Ташаккур барои боздид аз Nature.com. Версияи браузере, ки шумо истифода мебаред, дастгирии маҳдуди CSS дорад. Барои беҳтарин таҷриба, мо тавсия медиҳем, ки шумо браузери навшударо истифода баред (ё режими мутобиқатро дар Internet Explorer ғайрифаъол кунед). Дар айни замон, барои таъмини дастгирии доимӣ, мо сайтро бе услубҳо ва JavaScript намоиш медиҳем.
Хунравии беназорат яке аз сабабҳои асосии марг аст. Ноил шудан ба гемостази зуд зинда мондани субъектро ҳамчун ёрии аввалия ҳангоми ҷанг, садамаҳои нақлиётӣ ва амалиётҳои кам кардани марг таъмин мекунад. Искафали композитии бо нахҳои нахдор тақвиятёфта (NFRCS), ки аз таркиби оддии плёнкаи гемостатикии (HFFC) ҳамчун фазаи пайваста гирифта шудааст, метавонад гемостазро ба вуҷуд орад ва беҳтар созад. Таҳияи NFRCS ба тарҳи боли сӯзанак асос ёфтааст. Сохтори боли сӯзанак аз болҳои кундаланг ва дарозӣ иборат аст ва мембранаҳои бол барои нигоҳ доштани якпорчагии микросохтор ба якдигар пайвастанд. HFFC сатҳи нахро бо плёнкаи ғафсии нанометрӣ яксон мепӯшонад ва ғафсии пахтаи тасодуфан тақсимшударо (Ct) (фазаи пароканда) барои ташкил додани сохтори наносӯзонак пайваст мекунад. Омезиши фазаҳои пайваста ва пароканда арзиши маҳсулотро дар муқоиса бо маҳсулоти дастраси тиҷоратӣ даҳ маротиба кам мекунад. NFRCS-и тағйирёфта (тампонҳо ё банди дастӣ)-ро дар як қатор барномаҳои биотиббӣ истифода бурдан мумкин аст. Таҳқиқоти in vivo нишон доданд, ки NFRCS-и таҳияшудаи Cp раванди лахташавиро дар макони истифода ба вуҷуд меорад ва тақвият медиҳад. NFRCS метавонад муҳити микроро танзим кунад ва дар сатҳи ҳуҷайравӣ аз сабаби сохтори нанопораи худ амал кунад, ки боиси шифоёбии беҳтари захм дар модели захми буридашуда мегардад.
Хунравии беназорат ҳангоми ҷанг, дар ҳолатҳои амалиётӣ ва фавқулодда метавонад ба ҳаёти маҷрӯҳон таҳдиди ҷиддӣ эҷод кунад1. Ин ҳолатҳо минбаъд ба афзоиши умумии муқовимати рагҳои периферӣ оварда мерасонанд, ки боиси шоки геморрагӣ мегардад. Чораҳои мувофиқ барои назорати хунравӣ ҳангоми ҷарроҳӣ ва баъд аз он эҳтимолан барои ҳаёт хатарнок ҳисобида мешаванд2,3. Зарар ба рагҳои калон боиси аз даст додани хунравии аз ҳад зиёд мегардад, ки дар натиҷа сатҳи фавт дар ҷанг ≤ 50% ва ҳангоми ҷарроҳӣ 31% мегардад1. Аз даст додани хунравии аз ҳад зиёд боиси кам шудани ҳаҷми бадан мегардад, ки боиси коҳиши ҳаҷми дил мегардад. Афзоиши муқовимати умумии рагҳои периферӣ ва вайроншавии прогрессивии микрогардиш боиси гипоксия дар узвҳои ҳаётбахш мегардад. Агар ин ҳолат бе дахолати муассир идома ёбад, шоки геморрагӣ метавонад ба вуҷуд ояд1,4,5. Мушкилоти дигар пешрафти гипотермия ва ацидози метаболикӣ, инчунин ихтилоли лахташавӣ, ки ба раванди лахташавӣ халал мерасонад, иборатанд. Шоки шадиди геморрагӣ бо хатари баланди марг алоқаманд аст6,7,8. Дар шоки дараҷаи III (прогрессивӣ), интиқоли хун барои зинда мондани бемор ҳангоми беморӣ ва фавт дар давраи амалиётӣ ва баъди ҷарроҳӣ муҳим аст. Барои бартараф кардани ҳамаи ҳолатҳои дар боло зикршуда, ки барои ҳаёт хатарноканд, мо як тахтаи композитии бо нахҳои нанопорадор тақвиятёфтаро (NFRCS) таҳия кардем, ки консентратсияи ҳадди ақали полимерро (0,5%) бо истифода аз омезиши полимерҳои гемостатикии дар об ҳалшаванда истифода мебарад.
Бо истифода аз тақвияти нах, маҳсулоти камхарҷро таҳия кардан мумкин аст. Нахҳои тасодуфан ҷойгиршуда ба сохтори боли сӯзан монанданд, ки бо рахҳои уфуқӣ ва амудии болҳо мувозинат карда шудаанд. Рагҳои кундаланг ва дарозии бол бо мембранаи бол робита доранд (Расми 1). NFRCS аз Ct-и тақвиятёфта ҳамчун системаи каркас бо қувваи беҳтари ҷисмонӣ ва механикӣ иборат аст (Расми 1). Аз сабаби дастрасии он ва ҳунармандӣ, ҷарроҳон ҳангоми амалиёт ва пӯшишҳо истифодаи ченакҳои риштаи пахтагинро (Ct) афзалтар медонанд. Аз ин рӯ, бо назардошти манфиатҳои сершумори он, аз ҷумла зиёда аз 90% селлюлозаи кристаллӣ (ки дар беҳтар кардани фаъолияти гемостатикӣ иштирок мекунад), Ct ҳамчун системаи скелетии NFRCS9,10 истифода шудааст. Аз ин рӯ, бо назардошти манфиатҳои сершумори он, аз ҷумла зиёда аз 90% селлюлозаи кристаллӣ (ки дар беҳтар кардани фаъолияти гемостатикӣ иштирок мекунад), Ct ҳамчун системаи скелетии NFRCS9,10 истифода шудааст. Следовательно, учитывая его многочисленные преимущества, в том числе > 90% кристаллической целлюлозӣ (участвует дар повышении гемостатической активности), Ct истифодабарии системаи качестве скелетной NFRCS9,10. Аз ин рӯ, бо назардошти бартариҳои зиёди он, аз ҷумла зиёда аз 90% селлюлозаи кристаллӣ (ки дар афзоиши фаъолияти гемостатикӣ иштирок мекунад), Ct ҳамчун системаи скелетии NFRCS истифода шудааст9,10.因此，考虑到它的多重益处，包括> 90% 的结晶纤维素（有助于增强止血C，漻被用作NFRCS9,10 的骨架系统。因此，考虑到它的多重益处，包括> 90%Аз ин рӯ, бо назардошти манфиатҳои зиёди он, аз ҷумла зиёда аз 90% селлюлозаи кристаллӣ (ба беҳтар шудани фаъолияти гемостатикӣ мусоидат мекунад), Ct ҳамчун таҳкурсӣ барои NFRCS9,10 истифода шудааст.Ct рӯйпӯш карда шуд (ташаккули плёнкаи наноғафс мушоҳида шуд) ва бо таркиби гемостатикии плёнкашакл (HFFC) пайваст карда шуд. HFFC мисли матригел амал мекунад ва Ct-и тасодуфан ҷойгиршударо дар як ҷо нигоҳ медорад. Тарҳи таҳияшуда фишорро дар дохили фазаи пароканда (нахҳои мустаҳкамкунанда) интиқол медиҳад. Бо истифода аз консентратсияи ҳадди ақали полимер, ба даст овардани сохторҳои нанопора бо қувваи хуби механикӣ душвор аст. Илова бар ин, танзим кардани қолабҳои гуногун барои барномаҳои гуногуни биотиббӣ осон нест.
