„Ärge kunagi kahelge, et väike grupp mõtlevaid ja pühendunud kodanikke suudab maailma muuta. Tegelikult on see ainus, mis maailmas on.“
Cureuse missioon on muuta meditsiinilise kirjastamise pikaajalist mudelit, kus uuringute esitamine võib olla kulukas, keeruline ja aeganõudev.
Trombotsüütiderikas plasma/prp, kudede regenereerimine, trombotsüütide aktiveerimine, glükoosi proliferatiivne ravi, trombotsüüdid, proliferatiivne ravi
Tsiteeri seda artiklit järgmiselt: Harrison TE, Bowler J, Reeves K jt (17. mai 2022) Glükoosi mõju trombotsüütide arvule ja mahule: mõju regeneratiivsele meditsiinile. Cure 14(5): e25081. doi:10.7759/cureus.25081
Trombotsüütiderikast plasmat (PRP) ja hüpertoonilisi glükoosilahuseid kasutatakse regeneratiivses meditsiinis süstimiseks tavaliselt, mõnikord koos. Hüpertoonilise glükoosi mõju trombotsüütide lüüsile ja aktiveerimisele ei ole varem avaldatud. Testisime kõrgenenud glükoosikontsentratsioonide mõju trombotsüütide ja erütrotsüütide arvule, samuti rakkude mahule PRP-s ja täisveres. Kõigi glükoosisegude ja PRP või täisvere segamisel täheldati trombotsüütide arvu kiiret osalist vähenemist, mis on kooskõlas osalise lüüsiga. Pärast esimest minutit püsis trombotsüütide arv stabiilsena, mis viitab järelejäänud trombotsüütide kiirele kohanemisele äärmise (>2000 mOsm) hüpertoonilisuseni. Pärast esimest minutit püsis trombotsüütide arv stabiilsena, mis viitab järelejäänud trombotsüütide kiirele kohanemisele äärmise (>2000 mOsm) hüpertoonilisuseni. После первой минуты количество тромбоцитов оставалось стабильным, что указывает на быструх аккомоданыстацитою тромбоцитов до экстремального (>2000 мОсм) гипертонуса. Pärast esimest minutit püsis trombotsüütide arv stabiilsena, mis viitab järelejäänud trombotsüütide kiirele kohanemisele äärmise (>2000 mOsm) hüpertoonilisuseni.第一分钟后，血小板计数保持稳定，表明残余血小板迅速适应极端（> 2000 mOsm）高渗状态.2000 mOsm）高渗状态. После первой минуты количество тромбоцитов оставалось стабильным, что указывает на быструю адаптацитромостоцацитою к экстремальному (>2000 мОсм) гиперосмолярному состоянию. Pärast esimest minutit püsis trombotsüütide arv stabiilsena, mis näitab jääktrombotsüütide kiiret kohanemist äärmusliku (>2000 mOsm) hüperosmolaarse olekuga.Glükoosi kontsentratsioon 25% ja üle selle põhjustas trombotsüütide keskmise mahu (MPV) olulise suurenemise, mis viitab trombotsüütide aktivatsiooni varajasele staadiumile. Täiendavad uuringud on vajalikud, et teha kindlaks, kas toimub trombotsüütide lüüs või aktivatsioon ning kas hüpertooniline glükoosi süstimine üksi või kombinatsioonis PRP-ga võib pakkuda täiendavat kliinilist kasu.
1950. aastatel avastas Ameerika kirurg George Hackett, et ta suudab paljudel patsientidel liigese- ja seljavalu püsivalt leevendada, süstides kõõlustesse ja sidemetesse proliferatiivset lahust. Tema katsed küülikutega näitasid, et ravi, mida ta nimetas proliferatiivseks teraapiaks, põhjustas kõõluste suurenemist ja tugevnemist. Histoloogilised uuringud on kinnitanud, et selle protsessi käigus toodetakse uut kollageeni [1].
Esimeste kümnendite jooksul prooviti paljusid erinevaid jaotuslahendusi. 1990. aastateks pidas enamik praktikuid kõige ohutumaks ja tõhusamaks meetodiks kõrge glükoosikontsentratsiooni. Toimemehhanism on aga siiani ebaselge.
Pärast Hacketti tööd viidi 20. sajandil läbi vähe kliinilisi uuringuid. 2000. aastatel aga taas huvitus see ravimeetod ja mitu edukat kliinilist uuringut proliferatiivse ravi kohta alaseljavalu [2], põlve osteoartriidi [3] ja lateraalse epikondüliidi [4] ravis viidi läbi.
