Salamat sa pagbisita sa Nature.com. Limitado ang suporta sa CSS sa bersyon ng browser na iyong ginagamit. Para sa pinakamahusay na karanasan, inirerekomenda namin na gumamit ka ng updated na browser (o i-disable ang Compatibility Mode sa Internet Explorer). Samantala, upang matiyak ang patuloy na suporta, ire-render namin ang site nang walang mga style at JavaScript.
Ang hindi makontrol na pagdurugo ay isa sa mga pangunahing sanhi ng kamatayan. Ang pagkamit ng mabilis na hemostasis ay nagsisiguro ng kaligtasan ng pasyente bilang pangunang lunas sa panahon ng labanan, aksidente sa trapiko, at mga operasyon sa pagbabawas ng kamatayan. Ang nanoporous fiber-reinforced composite scaffold (NFRCS) na nagmula sa isang simpleng hemostatic film-forming composition (HFFC) bilang isang tuluy-tuloy na yugto ay maaaring mag-trigger at magpahusay ng hemostasis. Ang pagbuo ng NFRCS ay batay sa disenyo ng pakpak ng tutubi. Ang istraktura ng pakpak ng tutubi ay binubuo ng mga transverse at longhitudinal na pakpak, at ang mga lamad ng pakpak ay konektado sa isa't isa upang mapanatili ang integridad ng microstructure. Ang HFFC ay pantay na bumabalot sa ibabaw ng hibla ng isang pelikula na may kapal na nanometer at nag-uugnay sa random na ipinamamahaging kapal ng bulak (Ct) (dispersed phase) upang bumuo ng isang nanoporous na istraktura. Ang kumbinasyon ng tuluy-tuloy at dispersed na mga yugto ay binabawasan ang gastos ng produkto nang sampung beses kumpara sa mga produktong mabibili sa komersyo. Ang mga binagong NFRCS (tampon o wristband) ay maaaring gamitin sa iba't ibang biomedical na aplikasyon. Napagpasyahan ng mga pag-aaral na in vivo na ang nabuong Cp NFRCS ay nagpapalitaw at nagpapahusay sa proseso ng coagulation sa lugar ng aplikasyon. Maaaring baguhin ng NFRCS ang microenvironment at kumilos sa antas ng cellular dahil sa nanoporous na istraktura nito na nagreresulta sa mas mahusay na paggaling ng sugat sa excision wound model.
Ang hindi makontrol na pagdurugo habang nasa labanan, intraoperative, at mga emergency na sitwasyon ay maaaring magdulot ng seryosong banta sa buhay ng mga sugatan1. Ang mga kondisyong ito ay lalong humahantong sa pangkalahatang pagtaas ng peripheral vascular resistance, na humahantong sa hemorrhagic shock. Ang mga naaangkop na hakbang upang makontrol ang pagdurugo habang at pagkatapos ng operasyon ay itinuturing na potensyal na nagbabanta sa buhay2,3. Ang pinsala sa malalaking daluyan ng dugo ay humahantong sa napakalaking pagkawala ng dugo, na nagreresulta sa mortality rate na ≤ 50% sa labanan at 31% habang nasa operasyon1. Ang napakalaking pagkawala ng dugo ay humahantong sa pagbaba ng body volume, na nagpapababa sa cardiac output. Ang pagtaas ng total peripheral vascular resistance at progresibong pagkasira ng microcirculation ay humahantong sa hypoxia sa mga life-support organ. Maaaring mangyari ang hemorrhagic shock kung magpapatuloy ang kondisyon nang walang epektibong interbensyon1,4,5. Kabilang sa iba pang mga komplikasyon ang paglala ng hypothermia at metabolic acidosis, pati na rin ang coagulation disorder na humahadlang sa proseso ng coagulation. Ang matinding hemorrhagic shock ay nauugnay sa mas mataas na panganib ng kamatayan6,7,8. Sa grade III (progressive) shock, ang pagsasalin ng dugo ay mahalaga para sa kaligtasan ng pasyente sa panahon ng intraoperative at postoperative morbidity at mortality. Upang malampasan ang lahat ng nabanggit na mga sitwasyong nagbabanta sa buhay, bumuo kami ng isang nanoporous fiber-reinforced composite scaffold (NFRCS) na gumagamit ng kaunting konsentrasyon ng polymer (0.5%) gamit ang kombinasyon ng mga water-soluble hemostatic polymer.
Gamit ang fiber reinforcement, maaaring makabuo ng mga produktong matipid. Ang mga hibla na nakaayos nang sapalaran ay kahawig ng istruktura ng pakpak ng tutubi, na binabalanse ng mga pahalang at patayong guhit sa mga pakpak. Ang transverse at longitudinal na mga ugat ng pakpak ay nakikipag-ugnayan sa lamad ng pakpak (Fig. 1). Ang NFRCS ay binubuo ng reinforced Ct bilang scaffold system na may mas mahusay na pisikal at mekanikal na lakas (Figure 1). Dahil sa abot-kayang presyo at pagkakagawa, mas gusto ng mga siruhano na gumamit ng cotton thread gauges (Ct) sa panahon ng mga operasyon at pagbibihis. Kaya naman, kung isasaalang-alang ang maraming benepisyo nito, kabilang ang > 90% crystalline cellulose (nakakatulong sa pagpapahusay ng hemostatic activity), ginamit ang Ct bilang skeletal system ng NFRCS9,10. Kaya naman, kung isasaalang-alang ang maraming benepisyo nito, kabilang ang > 90% crystalline cellulose (nakakatulong sa pagpapahusay ng hemostatic activity), ginamit ang Ct bilang skeletal system ng NFRCS9,10. Следовательно, учитывая его многочисленные преимущества, в том числе > 90% кристаллической целлюлозы (участишполозы) гемостатической активности), Ct использовали в качестве скелетной системы NFRCS9,10. Samakatuwid, dahil sa maraming benepisyo nito, kabilang ang >90% crystalline cellulose (na kasama sa pagtaas ng hemostatic activity), ginamit ang Ct bilang skeletal system ng NFRCS9,10.因此，考虑到它的多重益处，包括> 90% 的结晶纤维素（有助于增强止血活性），NC00的骨架系统。因此，考虑到它的多重益处，包括> 90%Samakatuwid, dahil sa maraming benepisyo nito, kabilang ang mahigit 90% crystalline cellulose (nakakatulong na mapahusay ang hemostatic activity), ginamit ang Ct bilang plantsa para sa NFRCS9,10.Ang Ct ay pinahiran nang mababaw (naobserbahan ang pagbuo ng nano-thick film) at pinagdugtong gamit ang isang hemostatic film-forming composition (HFFC). Ang HFFC ay gumagana tulad ng isang matrigel, na pinagsasama-sama ang mga random na nakalagay na Ct. Ang nabuong disenyo ay nagpapadala ng stress sa loob ng dispersed phase (mga reinforcing fibers). Mahirap makakuha ng mga nanoporous na istruktura na may mahusay na mekanikal na lakas gamit ang kaunting konsentrasyon ng polymer. Bukod pa rito, hindi madaling i-customize ang iba't ibang hulmahan para sa iba't ibang biomedical application.
