تركيبات حيوية نشطة مكونة لأغشية نانوية المسامية والنانوية السميكة للتطبيقات الطبية الحيوية

شكرًا لزيارتكم موقع Nature.com. إصدار المتصفح الذي تستخدمونه يدعم CSS بشكل محدود. للحصول على أفضل تجربة، نوصي باستخدام متصفح مُحدّث (أو تعطيل وضع التوافق في Internet Explorer). في هذه الأثناء، ولضمان استمرار الدعم، سنُقدّم الموقع بدون أنماط أو JavaScript.
يُعد النزيف غير المُتحكّم فيه أحد الأسباب الرئيسية للوفاة. يضمن تحقيق الإرقاء السريع بقاء الشخص على قيد الحياة كإسعافات أولية أثناء القتال وحوادث المرور وعمليات الحد من الوفيات. يمكن للسقالة المركبة المُقوّاة بالألياف النانوية المسامية (NFRCS)، المُشتقة من تركيبة مُكوّنة لأغشية مُرقئة بسيطة (HFFC) كمرحلة مُستمرة، أن تُحفّز الإرقاء وتُعززه. يعتمد تطوير NFRCS على تصميم جناح اليعسوب. يتكون هيكل جناح اليعسوب من أجنحة عرضية وطولية، وتتصل أغشية الجناح ببعضها البعض للحفاظ على سلامة البنية الدقيقة. تُغطّي HFFC سطح الألياف بشكل مُوحّد بغشاء بسمك نانومتر، وتربط سمك القطن المُوزّع عشوائيًا (Ct) (المرحلة المُشتّتة) لتشكيل بنية نانوية المسام. يُقلّل الجمع بين المراحل المُستمرة والمُشتّتة من تكلفة المنتج بعشرة أضعاف مُقارنةً بالمنتجات المُتاحة تجاريًا. يمكن استخدام NFRCS المُعدَّل (السدادات القطنية أو أساور المعصم) في مجموعة متنوعة من التطبيقات الطبية الحيوية. وقد خلصت الدراسات الحية إلى أن NFRCS المُطوَّر Cp يُحفِّز عملية التخثر في موقع التطبيق ويُحسِّنها. ويمكن لـ NFRCS تعديل البيئة الدقيقة والتأثير على المستوى الخلوي بفضل بنيته النانوية المسامية، مما يُحسِّن التئام الجروح في نموذج جرح الاستئصال.
يمكن أن يُشكل النزيف غير المُتحكّم فيه أثناء القتال، وأثناء العمليات الجراحية، وفي حالات الطوارئ تهديدًا خطيرًا لحياة الجرحى1. وتؤدي هذه الحالات إلى زيادة عامة في مقاومة الأوعية الدموية الطرفية، مما يُؤدي إلى صدمة نزفية. تُعتبر التدابير المناسبة للسيطرة على النزيف أثناء الجراحة وبعدها مُهددة للحياة2،3. يؤدي تلف الأوعية الكبيرة إلى فقدان كميات كبيرة من الدم، مما يُؤدي إلى معدل وفيات أقل من 50% في القتال و31% أثناء الجراحة1. ويؤدي فقدان الدم بكميات كبيرة إلى انخفاض حجم الجسم، مما يُقلل من النتاج القلبي. كما أن زيادة المقاومة الوعائية الطرفية الكلية والضعف التدريجي للدورة الدموية الدقيقة يُؤديان إلى نقص الأكسجة في أعضاء دعم الحياة. وقد تحدث صدمة نزفية إذا استمرت الحالة دون تدخل فعال1،4،5. وتشمل المضاعفات الأخرى تفاقم انخفاض حرارة الجسم والحماض الأيضي، بالإضافة إلى اضطراب تخثر الدم الذي يُعيق عملية التخثر. وترتبط الصدمة النزفية الشديدة بارتفاع خطر الوفاة6،7،8. في حالات الصدمة من الدرجة الثالثة (المتفاقمة)، يُعد نقل الدم ضروريًا لبقاء المريض على قيد الحياة أثناء الاعتلال والوفيات أثناء وبعد العملية الجراحية. وللتغلب على جميع الحالات المهددة للحياة المذكورة أعلاه، قمنا بتطوير سقالة مركبة نانوية المسام معززة بالألياف (NFRCS) تستخدم تركيزًا ضئيلًا من البوليمر (0.5%) باستخدام مزيج من البوليمرات المرقئة القابلة للذوبان في الماء.
باستخدام تقوية الألياف، يُمكن تطوير منتجات فعّالة من حيث التكلفة. تُشبه الألياف المُرتّبة عشوائيًا بنية جناح اليعسوب، مُتوازنةً بالخطوط الأفقية والرأسية على الأجنحة. تتصل الأوردة العرضية والطولية للجناح بغشاء الجناح (الشكل 1). يتكون نظام NFRCS من ألياف قطنية مُقوّاة كنظام سقالة يتميز بمتانة فيزيائية وميكانيكية أفضل (الشكل 1). نظرًا لسعرها المناسب وحرفيتها العالية، يُفضّل الجراحون استخدام خيوط قطنية (Ct) أثناء العمليات الجراحية والضمادات. ومن ثم، ونظرا لفوائده المتعددة، بما في ذلك احتوائه على أكثر من 90% من السليلوز البلوري (يساهم في تعزيز النشاط المرقئ)، فقد تم استخدام Ct كنظام هيكلي لـ NFRCS9،10. ومن ثم، ونظرا لفوائده المتعددة، بما في ذلك احتوائه على أكثر من 90% من السليلوز البلوري (يساهم في تعزيز النشاط المرقئ)، فقد تم استخدام Ct كنظام هيكلي لـ NFRCS9،10. وبالتالي, تتمتع نفسها بميزة كبيرة حيث أنها > 90% من الخلايا الكريستالية (مشرقة بشكل أفضل) النشاط الحراري)، Ct تم استخدامه في الأنظمة الهيكلية الصلبة NFRCS9,10. لذلك، ونظراً لفوائده العديدة، بما في ذلك احتواءه على أكثر من 90% من السليلوز البلوري (الذي يشارك في زيادة النشاط المرقئ)، تم استخدام Ct كنظام هيكلي NFRCS9،10.تم اختباره على نطاق واسع بنسبة 90٪ من 90٪ من NFRCS9،10 هذا هو الحال.نسبة مئوية عالية من الوزن الزائد> 90%لذلك، ونظراً لفوائده العديدة، بما في ذلك احتوائه على أكثر من 90% من السليلوز البلوري (يساعد على تعزيز النشاط المرقئ)، تم استخدام Ct كسقالة لـ NFRCS9،10.طُلِيَت مادة Ct سطحيًا (لوحظ تكوُّن غشاء نانوي السُمك) ورُبطت بتركيبة مُكوِّنة للأغشية المُرقئة (HFFC). تعمل هذه التركيبة كطبقة هلامية، حيث تُثبِّت ألياف Ct المُوزَّعة عشوائيًا. ينقل التصميم المُطوَّر الضغط داخل الطور المُشتَّت (ألياف مُقوِّية). من الصعب الحصول على هياكل نانوية مسامية ذات قوة ميكانيكية جيدة باستخدام تركيزات ضئيلة من البوليمر. بالإضافة إلى ذلك، ليس من السهل تخصيص قوالب مُختلفة لتطبيقات طبية حيوية مُختلفة.
