«Ez ezazu inoiz zalantzan jarri herritar pentsakor eta dedikatu talde txiki batek mundua alda dezakeela. Izan ere, bakarra da hor».
Cureus-en eginkizuna argitalpen medikoen eredu zaharra aldatzea da, non ikerketak aurkeztea garestia, konplexua eta denbora asko eskatzen duen eredua izan daitekeen.
Plaketaz aberatsa den plasma/prp, ehunen birsorkuntza, plaketen aktibazioa, glukosaren ugalketa-terapia, plaketak, ugalketa-terapia
Aipatu artikulu hau honela: Harrison TE, Bowler J, Reeves K, et al. (2022ko maiatzaren 17a) Glukosak plaketen kopuruan eta bolumenean duen eragina: medikuntza birsortzailerako inplikazioak. Cure 14(5): e25081. doi:10.7759/cureus.25081
Plaketa-plasma aberatsa (PRP) eta glukosa hipertonikoaren soluzioak normalean erabiltzen dira injekzioetarako medikuntza birsortzailean, batzuetan elkarrekin. Glukosa hipertonikoak plaketen lisian eta aktibazioan duen eragina ez da lehenago jakinarazi. Glukosa-kontzentrazio altuak plaketa eta eritrozitoen kopuruetan duen eragina probatu genuen, baita PRP eta odol osoan (WB) duten zelulen bolumenetan ere. Plaketa-kopuruaren murrizketa partzial azkarra gertatu zen PRP edo odol osoarekin nahastutako glukosa-nahasketa guztiekin, lisi partzialarekin bat etorriz. Lehenengo minutuaren ondoren, plaketen kopurua egonkor mantendu zen, eta horrek iradokitzen du hondar plaketen egokitzapen azkarra muturreko (>2000 mOsm) hipertonikotasunera. Lehenengo minutuaren ondoren, plaketen kopurua egonkor mantendu zen, eta horrek iradokitzen du hondar plaketen egokitzapen azkarra muturreko (>2000 mOsm) hipertonikotasunera. После первой минуты количество тромбоцитов оставалось стабильным, что указывает на зывает на юцомы остаточных тромбоцитов до экстремального (>2000 мОсм) гипертонуса. Lehenengo minutuaren ondoren, plaketen kopurua egonkor mantendu zen, eta horrek adierazten du gainerako plaketen egokitzapen azkarra muturreko (>2000 mOsm) hipertonikotasunera.第一分钟后，血小板计数保持稳定，表明残余血小板迅速适应极端（> 2000 mOsm）高渗状态。2000 mOsm）高渗状态。 После первой минуты количество тромбоцитов оставалось стабильным, что указывает на зывает на зывает на боцитов оставалось стабильным остаточных тромбоцитов к экстремальному (>2000 мОсм) гиперосмолярному состоянию. Lehenengo minutuaren ondoren, plaketen kopurua egonkor mantendu zen, eta horrek adierazten du gainerako plaketak muturreko (>2000 mOsm) egoera hiperosmolarrera egokitzapen azkarra izan direla.% 25eko edo gehiagoko glukosa-kontzentrazioek plaketen batez besteko bolumenaren (MPV) igoera nabarmena eragin zuten, eta horrek plaketen aktibazioaren fase goiztiarra adierazten du. Ikerketa gehiago behar dira plaketen lisia edo aktibazioa gertatzen den zehazteko, eta glukosa hipertonikoaren injekzioek, bakarrik edo PRPrekin konbinatuta, onura kliniko gehigarria eman dezaketen zehazteko.
1950eko hamarkadan, George Hackett zirujau estatubatuarrak aurkitu zuen paziente askoren artikulazioetako eta bizkarreko mina betirako arindu zezakeela tendoi eta lotailuetan ugalketa-soluzio bat injektatuz. Untxiekin egindako esperimentuek erakutsi zuten tratamenduak, berak ugalketa-terapia deitu zuenak, tendoiak handitu eta indartu egiten zituela. Azterketa histologikoek baieztatu dute kolageno berria sortzen dela prozesu horretan [1].
Lehenengo hamarkadetan, banaketa-irtenbide asko probatu ziren. 1990eko hamarkadarako, profesional gehienek glukosa-kontzentrazio altuak zirela uste zuten metodorik seguruena eta eraginkorrena. Hala ere, ekintza-mekanismoa ez dago argi oraindik.
XX. mendean Hackett-en lanaren ondoren, ikerketa kliniko gutxi egin ziren. Hala ere, 2000ko hamarkadan interesa berpiztu zen eta terapia proliferatiboaren hainbat saiakuntza kliniko arrakastatsu burutu ziren bizkarreko beheko mina [2], belauneko osteoartritisa [3] eta epikondilitis laterala [4] tratatzeko.
