Nature.com сайтад зочилсонд баярлалаа. Таны ашиглаж буй хөтчийн хувилбар нь хязгаарлагдмал CSS дэмжлэгтэй. Хамгийн сайн туршлагын тулд бид танд шинэчлэгдсэн хөтчийг ашиглахыг зөвлөж байна (эсвэл Internet Explorer дээр нийцтэй байдлын горимыг идэвхгүй болгох). Энэ хооронд бид сайтыг хэв маяг болон JavaScriptгүйгээр үзүүлэх болно.
Хяналтгүй цус алдалт нь нас баралтын тэргүүлэх шалтгаануудын нэг юм. Цус алдалтыг хурдан зогсоох нь тулалдаан, зам тээврийн осол, үхлийг бууруулах ажиллагааны үед анхны тусламж үзүүлэх зорилгоор тухайн хүний ​​амьд үлдэхийг баталгаажуулдаг. Энгийн цус тогтоогч хальс үүсгэгч найрлагаас (HFFC) тасралтгүй фаз болгон гаргаж авсан нано нүх сүвтэй шилэн бэхжүүлсэн нийлмэл шат (NFRCS) нь цус алдалтыг өдөөж, сайжруулж чаддаг. NFRCS-ийн хөгжил нь соногийн далавчны загвар дээр суурилдаг. Соногийн далавчны бүтэц нь хөндлөн ба уртааш далавчнаас бүрдэх бөгөөд далавчны мембранууд нь бичил бүтцийн бүрэн бүтэн байдлыг хадгалахын тулд хоорондоо холбогдсон байдаг. HFFC нь шилэн гадаргууг нанометрийн зузаантай хальсаар жигд бүрхэж, санамсаргүй тархсан хөвөнгийн зузааныг (Ct) (тархсан фаз) холбож нано нүх сүвтэй бүтэц үүсгэдэг. Тасралтгүй ба тархсан фазын хослол нь худалдаанд байгаа бүтээгдэхүүнтэй харьцуулахад бүтээгдэхүүний өртгийг арав дахин бууруулдаг. Өөрчлөгдсөн NFRCS (тампон эсвэл бугуйвч)-ийг биоанагаахын янз бүрийн хэрэглээнд ашиглаж болно. In vivo судалгаагаар боловсруулсан Cp NFRCS нь хэрэглэсэн хэсэгт бүлэгнэлтийн процессыг идэвхжүүлж, сайжруулдаг болохыг тогтоожээ. NFRCS нь нано нүх сүвтэй бүтцийн ачаар бичил орчныг зохицуулж, эсийн түвшинд үйлчилж, улмаар тайралтын шархны загварт шархны эдгэрэлтийг сайжруулдаг.
Тулалдааны үеэр, мэс заслын үеэр болон яаралтай тусламжийн үед хяналтгүй цус алдалт нь шархадсан хүний ​​амь насанд ноцтой аюул учруулж болзошгүй1. Эдгээр нөхцөл байдал нь захын судасны эсэргүүцлийг ерөнхийд нь нэмэгдүүлж, цус алдалтын шоконд хүргэдэг. Мэс заслын үеэр болон дараа цус алдалтыг хянах зохих арга хэмжээг амь насанд аюултай гэж үздэг2,3. Том судасны гэмтэл нь их хэмжээний цус алдалтад хүргэдэг бөгөөд тулалдаанд нас баралтын түвшин ≤ 50%, мэс заслын үед 31% байдаг1. Их хэмжээний цус алдалт нь биеийн эзэлхүүн буурахад хүргэдэг бөгөөд энэ нь зүрхний гаралтыг бууруулдаг. Захын судасны нийт эсэргүүцэл нэмэгдэж, бичил эргэлтийн аажмаар бууралт нь амь насыг тэтгэх эрхтнүүдэд гипокси үүсгэдэг. Хэрэв нөхцөл байдал үр дүнтэй арга хэмжээ авалгүйгээр үргэлжилбэл цус алдалтын шок үүсч болно1,4,5. Бусад хүндрэлүүдэд гипотерми ба бодисын солилцооны ацидозын явц, мөн цусны бүлэгнэлтийн үйл явцад саад учруулдаг цусны бүлэгнэлтийн эмгэг орно. Хүнд хэлбэрийн цус алдалтын шок нь нас баралтын өндөр эрсдэлтэй холбоотой байдаг6,7,8. III зэргийн (даамжрах) шокын үед мэс заслын үед болон мэс заслын дараах өвчлөл, нас баралтын үед өвчтөний амьд үлдэхийн тулд цус сэлбэх нь зайлшгүй шаардлагатай. Дээрх амь насанд аюултай бүх нөхцөл байдлыг даван туулахын тулд бид усанд уусдаг цус тогтоогч полимерүүдийн хослолыг ашиглан хамгийн бага полимерийн концентраци (0.5%) ашигладаг нано нүх сүвтэй шилэн хүчитгэсэн нийлмэл шат (NFRCS)-ийг боловсруулсан.
Шилэн арматурыг ашигласнаар өртөг хэмнэлттэй бүтээгдэхүүн боловсруулж болно. Санамсаргүй байдлаар байрлуулсан ширхэгүүд нь соногийн далавчны бүтэцтэй төстэй бөгөөд далавч дээрх хэвтээ ба босоо судлуудтай тэнцвэрждэг. Далавчны хөндлөн ба уртын судал нь далавчны мембрантай холбогддог (Зураг 1). NFRCS нь илүү сайн физик болон механик бат бөх чанартай бэхэлсэн Ct-ээс бүрддэг (Зураг 1). Боломжийн болон ур чадварын ачаар мэс засалчид мэс засал, боолт хийх үед хөвөн утас хэмжигч (Ct) ашиглахыг илүүд үздэг. Тиймээс Ct-г 90%-иас дээш талст целлюлоз (цус тогтоолтын идэвхжилийг сайжруулахад оролцдог) зэрэг олон талт ашиг тусыг нь харгалзан NFRCS9,10-ийн араг ясны систем болгон ашигласан. Тиймээс Ct-г 90%-иас дээш талст целлюлоз (цус тогтоолтын идэвхжилийг сайжруулахад оролцдог) зэрэг олон талт ашиг тусыг нь харгалзан NFRCS9,10-ийн араг ясны систем болгон ашигласан. Следовательно, учитывая его многочисленные преимущества, в том числе > 90% кристаллической целлюлозы (участвует в повышении гемостатической активности), Ct ашиглах чадвар нь NFRCS9,10. Тиймээс, 90%-иас дээш талст целлюлоз (цус тогтоолтын идэвхжил нэмэгдэхэд оролцдог) зэрэг олон давуу талыг харгалзан Ct-г NFRCS араг ясны систем болгон ашигласан9,10.因此，考虑到它的多重益处，包括> 90% 的结晶纤维素（有助于增强止血C，止血C被用作NFRCS9,10 的骨架系统。因此，考虑到它的多重益处，包括> 90%Тиймээс 90%-иас дээш талст целлюлоз (цус тогтоолтын үйл ажиллагааг сайжруулахад тусалдаг) зэрэг олон давуу талыг харгалзан Ct-ийг NFRCS9,10-ийн тулгуур болгон ашигласан.Ct-г өнгөцөөр бүрсэн (нано зузаан хальс үүсэлт ажиглагдсан) бөгөөд цус тогтоогч хальс үүсгэгч найрлагатай (HFFC) холбосон. HFFC нь матригель шиг ажилладаг бөгөөд санамсаргүй байдлаар байрлуулсан Ct-г хооронд нь барьдаг. Боловсруулсан загвар нь тархсан фазын дотор (арматурын утас) стресс дамжуулдаг. Хамгийн бага полимер концентрацийг ашиглан сайн механик бат бэхтэй нано нүх сүвтэй бүтэц олж авахад хэцүү байдаг. Үүнээс гадна, биоанагаахын янз бүрийн хэрэглээнд зориулж өөр өөр хэвийг өөрчлөх нь тийм ч амар биш юм.
