"Hech qachon shubha qilmangki, kichik bir guruh o'ychan va fidoyi fuqarolar dunyoni o'zgartira oladi. Aslida, bu u yerda yagona."
Cureusning vazifasi uzoq vaqtdan beri mavjud bo'lgan tibbiy nashriyot modelini o'zgartirishdir, bunda tadqiqot topshirish qimmat, murakkab va vaqt talab qilishi mumkin.
Trombotsitlarga boy plazma/PRP, to'qimalarning regeneratsiyasi, trombotsitlarning faollashishi, glyukoza proliferativ terapiya, trombotsitlar, proliferativ terapiya
Ushbu maqolani quyidagicha keltiring: Harrison TE, Bowler J, Reeves K va boshqalar. (2022-yil 17-may) Glyukozaning trombotsitlar soni va hajmiga ta'siri: regenerativ tibbiyot uchun oqibatlari. Cure 14(5): e25081. doi:10.7759/cureus.25081
Trombotsitlarga boy plazma (PRP) va gipertonik glyukoza eritmalari regenerativ tibbiyotda in'ektsiya uchun keng qo'llaniladi, ba'zan birgalikda. Gipertonik glyukozaning trombotsitlar lizisi va faollashuviga ta'siri ilgari xabar qilinmagan. Biz glyukoza konsentratsiyasining yuqori bo'lishining trombotsitlar va eritrotsitlar soniga, shuningdek, PRP va butun qon (WB) hujayra hajmiga ta'sirini sinab ko'rdik. PRP yoki butun qon bilan aralashtirilgan barcha glyukoza aralashmalarida trombotsitlar sonining tez qisman kamayishi kuzatildi, bu qisman lizisga mos keladi. Birinchi daqiqadan so'ng trombotsitlar soni barqaror bo'lib qoldi, bu qoldiq trombotsitlarning ekstremal (>2000 mOsm) gipertoniklikka tez moslashishini ko'rsatadi. Birinchi daqiqadan so'ng trombotsitlar soni barqaror bo'lib qoldi, bu qoldiq trombotsitlarning ekstremal (>2000 mOsm) gipertoniklikka tez moslashishini ko'rsatadi. Posle pervoy minuty kolichestvo trombositov ostavalos stabilnym, chto ukazyvaet bystruyu akkomodatsyyu ostatochnyh trombotsitov ham ekstremal (>2000 mOsm) gipertonus. Birinchi daqiqadan so'ng trombotsitlar soni barqaror bo'lib qoldi, bu qoldiq trombotsitlarning ekstremal (>2000 mOsm) gipertoniklikka tez moslashishini ko'rsatadi.língíngíngíní, yíngííííííííííníííííííníngíngíníngíngíngíngíngíngíngíngíngíngíngíngíngíngíngíngínjíníngíníngyínígíní> 2000 mOsm）līngwīngyī.2000 mOsm. Posle pervoy minuty kolichestvo trombotsitov ostavalos stabilnym, chto ukazyvaet bystruyu adaptatyu ostatochnyh trombotsitov k ekstremalnom (>2000 mOsm) giperosmolyarnomu sostoyaniyu. Birinchi daqiqadan so'ng trombotsitlar soni barqaror bo'lib qoldi, bu qoldiq trombotsitlarning ekstremal (>2000 mOsm) giperosmolyar holatga tez moslashishini ko'rsatadi.Glyukoza konsentratsiyasining 25% va undan yuqori bo'lishi trombotsitlarning o'rtacha hajmining (MPV) sezilarli darajada oshishiga olib keldi, bu trombotsitlar faollashuvining dastlabki bosqichini ko'rsatadi. Trombotsitlar lizisi yoki faollashuvi sodir bo'ladimi yoki yo'qligini va gipertonik glyukoza in'ektsiyasi yolg'iz yoki PRP bilan birgalikda qo'shimcha klinik foyda keltirishi mumkinligini aniqlash uchun qo'shimcha tadqiqotlar talab etiladi.
1950-yillarda amerikalik jarroh Jorj Xakett pay va bog'lamlarga proliferativ eritma yuborish orqali ko'plab bemorlarda bo'g'im va bel og'rig'ini butunlay yengillashtirishi mumkinligini aniqladi. Uning quyonlar ustida o'tkazgan tajribalari shuni ko'rsatdiki, u proliferativ terapiya deb atagan davolash usuli paylarning kattalashishi va mustahkamlanishiga olib keldi. Gistologik tadqiqotlar shuni tasdiqladiki, bu jarayon davomida yangi kollagen ishlab chiqariladi [1].
Dastlabki bir necha o'n yilliklar davomida ko'plab turli xil tarqatish yechimlari sinab ko'rildi. 1990-yillarga kelib, ko'pchilik amaliyotchilar glyukozaning yuqori konsentratsiyasini eng xavfsiz va eng samarali usul deb hisoblashdi. Biroq, ta'sir mexanizmi noma'lumligicha qolmoqda.
20-asrda Hackettning ishidan so'ng kam sonli klinik tadqiqotlar o'tkazildi. Biroq, 2000-yillarda bu sohaga qiziqish qayta tiklandi va bel og'rig'i [2], tizza osteoartriti [3] va lateral epikondilit [4] ni davolash uchun proliferativ terapiyaning bir nechta muvaffaqiyatli klinik sinovlari yakunlandi.
