សូមអរគុណសម្រាប់ការចូលមើលគេហទំព័រ Nature.com។ កំណែកម្មវិធីរុករកដែលអ្នកកំពុងប្រើមានការគាំទ្រ CSS មានកំណត់។ ដើម្បីទទួលបានបទពិសោធន៍ល្អបំផុត យើងសូមណែនាំឱ្យអ្នកប្រើកម្មវិធីរុករកដែលបានធ្វើបច្ចុប្បន្នភាព (ឬបិទរបៀបឆបគ្នានៅក្នុង Internet Explorer)។ ទន្ទឹមនឹងនេះ ដើម្បីធានាបាននូវការគាំទ្រជាបន្តបន្ទាប់ យើងនឹងបង្ហាញគេហទំព័រដោយគ្មានរចនាប័ទ្ម និង JavaScript។
ការហូរឈាមដែលមិនអាចគ្រប់គ្រងបាន គឺជាមូលហេតុចម្បងមួយនៃការស្លាប់។ ការសម្រេចបាននូវភាពរឹងមាំនៃឈាមយ៉ាងឆាប់រហ័ស ធានានូវការរស់រានមានជីវិតរបស់បុគ្គលនោះ ជាជំនួយដំបូងក្នុងអំឡុងពេលប្រយុទ្ធ គ្រោះថ្នាក់ចរាចរណ៍ និងប្រតិបត្តិការកាត់បន្ថយការស្លាប់។ រន្ទាសមាសធាតុដែលពង្រឹងដោយសរសៃដែលមានរន្ធណាណូ (NFRCS) ដែលទទួលបានពីសមាសធាតុបង្កើតខ្សែភាពយន្ត hemostatic សាមញ្ញ (HFFC) ជាដំណាក់កាលបន្តអាចបង្កឱ្យមាន និងបង្កើនភាពរឹងមាំនៃឈាម។ ការអភិវឌ្ឍ NFRCS គឺផ្អែកលើការរចនាស្លាបរបស់សត្វកន្លាត។ រចនាសម្ព័ន្ធស្លាបរបស់សត្វកន្លាតមានស្លាបឆ្លងកាត់ និងស្លាបបណ្តោយ ហើយភ្នាសស្លាបត្រូវបានភ្ជាប់គ្នាទៅវិញទៅមក ដើម្បីរក្សាភាពសុចរិតនៃមីក្រូស្ត្រុកទ័រ។ HFFC ស្រោបផ្ទៃសរសៃដោយឯកសណ្ឋានជាមួយនឹងខ្សែភាពយន្តកម្រាស់ណាណូម៉ែត្រ និងភ្ជាប់កម្រាស់កប្បាសចែកចាយដោយចៃដន្យ (Ct) (ដំណាក់កាលបំបែក) ដើម្បីបង្កើតជារចនាសម្ព័ន្ធរន្ធណាណូ។ ការរួមបញ្ចូលគ្នានៃដំណាក់កាលបន្ត និងបំបែក កាត់បន្ថយថ្លៃដើមនៃផលិតផលដប់ដង បើប្រៀបធៀបទៅនឹងផលិតផលដែលមានលក់នៅលើទីផ្សារ។ NFRCS ដែលបានកែប្រែ (សំឡីអនាម័យ ឬខ្សែដៃ) អាចត្រូវបានប្រើនៅក្នុងកម្មវិធីជីវវេជ្ជសាស្ត្រជាច្រើន។ ការសិក្សានៅក្នុងខ្លួន (in vivo) បានសន្និដ្ឋានថា Cp NFRCS ដែលបានអភិវឌ្ឍជំរុញ និងបង្កើនដំណើរការកកឈាមនៅកន្លែងលាប។ NFRCS អាចកែប្រែបរិស្ថានខ្នាតតូច និងធ្វើសកម្មភាពនៅកម្រិតកោសិកា ដោយសារតែរចនាសម្ព័ន្ធ nanoporous របស់វា ដែលបណ្តាលឱ្យការព្យាបាលមុខរបួសកាន់តែប្រសើរឡើងនៅក្នុងគំរូមុខរបួសដែលកាត់ចេញ។
ការហូរឈាមដែលមិនអាចគ្រប់គ្រងបានក្នុងអំឡុងពេលប្រយុទ្ធ ក្នុងពេលវះកាត់ និងស្ថានភាពអាសន្នអាចបង្កការគំរាមកំហែងយ៉ាងធ្ងន់ធ្ងរដល់អាយុជីវិតរបស់អ្នករបួស1។ លក្ខខណ្ឌទាំងនេះនាំឱ្យមានការកើនឡើងជារួមនៃភាពធន់នឹងសរសៃឈាមគ្រឿងកុំព្យួទ័រ ដែលនាំឱ្យមានការឆក់ឈាម។ វិធានការសមស្របដើម្បីគ្រប់គ្រងការហូរឈាមអំឡុងពេល និងក្រោយពេលវះកាត់ត្រូវបានចាត់ទុកថាអាចគំរាមកំហែងដល់អាយុជីវិត2,3។ ការខូចខាតដល់សរសៃឈាមធំៗនាំឱ្យមានការបាត់បង់ឈាមយ៉ាងច្រើន ដែលបណ្តាលឱ្យអត្រាមរណភាព ≤ 50% ក្នុងការប្រយុទ្ធ និង 31% អំឡុងពេលវះកាត់1។ ការបាត់បង់ឈាមយ៉ាងច្រើននាំឱ្យមានការថយចុះបរិមាណរាងកាយ ដែលកាត់បន្ថយទិន្នផលបេះដូង។ ការកើនឡើងនៃភាពធន់នឹងសរសៃឈាមគ្រឿងកុំព្យួទ័រសរុប និងការចុះខ្សោយជាលំដាប់នៃមីក្រូឈាមរត់នាំឱ្យមានកង្វះអុកស៊ីសែននៅក្នុងសរីរាង្គទ្រទ្រង់ជីវិត។ ការឆក់ឈាមអាចកើតឡើងប្រសិនបើស្ថានភាពនៅតែបន្តដោយគ្មានអន្តរាគមន៍ប្រកបដោយប្រសិទ្ធភាព1,4,5។ ផលវិបាកផ្សេងទៀតរួមមានការវិវត្តនៃការថយចុះកម្តៅ និងអាស៊ីតមេតាបូលីក ក៏ដូចជាជំងឺកកឈាមដែលរារាំងដំណើរការកកឈាម។ ការឆក់ឈាមធ្ងន់ធ្ងរត្រូវបានផ្សារភ្ជាប់ជាមួយនឹងហានិភ័យខ្ពស់នៃការស្លាប់6,7,8។ នៅក្នុងការឆក់ថ្នាក់ទី III (រីកចម្រើន) ការបញ្ចូលឈាមគឺចាំបាច់សម្រាប់ការរស់រានមានជីវិតរបស់អ្នកជំងឺក្នុងអំឡុងពេលមានជំងឺ និងមរណភាពក្នុងពេលវះកាត់ និងក្រោយការវះកាត់។ ដើម្បីជម្នះស្ថានភាពគំរាមកំហែងដល់អាយុជីវិតទាំងអស់ខាងលើ យើងបានបង្កើតរនាំងសមាសធាតុដែលពង្រឹងដោយជាតិសរសៃដែលមានរន្ធណាណូ (NFRCS) ដែលប្រើប្រាស់កំហាប់ប៉ូលីមែរអប្បបរមា (0.5%) ដោយប្រើបន្សំនៃប៉ូលីមែររលាយក្នុងទឹកសម្រាប់ទប់ឈាម។
ជាមួយនឹងការប្រើប្រាស់ការពង្រឹងសរសៃ ផលិតផលដែលមានតម្លៃសមរម្យអាចត្រូវបានបង្កើតឡើង។ សរសៃដែលរៀបចំដោយចៃដន្យស្រដៀងនឹងរចនាសម្ព័ន្ធស្លាបរបស់សត្វកន្លាត ដែលមានតុល្យភាពដោយឆ្នូតផ្ដេក និងបញ្ឈរនៅលើស្លាប។ សរសៃឆ្លងកាត់ និងបណ្តោយនៃស្លាបទំនាក់ទំនងជាមួយភ្នាសស្លាប (រូបភាពទី 1)។ NFRCS មាន Ct ដែលបានពង្រឹងជាប្រព័ន្ធរន្ទាដែលមានកម្លាំងរូបវន្ត និងមេកានិចល្អជាង (រូបភាពទី 1)។ ដោយសារតែតម្លៃសមរម្យ និងជំនាញ គ្រូពេទ្យវះកាត់ចូលចិត្តប្រើរង្វាស់ខ្សែកប្បាស (Ct) អំឡុងពេលវះកាត់ និងការស្លៀកពាក់។ ដូច្នេះ ដោយពិចារណាលើអត្ថប្រយោជន៍ច្រើនរបស់វា រួមទាំងសែលុយឡូសគ្រីស្តាល់ > 90% (រួមចំណែកដល់ការបង្កើនសកម្មភាព hemostatic) Ct ត្រូវបានគេប្រើជាប្រព័ន្ធគ្រោងឆ្អឹងរបស់ NFRCS9,10។ ដូច្នេះ ដោយពិចារណាលើអត្ថប្រយោជន៍ច្រើនរបស់វា រួមទាំងសែលុយឡូសគ្រីស្តាល់ > 90% (រួមចំណែកដល់ការបង្កើនសកម្មភាព hemostatic) Ct ត្រូវបានគេប្រើជាប្រព័ន្ធគ្រោងឆ្អឹងរបស់ NFRCS9,10។ Следовательно, учитывая его многочисленные преимущества, в том числе > 90% кристаллической целуслой целуслой целуслот повышении гемостатической активности), Ct использовали в качестве скелетной системы NFRCS9,10. ដូច្នេះ ដោយសារ​តែ​វា​មាន​អត្ថប្រយោជន៍​ជាច្រើន រួម​ទាំង​សែលុយឡូស​គ្រីស្តាល់ >90% (ពាក់ព័ន្ធ​នឹង​សកម្មភាព​កកឈាម​កើនឡើង) Ct ត្រូវ​បាន​ប្រើ​ជា​ប្រព័ន្ធ​គ្រោងឆ្អឹង NFRCS9,10។因此，考虑到它的多重益处，包括> 90%的结晶纤维素（有助于增强止血活性），Ct 被活性，Ct 被9䜨的骨架系统។因此，考虑到它的多重益处，包括> 90%ដូច្នេះ ដោយសារ​អត្ថប្រយោជន៍​ជាច្រើន​របស់វា រួមទាំង​សែលុយឡូស​គ្រីស្តាល់​ជាង 90% (ជួយបង្កើន​សកម្មភាព​រក្សា​ឈាម) Ct ត្រូវ​បាន​ប្រើ​ជា​រនាំង​សម្រាប់ NFRCS9,10។សារធាតុ Ct ត្រូវបានស្រោបដោយស្រទាប់ខាងក្រៅ (ការបង្កើតជាខ្សែភាពយន្តក្រាស់ណាណូត្រូវបានគេសង្កេតឃើញ) ហើយត្រូវបានភ្ជាប់ជាមួយនឹងសមាសធាតុបង្កើតជាខ្សែភាពយន្ត hemostatic (HFFC)។ HFFC ដើរតួដូចជា matrigel ដោយកាន់ Ct ដែលដាក់ដោយចៃដន្យជាមួយគ្នា។ ការរចនាដែលបានអភិវឌ្ឍបញ្ជូនភាពតានតឹងនៅក្នុងដំណាក់កាលបំបែក (សរសៃពង្រឹង)។ វាពិបាកក្នុងការទទួលបានរចនាសម្ព័ន្ធ nanoporous ដែលមានកម្លាំងមេកានិចល្អដោយប្រើកំហាប់ប៉ូលីមែរតិចតួចបំផុត។ លើសពីនេះ វាមិនងាយស្រួលទេក្នុងការប្ដូរតាមបំណងនូវផ្សិតផ្សេងៗគ្នាសម្រាប់កម្មវិធីជីវវេជ្ជសាស្ត្រផ្សេងៗគ្នា។
