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多血小板血漿/PRP、組織再生、血小板活性化、ブドウ糖増殖療法、血小板、増殖療法
この記事を引用する場合は、Harrison TE、Bowler J、Reeves K、et al. (2022年5月17日) 「血小板数と血小板容積に対するブドウ糖の影響:再生医療への示唆」Cure 14(5): e25081. doi:10.7759/cureus.25081
再生医療において、多血小板血漿(PRP)と高張ブドウ糖液は一般的に注射剤として使用され、併用されることもあります。高張ブドウ糖が血小板の溶解および活性化に及ぼす影響はこれまで報告されていません。本研究では、高濃度ブドウ糖がPRPおよび全血(WB)中の血小板数、赤血球数、および細胞容積に及ぼす影響を検討しました。PRPまたは全血と混合した全てのブドウ糖液において、血小板数が急速かつ部分的に減少し、部分溶解と一致しました。 最初の 1 分後、血小板数は安定したままであり、残留血小板が極度の高張性 (> 2000 mOsm) に急速に適応したことを示しています。 最初の 1 分後、血小板数は安定したままであり、残留血小板が極度の高張性 (> 2000 mOsm) に急速に適応したことを示しています。 После первой минуты количество тромбоцитов оставалось стабильным, что указывает на быструю аккомодацию остаточных тромбоцитов до экстремального (>2000 мОсм) гипертонуса. 最初の 1 分後、血小板数は安定したままであり、残留血小板が極度の高張性 (> 2000 mOsm) に急速に適応したことを示しています。最初の1分後、血小板数値は安定したままであり、残存血小板が急速に適切な高濃度状態にあることを示した。2000 mOsm)高渗状態。 После первой минуты количество тромбоцитов оставалось стабильным, что указывает на быструю адаптацию остаточных тромбоцитов к экстремальному (>2000 мОсм) гиперосмолярному состоянию. 最初の 1 分後、血小板数は安定したままであり、残留血小板が極度の (>2000 mOsm) 高浸透圧状態に急速に適応したことを示しています。グルコース濃度が25%以上になると、平均血小板容積(MPV)が有意に増加し、血小板活性化の初期段階にあることが示唆されます。血小板溶解または活性化が起こるかどうか、また高張ブドウ糖注射単独またはPRPとの併用がさらなる臨床的利益をもたらすかどうかについては、さらなる研究が必要です。
1950年代、アメリカの外科医ジョージ・ハケットは、腱と靭帯に増殖溶液を注入することで、多くの患者の関節痛や腰痛を永続的に緩和できることを発見しました。ウサギを用いた実験では、彼が増殖療法と名付けたこの治療法が腱の肥大と強化をもたらすことが示されました。組織学的研究により、この過程で新たなコラーゲンが生成されることが確認されています[1]。
最初の数十年間は、様々な分配法が試みられました。1990年代までに、ほとんどの医師は高濃度ブドウ糖が最も安全かつ効果的な方法であると考えるようになりました。しかし、その作用機序は依然として不明です。
20世紀にはハケットの研究以降、臨床研究はほとんど行われませんでした。しかし、2000年代には再び関心が高まり、腰痛[2]、変形性膝関節症[3]、上腕骨外側上顆炎[4]の治療を目的とした増殖療法の臨床試験がいくつか成功しました。
組織の再生には幹細胞の関与が不可欠です。したがって、高濃度のグルコースは、何らかの形で幹細胞の移動、複製、そして分化を誘導すると考えられます。私たちは、血小板がメッセンジャーとして機能し、高濃度のグルコースが血小板からサイトカインや成長因子を放出することで、再生プロセス、特に高濃度グルコース領域への幹細胞の移動を促進するのではないかと仮説を立てています。