To'qimalarning regeneratsiyasi ildiz hujayralarining ishtirokini talab qiladi. Shuning uchun glyukozaning yuqori konsentratsiyasi ildiz hujayralarining migratsiyasini, replikatsiyasini va differentsiatsiyasini qandaydir tarzda keltirib chiqarishi kerak. Biz trombotsitlar xabarchi vazifasini bajarishi mumkin va glyukozaning yuqori konsentratsiyasi trombotsitlarning sitokinlar va o'sish omillarini chiqarishiga olib kelishi mumkin, shu bilan regenerativ jarayonlarni, ayniqsa ildiz hujayralarining glyukoza konsentratsiyasi yuqori bo'lgan joylarga migratsiyasini rag'batlantirishi mumkin, deb taxmin qilamiz.
Trombotsitlarning faollashuvi har doim hujayra ichidagi kaltsiyning ko'payishidan oldin sodir bo'ladi [5]. Liu va boshqalar 2008-yilda yuqori glyukoza darajasi plazma membranasidagi o'tkinchi retseptor potensiali kanonik 6-turdagi (TRPC6) kanallarning faolligini oshirishini ko'rsatdilar, bu esa trombotsitlarga kaltsiy ionlarining kirib kelishiga olib keladi [6]. Boshqa bir tadqiqot shuni ko'rsatdiki, mikrotubulaning chekka zonasiga kaltsiy ionlari ta'siri chekka zonaning bo'shashishiga, kengayishiga va deformatsiyasiga olib keladi, bu esa o'z navbatida diskdan sharsimon shaklga o'zgarishiga olib keladi, natijada o'rtacha trombotsit hajmi (MPV) hosil bo'ladi [7].
Ushbu tadqiqotdagi gipotezamiz shundan iboratki, trombotsitlarning yuqori konsentratsiyali glyukoza ta'siriga uchrashi mikrotubulaning chekka zonasiga va hujayra ichidagi muhitga ta'sir qiladi va bu MPV ning oshishiga olib keladi.
Tadqiqot tafsilotlari tushuntirilgandan so'ng va namunalarni olishdan oldin barcha ishtirokchilar xabardor qilingan rozilik shaklini imzoladilar. Ushbu tadqiqotda faqat gematokrit 2% dan yuqori bo'lgan PRP namunalari ishlatilgan, shunda eritrotsitlar (eritrotsitlar) soni va qizil qon hujayralarining o'rtacha korpuskulyar hajmi (MCV) taqqoslash uchun kiritilishi mumkin edi.
Tadqiqot to'rt bosqichda o'tkazildi, birinchi bosqich PRP, qolgan bosqichlar esa butun qon edi (1-jadval). Avvalroq [8] ta'riflanganidek, barcha nisbiy markazdan qochma kuchlar (RCF, g-kuch) markazdan qochma shpritsdagi qon ustunining o'rta nuqtasidan (Rmid, sm) hisoblab chiqildi. Biz MPV ni trombotsitlar sensibilizatsiyasi markeri sifatida va trombotsitlar sonini potensial trombotsitlar lizisi ko'rsatkichi sifatida ishlatishni tanladik, ularning ikkalasini ham standart gematologiya analizatorlarida osongina o'lchash mumkin.
Birinchi bosqichda 47 nafar ko'ngilli qon namunalarini — bitta naycha etilendiamintetrasirka kislotasi (EDTA) va bitta PRP butun qon namunasini (natriy sitrat (NaCl, 3%) bilan antikoagulyatsiyalangan) donorlik qildi (1-jadval). Rokerni darhol naychaga joylashtiring. EDTA namunalarida to'liq qon tahlili (CBC) uch nusxada o'tkazildi va NaCl namunalari CBC tahlili uchun uch nusxada tahlil qilindi, so'ngra PRP yuqorida tavsiflangan turli usullar bilan tayyorlandi [8]. Barcha PRP namunalari 900–1000 g da santrifugalash orqali tayyorlandi. Har bir PRP namunasini vorteks mikserida 5–10 soniya davomida aralashtiring, so'ngra beshta 0,5 ml alikvotni naychalarga bo'ling.
Trombotsitlar ta'sirining yuqori glyukoza konsentratsiyasiga ta'sirini baholash uchun suvdagi 0%, 5%, 12,5%, 25% va 50% glyukoza teng miqdorda (0,5 ml) trombotsitlar namunalari bilan aralashtirildi va glyukoza aralashmasining 0%, 2,5%, 6,25%, 12,5% va 25% konsentratsiyalari olindi va naychalar probirka silkitgichida 15 daqiqa davomida aralashtirildi. Har bir aralashmaning TAC qiymati 15 daqiqadan so'ng uch marta tahlil qilindi. Har bir naycha uchun trombotsitlar soni (PLT), eritrotsitlar soni, MCV va MPV o'rtacha hisoblandi va barcha PRP namunalari uchun o'rtacha trombotsitlar soni, eritrotsitlar soni, MCV va MPV hisoblandi.
Ma'lumotlarni to'plashning birinchi bosqichi tugagandan so'ng, biz D50W qo'shilgandan so'ng PRP trombotsitlarida trombotsitlar hajmining sezilarli darajada oshganini sezdik. PRP trombotsitlari qondagi barcha trombotsitlarni ifodalamaydi va PRP muhiti WB muhitidan farq qiladi. Shuning uchun biz butun qonga D50W qo'shish ta'sirini ikkinchi bosqichda sinab ko'rishga qaror qildik.