Дар расм диаграммаи тарҳи NFRCS, ки бар асоси сохтори болҳои сӯзаншакл (A) асос ёфтааст, нишон дода шудааст. Ин тасвир қиёси сохтори болҳои сӯзаншаклро (рагҳои буришкунанда ва дарозии бол ба ҳам пайвастанд) ва фотомикрографияи буриши буриши Cp NFRCS (B) нишон медиҳад. Намунаи схемавии NFRCS.
NFRC-ҳо бо истифода аз HFFC ҳамчун фазаи пайваста барои бартараф кардани маҳдудиятҳои дар боло зикршуда таҳия карда шуданд. HFFC аз полимерҳои гуногуни гемостатикии плёнкашакл иборат аст, аз ҷумла хитозан (ҳамчун полимери асосии гемостатик) бо метилселлюлоза (MC), гидроксипропил метилселлюлоза (HPMC 50 cp) ва спирти поливинил (PVA)) (125 kDa) ҳамчун полимери ёрирасон, ки ташаккули тромбро мусоидат мекунад. Илова кардани поливинилпирролидин K30 (PVP K30) қобилияти ҷабби намии NFRCS-ро беҳтар кард. Полиэтиленгликол 400 (PEG 400) барои беҳтар кардани пайванди полимер дар омехтаҳои полимерии пайвастшуда илова карда шуд. Се таркиби гуногуни гемостатикии HFFC (Cm HFFC, Ch HFFC ва Cp HFFC), яъне хитозан бо MC (Cm), хитозан бо HPMC (Ch) ва хитозан бо PVA (Cp), ба Ct истифода шуданд. Тадқиқотҳои гуногуни тавсифи in vitro ва in vivo фаъолияти гемостатикӣ ва шифобахшии захмҳои NFRCS-ро тасдиқ карданд. Маводҳои композитӣ, ки аз ҷониби NFRCS пешниҳод карда мешаванд, метавонанд барои танзими шаклҳои гуногуни сохтмон барои қонеъ кардани ниёзҳои мушаххас истифода шаванд.
Илова бар ин, NFRCS-ро метавон ҳамчун бинт ё рулон тағйир дод, то тамоми минтақаи осеби дасту пойҳо ва дигар қисмҳои баданро пӯшонад. Махсусан барои ҷароҳатҳои дасту пойҳои ҷангӣ, тарҳи NFRCS-и тарҳрезишударо метавон ба ним даст ё пойи пурра иваз кард (Расми иловагӣ S11). NFRCS-ро метавон ба як банди дастӣ бо часпаки бофта табдил дод, ки онро барои қатъ кардани хунравӣ аз ҷароҳатҳои вазнини худкушӣ аз даст истифода бурдан мумкин аст. Ҳадафи асосии мо таҳияи NFRCS бо полимери ҳарчи камтар аст, ки метавонад ба аҳолии калон (поёнтар аз хатти камбизоатӣ) расонида шавад ва онро дар маҷмӯаи ёрии аввал ҷойгир кардан мумкин аст. NFRCS, ки тарҳи оддӣ, самаранок ва сарфакор дорад, ба ҷамоатҳои маҳаллӣ фоида меорад ва метавонад таъсири ҷаҳонӣ расонад.
Хитозан (вазни молекулавии 80 кДа) ва амарант аз Мерк, Ҳиндустон харидорӣ карда шуданд. Гидроксипропил метилселлюлоза 50 Cp, полиэтиленгликол 400 ва метилселлюлоза аз Loba Chemie Pvt. LLC, Мумбай харидорӣ карда шуданд. Спирти поливинил (вазни молекулавии 125 кДа) (87-90% гидролизшуда) аз National Chemicals, Гуҷарот харидорӣ карда шуд. Поливинилпирролидин K30 аз Molychem, Мумбай харидорӣ карда шуд ва тампонҳои стерилӣ аз Ramaraju Surgery Cotton Mills Ltd., Тамилнад харидорӣ карда шуданд, ки оби Milli Q (системаи тозакунии об Direct-Q3, Мерк, Ҳиндустон) ҳамчун интиқолдиҳанда истифода мешуд.
NFRC бо истифода аз усули лиофилизатсия таҳия шудааст11,12. Ҳамаи таркибҳои HFFC (Ҷадвали 1) бо истифода аз омехтакунандаи механикӣ омода карда шуданд. Маҳлули 0,5%-и хитозанро бо истифода аз 1%-и кислотаи сирко дар об бо омехтакунии пайваста бо суръати 800 чархзанӣ дар як дақиқа дар омехтакунандаи механикӣ омода кунед. Вазни дақиқи полимери пуркардашуда, ки дар Ҷадвали 1 нишон дода шудааст, ба маҳлули хитозан илова карда шуд ва то ба даст овардани маҳлули полимери шаффоф омехта карда шуд. PVP K30 ва PEG 400 ба омехтаи ҳосилшуда дар миқдори нишондодашуда дар Ҷадвали 1 илова карда шуданд ва омехта кардан то ба даст овардани маҳлули полимери часпаки шаффоф идома ёфт. Ваннаи маҳлули полимери ҳосилшуда барои 60 дақиқа бо ултрасадо коркард карда шуд, то ҳубобчаҳои ҳавои дармонда аз омехтаи полимер хориҷ карда шаванд. Тавре ки дар расми иловагии S1(b) нишон дода шудааст, Ct дар ҳар як чоҳи табақи 6-чоҳӣ (қолаб), ки бо 5 мл HFFC илова карда шудааст, баробар тақсим карда шуд.
Барои ба даст овардани яксонии таркунӣ ва тақсимоти HFFC дар шабакаи Ct, пластинаи шашчоҳӣ ба муддати 60 дақиқа бо ултрасадо коркард карда шуд. Сипас, пластинаи шашчоҳӣ дар ҳарорати -20°C ба муддати 8-12 соат ях карда шуд. Пластинаҳои яхкунӣ барои ба даст овардани формулаҳои гуногуни NFRCS ба муддати 48 соат лиофилизатсия карда шуданд. Ҳамин тартиб барои истеҳсоли шаклҳо ва сохторҳои гуногун, ба монанди тампонҳо ё тампонҳои силиндрӣ ё ҳама гуна шакли дигар барои истифодаҳои гуногун истифода мешавад.
Хитозан (80 кДа) (3%) бо дақиқ вазн кардашуда дар 1% кислотаи сирко бо истифода аз омехтакунандаи магнитӣ ҳал карда мешавад. Ба маҳлули ҳосилшудаи хитозан 1% PEG 400 илова карда шуда, 30 дақиқа омехта карда мешавад. Маҳлули ҳосилшударо ба зарфи чоркунҷа ё росткунҷа рехта, дар ҳарорати -80°C барои 12 соат ях кунед. Намунаҳои яхкардашуда барои ба даст овардани Cs13 сӯрохдор барои 48 соат лиофилизатсия карда шуданд.
NFRCS-и таҳияшуда бо истифода аз спектроскопияи инфрасурхи табдили Фурйе (FTIR) (Shimadzu 8400 s FTIR, Токио, Ҷопон) барои тасдиқи мутобиқати кимиёвии хитозан бо дигар полимерҳо14,15 таҷриба карда шуд. Спектрҳои FTIR (паҳнои диапазони спектр аз 400 то 4000 см-1)-и ҳамаи намунаҳои санҷидашуда бо роҳи анҷом додани 32 скан ба даст оварда шуданд.