يوضح الشكل مخططًا لتصميم NFRCS استنادًا إلى بنية جناح اليعسوب (أ). تُظهر هذه الصورة تشبيهًا مقارنًا لبنية جناح اليعسوب (العروق المتقاطعة والطولية للجناح مترابطة)، وصورة مجهرية مقطعية لـ Cp NFRCS (ب). تمثيل تخطيطي لـ NFRCS.
تم تطوير NFRCs باستخدام HFFC كمرحلة مستمرة لمعالجة القيود المذكورة أعلاه. يتكون HFFC من بوليمرات مرقئة مكونة للأغشية المختلفة بما في ذلك الكيتوزان (كبوليمر مرقئ رئيسي) مع ميثيل سليلوز (MC) وهيدروكسي بروبيل ميثيل سليلوز (HPMC 50 cp) وكحول بولي فينيل (PVA)) (125 كيلو دالتون) كبوليمر داعم يعزز تكوين الخثرة. التكوين. أدى إضافة بولي فينيل بيروليدين K30 (PVP K30) إلى تحسين قدرة امتصاص الرطوبة لـ NFRCS. تمت إضافة بولي إيثيلين جلايكول 400 (PEG 400) لتحسين الترابط المتشابك للبوليمر في مخاليط البوليمر المرتبطة. تم تطبيق ثلاثة تركيبات مرقئة مختلفة من HFFC (Cm HFFC و Ch HFFC و Cp HFFC)، وهي الكيتوزان مع MC (Cm) والكيتوزان مع HPMC (Ch) والكيتوزان مع PVA (Cp)، على Ct. أكدت دراسات توصيف متعددة، سواءً في المختبر أو في الجسم الحي، فعالية NFRCS في وقف النزيف وشفاء الجروح. يمكن استخدام المواد المركبة التي توفرها NFRCS لتخصيص أشكال مختلفة من السقالات لتلبية احتياجات محددة.
بالإضافة إلى ذلك، يمكن تعديل ضمادة NFRCS كضمادة أو لفافة لتغطية منطقة الإصابة بالكامل في الأطراف السفلية وأجزاء أخرى من الجسم. وخصوصًا لإصابات الأطراف الناتجة عن القتال، يمكن تغيير تصميم NFRCS ليشمل نصف الذراع أو الساق بالكامل (الشكل التكميلي S11). ويمكن تحويل NFRCS إلى سوار معصم باستخدام غراء الأنسجة، والذي يُستخدم لوقف النزيف الناتج عن إصابات المعصم الشديدة التي قد تؤدي إلى الانتحار. هدفنا الرئيسي هو تطوير NFRCS بأقل كمية ممكنة من البوليمر، بحيث يمكن توصيله إلى شريحة كبيرة من السكان (تحت خط الفقر) ووضعه في حقيبة الإسعافات الأولية. يتميز NFRCS بتصميمه البسيط والفعال والاقتصادي، مما يعود بالنفع على المجتمعات المحلية ويمكن أن يكون له تأثير عالمي.
تم شراء الكيتوزان (الوزن الجزيئي 80 كيلو دالتون) والأمارانث من شركة ميرك، الهند. تم شراء هيدروكسي بروبيل ميثيل سلولوز 50 سي بي، وبولي إيثيلين جلايكول 400، وميثيل سلولوز من شركة لوبا كيمي الخاصة المحدودة، مومباي. تم شراء كحول البولي فينيل (الوزن الجزيئي 125 كيلو دالتون) (محلل بنسبة 87-90%) من شركة ناشيونال كيميكالز، غوجارات. تم شراء بولي فينيل بيروليدين K30 من شركة موليكيم، مومباي، ومسحات معقمة من شركة راماراجو سيرجري كوتون ميلز المحدودة، تاميل نادو، باستخدام مياه ميلي كيو (نظام تنقية المياه دايركت-كيو 3، ميرك، الهند) كحامل.
تم تطوير NFRCS باستخدام طريقة التجفيف بالتجميد11،12. تم تحضير جميع تركيبات HFFC (الجدول 1) باستخدام محرك ميكانيكي. تم تحضير محلول 0.5٪ من الكيتوزان باستخدام حمض الأسيتيك بنسبة 1٪ في الماء عن طريق التحريك المستمر عند 800 دورة في الدقيقة على محرك ميكانيكي. تمت إضافة الوزن الدقيق للبوليمر المحمل الموضح في الجدول 1 إلى محلول الكيتوزان وحرك حتى تم الحصول على محلول بوليمر صافٍ. تمت إضافة PVP K30 و PEG 400 إلى الخليط الناتج بالكميات الموضحة في الجدول 1، واستمر التحريك حتى تم الحصول على محلول بوليمر لزج صافٍ. تم معالجة حمام محلول البوليمر الناتج بالموجات فوق الصوتية لمدة 60 دقيقة لإزالة فقاعات الهواء المحاصرة من خليط البوليمر. كما هو موضح في الشكل التكميلي S1 (ب)، تم توزيع Ct بالتساوي في كل بئر من صفيحة ذات 6 آبار (قالب) مضاف إليها 5 مل من HFFC.
تم تعقيم الصفيحة ذات الآبار الستة بالموجات فوق الصوتية لمدة 60 دقيقة لتحقيق ترطيب وتوزيع متساوٍ لـ HFFC في شبكة Ct. ثم جُمِّدت الصفيحة ذات الآبار الستة عند درجة حرارة -20 درجة مئوية لمدة 8-12 ساعة. جُفِّدت ألواح التجميد بالتجميد لمدة 48 ساعة للحصول على تركيبات مختلفة من NFRCS. يُستخدم الإجراء نفسه لإنتاج أشكال وهياكل مختلفة، مثل السدادات القطنية أو السدادات القطنية الأسطوانية، أو أي شكل آخر لتطبيقات مختلفة.
يُذاب الكيتوزان (80 كيلو دالتون) (3%)، ذو الوزن الدقيق، في حمض الأسيتيك بتركيز 1% باستخدام محرك مغناطيسي. يُضاف إلى المحلول الناتج من الكيتوزان 1% PEG 400، ويُحرك لمدة 30 دقيقة. يُسكب المحلول الناتج في وعاء مربع أو مستطيل، ويُجمد عند درجة حرارة -80 درجة مئوية لمدة 12 ساعة. تُجفف العينات المجمدة بالتجميد لمدة 48 ساعة للحصول على Cs13 المسامي.
أُجريت تجارب على مادة NFRCS المُطوّرة باستخدام مطيافية تحويل فورييه بالأشعة تحت الحمراء (FTIR) (مطيافية تحويل فورييه بالأشعة تحت الحمراء Shimadzu 8400 s، طوكيو، اليابان) للتأكد من التوافق الكيميائي للكيتوزان مع البوليمرات الأخرى. وتم الحصول على أطياف تحويل فورييه بالأشعة تحت الحمراء (عرض النطاق الطيفي من 400 إلى 4000 سم³) لجميع العينات المختبرة بإجراء 32 مسحًا.
