Nature.comను సందర్శించినందుకు ధన్యవాదాలు. మీరు ఉపయోగిస్తున్న బ్రౌజర్ వెర్షన్‌లో CSS మద్దతు పరిమితంగా ఉంది. ఉత్తమ అనుభవం కోసం, మీరు అప్‌డేట్ చేయబడిన బ్రౌజర్‌ను ఉపయోగించాలని (లేదా ఇంటర్నెట్ ఎక్స్‌ప్లోరర్‌లో కంపాటిబిలిటీ మోడ్‌ను నిలిపివేయాలని) మేము సిఫార్సు చేస్తున్నాము. ఈలోగా, మద్దతు కొనసాగేలా చూసేందుకు, మేము స్టైల్స్ మరియు జావాస్క్రిప్ట్ లేకుండా సైట్‌ను రెండర్ చేస్తాము.
అనియంత్రిత రక్తస్రావం మరణానికి ప్రధాన కారణాలలో ఒకటి. యుద్ధం, రహదారి ప్రమాదాలు మరియు మరణాల తగ్గింపు ఆపరేషన్ల సమయంలో ప్రథమ చికిత్సగా, వేగవంతమైన రక్తస్రావ నివారణను సాధించడం వ్యక్తి ప్రాణాలను కాపాడుతుంది. ఒక సాధారణ రక్తస్రావ నివారణ పొరను ఏర్పరిచే మిశ్రమం (HFFC) నుండి నిరంతర దశగా ఉద్భవించిన నానోరంధ్రాల ఫైబర్-బలవర్ధక మిశ్రమ స్కాఫోల్డ్ (NFRCS), రక్తస్రావ నివారణను ప్రేరేపించి, మెరుగుపరుస్తుంది. NFRCS అభివృద్ధి తుమ్మెద రెక్క రూపకల్పనపై ఆధారపడి ఉంటుంది. తుమ్మెద రెక్క నిర్మాణం అడ్డ మరియు నిలువు రెక్కలను కలిగి ఉంటుంది, మరియు సూక్ష్మ నిర్మాణ సమగ్రతను కాపాడుకోవడానికి రెక్క పొరలు ఒకదానికొకటి అనుసంధానించబడి ఉంటాయి. HFFC, ఫైబర్ ఉపరితలాన్ని నానోమీటర్ మందం గల పొరతో ఏకరీతిగా పూస్తుంది మరియు యాదృచ్ఛికంగా పంపిణీ చేయబడిన దూది మందం (Ct) (విక్షేప దశ)ను అనుసంధానించి నానోరంధ్రాల నిర్మాణాన్ని ఏర్పరుస్తుంది. నిరంతర మరియు విక్షేప దశల కలయిక, వాణిజ్యపరంగా లభించే ఉత్పత్తులతో పోలిస్తే ఉత్పత్తి ధరను పది రెట్లు తగ్గిస్తుంది. సవరించిన NFRCS (ట్యాంపన్‌లు లేదా రిస్ట్‌బ్యాండ్‌లు) వివిధ రకాల బయోమెడికల్ అనువర్తనాలలో ఉపయోగించవచ్చు. ఇన్ వివో అధ్యయనాలు అభివృద్ధి చేయబడిన Cp NFRCS, ప్రయోగించిన ప్రదేశంలో గడ్డకట్టే ప్రక్రియను ప్రేరేపిస్తుందని మరియు మెరుగుపరుస్తుందని నిర్ధారించాయి. NFRCS దాని నానోపోరస్ నిర్మాణం కారణంగా సూక్ష్మ వాతావరణాన్ని నియంత్రించగలదు మరియు కణ స్థాయిలో పనిచేయగలదు, ఫలితంగా ఎక్సిషన్ గాయం నమూనాలో గాయం మెరుగ్గా నయమవుతుంది.
యుద్ధం, శస్త్రచికిత్స సమయంలో మరియు అత్యవసర పరిస్థితులలో అనియంత్రిత రక్తస్రావం గాయపడిన వారి ప్రాణాలకు తీవ్రమైన ముప్పును కలిగిస్తుంది¹. ఈ పరిస్థితులు పరిధీయ రక్తనాళ నిరోధకతను మరింత పెంచి, రక్తస్రావ షాక్‌కు దారితీస్తాయి. శస్త్రచికిత్స సమయంలో మరియు తర్వాత రక్తస్రావాన్ని నియంత్రించడానికి తీసుకునే సరైన చర్యలు ప్రాణాంతకం కాగలవని భావిస్తారు²,³. పెద్ద రక్తనాళాలు దెబ్బతినడం వల్ల అధిక రక్త నష్టం జరుగుతుంది, దీని ఫలితంగా యుద్ధంలో మరణాల రేటు ≤ 50% మరియు శస్త్రచికిత్స సమయంలో 31% ఉంటుంది¹. అధిక రక్త నష్టం శరీర పరిమాణం తగ్గడానికి దారితీస్తుంది, దీనివల్ల గుండె నుండి వెలువడే రక్త పరిమాణం తగ్గుతుంది. మొత్తం పరిధీయ రక్తనాళ నిరోధకత పెరగడం మరియు సూక్ష్మ రక్తప్రసరణ క్రమంగా క్షీణించడం వల్ల ప్రాణాన్ని నిలబెట్టే అవయవాలలో ఆక్సిజన్ కొరత (హైపోక్సియా) ఏర్పడుతుంది. సమర్థవంతమైన జోక్యం లేకుండా ఈ పరిస్థితి కొనసాగితే రక్తస్రావ షాక్ సంభవించవచ్చు¹,⁴,⁵. ఇతర సమస్యలలో శరీర ఉష్ణోగ్రత తగ్గడం (హైపోథెర్మియా) మరియు జీవక్రియ సంబంధిత ఆమ్లత (మెటబాలిక్ అసిడోసిస్) తీవ్రమవడం, అలాగే రక్తం గడ్డకట్టే ప్రక్రియకు ఆటంకం కలిగించే గడ్డకట్టే రుగ్మత (కోయాగ్యులేషన్ డిజార్డర్) కూడా ఉన్నాయి. తీవ్రమైన రక్తస్రావ షాక్‌తో మరణించే ప్రమాదం ఎక్కువగా ఉంటుంది⁶,⁷,⁸. గ్రేడ్ III (ప్రగతిశీల) షాక్‌లో, శస్త్రచికిత్స సమయంలో మరియు శస్త్రచికిత్స అనంతర అనారోగ్యం మరియు మరణం నుండి రోగి ప్రాణాలను కాపాడటానికి రక్త మార్పిడి అత్యవసరం. పైన పేర్కొన్న అన్ని ప్రాణాంతక పరిస్థితులను అధిగమించడానికి, మేము నీటిలో కరిగే హెమోస్టాటిక్ పాలిమర్‌ల కలయికను ఉపయోగించి, అతి తక్కువ పాలిమర్ గాఢత (0.5%)తో పనిచేసే ఒక నానోపోరస్ ఫైబర్-రీన్‌ఫోర్స్డ్ కాంపోజిట్ స్కాఫోల్డ్ (NFRCS)ను అభివృద్ధి చేశాము.
ఫైబర్ రీఇన్‌ఫోర్స్‌మెంట్ వాడకంతో, తక్కువ ఖర్చుతో కూడిన ఉత్పత్తులను అభివృద్ధి చేయవచ్చు. యాదృచ్ఛికంగా అమర్చబడిన ఫైబర్‌లు, రెక్కలపై ఉండే అడ్డ మరియు నిలువు చారల ద్వారా సమతుల్యం చేయబడిన తుమ్మెద రెక్క నిర్మాణాన్ని పోలి ఉంటాయి. రెక్క యొక్క అడ్డ మరియు నిలువు సిరలు రెక్క పొరతో అనుసంధానించబడి ఉంటాయి (పటం 1). NFRCS అనేది మెరుగైన భౌతిక మరియు యాంత్రిక బలంతో కూడిన ఒక స్కాఫోల్డ్ వ్యవస్థగా, రీఇన్‌ఫోర్స్‌డ్ Ctని కలిగి ఉంటుంది (పటం 1). అందుబాటు ధర మరియు సులభమైన పనితనం కారణంగా, శస్త్రవైద్యులు ఆపరేషన్లు మరియు డ్రెస్సింగ్‌ల సమయంలో కాటన్ థ్రెడ్ గేజ్‌లను (Ct) ఉపయోగించడానికి ఇష్టపడతారు. అందువల్ల, 90% కంటే ఎక్కువ స్ఫటికాకార సెల్యులోజ్ (హెమోస్టాటిక్ చర్యను మెరుగుపరచడంలో సహాయపడుతుంది)తో సహా దాని బహుళ ప్రయోజనాలను పరిగణనలోకి తీసుకుని, Ct ని NFRCS9,10 యొక్క అస్థిపంజర వ్యవస్థగా ఉపయోగించారు. అందువల్ల, 90% కంటే ఎక్కువ స్ఫటికాకార సెల్యులోజ్ (హెమోస్టాటిక్ చర్యను మెరుగుపరచడంలో సహాయపడుతుంది)తో సహా దాని బహుళ ప్రయోజనాలను పరిగణనలోకి తీసుకుని, Ct ని NFRCS9,10 యొక్క అస్థిపంజర వ్యవస్థగా ఉపయోగించారు. స్లెడోవాటెల్నో, ఊపిరితిత్తుల గురించి ఆలోచించడం, ఈ ప్రక్రియలో > 90% క్రిస్టాలిచెస్కోయ్ (చర్చలు పోవిషెనియి గేమోస్టాటిచెస్కోయ్ యాక్టివ్నోస్టి), Ct. అందువల్ల, 90% కంటే ఎక్కువ స్ఫటికాకార సెల్యులోజ్ (పెరిగిన హెమోస్టాటిక్ చర్యలో పాల్గొంటుంది)తో సహా దాని అనేక ప్రయోజనాల దృష్ట్యా, Ct ని NFRCS అస్థిపంజర వ్యవస్థగా ఉపయోగించారు9,10.因此，考虑到它的多重益处，包括> 90% 的结晶纤维素被用作NFRCS9,10 的骨架系统。因此，考虑到它的多重益处，包括> 90%అందువల్ల, 90% కంటే ఎక్కువ స్ఫటికాకార సెల్యులోజ్ (హెమోస్టాటిక్ చర్యను మెరుగుపరచడంలో సహాయపడుతుంది)తో సహా దాని అనేక ప్రయోజనాల దృష్ట్యా, NFRCS9,10 కోసం Ct ని ఒక స్కాఫోల్డ్‌గా ఉపయోగించారు.Ct ఉపరితలంపై పూత పూయబడింది (నానో-మందపాటి పొర ఏర్పడటం గమనించబడింది) మరియు రక్తస్రావాన్ని ఆపే పొరను ఏర్పరిచే మిశ్రమం (HFFC)తో అనుసంధానించబడింది. HFFC ఒక మాట్రిజెల్ లాగా పనిచేస్తూ, యాదృచ్ఛికంగా ఉంచిన Ct ని కలిపి ఉంచుతుంది. అభివృద్ధి చేయబడిన ఈ రూపకల్పన, విక్షేపిత దశలో (బలపరిచే ఫైబర్‌లు) ఒత్తిడిని ప్రసారం చేస్తుంది. కనిష్ట పాలిమర్ సాంద్రతలను ఉపయోగించి మంచి యాంత్రిక బలం గల నానోరంధ్రాల నిర్మాణాలను పొందడం కష్టం. అదనంగా, వివిధ బయోమెడికల్ అనువర్తనాల కోసం వేర్వేరు అచ్చులను అనుకూలీకరించడం అంత సులభం కాదు.