Ikkinchi bosqich uchun biz "Tahlil" bo'limida tasvirlanganidek, birinchi seriya natijalariga asoslanib 30 ta namuna hajmini tanladik. Ushbu seriyada 20 ko'ngilli qon namunalarini topshirdi (1-jadval). Butun qon (1,8 ml) 3 ml shpritsga olindi va 0,2 ml 40% NaCl bilan antikoagulyatsiya qilindi. Butun qon shprits besh soniya davomida vorteks mikser bilan aralashtirildi va CBC uch marta tahlil qilindi. Tahlildan so'ng, antikoagulyatsiyalangan qon 5 ml shpritsdagi 2 ml 50% glyukozaga qo'shildi (yakuniy glyukoza konsentratsiyasi taxminan 25% (D25) edi va 30 daqiqa davomida chayqatish naychasiga joylashtirildi). 30 daqiqadan so'ng, WB shpritslaridagi D25/CBC uch marta tahlil qilindi. Har bir shprits uchun trombotsitlar soni, eritrotsitlar soni, MCV va MPV o'rtacha hisoblandi va glyukoza qo'shishdan oldin va keyin har bir namuna uchun o'rtacha PLT, eritrotsitlar soni, MCV va MPV hisoblandi.
Butun qondagi trombotsitlar minimal invaziv in'ektsiya tufayli proliferativ glyukoza terapiyasi paytida ko'pincha gipertonik glyukozaga duchor bo'lganligi va PRP ni in'ektsiyadan oldin gipertonik glyukoza bilan birlashtirish keng tarqalgan emasligi sababli, biz 1-bo'limda WB bilan birgalikda gipertonik glyukozani o'rganishga qaror qildik. Uchinchi va to'rtinchi bosqich. Har bir bosqichda 20 ko'ngilli qon antikoagulyantlari uchun 7-8 ml ACD-A (trinatriy sitrat (22,0 g/l), limon kislotasi (8,0 g/l) va glyukoza (24,5 g/l), dekstroza sitrat eritmasi) donorlik qildi (1-jadval). MPV ning oshishi bilan bog'liq chegaraviy foizni aniqlash uchun faqat 12,5% dan yuqori glyukoza aralashmalari ishlatilgan. Uchinchi bosqichda 1 ml qon sinov naychasiga joylashtiriladi. Keyin qonni vorteks mikserida 10 soniya davomida aralashtiring, natijada mos ravishda 15%, 20% va 25% yakuniy glyukoza konsentratsiyasini olish uchun naychaga 1 ml 30% glyukoza, 40% glyukoza yoki 50% glyukoza qo'shing. Glyukoza qon namunalari aralashtirilgandan so'ng darhol CBC uchun tahlil qilindi va har ikki daqiqada 30 daqiqa davomida takrorlandi.
Dastlabki aralashtirish jarayonida 1:1 gipertonik glyukoza va WB yoki PRP qo'shilishi trombotsitlarni bir necha soniya davomida 25% dan yuqori konsentratsiyalarga duchor qiladi. To'rtinchi bosqichda, minimal boshlang'ich cho'qqi konsentratsiyalari bilan gipertonik glyukoza ta'sirini baholash va glyukoza ta'sirining yuqori chegarasini sinab ko'rish uchun biz D25W yoki D50W ga oz miqdordagi qon qo'shdik. Naychaga 1 ml D25W yoki D50W joylashtiring va namunani 10 soniya davomida aralashtirib, 0,2 ml WB qo'shing. Bunday hollarda, qon 3-bosqichdagi kabi yakuniy konsentratsiyadan 50% yuqori emas, balki yakuniy konsentratsiyadan taxminan 20% yuqori konsentratsiyada glyukozaga duchor bo'ldi, natijada yakuniy glyukoza konsentratsiyasi 20,8% va 41,6% ni tashkil etdi. Aralash namunalar 3-bosqichdagi kabi bir xil vaqt oralig'ida tahlil qilindi.
Har bir glyukoza suyultirish seriyasining birinchi bosqichida 30 ta namuna olindi, chunki bu sinov tadqiqoti uchun mos namuna hajmi edi [9]. Har bir bosqich oxirida (birinchi bosqichni ham qo'shgan holda), bitta populyatsiyada uzluksiz natija o'zgaruvchisining o'rtacha qiymatini baholash uchun zarur bo'lgan namuna hajmini aniqlash uchun ishlatiladigan formuladan foydalanib, namuna hajmining yetarliligini baholang. n = Z2 x SD2 /E2 formulasi. Ushbu tenglamada Z Z-ball, SD standart og'ish va E kerakli xatolikdir [10]. Bizning alfa koeffitsientimiz 0,05 ga teng, bu 1,96 Z qiymatiga mos keladi va biz 5 xatolikni (foizda) kutamiz. Shuning uchun biz n = (1,962 x SD2)/52 ni yechamiz. Natijalar shuni ko'rsatdiki, har bir bosqich uchun talab qilinadigan namuna hajmi to'plangan haqiqiy sondan kichikroq edi.
