«Ойчул, берилген жарандардын чакан тобу дүйнөнү өзгөртө аларына эч качан шек санабаңыз. Чындыгында, ал жерде жалгыз ушул».
Cureusтун миссиясы - изилдөө иштерин тапшыруу кымбат, татаал жана көп убакытты талап кылган медициналык басылмалардын көптөн бери келе жаткан моделин өзгөртүү.
Тромбоциттерге бай плазма/PRP, ткандардын регенерациясы, тромбоциттердин активдешүүсү, глюкозанын пролиферативдик терапиясы, тромбоциттер, пролиферативдик терапия
Бул макаланы төмөнкүчө цитаталаңыз: Харрисон Т.Э., Боулер Дж., Ривз К. ж.б. (2022-жылдын 17-майы) Глюкозанын тромбоциттердин санына жана көлөмүнө тийгизген таасири: регенеративдик медицинага тийгизген таасири. Cure 14(5): e25081. doi:10.7759/cureus.25081
Тромбоциттерге бай плазма (PRP) жана гипертоникалык глюкоза эритмелери регенеративдик медицинада көбүнчө инъекция үчүн колдонулат, кээде чогуу. Гипертоникалык глюкозанын тромбоциттердин лизисине жана активдешүүсүнө тийгизген таасири мурда кабарланган эмес. Биз глюкозанын жогорку концентрациясынын тромбоциттердин жана эритроциттердин санына, ошондой эле PRPдеги жана бүт кандагы (WB) клетка көлөмүнө тийгизген таасирин текшердик. PRP же бүт кан менен аралаштырылган бардык глюкоза аралашмаларында тромбоциттердин саны тез жарым-жартылай азайган, бул жарым-жартылай лизиске шайкеш келет. Биринчи мүнөттөн кийин тромбоциттердин саны туруктуу бойдон калган, бул калдык тромбоциттердин тез арада өтө (>2000 мОсм) гипертонуска чейин жайгашышын көрсөтүп турат. Биринчи мүнөттөн кийин тромбоциттердин саны туруктуу бойдон калган, бул калдык тромбоциттердин тез арада өтө (>2000 мОсм) гипертонуска чейин жайгашышын көрсөтүп турат. После первой минуты количество тромбоцитов оставалось стабильным, бул указывает на быструю аккомодацию остаточных тромбоцитов чейин экстремального (>2000 мОсм) гипертонуса. Биринчи мүнөттөн кийин тромбоциттердин саны туруктуу бойдон калган, бул калдык тромбоциттердин экстремалдык (>2000 мОсм) гипертонуска тез жайгашышын көрсөтүп турат.第一分钟后，血小板计数保持稳定，表明残余血小板迅速适应极端（> 2000 mOsm）高渗状态、2000 мОсм）高渗状态、. После первой минуты количество тромбоцитов оставалось стабильным, мында указывает на быструю адаптацию остаточных тромбоцитов к экстремалном (>2000 мОсм) гиперосмолярномы состоянию. Биринчи мүнөттөн кийин тромбоциттердин саны туруктуу бойдон калган, бул калдык тромбоциттердин экстремалдык (>2000 мОсм) гиперосмолярдык абалга тез ыңгайлашуусун көрсөтүп турат.Глюкозанын концентрациясы 25% жана андан жогору болгондо, тромбоциттердин орточо көлөмүнүн (MPV) олуттуу жогорулашы байкалган, бул тромбоциттердин активдешүүсүнүн алгачкы этабын көрсөтүп турат. Тромбоциттердин лизиси же активдешүүсү болобу жана гипертониялык глюкозаны өзүнчө сайуу же PRP менен айкалыштырып колдонуу кошумча клиникалык пайда алып келиши мүмкүнбү же жокпу, аныктоо үчүн кошумча изилдөөлөр талап кылынат.
1950-жылдары америкалык хирург Джордж Хакетт тарамыштарга жана байламталарга пролиферативдик эритме сайып, көптөгөн бейтаптардын муун жана бел оорусун биротоло басаңдата аларын аныктаган. Анын коёндорго жасаган эксперименттери пролиферативдик терапия деп атаган дарылоо ыкмасы тарамыштардын чоңоюшуна жана күчөшүнө алып келерин көрсөттү. Гистологиялык изилдөөлөр бул процессте жаңы коллаген өндүрүлөрүн тастыктады [1].
Алгачкы бир нече он жылдыктарда көптөгөн ар кандай бөлүштүрүү чечимдери колдонулуп келген. 1990-жылдарга чейин көпчүлүк адистер глюкозанын жогорку концентрациясын эң коопсуз жана эң натыйжалуу ыкма деп эсептешкен. Бирок, анын таасир этүү механизми белгисиз бойдон калууда.
Хакеттин эмгегинен кийин 20-кылымда клиникалык изилдөөлөр аз жүргүзүлгөн. Бирок, 2000-жылдары кайрадан кызыгуу пайда болуп, белдин оорушун [2], тизенин остеоартритин [3] жана каптал эпикондилитти [4] дарылоо үчүн пролиферативдик терапиянын бир нече ийгиликтүү клиникалык сыноолору аяктаган.