Kudede regenereerimine nõuab tüvirakkude osalemist. Seega peavad kõrged glükoosikontsentratsioonid kuidagi indutseerima tüvirakkude migratsiooni, replikatsiooni ja diferentseerumist. Meie hüpotees on, et trombotsüüdid võivad toimida virgatsainetena ja et kõrged glükoosikontsentratsioonid võivad põhjustada trombotsüütide tsütokiinide ja kasvufaktorite vabanemist, soodustades seeläbi regeneratiivseid protsesse, eriti tüvirakkude migratsiooni kõrge glükoosikontsentratsiooniga piirkondadesse.
Trombotsüütide aktivatsioon eelneb alati rakusisese kaltsiumi suurenemisele [5]. Liu jt näitasid 2008. aastal, et kõrge glükoositase suurendab plasmamembraanis transientse retseptori potentsiaaliga kanooniliste 6. tüüpi (TRPC6) kanalite aktiivsust, mis viib kaltsiumiioonide sissevooluni trombotsüütidesse [6]. Teine uuring näitas, et mikrotuubulite marginaaltsooni kokkupuude kaltsiumiioonidega põhjustab marginaaltsooni lõdvestumist, laienemist ja deformatsiooni, mis omakorda põhjustab kuju muutuse kettakujulisest sfääriliseks, mille tulemuseks on trombotsüütide keskmine maht (MPV) [7].
Meie uuringu hüpotees on, et trombotsüütide kokkupuude kõrge glükoosikontsentratsiooniga mõjutab mikrotuubulite marginaaltsooni ja rakusisest keskkonda, mis viib MPV suurenemiseni.
Pärast uuringu üksikasjade selgitamist ja enne proovide saamist allkirjastasid kõik osalejad teadliku nõusoleku vormi. Selles uuringus kasutati ainult PRP proove, mille hematokrit oli üle 2%, et võrdluseks saaks lisada erütrotsüütide (erütrotsüütide) arvu ja punaste vereliblede keskmise korpuskulaarse mahu (MCV).
Uuring viidi läbi neljas faasis, esimene faas oli PRP ja ülejäänud faasid olid täisveri (tabel 1). Nagu varem kirjeldatud [8], arvutati kõik suhtelised tsentrifugaaljõud (RCF, g-jõud) tsentrifugaalsüstlas oleva verekolonni keskpunktist (Rmid, sentimeetrites). Otsustasime kasutada MPV-d trombotsüütide sensibiliseerimise markerina ja trombotsüütide arvu potentsiaalse trombotsüütide lüüsi indikaatorina, mida mõlemaid saab hõlpsasti mõõta standardsete hematoloogiliste analüsaatoritega.
Esimeses etapis annetasid 47 vabatahtlikku vereproove – ühe tuubi etüleendiamiintetraäädikhapet (EDTA) ja ühe PRP täisvereproovi (antikoaguleeritud naatriumtsitraadiga (NaCl, 3%)) (tabel 1). Asetage loksuti kohe tuubi. EDTA proovidega tehti kolmes korduses täisvereanalüüs (CBC) ja NaCl proove analüüsiti kolmes korduses CBC analüüsiks ning seejärel valmistati PRP ette eespool kirjeldatud erinevate meetodite abil [8]. Kõik PRP proovid valmistati tsentrifuugimise teel kiirusel 900–1000 g. Segage iga PRP proovi keerissegistis 5–10 sekundit, seejärel jagage viis 0,5 ml alikvooti tuubidesse.
Trombotsüütidega kokkupuute mõju hindamiseks kõrgenenud glükoosikontsentratsioonidele segati trombotsüütide proovidega võrdsed kogused (0,5 ml) 0%, 5%, 12,5%, 25% ja 50% glükoosi vesilahust, et saada glükoosisegu kontsentratsioonid 0%, 2,5%, 6,25%, 12,5% ja 25%, ning tuube segati katseklaasi loksutil 15 minutit. Iga segu kogukontsentratsiooni (TAC) analüüsiti kolmes korduses 15 minuti pärast. Iga tuubi kohta arvutati trombotsüütide arvu (PLT), erütrotsüütide arvu, MCV ja MPV keskmine ning kõigi PRP proovide kohta arvutati keskmine trombotsüütide arv, erütrotsüütide arv, MCV ja MPV.
Pärast andmete kogumise esimese etapi lõppu märkasime pärast D50W lisamist PRP-trombotsüütides trombotsüütide mahu olulist suurenemist. PRP-trombotsüüdid ei esinda tingimata kõiki veres olevaid trombotsüüte ja PRP-keskkond erineb WB-keskkonnast. Seetõttu otsustasime läbi viia teise faasi uuringu, et uurida D50W lisamise mõju täisverele.
