Nanoporinės ir nanostorės plėvelę formuojančios bioaktyvios kompozicijos biomedicininėms reikmėms

Dėkojame, kad apsilankėte Nature.com. Jūsų naudojama naršyklės versija turi ribotą CSS palaikymą. Kad galėtumėte naudotis visomis įmanomomis funkcijomis, rekomenduojame naudoti atnaujintą naršyklę (arba išjungti suderinamumo režimą „Internet Explorer“). Tuo tarpu, siekdami užtikrinti nuolatinį palaikymą, svetainę pateiksime be stilių ir „JavaScript“.
Nesustabdomas kraujavimas yra viena iš pagrindinių mirties priežasčių. Greita hemostazė užtikrina tiriamojo išgyvenimą kaip pirmoji pagalba kovos, eismo įvykių ir mirčių mažinimo operacijų metu. Nanoporinis pluoštu armuotas kompozicinis karkasas (NFRCS), gautas iš paprastos hemostatinės plėvelę formuojančios kompozicijos (HFFC) kaip ištisinė fazė, gali sukelti ir sustiprinti hemostazę. NFRCS sukūrimas pagrįstas laumžirgio sparno konstrukcija. Laumžirgio sparno struktūrą sudaro skersiniai ir išilginiai sparnai, o sparnų membranos yra sujungtos viena su kita, kad būtų išlaikytas mikrostruktūros vientisumas. HFFC tolygiai padengia pluošto paviršių nanometro storio plėvele ir sujungia atsitiktinai paskirstytą medvilnės storį (Ct) (dispersinę fazę), kad susidarytų nanoporinė struktūra. Ištisinės ir dispersinės fazių derinys sumažina produkto kainą dešimt kartų, palyginti su komerciškai prieinamais produktais. Modifikuoti NFRCS (tamponai arba apyrankės) gali būti naudojami įvairiose biomedicinos srityse. In vivo tyrimai parodė, kad sukurtas Cp NFRCS sukelia ir sustiprina krešėjimo procesą taikymo vietoje. NFRCS gali moduliuoti mikroaplinką ir veikti ląstelių lygmeniu dėl savo nanoporinės struktūros, todėl pagerėja žaizdų gijimas ekscizijos žaizdos modelyje.
Nesustabdomas kraujavimas kovos, intraoperacinių ir avarinių situacijų metu gali kelti rimtą grėsmę sužeistųjų gyvybei1. Šios būklės dar labiau padidina bendrą periferinių kraujagyslių pasipriešinimą, dėl kurio atsiranda hemoraginis šokas. Tinkamos kraujavimo kontrolės priemonės operacijos metu ir po jos laikomos potencialiai pavojingomis gyvybei2,3. Didelių kraujagyslių pažeidimas sukelia didžiulį kraujo netekimą, todėl mirtingumas kovos metu siekia ≤ 50%, o operacijos metu – 31%1. Dėl didelio kraujo netekimo sumažėja kūno tūris, o tai sumažina širdies išstumiamąjį kraujo tūrį. Padidėjęs bendras periferinių kraujagyslių pasipriešinimas ir progresuojantis mikrocirkuliacijos sutrikimas sukelia hipoksiją gyvybę palaikančiuose organuose. Jei būklė tęsiasi be veiksmingos intervencijos, gali ištikti hemoraginis šokas1,4,5. Kitos komplikacijos yra hipotermijos ir metabolinės acidozės progresavimas, taip pat krešėjimo sutrikimas, kuris trukdo krešėjimo procesui. Sunkus hemoraginis šokas yra susijęs su didesne mirties rizika6,7,8. Esant III laipsnio (progresuojančiam) šokui, kraujo perpylimas yra būtinas paciento išgyvenimui intraoperacinio ir pooperacinio sergamumo bei mirtingumo metu. Siekdami įveikti visas aukščiau išvardytas gyvybei pavojingas situacijas, sukūrėme nanoporinį pluoštu armuotą kompozicinį karkasą (NFRCS), kuriame naudojama minimali polimero koncentracija (0,5 %), naudojant vandenyje tirpių hemostatinių polimerų derinį.