រូបភាពនេះបង្ហាញដ្យាក្រាមនៃការរចនា NFRCS ដោយផ្អែកលើរចនាសម្ព័ន្ធស្លាបរបស់សត្វកន្លាត (ក)។ រូបភាពនេះបង្ហាញពីភាពស្រដៀងគ្នាប្រៀបធៀបនៃរចនាសម្ព័ន្ធស្លាបរបស់សត្វកន្លាត (សរសៃដែលប្រសព្វគ្នា និងសរសៃបណ្តោយនៃស្លាបត្រូវបានភ្ជាប់គ្នា) និងរូបថតមីក្រូទស្សន៍កាត់ផ្នែកនៃ Cp NFRCS (ខ)។ ការតំណាងគ្រោងការណ៍នៃ NFRCS។
NFRCs ត្រូវបានបង្កើតឡើងដោយប្រើប្រាស់ HFFC ជាដំណាក់កាលបន្តដើម្បីដោះស្រាយដែនកំណត់ខាងលើ។ HFFC ត្រូវបានផ្សំឡើងពីប៉ូលីមែរ hemostatic ជាច្រើនប្រភេទ រួមទាំង chitosan (ជាប៉ូលីមែរ hemostatic សំខាន់) ជាមួយ methylcellulose (MC) hydroxypropyl methylcellulose (HPMC 50 cp) និង polyvinyl alcohol (PVA)) (125 kDa) ជាប៉ូលីមែរជំនួយដែលជំរុញការបង្កើត thrombus។ ការបន្ថែម polyvinylpyrrolidine K30 (PVP K30) បានធ្វើអោយប្រសើរឡើងនូវសមត្ថភាពស្រូបយកសំណើមរបស់ NFRCS។ Polyethylene glycol 400 (PEG 400) ត្រូវបានបន្ថែមដើម្បីធ្វើអោយប្រសើរឡើងនូវ polymer crosslinking នៅក្នុងល្បាយ polymer ភ្ជាប់។ សមាសធាតុ hemostatic HFFC បីផ្សេងគ្នា (Cm HFFC, Ch HFFC និង Cp HFFC) គឺ chitosan ជាមួយ MC (Cm) chitosan ជាមួយ HPMC (Ch) និង chitosan ជាមួយ PVA (Cp) ត្រូវបានអនុវត្តទៅ Ct។ ការសិក្សា​កំណត់​លក្ខណៈ​ជាច្រើន​នៅក្នុង​វីត្រូ និង​នៅក្នុង​វីវ៉ូ បាន​បញ្ជាក់​ពី​សកម្មភាព​រក្សា​ការកកឈាម និង​ព្យាបាល​របួស​របស់ NFRCS។ សម្ភារៈ​សមាសធាតុ​ដែល​ផ្តល់​ដោយ NFRCS អាច​ត្រូវ​បាន​ប្រើ​ដើម្បី​ប្ដូរ​ទម្រង់​ផ្សេងៗ​នៃ​រន្ទា​ដើម្បី​បំពេញ​តម្រូវការ​ជាក់លាក់។
លើសពីនេះ NFRCS អាចត្រូវបានកែប្រែជាបង់រុំ ឬរមូរដើម្បីគ្របដណ្តប់លើតំបន់របួសទាំងមូលនៃចុងខាងក្រោម និងផ្នែកផ្សេងទៀតនៃរាងកាយ។ ជាពិសេសសម្រាប់របួសអវយវៈប្រយុទ្ធ ការរចនា NFRCS ដែលបានរចនាឡើងអាចត្រូវបានផ្លាស់ប្តូរទៅជាដៃពាក់កណ្តាល ឬជើងពេញ (រូបភាពបន្ថែម S11)។ NFRCS អាចត្រូវបានផលិតទៅជាខ្សែដៃដែលមានកាវជាលិកា ដែលអាចត្រូវបានប្រើដើម្បីបញ្ឈប់ការហូរឈាមពីរបួសកដៃធ្វើអត្តឃាតធ្ងន់ធ្ងរ។ គោលដៅចម្បងរបស់យើងគឺអភិវឌ្ឍ NFRCS ដែលមានប៉ូលីមែរតិចតួចតាមដែលអាចធ្វើទៅបាន ដែលអាចចែកចាយដល់ប្រជាជនមួយចំនួនធំ (ក្រោមបន្ទាត់ភាពក្រីក្រ) និងដែលអាចដាក់ក្នុងឧបករណ៍សង្គ្រោះបឋម។ NFRCS មានការរចនាសាមញ្ញ មានប្រសិទ្ធភាព និងសន្សំសំចៃ ផ្តល់អត្ថប្រយោជន៍ដល់សហគមន៍ក្នុងតំបន់ និងអាចមានផលប៉ះពាល់ជាសកល។
ជីតូសាន (ទម្ងន់ម៉ូលេគុល 80 kDa) និងអាម៉ារ៉ាន់ត្រូវបានទិញពីក្រុមហ៊ុន Merck ប្រទេសឥណ្ឌា។ អ៊ីដ្រូស៊ីប្រូភីលមេទីលសែលុយឡូស 50 Cp, ប៉ូលីអេទីឡែនគ្លីកូល 400 និងមេទីលសែលុយឡូសត្រូវបានទិញពីក្រុមហ៊ុន Loba Chemie Pvt. LLC ទីក្រុងមុំបៃ។ អាល់កុលប៉ូលីវីនីល (ទម្ងន់ម៉ូលេគុល 125 kDa) (87-90% អ៊ីដ្រូលីស) ត្រូវបានទិញពីក្រុមហ៊ុន National Chemicals រដ្ឋ Gujarat។ ប៉ូលីវីនីលភីរ៉ូលីឌីន K30 ត្រូវបានទិញពីក្រុមហ៊ុន Molychem ទីក្រុងមុំបៃ ហើយសំឡីអនាម័យត្រូវបានទិញពីក្រុមហ៊ុន Ramaraju Surgery Cotton Mills Ltd. រដ្ឋ Tamil Nadu ជាមួយទឹក Milli Q (ប្រព័ន្ធបន្សុទ្ធទឹក Direct-Q3 ទីក្រុង Merck ប្រទេសឥណ្ឌា) ជាសារធាតុដឹកជញ្ជូន។
NFRCS ត្រូវបានបង្កើតឡើងដោយប្រើវិធីសាស្ត្រ lyophilization11,12។ សមាសធាតុ HFFC ទាំងអស់ (តារាងទី 1) ត្រូវបានរៀបចំដោយប្រើឧបករណ៍កូរមេកានិច។ រៀបចំដំណោះស្រាយ chitosan 0.5% ដោយប្រើអាស៊ីតអាសេទិក 1% ក្នុងទឹកដោយការកូរជាបន្តបន្ទាប់ក្នុងល្បឿន 800 rpm លើឧបករណ៍កូរមេកានិច។ ទម្ងន់ពិតប្រាកដនៃប៉ូលីមែរដែលផ្ទុកបានចង្អុលបង្ហាញនៅក្នុងតារាងទី 1 ត្រូវបានបន្ថែមទៅក្នុងដំណោះស្រាយ chitosan ហើយកូររហូតដល់ទទួលបានដំណោះស្រាយប៉ូលីមែរថ្លា។ PVP K30 និង PEG 400 ត្រូវបានបន្ថែមទៅក្នុងល្បាយលទ្ធផលក្នុងបរិមាណដែលបានចង្អុលបង្ហាញនៅក្នុងតារាងទី 1 ហើយការកូរត្រូវបានបន្តរហូតដល់ទទួលបានដំណោះស្រាយប៉ូលីមែរស្អិតថ្លា។ ទឹកដំណោះស្រាយប៉ូលីមែរលទ្ធផលត្រូវបានបញ្ចេញសំឡេងរយៈពេល 60 នាទីដើម្បីយកពពុះខ្យល់ដែលជាប់ចេញពីល្បាយប៉ូលីមែរ។ ដូចបង្ហាញក្នុងរូបភាពបន្ថែម S1(ខ) Ct ត្រូវបានចែកចាយស្មើៗគ្នានៅក្នុងអណ្តូងនីមួយៗនៃចាន 6 អណ្តូង (ផ្សិត) ដែលបានបន្ថែមជាមួយ HFFC 5 មីលីលីត្រ។
បន្ទះ​ប្រាំមួយ​អណ្តូង​ត្រូវ​បាន​សូនីតា​រយៈពេល 60 នាទី ដើម្បី​សម្រេច​បាន​នូវ​ការ​សើម​ស្មើៗ​គ្នា និង​ការ​ចែកចាយ HFFC នៅ​ក្នុង​បណ្តាញ Ct។ បន្ទាប់​មក​បង្កក​បន្ទះ​ប្រាំមួយ​អណ្តូង​នៅ​ -20°C រយៈពេល 8-12 ម៉ោង។ បន្ទះ​បង្កក​ត្រូវ​បាន​សម្ងួត​រយៈពេល 48 ម៉ោង ដើម្បី​ទទួល​បាន​រូបមន្ត​ផ្សេងៗ​នៃ NFRCS។ នីតិវិធី​ដូចគ្នា​នេះ​ត្រូវ​បាន​ប្រើ​ដើម្បី​ផលិត​រាង និង​រចនាសម្ព័ន្ធ​ផ្សេងៗ​គ្នា ដូចជា​សំឡី​អនាម័យ ឬ​សំឡី​អនាម័យ​រាង​ស៊ីឡាំង ឬ​រាង​ផ្សេង​ទៀត​សម្រាប់​កម្មវិធី​ផ្សេងៗ។
សារធាតុ Chitosan (80 kDa) (3%) ដែលមានទម្ងន់ត្រឹមត្រូវ ត្រូវបានរំលាយក្នុងអាស៊ីតអាសេទិក 1% ដោយប្រើឧបករណ៍កូរម៉ាញេទិក។ សារធាតុ PEG 400 1% ត្រូវបានបន្ថែមទៅក្នុងដំណោះស្រាយ Chitosan ជាលទ្ធផល ហើយកូររយៈពេល 30 នាទី។ ចាក់ដំណោះស្រាយលទ្ធផលចូលទៅក្នុងធុងការ៉េ ឬចតុកោណកែង ហើយបង្កកនៅសីតុណ្ហភាព -80°C រយៈពេល 12 ម៉ោង។ គំរូកកត្រូវបានសម្ងួតរយៈពេល 48 ម៉ោង ដើម្បីទទួលបាន Cs13 ដែលមានរន្ធញើស។