Ang pigura ay nagpapakita ng isang diagram ng disenyo ng NFRCS batay sa istruktura ng pakpak ng tutubi (A). Ang larawang ito ay nagpapakita ng isang paghahambing na pagkakatulad ng istruktura ng pakpak ng isang tutubi (ang nagsasalubong at paayon na mga ugat ng pakpak ay magkakaugnay) at isang cross-sectional photomicrograph ng Cp NFRCS (B). Eskematikong representasyon ng NFRCS.
Ang mga NFRC ay binuo gamit ang HFFC bilang isang tuluy-tuloy na yugto upang matugunan ang mga limitasyong nabanggit. Ang HFFC ay binubuo ng iba't ibang mga hemostatic polymer na bumubuo ng pelikula kabilang ang chitosan (bilang pangunahing hemostatic polymer) na may methylcellulose (MC), hydroxypropyl methylcellulose (HPMC 50 cp) at polyvinyl alcohol (PVA)) (125 kDa) bilang isang support polymer na nagtataguyod ng pagbuo ng thrombus. Ang pagdaragdag ng polyvinylpyrrolidine K30 (PVP K30) ay nagpabuti sa kapasidad ng pagsipsip ng moisture ng NFRCS. Ang polyethylene glycol 400 (PEG 400) ay idinagdag upang mapabuti ang polymer crosslinking sa mga bonded polymer blends. Tatlong magkakaibang hemostatic compositions ng HFFC (Cm HFFC, Ch HFFC at Cp HFFC), katulad ng chitosan na may MC (Cm), chitosan na may HPMC (Ch), at chitosan na may PVA (Cp), ay inilapat sa Ct. Kinumpirma ng iba't ibang in vitro at in vivo na pag-aaral sa karakterisasyon ang hemostatic at wound healing activity ng NFRCS. Ang mga composite material na iniaalok ng NFRCS ay maaaring gamitin upang i-customize ang iba't ibang anyo ng scaffolding upang matugunan ang mga partikular na pangangailangan.
Bukod pa rito, ang NFRCS ay maaaring baguhin bilang isang bendahe o rolyo upang matakpan ang buong bahagi ng pinsala sa ibabang bahagi ng katawan at iba pang bahagi ng katawan. Partikular para sa mga pinsala sa paa't kamay na dulot ng labanan, ang dinisenyong disenyo ng NFRCS ay maaaring baguhin sa kalahating braso o buong binti (Karagdagang Larawan S11). Ang NFRCS ay maaaring gawing pulseras gamit ang pandikit ng tisyu, na maaaring gamitin upang ihinto ang pagdurugo mula sa malalang pinsala sa pulso na dulot ng pagpapakamatay. Ang aming pangunahing layunin ay bumuo ng isang NFRCS na may kaunting polimer hangga't maaari na maaaring maihatid sa isang malaking populasyon (sa ibaba ng linya ng kahirapan) at maaaring ilagay sa isang first aid kit. Simple, mahusay, at matipid sa disenyo, ang NFRCS ay nakikinabang sa mga lokal na komunidad at maaaring magkaroon ng pandaigdigang epekto.
Ang Chitosan (molecular weight 80 kDa) at amaranth ay binili mula sa Merck, India. Ang Hydroxypropyl methylcellulose 50 Cp, polyethylene glycol 400 at methylcellulose ay binili mula sa Loba Chemie Pvt. LLC, Mumbai. Ang Polyvinyl alcohol (molecular weight 125 kDa) (87-90% hydrolyzed) ay binili mula sa National Chemicals, Gujarat. Ang Polyvinylpyrrolidine K30 ay binili mula sa Molychem, Mumbai, at ang mga sterile swab ay binili mula sa Ramaraju Surgery Cotton Mills Ltd., Tamil Nadu, gamit ang Milli Q water (Direct-Q3 water purification system, Merck, India) bilang carrier.
Ang NFRCS ay binuo gamit ang isang paraan ng lyophilization11,12. Ang lahat ng komposisyon ng HFFC (Talahanayan 1) ay inihanda gamit ang isang mechanical stirrer. Maghanda ng 0.5% na solusyon ng chitosan gamit ang 1% acetic acid sa tubig sa pamamagitan ng patuloy na paghahalo sa 800 rpm sa isang mechanical stirrer. Ang eksaktong bigat ng naka-load na polymer na ipinahiwatig sa Talahanayan 1 ay idinagdag sa solusyon ng chitosan at hinalo hanggang sa makuha ang isang malinaw na solusyon ng polymer. Ang PVP K30 at PEG 400 ay idinagdag sa nagresultang timpla sa mga dami na ipinahiwatig sa Talahanayan 1, at ang paghahalo ay ipinagpatuloy hanggang sa makuha ang isang malinaw at malapot na solusyon ng polymer. Ang nagresultang paliguan ng solusyon ng polymer ay sonicated sa loob ng 60 minuto upang alisin ang mga nakulong na bula ng hangin mula sa pinaghalong polymer. Tulad ng ipinapakita sa Karagdagang Larawan S1(b), ang Ct ay pantay na ipinamahagi sa bawat balon ng isang 6-well plate (mold) na nilagyan ng 5 ml ng HFFC.
Ang six-well plate ay sinuri sa sonication sa loob ng 60 minuto upang makamit ang pantay na pagkabasa at distribusyon ng HFFC sa Ct network. Pagkatapos ay i-freeze ang six-well plate sa -20°C sa loob ng 8-12 oras. Ang mga freeze plate ay ni-lyophilize sa loob ng 48 oras upang makakuha ng iba't ibang pormulasyon ng NFRCS. Ang parehong pamamaraan ay ginagamit upang makagawa ng iba't ibang hugis at istruktura, tulad ng mga tampon o cylindrical tampon, o anumang iba pang hugis para sa iba't ibang aplikasyon.
Ang chitosan (80 kDa) (3%) na wastong tinimbang ay tinunaw sa 1% acetic acid gamit ang magnetic stirrer. Sa nagresultang solusyon ng chitosan ay idinagdag ang 1% PEG 400 at hinalo sa loob ng 30 minuto. Ibuhos ang nagresultang solusyon sa isang parisukat o parihabang lalagyan at i-freeze sa -80°C sa loob ng 12 oras. Ang mga nakapirming sample ay ni-lyophilize sa loob ng 48 oras upang makakuha ng porous na Cs13.
Ang nabuong NFRCS ay isinailalim sa mga eksperimento gamit ang Fourier transform infrared spectroscopy (FTIR) (Shimadzu 8400 s FTIR, Tokyo, Japan) upang kumpirmahin ang kemikal na pagiging tugma ng chitosan sa iba pang mga polymer14,15. Ang FTIR spectra (lapad ng spectral range mula 400 hanggang 4000 cm-1) ng lahat ng sinubok na sample ay nakuha sa pamamagitan ng pagsasagawa ng 32 scan.