血小板の活性化は、常に細胞内カルシウム濃度の増加に先行する[5]。Liuらは2008年に、高血糖が細胞膜上の一過性受容体電位カノニカル6型(TRPC6)チャネルの活性を上昇させ、血小板へのカルシウムイオンの流入につながることを明らかにした[6]。別の研究では、微小管辺縁帯がカルシウムイオンに曝露されると、辺縁帯の弛緩、拡張、変形が起こり、その結果、円板状から球状へと形状変化が起こり、平均血小板容積(MPV)が上昇することが示された[7]。
この研究における私たちの仮説は、血小板を高濃度のブドウ糖にさらすと、微小管辺縁帯と細胞内環境に影響を及ぼし、MPV の増加につながるというものです。
参加者全員は、研究内容の説明後、サンプルの受け取り前にインフォームド・コンセント(同意書)に署名しました。本研究では、赤血球数と平均赤血球容積(MCV)を比較対象とするため、ヘマトクリット値が2%を超えるPRPサンプルのみを使用しました。
本研究は4つのフェーズで実施され、第1フェーズはPRP、残りのフェーズは全血であった(表1)。既報[8]の通り、すべての相対遠心力(RCF、g-force)は、遠心シリンジ内の血液柱の中央値(Rmid、単位cm)から算出した。血小板感作の指標としてMPV、潜在的な血小板溶解の指標として血小板数を用いることとした。いずれも標準的な血液分析装置で容易に測定可能である。
第一段階では、47名のボランティアが血液サンプルを提供しました。エチレンジアミン四酢酸(EDTA)のチューブ1本とPRP全血サンプル1本(クエン酸ナトリウム(NaCl、3%)で抗凝固処理)です(表1)。ロッカーを直ちにチューブに入れました。EDTAサンプルでは全血球算定(CBC)を3回実施し、NaClサンプルはCBC分析のために3回分析した後、PRPを前述のさまざまな方法で調製しました[8]。すべてのPRPサンプルは、900~1000 gで遠心分離して調製しました。各PRPサンプルをボルテックスミキサーで5~10秒間混合し、0.5 mlずつ5本のチューブに分けました。
血小板曝露による血糖値上昇への影響を評価するため、0%、5%、12.5%、25%、50%のグルコース水溶液を等量(0.5 ml)血小板サンプルと混合し、0%、2.5%、6.25%、12.5%、25%の濃度のグルコース混合液を作成し、試験管振盪機で15分間撹拌した。各混合液のTACは15分後に3回繰り返して分析した。各試験管の血小板数(PLT)、赤血球数、MCV、MPVの平均値を算出し、すべてのPRPサンプルの平均血小板数、赤血球数、MCV、MPVを算出した。
第一段階のデータ収集完了後、D50W添加後にPRP血小板中の血小板容積が有意に増加したことを確認しました。PRP血小板は必ずしも血液中のすべての血小板を代表するものではなく、またPRP培地はWB培地とは異なります。そのため、全血にD50Wを添加した場合の効果について第二段階の試験を実施することにしました。
第2ラウンドでは、解析セクションに記載されている通り、第1ラウンドの結果に基づき、サンプル数を30としました。このシリーズでは、20名のボランティアが血液サンプルを提供しました(表1)。全血(1.8 mL)を3 mLシリンジに採取し、0.2 mLの40% NaClで抗凝固処理しました。全血シリンジをボルテックスミキサーで5秒間撹拌し、CBCを3回繰り返して分析しました。分析後、抗凝固処理した血液を 5 ml シリンジ内の 50% グルコース 2 ml に加え (最終グルコース濃度は約 25% (D25))、振盪チューブに 30 分間置きました。30 分後、WB シリンジ内の D25/CBC を 3 回繰り返して分析しました。シリンジあたりの血小板数、赤血球数、MCV、および MPV を平均し、グルコース添加前後の各サンプルの平均 PLT、赤血球数、MCV、および MPV を計算しました。
増殖性ブドウ糖療法では、低侵襲性注射のため、全血中の血小板が高張ブドウ糖にさらされることが多く、注射直前にPRPを高張ブドウ糖と混合することは一般的ではないため、セクション1でWBと組み合わせて高張ブドウ糖を検討することにしました。ステップ3と4。各段階で、20人のボランティアが血液抗凝固剤として7〜8 mlのACD-A(クエン酸三ナトリウム(22.0 g / l)、クエン酸(8.0 g / l)およびブドウ糖(24.5 g / l)を含む酸、デキストロースクエン酸溶液)を寄付しました(表1)。 MPVの増加に関連する閾値パーセンテージを決定するために、12.5%を超えるブドウ糖の混合物のみを使用しました。第3段階では、1 mlの血液を試験管に入れます。次に、30%グルコース、40%グルコース、または50%グルコースを1mlずつチューブに加え、ボルテックスミキサーで10秒間血液を混合し、最終グルコース濃度をそれぞれ15%、20%、25%にします。グルコースを含む血液サンプルは、混合直後に全血球計算(CBC)を行い、その後2分ごとに30分間繰り返しました。