Зурагт соногийн далавчны бүтэц дээр суурилсан NFRCS дизайны диаграммыг харуулав (A). Энэ зурагт соногийн далавчны бүтцийн харьцуулсан аналоги (далавчны огтлолцсон ба уртааш судлууд хоорондоо холбогдсон) болон Cp NFRCS-ийн хөндлөн огтлолын микроскоп зургийг харуулав (B). NFRCS-ийн схемийн дүрслэл.
Дээрх хязгаарлалтуудыг арилгахын тулд HFFC-г тасралтгүй фаз болгон ашиглан NFRC-г боловсруулсан. HFFC нь метилцеллюлоз (MC)-тэй хитозан (гол цус тогтоогч полимер), гидроксипропил метилцеллюлоз (HPMC 50 cp) болон тромбо үүсэхийг дэмждэг тулгуур полимер болох поливинил спирт (PVA)) (125 kDa) зэрэг янз бүрийн хальс үүсгэдэг цус тогтоогч полимерүүдээс бүрдэнэ. Поливинилпирролидин K30 (PVP K30)-г нэмснээр NFRCS-ийн чийг шингээх чадварыг сайжруулсан. Холбогдсон полимер хольц дахь полимерийн хөндлөн холболтыг сайжруулахын тулд полиэтилен гликол 400 (PEG 400)-г нэмсэн. MC-тэй хитозан (Cm), HPMC-тэй хитозан (Ch), PVA-тай хитозан (Cp) гэсэн гурван өөр HFFC цус тогтоогч найрлага (Cm HFFC, Ch HFFC болон Cp HFFC)-г Ct-д хэрэглэсэн. NFRCS-ийн цус тогтоогч болон шарх эдгээх үйл ажиллагааг in vitro болон in vivo шинж чанарын янз бүрийн судалгаагаар баталгаажуулсан. NFRCS-ийн санал болгож буй нийлмэл материалыг тодорхой хэрэгцээнд нийцүүлэн янз бүрийн хэлбэрийн шатыг өөрчлөхөд ашиглаж болно.
Үүнээс гадна, NFRCS-ийг доод мөч болон биеийн бусад хэсгийн гэмтлийн хэсгийг бүхэлд нь хамрахын тулд боолт эсвэл ороомог хэлбэрээр өөрчилж болно. Ялангуяа тулааны мөчний гэмтлийн хувьд зохион бүтээсэн NFRCS загварыг хагас гар эсвэл бүтэн хөл болгон өөрчилж болно (Нэмэлт зураг S11). NFRCS-ийг эдийн цавуугаар бугуйвч болгон хийж болох бөгөөд үүнийг амиа хорлох бугуйн хүнд гэмтлээс үүдэлтэй цус алдалтыг зогсооход ашиглаж болно. Бидний гол зорилго бол аль болох бага полимер ашиглан олон хүн амд (ядуурлын шугамаас доогуур) хүргэж, анхны тусламжийн хэрэгсэлд хийж болох NFRCS боловсруулах явдал юм. Энгийн, үр ашигтай, хэмнэлттэй дизайны хувьд NFRCS нь орон нутгийн иргэдэд ашиг тустай бөгөөд дэлхий даяар нөлөө үзүүлэх боломжтой.
Хитозан (молекул жин 80 кДа) болон амарантыг Энэтхэгийн Мерк хотоос худалдаж авсан. Гидроксипропил метилцеллюлоз 50 Cp, полиэтилен гликол 400 болон метилцеллюлозыг Мумбай хотын Loba Chemie Pvt. ХХК-аас худалдаж авсан. Поливинил спирт (молекул жин 125 кДа) (87-90% гидролизжүүлсэн)-ийг Гужарат мужийн National Chemicals компаниас худалдаж авсан. Поливинилпирролидин K30-ийг Мумбай хотын Molychem компаниас, ариутгасан арчдасыг Тамил Наду мужийн Ramaraju Surgery Cotton Mills Ltd.-ээс Milli Q ус (Direct-Q3 ус цэвэршүүлэх систем, Мерк, Энэтхэг) тээвэрлэгч болгон худалдаж авсан.
NFRC-ийг лиофилизацийн аргаар боловсруулсан11,12. Бүх HFFC найрлагыг (Хүснэгт 1) механик хутгагч ашиглан бэлтгэсэн. Механик хутгагч дээр 800 эрг/мин хурдтайгаар тасралтгүй хутгаж, усанд 1% цууны хүчил ашиглан 0.5% хитосаны уусмал бэлтгэнэ. Хүснэгт 1-д заасан ачаалагдсан полимерийн яг жинг хитосаны уусмалд нэмж, тунгалаг полимер уусмал гартал хутгана. Хүснэгт 1-д заасан хэмжээгээр үүссэн хольц дээр PVP K30 болон PEG 400 нэмж, тунгалаг наалдамхай полимер уусмал гартал хутгах ажиллагааг үргэлжлүүлэв. Полимер хольцоос гацсан агаарын бөмбөлгийг зайлуулахын тулд үүссэн полимер уусмалын ванныг 60 минутын турш хэт авиан шинжилгээгээр арилгасан. Нэмэлт зураг S1(b)-д үзүүлсэнчлэн, Ct-ийг 5 мл HFFC-ээр баяжуулсан 6 нүхтэй хавтан (хэв)-ийн нүх бүрт жигд хуваарилсан.
Зургаан нүхтэй хавтанг Ct сүлжээнд HFFC-ийн жигд норгож, тархалтыг хангахын тулд 60 минутын турш хэт авиан шинжилгээгээр шалгасан. Дараа нь зургаан нүхтэй хавтанг -20°C-д 8-12 цагийн турш хөлдөөсөн. NFRCS-ийн янз бүрийн найрлагыг авахын тулд хөлдөөх хавтанг 48 цагийн турш лиофилжүүлсэн. Үүнтэй ижил процедурыг тампон эсвэл цилиндр хэлбэртэй тампон гэх мэт өөр өөр хэлбэр, бүтэц, эсвэл өөр өөр хэрэглээнд зориулсан бусад хэлбэрийг үйлдвэрлэхэд ашигладаг.
Нарийвчлалтай жигнэсэн хитозан (80 кДа) (3%)-ийг соронзон хутгагч ашиглан 1% цууны хүчилд уусгана. Үүссэн хитосаны уусмал дээр 1% PEG 400 нэмж, 30 минут хутгана. Үүссэн уусмалыг дөрвөлжин эсвэл тэгш өнцөгт саванд хийж, -80°C-д 12 цагийн турш хөлдөөнө. Хөлдөөсөн дээжийг сүвэрхэг Cs13 гарган авахын тулд 48 цагийн турш лиофилизаци хийнэ.
Боловсруулсан NFRCS-ийг Фурье хувиргасан хэт улаан туяаны спектроскопи (FTIR) (Shimadzu 8400 s FTIR, Токио, Япон) ашиглан туршилтад хамруулсан бөгөөд хитозан нь бусад полимерүүдтэй химийн нийцтэй эсэхийг баталгаажуулсан14,15. Туршилтад хамрагдсан бүх дээжийн FTIR спектрийг (спектрийн хүрээний өргөн 400-4000 см-1) 32 сканнердах замаар олж авсан.