Суръати ҷабби хун (BAR) барои ҳамаи формулаҳо бо истифода аз усули тавсифкардаи Чен ва дигарон 16 бо тағйироти ночиз арзёбӣ карда шуд. NFRK-ҳои таҳияшудаи ҳамаи таркибҳо дар танӯри вакуумӣ дар ҳарорати 105°C шабона хушк карда шуданд, то ҳалкунандаи боқимондаро тоза кунанд. 30 мг NFRCS (вазни ибтидоии намуна - W0) ва 30 мг Ct (назорати мусбат) дар зарфҳои алоҳида, ки дорои омехтаи пешакӣ 3,8% цитрати натрий буданд, ҷойгир карда шуданд. Дар фосилаҳои муайяншудаи вақт, яъне 5, 10, 20, 30, 40 ва 60 сония, NFRCS хориҷ карда шуд ва сатҳҳои онҳо бо гузоштани намунаҳо дар Ct барои 30 сония аз хуни ҷаббиданашуда тоза карда шуданд. Вазни ниҳоии хуни ҷаббидашуда аз ҷониби NFRCS 16 дар ҳар як нуқтаи вақт (W1) ба назар гирифта шуд. Фоизи BAR-ро бо истифода аз формулаи зерин ҳисоб кунед:
Вақти лахташавии хун (BCT) мувофиқи гузориши Ванг ва дигарон муайян карда шуд. 17. Вақти зарурӣ барои лахташавии хуни пурра (хун бо 3,8% цитрати натрий омехташуда) дар ҳузури NFRCS ҳамчун BCT-и намунаи санҷишӣ ҳисоб карда шуд. Ҷузъҳои гуногуни NFRCS (30 мг) дар шишаҳои 10 мл бо сарпӯши винтӣ ҷойгир карда шуда, дар ҳарорати 37°C инкубатсия карда шуданд. Хун (0,5 мл) ба шиша илова карда шуд ва барои фаъол кардани лахташавии хун 0,3 мл 0,2 M CaCl2 илова карда шуд. Дар ниҳоят, шишаро ҳар 15 сония (то 180°) то пайдо шудани лахтаи сахт чаппа кунед. BCT-и намуна аз рӯи шумораи пардаҳои гардишкунанда ҳисоб карда мешавад17,18. Дар асоси BCT, ду таркиби беҳтарин аз NFRCS Cm, Ch ва Cp барои таҳқиқоти минбаъдаи тавсиф интихоб карда шуданд.
BCT-и таркибҳои Ch NFRCS ва Cp NFRCS бо роҳи татбиқи усули тавсифшуда аз ҷониби Ли ва дигарон муайян карда шуд. 19. 15 x 15 мм2 Ch NFRCS, Cp NFRCS ва Cs (назорати мусбат)-ро ба косаҳои алоҳидаи Петри (37 °C) ҷойгир кунед. Хуне, ки дорои 3,8% цитрати натрий буд, бо 0,2 М CaCl2 бо таносуби ҳаҷми 10:1 омехта карда шуд, то раванди лахташавии хун оғоз шавад. 20 мкл омехтаи хуни каламуши 0,2 М CaCl2 ба сатҳи намуна молида шуда, дар косаи холӣ Петри ҷойгир карда шуд. Хуни назоратӣ ба косаҳои холӣи Петри бе Ct рехта шуд. Дар фосилаҳои муқарраршудаи 0, 3 ва 5 дақиқа, лахташавиро бо илова кардани 10 мл оби деионизатсияшуда (DI) ба намунае, ки косаро дар бар мегирад, бе халалдор кардани лахта қатъ кунед. Эритроситҳои бекоагуляция (эритроситҳо) дар ҳузури оби деионизатсияшуда гемолизро аз сар мегузаронанд ва гемоглобинро раҳо мекунанд. Гемоглобин дар нуқтаҳои гуногуни вақт (HA(t)) дар 540 нм (λmax гемоглобин) бо истифода аз спектрофотометри UV-Vis чен карда шуд. Ҷуброни мутлақи гемоглобин (AH(0)) дар 0 дақиқаи 20 мкл хун дар 10 мл оби деионизатсияшуда ҳамчун стандарти истинодӣ қабул карда шуд. Ҷуброни нисбии гемоглобин (RHA)-и хуни лахташуда аз таносуби HA(t)/HA(0) бо истифода аз ҳамон партияи хун ҳисоб карда шуд.
Бо истифода аз таҳлилгари текстура (Texture Pro CT V1.3 Build 15, Брукфилд, ИМА), хосиятҳои часпакии NFRK ба бофтаи осебдида муайян карда шуданд. Як косаи силиндрии поёни кушодаро ба даруни пӯсти хук (бе қабати равған) пахш кунед. Намунаҳо (Ch NFRCS ва Cp NFRCS) тавассути канюля ба қолабҳои силиндрӣ часпонида шуданд, то часпак ба пӯсти хук эҷод карда шавад. Пас аз инкубатсияи 3-дақиқаӣ дар ҳарорати хонагӣ (RT) (25° C), қувваи часпакии NFRCS бо суръати доимии 0,5 мм/сония сабт карда шуд.
Хусусияти асосии герметикҳои ҷарроҳӣ афзоиши лахташавии хун ва кам кардани талафоти хун аст. Коагулятсияи беталафот дар NFRCS бо истифода аз усули қаблан нашршуда бо тағйироти ночиз арзёбӣ карда шуд 19. Як найчаи микросентрифуга (2 мл) (диаметри дарунии 10 мм) бо сӯрохи 8 × 5 мм2 дар як тарафи найчаи сентрифуга (ки захми кушодаро ифода мекунад) созед. NFRCS барои пӯшидани сӯрох ва лента барои мӯҳр кардани канорҳои берунӣ истифода мешавад. Ба найчаи микросентрифуга, ки дорои премикси 3,8% цитрати натрий мебошад, 20 мкл 0,2 М CaCl2 илова кунед. Пас аз 10 дақиқа, найчаҳои микросентрифуга аз зарфҳо хориҷ карда шуданд ва афзоиши массаи зарфҳо аз сабаби хуруҷи хун аз NFRK (n = 3) муайян карда шуд. Талафоти хун Ch NFRCS ва Cp NFRCS бо Cs муқоиса карда шуданд.
Якпорчагии таршудаи NFRCS бар асоси усули тавсифкардаи Мишра ва Чаудхари21 бо тағйироти ночиз муайян карда шуд. NFRCS-ро дар колбаи 100 мл Эрленмейер бо 50 мл об ҷойгир кунед ва барои 60 сония бе ташкили боло гардонед. Санҷиши визуалӣ ва афзалият додани намунаҳо барои якпорчагии ҷисмонӣ дар асоси ҷамъоварӣ.
Қувваи пайвастшавии HFFC ба Ct бо истифода аз усулҳои қаблан нашршуда бо тағйироти ночиз омӯхта шуд. Якпорчагии рӯйпӯши сатҳӣ бо роҳи таъсир расонидан ба NFRK ба мавҷҳои акустикӣ (ангезиши беруна) дар ҳузури оби milliQ (Ct) арзёбӣ карда шуд. NFRCS Ch NFRCS ва Cp NFRCS-ҳои таҳияшуда дар стаканчаи пур аз об ҷойгир карда шуданд ва мутаносибан барои 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10 ва 30 дақиқа бо ултрасадо коркард шуданд. Пас аз хушкшавӣ, фарқияти фоизӣ байни вазни ибтидоӣ ва ниҳоии NFRCS барои ҳисоб кардани талафоти фоизи мавод (HFFC) истифода шуд. BCT дар in vitro минбаъд қувваи пайвастшавӣ ё талафоти маводҳои сатҳӣ-ро дастгирӣ кард. Самаранокии пайвастшавии HFFC ба Ct коагулятсияи хун ва рӯйпӯши эластикиро дар сатҳи Ct22 таъмин мекунад.