Ehunen birsorkuntzak zelula amen parte-hartzea eskatzen du. Beraz, glukosa kontzentrazio altuek nolabait zelula amen migrazioa, erreplikazioa eta bereizketa eragin behar dituzte. Hipotesi gisa planteatzen dugu plaketak mezulari gisa joka dezaketela eta glukosa kontzentrazio altuek plaketak zitokinak eta hazkuntza faktoreak askatzea eragin dezaketela, horrela birsorkuntza prozesuak sustatuz, batez ere zelula amen migrazioa glukosa kontzentrazio handiko eremuetara.
Plaketen aktibazioa beti dator aurretik zelula barneko kaltzioaren igoera [5]. Liu et al.-ek 2008an erakutsi zuten glukosa maila altuek TRPC6 motako 6. errezeptore potentzial kanonikoen kanalen jarduera handitzen dutela mintz plasmatikoan, eta horrek kaltzio ioien sarrera eragiten duela plaketetara [6]. Beste ikerketa batek erakutsi zuen mikrotubulu-eremu marjinala kaltzio ioien eraginpean jartzeak eremu marjinalaren erlaxazioa, hedapena eta deformazioa eragiten dituela, eta horrek, aldi berean, forma diskotik esferikoara aldatzea eragiten duela, eta ondorioz, plaketen batez besteko bolumena (MPV) [7].
Gure hipotesia da plaketak glukosa kontzentrazio altuen eraginpean jartzeak mikrotubuluetako eremu marjinala eta ingurune intrazelularra eragiten duela, MPV handitzea eraginez.
Parte-hartzaile guztiek baimen informatua sinatu zuten ikerketaren xehetasunak azaldu ondoren eta laginak jaso aurretik. Ikerketa honetan, % 2 baino hematokrito handiagoa zuten PRP laginak bakarrik erabili ziren, eritrozitoen kopurua eta globulu gorrien batez besteko bolumen korpuskularra (MCV) konparaziorako sartu ahal izateko.
Ikerketa lau fasetan egin zen, lehenengo fasea PRP izan zen eta gainerako faseak odol osoa (1. taula). Aurretik deskribatu bezala [8], indar zentrifugo erlatibo guztiak (RCF, g-indarra) odol-zutabearen erdiko puntutik (Rmid, cm-tan) kalkulatu ziren xiringa zentrifugoan. MPV erabiltzea aukeratu genuen plaketen sentsibilizazio-markatzaile gisa eta plaketen kopurua plaketen lisi potentzialaren adierazle gisa, eta biak erraz neur daitezke hematologia-analizatzaile estandarretan.
Lehenengo fasean, 47 boluntariok odol laginak eman zituzten: etilendiaminotetraazetiko azido (EDTA) hodi bat eta PRP odol lagin oso bat (sodio zitratoarekin antikoagulatua (NaCl, % 3)) (1. taula). Jarri kulunkaria hodian berehala. Odol-kontaketa osoa (CBC) egin zen EDTA laginetan hirukoiztuta, eta NaCl laginak hirukoiztuta aztertu ziren CBC analisietarako, eta ondoren PRP prestatu zen goian deskribatutako hainbat metodoren bidez [8]. PRP lagin guztiak 900-1000 g-tan zentrifugatuz prestatu ziren. Nahastu PRP lagin bakoitza zurrunbilo-nahasgailu batean 5-10 segundoz, eta ondoren banatu bost 0,5 ml-ko alikuota hodietan.
Plaketen esposizioak glukosa-kontzentrazio altuetan duen eragina ebaluatzeko, uretan % 0, % 5, % 12,5, % 25 eta % 50eko glukosa kantitate berdinak (0,5 ml) nahastu ziren plaketen laginekin, glukosa-nahastearen % 0, % 2,5, % 6,25, % 12,5 eta % 25eko kontzentrazioak lortzeko, eta hodiak probeta-astingailu batean nahastu ziren 15 minutuz. Nahaste bakoitzaren TAC hirukoiztuta aztertu zen 15 minutu igaro ondoren. Plaketen kopurua (PLT), eritrozitoen kopurua, MCV eta MPV batez bestekoak kalkulatu ziren hodi bakoitzerako, eta plaketen kopuruaren, eritrozitoen kopuruaren, MCV eta MPV batez bestekoak kalkulatu ziren PRP lagin guztientzat.
Datuen bilketaren lehen fasea amaitu ondoren, D50W gehitu ondoren PRP plaketetan plaketen bolumenaren igoera nabarmena ikusi genuen. PRP plaketek ez dituzte zertan odoleko plaketa guztiak ordezkatu, eta PRP medioa WB mediotik desberdina da. Hori dela eta, bigarren faseko saiakuntza bat egitea erabaki genuen D50W odol osoari gehitzearen eragina aztertzeko.