ఈ పటం తుమ్మెద రెక్కల నిర్మాణం ఆధారంగా రూపొందించిన NFRCS డిజైన్ యొక్క రేఖాచిత్రాన్ని (A) చూపుతుంది. ఈ చిత్రం తుమ్మెద రెక్కల నిర్మాణం యొక్క తులనాత్మక సారూప్యతను (రెక్క యొక్క ఖండన మరియు నిలువు సిరలు ఒకదానికొకటి అనుసంధానించబడి ఉంటాయి) మరియు Cp NFRCS యొక్క క్రాస్-సెక్షనల్ ఫోటోమైక్రోగ్రాఫ్‌ను (B) చూపుతుంది. NFRCS యొక్క రేఖాచిత్ర ప్రాతినిధ్యం.
పైన పేర్కొన్న పరిమితులను పరిష్కరించడానికి HFFC ని నిరంతర దశగా ఉపయోగించి NFRC లను అభివృద్ధి చేశారు. HFFC అనేది వివిధ ఫిల్మ్-ఫార్మింగ్ హెమోస్టాటిక్ పాలిమర్లతో కూడి ఉంటుంది, వీటిలో కైటోసాన్ (ప్రధాన హెమోస్టాటిక్ పాలిమర్‌గా) మరియు మిథైల్‌సెల్యులోజ్ (MC), హైడ్రాక్సీప్రొపైల్ మిథైల్‌సెల్యులోజ్ (HPMC 50 cp) మరియు పాలీవినైల్ ఆల్కహాల్ (PVA) (125 kDa) లను థ్రాంబస్ ఏర్పడటాన్ని ప్రోత్సహించే సపోర్ట్ పాలిమర్‌గా కలిగి ఉంటుంది. పాలీవినైల్‌పైరోలిడిన్ K30 (PVP K30) ను కలపడం వలన NFRC ల తేమ శోషణ సామర్థ్యం మెరుగుపడింది. బంధిత పాలిమర్ మిశ్రమాలలో పాలిమర్ క్రాస్‌లింకింగ్‌ను మెరుగుపరచడానికి పాలీఇథిలీన్ గ్లైకాల్ 400 (PEG 400) ను జోడించారు. మూడు విభిన్న HFFC హెమోస్టాటిక్ కూర్పులు (Cm HFFC, Ch HFFC మరియు Cp HFFC), అవి కైటోసాన్‌తో MC (Cm), కైటోసాన్‌తో HPMC (Ch), మరియు కైటోసాన్‌తో PVA (Cp), Ct కి వర్తింపజేయబడ్డాయి. వివిధ ఇన్ విట్రో మరియు ఇన్ వివో లక్షణ నిర్ధారణ అధ్యయనాలు NFRCS యొక్క రక్తస్రావ నివారణ మరియు గాయం మాన్పే చర్యను ధృవీకరించాయి. నిర్దిష్ట అవసరాలను తీర్చడానికి, NFRCS అందించే మిశ్రమ పదార్థాలను ఉపయోగించి వివిధ రకాల స్కాఫోల్డింగ్‌లను అనుకూలీకరించవచ్చు.
దీనికి అదనంగా, కాళ్ళ మరియు శరీరంలోని ఇతర భాగాల గాయపడిన ప్రాంతం మొత్తాన్ని కప్పడానికి NFRCSను బ్యాండేజ్ లేదా రోల్‌గా మార్చవచ్చు. ప్రత్యేకంగా యుద్ధంలో అవయవాలకు అయ్యే గాయాల కోసం, రూపొందించిన NFRCS డిజైన్‌ను సగం చేయికి లేదా పూర్తి కాలికి సరిపోయేలా మార్చవచ్చు (అనుబంధ చిత్రం S11). NFRCSను టిష్యూ గ్లూతో రిస్ట్‌బ్యాండ్‌గా తయారు చేయవచ్చు, దీనిని తీవ్రమైన మణికట్టు గాయాల నుండి రక్తస్రావాన్ని ఆపడానికి ఉపయోగించవచ్చు. సాధ్యమైనంత తక్కువ పాలిమర్‌తో, పెద్ద సంఖ్యలో ప్రజలకు (పేదరిక రేఖకు దిగువన ఉన్నవారికి) అందించగల మరియు ప్రథమ చికిత్స కిట్‌లో ఉంచగల NFRCSను అభివృద్ధి చేయడమే మా ప్రధాన లక్ష్యం. సరళమైన, సమర్థవంతమైన మరియు పొదుపైన డిజైన్‌తో, NFRCS స్థానిక సమాజాలకు ప్రయోజనం చేకూరుస్తుంది మరియు ప్రపంచవ్యాప్త ప్రభావాన్ని చూపగలదు.
కైటోసాన్ (అణుభారం 80 kDa) మరియు అమరాంత్‌లను మెర్క్, ఇండియా నుండి కొనుగోలు చేశారు. హైడ్రాక్సీప్రొపైల్ మిథైల్ సెల్యులోజ్ 50 Cp, పాలిఇథిలీన్ గ్లైకాల్ 400 మరియు మిథైల్ సెల్యులోజ్‌లను లోబా కెమీ ప్రైవేట్ LLC, ముంబై నుండి కొనుగోలు చేశారు. పాలివినైల్ ఆల్కహాల్ (అణుభారం 125 kDa) (87-90% హైడ్రోలైజ్డ్)ను నేషనల్ కెమికల్స్, గుజరాత్ నుండి కొనుగోలు చేశారు. పాలివినైల్‌పైరోలిడిన్ K30ను మోలీకెమ్, ముంబై నుండి కొనుగోలు చేశారు, స్టెరైల్ స్వాబ్స్‌ను రామరాజు సర్జరీ కాటన్ మిల్స్ లిమిటెడ్, తమిళనాడు నుండి కొనుగోలు చేశారు, క్యారియర్‌గా మిల్లీ క్యూ వాటర్ (డైరెక్ట్-Q3 వాటర్ ప్యూరిఫికేషన్ సిస్టమ్, మెర్క్, ఇండియా)ను ఉపయోగించారు.
NFRCS ను లైయోఫిలైజేషన్ పద్ధతి¹¹,¹² ఉపయోగించి అభివృద్ధి చేశారు. అన్ని HFFC కూర్పులను (పట్టిక 1) మెకానికల్ స్టిరర్ ఉపయోగించి తయారు చేశారు. మెకానికల్ స్టిరర్‌పై 800 rpm వద్ద నిరంతరం కలుపుతూ, నీటిలో 1% ఎసిటిక్ ఆమ్లాన్ని ఉపయోగించి 0.5% కైటోసాన్ ద్రావణాన్ని తయారు చేయండి. పట్టిక 1లో సూచించిన లోడ్ చేయబడిన పాలిమర్ యొక్క కచ్చితమైన బరువును కైటోసాన్ ద్రావణానికి కలిపి, స్పష్టమైన పాలిమర్ ద్రావణం వచ్చేవరకు కలిపారు. ఫలితంగా వచ్చిన మిశ్రమానికి పట్టిక 1లో సూచించిన పరిమాణాలలో PVP K30 మరియు PEG 400 లను కలిపి, స్పష్టమైన చిక్కని పాలిమర్ ద్రావణం వచ్చేవరకు కలపడం కొనసాగించారు. పాలిమర్ మిశ్రమం నుండి చిక్కుకున్న గాలి బుడగలను తొలగించడానికి, ఫలితంగా వచ్చిన పాలిమర్ ద్రావణపు బాత్‌ను 60 నిమిషాల పాటు సోనికేట్ చేశారు. అనుబంధ చిత్రం S1(b)లో చూపిన విధంగా, 5 ml HFFCతో అనుబంధంగా ఉన్న 6-వెల్ ప్లేట్ (మోల్డ్) యొక్క ప్రతి వెల్‌లో Ct సమానంగా పంపిణీ చేయబడింది.
Ct నెట్‌వర్క్‌లో HFFC ఏకరీతిగా తడిసి, పంపిణీ అయ్యేలా చేయడానికి ఆరు-బావుల ప్లేట్‌ను 60 నిమిషాల పాటు సోనికేట్ చేశారు. ఆ తర్వాత ఆరు-బావుల ప్లేట్‌ను -20°C వద్ద 8-12 గంటల పాటు ఫ్రీజ్ చేశారు. NFRCS యొక్క వివిధ ఫార్ములేషన్‌లను పొందడానికి ఫ్రీజ్ ప్లేట్‌లను 48 గంటల పాటు లైయోఫిలైజ్ చేశారు. టాంపన్‌లు లేదా స్థూపాకార టాంపన్‌లు, లేదా వివిధ అనువర్తనాల కోసం మరేదైనా ఆకారం వంటి విభిన్న ఆకారాలు మరియు నిర్మాణాలను ఉత్పత్తి చేయడానికి ఇదే విధానాన్ని ఉపయోగిస్తారు.
ఖచ్చితంగా తూచిన కైటోసాన్ (80 kDa) (3%)ను మాగ్నెటిక్ స్టిరర్ ఉపయోగించి 1% ఎసిటిక్ ఆమ్లంలో కరిగించాలి. ఫలితంగా వచ్చిన కైటోసాన్ ద్రావణానికి 1% PEG 400 కలిపి 30 నిమిషాల పాటు కలపాలి. ఫలితంగా వచ్చిన ద్రావణాన్ని ఒక చతురస్రాకార లేదా దీర్ఘచతురస్రాకార పాత్రలో పోసి, -80°C వద్ద 12 గంటల పాటు ఫ్రీజ్ చేయాలి. ఘనీభవించిన నమూనాలను పోరస్ Cs13ను పొందడానికి 48 గంటల పాటు లైయోఫిలైజ్ చేయాలి.