تم تقييم معدل امتصاص الدم (BAR) لجميع التركيبات باستخدام الطريقة التي وصفها تشين وآخرون 16 مع تعديلات طفيفة. جُفِّفت NFRKs المُطوَّرة لجميع التركيبات في فرن تفريغ عند درجة حرارة 105 درجة مئوية طوال الليل لإزالة المذيب المتبقي. وُضِعَ 30 ملغ من NFRCS (وزن العينة الأولي - W0) و30 ملغ من Ct (مجموعة التحكم الإيجابية) في أطباق منفصلة تحتوي على خليط مسبق من سترات الصوديوم 3.8%. على فترات زمنية محددة مسبقًا، أي 5 و10 و20 و30 و40 و60 ثانية، أُزيلت NFRCS ونُظِّفت أسطحها من الدم غير الممتص بوضع العينات على Ct لمدة 30 ثانية. وُضِعَ الوزن النهائي للدم الممتص بواسطة NFRCS 16 (W1) في كل نقطة زمنية. احسب نسبة BAR باستخدام الصيغة التالية:
تم تحديد زمن تخثر الدم (BCT) كما ورد في تقرير وانج وآخرون. 17. تم حساب الوقت اللازم لتجلط الدم الكامل (دم الفئران المخلوط مسبقًا مع 3.8٪ سترات الصوديوم) في وجود NFRCS باعتباره BCT لعينة الاختبار. تم وضع مكونات NFRCS المختلفة (30 مجم) في قوارير ذات أغطية لولبية سعة 10 مل وحضنت عند 37 درجة مئوية. تمت إضافة الدم (0.5 مل) إلى القارورة وأضيف 0.3 مل من 0.2 مولار CaCl2 لتنشيط تخثر الدم. أخيرًا، اقلب القارورة كل 15 ثانية (حتى 180 درجة) حتى تتكون جلطة ثابتة. يتم تقدير BCT للعينة من خلال عدد التقلبات vails17،18. بناءً على BCT، تم اختيار تركيبتين مثاليتين من NFRCS Cm وCh وCp لمزيد من دراسات التوصيف.
تم تحديد BCT لتركيبات Ch NFRCS و Cp NFRCS من خلال تطبيق الطريقة التي وصفها Li et al. 19. ضع 15 × 15 مم2 من Ch NFRCS و Cp NFRCS و Cs (مجموعة التحكم الإيجابية) في أطباق بتري منفصلة (37 درجة مئوية). تم خلط الدم المحتوي على 3.8٪ سترات الصوديوم مع 0.2 مولار CaCl2 بنسبة حجم 10: 1 لبدء عملية تخثر الدم. تم وضع 20 ميكرولتر من خليط دم الفئران CaCl2 بتركيز 0.2 مولار على سطح العينة ووضعها في طبق بتري فارغ. تم سكب الدم في أطباق بتري فارغة بدون Ct في مجموعة التحكم. على فترات ثابتة من 0 و 3 و 5 دقائق، أوقف التخثر عن طريق إضافة 10 مل من الماء منزوع الأيونات (DI) إلى العينة التي تحتوي على الطبق دون إزعاج الجلطة. تخضع كريات الدم الحمراء غير المتخثرة (كريات الدم الحمراء) للتحلل الدموي في وجود الماء منزوع الأيونات وتطلق الهيموجلوبين. تم قياس الهيموغلوبين في نقاط زمنية مختلفة (HA(t)) عند طول موجي 540 نانومتر (λmax هيموغلوبين) باستخدام مطياف الأشعة فوق البنفسجية-المرئية. واتخذ الامتصاص المطلق للهيموغلوبين (AH(0)) في 0 دقيقة من 20 ميكرولتر من الدم في 10 مل من الماء منزوع الأيونات معيارًا مرجعيًا. وحُسب الامتصاص النسبي للهيموغلوبين (RHA) للدم المتخثر من نسبة HA(t)/HA(0) باستخدام نفس دفعة الدم.
باستخدام جهاز تحليل الملمس (Texture Pro CT V1.3 Build 15، بروكفيلد، الولايات المتحدة الأمريكية)، حُددت خصائص التصاق NFRK بالأنسجة التالفة. ضُغط طبق أسطواني مفتوح القاع على الجزء الداخلي من جلد الخنزير (بدون طبقة الدهن). وُضعت العينات (Ch NFRCS وCp NFRCS) عبر قنية في قوالب أسطوانية لزيادة التصاقها بجلد الخنزير. بعد حضانة لمدة 3 دقائق في درجة حرارة الغرفة (25 درجة مئوية)، سُجلت قوة التصاق NFRCS بمعدل ثابت قدره 0.5 مم/ثانية.
الميزة الرئيسية للمواد المانعة للتسرب الجراحية هي زيادة تخثر الدم مع تقليل فقدان الدم. تم تقييم التخثر غير المفقود في NFRCS باستخدام طريقة منشورة مسبقًا مع تعديلات طفيفة 19. اصنع أنبوب طرد مركزي دقيق (2 مل) (القطر الداخلي 10 مم) بفتحة 8 × 5 مم 2 على جانب واحد من أنبوب الطرد المركزي (يمثل جرحًا مفتوحًا). يستخدم NFRCS لإغلاق الفتحة ويُستخدم الشريط لإغلاق الحواف الخارجية. أضف 20 ميكرولترًا من 0.2 مولار CaCl2 إلى أنبوب الطرد المركزي الدقيق الذي يحتوي على خليط سترات الصوديوم بنسبة 3.8٪. بعد 10 دقائق، تمت إزالة أنابيب الطرد المركزي الدقيقة من الأطباق وتم تحديد الزيادة في كتلة الأطباق بسبب تدفق الدم من NFRK (n = 3). تمت مقارنة فقدان الدم Ch NFRCS و Cp NFRCS مع Cs.
تم تحديد سلامة رطوبة NFRCS بناءً على الطريقة التي وصفها ميشرا وتشودري21 مع تعديلات طفيفة. ضع NFRCS في دورق مخروطي سعة 100 مل مع 50 مل من الماء، وحركه لمدة 60 ثانية دون أن يتشكل غطاء. تم الفحص البصري وتحديد أولوية العينات للتحقق من سلامتها الفيزيائية بناءً على عملية الجمع.
دُرست قوة ارتباط HFFC بـ Ct باستخدام طرق منشورة سابقًا مع تعديلات طفيفة. قُيِّمت سلامة طلاء السطح بتعريض NFRK لموجات صوتية (محفز خارجي) بوجود ماء milliQ (Ct). وُضعت NFRCS Ch NFRCS وCp NFRCS المُطوَّرة في دورق مملوء بالماء، وخضعت للموجات فوق الصوتية لمدة دقيقة واحدة، دقيقتين، 3، 4، 5، 6، 7، 8، 9، 10، و30 دقيقة على التوالي. بعد التجفيف، استُخدم الفرق النسبي بين الوزن الابتدائي والوزن النهائي لـ NFRCS لحساب نسبة فقدان المادة (HFFC). وقد دعمت تقنية BCT المختبرية قوة ارتباط أو فقدان المواد السطحية. تُوفر كفاءة ارتباط HFFC بـ Ct تخثرًا للدم وطبقة مرنة على سطح Ct22.