NFRCS ដែលបានអភិវឌ្ឍត្រូវបានទទួលរងនូវការពិសោធន៍ដោយប្រើវិសាលគមអ៊ីនហ្វ្រារ៉េដ Fourier transform infrared spectroscopy (FTIR) (Shimadzu 8400 s FTIR, តូក្យូ, ជប៉ុន) ដើម្បីបញ្ជាក់ពីភាពឆបគ្នាខាងគីមីរបស់ chitosan ជាមួយប៉ូលីមែរផ្សេងទៀត14,15។ វិសាលគម FTIR (ទទឹងនៃជួរវិសាលគមពី 400 ដល់ 4000 cm-1) នៃគំរូដែលបានសាកល្បងទាំងអស់ត្រូវបានទទួលដោយធ្វើការស្កេនចំនួន 32 ។
អត្រាស្រូបយកឈាម (BAR) សម្រាប់រូបមន្តទាំងអស់ត្រូវបានវាយតម្លៃដោយប្រើវិធីសាស្ត្រដែលបានពិពណ៌នាដោយ Chen et al. 16 ជាមួយនឹងការកែប្រែបន្តិចបន្តួច។ NFRKs ដែលបានអភិវឌ្ឍនៃសមាសធាតុទាំងអស់ត្រូវបានសម្ងួតក្នុងឡសម្ងួតក្នុងសុញ្ញកាសនៅសីតុណ្ហភាព 105°C ពេញមួយយប់ដើម្បីយកសារធាតុរំលាយដែលនៅសេសសល់ចេញ។ NFRCS 30 មីលីក្រាម (ទម្ងន់គំរូដំបូង – W0) និង Ct 30 មីលីក្រាម (ការគ្រប់គ្រងវិជ្ជមាន) ត្រូវបានដាក់ក្នុងចានដាច់ដោយឡែកដែលមានល្បាយបឋមនៃសូដ្យូមស៊ីត្រាត 3.8%។ នៅចន្លោះពេលដែលបានកំណត់ជាមុន ពោលគឺ 5, 10, 20, 30, 40 និង 60 វិនាទី NFRCS ត្រូវបានយកចេញ ហើយផ្ទៃរបស់វាត្រូវបានសម្អាតពីឈាមដែលមិនទាន់ស្រូបយកដោយដាក់គំរូនៅលើ Ct រយៈពេល 30 វិនាទី។ ទម្ងន់ចុងក្រោយនៃឈាមដែលស្រូបយកដោយ NFRCS 16 ត្រូវបានពិចារណា (W1) នៅចំណុចពេលវេលានីមួយៗ។ គណនាភាគរយ BAR ដោយប្រើរូបមន្តដូចខាងក្រោម៖
ពេលវេលាកំណកឈាម (BCT) ត្រូវបានកំណត់ដូចដែលបានរាយការណ៍ដោយ Wang et al. 17។ ពេលវេលាដែលត្រូវការសម្រាប់ឈាមទាំងមូល (ឈាមកណ្តុរដែលលាយជាមុនជាមួយសូដ្យូមស៊ីត្រាត 3.8%) ដើម្បីកំណកនៅក្នុងវត្តមាននៃ NFRCS ត្រូវបានគណនាជា BCT នៃគំរូសាកល្បង។ សមាសធាតុ NFRCS ផ្សេងៗ (30 មីលីក្រាម) ត្រូវបានដាក់ក្នុងដបគម្របវីស 10 មីលីលីត្រ ហើយភ្ញាស់នៅសីតុណ្ហភាព 37°C។ ឈាម (0.5 មីលីលីត្រ) ត្រូវបានបន្ថែមទៅក្នុងដប ហើយ 0.3 មីលីលីត្រនៃ 0.2 M CaCl2 ត្រូវបានបន្ថែមដើម្បីធ្វើឱ្យឈាមសកម្ម។ ជាចុងក្រោយ បញ្ច្រាសដបរៀងរាល់ 15 វិនាទីម្តង (រហូតដល់ 180°) រហូតដល់កំណកឈាមរឹង។ BCT នៃគំរូត្រូវបានប៉ាន់ប្រមាណដោយចំនួននៃការបង្វិលវ៉ាល់ 17,18។ ដោយផ្អែកលើ BCT សមាសធាតុល្អបំផុតពីរពី NFRCS Cm, Ch និង Cp ត្រូវបានជ្រើសរើសសម្រាប់ការសិក្សាកំណត់លក្ខណៈបន្ថែម។
អត្រាកកឈាមប្រចាំថ្ងៃ (BCT) នៃសមាសធាតុ Ch NFRCS និង Cp NFRCS ត្រូវបានកំណត់ដោយអនុវត្តវិធីសាស្ត្រដែលបានពិពណ៌នាដោយ Li et al. 19។ ដាក់ Ch NFRCS, Cp NFRCS និង Cs ទំហំ 15 x 15 mm2 (ក្រុមត្រួតពិនិត្យវិជ្ជមាន) ចូលទៅក្នុងចាន Petri ដាច់ដោយឡែកពីគ្នា (37°C)។ ឈាមដែលមានផ្ទុកសូដ្យូមស៊ីត្រាត 3.8% ត្រូវបានលាយជាមួយ CaCl2 0.2 M ក្នុងសមាមាត្របរិមាណ 10:1 ដើម្បីចាប់ផ្តើមដំណើរការកកឈាម។ ល្បាយឈាមកណ្តុរ CaCl2 0.2 M ចំនួន 20 µl ត្រូវបានអនុវត្តទៅលើផ្ទៃគំរូ ហើយដាក់ក្នុងចាន Petri ទទេ។ ក្រុមត្រួតពិនិត្យត្រូវបានចាក់ឈាមចូលទៅក្នុងចាន Petri ទទេដោយមិនប្រើ Ct។ នៅចន្លោះពេលថេរ 0, 3 និង 5 នាទី បញ្ឈប់ការកកឈាមដោយបន្ថែមទឹក deionized (DI) ចំនួន 10 មីលីលីត្រទៅក្នុងគំរូដែលមានចានដោយមិនរំខានដល់កំណកឈាម។ កោសិកាឈាមក្រហមដែលមិនកក (erythrocytes) ឆ្លងកាត់ការបំបែកឈាមនៅក្នុងវត្តមាននៃទឹក deionized ហើយបញ្ចេញអេម៉ូក្លូប៊ីន។ អេម៉ូក្លូប៊ីននៅចំណុចពេលវេលាផ្សេងៗគ្នា (HA(t)) ត្រូវបានវាស់នៅ 540 nm (λmax hemoglobin) ដោយប្រើវិសាលគម UV-Vis។ ការស្រូបយកដាច់ខាតនៃអេម៉ូក្លូប៊ីន (AH(0)) ក្នុង 0 នាទី នៃឈាម 20 µl ក្នុងទឹក 10 មីលីលីត្រ ដែលគ្មានអ៊ីយ៉ុង ត្រូវបានយកជាស្តង់ដារយោង។ ការស្រូបយកអេម៉ូក្លូប៊ីនដែលទាក់ទង (RHA) នៃឈាមដែលកកត្រូវបានគណនាពីសមាមាត្រ HA(t)/HA(0) ដោយប្រើឈាមមួយបាច់ដូចគ្នា។
ដោយប្រើឧបករណ៍វិភាគវាយនភាព (Texture Pro CT V1.3 Build 15, Brookfield, សហរដ្ឋអាមេរិក) លក្ខណៈសម្បត្តិស្អិតរបស់ NFRK ទៅនឹងជាលិកាដែលខូចត្រូវបានកំណត់។ ចុចចានរាងស៊ីឡាំងបាតបើកចំហទល់នឹងផ្នែកខាងក្នុងនៃស្បែកជ្រូក (ដោយគ្មានស្រទាប់ខ្លាញ់)។ គំរូ (Ch NFRCS និង Cp NFRCS) ត្រូវបានអនុវត្តតាមរយៈបំពង់ចូលទៅក្នុងផ្សិតរាងស៊ីឡាំងដើម្បីបង្កើតភាពស្អិតទៅនឹងស្បែកជ្រូក។ បន្ទាប់ពីការភ្ញាស់រយៈពេល 3 នាទីនៅសីតុណ្ហភាពបន្ទប់ (RT) (25°C) កម្លាំងស្អិត NFRCS ត្រូវបានកត់ត្រាក្នុងអត្រាថេរ 0.5 មីលីម៉ែត្រ/វិនាទី។
លក្ខណៈពិសេសចម្បងនៃសារធាតុផ្សាភ្ជាប់វះកាត់គឺដើម្បីបង្កើនការកកឈាម ខណៈពេលដែលកាត់បន្ថយការបាត់បង់ឈាម។ ការកកឈាមដែលមិនបាត់បង់នៅក្នុង NFRCS ត្រូវបានវាយតម្លៃដោយប្រើវិធីសាស្ត្រដែលបានបោះពុម្ពផ្សាយពីមុនជាមួយនឹងការកែប្រែបន្តិចបន្តួច 19។ ធ្វើបំពង់មីក្រូសេនទ្រីហ្វុយ (2 មីលីលីត្រ) (អង្កត់ផ្ចិតខាងក្នុង 10 មីលីម៉ែត្រ) ដែលមានរន្ធ 8 × 5 មីលីម៉ែត្រ2 នៅម្ខាងនៃបំពង់សេនទ្រីហ្វុយ (តំណាងឱ្យមុខរបួសបើកចំហ)។ NFRCS ត្រូវបានប្រើដើម្បីបិទការបើក ហើយកាសែតត្រូវបានប្រើដើម្បីបិទគែមខាងក្រៅ។ បន្ថែម 20 µl នៃ 0.2 M CaCl2 ទៅក្នុងបំពង់មីក្រូសេនទ្រីហ្វុយដែលមានល្បាយសូដ្យូមស៊ីត្រាត 3.8%។ បន្ទាប់ពី 10 នាទី បំពង់មីក្រូសេនទ្រីហ្វុយត្រូវបានយកចេញពីចាន ហើយការកើនឡើងនៃម៉ាស់នៃចានត្រូវបានកំណត់ដោយសារតែលំហូរឈាមចេញពី NFRK (n = 3)។ ការបាត់បង់ឈាម Ch NFRCS និង Cp NFRCS ត្រូវបានប្រៀបធៀបជាមួយ Cs។
ភាពសុចរិតសើមរបស់ NFRCS ត្រូវបានកំណត់ដោយផ្អែកលើវិធីសាស្ត្រដែលបានពិពណ៌នាដោយ Mishra និង Chaudhary21 ជាមួយនឹងការកែប្រែតិចតួច។ ដាក់ NFRCS ទៅក្នុងដប Erlenmeyer ចំណុះ 100 មីលីលីត្រ ជាមួយទឹក 50 មីលីលីត្រ ហើយកូររយៈពេល 60 វិនាទីដោយមិនបង្កើតជាកំពូល។ ការត្រួតពិនិត្យដោយមើលឃើញ និងការកំណត់អាទិភាពនៃគំរូសម្រាប់ភាពសុចរិតរូបវន្តដោយផ្អែកលើការប្រមូល។