ఇతర పాలిమర్‌లతో కైటోసాన్ యొక్క రసాయన అనుకూలతను నిర్ధారించడానికి, అభివృద్ధి చేయబడిన NFRCSను ఫోరియర్ ట్రాన్స్‌ఫార్మ్ ఇన్‌ఫ్రారెడ్ స్పెక్ట్రోస్కోపీ (FTIR) (షిమాడ్జు 8400 s FTIR, టోక్యో, జపాన్) ఉపయోగించి ప్రయోగాలకు గురిచేశారు¹⁴,¹⁵. పరీక్షించిన అన్ని నమూనాల FTIR స్పెక్ట్రాలను (స్పెక్ట్రల్ పరిధి యొక్క వెడల్పు 400 నుండి 4000 cm⁻¹ వరకు) 32 స్కాన్‌లను నిర్వహించడం ద్వారా పొందారు.
అన్ని ఫార్ములేషన్‌ల కోసం రక్త శోషణ రేటు (BAR)ను చెన్ మరియు ఇతరులు 16 వివరించిన పద్ధతిని స్వల్ప మార్పులతో ఉపయోగించి మూల్యాంకనం చేశారు. అన్ని కూర్పుల యొక్క అభివృద్ధి చేయబడిన NFRKలను అవశేష ద్రావణిని తొలగించడానికి 105°C వద్ద వాక్యూమ్ ఓవెన్‌లో రాత్రిపూట ఆరబెట్టారు. 3.8% సోడియం సిట్రేట్ యొక్క ప్రీమిక్స్ ఉన్న వేర్వేరు డిష్‌లలో 30 mg NFRCS (ప్రారంభ నమూనా బరువు – W0) మరియు 30 mg Ct (పాజిటివ్ కంట్రోల్) ఉంచబడ్డాయి. ముందుగా నిర్ణయించిన సమయ వ్యవధులలో, అంటే 5, 10, 20, 30, 40 మరియు 60 సెకన్ల వద్ద, NFRCSలను తీసివేసి, నమూనాలను 30 సెకన్ల పాటు Ct పై ఉంచడం ద్వారా వాటి ఉపరితలాల నుండి శోషించబడని రక్తాన్ని శుభ్రం చేశారు. ప్రతి సమయ బిందువు వద్ద NFRCS 16 ద్వారా శోషించబడిన రక్తం యొక్క తుది బరువు (W1)గా పరిగణించబడింది. కింది సూత్రాన్ని ఉపయోగించి BAR శాతాన్ని లెక్కించండి:
వాంగ్ మరియు ఇతరులు 17 నివేదించిన ప్రకారం రక్త గడ్డకట్టే సమయం (BCT) నిర్ణయించబడింది. NFRCS సమక్షంలో సంపూర్ణ రక్తం (3.8% సోడియం సిట్రేట్‌తో ముందుగా కలిపిన ఎలుక రక్తం) గడ్డకట్టడానికి పట్టే సమయాన్ని పరీక్ష నమూనా యొక్క BCTగా లెక్కించారు. వివిధ NFRCS భాగాలను (30 mg) 10 ml స్క్రూ క్యాప్ సీసాలలో ఉంచి 37°C వద్ద ఇంక్యుబేట్ చేశారు. సీసాకు రక్తం (0.5 ml) మరియు రక్త గడ్డకట్టడాన్ని ఉత్తేజపరిచేందుకు 0.3 ml 0.2 M CaCl2 ను కలిపారు. చివరగా, గట్టి గడ్డ ఏర్పడే వరకు ప్రతి 15 సెకన్లకు సీసాను తలక్రిందులుగా తిప్పారు (180° వరకు). సీసాలను తిప్పిన సంఖ్య ద్వారా నమూనా యొక్క BCTని అంచనా వేస్తారు17,18. BCT ఆధారంగా, తదుపరి లక్షణాల అధ్యయనాల కోసం NFRCS Cm, Ch మరియు Cp నుండి రెండు ఉత్తమ కూర్పులను ఎంపిక చేశారు.
లి మరియు ఇతరులు 19 వివరించిన పద్ధతిని అమలు చేయడం ద్వారా Ch NFRCS మరియు Cp NFRCS కూర్పుల యొక్క BCT నిర్ణయించబడింది. 15 x 15 mm2 Ch NFRCS, Cp NFRCS, మరియు Cs (పాజిటివ్ కంట్రోల్) లను వేర్వేరు పెట్రీ డిష్‌లలో (37 °C) ఉంచండి. రక్తం గడ్డకట్టే ప్రక్రియను ప్రారంభించడానికి 3.8% సోడియం సిట్రేట్ కలిగిన రక్తాన్ని 0.2 M CaCl2 తో 10:1 ఘనపరిమాణ నిష్పత్తిలో కలిపారు. 20 µl 0.2 M CaCl2 ఎలుక రక్త మిశ్రమాన్ని నమూనా ఉపరితలంపై పూసి, ఖాళీ పెట్రీ డిష్‌లో ఉంచారు. కంట్రోల్ అనేది Ct లేకుండా ఖాళీ పెట్రీ డిష్‌లలో పోసిన రక్తం. 0, 3, మరియు 5 నిమిషాల స్థిర విరామాలలో, గడ్డకు భంగం కలిగించకుండా, నమూనా ఉన్న డిష్‌కు 10 ml డీయోనైజ్డ్ (DI) నీటిని జోడించడం ద్వారా గడ్డకట్టడాన్ని ఆపండి. గడ్డకట్టని ఎరిత్రోసైట్లు (ఎరిత్రోసైట్లు) డీయోనైజ్డ్ నీటి సమక్షంలో హిమోలైసిస్‌కు గురై హిమోగ్లోబిన్‌ను విడుదల చేస్తాయి. UV-Vis స్పెక్ట్రోఫోటోమీటర్‌ను ఉపయోగించి, వివిధ సమయాల్లోని హిమోగ్లోబిన్‌ను (HA(t)) 540 nm (λmax హిమోగ్లోబిన్) వద్ద కొలిచారు. 10 ml డీయోనైజ్డ్ నీటిలో ఉన్న 20 µl రక్తం యొక్క 0 నిమిషాలలోని హిమోగ్లోబిన్ సంపూర్ణ శోషణను (AH(0)) ఒక రిఫరెన్స్ స్టాండర్డ్‌గా తీసుకున్నారు. అదే బ్యాచ్ రక్తాన్ని ఉపయోగించి, HA(t)/HA(0) నిష్పత్తి నుండి గడ్డకట్టిన రక్తం యొక్క సాపేక్ష హిమోగ్లోబిన్ గ్రహణాన్ని (RHA) లెక్కించారు.
టెక్స్చర్ ఎనలైజర్ (టెక్స్చర్ ప్రో CT V1.3 బిల్డ్ 15, బ్రూక్‌ఫీల్డ్, USA) ఉపయోగించి, దెబ్బతిన్న కణజాలానికి NFRK యొక్క అంటుకునే లక్షణాలను నిర్ధారించారు. అడుగుభాగం తెరిచి ఉన్న ఒక స్థూపాకార పాత్రను పంది చర్మం లోపలి భాగానికి (కొవ్వు పొర లేకుండా) నొక్కి పెట్టండి. పంది చర్మానికి అంటుకునేలా చేయడానికి, నమూనాలను (Ch NFRCS మరియు Cp NFRCS) కాన్యులా ద్వారా స్థూపాకార అచ్చులలోకి ప్రవేశపెట్టారు. గది ఉష్ణోగ్రత (RT) (25° C.) వద్ద 3 నిమిషాల పాటు ఉంచిన తర్వాత, NFRCS అంటుకునే బలాన్ని 0.5 mm/sec స్థిర వేగంతో నమోదు చేశారు.
సర్జికల్ సీలెంట్ల యొక్క ప్రధాన లక్షణం రక్త నష్టాన్ని తగ్గిస్తూ రక్తం గడ్డకట్టడాన్ని పెంచడం. NFRCSలో నష్టరహిత గడ్డకట్టడాన్ని, గతంలో ప్రచురించిన పద్ధతిని స్వల్ప మార్పులతో ఉపయోగించి మూల్యాంకనం చేశారు 19. ఒక మైక్రోసెంట్రిఫ్యూజ్ ట్యూబ్ (2 మి.లీ) (లోపలి వ్యాసం 10 మి.మీ) తయారుచేసి, దాని ఒక వైపున 8 × 5 మి.మీ2 రంధ్రం చేయండి (ఇది ఒక తెరిచిన గాయాన్ని సూచిస్తుంది). ఈ రంధ్రాన్ని మూసివేయడానికి NFRCSను, మరియు బయటి అంచులను సీల్ చేయడానికి టేప్‌ను వాడండి. 3.8% సోడియం సిట్రేట్ ప్రీమిక్స్ ఉన్న మైక్రోసెంట్రిఫ్యూజ్ ట్యూబ్‌కు 20 µl 0.2 M CaCl2ను కలపండి. 10 నిమిషాల తర్వాత, మైక్రోసెంట్రిఫ్యూజ్ ట్యూబ్‌లను డిష్‌ల నుండి తీసివేసి, NFRK నుండి రక్తం బయటకు ప్రవహించడం వల్ల డిష్‌ల ద్రవ్యరాశిలో పెరుగుదలను నిర్ధారించారు (n = 3). Ch NFRCS మరియు Cp NFRCSలలోని రక్త నష్టాన్ని Csతో పోల్చారు.
మిశ్రా మరియు చౌదరి21 వివరించిన పద్ధతి ఆధారంగా, స్వల్ప మార్పులతో NFRCS యొక్క తడి సమగ్రతను నిర్ధారించారు. NFRCSను 50 ml నీటితో 100 ml ఎర్లెన్‌మేయర్ ఫ్లాస్క్‌లో ఉంచి, పైభాగం ఏర్పడకుండా 60 సెకన్ల పాటు తిప్పండి. సేకరణ ఆధారంగా భౌతిక సమగ్రత కోసం నమూనాల దృశ్య తనిఖీ మరియు ప్రాధాన్యత నిర్ధారణ.
గతంలో ప్రచురించిన పద్ధతులకు స్వల్ప మార్పులు చేసి, Ct కు HFFC యొక్క బంధన బలాన్ని అధ్యయనం చేశారు. మిల్లీక్యూ నీరు (Ct) సమక్షంలో NFRK ను ధ్వని తరంగాలకు (బాహ్య ఉద్దీపన) గురిచేయడం ద్వారా ఉపరితల పూత సమగ్రతను అంచనా వేశారు. అభివృద్ధి చేసిన NFRCS Ch NFRCS మరియు Cp NFRCS లను నీటితో నింపిన ఒక బీకర్‌లో ఉంచి, వరుసగా 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, మరియు 30 నిమిషాల పాటు సోనికేట్ చేశారు. ఆరబెట్టిన తర్వాత, NFRCS యొక్క ప్రారంభ మరియు తుది బరువుల మధ్య ఉన్న శాత వ్యత్యాసాన్ని ఉపయోగించి పదార్థ నష్ట శాతాన్ని (HFFC) లెక్కించారు. ఇన్ విట్రో BCT ఉపరితల పదార్థాల బంధన బలాన్ని లేదా నష్టాన్ని మరింతగా బలపరిచింది. Ct కు HFFC బంధన సామర్థ్యం రక్త గడ్డకట్టడాన్ని మరియు Ct22 ఉపరితలంపై ఒక స్థితిస్థాపక పూతను అందిస్తుంది.