Teise vooru jaoks valisime esimese seeria tulemuste põhjal 30 valimi suuruse valimi, nagu on kirjeldatud analüüsi osas. Selles seerias annetas vereproove 20 vabatahtlikku (tabel 1). Täisveri (1,8 ml) võeti 3 ml süstlasse ja antikoaguleeriti 0,2 ml 40% NaCl-ga. Täisveresüstalt segati viis sekundit keerissegistiga ja CBC-d analüüsiti kolmes korduses. Pärast analüüsi lisati antikoaguleeritud veri 2 ml 50% glükoosile 5 ml süstlas (lõplik glükoosikontsentratsioon oli ligikaudu 25% (D25)) ja asetati 30 minutiks loksutustorusse. 30 minuti pärast analüüsiti WB süstaldes olevaid D25/CBC-d kolmes korduses. Trombotsüütide arv, erütrotsüütide arv, MCV ja MPV süstla kohta keskmistati ning iga proovi keskmine PLT, erütrotsüütide arv, MCV ja MPV arvutati enne ja pärast glükoosi lisamist.
Kuna täisvere trombotsüüdid puutuvad proliferatiivse glükoosravi ajal minimaalselt invasiivse süstimise tõttu sageli kokku hüpertoonilise glükoosiga ja PRP kombineerimine hüpertoonilise glükoosiga vahetult enne süstimist pole tavaline, otsustasime 1. osas, kolmandas ja neljandas etapis uurida hüpertoonilist glükoosi kombinatsioonis verevalumiga. Igas etapis annetasid 20 vabatahtlikku vere antikoagulantideks 7–8 ml ACD-A-d (hape, mis sisaldab trinaatriumtsitraati (22,0 g/l), sidrunhapet (8,0 g/l) ja glükoosi (24,5 g/l), dekstroostsitraadi lahus) (tabel 1). MPV suurenemisega seotud läviväärtuse protsendi määramiseks kasutati ainult üle 12,5% glükoosisisaldusega segusid. Kolmandas etapis pannakse katseklaasi 1 ml verd. Seejärel segage verd keerissegistis 10 sekundit, lisades tuubi 1 ml 30%, 40% või 50% glükoosi, et saada glükoosi lõppkontsentratsiooniks vastavalt 15%, 20% ja 25%. Glükoosi sisaldavaid vereproove analüüsiti CBC suhtes kohe pärast segamist ja korrati iga kahe minuti järel 30 minuti jooksul.
Esialgse segamise ajal viib 1:1 hüpertoonilise glükoosi ja WB või PRP lisamine trombotsüüdid mitmeks sekundiks üle 25% kontsentratsioonini. Neljandas etapis, et hinnata hüpertoonilise glükoosi mõju minimaalsete esialgsete tippkontsentratsioonidega ja testida glükoosi mõju ülempiiri, lisasime D25W või D50W proovile ainult väikese koguse verd. Pange 1 ml D25W või D50W katseklaasi ja lisage 0,2 ml WB-d, segades proovi 10 sekundit keerises. Nendel juhtudel puutus veri kokku glükoosiga kontsentratsioonis, mis oli ligikaudu 20% kõrgem lõppkontsentratsioonist, mitte 50% kõrgem lõppkontsentratsioonist nagu 3. faasis, mille tulemuseks olid glükoosi lõppkontsentratsioonid 20,8% ja 41,6%. Segatud proove analüüsiti sama ajavahemiku järel nagu 3. etapis.
Iga glükoosi lahjenduste seeria esimeses etapis võeti 30 proovi, kuna see oli pilootuuringu jaoks sobiv valimi suurus [9]. Iga etapi (kaasa arvatud esimese etapi) lõpus hinnake valimi suuruse piisavust, kasutades valemit, mida kasutati pideva tulemusmuutuja keskmise hindamiseks vajaliku valimi suuruse määramiseks ühes populatsioonis. Valem n = Z2 x SD2 /E2. Selles võrrandis on Z Z-skoor, SD on standardhälve ja E on soovitud viga [10]. Meie alfa on 0,05, mis vastab Z-väärtusele 1,96 ja me eeldame viga 5 (protsentides). Seega lahendame n = (1,962 x SD2)/52. Tulemused näitasid, et iga etapi jaoks vajalik valimi suurus oli väiksem kui tegelikult kogutud arv.
