampjun meħtieġ biex tiġi stmata l-medja tal-varjabbli tar-riżultat kontinwu f'popolazzjoni waħda. Formula n = Z2 x SD2 /E2. F'din l-ekwazzjoni, Z huwa l-punteġġ Z, SD hija d-devjazzjoni standard, u E huwa l-iżball mixtieq [10]. L-alfa tagħna hija 0.05, li tikkorrispondi għal valur Z ta' 1.96, u nistennew żball ta' 5 (f'perċentwali). Għalhekk insolvu għal n = (1.962 x SD2)/52. Ir-riżultati wrew li d-daqs tal-kampjun meħtieġ għal kull stadju kien iżgħar min-numru attwali miġbur.
Matul il-perjodi 1, 3 u 4 bl-użu ta' aktar minn konċentrazzjoni waħda ta' glukożju, l-effett ta' konċentrazzjonijiet differenti ta' glukożju ġie analizzat billi tqabbel il-bidla frazzjonali bejn il-ħin 0 u kull ħin sussegwenti (fażi 1 wara 15-il minuta, perjodu 3 wara 15-il minuta, u erbgħa wara 15-il sekonda, imbagħad kull żewġ minuti.) Ir-rati ta' bidla għal kull perjodu ta' żmien tqabblu bl-użu tat-test U ta' Mann-Whitney għaliex id-dejta ma segwietx distribuzzjoni normali kif determinat mit-test tan-normalità ta' Shapiro-Wilk. Peress li twettqet analiżi 1 għal 1 ta' diversi gruppi (ħamsa) fl-ewwel, it-tielet u r-raba' passi (ħamsa b'kollox), twettqet korrezzjoni ta' Bonferroni biex taġġusta l-valur alfa mixtieq għal ≤0.01 iżda mhux ≤0.05.
Tnaqqis fl-għadd ta' plejtlits bil-konċentrazzjonijiet kollha ta' destrożju ipertoniku u żieda fl-MPV fil-plejtlits PRP b'konċentrazzjoni ta' destrożju ta' >12.5%: L-għadd ta' plejtlits PRP żdied minn darba sa ħames darbiet il-konċentrazzjoni meta mqabbel mad-demm sħiħ bażi, u varja skont il-metodu (mhux muri). Tnaqqis fl-għadd tal-plejtlits bil-konċentrazzjonijiet kollha ta' destrosju ipertoniku u żieda fl-MPV fil-plejtlits PRP b'konċentrazzjoni ta' destrosju ta' >12.5%: L-għadd tal-plejtlits PRP żdied minn darba sa ħames darbiet il-konċentrazzjoni meta mqabbel mad-demm sħiħ bażi, u varja skont il-metodu (mhux muri). Уменьшение количества тромбоцитов при всех концентрациях гипертонической декстроеской декстроцитов при всех концентрациях тромбоцитах PRP при концентрации декстрозы > 12,5%: количество тромбоцитов PRP увеличило з1-пь 5 сравнению с исходной цельной кровью, в зависимости от метода (не показано). Tnaqqis fl-għadd ta' plejtlits fil-konċentrazzjonijiet kollha ta' destrosju ipertoniċi u żieda fl-MPV fil-plejtlits PRP f'konċentrazzjoni ta' destrosju ta' >12.5%: L-għadd ta' plejtlits PRP żdied minn 1 sa 5 darbiet meta mqabbel mad-demm sħiħ fil-linja bażi, skont il-metodu (mhux muri). ).