Co-dhèanamhan bith-ghnìomhach a chruthaicheas filmichean nanophorous agus nanothiugh airson tagraidhean bith-mheidigeach

Tapadh leibh airson tadhal air Nature.com. Tha taic CSS cuibhrichte aig an dreach brabhsair a tha thu a’ cleachdadh. Airson an eòlas as fheàrr, tha sinn a’ moladh gun cleachd thu brabhsair ùraichte (no gun cuir thu dheth Modh Co-chòrdalachd ann an Internet Explorer). Aig an aon àm, gus dèanamh cinnteach à taic leantainneach, nì sinn an làrach-lìn gun stoidhlichean agus JavaScript.
’S e bleeding neo-riaghlaichte aon de na prìomh adhbharan bàis. Le bhith a’ coileanadh hemostasis luath, bidh an cuspair beò mar chiad chobhair rè sabaid, tubaistean trafaic, agus obrachaidhean lughdachadh bàis. Faodaidh sgafaill co-dhèanta neartaichte le snàithleach nanophorous (NFRCS) a tha air a thoirt bho cho-dhèanamh film hemostatic sìmplidh (HFFC) mar ìre leantainneach hemostasis a bhrosnachadh agus a neartachadh. Tha leasachadh an NFRCS stèidhichte air dealbhadh sgiath an dearcan-nathrach. Tha structar sgiath an dearcan-nathrach air a dhèanamh suas de sgiathan transverse agus longitudinal, agus tha na membranan sgiath ceangailte ri chèile gus ionracas a’ mhicro-structair a chumail suas. Bidh HFFC a’ còmhdach uachdar an t-snàithleach gu cothromach le film de thiugh nanometer agus a’ ceangal an tiugh cotan air a sgaoileadh air thuaiream (Ct) (ìre sgapte) gus structar nanophorous a chruthachadh. Bidh measgachadh de ìrean leantainneach agus sgapte a’ lughdachadh cosgais an toraidh deich uiread an taca ri toraidhean a tha rim faighinn gu malairteach. Faodar NFRCS atharraichte (tampons no bannan-dùirn) a chleachdadh ann an grunn thagraidhean bith-mheidigeach. Tha sgrùdaidhean in vivo air tighinn chun cho-dhùnaidh gu bheil an Cp NFRCS a chaidh a leasachadh a’ piobrachadh agus a’ neartachadh a’ phròiseis coagulation aig làrach an tagraidh. Faodaidh NFRCS an àrainneachd bheag atharrachadh agus obrachadh aig an ìre cheallach air sgàth a structair nanoporous a’ leantainn gu slànachadh lotan nas fheàrr anns a’ mhodail lotan air an gearradh a-mach.
Faodaidh fuil gun smachd rè sabaid, rè suidheachaidhean rè obair-lannsa agus èiginn a bhith na chunnart mòr do bheatha an leòintich1. Bidh na cumhaichean sin a’ leantainn gu àrdachadh iomlan ann an strì an aghaidh shoithichean fala iomaill, a’ leantainn gu clisgeadh fala. Thathas den bheachd gu bheil ceumannan iomchaidh gus smachd a chumail air fuil rè agus às deidh lannsaireachd a’ bagairt beatha2,3. Bidh milleadh air soithichean mòra ag adhbhrachadh call mòr fala, agus mar thoradh air sin bidh ìre bàsmhorachd ≤ 50% ann an sabaid agus 31% rè lannsaireachd1. Bidh call mòr fala ag adhbhrachadh lùghdachadh ann am meud a’ chuirp, a lughdaicheas toradh cridhe. Bidh àrdachadh ann an strì an aghaidh shoithichean fala iomaill iomlan agus lagachadh mean air mhean air microcirculation ag adhbhrachadh hypoxia anns na buill-bodhaig taic-beatha. Faodaidh clisgeadh fala tachairt ma leanas an suidheachadh às aonais eadar-theachd èifeachdach1,4,5. Am measg dhuilgheadasan eile tha adhartas hypothermia agus acidosis metabolach, a bharrachd air eas-òrdugh coagulation a chuireas bacadh air a’ phròiseas coagulation. Tha clisgeadh fala cruaidh co-cheangailte ri cunnart bàis nas àirde6,7,8. Ann an clisgeadh ìre III (adhartach), tha tar-fhilleadh fala riatanach airson mairsinn euslaintich rè tinneas agus bàsmhorachd rè obair-lannsa agus às deidh obair-lannsa. Gus faighinn thairis air na suidheachaidhean cunnartach beatha gu h-àrd, tha sinn air sgafaill co-dhèanta neartaichte le snàithleach nanoporous (NFRCS) a leasachadh a bhios a’ cleachdadh dùmhlachd polymer as ìsle (0.5%) le bhith a’ cleachdadh measgachadh de polymers hemostatic soluble in water.
Le bhith a’ cleachdadh neartachadh snàithleach, faodar toraidhean cosg-èifeachdach a leasachadh. Tha na snàithleanan air an rèiteachadh air thuaiream coltach ri structar sgiath dealan-dè, air an cothromachadh leis na stiallan còmhnard is dìreach air na sgiathan. Bidh na féithean transverse agus fadail den sgiath a’ conaltradh ris a’ membran sgiath (Figear 1). Tha NFRCS air a dhèanamh suas de Ct neartaichte mar shiostam sgafaill le neart corporra is meacanaigeach nas fheàrr (Figear 1). Air sgàth cho saor ‘s a tha e agus cho èifeachdach sa tha e a bhith a’ dèanamh obair-ciùird, is fheàrr le lannsairean tomhasairean snàth cotan (Ct) a chleachdadh rè obrachaidhean agus dreasaichean. Mar sin, leis na iomadh buannachd a th’ ann, a’ gabhail a-steach > 90% ceallalòs criostalach (a chuireas ri gnìomhachd hemostatic), chaidh Ct a chleachdadh mar shiostam cnàimheach NFRCS9,10. Mar sin, leis na iomadh buannachd a th’ ann, a’ gabhail a-steach > 90% ceallalòs criostalach (a chuireas ri gnìomhachd hemostatic), chaidh Ct a chleachdadh mar shiostam cnàimheach NFRCS9,10. Следовательно, учитывая его многочисленные преимущества, anns an ùine ghoirid > 90% кристалическолююыы (участвует в повышении гемостатической активности), Ct использовали в качестве скелетной систем9,1 NFRCS. Mar sin, leis na mòran bhuannachdan a th’ ann, a’ gabhail a-steach >90% ceallalòs criostalach (a tha an sàs ann am barrachd gnìomhachd hemostatic), chaidh Ct a chleachdadh mar shiostam cnàimheach NFRCS9,10.因此,考虑到它的多重益处, 包括> 90% nas àirde na an àbhaist;被用作NFRCS9,10的骨架系统.因此,考虑到它的多重益处,包括> 90%Mar sin, leis na mòran bhuannachdan a th’ ann, nam measg còrr is 90% ceallalòs criostalach (a chuidicheas le bhith a’ neartachadh gnìomhachd hemostatic), chaidh Ct a chleachdadh mar sgafaill airson NFRCS9,10.Chaidh Ct a chòmhdach gu h-uachdar (chaidh cruthachadh film nano-tiugh fhaicinn) agus chaidh a cheangal ri chèile le co-dhèanamh film hemostatic (HFFC). Bidh HFFC ag obair mar matrigel, a’ cumail Ct air a chuir air thuaiream còmhla. Bidh an dealbhadh a chaidh a leasachadh a’ gluasad cuideam taobh a-staigh na h-ìre sgapte (a’ neartachadh snàithleanan). Tha e duilich structaran nanoporous fhaighinn le neart meacanaigeach math a’ cleachdadh dùmhlachdan polymer as ìsle. ​​A bharrachd air an sin, chan eil e furasta diofar mholltairean a ghnàthachadh airson diofar thagraidhean bith-mheidigeach.