تم تحديد تجانس NFRCS المُطوّر من خلال التصوير المقطعي المحوري (BCT) لعينات (30 ملغ) مأخوذة من مواقع عامة مختارة عشوائيًا من NFRCS. اتبع إجراء التصوير المقطعي المحوري المذكور سابقًا لتحديد توافق NFRCS. يضمن القرب بين العينات الخمس تغطية سطحية موحدة وترسيب HFFC في شبكة Ct.
تم تحديد مساحة تماس الدم الاسمية (NBCA) كما ورد سابقًا مع بعض التعديلات. تخثر الدم عن طريق تثبيت 20 ميكرولترًا من الدم بين سطحي الدعامة Ct، Ch NFRCS، Cp NFRCS، وCs. بعد ساعة واحدة، فُصل جزآ الدعامة وقيست مساحة التخثر يدويًا. اعتُبرت القيمة المتوسطة لثلاث تكرارات NBCA NFRCS19.
استُخدم تحليل الامتصاص الديناميكي للبخار (DVS) لتقييم فعالية نظام NFRCS في امتصاص الماء من البيئة الخارجية أو من موقع الإصابة المسؤول عن بدء التخثر. يُقيّم أو يُسجل تحليل DVS امتصاص البخار وفقدانه في العينة وزنيًا باستخدام ميزان فائق الحساسية بدقة كتلة ±0.1 ميكروغرام. يُولّد ضغط بخار جزئي (رطوبة نسبية) بواسطة وحدة تحكم إلكترونية في تدفق الكتلة حول العينة عن طريق خلط الغازات الحاملة المشبعة والجافة. وفقًا لإرشادات دستور الأدوية الأوروبي، بناءً على نسبة امتصاص الرطوبة بواسطة العينات، تم تصنيف العينات إلى 4 فئات (0-0.012% وزن/وزن - غير استرطابية، 0.2-2% وزن/وزن استرطابية قليلاً، 2-15% استرطابية بشكل معتدل، و> 15% استرطابية للغاية)23. وفقًا لإرشادات دستور الأدوية الأوروبي، بناءً على نسبة امتصاص الرطوبة بواسطة العينات، تم تصنيف العينات إلى 4 فئات (0-0.012% وزن/وزن - غير ماصة للرطوبة، 0.2-2% وزن/وزن ماصة للرطوبة قليلاً، 2-15% ماصة للرطوبة بشكل معتدل، و> 15% ماصة للرطوبة للغاية)23.وفقًا لتوصيات دستور الأدوية الأوروبي، واعتمادًا على نسبة امتصاص الرطوبة بواسطة العينات، تم تقسيم العينات إلى 4 فئات (0-0.012% وزن/وزن - غير استرطابية، 0.2-2% وزن/وزن استرطابية قليلاً، 2- خمسة عشر%).% هزاز للغاية و > 15% هزاز للغاية)23. (% استرطابي بشكل معتدل و> 15% استرطابي للغاية)23.يجب أن تكون مقاومة للماء 4 类(0-0.012% w/w- 非吸湿性、0.2-2% w/w)轻微吸湿性、2-15% 适度吸湿،> 15% 非常吸湿)23.يجب أن يتم استخدام الماء المقطر في الماء للحصول على أفضل النتائج ((0-0.012% W/w- نسبة الوزن المسموح بها 、 、 、 0.2-2% وزن/وزن 、 2-15% نسبة الوزن الزائد ,> 15% وزن/وزن 23.وفقًا لتوصيات دستور الأدوية الأوروبي، يتم تقسيم العينات إلى 4 فئات اعتمادًا على نسبة الرطوبة التي تمتصها العينة (0-0.012٪ بالوزن - غير استرطابية، 0.2-2٪ بالوزن استرطابية قليلاً، 2-15٪ بالوزن).% هزاز كبير، > 15 % هزاز للغاية) 23. % استرطابي بدرجة معتدلة، > 15% استرطابي للغاية) 23.تم تحديد الكفاءة الاسترطابية لـ NFCS X NFCS وTsN NFCS باستخدام جهاز التحليل DVS TA TGA Q5000 SA. خلال هذه العملية، تم الحصول على وقت التشغيل، والرطوبة النسبية (RH)، ووزن العينة في الوقت الفعلي عند 25 درجة مئوية. يُحسب محتوى الرطوبة من خلال تحليل كتلة NFRCS الدقيق باستخدام المعادلة التالية:
MC هو رطوبة NFRCS. m1 هو الوزن الجاف لمضادات الالتهاب غير الستيرويدية. m2 هي كتلة NFRCS في الوقت الحقيقي عند رطوبة نسبية معينة.
تم تقدير المساحة السطحية الإجمالية باستخدام تجربة امتصاص النيتروجين بالنيتروجين السائل بعد تفريغ العينات عند 25 درجة مئوية لمدة 10 ساعات (< 7 × 10–3 تور). تم تقدير المساحة السطحية الإجمالية باستخدام تجربة امتصاص النيتروجين بالنيتروجين السائل بعد تفريغ العينات عند 25 درجة مئوية لمدة 10 ساعات (< 7 × 10–3 تور). يتم تقييم درجة الجودة العالية من خلال تجربة امتصاص بعض المواد بعد عملية الامتصاص عند 25 درجة مئوية إلى 10 درجات مئوية (< 7 × 10–3 درجات مئوية). تم تقدير المساحة السطحية الإجمالية باستخدام تجربة امتصاص النيتروجين بالنيتروجين السائل بعد تفريغ العينات عند 25 درجة مئوية لمدة 10 ساعات (< 7 × 10–3 تور).درجة حرارة 25 درجة مئوية تصل إلى 10 درجة مئوية (< 7 × 10-3 تور) وتتراوح درجة الحرارة بين 10 و 10 درجة مئوية.25 درجة مئوية يتم تعزيز درجة الحموضة العالية باستخدام تجارب الامتصاص التي يتم الحصول عليها بعد الدعم образцов в течение 10 ساعات عند 25 درجة مئوية (< 7 × 10-3 топ). تم تقدير المساحة السطحية الكلية باستخدام تجارب امتصاص النيتروجين بالنيتروجين السائل بعد تفريغ العينات لمدة 10 ساعات عند 25 درجة مئوية (< 7 × 10-3 تور).تم تحديد إجمالي مساحة السطح وحجم المسام وحجم مسام NFRCS باستخدام Quantachrome من NOVA 1000e، النمسا باستخدام برنامج RS 232.