Ткандардын регенерациясы өзөк клеткаларынын катышуусун талап кылат. Ошондуктан, глюкозанын жогорку концентрациясы кандайдыр бир жол менен өзөк клеткаларынын миграциясын, репликациясын жана дифференциациясын шартташы керек. Биз тромбоциттер кабарчылар катары иштеши мүмкүн жана глюкозанын жогорку концентрациясы тромбоциттердин цитокиндерди жана өсүү факторлорун бөлүп чыгаруусуна алып келиши мүмкүн, ошону менен регенерация процесстерин, айрыкча, өзөк клеткаларынын глюкозанын жогорку концентрациясындагы аймактарга миграциясын күчөтөт деп божомолдойбуз.
Тромбоциттердин активдешүүсү ар дайым клетка ичиндеги кальцийдин көбөйүшүнөн мурун болот [5]. Liu жана башкалар 2008-жылы глюкозанын жогорку деңгээли плазма мембранасындагы өткөөл рецептордук потенциалдын канондук 6-типтеги (TRPC6) каналдарынын активдүүлүгүн жогорулатарын, бул кальций иондорунун тромбоциттерге агылып киришине алып келерин көрсөтүшкөн [6]. Дагы бир изилдөө көрсөткөндөй, микротүтүкчөлөрдүн четки зонасынын кальций иондоруна дуушар болушу четки зонанын релаксациясына, кеңейишине жана деформациясына алып келет, бул өз кезегинде дисктин формасынын сфералык формага өзгөрүшүнө алып келет, натыйжада тромбоциттердин орточо көлөмү (MPV) пайда болот [7].
Бул изилдөөдөгү биздин гипотезабыз, тромбоциттердин глюкозанын жогорку концентрациясына дуушар болушу микротүтүкчөлөрдүн четки зонасына жана клетка ичиндеги чөйрөгө таасир этет, бул MPVнин көбөйүшүнө алып келет.
Бардык катышуучулар изилдөөнүн чоо-жайы түшүндүрүлгөндөн кийин жана үлгүлөрдү алуудан мурун маалымдуу макулдук формасына кол коюшкан. Бул изилдөөдө гематокрити 2% дан жогору болгон PRP үлгүлөрү гана колдонулган, ошондо салыштыруу үчүн эритроциттердин (эритроциттердин) саны жана эритроциттердин орточо корпускулярдык көлөмү (MCV) киргизилиши мүмкүн болгон.
Изилдөө төрт фазада жүргүзүлдү, биринчи фаза PRP, ал эми калган фазалар бүтүн кан болду (1-таблица). Буга чейин сүрөттөлгөндөй [8], бардык салыштырмалуу борбордон чегинүүчү күчтөр (RCF, g-күчү) борбордон чегинүүчү шприцтеги кан тилкесинин ортоңку чекитинен (Rmid, см менен) эсептелген. Биз MPVди тромбоциттердин сезгичтигинин маркери катары жана тромбоциттердин санынын потенциалдуу тромбоциттердин лизисинин индикатору катары колдонууну чечтик, экөөнү тең стандарттуу гематологиялык анализаторлордо оңой өлчөөгө болот.
Биринчи этапта 47 ыктыярчы кан үлгүлөрүн тапшырышты — бир түтүк этилендиаминтетрауксус кислотасы (ЭДТА) жана бир PRP бүтүн кан үлгүсү (натрий цитраты (NaCl, 3%) менен антикоагуляцияланган) (1-таблица). Трокерди дароо түтүккө салыңыз. EDTA үлгүлөрүндө кандын толук анализи (ККК) үч жолу жүргүзүлдү жана ККК анализи үчүн NaCl үлгүлөрү үч жолу талданды, андан кийин PRP жогоруда сүрөттөлгөн ар кандай ыкмалар менен даярдалды [8]. Бардык PRP үлгүлөрү 900–1000 г салмакта центрифугалоо жолу менен даярдалган. Ар бир PRP үлгүсүн вортекс аралаштыргычында 5–10 секунд аралаштырыңыз, андан кийин беш 0,5 мл аликвотту түтүкчөлөргө бөлүңүз.
Тромбоциттердин таасиринин глюкозанын жогорку концентрациясына тийгизген таасирин баалоо үчүн, глюкоза аралашмасынын 0%, 2,5%, 6,25%, 12,5% жана 25% концентрацияларын алуу үчүн суудагы 0%, 5%, 12,5%, 25% жана 50% глюкозанын бирдей өлчөмдөрү (0,5 мл) тромбоциттердин үлгүлөрү менен аралаштырылып, пробиркаларды 15 мүнөт бою пробирка чайкагычында аралаштырылды. Ар бир аралашманын TAC көрсөткүчү 15 мүнөттөн кийин үч жолу талданды. Ар бир пробирка үчүн тромбоциттердин саны (PLT), эритроциттердин саны, MCV жана MPV орточо эсептелди, ал эми бардык PRP үлгүлөрү үчүн тромбоциттердин орточо саны, эритроциттердин саны, MCV жана MPV эсептелди.
Маалыматтарды чогултуунун биринчи этабы аяктагандан кийин, D50W кошулгандан кийин PRP тромбоциттериндеги тромбоциттердин көлөмүнүн олуттуу көбөйгөнүн байкадык. PRP тромбоциттери кандагы бардык тромбоциттерди билдирбейт жана PRP чөйрөсү WB чөйрөсүнөн айырмаланат. Ошондуктан, биз бүтүн канга D50W кошуунун таасиринин экинчи этабын сыноону жүргүзүүнү чечтик.