Tha an dealbh a’ sealltainn diagram de dhealbhadh NFRCS stèidhichte air structar sgiath nathair-dè (A). Tha an ìomhaigh seo a’ sealltainn coimeas eadar structar sgiath nathair-dè (tha na féithean trasnaidh is fadail den sgiath ceangailte ri chèile) agus dealbh-mhicrograf thar-roinneil de Cp NFRCS (B). Riochdachadh sgemataigeach de NFRCS.
Chaidh NFRCan a leasachadh a’ cleachdadh HFFC mar ìre leantainneach gus dèiligeadh ris na cuingealachaidhean gu h-àrd. Tha HFFC air a dhèanamh suas de dhiofar phoileimeirean hemostatic a bhios a’ cruthachadh film, nam measg chitosan (mar am prìomh phoileimeir hemostatic) le methylcellulose (MC), hydroxypropyl methylcellulose (HPMC 50 cp) agus polyvinyl alcohol (PVA)) (125 kDa) mar phoileimeir taice a bhrosnaicheas cruthachadh thrombus. Leasaich cur-ris polyvinylpyrrolidine K30 (PVP K30) comas gabhail a-steach taiseachd an NFRCS. Chaidh polyethylene glycol 400 (PEG 400) a chur ris gus ceangal-tarsainn poileimeir a leasachadh ann am measgachaidhean poileimeir ceangailte. Chaidh trì diofar cho-dhèanamh hemostatic HFFC (Cm HFFC, Ch HFFC agus Cp HFFC), is iad sin chitosan le MC (Cm), chitosan le HPMC (Ch), agus chitosan le PVA (Cp), a chur an sàs ann an Ct. Tha diofar sgrùdaidhean caractarachaidh in vitro agus in vivo air dearbhadh gu bheil gnìomhachd hemostatic agus slànachaidh lotan aig NFRCS. Faodar stuthan co-dhèanta a tha air an tabhann le NFRCS a chleachdadh gus diofar sheòrsaichean sgafaill a ghnàthachadh gus coinneachadh ri feumalachdan sònraichte.
A bharrachd air an sin, faodar NFRCS atharrachadh mar bhanna no rolla gus an raon leòn gu lèir de na buill ìochdarach agus pàirtean eile den bhodhaig a chòmhdach. Gu sònraichte airson leòntan buill-bodhaig sabaid, faodar dealbhadh an NFRCS a chaidh a dhealbhadh atharrachadh gu leth-ghàirdean no cas slàn (Figear a bharrachd S11). Faodar an NFRCS a dhèanamh na chòmhlan-dùirn le glaodh clò, a dh'fhaodar a chleachdadh gus stad a chuir air bleeding bho leòntan dùirn fèin-mharbhadh dona. Is e ar prìomh amas NFRCS a leasachadh le cho beag de phoilimear 's as urrainn a dh'fhaodar a lìbhrigeadh gu sluagh mòr (fo loidhne na bochdainn) agus a dh'fhaodar a chuir ann am pasgan ciad-chobhair. Le dealbhadh sìmplidh, èifeachdach agus eaconamach, tha NFRCS a’ toirt buannachd do choimhearsnachdan ionadail agus faodaidh buaidh chruinneil a bhith aige.
Chaidh chitosan (cuideam moileciuil 80 kDa) agus amaranth a cheannach bho Merck, na h-Innseachan. Chaidh hydroxypropyl methylcellulose 50 Cp, polyethylene glycol 400 agus methylcellulose a cheannach bho Loba Chemie Pvt. LLC, Mumbai. Chaidh polyvinyl alcohol (cuideam moileciuil 125 kDa) (87-90% air a hydrolysis) a cheannach bho National Chemicals, Gujarat. Chaidh polyvinylpyrrolidine K30 a cheannach bho Molychem, Mumbai, chaidh swaban sterile a cheannach bho Ramaraju Surgery Cotton Mills Ltd., Tamil Nadu, le uisge Milli Q (siostam glanaidh uisge Direct-Q3, Merck, na h-Innseachan) mar an giùlan.
Chaidh NFRCS a leasachadh le bhith a’ cleachdadh dòigh lyophilization11,12. Chaidh a h-uile co-dhèanamh HFFC (Clàr 1) ullachadh le bhith a’ cleachdadh inneal-measgachaidh meacanaigeach. Ullaich fuasgladh 0.5% de chitosan le bhith a’ cleachdadh 1% searbhag aiseatach ann an uisge le bhith ga mheasgachadh gu leantainneach aig 800 rpm air inneal-measgachaidh meacanaigeach. Chaidh cuideam mionaideach a’ phoileimeir luchdaichte a tha air a chomharrachadh ann an Clàr 1 a chur ris an fhuasgladh chitosan agus a mheasgachadh gus an deach fuasgladh poileimeir soilleir fhaighinn. Chaidh PVP K30 agus PEG 400 a chur ris a’ mheasgachadh a thig às anns na meudan a tha air an comharrachadh ann an Clàr 1, agus lean am measgachadh gus an deach fuasgladh poileimeir slaodach soilleir fhaighinn. Chaidh amar an fhuasglaidh poileimeir a thig às a seo a sonicachadh airson 60 mionaid gus builgeanan èadhair glaiste a thoirt air falbh bhon mheasgachadh poileimeir. Mar a chithear ann am Figear Taiceil S1(b), chaidh Ct a sgaoileadh gu cothromach anns gach tobar de phlàta 6-tobar (molltair) le 5 ml de HFFC air a chur ris.
Chaidh am plàta sia-tobair a shònachadh airson 60 mionaid gus fliuchadh agus sgaoileadh èideadh HFFC fhaighinn anns an lìonra Ct. An uairsin reothadh am plàta sia-tobair aig -20°C airson 8-12 uairean a thìde. Chaidh na plàtaichean reòta a liofileachadh airson 48 uairean a thìde gus diofar fhoirmlean de NFRCS fhaighinn. Tha an aon dhòigh-obrach air a chleachdadh gus diofar chumaidhean agus structaran a thoirt gu buil, leithid tampons no tampons siolandair, no cumadh sam bith eile airson diofar thagraidhean.
Tha chitosan (80 kDa) (3%), air a thomhas gu ceart, air a sgaoileadh ann an 1% searbhag aiseatach le bhith a’ cleachdadh inneal-measgachaidh magnetach. Chaidh 1% PEG 400 a chur ris an fhuasgladh chitosan a thig às agus chaidh a mheasgachadh airson 30 mionaid. Dòirt an fhuasgladh a thig às a sin a-steach do shoitheach ceàrnagach no ceart-cheàrnach agus reothadh aig -80°C airson 12 uair a thìde. Chaidh sampallan reòta a liofileachadh airson 48 uair a thìde gus Cs13 porous fhaighinn.
Chaidh deuchainnean a dhèanamh air an NFRCS a chaidh a leasachadh a’ cleachdadh speactroscopaidh infridhearg cruth-atharrachaidh Fourier (FTIR) (Shimadzu 8400 s FTIR, Tokyo, Iapan) gus dearbhadh a dhèanamh air co-chòrdalachd ceimigeach chitosan le poileamairean eile14,15. Fhuaireadh speactra FTIR (leud an raoin speactramach bho 400 gu 4000 cm-1) de na sampallan uile a chaidh a dhearbhadh le bhith a’ dèanamh 32 scan.
