Misaotra anao nitsidika ny Nature.com. Voafetra ny fanohanana CSS amin'ny dikan-tranonkala ampiasainao. Ho an'ny traikefa tsara indrindra, manoro hevitra anao izahay hampiasa navigateur nohavaozina (na hanafoana ny Compatibility Mode ao amin'ny Internet Explorer). Mandritra izany fotoana izany, mba hahazoana antoka fa mitohy ny fanohanana, dia hampiseho ny tranonkala tsy misy styles sy JavaScript izahay.
Ny rà mandriaka tsy voafehy no iray amin'ireo antony lehibe mahatonga fahafatesana. Ny fahazoana hemostasis haingana dia miantoka ny fahaveloman'ny olona voakasika ho toy ny fanampiana voalohany mandritra ny ady, lozam-pifamoivoizana, ary ny fandidiana hampihenana ny fahafatesana. Ny scaffold composite nohamafisina amin'ny fibre nanoporous (NFRCS) avy amin'ny firafitra mamorona sarimihetsika hemostatic tsotra (HFFC) ho dingana mitohy dia afaka mandrisika sy manatsara ny hemostasis. Ny fampivoarana ny NFRCS dia mifototra amin'ny famolavolana ny elatry ny angidina. Ny rafitry ny elatry ny angidina dia misy elatra mitsivalana sy lava, ary ny fonon'ny elatra dia mifamatotra mba hitazonana ny fahamarinan'ny rafitra bitika. Ny HFFC dia mandrakotra mitovy ny velaran'ny fibre amin'ny sarimihetsika matevina nanometer ary mampifandray ny hatevin'ny landihazo mizara kisendrasendra (Ct) (dingana miparitaka) mba hamorona rafitra nanoporous. Ny fitambaran'ny dingana mitohy sy miparitaka dia mampihena ny vidin'ny vokatra impolo heny raha oharina amin'ny vokatra azo vidiana eny an-tsena. Ny NFRCS novaina (tampons na wristbands) dia azo ampiasaina amin'ny fampiharana biomedika isan-karazany. Ny fanadihadiana in vivo dia nanatsoaka hevitra fa ny Cp NFRCS novolavolaina dia mampihetsika sy mampitombo ny fizotran'ny coagulation eo amin'ny toerana fampiharana. Ny NFRCS dia afaka manova ny tontolo iainana bitika ary miasa amin'ny ambaratonga sela noho ny rafitra nanoporous izay miteraka fanasitranana ratra tsara kokoa amin'ny modely ratra excision.
Ny rà mandriaka tsy voafehy mandritra ny ady, mandritra ny fandidiana ary amin'ny toe-javatra maika dia mety hampidi-doza lehibe ho an'ny ain'ny naratra1. Ireo toe-javatra ireo dia mitarika amin'ny fitomboan'ny fanoherana ny lalan-dra periferika amin'ny ankapobeny, izay mitarika ho amin'ny fahatairana hemorrhagic. Ny fepetra mety hifehezana ny rà mandriaka mandritra sy aorian'ny fandidiana dia heverina ho mety hahafaty2,3. Ny fahasimban'ny lalan-dra lehibe dia mitarika ho amin'ny fahaverezan-dra be dia be, ka miteraka tahan'ny fahafatesana ≤ 50% amin'ny ady ary 31% mandritra ny fandidiana1. Ny fahaverezan-dra be dia be dia mitarika ho amin'ny fihenan'ny haben'ny vatana, izay mampihena ny output cardiac. Ny fitomboan'ny fanoherana ny lalan-dra periferika manontolo sy ny fahasimban'ny microcirculation miandalana dia mitarika ho amin'ny hypoxia ao amin'ny taova mpanohana aina. Mety hitranga ny fahatairana hemorrhagic raha mitohy ny toe-javatra raha tsy misy fitsaboana mahomby1,4,5. Ny fahasarotana hafa dia ahitana ny fivoaran'ny hypothermia sy ny acidosis metabolika, ary koa ny fikorontanan'ny coagulation izay manakana ny dingan'ny coagulation. Ny fahatairana hemorrhagic mafy dia mifandray amin'ny risika ambony kokoa amin'ny fahafatesana6,7,8. Amin'ny fahatairana kilasy III (miandalana), ny fampidiran-dra dia tena ilaina amin'ny fahaveloman'ny marary mandritra ny morbidity sy ny fahafatesana mandritra ny fandidiana sy aorian'ny fandidiana. Mba handresena ireo toe-javatra mety hahafaty rehetra voalaza etsy ambony ireo, dia namorona rafitra fanamboarana "nanoporous fibre-reinforced composite scaffold" (NFRCS) izahay izay mampiasa fifantohana polymer faran'izay kely (0.5%) amin'ny fampiasana fitambaran'ny polymer hemostatic mety levona anaty rano.
Amin'ny fampiasana fanamafisana fibre, dia azo atao ny mamorona vokatra mahomby amin'ny vidiny. Ireo fibre milahatra kisendrasendra dia mitovy amin'ny rafitry ny elatry ny angidina, voalanjalanja amin'ny tsipika mitsivalana sy mitsangana eo amin'ny elatra. Ny lalan-drà mitsivalana sy lava amin'ny elatra dia mifandray amin'ny fonon'ny elatra (Sary 1). Ny NFRCS dia misy Ct nohamafisina ho rafitra fanohanana miaraka amin'ny tanjaka ara-batana sy mekanika tsara kokoa (Sary 1). Noho ny vidiny mirary sy ny fahaiza-manao, ny mpandidy dia aleony mampiasa kofehy landihazo (Ct) mandritra ny fandidiana sy ny famonosana. Noho izany, raha jerena ireo tombontsoa maro azony, anisan'izany ny selulosa kristaly mihoatra ny 90% (mampitombo ny asan'ny hemostatic), dia nampiasaina ho rafitra taolana an'ny NFRCS9,10 ny Ct. Noho izany, raha jerena ireo tombontsoa maro azony, anisan'izany ny selulosa kristaly mihoatra ny 90% (mampitombo ny asan'ny hemostatic), dia nampiasaina ho rafitra taolana an'ny NFRCS9,10 ny Ct. Следовательно, учитывая его многочисленные преимущества, в том числе > 90% кристаллической целлюлозы (участивозы гемостатической активности), Ct использовали в качестве скелетной системы NFRCS9,10. Noho izany, noho ireo tombontsoa maro azony, anisan'izany ny selulosa kristaly >90% (izay tafiditra amin'ny fitomboan'ny asa hemostatic), dia nampiasaina ho rafitra taolana NFRCS ny Ct9,10.因此，考虑到它的多重益处，包括> 90% 的结晶纤维素（有助于增强止血活性从看0,NC00的骨架系统。因此，考虑到它的多重益处，包括> 90%Noho izany, noho ireo tombontsoa maro azony, anisan'izany ny selulosa kristaly maherin'ny 90% (manampy amin'ny fanamafisana ny asan'ny hemostatic), dia nampiasaina ho toy ny fototra ho an'ny NFRCS9,10 ny Ct.Norakofana ambonin'ny sosona ivelany ny Ct (hita ny fiforonan'ny sarimihetsika nano-matevina) ary nampifandraisina tamin'ny singa mamorona sarimihetsika hemostatic (HFFC). Miasa toy ny matrigel ny HFFC, mitazona ny Ct napetraka kisendrasendra miaraka. Ny endrika novolavolaina dia mampita ny fihenjanana ao anatin'ny dingana miparitaka (fibre fanamafisana). Sarotra ny mahazo rafitra nanoporous manana tanjaka mekanika tsara amin'ny fampiasana fifantohana polymer kely indrindra. Fanampin'izany, tsy mora ny manamboatra lasitra samihafa ho an'ny fampiharana biomedika samihafa.