Bigarren txandarako, 30eko lagin-tamaina aukeratu genuen lehenengo serieko emaitzetan oinarrituta, Analisia atalean deskribatzen den bezala. Serie honetan, 20 boluntariok eman zituzten odol-laginak (1. taula). Odol osoa (1,8 ml) 3 ml-ko xiringa batean sartu eta % 40ko NaCl 0,2 ml-rekin antikoagulatu zen. Odol osoko xiringa bost segundoz nahastu zen zurrunbilo-nahasgailu batekin eta hemorragia hirukoiztuta aztertu zen. Analisiaren ondoren, odol antikoagulatua 2 ml-ko % 50eko glukosari gehitu zitzaion 5 ml-ko xiringa batean (glukosa-kontzentrazio finala % 25 ingurukoa zen (D25)) eta astintzeko hodi batean jarri zen 30 minutuz. 30 minutu igaro ondoren, D25/hemorragia zuriko xiringetan hirukoiztuta aztertu ziren. Xiringa bakoitzeko plaketen kopurua, eritrozitoen kopurua, MCV eta MPVren batez bestekoa kalkulatu zen, eta PLT, eritrozitoen kopurua, MCV eta MPVren batez bestekoa kalkulatu zen lagin bakoitzerako glukosa gehitu aurretik eta ondoren.
Odoleko plaketak glukosa hipertonikoarekiko esposizioa izaten dutenez glukosa proliferatiboaren terapian zehar, injekzio gutxieneko inbaditzailea dela eta, eta ez denez ohikoa PRP glukosa hipertonikoarekin konbinatzea injekzioaren aurretik, erabaki genuen glukosa hipertonikoa WBrekin konbinatuta aztertzea 1. atalean, Hirugarren eta laugarren urratsetan. Fase bakoitzean, 20 boluntariok 7-8 ml ACD-A eman zituzten (trisodio zitratoa (22,0 g/l), azido zitrikoa (8,0 g/l) eta glukosa (24,5 g/l) dituen azidoa, dextrosa zitratoaren disoluzioa) odoleko antikoagulatzaileetarako (1. taula). % 12,5 baino gehiagoko glukosa nahasketak bakarrik erabili ziren MPV-ren igoerarekin lotutako atalase-ehunekoa zehazteko. Hirugarren fasean, 1 ml odol jartzen da probeta batean. Ondoren, nahastu odola zurrunbilo-nahasgailu batean 10 segundoz, % 30eko glukosa, % 40ko glukosa edo % 50eko glukosa 1 ml gehituz hodira, % 15eko, % 20ko eta % 25eko glukosa-kontzentrazio finala lortzeko, hurrenez hurren. Glukosa-odoleko laginak CBC detektatzeko aztertu ziren nahastu ondoren berehala, eta bi minuturo errepikatu ziren 30 minutuz.
Hasierako nahasketan, glukosa hipertonikoaren 1:1 proportzioan WB edo PRP gehitzeak plaketak % 25etik gorako kontzentrazioetan jartzen ditu hainbat segundoz. Laugarren urratsean, hasierako gailur kontzentrazio minimoekin glukosa hipertonikoaren eragina ebaluatzeko eta glukosaren efektuaren goiko muga probatzeko, odol kantitate txiki bat bakarrik gehitu genion D25W edo D50W-ri. Jarri 1 ml D25W edo D50W hodi batean eta gehitu 0,2 ml WB lagina 10 segundoz irabiatuz. Kasu hauetan, odola glukosaren eraginpean jarri zen azken kontzentrazioa baino % 20 inguru handiagoa zen kontzentrazio batean, 3. fasean bezala azken kontzentrazioa baino % 50 handiagoa izan beharrean, eta ondorioz, % 20,8 eta % 41,6ko glukosa kontzentrazioak lortu ziren. Lagin nahasiak 3. urratseko denbora-tarte berean aztertu ziren.
Glukosa diluzio serie bakoitzaren lehen urratsean, 30 lagin hartu ziren, hau baitzen pilotu-azterketarako lagin-tamaina egokia [9]. Fase bakoitzaren amaieran (lehen fasea barne), ebaluatu lagin-tamainaren egokitasuna, populazio batean emaitza-aldagai jarraituaren batez bestekoa kalkulatzeko behar den lagin-tamaina zehazteko erabilitako formula erabiliz. n = Z2 x SD2 /E2 formula. Ekuazio honetan, Z Z-puntuazioa da, SD desbideratze estandarra eta E nahi den errorea [10]. Gure alfa 0,05 da, hau da, 1,96ko Z balioari dagokio, eta 5eko errorea espero dugu (ehunekotan). Beraz, n = (1,962 x SD2)/52 ebazten dugu. Emaitzek erakutsi zuten etapa bakoitzerako behar zen lagin-tamaina bildutako benetako kopurua baino txikiagoa zela.