Chaidh an ìre gabhail fala (BAR) airson a h-uile foirmle a mheasadh a’ cleachdadh an dòigh a mhìnich Chen et al. 16 le beagan atharrachaidhean. Chaidh na NFRKan a chaidh a leasachadh de na co-dhèanamhan uile a thiormachadh ann an àmhainn falamh aig 105°C thar oidhche gus fuigheall fuigheall a thoirt air falbh. Chaidh 30 mg NFRCS (cuideam tùsail an t-sampall – W0) agus 30 mg Ct (smachd dearbhach) a chur ann an soithichean fa leth anns an robh ro-mheasgachadh de 3.8% sodium citrate. Aig amannan ro-shuidhichte, ie 5, 10, 20, 30, 40 agus 60 diogan, chaidh na NFRCS a thoirt air falbh agus chaidh na h-uachdaran aca a ghlanadh de fhuil gun ghabhail a-steach le bhith a’ cur nan sampallan air Ct airson 30 diogan. Chaidh beachdachadh air cuideam deireannach na fala a chaidh a ghabhail a-steach le NFRCS 16 (W1) aig gach àm. Obraich a-mach ceudad BAR a’ cleachdadh na foirmle a leanas:
Chaidh ùine dòrtadh fala (BCT) a dhearbhadh mar a chaidh aithris le Wang et al. 17 . Chaidh an ùine a dh’ fheumadh fuil slàn (fuil radain air a measgachadh ro-làimh le 3.8% sodium citrate) dòrtadh an làthair NFRCS obrachadh a-mach mar BCT an t-sampall deuchainn. Chaidh na diofar phàirtean NFRCS (30 mg) a chur ann am fiolan le caip sgriubha 10 ml agus a ghoir aig 37°C. Chaidh fuil (0.5 ml) a chur ris a’ fhiol agus chaidh 0.3 ml de 0.2 M CaCl2 a chur ris gus dòrtadh fala a ghnìomhachadh. Mu dheireadh, tionndaidh am fiol bun os cionn a h-uile 15 diogan (suas ri 180°) gus an tèid dòrtadh daingeann a chruthachadh. Tha BCT an t-sampall air a thomhas leis an àireamh de fhiolan tionndaidh 17,18. Stèidhichte air BCT, chaidh dà cho-dhèanamh as fheàrr bho NFRCS Cm, Ch agus Cp a thaghadh airson tuilleadh sgrùdaidhean caractarachaidh.
Chaidh BCT de cho-dhèanamh Ch NFRCS agus Cp NFRCS a dhearbhadh le bhith a’ cur an gnìomh an dòigh a mhìnich Li et al. 19. Cuir 15 x 15 mm2 Ch NFRCS, Cp NFRCS, agus Cs (smachd deimhinneach) ann an soithichean Petri fa leth (37 °C). Chaidh fuil anns a bheil 3.8% sodium citrate a mheasgachadh le 0.2 M CaCl2 ann an co-mheas toirt 10:1 gus am pròiseas dòrtadh fala a thòiseachadh. Chaidh 20 µl de mheasgachadh fala radain 0.2 M CaCl2 a chur air uachdar an t-sampall agus a chur ann am mias Petri falamh. B’ e an smachd fuil a chaidh a dhòrtadh a-steach do shoithichean Petri falamh às aonais Ct. Aig amannan stèidhichte de 0, 3, agus 5 mionaidean, stad dòrtadh le bhith a’ cur 10 ml de dh’uisge dì-ionichte (DI) ris an sampall anns a bheil am mias gun a bhith a’ cur dragh air a’ chlot. Bidh erythrocytes neo-dhlùthaichte (erythrocytes) a’ faighinn hemolysis an làthair uisge dì-ionichte agus a’ leigeil ma sgaoil haemoglobin. Chaidh haemoglobin aig diofar amannan (HA(t)) a thomhas aig 540 nm (haemoglobin λmax) a’ cleachdadh speactrofotomeatair UV-Vis. Chaidh gabhail a-steach iomlan haemoglobin (AH(0)) ann an 0 mionaid de 20 µl de fhuil ann an 10 ml de dh’uisge dì-ionichte a ghabhail mar inbhe iomraidh. Chaidh gabhail a-steach coimeasach haemoglobin (RHA) de fhuil chòmhdaichte obrachadh a-mach bhon cho-mheas HA(t)/HA(0) a’ cleachdadh an aon bhaidse de fhuil.
Le bhith a’ cleachdadh inneal-anailis inneach (Texture Pro CT V1.3 Build 15, Brookfield, USA), chaidh feartan greamachaidh NFRK ri clò millte a dhearbhadh. Brùth mias siolandair le bonn fosgailte an aghaidh taobh a-staigh craiceann na muice (às aonais an t-sreath geir). Chaidh sampallan (Ch NFRCS agus Cp NFRCS) a chur an sàs tro chanula ann am molltairean siolandair gus greamachadh a chruthachadh ri craiceann na muice. Às deidh 3 mionaidean de ghoir aig teòthachd an t-seòmair (RT) (25° C.), chaidh neart greamachaidh NFRCS a chlàradh aig ìre sheasmhach de 0.5 mm/diog.
Is e prìomh fheart sealant lannsaichte àrdachadh ann an dòrtadh fala agus call fala a lughdachadh. Chaidh dòrtadh gun chall ann an NFRCS a mheasadh a’ cleachdadh dòigh a chaidh fhoillseachadh roimhe le beagan atharrachaidhean 19. Dèan tiùb microcentrifuge (2 ml) (trast-thomhas a-staigh 10 mm) le toll 8 × 5 mm2 air aon taobh den tiùb centrifuge (a’ riochdachadh lot fosgailte). Bithear a’ cleachdadh NFRCS gus an fosgladh a dhùnadh agus thathar a’ cleachdadh teip gus na h-oirean a-muigh a dhùnadh. Cuir 20 µl de 0.2 M CaCl2 ris an tiùb microcentrifuge anns a bheil am measgachadh ro-làimh de sodium citrate 3.8%. Às deidh 10 mionaidean, chaidh na tiùban microcentrifuge a thoirt a-mach às na soithichean agus chaidh an àrdachadh ann am mais nan soithichean a dhearbhadh mar thoradh air sruthadh fala a-mach às an NFRK (n = 3). Call fala Chaidh Ch NFRCS agus Cp NFRCS a choimeas ri Cs.
Chaidh ionracas fliuch NFRCS a dhearbhadh a rèir na dòigh-obrach a mhìnich Mishra agus Chaudhary21 le beagan atharrachaidhean. Cuir an NFRCS ann am flasg Erlenmeyer 100 ml le 50 ml uisge agus cuartaich airson 60 diogan gun mhullach a chruthachadh. Sgrùdadh lèirsinneach agus prìomhachas a thoirt do shamhlaichean airson ionracas corporra a rèir an t-seata.
Chaidh neart ceangail HFFC ri Ct a sgrùdadh le bhith a’ cleachdadh dhòighean a chaidh fhoillseachadh roimhe le beagan atharrachaidhean. Chaidh ionracas còmhdach uachdar a mheasadh le bhith a’ nochdadh NFRK do thonnan fuaimneach (brosnachadh bhon taobh a-muigh) an làthair uisge milliQ (Ct). Chaidh an NFRCS Ch NFRCS agus Cp NFRCS a chaidh a leasachadh a chur ann am beacair làn uisge agus chaidh an sonicachadh airson 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, agus 30 mionaid, fa leth. Às deidh tiormachadh, chaidh an diofar sa cheud eadar cuideam tùsail agus cuideam deireannach an NFRCS a chleachdadh gus call sa cheud stuthan (HFFC) obrachadh a-mach. Thug BCT in vitro tuilleadh taic do neart ceangail no call stuthan uachdar. Tha èifeachdas ceangal HFFC ri Ct a’ toirt seachad dùmhlachd fala agus còmhdach elastagach air uachdar Ct22.