Бүх найрлагын цус шингээлтийн хурдыг (BAR) Чен болон бусад 16-ийн тайлбарласан аргыг ашиглан бага зэрэг өөрчлөлт оруулан үнэлсэн. Бүх найрлагын боловсруулсан NFRK-г үлдэгдэл уусгагчийг зайлуулахын тулд вакуум зууханд 105°C-д шөнийн турш хатаасан. 30 мг NFRCS (анхны дээжийн жин – W0) болон 30 мг Ct (эерэг хяналт)-ийг 3.8% натрийн цитраттай урьдчилан холимог агуулсан тусдаа саванд хийсэн. Урьдчилан тогтоосон хугацааны интервалаар, тухайлбал 5, 10, 20, 30, 40, 60 секундын хугацаанд NFRCS-ийг авч, дээжийг Ct дээр 30 секундын турш байрлуулж гадаргууг нь шингэээгүй цуснаас цэвэрлэсэн. NFRCS 16-аар шингээгдсэн цусны эцсийн жинг цаг хугацааны цэг бүрт (W1) авч үзсэн. Дараах томъёог ашиглан BAR хувийг тооцоолно уу:
Ван болон бусад судлаачдын мэдээлснээр цусны бүлэгнэлтийн хугацааг (BCT) тодорхойлсон. 17. NFRCS-ийн дэргэд бүхэл цус (3.8% натрийн цитраттай хольсон хархны цус) бүлэгнэхэд шаардагдах хугацааг шинжилгээний дээжийн BCT гэж тооцоолсон. NFRCS-ийн янз бүрийн бүрэлдэхүүн хэсгүүдийг (30 мг) 10 мл-ийн шураг таглаатай шилэнд хийж, 37°C-д өсгөвөрлөв. Цус (0.5 мл)-ийг шилэнд нэмж, цусны бүлэгнэлтийг идэвхжүүлэхийн тулд 0.3 мл 0.2 M CaCl2 нэмсэн. Эцэст нь шилийг 15 секунд тутамд (180° хүртэл) хатуу бүлэгнэл үүсэх хүртэл эргүүлнэ. Дээжийн BCT-г эргүүлэх нүхний тоогоор тооцоолно. BCT дээр үндэслэн цаашдын шинж чанарын судалгаанд зориулж NFRCS Cm, Ch, Cp-ээс хоёр оновчтой найрлагыг сонгосон.
Ch NFRCS болон Cp NFRCS найрлагын BCT-г Ли болон бусад судлаачдын тайлбарласан аргыг ашиглан тодорхойлсон. 19. 15 x 15 мм2 Ch NFRCS, Cp NFRCS, болон Cs (эерэг хяналт)-ийг тусдаа Петрийн аяганд (37 °C) хийнэ. Цусны бүлэгнэлтийн процессыг эхлүүлэхийн тулд 3.8% натрийн цитрат агуулсан цусыг 0.2 М CaCl2-той 10:1 эзлэхүүний харьцаатай хольсон. Дээжийн гадаргуу дээр 20 мкл 0.2 М CaCl2 хархны цусны хольцыг түрхэж, хоосон Петрийн аяганд хийсэн. Хяналтын цусыг Ct-гүй хоосон Петрийн аяганд хийсэн. 0, 3, 5 минутын тогтмол интервалтайгаар аяга агуулсан дээжинд 10 мл деионжуулсан (DI) ус нэмж, бүлэгнэлтийг зогсооно. Бүлэгнээгүй эритроцитууд (эритроцитууд) деионжуулсан усны дэргэд гемолизд орж, гемоглобин ялгаруулдаг. Гемоглобины өөр өөр цаг хугацааны цэгүүд дэх (HA(t)) гемоглобины хэмжээг UV-Vis спектрофотометр ашиглан 540 нм (λmax гемоглобин)-д хэмжсэн. 10 мл ионгүйжүүлсэн усанд 20 мкл цусанд 0 минутанд гемоглобины үнэмлэхүй шингээлтийг (AH(0)) лавлагаа стандарт болгон авсан. Цус бүлэгнэлтийн харьцангуй гемоглобины шингээлтийг (RHA) ижил багц цус ашиглан HA(t)/HA(0) харьцаанаас тооцоолсон.
Бүтцийн анализатор (Texture Pro CT V1.3 Build 15, Брукфилд, АНУ) ашиглан NFRK-ийн гэмтсэн эдэд үзүүлэх наалдамхай шинж чанарыг тодорхойлсон. Нээлттэй ёроолтой цилиндр хэлбэртэй савыг гахайн арьсны дотор талд (өөхний давхаргагүйгээр) дарсан. Дээжийг (Ch NFRCS болон Cp NFRCS) канюляар дамжуулан цилиндр хэлбэртэй хэвэнд хийж, гахайн арьсанд наалдсан. Өрөөний температурт (RT) (25°C) 3 минутын турш инкубацийн дараа NFRCS-ийн наалдамхай бат бөх чанарыг 0.5 мм/сек тогтмол хурдаар бүртгэсэн.
Мэс заслын чигжээсийн гол онцлог нь цусны алдагдлыг бууруулахын зэрэгцээ цусны бүлэгнэлтийг нэмэгдүүлэх явдал юм. NFRCS-ийн алдагдалгүй бүлэгнэлтийг өмнө нь нийтэлсэн аргыг бага зэрэг өөрчлөлттэйгээр ашиглан үнэлсэн 19. Центрифугийн хоолойн нэг талд 8 × 5 мм2 нүхтэй (нээлттэй шархыг төлөөлдөг) микроцентрифугийн хоолой (2 мл) (дотоод диаметр 10 мм) хийнэ. NFRCS нь нүхийг хаахад, гадна ирмэгийг битүүмжлэхэд тууз ашигладаг. 3.8% натрийн цитрат премикс агуулсан микроцентрифугийн хоолойд 20 µl 0.2 M CaCl2 нэмнэ. 10 минутын дараа микроцентрифугийн хоолойг аяганаас гаргаж, аяганы массын өсөлтийг NFRK-аас цусны урсгалаас шалтгаалан тодорхойлсон (n = 3). Цус алдалтын Ch NFRCS болон Cp NFRCS-ийг Cs-тэй харьцуулсан.
NFRCS-ийн нойтон бүрэн бүтэн байдлыг Мишра, Чаудхари21 нарын тайлбарласан аргаар бага зэрэг өөрчлөлттэйгээр тодорхойлсон. NFRCS-ийг 100 мл-ийн Эрленмейер колбонд 50 мл устай хийж, дээд хэсэг үүсгэлгүйгээр 60 секундын турш эргүүлнэ. Дээжийг нүдээр шалгаж, цуглуулгад үндэслэн физик бүрэн бүтэн байдлыг нь эрэмбэлэх.
HFFC-ийн Ct-тэй холбох бат бэхийг өмнө нь нийтлэгдсэн аргуудыг ашиглан бага зэргийн өөрчлөлттэйгөөр судалсан. Гадаргуугийн бүрхүүлийн бүрэн бүтэн байдлыг NFRK-г milliQ ус (Ct)-ийн дэргэд акустик долгионд (гадаад өдөөлт) өртүүлэх замаар үнэлсэн. Боловсруулсан NFRCS Ch NFRCS болон Cp NFRCS-ийг усаар дүүргэсэн стаканд хийж, тус тус 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 30 минутын турш хэт авиагаар шарсан. Хатаасны дараа NFRCS-ийн анхны болон эцсийн жингийн хоорондох хувийн зөрүүг материалын алдагдлын хувийг (HFFC) тооцоолоход ашигласан. In vitro BCT нь гадаргуугийн материалын холболтын бат бэх буюу алдагдлыг цаашид дэмжсэн. HFFC-ийн Ct-тэй холбогдох үр ашиг нь цусны бүлэгнэлт болон Ct22-ийн гадаргуу дээр уян хатан бүрхүүл үүсгэдэг.