NFRCS యొక్క యాదృచ్ఛికంగా ఎంపిక చేయబడిన సాధారణ ప్రదేశాల నుండి తీసుకున్న నమూనాల (30 mg) BCT ద్వారా అభివృద్ధి చేయబడిన NFRCS యొక్క సజాతీయతను నిర్ధారించారు. NFRCS అనుగుణ్యతను నిర్ధారించడానికి ముందుగా పేర్కొన్న BCT విధానాన్ని అనుసరించండి. ఐదు నమూనాల మధ్య సామీప్యత Ct మెష్‌లో ఏకరీతి ఉపరితల కవరేజీని మరియు HFFC నిక్షేపణను నిర్ధారిస్తుంది.
నామమాత్రపు రక్త సంపర్క ప్రాంతం (NBCA) గతంలో నివేదించిన విధంగా కొన్ని మార్పులతో నిర్ణయించబడింది. Ct, Ch NFRCS, Cp NFRCS మరియు Cs యొక్క రెండు ఉపరితలాల మధ్య 20 µl రక్తాన్ని క్లాంప్ చేయడం ద్వారా రక్తాన్ని గడ్డకట్టించారు. 1 గంట తర్వాత, స్టెంట్ యొక్క రెండు భాగాలను వేరు చేసి, గడ్డ యొక్క వైశాల్యాన్ని చేతితో కొలిచారు. మూడు పునరావృతాల సగటు విలువను NBCA NFRCS19గా పరిగణించారు.
బాహ్య వాతావరణం నుండి లేదా గడ్డకట్టడాన్ని ప్రారంభించే గాయపడిన ప్రదేశం నుండి నీటిని శోషించుకోవడంలో NFRCS యొక్క ప్రభావాన్ని అంచనా వేయడానికి డైనమిక్ వేపర్ సార్ప్షన్ (DVS) విశ్లేషణను ఉపయోగించారు. DVS, ±0.1 µg ద్రవ్యరాశి రిజల్యూషన్‌తో కూడిన అత్యంత సున్నితమైన బ్యాలెన్స్‌ను ఉపయోగించి, ఒక నమూనాలోని ఆవిరి గ్రహణాన్ని మరియు నష్టాన్ని గురుత్వాకర్షణ పద్ధతిలో అంచనా వేస్తుంది లేదా నమోదు చేస్తుంది. సంతృప్త మరియు పొడి క్యారియర్ వాయువులను కలపడం ద్వారా, ఒక ఎలక్ట్రానిక్ మాస్ ఫ్లో కంట్రోలర్ ద్వారా నమూనా చుట్టూ పాక్షిక ఆవిరి పీడనం (సాపేక్ష ఆర్ద్రత) ఉత్పత్తి చేయబడుతుంది. యూరోపియన్ ఫార్మకోపియా మార్గదర్శకాల ప్రకారం, నమూనాలు తేమను గ్రహించే శాతం ఆధారంగా, నమూనాలను 4 వర్గాలుగా వర్గీకరించారు (0–0.012% w/w− తేమను పీల్చుకోనివి, 0.2–2% w/w కొద్దిగా తేమను పీల్చుకునేవి, 2–15% మధ్యస్తంగా తేమను పీల్చుకునేవి, మరియు > 15% చాలా తేమను పీల్చుకునేవి)23. యూరోపియన్ ఫార్మకోపియా మార్గదర్శకాల ప్రకారం, నమూనాలు తేమను గ్రహించే శాతం ఆధారంగా, నమూనాలను 4 వర్గాలుగా వర్గీకరించారు (0–0.012% w/w− తేమను పీల్చుకోనివి, 0.2–2% w/w కొద్దిగా తేమను పీల్చుకునేవి, 2–15 % మధ్యస్తంగా తేమను పీల్చుకునేవి, మరియు > 15% చాలా తేమను పీల్చుకునేవి)23.యూరోపియన్ ఫార్మకోపియా సిఫార్సులకు అనుగుణంగా, నమూనాలు తేమను గ్రహించే శాతాన్ని బట్టి, నమూనాలను 4 వర్గాలుగా విభజించారు (0–0.012% w/w – తేమను పీల్చుకోనివి, 0.2–2% w/w కొద్దిగా తేమను పీల్చుకునేవి, 2–15 %).% ఉమెరెన్నో గిగ్రోస్కోపిచెన్ మరియు > 15% ఓచెన్ గిగ్రోస్కోపిచెన్)23. % మితంగా హైగ్రోస్కోపిక్ మరియు > 15% చాలా హైగ్రోస్కోపిక్)23.根据欧洲药典指南，根据样品吸收水分的百分比，样品分为4 类（0-0.012% w/w-20.2% w/w- w/w 轻微吸湿性、2-15 % 适度吸湿，> 15% 非常吸湿）23。根据 欧洲 药典 指南 , 根据 吸收 水分 的 百分比 样品 分为 分为 分为 20-10-2018吸湿 性 、 、 、 、 0.2-2% W/w 轻微 、 2-15% 适度 吸湿 ，> 15 %非常吸湿）23。యూరోపియన్ ఫార్మకోపియా సిఫార్సులకు అనుగుణంగా, నమూనా గ్రహించిన తేమ శాతాన్ని బట్టి నమూనాలను 4 తరగతులుగా విభజిస్తారు (బరువు ప్రకారం 0-0.012% – తేమను పీల్చుకోనివి, బరువు ప్రకారం 0.2-2% కొద్దిగా తేమను పీల్చుకునేవి, బరువు ప్రకారం 2-15%).% ఉమెరెన్నో గిగ్రోస్కోపిచెన్, > 15 % ఒచున్ గిగ్రోస్కోపిచెన్) 23. % మితంగా తేమను పీల్చుకునేవి, > 15% చాలా తేమను పీల్చుకునేవి) 23.NFCS X NFCS మరియు TsN NFCS ల యొక్క హైగ్రోస్కోపిక్ సామర్థ్యాన్ని DVS TA TGA Q5000 SA అనే ​​ఎనలైజర్‌పై నిర్ధారించారు. ఈ ప్రక్రియలో, రన్ టైమ్, సాపేక్ష ఆర్ద్రత (RH), మరియు 25°C24 వద్ద రియల్-టైమ్ నమూనా బరువును పొందారు. కింది సమీకరణాన్ని ఉపయోగించి ఖచ్చితమైన NFRCS ద్రవ్యరాశి విశ్లేషణ ద్వారా తేమ శాతాన్ని లెక్కిస్తారు:
MC అంటే NFRCS ఆర్ద్రత. m1 – NSAIDల పొడి బరువు. m2 అంటే ఒక నిర్దిష్ట RH వద్ద నిజ-సమయ NFRCS ద్రవ్యరాశి.
25 °C వద్ద 10 గంటల పాటు (< 7 × 10–3 టార్) నమూనాలను ఖాళీ చేసిన తర్వాత, ద్రవ నైట్రోజన్‌తో నైట్రోజన్ అధిశోషణ ప్రయోగం ద్వారా మొత్తం ఉపరితల వైశాల్యాన్ని అంచనా వేశారు. 25 °C వద్ద 10 గంటల పాటు (< 7 × 10–3 టార్) నమూనాలను ఖాళీ చేసిన తర్వాత, ద్రవ నైట్రోజన్‌తో నైట్రోజన్ అధిశోషణ ప్రయోగం ద్వారా మొత్తం ఉపరితల వైశాల్యాన్ని అంచనా వేశారు. అడ్సోర్బియాస్ అజోటా జిడ్కిమ్ యొక్క పోమోషియస్ ఎక్సపెరిమెంటా 25 °С వ. течение 10 ч (< 7 × 10–3 Торр). నమూనాలను 25°C వద్ద 10 గంటల పాటు (< 7 × 10–3 టార్) ఖాళీ చేసిన తర్వాత, ద్రవ నైట్రోజన్‌తో నైట్రోజన్ అధిశోషణ ప్రయోగం ద్వారా మొత్తం ఉపరితల వైశాల్యాన్ని అంచనా వేశారు.在25°C 清空样品10 小时（< 7 × 10-3 Torr）后，使用液氮的氮吸附实验伧计总表25°C అడ్సోర్బియాస్ అజోక్త జిమ్టోవ్ పోల్సోవానియం ఒపోరోజినేనియా ఒబ్రాసియోవ్ వి течение 10 часов при 25°C (< 7 × 10-3 торр). 25°C (< 7 x 10-3 టార్) వద్ద 10 గంటల పాటు నమూనాలను ఖాళీ చేసిన తర్వాత, ద్రవ నైట్రోజన్‌తో నైట్రోజన్ అధిశోషణ ప్రయోగాలను ఉపయోగించి మొత్తం ఉపరితల వైశాల్యాన్ని అంచనా వేశారు.ఆస్ట్రియాకు చెందిన NOVA 1000e వారి క్వాంటాక్రోమ్‌ను ఉపయోగించి, RS 232 సాఫ్ట్‌వేర్‌తో మొత్తం ఉపరితల వైశాల్యం, రంధ్రాల ఘనపరిమాణం మరియు NFRCS రంధ్రాల పరిమాణాన్ని నిర్ధారించారు.
సంపూర్ణ రక్తం నుండి 5% RBCలను (ద్రావణిగా సెలైన్‌ను ఉపయోగించి) సిద్ధం చేయండి. ఆ తర్వాత, HFFC (0.25 మి.లీ) యొక్క కొంత భాగాన్ని 96-వెల్ ప్లేట్‌కు మరియు 5% RBC ద్రవ్యరాశిని (0.1 మి.లీ) బదిలీ చేయండి. ఈ మిశ్రమాన్ని 37°C వద్ద 40 నిమిషాల పాటు ఇంక్యుబేట్ చేయండి. ఎర్ర రక్త కణాలు మరియు సీరం మిశ్రమాన్ని పాజిటివ్ కంట్రోల్‌గా, మరియు సెలైన్ మరియు ఎర్ర రక్త కణాల మిశ్రమాన్ని నెగటివ్ కంట్రోల్‌గా పరిగణించారు. స్టాజిట్జ్కీ స్కేల్ ప్రకారం హిమాగ్లూటినేషన్‌ను నిర్ధారించారు. ప్రతిపాదిత స్కేల్స్ ఈ క్రింది విధంగా ఉన్నాయి: + + + + దట్టమైన రేణువుల సమూహాలు; + + + వంపు అంచులతో నునుపైన అడుగు భాగపు ప్యాడ్‌లు; + + చిరిగిన అంచులతో నునుపైన అడుగు భాగపు ప్యాడ్‌లు; + నునుపైన ప్యాడ్‌ల అంచుల చుట్టూ సన్నని ఎర్రటి వలయాలు; – (నెగటివ్) దిగువ వెల్ మధ్యలో వివిక్త ఎర్రటి బటన్ 12.