Chaidh aon-ghnèitheachd an NFRCS a chaidh a leasachadh a dhearbhadh leis a’ BCT de shamhlaichean (30 mg) a chaidh a thogail bho àiteachan coitcheann air an taghadh air thuaiream den NFRCS. Lean modh-obrach BCT a chaidh ainmeachadh roimhe gus co-chòrdalachd NFRCS a dhearbhadh. Tha dlùth-cheangal eadar na còig sampallan a’ dèanamh cinnteach à còmhdach uachdar aon-ghnèitheach agus tasgadh HFFC ann am mogal Ct.
Chaidh an raon conaltraidh fala ainmichte (NBCA) a dhearbhadh mar a chaidh aithris roimhe le beagan atharrachaidhean. Dèan an fhuil a chnàmhadh le bhith a’ teannachadh 20 µl de fhuil eadar an dà uachdar de Ct, Ch NFRCS, Cp NFRCS agus Cs. Às dèidh 1 uair a thìde, chaidh an dà phàirt den stent a sgaradh agus chaidh raon a’ chnàimh a thomhas le làimh. Chaidh luach cuibheasach trì ath-aithris a mheas mar NBCA NFRCS19.
Chaidh mion-sgrùdadh Dynamic Vapor Sorption (DVS) a chleachdadh gus measadh a dhèanamh air èifeachdas NFRCS gus uisge a ghabhail a-steach bhon àrainneachd a-muigh no bhon làrach leòin a tha an urra ri bhith a’ tòiseachadh air coagulation. Bidh an DVS a’ measadh no a’ clàradh glacadh is call an smùid ann an sampall gu gravimetric a’ cleachdadh cothromachadh ultra-mhothachail le rùn mais de ±0.1 µg. Tha cuideam smùid pàirteach (taiseachd coimeasach) air a chruthachadh le rianadair sruthadh mais dealanach timcheall an t-sampall le bhith a’ measgachadh gasaichean giùlain shàthaichte agus tioram. A rèir stiùiridhean Pharmacopeia na h-Eòrpa, stèidhichte air a’ cheudad de ghlacadh taiseachd leis na sampallan, chaidh sampallan a sheòrsachadh ann an 4 roinnean (0–0.012% w/w− neo-uisge-shlàinteil, 0.2–2% w/w beagan uisge-shlàinteil, 2–15% meadhanach uisge-shlàinteil, agus > 15% glè uisge-shlàinteil)23. A rèir stiùiridhean Pharmacopeia na h-Eòrpa, stèidhichte air a’ cheudad de ghlacadh taiseachd leis na sampallan, chaidh sampallan a sheòrsachadh ann an 4 roinnean (0–0.012% w/w− neo-uisge-shlàinteil, 0.2–2% w/w beagan uisge-shlàinteil, 2–15% meadhanach uisge-shlàinteil, agus > 15% glè uisge-shlàinteil)23.A rèir molaidhean Pharmacopoeia na h-Eòrpa, a rèir na ceudad de ghabhail a-steach taiseachd leis na sampallan, chaidh na sampallan a roinn ann an 4 roinnean (0–0.012% w/w – neo-uisge-shlàinteil, 0.2–2% w/w beagan uisge-shlàinteil, 2–15%).% умеренно гигроскопичен agus > 15% очень гигроскопичен)23. % meadhanach taiseachd-uisgeach agus > 15% glè taiseachd-uisgeach)23.根据欧洲药典指南,根据样品吸收水分的百分比, 样品分为4 类(0-0.012% w/w-非吸湿性、0.2-2% w/w 轻微吸湿性、2-15% 适度吸湿,> 15% 非常吸湿)23.根据 欧洲 药典 指南 , 根据 吸收 水分 的 百分比 样品分为分为分为-0.0-1%吸湿 性、、、、0.2-2% W/w轻微、2-15% 适度吸湿 ,> 15% 非常吸湿) 23。A rèir mholaidhean Pharmacopoeia na h-Eòrpa, tha sampallan air an roinn ann an 4 clasaichean a rèir na ceudad taiseachd a tha an sampall a’ gabhail a-steach (0-0.012% a rèir cuideam – neo-uisge-shlàinteil, 0.2-2% a rèir cuideam beagan uisge-shlàinteil, 2-15% a rèir cuideam).% умеренно гигроскопичен, > 15 % очень гигроскопичен) 23. % meadhanach taiseachd-dhìonach, > 15% glè taiseachd-dhìonach) 23.Chaidh èifeachdas taiseachd-uisgeach NFCS X NFCS agus TsN NFCS a dhearbhadh air inneal-anailis DVS TA TGA Q5000 SA. Rè a’ phròiseis seo, fhuaireadh ùine ruith, taiseachd coimeasach (RH), agus cuideam sampall fìor-ùine aig 25°C24. Tha susbaint taiseachd air a thomhas le mion-sgrùdadh mais NFRCS ceart a’ cleachdadh na co-aontar a leanas:
Is e MC taiseachd NFRCS. m1 – cuideam tioram NSAIDs. Is e m2 mais NFRCS fìor-ùine aig RH sònraichte.
Chaidh an raon uachdair iomlan a mheasadh le bhith a’ cleachdadh deuchainn adsorption naitridein le naitridein leaghaidh an dèidh na sampallan a fhalamhachadh aig 25 °C airson 10 uairean a thìde (< 7 × 10–3 Torr). Chaidh an raon uachdair iomlan a mheasadh le bhith a’ cleachdadh deuchainn adsorption naitridein le naitridein leaghaidh an dèidh na sampallan a fhalamhachadh aig 25 °C airson 10 uairean a thìde (< 7 × 10–3 Torr). Mar a dh'fhosglas tu an t-acras air an t-seòmar-bìdh airson an t-seòmair-cadail опорожнения образцов при 25 °С в течение 10 ч (< 7 × 10–3 Торр). Chaidh an raon uachdair iomlan a thomhas le bhith a’ cleachdadh deuchainn adsorption naitridein le naitridein leaghaidh às dèidh do na sampallan a bhith air am falmhachadh aig 25°C airson 10 uairean a thìde (< 7 × 10–3 Torr).25°C 清空样品10 小时(< 7 × 10-3 Torrgu 25 ° C an t-acras air an t-seòmar-suidhe na an àbhaist airson na h-ath-ghinealach опорожнения образцов anns an teòthachd 10 часов aig 25 ° C (< 7 × 10-3). Chaidh an raon uachdair iomlan a mheasadh le bhith a’ cleachdadh deuchainnean adsorption naitridein le naitridein leaghaidh an dèidh do na sampallan a bhith air am falmhachadh airson 10 uairean a thìde aig 25°C (< 7 x 10-3 torr).Chaidh farsaingeachd uachdar iomlan, meud nam pores agus meud nam pores NFRCS a dhearbhadh le Quantachrome bho NOVA 1000e, an Ostair, a’ cleachdadh bathar-bog RS 232.
Ullaich 5% de cheallan fola dearga (sailean mar chaolaiche) bho fhuil slàn. An uairsin gluais cuibhreann de HFFC (0.25 ml) gu truinnsear 96-tobar agus mais 5% de cheallan fola dearga (0.1 ml). Goir am measgachadh aig 37°C airson 40 mionaid. Chaidh measgachadh de cheallan fola dearga agus serum a mheas mar smachd deimhinneach, agus measgachadh de shailean agus cheallan fola dearga mar smachd àicheil. Chaidh hemagglutination a dhearbhadh a rèir sgèile Stajitzky. Is iad na sgèilean a thathar a’ moladh mar a leanas: + + + + cruinneachaidhean gràinneach dùmhail; + + + padaichean bonn rèidh le oirean lùbte; + + padaichean bonn rèidh le oirean reubte; + fàinneachan dearga cumhang timcheall oirean nam padaichean rèidh; – (àicheil) putan dearg fa leth 12 ann am meadhan an tobair as ìsle.