Боловсруулсан NFRCS-ийн нэгэн төрлийн байдлыг NFRCS-ийн санамсаргүй байдлаар сонгосон ерөнхий байршлуудаас авсан дээжийн (30 мг) BCT-ээр тодорхойлсон. NFRCS-ийн нийцлийг тодорхойлохын тулд өмнө дурдсан BCT процедурыг дагана уу. Таван дээжийн хоорондох ойр байдал нь гадаргуугийн жигд бүрхүүл болон Ct торонд HFFC хуримтлалыг баталгаажуулдаг.
Цусны хүрэлцэх хэсгийн нэрлэсэн хэмжээг (NBCA) өмнө нь мэдээлсэнчлэн зарим өөрчлөлттэйгөөр тодорхойлсон. Ct, Ch NFRCS, Cp NFRCS болон Cs гэсэн хоёр гадаргуугийн хооронд 20 µl цус хавчих замаар цусыг бүлэгнүүлнэ. 1 цагийн дараа стентийн хоёр хэсгийг салгаж, бүлэгнэлтийн талбайг гараар хэмжсэн. Гурван давталтын дундаж утгыг NBCA NFRCS19 гэж үзсэн.
Динамик уурын сорбцийн (DVS) шинжилгээг ашиглан гадаад орчноос эсвэл бүлэгнэлтийг эхлүүлэх үүрэгтэй гэмтлийн цэгээс усыг шингээх NFRCS-ийн үр нөлөөг үнэлэв. DVS нь ±0.1 µg массын нягтралтай хэт мэдрэг тэнцвэрийг ашиглан дээжинд уурын шингээлт болон алдагдлыг гравиметрийн аргаар үнэлдэг эсвэл бүртгэдэг. Дээжийн эргэн тойронд электрон массын урсгалын хянагч нь ханасан болон хуурай тээвэрлэгч хийг холих замаар хэсэгчилсэн уурын даралт (харьцангуй чийгшил) үүсгэдэг. Европын Эмийн сангийн удирдамжийн дагуу дээжийн чийг шингээлтийн хувийг үндэслэн дээжийг 4 ангилалд хуваасан (0–0.012% w/w− чийг шингэдэггүй, 0.2–2% w/w бага зэрэг чийг шингэдэг, 2–15% дунд зэрэг чийг шингэдэг, > 15% маш чийг шингэдэг)23. Европын Эмийн сангийн удирдамжийн дагуу дээжийн чийг шингээлтийн хувийг үндэслэн дээжийг 4 ангилалд хуваасан (0–0.012% w/w− чийг шингээдэггүй, 0.2–2% w/w бага зэрэг чийг шингээдэг, 2–15% дунд зэрэг чийг шингээдэг, > 15% маш чийг шингээдэг)23.Европын Эмийн Эмийн Эмийн зөвлөмжийн дагуу дээжийн чийг шингээлтийн хувь хэмжээнээс хамааран дээжийг 4 ангилалд хуваасан (0–0.012% w/w – чийг шингээдэггүй, 0.2–2% w/w бага зэрэг чийг шингээдэг, 2–15%).% умеренно гигроскопичен и > 15% очень гигроскопичен)23. дунд зэргийн гигроскопийн % ба > 15% маш гигроскопийн)23.根据欧洲药典指南，根据样品吸收水分的百分比，样品分为4 类（0-0.012% w/w非吸湿性、0.2-2% w/w 轻微吸湿性、2-15% 适度吸湿，> 15% 非常吸湿）23。根据 欧洲 药典 指南 ， 根据 吸收 水分 的 百分比 样品 分为 分为 分为 分为 分为 ， 根据 吸收 水分 0. W/w- 吸湿 性 、 、 、 、 0.2-2% W/w 轻微 、 2-15% 适度 吸湿 ，> 15%非常吸湿）2Европын Эмийн Эмийн Эмийн зөвлөмжийн дагуу дээжийг дээжинд шингээсэн чийгийн хувь хэмжээгээр нь 4 ангилалд хуваадаг (жингийн 0-0.012% - чийг шингээдэггүй, жингийн 0.2-2% - бага зэрэг чийг шингээдэг, жингийн 2-15%).% умеренно гигроскопичен, > 15 % очень гигроскопичен) 23. дунд зэргийн гигроскопийн %, > 15% маш гигроскопийн) 23.NFCS X NFCS болон TsN NFCS-ийн гигроскопийн үр ашгийг DVS TA TGA Q5000 SA анализатор дээр тодорхойлсон. Энэ процессын явцад ажиллах хугацаа, харьцангуй чийгшил (RH) болон 25°C24 температурт бодит цагийн дээжийн жинг олж авсан. Чийгийн агууламжийг дараах тэгшитгэлийг ашиглан NFRCS-ийн нарийн массын шинжилгээгээр тооцоолно.
MC нь NFRCS чийгшил юм. m1 нь NSAID-ийн хуурай жин. m2 нь өгөгдсөн чийгшлийн нөхцөлд бодит цагийн NFRCS масс юм.
Дээжийг 25°C-д 10 цагийн турш хоосолсны дараа шингэн азотоор азотын адсорбцийн туршилтыг ашиглан нийт гадаргуугийн талбайг тооцоолсон (< 7 × 10–3 Торр). Дээжийг 25°C-д 10 цагийн турш хоосолсны дараа шингэн азотоор азотын адсорбцийн туршилтыг ашиглан нийт гадаргуугийн талбайг тооцоолсон (< 7 × 10–3 Торр). Общая площадь поверхности оценивалась с помощью туршилта по адсорбции азота жидким азотом дараа опорожнения образцов при 25 °С в течение 10 ч (< 7 × 10–3 Торр). Дээжийг 25°C-д 10 цагийн турш хоосолсны дараа шингэн азотоор азотын адсорбцийн туршилтыг ашиглан нийт гадаргуугийн талбайг тооцоолсон (< 7 × 10–3 Торр).在25°C 清空样品10 小时（< 7 × 10-3 Torr）后，使用液氮的氮吸附实验估计总表靂表25 хэм хүртэл Общая площадь поверхности оценивалась с использованием туршилтын по адсорбции азота жидким азотом дараа опорожнения образцов в течение 10 цаг 25°C (< 7 × 10-3 торр). Нийт гадаргуугийн талбайг 25°C (< 7 x 10-3 торр) температурт дээжийг 10 цагийн турш хоосолсны дараа шингэн азотоор азотын адсорбцийн туршилтыг ашиглан тооцоолсон.Нийт гадаргуугийн талбай, нүх сүвний эзэлхүүн болон NFRCS нүх сүвний хэмжээг RS 232 програм хангамж ашиглан Австрийн NOVA 1000e компанийн Quantachrome ашиглан тодорхойлсон.
Бүхэл цуснаас 5% улаан эс (шингэлэгч болгон давсны уусмал) бэлтгэнэ. Дараа нь тодорхой хэмжээний HFFC (0.25 мл)-ийг 96 нүхтэй таваг болон 5% улаан эсийн масс (0.1 мл) руу хийнэ. Холимгийг 37°C-д 40 минут өсгөвөрлөнө. Улаан эс болон ийлдсийн холимогийг эерэг хяналт, давсны уусмал болон улаан эсийн холимогийг сөрөг хяналт гэж үзсэн. Гемагглютинжилтийг Стажицкийн шатлалаар тодорхойлсон. Санал болгож буй шатлалууд нь дараах байдалтай байна: + + + + нягт мөхлөгт агрегатууд; + + + муруй ирмэгтэй гөлгөр ёроолын дэвсгэрүүд; + + урагдсан ирмэгтэй гөлгөр ёроолын дэвсгэрүүд; + гөлгөр дэвсгэрийн ирмэгийг тойрсон нарийн улаан цагираг; – доод нүхний төвд (сөрөг) салангид улаан товчлуур 12.