在> 12.5% ​​的葡萄糖浓度下，所有浓度的高渗葡萄糖降低血小板计数，PRP 数，中度的高渗葡萄糖降低血小板计数，PRP 血孏增加：与基线全血相比，PRP 血小板计数从浓度的1 倍上升到5 倍，因方法，因方法（氏而氏浓度的1 B'konċentrazzjoni ta' glukożju ta' >12.5%, il-konċentrazzjoni għolja ta' glukożju tnaqqas l-għadd tad-demm, l-MPV fid-demm tal-PRP jiżdied: meta mqabbel ma' 与基线全血, l-għadd tad-demm tal-PRP jiżdied minn 1 sa 5 darbiet dak tal-konċentrazzjoni (mhux deskritt). При концентрациях глюкозы >12,5% все концентрации гипертонической глюкозы снижтали ксолиции тромбоцитов, а MPV повышали в тромбоцитах PRP: количество тромбоцитов PRP увеличивалось оты51--ь оты концентраций по сравнению с исходными концентрациями цельной крови, в зависимости от мето (mhux deskritt). F'konċentrazzjonijiet ta' glukożju >12.5%, il-konċentrazzjonijiet kollha ta' glukożju ipertensiv naqqsu l-għadd ta' plejtlits u żiedu l-MPV fil-plejtlits PRP: l-għadd ta' plejtlits PRP żdied minn darba sa 5 darbiet meta mqabbel mal-konċentrazzjonijiet bażi fid-demm sħiħ, skont il-metodu (kif deskritt).Il-Figura 1 turi li n-numru ta' plejtlits naqas bi kważi 75% wara d-dilwizzjoni fl-ilma u b'20-30% wara 15-il minuta ta' dilwizzjoni b'konċentrazzjonijiet differenti ta' glukożju meta mqabbla mal-PRP bażi u dilwizzjoni 1:1 aġġustata għall-volum (1- k1 b'korrezzjoni tal-volum). k -1 tnissil).1 tnissil).
L-għadd ta' ċelluli f'kull dilwizzjoni huwa espress bħala frazzjoni tal-għadd oriġinali qabel id-dilwizzjoni.
L-MPV naqas minimament waqt il-produzzjoni tal-PRP, mingħajr aktar bidla fil-konċentrazzjonijiet tad-dilwizzjoni għal 12.5% ​​​​fl-ilma jew fil-glukożju (inklużi taħlitiet ta' 25% PRP glukożju) u żdied b'aktar minn 20% wara d-dilwizzjoni f'soluzzjoni ta' 50% glukożju (Fig. .2). B'kuntrast, l-eritroċiti ma wrew l-ebda bidla sinifikanti fil-volum fi kwalunkwe dilwizzjoni għajr l-H2O.
Il-volum medju taċ-ċelloli f'kull dilwizzjoni huwa espress bħala perċentwal tal-volum oriġinali qabel id-dilwizzjoni.
Tnaqqis simili iżda inqas evidenti fl-għadd tal-plejtlits u żieda fis-CVR ġew osservati f'BC esposti għal 50% glukożju (biex tiġi fformulata b'25% glukożju). It-Tabella 2 tqabbel in-numru taċ-ċelluli u l-volumi taċ-ċelluli fid-demm sħiħ dilwit f'50% destrożju mad-dejta tal-PRP tal-fażi 1 dilwita f'50% destrożju. Il-bidliet fl-għadd tar-RBC u l-MCV tar-RBC ma kinux ovvji u ma kinux il-fokus tal-attenzjoni tagħna.
SD = devjazzjoni standard, MD = differenza medja bejn il-gruppi, SE = devjazzjoni standard tad-differenza medja, RBC = eritroċiti, PLT = plejtlits, PRP = plażma rikka fil-plejtlits, WB = demm sħiħ
Wara ż-żieda ta' D50W ma' WB, il-perċentwal ta' telf ta' plejtlits aġġustat għad-dilwizzjoni kien ta' 7.7% (310±73 vs. 286±96) meta mqabbel ma' 17.8% għad-dilwizzjoni ta' PRP f'D50W (664±348 vs. 544±277). L-MPV WB żdied b'16.8% (minn 10.1 ± 0.5 għal 11.8 ± 0.6), filwaqt li l-MPV PRP żdied b'26% (9.2 ± 0.8 vs. 11.6 ± 0.7). Għalkemm id-differenzi medji kemm fit-tnaqqis tal-għadd tal-plejtlits kif ukoll fiż-żieda tal-MPV kienu sinifikament akbar bil-PRP, il-bidliet fit-tnaqqis tal-għadd tal-plejtlits