Perioodidel 1, 3 ja 4, kasutades rohkem kui ühte glükoosi kontsentratsiooni, analüüsiti erinevate glükoosi kontsentratsioonide mõju, võrreldes murdosa muutust aja 0 ja iga järgneva aja vahel (1. faas 15 minutil, 3. periood 15 minutil ja neli 15 sekundil ning seejärel iga kahe minuti järel). Iga ajaperioodi muutusmäärasid võrreldi Mann-Whitney U-testi abil, kuna andmed ei järginud normaaljaotust, nagu määrati Shapiro-Wilki normaalsustestiga. Kuna esimeses, kolmandas ja neljandas etapis (kokku viis) viidi läbi mitme rühma (viie) 1:1 analüüs, tehti Bonferroni korrektsioon, et reguleerida soovitud alfa väärtus ≤0,01, kuid mitte ≤0,05-ni.
Trombotsüütide arvu vähenemine kõigi hüpertoonilise dekstroosi kontsentratsioonide korral ja MPV suurenemine PRP-trombotsüütides >12,5% dekstroosi kontsentratsiooni juures: PRP-trombotsüütide arv tõusis algtaseme täisverega võrreldes ühe kuni viiekordse kontsentratsioonini, varieerudes meetoditi (pole kujutatud). Trombotsüütide arvu vähenemine kõigi hüpertoonilise dekstroosi kontsentratsioonide korral ja MPV suurenemine PRP-trombotsüütides >12,5% ​​dekstroosi kontsentratsiooni juures: PRP-trombotsüütide arv suurenes ühe kuni viiekordselt võrreldes algtaseme täisverega, varieerudes meetoditi (pole kujutatud). Уменьшение количества тромбоцитов при всех концентрациях гипертонической декстрозы и увеличение MPV вхпримпритов концентрации декстрозы > 12,5%: количество тромбоцитов PRP увеличилось в 1-5 раз по сравнению с исхольной кровью, в зависимости от метода (не показано). Trombotsüütide arvu vähenemine kõigi hüpertooniliste dekstroosi kontsentratsioonide korral ja MPV suurenemine PRP-trombotsüütides >12,5% ​​dekstroosi kontsentratsiooni korral: PRP-trombotsüütide arv suurenes 1-5 korda võrreldes täisvere algväärtusega, olenevalt meetodist (pole näidatud). ).在> 12,5% 的葡萄糖浓度下，所有浓度的高渗葡萄糖降低血小板计数，䰏VMP 血增加：与基线全血相比，PRP 血小板计数从浓度的1 倍上升到5倍，因方法而异（未描述）. Kui glükoosi kontsentratsioon on üle 12,5%, vähendab kõrge glükoosikontsentratsioon vereanalüüsi, PRP vere MPV suureneb: võrreldes 与基线全血-ga suureneb PRP vereanalüüs 1–5 korda kontsentratsioonist (pole kirjeldatud). При концентрациях глюкозы >12,5% все концентрации гипертонической глюкозы снижали количество количество тромбо в тромбоцитах PRP: количество тромбоцитов PRP увеличивалось от 1- до 5-кратных концентраций по сравенцинхо сравне концентрациями цельной крови, в зависимости от метода (не описано ). Glükoosi kontsentratsioonil >12,5% vähendasid kõik hüpertensiivsed glükoosi kontsentratsioonid trombotsüütide arvu ja suurendasid MPV-d PRP-trombotsüütides: PRP-trombotsüütide arv suurenes 1–5 korda võrreldes algtaseme täisvere kontsentratsiooniga, olenevalt meetodist (nagu kirjeldatud).Joonis 1 näitab, et trombotsüütide arv vähenes pärast veega lahjendamist peaaegu 75% ja pärast 15-minutilist lahjendamist erineva kontsentratsiooniga glükoosiga 20–30% võrreldes algtaseme PRP-ga ja mahu järgi korrigeeritud 1:1 lahjendusega (1- k1 mahu korrektsiooniga). k -1 aretus).1 aretus).
Igas lahjenduses olevate rakkude arv väljendatakse lahjendamisele eelnenud algse arvu murdosana.
MPV vähenes PRP tootmise ajal minimaalselt, ilma lahjenduskontsentratsioonide edasise muutmiseta 12,5%-ni vees või glükoosis (sh 25% PRP glükoosisegudes) ja suurenes pärast lahjendamist 50% glükoosilahuses enam kui 20% (joonis 2). Seevastu erütrotsüüdid ei näidanud olulist mahu muutust ühegi teise lahjenduse korral peale H2O.
Igas lahjenduses olevate rakkude keskmine maht väljendatakse protsendina algsest mahust enne lahjendamist.
Sarnast, kuid vähem väljendunud trombotsüütide arvu vähenemist ja CVR-i suurenemist täheldati 50% glükoosiga töödeldud rinnavähi puhul (25% glükoosiga formulatsiooni puhul). Tabelis 2 võrreldakse rakkude arvu ja mahtu 50% dekstroosiga lahjendatud täisveres 1. faasi PRP andmetega, mis on lahjendatud 50% dekstroosiga. Erütrotsüütide arvu ja RBC MCV muutused ei olnud ilmsed ega olnud meie tähelepanu keskpunktis.