حضّر 5% من خلايا الدم الحمراء (محلول ملحي كمخفف) من الدم الكامل. ثم انقل جزءًا صغيرًا من HFFC (0.25 مل) إلى طبق ذي 96 بئرًا وكتلة 5% من خلايا الدم الحمراء (0.1 مل). احتضن الخليط عند 37 درجة مئوية لمدة 40 دقيقة. اعتُبر خليط من خلايا الدم الحمراء والمصل ضابطًا إيجابيًا، وخليطًا من المحلول الملحي وخلايا الدم الحمراء ضابطًا سلبيًا. حُدد التراص الدموي وفقًا لمقياس ستاجيتسكي. المقاييس المقترحة هي كما يلي: + + + + تجمعات حبيبية كثيفة؛ + + + وسادات سفلية ناعمة ذات حواف منحنية؛ + + وسادات سفلية ناعمة ذات حواف ممزقة؛ + حلقات حمراء ضيقة حول حواف الوسادات الناعمة؛ - زر أحمر منفصل 12 (سلبي) في وسط البئر السفلي.
دُرست التوافقية الدموية لـ NFRCS وفقًا لطريقة المنظمة الدولية للمعايير (ISO) (ISO10993-4، 1999)26،27. الطريقة الوزنية التي وصفها سينغ وآخرون. أُجريت تعديلات طفيفة لتقييم تكوّن الخثرة في وجود NFRCS أو عليه. حُضنت 500 ملغ من Cs وCh وCp NFRCS في محلول ملحي مُنظّم بالفوسفات (PBS) لمدة 24 ساعة عند درجة حرارة 37 درجة مئوية. بعد 24 ساعة، أُزيل PBS وعولج NFRCS بـ 2 مل من الدم المحتوي على 3.8% سترات الصوديوم. على سطح NFRCS، أُضيف 0.04 مل من 0.1 مولار CaCl2 إلى العينات المُحضّنة. بعد 45 دقيقة، أُضيف 5 مل من الماء المقطر لوقف التخثر. عولج الدم المتخثر على سطح NFRK بمحلول فورمالدهايد بتركيز 36-38%. جُففت الجلطات المثبتة بالفورمالدهايد ووُزنت. قُدِّرت نسبة التخثر بحساب وزن الزجاج الخالي من الدم والعينة (مجموعة التحكم السلبية) والزجاج المحتوي على الدم (مجموعة التحكم الإيجابية).
كتأكيد أولي، تم تصوير العينات تحت المجهر الضوئي لفهم قدرة طلاء سطح HFFC، وترابط Ct، وشبكة Ct على تكوين المسام. قُصّت مقاطع رقيقة من Ch وCp من NFRCS بشفرة مشرط. وُضع المقطع الناتج على شريحة زجاجية، وغُطّيت بغطاء زجاجي، وثُبّتت حوافها بالغراء. فُحصت الشرائح المُحضّرة تحت المجهر الضوئي، والتُقطت صور فوتوغرافية بتكبيرات مختلفة.
تم تصور ترسب البوليمر في شبكات Ct باستخدام المجهر الفلوري استنادًا إلى الطريقة التي وصفها Rice et al.29. تم خلط تركيبة HFFC المستخدمة في الصياغة مع صبغة فلورية (أمارانث)، وتم تحضير NFRCS (Ch & Cp) وفقًا للطريقة المذكورة سابقًا. تم خلط تركيبة HFFC المستخدمة في الصياغة مع صبغة فلورية (أمارانث)، وتم تحضير NFRCS (Ch & Cp) وفقًا للطريقة المذكورة سابقًا.تم خلط تركيبة HFFC المستخدمة في الصياغة مع صبغة فلورية (أمارانث) وتم الحصول على NFRCS (Ch و Cp) وفقًا للطريقة المذكورة سابقًا.تم تصميم تقنية HFFC بواسطة NFRCS (Ch & Cp).تم تصميم تقنية HFFC بواسطة NFRCS (Ch & Cp).تم خلط تركيبة HFFC المستخدمة في التركيبة مع صبغة فلورية (Amaranth) وحصلت على NFRCS (Ch و Cp)، كما ذكرنا سابقًا.قُطعت مقاطع رقيقة من NFRK من العينات المُحصَّلة، ووُضعت على شرائح زجاجية، وغُطِّيت بأغطية. راقب الشرائح المُحضَّرة تحت مجهر فلوري باستخدام مُرشِّح أخضر (310-380 نانومتر). التُقطت الصور بتكبير 4 أضعاف لفهم علاقات Ct وترسيب البوليمر الزائد في شبكة Ct.
تم تحديد تضاريس سطح NFRCS Ch وCp باستخدام مجهر القوة الذرية (AFM) مع ذراع TESP فائق الدقة في وضع النقر: 42 نيوتن/متر، 320 كيلوهرتز، ROC 2-5 نانومتر، بروكر، تايوان. حُددت خشونة السطح بواسطة جذر متوسط ​​التربيع (RMS) باستخدام برنامج (معالج صور مسبار المسح). تم عرض مواقع NFRCS المختلفة على صور ثلاثية الأبعاد للتحقق من تجانس السطح. يُعرّف الانحراف المعياري للنتيجة لمنطقة معينة بأنه خشونة السطح. استُخدمت معادلة RMS لقياس خشونة سطح NFRCS31.
أُجريت دراسات قائمة على FESEM باستخدام FESEM، SU8000، HI-0876-0003، هيتاشي، طوكيو، لفهم مورفولوجيا سطح Ch NFRCS وCp NFRCS، والتي أظهرت نتائج أفضل في BCT مقارنةً بـ Cm NFRCS. أُجريت دراسة FESEM وفقًا للطريقة التي وصفها تشاو وآخرون (32) مع تعديلات طفيفة. خُلطت جرعة من 20 إلى 30 ملغ من NFRCS Ch NFRCS وCp NFRCS مسبقًا مع 20 ميكرولتر من سترات الصوديوم 3.8% الممزوجة مسبقًا بدم الفئران. أُضيف 20 ميكرولتر من 0.2 مولار CaCl2 إلى عينات الدم المعالجة لبدء التخثر، وحُضنت العينات في درجة حرارة الغرفة لمدة 10 دقائق. بالإضافة إلى ذلك، أُزيلت كريات الدم الحمراء الزائدة من سطح NFRCS عن طريق الشطف بمحلول ملحي.
عولجت العينات اللاحقة بـ 0.1% غلوتارالدهيد، ثم جُففت في فرن هواء ساخن عند درجة حرارة 37 مئوية لإزالة الرطوبة. طُليت العينات المجففة وحُللت 32. وشملت الصور الأخرى التي تم الحصول عليها أثناء التحليل تكوّن الجلطة على سطح ألياف القطن الفردية، وترسب البوليمر بين الكادميوم، وشكل كريات الدم الحمراء، وسلامة الجلطة، وشكل كريات الدم الحمراء في وجود NFRCS. تم مسح مناطق NFRCS غير المعالجة ومناطق NFRCS المعالجة بـ Ch وCp والمُحضّنة بالدم بحثًا عن أيونات عنصرية (الصوديوم والبوتاسيوم والنيتروجين والكالسيوم والمغنيسيوم والزنك والنحاس والسيلينيوم)33. قارن النسب المئوية للأيونات العنصرية بين العينات المعالجة وغير المعالجة لفهم تراكم الأيونات العنصرية أثناء تكوّن الجلطة وتجانس الجلطة.