NFRCS-ийн цусан дахь нийцтэй байдлыг Олон Улсын Стандартчиллын Байгууллага (ISO)-ийн аргаар (ISO10993-4, 1999) судалсан. Сингх болон бусад судлаачдын тодорхойлсон гравиметрийн аргыг ашиглан NFRCS-ийн гадаргуу дээр эсвэл түүний дэргэд тромбо үүсэхийг үнэлэхэд бага зэргийн өөрчлөлт оруулсан. 500 мг Cs, Ch NFRCS болон Cp NFRCS-ийг 37°C-д 24 цагийн турш фосфатын буфержуулсан давсны уусмалд (PBS) инкубацлав. 24 цагийн дараа PBS-ийг авч, NFRCS-ийг 3.8% натрийн цитрат агуулсан 2 мл цусаар боловсруулсан. NFRCS-ийн гадаргуу дээр инкубацийн дээжинд 0.04 мл 0.1 М CaCl2 нэмнэ. 45 минутын дараа бүлэгнэлтийг зогсоохын тулд 5 мл нэрмэл ус нэмнэ. NFRK-ийн гадаргуу дээрх бүлэгнсэн цусыг 36-38% формальдегидийн уусмалаар боловсруулсан. Формальдегидээр бэхлэгдсэн бүлэгнүүдийг хатааж, жинлэв. Тромбозын хувийг цус, дээжгүй шилний жинг (сөрөг хяналт) болон цустай шилний жинг (эерэг хяналт) тооцоолж тооцоолсон.
Анхны баталгаажуулалт болгон дээжийг оптик микроскопоор дүрслэн харуулснаар HFFC гадаргуугийн бүрхүүл, Ct хоорондоо холбогдсон болон Ct сүлжээ нь нүх сүв үүсгэх чадварыг ойлгосон. NFRCS-ээс гаргаж авсан Ch болон Cp-ийн нимгэн хэсгүүдийг хуйхны ирээр хайчилж авсан. Үүссэн хэсгийг шилэн слайд дээр байрлуулж, бүрхүүлийн хальсаар бүрхэж, ирмэгийг нь цавуугаар бэхэлсэн. Бэлтгэсэн слайдуудыг оптик микроскопоор харж, өөр өөр томруулалтаар гэрэл зураг авсан.
Ct сүлжээнд полимер хуримтлалыг Райс болон бусад хүмүүсийн тайлбарласан аргад үндэслэн флуоресценцийн микроскоп ашиглан дүрслэн харуулсан.29. Найрлагад ашигласан HFFC найрлагыг флуоресцент будагч бодис (амарант)-тай хольж, өмнө дурдсан аргын дагуу NFRCS (Ch & Cp) бэлтгэсэн. Найрлагад ашигласан HFFC найрлагыг флуоресцент будагч бодис (амарант)-тай хольж, өмнө дурдсан аргын дагуу NFRCS (Ch & Cp) бэлтгэсэн.Найрлагад ашигласан HFFC найрлагыг флуоресцент будагч бодис (амарант)-тай хольж, өмнө дурдсан аргын дагуу NFRCS (Ch ба Cp)-ийг гаргаж авсан.将用于配方的HFFC 组合物与荧光染料（苋菜）混合，并按照前面提到的方到的方NF Cp).将用于配方的HFFC 组合物与荧光染料（苋菜）混合，并按照前面提到的方到的方NF Cp).Найрлагад ашигласан HFFC найрлагыг флуоресцент будагч бодис (Амарант)-тай хольж, өмнө дурдсанчлан NFRCS (Ch ба Cp)-г авсан.Олж авсан дээжээс NFRK-ийн нимгэн хэсгүүдийг хайчилж, шилэн слайд дээр байрлуулж, бүрхүүлийн хальсаар бүрхэв. Бэлтгэсэн слайдуудыг ногоон шүүлтүүр (310-380 нм) ашиглан флуоресцент микроскопоор ажиглана уу. Ct сүлжээнд Ct хамаарал болон илүүдэл полимер хуримтлалыг ойлгохын тулд зургийг 4 дахин томруулалтаар авсан.
NFRCS Ch болон Cp-ийн гадаргуугийн топографийг хэт хурц TESP консол бүхий атомын хүчний микроскоп (AFM) ашиглан товшилтын горимд тодорхойлсон: 42 N/m, 320 kHz, ROC 2-5 нм, Брукер, Тайвань. Гадаргуугийн барзгар байдлыг програм хангамж (Scanning Probe Image Processor) ашиглан дундаж квадрат (RMS)-ээр тодорхойлсон. Гадаргуугийн жигд байдлыг шалгахын тулд NFRCS-ийн янз бүрийн байршлыг 3 хэмжээст зураг дээр дүрсэлсэн. Өгөгдсөн талбайн онооны стандарт хазайлтыг гадаргуугийн барзгар байдал гэж тодорхойлдог. NFRCS31-ийн гадаргуугийн барзгар байдлыг тоон үзүүлэлтээр тодорхойлоход RMS тэгшитгэлийг ашигласан.
FESEM дээр суурилсан судалгааг Ch NFRCS болон Cp NFRCS-ийн гадаргуугийн морфологийг ойлгохын тулд Токио хотын Хитачи хотын FESEM, SU8000, HI-0876-0003 ашиглан хийсэн бөгөөд энэ нь Cm NFRCS-ээс илүү сайн BCT үзүүлсэн. FESEM судалгааг Жао болон бусад 32-ын тайлбарласан аргын дагуу бага зэргийн өөрчлөлттэйгээр гүйцэтгэсэн. NFRCS 20-30 мг Ch NFRCS болон Cp NFRCS-ийг хархны цустай хольсон 20 мкл 3.8% натрийн цитраттай урьдчилан хольсон. Цусаар боловсруулсан дээжинд 20 мкл 0.2 М CaCl2 нэмж, бүлэгнэлтийг эхлүүлж, дээжийг өрөөний температурт 10 минутын турш инкубацлав. Үүнээс гадна, илүүдэл эритроцитыг NFRCS-ийн гадаргуугаас давсны уусмалаар зайлж зайлуулсан.
Дараагийн дээжийг 0.1% глутаральдегидээр боловсруулж, чийгийг арилгахын тулд 37°C-д халуун агаарын зууханд хатаасан. Хатаасан дээжийг бүрж, шинжилсэн 32. Шинжилгээний явцад олж авсан бусад зургууд нь хөвөн ширхэгийн гадаргуу дээрх бөөгнөрөл үүсэх, Ct-ийн хоорондох полимер хуримтлал, эритроцитын морфологи (хэлбэр), бөөгнөрөлийн бүрэн бүтэн байдал, NFRCS-ийн дэргэд эритроцитын морфологи байв. Цусаар инкубацлагдсан боловсруулаагүй NFRCS хэсгүүд болон Ch ба Cp боловсруулсан NFRCS хэсгүүдийг элементийн ион (натри, кали, азот, кальци, магни, цайр, зэс, селен)-д сканнердсан 33. Бөгнөрөл үүсэх үед элементийн ионы хуримтлал болон бөөгнөрөлийн нэгэн төрлийн байдлыг ойлгохын тулд боловсруулсан болон боловсруулаагүй дээжийн хоорондох элементийн ионы хувийг харьцуулна уу.