Ity sary ity dia mampiseho kisarisary maneho ny endrika NFRCS mifototra amin'ny rafitry ny elatry ny angidina (A). Ity sary ity dia mampiseho fampitahana ny rafitry ny elatry ny angidina (mifamatotra ireo lalan-drà mifanelanelana sy lava amin'ny elatra) ary sary mikrografy miampita ny Cp NFRCS (B). Fanehoana ara-drafitra ny NFRCS.
Novolavolaina tamin'ny fampiasana HFFC ho dingana mitohy ny NFRC mba handaminana ireo fetra voalaza etsy ambony ireo. Ny HFFC dia ahitana pôlimera hemostatika isan-karazany mamorona sarimihetsika, anisan'izany ny chitosan (ho pôlimera hemostatika lehibe) miaraka amin'ny methylcellulose (MC), hydroxypropyl methylcellulose (HPMC 50 cp) ary alikaola polyvinyl (PVA)) (125 kDa) ho pôlimera mpanohana izay mampiroborobo ny fiforonan'ny thrombus. Ny fanampiana polyvinylpyrrolidine K30 (PVP K30) dia nanatsara ny fahafahan'ny NFRCS mandray hamandoana. Nampiana polyethylene glycol 400 (PEG 400) mba hanatsarana ny fifandraisan'ny pôlimera amin'ny fifangaroan'ny pôlimera mifamatotra. Firafitra hemostatika HFFC telo samihafa (Cm HFFC, Ch HFFC ary Cp HFFC), dia ny chitosan miaraka amin'ny MC (Cm), chitosan miaraka amin'ny HPMC (Ch), ary chitosan miaraka amin'ny PVA (Cp), no nampiharina tamin'ny Ct. Nanamafy ny fiasan'ny NFRCS amin'ny hemostatic sy ny fanasitranana ratra ny fanadihadiana isan-karazany natao in vitro sy in vivo. Azo ampiasaina hanamboarana endrika scaffolding isan-karazany mba hanomezana fahafaham-po ny filàna manokana ny fitaovana mitambatra atolotry ny NFRCS.
Ankoatra izany, ny NFRCS dia azo ovaina ho toy ny fehy na horonana handrakofana ny faritra ratra manontolo amin'ny rantsambatana ambany sy ny faritra hafa amin'ny vatana. Ho an'ny ratra amin'ny rantsambatana amin'ny ady manokana, ny endrika NFRCS dia azo ovaina ho antsasaky ny sandry na tongotra feno (Sary Fanampiny S11). Ny NFRCS dia azo atao fehin-tanana miaraka amin'ny lakaoly, izay azo ampiasaina hampijanonana ny rà mandriaka avy amin'ny ratra mafy amin'ny tànana amin'ny famonoan-tena. Ny tanjonay lehibe dia ny hampivelatra NFRCS miaraka amin'ny polymer faran'izay kely azo atao izay azo atolotra ho an'ny mponina maro (ambanin'ny tsipika fahantrana) ary azo apetraka ao anaty kitapo vonjy taitra. Tsotra, mahomby ary ara-toekarena amin'ny famolavolana, ny NFRCS dia mahasoa ny vondrom-piarahamonina eo an-toerana ary afaka misy fiantraikany manerantany.
Novidina avy any Merck, India ny chitosan (lanja molekiola 80 kDa) sy amaranth. Novidina avy any Loba Chemie Pvt. LLC, Mumbai ny hydroxypropyl methylcellulose 50 Cp, polyethylene glycol 400 ary methylcellulose. Novidina avy any National Chemicals, Gujarat ny alikaola polyvinyl (lanja molekiola 125 kDa) (87-90% hydrolyzed). Novidina avy any Molychem, Mumbai ny polyvinylpyrrolidine K30, ary novidina avy any Ramaraju Surgery Cotton Mills Ltd., Tamil Nadu ny swab sterile, miaraka amin'ny rano Milli Q (Direct-Q3 water purification system, Merck, India) ho mpitondra.
Noforonina tamin'ny alalan'ny fomba lyophilization ny NFRCS11,12. Ny singa HFFC rehetra (Tabilao 1) dia nomanina tamin'ny alalan'ny stirrer mekanika. Manomàna vahaolana chitosan 0.5% amin'ny fampiasana asidra asetika 1% ao anaty rano amin'ny alàlan'ny stirrer mekanika tsy tapaka amin'ny 800 rpm. Ny lanjan'ny polymer feno voalaza ao amin'ny Tabilao 1 dia nampiana tao amin'ny vahaolana chitosan ary nafangaro mandra-pahazoana vahaolana polymer mazava. Nampiana tamin'ny fangaro vokarina ny PVP K30 sy PEG 400 tamin'ny fatra voalaza ao amin'ny Tabilao 1, ary notohizana ny fangaro mandra-pahazoana vahaolana polymer viscous mazava. Ny fandroana vahaolana polymer vokarina dia no-sonicated nandritra ny 60 minitra mba hanesorana ny rivotra miboiboika amin'ny fangaro polymer. Araka ny aseho amin'ny Sary Fanampiny S1(b), ny Ct dia nozaraina mitovy amin'ny lavaka tsirairay amin'ny takelaka (labozia) misy lavaka 6 izay ampiana HFFC 5 ml.
Nojerena nandritra ny 60 minitra ny takelaka misy lavaka enina mba hahazoana hamandoana sy fizarana mitovy amin'ny HFFC ao amin'ny tambajotra Ct. Avy eo dia ampangatsiahina amin'ny -20°C mandritra ny 8-12 ora ny takelaka misy lavaka enina. Nampangatsiahina nandritra ny 48 ora ny takelaka mba hahazoana karazana NFRCS isan-karazany. Ampiasaina ihany koa io fomba fiasa io mba hamokarana endrika sy rafitra samihafa, toy ny tampon na tampon boribory, na endrika hafa ho an'ny fampiharana samihafa.
Levona ao anaty asidra asetika 1% amin'ny alalan'ny "stirer andriamby" ny kitosan (80 kDa) (3%) voalanja tsara. Nampiana PEG 400 1% ny vahaolana kitosan vokarina ary nafangaro nandritra ny 30 minitra. Araraka ao anaty fitoeran-javatra efamira na mahitsizoro ny vahaolana vokarina ary ampangatsiahina amin'ny -80°C mandritra ny 12 ora. Nohamainina nandritra ny 48 ora ny santionany nangatahana mba hahazoana Cs13 misy lavaka.
Nosedraina tamin'ny alalan'ny fampiasana ny Fourier transform infrared spectroscopy (FTIR) (Shimadzu 8400 s FTIR, Tokyo, Japon) ny NFRCS novolavolaina mba hanamafisana ny fifanarahan'ny chitosan amin'ny polymers hafa14,15. Ny spectra FTIR (sakany amin'ny elanelan'ny spectral manomboka amin'ny 400 ka hatramin'ny 4000 cm-1) amin'ny santionany rehetra nosedraina dia azo tamin'ny alalan'ny fanaovana scan 32.