Якхелагии NFRCS-и таҳияшуда тавассути BCT намунаҳо (30 мг), ки аз маконҳои умумии тасодуфан интихобшудаи NFRCS гирифта шудаанд, муайян карда шуд. Барои муайян кардани мутобиқати NFRCS, тартиби қаблан зикршудаи BCT-ро риоя кунед. Наздикии байни ҳар панҷ намуна фарогирии якхелаи сатҳ ва ҷойгиршавии HFFC-ро дар шабакаи Ct таъмин мекунад.
Минтақаи номиналии тамос бо хун (NBCA) тавре ки қаблан гузориш шуда буд, бо баъзе тағйирот муайян карда шуд. Хунро бо фишурдани 20 мкл хун байни ду сатҳи Ct, Ch NFRCS, Cp NFRCS ва Cs коагулятсия кунед. Пас аз 1 соат, ду қисми стент ҷудо карда шуданд ва майдони лахта бо даст чен карда шуд. Арзиши миёнаи се такрор NBCA NFRCS19 ҳисобида шуд.
Таҳлили ҷабби динамикии буғ (DVS) барои арзёбии самаранокии NFRCS барои ҷабби об аз муҳити беруна ё аз макони осеб, ки барои оғози коагулятсия масъул аст, истифода шуд. DVS ҷаббида ва талафоти буғро дар намуна бо истифода аз тавозуни ултраҳассос бо қарори массаи ±0.1 µg ба таври гравиметрӣ арзёбӣ ё сабт мекунад. Фишори қисман буғ (намӣ нисбӣ) аз ҷониби контроллери электронии ҷараёни масса дар атрофи намуна тавассути омезиши газҳои сершуда ва хушки интиқолдиҳанда тавлид мешавад. Мувофиқи дастурҳои Фармакопеяи Аврупо, дар асоси фоизи ҷабби намӣ аз ҷониби намунаҳо, намунаҳо ба 4 категория тақсим карда шуданд (0–0.012% w/w - ғайригигроскопӣ, 0.2–2% w/w каме гигроскопӣ, 2–15% мӯътадил гигроскопӣ ва > 15% хеле гигроскопӣ)23. Мувофиқи дастурҳои Фармакопеяи Аврупо, дар асоси фоизи ҷабби намӣ аз ҷониби намунаҳо, намунаҳо ба 4 категория тақсим карда шуданд (0–0.012% w/w - ғайригигроскопӣ, 0.2–2% w/w каме гигроскопӣ, 2–15% мӯътадил гигроскопӣ ва > 15% хеле гигроскопӣ)23.Мувофиқи тавсияҳои Фармакопеяи Аврупо, вобаста ба фоизи ҷабби намӣ аз ҷониби намунаҳо, намунаҳо ба 4 категория тақсим карда шуданд (0–0.012% w/w – ғайригигроскопӣ, 0.2–2% w/w каме гигроскопӣ, 2–15%).% умеренно гигроскопичен и > 15% очень гигроскопичен)23. (%) миёна гигроскопӣ ва > 15% хеле гигроскопӣ)23.根据欧洲药典指南，根据样品吸收水分的百分比，样品分为4 类（0-0.012% w/w非吸湿性,0,2-2% w/w 轻微吸湿性,2-15% 适度吸湿，> 15% 非常吸湿）23。根据 欧洲 药典 指南 ， 根据 吸收 水分 的 百分比 样品 分为 分为 分为 分为 分为 分为 分为 0-0%. W/w- 吸湿 性 、 、 、 、 0,2-2% В/в 轻微 、 2-15% 适度 吸湿 ，> 15%非常吸湿）2Мувофиқи тавсияҳои Фармакопеяи Аврупо, намунаҳо вобаста ба фоизи намӣ, ки аз ҷониби намуна ҷаббида мешавад, ба 4 синф тақсим карда мешаванд (0-0,012% аз рӯи вазн - ғайригигроскопӣ, 0,2-2% аз рӯи вазн каме гигроскопӣ, 2-15% аз рӯи вазн).% умеренно гигроскопичен, > 15 % очень гигроскопичен) 23. % миёна гигроскопӣ, > 15% хеле гигроскопӣ) 23.Самаранокии гигроскопии NFCS X NFCS ва TsN NFCS дар анализатори DVS TA TGA Q5000 SA муайян карда шуд. Дар ин раванд, вақти корӣ, намии нисбӣ (RH) ва вазни намуна дар вақти воқеӣ дар 25°C24 ба даст оварда шуд. Миқдори намӣ тавассути таҳлили дақиқи массаи NFRCS бо истифода аз муодилаи зерин ҳисоб карда мешавад:
MC намӣ аз NFRCS аст. m1 – вазни хушки NSAID-ҳо. m2 массаи NFRCS дар вақти воқеӣ дар RH-и додашуда аст.
Масоҳати умумии сатҳ бо истифода аз таҷрибаи адсорбсияи нитроген бо нитрогени моеъ пас аз холӣ кардани намунаҳо дар ҳарорати 25°C ба муддати 10 соат (<7 × 10–3 Торр) ҳисоб карда шуд. Масоҳати умумии сатҳ бо истифода аз таҷрибаи адсорбсияи нитроген бо нитрогени моеъ пас аз холӣ кардани намунаҳо дар ҳарорати 25°C ба муддати 10 соат (<7 × 10–3 Торр) ҳисоб карда шуд. Общая площадь поверхности оценивалась с помощью эксперимента по адсорбции азота жидким азотом баъд аз опорожнения образцов барои 25 °С дар техникаи 10 ч (< 7 × 10-3 Торр). Масоҳати умумии сатҳ бо истифода аз таҷрибаи адсорбсияи нитроген бо нитрогени моеъ пас аз холӣ кардани намунаҳо дар ҳарорати 25°C ба муддати 10 соат (<7 × 10–3 Торр) ҳисоб карда шуд.在25°C 清空样品10 小时（< 7 × 10-3 Torr）后，使用液氮的氮吸附实验估计总表面表25°C Общая площадь поверхности оценивалась с использованием экспериментов по адсорбции азота жидким азотом баъд аз опорожнения образцов дар техникӣ 10 соат дар ҳарорати 25°C (< 7 × 10-3 торр). Масоҳати умумии сатҳ бо истифода аз таҷрибаҳои адсорбсияи нитроген бо нитрогени моеъ пас аз холӣ кардани намунаҳо ба муддати 10 соат дар ҳарорати 25°C (<7 x 10-3 торр) ҳисоб карда шуд.Масоҳати умумии сатҳ, ҳаҷми сӯрохиҳо ва андозаи сӯрохиҳои NFRCS бо истифода аз Quantachrome аз NOVA 1000e, Австрия, бо истифода аз нармафзори RS 232 муайян карда шуданд.
5% эритроситҳо (маҳлули шӯр ҳамчун ҳалкунанда)-ро аз хуни пурра омода кунед. Сипас, як қисми HFFC (0,25 мл)-ро ба табақи 96-чоҳӣ ва 5% массаи эритроситҳо (0,1 мл) интиқол диҳед. Омехтаро дар ҳарорати 37°C барои 40 дақиқа инкубатсия кунед. Омехтаи ҳуҷайраҳои сурхи хун ва зардоб ҳамчун назорати мусбат ва омехтаи маҳлули шӯр ва ҳуҷайраҳои сурхи хун ҳамчун назорати манфӣ ҳисобида шуд. Гемагглютинатсия мувофиқи шкалаи Стажицкий муайян карда шуд. Шкалаҳои пешниҳодшуда чунинанд: + + + + агрегатҳои зичи доначадор; + + + болиштҳои поёнии ҳамвор бо канорҳои каҷ; + + болиштҳои поёнии ҳамвор бо канорҳои кандашуда; + ҳалқаҳои сурхи борик дар атрофи канорҳои болиштҳои ҳамвор; – (манфӣ) тугмаи сурхи дискретӣ 12 дар маркази чоҳи поёнӣ.