កម្លាំងចងរបស់ HFFC ទៅនឹង Ct ត្រូវបានសិក្សាដោយប្រើវិធីសាស្ត្រដែលបានបោះពុម្ពផ្សាយពីមុនជាមួយនឹងការកែប្រែតិចតួច។ ភាពសុចរិតនៃថ្នាំកូតផ្ទៃត្រូវបានវាយតម្លៃដោយការប៉ះពាល់ NFRK ទៅនឹងរលកសូរស័ព្ទ (ការរំញោចខាងក្រៅ) នៅក្នុងវត្តមាននៃទឹក milliQ (Ct)។ NFRCS Ch NFRCS និង Cp NFRCS ដែលបានអភិវឌ្ឍត្រូវបានដាក់ក្នុងប៊ីកឺរដែលពោរពេញទៅដោយទឹក ហើយត្រូវបានបញ្ចេញសំឡេងរយៈពេល 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10 និង 30 នាទីរៀងៗខ្លួន។ បន្ទាប់ពីស្ងួត ភាពខុសគ្នាភាគរយរវាងទម្ងន់ដំបូង និងទម្ងន់ចុងក្រោយរបស់ NFRCS ត្រូវបានប្រើដើម្បីគណនាភាគរយនៃការបាត់បង់សម្ភារៈ (HFFC)។ BCT នៅក្នុង vitro បានគាំទ្របន្ថែមទៀតនូវកម្លាំងចង ឬការបាត់បង់សម្ភារៈផ្ទៃ។ ប្រសិទ្ធភាពនៃការភ្ជាប់ HFFC ទៅនឹង Ct ផ្តល់នូវការកកឈាម និងថ្នាំកូតយឺតនៅលើផ្ទៃនៃ Ct22។
ភាពដូចគ្នានៃ NFRCS ដែលបានអភិវឌ្ឍត្រូវបានកំណត់ដោយ BCT នៃគំរូ (30 មីលីក្រាម) ដែលយកចេញពីទីតាំងទូទៅដែលបានជ្រើសរើសដោយចៃដន្យនៃ NFRCS។ អនុវត្តតាមនីតិវិធី BCT ដែលបានរៀបរាប់ខាងលើដើម្បីកំណត់ការអនុលោមតាម NFRCS។ ភាពជិតគ្នារវាងគំរូទាំងប្រាំធានាបាននូវការគ្របដណ្តប់លើផ្ទៃឯកសណ្ឋាន និងការដាក់ HFFC នៅក្នុងសំណាញ់ Ct។
តំបន់ទំនាក់ទំនងឈាមនាមករណ៍ (NBCA) ត្រូវបានកំណត់ដូចដែលបានរាយការណ៍ពីមុនជាមួយនឹងការកែប្រែមួយចំនួន។ ធ្វើឱ្យឈាមកកដោយការគៀបឈាម 20 µl រវាងផ្ទៃទាំងពីរនៃ Ct, Ch NFRCS, Cp NFRCS និង Cs។ បន្ទាប់ពី 1 ម៉ោង ផ្នែកទាំងពីរនៃ stent ត្រូវបានបំបែកចេញ ហើយវាស់ផ្ទៃនៃកំណកឈាមដោយដៃ។ តម្លៃជាមធ្យមនៃការធ្វើម្តងទៀតបីដងត្រូវបានចាត់ទុកថាជា NBCA NFRCS19។
ការវិភាគការស្រូបយកចំហាយទឹកថាមវន្ត (DVS) ត្រូវបានប្រើដើម្បីវាយតម្លៃប្រសិទ្ធភាពរបស់ NFRCS ក្នុងការស្រូបយកទឹកពីបរិស្ថានខាងក្រៅ ឬពីកន្លែងរងរបួសដែលទទួលខុសត្រូវចំពោះការចាប់ផ្តើមការកកឈាម។ DVS វាយតម្លៃ ឬកត់ត្រាការស្រូបយក និងការបាត់បង់ចំហាយទឹកនៅក្នុងគំរូដោយវិធីសាស្ត្រទម្ងន់ ដោយប្រើតុល្យភាពដែលងាយប្រតិកម្មខ្លាំងជាមួយនឹងគុណភាពបង្ហាញម៉ាស់ ±0.1 µg។ សម្ពាធចំហាយទឹកដោយផ្នែក (សំណើមដែលទាក់ទង) ត្រូវបានបង្កើតឡើងដោយឧបករណ៍បញ្ជាលំហូរម៉ាស់អេឡិចត្រូនិចជុំវិញគំរូដោយលាយឧស្ម័នផ្ទុកឆ្អែត និងឧស្ម័នផ្ទុកស្ងួត។ យោងតាមគោលការណ៍ណែនាំរបស់ឱសថស្ថានអឺរ៉ុប ដោយផ្អែកលើភាគរយនៃការស្រូបយកសំណើមដោយគំរូ គំរូត្រូវបានចាត់ថ្នាក់ជា 4 ប្រភេទ (0–0.012% w/w− មិនសើមដោយសំណើម 0.2–2% w/w សើមបន្តិច 2–15% សើមមធ្យម និង > 15% សើមខ្លាំង)23។ យោងតាមគោលការណ៍ណែនាំរបស់ឱសថស្ថានអឺរ៉ុប ដោយផ្អែកលើភាគរយនៃការស្រូបយកសំណើមដោយគំរូ គំរូត្រូវបានចាត់ថ្នាក់ជា 4 ប្រភេទ (0–0.012% w/w− មិនសើមដោយសំណើម 0.2–2% w/w សើមបន្តិច 2–15% សើមមធ្យម និង > 15% សើមខ្លាំង)23។អនុលោមតាមអនុសាសន៍របស់ឱសថស្ថានអឺរ៉ុប អាស្រ័យលើភាគរយនៃការស្រូបយកសំណើមដោយគំរូ គំរូត្រូវបានបែងចែកជា 4 ប្រភេទ (0–0.012% w/w – មិនសើមសំណើម 0.2–2% w/w សើមសំណើមបន្តិច 2– 15%)។% умеренно гигроскопичен и > 15% очень гигроскопичен)23. % សំណើមមធ្យម និង > 15% សំណើមខ្លាំង)23.根据欧洲药典指南，根据样品吸收水分的百分比，样品分为4类（0-0.012% w/w- 靿吸、 靀分为4轻微吸湿性、2-15% 适度吸湿，> 15% 非常吸湿）23 ។根据欧洲药典指南，根据吸收水分的百分比样品分为分为分为（百分比样品分为分为分为縺吻。-0性、、、、、 0.2-2% W/w 轻微、2-15%适度吸湿，> 15%非常吸湿）23 ។អនុលោមតាមអនុសាសន៍របស់ឱសថស្ថានអឺរ៉ុប គំរូត្រូវបានបែងចែកជា ៤ ថ្នាក់អាស្រ័យលើភាគរយនៃសំណើមដែលស្រូបយកដោយគំរូ (០-០,០១២% តាមទម្ងន់ - មិនសើម ០,២-២% តាមទម្ងន់ សើមបន្តិច ២-១៥% តាមទម្ងន់)។% умеренно гигроскопичен, > 15 % очень гигроскопичен) 23. % សំណើមមធ្យម, > 15% សំណើមខ្លាំង) 23.ប្រសិទ្ធភាព​សំណើម​នៃ NFCS X NFCS និង TsN NFCS ត្រូវ​បាន​កំណត់​លើ​ម៉ាស៊ីន​វិភាគ DVS TA TGA Q5000 SA។ អំឡុង​ពេល​ដំណើរការ​នេះ ពេលវេលា​ដំណើរការ សំណើម​ដែល​ទាក់ទង (RH) និង​ទម្ងន់​គំរូ​ជាក់ស្តែង​នៅ 25°C24 ត្រូវ​បាន​ទទួល។ មាតិកា​សំណើម​ត្រូវ​បាន​គណនា​ដោយ​ការ​វិភាគ​ម៉ាស់ NFRCS ដែល​ត្រឹមត្រូវ​ដោយ​ប្រើ​សមីការ​ដូច​ខាង​ក្រោម៖
MC គឺជាសំណើម NFRCS។ m1 – ទម្ងន់ស្ងួតនៃ NSAIDs។ m2 គឺជាម៉ាស់ NFRCS ជាក់ស្តែងនៅ RH ដែលបានផ្តល់ឱ្យ។
ផ្ទៃសរុបត្រូវបានប៉ាន់ប្រមាណដោយប្រើការពិសោធន៍ស្រូបយកអាសូតជាមួយអាសូតរាវបន្ទាប់ពីចាក់សំណាកចេញពីគំរូនៅសីតុណ្ហភាព 25°C រយៈពេល 10 ម៉ោង (< 7 × 10–3 Torr)។ ផ្ទៃសរុបត្រូវបានប៉ាន់ប្រមាណដោយប្រើការពិសោធន៍ស្រូបយកអាសូតជាមួយអាសូតរាវបន្ទាប់ពីចាក់សំណាកចេញពីគំរូនៅសីតុណ្ហភាព 25°C រយៈពេល 10 ម៉ោង (< 7 × 10–3 Torr)។ Общая площадь поверхности оценивалась с помощью эксперимента по адсорбции азота жидким азовном посперимента при 25 °С в течение 10 ч (< 7 × 10–3 Торр) ។ ផ្ទៃសរុបត្រូវបានប៉ាន់ប្រមាណដោយប្រើការពិសោធន៍ស្រូបយកអាសូតជាមួយអាសូតរាវបន្ទាប់ពីគំរូត្រូវបានបង្ហូរចេញនៅសីតុណ្ហភាព 25°C រយៈពេល 10 ម៉ោង (< 7 × 10–3 Torr)។在25°C 清空样品10小时（< 7 × 10-3 Torr）后，使用液氮的氮吸附实验估计总表面积។នៅក្នុង 25 ° C Общая площадь поверхности оценивалась с использованием экспериментов по адсорбции азота жидким азсотром по адсорбции азота жидким азсотром по образцов в течение 10 часов при 25°C (< 7 × 10-3 торр) ។ ផ្ទៃសរុបត្រូវបានប៉ាន់ប្រមាណដោយប្រើការពិសោធន៍ស្រូបយកអាសូតជាមួយអាសូតរាវបន្ទាប់ពីគំរូត្រូវបានបង្ហូរចេញរយៈពេល 10 ម៉ោងនៅសីតុណ្ហភាព 25°C (< 7 x 10-3 torr)។ផ្ទៃសរុប បរិមាណរន្ធញើស និងទំហំរន្ធញើស NFRCS ត្រូវបានកំណត់ដោយ Quantachrome ពី NOVA 1000e ប្រទេសអូទ្រីស ដោយប្រើកម្មវិធី RS 232។
រៀបចំកោសិកាឈាមក្រហម ៥% (ទឹកអំបិលជាសារធាតុរំលាយ) ពីឈាមទាំងមូល។ បន្ទាប់មកផ្ទេរ HFFC មួយចំណែក (០,២៥ មីលីលីត្រ) ទៅក្នុងចាន ៩៦ រន្ធ និងម៉ាស់កោសិកាឈាមក្រហម ៥% (០,១ មីលីលីត្រ)។ ភ្ញាស់ល្បាយនេះនៅសីតុណ្ហភាព ៣៧°C រយៈពេល ៤០ នាទី។ ល្បាយនៃកោសិកាឈាមក្រហម និងសេរ៉ូមត្រូវបានចាត់ទុកថាជាការគ្រប់គ្រងវិជ្ជមាន ហើយល្បាយនៃទឹកអំបិល និងកោសិកាឈាមក្រហមជាការគ្រប់គ្រងអវិជ្ជមាន។ ការបង្កើតអេម៉ាហ្គូទីននីញ៉ូមត្រូវបានកំណត់យោងទៅតាមមាត្រដ្ឋាន Stajitzky។ មាត្រដ្ឋានដែលបានស្នើឡើងមានដូចខាងក្រោម៖ + + + + សារធាតុប្រមូលផ្តុំគ្រាប់ក្រាស់; + + + បន្ទះបាតរលោងដែលមានគែមកោង; + + បន្ទះបាតរលោងដែលមានគែមរហែក; + ចិញ្ចៀនក្រហមតូចចង្អៀតជុំវិញគែមនៃបន្ទះរលោង; – (អវិជ្ជមាន) ប៊ូតុងក្រហមដាច់ពីគ្នា ១២ នៅចំកណ្តាលអណ្តូងខាងក្រោម។