تم تحديد سمك طبقة طلاء سطح Cp HFFC على سطح Ct باستخدام FESEM. قُطعت المقاطع العرضية لـ Cp NFRCS من الإطار وطُليت بالرش. رُصدت عينات طلاء الرش الناتجة باستخدام FESEM، وقيست سماكة طبقة الطلاء السطحية 34 و35 و36.
يوفر التصوير المقطعي المحوسب الدقيق بالأشعة السينية تصويرًا ثلاثي الأبعاد عالي الدقة وغير مدمر، ويتيح دراسة التركيب الهيكلي الداخلي لـ NFRK. يستخدم التصوير المقطعي المحوسب الدقيق شعاعًا من الأشعة السينية يمر عبر العينة لتسجيل معامل التوهين الخطي المحلي للأشعة السينية في العينة، مما يساعد على الحصول على معلومات مورفولوجية. تم فحص الموقع الداخلي لـ Ct في عينات Cp NFRCS وCp NFRCS المعالجة بالدم بواسطة التصوير المقطعي المحوسب الدقيق لفهم كفاءة الامتصاص وتجلط الدم في وجود NFRCS37،38،39. أعيد بناء التركيبات ثلاثية الأبعاد لعينات Cp NFRCS المعالجة بالدم وغير المعالجة باستخدام التصوير المقطعي المحوسب الدقيق (V|tome|x S240، فينيكس، ألمانيا). باستخدام برنامج VG STUDIO-MAX الإصدار 2.2، تم التقاط العديد من صور الأشعة السينية من زوايا مختلفة (يفضل تغطية 360 درجة) لإنتاج صور ثلاثية الأبعاد لـ NFRCS. تم إعادة بناء بيانات الإسقاط المجمعة إلى صور ثلاثية الأبعاد باستخدام برنامج 3D ScanIP Academic البسيط المقابل.
بالإضافة إلى ذلك، لفهم توزيع الجلطة، أُضيف 20 ميكرولترًا من الدم المُسْتَراتي المُخْلَط مُسبقًا و20 ميكرولترًا من كلوريد الكالسيوم بتركيز 0.2 مولار إلى مادة NFRCS لبدء تخثر الدم. تُركت العينات المُحَضَّرة لتتصلب. عولج سطح مادة NFRK بجلوتارالدهيد بتركيز 0.5%، وجُفِّف في فرن هواء ساخن بدرجة حرارة تتراوح بين 30 و40 درجة مئوية لمدة 30 دقيقة. فُحصت جلطة الدم المُتَشَكِّلة على مادة NFRCS، وأُعِيدَ بناؤها، ورُصِدَت صورة ثلاثية الأبعاد لها.
أُجريت اختبارات مضادة للبكتيريا على Cp NFRCS (أفضل مقارنة بـ Ch NFRCS) باستخدام الطريقة الموصوفة سابقًا مع تعديلات طفيفة. حُدد النشاط المضاد للبكتيريا لـ Cp NFRCS وCp HFFC باستخدام ثلاثة كائنات دقيقة اختبارية مختلفة [S.aureus (بكتيريا موجبة الجرام)، وE.coli (بكتيريا سالبة الجرام)، والمبيضات البيضاء (C.albicans)] تنمو على أجار في أطباق بتري في حاضنة. ثبّت بالتساوي 50 مل من معلق الثقافة البكتيرية المخفف بتركيز 105-106 وحدة تشكيل مستعمرة مل-1 على وسط الأجار. صب الوسط في طبق بتري واتركه يتصلب. تم عمل آبار على سطح طبق الأجار لملئها بـ HFFC (3 آبار لـ HFFC وواحدة للتحكم السلبي). أضف 200 ميكرولتر من HFFC إلى 3 آبار و200 ميكرولتر من PBS بدرجة حموضة 7.4 إلى البئر الرابع. على الجانب الآخر من طبق بتري، ضع قرصًا من مادة Cp NFRCS بقطر 12 مم على الأجار المُصلّب، ثم بللها بـ PBS (درجة حموضة 7.4). تُعتبر أقراص سيبروفلوكساسين والأمبيسيلين والفلوكونازول معايير مرجعية لبكتيريا المكورات العنقودية الذهبية والإشريكية القولونية والمبيضة البيضاء. قِس منطقة التثبيط يدويًا والتقط صورة رقمية لها.
بعد الموافقة الأخلاقية المؤسسية، أجريت الدراسة في كلية الطب والتعليم والبحث في كاستوربا في مانيبال، كارناتاكا، في جنوب الهند. تمت مراجعة البروتوكول التجريبي لـ TEG في المختبر واعتماده من قبل لجنة الأخلاقيات المؤسسية في كلية الطب كاستوربا، مانيبال، كارناتاكا (IEC: 674/2020). تم تجنيد الأشخاص من متبرعين بالدم متطوعين (تتراوح أعمارهم بين 18 و55 عامًا) من بنك الدم بالمستشفى. بالإضافة إلى ذلك، تم الحصول على نموذج موافقة مستنيرة من المتطوعين لجمع عينات الدم. تم استخدام TEG الأصلي (N-TEG) ​​​​لدراسة تأثير تركيبة Cp HFFC على الدم الكامل الممزوج مسبقًا بسترات الصوديوم. يُعرف N-TEG على نطاق واسع بدوره في الإنعاش في نقطة الرعاية، مما يخلق مشاكل للأطباء بسبب احتمال حدوث تأخير كبير سريريًا في النتائج (اختبارات التخثر الروتينية). تم إجراء تحليل N-TEG باستخدام الدم الكامل. تم الحصول على موافقة مستنيرة وتاريخ طبي مفصل من جميع المشاركين. لم تشمل الدراسة مشاركين يعانون من مضاعفات تخثر أو توقف تخثر الدم، مثل الحمل/ما بعد الولادة أو أمراض الكبد. كما استُبعد من الدراسة الأشخاص الذين يتناولون أدوية تؤثر على عملية التخثر. أُجريت فحوصات معملية أساسية (الهيموغلوبين، وزمن البروثرومبين، والثرومبوبلاستين المنشط، وعدد الصفائح الدموية) على جميع المشاركين وفقًا للإجراءات القياسية. يحدد تحليل N-TEG مرونة لزوجة جلطة الدم، وتركيبها الأولي، وتفاعل الجسيمات، وتقوية الجلطة، وانحلالها. يوفر تحليل N-TEG بيانات بيانية ورقمية حول التأثيرات الجماعية للعديد من العناصر الخلوية والبلازما. أُجري تحليل N-TEG على حجمين مختلفين من Cp HFFC (10 ميكرولتر و50 ميكرولتر). ونتيجة لذلك، أُضيف 1 مل من الدم الكامل مع حمض الستريك إلى 10 ميكرولتر من Cp HFFC. أضف 1 مل (Cp HFFC + دم مُسْتَتَر) و340 ميكرولتر من الدم المخلوط إلى طبق TEG يحتوي على 20 ميكرولتر من كلوريد الكالسيوم بتركيز 0.2 مولار. بعد ذلك، وُضِعَت أطباق TEG في جهاز TEG® 5000 الأمريكي لقياس R، وK، وزاوية ألفا، وMA، وG، وCI، وTPI، وEPL، وLY في 30% من عينات الدم بوجود Cp HFFC41.