最初の混合中に、1:1 の高張ブドウ糖と WB または PRP を添加すると、血小板は数秒間 25% を超える濃度に曝露されます。第 4 段階では、初期ピーク濃度を最小限に抑えて高張ブドウ糖の効果を評価し、ブドウ糖の効果の上限をテストするために、少量の血液を D25W または D50W に加えました。チューブに D25W または D50W を 1 ml 入れ、サンプルを 10 秒間ボルテックスしながら WB を 0.2 ml 加えます。これらの場合、血液は、フェーズ 3 のように最終濃度の 50% を超える濃度ではなく、最終濃度の約 20% を超える濃度のブドウ糖に曝露され、最終的なブドウ糖濃度は 20.8% と 41.6% になりました。混合サンプルは、手順 3 と同じ時間間隔で分析されました。
各ブドウ糖希釈系列の最初のステップでは、パイロット スタディに適切なサンプル サイズである 30 個のサンプルが採取されました [9]。各フェーズ (第 1 フェーズを含む) の最後に、1 つの母集団における連続結果変数の平均を推定するために必要なサンプル サイズを決定するときに使用する式を使用して、サンプル サイズの妥当性を評価します。式: n = Z2 x SD2 /E2。この式で、Z は Z スコア、SD は標準偏差、E は望ましい誤差です [10]。アルファは 0.05 で、これは Z 値 1.96 に相当し、誤差は 5 (パーセント) と予想されます。したがって、n = (1.962 x SD2)/52 を解きます。結果は、各ステージに必要なサンプル サイズが実際に収集された数よりも小さいことを示しました。
複数のグルコース濃度を使用した期間 1、3、4 では、異なるグルコース濃度の影響を、時間 0 とその後の各時間 (フェーズ 1 は 15 分、期間 3 は 15 分) の間の分数変化を比較することによって分析しました。 データは、Shapiro-Wilk 正規性検定によって決定された正規分布に従わなかったため、各期間の変化率は Mann-Whitney U 検定を使用して比較しました。 1 番目、3 番目、4 番目のステップ (合計 5 つ) で複数のグループ (5 つ) の 1 対 1 分析が実行されたため、Bonferroni 補正を実行して、目的のアルファ値を ≤0.01 に調整しましたが、≤0.05 には調整しませんでした。
高張デキストロース濃度すべてにおいて血小板数が減少し、デキストロース濃度が 12.5% を超えると PRP 血小板の MPV が増加しました。PRP 血小板数は、方法によって異なりますが、ベースラインの全血と比較して濃度が 1 ~ 5 倍に増加しました (図示せず)。 すべての濃度の高張デキストロースで血小板数が減少し、デキストロース濃度が 12.5% を超えると PRP 血小板の MPV が増加しました。PRP 血小板数は、方法によって異なりますが、ベースラインの全血と比較して 1 ~ 5 倍の濃度に増加しました (図示せず)。 Уменьзение количества тромбоцитов при всех концентрациях гипертонической декстрозы и увеличение MPV в тромбоцитах PRP при концентрации декстрозы > 12,5%: количество тромбоцитов PRP увеличилось в 1-5 раз по сравнению с исходной цельной кровью、в зависимости от метода (не показано)。 すべての高張デキストロース濃度で血小板数が減少し、デキストロース濃度が 12.5% を超えると PRP 血小板の MPV が増加しました。