Chaidh co-fhreagarrachd fala NFRCS a sgrùdadh a rèir modh na Buidhne Eadar-nàiseanta airson Co-chòrdadh (ISO) (ISO10993-4, 1999)26,27. An dòigh gravimetric air a mhìneachadh le Singh et al. Chaidh atharrachaidhean beaga a dhèanamh gus measadh a dhèanamh air cruthachadh thrombus an làthair no air uachdar NFRCS. Chaidh 500 mg de Cs, Ch NFRCS agus Cp NFRCS a ghoir ann an saline bufair fosfáit (PBS) airson 24 uair a thìde aig 37°C. Às dèidh 24 uair a thìde, chaidh PBS a thoirt air falbh agus chaidh NFRCS a làimhseachadh le 2 ml de fhuil anns an robh 3.8% sodium citrate. Air uachdar an NFRCS, cuir 0.04 ml de 0.1 M CaCl2 ris na sampallan a chaidh a ghoir. Às dèidh 45 mionaidean, chaidh 5 ml de dh’uisge grùide a chur ris gus stad a chuir air coagulation. Chaidh fuil coagulated air uachdar NFRK a làimhseachadh le fuasgladh formaldehyde 36-38%. Chaidh na clots a chaidh a shuidheachadh le formaldehyde a thiormachadh agus a thomhas. Chaidh ceudad thrombosis a thomhas le bhith a’ obrachadh a-mach cuideam a’ ghlainne gun fhuil agus sampall (smachd àicheil) agus a’ ghlainne le fuil (smachd deimhinneach).
Mar dhearbhadh tùsail, chaidh na sampallan fhaicinn fo mhiocroscop optaigeach gus tuigse fhaighinn air comas còmhdach uachdar HFFC, Ct eadar-cheangailte, agus lìonra Ct gus pores a chruthachadh. Chaidh earrannan tana de Ch agus Cp bho NFRCS a ghearradh le lann scalpel. Chaidh an earrann a thig às a chur air sleamhnag glainne, còmhdaichte le còmhdach-sleamhnag, agus chaidh na h-oirean a dhaingneachadh le glaodh. Chaidh na sleamhnagan ullaichte fhaicinn fo mhiocroscop optaigeach agus chaidh dealbhan a thogail aig diofar mheudachaidhean.
Chaidh tasgadh polaimeir ann an lìonraidhean Ct a dhèanamh follaiseach le bhith a’ cleachdadh maicreasgopaidh fluorescence stèidhichte air an dòigh a mhìnich Rice et al.29. Chaidh an co-dhèanamh HFFC a chaidh a chleachdadh airson an fhoirmleachaidh a mheasgachadh le datha fluorescent (amaranth), agus chaidh NFRCS (Ch & Cp) ullachadh a rèir na dòigh a chaidh ainmeachadh roimhe. Chaidh an co-dhèanamh HFFC a chaidh a chleachdadh airson an fhoirmleachaidh a mheasgachadh le datha fluorescent (amaranth), agus chaidh NFRCS (Ch & Cp) ullachadh a rèir na dòigh a chaidh ainmeachadh roimhe.Chaidh an co-dhèanamh HFFC a chaidh a chleachdadh airson a chruthachadh a mheasgachadh le datha fluorescent (amaranth) agus fhuaireadh NFRCS (Ch agus Cp) a rèir na dòigh a chaidh ainmeachadh roimhe.将用于配方的HFFC组合物与荧光染料(苋菜)混合, 并按照前面提到的方法到的方法到的方法到的方泇Cp).将用于配方的HFFC组合物与荧光染料(苋菜)混合, 并按照前面提到的方法到的方法到的方法到的方泇Cp).Chaidh an co-dhèanamh HFFC a chaidh a chleachdadh anns an fhoirmleachadh a mheasgachadh le datha fluorescent (Amaranth) agus fhuair e NFRCS (Ch agus Cp), mar a chaidh ainmeachadh roimhe.Chaidh earrannan tana de NFRK a ghearradh bho na sampallan a fhuaireadh, an cur air sleamhnagan glainne, agus an còmhdach le sleamhnagan còmhdaich. Thoir sùil air na sleamhnagan ullaichte fo mhiocroscop fhlùraiseach a’ cleachdadh sìoltachan uaine (310-380 nm). Chaidh ìomhaighean a thogail aig meudachadh 4x gus tuigse fhaighinn air dàimhean Ct agus cus tasgadh polymer ann an lìonra Ct.
Chaidh cruinn-eòlas uachdar Ch agus Cp NFRCS a dhearbhadh le bhith a’ cleachdadh miocroscop feachd atamach (AFM) le cantilever TESP fìor gheur ann am modh tapadh: 42 N/m, 320 kHz, ROC 2-5 nm, Bruker, Taiwan. Chaidh garbh-chruth an uachdair a dhearbhadh le freumh cuibheasach ceàrnagach (RMS) a’ cleachdadh bathar-bog (Scanning Probe Image Processor). Chaidh diofar àiteachan NFRCS a thoirt seachad air ìomhaighean 3D gus sgrùdadh a dhèanamh airson cunbhalachd an uachdair. Tha an claonadh àbhaisteach den sgòr airson raon sònraichte air a mhìneachadh mar gharbh-chruth an uachdair. Chaidh an co-aontar RMS a chleachdadh gus garbh-chruth uachdar NFRCS31 a thomhas.
Chaidh sgrùdaidhean stèidhichte air FESEM a dhèanamh a’ cleachdadh FESEM, SU8000, HI-0876-0003, Hitachi, Tokyo, gus tuigse fhaighinn air morf-eòlas uachdar Ch NFRCS agus Cp NFRCS, a sheall BCT nas fheàrr na Cm NFRCS. Chaidh an sgrùdadh FESEM a dhèanamh a rèir an dòigh a mhìnich Zhao et al. 32 le beagan atharrachaidhean. Chaidh 20 gu 30 mg Ch NFRCS agus Cp NFRCS de NFRCS a mheasgachadh ro-làimh le 20 µl de 3.8% sodium citrate air a mheasgachadh ro-làimh le fuil radain. Chaidh 20 μl de 0.2 M CaCl2 a chur ris na sampallan air an làimhseachadh leis an fhuil gus coagulation a thòiseachadh agus chaidh na sampallan a ghoir aig teòthachd an t-seòmair airson 10 mionaidean. A bharrachd air an sin, chaidh cus erythrocytes a thoirt air falbh bho uachdar NFRCS le bhith gan sruthladh le saline.
Chaidh sampallan às dèidh sin a làimhseachadh le 0.1% glutaraldehyde agus an uairsin a thiormachadh ann an àmhainn èadhair theth aig 37°C gus taiseachd a thoirt air falbh. Chaidh na sampallan tiormaichte a chòmhdach agus a sgrùdadh 32. B’ e ìomhaighean eile a fhuaireadh rè na h-anailis cruthachadh clot air uachdar snàithleanan cotan fa leth, tasgadh polymer eadar Ct, morf-eòlas erythrocyte (cruth), ionracas clot, agus morf-eòlas erythrocyte an làthair NFRCS. Chaidh raointean NFRCS gun làimhseachadh agus raointean NFRCS Ch agus Cp air an làimhseachadh le fuil a sganadh airson ianan eileamaideach (sodium, potasium, naitridean, calcium, magnesium, sinc, copar agus selenium) 33. Dèan coimeas eadar ceudadan ian eileamaideach eadar sampallan air an làimhseachadh agus gun làimhseachadh gus tuigse fhaighinn air cruinneachadh ian eileamaideach rè cruthachadh clot agus aon-ghnèitheachd clot.