1, 3 va 4-davrlarda bir nechta glyukoza konsentratsiyasidan foydalangan holda, turli glyukoza konsentratsiyalarining ta'siri 0 vaqt va har bir keyingi vaqt (1-faza 15 daqiqada, 3-davr 15 daqiqada) va 15 soniyada to'rtta, keyin esa har ikki daqiqada o'rtasidagi kasr o'zgarishini taqqoslash orqali tahlil qilindi.) Har bir vaqt davri uchun o'zgarish tezligi Mann-Whitney U-testi yordamida taqqoslandi, chunki ma'lumotlar Shapiro-Wilk normallik testi bilan aniqlangan normal taqsimotga amal qilmadi. Birinchi, uchinchi va to'rtinchi bosqichlarda (jami beshta) bir nechta guruhlarning 1 dan 1 gacha tahlili o'tkazilganligi sababli, kerakli alfa qiymatini ≤0,01 ga, lekin ≤0,05 ga emas, balki sozlash uchun Bonferroni tuzatishi amalga oshirildi.
Gipertonik dekstrozaning barcha konsentratsiyalarida trombotsitlar sonining kamayishi va dekstroza konsentratsiyasi >12,5% da PRP trombotsitlarida MPV ning oshishi: PRP trombotsitlar soni boshlang'ich qon konsentratsiyasiga nisbatan bir baravardan besh baravargacha oshdi, bu usulga qarab o'zgarib turadi (tasvirlanmagan). Gipertonik dekstrozaning barcha konsentratsiyalarida trombotsitlar sonining kamayishi va dekstroza konsentratsiyasi >12,5% da PRP trombotsitlarida MPV ning oshishi: PRP trombotsitlar soni boshlang'ich qon konsentratsiyasiga nisbatan bir baravardan besh baravargacha oshdi, bu usulga qarab o'zgarib turadi (tasvirlanmagan). Umenshie kolichestva trombotsitov va barcha nazorat qilish usullarining gipertonik dekstrozi va uvelichenie MPV va trombotsitax PRP uchun trombotsitlar > 12,5%: PRP kolichestvo trombositlar va 1-5 razryadlar bo'yicha sravneniyu sravneniyu sravneniyu sxodnoy tsellyuloza o'tkazuvchanligi. Barcha gipertonik dekstroza konsentratsiyasida trombotsitlar sonining kamayishi va dekstroza konsentratsiyasi >12,5% da PRP trombotsitlarida MPV ning oshishi: PRP trombotsitlar soni boshlang'ich qonga nisbatan 1-5 baravar oshdi, bu usulga bog'liq (ko'rsatilmagan). ).在> 12.5% ​​的葡萄糖浓度下，所有浓度的高渗葡萄糖降低血小板计数，PRP 血小板中MPV mín: yíngííííí, PRP líííííííííííííííííííííí1 ííníínííníín 5 díngíngíngíngín >12,5% ​​glyukoza konsentratsiyasida glyukozaning yuqori konsentratsiyasi qon sonini kamaytiradi, PRP qon MPV ko'payadi: 与基线全血 bilan solishtirganda, PRP qon soni konsentratsiyadan 1 dan 5 baravargacha oshadi (tavsiflanmagan). Prikoliyax glyukozi >12,5% barcha markazlashtirilgan gipertonik glyukozi snijali kolichestvo trombositlar, a MPV povyshali trombotsitlar PRP: kolichestvo trombositov PRP uvelichivalos ot 1-dan 5-kratgacha bo'lgan usullarni qo'llab-quvvatlaydi. ). Glyukoza konsentratsiyasi >12,5% da barcha gipertenziv glyukoza konsentratsiyalari PRP trombotsitlarida trombotsitlar sonini kamaytirdi va MPV ni oshirdi: PRP trombotsitlar soni usulga qarab (ta'riflanganidek) boshlang'ich qon konsentratsiyasiga nisbatan 1 dan 5 baravargacha oshdi.1-rasmda trombotsitlar soni suvda suyultirilgandan keyin deyarli 75% ga va turli konsentratsiyali glyukoza bilan 15 daqiqa suyultirilgandan keyin boshlang'ich PRP va hajmga moslashtirilgan 1:1 suyultirish (1- k1 hajmni to'g'rilash bilan) bilan solishtirganda 20-30% ga kamayganligi ko'rsatilgan. k -1 naslchilik).1 naslchilik).
Har bir suyultirishdagi hujayralar soni suyultirishdan oldingi asl sonning bir qismi sifatida ifodalanadi.
MPV PRP ishlab chiqarish jarayonida minimal darajada kamaydi, suvda yoki glyukozada (shu jumladan, 25% PRP glyukoza aralashmalarida) suyultirish konsentratsiyasi 12,5% gacha o'zgarmadi va 50% glyukoza eritmasida suyultirilgandan keyin 20% dan ortiqqa oshdi (2-rasm). Aksincha, eritrotsitlar H2O dan boshqa har qanday suyultirishda hajmda sezilarli o'zgarish ko'rsatmadi.
Har bir suyultirishdagi hujayralarning o'rtacha hajmi suyultirishdan oldingi asl hajmning foizi sifatida ifodalanadi.
50% glyukoza ta'sirida bo'lgan BCda (25% glyukoza bilan formulalash uchun) trombotsitlar sonining shunga o'xshash, ammo kamroq sezilarli kamayishi va CVR ning oshishi kuzatildi. 2-jadvalda 50% dekstrozada suyultirilgan butun qondagi hujayralar soni va hujayra hajmi 50% dekstrozada suyultirilgan 1-faza PRP ma'lumotlari bilan taqqoslanadi. RBClar soni va RBC MCV dagi o'zgarishlar aniq emas edi va bizning e'tiborimiz markazida bo'lmadi.