అంతర్జాతీయ ప్రామాణిక సంస్థ (ISO) (ISO10993-4, 1999)26,27 పద్ధతి ప్రకారం NFRCS యొక్క రక్త అనుకూలతను అధ్యయనం చేశారు. సింగ్ మరియు ఇతరులు వివరించిన గ్రావిమెట్రిక్ పద్ధతిలో, NFRCS సమక్షంలో లేదా దాని ఉపరితలంపై థ్రాంబస్ ఏర్పడటాన్ని అంచనా వేయడానికి చిన్న మార్పులు చేశారు. 500 mg Cs, Ch NFRCS మరియు Cp NFRCS లను ఫాస్ఫేట్ బఫర్డ్ సెలైన్ (PBS) లో 37°C వద్ద 24 గంటల పాటు ఇంక్యుబేట్ చేశారు. 24 గంటల తర్వాత, PBS ను తొలగించి, 3.8% సోడియం సిట్రేట్ కలిగిన 2 ml రక్తంతో NFRCS కు చికిత్స చేశారు. ఇంక్యుబేట్ చేసిన నమూనాలకు, NFRCS ఉపరితలంపై 0.04 ml 0.1 M CaCl2 ను జోడించారు. 45 నిమిషాల తర్వాత, గడ్డకట్టడాన్ని ఆపడానికి 5 ml స్వేదన జలాన్ని జోడించారు. NFRK ఉపరితలంపై గడ్డకట్టిన రక్తానికి 36-38% ఫార్మాల్డిహైడ్ ద్రావణంతో చికిత్స చేశారు. ఫార్మాల్డిహైడ్‌తో స్థిరీకరించిన గడ్డలను ఆరబెట్టి, తూకం వేశారు. రక్తం మరియు నమూనా లేని గ్లాసు (నెగటివ్ కంట్రోల్) మరియు రక్తం ఉన్న గ్లాసు (పాజిటివ్ కంట్రోల్) బరువులను లెక్కించడం ద్వారా థ్రాంబోసిస్ శాతాన్ని అంచనా వేశారు.
ప్రాథమిక నిర్ధారణగా, HFFC ఉపరితల పూత, Ct అంతరసంబంధితం, మరియు Ct నెట్‌వర్క్‌కు రంధ్రాలను ఏర్పరిచే సామర్థ్యాన్ని అర్థం చేసుకోవడానికి నమూనాలను ఆప్టికల్ మైక్రోస్కోప్ కింద దృశ్యమానం చేశారు. NFRCS నుండి Ch మరియు Cp యొక్క పలుచని భాగాలను స్కాల్పెల్ బ్లేడ్‌తో కత్తిరించారు. ఫలితంగా వచ్చిన భాగాన్ని ఒక గాజు స్లైడ్‌పై ఉంచి, కవర్‌స్లిప్‌తో కప్పి, అంచులను జిగురుతో స్థిరపరిచారు. తయారుచేసిన స్లైడ్‌లను ఆప్టికల్ మైక్రోస్కోప్ కింద చూసి, వివిధ మాగ్నిఫికేషన్‌లలో ఫోటోలు తీశారు.
రైస్ మరియు ఇతరులు29 వివరించిన పద్ధతి ఆధారంగా ఫ్లోరోసెన్స్ మైక్రోస్కోపీని ఉపయోగించి Ct నెట్‌వర్క్‌లలో పాలిమర్ నిక్షేపణను దృశ్యమానం చేశారు. ఫార్ములేషన్ కోసం ఉపయోగించిన HFFC మిశ్రమాన్ని ఫ్లోరోసెంట్ డై (అమరాంత్)తో కలిపారు, మరియు ఇంతకు ముందు పేర్కొన్న పద్ధతి ప్రకారం NFRCS (Ch & Cp) లను తయారు చేశారు. ఫార్ములేషన్ కోసం ఉపయోగించిన HFFC మిశ్రమాన్ని ఫ్లోరోసెంట్ డై (అమరాంత్)తో కలిపారు, మరియు ఇంతకు ముందు పేర్కొన్న పద్ధతి ప్రకారం NFRCS (Ch & Cp) లను తయారు చేశారు.ఫార్ములేషన్ కోసం ఉపయోగించిన HFFC మిశ్రమాన్ని ఫ్లోరోసెంట్ డై (అమరాంత్)తో కలిపి, ముందుగా పేర్కొన్న పద్ధతి ప్రకారం NFRCS (Ch మరియు Cp) ను పొందారు.将用于配方的HFFC 组合物与荧光染料సిపి).将用于配方的HFFC 组合物与荧光染料సిపి).ఫార్ములేషన్‌లో ఉపయోగించిన HFFC మిశ్రమాన్ని ఫ్లోరోసెంట్ డై (అమరాంత్)తో కలిపి, ముందుగా చెప్పినట్లుగా NFRCS (Ch మరియు Cp)లను పొందారు.పొందిన నమూనాల నుండి NFRK యొక్క పలుచని ముక్కలను కత్తిరించి, గాజు స్లైడ్‌లపై ఉంచి, కవర్ స్లిప్‌లతో కప్పారు. తయారుచేసిన స్లైడ్‌లను గ్రీన్ ఫిల్టర్ (310-380 nm) ఉపయోగించి ఫ్లోరోసెంట్ మైక్రోస్కోప్ కింద పరిశీలించండి. Ct సంబంధాలను మరియు Ct నెట్‌వర్క్‌లో అదనపు పాలిమర్ నిక్షేపణను అర్థం చేసుకోవడానికి 4x మాగ్నిఫికేషన్ వద్ద చిత్రాలు తీయబడ్డాయి.
NFRCS Ch మరియు Cp యొక్క ఉపరితల టోపోగ్రఫీని, ట్యాపింగ్ మోడ్‌లో (42 N/m, 320 kHz, ROC 2-5 nm, బ్రూకర్, తైవాన్) అల్ట్రా-షార్ప్ TESP కాంటిలివర్‌తో కూడిన అటామిక్ ఫోర్స్ మైక్రోస్కోప్ (AFM) ఉపయోగించి నిర్ధారించారు. ఉపరితల గరుకుదనాన్ని సాఫ్ట్‌వేర్ (స్కానింగ్ ప్రోబ్ ఇమేజ్ ప్రాసెసర్) ఉపయోగించి రూట్ మీన్ స్క్వేర్ (RMS) ద్వారా నిర్ణయించారు. ఉపరితల ఏకరూపతను తనిఖీ చేయడానికి వివిధ NFRCS స్థానాలను 3D చిత్రాలపై రెండర్ చేశారు. ఒక నిర్దిష్ట ప్రాంతానికి సంబంధించిన స్కోర్ యొక్క ప్రామాణిక విచలనాన్ని ఉపరితల గరుకుదనంగా నిర్వచించారు. NFRCS31 యొక్క ఉపరితల గరుకుదనాన్ని పరిమాణీకరించడానికి RMS సమీకరణాన్ని ఉపయోగించారు.
Cm NFRCS కంటే మెరుగైన BCTని ప్రదర్శించిన Ch NFRCS మరియు Cp NFRCS యొక్క ఉపరితల స్వరూపాన్ని అర్థం చేసుకోవడానికి, FESEM, SU8000, HI-0876-0003, హిటాచీ, టోక్యోను ఉపయోగించి FESEM-ఆధారిత అధ్యయనాలు నిర్వహించబడ్డాయి. ఈ FESEM అధ్యయనం, జావో మరియు ఇతరులు 32 వివరించిన పద్ధతి ప్రకారం, స్వల్ప మార్పులతో నిర్వహించబడింది. 20 నుండి 30 mg Ch NFRCS మరియు Cp NFRCS నమూనాలను, ఎలుక రక్తంతో ముందుగా కలిపిన 20 µl 3.8% సోడియం సిట్రేట్‌తో ముందుగా మిశ్రమం చేశారు. గడ్డకట్టడాన్ని ప్రారంభించడానికి రక్తంతో శుద్ధి చేసిన నమూనాలకు 20 µl 0.2 M CaCl2 జోడించబడింది మరియు నమూనాలను గది ఉష్ణోగ్రత వద్ద 10 నిమిషాల పాటు ఇంక్యుబేట్ చేశారు. అదనంగా, సెలైన్‌తో కడగడం ద్వారా NFRCS ఉపరితలం నుండి అదనపు ఎరిత్రోసైట్‌లను తొలగించారు.
తరువాతి నమూనాలకు 0.1% గ్లుటరాల్డిహైడ్‌తో చికిత్స చేసి, తేమను తొలగించడానికి 37°C వద్ద వేడి గాలి ఓవెన్‌లో ఆరబెట్టారు. ఆరబెట్టిన నమూనాలకు కోటింగ్ వేసి విశ్లేషించారు 32. విశ్లేషణ సమయంలో పొందిన ఇతర చిత్రాలు: వ్యక్తిగత పత్తి పీచుల ఉపరితలంపై గడ్డ ఏర్పడటం, Ct మధ్య పాలిమర్ నిక్షేపణ, ఎరిత్రోసైట్ స్వరూపం (ఆకారం), గడ్డ సమగ్రత, మరియు NFRCS సమక్షంలో ఎరిత్రోసైట్ స్వరూపం. చికిత్స చేయని NFRCS ప్రాంతాలు మరియు రక్తంతో ఇంక్యుబేట్ చేయబడిన Ch మరియు Cp చికిత్స పొందిన NFRCS ప్రాంతాలను మూలక అయాన్ల (సోడియం, పొటాషియం, నైట్రోజన్, కాల్షియం, మెగ్నీషియం, జింక్, రాగి మరియు సెలీనియం) కోసం స్కాన్ చేశారు 33. గడ్డ ఏర్పడటం మరియు గడ్డ సజాతీయత సమయంలో మూలక అయాన్ల చేరడాన్ని అర్థం చేసుకోవడానికి చికిత్స పొందిన మరియు చికిత్స పొందని నమూనాల మధ్య మూలక అయాన్ల శాతాలను పోల్చండి.