Chaidh tiughas còmhdach uachdar Cp HFFC air uachdar Ct a thomhas le bhith a’ cleachdadh FESEM. Chaidh na h-earrannan-tarsainn de Cp NFRCS a ghearradh bhon fhrèam-obrach agus an còmhdach le sputter. Chaidh na sampallan còmhdach sputter a thig às a choimhead le FESEM agus chaidh tiughas a’ chòmhdach uachdar a thomhas 34, 35, 36.
Bheir meanbh-CT X-ghath ìomhaighean neo-sgriosail 3D àrd-rèiteachaidh agus leigidh e leat sgrùdadh a dhèanamh air rèiteachadh structarail a-staigh NFRK. Bidh meanbh-CT a’ cleachdadh beam X-ghath a’ dol tron ​​sampall gus co-èifeachd lagachaidh loidhneach ionadail nan X-ghathannan san sampall a chlàradh, a chuidicheas le bhith a’ faighinn fiosrachadh morf-eòlach. Chaidh suidheachadh a-staigh Ct ann an Cp NFRCS agus Cp NFRCS air a làimhseachadh le fuil a sgrùdadh le meanbh-CT gus tuigse fhaighinn air èifeachdas gabhail a-steach agus dòrtadh fala an làthair NFRCS37,38,39. Chaidh structaran 3D shamhlaichean Cp NFRCS air an làimhseachadh le fuil agus gun làimhseachadh ath-thogail a’ cleachdadh meanbh-CT (V|tome|x S240, Phoenix, a’ Ghearmailt). A’ cleachdadh bathar-bog VG STUDIO-MAX dreach 2.2, chaidh grunn ìomhaighean X-ghath a thogail bho dhiofar cheàrnan (gu h-iomchaidh còmhdach 360°) gus ìomhaighean 3D a leasachadh airson NFRCS. Chaidh an dàta ro-mheasaidh a chaidh a chruinneachadh ath-thogail gu ìomhaighean toirteil 3D a’ cleachdadh am bathar-bog sìmplidh 3D ScanIP Academic co-fhreagarrach.
A bharrachd air sin, gus tuigse fhaighinn air mar a bha an clot fala air a sgaoileadh, chaidh 20 µl de fhuil citrated ro-mheasgaichte agus 20 µl de 0.2 M CaCl2 a chur ris an NFRCS gus dòrtadh fala a thòiseachadh. Tha na sampallan ullaichte air am fàgail gus an cruadhaich iad. Chaidh uachdar an NFRK a làimhseachadh le 0.5% glutaraldehyde agus a thiormachadh ann an àmhainn èadhair theth aig 30–40°C airson 30 mionaid. Chaidh an clot fala a chaidh a chruthachadh air an NFRCS a sganadh, ath-chruthachadh, agus chaidh ìomhaigh 3D den chlot fala a dhèanamh follaiseach.
Chaidh deuchainnean antibacterial a dhèanamh air Cp NFRCS (as fheàrr an coimeas ri Ch NFRCS) a’ cleachdadh an dòigh a chaidh a mhìneachadh roimhe le beagan atharrachaidhean. Chaidh gnìomhachd antibacterial Cp NFRCS agus Cp HFFC a dhearbhadh a’ cleachdadh trì meanbh-fhàs-bheairtean deuchainn eadar-dhealaichte [S.aureus (bacteria gram-dheimhinneach), E.coli (bacteria gram-àicheil) agus Candida geal (C.albicans)] a’ fàs air agar ann am soithichean Petri ann an goireadair. Cuir 50 ml den fhuasgladh cultar bacterial caolaichte aig dùmhlachd de 105-106 CFU ml-1 air meadhan an agar gu cothromach. Dòirt am meadhan a-steach do shoitheach Petri agus leig leis cruadhachadh. Chaidh tobraichean a dhèanamh air uachdar a’ phlàta agar gus an lìonadh le HFFC (3 tobraichean airson HFFC agus 1 airson smachd àicheil). Cuir 200 µl HFFC ri 3 tobraichean agus 200 µl pH 7.4 PBS ris a’ 4mh tobar. Air taobh eile a’ mhias petri, cuir diosc Cp NFRCS 12 mm air an agar cruaidhte agus fliuch e le PBS (pH 7.4). Thathas a’ meas gu bheil clàran ciprofloxacin, ampicillin agus fluconazole nan inbhean iomraidh airson Staphylococcus aureus, Escherichia coli agus Candida albicans. Tomhais an raon bacaidh le làimh agus gabh ìomhaigh dhidseatach den raon bacaidh.
Às dèidh cead beusach institiùideach, chaidh an sgrùdadh a dhèanamh aig Colaiste Meidigeach Foghlaim is Rannsachaidh Kasturba ann am Manipal, Karnataka, ann an ceann a deas na h-Innseachan. Chaidh am pròtacal deuchainneach TEG in vitro ath-sgrùdadh agus aontachadh le Comataidh Beusachd Institiùideach Colaiste Meidigeach Kasturba, Manipal, Karnataka (IEC: 674/2020). Chaidh cuspairean fhastadh bho luchd-tabhartais fala saor-thoileach (aois 18 gu 55) bhon bhanca fala ospadail. A bharrachd air an sin, fhuaireadh foirm cead fiosraichte bho na saor-thoilich airson sampallan fala a chruinneachadh. Chaidh TEG dùthchasach (N-TEG) ​​a chleachdadh gus buaidh foirmleachadh Cp HFFC air fuil slàn air a measgachadh ro-làimh le sodium citrate a sgrùdadh. Tha N-TEG air aithneachadh gu farsaing airson a dhreuchd ann an ath-bheothachadh puing-cùraim, a chruthaicheas duilgheadasan do luchd-clionaigeach air sgàth 's gum faodadh dàil clionaigeach cudromach a bhith ann an toraidhean (deuchainnean coagulation àbhaisteach). Chaidh mion-sgrùdadh N-TEG a dhèanamh a’ cleachdadh fuil slàn. Fhuaireadh cead fiosraichte agus eachdraidh mheidigeach mhionaideach bho na com-pàirtichean uile. Cha robh com-pàirtichean le duilgheadasan hemostatic no thrombotic leithid torrachas/às dèidh breith chloinne no galar grùthan air an gabhail a-steach san sgrùdadh. Chaidh cuspairean a bha a’ gabhail dhrogaichean a bheir buaidh air an t-sruth coagulation a thoirmeasg bhon sgrùdadh cuideachd. Chaidh deuchainnean obair-lann bunaiteach (hemoglobin, ùine prothrombin, thromboplastin gnìomhaichte agus cunntadh platelet) a dhèanamh air a h-uile com-pàirtiche a rèir modhan-obrach àbhaisteach. Bidh N-TEG a’ dearbhadh slaodachd clot fala, structar tùsail clot, eadar-obrachadh mìrean, neartachadh clot, agus lysis clot. Tha an anailis N-TEG a’ toirt seachad dàta grafaigeach agus àireamhach air buaidhean còmhla grunn eileamaidean ceallach agus plasma. Chaidh an anailis N-TEG a dhèanamh air dà mheud eadar-dhealaichte de Cp HFFC (10 µl agus 50 µl). Mar thoradh air an sin, chaidh 1 ml de fhuil slàn le searbhag citrach a chur ri 10 μl de Cp HFFC. Cuir 1 ml (Cp HFFC + fuil citrated), 340 µl de fhuil mheasgaichte ri 20 µl 0.2 M CaCl2 anns a bheil mias TEG. Às dèidh sin, chaidh soithichean TEG a luchdachadh a-steach do TEG® 5000, US gus R, K, ceàrn alpha, MA, G, CI, TPI, EPL, LY 30% de shamhlaichean fala a thomhas an làthair Cp HFFC41.