Ny tahan'ny fidiran'ny ra (BAR) ho an'ny fangaro rehetra dia nojerena tamin'ny fampiasana ny fomba nohazavain'i Chen et al. 16 miaraka amin'ny fanovana kely. Ny NFRK novolavolaina tamin'ny fangaro rehetra dia nohamainina tao anaty lafaoro banga tamin'ny 105°C nandritra ny alina mba hanesorana ny solvent sisa tavela. Ny 30 mg NFRCS (lanjan'ny santionany voalohany - W0) sy 30 mg Ct (fanaraha-maso tsara) dia napetraka tao anaty lovia misaraka misy premix 3.8% sodium citrate. Tamin'ny elanelam-potoana voafaritra mialoha, izany hoe 5, 10, 20, 30, 40 ary 60 segondra, dia nesorina ny NFRCS ary nodiovina tamin'ny ra tsy voatsindrona ny velarany tamin'ny fametrahana ny santionany teo amin'ny Ct nandritra ny 30 segondra. Ny lanjan'ny ra farany voatsindrona tamin'ny NFRCS 16 dia nodinihina (W1) isaky ny fotoana. Kajy ny isan-jaton'ny BAR amin'ny fampiasana ity raikipohy manaraka ity:
Ny fotoana fivontosan'ny ra (BCT) dia voafaritra araka ny tatitry Wang et al. 17. Ny fotoana ilaina amin'ny ra manontolo (ran'ny voalavo afangaro amin'ny sodium citrate 3.8%) mba hivontosan'ny ra eo anatrehan'ny NFRCS dia nokajiana ho BCT an'ny santionany notsapaina. Ireo singa NFRCS isan-karazany (30 mg) dia napetraka tao anaty tavoahangy misy sarony 10 ml ary notehirizina tamin'ny 37°C. Nampiana ra (0.5 ml) tao anaty tavoahangy ary nampiana 0.3 ml ny CaCl2 0.2 M mba hampavitrika ny fivontosan'ny ra. Farany, avadiho isaky ny 15 segondra (hatramin'ny 180°) ny tavoahangy mandra-piforon'ny fivontosan'ny ra mafy. Ny BCT an'ny santionany dia tombanana amin'ny isan'ny fihodinana 17,18. Mifototra amin'ny BCT, dia nofantenana ho an'ny fanadihadiana momba ny toetra mampiavaka azy bebe kokoa ny firafitry ny ra roa tsara indrindra avy amin'ny NFRCS Cm, Ch ary Cp.
Ny BCT an'ny firafitry ny Ch NFRCS sy Cp NFRCS dia voafaritra tamin'ny fampiharana ny fomba voalazan'i Li et al. 19. Apetraho ao anaty lovia Petri misaraka (37 °C) ny Ch NFRCS, Cp NFRCS, ary Cs (fanaraha-maso tsara). Ny ra misy sodium citrate 3.8% dia afangaro amin'ny 0.2 M CaCl2 amin'ny tahan'ny volume 10:1 mba hanombohana ny dingan'ny fampivainganana ny ra. Ny fangaroan-dra voalavo 0.2 M CaCl2 dia ampiharina amin'ny velaran'ny santionany ary apetraka ao anaty lovia Petri foana. Ny fanaraha-maso dia ny ra nararaka tao anaty lovia Petri foana tsy misy Ct. Amin'ny elanelam-potoana raikitra 0, 3, ary 5 minitra, atsaharo ny fampivainganana amin'ny alàlan'ny fanampiana rano deionized (DI) 10 ml amin'ny santionany misy ny lovia tsy manelingelina ny fampivainganana. Ny erythrocytes tsy mivaingana (erythrocytes) dia mandalo hemolysis eo anatrehan'ny rano deionized ary mamoaka hemoglobin. Ny hemoglobinina amin'ny fotoana samihafa (HA(t)) dia norefesina tamin'ny 540 nm (λmax hemoglobine) tamin'ny fampiasana spectrophotometer UV-Vis. Ny fidiran'ny hemoglobinina tanteraka (AH(0)) ao anatin'ny 0 minitra amin'ny ra 20 µl ao anaty rano deionized 10 ml no noraisina ho fenitra fanondroana. Ny fidiran'ny hemoglobinina mifandraika (RHA) amin'ny ra mivaingana dia nokajiana avy amin'ny tahan'ny HA(t)/HA(0) amin'ny fampiasana andian-dra mitovy.
Nampiasa fitaovana famakafakana ny endrika (Texture Pro CT V1.3 Build 15, Brookfield, Etazonia) mba hamaritana ny toetran'ny NFRK miraikitra amin'ny sela simba. Tsindrio eo amin'ny ao anatin'ny hoditry ny kisoa (tsy misy ny sosona tavy) ny lovia boribory misokatra eo ambany. Nampiharina tamin'ny alalan'ny cannula tao anaty lasitra boribory ny santionany (Ch NFRCS sy Cp NFRCS) mba hamoronana fifikirana amin'ny hoditry ny kisoa. Rehefa avy notehirizina nandritra ny 3 minitra tamin'ny mari-pana ao an-trano (RT) (25° C.), dia noraketina tamin'ny tahan'ny tsy miovaova 0.5 mm/segondra ny tanjaky ny fifikirana NFRCS.
Ny endri-javatra lehibe amin'ny tombo-kase fandidiana dia ny fampitomboana ny fivontosan'ny ra sady mampihena ny fahaverezan-dra. Ny fivontosan'ny ra tsy misy fatiantoka ao amin'ny NFRCS dia nodinihina tamin'ny fampiasana fomba efa navoaka teo aloha miaraka amin'ny fanovana kely 19. Manaova fantsona microcentrifuge (2 ml) (savaivony anatiny 10 mm) misy lavaka 8 × 5 mm2 amin'ny ilany iray amin'ny fantsona centrifuge (maneho ratra misokatra). Ny NFRCS dia ampiasaina hanidiana ny fisokafana ary ny kasety dia ampiasaina hanidiana ny sisiny ivelany. Ampio 20 µl amin'ny 0.2 M CaCl2 ao amin'ny fantsona microcentrifuge misy ny premix sodium citrate 3.8%. Rehefa afaka 10 minitra, dia nesorina tao anaty lovia ny fantsona microcentrifuge ary ny fitomboan'ny lanjan'ny lovia dia voafaritra noho ny fivoahan'ny ra avy amin'ny NFRK (n = 3). Ny fahaverezan-dra Ch NFRCS sy Cp NFRCS dia noharina tamin'ny Cs.
Ny tsy fahalotoan'ny NFRCS amin'ny rano dia voafaritra mifototra amin'ny fomba nohazavain'i Mishra sy Chaudhary21 miaraka amin'ny fanovana kely. Apetraho ao anaty tavoara Erlenmeyer 100 ml misy rano 50 ml ny NFRCS ary afangaro mandritra ny 60 segondra nefa tsy mamorona tampony. Ny fizahana maso sy ny fanomezana laharam-pahamehana ny santionany mba hahitana ny tsy fahalotoan'ny santionany ara-batana mifototra amin'ny fanangonana azy.
Nodinihina tamin'ny alalan'ny fomba efa navoaka teo aloha ny tanjaky ny fifamatoran'ny HFFC amin'ny Ct miaraka amin'ny fanovana kely. Nodinihina ny fahamarinan'ny sosona ambonin'ny tany tamin'ny alalan'ny fampiharihariana ny NFRK tamin'ny onja akostika (fandrisihana ivelany) teo anatrehan'ny rano milliQ (Ct). Ny NFRCS Ch NFRCS sy Cp NFRCS novolavolaina dia napetraka tao anaty vera feno rano ary nohavaozina nandritra ny 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, ary 30 minitra tsirairay avy. Rehefa avy maina, ny isan-jaton'ny fahasamihafana eo amin'ny lanja voalohany sy farany amin'ny NFRCS dia nampiasaina hikajiana ny isan-jaton'ny fahaverezan'ny fitaovana (HFFC). Ny BCT in vitro dia nanohana bebe kokoa ny tanjaky ny fifamatoran'ny fitaovana ambonin'ny tany. Ny fahombiazan'ny fifamatoran'ny HFFC amin'ny Ct dia manome fampivainganana ny ra sy sosona elastika eo amin'ny velaran'ny Ct22.