Мутобиқати гемомутобиқати NFRCS мувофиқи усули Созмони Байналмилалии Стандартизатсия (ISO) (ISO10993-4, 1999)26,27 омӯхта шуд. Усули гравиметрӣ, ки аз ҷониби Сингҳ ва ҳамкорон тавсиф шудааст. Барои арзёбии ташаккули тромб дар ҳузури ё дар сатҳи NFRCS тағйироти ночиз ворид карда шуданд. 500 мг Cs, Ch NFRCS ва Cp NFRCS дар маҳлули фосфатии буферӣ (PBS) барои 24 соат дар ҳарорати 37°C инкубатсия карда шуданд. Пас аз 24 соат, PBS хориҷ карда шуд ва NFRCS бо 2 мл хун, ки дорои 3,8% цитрати натрий буд, коркард карда шуд. Дар сатҳи NFRCS ба намунаҳои инкубатсияшуда 0,04 мл 0,1 M CaCl2 илова кунед. Пас аз 45 дақиқа, барои қатъ кардани лахташавӣ 5 мл оби тозашуда илова карда шуд. Хуни лахташуда дар сатҳи NFRK бо маҳлули 36-38% формальдегид коркард карда шуд. Лахтаҳои бо формальдегид мустаҳкамшуда хушк карда шуда, вазн карда шуданд. Фоизи тромбоз бо ҳисоб кардани вазни шиша бе хун ва намуна (назорати манфӣ) ва шиша бо хун (назорати мусбат) ҳисоб карда шуд.
Ҳамчун тасдиқи аввалия, намунаҳо таҳти микроскопи оптикӣ барои фаҳмидани қобилияти рӯйпӯши рӯи HFFC, пайвастшавии Ct ва шабакаи Ct барои ташкили сӯрохиҳо тасвир карда шуданд. Қисмҳои тунуки Ch ва Cp аз NFRCS бо теғи скальпел бурида шуданд. Қисмати ҳосилшуда ба слайди шишагӣ гузошта шуда, бо пӯшиши рӯйпӯш пӯшонида шуд ва канорҳо бо ширеш маҳкам карда шуданд. Слайдҳои омодашуда таҳти микроскопи оптикӣ дида шуданд ва бо бузургиҳои гуногун аксҳо гирифта шуданд.
Ҷойгиршавии полимер дар шабакаҳои Ct бо истифода аз микроскопияи флуоресцентӣ, ки бар асоси усули тавсифкардаи Райс ва ҳамкоронаш29 тасвир шудааст, тасвир карда шуд. Таркиби HFFC, ки барои формула истифода шудааст, бо ранги флуоресцентӣ (амарант) омехта карда шуд ва NFRCS (Ch & Cp) мувофиқи усули қаблан зикршуда омода карда шуданд. Таркиби HFFC, ки барои формула истифода шудааст, бо ранги флуоресцентӣ (амарант) омехта карда шуд ва NFRCS (Ch & Cp) мувофиқи усули қаблан зикршуда омода карда шуданд.Таркиби HFFC, ки барои формула истифода шудааст, бо ранги флуоресцентӣ (амарант) омехта карда шуд ва NFRCS (Ch ва Cp) мувофиқи усули қаблан зикршуда ба даст оварда шуд.将用于配方的HFFC 组合物与荧光染料（苋菜）混合，并按照前面提到的方到的方Ch Cp).将用于配方的HFFC 组合物与荧光染料（苋菜）混合，并按照前面提到的方到的方Ch Cp).Таркиби HFFC, ки дар формула истифода шудааст, бо ранги флуоресцентӣ (Амаранта) омехта карда шуд ва NFRCS (Ch ва Cp)-ро, тавре ки қаблан зикр гардид, гирифт.Қисмҳои тунуки NFRK аз намунаҳои гирифташуда бурида, дар слайдҳои шишагӣ ҷойгир карда шуданд ва бо лавҳаҳои сарпӯш пӯшонида шуданд. Лавҳаҳои омодашударо дар зери микроскопи флуоресцентӣ бо истифода аз филтри сабз (310-380 нм) мушоҳида кунед. Барои фаҳмидани робитаҳои Ct ва ҷойгиршавии барзиёди полимер дар шабакаи Ct тасвирҳо бо бузургии 4x гирифта шуданд.
Топографияи сатҳи NFRCS Ch ва Cp бо истифода аз микроскопи қувваи атомӣ (AFM) бо консолҳои ултратези TESP дар ҳолати ламскунӣ муайян карда шуд: 42 Н/м, 320 кГц, ROC 2-5 нм, Брукер, Тайван. Ноҳамвории сатҳ бо истифода аз нармафзори Scanning Probe Image Processor бо истифода аз миёнаи квадрат (RMS) муайян карда шуд. Барои санҷидани якрангии сатҳ, маконҳои гуногуни NFRCS дар тасвирҳои 3D нишон дода шуданд. Инҳирофи стандартии хол барои минтақаи додашуда ҳамчун ноҳамвории сатҳ муайян карда мешавад. Муодилаи RMS барои чен кардани ноҳамвории сатҳ NFRCS31 истифода шудааст.
Таҳқиқоти бар асоси FESEM бо истифода аз FESEM, SU8000, HI-0876-0003, Хитачи, Токио, барои фаҳмидани морфологияи сатҳии Ch NFRCS ва Cp NFRCS, ки BCT-и беҳтарро нисбат ба Cm NFRCS нишон доданд, анҷом дода шуданд. Таҳқиқоти FESEM мувофиқи усули тавсифкардаи Zhao et al. 32 бо тағйироти ночиз анҷом дода шуд. NFRCS аз 20 то 30 мг Ch NFRCS ва Cp NFRCS бо 20 мкл 3.8% цитрати натрий, ки бо хуни каламуш омехта карда шуда буд, пешакӣ омехта карда шуданд. Барои оғози лахташавӣ ба намунаҳои коркардшудаи хун 20 мкл 0.2 M CaCl2 илова карда шуд ва намунаҳо дар ҳарорати хонагӣ барои 10 дақиқа инкубатсия карда шуданд. Илова бар ин, эритроситҳои зиёдатӣ аз сатҳи NFRCS бо шустан бо маҳлули шӯр тоза карда шуданд.
Намунаҳои баъдӣ бо 0,1% глутаральдегид коркард шуда, сипас дар танӯри ҳавои гарм дар ҳарорати 37°C хушк карда шуданд, то намӣ тоза карда шавад. Намунаҳои хушкшуда пӯшонида ва таҳлил карда шуданд 32. Тасвирҳои дигаре, ки ҳангоми таҳлил ба даст оварда шуданд, ташаккули лахта дар сатҳи нахҳои пахтаи алоҳида, ҷойгиршавии полимер байни Ct, морфологияи эритроситҳо (шакл), якпорчагии лахта ва морфологияи эритроситҳо дар ҳузури NFRCS буданд. Минтақаҳои NFRCS-и коркарднашуда ва минтақаҳои NFRCS-и коркардшуда бо Ch ва Cp, ки бо хун инкубатсия шудаанд, барои ионҳои элементӣ (натрий, калий, нитроген, калсий, магний, руҳ, мис ва селен) скан карда шуданд 33. Фоизҳои ионҳои элементиро байни намунаҳои коркардшуда ва коркарднашуда муқоиса кунед, то ҷамъшавии ионҳои элементӣ ҳангоми ташаккули лахта ва якхелагии лахтаро дарк кунед.