fi ħdan il-WB kienu kważi sinifikanti (310 ± 73 sa 286 ± 96 (-7.7%); p = .06) u ż-żieda fl-MPV kienet sinifikanti (10.1 ± 0.5 sa 11.8 ± 0.6 (+16.8) p < .001). Għalkemm id-differenzi medji kemm fit-tnaqqis tal-għadd tal-plejtlits kif ukoll fiż-żieda tal-MPV kienu sinifikament akbar bil-PRP, il-bidliet fit-tnaqqis tal-għadd tal-plejtlits fi ħdan il-WB kienu kważi sinifikanti (310 ± 73 sa 286 ± 96 (-7.7%); p = .06) u ż-żieda fl-MPV kienet sinifikanti (10.1 ± 0.5 sa 11.8 ± 0.6 (+16.8) p < .001).Għalkemm id-differenzi medji kemm fit-tnaqqis tal-għadd tal-plejtlits kif ukoll fiż-żieda tas-CVR kienu sinifikament akbar bil-PRP, il-bidliet fit-tnaqqis tal-għadd tal-plejtlits fi ħdan il-WB kienu kważi sinifikanti (310 ± 73 sa 286 ± 96 (-7.7%); p = 0.06).увеличение MPV было значительным (от 10,1 ± 0,5 до 11,8 ± 0,6 (+16,8) p < 0,001). Iż-żieda fl-MPV kienet sinifikanti (minn 10.1 ± 0.5 għal 11.8 ± 0.6 (+16.8) p < 0.001).尽管PRP 在血小板计数减少和MPV 增加方面的平均差异显着更大，但WB内血小板计数减少的变化几乎是显着的（310 ± 73 至286 ± 96 (-7.7%)；p = .06）和MPV的增加是显着的（10.1 ± 0.5 到11.8 ± 0.6 (+16.8) p < .001）。尽管 PRP 在 血小板 计数 和 和 增加 方面 的 平均 差异 显着 大 ， 但 但 冡 轆 冡敝减少 的 几乎 是 显着 的 （（（310 ± 73 至 286 ± 96 (-7.7%) ； p = .06）和MPV 的增昊的增昊＄增昊（1. ± 0.5 到11.8 ± 0.6 (+16.8) p < .001).It-tnaqqis fl-għadd tal-plejtlits fil-WB kien kważi sinifikanti (minn 310 ± 73 għal 286 ± 96 (-7.7%); p = 0.06), għalkemm il-PRP kellu differenzi medji sinifikament akbar fit-tnaqqis fl-għadd tal-plejtlits u ż-żieda fl-MPV, u ż-żieda fl-MPV kienet sinifikanti.(от 10,1 ± 0,5 до 11,8 ± 0,6 (+16,8) р < 0,001). (minn 10.1 ± 0.5 għal 11.8 ± 0.6 (+16.8) p < 0.001).
Konċentrazzjoni finali ta' 20% glukożju kienet meħtieġa biex tara bidla sinifikanti fl-MPV, iżda l-bidla fl-MPV kienet aktar evidenti fil-konċentrazzjoni finali ta' 25%. It-telf tal-plejtlits stabbilizza ruħu wara t-tnaqqis inizjali. Innutajna tnaqqis qawwi inizjali fis-CVR, madankollu, is-CVR ġie rrestawrat malajr fil-konċentrazzjoni finali tal-glukożju ta' 25%, li kienet sinifikament ogħla mil-livelli tas-CVR osservati fil-konċentrazzjonijiet finali tal-glukożju ta' 20% u 15% (Fig. 3 u fuq ix-xellug tat-Tabella 3; kaxxi dellija). jindikaw valuri-p ≤ alpha b'korrezzjoni ta' Bonferroni ta' 0.01). Kien hemm ukoll tnaqqis qawwi inizjali fin-numru ta' PLT, osservat fil-fażi inizjali ta' 0-15-il sekonda, u mbagħad baqa' stabbli (minn 15-il sekonda sa 30 minuta; fuq ix-xellug tat-tabella 4).
Iż-żieda ta’ diversi konċentrazzjonijiet ta’ glukożju mad-demm sħiħ irriżultat fi tnaqqis inizjali rapidu fl-MPV segwit minn irkupru dipendenti fuq il-konċentrazzjoni ta’ aktar minn 20%. Il-leġġenda turi l-konċentrazzjoni tal-glukożju wara d-dilwizzjoni. D15, D20 u D25 twettqu f’dilwizzjoni ta’ 1:1. D21 u D41 twettqu f’dilwizzjoni ta’ 1:5.