Экинчи тур үчүн биз "Анализ" бөлүмүндө сүрөттөлгөндөй, биринчи сериянын жыйынтыктарына негизделген 30 үлгүнү тандап алдык. Бул серияда 20 ыктыярчы кан үлгүлөрүн тапшырышкан (1-таблица). Бүтүн кан (1,8 мл) 3 мл шприцке алынып, 0,2 мл 40% NaCl менен антикоагуляцияланган. Бүтүн кан шприци вортекс аралаштыргычы менен беш секунд аралаштырылып, кандын жалпы анализи үч жолу талданган. Анализден кийин, антикоагуляцияланган кан 5 мл шприцтеги 2 мл 50% глюкозага кошулган (глюкозанын акыркы концентрациясы болжол менен 25% (D25) болгон жана 30 мүнөткө чайкоочу түтүккө салынган. 30 мүнөттөн кийин WB шприцтериндеги D25/CBC үч жолу талданган. Ар бир шприцтеги тромбоциттердин саны, эритроциттердин саны, MCV жана MPV орточо эсептелген, ал эми глюкозаны кошуудан мурун жана андан кийин ар бир үлгү үчүн PLT, эритроциттердин саны, MCV жана MPV орточо маанилери эсептелген.
Кандагы тромбоциттер пролиферативдик глюкоза терапиясы учурунда минималдуу инвазивдүү инъекциядан улам гипертоникалык глюкозага көп дуушар болгондуктан жана инъекциядан мурун PRPди гипертоникалык глюкоза менен айкалыштыруу көп кездешпегендиктен, биз 1-бөлүмдө гипертоникалык глюкозаны WB менен айкалыштыруу менен изилдөөнү чечтик. Үчүнчү жана төртүнчү кадамдар. Ар бир этапта 20 ыктыярчы кан антикоагулянттары үчүн 7-8 мл ACD-A (тринатрий цитратын (22,0 г/л) камтыган кислота), лимон кислотасын (8,0 г/л) жана глюкозаны (24,5 г/л), декстроза цитратынын эритмесин) беришти (1-таблица). MPVнин жогорулашы менен байланышкан босоголук пайызды аныктоо үчүн 12,5% дан жогору глюкозанын аралашмалары гана колдонулган. Үчүнчү этапта пробиркага 1 мл кан куюлат. Андан кийин канды вортекс аралаштыргычында 10 секунд аралаштырыңыз, түтүккө 1 мл 30%, 40% же 50% глюкоза кошуп, тиешелүүлүгүнө жараша 15%, 20% жана 25% глюкозанын акыркы концентрациясын алыңыз. Глюкозанын кан үлгүлөрү аралаштырылгандан кийин дароо жалпы кан анализине анализ жүргүзүлүп, 30 мүнөт бою ар бир эки мүнөт сайын кайталанып турду.
Баштапкы аралаштыруу учурунда 1:1 гипертоникалык глюкозаны жана WB же PRP кошуу тромбоциттерди бир нече секунд бою 25% дан жогору концентрацияга дуушар кылат. Төртүнчү кадамда, баштапкы минималдуу чоку концентрациялары менен гипертоникалык глюкозанын таасирин баалоо жана глюкозанын таасиринин жогорку чегин текшерүү үчүн, биз D25W же D50W канга аз өлчөмдө гана кан коштук. Түтүккө 1 мл D25W же D50W салып, үлгүнү 10 секунд чайкап жатып, 0,2 мл WB коштук. Бул учурларда, кан 3-фазадагыдай акыркы концентрациядан 50% жогору эмес, акыркы концентрациядан болжол менен 20% жогору концентрацияда глюкозага дуушар болду, натыйжада глюкозанын акыркы концентрациясы 20,8% жана 41,6% түздү. Аралаш үлгүлөр 3-кадамдагыдай эле убакыт аралыгында талданды.
Ар бир глюкозаны суюлтуу сериясынын биринчи кадамында 30 үлгү алынган, анткени бул пилоттук изилдөө үчүн ылайыктуу үлгүнүн өлчөмү болгон [9]. Ар бир фазанын аягында (биринчи фазаны кошо алганда), бир популяциядагы үзгүлтүксүз натыйжа өзгөрмөсүнүн орточо маанисин баалоо үчүн керектүү үлгүнүн өлчөмүн аныктоо үчүн колдонулган формуланы колдонуп, үлгүнүн өлчөмүнүн адекваттуулугун баалаңыз. Формула n = Z2 x SD2 /E2. Бул теңдемеде Z - Z-балл, SD - стандарттык четтөө, ал эми E - каалаган ката [10]. Биздин альфа 0,05, бул 1,96 Z маанисине туура келет жана биз 5 катасын (пайыз менен) күтөбүз. Ошондуктан, биз n = (1,962 x SD2)/52 үчүн чечим кабыл алабыз. Жыйынтыктар ар бир этап үчүн талап кылынган үлгүнүн өлчөмү чогултулган чыныгы сандан кичине экенин көрсөттү.