ភាពឆបគ្នានៃឈាមរបស់ NFRCS ត្រូវបានសិក្សាស្របតាមវិធីសាស្ត្ររបស់អង្គការអន្តរជាតិសម្រាប់ស្តង់ដារភាវូបនីយកម្ម (ISO) (ISO10993-4, 1999)26,27។ វិធីសាស្ត្រទម្ងន់ដែលបានពិពណ៌នាដោយ Singh et al. ការកែប្រែតិចតួចត្រូវបានធ្វើឡើងដើម្បីវាយតម្លៃការបង្កើតកំណកឈាមនៅក្នុងវត្តមាន ឬនៅលើផ្ទៃនៃ NFRCS។ សារធាតុ Cs, Ch NFRCS និង Cp NFRCS ចំនួន 500 មីលីក្រាមត្រូវបានភ្ញាស់ក្នុងទឹកអំបិលផូស្វាត (PBS) រយៈពេល 24 ម៉ោងនៅសីតុណ្ហភាព 37°C។ បន្ទាប់ពី 24 ម៉ោង PBS ត្រូវបានយកចេញ ហើយ NFRCS ត្រូវបានព្យាបាលដោយឈាម 2 មីលីលីត្រដែលមានផ្ទុកសូដ្យូមស៊ីត្រាត 3.8%។ នៅលើផ្ទៃនៃ NFRCS បន្ថែម CaCl2 0.04 មីលីលីត្រ 0.1 M ទៅក្នុងគំរូដែលបានភ្ញាស់។ បន្ទាប់ពី 45 នាទី ទឹកចម្រោះ 5 មីលីលីត្រត្រូវបានបន្ថែមដើម្បីបញ្ឈប់ការកកឈាម។ ឈាមដែលកកនៅលើផ្ទៃនៃ NFRK ត្រូវបានព្យាបាលដោយដំណោះស្រាយ formaldehyde 36-38%។ កំណកឈាមដែលជួសជុលជាមួយ formaldehyde ត្រូវបានសម្ងួត និងថ្លឹងទម្ងន់។ ភាគរយនៃការកកឈាមត្រូវបានប៉ាន់ប្រមាណដោយការគណនាទម្ងន់នៃកែវដោយគ្មានឈាម និងសំណាក (ក្រុមត្រួតពិនិត្យអវិជ្ជមាន) និងកែវដែលមានឈាម (ក្រុមត្រួតពិនិត្យវិជ្ជមាន)។
ជាការបញ្ជាក់ដំបូង គំរូត្រូវបានមើលឃើញនៅក្រោមមីក្រូទស្សន៍អុបទិក ដើម្បីយល់ពីសមត្ថភាពនៃថ្នាំកូតផ្ទៃ HFFC ការតភ្ជាប់ Ct និងបណ្តាញ Ct ដើម្បីបង្កើតរន្ធញើស។ ផ្នែកស្តើងៗនៃ Ch និង Cp ពី NFRCS ត្រូវបានកាត់ដោយកាំបិតវះកាត់។ ផ្នែកលទ្ធផលត្រូវបានដាក់នៅលើស្លាយកញ្ចក់ គ្របដោយបន្ទះបិទ ហើយគែមត្រូវបានជួសជុលដោយកាវ។ ស្លាយដែលបានរៀបចំត្រូវបានមើលនៅក្រោមមីក្រូទស្សន៍អុបទិក ហើយរូបថតត្រូវបានថតនៅកម្រិតពង្រីកផ្សេងៗគ្នា។
ការដាក់ប៉ូលីមែរនៅក្នុងបណ្តាញ Ct ត្រូវបានមើលឃើញដោយប្រើមីក្រូទស្សន៍ហ្វ្លុយអូរីសស្កូបដោយផ្អែកលើវិធីសាស្ត្រដែលបានពិពណ៌នាដោយ Rice et al.29។ សមាសធាតុ HFFC ដែលប្រើសម្រាប់រូបមន្តត្រូវបានលាយជាមួយថ្នាំជ្រលក់ fluorescent (amaranth) ហើយ NFRCS (Ch & Cp) ត្រូវបានរៀបចំតាមវិធីសាស្ត្រដែលបានរៀបរាប់ខាងលើ។ សមាសធាតុ HFFC ដែលប្រើសម្រាប់រូបមន្តត្រូវបានលាយជាមួយថ្នាំជ្រលក់ fluorescent (amaranth) ហើយ NFRCS (Ch & Cp) ត្រូវបានរៀបចំតាមវិធីសាស្ត្រដែលបានរៀបរាប់ខាងលើ។សមាសធាតុ HFFC ដែលប្រើសម្រាប់រូបមន្តត្រូវបានលាយជាមួយថ្នាំជ្រលក់ fluorescent (amaranth) ហើយ NFRCS (Ch និង Cp) ត្រូវបានទទួលតាមវិធីសាស្ត្រដែលបានរៀបរាប់ខាងលើ។将用于配方的HFFC 组合物与荧光染料（苋菜）混合，并按照前面提到的方法制备 & CpFR។将用于配方的HFFC 组合物与荧光染料（苋菜）混合，并按照前面提到的方法制备 & CpFR។សមាសធាតុ HFFC ដែលប្រើក្នុងរូបមន្តត្រូវបានលាយជាមួយថ្នាំជ្រលក់ហ្វ្លុយអូរ៉េសង់ (Amaranth) ហើយទទួលបាន NFRCS (Ch និង Cp) ដូចដែលបានរៀបរាប់ខាងលើ។ផ្នែកស្តើងៗនៃ NFRK ត្រូវបានកាត់ចេញពីគំរូដែលទទួលបាន ដាក់លើស្លាយកញ្ចក់ ហើយគ្របដោយបន្ទះគម្រប។ សង្កេតមើលស្លាយដែលបានរៀបចំនៅក្រោមមីក្រូទស្សន៍ហ្វ្លុយអូរ៉េសង់ដោយប្រើតម្រងពណ៌បៃតង (310-380 nm)។ រូបភាពត្រូវបានថតនៅកម្រិតពង្រីក 4x ដើម្បីយល់ពីទំនាក់ទំនង Ct និងការដាក់ប៉ូលីមែរលើសនៅក្នុងបណ្តាញ Ct។
សណ្ឋានដីលើផ្ទៃនៃ NFRCS Ch និង Cp ត្រូវបានកំណត់ដោយប្រើមីក្រូទស្សន៍កម្លាំងអាតូម (AFM) ជាមួយនឹងជើងទម្រ TESP មុតស្រួចខ្លាំងក្នុងរបៀប tapping: 42 N/m, 320 kHz, ROC 2-5 nm, Bruker, តៃវ៉ាន់។ ភាពរដុបលើផ្ទៃត្រូវបានកំណត់ដោយមធ្យមភាគឫសការ៉េ (RMS) ដោយប្រើកម្មវិធី (Scanning Probe Image Probe Processor)។ ទីតាំង NFRCS ផ្សេងៗត្រូវបានបង្ហាញលើរូបភាព 3D ដើម្បីពិនិត្យមើលឯកសណ្ឋានលើផ្ទៃ។ គម្លាតស្តង់ដារនៃពិន្ទុសម្រាប់ផ្ទៃដែលបានផ្តល់ឱ្យត្រូវបានកំណត់ថាជាភាពរដុបលើផ្ទៃ។ សមីការ RMS ត្រូវបានប្រើដើម្បីវាស់បរិមាណភាពរដុបលើផ្ទៃរបស់ NFRCS31។
ការសិក្សាដែលមានមូលដ្ឋានលើ FESEM ត្រូវបានអនុវត្តដោយប្រើ FESEM, SU8000, HI-0876-0003, Hitachi, តូក្យូ ដើម្បីយល់ពីរូបរាងផ្ទៃនៃ Ch NFRCS និង Cp NFRCS ដែលបង្ហាញពី BCT ល្អជាង Cm NFRCS។ ការសិក្សា FESEM ត្រូវបានអនុវត្តតាមវិធីសាស្ត្រដែលបានពិពណ៌នាដោយ Zhao et al. 32 ជាមួយនឹងការកែប្រែតិចតួច។ NFRCS 20 ទៅ 30 mg Ch NFRCS និង Cp NFRCS ត្រូវបានលាយជាមុនជាមួយសូដ្យូមស៊ីត្រាត 3.8% ចំនួន 20 µl ដែលលាយជាមុនជាមួយឈាមកណ្តុរ។ CaCl2 0.2 M ចំនួន 20 µl ត្រូវបានបន្ថែមទៅក្នុងសំណាកដែលបានព្យាបាលដោយឈាម ដើម្បីចាប់ផ្តើមការកកឈាម ហើយសំណាកត្រូវបានភ្ញាស់នៅសីតុណ្ហភាពបន្ទប់រយៈពេល 10 នាទី។ លើសពីនេះ កោសិកាឈាមក្រហមលើសត្រូវបានយកចេញពីផ្ទៃ NFRCS ដោយលាងសម្អាតជាមួយទឹកអំបិល។
គំរូជាបន្តបន្ទាប់ត្រូវបានព្យាបាលដោយ glutaraldehyde 0.1% ហើយបន្ទាប់មកសម្ងួតក្នុងឡដុតខ្យល់ក្តៅនៅសីតុណ្ហភាព 37°C ដើម្បីយកសំណើមចេញ។ គំរូស្ងួតត្រូវបានស្រោប និងវិភាគ 32។ រូបភាពផ្សេងទៀតដែលទទួលបានក្នុងអំឡុងពេលវិភាគគឺការបង្កើតកំណកឈាមនៅលើផ្ទៃសរសៃកប្បាសនីមួយៗ ការដាក់ប៉ូលីមែររវាង Ct រូបរាងកោសិកាឈាមក្រហម ភាពសុចរិតនៃកំណកឈាម និងរូបរាងកោសិកាឈាមក្រហមនៅក្នុងវត្តមាននៃ NFRCS។ តំបន់ NFRCS ដែលមិនបានព្យាបាល និងតំបន់ NFRCS ដែលព្យាបាលដោយ Ch និង Cp ដែលភ្ញាស់ជាមួយឈាមត្រូវបានស្កេនរកអ៊ីយ៉ុងធាតុ (សូដ្យូម ប៉ូតាស្យូម អាសូត កាល់ស្យូម ម៉ាញ៉េស្យូម ស័ង្កសី ទង់ដែង និងសេលេញ៉ូម)33។ ប្រៀបធៀបភាគរយអ៊ីយ៉ុងធាតុរវាងគំរូដែលបានព្យាបាល និងមិនបានព្យាបាល ដើម្បីយល់ពីការប្រមូលផ្តុំអ៊ីយ៉ុងធាតុក្នុងអំឡុងពេលបង្កើតកំណកឈាម និងភាពដូចគ្នានៃកំណកឈាម។