Ang blood absorption rate (BAR) para sa lahat ng pormulasyon ay sinuri gamit ang pamamaraang inilarawan nina Chen et al. 16 na may kaunting mga pagbabago. Ang mga nabuong NFRK ng lahat ng komposisyon ay pinatuyo sa isang vacuum oven sa 105°C magdamag upang maalis ang natitirang solvent. Ang 30 mg NFRCS (unang timbang ng sample – W0) at 30 mg Ct (positibong kontrol) ay inilagay sa magkakahiwalay na lalagyan na naglalaman ng premix na 3.8% sodium citrate. Sa mga paunang natukoy na agwat ng oras, ibig sabihin, 5, 10, 20, 30, 40 at 60 segundo, ang mga NFRCS ay tinanggal at ang kanilang mga ibabaw ay nilinis ng hindi nasipsip na dugo sa pamamagitan ng paglalagay ng mga sample sa Ct sa loob ng 30 segundo. Ang pangwakas na timbang ng dugong nasipsip ng NFRCS 16 ay isinaalang-alang (W1) sa bawat punto ng oras. Kalkulahin ang porsyento ng BAR gamit ang sumusunod na pormula:
Ang oras ng pamumuo ng dugo (BCT) ay natukoy ayon sa iniulat nina Wang et al. 17. Ang oras na kinakailangan para sa buong dugo (dugo ng daga na hinaluan ng 3.8% sodium citrate) upang mamuo sa presensya ng NFRCS ay kinalkula bilang BCT ng sample ng pagsubok. Ang iba't ibang bahagi ng NFRCS (30 mg) ay inilagay sa 10 ml na mga vial na may takip na tornilyo at in-incubate sa 37°C. Ang dugo (0.5 ml) ay idinagdag sa vial at 0.3 ml ng 0.2 M CaCl2 ay idinagdag upang i-activate ang pamumuo ng dugo. Panghuli, baligtarin ang vial bawat 15 segundo (hanggang 180°) hanggang sa mabuo ang isang matigas na namuong dugo. Ang BCT ng sample ay tinatantya sa pamamagitan ng bilang ng mga flips vails17,18. Batay sa BCT, dalawang pinakamainam na komposisyon mula sa NFRCS Cm, Ch at Cp ang napili para sa karagdagang mga pag-aaral sa karakterisasyon.
Ang BCT ng mga komposisyon ng Ch NFRCS at Cp NFRCS ay natukoy sa pamamagitan ng pagpapatupad ng pamamaraang inilarawan nina Li et al. 19. Ilagay ang 15 x 15 mm2 Ch NFRCS, Cp NFRCS, at Cs (positibong kontrol) sa magkakahiwalay na Petri dish (37 °C). Ang dugo na naglalaman ng 3.8% sodium citrate ay hinaluan ng 0.2 M CaCl2 sa 10:1 volume ratio upang simulan ang proseso ng pamumuo ng dugo. 20 µl ng 0.2 M CaCl2 na pinaghalong dugo ng daga ay inilapat sa ibabaw ng sample at inilagay sa isang walang laman na Petri dish. Ang kontrol ay dugong ibinuhos sa mga walang laman na Petri dish nang walang Ct. Sa mga takdang pagitan na 0, 3, at 5 minuto, itigil ang pamumuo sa pamamagitan ng pagdaragdag ng 10 ml ng deionized (DI) na tubig sa sample na naglalaman ng dish nang hindi ginagambala ang namuong dugo. Ang mga uncoagulated erythrocytes (erythrocytes) ay sumasailalim sa hemolysis sa presensya ng deionized na tubig at naglalabas ng hemoglobin. Ang hemoglobin sa iba't ibang oras (HA(t)) ay sinukat sa 540 nm (λmax hemoglobin) gamit ang UV-Vis spectrophotometer. Ang absolute absorption ng hemoglobin (AH(0)) sa loob ng 0 minuto ng 20 µl ng dugo sa 10 ml ng deionized water ay kinuha bilang reference standard. Ang relative hemoglobin uptake (RHA) ng coagulated blood ay kinalkula mula sa ratio na HA(t)/HA(0) gamit ang parehong batch ng dugo.
Gamit ang isang texture analyzer (Texture Pro CT V1.3 Build 15, Brookfield, USA), natukoy ang mga katangian ng pandikit ng NFRK sa nasirang tisyu. Idiin ang isang cylindrical dish na may bukas na ilalim laban sa loob ng balat ng baboy (nang walang patong ng taba). Ang mga sample (Ch NFRCS at Cp NFRCS) ay inilapat sa pamamagitan ng cannula sa mga cylindrical mold upang lumikha ng pagdikit sa balat ng baboy. Pagkatapos ng 3 minutong incubation sa temperatura ng silid (RT) (25° C.), ang lakas ng pandikit ng NFRCS ay naitala sa isang pare-parehong rate na 0.5 mm/seg.
Ang pangunahing katangian ng mga surgical sealant ay ang pagpapataas ng pamumuo ng dugo habang binabawasan ang pagkawala ng dugo. Ang lossless coagulation sa NFRCS ay sinuri gamit ang isang naunang nailathalang pamamaraan na may kaunting mga pagbabago 19. Gumawa ng isang microcentrifuge tube (2 ml) (panloob na diyametro 10 mm) na may butas na 8 × 5 mm2 sa isang gilid ng centrifuge tube (na kumakatawan sa isang bukas na sugat). Ginagamit ang NFRCS upang isara ang butas at ginagamit ang tape upang isara ang mga panlabas na gilid. Magdagdag ng 20 µl ng 0.2 M CaCl2 sa microcentrifuge tube na naglalaman ng 3.8% sodium citrate premix. Pagkatapos ng 10 minuto, ang mga microcentrifuge tube ay tinanggal mula sa mga pinggan at ang pagtaas sa masa ng mga pinggan ay natukoy dahil sa paglabas ng dugo mula sa NFRK (n = 3). Ang pagkawala ng dugo na Ch NFRCS at Cp NFRCS ay inihambing sa Cs.
Ang basang integridad ng NFRCS ay natukoy batay sa pamamaraang inilarawan nina Mishra at Chaudhary21 na may kaunting mga pagbabago. Ilagay ang NFRCS sa isang 100 ml na Erlenmeyer flask na may 50 ml na tubig at paikutin sa loob ng 60 segundo nang hindi bumubuo ng takip. Biswal na inspeksyon at pagbibigay-priyoridad sa mga sample para sa pisikal na integridad batay sa koleksyon.
Ang lakas ng pagdikit ng HFFC sa Ct ay pinag-aralan gamit ang mga naunang nailathalang pamamaraan na may kaunting mga pagbabago. Ang integridad ng surface coating ay tinasa sa pamamagitan ng paglalantad ng NFRK sa mga acoustic wave (external stimulus) sa presensya ng milliQ water (Ct). Ang nabuo na NFRCS Ch NFRCS at Cp NFRCS ay inilagay sa isang beaker na puno ng tubig at in-sonicate sa loob ng 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, at 30 minuto, ayon sa pagkakabanggit. Pagkatapos matuyo, ang porsyento ng pagkakaiba sa pagitan ng paunang at pangwakas na timbang ng NFRCS ay ginamit upang kalkulahin ang porsyento ng pagkawala ng materyal (HFFC). Ang in vitro BCT ay higit pang sumuporta sa lakas ng pagdikit o pagkawala ng mga materyales sa ibabaw. Ang kahusayan ng pagdikit ng HFFC sa Ct ay nagbibigay ng pamumuo ng dugo at isang elastic coating sa ibabaw ng Ct22.