Ғафсии рӯйпӯши сатҳи Cp HFFC дар сатҳи Ct бо истифода аз FESEM муайян карда шуд. Буришҳои кунҷии Cp NFRCS аз чаҳорчӯба бурида ва бо пошидани дорупошӣ пӯшонида шуданд. Намунаҳои рӯйпӯши пошидани дорупошии ҳосилшуда бо истифода аз FESEM мушоҳида карда шуданд ва ғафсии рӯйпӯши сатҳӣ 34, 35, 36 чен карда шуд.
Микро-КТ-и рентгенӣ тасвири 3D-и ғайривайронкунандаро бо қарори баланд таъмин мекунад ва ба шумо имкон медиҳад, ки сохтори дохилии NFRK-ро омӯзед. Микро-КТ аз шуои рентгенӣ истифода мебарад, ки аз намуна мегузарад, то коэффисиенти сустшавии хаттии маҳаллии шуоъҳои рентгениро дар намуна сабт кунад, ки ба гирифтани маълумоти морфологӣ мусоидат мекунад. Ҷойгиршавии дохилии Ct дар Cp NFRCS ва Cp NFRCS-и бо хун коркардшуда бо истифода аз микро-КТ барои фаҳмидани самаранокии ҷаббида ва лахташавии хун дар ҳузури NFRCS37,38,39 таҳқиқ карда шуд. Сохторҳои 3D-и намунаҳои Cp NFRCS-и бо хун коркардшуда ва коркарднашуда бо истифода аз микро-КТ (V|tome|x S240, Финикс, Олмон) аз нав сохта шуданд. Бо истифода аз нармафзори VG STUDIO-MAX версияи 2.2, якчанд тасвирҳои рентгенӣ аз кунҷҳои гуногун (пӯшиши беҳтарин 360°) гирифта шуданд, то тасвирҳои 3D-ро барои NFRCS таҳия кунанд. Маълумоти проексияи ҷамъовардашуда бо истифода аз нармафзори оддии 3D ScanIP Academic ба тасвирҳои ҳаҷмии 3D барқарор карда шуданд.
Илова бар ин, барои фаҳмидани тақсимоти лахта, барои оғози лахташавии хун, 20 мкл хуни цитратшудаи пешакӣ омехташуда ва 20 мкл 0,2 М CaCl2 ба NFRCS илова карда шуданд. Намунаҳои омодашуда барои сахт шудан гузошта мешаванд. Сатҳи NFRK бо 0,5% глутаральдегид коркард шуда, дар танӯри ҳавои гарм дар ҳарорати 30-40°C барои 30 дақиқа хушк карда шуд. Лахтаи хун, ки дар NFRCS ба вуҷуд омадааст, скан карда шуд, барқарор карда шуд ва тасвири сеченакаи лахтаи хун намоиш дода шуд.
Таҳлилҳои зиддибактериявӣ дар Cp NFRCS (беҳтараш дар муқоиса бо Ch NFRCS) бо истифода аз усули қаблан тавсифшуда бо тағйироти ночиз анҷом дода шуданд. Фаъолияти зиддибактериявии Cp NFRCS ва Cp HFFC бо истифода аз се микроорганизмҳои гуногуни санҷишӣ [S.aureus (бактерияҳои грам-мусбат), E.coli (бактерияҳои грам-манфӣ) ва Candida сафед (C.albicans)], ки дар агар дар косаҳои Петри дар инкубатор мерӯянд, муайян карда шуд. 50 мл суспензияи фарҳанги бактериявии обшударо бо консентратсияи 105-106 CFU мл-1 ба муҳити агар яксон ворид кунед. Муҳитро ба косаи Петри резед ва бигзоред, ки он сахт шавад. Дар сатҳи табақчаи агар чоҳҳо сохта шуданд, то бо HFFC пур карда шаванд (3 чоҳ барои HFFC ва 1 барои назорати манфӣ). Ба 3 чоҳ 200 мкл HFFC ва ба чоҳи 4-ум 200 мкл pH 7.4 PBS илова кунед. Дар тарафи дигари косачаи Петри, диски 12 мм Cp NFRCS-ро дар агари сахтшуда ҷойгир кунед ва бо PBS (рН 7.4) тар кунед. Лавҳаҳои ципрофлоксацин, ампициллин ва флуконазол стандартҳои истинодӣ барои Staphylococcus aureus, Escherichia coli ва Candida albicans ҳисобида мешаванд. Минтақаи боздорӣро дастӣ чен кунед ва тасвири рақамии минтақаи боздорӣ гиред.
Пас аз тасдиқи ахлоқии муассисавӣ, таҳқиқот дар Коллеҷи таълим ва тадқиқоти тиббии Кастурба дар Манипал, Карнатака, дар ҷануби Ҳиндустон гузаронида шуд. Протоколи таҷрибавии TEG дар in vitro аз ҷониби Кумитаи ахлоқии муассисавии Коллеҷи тиббии Кастурба, Манипал, Карнатака (IEC: 674/2020) баррасӣ ва тасдиқ карда шудааст. Иштирокчиён аз донорҳои ихтиёрии хун (аз 18 то 55 сола) аз бонки хуни беморхона ҷалб карда шуданд. Илова бар ин, аз ихтиёриён барои ҷамъоварии намунаҳои хун варақаи розигии огоҳона гирифта шуд. TEG Native (N-TEG) ​​барои омӯзиши таъсири формулаи Cp HFFC ба хуни пурра, ки бо цитрати натрий омехта шудааст, истифода шуд. N-TEG бо нақши худ дар эҳёгарии нуқтаи ёрии таъҷилӣ васеъ эътироф шудааст, ки барои табибон мушкилот эҷод мекунад, зеро эҳтимолияти таъхири назарраси клиникӣ дар натиҷаҳо (санҷишҳои муқаррарии коагулятсия) вуҷуд дорад. Таҳлили N-TEG бо истифода аз хуни пурра гузаронида шуд. Розигии огоҳона ва таърихи муфассали тиббӣ аз ҳамаи иштирокчиён гирифта шуд. Таҳқиқот иштирокчиёни гирифтори мушкилоти гемостатикӣ ё тромботикӣ, ба монанди ҳомиладорӣ/баъд аз таваллуд ё бемории ҷигарро дар бар нагирифт. Субъектҳое, ки доруҳоеро истеъмол мекарданд, ки ба каскади лахташавӣ таъсир мерасонанд, низ аз таҳқиқот хориҷ карда шуданд. Санҷишҳои асосии лабораторӣ (гемоглобин, вақти протромбин, тромбопластини фаъолшуда ва шумораи тромбоситҳо) дар ҳамаи иштирокчиён мувофиқи тартиби стандартӣ гузаронида шуданд. N-TEG часпакии лахтаи хун, сохтори ибтидоии лахта, таъсири мутақобилаи зарраҳо, мустаҳкамшавии лахта ва лизиси лахтаро муайян мекунад. Таҳлили N-TEG маълумоти графикӣ ва рақамиро дар бораи таъсири якҷояи якчанд унсурҳои ҳуҷайра ва плазма пешниҳод мекунад. Таҳлили N-TEG дар ду ҳаҷми гуногуни Cp HFFC (10 мкл ва 50 мкл) гузаронида шуд. Дар натиҷа, 1 мл хуни пурра бо кислотаи лиму ба 10 мкл Cp HFFC илова карда шуд. 1 мл (Cp HFFC + хуни цитратӣ), 340 мкл хуни омехтаро ба 20 мкл 0.2 M CaCl2, ки дорои TEG аст, илова кунед. Пас аз ин, косаҳои TEG ба TEG® 5000, US бор карда шуданд, то 30% намунаҳои хунро дар ҳузури Cp HFFC41 чен кунанд.