1, 3 eta 4 aldietan glukosa-kontzentrazio bat baino gehiago erabiliz, glukosa-kontzentrazio desberdinen eragina aztertu zen 0 denboraren eta ondorengo aldi bakoitzaren arteko aldaketa zatikia alderatuz (1. fasea 15 minututan, 3. aldia 15 minututan). Eta lau 15 segundotan, eta gero bi minuturo). Denbora-tarte bakoitzerako aldaketa-tasak Mann-Whitney U-testa erabiliz alderatu ziren, datuek ez baitzuten Shapiro-Wilk normaltasun-testak zehaztutako banaketa normal bat jarraitzen. Hainbat talderen 1etik 1era analisi bat egin zenez (bost) lehenengo, hirugarren eta laugarren urratsetan (bost guztira), Bonferroni zuzenketa bat egin zen nahi zen alfa balioa ≤0,01era doitzeko, baina ez ≤0,05era.
Plaketa kopuruaren murrizketa dextrosa hipertonikoaren kontzentrazio guztiekin eta MPV-ren igoera PRP plaketetan % 12,5etik gorako dextrosa kontzentrazioan: PRP plaketa kopurua oinarrizko odol osoaren kontzentrazioaren aldiz bat eta bost aldiz igo zen, metodoaren arabera aldatuz (ez da irudikatu). Plaketa kopuruaren murrizketa dextrosa hipertonikoaren kontzentrazio guztiekin eta MPV-aren igoera PRP plaketetan % 12,5 ​​​​dextrosa kontzentraziotik gorakoan: PRP plaketa kopurua oinarrizko odol osoaren kontzentrazioaren bat eta bost aldiz igo zen, metodoaren arabera aldatuz (ez da irudikatu). Уменьшение количества тромбоцитов при всех концентрациях гипертонической декстроеской декстрозел декстрозел MP тромбоцитах PRP при концентрации декстрозы > % 12,5: количество тромбоцитов PRP увеличило 1-пь 5 сравнению с исходной цельной кровью, в зависимости от метода (не показано). Plaketa kopurua gutxitu egin da dextrosa kontzentrazio hipertoniko guztietan eta MPV handitu egin da PRP plaketetan % 12,5 ​​​​dextrosa kontzentraziotik gorakoan: PRP plaketa kopurua 1-5 aldiz handitu da oinarrizko odol osoarekin alderatuta, metodoaren arabera (ez da erakusten). ).在> % 12,5 的葡萄糖浓度下，所有浓度的高渗葡萄糖降低血小板计数，PRP 数，丰度的高渗葡萄糖降低血小板计数，PRP 血小增加：与基线全血相比，PRP 血小板计数从浓度的1 倍上升到5 倍，因方法，张方法／而氏浓度的1 % 12,5eko glukosa kontzentraziotik gorakoan, glukosa kontzentrazio altuak odol-kopurua murrizten du, PRP odoleko MPV handitzen da: 与基线全血-rekin alderatuta, PRP odol-kopurua kontzentrazioaren 1etik 5era handitzen da (ez da deskribatu). При концентрациях глюкозы >% 12,5 все концентрации гипертонической глюкозы снижтали ксолиции тромбоцитов, а MPV повышали в тромбоцитах PRP: количество тромбоцитов PRP увеличивалось от51-кра оты концентраций по сравнению с исходными концентрациями цельной крови, в зависимости от мето (ez da deskribatu). % 12,5etik gorako glukosa-kontzentrazioetan, hipertentsio-glukosa-kontzentrazio guztiek plaketen kopurua murriztu eta PRP plaketen MPV handitu zuten: PRP plaketen kopurua 1 eta 5 aldiz handitu zen oinarrizko odol osoko kontzentrazioekin alderatuta, metodoaren arabera (deskribatutako moduan).1. irudiak erakusten du plaketen kopurua ia % 75 jaitsi zela uretan diluitu ondoren, eta % 20-30 glukosa-kontzentrazio desberdinekin 15 minutuz diluitu ondoren, oinarrizko PRParekin eta bolumenaren arabera doitutako 1:1 diluzioarekin alderatuta (1- k1 bolumenaren zuzenketarekin). k -1 hazkuntza).1 hazkuntza).
Diluzio bakoitzeko zelulen kopurua diluzioaren aurreko jatorrizko kopuruaren zatiki gisa adierazten da.
MPV gutxieneko jaitsiera izan zuen PRP ekoizpenean, diluzio-kontzentrazioak % 12,5era aldatu gabe uretan edo glukosan (% 25eko PRP glukosa nahasteak barne), eta % 20 baino gehiago handitu zen % 50eko glukosa-soluzioan diluitu ondoren (2. irudia). Aitzitik, eritrozitoek ez zuten bolumen-aldaketa esanguratsurik erakutsi H2Oz besteko diluzioetan.
Diluzio bakoitzeko zelulen batez besteko bolumena diluzioaren aurreko jatorrizko bolumenaren ehuneko gisa adierazten da.