SD = standart og'ish, MD = guruhlar orasidagi o'rtacha farq, SE = o'rtacha farqning standart og'ishi, RBC = eritrotsitlar, PLT = trombotsitlar, PRP = trombotsitlarga boy plazma, WB = butun qon
D50W ni WB ga qo'shgandan so'ng, suyultirishga moslashtirilgan trombotsitlar yo'qotilishi foizda 7,7% ni tashkil etdi (310 ± 73 va 286 ± 96), D50W da PRP suyultirishda esa bu ko'rsatkich 17,8% ga nisbatan (664 ± 348 va 544 ± 277). MPV WB 16,8% ga oshdi (10,1 ± 0,5 dan 11,8 ± 0,6 gacha), MPV PRP esa 26% ga oshdi (9,2 ± 0,8 va 11,6 ± 0,7). Trombotsitlar sonining kamayishi va MPV o'sishidagi o'rtacha farqlar PRP bilan sezilarli darajada ko'proq bo'lsa-da, WB ichidagi trombotsitlar sonining kamayishidagi o'zgarishlar deyarli sezilarli edi (310 ± 73 dan 286 ± 96 gacha (-7,7%); p = .06) va MPV ning oshishi sezilarli edi (10,1 ± 0,5 dan 11,8 ± 0,6 gacha (+16,8) p < .001). Trombotsitlar sonining kamayishi va MPV o'sishidagi o'rtacha farqlar PRP bilan sezilarli darajada ko'proq bo'lsa-da, WB ichidagi trombotsitlar sonining kamayishidagi o'zgarishlar deyarli sezilarli edi (310 ± 73 dan 286 ± 96 gacha (-7,7%); p = .06) va MPV ning oshishi sezilarli edi (10,1 ± 0,5 dan 11,8 ± 0,6 gacha (+16,8) p < .001).PRP bilan trombotsitlar sonining kamayishi va CVR o'sishidagi o'rtacha farqlar sezilarli darajada katta bo'lsa-da, WB ichida trombotsitlar sonining pasayishidagi o'zgarishlar deyarli sezilarli edi (310 ± 73 dan 286 ± 96 gacha (-7,7%); p = 0,06).uvelichenie MPV bylo znachitelnym (ot 10,1 ± 0,5 dan 11,8 ± 0,6 (+16,8) p < 0,001). MPV ning oshishi sezilarli bo'ldi (10,1 ± 0,5 dan 11,8 ± 0,6 gacha (+16,8) p < 0,001).PRP míngíngíngíníngíngíngíngíngíngíngíngíngíngíngíngíngíngíngíngíngíngíngíngíngíngíníngwbwbwbwbwbwb língíííííííííííííííííníínínín (310 ± 73 lín 286 ± 96 (-7,7%)), p = .06） MPV língíííííííí (10.1 ± 0.5 11.8 ± 0.6 (+16.8) p < .001）。PRP míníííííí ííííííí íííííí chàngāngāngāngāngāngāngāngī （（（（（（310 ± 73 lín 286 ± 96 (-7,7%) ； p = .06） 1（（līngīngīngīngīng. ± 0,5 11,8 ± 0,6 (+16,8) p < ,001）。WB ichida trombotsitlar sonining kamayishidagi o'zgarish deyarli sezilarli edi (310 ± 73 dan 286 ± 96 gacha (-7,7%); p = 0,06), garchi PRP trombotsitlar sonining pasayishi va MPV o'sishida o'rtacha farqlarni sezilarli darajada oshirgan bo'lsa-da va MPV ning oshishi sezilarli bo'lgan.(ot 10,1 ± 0,5 to 11,8 ± 0,6 (+16,8) r < 0,001). (10,1 ± 0,5 dan 11,8 ± 0,6 gacha (+16,8) p < 0,001).
MPVda sezilarli o'zgarishni ko'rish uchun 20% glyukoza miqdoridagi yakuniy konsentratsiya talab qilingan, ammo MPVdagi o'zgarish 25% lik yakuniy konsentratsiyada aniqroq bo'lgan. Dastlabki pasayishdan keyin trombotsitlar yo'qotilishi barqarorlashgan. Biz CVRning dastlabki keskin pasayishini qayd etdik, ammo CVR 25% yakuniy glyukoza konsentratsiyasida tezda tiklandi, bu 20% va 15% yakuniy glyukoza konsentratsiyasida kuzatilgan CVR darajasidan sezilarli darajada yuqori edi (3-rasm va 3-jadvalning chap tomonida; soyali katakchalar). p-qiymatlari ≤ alfa ni Bonferroni tuzatishi 0,01 bilan ko'rsatadi). Shuningdek, PLT sonining dastlabki keskin pasayishi kuzatildi, 0-15 soniya boshlang'ich bosqichida kuzatildi va keyin barqaror qoldi (15 soniyadan 30 daqiqagacha; 4-jadvalning chap tomonida).
Butun qonga turli konsentratsiyadagi glyukoza qo'shilishi MPV ning dastlab tez pasayishiga olib keldi, so'ngra konsentratsiyaga bog'liq holda 20% dan ortiq tiklanish kuzatildi. Afsonada suyultirilgandan keyin glyukoza konsentratsiyasi ko'rsatilgan. D15, D20 va D25 1:1 suyultirishda amalga oshirildi. D21 va D41 1:5 suyultirishda amalga oshirildi.