It-Tabella 4 turi l-bidla fl-għadd tal-plejtlits meta dilwit fi glukożju ipertoniku. Osservajna relazzjoni dipendenti mid-doża bejn it-tnaqqis immedjat fin-numri tal-PLT fid-dilwizzjoni 1:1 u fid-dilwizzjoni 1:5. Meta qabblu d-dilwizzjonijiet 1:1 bħala grupp wieħed mad-dilwizzjonijiet 1:5, il-grupp 1:1 kellu tnaqqis immedjat fl-għadd tal-plejtlits inqas mill-grupp 1:5 66±48,000 (23%) kontra 99±69,000 (37%)., p = 0.014) fil-grupp 1:5. Wara tnaqqis inizjali fl-ewwel punt tal-kejl, l-għadd tal-plejtlits bħala perċentwal tal-glukożju stabbilizza ruħu (Fig. 4).
Meta d-demm sħiħ jiżdied mal-glukożju fi proporzjon ta' 1:1, l-għadd tal-plejtlits jitnaqqas b'madwar 25%. Madankollu, meta d-demm sħiħ jiżdied fi proporzjon ta' 1:5, it-tnaqqis kien ħafna akbar – madwar 50%.
Il-glukożju ta' 41% żied l-MPV aktar malajr u b'mod aktar drammatiku minn 25% jew 21%. Ir-riżultati tal-MPV huma murija fil-Figura 3. Fid-dilwizzjonijiet l-oħra kollha, ma ġie osservat l-ebda tnaqqis inizjali immedjat fl-MPV wara ż-żieda ta' 50% glukożju. Meta ntuża glukożju ta' 25% (konċentrazzjoni tal-glukożju ta' 20.8% fid-dilwizzjoni finali), il-bidla fl-MPV kienet komparabbli mal-bidla fil-glukożju ta' 20% f'dilwizzjoni ta' 1:1 (Fig. 3). Għalkemm il-bidliet fl-MPV kienu inizjalment akbar fil-konċentrazzjoni mħallta ta' 41% milli f'25%, id-differenza fl-MPV bejn 41% u 25% wara 16-il minuta ma baqgħetx sinifikanti (Tabella 3, lemin). Huwa interessanti wkoll li l-glukożju ta' 25% żied l-MPV b'mod aktar effettiv minn 20.8%.
Dan l-istudju in vitro kkonferma parzjalment l-ipoteżi tagħna. Wera lisi parzjali potenzjali tal-plejtlits permezz ta' taħlita ta' destrosju, akkomodazzjoni rapida tal-plejtlits għal ipertoniċità estrema, u żieda sinifikanti fl-MPV b'reazzjoni għal konċentrazzjonijiet ta' > 25% ta' destrosju ipertoniku. Wera lisi parzjali potenzjali tal-plejtlits permezz ta' taħlita ta' destrosju, akkomodazzjoni rapida tal-plejtlits għal ipertoniċità estrema, u żieda sinifikanti fl-MPV b'reazzjoni għal konċentrazzjonijiet ta' > 25% ta' destrosju ipertoniku. Он показал потенциальный частичный лизис тромбоцитов примесью декстрозы, быстрцитов примесью декстрозы, быструю одакцитов тромбоцитов до экстремального гипертонуса и значительное повышение MPV в ответ на гипючерто концентрацию декстрозы > 25%. Wera lisi parzjali potenzjali tal-plejtlits bid-destrosju, akkomodazzjoni rapida tal-plejtlits għal ipertoniċità estrema, u żieda sinifikanti fl-MPV b'reazzjoni għal livelli ipertoniċi ta' destrosju >25%.它显示出通过葡萄糖混合物潜在的部分血小板溶解，血小板快速适应极端高渗，以及响应> 25% 浓度的高渗葡萄糖时MPV 显着上升。它 显示 出 通过 葡萄糖 潜在 的 部分 血小板 溶解 血小板 快速 适应 在 的 部分 血小板 溶解 血小板 快速 适应 在 适庯 枫 枫经响应> 25% 浓度 高渗 葡萄糖 时 时 mpv 显着。。。。。 Он показывает потенциальный частичный лизис тромбоцитов смесями с глюкозой, быстрауюп тромбоцитов к экстремальному гипертонусу и значительное увеличение MPV в ответ на контрацени гипертонической глюкозы > 25%. Juri lisi parzjali potenzjali tal-plejtlits minn taħlitiet tal-glukożju, adattament rapidu tal-plejtlits għal ipertoniċità estrema, u żieda sinifikanti fl-MPV b'reazzjoni għal glukożju ipertoniku >25%.Iż-żieda inizjali kienet massima b'espożizzjoni ta' 41.6% għall-glukożju, iżda ż-żieda fl-MPV resqet lejn l-espożizzjoni ta' 25% għall-glukożju madwar 20 minuta wara l-espożizzjoni.