Antzeko plaketen kopuruaren murrizketa, baina ez hain nabarmena, eta KBEren igoera ikusi ziren % 50eko glukosaren eraginpean zeuden odol-adaretan (% 25eko glukosarekin formulatzeko). 2. taulan % 50eko dextrosan diluitutako odol osoko zelula-kopurua eta zelula-bolumenak alderatzen dira % 50eko dextrosan diluitutako 1. faseko PRP datuekin. GR kopuruaren eta GR MCV-ren aldaketak ez ziren agerikoak eta ez ziren gure arretaren ardatza izan.
SD = desbideratze estandarra, MD = taldeen arteko batez besteko aldea, SE = batez besteko aldearen desbideratze estandarra, RBC = eritrozitoak, PLT = plaketak, PRP = plaketaz aberatsa den plasma, WB = odol osoa
D50W WB-ri gehitu ondoren, diluzioaren arabera doitutako plaketen galera ehunekoa % 7,7koa izan zen (310 ± 73 vs. 286 ± 96), D50W-ko PRP diluzioaren % 17,8arekin alderatuta (664 ± 348 vs. 544 ± 277). MPV WB % 16,8 handitu zen (10,1 ± 0,5etik 11,8 ± 0,6ra), MPV PRP % 26 handitu zen bitartean (9,2 ± 0,8 vs. 11,6 ± 0,7). Plaketa-kopuruaren murrizketaren eta MPVren igoeraren batez besteko aldeak PRPrekin nabarmen handiagoak izan ziren arren, WB barruan plaketa-kopuruaren murrizketaren aldaketak ia esanguratsuak izan ziren (310 ± 73tik 286 ± 96ra (-7,7%); p = .06) eta MPVren igoera esanguratsua izan zen (10,1 ± 0,5etik 11,8 ± 0,6ra (+16,8) p < .001). Plaketa-kopuruaren murrizketaren eta MPVren igoeraren batez besteko aldeak PRPrekin nabarmen handiagoak izan ziren arren, WB barruan plaketa-kopuruaren murrizketaren aldaketak ia esanguratsuak izan ziren (310 ± 73tik 286 ± 96ra (-7,7%); p = .06) eta MPVren igoera esanguratsua izan zen (10,1 ± 0,5etik 11,8 ± 0,6ra (+16,8) p < .001).Plaketa-kopuruaren murrizketaren eta KVGren igoeraren batez besteko aldeak nabarmen handiagoak izan ziren arren PRPrekin, WB barruan plaketa-kopuruaren beherakadaren aldaketak ia esanguratsuak izan ziren (310 ± 73tik 286 ± 96ra (-% 7,7; p = 0,06).увеличение MPV было значительным (от 10,1 ± 0,5 до 11,8 ± 0,6 (+16,8) p < 0,001). MPV-ren igoera esanguratsua izan zen (10,1 ± 0,5etik 11,8 ± 0,6ra (+16,8) p < 0,001).尽管PRP 在血小板计数减少和MPV 增加方面的平均差异显着更大，但WB内血小板计数减少的变化几乎是显着的（310 ± 73 至286 ± 96 (-7,7%)；p = .06）和MPV的增加是显着的（10,1 ± 0,5 到11,8 ± 0,6 (+16,8) p < .001）。尽管 PRP 在 血小板 计数 和 和 增加 方面 的 平均 差异 显着 大 ， 但 但 冡 桰 氡揮 板 异减少 的 几乎 是 显着 的 （（（310 ± 73 至 286 ± 96 (%-7,7) ； p = .06）和MPV 的增昊＄增昊＄增昊＄增± 0,5 到11,8 ± 0,6 (+16,8) p < 0,001).WB barruan plaketen kopuruaren murrizketaren aldaketa ia esanguratsua izan zen (310 ± 73tik 286 ± 96ra (-7,7%); p = 0,06), nahiz eta PRPk plaketen kopuruaren beherakadaren eta MPVaren igoeraren batez besteko aldeak nabarmen handiagoak izan, eta MPVaren igoera esanguratsua izan zen.(10,1 ± 0,5 eta 11,8 ± 0,6 (+16,8) р < 0,001). (10,1 ± 0,5etik 11,8 ± 0,6ra (+16,8) p < 0,001).
MPV-an aldaketa esanguratsu bat ikusteko, % 20ko glukosa-kontzentrazio finala behar zen, baina MPV-an aldaketa nabarmenagoa izan zen % 25eko azken kontzentrazioan. Plaketen galera egonkortu egin zen hasierako beherakadaren ondoren. Hasieran KBE-an jaitsiera zorrotz bat ikusi genuen, baina KBE azkar berrezarri zen % 25eko azken glukosa-kontzentrazioan, eta hori % 20ko eta % 15eko azken glukosa-kontzentrazioetan behatutako KBE mailak baino nabarmen handiagoa zen (3. irudia eta 3. taularen ezkerrean; itzalpeko laukitxoak). p-balioak ≤ alfa adierazten dira, 0,01eko Bonferroni zuzenketa batekin). PLT kopuruan ere jaitsiera zorrotz bat egon zen hasieratik, 0-15 segundoko hasierako fasean ikusi zena, eta gero egonkor mantendu zen (15 segundotik 30 minutura; 4. taularen ezkerrean).