1, 3 жана 4-мезгилдерде бирден ашык глюкоза концентрациясын колдонуу менен, ар кандай глюкоза концентрацияларынын таасири 0 убакыт менен ар бир кийинки убакыттын (1-фаза 15 мүнөттө, 3-мезгил 15 мүнөттө) жана төрт 15 секундда, андан кийин ар бир эки мүнөттө ортосундагы бөлчөктүк өзгөрүүнү салыштыруу аркылуу талданган.) Ар бир убакыт мезгили үчүн өзгөрүү ылдамдыктары Манн-Уитни U-тестинин жардамы менен салыштырылган, анткени маалыматтар Шапиро-Уилк нормалдуулук тести менен аныкталгандай нормалдуу бөлүштүрүүнү ээрчиген эмес. Биринчи, үчүнчү жана төртүнчү кадамдарда (жалпысынан беш) бирден 1ге чейинки анализ жүргүзүлгөндүктөн, каалаган альфа маанисин ≤0,01ге, бирок ≤0,05ке эмес, тууралоо үчүн Бонферрони коррекциясы жүргүзүлгөн.
Гипертоникалык декстрозанын бардык концентрацияларында тромбоциттердин санынын азайышы жана декстрозанын концентрациясы >12,5% болгондо PRP тромбоциттеринде MPV көбөйүшү: PRP тромбоциттеринин саны баштапкы канга салыштырмалуу концентрациядан бирден беш эсеге чейин жогорулаган, бул ыкмага жараша өзгөрүп турат (сүрөттөлгөн эмес). Гипертоникалык декстрозанын бардык концентрацияларында тромбоциттердин санынын азайышы жана декстрозанын концентрациясынын >12,5%ында PRP тромбоциттеринде MPV көбөйүшү: PRP тромбоциттеринин саны баштапкы канга салыштырмалуу концентрациядан бирден беш эсеге чейин жогорулаган, бул ыкмага жараша өзгөрүп турат (сүрөттөлгөн эмес). Уменьшение количества тромбоцитов при всех контролях гипертонические декстрозы жана увеличение MPV в тромбоцитах PRP при контролии декстрозы > 12,5%: PRP количество тромбоцитов в 1-5 разрядка сравнению развития по сравнению размещениями по сравнениемый кровью, в изходной цельной кровью. Декстрозанын бардык гипертониялык концентрацияларында тромбоциттердин санынын азайышы жана декстрозанын >12,5% ​​концентрациясында PRP тромбоциттеринде MPV көбөйүшү: PRP тромбоциттеринин саны баштапкы канга салыштырмалуу 1-5 эсе көбөйгөн, бул ыкмага жараша (көрсөтүлгөн эмес). ).在> 12.5% ​​的葡萄糖浓度下，所有浓度的高渗葡萄糖降低血小板计数，PRP 血V增加：与基线全血相比，PRP 血小板计数从浓度的1 倍上升到5 倍，因方泂＂（而 Глюкоза концентрациясы >12,5% болгондо, глюкозанын жогорку концентрациясы кандын курамын азайтат, PRP канындагы MPV жогорулайт: 与基线全血 менен салыштырганда, PRP канындагы курамы концентрацияга караганда 1ден 5 эсеге чейин көбөйөт (сүрөттөлбөйт). При топтолгон глюкоздар >12,5% бардык топтолгон гипертоникалык глюкоздор, а MPV повышали в тромбоцитах PRP: количество тромбоцитов PRP увеличивалось от 1-дан 5-к-ка чейинки ыкмаларды чогултуу үчүн сравнению сравнению сходной резервуаровой резервациялар, ). Глюкоза концентрациясы >12,5% болгондо, бардык гипертониялык глюкоза концентрациялары тромбоциттер санын азайтып, PRP тромбоциттеринде MPV көбөйгөн: PRP тромбоциттеринин саны баштапкы кандагы концентрацияга салыштырмалуу 1ден 5 эсеге чейин көбөйгөн, бул ыкмага жараша (сүрөттөлгөндөй).1-сүрөттө тромбоциттердин саны сууда суюлтулгандан кийин дээрлик 75% га, ал эми глюкозанын ар кандай концентрациялары менен 15 мүнөт суюлтулгандан кийин баштапкы PRP жана көлөмгө ылайыкташтырылган 1:1 суюлтууга (көлөмдү оңдоо менен 1- k1) салыштырмалуу 20-30% га азайганы көрсөтүлгөн. k -1 асылдандыруу).1 асылдандыруу).
Ар бир суюлтуудагы клеткалардын саны суюлтууга чейинки баштапкы сандын үлүшү катары көрсөтүлөт.
MPV PRP өндүрүшү учурунда минималдуу түрдө төмөндөгөн, суюлтуу концентрациясы андан ары сууда же глюкозада (25% PRP глюкоза аралашмасын кошо алганда) 12,5% га чейин өзгөрбөстөн жана 50% глюкоза эритмесинде суюлтулгандан кийин 20% дан ашык жогорулаган (2-сүрөт). Ал эми эритроциттер H2Oдон башка эч кандай суюлтууда көлөмдө олуттуу өзгөрүү байкаган эмес.
Ар бир суюлтуудагы клеткалардын орточо көлөмү суюлтууга чейинки баштапкы көлөмдүн пайызы катары көрсөтүлөт.