Ang homogeneity ng nabuong NFRCS ay natukoy sa pamamagitan ng BCT ng mga sample (30 mg) na kinuha mula sa mga random na napiling pangkalahatang lokasyon ng NFRCS. Sundin ang nabanggit na pamamaraan ng BCT upang matukoy ang pagsunod sa NFRCS. Ang kalapitan sa pagitan ng lahat ng limang sample ay nagsisiguro ng pantay na saklaw ng ibabaw at deposisyon ng HFFC sa Ct mesh.
Ang nominal blood contact area (NBCA) ay natukoy gaya ng naunang naiulat na may ilang pagbabago. Pakuluan ang dugo sa pamamagitan ng pag-clamping ng 20 µl ng dugo sa pagitan ng dalawang ibabaw ng Ct, Ch NFRCS, Cp NFRCS at Cs. Pagkatapos ng 1 oras, ang dalawang bahagi ng stent ay pinaghiwalay at manu-manong sinukat ang lawak ng namuong dugo. Ang average na halaga ng tatlong pag-uulit ay itinuturing na NBCA NFRCS19.
Ginamit ang pagsusuring Dynamic Vapor Sorption (DVS) upang suriin ang bisa ng NFRCS sa pagsipsip ng tubig mula sa panlabas na kapaligiran o mula sa lugar ng pinsala na responsable sa pagsisimula ng coagulation. Sinusuri o itinatala ng DVS ang pagsipsip at pagkawala ng singaw sa isang sample sa pamamagitan ng gravimetric na paraan gamit ang isang ultra-sensitive balance na may mass resolution na ±0.1 µg. Ang partial vapor pressure (relative humidity) ay nalilikha ng isang electronic mass flow controller sa paligid ng sample sa pamamagitan ng paghahalo ng saturated at dry carrier gases. Ayon sa mga alituntunin ng European Pharmacopeia, batay sa porsyento ng pagsipsip ng kahalumigmigan ng mga sample, ang mga sample ay ikinategorya sa 4 na kategorya (0–0.012% w/w− hindi hygroscopic, 0.2–2% w/w bahagyang hygroscopic, 2–15% katamtamang hygroscopic, at > 15% napaka-hygroscopic)23. Ayon sa mga alituntunin ng European Pharmacopeia, batay sa porsyento ng pagsipsip ng moisture ng mga sample, ang mga sample ay ikinategorya sa 4 na kategorya (0–0.012% w/w− hindi hygroscopic, 0.2–2% w/w bahagyang hygroscopic, 2–15% katamtamang hygroscopic, at > 15% napaka-hygroscopic)23.Alinsunod sa mga rekomendasyon ng European Pharmacopoeia, depende sa porsyento ng pagsipsip ng kahalumigmigan ng mga sample, ang mga sample ay hinati sa 4 na kategorya (0–0.012% w/w – hindi hygroscopic, 0.2–2% w/w bahagyang hygroscopic, 2–15%).% умеренно гигроскопичен и > 15% очень гигроскопичен)23. % katamtamang higroskopiko at > 15% napakahigroskopiko)23.根据欧洲药典指南，根据样品吸收水分的百分比，样品分为4 类（0-0.012% w/w.吸收水分的百分比，样品分为4 类（0-0.012% w/w.倐-湁%倐、面w/w 轻微吸湿性、2-15 % 适度吸湿，> 15% 非常吸湿）23.根据 欧洲 药典 指南 ， 根据 吸收 水分 的 百分比 样品 分为 分为 分为 分为 分为 分为 分为 分为 0.（ 0.（ 类 1吸湿 性 、 、 、 、 0.2-2% W/w 轻微 、 2-15% 适度 吸湿 ，> 15 %非常吸湿）23.Alinsunod sa mga rekomendasyon ng European Pharmacopoeia, ang mga sample ay nahahati sa 4 na klase depende sa porsyento ng kahalumigmigan na hinihigop ng sample (0-0.012% ayon sa timbang – hindi hygroscopic, 0.2-2% ayon sa timbang, bahagyang hygroscopic, 2-15% ayon sa timbang).% умеренно гигроскопичен, > 15 % очень гигроскопичен) 23. % katamtamang higroskopiko, > 15% napakahigroskopiko) 23.Ang hygroscopic efficiency ng NFCS X NFCS at TsN NFCS ay natukoy sa isang analyzer na DVS TA TGA Q5000 SA. Sa prosesong ito, nakuha ang run time, relative humidity (RH), at real-time sample weight sa 25°C24. Ang moisture content ay kinakalkula sa pamamagitan ng tumpak na NFRCS mass analysis gamit ang sumusunod na equation:
Ang MC ay ang NFRCS humidity. m1 – tuyong timbang ng mga NSAID. Ang m2 ay ang real-time na masa ng NFRCS sa isang ibinigay na RH.
Ang kabuuang lawak ng ibabaw ay tinantya gamit ang isang eksperimento sa adsorption ng nitrogen gamit ang likidong nitrogen pagkatapos alisin ang laman ng mga sample sa 25 °C sa loob ng 10 oras (< 7 × 10–3 Torr). Ang kabuuang lawak ng ibabaw ay tinantya gamit ang isang eksperimento sa adsorption ng nitrogen gamit ang likidong nitrogen pagkatapos alisin ang laman ng mga sample sa 25 °C sa loob ng 10 oras (< 7 × 10–3 Torr). Общая площадь поверхности оценивалась с помощью эксперимента по адсорбции азота жидким азотом после опорожнраце опорожнраце течение 10 ч (< 7 × 10–3 Торр). Ang kabuuang lawak ng ibabaw ay tinantya gamit ang isang eksperimento sa adsorption ng nitrogen gamit ang likidong nitrogen matapos alisin ang laman ng mga sample sa 25°C sa loob ng 10 oras (< 7 × 10–3 Torr).在25°C 清空样品10 小时（< 7 × 10-3 Torr）后，使用液氮的氮吸附实验估计总表面积。在 25°C Общая площадь поверхности оценивалась с использованием экспериментов по адсорбции азота жидким азотом поросленио течение 10 часов при 25°C (< 7 × 10-3 торр). Ang kabuuang lawak ng ibabaw ay tinantya gamit ang mga eksperimento sa adsorption ng nitrogen gamit ang likidong nitrogen matapos alisin ang laman ng mga sample sa loob ng 10 oras sa 25°C (< 7 x 10-3 torr).Ang kabuuang lawak ng ibabaw, dami ng butas, at laki ng butas ng NFRCS ay natukoy gamit ang isang Quantachrome mula sa NOVA 1000e, Austria gamit ang RS 232 software.