Il-konċentrazzjoni tal-plejtlits hija affettwata mill-glukożju. Innotajna li l-ammont ta' PLT naqas fid-dilwizzjonijiet kollha tal-glukożju. Tnaqqis qawwi fin-numru ta' plejtlits fid-dilwizzjonijiet tal-H2O (0%) tas-serje PRP jista' jkun assoċjat ma' lisi osmotika. Alternattivament, dan jista' jkun artefatt ikkawżat minn raggruppament ta' plejtlits, iżda dan huwa f'kuntrast man-nuqqas ta' bidla fl-MPV f'din id-dilwizzjoni. Din is-sejba tfisser li xi plejtlits huma sensittivi ħafna għall-ipoosmolarità.
Fid-dilwizzjonijiet kollha ta' glukożju 1:1, l-ammont ta' PLT naqas b'20-30%, anke b'D5W (ipotoniku f'252 mOsm), li jista' jindika effett mhux osmotiku speċifiku tal-glukożju, peress li kemm il-PLT kif ukoll l-MPV baqgħu l-istess b'żieda ta' tliet darbiet fil-konċentrazzjoni. minn D5W għal D25W. Fil-fatt, il-konċentrazzjonijiet ta' PLT kellhom it-tendenza li jiżdiedu xi ftit biż-żieda fl-osmolarità.
It-tnaqqis fil-PLT bejn dilwizzjonijiet 1:1 u 1:5 ifisser li l-effett tad-dissoluzzjoni jiddependi fuq il-konċentrazzjoni inizjali u finali tal-glukożju. Li kieku kien jiddependi biss fuq il-konċentrazzjoni inizjali, allura wieħed jistenna li jara differenza fit-tnaqqis tal-PLT bejn konċentrazzjonijiet 1:1. Imma aħna ma nistennewx. Jekk l-effett tal-liżi jiddependi biss fuq il-konċentrazzjoni finali tal-glukożju, allura ma nistennewx ħafna differenza bejn dilwizzjoni ta' 20% 1:1 u dilwizzjoni ta' 20.8% 1:5. U madankollu għamilnieha.
Jekk iseħħ telf ta' plejtlits minħabba l-liżi tal-plejtlits, jiġi ffurmat liżat parzjali, u wara dan iċ-ċitokini u l-fatturi tat-tkabbir jiġu rilaxxati fl-ambjent extraċellulari. Diversi studji wrew li l-liżat tal-plejtlits huwa kważi effettiv daqs il-PRP bħala soluzzjoni ta' proliferazzjoni [11]. Il-PRP innifsu ntwera li huwa soluzzjoni effettiva għat-trattament tal-proliferazzjoni [12-14].
Il-plejtlits inattivi jiċċirkolaw fil-forma ta’ diska msaħħa b’diversi strutturi interni. Waqt l-attivazzjoni, jieħdu forma aktar sferika jew ta’ ameba, li tirriżulta f’żieda fil-volum. Iż-żieda fil-volum teħtieġ żieda fl-erja tal-wiċċ, li hija r-riżultat tal-estrużjoni tas-sistema tat-tubuli miftuħa (OCS) u ż-żieda ta’ granuli eżoċitiċi mal-membrana. Għad irid jiġi determinat jekk iż-żieda fl-MPV indotta mill-glukożju ipertoniku tinvolvix wieħed jew it-tnejn minn dawn il-mekkaniżmi, iżda jekk dan ikun tal-aħħar, allura żieda fl-MPV tindika degranulazzjoni.