Ct ఉపరితలంపై ఉన్న Cp HFFC ఉపరితల పూత యొక్క మందాన్ని FESEM ఉపయోగించి నిర్ణయించారు. Cp NFRCS యొక్క క్రాస్ సెక్షన్‌లను ఫ్రేమ్‌వర్క్ నుండి కత్తిరించి, స్పుటర్ కోటింగ్ చేశారు. ఫలితంగా వచ్చిన స్పుటర్ కోటింగ్ నమూనాలను FESEM ద్వారా పరిశీలించి, ఉపరితల పూత యొక్క మందాన్ని కొలిచారు 34, 35, 36.
ఎక్స్-రే మైక్రో-సిటి అధిక-రిజల్యూషన్ 3D నాన్-డిస్ట్రక్టివ్ ఇమేజింగ్‌ను అందిస్తుంది మరియు NFRK యొక్క అంతర్గత నిర్మాణ అమరికను అధ్యయనం చేయడానికి మిమ్మల్ని అనుమతిస్తుంది. మైక్రో-సిటి, నమూనా గుండా వెళుతున్న ఎక్స్-రే కిరణపుంజాన్ని ఉపయోగించి, నమూనాలోని ఎక్స్-రేల స్థానిక రేఖీయ క్షీణత గుణకాన్ని రికార్డ్ చేస్తుంది, ఇది స్వరూపాత్మక సమాచారాన్ని పొందడంలో సహాయపడుతుంది. NFRCS37,38,39 సమక్షంలో శోషణ సామర్థ్యం మరియు రక్తం గడ్డకట్టడాన్ని అర్థం చేసుకోవడానికి, Cp NFRCS మరియు రక్తంతో చికిత్స పొందిన Cp NFRCS లలో Ct యొక్క అంతర్గత స్థానాన్ని మైక్రో-సిటి ద్వారా పరిశీలించారు. రక్తంతో చికిత్స పొందిన మరియు చికిత్స పొందని Cp NFRCS నమూనాల 3D నిర్మాణాలను మైక్రో-సిటి (V|tome|x S240, ఫీనిక్స్, జర్మనీ) ఉపయోగించి పునర్నిర్మించారు. VG స్టూడియో-మాక్స్ సాఫ్ట్‌వేర్ వెర్షన్ 2.2ను ఉపయోగించి, NFRCS కోసం 3D చిత్రాలను అభివృద్ధి చేయడానికి వివిధ కోణాల నుండి (ఆదర్శంగా 360° కవరేజ్) అనేక ఎక్స్-రే చిత్రాలను తీశారు. సేకరించిన ప్రొజెక్షన్ డేటాను సంబంధిత సింపుల్ 3D స్కాన్‌ఐపి అకాడమిక్ సాఫ్ట్‌వేర్‌ను ఉపయోగించి 3D వాల్యూమెట్రిక్ చిత్రాలుగా పునర్నిర్మించారు.
అదనంగా, గడ్డ యొక్క విస్తరణను అర్థం చేసుకోవడానికి, రక్తం గడ్డకట్టడాన్ని ప్రారంభించడానికి 20 µl ముందుగా కలిపిన సిట్రేటెడ్ రక్తం మరియు 20 µl 0.2 M CaCl2 ను NFRCS కు జోడించారు. తయారుచేసిన నమూనాలను గట్టిపడటానికి వదిలివేశారు. NFRK ఉపరితలానికి 0.5% గ్లూటరాల్డిహైడ్‌తో చికిత్స చేసి, 30–40°C వద్ద వేడి గాలి ఓవెన్‌లో 30 నిమిషాల పాటు ఆరబెట్టారు. NFRCS పై ఏర్పడిన రక్తపు గడ్డను స్కాన్ చేసి, పునర్నిర్మించి, ఆ రక్తపు గడ్డ యొక్క 3D చిత్రాన్ని దృశ్యమానం చేశారు.
గతంలో వివరించిన పద్ధతిలో స్వల్ప మార్పులు చేసి, Cp NFRCS (Ch NFRCSతో పోలిస్తే ఉత్తమమైనది) పై యాంటీ బాక్టీరియల్ పరీక్షలు నిర్వహించబడ్డాయి. ఇంక్యుబేటర్‌లో పెట్రీ డిష్‌లలోని అగర్‌పై పెరుగుతున్న మూడు వేర్వేరు పరీక్షా సూక్ష్మజీవులను [S.aureus (గ్రామ్-పాజిటివ్ బాక్టీరియా), E.coli (గ్రామ్-నెగటివ్ బాక్టీరియా) మరియు తెల్ల కాండిడా (C.albicans)] ఉపయోగించి Cp NFRCS మరియు Cp HFFC యొక్క యాంటీ బాక్టీరియల్ చర్యను నిర్ధారించారు. 10⁵-10⁶ CFU ml⁻¹ గాఢత వద్ద పలుచన చేసిన బాక్టీరియల్ కల్చర్ సస్పెన్షన్ యొక్క 50 ml ను అగర్ మాధ్యమంపై ఏకరీతిగా ఇనాక్యులేట్ చేయండి. మాధ్యమాన్ని ఒక పెట్రీ డిష్‌లోకి పోసి గట్టిపడనివ్వండి. HFFC తో నింపడానికి అగర్ ప్లేట్ ఉపరితలంపై బావులు (వెల్స్) తయారు చేయబడ్డాయి (HFFC కోసం 3 బావులు మరియు నెగటివ్ కంట్రోల్ కోసం 1). 3 బావులకు 200 µl HFFC మరియు 4వ బావికి 200 µl pH 7.4 PBS కలపండి. పెట్రీ డిష్ యొక్క మరొక వైపున, గట్టిపడిన అగర్ మీద 12 మి.మీ. Cp NFRCS డిస్క్‌ను ఉంచి, PBS (pH 7.4) తో తడపండి. స్టెఫిలోకాకస్ ఆరియస్, ఎస్చెరిచియా కోలి మరియు కాండిడా ఆల్బికాన్స్ కోసం సిప్రోఫ్లోక్సాసిన్, ఆంపిసిలిన్ మరియు ఫ్లూకోనజోల్ మాత్రలను రిఫరెన్స్ స్టాండర్డ్స్‌గా పరిగణిస్తారు. నిరోధక మండలాన్ని చేతితో కొలిచి, దాని డిజిటల్ చిత్రాన్ని తీయండి.
సంస్థాగత నైతిక ఆమోదం పొందిన తరువాత, ఈ అధ్యయనం దక్షిణ భారతదేశంలోని కర్ణాటక రాష్ట్రం, మణిపాల్‌లోని కస్తూర్బా మెడికల్ కాలేజ్ ఆఫ్ ఎడ్యుకేషన్ అండ్ రీసెర్చ్‌లో నిర్వహించబడింది. ఇన్ విట్రో TEG ప్రయోగాత్మక ప్రోటోకాల్‌ను కస్తూర్బా మెడికల్ కాలేజ్, మణిపాల్, కర్ణాటక యొక్క సంస్థాగత నైతిక కమిటీ (IEC: 674/2020) సమీక్షించి ఆమోదించింది. ఆసుపత్రి బ్లడ్ బ్యాంక్ నుండి స్వచ్ఛంద రక్తదాతల (18 నుండి 55 సంవత్సరాల వయస్సు గలవారు) నుండి అధ్యయనంలో పాల్గొనేవారిని ఎంపిక చేశారు. అదనంగా, రక్త నమూనాల సేకరణ కోసం స్వచ్ఛంద సేవకుల నుండి సమాచార సమ్మతి పత్రాన్ని పొందారు. సోడియం సిట్రేట్‌తో ముందుగా కలిపిన సంపూర్ణ రక్తంపై Cp HFFC ఫార్ములేషన్ ప్రభావాన్ని అధ్యయనం చేయడానికి నేటివ్ TEG (N-TEG)ని ఉపయోగించారు. పాయింట్-ఆఫ్-కేర్ రిససిటేషన్‌లో దాని పాత్రకు N-TEG విస్తృతంగా గుర్తింపు పొందింది, ఇది ఫలితాలు రావడంలో (సాధారణ గడ్డకట్టే పరీక్షలు) వైద్యపరంగా ముఖ్యమైన ఆలస్యం అయ్యే అవకాశం ఉన్నందున వైద్యులకు సమస్యలను సృష్టిస్తుంది. సంపూర్ణ రక్తాన్ని ఉపయోగించి N-TEG విశ్లేషణ నిర్వహించబడింది. పాల్గొన్న వారందరి నుండి సమాచార సమ్మతి మరియు వివరణాత్మక వైద్య చరిత్రను పొందారు. ఈ అధ్యయనంలో గర్భం/ప్రసవానంతర సమస్యలు లేదా కాలేయ వ్యాధి వంటి హెమోస్టాటిక్ లేదా థ్రాంబోటిక్ సమస్యలు ఉన్నవారిని చేర్చలేదు. గడ్డకట్టే ప్రక్రియను ప్రభావితం చేసే మందులు తీసుకుంటున్న వారిని కూడా అధ్యయనం నుండి మినహాయించారు. ప్రామాణిక పద్ధతుల ప్రకారం పాల్గొన్న వారందరికీ ప్రాథమిక ప్రయోగశాల పరీక్షలు (హిమోగ్లోబిన్, ప్రోథ్రాంబిన్ సమయం, యాక్టివేటెడ్ థ్రాంబోప్లాస్టిన్ మరియు ప్లేట్‌లెట్ కౌంట్) నిర్వహించబడ్డాయి. N-TEG రక్తపు గడ్డ యొక్క విస్కోఎలాస్టిసిటీ, ప్రారంభ గడ్డ నిర్మాణం, కణాల పరస్పర చర్య, గడ్డ బలోపేతం మరియు గడ్డ విచ్ఛిన్నతను నిర్ధారిస్తుంది. N-TEG విశ్లేషణ అనేక కణ మూలకాలు మరియు ప్లాస్మా యొక్క సమిష్టి ప్రభావాలపై గ్రాఫికల్ మరియు సంఖ్యాపరమైన డేటాను అందిస్తుంది. N-TEG విశ్లేషణను Cp HFFC యొక్క రెండు వేర్వేరు పరిమాణాలపై (10 µl మరియు 50 µl) నిర్వహించారు. ఫలితంగా, 10 µl Cp HFFC కి సిట్రిక్ యాసిడ్‌తో కూడిన 1 ml పూర్తి రక్తాన్ని జోడించారు. 20 µl 0.2 M CaCl2 కలిగిన TEG డిష్‌కు 1 ml (Cp HFFC + సిట్రేటెడ్ రక్తం), 340 µl మిశ్రమ రక్తాన్ని కలపండి. ఆ తర్వాత, Cp HFFC41 సమక్షంలో రక్త నమూనాలలో 30% R, K, ఆల్ఫా కోణం, MA, G, CI, TPI, EPL, LY లను కొలవడానికి TEG డిష్‌లను TEG® 5000, US లోకి లోడ్ చేశారు.