Glukosa-kontzentrazio desberdinak odol osora gehitzeak MPV-aren hasieran jaitsiera azkarra eragin zuen, eta ondoren, % 20 baino gehiagoko kontzentrazioaren araberako berreskurapena. Legendak diluzioaren ondoren glukosaren kontzentrazioa erakusten du. D15, D20 eta D25 1:1 diluzioan egin ziren. D21 eta D41 1:5 diluzioan egin ziren.
4. taulak plaketen kopuruan izandako aldaketa erakusten du glukosa hipertonikoan diluitzean. Dosi-menpeko erlazioa ikusi genuen PLT kopuruen berehalako jaitsieraren artean 1:1 diluzioan eta 1:5 diluzioan. 1:1 diluzioak talde bakar gisa 1:5 diluzioekin alderatuta, 1:1 taldeak plaketen kopuruan berehalako jaitsiera bat izan zuen 1:5 taldekoak baino txikiagoa: 66±48.000 (% 23) eta 1:5 taldekoak, berriz, 99±69.000 (% 37), p = 0,014. Lehenengo neurketa-puntuan hasierako jaitsiera baten ondoren, plaketen kopurua glukosaren ehuneko gisa egonkortu egin zen (4. irudia).
Odol osoa glukosari 1:1 proportzioan gehitzen zaionean, plaketen kopurua % 25 inguru murrizten da. Hala ere, odol osoa 1:5 proportzioan gehitzen zaionean, murrizketa askoz handiagoa izan zen, % 50 inguru.
% 41eko glukosak MPV azkarrago eta nabarmenago handitu zuen % 25eko edo % 21ekoarekin alderatuta. MPV emaitzak 3. irudian ageri dira. Beste diluzio guztietan, ez zen MPV-ren hasierako berehalako jaitsierarik ikusi % 50eko glukosa gehitu ondoren. % 25eko glukosa erabiltzean (glukosa-kontzentrazioa % 20,8 azken diluzioan), MPV-ren aldaketa % 20ko glukosaren aldaketaren parekoa izan zen 1:1 diluzio batean (3. irudia). MPV-ren aldaketak hasieran handiagoak izan ziren % 41eko kontzentrazio nahasian % 25ekoan baino, baina % 41 eta % 25 arteko MPV-ren aldea 16 minutu igaro ondoren ez zen jada esanguratsua (3. taula, eskuinean). Interesgarria da, halaber, % 25eko glukosak MPV % 20,8ak baino eraginkorrago handitu zuela.
In vitro ikerketa honek gure hipotesia partzialki berretsi zuen. Dextrosa nahasketagatik plaketen lisi partziala izan daitekeela erakutsi zuen, plaketen egokitzapen azkarra hipertoniko handira, eta MPV-ren igoera nabarmena dextrosa hipertonikoaren % 25etik gorako kontzentrazioei erantzunez. Dextrosa nahasketagatik plaketen lisi partziala izan daitekeela erakutsi zuen, plaketen egokitzapen azkarra hipertoniko handira, eta MPV-ren igoera nabarmena dextrosa hipertonikoaren % 25etik gorako kontzentrazioei erantzunez. Он показал потенциальный частичный лизис тромбоцитов примесью декстрозы, быстрюю дакцитов тромбоцитов до экстремального гипертонуса eta значительное повышение MPV в ответ на гипючерток концентрацию декстрозы > %25. Dextrosarekin plaketen lisi partziala izan zezakeela erakutsi zuen, plaketen egokitzapen azkarra hipertonikotasun handira, eta MPV-ren igoera nabarmena % 25etik gorako dextrosa maila hipertonikoei erantzunez.它显示出通过葡萄糖混合物潜在的部分血小板溶解，血小板快速适应极端高渗，以及响应> % 25 浓度的高渗葡萄糖时MPV 显着上升。它 显示 出 通过 葡萄糖 潜在 的 部分 血小板 溶解 血小板 快速 适应 在 适应 枫 枫经响应> % 25 浓度 高渗 葡萄糖 时 时 mpv 显着。。。。。 Он показывает потенциальный частичный лизис тромбоцитов смесями с глюкозой, бтастрауюп тромбоцитов к экстремальному гипертонусу eta значительное увеличение MPV ответ на концение гипертонической глюкозы > %25. Glukosa nahasteek plaketen lisi partziala izan dezaketela erakusten du, plaketen egokitzapen azkarra hipertonikotasun handira eta MPV-ren igoera nabarmena % 25etik gorako glukosa hipertonikoari erantzunez.Hasierako igoera maximoa % 41,6ko glukosaren esposizioan izan zen, baina MPV-ren igoera % 25eko glukosaren esposiziora hurbildu zen esposizioaren ondorengo 20 minutu ingurura.