PRP 血小板数は、方法に応じてベースライン全血と比較して 1 ~ 5 倍増加しました (図示せず)。 ).12.5%を超えるグルコース濃度では、すべての濃度の高グルコースが血小板の数値を低下させ、PRP血小板中のMPVがベースライン全血と比較して増加し、PRP血小板の濃度が1倍から5倍に上昇するため、この方法が行われた(未記載)。 ブドウ糖濃度が 12.5% を超えると、ブドウ糖の高濃度によって血球数が減少し、PRP 血の MPV が増加します。基線全血と比較すると、PRP 血球数は濃度の 1 ~ 5 倍に増加します (記載なし)。 При концентрациях глюкозы >12,5% все концентрации гипертонической глюкозы снижали количество тромбоцитов, MPV の PRP: количество тромбоцитов PRP увеличивалось от 1-до 5-кратных концентраций по最高ですконцентрациями цельной крови, в зависимости от метода (не описано ). グルコース濃度が 12.5% を超えると、すべての高血圧性グルコース濃度で血小板数が減少し、PRP 血小板中の MPV が増加しました。PRP 血小板数は、方法に応じて、ベースラインの全血濃度と比較して 1 ~ 5 倍増加しました (記載のとおり)。図 1 は、ベースライン PRP および体積補正された 1:1 希釈率 (体積補正による 1- k1) と比較して、水で希釈した後に血小板数が約 75% 減少し、さまざまな濃度のグルコースで 15 分間希釈した後に 20 ~ 30% 減少したことを示しています。k -1 繁殖)。1 繁殖)。
各希釈倍数内の細胞数は、希釈前の元の数の割合として表されます。
MPVはPRP製造中に最小限に減少し、水またはグルコース(25%PRPグルコース混合物を含む)で12.5%までの希釈濃度でそれ以上の変化はなく、50%グルコース溶液で希釈した後に20%以上増加しました(図2)。対照的に、赤血球はH2O以外のどの希釈度でも体積の有意な変化は示しませんでした。
各希釈度における細胞の平均体積は、希釈前の元の体積に対するパーセンテージとして表されます。
50%ブドウ糖(25%ブドウ糖で製剤化)に曝露したBCでも、同様の血小板数の減少とCVRの上昇が観察されましたが、その程度は顕著ではありませんでした。表2は、50%ブドウ糖で希釈した全血中の細胞数と細胞容積と、50%ブドウ糖で希釈した第1相PRPデータを比較したものです。赤血球数と赤血球MCVの変化は明らかではなく、注目しませんでした。
SD = 標準偏差、MD = グループ間の平均差、SE = 平均差の標準偏差、RBC = 赤血球、PLT = 血小板、PRP = 多血小板血漿、WB = 全血
全血にD50Wを添加した場合、希釈率調整後の血小板減少率は7.7%(310±73 vs. 286±96)であったのに対し、D50WのPRP希釈率では17.8%(664±348 vs. 544±277)であった。MPV全血は16.8%(10.1 ± 0.5から11.8 ± 0.6)増加し、MPV PRPは26%(9.2 ± 0.8 vs. 11.6 ± 0.7)増加した。 血小板数減少とMPV増加の平均差はどちらもPRPで有意に大きかったが、WB内での血小板数減少の変化はほぼ有意(310 ± 73から286 ± 96(-7.7%)、p = .06)で、MPVの増加は有意(10.1 ± 0.5から11.8 ± 0.6(+16.8)p < .001)であった。 血小板数減少とMPV増加の平均差はどちらもPRPで有意に大きかったが、WB内での血小板数減少の変化はほぼ有意(310 ± 73から286 ± 96(-7.7%)、p = .06)で、MPVの増加は有意(10.1 ± 0.5から11.8 ± 0.6(+16.8)p < .001)であった。血小板数減少とCVR増加の平均差はPRPで有意に大きくなったが、WB内での血小板数減少の変化はほぼ有意であった(310 ± 73~286 ± 96(-7.7%)、p = 0.06)。MPV の値 (от 10,1 ± 0,5 до 11,8 ± 0,6 (+16,8) p < 0,001)。 