ఇన్ వివో అధ్యయన ప్రోటోకాల్‌ను మణిపాల్ ఇన్‌స్టిట్యూట్ ఆఫ్ హయ్యర్ ఎడ్యుకేషన్, కస్తూర్బా స్కూల్ ఆఫ్ మెడిసిన్, మణిపాల్ యొక్క ఇన్‌స్టిట్యూషనల్ యానిమల్ ఎథిక్స్ కమిటీ (IAEC) సమీక్షించి ఆమోదించింది (IAEC/KMC/69/2020). జంతు ప్రయోగాల నియంత్రణ మరియు పర్యవేక్షణ కమిటీ (CPCSEA) సిఫార్సులకు అనుగుణంగా అన్ని జంతు ప్రయోగాలు నిర్వహించబడ్డాయి. అన్ని ఇన్ వివో NFRCS అధ్యయనాలు (2 × 2 సెం.మీ.2) ఆడ విస్టార్ ఎలుకలపై (200 నుండి 250 గ్రాముల బరువు) నిర్వహించబడ్డాయి. అన్ని జంతువులను 24-26°C ఉష్ణోగ్రత వద్ద అలవాటు చేశారు, జంతువులకు ప్రామాణిక ఆహారం మరియు నీరు స్వేచ్ఛగా అందుబాటులో ఉన్నాయి. అన్ని జంతువులను యాదృచ్ఛికంగా వేర్వేరు సమూహాలుగా విభజించారు, ప్రతి సమూహంలో మూడు జంతువులు ఉన్నాయి. అన్ని అధ్యయనాలు యానిమల్ స్టడీస్: రిపోర్ట్ ఆఫ్ ఇన్ వివో ఎక్స్‌పెరిమెంట్స్ 43 కు అనుగుణంగా నిర్వహించబడ్డాయి. అధ్యయనానికి ముందు, జంతువులకు ఇంట్రాపెరిటోనియల్ (ip) పద్ధతిలో 20-50 mg కెటమైన్ (ప్రతి 1 kg శరీర బరువుకు) మరియు 2-10 mg జైలాజైన్ మిశ్రమాన్ని ఇచ్చి మత్తు కలిగించారు. అధ్యయనం తర్వాత, నమూనాల ప్రారంభ మరియు తుది బరువుల మధ్య వ్యత్యాసాన్ని అంచనా వేయడం ద్వారా రక్తస్రావ పరిమాణాన్ని లెక్కించారు; మూడు పరీక్షల నుండి పొందిన సగటు విలువను నమూనా యొక్క రక్తస్రావ పరిమాణంగా తీసుకున్నారు.
గాయం, పోరాటం లేదా ట్రాఫిక్ ప్రమాదం (గాయం నమూనా)లో రక్తస్రావాన్ని నియంత్రించడంలో NFRCS యొక్క సామర్థ్యాన్ని అర్థం చేసుకోవడానికి ఎలుక తోక విచ్ఛేదన నమూనాను అమలు చేశారు. సాధారణ రక్తస్రావాన్ని నిర్ధారించడానికి స్కాల్పెల్ బ్లేడ్‌తో తోకలో 50% కత్తిరించి 15 సెకన్ల పాటు గాలిలో ఉంచారు. అదనంగా, ఒత్తిడిని (Ct, Cs, Ch NFRCS మరియు Cp NFRCS) వర్తింపజేయడం ద్వారా పరీక్ష నమూనాలను ఎలుక తోకపై ఉంచారు. పరీక్ష నమూనాల (n = 3)17,45 కోసం రక్తస్రావం మరియు PCT నివేదించబడ్డాయి.
పోరాటంలో NFRCS పీడన నియంత్రణ యొక్క ప్రభావాన్ని ఉపరితల ఫెమోరల్ ధమని నమూనాపై పరిశోధించారు. ఫెమోరల్ ధమనిని బహిర్గతం చేసి, 24G ట్రోకార్‌తో గుచ్చి, 15 సెకన్లలోపు రక్తస్రావం అయ్యేలా చేశారు. అనియంత్రిత రక్తస్రావం గమనించిన తర్వాత, పరీక్ష నమూనాను గుచ్చిన ప్రదేశంలో ఉంచి, పీడనాన్ని ప్రయోగించారు. పరీక్ష నమూనాను ఉంచిన వెంటనే, రక్తం గడ్డకట్టే సమయాన్ని నమోదు చేసి, తదుపరి 5 నిమిషాల పాటు రక్తస్రావ నివారణ సామర్థ్యాన్ని గమనించారు. ఇదే విధానాన్ని Cs మరియు Ct46 లతో పునరావృతం చేశారు.
ఆపరేషన్ సమయంలో జరిగే రక్తస్రావం సందర్భంలో, రక్తస్రావాన్ని ఆపే పదార్థాల యొక్క రక్తస్రావ నివారణ సామర్థ్యాన్ని అంచనా వేయడానికి డౌలింగ్ మరియు ఇతరులు 47 ఒక కాలేయ గాయం నమూనాను ప్రతిపాదించారు. Ct నమూనాలు (నెగటివ్ కంట్రోల్), Cs ఫ్రేమ్‌వర్క్ (పాజిటివ్ కంట్రోల్), Ch NFRCS నమూనాలు, మరియు Cp NFRCS నమూనాల కోసం BCT నమోదు చేయబడింది. మధ్యస్థ లాపరోటమీ చేయడం ద్వారా ఎలుక యొక్క సుప్రాహెపాటిక్ వెనా కావాను బహిర్గతం చేశారు. ఆ తర్వాత, ఎడమ లోబ్ యొక్క దూరపు భాగాన్ని కత్తెరతో కత్తిరించారు. స్కాల్పెల్ బ్లేడ్‌తో కాలేయంలో కోత పెట్టి, కొన్ని సెకన్ల పాటు రక్తస్రావం జరగనివ్వండి. ఖచ్చితంగా తూకం వేసిన Ch NFRCS మరియు Cp NFRCS పరీక్ష నమూనాలను ఎటువంటి పాజిటివ్ ప్రెజర్ లేకుండా దెబ్బతిన్న ఉపరితలంపై ఉంచి, BCT నమోదు చేశారు. ఆ తర్వాత కంట్రోల్ గ్రూప్ (Ct) గాయాన్ని పగలగొట్టకుండా ప్రెజర్ ప్రయోగించి, దాని తర్వాత Cs 30 s47 ను ప్రయోగించింది.
అభివృద్ధి చేయబడిన పాలిమర్-ఆధారిత NFRCSల యొక్క గాయం నయం చేసే లక్షణాలను మూల్యాంకనం చేయడానికి, ఎక్సిషనల్ గాయం నమూనాను ఉపయోగించి ఇన్ వివో గాయం నయం చేసే పరీక్షలు నిర్వహించబడ్డాయి. ఎక్సిషనల్ గాయాల నమూనాలను ఎంపిక చేసి, గతంలో ప్రచురించిన పద్ధతుల ప్రకారం చిన్న మార్పులతో నిర్వహించారు¹⁹,³²,⁴⁸. గతంలో వివరించిన విధంగా అన్ని జంతువులకు మత్తుమందు ఇచ్చారు. వీపు చర్మంపై వృత్తాకారంలో లోతైన కోత పెట్టడానికి బయాప్సీ పంచ్ (12 మిమీ) ఉపయోగించారు. సిద్ధం చేసిన గాయాల ప్రదేశాలకు Cs (పాజిటివ్ కంట్రోల్), Ct (కాటన్ ప్యాడ్‌లు గాయం నయం కావడానికి ఆటంకం కలిగిస్తాయని గుర్తించి), Ch NFRCS మరియు Cp NFRCS (ప్రయోగాత్మక సమూహం) మరియు ఎటువంటి చికిత్స లేని నెగటివ్ కంట్రోల్‌తో డ్రెస్సింగ్ చేశారు. అధ్యయనం యొక్క ప్రతి రోజు, అన్ని ఎలుకలలో గాయం యొక్క వైశాల్యాన్ని కొలిచారు. గాయం ప్రాంతం యొక్క చిత్రాన్ని తీయడానికి మరియు కొత్త డ్రెస్సింగ్ వేయడానికి డిజిటల్ కెమెరాను ఉపయోగించారు. గాయం మూసివేత శాతాన్ని ఈ క్రింది సూత్రం ద్వారా కొలిచారు:
అధ్యయనం యొక్క 12వ రోజున గాయం మూసివేత శాతం ఆధారంగా, ఉత్తమ సమూహం ((Cp NFRCS) మరియు నియంత్రణ సమూహం) యొక్క ఎలుక చర్మాన్ని కత్తిరించి, H&E స్టెయినింగ్ మరియు మాసన్స్ ట్రైక్రోమ్ స్టెయినింగ్ ద్వారా అధ్యయనం చేశారు. అధ్యయనం యొక్క 12వ రోజున గాయం మూసివేత శాతం ఆధారంగా, ఉత్తమ సమూహం ((Cp NFRCS) మరియు నియంత్రణ సమూహం) యొక్క ఎలుక చర్మాన్ని కత్తిరించి, H&E స్టెయినింగ్ మరియు మాసన్స్ ట్రైక్రోమ్ స్టెయినింగ్ ద్వారా అధ్యయనం చేశారు.అధ్యయనం యొక్క 12వ రోజున గాయం మూసివేత శాతం ఆధారంగా, ఉత్తమ సమూహం ((Cp NFRCS) మరియు నియంత్రణ సమూహం) యొక్క ఎలుకల చర్మాన్ని కత్తిరించి, హెమటోక్సిలిన్-ఇయోసిన్ మరియు మాసన్స్ ట్రైక్రోమ్‌తో రంగు వేసి పరీక్షించారు.根据研究第12天的伤口闭合百分比，切除最佳组((Cp NFRCS)和对照组)的大鼠皮肤，进行H&E染色和Masson三色染色研究。根据研究第12天的伤口闭合百分比，切除最佳组((Cp NFRCS)和对照组)的大鼠皮肤，进行H&E染色和眳组）అధ్యయనం యొక్క 12వ రోజున గాయం మూసివేత శాతం ఆధారంగా, ఉత్తమ సమూహంలోని ((Cp NFRCS) మరియు నియంత్రణ సమూహాలు) ఎలుకలను హెమటోక్సిలిన్-ఇయోసిన్ స్టెయినింగ్ మరియు మాసన్స్ ట్రైక్రోమ్ స్టెయినింగ్ కోసం వేరుచేయడం జరిగింది.అమలు చేయబడిన స్టెయినింగ్ ప్రక్రియ గతంలో వివరించిన పద్ధతుల49,50 ప్రకారం నిర్వహించబడింది. క్లుప్తంగా, 10% ఫార్మాలిన్‌లో ఫిక్సేషన్ చేసిన తర్వాత, నమూనాలను వివిధ గ్రేడెడ్ ఆల్కహాల్‌ల శ్రేణిని ఉపయోగించి నిర్జలీకరణం చేశారు. కత్తిరించిన కణజాలం యొక్క పలుచని సెక్షన్‌లను (5 µm మందం) పొందడానికి మైక్రోటోమ్‌ను ఉపయోగించండి. హిస్టోపాథలాజికల్ మార్పులను అధ్యయనం చేయడానికి కంట్రోల్స్ మరియు Cp NFRCS యొక్క పలుచని సీరియల్ సెక్షన్‌లను హెమటోక్సిలిన్ మరియు ఇయోసిన్‌తో ట్రీట్ చేశారు. కొల్లాజెన్ ఫైబ్రిల్స్ ఏర్పడటాన్ని గుర్తించడానికి మాసన్ ట్రైక్రోమ్ స్టెయిన్‌ను ఉపయోగించారు. పొందిన ఫలితాలను పాథాలజిస్టులు బ్లైండ్‌గా అధ్యయనం చేశారు.