Chaidh am pròtacal sgrùdaidh in vivo ath-sgrùdadh agus aontachadh leis a’ Chomataidh Beusachd Ainmhidhean Institiùideach (IAEC), Sgoil Leigheis Kasturba, Institiud Foghlaim Àrd-ìre Manipal, Manipal (IAEC/KMC/69/2020). Chaidh a h-uile deuchainn bheathaichean a dhèanamh a rèir molaidhean a’ Chomataidh airson Smachd agus Stiùireadh Deuchainnean Ainmhidhean (CPCSEA). Chaidh a h-uile sgrùdadh NFRCS in vivo (2 × 2 cm2) a dhèanamh air radain Wistar boireann (le cuideam 200 gu 250 g). Chaidh a h-uile beathach a dhèanamh gnàthaichte aig teòthachd 24-26°C, bha cothrom saor aig na beathaichean air biadh is uisge àbhaisteach ad libitum. Chaidh a h-uile beathach a roinn air thuaiream ann am buidhnean eadar-dhealaichte, agus bha trì beathaichean anns gach buidheann. Chaidh a h-uile sgrùdadh a dhèanamh a rèir Sgrùdaidhean Ainmhidhean: Aithisg air Deuchainnean In Vivo 43. Ron sgrùdadh, chaidh na beathaichean a thoirt fo anesthetis le bhith gan toirt seachad tro mheasgachadh de 20-50 mg de ketamine (gach 1 kg de chuideam bodhaig) agus 2-10 mg de xylazine (gach 1 kg de chuideam bodhaig) tro na làmhan. Às dèidh an sgrùdaidh, chaidh meud an fhuil obrachadh a-mach le bhith a’ measadh an eadar-dhealachaidh eadar cuideam tùsail is cuideam deireannach nan sampallan, agus chaidh an luach cuibheasach a fhuaireadh bho na trì deuchainnean a ghabhail mar mheud fhuil an t-sampall.
Chaidh modail gearradh-earbaill radain a chur an gnìomh gus tuigse fhaighinn air comas NFRCS gus bleeding a mhodachadh ann an trauma, sabaid, no tubaist trafaic (modail leòn). Gearr dheth 50% den earball le lann scalpel agus cuir san adhar airson 15 diogan gus dèanamh cinnteach à bleeding àbhaisteach. A bharrachd air an sin, chaidh sampallan deuchainn a chuir air earball radain le bhith a’ cur cuideam an sàs (Ct, Cs, Ch NFRCS agus Cp NFRCS). Chaidh bleeding agus PCT aithris airson sampallan deuchainn (n = 3)17,45.
Chaidh èifeachdas smachd cuideam NFRCS ann an sabaid a sgrùdadh air modail den artery femur superficial. Tha an artery femur air a nochdadh, air a tholladh le trocar 24G, agus air a fhuil a leigeil ma sgaoil taobh a-staigh 15 diogan. Às deidh sèididh neo-riaghlaichte fhaicinn, thèid an sampall deuchainn a chuir aig làrach an tollaidh le cuideam air a chuir an sàs. Dìreach às deidh an sampall deuchainn a chuir an sàs, chaidh an ùine clotadh a chlàradh agus chaidh èifeachdas hemostatic fhaicinn airson na 5 mionaidean a tha romhainn. Chaidh an aon mhodh-obrach ath-aithris le Cs agus Ct46.
Mhol Dowling et al. 47 modail leòn grùthan gus comas hemostatic stuthan hemostatic a mheasadh ann an co-theacsa bleeding rè obair-lannsa. Chaidh BCT a chlàradh airson sampallan Ct (smachd àicheil), frèam Cs (smachd deimhinneach), sampallan Ch NFRCS, agus sampallan Cp NFRCS. Chaidh vena cava suprahepatic an radain fhoillseachadh le bhith a’ dèanamh laparotomy meadhanach. Às deidh sin, chaidh am pàirt distal den lobe chlì a ghearradh a-mach le siosar. Dèan gearradh san grùthan le lann scalpel agus leig leis bleeding airson beagan dhiog. Chaidh sampallan deuchainn Ch NFRCS agus Cp NFRCS, a chaidh a thomhas gu ceart, a chuir air an uachdar millte gun chuideam deimhinneach sam bith agus chaidh BCT a chlàradh. An uairsin chuir a’ bhuidheann smachd (Ct) cuideam an sàs agus an uairsin Cs 30 s47 gun an dochann a bhriseadh.
Chaidh deuchainnean slànachaidh lotan in vivo a dhèanamh le bhith a’ cleachdadh modail lotan gearraidh gus measadh a dhèanamh air feartan slànachaidh lotan nan NFRCSan stèidhichte air polymer a chaidh a leasachadh. Chaidh modailean de lotan gearraidh a thaghadh agus a dhèanamh a rèir dhòighean a chaidh fhoillseachadh roimhe le beagan atharrachaidhean19,32,48. Chaidh a h-uile beathach a thoirt fo ainéistéise mar a chaidh a mhìneachadh roimhe. Cleachd punch biopsy (12 mm) gus gearradh domhainn cruinn a dhèanamh ann an craiceann a’ chùil. Chaidh làraichean lotan ullaichte a chòmhdach le Cs (smachd adhartach), Ct (a’ tuigsinn gu bheil padaichean cotan a’ cur bacadh air slànachadh), Ch NFRCS agus Cp NFRCS (buidheann deuchainneach) agus smachd àicheil gun làimhseachadh sam bith. Air gach latha den sgrùdadh, chaidh farsaingeachd an lot a thomhas anns a h-uile radain. Cleachd camara didseatach gus dealbh a thogail den raon lotan agus cuir dreasa ùr air. Chaidh ceudad dùnadh lotan a thomhas leis an fhoirmle a leanas:
Stèidhichte air ceudad dùnadh lotan air an 12mh latha den sgrùdadh, chaidh craiceann radain a’ bhuidheann as fheàrr a thoirt a-mach ((Cp NFRCS) agus a’ bhuidheann smachd) agus a sgrùdadh le dathadh H&E agus dathadh trichrome Masson. Stèidhichte air ceudad dùnadh lotan air an 12mh latha den sgrùdadh, chaidh craiceann radain a’ bhuidheann as fheàrr a thoirt a-mach ((Cp NFRCS) agus a’ bhuidheann smachd) agus a sgrùdadh le dathadh H&E agus dathadh trichrome Masson.Stèidhichte air ceudad dùnadh lotan air an 12mh latha den sgrùdadh, chaidh craiceann radain a’ bhuidheann as fheàrr ((Cp NFRCS) agus a’ bhuidheann smachd) a thoirt a-mach agus a sgrùdadh le bhith ga dhathadh le hematoxylin-eosin agus trichrome Masson.根据研究第12天的伤口闭合百分比, 切除最佳组((Cp NFRCS) 和对 照组) 的大鼠皮肤, 进行 H&E染色和Masson 三色染色研究。根据研究第12天的伤口闭合百分比, 切除最佳组((Cp NFRCS) 和对 照组) 的大鼠皮肤, 进行 H&E染色和眳组)Chaidh radain sa bhuidheann as fheàrr ((Cp NFRCS) agus buidhnean smachd) a thoirt a-mach airson dathadh hematoxylin-eosin agus dathadh trichrome Masson stèidhichte air ceudad dùnadh lotan air latha 12 den sgrùdadh.Chaidh am modh-obrach dathaidh a chaidh a chur an gnìomh a rèir nan dòighean a chaidh a mhìneachadh roimhe49,50. Gu h-aithghearr, às dèidh dhaibh a bhith air an daingneachadh ann an 10% formalin, chaidh na sampallan a dhì-uisgeachadh le bhith a’ cleachdadh sreath de dheochan ìreichte. Cleachd microtome gus earrannan tana (5 µm de thighead) den stuth a chaidh a thoirt a-mach fhaighinn. Chaidh earrannan sreath tana de smachdan agus Cp NFRCS a làimhseachadh le hematoxylin agus eosin gus atharrachaidhean histopathological a sgrùdadh. Chaidh dath trichrome Masson a chleachdadh gus cruthachadh snàithleanan collagen a lorg. Chaidh na toraidhean a fhuaireadh a sgrùdadh gu dall le pathologists.