SD = standardhälve, MD = rühmade keskmine erinevus, SE = keskmise erinevuse standardhälve, RBC = erütrotsüüdid, PLT = trombotsüüdid, PRP = trombotsüütiderikas plasma, WB = täisveri
Pärast D50W lisamist WB-le oli lahjenduse järgi korrigeeritud trombotsüütide kadu protsent 7,7% (310±73 vs. 286±96), võrreldes 17,8%-ga PRP lahjenduse puhul D50W-s (664±348 vs. 544±277). MPV WB suurenes 16,8% (10,1 ± 0,5-lt 11,8 ± 0,6-le), samas kui MPV PRP suurenes 26% (9,2 ± 0,8 vs. 11,6 ± 0,7). Kuigi nii trombotsüütide arvu vähenemise kui ka MPV suurenemise keskmised erinevused olid PRP puhul oluliselt suuremad, olid trombotsüütide arvu vähenemise muutused vereliistakute piires peaaegu olulised (310 ± 73 kuni 286 ± 96 (-7,7%); p = 0,06) ja MPV suurenemine oli oluline (10,1 ± 0,5 kuni 11,8 ± 0,6 (+16,8) p < 0,001). Kuigi nii trombotsüütide arvu vähenemise kui ka MPV suurenemise keskmised erinevused olid PRP puhul oluliselt suuremad, olid trombotsüütide arvu vähenemise muutused vereliistakute piires peaaegu olulised (310 ± 73 kuni 286 ± 96 (-7,7%); p = 0,06) ja MPV suurenemine oli oluline (10,1 ± 0,5 kuni 11,8 ± 0,6 (+16,8) p < 0,001).Kuigi trombotsüütide arvu vähenemise ja CVR-i suurenemise keskmised erinevused olid PRP puhul oluliselt suuremad, olid trombotsüütide arvu languse muutused vereliistakute piires peaaegu olulised (310 ± 73 kuni 286 ± 96 (-7,7%); p = 0,06).увеличение MPV было значительным (от 10,1 ± 0,5 до 11,8 ± 0,6 (+16,8) p < 0,001). MPV suurenemine oli oluline (10,1 ± 0,5-lt 11,8 ± 0,6-ni (+16,8) p < 0,001).尽管PRP 在血小板计数减少和MPV 增加方面的平均差异显着更大，但WB内血小板计数减少的变化几乎是显着的（310 ± 73 至286 ± 96 (-7,7%)；p = 0,06）和MP的增加是显着的（10,1 ± 0,5 到11,8 ± 0,6 (+16,8) p < .001）.尽管 PRP 在 血小板 计数 和 和 增加 方面 的 平均 差异 显着 大 ， 但 尡 膅 小减少 的 几乎 是 显着 的 （（(310 ± 73 至 286 ± 96 (-7,7%) ； p = .06）和MPV 的增劊± 0,5 到11,8 ± 0,6 (+16,8) p < 0,001）.Trombotsüütide arvu vähenemise muutus vereliistaku piires oli peaaegu oluline (310 ± 73-lt 286 ± 96-le (-7,7%); p = 0,06), kuigi PRP-l olid trombotsüütide arvu languse ja MPV suurenemise keskmised erinevused oluliselt suuremad ning MPV suurenemine oli oluline.(от 10,1 ± 0,5 до 11,8 ± 0,6 (+16,8) р < 0,001). (vahemikus 10,1 ± 0,5 kuni 11,8 ± 0,6 (+16,8) p < 0,001).
MPV olulise muutuse nägemiseks oli vajalik 20% glükoosi lõppkontsentratsioon, kuid MPV muutus oli märgatavam 25% lõppkontsentratsiooni juures. Trombotsüütide kadu stabiliseerus pärast esialgset langust. Täheldasime CVR-i esialgset järsku langust, kuid CVR taastus kiiresti 25% glükoosi lõppkontsentratsiooni juures, mis oli oluliselt kõrgem kui CVR-i tasemed, mida täheldati 20% ja 15% glükoosi lõppkontsentratsioonide juures (joonis 3 ja tabeli 3 vasakul pool; varjutatud kastid). näitab p-väärtusi ≤ alfa Bonferroni korrektsiooniga 0,01). Samuti esines PLT-de arvu esialgne järsk langus, mida täheldati algfaasis 0–15 sekundit ja seejärel püsis see stabiilsena (15 sekundist 30 minutini; tabeli 4 vasakul pool).