50% глюкозага дуушар болгон (25% глюкоза менен формулалоо үчүн) BCде тромбоциттердин санынын окшош, бирок анча байкалбаган азайышы жана CVRдин жогорулашы байкалган. 2-таблицада 50% декстрозада суюлтулган бүт кандагы клеткалардын саны жана клеткалардын көлөмү 50% декстрозада суюлтулган 1-фазадагы PRP маалыматтары менен салыштырылат. Эритроциттердин санынын жана эритроциттердин MCVдеги өзгөрүүлөр айкын болгон жок жана биздин көңүлүбүздүн борборунда болгон жок.
SD = стандарттык четтөө, MD = топтордун ортосундагы орточо айырма, SE = орточо айырманын стандарттык четтөөсү, RBC = эритроциттер, PLT = тромбоциттер, PRP = тромбоциттерге бай плазма, WB = бүт кан
D50W WB кошулгандан кийин, суюлтууга туураланган тромбоциттердин жоготуу пайызы 7,7% түздү (310±73 vs. 286±96), ал эми D50Wдагы PRP суюлтуудагы 17,8% (664±348 vs. 544±277). MPV WB 16,8% га жогорулаган (10,1 ± 0,5тен 11,8 ± 0,6га чейин), ал эми MPV PRP 26% га жогорулаган (9,2 ± 0,8 vs. 11,6 ± 0,7). Тромбоциттердин санынын азайышындагы жана MPV көбөйүшүндөгү орточо айырмачылыктар PRP менен бир кыйла чоң болгону менен, WB ичиндеги тромбоциттердин санынын азайышындагы өзгөрүүлөр дээрлик олуттуу болгон (310 ± 73төн 286 ± 96га чейин (-7,7%); p = .06) жана MPVнин көбөйүшү олуттуу болгон (10,1 ± 0,5тен 11,8 ± 0,6га чейин (+16,8) p < .001). Тромбоциттердин санынын азайышындагы жана MPV көбөйүшүндөгү орточо айырмачылыктар PRP менен бир кыйла чоң болгону менен, WB ичиндеги тромбоциттердин санынын азайышындагы өзгөрүүлөр дээрлик олуттуу болгон (310 ± 73төн 286 ± 96га чейин (-7,7%); p = .06) жана MPVнин көбөйүшү олуттуу болгон (10,1 ± 0,5тен 11,8 ± 0,6га чейин (+16,8) p < .001).Тромбоциттердин санынын азайышындагы жана CVR көбөйүшүндөгү орточо айырмачылыктар PRP менен бир кыйла чоң болгону менен, WB ичиндеги тромбоциттердин санынын азайышындагы өзгөрүүлөр дээрлик олуттуу болгон (310 ± 73төн 286 ± 96га чейин (-7,7%); p = 0,06).увеличение MPV было значительным (от 10,1 ± 0,5 до 11,8 ± 0,6 (+16,8) p < 0,001). MPVнин көбөйүшү олуттуу болгон (10,1 ± 0,5тен 11,8 ± 0,6га чейин (+16,8) p < 0,001).尽管PRP 在血小板计数减少和MPV 增加方面的平均差异显着更大，但WB内血小板计数减少的变化几乎是显着的（310 ± 73 至286 ± 96 (-7,7%)；p = .06）和MPV的增加是显着的（10,1 ± 0,5 到11,8 ± 0,6 (+16,8) p < .001）。Каттоо PRP减少 的 几乎 是 显着 的 （（（310 ± 73 至 286 ± 96 (-7,7%) ； p = .06）和MPV 的墀是 的增1.） ± 0,5 到11,8 ± 0,6 (+16,8) p < .001）。WB ичинде тромбоциттердин санынын азайышынын өзгөрүшү дээрлик олуттуу болгон (310 ± 73төн 286 ± 96га чейин (-7,7%); p = 0,06), бирок PRP тромбоциттердин санынын азайышы жана MPV көбөйүшүндө орточо айырмачылыктарды бир кыйла чоң кылган жана MPV көбөйүшү олуттуу болгон.(от 10,1 ± 0,5 до 11,8 ± 0,6 (+16,8) р < 0,001). (10,1 ± 0,5тен 11,8 ± 0,6га чейин (+16,8) p < 0,001).
MPVде олуттуу өзгөрүүнү көрүү үчүн 20% глюкозанын акыркы концентрациясы талап кылынган, бирок MPVдеги өзгөрүү 25% акыркы концентрацияда айкыныраак болгон. Тромбоциттердин жоголушу баштапкы төмөндөөдөн кийин турукташкан. CVRдин баштапкы кескин төмөндөшүн байкадык, бирок CVR 25% акыркы глюкоза концентрациясында тез калыбына келген, бул 20% жана 15% акыркы глюкоза концентрацияларында байкалган CVR деңгээлинен бир топ жогору болгон (3-сүрөт жана 3-таблицанын сол жагында; боёлгон кутучалар). 0,01 Бонферрони коррекциясы менен p-маанилери ≤ альфаны көрсөтөт). Ошондой эле PLT санынын баштапкы кескин төмөндөшү байкалган, ал 0-15 секунддун баштапкы фазасында байкалган жана андан кийин туруктуу бойдон калган (15 секунддан 30 мүнөткө чейин; 4-таблицанын сол жагында).