4-jadvalda gipertonik glyukozada suyultirilganda trombotsitlar sonining o'zgarishi ko'rsatilgan. Biz 1:1 suyultirilganda va 1:5 suyultirilganda PLT sonining darhol pasayishi o'rtasida dozaga bog'liq bog'liqlikni kuzatdik. 1:1 suyultirilganlarni bitta guruh sifatida 1:5 suyultirilganlar bilan taqqoslaganda, 1:1 guruhida trombotsitlar sonining darhol pasayishi 1:5 guruhidagi 66±48000 (23%) dan kam, 1:5 guruhidagi 99±69000 (37%) ga nisbatan kuzatildi. , p = 0.014). Birinchi o'lchov nuqtasida dastlabki pasayishdan so'ng, glyukoza foizi sifatida trombotsitlar soni barqarorlashdi (4-rasm).
Glyukozaga butun qon 1:1 nisbatda qo'shilganda, trombotsitlar soni taxminan 25% ga kamayadi. Biroq, butun qon 1:5 nisbatda qo'shilganda, kamayish ancha katta - taxminan 50% ni tashkil etdi.
41% glyukoza MPV ni 25% yoki 21% ga qaraganda tezroq va sezilarli darajada oshirdi. MPV natijalari 3-rasmda ko'rsatilgan. Boshqa barcha suyultirishlarda 50% glyukoza qo'shilgandan so'ng MPV ning dastlabki darhol pasayishi kuzatilmadi. 25% glyukoza ishlatilganda (yakuniy suyultirishda glyukoza konsentratsiyasi 20,8%), MPV ning o'zgarishi 1:1 suyultirishda 20% glyukoza o'zgarishiga o'xshash edi (3-rasm). MPV dagi o'zgarishlar dastlab 41% aralash konsentratsiyada 25% ga qaraganda ko'proq bo'lsa-da, 16 daqiqadan so'ng 41% va 25% o'rtasidagi MPV farqi endi ahamiyatli emas edi (3-jadval, o'ngda). Shuningdek, 25% glyukoza MPV ni 20,8% ga qaraganda samaraliroq oshirgani qiziq.
Ushbu in vitro tadqiqot bizning gipotezamizni qisman tasdiqladi. Dekstroza aralashmasi bilan trombotsitlarning qisman lizisi, trombotsitlarning haddan tashqari gipertoniklikka tez moslashishi va gipertonik dekstrozaning >25% konsentratsiyasiga javoban MPV ning sezilarli darajada oshishi kuzatildi. Dekstroza aralashmasi bilan trombotsitlarning qisman lizisi, trombotsitlarning haddan tashqari gipertoniklikka tez moslashishi va gipertonik dekstrozaning >25% konsentratsiyasiga javoban MPV ning sezilarli darajada oshishi kuzatildi. On pokazal potensialnyy chastichnyy lizis trombositov primesyu dekstrozy, bystruyu akkomodatsyyu trombotsitov to ekstremalnogo gipertonusa va znachitelnoe povyshenie MPV v otvet na hypertonicheskuyu ko'taruvchi destrozy > 25%. Dekstroz bilan trombotsitlarning qisman lizisi, trombotsitlarning tez joylashishi va gipertonik dekstroz darajasi >25% ga javoban MPV ning sezilarli darajada oshishi kuzatildi.língíngíngíngíngíngíngíngíngíngíngíngíngíngí溶解，血小板快速适应极端高渗，以及响应> 25% língīngīngīngīngīngīngīngīngīngīngīngīngīngīngīngīngīngīngīngīng.língjín língíngíííííííííííííííííííííí líní> 25% língííííííííííííííííínííníní mpv língíníní. U pokazyvaet potentsial chastichnyy lizis trombotsitov smesyami s glyukozoy, bystruyu adaptatsiyu trombotsitov k ekstremalnomu gipertonusi va snachitelnoe uvelchenie MPV v otvet natoksyyu hypertonycheskoy golyukozy > 25%. Bu glyukoza aralashmalari tomonidan trombotsitlarning qisman lizisini, trombotsitlarning haddan tashqari gipertoniklikka tez moslashishini va gipertonik glyukoza >25% ga javoban MPV ning sezilarli darajada oshishini ko'rsatadi.Dastlabki o'sish 41,6% glyukoza ta'sirida maksimal bo'lgan, ammo MPV ning oshishi ta'sirdan taxminan 20 daqiqa o'tgach 25% glyukoza ta'siriga yaqinlashgan.
Trombotsitlar konsentratsiyasiga glyukoza ta'sir qiladi. Biz glyukozaning barcha suyultirilganda PLT miqdori kamayganini payqadik. PRP seriyasining H2O (0%) suyultirilganda trombotsitlar sonining keskin pasayishi osmotik lizis bilan bog'liq bo'lishi mumkin. Shu bilan bir qatorda, bu trombotsitlarning to'planishi natijasida yuzaga keladigan artefakt bo'lishi mumkin, ammo bu suyultirilganda MPV o'zgarishining yo'qligidan farq qiladi. Bu topilma ba'zi trombotsitlar gipoosmolyarlikka juda sezgir ekanligini anglatadi.