Maghanda ng 5% RBCs (saline bilang diluent) mula sa whole blood. Pagkatapos, ilipat ang isang aliquot ng HFFC (0.25 ml) sa isang 96-well plate at 5% RBC mass (0.1 ml). I-incubate ang mixture sa 37°C sa loob ng 40 minuto. Ang pinaghalong pulang selula ng dugo at serum ay itinuturing na positive control, at ang pinaghalong saline at pulang selula ng dugo bilang negative control. Ang hemagglutination ay natukoy ayon sa Stajitzky scale. Ang mga iminungkahing scale ay ang mga sumusunod: + + + + siksik na granular aggregates; + + + makinis na bottom pads na may kurbadong mga gilid; + + makinis na bottom pads na may punit na mga gilid; + makikipot na pulang singsing sa paligid ng mga gilid ng makinis na pads; – (negatibo) discrete red button 12 sa gitna ng lower well.
Ang hemocompatibility ng NFRCS ay pinag-aralan ayon sa pamamaraan ng International Organization for Standardization (ISO) (ISO10993-4, 1999)26,27. Ang gravimetric method na inilarawan ni Singh et al. May mga maliliit na pagbabagong ginawa upang masuri ang pagbuo ng thrombus sa presensya o sa ibabaw ng NFRCS. 500 mg ng Cs, Ch NFRCS at Cp NFRCS ay in-incubate sa phosphate buffered saline (PBS) sa loob ng 24 na oras sa 37°C. Pagkatapos ng 24 na oras, tinanggal ang PBS at ang NFRCS ay ginamot gamit ang 2 ml ng dugo na naglalaman ng 3.8% sodium citrate. Sa ibabaw ng NFRCS, magdagdag ng 0.04 ml ng 0.1 M CaCl2 sa mga in-incubate na sample. Pagkatapos ng 45 minuto, idinagdag ang 5 ml ng distilled water upang ihinto ang coagulation. Ang coagulated na dugo sa ibabaw ng NFRK ay ginamot gamit ang 36-38% formaldehyde solution. Ang mga clot na naayos gamit ang formaldehyde ay pinatuyo at tinimbang. Ang porsyento ng thrombosis ay tinantya sa pamamagitan ng pagkalkula ng bigat ng baso na walang dugo at sample (negatibong kontrol) at ng baso na may dugo (positibong kontrol).
Bilang panimulang kumpirmasyon, ang mga sample ay isinailalim sa biswalisasyon sa ilalim ng optical microscope upang maunawaan ang kakayahan ng HFFC surface coating, Ct interconnected, at Ct network na bumuo ng mga butas. Ang manipis na mga seksyon ng Ch at Cp mula sa NFRCS ay pinutol gamit ang isang scalpel blade. Ang nagresultang seksyon ay inilagay sa isang glass slide, tinakpan ng coverslip, at ang mga gilid ay inayos gamit ang pandikit. Ang mga inihandang slide ay tiningnan sa ilalim ng optical microscope at kinuhanan ng mga litrato sa iba't ibang magnification.
Ang deposisyon ng polimer sa mga network ng Ct ay isinalarawan gamit ang fluorescence microscopy batay sa pamamaraang inilarawan nina Rice et al.29. Ang komposisyong HFFC na ginamit para sa pormulasyon ay hinaluan ng fluorescent dye (amaranth), at ang NFRCS (Ch at Cp) ay inihanda ayon sa pamamaraang nabanggit kanina. Ang komposisyong HFFC na ginamit para sa pormulasyon ay hinaluan ng fluorescent dye (amaranth), at ang NFRCS (Ch at Cp) ay inihanda ayon sa pamamaraang nabanggit kanina.Ang komposisyong HFFC na ginamit para sa pormulasyon ay hinaluan ng fluorescent dye (amaranth) at ang NFRCS (Ch at Cp) ay nakuha ayon sa nabanggit na pamamaraan.HFFCHFFCAng komposisyong HFFC na ginamit sa pormulasyon ay hinaluan ng fluorescent dye (Amaranth) at nakatanggap ng NFRCS (Ch at Cp), gaya ng nabanggit kanina.Ang mga manipis na bahagi ng NFRK ay pinutol mula sa mga nakuha na sample, inilagay sa mga glass slide, at tinakpan ng mga cover slip. Obserbahan ang mga inihandang slide sa ilalim ng fluorescent microscope gamit ang berdeng filter (310-380 nm). Ang mga imahe ay kinuha sa 4x magnification upang maunawaan ang mga ugnayan ng Ct at labis na deposisyon ng polimer sa Ct network.
Ang topograpiya ng ibabaw ng NFRCS Ch at Cp ay natukoy gamit ang isang atomic force microscope (AFM) na may ultra-sharp TESP cantilever sa tapping mode: 42 N/m, 320 kHz, ROC 2-5 nm, Bruker, Taiwan. Ang surface roughness ay natukoy sa pamamagitan ng root mean square (RMS) gamit ang software (Scanning Probe Image Processor). Iba't ibang lokasyon ng NFRCS ang ipinakita sa mga 3D na imahe upang suriin ang surface uniformity. Ang standard deviation ng score para sa isang partikular na lugar ay binibigyang kahulugan bilang surface roughness. Ang RMS equation ay ginamit upang masukat ang surface roughness ng NFRCS31.
Isinagawa ang mga pag-aaral batay sa FESEM gamit ang FESEM, SU8000, HI-0876-0003, Hitachi, Tokyo, upang maunawaan ang morpolohiya ng ibabaw ng Ch NFRCS at Cp NFRCS, na nagpakita ng mas mahusay na BCT kaysa sa Cm NFRCS. Isinagawa ang pag-aaral ng FESEM ayon sa pamamaraang inilarawan nina Zhao et al. 32 na may kaunting mga pagbabago. Ang NFRCS 20 hanggang 30 mg Ch NFRCS at Cp NFRCS ay hinaluan ng 20 µl ng 3.8% sodium citrate na hinaluan ng dugo ng daga. 20 μl ng 0.2 M CaCl2 ang idinagdag sa mga sample na ginamot sa dugo upang simulan ang coagulation at ang mga sample ay in-incubate sa temperatura ng silid sa loob ng 10 minuto. Bilang karagdagan, ang sobrang mga erythrocyte ay inalis mula sa ibabaw ng NFRCS sa pamamagitan ng pagbabanlaw gamit ang saline.
Ang mga kasunod na sample ay ginamot gamit ang 0.1% glutaraldehyde at pagkatapos ay pinatuyo sa isang hot air oven sa 37°C upang maalis ang kahalumigmigan. Ang mga pinatuyong sample ay binalutan at sinuri 32. Ang iba pang mga imahe na nakuha sa panahon ng pagsusuri ay ang pagbuo ng namuong dugo sa ibabaw ng mga indibidwal na hibla ng bulak, polymer deposition sa pagitan ng Ct, morpolohiya (hugis) ng erythrocyte, integridad ng namuong dugo, at morpolohiya ng erythrocyte sa presensya ng NFRCS. Ang mga hindi ginamot na lugar ng NFRCS at mga lugar ng NFRCS na ginamot ng Ch at Cp na na-incubate ng dugo ay ini-scan para sa mga elemental ion (sodium, potassium, nitrogen, calcium, magnesium, zinc, copper at selenium) 33. Paghambingin ang mga porsyento ng elemental ion sa pagitan ng mga ginamot at hindi ginamot na sample upang maunawaan ang akumulasyon ng elemental ion sa panahon ng pagbuo ng namuong dugo at ang homogeneity ng namuong dugo.