Канга ар кандай концентрациядагы глюкозаны кошуу башында MPVнин тез төмөндөшүнө алып келген, андан кийин концентрацияга көз каранды 20% дан ашык калыбына келген. Легенда суюлтулгандан кийинки глюкозанын концентрациясын көрсөтөт. D15, D20 жана D25 1:1 суюлтуу менен жүргүзүлдү. D21 жана D41 1:5 суюлтуу менен жүргүзүлдү.
4-таблицада гипертониялык глюкозада суюлтулганда тромбоциттердин санынын өзгөрүшү көрсөтүлгөн. Биз 1:1 суюлтууда жана 1:5 суюлтууда PLT санынын дароо төмөндөшүнүн ортосундагы дозага көз каранды байланышты байкадык. Бир топ катары 1:1 суюлтууларды 1:5 суюлтуулар менен салыштырганда, 1:1 тобунда тромбоциттердин саны 1:5 тобуна караганда 66±48000 (23%) азыраак, ал эми 1:5 тобунда 99±69000 (37%), p = 0.014 азыраак дароо төмөндөгөн. Биринчи өлчөө чекитинде баштапкы төмөндөөдөн кийин, глюкозанын пайызы катары тромбоциттердин саны турукташкан (4-сүрөт).
Глюкозага бүтүн кан 1:1 катышында кошулганда, тромбоциттердин саны болжол менен 25% га азаят. Бирок, бүтүн кан 1:5 катышында кошулганда, азайуу алда канча көп болгон – болжол менен 50%.
41% глюкоза MPVди 25% же 21%га караганда тезирээк жана кескин жогорулаткан. MPV жыйынтыктары 3-сүрөттө көрсөтүлгөн. Башка бардык суюлтууларда 50% глюкоза кошулгандан кийин MPVдин баштапкы дароо төмөндөшү байкалган жок. 25% глюкозаны колдонгондо (акыркы суюлтууда глюкозанын концентрациясы 20,8%), MPVдин өзгөрүшү 1:1 суюлтуудагы 20% глюкозанын өзгөрүшүнө окшош болгон (3-сүрөт). MPVдеги өзгөрүүлөр башында 41% аралаш концентрацияда 25%га караганда көбүрөөк болгону менен, 16 мүнөттөн кийин 41% жана 25% ортосундагы MPVдеги айырмачылык мындан ары олуттуу болбой калган (3-таблица, оңдо). Ошондой эле, 25% глюкоза MPVди 20,8%га караганда натыйжалуураак жогорулатканы кызыктуу.
Бул in vitro изилдөө биздин гипотезабызды жарым-жартылай тастыктады. Декстроза аралашмасынан улам тромбоциттердин жарым-жартылай эришин, тромбоциттердин өтө гипертоникалык абалга чейин тез жайгашуусун жана гипертониялык декстрозанын 25% дан ашык концентрациясына жооп катары MPVнин олуттуу жогорулашын көрсөттү. Декстроза аралашмасынан улам тромбоциттердин жарым-жартылай эришин, тромбоциттердин өтө гипертоникалык абалга чейин тез жайгашуусун жана гипертониялык декстрозанын 25% дан ашык концентрациясына жооп катары MPVнин олуттуу жогорулашын көрсөттү. Он показал потенциальный частичный лизис тромбоцитов примесью декстрозы, быструю аккомодацию тромбоцитов до экстремального гипертонуса и значительное повышение MPV в ответ на гипертонической локализация декстрозы > 25%. Декстроза менен тромбоциттердин жарым-жартылай эризи, тромбоциттердин тез арада гипертонияга чейин жайгашуусу жана декстрозанын гипертониялык деңгээли >25% болгондо MPVнин олуттуу жогорулашы байкалган.它显示出通过葡萄糖混合物潜在的部分血小板溶解，血小板快速适应极端高渗，以及响应> 25% 浓度的高渗葡萄糖时MPV 显着上升。它 显示 出 通过 葡萄糖 潜在 的 部分 血小板 溶解 血小板 快速 适应 快速 适应 漘丗响应> 25% 浓度 高渗 葡萄糖 时 时 mpv 显着。。。。。 Ал потенциалдык частичный лизис тромбоцитов смесями глюкозой, быструю адаптацию тромбоцитов к экстремальному гипертонусу жана значительное увеличение MPV в ответ на локализация гипертонической голюкозы > 25%. Бул глюкоза аралашмалары менен тромбоциттердин жарым-жартылай эришин, тромбоциттердин өтө гипертоникалык абалга тез адаптацияланышын жана гипертониялык глюкоза >25%га жооп катары MPVнин олуттуу жогорулашын көрсөтөт.Баштапкы көбөйүү глюкозанын 41,6% таасири астында максималдуу болгон, бирок MPVнин көбөйүшү таасирден болжол менен 20 мүнөттөн кийин глюкозанын 25% таасирине жакындаган.
Тромбоциттердин концентрациясына глюкоза таасир этет. Биз глюкозанын бардык суюлтууларында PLT көлөмү азайганын байкадык. PRP сериясынын H2O (0%) суюлтууларындагы тромбоциттердин санынын кескин төмөндөшү осмотикалык лизис менен байланыштуу болушу мүмкүн. Же болбосо, бул тромбоциттердин топтолушунан келип чыккан артефакт болушу мүмкүн, бирок бул суюлтууда MPV өзгөрүүсүнүн жоктугунан айырмаланып турат. Бул ачылыш кээ бир тромбоциттердин гипоосмолярдуулукка өтө сезгич экенин билдирет.