កម្រាស់នៃថ្នាំកូតផ្ទៃ Cp HFFC លើផ្ទៃ Ct ត្រូវបានកំណត់ដោយប្រើ FESEM។ ផ្នែកឆ្លងកាត់នៃ Cp NFRCS ត្រូវបានកាត់ចេញពីស៊ុម ហើយស្រោបដោយសារធាតុ sputter។ សំណាកថ្នាំកូត sputter លទ្ធផលត្រូវបានសង្កេតឃើញដោយ FESEM ហើយកម្រាស់នៃថ្នាំកូតផ្ទៃត្រូវបានវាស់ 34, 35, 36។
ការថតកាំរស្មីអ៊ិចមីក្រូ-CT ផ្តល់នូវរូបភាព 3D ដែលមានគុណភាពបង្ហាញខ្ពស់មិនបំផ្លិចបំផ្លាញ និងអនុញ្ញាតឱ្យអ្នកសិក្សាពីការរៀបចំរចនាសម្ព័ន្ធខាងក្នុងរបស់ NFRK។ Micro-CT ប្រើធ្នឹមកាំរស្មីអ៊ិចដែលឆ្លងកាត់គំរូដើម្បីកត់ត្រាមេគុណចុះខ្សោយលីនេអ៊ែរក្នុងស្រុកនៃកាំរស្មីអ៊ិចនៅក្នុងគំរូ ដែលជួយទទួលបានព័ត៌មានរូបវិទ្យា។ ទីតាំងខាងក្នុងនៃ Ct នៅក្នុង Cp NFRCS និង Cp NFRCS ដែលបានព្យាបាលដោយឈាមត្រូវបានពិនិត្យដោយ micro-CT ដើម្បីយល់ពីប្រសិទ្ធភាពស្រូបយក និងការកកឈាមនៅក្នុងវត្តមាននៃ NFRCS37,38,39។ រចនាសម្ព័ន្ធ 3D នៃគំរូ Cp NFRCS ដែលបានព្យាបាលដោយឈាម និងមិនបានព្យាបាលត្រូវបានកសាងឡើងវិញដោយប្រើ micro-CT (V|tome|x S240, Phoenix, អាល្លឺម៉ង់)។ ដោយប្រើកម្មវិធី VG STUDIO-MAX កំណែ 2.2 រូបភាពកាំរស្មីអ៊ិចជាច្រើនត្រូវបានថតចេញពីមុំផ្សេងៗគ្នា (ល្អបំផុតគឺការគ្របដណ្តប់ 360°) ដើម្បីបង្កើតរូបភាព 3D សម្រាប់ NFRCS។ ទិន្នន័យព្យាករណ៍ដែលប្រមូលបានត្រូវបានកសាងឡើងវិញទៅជារូបភាពបរិមាណ 3D ដោយប្រើកម្មវិធី 3D ScanIP Academic សាមញ្ញដែលត្រូវគ្នា។
លើសពីនេះ ដើម្បីយល់ពីការចែកចាយនៃកំណកឈាម ឈាមស៊ីត្រាតលាយជាមុនចំនួន 20 µl និង CaCl2 កំហាប់ 0.2 M ចំនួន 20 µl ត្រូវបានបន្ថែមទៅក្នុង NFRCS ដើម្បីចាប់ផ្តើមកំណកឈាម។ សំណាកដែលបានរៀបចំត្រូវបានទុកឱ្យរឹង។ ផ្ទៃ NFRK ត្រូវបានព្យាបាលដោយ glutaraldehyde 0.5% ហើយសម្ងួតក្នុងឡដុតខ្យល់ក្តៅនៅសីតុណ្ហភាព 30–40°C រយៈពេល 30 នាទី។ កំណកឈាមដែលបង្កើតឡើងនៅលើ NFRCS ត្រូវបានស្កេន សាងសង់ឡើងវិញ ហើយរូបភាព 3D នៃកំណកឈាមត្រូវបានមើលឃើញ។
ការវិភាគប្រឆាំងបាក់តេរីត្រូវបានអនុវត្តលើ Cp NFRCS (បើប្រៀបធៀបទៅនឹង Ch NFRCS បានល្អបំផុត) ដោយប្រើវិធីសាស្ត្រដែលបានពិពណ៌នាពីមុនជាមួយនឹងការកែប្រែតិចតួច។ សកម្មភាពប្រឆាំងបាក់តេរីរបស់ Cp NFRCS និង Cp HFFC ត្រូវបានកំណត់ដោយប្រើអតិសុខុមប្រាណសាកល្បងបីផ្សេងគ្នា [S.aureus (បាក់តេរីក្រាមវិជ្ជមាន) E.coli (បាក់តេរីក្រាមអវិជ្ជមាន) និង Candida ពណ៌ស (C.albicans)] ដែលដុះលើអាហ្គាក្នុងចាន Petri ក្នុងម៉ាស៊ីនភ្ញាស់។ ចាក់ស៊ុស្ប៉ង់ស្យុងវប្បធម៌បាក់តេរីពនលាយចំនួន 50 មីលីលីត្រស្មើៗគ្នាក្នុងកំហាប់ 105-106 CFU ml-1 ទៅលើឧបករណ៍ផ្ទុកអាហ្គា។ ចាក់ឧបករណ៍ចូលទៅក្នុងចាន Petri ហើយទុកឱ្យវារឹង។ អណ្តូងត្រូវបានធ្វើឡើងនៅលើផ្ទៃនៃចានអាហ្គាដើម្បីបំពេញដោយ HFFC (អណ្តូងចំនួន 3 សម្រាប់ HFFC និងអណ្តូងចំនួន 1 សម្រាប់ការគ្រប់គ្រងអវិជ្ជមាន)។ បន្ថែម HFFC 200 µl ទៅអណ្តូងចំនួន 3 និង pH 7.4 PBS 200 µl ទៅអណ្តូងទី 4។ នៅម្ខាងទៀតនៃចាន Petri ដាក់ឌីស Cp NFRCS ទំហំ 12 mm លើអាហ្គារដែលរឹង ហើយធ្វើឲ្យសើមដោយ PBS (pH 7.4)។ ថ្នាំគ្រាប់ Ciprofloxacin, ampicillin និង fluconazole ត្រូវបានចាត់ទុកថាជាស្តង់ដារយោងសម្រាប់ Staphylococcus aureus, Escherichia coli និង Candida albicans។ វាស់តំបន់រារាំងដោយដៃ ហើយថតរូបភាពឌីជីថលនៃតំបន់រារាំង។
បន្ទាប់ពីការអនុម័តផ្នែកសីលធម៌របស់ស្ថាប័ន ការសិក្សានេះត្រូវបានធ្វើឡើងនៅមហាវិទ្យាល័យអប់រំ និងស្រាវជ្រាវវេជ្ជសាស្ត្រ Kasturba ក្នុងទីក្រុង Manipal រដ្ឋ Karnataka ភាគខាងត្បូងប្រទេសឥណ្ឌា។ ពិធីការពិសោធន៍ TEG ក្នុងវីត្រូត្រូវបានពិនិត្យ និងអនុម័តដោយគណៈកម្មាធិការសីលធម៌ស្ថាប័ននៃមហាវិទ្យាល័យវេជ្ជសាស្ត្រ Kasturba ទីក្រុង Manipal រដ្ឋ Karnataka (IEC: 674/2020)។ អ្នកចូលរួមត្រូវបានជ្រើសរើសពីអ្នកបរិច្ចាគឈាមស្ម័គ្រចិត្ត (អាយុពី 18 ដល់ 55 ឆ្នាំ) ពីធនាគារឈាមមន្ទីរពេទ្យ។ លើសពីនេះ ទម្រង់យល់ព្រមដែលមានព័ត៌មានត្រូវបានទទួលពីអ្នកស្ម័គ្រចិត្តសម្រាប់ការប្រមូលសំណាកឈាម។ TEG ដើម (N-TEG) ​​​​ត្រូវបានប្រើដើម្បីសិក្សាពីឥទ្ធិពលនៃរូបមន្ត Cp HFFC លើឈាមទាំងមូលដែលលាយជាមុនជាមួយសូដ្យូមស៊ីត្រាត។ N-TEG ត្រូវបានទទួលស្គាល់យ៉ាងទូលំទូលាយសម្រាប់តួនាទីរបស់វាក្នុងការសង្គ្រោះនៅចំណុចថែទាំ ដែលបង្កើតបញ្ហាសម្រាប់គ្រូពេទ្យដោយសារតែសក្តានុពលសម្រាប់ការពន្យារពេលគួរឱ្យកត់សម្គាល់ខាងគ្លីនិកនៅក្នុងលទ្ធផល (ការធ្វើតេស្តកំណកឈាមជាប្រចាំ)។ ការវិភាគ N-TEG ត្រូវបានអនុវត្តដោយប្រើឈាមទាំងមូល។ ការយល់ព្រមដែលមានព័ត៌មាន និងប្រវត្តិវេជ្ជសាស្ត្រលម្អិតត្រូវបានទទួលពីអ្នកចូលរួមទាំងអស់។ ការសិក្សានេះមិនបានរាប់បញ្ចូលអ្នកចូលរួមដែលមានផលវិបាកនៃការកកឈាម ឬស្ទះសរសៃឈាមដូចជា ការមានផ្ទៃពោះ/ក្រោយសម្រាលកូន ឬជំងឺថ្លើមនោះទេ។ អ្នកចូលរួមដែលប្រើថ្នាំដែលប៉ះពាល់ដល់ដំណើរការកកឈាមក៏ត្រូវបានដកចេញពីការសិក្សាផងដែរ។ ការធ្វើតេស្តមន្ទីរពិសោធន៍ជាមូលដ្ឋាន (អេម៉ូក្លូប៊ីន ពេលវេលាប្រូត្រុមប៊ីន ត្រុំបូផ្លាស្ទីនដែលបានធ្វើឱ្យសកម្ម និងចំនួនផ្លាកែត) ត្រូវបានអនុវត្តលើអ្នកចូលរួមទាំងអស់ស្របតាមនីតិវិធីស្តង់ដារ។ N-TEG កំណត់ភាពស្អិតនៃកំណកឈាម រចនាសម្ព័ន្ធកំណកឈាមដំបូង អន្តរកម្មភាគល្អិត ការពង្រឹងកំណកឈាម និងការបំបែកកំណកឈាម។ ការវិភាគ N-TEG ផ្តល់ទិន្នន័យក្រាហ្វិក និងលេខលើផលប៉ះពាល់រួមនៃធាតុកោសិកា និងប្លាស្មាជាច្រើន។ ការវិភាគ N-TEG ត្រូវបានអនុវត្តលើបរិមាណពីរផ្សេងគ្នានៃ Cp HFFC (10 µl និង 50 µl)។ ជាលទ្ធផល ឈាមទាំងមូល 1 មីលីលីត្រ ដែលមានអាស៊ីតក្រូចឆ្មា ត្រូវបានបន្ថែមទៅក្នុង Cp HFFC 10 µl។ បន្ថែមឈាមចម្រុះ 1 មីលីលីត្រ (Cp HFFC + ឈាមស៊ីត្រាត) 340 µl ទៅក្នុងចាន TEG ដែលមាន CaCl2 0.2 M 20 µl។ បន្ទាប់មក ចាន TEG ត្រូវបានផ្ទុកចូលទៅក្នុង TEG® 5000, US ដើម្បីវាស់ R, K, មុំអាល់ហ្វា, MA, G, CI, TPI, EPL, LY 30% នៃសំណាកឈាមនៅក្នុងវត្តមាននៃ Cp HFFC41។