تمت مراجعة بروتوكول الدراسة الحية واعتماده من قبل لجنة أخلاقيات الحيوان المؤسسية (IAEC)، كلية طب كاستوربا، معهد مانيبال للتعليم العالي، مانيبال (IAEC/KMC/69/2020). أجريت جميع التجارب على الحيوانات وفقًا لتوصيات لجنة مراقبة وإشراف التجارب على الحيوانات (CPCSEA). أجريت جميع دراسات NFRCS الحية (2 × 2 سم2) على إناث فئران ويستار (تزن من 200 إلى 250 جم). تم تأقلم جميع الحيوانات عند درجة حرارة 24-26 درجة مئوية، وكان للحيوانات حرية الوصول إلى الغذاء والماء القياسيين حسب الرغبة. تم تقسيم جميع الحيوانات عشوائيًا إلى مجموعات مختلفة، تتكون كل مجموعة من ثلاثة حيوانات. أجريت جميع الدراسات وفقًا لدراسات الحيوانات: تقرير التجارب الحية 43. قبل الدراسة، خُدِّرت الحيوانات بإعطائها داخل الصفاق مزيجًا من ٢٠-٥٠ ملغ من الكيتامين (لكل كيلوغرام من وزن الجسم) و٢-١٠ ملغ من الزيلازين (لكل كيلوغرام من وزن الجسم). بعد الدراسة، حُسب حجم النزيف بتقييم الفرق بين الوزن الابتدائي والوزن النهائي للعينات، واعتمد متوسط ​​القيمة الناتجة عن الاختبارات الثلاثة على حجم نزيف العينة.
طُبِّق نموذج بتر ذيل الفأر لفهم قدرة NFRCS على تعديل النزيف في حالات الصدمات أو القتال أو حوادث المرور (نموذج الإصابة). قُطِع 50% من الذيل بشفرة مشرط، ثم وُضِع في الهواء لمدة 15 ثانية لضمان نزيف طبيعي. إضافةً إلى ذلك، وُضِعَت عينات الاختبار على ذيل الفأر مع الضغط عليها (Ct، Cs، Ch NFRCS، وCp NFRCS). أُبلغ عن حدوث نزيف وPCT لعينات الاختبار (ن = 3)17،45.
تم دراسة فعالية التحكم في ضغط NFRCS في القتال باستخدام نموذج الشريان الفخذي السطحي. يُكشف الشريان الفخذي، ويُثقب بمِبزلة 24G، ويُنزف خلال 15 ثانية. بعد ملاحظة نزيف غير مُسيطر عليه، تُوضع عينة الاختبار في موضع الثقب مع الضغط عليها. بعد وضع عينة الاختبار مباشرةً، يُسجل زمن التخثر، وتُلاحظ فعالية وقف النزيف خلال الدقائق الخمس التالية. يُكرر الإجراء نفسه مع Cs وCt46.
اقترح داولينج وآخرون 47 نموذجًا لإصابة الكبد لتقييم القدرة على وقف النزيف للمواد المرقئة في سياق النزيف أثناء الجراحة. تم تسجيل BCT لعينات Ct (مجموعة التحكم السلبية) وإطار Cs (مجموعة التحكم الإيجابية) وعينات Ch NFRCS وعينات Cp NFRCS. تم الكشف عن الوريد الأجوف فوق الكبدي للجرذ عن طريق إجراء فتح بطن متوسط. بعد ذلك، تم قطع الجزء البعيد من الفص الأيسر بالمقص. قم بعمل شق في الكبد بشفرة مشرط واتركه ينزف لبضع ثوانٍ. تم وضع عينات اختبار Ch NFRCS و Cp NFRCS الموزونة بدقة على السطح التالف دون أي ضغط إيجابي وتم تسجيل BCT. ثم طبقت المجموعة الضابطة (Ct) ضغطًا متبوعًا بـ Cs 30 s47 دون كسر الإصابة.
أُجريت اختبارات التئام الجروح داخل الجسم الحي باستخدام نموذج جرح استئصالي لتقييم خصائص التئام الجروح لمركبات NFRCS المُطوّرة القائمة على البوليمر. اختيرت نماذج الجروح الاستئصالية وأُجريت وفقًا لطرق منشورة سابقًا مع تعديلات طفيفة 19،32،48. خُدّرت جميع الحيوانات كما هو موصوف سابقًا. استُخدم مثقاب خزعة (12 مم) لعمل شق دائري عميق في جلد الظهر. غُطّيت مواقع الجروح المُجهّزة بـ Cs (مجموعة ضابطة إيجابية)، وCt (مع مراعاة أن ضمادات القطن تُعيق التئامها)، وCh NFRCS وCp NFRCS (مجموعة تجريبية)، ومجموعة ضابطة سلبية دون أي علاج. في كل يوم من أيام الدراسة، قُيست مساحة الجرح لدى جميع الفئران. استُخدمت كاميرا رقمية لالتقاط صورة لمنطقة الجرح ووضع ضمادة جديدة. قُيست نسبة التئام الجرح بالصيغة التالية:
وبناء على نسبة انغلاق الجرح في اليوم الثاني عشر من الدراسة تم استئصال جلد الفئران للمجموعة الأفضل ((Cp NFRCS) والمجموعة الضابطة) ودرست بصبغة الهيماتوكسيلين وصبغة ماسون الثلاثية اللون. وبناء على نسبة انغلاق الجرح في اليوم الثاني عشر من الدراسة تم استئصال جلد الفئران للمجموعة الأفضل ((Cp NFRCS) والمجموعة الضابطة) ودرست بصبغة الهيماتوكسيلين وصبغة ماسون الثلاثية اللون.وبناء على نسبة إغلاق الجرح في اليوم الثاني عشر من الدراسة، تم استئصال جلد الفئران من المجموعة الأفضل ((Cp NFRCS) والمجموعة الضابطة) وفحصه عن طريق التلوين بالهيماتوكسيلين-إيوزين وثلاثي كروم ماسون.أفضل 12 قطعة من مستلزمات السفر في العالم((Cp (NFRCS) و和对照组) من خلال سلاسل المفاتيح، وH&E في H&E وMasson في نهاية المطاف.أفضل 12 قطعة من مستلزمات السفر في العالم((Cp (NFRCS) و和对照组) 的大鼠皮肤،进行H&E染色،和眳组)تم استئصال الفئران في أفضل مجموعة ((Cp NFRCS) ومجموعات التحكم) لصبغ الهيماتوكسيلين-الإيوزين وصبغة ماسون ثلاثية الألوان بناءً على نسبة إغلاق الجرح في اليوم الثاني عشر من الدراسة.أُجريت عملية التلوين المُنفَّذة وفقًا للطرق الموصوفة سابقًا49،50. باختصار، بعد تثبيت العينات في فورمالين بنسبة 10%، جُفِّفت باستخدام سلسلة من الكحولات المُدرَّجة. استُخدم ميكروتوم للحصول على مقاطع رقيقة (بسمك 5 ميكرومتر) من الأنسجة المُستأصلة. عولجت المقاطع الرقيقة المتسلسلة من العينات الضابطة وخلايا Cp NFRCS بالهيماتوكسيلين والإيوزين لدراسة التغيرات النسيجية المرضية. استُخدمت صبغة ماسون ثلاثية الألوان للكشف عن تكوُّن ألياف الكولاجين. ودرس أخصائيو علم الأمراض النتائج بشكل عشوائي.