Erinevate glükoosikontsentratsioonide lisamine täisverele põhjustas MPV esialgse kiire languse, millele järgnes kontsentratsioonist sõltuv taastumine enam kui 20%. Legend näitab glükoosi kontsentratsiooni pärast lahjendamist. D15, D20 ja D25 viidi läbi lahjenduses 1:1. D21 ja D41 viidi läbi lahjenduses 1:5.
Tabel 4 näitab trombotsüütide arvu muutust hüpertoonilise glükoosiga lahjendamisel. Täheldasime annusest sõltuvat seost PLT-arvude kohese languse vahel lahjenduse 1:1 ja lahjenduse 1:5 puhul. Võrreldes 1:1 lahjendusi ühe rühmana 1:5 lahjendustega, oli 1:1 rühmas trombotsüütide arvu kohene langus väiksem kui 1:5 rühmas, 66±48 000 (23%) versus 99±69 000 (37%). , p = 0,014) 1:5 rühmas. Pärast esialgset langust esimeses mõõtmispunktis stabiliseerus trombotsüütide arv glükoosi protsendina (joonis 4).
Kui glükoosile lisatakse täisverd vahekorras 1:1, väheneb trombotsüütide arv umbes 25%. Kui aga täisverd lisati vahekorras 1:5, oli vähenemine palju suurem – umbes 50%.
41% glükoos suurendas MPV-d kiiremini ja dramaatilisemalt kui 25% või 21%. MPV tulemused on näidatud joonisel 3. Kõigi teiste lahjenduste korral ei täheldatud pärast 50% glükoosi lisamist MPV kohest esialgset langust. 25% glükoosi kasutamisel (glükoosi kontsentratsioon lõpplahjenduses 20,8%) oli MPV muutus võrreldav 20% glükoosi muutusega 1:1 lahjenduses (joonis 3). Kuigi MPV muutused olid algselt 41% segatud kontsentratsiooni korral suuremad kui 25% korral, ei olnud MPV erinevus 41% ja 25% vahel 16 minuti pärast enam oluline (tabel 3, paremal). Samuti on huvitav, et 25% glükoos suurendas MPV-d efektiivsemalt kui 20,8%.
See in vitro uuring kinnitas osaliselt meie hüpoteesi. See näitas potentsiaalset osalist trombotsüütide lüüsi dekstroosi lisamisel, trombotsüütide kiiret kohanemist äärmise hüpertoonilisusega ja MPV olulist tõusu vastusena > 25% hüpertoonilise dekstroosi kontsentratsioonile. See näitas potentsiaalset osalist trombotsüütide lüüsi dekstroosi lisamisel, trombotsüütide kiiret kohanemist äärmise hüpertoonilisusega ja MPV olulist tõusu vastusena > 25% hüpertoonilise dekstroosi kontsentratsioonile. Он показал потенциальный частичный лизис тромбоцитов примесью декстрозы, быструю аккомодациальный аккомодациальный частичный лизис тромбоцитов примесью декстрозы, быструю аккомодациальный аккомодациаю тромбоцитов примесью декстрозы гипертонуса и значительное повышение MPV в ответ на гипертоническую концентрацию декстрозы > 25%. See näitas potentsiaalset osalist trombotsüütide lüüsi dekstroosi korral, kiiret trombotsüütide akommodatsiooni äärmise hüpertoonilisuseni ja MPV olulist suurenemist vastusena hüpertoonilisele dekstroosi tasemele >25%.它显示出通过葡萄糖混合物潜在的部分血小板溶解，血小板快速适应极端高渗，以及响应> 25% 浓度的高渗葡萄糖时MPV 显着上升.它 显示 出 通过 葡萄糖 潜在 的 部分 血小板 溶解 血小板 忼 速 适应 极 速 适庯 枏响应> 25% 浓度 高渗 葡萄糖 时 时 mpv 显着。。。。. Он показывает потенциальный частичный лизис тромбоцитов смесями с глюкозой, быструю адаптацию адаптацию экстремальному гипертонусу и значительное увеличение MPV в ответ на концентрацию гипертонической глюкозы > 25%. See näitab potentsiaalset osalist trombotsüütide lüüsi glükoosisegude poolt, trombotsüütide kiiret kohanemist äärmise hüpertoonilisusega ja MPV olulist suurenemist vastusena hüpertoonilisele glükoosile >25%.Esialgne tõus oli maksimaalne 41,6% glükoosiga kokkupuute juures, kuid MPV suurenemine lähenes 25% glükoosiga kokkupuutele umbes 20 minutit pärast kokkupuudet.