MPVの増加は有意であった(10.1 ± 0.5から11.8 ± 0.6(+16.8)p < 0.001)。PRP の血小板数減少と MPV 増加の面での平均差はより大きいが、WB 内血小板数の減少の変化は顕著である(310 ± 73 ~ 286 ± 96 (-7.7%); p = 0.06)と MPV増加は顕著でした(10.1 ± 0.5 ~ 11.8 ± 0.6 (+16.8) p < .001)。血小板数と増加の面での PRP の平均差は大きくなっていますが、内血小板数の減少は顕著です(((310 ± 73 ~ 286 ± 96 (-7.7%) ; p = .06)および MPV の増加は顕著です(10.1 ± 0.5 ~ 11.8 ± 0.6 (+16.8) p < .001)。WB 内での血小板数減少の変化はほぼ有意 (310 ± 73 から 286 ± 96 (-7.7%)、p = 0.06) でしたが、PRP では血小板数減少と MPV 増加の平均差が有意に大きく、MPV の増加は有意でした。(от 10,1 ± 0,5 до 11,8 ± 0,6 (+16,8) р < 0,001)。 (10.1±0.5から11.8±0.6(+16.8)p<0.001)。
MPVに有意な変化が見られるためには最終グルコース濃度20%が必要であったが、MPVの変化は最終濃度25%でより顕著であった。血小板損失は最初の減少の後、安定しました。CVRは最初に急激に減少しましたが、最終グルコース濃度25%でCVRは急速に回復し、最終グルコース濃度20%および15%で観察されたCVRレベルよりも有意に高くなりました(図3および表3の左側、網掛けボックス)。ボンフェローニ補正0.01でp値≤αを示します。また、PLT数にも最初の急激な減少があり、0〜15秒の初期段階で観察され、その後安定しました(15秒から30分まで、表4の左側)。
全血に様々な濃度のグルコースを添加すると、MPVは当初急速に減少し、その後濃度依存的に20%以上回復しました。凡例は希釈後のグルコース濃度を示しています。D15、D20、D25は1:1希釈で実施しました。D21とD41は1:5希釈で実施しました。
表4は、高張ブドウ糖で希釈した際の血小板数の変化を示しています。1:1希釈と1:5希釈における血小板数の即時減少には用量依存的な関係が認められました。1:1希釈を1:5希釈と単独群で比較すると、1:1群の血小板数の即時減少は1:5群の99±69,000(37%)に対して66±48,000(23%)と、1:5群よりも少なかったことが分かりました。(p = 0.014)最初の測定時点では血糖値に対する血小板数は減少しましたが、その後安定しました(図4)。
全血をブドウ糖に1:1の比率で加えると、血小板数は約25%減少します。しかし、全血を1:5の比率で加えると、減少率はさらに大きくなり、約50%減少しました。
41%グルコースでは、25%や21%の場合よりも速く、劇的にMPVが増加しました。MPVの結果を図3に示します。他のすべての希釈度では、50%グルコースの添加後、MPVの即時的な初期減少は観察されませんでした。25%グルコースを使用した場合(最終希釈度でのグルコース濃度20.8%)、MPVの変化は1:1希釈での20%グルコースの変化と同等でした(図3)。最初は41%混合濃度の方が25%よりもMPVの変化が大きくなりましたが、16分後には41%と25%のMPVの差は有意ではなくなりました(表3、右)。25%グルコースが20.8%よりもMPVをより効果的に増加させたことも興味深いことです。
この試験管内研究により、私たちの仮説は部分的に確認されました。 これは、ブドウ糖混合物による潜在的な部分的な血小板溶解、極度の高張性に対する血小板の急速な適応、および 25% を超える濃度の高張ブドウ糖に対する反応としての MPV の大幅な上昇を示しました。 これは、ブドウ糖混合物による潜在的な部分的な血小板溶解、極度の高張性に対する血小板の急速な適応、および 25% を超える濃度の高張ブドウ糖に対する反応としての MPV の大幅な上昇を示しました。 Он показал потенциальный частичный лизис тромбоцитов примесью декстрозы, быструю аккомодацию тромбоцитов MPV と гипертоническую концентрацию декстрозы > 25%。 