Ct гадаргуу дээрх Cp HFFC гадаргуугийн бүрхүүлийн зузааныг FESEM ашиглан тодорхойлсон. Cp NFRCS-ийн хөндлөн огтлолыг хүрээнээс хайчилж, шүршигчээр бүрсэн. Үүссэн шүршигч бүрхүүлийн дээжийг FESEM ашиглан ажиглаж, гадаргуугийн бүрхүүлийн зузааныг 34, 35, 36 хэмжсэн.
Рентген микро-КТ нь өндөр нягтралтай 3D үл эвдэх дүрслэлийг өгдөг бөгөөд NFRK-ийн дотоод бүтцийн зохион байгуулалтыг судлах боломжийг олгодог. Микро-КТ нь дээжээр дамжин өнгөрч буй рентген туяаг ашиглан дээжинд байгаа рентген туяаны орон нутгийн шугаман сулралын коэффициентийг бүртгэдэг бөгөөд энэ нь морфологийн мэдээлэл авахад тусалдаг. Cp NFRCS болон цусаар боловсруулсан Cp NFRCS дахь Ct-ийн дотоод байршлыг NFRCS37,38,39-ийн дэргэд шингээлтийн үр ашиг болон цусны бүлэгнэлтийг ойлгохын тулд микро-КТ-ээр шалгасан. Цусаар боловсруулсан болон эмчилээгүй Cp NFRCS дээжийн 3D бүтцийг микро-КТ (V|tome|x S240, Финикс, Герман) ашиглан сэргээн босгосон. VG STUDIO-MAX програм хангамжийн 2.2 хувилбарыг ашиглан NFRCS-д зориулсан 3D зургийг боловсруулахын тулд хэд хэдэн рентген зургийг өөр өөр өнцгөөс (хамгийн тохиромжтой нь 360° бүрхүүл) авсан. Цуглуулсан проекцийн өгөгдлийг харгалзах энгийн 3D ScanIP Academic програм хангамжийг ашиглан 3D эзэлхүүнтэй дүрс болгон сэргээн босгосон.
Үүнээс гадна, цусны бүлэгнэлтийн тархалтыг ойлгохын тулд цусны бүлэгнэлтийг эхлүүлэхийн тулд NFRCS-д 20 мкл урьдчилан хольсон цитрат цус, 20 мкл 0.2 М CaCl2 нэмсэн. Бэлтгэсэн дээжийг хатууруулахаар үлдээнэ. NFRK гадаргууг 0.5% глутаральдегидээр боловсруулж, 30-40°C температурт 30 минутын турш халуун агаарын зууханд хатаасан. NFRCS дээр үүссэн цусны бүлэгнэлтийг сканнердаж, сэргээн засварлаж, цусны бүлэгнэлтийн 3 хэмжээст зургийг дүрслэн харуулсан.
Бактерийн эсрэг шинжилгээг өмнө нь тайлбарласан аргыг бага зэрэг өөрчлөлттэйгөөр ашиглан Cp NFRCS дээр (Ch NFRCS-тэй харьцуулахад хамгийн сайн) хийсэн. Cp NFRCS болон Cp HFFC-ийн бактерийн эсрэг идэвхийг инкубаторт Петрийн аяганд агар дээр ургадаг гурван өөр туршилтын бичил биетэн [S.aureus (грам эерэг бактери), E.coli (грам сөрөг бактери) болон цагаан Candida (C.albicans)] ашиглан тодорхойлсон. 105-106 CFU мл-1 концентрацитай 50 мл шингэрүүлсэн бактерийн өсгөврийн суспензийг агар орчинд жигд тарь. Орчныг Петрийн аяганд хийж, хатууруулна. Агар хавтангийн гадаргуу дээр HFFC-ээр дүүргэх нүх гаргав (HFFC-д 3 нүх, сөрөг хяналтын хувьд 1 нүх). 3 нүхэнд 200 µl HFFC, 4 дэх нүхэнд 200 µl рН 7.4 PBS нэмнэ. Петрийн аяганы нөгөө талд 12 мм-ийн Cp NFRCS дискийг хатуурсан агар дээр байрлуулж, PBS (рН 7.4)-ээр чийглэнэ. Ципрофлоксацин, ампициллин болон флуконазол шахмалыг Staphylococcus aureus, Escherichia coli болон Candida albicans-ийн лавлагаа стандарт гэж үздэг. Дарангуйлах бүсийг гараар хэмжиж, дарангуйлах бүсийн дижитал зургийг авна.
Байгууллагын ёс зүйн зөвшөөрлийн дараа уг судалгааг Энэтхэгийн өмнөд хэсэгт орших Карнатака мужийн Манипал дахь Боловсрол, судалгааны Кастурба Анагаах Ухааны Коллежид явуулсан. In vitro TEG туршилтын протоколыг Карнатака мужийн Манипал дахь Кастурба Анагаах Ухааны Коллежийн Байгууллагын Ёс зүйн Хороо хянаж, баталсан (IEC: 674/2020). Эмнэлгийн цусны банкнаас (18-55 насны) сайн дурын цусны доноруудаас судалгаанд оролцогчдыг цуглуулсан. Үүнээс гадна, цусны дээж цуглуулах сайн дурынхнаас мэдээлэлтэй зөвшөөрлийн маягтыг авсан. Натурал TEG (N-TEG)-ийг натрийн цитраттай хольсон бүхэл цусанд Cp HFFC найрлагын нөлөөг судлахад ашигласан. N-TEG нь эмнэлгийн тусламжийн цэгийн сэхээн амьдруулахад гүйцэтгэх үүргээрээ өргөнөөр хүлээн зөвшөөрөгдсөн бөгөөд энэ нь үр дүн нь эмнэлзүйн хувьд мэдэгдэхүйц саатал гарах магадлалтай (тогтмол бүлэгнэлтийн шинжилгээ) тул эмч нарт асуудал үүсгэдэг. N-TEG шинжилгээг бүхэл цус ашиглан хийсэн. Бүх оролцогчдоос мэдээлэлтэй зөвшөөрөл, дэлгэрэнгүй эмнэлгийн түүхийг авсан. Судалгаанд жирэмслэлт/төрсний дараах үе эсвэл элэгний өвчин зэрэг цус тогтоогч эсвэл тромботик хүндрэлтэй оролцогчдыг хамруулаагүй болно. Цус бүлэгнэлтийн каскадад нөлөөлдөг эм ууж буй хүмүүсийг мөн судалгаанаас хассан. Лабораторийн үндсэн шинжилгээ (гемоглобин, протромбины хугацаа, идэвхжүүлсэн тромбопластин болон ялтас эсийн тоо)-г бүх оролцогчдод стандарт журмын дагуу хийсэн. N-TEG нь цусны бүлэгнэлтийн зуурамтгай чанар, анхны бүлэгнэлтийн бүтэц, бөөмсийн харилцан үйлчлэл, бүлэгнэлтийн бэхжилт, бүлэгнэлтийн задралыг тодорхойлдог. N-TEG шинжилгээ нь хэд хэдэн эсийн элементүүд болон сийвэнгийн хамтын нөлөөллийн талаарх график болон тоон өгөгдлийг өгдөг. N-TEG шинжилгээг Cp HFFC-ийн хоёр өөр эзэлхүүн (10 мкл ба 50 мкл) дээр хийсэн. Үүний үр дүнд 10 мкл Cp HFFC дээр нимбэгийн хүчилтэй 1 мл бүхэл цус нэмсэн. TEG аяга агуулсан 20 мкл 0.2 М CaCl2 дээр 1 мл (Cp HFFC + цитрат цус), 340 мкл холимог цус нэмнэ. Үүний дараа TEG аягануудыг TEG® 5000, US-д хийж, Cp HFFC41-ийн дэргэд цусны дээжийн R, K, альфа өнцөг, MA, G, CI, TPI, EPL, LY-ийн 30%-ийг хэмжсэн.