Ny fitoviana eo amin'ny NFRCS novolavolaina dia voafaritry ny BCT an'ny santionany (30 mg) nalaina avy amin'ny toerana ankapobeny nofantenana kisendrasendra tao amin'ny NFRCS. Araho ny fomba fiasa BCT voalaza teo aloha mba hamaritana ny fanarahan-dalàna ny NFRCS. Ny akaiky ny santionany dimy rehetra dia miantoka ny fandrakofana mitovy ny velarana sy ny fametrahana HFFC ao amin'ny harato Ct.
Ny faritra ifandraisan'ny ra (NBCA) dia voafaritra araka ny tatitra teo aloha niaraka tamin'ny fanovana sasany. Ampitomboy ny fangorahana ny ra amin'ny alàlan'ny famehezana ra 20 µl eo anelanelan'ny velaran'ny Ct, Ch NFRCS, Cp NFRCS ary Cs. Rehefa afaka adiny 1, dia nosarahina ireo faritra roa amin'ny stent ary norefesina tamin'ny tanana ny velaran'ny clot. Ny salan'isa amin'ny famerimberenana intelo dia noheverina ho NBCA NFRCS19.
Nampiasaina ny fanadihadiana Dynamic Vapor Sorption (DVS) mba hanombanana ny fahombiazan'ny NFRCS amin'ny fidiran'ny rano avy amin'ny tontolo ivelany na avy amin'ny toerana misy ratra izay tompon'andraikitra amin'ny fanombohana ny coagulation. Ny DVS dia manombana na mirakitra ny fidiran'ny etona sy ny fatiantoka ao anaty santionany amin'ny alàlan'ny gravimetry amin'ny alàlan'ny fandanjana ultra-sensitive miaraka amin'ny famaha lanja ±0.1 µg. Ny tsindry etona ampahany (hamandoana relative) dia vokarin'ny mpanara-maso ny fikorianan'ny lanja elektronika manodidina ny santionany amin'ny alàlan'ny fampifangaroana ny entona mpitatitra mahavoky sy maina. Araka ny torolalana avy amin'ny European Pharmacopeia, mifototra amin'ny isan-jaton'ny fidiran'ny hamandoana ao amin'ny santionany, dia nozaraina ho sokajy 4 ny santionany (0–0.012% w/w− tsy higroskopika, 0.2–2% w/w somary higroskopika, 2–15% antonony higroskopika, ary > 15% tena higroskopika)23. Araka ny torolalana avy amin'ny European Pharmacopeia, mifototra amin'ny isan-jaton'ny fidiran'ny hamandoana amin'ny santionany, dia nozaraina ho sokajy 4 ny santionany (0–0.012% w/w− tsy higroskopika, 0.2–2% w/w somary higroskopika, 2–15% antonony higroskopika, ary > 15% tena higroskopika)23.Araka ny tolo-kevitry ny Pharmacopoeia Eoropeana, arakaraka ny isan-jaton'ny fidiran'ny hamandoana amin'ny santionany, dia nozaraina ho sokajy 4 ny santionany (0–0.012% w/w – tsy higroskopika, 0.2–2% w/w somary higroskopika, 2–dimy ambin'ny folo%).% умеренно гигроскопичен и > 15% очень гигроскопичен)23. (5%) antonony ny higroskopiny ary > 15% tena higroskopiny23.根据欧洲药典指南，根据样品吸收水分的百分比，样品分为4 类（0-0.012% w/w.【、湁% 【【【、、 w/w 轻微吸湿性、2-15% 适度吸湿，> 15% 非常吸湿）23.根据 欧洲 药典 指南 ， 根据 吸收 水分 的 百分比 样品 分为 分为 分为 分为 分为 分为 w-0.吸湿 性 、 、 、 、 0.2-2% W/w 轻微 、 2-15% 适度 吸湿 ，> 15 %非常吸湿）23.Araka ny tolo-kevitry ny Pharmacopoeia Eoropeana, ny santionany dia mizara ho kilasy 4 arakaraka ny isan-jaton'ny hamandoana voarain'ny santionany (0-0.012% amin'ny lanjany - tsy higroskopika, 0.2-2% amin'ny lanjany somary higroskopika, 2-15% amin'ny lanjany).% умеренно гигроскопичен, > 15 % очень гигроскопичен) 23. (23) antonony ny higroskopiany, > 15% tena higroskopiany.Ny fahombiazan'ny NFCS X NFCS sy TsN NFCS dia voafaritra tamin'ny alalan'ny fitaovana famakafakana DVS TA TGA Q5000 SA. Nandritra ity dingana ity, dia azo ny fotoana fiasana, ny hamandoana (RH), ary ny lanjan'ny santionany amin'ny fotoana tena izy amin'ny 25°C24. Ny votoatin'ny hamandoana dia kajiana amin'ny alalan'ny famakafakana ny lanjan'ny NFRCS marina amin'ny fampiasana ity raikipohy manaraka ity:
MC dia ny hamandoana NFRCS. m1 – lanja maina an'ny NSAID. m2 dia ny lanjan'ny NFRCS amin'ny fotoana tena izy amin'ny RH iray.
Notombanana ny velaran-tany manontolo tamin'ny alalan'ny andrana fidiran'ny azota amin'ny azota ranoka rehefa avy nanala ireo santionany tamin'ny 25 °C nandritra ny 10 ora (< 7 × 10–3 Torr). Notombanana ny velaran-tany manontolo tamin'ny alalan'ny andrana fidiran'ny azota amin'ny azota ranoka rehefa avy nanala ireo santionany tamin'ny 25 °C nandritra ny 10 ora (< 7 × 10–3 Torr). Общая площадь поверхности оценивалась с помощью эксперимента по адсорбции азота жидким азотом после опорожнец ° 5 течение 10 ч (< 7 × 10–3 Торр). Notombanana ny velaran-tany manontolo tamin'ny alalan'ny andrana fidiran'ny azota amin'ny azota ranoka rehefa avy nesorina tamin'ny 25°C nandritra ny 10 ora ny santionany (< 7 × 10–3 Torr).在25°C 清空样品10 小时（< 7 × 10-3 Torr）后，使用液氮的氮吸附实验估计总表面积。25°C Общая площадь поверхности оценивалась с использованием экспериментов по адсорбции азота жидким азотом порослерац течение 10 часов при 25°C (< 7 × 10-3 торр). Notombanana ny velaran-tany manontolo tamin'ny alalan'ny andrana fidiran'ny azota tamin'ny azota ranoka rehefa avy noesorina nandritra ny 10 ora tamin'ny 25°C (< 7 x 10-3 torr).Ny velaran-tany manontolo, ny haben'ny mason-koditra ary ny haben'ny mason-koditra NFRCS dia voafaritra tamin'ny alalan'ny Quantachrome avy amin'ny NOVA 1000e, Aotrisy tamin'ny fampiasana rindrambaiko RS 232.
Manomàna RBC 5% (sira ho toy ny mpanalefaka) avy amin'ny ra manontolo. Avy eo dia afindrao ao anaty takelaka 96-lavaka ny ampahany amin'ny HFFC (0.25 ml) ary 5% ny RBC mass (0.1 ml). Avela hilona amin'ny 37°C mandritra ny 40 minitra ny fangaro. Ny fifangaroan'ny sela mena sy ny serum dia noheverina ho fanaraha-maso tsara, ary ny fifangaroan'ny saline sy ny sela mena ho fanaraha-maso ratsy. Ny hemagglutination dia voafaritra araka ny mizana Stajitzky. Ireto avy ny mizana natolotra: + + + + + vovoka matevina; + + + takelaka ambany malama misy sisiny miolikolika; + + takelaka ambany malama misy sisiny rovitra; + peratra mena tery manodidina ny sisin'ny takelaka malama; – (ratsy) bokotra mena misaraka 12 eo afovoan'ny lavaka ambany.