Cp NFRCS నమూనాల స్థిరత్వాన్ని గది ఉష్ణోగ్రత (25°C ± 2°C/60% RH ± 5%) వద్ద 12 నెలల పాటు అధ్యయనం చేశారు51. మెటీరియల్స్ అండ్ మెథడ్స్ విభాగంలో వివరించిన పై పద్ధతుల ప్రకారం Cp NFRCS (ఉపరితల రంగు మారడం మరియు సూక్ష్మజీవుల పెరుగుదల)ను దృశ్యమానంగా తనిఖీ చేసి, మడత అరుగుదల నిరోధకత మరియు BCT కోసం పరీక్షించారు.
15×15 cm2 పరిమాణంలో Cp NFRCS ను తయారు చేయడం ద్వారా దాని విస్తరణ సామర్థ్యం మరియు పునరుత్పత్తి సామర్థ్యాన్ని పరిశీలించడం జరిగింది. అదనంగా, వివిధ Cp NFRCS ఫ్రాక్షన్‌ల నుండి 30 mg నమూనాలను (n = 5) వేరుచేసి, పద్ధతుల విభాగంలో ముందుగా వివరించిన విధంగా అధ్యయనం చేసిన నమూనాల BCT ని మూల్యాంకనం చేయడం జరిగింది.
మేము వివిధ బయోమెడికల్ అనువర్తనాల కోసం Cp NFRCS సమ్మేళనాలను ఉపయోగించి వివిధ ఆకారాలు మరియు నిర్మాణాలను అభివృద్ధి చేయడానికి ప్రయత్నించాము. అటువంటి ఆకారాలు లేదా నిర్మాణాలలో ముక్కు నుండి రక్తం కారడానికి, దంత చికిత్సల కోసం శంఖాకారపు స్వాబ్‌లు మరియు యోని రక్తస్రావం కోసం స్థూపాకారపు స్వాబ్‌లు ఉన్నాయి.
అన్ని డేటా సెట్‌లు సగటు ± ప్రామాణిక విచలనం రూపంలో వ్యక్తీకరించబడ్డాయి మరియు ప్రిజం 5.03 (గ్రాఫ్‌ప్యాడ్, శాన్ డియాగో, CA, USA) ఉపయోగించి ANOVA ద్వారా విశ్లేషించబడ్డాయి, ఆ తర్వాత బోన్‌ఫెరోనీ యొక్క బహుళ పోలికల పరీక్ష (*p<0.05) నిర్వహించబడింది.
మానవ అధ్యయనాలలో నిర్వహించిన అన్ని విధానాలు ఇన్‌స్టిట్యూట్ మరియు నేషనల్ రీసెర్చ్ కౌన్సిల్ ప్రమాణాలకు, అలాగే 1964 నాటి హెల్సింకి ప్రకటన మరియు దాని తదుపరి సవరణలు లేదా ఇలాంటి నైతిక ప్రమాణాలకు అనుగుణంగా ఉన్నాయి. పాల్గొనే వారందరికీ అధ్యయనం యొక్క లక్షణాలు మరియు దాని స్వచ్ఛంద స్వభావం గురించి తెలియజేయబడింది. పాల్గొనేవారి డేటా సేకరించిన తర్వాత గోప్యంగా ఉంచబడుతుంది. ఇన్ విట్రో TEG ప్రయోగాత్మక ప్రోటోకాల్‌ను కర్ణాటకలోని మణిపాల్‌లోని కస్తూర్బా మెడికల్ కాలేజ్ యొక్క ఇన్‌స్టిట్యూషనల్ ఎథిక్స్ కమిటీ (IEC: 674/2020) సమీక్షించి ఆమోదించింది. రక్త నమూనాలను సేకరించడానికి వాలంటీర్లు సమాచార సమ్మతి పత్రంపై సంతకం చేశారు.
జంతు అధ్యయనాలలో నిర్వహించిన అన్ని విధానాలు కస్తుబా ఫ్యాకల్టీ ఆఫ్ మెడిసిన్, మణిపాల్ ఇన్స్టిట్యూట్ ఆఫ్ హయ్యర్ ఎడ్యుకేషన్, మణిపాల్ (IAEC/KMC/69/2020) మార్గదర్శకాలకు అనుగుణంగా జరిగాయి. రూపొందించిన అన్ని జంతు ప్రయోగాలు కమిటీ ఫర్ ది కంట్రోల్ అండ్ సూపర్‌విజన్ ఆఫ్ యానిమల్ ఎక్స్‌పెరిమెంటేషన్ (CPCSEA) మార్గదర్శకాలకు అనుగుణంగా నిర్వహించబడ్డాయి. రచయితలందరూ ARRIVE మార్గదర్శకాలను అనుసరిస్తారు.
అన్ని NFRCSల యొక్క FTIR స్పెక్ట్రాలను విశ్లేషించి, చిత్రం 2Aలో చూపిన కైటోసాన్ స్పెక్ట్రంతో పోల్చారు. కైటోసాన్ యొక్క లక్షణ స్పెక్ట్రల్ శిఖరాలు (నమోదు చేయబడినవి) 3437 cm-1 (OH మరియు NH స్ట్రెచింగ్, ఓవర్‌ల్యాప్), 2945 మరియు 2897 cm-1 (CH స్ట్రెచింగ్), 1660 cm-1 (NH2 స్ట్రెయిన్), 1589 cm-1 (N–H బెండింగ్), 1157 cm-1 (బ్రిడ్జ్ స్ట్రెచ్ O-), 1067 cm-1 (స్ట్రెచ్ C–O, సెకండరీ హైడ్రాక్సిల్), 993 cm-1 (స్ట్రెచ్ CO, Bo-OH) 52.53.54 వద్ద ఉన్నాయి. అనుబంధ పట్టిక S1 కైటోసాన్ (రిపోర్టర్), స్వచ్ఛమైన కైటోసాన్, Cm, Ch, మరియు Cpల యొక్క FTIR NFRCS శోషణ స్పెక్ట్రం విలువలను చూపుతుంది. అన్ని NFRCS (Cm, Ch మరియు Cp) యొక్క FTIR స్పెక్ట్రాలు ఎటువంటి ముఖ్యమైన మార్పులు లేకుండా స్వచ్ఛమైన చిటోసాన్ వలె అవే లక్షణ శోషణ బ్యాండ్‌లను చూపించాయి (Fig. 2A). NFRCSను అభివృద్ధి చేయడానికి ఉపయోగించిన పాలిమర్‌ల మధ్య రసాయన లేదా భౌతిక పరస్పర చర్యలు లేవని FTIR ఫలితాలు నిర్ధారించాయి, ఇది ఉపయోగించిన పాలిమర్‌లు జడమైనవని సూచిస్తుంది.
Cm NFRCS, Ch NFRCS, Cp NFRCS మరియు Cs యొక్క ఇన్ విట్రో లక్షణీకరణ. (A) సంపీడనం కింద కైటోసాన్ మరియు Cm NFRCS, Ch NFRCS మరియు Cp NFRCS ల కూర్పుల యొక్క సంయుక్త FTIR స్పెక్ట్రాలను సూచిస్తుంది. (B) a) NFRCS Cm, Ch, Cp, మరియు Cg యొక్క సంపూర్ణ రక్త శోషణ రేటు (n = 3); కాటన్ స్వాబ్‌కు అధిక శోషణ సామర్థ్యం ఉన్నందున Ct నమూనాలు అధిక BARను చూపించాయి; b) రక్త శోషణ తర్వాత రక్తం, శోషించబడిన నమూనా యొక్క దృష్టాంతం. పరీక్ష నమూనా C యొక్క BCT యొక్క గ్రాఫికల్ ప్రాతినిధ్యం (Cp NFRCS ఉత్తమ BCTని కలిగి ఉంది (15 s, n = 3)). C, D, E, మరియు G లలోని డేటాను సగటు ± SD గా చూపించారు, మరియు ఎర్రర్ బార్‌లు SD ని సూచిస్తాయి, ***p < 0.0001. C, D, E, మరియు G లలోని డేటాను సగటు ± SD గా చూపించారు, మరియు ఎర్రర్ బార్‌లు SD ని సూచిస్తాయి, ***p < 0.0001. డానీ వ సి, డి, ఇ మరియు జి ప్రెడ్‌స్టావ్‌లేన్ కాక్ స్రెడ్నీ ± స్టాండర్ట్‌నో ఓట్‌క్లోనెనియె, ఎ ప్లాంకీ పోగ్రెషోస్ట్ అప్‌పోస్ట్ стандартное отклонение, ***p <0,0001. C, D, E, మరియు G లలోని డేటా సగటు ± ప్రామాణిక విచలనం రూపంలో ప్రదర్శించబడింది, మరియు ఎర్రర్ బార్‌లు ప్రామాణిక విచలనాన్ని సూచిస్తాయి, ***p<0.0001. C、D、E 和G 中的数据显示为平均值± SD，误差线代表SD,***p <0.0001。 C、D、E 和G 中的数据显示为平均值± SD，误差线代表SD,***p <0.0001。 డాని వ సి, డి, ఇ మరియు జి పోకజన్ కాక్ స్రెడ్నీ జానచెనీ ± స్టాండర్ట్నో ఓట్‌క్లోనీ, ప్లాంకీ పోగ్రెష్‌నోస్టేయ్ ప్రోగ్రాం స్టాండర్ట్నో ఓట్క్లోనెనియే, ***p <0,0001. C, D, E, మరియు G లలోని డేటా సగటు ± ప్రామాణిక విచలనం రూపంలో చూపబడింది, ఎర్రర్ బార్‌లు ప్రామాణిక విచలనాన్ని సూచిస్తాయి, ***p<0.0001.