In vivo судалгааны протоколыг Манипал дахь Манипал Дээд Боловсролын Хүрээлэнгийн Кастурба Анагаах Ухааны Сургуулийн Амьтны Ёс Зүйн Байгууллагын Хороо (IAEC) хянаж, баталсан (IAEC/KMC/69/2020). Амьтны бүх туршилтыг Амьтны Туршилтын Хяналт, Хяналтын Хорооны (CPCSEA) зөвлөмжийн дагуу гүйцэтгэсэн. In vivo NFRCS-ийн бүх судалгааг (2 × 2 см2) эмэгчин Вистар хархнууд дээр (200-250 гр жинтэй) хийсэн. Бүх амьтдыг 24-26°C температурт дасан зохицуулсан бөгөөд амьтад стандарт хоол хүнс, усыг чөлөөтэй хэрэглэх боломжтой байв. Бүх амьтдыг санамсаргүй байдлаар өөр өөр бүлэгт хуваасан бөгөөд бүлэг бүр гурван амьтнаас бүрдсэн. Бүх судалгааг Амьтны Судалгаа: In Vivo Туршилтын Тайлан 43-ын дагуу гүйцэтгэсэн. Судалгаанаас өмнө амьтдыг хэвлийн хөндийд (IP) 20-50 мг кетамин (биеийн жингийн 1 кг тутамд) болон 2-10 мг ксилазин (биеийн жингийн 1 кг тутамд) холимогоор мэдээ алдуулалт хийсэн. Судалгааны дараа дээжийн анхны болон эцсийн жингийн зөрүүг үнэлж цус алдалтын хэмжээг тооцоолсон бөгөөд гурван шинжилгээнээс авсан дундаж утгыг дээжийн цус алдалтын эзэлхүүн болгон авсан.
Хархны сүүл тайрах загварыг гэмтэл, тулаан эсвэл зам тээврийн ослын үед цус алдалтыг зохицуулах NFRCS-ийн боломжийг ойлгохын тулд хэрэгжүүлсэн (гэмтлийн загвар). Хэвийн цус алдалтыг хангахын тулд сүүлний 50%-ийг хуйхны ирээр тасдаж, 15 секундын турш агаарт байрлуулна. Үүнээс гадна, туршилтын дээжийг даралтаар (Ct, Cs, Ch NFRCS болон Cp NFRCS) хархны сүүл дээр байрлуулсан. Туршилтын дээжинд цус алдалт болон PCT-г мэдээлсэн (n = 3)17,45.
Тулалдаанд NFRCS даралтыг хянах үр нөлөөг гуяны өнгөц артерийн загвар дээр судалсан. Гуяны артерийг ил гаргаж, 24G трокараар хатгаж, 15 секундын дотор цус гаргана. Хяналтгүй цус алдалт ажиглагдсаны дараа туршилтын дээжийг хатгалтын хэсэгт байрлуулж, даралт өгнө. Туршилтын дээжийг хэрэглэсний дараа шууд бүлэгнэлтийн хугацааг тэмдэглэж, дараагийн 5 минутын турш цус тогтоолтын үр нөлөөг ажигласан. Үүнтэй ижил процедурыг Cs болон Ct46-тай давтан хийсэн.
Доулинг нар 47 мэс заслын үеийн цус алдалтын үед цус тогтоогч материалын цус тогтоогч чадавхийг үнэлэхийн тулд элэгний гэмтлийн загварыг санал болгосон. Ct дээж (сөрөг хяналт), Cs framework (эерэг хяналт), Ch NFRCS дээж, Cp NFRCS дээжүүдэд BCT тэмдэглэсэн. Хархны дээд хөндийн венийг дунд зэргийн лапаротоми хийж ил гаргасан. Үүний дараа зүүн дэлбээний дистал хэсгийг хайчаар хайчилж авсан. Элгэнд хуйхны ирээр зүсэлт хийж, хэдэн секундын турш цус гаргана. Нарийвчлалтай жинлэсэн Ch NFRCS болон Cp NFRCS шинжилгээний дээжийг гэмтсэн гадаргуу дээр эерэг даралтгүйгээр байрлуулж, BCT тэмдэглэсэн. Дараа нь хяналтын бүлэг (Ct) гэмтэлийг эвдрэлгүйгээр даралт үзүүлсний дараа Cs 30 s47 хийсэн.
Боловсруулсан полимер суурьтай NFRCS-ийн шарх эдгээх шинж чанарыг үнэлэхийн тулд шархны тайралтын загварыг ашиглан in vivo шарх эдгэрэлтийн шинжилгээг хийсэн. Хасалтын шархны загваруудыг өмнө нь нийтлэгдсэн аргуудын дагуу бага зэргийн өөрчлөлттэйгээр сонгож, гүйцэтгэсэн19,32,48. Бүх амьтдыг өмнө нь тайлбарласны дагуу мэдээ алдуулалт хийсэн. Нурууны арьсан дээр дугуй хэлбэртэй гүн зүсэлт хийхийн тулд биопсийн цоолтуур (12 мм) ашиглана. Бэлтгэсэн шархны хэсгүүдийг Cs (эерэг хяналт), Ct (хөвөн дэвсгэр эдгэрэлтэд саад учруулдаг болохыг хүлээн зөвшөөрсөн), Ch NFRCS болон Cp NFRCS (туршилтын бүлэг) болон сөрөг хяналтаар ямар ч эмчилгээ хийлгүйгээр боосон. Судалгааны өдөр бүр бүх харханд шархны талбайг хэмжсэн. Шархны хэсгийн зургийг авахын тулд дижитал камер ашиглан шинэ боолт тавина. Шарх хаагдах хувийг дараах томъёогоор хэмжсэн:
Судалгааны 12 дахь өдөр шарх хаагдсан хувь дээр үндэслэн хамгийн сайн бүлгийн хархны арьсыг ((Cp NFRCS) болон хяналтын бүлэг) тайрч, H&E будалт болон Массоны трихромын будалтаар судалсан. Судалгааны 12 дахь өдөр шарх хаагдсан хувь дээр үндэслэн хамгийн сайн бүлгийн хархны арьсыг ((Cp NFRCS) болон хяналтын бүлэг) тайрч, H&E будалт болон Массоны трихромын будалтаар судалсан.Судалгааны 12 дахь өдөр шарх хаагдсан хувь дээр үндэслэн хамгийн сайн бүлгийн ((Cp NFRCS) болон хяналтын бүлгийн) хархнуудын арьсыг тайрч, гематоксилин-эозин болон Массоны трихромоор будах замаар шинжилсэн.根据研究第12天的伤口闭合百分比，切除最佳组((Cp) NFRCS)和对照组)的大鼠皮肤，进行H&E染色和Masson三色染色研究。根据研究第12天的伤口闭合百分比，切除最佳组((Cp) NFRCS)和对照组)的大鼠皮肤，进行H&E染色和眳组）Судалгааны 12 дахь өдөр шархны хаалтын хувь дээр үндэслэн хамгийн сайн бүлэгт ((Cp NFRCS) болон хяналтын бүлгүүд) багтсан хархнуудыг гематоксилин-эозин будалт болон Массоны трихромын будалтаар хассан.Хэрэгжүүлсэн будах процедурыг өмнө нь тайлбарласан аргуудын дагуу гүйцэтгэсэн49,50. Товчхондоо, 10% формалинд бэхлэсний дараа дээжийг хэд хэдэн зэрэглэлийн спирт ашиглан хатаасан. Микротом ашиглан тайрсан эдийн нимгэн хэсгүүдийг (5 мкм зузаантай) гаргаж авсан. Хяналтын болон Cp NFRCS-ийн нимгэн цуваа хэсгүүдийг гистопатологийн өөрчлөлтийг судлахын тулд гематоксилин ба эозиноор боловсруулсан. Массоны трихромын будгийг коллагены фибрил үүсэхийг илрүүлэхэд ашигласан. Олж авсан үр дүнг эмгэг судлаачид сохроор судалсан.