Dan l-istudju wera li l-espożizzjoni għal konċentrazzjonijiet għoljin ta’ glukożju fuq PRP jew plejtlits fid-demm sħiħ irriżulta f’żieda fl-MPV fi żmien 15-il minuta b’konċentrazzjoni ta’ glukożju ta’ 25% u 41.6%, rispettivament.
Iż-żieda fl-MPV tal-plejtlits tista' tkun dovuta għad-dilatazzjoni tat-tagħqid tal-mikrotubuli tal-madwar b'reazzjoni għall-influss tal-kalċju. Liu et al. Il-glukożju ntwera li jimmedja l-influss tal-kalċju permezz tal-kanal tal-plejtlits TRPC6 [6]. L-ipoteżi tagħna hija li l-glukożju jikkaġuna r-rilassament tat-tagħqid tal-mikrotubuli, li jwassal għal żieda fl-MPV u s-sensibilizzazzjoni u/jew l-attivazzjoni tal-plejtlits. Madankollu, jekk niġġudikaw mir-riżultati tagħna, din hija biss parti mill-istorja. Fit-testijiet tagħna, l-ebda konċentrazzjoni taħt D25W ma rriżultat f'żieda fl-MPV. Minħabba li ma ttestjajniex l-espożizzjoni għal konċentrazzjonijiet ta' glukożju bejn 12.5% ​​​​u 25%, ir-riżultati tal-fażi 1 tagħna jissuġġerixxu li jista' jkun hemm limitu f'din il-medda ta' konċentrazzjonijiet ta' glukożju li jwassal għal żieda fl-MPV. Aktar ittestjar fl-istadji 3 u 4 wera li 20-25% glukożju jidher li huwa l-limitu għal dan, iżda għadu mhux ċar għaliex.
Osservajna wkoll tnaqqis ta' ~9% ​​fl-MPV wara ċ-ċentrifugazzjoni. Mhuwiex ċar jekk dan it-tnaqqis fl-MPV huwiex dovut għal plejtlits akbar u aktar densi maqbuda fis-saff RBC taċ-ċentrifuga. Din l-osservazzjoni tista' tkun importanti għall-kliniċisti peress li tista' timplika li l-plejtlits PRP huma sottosett iżgħar u inqas dens tal-plejtlits WB.
Fi studju preċedenti, wrejna li l-preparazzjoni tal-PRP b'metodi manwali hija rħisa [8]. Jekk il-glukożju jissensibilizza l-plejtlits tat-tessuti jew il-PRP, u jagħmilhom aktar suxxettibbli għall-attivazzjoni, jew jekk il-PRP jiġi prodott bi proprjetajiet parzjali ta' lisat, dan jista' jtejjeb ir-riġenerazzjoni u jnaqqas il-ħtieġa għat-terapija. Għalhekk, il-kombinazzjoni ta' PRP u glukożju kkonċentrat ħafna tista' tkun aktar kosteffettiva minn PRP jew glukożju waħedhom.
L-istudju tagħna għandu diversi nuqqasijiet. L-ewwelnett, nużaw PRP miksub minn diversi metodi differenti. Dan jista' jwassal għal riżultati konfliġġenti. It-tieni, ma stajniex inwettqu analiżi bijokimika ta' xi wieħed mill-kampjuni tagħna biex niddeterminaw b'mod aktar preċiż jekk seħħitx attivazzjoni tal-plejtlits. Nixtiequ nkejlu l-P-selectin, il-fattur 4 tal-plejtlits, l-aggregati tal-plejtlits monoċitiċi, jew markaturi oħra ta' attivazzjoni tal-plejtlits biex nifhmu aħjar il-grad jew il-preżenza ta' degranulazzjoni tal-granuli alfa, iżda dan imur lil hinn mill-ambitu ta' dan l-istudju. It-tielet, ma stajniex nikkonfermaw permezz ta' mikroskopija elettronika jew metodi oħra li ż-żieda fl-MPV fil-plejtlits esposti għall-glukożju kienet dovuta għall-effett fuq it-tħabbil tal-mikrotubuli.