دُرست ثباتية عينات Cp NFRCS عند درجة حرارة الغرفة (25 درجة مئوية ± 2 درجة مئوية/60% رطوبة نسبية ± 5%) لمدة 12 شهرًا51. وخضعت عينات Cp NFRCS (تغير لون السطح ونمو الميكروبات) للفحص البصري واختبار مقاومة التآكل واختبار BCT وفقًا للطرق المذكورة أعلاه في قسم المواد والطرق.
تم فحص قابلية التوسع وإعادة إنتاج Cp NFRCS من خلال تحضير Cp NFRCS بحجم 15×15 سم². بالإضافة إلى ذلك، تم استئصال عينات بتركيز 30 ملغ (ن = 5) من كسور Cp NFRCS المختلفة، وتم تقييم BCT للعينات المدروسة كما هو موضح سابقًا في قسم الطرق.
لقد حاولنا تطوير أشكال وهياكل متنوعة باستخدام تركيبات Cp NFRCS لتطبيقات طبية حيوية متنوعة. تشمل هذه الأشكال أو التكوينات مسحات مخروطية الشكل لعلاج نزيف الأنف، وإجراءات طب الأسنان، ومسحات أسطوانية الشكل لعلاج نزيف المهبل.
يتم التعبير عن جميع مجموعات البيانات على أنها متوسط ​​± الانحراف المعياري وتم تحليلها بواسطة تحليل التباين باستخدام Prism 5.03 (GraphPad، سان دييغو، كاليفورنيا، الولايات المتحدة الأمريكية) متبوعًا باختبار المقارنات المتعددة لبونفيروني (*p <0.05).
جميع الإجراءات التي أُجريت في الدراسات البشرية كانت متوافقة مع معايير المعهد والمجلس الوطني للبحوث، بالإضافة إلى إعلان هلسنكي لعام ١٩٦٤ وتعديلاته اللاحقة، أو المعايير الأخلاقية المماثلة. أُبلغ جميع المشاركين بخصائص الدراسة وطبيعتها التطوعية. تبقى بيانات المشاركين سرية بعد جمعها. راجعت لجنة الأخلاقيات المؤسسية في كلية كاستوربا الطبية، مانيبال، كارناتاكا، بروتوكول تجربة TEG في المختبر واعتمدته (IEC: 674/2020). وقّع المتطوعون على موافقة مستنيرة لجمع عينات الدم.
أُجريت جميع الإجراءات في الدراسات على الحيوانات وفقًا لمعايير كلية الطب كاستوبا، معهد مانيبال للتعليم العالي، مانيبال (IAEC/KMC/69/2020). أُجريت جميع التجارب على الحيوانات المصممة وفقًا لإرشادات لجنة مراقبة وإشراف التجارب على الحيوانات (CPCSEA). ويتبع جميع المؤلفين إرشادات ARRIVE.
تم تحليل أطياف FTIR لجميع NFRCS ومقارنتها بطيف الكيتوزان الموضح في الشكل 2أ. القمم الطيفية المميزة للكيتوزان (المسجلة) عند 3437 سم-1 (تمدد OH وNH، تداخل)، 2945 و2897 سم-1 (تمدد CH)، 1660 سم-1 (إجهاد NH2)، 1589 سم-1 (انحناء N–H)، 1157 سم-1 (تمدد جسر O-)، 1067 سم-1 (تمدد C–O، هيدروكسيل ثانوي)، 993 سم-1 (تمدد CO، Bo-OH) 52.53.54. يوضح الجدول التكميلي S1 قيم طيف امتصاص FTIR NFRCS للكيتوزان (المراسل)، الكيتوزان النقي، Cm، Ch، وCp. أظهرت أطياف FTIR لجميع البوليمرات النانوية النانوية (Cm، Ch، وCp) نفس نطاقات الامتصاص المميزة للكيتوزان النقي دون أي تغيرات ملحوظة (الشكل 2أ). وأكدت نتائج FTIR عدم وجود تفاعلات كيميائية أو فيزيائية بين البوليمرات المستخدمة في تطوير البوليمرات النانوية النانوية، مما يشير إلى أن البوليمرات المستخدمة خاملة.
توصيف مُختبري لـ Cm NFRCS وCh NFRCS وCp NFRCS وCs. (أ) يُمثل أطياف FTIR المُجمعة لتركيبات الكيتوزان وCm NFRCS وCh NFRCS وCp NFRCS تحت الضغط. (ب) أ) معدل امتصاص الدم الكامل لـ NFRCS Cm وCh وCp وCg (ن = 3)؛ أظهرت عينات Ct قيمة BAR أعلى نظرًا لكفاءة امتصاص مسحة القطن العالية؛ ب) الدم بعد امتصاص الدم. رسم توضيحي للعينة المُمتصة. تمثيل بياني لـ BCT لعينة الاختبار C (كان لدى Cp NFRCS أفضل BCT (15 ثانية، ن = 3)). تم عرض البيانات في C وD وE وG على أنها متوسط ​​± انحراف معياري، وتمثل أشرطة الخطأ الانحراف المعياري، ***p < 0.0001. تم عرض البيانات في C وD وE وG على أنها متوسط ​​± انحراف معياري، وتمثل أشرطة الخطأ الانحراف المعياري، ***p < 0.0001. يتم تقديم البيانات في C، وD، وE، وG على أنها تباعد قياسي، والألواح المتقدمة تمثل تباعدًا قياسيًا، *** ع <0,0001. يتم تقديم البيانات في C وD وE وG على هيئة متوسط ​​± الانحراف المعياري، وتمثل أشرطة الخطأ الانحراف المعياري، ***p<0.0001. C、D、E وG 中的数据显示为平均值± SD، 误差线代表SD،***p <0.0001. C、D、E وG 中的数据显示为平均值± SD، 误差线代表SD،***p <0.0001. البيانات في C وD وE وG توضح كيف تكون المسافة بين الشبكة والانغلاق القياسي، واللوحات المتقدمة تمثل معيارًا отклонение, ***p <0,0001. تظهر البيانات في C وD وE وG على هيئة متوسط ​​± الانحراف المعياري، وتمثل أشرطة الخطأ الانحراف المعياري، ***p<0.0001.


وقت النشر: ١٣ أغسطس ٢٠٢٢