Cp NFRCS дээжийн тогтвортой байдлыг өрөөний температурт (25°C ± 2°C/60% RH ± 5%) 12 сарын турш судалсан51. Cp NFRCS (гадаргуугийн өнгө өөрчлөгдөх ба бичил биетний өсөлт)-ийг харааны үзлэгээр шалгаж, Материал ба Арга зүйн хэсэгт дурдсан дээрх аргуудын дагуу нугалаас элэгдэлд тэсвэртэй байдал болон BCT-г туршсан.
Cp NFRCS-ийн өргөтгөх чадвар болон давтагдах чадварыг 15×15 см2 хэмжээтэй Cp NFRCS бэлтгэснээр шалгасан. Үүнээс гадна, янз бүрийн Cp NFRCS фракцуудаас 30 мг дээж (n = 5)-ийг гаргаж авсан бөгөөд судлагдсан дээжийн BCT-г Арга зүйн хэсэгт өмнө нь тайлбарласны дагуу үнэлсэн.
Бид янз бүрийн биоанагаахын хэрэглээнд зориулж Cp NFRCS найрлага ашиглан янз бүрийн хэлбэр, бүтэц боловсруулахыг оролдсон. Ийм хэлбэр эсвэл тохиргоонд хамраас цус гарах конус хэлбэрийн арчдас, шүдний эмчилгээ, үтрээний цус алдалтын цилиндр хэлбэрийн арчдас орно.
Бүх өгөгдлийн багцыг дундаж ± стандарт хазайлтаар илэрхийлсэн бөгөөд Prism 5.03 (GraphPad, Сан Диего, Калифорни, АНУ) ашиглан ANOVA-аар шинжилсэн бөгөөд дараа нь Бонферронигийн олон харьцуулалтын тест (*p<0.05)-ийг ашигласан.
Хүний судалгаанд хийгдсэн бүх процедур нь Хүрээлэн болон Үндэсний Судалгааны Зөвлөлийн стандартууд, мөн 1964 оны Хельсинкийн тунхаглал болон түүний дараагийн нэмэлт өөрчлөлтүүд, эсвэл үүнтэй төстэй ёс зүйн стандартуудтай нийцсэн байв. Бүх оролцогчдод судалгааны онцлог, сайн дурын шинж чанарын талаар мэдээлэл өгсөн. Оролцогчдын мэдээллийг цуглуулсны дараа нууц хэвээр үлдэнэ. In vitro TEG туршилтын протоколыг Карнатака мужийн Манипал хотын Кастурба Анагаах Ухааны Коллежийн Байгууллагын Ёс зүйн Хороо хянаж, баталсан (IEC: 674/2020). Сайн дурынхан цусны дээж авах талаар мэдээлэлтэй зөвшөөрөлд гарын үсэг зурсан.
Амьтан дээр хийсэн бүх судалгааг Кастуба Анагаах Ухааны Факультет, Манипал Дээд Боловсролын Хүрээлэн, Манипал (IAEC/KMC/69/2020)-ын дагуу явуулсан. Амьтан дээр хийсэн бүх туршилтыг Амьтны Туршилтын Хяналт, Хяналтын Хорооны (CPCSEA) удирдамжийн дагуу явуулсан. Бүх зохиогчид ARRIVE удирдамжийг дагаж мөрддөг.
Бүх NFRCS-ийн FTIR спектрийг шинжилж, Зураг 2A-д үзүүлсэн хитозан спектртэй харьцуулсан. 3437 см-1 (OH ба NH суналт, давхцал), 2945 ба 2897 см-1 (CH суналт), 1660 см-1 (NH2 омог), 1589 см-1 (N–H нугалалт), 1157 см-1 (гүүрний суналт O-), 1067 см-1 (C–O суналт, хоёрдогч гидроксил), 993 см-1 (CO суналт, Bo-OH) 52.53.54 дээрх хитозанын онцлог спектрийн оргилууд (бүртгэгдсэн). Нэмэлт хүснэгт S1 нь хитозан (тайланч), цэвэр хитозан, Cm, Ch, болон Cp-ийн FTIR NFRCS шингээлтийн спектрийн утгыг харуулав. Бүх NFRCS (Cm, Ch ба Cp)-ийн FTIR спектрүүд нь цэвэр хитозантай ижил шинж чанартай шингээлтийн зурвасуудыг мэдэгдэхүйц өөрчлөлтгүйгээр харуулсан (Зураг 2A). FTIR-ийн үр дүнгүүд нь NFRCS-ийг боловсруулахад ашигласан полимерүүдийн хооронд химийн болон физик харилцан үйлчлэл байхгүй болохыг баталсан бөгөөд энэ нь ашигласан полимерүүд идэвхгүй болохыг харуулж байна.
Cm NFRCS, Ch NFRCS, Cp NFRCS болон Cs-ийн in vitro шинж чанар. (A) нь шахалтын дор хитозан болон Cm NFRCS, Ch NFRCS болон Cp NFRCS-ийн найрлагын нийлмэл FTIR спектрийг илэрхийлнэ. (B) a) NFRCS Cm, Ch, Cp, болон Cg-ийн цусанд шингээлтийн түвшин (n = 3); Ct дээжүүд нь BAR-ийн өндөр түвшинг харуулсан, учир нь хөвөн арчдас нь шингээлтийн үр ашгийг өндөрсгөсөн; b) Цус шингээлтийн дараах цус. Шингээгдсэн дээжийн зураг. Туршилтын дээж C-ийн BCT-ийн график дүрслэл (Cp NFRCS нь хамгийн сайн BCT-тэй байсан (15 сек, n = 3)). C, D, E, болон G дахь өгөгдлийг дундаж ± SD гэж харуулсан бөгөөд алдааны мөрүүд нь SD, ***p < 0.0001-г илэрхийлнэ. C, D, E, болон G дахь өгөгдлийг дундаж ± SD гэж харуулсан бөгөөд алдааны мөрүүд нь SD, ***p < 0.0001-г илэрхийлнэ. Данные в C, D, E и G представлены как среднее ± стандартное отклонение, а планки погрешностей представляют стандартное отклонение, ***p <0,0001. C, D, E, болон G дахь өгөгдлийг дундаж ± стандарт хазайлтаар харуулсан бөгөөд алдааны мөрүүд нь стандарт хазайлт болох ***p<0.0001-ийг илэрхийлнэ. C、D、E 和G 中的数据显示为平均值± SD，误差线代表SD，***p < 0.0001。 C、D、E 和G 中的数据显示为平均值± SD，误差线代表SD，***p < 0.0001。 Данные в C, D, E и G показаны как среднее значение ± стандартное отклонение, планки погрешностей представляют стандартное отклонение, ***p <0,0001. C, D, E, болон G өгөгдлүүдийг дундаж ± стандарт хазайлтаар харуулсан бөгөөд алдааны мөрүүд нь стандарт хазайлтыг илэрхийлнэ, ***p<0.0001.