Glyukozaning barcha 1:1 suyultirishlarida PLT miqdori hatto D5W (252 mOsm da gipotonik) bo'lsa ham 20-30% ga kamaydi, bu glyukozaning o'ziga xos osmotik bo'lmagan ta'sirini ko'rsatishi mumkin, chunki PLT ham, MPV ham konsentratsiyaning uch baravar oshishi bilan o'zgarishsiz qoldi. glyukoza. D5W dan D25W gacha. Aslida, PLT konsentratsiyasi osmolyarlikning oshishi bilan biroz oshish tendentsiyasiga ega edi.
PLT ning 1:1 va 1:5 suyultirishlar oralig'ida pasayishi, erish effekti boshlang'ich va yakuniy glyukoza konsentratsiyasiga bog'liqligini anglatadi. Agar u faqat boshlang'ich konsentratsiyaga bog'liq bo'lsa, unda PLT ning 1:1 konsentratsiyalar oralig'ida pasayishida farq bo'lishini kutish mumkin. Lekin biz bunday qilmaymiz. Agar lizis effekti faqat yakuniy glyukoza konsentratsiyasiga bog'liq bo'lsa, unda biz 20% 1:1 suyultirish va 20,8% 1:5 suyultirish o'rtasida katta farq kutmaymiz. Shunga qaramay, biz buni uddaladik.
Agar trombotsitlar yo'qolishi trombotsitlar lizisi tufayli yuzaga kelsa, qisman lizat hosil bo'ladi, shundan so'ng sitokinlar va o'sish omillari hujayradan tashqari muhitga chiqariladi. Bir nechta tadqiqotlar shuni ko'rsatdiki, trombotsitlar lizati proliferatsiya eritmasi sifatida PRP kabi deyarli samarali [11]. PRPning o'zi proliferatsiyani davolash uchun samarali yechim ekanligi ko'rsatilgan [12-14].
Faol bo'lmagan trombotsitlar bir nechta ichki tuzilmalar bilan mustahkamlangan disk shaklida aylanadi. Faollashtirish jarayonida ular ko'proq sharsimon yoki amyoba shaklini oladi, natijada hajm oshadi. Hajmning oshishi sirt maydonining ko'payishini talab qiladi, bu ochiq naycha tizimining (OCS) ekstruziyasi va membranaga ekzotsitik granulalar qo'shilishi natijasidir. Gipertonik glyukoza keltirib chiqaradigan MPV ning oshishi ushbu mexanizmlardan birini yoki ikkalasini ham o'z ichiga oladimi yoki yo'qmi, hali aniqlanmagan, ammo agar ikkinchisi bo'lsa, MPV ning oshishi degranulyatsiyani ko'rsatadi.
Ushbu tadqiqot shuni ko'rsatdiki, PRP yoki butun qon trombotsitlarida yuqori konsentratsiyali glyukoza ta'siriga duchor bo'lish 15 daqiqa ichida MPV ning oshishiga olib keldi, glyukoza konsentratsiyasi mos ravishda 25% va 41,6% ni tashkil etdi.
Trombotsitlar MPV ning oshishi kaltsiy oqimiga javoban atrofdagi mikrotubulalar chalkashliklarining kengayishi bilan bog'liq bo'lishi mumkin. Liu va boshqalar. Glyukoza trombotsitlar TRPC6 kanali orqali kaltsiy oqimini vositachilik qilishi ko'rsatilgan [6]. Bizning gipotezamiz shundan iboratki, glyukoza mikrotubulalar chalkashliklarining bo'shashishini keltirib chiqaradi, bu esa MPV ning oshishiga va trombotsitlar sezgirligi va/yoki faollashuviga olib keladi. Biroq, natijalarimizga ko'ra, bu faqat hikoyaning bir qismi. Bizning sinovlarimizda D25W dan past konsentratsiya MPV ning oshishiga olib kelmadi. Biz 12,5% dan 25% gacha bo'lgan glyukoza konsentratsiyasiga ta'sir qilishni sinovdan o'tkazmaganligimizni hisobga olsak, 1-bosqich natijalarimiz shuni ko'rsatadiki, glyukoza konsentratsiyasining bu diapazonida MPV ning oshishiga olib keladigan chegara bo'lishi mumkin. 3 va 4-bosqichlarda keyingi sinovlar shuni ko'rsatdiki, 20-25% glyukoza buning uchun chegara bo'lib tuyuladi, ammo nima uchun ekanligi noma'lumligicha qolmoqda.
Shuningdek, biz santrifugadan keyin MPV ning ~9% ga kamayganini kuzatdik. MPV ning bu pasayishi santrifuganing eritrotsitlar qatlamida qolib ketgan kattaroq va zichroq trombotsitlar bilan bog'liqmi yoki yo'qmi, noma'lum. Bu kuzatuv klinisyenlar uchun muhim bo'lishi mumkin, chunki bu PRP trombotsitlari WB trombotsitlarining kichikroq va kamroq zichroq kichik guruhi ekanligini anglatishi mumkin.