Nodinihina araka ny fomba fiasan'ny Fikambanana Iraisam-pirenena ho an'ny Fanamarinana (ISO) (ISO10993-4, 1999)26,27 ny fifanaraka amin'ny hemodinamika ao amin'ny NFRCS. Ny fomba gravimetrika nohazavain'i Singh et al. Nisy fanovana kely natao mba hanombanana ny fiforonan'ny thrombus teo anatrehan'ny na teo ambonin'ny NFRCS. 500 mg ny Cs, Ch NFRCS ary Cp NFRCS dia notehirizina tao anaty saline phosphate buffered (PBS) nandritra ny 24 ora tamin'ny 37°C. Rehefa afaka 24 ora, dia nesorina ny PBS ary notsaboina tamin'ny ra 2 ml misy sodium citrate 3.8% ny NFRCS. Eo ambonin'ny NFRCS, ampio 0.04 ml ny CaCl2 0.1 M amin'ireo santionany notehirizina. Rehefa afaka 45 minitra, dia nampiana rano madio 5 ml mba hampijanonana ny coagulation. Ny ra mivaingana eo ambonin'ny NFRK dia notsaboina tamin'ny vahaolana formaldehyde 36-38%. Nohamainina sy nolanjaina ireo vongan-dra miraikitra amin'ny formaldehyde. Notombanana ny isan-jaton'ny thrombosis tamin'ny fikajiana ny lanjan'ny vera tsy misy ra sy santionany (fanaraha-maso ratsy) sy ny vera misy ra (fanaraha-maso tsara).
Ho fanamafisana voalohany, dia nojerena tamin'ny alalan'ny mikroskopia optika ireo santionany mba hahatakarana ny fahafahan'ny sosona ambonin'ny HFFC, ny fifandraisana Ct, ary ny tambajotra Ct mamorona mason-koditra. Notapatapahina tamin'ny lelany scalpel ireo fizarana manify amin'ny Ch sy Cp avy amin'ny NFRCS. Napetraka teo amin'ny fitaratra ny fizarana vokatr'izany, norakofana fonony, ary nohamafisina tamin'ny lakaoly ny sisiny. Nojerena tamin'ny alalan'ny mikroskopia optika ireo slide voaomana ary nalaina sary tamin'ny fampitomboana samihafa.
Nojerena tamin'ny alalan'ny mikroskopia fluorescence ny fametrahana pôlimera tao amin'ny tambajotra Ct, mifototra amin'ny fomba voalazan'i Rice et al.29. Nafangaro tamin'ny loko fluorescent (amaranth) ny fangaro HFFC nampiasaina tamin'ny fangaro, ary nomanina araka ny fomba voalaza teo aloha ny NFRCS (Ch & Cp). Nafangaro tamin'ny loko fluorescent (amaranth) ny fangaro HFFC nampiasaina tamin'ny fangaro, ary nomanina araka ny fomba voalaza teo aloha ny NFRCS (Ch & Cp).Nafangaro tamin'ny loko fluorescent (amaranth) ny fangaro HFFC nampiasaina tamin'ny fangaro ary azo ny NFRCS (Ch sy Cp) araka ny fomba voalaza teo aloha.将用于配方的HFFC 组合物与荧光染料（苋菜）混合，并按照前面提到的方法到的方法制（NFCh制天。将用于配方的HFFC 组合物与荧光染料（苋菜）混合，并按照前面提到的方法到的方法制（NFCh制天。Ny fangaro HFFC nampiasaina tao amin'ny fangaro dia nafangaro tamin'ny loko fluorescent (Amaranth) ary nahazo NFRCS (Ch sy Cp), araka ny voalaza tetsy aloha.Notapahina tamin'ireo santionany azo ireo ampahany manify tamin'ny NFRK, napetraka teo amin'ny fitaratra, ary norakofana lamba famaohana. Jereo eo ambanin'ny mikroskopia fluorescent ireo sary voaomana amin'ny fampiasana sivana maitso (310-380 nm). Nalaina tamin'ny fampitomboana 4x ny sary mba hahatakarana ny fifandraisan'ny Ct sy ny fametrahana polimera be loatra ao amin'ny tambajotra Ct.
Ny topografian'ny velaran'ny NFRCS Ch sy Cp dia voafaritra tamin'ny fampiasana mikroskopia hery atomika (AFM) miaraka amin'ny cantilever TESP maranitra be amin'ny fomba fanindriana: 42 N/m, 320 kHz, ROC 2-5 nm, Bruker, Taiwan. Ny harafesina amin'ny velaran-tany dia voafaritra tamin'ny alàlan'ny root mean square (RMS) tamin'ny fampiasana rindrambaiko (Scanning Probe Image Processor). Naseho tamin'ny sary 3D ny toerana NFRCS isan-karazany mba hijerena ny fitoviana amin'ny velaran-tany. Ny fivilian-dàlana mahazatra amin'ny isa ho an'ny faritra iray dia faritana ho harafesina amin'ny velaran-tany. Ny fampitoviana RMS dia nampiasaina handrefesana ny harafesina amin'ny velaran-tany amin'ny NFRCS31.
Natao tamin'ny alalan'ny FESEM, SU8000, HI-0876-0003, Hitachi, Tokyo, ireo fanadihadiana mifototra amin'ny FESEM mba hahatakarana ny endriky ny velaran'ny Ch NFRCS sy Cp NFRCS, izay naneho BCT tsara kokoa noho ny Cm NFRCS. Natao araka ny fomba voalazan'i Zhao et al. 32 ny fanadihadiana FESEM miaraka amin'ny fanovana kely. Ny NFRCS 20 ka hatramin'ny 30 mg Ch NFRCS sy Cp NFRCS dia nafangaro mialoha tamin'ny 20 µl sodium citrate 3.8% nafangaro mialoha tamin'ny ran'ny voalavo. Nampiana 20 μl CaCl2 0.2 M tamin'ireo santionany notsaboina tamin'ny ra mba hanombohana ny coagulation ary notehirizina tamin'ny mari-pana ao an-trano nandritra ny 10 minitra ireo santionany. Ho fanampin'izany, nesorina tamin'ny velaran'ny NFRCS ireo erythrocytes be loatra tamin'ny alalan'ny fanasana amin'ny saline.
Notsaboina tamin'ny glutaraldehyde 0.1% ireo santionany manaraka ary avy eo dia nohamainina tao anaty lafaoro mafana tamin'ny 37°C mba hanesorana ny hamandoana. Norakofana sy nohadihadiana ireo santionany maina 32. Ny sary hafa azo nandritra ny fanadihadiana dia ny fiforonan'ny rà mandriaka teo amin'ny velaran'ny kofehy landihazo tsirairay, ny fametrahana polymer teo anelanelan'ny Ct, ny endriky ny erythrocyte, ny fahamarinan'ny rà mandriaka, ary ny endriky ny erythrocyte teo anatrehan'ny NFRCS. Ny faritra NFRCS tsy voatsabo sy ny faritra NFRCS voatsabo Ch sy Cp izay novolena ra dia nozahana mba hahitana ion-javatra (sodium, potassium, azota, calcium, magnesium, zinc, varahina ary selenium)33. Ampitahao ny isan-jaton'ny ion-javatra eo amin'ny santionany voatsabo sy tsy voatsabo mba hahatakarana ny fanangonan-javatra ion-javatra mandritra ny fiforonan'ny rà mandriaka sy ny fitoviana amin'ny rà mandriaka.