Naudojant pluošto armatūrą, galima sukurti ekonomiškai efektyvius gaminius. Atsitiktinai išdėstyti pluoštai primena laumžirgio sparno struktūrą, kurią subalansuoja horizontalios ir vertikalios juostos ant sparnų. Skersinės ir išilginės sparno gyslos jungiasi su sparno membrana (1 pav.). NFRCS sudaro armuotas Ct kaip karkaso sistema, pasižyminti geresniu fiziniu ir mechaniniu stiprumu (1 pav.). Dėl prieinamos kainos ir meistriškumo chirurgai operacijų ir tvarsčių metu renkasi naudoti medvilninius siūlus (Ct). Todėl, atsižvelgiant į daugybę privalumų, įskaitant > 90 % kristalinės celiuliozės (kuri padeda sustiprinti hemostatinį aktyvumą), Ct buvo naudojamas kaip NFRCS9,10 skeleto sistema. Todėl, atsižvelgiant į daugybę privalumų, įskaitant > 90 % kristalinės celiuliozės (kuri padeda sustiprinti hemostatinį aktyvumą), Ct buvo naudojamas kaip NFRCS9,10 skeleto sistema. Следовательно, учитывая его многочисленные преимущества, в том числе > 90 proc. гемостатической активности), Ct использовали в качестве скелетной системы NFRCS9,10. Todėl, atsižvelgiant į daugybę privalumų, įskaitant >90 % kristalinės celiuliozės (kuri prisideda prie padidėjusio hemostazės aktyvumo), Ct buvo naudojamas kaip NFRCS skeleto sistemos analizė9,10.因此,考虑到它的多重益处,包括> 90 % 的结晶纤维素(有助于增强止衧＀被用作NFRCS9,10 的骨架系统.因此,考虑到它的多重益处,包括> 90 proc.Todėl, atsižvelgiant į daugybę privalumų, įskaitant daugiau nei 90 % kristalinės celiuliozės (padeda sustiprinti hemostatinį aktyvumą), Ct buvo naudojamas kaip NFRCS9,10 pagrindas.Ct buvo padengtas paviršiumi (buvo pastebėtas nanostorio plėvelės susidarymas) ir sujungtas hemostatine plėvelę formuojančia kompozicija (HFFC). HFFC veikia kaip matrigelis, laikantis atsitiktinai išdėstytą Ct kartu. Sukurtas dizainas perduoda įtempį dispersinėje fazėje (armatūriniai pluoštai). Naudojant minimalią polimerų koncentraciją, sunku gauti nanoporingas struktūras, pasižyminčias geru mechaniniu stiprumu. Be to, nėra lengva pritaikyti skirtingas formas skirtingoms biomedicinos reikmėms.
Paveikslėlyje parodyta NFRCS konstrukcijos schema, pagrįsta laumžirgio sparno struktūra (A). Šiame paveikslėlyje parodyta laumžirgio sparno struktūros lyginamoji analogija (sparno susikertanti ir išilginė gyslos yra tarpusavyje susijusios) ir Cp NFRCS skerspjūvio mikrofotografija (B). NFRCS schema.
NFRC buvo sukurti naudojant HFFC kaip ištisinę fazę, siekiant išspręsti minėtus apribojimus. HFFC sudaro įvairūs plėvelę formuojantys hemostatiniai polimerai, įskaitant chitozaną (kaip pagrindinį hemostatinį polimerą) su metilceliulioze (MC), hidroksipropilmetilceliulioze (HPMC 50 cp) ir polivinilo alkoholiu (PVA) (125 kDa) kaip pagalbiniu polimeru, kuris skatina trombų susidarymą. Pridėjus polivinilpirolidino K30 (PVP K30), pagerėjo NFRCS drėgmės sugerties pajėgumas. Polietilenglikolis 400 (PEG 400) buvo pridėtas siekiant pagerinti polimerų skersinį sujungimą sujungtuose polimerų mišiniuose. Ct buvo pritaikytos trys skirtingos HFFC hemostatinės kompozicijos (Cm HFFC, Ch HFFC ir Cp HFFC), būtent chitozanas su MC (Cm), chitozanas su HPMC (Ch) ir chitozanas su PVA (Cp). Įvairūs in vitro ir in vivo charakterizavimo tyrimai patvirtino NFRCS hemostatinį ir žaizdų gijimo aktyvumą. NFRCS siūlomos kompozicinės medžiagos gali būti naudojamos įvairių formų pastolių pritaikymui pagal konkrečius poreikius.
Be to, NFRCS galima modifikuoti kaip tvarstis arba ritinėlis, dengiantis visą apatinių galūnių ir kitų kūno dalių pažeidimo plotą. Specialiai kovos metu patirtoms galūnių traumoms sukurtą NFRCS dizainą galima pakeisti į pusės rankos arba visos kojos dengimą (papildomas S11 paveikslas). NFRCS su audinių klijais gali būti pagamintas į riešą, kuris gali būti naudojamas kraujavimui nuo sunkių savižudiškų riešo traumų sustabdyti. Mūsų pagrindinis tikslas – sukurti NFRCS su kuo mažesniu polimero kiekiu, kurį būtų galima pristatyti didelei populiacijai (žemiau skurdo ribos) ir kurį būtų galima įdėti į pirmosios pagalbos vaistinėlę. Paprasto, efektyvaus ir ekonomiško dizaino NFRCS naudingas vietos bendruomenėms ir gali turėti pasaulinį poveikį.