Глюкозанын бардык 1:1 суюлтууларында PLT көлөмү D5W (252 мОсмде гипотоникалык) боюнча да 20-30% га төмөндөгөн, бул глюкозанын спецификалык осмостук эмес таасирин көрсөтүшү мүмкүн, анткени PLT да, MPV да глюкозанын концентрациясынын үч эсе жогорулашында өзгөрүүсүз калган. D5W дан D25W га чейин. Чындыгында, PLT концентрациясы осмолярдуулуктун жогорулашы менен бир аз жогорулаган.
PLTнин 1:1 жана 1:5 суюлтууларынын ортосундагы төмөндөшү эрүү эффектисинин баштапкы жана акыркы глюкоза концентрациясына көз каранды экенин билдирет. Эгерде ал баштапкы концентрацияга гана көз каранды болсо, анда PLTнин 1:1 концентрацияларынын ортосундагы төмөндөшүндө айырмачылык болот деп күтсө болот. Бирок биз андай эмеспиз. Эгерде лизис эффектиси акыркы глюкоза концентрациясына гана көз каранды болсо, анда биз 20% 1:1 суюлтуу менен 20,8% 1:5 суюлтуунун ортосунда чоң айырмачылык күтпөйбүз. Бирок биз муну жасадык.
Эгерде тромбоциттердин жоголушу тромбоциттердин лизисине байланыштуу болсо, анда жарым-жартылай лизат пайда болот, андан кийин цитокиндер жана өсүү факторлору клеткадан тышкаркы чөйрөгө чыгарылат. Бир нече изилдөөлөр тромбоцит лизатынын пролиферация эритмеси катары PRP сыяктуу эле натыйжалуу экенин көрсөттү [11]. PRP өзү пролиферацияны дарылоо үчүн натыйжалуу чечим экени көрсөтүлдү [12-14].
Активдүү эмес тромбоциттер бир нече ички түзүлүштөр менен бекемделген диск түрүндө айланышат. Активдештирүү учурунда алар тоголок же амеба формасын алышат, натыйжада көлөм көбөйөт. Көлөмдүн көбөйүшү беттик аянтты көбөйтүүнү талап кылат, бул ачык түтүкчө системасынын (OCS) экструзиясынын жана мембранага экзоциттик гранулдардын кошулушунун натыйжасы. Гипертоникалык глюкозадан улам пайда болгон MPV көбөйүшү бул механизмдердин бирине же экөөнө тең тиешелүүбү же жокпу, азырынча аныктала элек, бирок эгерде экинчиси болсо, анда MPV көбөйүшү дегрануляцияны көрсөтөт.
Бул изилдөө PRP же бүт кан тромбоциттериндеги глюкозанын жогорку концентрациясына дуушар болуу 15 мүнөттүн ичинде MPVнин жогорулашына алып келгенин, глюкозанын концентрациясы тиешелүүлүгүнө жараша 25% жана 41,6% түзгөнүн көрсөттү.
Тромбоциттердин MPV көрсөткүчүнүн жогорулашы кальцийдин агымына жооп катары айланадагы микротүтүкчөлөрдүн түйүнчөлөрүнүн кеңейишинен улам болушу мүмкүн. Liu жана башкалар. Глюкоза тромбоциттердин TRPC6 каналы аркылуу кальцийдин агымын ортомчулук кылаары көрсөтүлгөн [6]. Биздин гипотеза боюнча, глюкоза микротүтүкчөлөрдүн түйүнчөлөрүнүн бошоңдошун шарттайт, бул MPVнин жогорулашына жана тромбоциттердин сезгичтигинин жана/же активдешүүсүнө алып келет. Бирок, биздин жыйынтыктарга караганда, бул окуянын бир гана бөлүгү. Биздин тесттерде D25Wден төмөн концентрация MPVнин жогорулашына алып келген жок. Биз 12,5% жана 25% ортосундагы глюкозанын концентрациясына дуушар болууну текшербегендиктен, биздин 1-фазадагы жыйынтыктар глюкозанын концентрациясынын бул диапазонунда MPVнин жогорулашына алып келүүчү босого болушу мүмкүн экенин көрсөтүп турат. 3 жана 4-стадиялардагы андан аркы тесттер 20-25% глюкоза мунун босогосу болуп көрүнөрүн көрсөттү, бирок эмне үчүн экени белгисиз бойдон калууда.
Ошондой эле, центрифугалоодон кийин MPVнин ~9% төмөндөшүн байкадык. MPVнин бул төмөндөшү центрифуганын эритроцит катмарында чоңураак жана тыгызыраак тромбоциттердин камалып калышына байланыштуубу же жокпу, белгисиз. Бул байкоо клиниктер үчүн маанилүү болушу мүмкүн, анткени ал PRP тромбоциттери WB тромбоциттеринин кичирээк жана тыгыздыгы азыраак дегенди билдириши мүмкүн.