Протоколи таҳқиқоти in vivo аз ҷониби Кумитаи ахлоқи ҳайвоноти институтсионалӣ (IAEC), Мактаби тиббии Кастурба, Институти таҳсилоти олии Манипал, Манипал (IAEC/KMC/69/2020) баррасӣ ва тасдиқ карда шуд. Ҳама таҷрибаҳои ҳайвонот мувофиқи тавсияҳои Кумитаи назорат ва назорати таҷрибаҳои ҳайвонот (CPCSEA) анҷом дода шуданд. Ҳама таҳқиқоти in vivo NFRCS (2 × 2 см2) дар каламушҳои модаи Вистар (вазни онҳо аз 200 то 250 г) анҷом дода шуданд. Ҳамаи ҳайвонот дар ҳарорати 24-26°C мутобиқ карда шуданд, ҳайвонот ба ғизо ва оби стандартӣ дастрасии озод доштанд. Ҳамаи ҳайвонот ба таври тасодуфӣ ба гурӯҳҳои гуногун тақсим карда шуданд, ки ҳар як гурӯҳ аз се ҳайвон иборат буд. Ҳама таҳқиқот мувофиқи Таҳқиқоти ҳайвонот: Ҳисоботи таҷрибаҳои in vivo 43 анҷом дода шуданд. Пеш аз таҳқиқот, ҳайвонҳо бо роҳи ворид намудани омехтаи 20-50 мг кетамин (ба 1 кг вазни бадан) ва 2-10 мг ксилазин (ба 1 кг вазни бадан) ба дохили шикам наркоз карда шуданд. Пас аз таҳқиқот, ҳаҷми хунравӣ бо арзёбии фарқияти байни вазни ибтидоӣ ва ниҳоии намунаҳо ҳисоб карда шуд ва арзиши миёнаи аз се санҷиш бадастомада ҳамчун ҳаҷми хунравии намуна гирифта шуд.
Модели ампутатсияи думи каламуш барои фаҳмидани потенсиали NFRCS барои танзими хунравӣ дар осеб, ҷанг ё садамаи нақлиётӣ (модели ҷароҳат) амалӣ карда шуд. 50% думро бо теғи скальпел буред ва барои 15 сония дар ҳаво гузоред, то хунравии муқаррарӣ таъмин карда шавад. Илова бар ин, намунаҳои санҷишӣ бо фишор (Ct, Cs, Ch NFRCS ва Cp NFRCS) ба думи каламуш гузошта шуданд. Хунравӣ ва PCT барои намунаҳои санҷишӣ гузориш дода шуданд (n = 3)17,45.
Самаранокии назорати фишори NFRCS дар ҷанг дар модели артерияи сатҳии феморалӣ таҳқиқ карда шуд. Артерияи феморалӣ кушода мешавад, бо трокари 24G сӯрох карда мешавад ва дар давоми 15 сония хунравӣ хориҷ карда мешавад. Пас аз мушоҳидаи хунравии беназорат, намунаи санҷишӣ дар ҷои сӯрохкунӣ бо фишор гузошта мешавад. Фавран пас аз истифодаи намунаи санҷишӣ, вақти лахташавӣ сабт карда шуд ва самаранокии гемостатикӣ дар 5 дақиқаи оянда мушоҳида карда шуд. Ҳамин тартиб бо Cs ва Ct46 такрор карда шуд.
Доулинг ва ҳамкоронаш 47 модели осеби ҷигарро барои арзёбии потенсиали гемостатикии маводҳои гемостатик дар шароити хунравии дохилиҷарроҳӣ пешниҳод карданд. BCT барои намунаҳои Ct (назорати манфӣ), чаҳорчӯбаи Cs (назорати мусбат), намунаҳои Ch NFRCS ва намунаҳои Cp NFRCS сабт карда шуд. Венаи каваи супрахепатии каламуш бо анҷом додани лапаротомияи медианӣ фош карда шуд. Пас аз ин, қисми дисталии қисми чап бо қайчӣ бурида шуд. Дар ҷигар бо теғи скальпел буриш кунед ва бигзоред, ки он барои чанд сония хунравӣ кунад. Намунаҳои санҷишии Ch NFRCS ва Cp NFRCS-и дақиқ вазншуда ба сатҳи осебдида бе ягон фишори мусбат гузошта шуданд ва BCT сабт карда шуд. Сипас гурӯҳи назоратӣ (Ct) фишорро татбиқ карданд ва пас аз он Cs 30 s47 бе шикастани ҷароҳат анҷом дода шуд.
Санҷишҳои шифоёбии захмҳо дар in vivo бо истифода аз модели захми эксцизионӣ барои арзёбии хосиятҳои шифоёбии захмҳои NFRC-ҳои таҳияшудаи полимерӣ анҷом дода шуданд. Моделҳои захмҳои эксцизионӣ мувофиқи усулҳои қаблан нашршуда бо тағйироти ночиз интихоб ва анҷом дода шуданд19,32,48. Ҳамаи ҳайвонҳо, тавре ки қаблан тавсиф шуда буд, наркоз карда шуданд. Барои буридани амиқ дар пӯсти пушт, аз сӯрохи биопсия (12 мм) истифода баред. Ҷойҳои омодашудаи захм бо Cs (назорати мусбат), Ct (эътироф кардани он, ки лавҳаҳои пахтагӣ ба шифоёбӣ халал мерасонанд), Ch NFRCS ва Cp NFRCS (гурӯҳи таҷрибавӣ) ва назорати манфӣ бе ягон табобат пӯшонида шуданд. Дар ҳар рӯзи тадқиқот, масоҳати захм дар ҳамаи каламушҳо чен карда шуд. Барои аксбардории минтақаи захм аз камераи рақамӣ истифода баред ва пӯшиши нав пӯшед. Фоизи басташавии захм бо формулаи зерин чен карда шуд:
Бар асоси фоизи басташавии захм дар рӯзи 12-уми тадқиқот, пӯсти каламуши гурӯҳи беҳтарин бурида шуд ((Cp NFRCS) ва гурӯҳи назоратӣ) ва бо рангкунии H&E ва рангкунии трихромии Массон омӯхта шуд. Бар асоси фоизи басташавии захм дар рӯзи 12-уми тадқиқот, пӯсти каламуши гурӯҳи беҳтарин бурида шуд ((Cp NFRCS) ва гурӯҳи назоратӣ) ва бо рангкунии H&E ва рангкунии трихромии Массон омӯхта шуд.Бар асоси фоизи баста шудани захм дар рӯзи 12-уми тадқиқот, пӯсти каламушҳои гурӯҳи беҳтарин ((Cp NFRCS) ва гурӯҳи назоратӣ) бурида ва бо рангкунӣ бо гематоксилин-эозин ва трихроми Массон тафтиш карда шуд.根据研究第12天的伤口闭合百分比，切除最佳组((Cp) NFRCS)和对照组)的大鼠皮肤，进行H&E染色和Masson三色染色研究。根据研究第12天的伤口闭合百分比，切除最佳组((Cp) NFRCS)和对照组)的大鼠皮肤，进行H&E染色和眳组）Каламушҳо дар гурӯҳи беҳтарин ((Cp NFRCS) ва гурӯҳҳои назоратӣ) барои рангкунии гематоксилин-эозин ва рангкунии трихромии Массон дар асоси фоизи басташавии захм дар рӯзи 12-уми таҳқиқот хориҷ карда шуданд.Тартиби рангкунии амалӣ мувофиқи усулҳои қаблан тавсифшуда анҷом дода шуд49,50. Хулоса, пас аз фиксатсия дар 10% формалин, намунаҳо бо истифода аз як қатор спиртҳои дараҷаи олӣ хушк карда шуданд. Барои гирифтани қисмҳои тунуки (ғафсии 5 мкм) бофтаи буридашуда аз микротом истифода баред. Қисмҳои тунуки силсилавии назорат ва Cp NFRCS бо гематоксилин ва эозин барои омӯзиши тағйироти гистопатологӣ коркард карда шуданд. Ранги трихромии Массон барои муайян кардани ташаккули нахҳои коллаген истифода шуд. Натиҷаҳои бадастомада аз ҷониби патологҳо нобино омӯхта шуданд.