Ny hatevin'ny sosona Cp HFFC eo amin'ny velaran'ny Ct dia voafaritra tamin'ny alalan'ny FESEM. Ny fizarana mitsivalana amin'ny Cp NFRCS dia notapatapahina avy amin'ny rafitra ary norakofana sputter. Ny santionan'ny sosona sputter vokarina dia nojerena tamin'ny alalan'ny FESEM ary ny hatevin'ny sosona 34, 35, 36.
Ny X-ray micro-CT dia manome sary 3D avo lenta tsy manimba ary ahafahanao mandalina ny fandaminana anatiny ny NFRK. Ny Micro-CT dia mampiasa taratra X mandalo amin'ny santionany mba handraisana an-tsoratra ny coefficient fihenan-danja eo an-toerana amin'ny taratra X ao amin'ny santionany, izay manampy amin'ny fahazoana fampahalalana ara-morfolojika. Ny toerana anatiny an'ny Ct ao amin'ny Cp NFRCS sy ny Cp NFRCS voatsabo amin'ny ra dia nodinihina tamin'ny micro-CT mba hahatakarana ny fahombiazan'ny fidiran'ny ra sy ny fivontosan'ny ra eo anatrehan'ny NFRCS37,38,39. Ny rafitra 3D an'ny santionany Cp NFRCS voatsabo amin'ny ra sy tsy voatsabo dia naverina namboarina tamin'ny alàlan'ny micro-CT (V|tome|x S240, Phoenix, Alemaina). Amin'ny fampiasana ny rindrambaiko VG STUDIO-MAX version 2.2, sary X-ray maromaro no nalaina avy amin'ny zoro samihafa (tsara indrindra ny fandrakofana 360°) mba hamoronana sary 3D ho an'ny NFRCS. Ny angon-drakitra projection voaangona dia naverina namboarina ho sary volumetric 3D amin'ny fampiasana ny rindrambaiko 3D ScanIP Academic tsotra mifanaraka amin'izany.
Ankoatra izany, mba hahatakarana ny fizarazaran'ny rà miraikitra, dia nampiana ra citrated 20 µl sy CaCl2 0.2 M 20 µl tao amin'ny NFRCS mba hanombohana ny fampivainganan'ny ra. Navela hihamafy ireo santionany voaomana. Notsaboina tamin'ny glutaraldehyde 0.5% ny velaran'ny NFRK ary nohamainina tao anaty lafaoro mafana tamin'ny 30–40°C nandritra ny 30 minitra. Nozahana ny rà miraikitra niforona teo amin'ny NFRCS, namboarina indray, ary naseho an-tsary ny sary 3D an'ilay rà miraikitra.
Natao tamin'ny Cp NFRCS (tsara indrindra raha ampitahaina amin'ny Ch NFRCS) ny fitiliana antibakteria tamin'ny fampiasana ny fomba voalaza teo aloha miaraka amin'ny fanovana kely. Ny fiasan'ny Cp NFRCS sy Cp HFFC amin'ny antibakteria dia voafaritra tamin'ny fampiasana zavamiaina bitika telo samihafa [S.aureus (bakteria gram-positive), E.coli (bakteria gram-negative) ary Candida fotsy (C.albicans)] mitombo amin'ny agar ao anaty lovia Petri ao anaty incubator. Ampidiro mitovy tsara ny 50 ml amin'ny fampiatoana kolontsaina bakteria voatsatso amin'ny fifantohana 105-106 CFU ml-1 eo amin'ny medium agar. Araraka ao anaty lovia Petri ny medium ary avela hivaingana. Nasiana lavaka teo amin'ny velaran'ny takelaka agar mba hamenoana HFFC (lavaka 3 ho an'ny HFFC ary 1 ho an'ny fanaraha-maso ratsy). Ampio HFFC 200 µl amin'ny lavaka 3 ary PBS pH 7.4 200 µl amin'ny lavaka faha-4. Eo amin'ny ilany ilan'ny lovia petri, apetraho eo amin'ny agar mivaingana ny kapila Cp NFRCS 12 mm ary hosory amin'ny PBS (pH 7.4). Ny takelaka Ciprofloxacin, ampicillin ary fluconazole dia heverina ho fenitra fanondroana ho an'ny Staphylococcus aureus, Escherichia coli ary Candida albicans. Refeso amin'ny tanana ny faritra manakana ary makà sary nomerika an'ilay faritra manakana.
Taorian'ny fankatoavana ara-etika avy amin'ny andrim-panjakana, dia natao tao amin'ny Kasturba Medical College of Education and Research any Manipal, Karnataka, any atsimon'i India ny fanadihadiana. Nojerena sy nankatoavin'ny Komitin'ny Etika ao amin'ny Kasturba Medical College, Manipal, Karnataka (IEC: 674/2020) ny protokol fanandramana TEG in vitro. Ireo mpandray anjara dia nalaina avy amin'ireo mpanome ra an-tsitrapo (18 ka hatramin'ny 55 taona) avy amin'ny banky ran'ny hopitaly. Ho fanampin'izany, dia nalaina avy amin'ireo mpilatsaka an-tsitrapo ny taratasy fanekena an-tsitrapo ho an'ny fanangonana santionan-dra. Nampiasaina handinihana ny fiantraikan'ny formulation Cp HFFC amin'ny ra manontolo mifangaro amin'ny sodium citrate ny TEG teratany (N-TEG). Ny N-TEG dia fantatra betsaka amin'ny anjara asany amin'ny famerenana amin'ny laoniny eo amin'ny toerana fitsaboana, izay miteraka olana ho an'ny mpitsabo noho ny mety hisian'ny fahatarana ara-pitsaboana manan-danja amin'ny valiny (fitiliana coagulation mahazatra). Ny fanadihadiana N-TEG dia natao tamin'ny fampiasana ra manontolo. Ny fanekena an-tsitrapo sy ny tantaram-pitsaboana amin'ny antsipiriany dia nalaina avy amin'ireo mpandray anjara rehetra. Ny fanadihadiana dia tsy nahitana ireo mpandray anjara manana fahasarotana hemostatic na thrombotic toy ny fitondrana vohoka/postpartum na aretin'ny aty. Nesorina tamin'ny fanadihadiana ihany koa ireo olona nandray fanafody izay misy fiantraikany amin'ny fizotran'ny coagulation. Natao tamin'ny mpandray anjara rehetra araka ny fomba fanao mahazatra ny fitiliana laboratoara fototra (hemoglobine, prothrombin time, thromboplastin activated ary platelet count). Ny N-TEG dia mamaritra ny viscoelasticity amin'ny clot ra, ny firafitry ny clot voalohany, ny fifandraisan'ny poti-javatra, ny fanamafisana ny clot, ary ny lysis clot. Ny fanadihadiana N-TEG dia manome angon-drakitra an-tsary sy nomerika momba ny fiantraikan'ny singa sela sy plasma maromaro. Natao tamin'ny Cp HFFC roa samihafa (10 µl sy 50 µl) ny fanadihadiana N-TEG. Vokatr'izany, nampiana 1 ml ny ra manontolo misy asidra sitrika tamin'ny 10 μl ny Cp HFFC. Ampio 1 ml (Cp HFFC + ra citrated), 340 µl ny ra mifangaro amin'ny lovia TEG 20 µl 0.2 M CaCl2. Taorian'izay, dia nampidirina tao amin'ny TEG® 5000, US ireo lovia TEG mba handrefesana ny R, K, zoro alpha, MA, G, CI, TPI, EPL, LY 30% amin'ny santionan-dra teo anatrehan'ny Cp HFFC41.