デキストロースによる部分的な血小板溶解の可能性、極度の高張性に対する血小板の急速な適応、および 25% を超える高張デキストロース レベルに対する MPV の大幅な増加が示されました。これは、潜在的な血小板の一部がグル糖混合物によって溶解され、血小板が急速に上昇し、25%を超える高グルコース濃度でMPVが上昇することを示している。これは、潜在的な血小板の一部をブドウ糖によって溶解することによって、血小板が急速に適性末端高濃度に達すること、および>25%の高濃度のブドウ糖が作用するときのmpvが滞留することを示している。 Он показывает потенциальный частичный лизис тромбоцитов смесями с глюкозой, быструю адаптацию тромбоцитов к экстремальному гипертонусу и значительное увеличение MPV в ответ на концентрацию гипертонической глюкозы > 25%。 これは、ブドウ糖混合物による潜在的な部分的な血小板溶解、極度の高張性に対する血小板の急速な適応、および 25% を超える高張ブドウ糖に対する MPV の大幅な増加を示しています。初期の増加はグルコース曝露量の 41.6% で最大となりましたが、曝露後約 20 分で MPV の増加はグルコース曝露量の 25% に近づきました。
血小板濃度はグルコースの影響を受けます。グルコース希釈度全てにおいて、PLT量が減少していることを確認しました。PRPシリーズのH2O(0%)希釈度における血小板数の急激な減少は、浸透圧溶解に関連している可能性があります。あるいは、血小板凝集によるアーティファクトである可能性もありますが、これはこの希釈度でMPVに変化が見られなかったこととは対照的です。この結果は、一部の血小板が低浸透圧に非常に敏感であることを意味します。
グルコースの1:1希釈液全てにおいて、血小板(PLT)量はD5W(低張性252 mOsm)でも20~30%減少しました。これは、濃度がD5WからD25Wまで3倍に増加しても血小板(PLT)とMPVは共に変化しなかったことから、グルコース特有の非浸透圧効果を示している可能性があります。実際、血小板濃度は浸透圧の上昇に伴ってわずかに増加する傾向がありました。
1:1希釈と1:5希釈の間の血小板減少は、溶解効果が初期グルコース濃度と最終グルコース濃度に依存していることを意味します。もし溶解効果が初期濃度のみに依存するのであれば、1:1希釈間で血小板減少量に差が見られるはずです。しかし、実際にはそうではありません。溶解効果が最終グルコース濃度のみに依存するのであれば、20% 1:1希釈と20.8% 1:5希釈の間に大きな差はないと予想されます。しかし、それでも私たちはそれを実現しました。
血小板溶解により血小板が減少すると、部分的な溶解液が形成され、その後、サイトカインと成長因子が細胞外に放出されます。いくつかの研究では、血小板溶解液は増殖治療液としてPRPとほぼ同等の効果があることが示されています[11]。PRP自体も増殖治療に有効な溶液であることが示されている[12-14]。
不活性血小板は、複数の内部構造で強化された円盤状に循環している。活性化すると、より球状またはアメーバ状となり、体積が増加する。体積増加には表面積の増加が必要であり、これは開放尿細管系(OCS)の押し出しと膜への細胞外顆粒の付加によって生じる。高張血糖によって誘発されるMPVの上昇がこれらのメカニズムのいずれか、あるいは両方に関与しているかどうかは未だ明らかにされていないが、後者の場合、MPVの上昇は脱顆粒を示唆すると考えられる。
この研究では、PRP または全血血小板を高濃度のブドウ糖にさらすと、ブドウ糖濃度がそれぞれ 25% と 41.6% のときに 15 分以内に MPV が上昇することが示されました。