ពិធីសារសិក្សាក្នុងសត្វត្រូវបានពិនិត្យ និងអនុម័តដោយគណៈកម្មាធិការសីលធម៌សត្វស្ថាប័ន (IAEC) សាលាវេជ្ជសាស្ត្រ Kasturba វិទ្យាស្ថានឧត្តមសិក្សា Manipal ទីក្រុង Manipal (IAEC/KMC/69/2020)។ ការពិសោធន៍លើសត្វទាំងអស់ត្រូវបានអនុវត្តស្របតាមអនុសាសន៍របស់គណៈកម្មាធិការសម្រាប់ការគ្រប់គ្រង និងត្រួតពិនិត្យការពិសោធន៍លើសត្វ (CPCSEA)។ ការសិក្សា NFRCS ក្នុងសត្វទាំងអស់ (2 × 2 សង់ទីម៉ែត្រ2) ត្រូវបានអនុវត្តលើសត្វកណ្ដុរ Wistar ញី (មានទម្ងន់ 200 ទៅ 250 ក្រាម)។ សត្វទាំងអស់ត្រូវបានសម្របខ្លួននៅសីតុណ្ហភាព 24-26°C សត្វទាំងនោះមានសិទ្ធិចូលប្រើប្រាស់អាហារ និងទឹកស្តង់ដារដោយសេរី។ សត្វទាំងអស់ត្រូវបានបែងចែកជាក្រុមផ្សេងៗគ្នាដោយចៃដន្យ ក្រុមនីមួយៗមានសត្វបីក្បាល។ ការសិក្សាទាំងអស់ត្រូវបានអនុវត្តស្របតាមការសិក្សាលើសត្វ៖ របាយការណ៍នៃការពិសោធន៍ក្នុងសត្វ 43។ មុនពេលសិក្សា សត្វត្រូវបានចាក់ថ្នាំសណ្តំដោយការចាក់បញ្ចូលតាមពោះ (ip) នៃល្បាយ ketamine 20-50 មីលីក្រាម (ក្នុង 1 គីឡូក្រាមនៃទម្ងន់រាងកាយ) និង xylazine 2-10 មីលីក្រាម (ក្នុង 1 គីឡូក្រាមនៃទម្ងន់រាងកាយ)។ បន្ទាប់ពីការសិក្សា បរិមាណហូរឈាមត្រូវបានគណនាដោយការវាយតម្លៃភាពខុសគ្នារវាងទម្ងន់ដំបូង និងចុងក្រោយនៃគំរូ តម្លៃជាមធ្យមដែលទទួលបានពីការធ្វើតេស្តទាំងបីត្រូវបានយកជាបរិមាណហូរឈាមនៃគំរូ។
គំរូកាត់កន្ទុយកណ្តុរត្រូវបានអនុវត្តដើម្បីយល់ពីសក្តានុពលរបស់ NFRCS ក្នុងការកែប្រែការហូរឈាមក្នុងរបួស ការប្រយុទ្ធ ឬគ្រោះថ្នាក់ចរាចរណ៍ (គំរូរបួស)។ កាត់កន្ទុយ 50% ដោយប្រើកាំបិតវះកាត់ ហើយដាក់ក្នុងខ្យល់រយៈពេល 15 វិនាទី ដើម្បីធានាបាននូវការហូរឈាមធម្មតា។ លើសពីនេះ គំរូសាកល្បងត្រូវបានដាក់លើកន្ទុយកណ្តុរដោយដាក់សម្ពាធ (Ct, Cs, Ch NFRCS និង Cp NFRCS)។ ការហូរឈាម និង PCT ត្រូវបានរាយការណ៍សម្រាប់គំរូសាកល្បង (n = 3)17,45។
ប្រសិទ្ធភាពនៃការគ្រប់គ្រងសម្ពាធ NFRCS ក្នុងការប្រយុទ្ធត្រូវបានស៊ើបអង្កេតលើគំរូនៃសរសៃឈាមភ្លៅខាងលើ។ សរសៃឈាមភ្លៅត្រូវបានលាតត្រដាង ចាក់ដោយឧបករណ៍វាស់សម្ពាធ 24G ហើយហូរឈាមក្នុងរយៈពេល 15 វិនាទី។ បន្ទាប់ពីសង្កេតឃើញការហូរឈាមដែលមិនអាចគ្រប់គ្រងបាន គំរូសាកល្បងត្រូវបានដាក់នៅកន្លែងចាក់ដោយដាក់សម្ពាធ។ ភ្លាមៗបន្ទាប់ពីលាបគំរូសាកល្បង ពេលវេលាកកឈាមត្រូវបានកត់ត្រា ហើយប្រសិទ្ធភាពនៃការកកឈាមត្រូវបានគេសង្កេតឃើញសម្រាប់រយៈពេល 5 នាទីបន្ទាប់។ នីតិវិធីដូចគ្នាត្រូវបានធ្វើម្តងទៀតជាមួយ Cs និង Ct46។
Dowling និងក្រុមការងារ 47 បានស្នើឡើងនូវគំរូរបួសថ្លើមមួយ ដើម្បីវាយតម្លៃសក្តានុពល hemostatic នៃសម្ភារៈ hemostatic នៅក្នុងបរិបទនៃការហូរឈាមក្នុងពេលវះកាត់។ BCT ត្រូវបានកត់ត្រាសម្រាប់គំរូ Ct (ការគ្រប់គ្រងអវិជ្ជមាន) Cs framework (ការគ្រប់គ្រងវិជ្ជមាន) គំរូ Ch NFRCS និងគំរូ Cp NFRCS។ ប្រហោងសរសៃឈាមវ៉ែនលើក្រពះរបស់កណ្តុរត្រូវបានលាតត្រដាងដោយការវះកាត់ laparotomy median។ បន្ទាប់ពីនោះ ផ្នែកខាងចុងនៃ lobe ខាងឆ្វេងត្រូវបានកាត់ចេញដោយកន្ត្រៃ។ ធ្វើស្នាមវះនៅក្នុងថ្លើមដោយប្រើកាំបិតវះកាត់ ហើយទុកវាឱ្យហូរឈាមពីរបីវិនាទី។ គំរូតេស្ត Ch NFRCS និង Cp NFRCS ដែលមានទម្ងន់ត្រឹមត្រូវត្រូវបានដាក់នៅលើផ្ទៃដែលខូចដោយគ្មានសម្ពាធវិជ្ជមានណាមួយ ហើយ BCT ត្រូវបានកត់ត្រា។ បន្ទាប់មកក្រុមត្រួតពិនិត្យ (Ct) បានអនុវត្តសម្ពាធ បន្ទាប់មកដោយ Cs 30 s47 ដោយមិនបំបែករបួស។
ការវាយតម្លៃការព្យាបាលរបួសនៅក្នុងខ្លួនត្រូវបានអនុវត្តដោយប្រើគំរូរបួសកាត់ចេញដើម្បីវាយតម្លៃលក្ខណៈសម្បត្តិព្យាបាលរបួសនៃ NFRCSs ដែលមានមូលដ្ឋានលើប៉ូលីមែរ។ គំរូនៃរបួសកាត់ចេញត្រូវបានជ្រើសរើស និងអនុវត្តតាមវិធីសាស្ត្រដែលបានបោះពុម្ពផ្សាយពីមុនជាមួយនឹងការកែប្រែតិចតួច 19,32,48។ សត្វទាំងអស់ត្រូវបានចាក់ថ្នាំសណ្តំដូចដែលបានពិពណ៌នាពីមុន។ ប្រើកណ្តាប់ដៃធ្វើកោសល្យវិច័យ (12 ម.ម) ដើម្បីធ្វើស្នាមវះជ្រៅជារង្វង់នៅលើស្បែកខ្នង។ កន្លែងរបួសដែលបានរៀបចំត្រូវបានស្លៀកពាក់ជាមួយ Cs (ក្រុមត្រួតពិនិត្យវិជ្ជមាន) Ct (ដោយទទួលស្គាល់ថាបន្ទះកប្បាសជ្រៀតជ្រែកជាមួយនឹងការជាសះស្បើយ) Ch NFRCS និង Cp NFRCS (ក្រុមពិសោធន៍) និងក្រុមត្រួតពិនិត្យអវិជ្ជមានដោយគ្មានការព្យាបាលណាមួយឡើយ។ នៅថ្ងៃនីមួយៗនៃការសិក្សា តំបន់នៃរបួសត្រូវបានវាស់វែងចំពោះសត្វកណ្តុរទាំងអស់។ ប្រើកាមេរ៉ាឌីជីថលដើម្បីថតរូបតំបន់របួស ហើយពាក់បង់រុំថ្មី។ ភាគរយនៃការបិទរបួសត្រូវបានវាស់ដោយរូបមន្តដូចខាងក្រោម៖
ដោយផ្អែកលើភាគរយនៃការបិទមុខរបួសនៅថ្ងៃទី 12 នៃការសិក្សា ស្បែកកណ្តុរនៃក្រុមដែលល្អបំផុតត្រូវបានកាត់ចេញ ((Cp NFRCS) និងក្រុមត្រួតពិនិត្យ) ហើយបានសិក្សាដោយការជ្រលក់ពណ៌ H&E និងការជ្រលក់ពណ៌ Masson's trichrome។ ដោយផ្អែកលើភាគរយនៃការបិទមុខរបួសនៅថ្ងៃទី 12 នៃការសិក្សា ស្បែកកណ្តុរនៃក្រុមដែលល្អបំផុតត្រូវបានកាត់ចេញ ((Cp NFRCS) និងក្រុមត្រួតពិនិត្យ) ហើយបានសិក្សាដោយការជ្រលក់ពណ៌ H&E និងការជ្រលក់ពណ៌ Masson's trichrome។ដោយផ្អែកលើភាគរយនៃការបិទមុខរបួសនៅថ្ងៃទី 12 នៃការសិក្សា ស្បែករបស់សត្វកណ្តុរនៃក្រុមល្អបំផុត ((Cp NFRCS) និងក្រុមត្រួតពិនិត្យ) ត្រូវបានកាត់ចេញ និងពិនិត្យដោយការជ្រលក់ពណ៌ជាមួយ hematoxylin-eosin និង Masson's trichrome។根据研究第12天的伤口闭合百分比，切除最佳组((Cp NFRCS)和对照组)的大鼠皮肤，进行H&E染色和Masson三色染色研究។根据研究第12天的伤口闭合百分比，切除最佳组((Cp NFRCS)和对照组)的大韠牚肤，进術)កណ្ដុរនៅក្នុងក្រុមល្អបំផុត ((Cp NFRCS) និងក្រុមត្រួតពិនិត្យ) ត្រូវបានកាត់ចេញសម្រាប់ការជ្រលក់ពណ៌ hematoxylin-eosin និងជ្រលក់ពណ៌ Masson's trichrome ដោយផ្អែកលើភាគរយនៃការបិទមុខរបួសនៅថ្ងៃទី 12 នៃការសិក្សា។នីតិវិធីជ្រលក់ពណ៌ដែលបានអនុវត្តត្រូវបានអនុវត្តតាមវិធីសាស្ត្រដែលបានពិពណ៌នាពីមុន49,50។ ជាសង្ខេប បន្ទាប់ពីបានជ្រលក់ក្នុងសារធាតុ formalin 10% សំណាកត្រូវបានខ្សោះជាតិទឹកដោយប្រើអាល់កុលដែលបានចាត់ថ្នាក់ជាបន្តបន្ទាប់។ ប្រើ microtome ដើម្បីទទួលបានផ្នែកស្តើងៗ (កម្រាស់ 5 µm) នៃជាលិកាដែលត្រូវបានកាត់ចេញ។ ផ្នែកស្តើងៗជាបន្តបន្ទាប់នៃក្រុមត្រួតពិនិត្យ និង Cp NFRCS ត្រូវបានព្យាបាលដោយ hematoxylin និង eosin ដើម្បីសិក្សាពីការផ្លាស់ប្តូរជាលិកាវិទ្យា។ ស្នាមប្រឡាក់ Masson's trichrome ត្រូវបានប្រើដើម្បីរកឃើញការបង្កើត collagen fibrils។ លទ្ធផលដែលទទួលបានត្រូវបានសិក្សាដោយងងឹតងងល់ដោយអ្នកជំនាញខាងរោគវិទ្យា។