Устувории намунаҳои Cp NFRCS дар ҳарорати хонагӣ (25°C ± 2°C/60% RH ± 5%) ба муддати 12 моҳ омӯхта шуд51. Cp NFRCS (тағйирёбии ранги сатҳ ва афзоиши микробҳо) бо чашм тафтиш карда шуд ва барои муқовимати фарсудашавии қат ва BCT мувофиқи усулҳои дар боло зикршуда, ки дар бахши Маводҳо ва Усулҳо зикр шудаанд, санҷида шуд.
Қобилияти миқёспазирӣ ва такроршавандагии Cp NFRCS бо тайёр кардани Cp NFRCS бо андозаи 15×15 см2 таҳқиқ карда шуд. Илова бар ин, намунаҳои 30 мг (n = 5) аз фраксияҳои гуногуни Cp NFRCS ҷудо карда шуданд ва BCT-и намунаҳои таҳқиқшуда тавре ки қаблан дар бахши Усулҳо тавсиф шуда буд, арзёбӣ карда шуд.
Мо кӯшиш кардем, ки шаклҳо ва сохторҳои гуногунро бо истифода аз композитсияҳои Cp NFRCS барои барномаҳои гуногуни биотиббӣ таҳия кунем. Чунин шаклҳо ё конфигуратсияҳо тампонҳои конусӣ барои хунравии бинӣ, амалиётҳои дандонпизишкӣ ва тампонҳои силиндрӣ барои хунравии мањбалро дар бар мегиранд.
Ҳамаи маҷмӯи маълумотҳо ҳамчун миёна ± инҳирофи стандартӣ ифода карда шудаанд ва бо истифода аз ANOVA бо истифода аз Prism 5.03 (GraphPad, Сан Диего, Калифорния, ИМА) ва баъдан санҷиши муқоисавии сершумори Бонферрони (*p<0.05) таҳлил карда шуданд.
Ҳамаи расмиёте, ки дар таҳқиқоти инсонӣ анҷом дода шудаанд, мутобиқи стандартҳои Институт ва Шӯрои миллии тадқиқотӣ, инчунин Эъломияи Хелсинки соли 1964 ва тағйироти минбаъдаи он ё стандартҳои шабеҳи ахлоқӣ буданд. Ҳамаи иштирокчиён дар бораи хусусиятҳои таҳқиқот ва хусусияти ихтиёрии он огоҳ карда шуданд. Маълумоти иштирокчиён пас аз ҷамъоварӣ махфӣ боқӣ мемонад. Протоколи таҷрибавии TEG in vitro аз ҷониби Кумитаи ахлоқии институтсионалии Коллеҷи тиббии Кастурба, Манипал, Карнатака (IEC: 674/2020) баррасӣ ва тасдиқ карда шудааст. Ихтиёриён барои ҷамъоварии намунаҳои хун розигии огоҳона имзо карданд.
Ҳамаи тартибҳое, ки дар таҳқиқоти ҳайвонот анҷом дода шудаанд, мувофиқи Факултаи тибби Кастуба, Институти таҳсилоти олии Манипал, Манипал (IAEC/KMC/69/2020) анҷом дода шуданд. Ҳамаи таҷрибаҳои дар ҳайвонот тарҳрезишуда мувофиқи дастурҳои Кумитаи назорат ва назорати таҷрибаҳои ҳайвонот (CPCSEA) гузаронида шуданд. Ҳамаи муаллифон дастурҳои ARRIVE-ро риоя мекунанд.
Спектрҳои FTIR-и ҳамаи NFRCS таҳлил ва бо спектри хитозан, ки дар расми 2A нишон дода шудааст, муқоиса карда шуданд. Қуллаҳои спектрии хоси хитозан (сабтшуда) дар 3437 см-1 (кашиши OH ва NH, ҳампӯшӣ), 2945 ва 2897 см-1 (кашиши CH), 1660 см-1 (штампи NH2), 1589 см-1 (хамиши N–H), 1157 см-1 (кашиши пул O-), 1067 см-1 (кашиши C–O, гидроксил дуюмдараҷа), 993 см-1 (кашиши CO, Bo-OH) 52.53.54. Ҷадвали иловагии S1 арзишҳои спектри азхудкунии FTIR NFRCS-ро барои хитозан (гузоришдиҳанда), хитозани холис, Cm, Ch ва Cp нишон медиҳад. Спектрҳои FTIR-и ҳамаи NFRCS (Cm, Ch ва Cp) ҳамон бандҳои ҷабби хосро ба монанди хитозани холис бидуни ягон тағйироти назаррас нишон доданд (Расми 2A). Натиҷаҳои FTIR набудани таъсири мутақобилаи кимиёвӣ ё физикиро байни полимерҳое, ки барои таҳияи NFRCS истифода шудаанд, тасдиқ карданд, ки нишон медиҳад, ки полимерҳои истифодашуда инертӣ мебошанд.
Тавсифи in vitro-и Cm NFRCS, Ch NFRCS, Cp NFRCS ва Cs. (A) спектрҳои FTIR-и якҷояшудаи таркибҳои хитозан ва Cm NFRCS, Ch NFRCS ва Cp NFRCS-ро таҳти фишор ифода мекунад. (B) а) Суръати ҷабби NFRCS Cm, Ch, Cp ва Cg дар тамоми хун (n = 3); Намунаҳои Ct BAR-и баландтарро нишон доданд, зеро тампончаи пахтагӣ самаранокии ҷаббидашавандаи баландтар дорад; б) Хун пас аз ҷаббидашавии хун. Тасвири намунаи ҷаббидашуда. Намунаи графикии BCT-и намунаи озмоишии C (Cp NFRCS беҳтарин BCT-ро дошт (15 сония, n = 3)). Маълумот дар C, D, E ва G ҳамчун миёна ± SD нишон дода шуданд ва сатрҳои хато SD-ро нишон медиҳанд, ***p < 0.0001. Маълумот дар C, D, E ва G ҳамчун миёна ± SD нишон дода шуданд ва сатрҳои хато SD-ро нишон медиҳанд, ***p < 0.0001. Данные в C, D, E и G представлены как среднее ± стандартное отклонение, а планки погрешностей представляют стандартное отклонение, ***p <0,0001. Маълумот дар C, D, E ва G ҳамчун миёнаи ± инҳирофи стандартӣ пешниҳод карда мешаванд ва сатрҳои хато инҳирофи стандартиро нишон медиҳанд, ***p<0.0001. C、D、E 和G 中的数据显示为平均值± SD，误差线代表SD，***p < 0,0001。 C、D、E 和G 中的数据显示为平均值± SD，误差线代表SD，***p < 0,0001。 Данные в C, D, E и G показаны как среднее значение ± стандартное отклонение, планки погрешностей представляют стандартное отклонение, ***p <0,0001. Маълумот дар C, D, E ва G ҳамчун миёна ± инҳирофи стандартӣ нишон дода шудаанд, сатрҳои хато инҳирофи стандартиро нишон медиҳанд, ***p<0.0001.