Ang kapal ng Cp HFFC surface coating sa ibabaw ng Ct ay natukoy gamit ang FESEM. Ang mga cross section ng Cp NFRCS ay pinutol mula sa balangkas at nilagyan ng sputter coating. Ang mga nagresultang sample ng sputter coating ay inobserbahan gamit ang FESEM at ang kapal ng surface coating ay sinukat 34, 35, 36.
Ang X-ray micro-CT ay nagbibigay ng high-resolution na 3D non-destructive imaging at nagbibigay-daan sa iyong pag-aralan ang panloob na istrukturang kaayusan ng NFRK. Gumagamit ang Micro-CT ng X-ray beam na dumadaan sa sample upang itala ang lokal na linear attenuation coefficient ng mga X-ray sa sample, na nakakatulong upang makakuha ng impormasyong morpolohikal. Ang panloob na lokasyon ng Ct sa Cp NFRCS at blood-treated Cp NFRCS ay sinuri sa pamamagitan ng micro-CT upang maunawaan ang kahusayan sa pagsipsip at pamumuo ng dugo sa presensya ng NFRCS37,38,39. Ang mga 3D na istruktura ng mga sample ng blood-treated at untreated Cp NFRCS ay muling binuo gamit ang micro-CT (V|tome|x S240, Phoenix, Germany). Gamit ang VG STUDIO-MAX software na bersyon 2.2, maraming X-ray na imahe ang kinuha mula sa iba't ibang anggulo (mainam na 360° coverage) upang bumuo ng mga 3D na imahe para sa NFRCS. Ang nakolektang data ng projection ay muling binuo sa mga 3D volumetric na imahe gamit ang kaukulang simpleng 3D ScanIP Academic software.
Bukod pa rito, upang maunawaan ang distribusyon ng namuong dugo, 20 µl ng premixed citrated blood at 20 µl ng 0.2 M CaCl2 ang idinagdag sa NFRCS upang simulan ang pamumuo ng dugo. Ang mga inihandang sample ay hinayaan hanggang tumigas. Ang ibabaw ng NFRK ay ginamitan ng 0.5% glutaraldehyde at pinatuyo sa isang hot air oven sa 30–40°C sa loob ng 30 minuto. Ang namuong dugo na nabuo sa NFRCS ay ini-scan, muling binuo, at isang 3D na imahe ng namuong dugo ang nakita sa visualization.
Isinagawa ang mga antibacterial assay sa Cp NFRCS (pinakamahusay kumpara sa Ch NFRCS) gamit ang naunang inilarawang pamamaraan na may kaunting mga pagbabago. Ang antibacterial activity ng Cp NFRCS at Cp HFFC ay natukoy gamit ang tatlong magkakaibang test microorganisms [S.aureus (gram-positive bacteria), E.coli (gram-negative bacteria) at white Candida (C.albicans)] na tumutubo sa agar sa mga Petri dish sa isang incubator. Pantay na i-inoculate ang 50 ml ng diluted bacterial culture suspension sa konsentrasyon na 105-106 CFU ml-1 papunta sa agar medium. Ibuhos ang medium sa isang Petri dish at hayaang tumigas ito. Gumawa ng mga well sa ibabaw ng agar plate upang punuin ng HFFC (3 well para sa HFFC at 1 para sa negative control). Magdagdag ng 200 µl HFFC sa 3 well at 200 µl pH 7.4 PBS sa ika-4 na well. Sa kabilang panig ng petri dish, maglagay ng 12 mm Cp NFRCS disk sa solidified agar at basain ito ng PBS (pH 7.4). Ang mga tabletang Ciprofloxacin, ampicillin at fluconazole ay itinuturing na mga pamantayang sanggunian para sa Staphylococcus aureus, Escherichia coli at Candida albicans. Sukatin nang manu-mano ang zone of inhibition at kumuha ng digital na imahe ng zone of inhibition.
Matapos ang pag-apruba ng institusyonal na etikal, ang pag-aaral ay isinagawa sa Kasturba Medical College of Education and Research sa Manipal, Karnataka, sa timog India. Ang in vitro TEG experimental protocol ay sinuri at inaprubahan ng Institutional Ethics Committee ng Kasturba Medical College, Manipal, Karnataka (IEC: 674/2020). Ang mga kalahok ay kinuha mula sa mga boluntaryong donor ng dugo (edad 18 hanggang 55) mula sa blood bank ng ospital. Bukod pa rito, isang informed consent form ang nakuha mula sa mga boluntaryo para sa pagkolekta ng mga sample ng dugo. Ginamit ang Native TEG (N-TEG) ​​upang pag-aralan ang epekto ng Cp HFFC formulation sa whole blood na hinaluan ng sodium citrate. Ang N-TEG ay malawakang kinikilala para sa papel nito sa point-of-care resuscitation, na lumilikha ng mga problema para sa mga clinician dahil sa potensyal para sa klinikal na makabuluhang pagkaantala sa mga resulta (mga routine coagulation test). Ang N-TEG analysis ay isinagawa gamit ang whole blood. Ang informed consent at detalyadong medical history ay nakuha mula sa lahat ng kalahok. Hindi isinama sa pag-aaral ang mga kalahok na may mga komplikasyon sa hemostatic o thrombotic tulad ng pagbubuntis/postpartum o sakit sa atay. Ang mga kalahok na umiinom ng mga gamot na nakakaapekto sa coagulation cascade ay hindi rin isinama sa pag-aaral. Ang mga pangunahing pagsusuri sa laboratoryo (hemoglobin, prothrombin time, activated thromboplastin at platelet count) ay isinagawa sa lahat ng kalahok ayon sa mga karaniwang pamamaraan. Tinutukoy ng N-TEG ang viscoelasticity ng namuong dugo, initial clot structure, particle interaction, clot strengthening, at clot lysis. Ang N-TEG analysis ay nagbibigay ng graphical at numerical data sa mga kolektibong epekto ng ilang cellular elements at plasma. Ang N-TEG analysis ay isinagawa sa dalawang magkaibang volume ng Cp HFFC (10 µl at 50 µl). Bilang resulta, 1 ml ng whole blood na may citric acid ay idinagdag sa 10 μl ng Cp HFFC. Magdagdag ng 1 ml (Cp HFFC + citrated blood), 340 µl mixed blood sa 20 µl 0.2 M CaCl2 na naglalaman ng TEG dish. Pagkatapos nito, ang mga TEG dish ay inilagay sa TEG® 5000, US upang sukatin ang R, K, alpha angle, MA, G, CI, TPI, EPL, LY 30% ng mga sample ng dugo sa presensya ng Cp HFFC41.