Nojeren'ny Komitin'ny Etika momba ny Biby (IAEC), Sekoly Fitsaboana Kasturba, Ivontoerana Manipal momba ny Fampianarana Ambony, Manipal (IAEC/KMC/69/2020) ary neken'ny Institutional Animal Ethics Committee (IAEC) ny protokolin'ny fandalinana in vivo. Natao araka ny tolo-kevitry ny Komitin'ny Fanaraha-maso sy ny Fanaraha-maso ny Fanandramana Biby (CPCSEA) avokoa ny fanandramana rehetra natao tamin'ny biby. Natao tamin'ny voalavo Wistar vavy (milanja 200 ka hatramin'ny 250 g) ny fandalinana NFRCS in vivo (2 × 2 cm2). Nampifanarahina tamin'ny mari-pana 24-26°C ny biby rehetra, ary afaka nahazo sakafo sy rano mahazatra malalaka ireo biby. Nozaraina kisendrasendra ho vondrona samihafa ny biby rehetra, ary ny vondrona tsirairay dia nisy biby telo. Natao araka ny Animal Studies: Report of In Vivo Experiments 43 ny fandalinana rehetra. Talohan'ny fanadihadiana, dia notorina tamin'ny alalan'ny fampidirana intraperitoneal (ip) fangaroan'ny ketamine 20-50 mg (isan'ny lanjan'ny vatana 1 kg) sy xylazine 2-10 mg (isan'ny lanjan'ny vatana 1 kg) ireo biby. Taorian'ny fanadihadiana, dia nokajiana ny habetsaky ny rà mandriaka tamin'ny alalan'ny fanombanana ny fahasamihafana misy eo amin'ny lanjan'ny santionany voalohany sy farany, ary ny salan'isa azo avy amin'ireo fitsapana telo ireo dia nalaina ho habetsaky ny rà mandriaka tao amin'ny santionany.
Nampiharina ny modely fanapahana rambon'ny voalavo mba hahatakarana ny mety ho vitan'ny NFRCS amin'ny fanovana ny rà mandriaka amin'ny ratra, ady, na lozam-pifamoivoizana (modely ratra). Hetezo amin'ny antsy scalpel ny 50%-n'ny rambony ary apetraho amin'ny rivotra mandritra ny 15 segondra mba hahazoana antoka fa mandeha ara-dalàna ny rà mandriaka. Ho fanampin'izany, napetraka teo amin'ny rambon'ny voalavo ny santionany fitsapana tamin'ny alàlan'ny fanerena (Ct, Cs, Ch NFRCS ary Cp NFRCS). Notaterina ny rà mandriaka sy ny PCT ho an'ny santionany fitsapana (n ​​= 3)17,45.
Nodinihina tamin'ny alalan'ny modely iray amin'ny lalan-drà femoraly ambonin'ny vatana ny fahombiazan'ny fanaraha-maso ny tsindrin'ny NFRCS amin'ny ady. Aseho ny lalan-drà femoraly, tetehina amin'ny trocar 24G, ary avoaka ao anatin'ny 15 segondra. Rehefa hita ny rà mandriaka tsy voafehy, dia apetraka eo amin'ny toerana tetehina ny santionany fitsapana ary asiana tsindry. Avy hatrany taorian'ny fametrahana ny santionany fitsapana, dia noraketina ny fotoana fampangatsiahana ary nojerena ny fahombiazan'ny hemostatic nandritra ny 5 minitra manaraka. Naverina tamin'ny Cs sy Ct46 io fomba fiasa io ihany.
Nanolotra modely momba ny ratra amin'ny aty i Dowling et al. 47 mba hanombanana ny mety ho hemostatic an'ny fitaovana hemostatic amin'ny rà mandriaka mandritra ny fandidiana. Noraisina an-tsoratra ny BCT ho an'ny santionany Ct (fanaraha-maso ratsy), ny rafitra Cs (fanaraha-maso tsara), ny santionany Ch NFRCS, ary ny santionany Cp NFRCS. Naseho tamin'ny alalan'ny laparotomy mediana ny vena cava suprahepatika an'ny voalavo. Taorian'izay, dia notapatapahina tamin'ny hety ny tapany distal amin'ny lobe havia. Manaova fandidiana amin'ny lelan'ny scalpel amin'ny aty ary avela handeha ra mandritra ny segondra vitsy. Nolanjaina tsara ny santionany fitsapana Ch NFRCS sy Cp NFRCS ary noraisina an-tsoratra ny BCT. Avy eo dia nampihatra tsindry ny vondrona fanaraha-maso (Ct) narahin'ny Cs 30 s47 tsy nanapaka ny ratra.
Natao tamin'ny alalan'ny modely ratra excisional ny fitiliana fanasitranana ratra in vivo mba hanombanana ny toetran'ny fanasitranana ratra amin'ny NFRCS miorina amin'ny polymer novolavolaina. Nofantenana sy natao araka ny fomba efa navoaka teo aloha miaraka amin'ny fanovana kely ny modely ratra excisional19,32,48. Nomena fanatoranana ny biby rehetra araka ny voalaza teo aloha. Ampiasao ny totohondry biopsy (12 mm) mba hanaovana fandidiana boribory lalina eo amin'ny hoditry ny lamosina. Nofonosina Cs (fanaraha-maso tsara), Ct (fahafantarana fa manelingelina ny fanasitranana ny lamba landihazo), Ch NFRCS sy Cp NFRCS (vondrona fanandramana) ary fanaraha-maso ratsy tsy misy fitsaboana ny toerana misy ny ratra. Isan'andro amin'ny fandalinana, dia norefesina ny velaran'ny ratra tamin'ny voalavo rehetra. Ampiasao ny fakantsary nomerika mba haka sary ny faritra misy ny ratra ary asio fehy vaovao. Ny isan-jaton'ny fikatonan'ny ratra dia norefesina tamin'ny alalan'ity raikipohy manaraka ity:
Mifototra amin'ny isan-jaton'ny fikatonan'ny ratra tamin'ny andro faha-12 tamin'ny fanadihadiana, dia nesorina ny hoditry ny voalavo ((Cp NFRCS) sy ny vondrona fanaraha-maso) ary nodinihina tamin'ny alalan'ny fandokoana H&E sy ny fandokoana trichrome Masson. Mifototra amin'ny isan-jaton'ny fikatonan'ny ratra tamin'ny andro faha-12 tamin'ny fanadihadiana, dia nesorina ny hoditry ny voalavo ((Cp NFRCS) sy ny vondrona fanaraha-maso) ary nodinihina tamin'ny alalan'ny fandokoana H&E sy ny fandokoana trichrome Masson.Mifototra amin'ny isan-jaton'ny fikatonan'ny ratra tamin'ny andro faha-12 tamin'ny fanadihadiana, dia nesorina ny hoditry ny voalavo tao amin'ny vondrona tsara indrindra ((Cp NFRCS) sy ny vondrona fanaraha-maso) ary nojerena tamin'ny alalan'ny fandokoana hematoxylin-eosin sy Masson's trichrome.根据研究第12天的伤口闭合百分比，切除最佳组((Cp NFRCS)和对照组)的大鼠皮肤，进行H&E染色和Masson三色染色研究。根据研究第12天的伤口闭合百分比，切除最佳组((Cp NFRCS)和对照组)的大鼠皮肤，进行H&E染色和眳组）Nesorina ireo voalavo tao amin'ny vondrona tsara indrindra ((Cp NFRCS) sy ny vondrona fanaraha-maso) mba hanaovana fandokoana hematoxylin-eosin sy fandokoana trichrome Masson mifototra amin'ny isan-jaton'ny fikatonan'ny ratra tamin'ny andro faha-12 tamin'ny fanadihadiana.Ny fomba fandokoana nampiharina dia natao araka ny fomba voalaza teo aloha49,50. Raha fintinina, rehefa avy nofatorana tamin'ny formaline 10%, dia nohamainina tamin'ny alikaola maromaro ireo santionany. Ampiasao ny mikrôtome mba hahazoana fizarana manify (5 µm ny hateviny) amin'ny sela nesorina. Ny fizarana manify amin'ny fanaraha-maso sy ny Cp NFRCS dia notsaboina tamin'ny hematoxylin sy eosin mba handinihana ny fiovana ara-pitsaboana. Ny fandokoana trichrome an'i Masson dia nampiasaina mba hamantarana ny fiforonan'ny fibrilan'ny collagen. Ny valiny azo dia nodinihin'ireo mpitsabo aretin-tsaina tsy nahitam-bokatra.