Avvalgi tadqiqotda biz qo'lda PRP tayyorlash arzon ekanligini ko'rsatgan edik [8]. Agar glyukoza to'qima trombotsitlarini yoki PRPni sezgirlashtirsa, ularni faollashishga ko'proq moyil qilsa yoki PRP qisman lizat xususiyatlari bilan ishlab chiqarilsa, bu regeneratsiyani kuchaytirishi va terapiyaga ehtiyojni kamaytirishi mumkin. Shuning uchun, PRP va yuqori konsentratsiyalangan glyukoza kombinatsiyasi PRP yoki glyukozaning o'zidan foydalanishga qaraganda tejamkorroq bo'lishi mumkin.
Bizning tadqiqotimizda bir nechta kamchiliklar mavjud. Birinchidan, biz bir nechta turli usullardan olingan PRP dan foydalanamiz. Bu qarama-qarshi natijalarga olib kelishi mumkin. Ikkinchidan, biz trombotsitlar faollashuvi sodir bo'lganligini aniqroq aniqlash uchun biron bir namunamizning biokimyoviy tahlilini o'tkaza olmadik. Alfa granulalarining degranulyatsiya darajasini yoki mavjudligini yaxshiroq tushunish uchun biz P-selektin, trombotsit omili 4, monotsit trombotsit agregatlari yoki trombotsitlar faollashuvining boshqa markerlarini o'lchashni xohlaymiz, ammo bu ushbu tadqiqot doirasidan tashqarida. Uchinchidan, biz glyukoza ta'sirida bo'lgan trombotsitlarda MPV ning ko'payishi mikrotubulalar chalkashliklariga ta'siri bilan bog'liqligini elektron mikroskopiya yoki boshqa usullar bilan tasdiqlay olmadik.
25% glyukoza bilan WB yoki PRP aralashmalari MPV ni oshirdi, bu trombotsitlar faollashuvining boshlanishini ko'rsatdi, ammo bu tadqiqot agregatsiya yoki degranulyatsiyaning rivojlanishini ko'rsatmadi. Gipertonik glyukoza aralashmasi trombotsitlarning yo'qolishiga olib keldi, bu ehtimol litik ta'sirni ifodalaydi. Trombotsitlarning qisman faollashishi yoki lizisi trombotsitlar in'ektsiyasidan keyin to'qimalarning regeneratsiyasiga olib kelishi mumkin. Bu o'zgarishlar qanday klinik oqibatlarga olib kelishi mumkinligi aniq emas. Keyingi tadqiqotlar faollashuv yoki lizisning aniqroq o'lchovlarini ko'rsatdi va WB yoki PRP bilan gipertonik glyukoza aralashmalarining turli klinik ta'sirlarini baholadi.
Glyukoza proliferativ terapiyasi - bu tez sur'atlar bilan kengayib borayotgan va klinik tadqiqotlarni qo'llab-quvvatlayotgan oddiy va arzon regenerativ terapiya. Ushbu tadqiqot, agar tasdiqlansa, proliferativ terapiyaning regenerativ mexanizmining bir qismini tushunishga yordam beradigan fiziologik mexanizmni taklif qiladi.
Missuri universiteti, Kanzas-Siti tibbiyot maktabi, Kanzas-Siti, AQShdagi biotibbiyot va sog'liqni saqlash informatikasi
Inson sub'ektlari: Ushbu tadqiqotning barcha ishtirokchilari rozilik berishdi yoki berishmadi. Xalqaro Hujayra Tibbiyoti Jamiyati ICMS-2017-003 tasdiqini berdi. Quyidagi protokol Xalqaro Hujayra Tibbiyoti Jamiyatining Institutsional Ko'rib chiqish Kengashi tomonidan keyingi foydalanish uchun tasdiqlandi: Sarlavha: Trombotsitlarga boy plazma preparatlari hosildorligini CBC boshlang'ich trombotsitlar soniga asoslangan holda hisoblash. Hayvonlar sub'ektlari: Barcha mualliflar ushbu tadqiqotda hech qanday hayvon yoki to'qimalar ishtirok etmaganligini tasdiqladilar. Manfaatlar to'qnashuvi: ICMJE Yagona Oshkor qilish Shakliga muvofiq, barcha mualliflar quyidagilarni e'lon qiladilar: To'lov/xizmat haqida ma'lumot: Barcha mualliflar taqdim etilgan ish uchun biron bir tashkilotdan moliyaviy yordam olmaganliklarini e'lon qiladilar. Moliyaviy munosabatlar: Barcha mualliflar hozirda yoki so'nggi uch yil ichida taqdim etilgan ish bilan qiziqishi mumkin bo'lgan biron bir tashkilot bilan moliyaviy munosabatlarga ega emasliklarini e'lon qiladilar. Boshqa munosabatlar: Barcha mualliflar taqdim etilgan ishga ta'sir qilishi mumkin bo'lgan boshqa munosabatlar yoki faoliyatlar yo'qligini e'lon qiladilar.
Harrison TE, Bowler J, Reeves K va boshqalar. (2022-yil 17-may) Glyukozaning trombotsitlar soni va hajmiga ta'siri: regenerativ tibbiyot uchun oqibatlari. Cure 14(5): e25081. doi:10.7759/cureus.25081
© Mualliflik huquqi 2022 Harrison va boshqalarga tegishli. Ushbu maqola Creative Commons Attribution litsenziyasi CC-BY 4.0 shartlari asosida tarqatilgan ochiq kirish huquqiga ega. Asl muallif va manba ko'rsatilgan taqdirda, istalgan vositada cheksiz foydalanish, tarqatish va ko'paytirishga ruxsat beriladi.