Мурунку изилдөөдө биз PRPди кол менен даярдоо арзан экенин көрсөткөнбүз [8]. Эгерде глюкоза ткандардын тромбоциттерин же PRPди сезгич кылып, аларды активдештирүүгө көбүрөөк сезгич кылса же PRP жарым-жартылай лизат касиеттери менен өндүрүлсө, бул регенерацияны күчөтүп, терапияга болгон муктаждыкты азайтышы мүмкүн. Ошондуктан, PRP менен жогорку концентрацияланган глюкозанын айкалышы PRPге же глюкозага өзүнчө караганда үнөмдүү болушу мүмкүн.
Биздин изилдөөнүн бир нече кемчиликтери бар. Биринчиден, биз бир нече ар кандай ыкмалар менен алынган PRPди колдонобуз. Бул карама-каршы натыйжаларга алып келиши мүмкүн. Экинчиден, тромбоциттердин активдешүүсү болгон-болбогонун так аныктоо үчүн биз үлгүлөрүбүздүн биринин да биохимиялык анализин жүргүзө алган жокпуз. Альфа грануласынын дегрануляциясынын даражасын же бар экендигин жакшыраак түшүнүү үчүн биз P-селектинди, тромбоцит факторун, моноцитарлык тромбоцит агрегаттарын же тромбоциттердин активдешүүсүнүн башка маркерлерин өлчөгүбүз келет, бирок бул изилдөөнүн алкагына кирбейт. Үчүнчүдөн, биз глюкозага дуушар болгон тромбоциттерде MPVнин көбөйүшү микротүтүкчөлөрдүн чаташкан жерлерине тийгизген таасиринен улам болгонун электрондук микроскопия же башка ыкмалар менен тастыктай алган жокпуз.
25% глюкоза кошулган WB же PRP аралашмалары MPVди жогорулатып, тромбоциттердин активдешүүсүнүн башталышын билдирген, бирок бул изилдөө агрегациянын же дегрануляциянын өнүгүшүн көрсөткөн эмес. Гипертоникалык глюкоза аралашмасы тромбоциттердин жоголушуна алып келген, бул литикалык эффект болушу мүмкүн. Тромбоциттердин жарым-жартылай активдешүүсү же лизиси тромбоциттерди сайгандан кийин ткандардын регенерациясына алып келиши мүмкүн. Бул өзгөрүүлөр кандай клиникалык кесепеттерге алып келиши мүмкүн экени белгисиз. Андан аркы изилдөөлөр активдешүүнүн же лиздин так өлчөөлөрүн көрсөттү жана WB же PRP кошулган гипертониялык глюкоза аралашмаларынын ар кандай клиникалык таасирлерин баалады.
Глюкоза пролиферативдик терапиясы – бул клиникалык изилдөөлөрдү тездик менен кеңейтип жана колдоп жаткан жөнөкөй жана арзан регенеративдик терапия. Бул изилдөө, эгерде тастыкталса, пролиферативдик терапиянын регенеративдик механизминин бир бөлүгүн түшүнүүгө жардам бере турган физиологиялык механизмди сунуштайт.
АКШнын Канзас-Сити шаарындагы Миссури университетинин биомедициналык жана саламаттыкты сактоо информатикасы, Канзас-Сити медициналык мектеби
Адамдар: Бул изилдөөнүн бардык катышуучулары макулдук беришкен же беришкен эмес. Эл аралык Клеткалык Медицина Коому ICMS-2017-003 бекитүүсүн чыгарды. Төмөнкү протокол Эл аралык Клеткалык Медицина Коомунун Институционалдык Карап Чыгуу Кеңеши тарабынан андан ары колдонуу үчүн бекитилген: Аталышы: Тромбоциттерге бай плазма дарысынын чыгышын баштапкы CBC тромбоциттердин санына негизделген эсептөө. Жаныбарлар: Бардык авторлор бул изилдөөгө эч кандай жаныбарлар же ткандар катышпаганын ырасташты. Кызыкчылыктардын кагылышуусу: ICMJE Бирдиктүү Ачыктоо Формасына ылайык, бардык авторлор төмөнкүлөрдү билдиришет: Төлөм/кызмат көрсөтүү жөнүндө маалымат: Бардык авторлор тапшырылган иш үчүн эч кандай уюмдан каржылык колдоо албаганын билдиришет. Каржылык мамилелер: Бардык авторлор тапшырылган ишке кызыкдар болушу мүмкүн болгон эч кандай уюм менен учурда же акыркы үч жылдын ичинде каржылык мамилелери жок экенин билдиришет. Башка мамилелер: Бардык авторлор тапшырылган ишке таасир этиши мүмкүн болгон башка мамилелер же иш-аракеттер жок экенин билдиришет.
Харрисон Т.Э., Боулер Дж., Ривз К. жана башкалар. (2022-жылдын 17-майы) Глюкозанын тромбоциттердин санына жана көлөмүнө тийгизген таасири: регенеративдик медицинага тийгизген таасири. Cure 14(5): e25081. doi:10.7759/cureus.25081
© Copyright 2022 Harrison et al. Бул Creative Commons Attribution License CC-BY 4.0 шарттары боюнча таратылган ачык жеткиликтүү макала. Баштапкы автору жана булагын көрсөтүү менен каалаган каражатта чексиз колдонууга, таратууга жана көчүрүүгө уруксат берилет.