Chaidh seasmhachd shampaill Cp NFRCS a sgrùdadh aig teòthachd an t-seòmair (25°C ± 2°C/60% RH ± 5%) airson 12 mìosan51. Chaidh Cp NFRCS (dath uachdar agus fàs meanbh-bhitheach) a sgrùdadh gu fradharcach agus a dhearbhadh airson strì an aghaidh caitheamh fillte agus BCT a rèir nan dòighean gu h-àrd a tha air am mìneachadh anns an earrann Stuthan agus Modhan.
Chaidh comas sgèileachaidh agus ath-riochdachadh Cp NFRCS a sgrùdadh le bhith ag ullachadh Cp NFRCS le meud 15 × 15 cm2. A bharrachd air an sin, chaidh sampallan 30 mg (n = 5) a thoirt a-mach à diofar bhloighean Cp NFRCS agus chaidh BCT nan sampallan a chaidh a sgrùdadh a mheasadh mar a chaidh a mhìneachadh roimhe seo anns an earrann Modhan.
Tha sinn air feuchainn ri diofar chumaidhean agus structaran a leasachadh a’ cleachdadh co-dhèanamh Cp NFRCS airson diofar thagraidhean bith-mheidigeach. Tha na cumaidhean no na rèiteachaidhean sin a’ toirt a-steach swaban cònail airson sròinean a’ sruthadh, modhan fiaclaireachd, agus swaban siolandair airson sròinean a’ sruthadh bhon bhànag.
Tha a h-uile seata dàta air an cur an cèill mar chuibheasach ± ​​claonadh àbhaisteach agus chaidh an sgrùdadh le ANOVA a’ cleachdadh Prism 5.03 (GraphPad, San Diego, CA, USA) agus an uair sin deuchainn coimeasan ioma-fhillte Bonferroni (*p<0.05).
Bha a h-uile modh-obrach a chaidh a dhèanamh ann an sgrùdaidhean daonna a rèir inbhean an Institiud agus na Comhairle Rannsachaidh Nàiseanta, a bharrachd air Dearbhadh Helsinki 1964 agus na h-atharrachaidhean às dèidh sin, no inbhean beusanta coltach ris. Chaidh fiosrachadh a thoirt do na com-pàirtichean uile mu fheartan an sgrùdaidh agus a nàdar saor-thoileach. Bidh dàta chom-pàirtichean fhathast dìomhair aon uair ‘s gu bheil e air a chruinneachadh. Chaidh am pròtacal deuchainneach TEG in vitro ath-sgrùdadh agus aontachadh le Comataidh Beusachd Institiùideach Colaiste Meidigeach Kasturba, Manipal, Karnataka (IEC: 674/2020). Chuir saor-thoilich ainm ri cead fiosraichte gus sampallan fala a chruinneachadh.
Chaidh a h-uile modh-obrach a chaidh a dhèanamh ann an sgrùdaidhean bheathaichean a dhèanamh a rèir stiùiridhean Dàmh Leigheis Kastuba, Institiud Foghlaim Àrd-ìre Manipal, Manipal (IAEC/KMC/69/2020). Chaidh a h-uile deuchainn bheathaichean a chaidh a dhealbhadh a dhèanamh a rèir stiùiridhean a’ Chomataidh airson Smachd agus Stiùireadh Deuchainnean Bheathaichean (CPCSEA). Tha a h-uile ùghdar a’ leantainn stiùiridhean ARRIVE.
Chaidh speactram FTIR nan NFRCS uile a sgrùdadh agus an coimeas ris an speactram chitosan a chithear ann am Figear 2A. Beanntan speactram sònraichte chitosan (clàraichte) aig 3437 cm-1 (sìneadh OH agus NH, for-chòmhdach), 2945 agus 2897 cm-1 (sìneadh CH), 1660 cm-1 (strain NH2), 1589 cm-1 (lùbadh N–H), 1157 cm-1 (sìneadh drochaid O-), 1067 cm-1 (sìneadh C–O, hydroxyl àrd-sgoile), 993 cm-1 (sìneadh CO, Bo-OH) 52.53.54. Tha Clàr a bharrachd S1 a’ sealltainn luachan speactram glacaidh FTIR NFRCS airson chitosan (aithrisear), chitosan fìor-ghlan, Cm, Ch, agus Cp. Sheall speactram FTIR nan NFRCS uile (Cm, Ch agus Cp) na h-aon chòmhlain glacaidh sònraichte ri chitosan fìor-ghlan gun atharrachaidhean mòra sam bith (Figear 2A). Dhearbh toraidhean an FTIR nach robh eadar-obrachaidhean ceimigeach no corporra eadar na poileimearan a chaidh a chleachdadh gus an NFRCS a leasachadh, a’ nochdadh gu bheil na poileimearan a chaidh a chleachdadh neo-ghnìomhach.
Comharrachadh in vitro de Cm NFRCS, Ch NFRCS, Cp NFRCS agus Cs. (A) a’ riochdachadh nan speactra FTIR còmhla de na co-dhèanamhan de chitosan agus Cm NFRCS, Ch NFRCS agus Cp NFRCS fo dhlùthadh. (B) a) Ìre gabhail fala slàn de NFRCS Cm, Ch, Cp, agus Cg (n = 3); Sheall na sampallan Ct BAR nas àirde leis gu bheil èifeachdas gabhail a-steach nas àirde aig a’ chliabh cotain; b) Gabhail a-steach fuil às dèidh fala Dealbh den sampall a chaidh a ghabhail a-steach. Riochdachadh grafaigeach de BCT sampall deuchainn C (bha an BCT as fheàrr aig Cp NFRCS (15 s, n = 3)). Chaidh dàta ann an C, D, E, agus G a shealltainn mar chuibheasach ± ​​SD, agus tha na bàraichean mearachd a’ riochdachadh SD, ***p < 0.0001. Chaidh dàta ann an C, D, E, agus G a shealltainn mar chuibheasach ± ​​SD, agus tha na bàraichean mearachd a’ riochdachadh SD, ***p < 0.0001. Данные в C, D, E и G представлены как среднее ± стандартное отклонение, а планки погрешностей предстатнеландия отклонение, ***p <0,0001. Tha dàta ann an C, D, E, agus G air an taisbeanadh mar chuibheasach ± ​​claonadh àbhaisteach, agus tha bàraichean mearachd a’ riochdachadh claonadh àbhaisteach, ***p<0.0001. C、D、E和G中的数据显示为平均值± SD, 误差 线 代 表SD, *** p <0.0001。 C、D、E和G中的数据显示为平均值± SD, 误差 线 代 表SD, *** p <0.0001。 Данные в C, D, E и G показаны как среднее значение ± стандартное отклонение, планки погрешностей пландартное отклонение, ***p <0,0001. Tha dàta ann an C, D, E, agus G air an sealltainn mar chuibheasach ± ​​claonadh àbhaisteach, tha bàraichean mearachd a’ riochdachadh claonadh àbhaisteach, ***p<0.0001.


Àm puist: 13 Lùnastal 2022