Ang protokol ng pag-aaral na in vivo ay sinuri at inaprubahan ng Institutional Animal Ethics Committee (IAEC), Kasturba School of Medicine, Manipal Institute of Higher Education, Manipal (IAEC/KMC/69/2020). Lahat ng eksperimento sa hayop ay isinagawa alinsunod sa mga rekomendasyon ng Committee for the Control and Supervision of Animal Experimentation (CPCSEA). Lahat ng pag-aaral na in vivo NFRCS (2 × 2 cm2) ay isinagawa sa mga babaeng Wistar rats (may bigat na 200 hanggang 250 g). Lahat ng hayop ay na-acclimatize sa temperaturang 24-26°C, ang mga hayop ay may malayang access sa karaniwang pagkain at tubig ad libitum. Lahat ng hayop ay random na hinati sa iba't ibang grupo, ang bawat grupo ay binubuo ng tatlong hayop. Lahat ng pag-aaral ay isinagawa alinsunod sa Animal Studies: Report of In Vivo Experiments 43. Bago ang pag-aaral, ang mga hayop ay binigyan ng pampamanhid sa pamamagitan ng intraperitoneal (ip) na pagbibigay ng pinaghalong 20-50 mg ng ketamine (bawat 1 kg ng timbang ng katawan) at 2-10 mg ng xylazine (bawat 1 kg ng timbang ng katawan). Pagkatapos ng pag-aaral, ang dami ng pagdurugo ay kinalkula sa pamamagitan ng pagsusuri sa pagkakaiba sa pagitan ng paunang at pangwakas na timbang ng mga sample, at ang average na halaga na nakuha mula sa tatlong pagsusuri ay kinuha bilang dami ng pagdurugo ng sample.
Ang modelo ng pagputol ng buntot ng daga ay ipinatupad upang maunawaan ang potensyal ng NFRCS na baguhin ang pagdurugo sa trauma, labanan, o aksidente sa trapiko (modelo ng pinsala). Putulin ang 50% ng buntot gamit ang talim ng scalpel at ilagay sa hangin sa loob ng 15 segundo upang matiyak ang normal na pagdurugo. Bukod pa rito, ang mga sample ng pagsubok ay inilagay sa buntot ng isang daga sa pamamagitan ng paglalapat ng presyon (Ct, Cs, Ch NFRCS at Cp NFRCS). Ang pagdurugo at PCT ay naiulat para sa mga specimen ng pagsubok (n ​​= 3)17,45.
Ang bisa ng pagkontrol ng presyon ng NFRCS sa labanan ay sinuri sa isang modelo ng superficial femoral artery. Ang femoral artery ay inilalantad, tinutusok gamit ang 24G trocar, at dinudugo sa loob ng 15 segundo. Matapos maobserbahan ang hindi makontrol na pagdurugo, ang test specimen ay inilalagay sa lugar ng tusok na may presyon na inilapat. Kaagad pagkatapos mailapat ang test sample, ang oras ng pamumuo ay itinala at ang hemostatic efficiency ay naobserbahan sa susunod na 5 minuto. Ang parehong pamamaraan ay inulit gamit ang Cs at Ct46.
Iminungkahi nina Dowling et al. 47 ang isang modelo ng pinsala sa atay upang masuri ang potensyal na hemostatic ng mga hemostatic na materyales sa konteksto ng pagdurugo sa loob ng operasyon. Itinala ang BCT para sa mga sample ng Ct (negatibong kontrol), Cs framework (positibong kontrol), mga sample ng Ch NFRCS, at mga sample ng Cp NFRCS. Ang suprahepatic vena cava ng daga ay inilantad sa pamamagitan ng pagsasagawa ng median laparotomy. Pagkatapos nito, ang distal na bahagi ng kaliwang lobe ay ginupit gamit ang gunting. Gumawa ng hiwa sa atay gamit ang isang scalpel blade at hayaang dumugo ito nang ilang segundo. Ang mga sample ng pagsubok ng Ch NFRCS at Cp NFRCS ay inilagay sa nasirang ibabaw nang walang anumang positibong presyon at itinala ang BCT. Pagkatapos ay naglapat ng presyon ang control group (Ct) na sinundan ng Cs 30 s47 nang hindi nababasag ang pinsala.
Isinagawa ang mga in vivo wound healing assay gamit ang isang excisional wound model upang suriin ang mga katangian ng paggaling ng sugat ng mga nabuong polymer-based NFRCS. Ang mga modelo ng excisional wound ay pinili at isinagawa ayon sa mga naunang nailathalang pamamaraan na may kaunting mga pagbabago19,32,48. Lahat ng hayop ay binigyan ng pampamanhid gaya ng naunang inilarawan. Gumamit ng biopsy punch (12 mm) upang gumawa ng isang pabilog at malalim na hiwa sa balat ng likod. Ang mga inihandang bahagi ng sugat ay nilagyan ng Cs (positive control), Ct (kinikilala na ang mga cotton pad ay nakakasagabal sa paggaling), Ch NFRCS at Cp NFRCS (experimental group) at isang negatibong kontrol nang walang anumang paggamot. Sa bawat araw ng pag-aaral, ang lawak ng sugat ay sinukat sa lahat ng daga. Gumamit ng digital camera upang kumuha ng larawan ng bahagi ng sugat at maglagay ng bagong bendahe. Ang porsyento ng pagsasara ng sugat ay sinukat gamit ang sumusunod na pormula:
Batay sa porsyento ng pagsasara ng sugat sa ika-12 araw ng pag-aaral, ang balat ng daga ng pinakamahusay na grupo ay tinanggal ((Cp NFRCS) at ang control group) at pinag-aralan sa pamamagitan ng H&E staining at Masson's trichrome staining. Batay sa porsyento ng pagsasara ng sugat sa ika-12 araw ng pag-aaral, ang balat ng daga ng pinakamahusay na grupo ay tinanggal ((Cp NFRCS) at ang control group) at pinag-aralan sa pamamagitan ng H&E staining at Masson's trichrome staining.Batay sa porsyento ng pagsara ng sugat sa ika-12 araw ng pag-aaral, ang balat ng mga daga ng pinakamahusay na grupo ((Cp NFRCS) at ang control group) ay inalis at sinuri sa pamamagitan ng paglamlam gamit ang hematoxylin-eosin at Masson's trichrome.根据研究第12天的伤口闭合百分比，切除最佳组((Cp NFRCS)和对照组)的大鼠皮肤，进行H&E染色和Masson三色染色研究。根据研究第12天的伤口闭合百分比，切除最佳组((Cp NFRCS)和对照组)的大鼠皮肤，进行H&E染色和眳组）Ang mga daga sa pinakamahusay na grupo ((Cp NFRCS) at mga control group) ay tinanggalan ng bahagi para sa hematoxylin-eosin staining at Masson's trichrome staining batay sa porsyento ng pagsasara ng sugat sa ika-12 araw ng pag-aaral.Ang ipinatupad na pamamaraan ng paglamlam ay isinagawa ayon sa mga naunang inilarawang pamamaraan49,50. Sa madaling salita, pagkatapos ng pag-aayos sa 10% formalin, ang mga sample ay inalis sa tubig gamit ang isang serye ng mga graded alcohol. Gumamit ng microtome upang makakuha ng manipis na mga seksyon (5 µm ang kapal) ng tinanggal na tisyu. Ang manipis na sunud-sunod na mga seksyon ng mga kontrol at Cp NFRCS ay ginamot gamit ang hematoxylin at eosin upang pag-aralan ang mga pagbabago sa histopathological. Ginamit ang Masson's trichrome stain upang matukoy ang pagbuo ng mga collagen fibril. Ang mga resultang nakuha ay bulag na pinag-aralan ng mga pathologist.