Glükoos mõjutab trombotsüütide kontsentratsiooni. Täheldasime, et PLT hulk vähenes glükoosi kõigi lahjenduste korral. Trombotsüütide arvu järsk langus PRP-seeria H2O (0%) lahjendustes võib olla seotud osmootse lüüsiga. Teise võimalusena võib see olla trombotsüütide agregatsioonist tingitud artefakt, kuid see on vastuolus MPV muutuse puudumisega selles lahjenduses. See leid tähendab, et mõned trombotsüüdid on hüpoosmolaarsuse suhtes väga tundlikud.
Kõigis glükoosi 1:1 lahjendustes vähenes PLT hulk 20–30%, isegi D5W korral (hüpotooniline 252 mOsm juures), mis võib viidata glükoosi spetsiifilisele mitteosmootsele toimele, kuna nii PLT kui ka MPV jäid muutumatuks glükoosi kontsentratsiooni kolmekordsel suurenemisel D5W-lt D25W-le. Tegelikult kaldusid PLT kontsentratsioonid osmolaarsuse suurenemisega veidi suurenema.
PLT vähenemine lahjenduste 1:1 ja 1:5 vahel tähendab, et lahustumisefekt sõltub glükoosi alg- ja lõppkontsentratsioonist. Kui see sõltuks ainult algkontsentratsioonist, siis võiks eeldada PLT vähenemise erinevust 1:1 kontsentratsioonide vahel. Aga meie seda ei eelda. Kui lüüsiefekt sõltub ainult glükoosi lõppkontsentratsioonist, siis me ei oota suurt erinevust 20% 1:1 lahjenduse ja 20,8% 1:5 lahjenduse vahel. Ja ometi me tegime seda.
Kui trombotsüütide lüüsi tõttu tekib trombotsüütide kadu, moodustub osaline lüsaat, mille järel tsütokiinid ja kasvufaktorid vabanevad rakuvälisesse keskkonda. Mitmed uuringud on näidanud, et trombotsüütide lüsaat on proliferatsioonilahusena peaaegu sama efektiivne kui PRP [11]. PRP ise on osutunud tõhusaks lahenduseks proliferatsiooni ravis [12-14].
Mitteaktiivsed trombotsüüdid ringlevad ketta kujul, mis on tugevdatud mitme sisemise struktuuriga. Aktiveerimise ajal omandavad nad sfäärilisema ehk amööbi kuju, mille tulemuseks on mahu suurenemine. Mahu suurenemine nõuab pindala suurenemist, mis on avatud tubulite süsteemi (OCS) ekstrusiooni ja eksotsütaarsete graanulite membraanile lisamise tulemus. Jääb kindlaks tegemata, kas hüpertoonilise glükoosi poolt esile kutsutud MPV suurenemine hõlmab ühte või mõlemat neist mehhanismidest, kuid kui tegemist on viimasega, siis MPV suurenemine viitaks degranulatsioonile.
See uuring näitas, et kokkupuude kõrge glükoosikontsentratsiooniga PRP-l või täisvere trombotsüütidel suurendas MPV-d 15 minuti jooksul vastavalt 25% ja 41,6%.
Trombotsüütide MPV suurenemine võib olla tingitud ümbritsevate mikrotuubulite sasipuntrate laienemisest vastusena kaltsiumi sissevoolule. Liu jt. On näidatud, et glükoos vahendab kaltsiumi sissevoolu trombotsüütide TRPC6 kanali kaudu [6]. Meie hüpotees on, et glükoos kutsub esile mikrotuubulite sasipuntrate lõdvestumise, mis viib MPV suurenemiseni ja trombotsüütide sensibiliseerumiseni ja/või aktivatsioonini. Meie tulemuste põhjal otsustades on see aga ainult osa loost. Meie testides ei põhjustanud ükski kontsentratsioon alla D25W MPV suurenemist. Arvestades, et me ei ole testinud glükoosikontsentratsioone vahemikus 12,5% kuni 25%, viitavad meie 1. faasi tulemused sellele, et selles glükoosikontsentratsioonide vahemikus võib olla lävi, mis viib MPV suurenemiseni. Edasised testid 3. ja 4. etapis näitasid, et 20–25% glükoosi näib olevat selle lävi, kuid jääb ebaselgeks, miks.
Samuti täheldasime pärast tsentrifuugimist MPV ~9% langust. Pole selge, kas see MPV langus on tingitud tsentrifuugi RBC-kihti kinni jäänud suurematest ja tihedamatest trombotsüütidest. See tähelepanek võib olla oluline arstidele, kuna see võib viidata sellele, et PRP-trombotsüüdid on WB-trombotsüütide väiksem ja väiksema tihedusega alamhulk.