ស្ថេរភាពនៃសំណាក Cp NFRCS ត្រូវបានសិក្សានៅសីតុណ្ហភាពបន្ទប់ (25°C ± 2°C/60% RH ± 5%) រយៈពេល 12 ខែ51។ Cp NFRCS (ការប្រែពណ៌លើផ្ទៃ និងការលូតលាស់របស់អតិសុខុមប្រាណ) ត្រូវបានត្រួតពិនិត្យ និងសាកល្បងដោយមើលឃើញសម្រាប់ភាពធន់នឹងការពាក់ផ្នត់ និង BCT ស្របតាមវិធីសាស្ត្រខាងលើដែលបានរៀបរាប់នៅក្នុងផ្នែកសម្ភារៈ និងវិធីសាស្ត្រ។
សមត្ថភាពធ្វើមាត្រដ្ឋាន និងសមត្ថភាពផលិតឡើងវិញនៃ Cp NFRCS ត្រូវបានពិនិត្យដោយការរៀបចំ Cp NFRCS ដែលមានទំហំ 15×15 សង់ទីម៉ែត្រ²។ លើសពីនេះ គំរូ 30 មីលីក្រាម (n = 5) ត្រូវបានកាត់ចេញពីប្រភាគ Cp NFRCS ផ្សេងៗ ហើយ BCT នៃគំរូដែលបានសិក្សាត្រូវបានវាយតម្លៃដូចដែលបានពិពណ៌នាពីមុននៅក្នុងផ្នែកវិធីសាស្ត្រ។
យើងបានព្យាយាមអភិវឌ្ឍរូបរាង និងរចនាសម្ព័ន្ធផ្សេងៗដោយប្រើប្រាស់សមាសធាតុ Cp NFRCS សម្រាប់កម្មវិធីជីវវេជ្ជសាស្ត្រផ្សេងៗ។ រូបរាង ឬការកំណត់រចនាសម្ព័ន្ធបែបនេះរួមមាន សំឡីសម្រាប់យកសំឡីមកពិនិត្យសម្រាប់ការហូរឈាមច្រមុះ ការវះកាត់ធ្មេញ និងសំឡីរាងស៊ីឡាំងសម្រាប់ការហូរឈាមតាមទ្វារមាស។
សំណុំទិន្នន័យទាំងអស់ត្រូវបានបង្ហាញជាមធ្យម ± គម្លាតស្តង់ដារ ហើយត្រូវបានវិភាគដោយ ANOVA ដោយប្រើ Prism 5.03 (GraphPad, San Diego, CA, USA) បន្ទាប់មកដោយការធ្វើតេស្តប្រៀបធៀបច្រើនរបស់ Bonferroni (*p<0.05)។
នីតិវិធីទាំងអស់ដែលបានអនុវត្តនៅក្នុងការសិក្សាលើមនុស្សគឺស្របតាមស្តង់ដាររបស់វិទ្យាស្ថាន និងក្រុមប្រឹក្សាស្រាវជ្រាវជាតិ ក៏ដូចជាសេចក្តីប្រកាស Helsinki ឆ្នាំ 1964 និងវិសោធនកម្មជាបន្តបន្ទាប់របស់វា ឬស្តង់ដារសីលធម៌ស្រដៀងគ្នា។ អ្នកចូលរួមទាំងអស់ត្រូវបានជូនដំណឹងអំពីលក្ខណៈពិសេសនៃការសិក្សា និងលក្ខណៈស្ម័គ្រចិត្តរបស់វា។ ទិន្នន័យអ្នកចូលរួមនៅតែជាការសម្ងាត់នៅពេលដែលប្រមូលបាន។ ពិធីសារពិសោធន៍ TEG ក្នុងវីត្រូត្រូវបានពិនិត្យ និងអនុម័តដោយគណៈកម្មាធិការសីលធម៌ស្ថាប័ននៃមហាវិទ្យាល័យវេជ្ជសាស្ត្រ Kasturba ទីក្រុង Manipal រដ្ឋ Karnataka (IEC: 674/2020)។ អ្នកស្ម័គ្រចិត្តបានចុះហត្ថលេខាលើការយល់ព្រមដោយមានព័ត៌មានដើម្បីប្រមូលសំណាកឈាម។
នីតិវិធីទាំងអស់ដែលបានអនុវត្តនៅក្នុងការសិក្សាលើសត្វត្រូវបានអនុវត្តស្របតាមមហាវិទ្យាល័យវេជ្ជសាស្ត្រ Kastuba វិទ្យាស្ថានឧត្តមសិក្សា Manipal ទីក្រុង Manipal (IAEC/KMC/69/2020)។ ការពិសោធន៍លើសត្វទាំងអស់ដែលត្រូវបានរចនាឡើងត្រូវបានធ្វើឡើងស្របតាមគោលការណ៍ណែនាំរបស់គណៈកម្មាធិការសម្រាប់ការគ្រប់គ្រង និងត្រួតពិនិត្យការពិសោធន៍លើសត្វ (CPCSEA)។ អ្នកនិពន្ធទាំងអស់អនុវត្តតាមគោលការណ៍ណែនាំរបស់ ARRIVE។
វិសាលគម FTIR នៃ NFRCS ទាំងអស់ត្រូវបានវិភាគ និងប្រៀបធៀបជាមួយវិសាលគម chitosan ដែលបង្ហាញក្នុងរូបភាពទី 2A។ កំពូលវិសាលគមលក្ខណៈនៃ chitosan (បានកត់ត្រា) នៅ 3437 cm-1 (ការលាតសន្ធឹង OH និង NH, ត្រួតស៊ីគ្នា), 2945 និង 2897 cm-1 (ការលាតសន្ធឹង CH), 1660 cm-1 (ពូជ NH2), 1589 cm-1 (ការពត់កោង N–H), 1157 cm-1 (ការលាតសន្ធឹងស្ពាន O-), 1067 cm-1 (ការលាតសន្ធឹង C–O, អ៊ីដ្រូស៊ីលបន្ទាប់បន្សំ), 993 cm-1 (ការលាតសន្ធឹង CO, Bo-OH) 52.53.54។ តារាងបន្ថែម S1 បង្ហាញតម្លៃវិសាលគមស្រូបយក FTIR NFRCS សម្រាប់ chitosan (អ្នករាយការណ៍), chitosan សុទ្ធ, Cm, Ch, និង Cp។ វិសាលគម FTIR នៃ NFRCS ទាំងអស់ (Cm, Ch និង Cp) បានបង្ហាញក្រុមស្រូបយកលក្ខណៈដូចគ្នានឹង chitosan សុទ្ធដោយគ្មានការផ្លាស់ប្តូរគួរឱ្យកត់សម្គាល់ណាមួយឡើយ (រូបភាពទី 2A)។ លទ្ធផល FTIR បានបញ្ជាក់ពីអវត្តមាននៃអន្តរកម្មគីមី ឬរូបវន្តរវាងប៉ូលីមែរដែលប្រើដើម្បីបង្កើត NFRCS ដែលបង្ហាញថាប៉ូលីមែរដែលប្រើគឺអសកម្ម។
ការកំណត់លក្ខណៈនៅក្នុង vitro នៃ Cm NFRCS, Ch NFRCS, Cp NFRCS និង Cs។ (ក) តំណាងឱ្យវិសាលគម FTIR រួមបញ្ចូលគ្នានៃសមាសធាតុនៃ chitosan និង Cm NFRCS, Ch NFRCS និង Cp NFRCS ក្រោមការបង្ហាប់។ (ខ) ក) អត្រាស្រូបយកឈាមទាំងមូលនៃ NFRCS Cm, Ch, Cp និង Cg (n = 3); គំរូ Ct បានបង្ហាញ BAR ខ្ពស់ជាងព្រោះសំឡីមានប្រសិទ្ធភាពស្រូបយកខ្ពស់ជាង; ខ) ឈាមបន្ទាប់ពីការស្រូបយកឈាម រូបភាពនៃគំរូដែលស្រូបយក។ ការតំណាងក្រាហ្វិកនៃ BCT នៃគំរូតេស្ត C (Cp NFRCS មាន BCT ល្អបំផុត (15 វិនាទី, n = 3))។ ទិន្នន័យនៅក្នុង C, D, E និង G ត្រូវបានបង្ហាញជាមធ្យម ± SD ហើយរបារកំហុសតំណាងឱ្យ SD, ***p < 0.0001។ ទិន្នន័យនៅក្នុង C, D, E និង G ត្រូវបានបង្ហាញជាមធ្យម ± SD ហើយរបារកំហុសតំណាងឱ្យ SD, ***p < 0.0001។ Данные в C, D, E និង G представлены как среднее ± стандартное отклонение, а планки погрешностей предатрта отклонение, ***p <0,0001. ទិន្នន័យនៅក្នុង C, D, E និង G ត្រូវបានបង្ហាញជាមធ្យម ± គម្លាតស្តង់ដារ ហើយរបារកំហុសតំណាងឱ្យគម្លាតស្តង់ដារ ***p<0.0001។ C、D、E 和G 中的数据显示为平均值± SD，误差线代表SD，***p < 0.0001 ។ C、D、E 和G 中的数据显示为平均值± SD，误差线代表SD，***p < 0.0001 ។ Данные в C, D, E និង G показаны как среднее значение ± стандартное отклонение, планки погрешностей пртледса отклонение, ***p <0,0001. ទិន្នន័យនៅក្នុង C, D, E និង G ត្រូវបានបង្ហាញជាមធ្យម ± គម្លាតស្តង់ដារ របារកំហុសតំណាងឱ្យគម្លាតស្តង់ដារ ***p<0.0001។