Plaketen kontzentrazioa glukosak eragiten du. Ohartu ginen PLT kantitatea glukosaren diluzio guztietan gutxitu zela. PRP serieko H2O (% 0) diluzioetan plaketen kopuruaren jaitsiera handia lisi osmotikoarekin lotuta egon daiteke. Bestela, plaketen multzokatzeak eragindako artefaktu bat izan liteke, baina diluzio honetan MPV aldaketarik ezarekin kontrastatzen da. Aurkikuntza honek esan nahi du plaketa batzuk oso sentikorrak direla hipoosmolalitatearekiko.
Glukosaren 1:1 diluzio guztietan, PLT kantitatea % 20-30 jaitsi zen, baita D5W-rekin ere (252 mOsm-tan hipotonikoa), eta horrek glukosaren efektu ez-osmotiko espezifiko bat adieraz dezake, bai PLT bai MPV aldatu gabe mantendu baitziren glukosa kontzentrazioaren hirukoitzapena izan zenean. D5W-tik D25W-ra. Izan ere, PLT kontzentrazioak apur bat handitzen ziren osmolaritatea handitu ahala.
1:1 eta 1:5 diluzioen arteko PLT-aren jaitsierak esan nahi du disoluzio-efektua hasierako eta azken glukosa-kontzentrazioaren araberakoa dela. Hasierako kontzentrazioaren araberakoa bakarrik balitz, orduan espero litzateke 1:1 kontzentrazioen artean PLT murrizketaren aldea ikustea. Baina ez dugu ikusten. Lisi-efektua azken glukosa-kontzentrazioaren araberakoa bakarrik bada, orduan ez dugu alde handirik espero % 20ko 1:1 diluzio baten eta % 20,8ko 1:5 diluzio baten artean. Eta hala ere lortu genuen.
Plaketen lisiaren ondorioz plaketen galera gertatzen bada, lisatu partzial bat sortzen da, eta ondoren zitokinak eta hazkuntza-faktoreak askatzen dira ingurune estrazelularrera. Hainbat ikerketek erakutsi dute plaketen lisatua ia PRP bezain eraginkorra dela proliferazio-soluzio gisa [11]. PRP bera proliferazioaren tratamendurako irtenbide eraginkorra dela frogatu da [12-14].
Plaketa inaktiboak hainbat barne-egituraz indartutako disko baten moduan zirkulatzen dute. Aktibazioan zehar, forma esferikoagoa edo ameba-forma hartzen dute, eta horren ondorioz bolumenaren handitzea dakar. Bolumenaren handitzeak azaleraren handitzea eskatzen du, eta hori sistema tubular irekiaren (SKI) estrusioaren eta mintzari exozitikoen granuluak gehitzearen ondorioa da. Zehazteke dago glukosa hipertonikoak eragindako MPV-aren handitzeak mekanismo horietako bat edo biak inplikatzen dituen, baina azken hori bada, MPV-aren handitzeak desgranulazioa adieraziko luke.
Ikerketa honek erakutsi zuen PRP edo odol osoko plaketetan glukosa-kontzentrazio altuen eraginpean egoteak MPV-aren igoera eragiten zuela 15 minututan, % 25eko eta % 41,6ko glukosa-kontzentrazioarekin, hurrenez hurren.
Plaketen MPV-aren igoera inguruko mikrotubulu-korapiloen dilatazioaren ondorio izan daiteke kaltzioaren sarrerari erantzunez. Liu et al. Frogatu da glukosak kaltzioaren sarrera bitartekatzen duela plaketen TRPC6 kanalaren bidez [6]. Gure hipotesia da glukosak mikrotubulu-korapiloen erlaxazioa eragiten duela, MPV-aren igoera eta plaketen sentsibilizazioa eta/edo aktibazioa eraginez. Hala ere, gure emaitzen arabera, hau istorioaren zati bat besterik ez da. Gure probetan, D25W-tik beherako kontzentrazio batek ere ez zuen MPV-aren igoerarik eragin. % 12,5 eta % 25 arteko glukosa-kontzentrazioen esposizioa probatu ez dugunez, gure 1. faseko emaitzek iradokitzen dute glukosa-kontzentrazio-tarte horretan atalase bat egon daitekeela MPV-aren igoera dakarrena. 3. eta 4. faseetan egindako proba gehiagok erakutsi zuten % 20-25eko glukosa dela horretarako atalasea, baina ez dago argi zergatik.
Zentrifugazioaren ondoren MPV-an % 9ko jaitsiera ere ikusi genuen. Ez dago argi MPV-aren jaitsiera hori zentrifugatzailearen eritrozitoen geruzan harrapatuta dauden plaketa handiago eta trinkoagoen ondoriozkoa den. Behaketa hau garrantzitsua izan daiteke klinikoentzat, PRP plaketak WB plaketen azpimultzo txikiagoa eta trinkotasun gutxiagokoa direla iradoki baitezake.