Varasemas uuringus näitasime, et PRP käsitsi valmistamine on odav [8]. Kui glükoos sensibiliseerib koetromütsüüte või PRP-d, muutes need aktiveerimise suhtes vastuvõtlikumaks, või kui PRP-d toodetakse osalise lüsaadi omadustega, võib see soodustada regeneratsiooni ja vähendada ravi vajadust. Seetõttu võib PRP ja kõrge kontsentratsiooniga glükoosi kombinatsioon olla kulutõhusam kui PRP või glükoos üksi.
Meie uuringul on mitmeid puudusi. Esiteks kasutame mitmel erineval meetodil saadud PRP-d. See võib viia vastuoluliste tulemusteni. Teiseks ei suutnud me ühegi oma proovi biokeemilist analüüsi läbi viia, et täpsemalt kindlaks teha, kas trombotsüütide aktivatsioon on toimunud. Soovime mõõta P-selektiini, trombotsüütide faktorit 4, monotsüütide trombotsüütide agregaate või muid trombotsüütide aktivatsiooni markereid, et paremini mõista alfagranulite degranulatsiooni astet või esinemist, kuid see jääb käesoleva uuringu raamidest välja. Kolmandaks ei suutnud me elektronmikroskoopia ega muude meetoditega kinnitada, et glükoosiga kokkupuutunud trombotsüütide MPV suurenemine oli tingitud mikrotuubulite sasipuntrate mõjust.
WB või PRP segud 25% glükoosiga suurendasid MPV-d, mis annab märku trombotsüütide aktivatsiooni algusest, kuigi see uuring ei näidanud agregatsiooni ega degranulatsiooni progresseerumist. Hüpertooniline glükoosisegu põhjustas trombotsüütide kadu, mis võib viidata lüütilisele efektile. Trombotsüütide osaline aktivatsioon või lüüs võib pärast trombotsüütide süstimist põhjustada kudede regeneratsiooni. Pole selge, milliseid kliinilisi tagajärgi need muutused võivad kaasa tuua. Edasised uuringud on näidanud aktivatsiooni või lüüsi täpsemaid mõõtmisi ja hinnanud hüpertooniliste glükoosisegude erinevaid kliinilisi toimeid WB või PRP-ga.
Glükoosi proliferatiivne ravi on lihtne ja odav regeneratiivne ravi, mis kiiresti laieneb ja toetab kliinilisi uuringuid. See uuring viitab füsioloogilisele mehhanismile, mis kinnituse korral aitaks meil mõista osa proliferatiivse ravi regeneratiivsest mehhanismist.
Biomeditsiiniline ja tervishoiuinformaatika Missouri Ülikoolis, Kansas City Meditsiinikoolis, Kansas City, USA
Inimesed: Kõik selles uuringus osalejad andsid või ei andnud nõusolekut. Rahvusvaheline Rakumeditsiini Selts on väljastanud ICMS-2017-003 heakskiidu. Järgmise protokolli on edasiseks kasutamiseks heaks kiitnud Rahvusvahelise Rakumeditsiini Seltsi institutsionaalne kontrollnõukogu: Pealkiri: Trombotsüütiderikka plasma ravimisaagise arvutamine algtaseme CBC trombotsüütide arvu põhjal. Loomkatsealused: Kõik autorid kinnitasid, et selles uuringus ei osalenud loomi ega kudesid. Huvide konfliktid: Vastavalt ICMJE ühtsele avalikustamisvormile deklareerivad kõik autorid järgmist: Makse-/teenuse teave: Kõik autorid deklareerivad, et nad ei ole esitatud töö jaoks saanud rahalist toetust üheltki organisatsioonilt. Rahalised suhted: Kõik autorid deklareerivad, et neil ei ole praegu ega viimase kolme aasta jooksul olnud rahalisi suhteid ühegi organisatsiooniga, mis võiks esitatud tööst huvitatud olla. Muud suhted: Kõik autorid deklareerivad, et puuduvad muud suhted või tegevused, mis võivad esitatud tööd mõjutada.
Harrison TE, Bowler J, Reeves K jt (17. mai 2022) Glükoosi mõju trombotsüütide arvule ja mahule: mõju regeneratiivsele meditsiinile. Cure 14(5): e25081. doi:10.7759/cureus.25081
© Autoriõigus 2022 Harrison jt. See on avatud juurdepääsuga artikkel, mis on levitatud Creative Commonsi omistuslitsentsi CC-BY 4.0 tingimuste kohaselt. Piiramatu kasutamine, levitamine ja reprodutseerimine mis tahes meediumis on lubatud, kui algne autor ja allikas on ära märgitud.