Nodinihina tamin'ny mari-pana ao an-trano (25°C ± 2°C/60% RH ± 5%) nandritra ny 12 volana ny fahamarinan'ny santionan'ny Cp NFRCS51. Nojerena maso ny Cp NFRCS (fiovan'ny lokon'ny velarana sy ny fitomboan'ny mikraoba) ary nosedraina mba hahitana ny fanoherana ny fikororohana sy ny BCT araka ny fomba voalaza etsy ambony ao amin'ny fizarana Fitaovana sy Fomba.
Nodinihina tamin'ny fanomanana ny Cp NFRCS mirefy 15 × 15 cm2 ny fahafahan'ny Cp NFRCS mivelatra sy azo averina ampiasaina. Ho fanampin'izany, dia nesorina avy amin'ny ampahan'ny Cp NFRCS isan-karazany ny santionany 30 mg (n = 5) ary nojerena ny BCT an'ireo santionany nodinihina araka ny voalaza teo aloha tao amin'ny fizarana Fomba.
Niezaka namorona endrika sy rafitra isan-karazany izahay tamin'ny fampiasana ny singa Cp NFRCS ho an'ny fampiharana biomedika isan-karazany. Anisan'izany endrika na firafitra izany ny swab kônika ho an'ny rà mandriaka amin'ny orona, ny fitsaboana nify, ary ny swab boribory ho an'ny rà mandriaka amin'ny fivaviana.
Ny angon-drakitra rehetra dia aseho amin'ny salan'isa ± fivilian-dàlana mahazatra ary nohadihadiana tamin'ny ANOVA mampiasa Prism 5.03 (GraphPad, San Diego, CA, Etazonia) arahin'ny fitsapana fampitahana marobe an'i Bonferroni (*p<0.05).
Ny fomba fiasa rehetra natao tamin'ny fanadihadiana olombelona dia nifanaraka tamin'ny fenitry ny Ivontoerana sy ny Filankevitry ny Fikarohana Nasionaly, ary koa ny Fanambarana Helsinki 1964 sy ireo fanitsiana nanaraka izany, na fenitra etika mitovy amin'izany. Nampahafantarina ny mpandray anjara rehetra momba ny endriky ny fanadihadiana sy ny maha-an-tsitrapo azy. Mijanona ho tsiambaratelo ny angon-drakitra avy amin'ny mpandray anjara rehefa voaangona. Ny protokol fanandramana TEG in vitro dia nojerena sy neken'ny Komitin'ny Etika Institutional ao amin'ny Kasturba Medical College, Manipal, Karnataka (IEC: 674/2020). Nanao sonia fanekena an-tsitrapo ireo mpilatsaka an-tsitrapo mba hanangona santionan-dra.
Ny fomba fiasa rehetra natao tamin'ny fandalinana biby dia notanterahina araka ny Kastuba Faculty of Medicine, Manipal Institute of Higher Education, Manipal (IAEC/KMC/69/2020). Ny fanandramana biby rehetra natao dia notanterahina araka ny torolalana avy amin'ny Komitin'ny Fanaraha-maso sy ny Fanaraha-maso ny Fanandramana Biby (CPCSEA). Manaraka ny torolalana ARRIVE ny mpanoratra rehetra.
Nohadihadiana sy nampitahaina tamin'ny spectrum chitosan aseho amin'ny Sary 2A ny spectra FTIR an'ny NFRCS rehetra. Ny tendrony spectral mampiavaka ny chitosan (voarakitra) amin'ny 3437 cm-1 (fihenjanan'ny OH sy NH, mifanindry), 2945 sy 2897 cm-1 (fihenjanan'ny CH), 1660 cm-1 (karazana NH2), 1589 cm-1 (fihenjanana N–H), 1157 cm-1 (fihenjanan'ny tetezana O-), 1067 cm-1 (fihenjanan'ny C–O, hydroxyl faharoa), 993 cm-1 (fihenjanan'ny CO, Bo-OH) 52.53.54. Ny Tabilao Fanampiny S1 dia mampiseho ny sandan'ny spectrum absorption FTIR NFRCS ho an'ny chitosan (reporter), chitosan madio, Cm, Ch, ary Cp. Ny spectra FTIR an'ny NFRCS rehetra (Cm, Ch ary Cp) dia naneho tarika absorption mitovy amin'ny chitosan madio tsy misy fiovana lehibe (Sary 2A). Nanamafy ny tsy fisian'ny fifandraisana simika na ara-batana teo amin'ireo pôlimera nampiasaina tamin'ny famolavolana ny NFRCS ny valin'ny FTIR, izay manondro fa tsy miasa ireo pôlimera nampiasaina.
Famaritana in vitro ny Cm NFRCS, Ch NFRCS, Cp NFRCS ary Cs. (A) dia maneho ny spektra FTIR mitambatra amin'ny firafitry ny chitosan sy Cm NFRCS, Ch NFRCS ary Cp NFRCS eo ambany fanerena. (B) a) Ny tahan'ny fidiran'ny NFRCS Cm, Ch, Cp, ary Cg amin'ny ra manontolo (n = 3); Ny santionany Ct dia naneho BAR ambony kokoa satria ny lamba landihazo dia manana fahombiazana amin'ny fidiran'ny ra ambony kokoa; b) Ra aorian'ny fidiran'ny ra Sary maneho ny santionany voaray. Fanehoana an-tsary ny BCT an'ny santionany fitsapana C (Cp NFRCS no nanana ny BCT tsara indrindra (15 s, n = 3)). Naseho ho salan'isa ± SD ny angona ao amin'ny C, D, E, ary G, ary ny bara fahadisoana dia maneho ny SD, ***p < 0.0001. Naseho ho salan'isa ± SD ny angona ao amin'ny C, D, E, ary G, ary ny bara fahadisoana dia maneho ny SD, ***p < 0.0001. Данные в C, D, E и G представлены как среднее ± стандартное отклонение, а планки погрешностей представляют стално <0,0001. Aseho amin'ny salan'isa ± fivilian-dàlana mahazatra ny angona ao amin'ny C, D, E, ary G, ary ny bara fahadisoana dia maneho ny fivilian-dàlana mahazatra, ***p<0.0001. C、D、E 和G 中的数据显示为平均值± SD，误差线代表SD，***p < 0.0001. C、D、E 和G 中的数据显示为平均值± SD，误差线代表SD，***p < 0.0001. Данные в C, D, E и G показаны как среднее значение ± стандартное отклонение, планки погрешностей представляют стално, *** <0,0001. Aseho amin'ny salan'isa ± fivilian-dàlana mahazatra ny angon-drakitra ao amin'ny C, D, E, ary G, ny bara fahadisoana dia maneho ny fivilian-dàlana mahazatra, ***p<0.0001.