Taħlitiet ta' WB jew PRP ma' 25% glukożju żiedu l-MPV, u dan jindika l-bidu tal-attivazzjoni tal-plejtlits, għalkemm dan l-istudju ma weriex progressjoni tal-aggregazzjoni jew tad-degranulazzjoni. It-taħlita ipertonika tal-glukożju rriżultat f'telf ta' plejtlits, li possibbilment jirrappreżenta effett litiku. L-attivazzjoni parzjali jew il-liżi tal-plejtlits tista' tikkawża riġenerazzjoni tat-tessuti wara l-injezzjoni tal-plejtlits. Mhuwiex ċar għal liema konsegwenzi kliniċi jistgħu jwasslu dawn il-bidliet. Studji ulterjuri wrew kejl aktar preċiż tal-attivazzjoni jew tal-liżi u evalwaw l-effetti kliniċi differenti ta' taħlitiet ipertoniċi tal-glukożju ma' WB jew PRP.
It-terapija proliferattiva tal-glukożju hija terapija riġenerattiva sempliċi u rħisa li qed tespandi b'rata mgħaġġla u qed tappoġġja r-riċerka klinika. Dan l-istudju jissuġġerixxi mekkaniżmu fiżjoloġiku li, jekk jiġi kkonfermat, jista' jgħinna nifhmu parti mill-mekkaniżmu riġenerattiv tat-terapija proliferattiva.
Informatika Bijomedika u tas-Saħħa fl-Università ta' Missouri, Kansas City School of Medicine, Kansas City, l-Istati Uniti
Suġġetti Bniedem: Il-parteċipanti kollha f'dan l-istudju taw jew ma tawx il-kunsens tagħhom. Is-Soċjetà Internazzjonali għall-Mediċina Ċellulari ħarġet l-approvazzjoni ICMS-2017-003. Il-protokoll li ġej ġie approvat għal użu ulterjuri mill-Bord ta' Reviżjoni Istituzzjonali tas-Soċjetà Internazzjonali għall-Mediċina Ċellulari: Titlu: Kalkolu tar-rendiment tal-mediċina fil-plażma rikka fil-plejtlits ibbażat fuq l-għadd ta' plejtlits CBC fil-linja bażi. Suġġetti tal-Annimali: L-awturi kollha kkonfermaw li l-ebda annimal jew tessut ma kien involut f'dan l-istudju. Kunflitti ta' Interess: Skont il-Formola Uniformi ta' Żvelar tal-ICMJE, l-awturi kollha jiddikjaraw dan li ġej: Informazzjoni dwar il-ħlas/servizz: L-awturi kollha jiddikjaraw li ma rċevewx appoġġ finanzjarju minn xi organizzazzjoni għax-xogħol sottomess. Relazzjonijiet Finanzjarji: L-awturi kollha jiddikjaraw li bħalissa jew fl-aħħar tliet snin m'għandhomx relazzjonijiet finanzjarji ma' xi organizzazzjoni li tista' tkun interessata fix-xogħol sottomess. Relazzjonijiet Oħra: L-awturi kollha jiddikjaraw li m'hemm l-ebda relazzjonijiet jew attivitajiet oħra li jistgħu jaffettwaw ix-xogħol sottomess.
Harrison TE, Bowler J, Reeves K et al. (17 ta' Mejju, 2022) L-effett tal-glukożju fuq l-għadd u l-volum tal-plejtlits: implikazzjonijiet għall-mediċina riġenerattiva. Cure 14(5): e25081. doi:10.7759/cureus.25081
© Copyright 2022 Harrison et al. Dan huwa artiklu b'aċċess miftuħ imqassam skont it-termini tal-Liċenzja ta' Attribuzzjoni Creative Commons CC-BY 4.0. L-użu, id-distribuzzjoni u r-riproduzzjoni illimitati fi kwalunkwe mezz huma permessi, sakemm l-awtur u s-sors oriġinali jingħataw kreditu.