血小板MPVの増加は、カルシウム流入に対する反応として周囲の微小管もつれの拡張が原因である可能性がある。Liu et al. グルコースは、血小板TRPC6チャネルを介してカルシウム流入を媒介することが示されている[6]。私たちの仮説は、グルコースが微小管もつれの弛緩を誘発し、MPVの増加と血小板感作および/または活性化につながるというものである。しかし、私たちの結果から判断すると、これは話の一部に過ぎない。私たちのテストでは、D25W未満の濃度ではMPVの増加は見られなかった。12.5%から25%のグルコース濃度への曝露をテストしていないことを考えると、フェーズ1の結果は、この範囲のグルコース濃度にMPVの増加につながる閾値がある可能性があることを示唆している。ステージ3と4でのさらなるテストでは、20〜25%のグルコースがこの閾値であると思われるが、その理由は不明のままである。
また、遠心分離後、MPVが約9%減少したことも観察されました。このMPVの減少が、遠心分離機の赤血球層に捕捉された、より大きく密度の高い血小板によるものかどうかは明らかではありません。この観察結果は、PRP血小板が全血血小板よりも小さく密度の低いサブセットであることを示唆する可能性があるため、臨床医にとって重要となる可能性があります。
以前の研究で、手技によるPRP調製は安価であることを示した[8]。グルコースが組織血小板またはPRPを感作し、活性化を受けやすくする、あるいはPRPが部分溶解性を持つように製造されるならば、再生を促進し、治療の必要性を減らす可能性がある。したがって、PRPと高濃度グルコースの併用は、PRPまたはグルコース単独よりも費用対効果が高い可能性がある。
本研究にはいくつかの欠点があります。第一に、複数の異なる方法で得られたPRPを使用しています。このため、矛盾する結果が生じる可能性があります。第二に、いずれのサンプルについても、血小板活性化の有無をより正確に判定するための生化学分析を実施できませんでした。α顆粒脱顆粒の程度や存在をより深く理解するために、Pセレクチン、血小板第4因子、単球性血小板凝集体、その他の血小板活性化マーカーを測定したいと考えていましたが、これは本研究の範囲外です。第三に、グルコース曝露血小板におけるMPVの上昇が微小管変化への影響によるものであることを、電子顕微鏡法などの方法で確認できませんでした。
全血またはPRPと25%ブドウ糖の混合物はMPVを上昇させ、血小板活性化の開始を示唆しましたが、本研究では凝集または脱顆粒の進行は示されませんでした。高張ブドウ糖混合物は血小板の減少をもたらし、おそらく溶解効果を反映していると考えられます。血小板の部分的な活性化または溶解は、血小板注入後に組織の再生を引き起こす可能性があります。これらの変化がどのような臨床的結果につながるかは明らかではありません。その後の研究により、活性化または溶解のより正確な測定方法が実証され、全血またはPRPと高張ブドウ糖混合物の異なる臨床効果が評価されました。
グルコース増殖療法は、簡便かつ安価な再生療法であり、急速に普及し、臨床研究を支えています。本研究は、増殖療法の再生メカニズムの一端を解明する上で役立つ可能性のある生理学的メカニズムを示唆しています。
ミズーリ大学カンザスシティ校医学部(米国カンザスシティ)の生物医学および健康情報科学
被験者: この研究のすべての参加者は、同意した、または同意しなかった。国際細胞医学会は ICMS-2017-003 承認を発行した。以下のプロトコルは、国際細胞医学会の機関審査委員会により、今後の使用が承認されている: タイトル: ベースライン CBC 血小板数に基づく血小板豊富血漿薬剤収量の計算。動物被験者: すべての著者は、この研究に動物または組織が関与していないことを確認した。利益相反: ICMJE 統一開示フォームに従って、すべての著者は以下を宣言する: 支払い/サービス情報: すべての著者は、投稿された研究に対していかなる組織からも財政的支援も受けていないことを宣言する。金銭的関係: すべての著者は、現在または過去 3 年以内に、投稿された研究に関心を持つ可能性のあるどの組織とも金銭的関係がないことを宣言する。その他の関係: すべての著者は、投稿された研究に影響を与える可能性のある他の関係または活動がないことを宣言する。
ハリソンTE、ボウラーJ、リーブスK他 (2022年5月17日) 血小板数および血小板容積に対するブドウ糖の影響:再生医療への示唆. Cure 14(5): e25081. doi:10.7759/cureus.25081
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投稿日時: 2022年8月15日