Aurreko ikerketa batean, eskuzko metodoen bidezko PRP prestatzea merkea dela erakutsi genuen [8]. Glukosak ehunen plaketak edo PRP sentikortzen baditu, aktibazioarekiko sentikorragoak bihurtuz, edo PRP lisatu partzialen propietateekin ekoizten bada, horrek birsorkuntza hobetu eta terapiaren beharra murriztu dezake. Beraz, PRP eta glukosa oso kontzentratua konbinatzea PRP edo glukosa bakarrik baino kostu-eraginkorragoa izan daiteke.
Gure ikerketak hainbat gabezia ditu. Lehenik eta behin, hainbat metodo ezberdinetatik lortutako PRP erabiltzen dugu. Horrek emaitza kontrajarriak ekar ditzake. Bigarrenik, ezin izan dugu gure laginen analisi biokimikorik egin plaketen aktibazioa gertatu den zehatzago zehazteko. P-selektina, plaketen 4. faktorea, plaketen agregatu monozitikoak edo plaketen aktibazioaren beste markatzaile batzuk neurtu nahiko genituzke alfa granuluen degranulazio-maila edo presentzia hobeto ulertzeko, baina hori ikerketa honen esparrutik kanpo dago. Hirugarrenik, ezin izan dugu mikroskopia elektronikoaren edo beste metodo batzuen bidez baieztatu glukosaren eraginpean dauden plaketen MPV-aren igoera mikrotubulu-korapiloetan izandako eraginaren ondorioa zela.
WB edo PRPren nahasteek % 25eko glukosarekin MPV handitu zuten, plaketen aktibazioaren hasiera adieraziz, nahiz eta ikerketa honek ez zuen agregazioaren edo degranulazioaren progresioa erakutsi. Glukosa nahasketa hipertonikoak plaketen galera eragin zuen, eta horrek efektu litiko bat izan dezake. Plaketen aktibazio edo lisi partzialak ehunen birsorkuntza eragin dezake plaketen injekzioaren ondoren. Ez dago argi aldaketa hauek zer ondorio kliniko ekar ditzaketen. Beste ikerketa batzuek aktibazio edo lisiaren neurketa zehatzagoak erakutsi dituzte eta WB edo PRPrekin duten glukosa nahasketa hipertonikoen efektu kliniko desberdinak ebaluatu dituzte.
Glukosaren ugalketa-terapia terapia birsortzaile sinple eta merkea da, azkar hedatzen ari dena eta ikerketa klinikoa laguntzen ari dena. Ikerketa honek mekanismo fisiologiko bat iradokitzen du, eta baieztatzen bada, ugalketa-terapiaren mekanismo birsortzailearen zati bat ulertzen lagun diezaguke.
Biomedikuntza eta Osasun Informatika Missouriko Unibertsitatean, Kansas Cityko Medikuntza Eskolan, Kansas Cityn, AEBn
Gizakiak: Ikerketa honetako parte-hartzaile guztiek eman zuten baimena edo ez zuten eman. Zelula Medikuntzako Nazioarteko Elkarteak ICMS-2017-003 onarpena eman du. Zelula Medikuntzako Nazioarteko Elkartearen Berrikuspen Batzorde Instituzionalak onartu du ondorengo protokoloa, etorkizunean erabiltzeko: Izenburua: Plaketa ugariko plasmako sendagaien etekinaren kalkulua, oinarrizko CBC plaketa kopuruan oinarrituta. Animaliakiak: Egile guztiek baieztatu dute ez dela animaliarik edo ehunik ikerketa honetan parte hartu. Interes gatazkak: ICMJEren Dibulgazio Inprimaki Uniformearen arabera, egile guztiek honako hau adierazten dute: Ordainketa/zerbitzuaren informazioa: Egile guztiek adierazten dute ez dutela inolako erakunderengandik finantza-laguntzarik jaso aurkeztutako lanagatik. Finantza-harremanak: Egile guztiek adierazten dute ez dutela gaur egun edo azken hiru urteetan finantza-harremanik aurkeztutako lanean interesa izan dezakeen inolako erakunderekin. Beste harreman batzuk: Egile guztiek adierazten dute ez dagoela aurkeztutako lanean eragina izan dezakeen beste harreman edo jarduerarik.
Harrison TE, Bowler J, Reeves K et al. (2022ko maiatzaren 17a) Glukosak plaketen kopuruan eta bolumenean duen eragina: medikuntza birsortzailerako inplikazioak. Cure 14(5): e25081. doi:10.7759/cureus.25081
© Copyright 2022 Harrison et al. Artikulu hau Creative Commons Attribution CC-BY 4.0 lizentziaren baldintzen arabera banatzen da, sarbide irekikoa. Edozein euskarritan erabilera, banaketa eta erreprodukzio mugagabea baimenduta dago, betiere jatorrizko egilea eta iturria aipatzen badira.