Ang katatagan ng mga sample ng Cp NFRCS ay pinag-aralan sa temperatura ng silid (25°C ± 2°C/60% RH ± 5%) sa loob ng 12 buwan51. Ang Cp NFRCS (pagbabago ng kulay sa ibabaw at paglaki ng mikrobyo) ay biswal na siniyasat at sinubukan para sa resistensya sa pagkaluma at BCT ayon sa mga pamamaraan sa itaas na nakabalangkas sa seksyon ng Mga Materyales at Paraan.
Ang kakayahang iskala at muling paggawa ng Cp NFRCS ay sinuri sa pamamagitan ng paghahanda ng Cp NFRCS na may sukat na 15 × 15 cm2. Bukod pa rito, 30 mg na mga sample (n = 5) ang kinuha mula sa iba't ibang mga praksyon ng Cp NFRCS at ang BCT ng mga pinag-aralang sample ay sinuri gaya ng nailarawan kanina sa seksyon ng Mga Paraan.
Sinubukan naming bumuo ng iba't ibang hugis at istruktura gamit ang mga komposisyon ng Cp NFRCS para sa iba't ibang aplikasyong biomedikal. Kabilang sa mga ganitong hugis o kumpigurasyon ang mga conical swab para sa pagdurugo ng ilong, mga pamamaraan sa ngipin, at mga cylindrical swab para sa pagdurugo ng ari.
Ang lahat ng set ng datos ay ipinahayag bilang mean ± standard deviation at sinuri gamit ang ANOVA gamit ang Prism 5.03 (GraphPad, San Diego, CA, USA) na sinundan ng Bonferroni's multiple comparisons test (*p<0.05).
Ang lahat ng mga pamamaraang isinagawa sa mga pag-aaral sa tao ay naaayon sa mga pamantayan ng Institute at ng National Research Council, pati na rin sa Deklarasyon ng Helsinki 1964 at mga kasunod na susog nito, o mga katulad na pamantayang etikal. Ang lahat ng kalahok ay ipinaalam tungkol sa mga katangian ng pag-aaral at ang boluntaryong katangian nito. Ang datos ng kalahok ay nananatiling kumpidensyal kapag nakolekta na. Ang in vitro TEG experimental protocol ay sinuri at inaprubahan ng Institutional Ethics Committee ng Kasturba Medical College, Manipal, Karnataka (IEC: 674/2020). Pumirma ang mga boluntaryo ng informed consent upang mangolekta ng mga sample ng dugo.
Ang lahat ng mga pamamaraang isinagawa sa mga pag-aaral sa hayop ay isinagawa alinsunod sa Kastuba Faculty of Medicine, Manipal Institute of Higher Education, Manipal (IAEC/KMC/69/2020). Ang lahat ng mga eksperimento sa hayop na idinisenyo ay isinagawa alinsunod sa mga alituntunin ng Committee for the Control and Supervision of Animal Experimentation (CPCSEA). Sinusunod ng lahat ng mga may-akda ang mga alituntunin ng ARRIVE.
Ang FTIR spectra ng lahat ng NFRCS ay sinuri at inihambing sa chitosan spectrum na ipinapakita sa Figure 2A. Mga katangiang spectral peak ng chitosan (naitala) sa 3437 cm-1 (OH at NH stretching, overlap), 2945 at 2897 cm-1 (CH stretching), 1660 cm-1 (NH2 strain), 1589 cm-1 (N–H bending), 1157 cm-1 (bridge stretch O-), 1067 cm-1 (stretch C–O, secondary hydroxyl), 993 cm-1 (stretch CO, Bo-OH) 52.53.54. Ipinapakita ng Supplementary Table S1 ang mga halaga ng FTIR NFRCS absorption spectrum para sa chitosan (reporter), purong chitosan, Cm, Ch, at Cp. Ang FTIR spectra ng lahat ng NFRCS (Cm, Ch at Cp) ay nagpakita ng parehong katangiang absorption band gaya ng purong chitosan nang walang anumang makabuluhang pagbabago (Fig. 2A). Kinumpirma ng mga resulta ng FTIR ang kawalan ng kemikal o pisikal na interaksyon sa pagitan ng mga polimer na ginamit upang bumuo ng NFRCS, na nagpapahiwatig na ang mga polimer na ginamit ay hindi gumagalaw.
In vitro na karakterisasyon ng Cm NFRCS, Ch NFRCS, Cp NFRCS at Cs. (A) ay kumakatawan sa pinagsamang FTIR spectra ng mga komposisyon ng chitosan at Cm NFRCS, Ch NFRCS at Cp NFRCS sa ilalim ng compression. (B) a) Whole blood uptake rate ng NFRCS Cm, Ch, Cp, at Cg (n = 3); Ang mga Ct sample ay nagpakita ng mas mataas na BAR dahil ang cotton swab ay may mas mataas na absorption efficiency; b) Dugo pagkatapos ng blood absorption Ilustrasyon ng hinihigop na sample. Graphical na representasyon ng BCT ng test sample C (Ang Cp NFRCS ang may pinakamahusay na BCT (15 s, n = 3)). Ang datos sa C, D, E, at G ay ipinakita bilang mean ± SD, at ang mga error bar ay kumakatawan sa SD, ***p < 0.0001. Ang datos sa C, D, E, at G ay ipinakita bilang mean ± SD, at ang mga error bar ay kumakatawan sa SD, ***p < 0.0001. Данные в C, D, E и G представлены как среднее ± стандартное отклонение, а планки погрешностей представляют сталнд, *** <0,0001. Ang datos sa C, D, E, at G ay ipinapakita bilang mean ± standard deviation, at ang mga error bar ay kumakatawan sa standard deviation, ***p<0.0001. C, D, E 和G 中的数据显示为平均值± SD，误差线代表SD，***p < 0.0001. C, D, E 和G 中的数据显示为平均值± SD，误差线代表SD，***p < 0.0001. Данные в C, D, E и G показаны как среднее значение ± стандартное отклонение, планки погрешностей представляют сталнд, *** <0,0001. Ang datos sa C, D, E, at G ay ipinapakita bilang mean ± standard deviation, ang mga error bar ay kumakatawan sa standard deviation, ***p<0.0001.