Chitozanas (molekulinė masė 80 kDa) ir amarantas buvo įsigyti iš „Merck“, Indija. Hidroksipropilmetilceliuliozė 50 Cp, polietilenglikolis 400 ir metilceliuliozė buvo įsigyta iš „Loba Chemie Pvt. LLC“, Mumbajus. Polivinilo alkoholis (molekulinė masė 125 kDa) (87–90 % hidrolizuotas) buvo įsigytas iš „National Chemicals“, Gudžaratas. Polivinilpirolidinas K30 buvo įsigytas iš „Molychem“, Mumbajus, sterilūs tamponai buvo įsigyti iš „Ramaraju Surgery Cotton Mills Ltd.“, Tamil Nadu, naudojant „Milli Q“ vandenį („Direct-Q3“ vandens valymo sistema, „Merck“, Indija) kaip nešiklius.
NFRCS buvo sukurtas naudojant liofilizacijos metodą11,12. Visos HFFC kompozicijos (1 lentelė) buvo paruoštos naudojant mechaninį maišytuvą. Paruoškite 0,5 % chitozano tirpalą, naudodami 1 % acto rūgštį vandenyje, nuolat maišydami mechaniniu maišytuvu 800 aps./min. greičiu. Į chitozano tirpalą buvo įpilta tiksli 1 lentelėje nurodyta įkrauto polimero masė ir maišoma, kol gautas skaidrus polimero tirpalas. Į gautą mišinį buvo įpilta PVP K30 ir PEG 400 1 lentelėje nurodytais kiekiais ir maišoma toliau, kol gautas skaidrus klampus polimero tirpalas. Gauta polimero tirpalo vonia buvo sonikuojama 60 minučių, kad iš polimero mišinio būtų pašalinti įstrigę oro burbuliukai. Kaip parodyta papildomame S1(b) paveiksle, Ct buvo tolygiai paskirstytas kiekviename 6 šulinėlių plokštelės (formos) šulinėlyje, į kurį buvo įpilta 5 ml HFFC.
Šešių šulinėlių plokštelė buvo sonikuojama 60 min., kad HFFC būtų tolygiai sudrėkinti ir pasiskirstytų Ct tinkle. Tada šešių šulinėlių plokštelė buvo užšaldoma -20 °C temperatūroje 8–12 valandų. Užšaldymo plokštelės buvo liofilizuotos 48 valandas, siekiant gauti įvairias NFRCS formules. Ta pati procedūra naudojama gaminant skirtingų formų ir struktūrų gaminius, tokius kaip tamponai arba cilindriniai tamponai, arba bet kokią kitą formą, skirtą skirtingoms reikmėms.
Tiksliai pasvertas chitozanas (80 kDa) (3 %) ištirpinamas 1 % acto rūgštyje, naudojant magnetinę maišyklę. Į gautą chitozano tirpalą įpilama 1 % PEG 400 ir maišoma 30 minučių. Gautas tirpalas supilamas į kvadratinį arba stačiakampį indą ir užšaldomas -80 °C temperatūroje 12 valandų. Užšaldyti mėginiai buvo liofilizuoti 48 valandas, siekiant gauti porėtą Cs13.
Sukurtas NFRCS buvo eksperimentuojamas naudojant Furjė transformacijos infraraudonųjų spindulių spektroskopiją (FTIR) („Shimadzu 8400 s FTIR“, Tokijas, Japonija), siekiant patvirtinti chitozano cheminį suderinamumą su kitais polimerais14,15. Visų tirtų mėginių FTIR spektrai (spektro diapazono plotis nuo 400 iki 4000 cm-1) buvo gauti atliekant 32 skenavimus.
Visų formuluočių kraujo absorbcijos greitis (BAR) buvo įvertintas naudojant Chen ir kt. aprašytą metodą16 su nedideliais pakeitimais. Visų sudėčių sukurti NFRK buvo džiovinami vakuuminėje krosnyje 105 °C temperatūroje per naktį, kad būtų pašalintas tirpiklio likutis. 30 mg NFRCS (pradinis mėginio svoris – W0) ir 30 mg Ct (teigiama kontrolė) buvo dedami į atskirus indus, kuriuose buvo 3,8 % natrio citrato premiksas. Iš anksto nustatytais laiko intervalais, t. y. 5, 10, 20, 30, 40 ir 60 sekundžių, NFRCS buvo išimti, o jų paviršiai nuvalyti nuo neabsorbuoto kraujo, uždedant mėginius ant Ct 30 sekundžių. Kiekvienu laiko momentu buvo atsižvelgiama į galutinį NFRCS16 absorbuoto kraujo svorį (W1). BAR procentą apskaičiuokite pagal šią formulę:
Kraujo krešėjimo laikas (KLT) buvo nustatytas, kaip pranešė Wang ir kt. 17. Laikas, reikalingas viso kraujo (žiurkės kraujo, sumaišyto su 3,8 % natrio citratu) krešėjimui esant NFRCS, buvo apskaičiuotas kaip tiriamojo mėginio KLT. Įvairūs NFRCS komponentai (30 mg) buvo supilti į 10 ml buteliukus su užsukamais dangteliais ir inkubuoti 37 °C temperatūroje. Į buteliuką buvo įpilta kraujo (0,5 ml) ir 0,3 ml 0,2 M CaCl2, kad suaktyvėtų kraujo krešėjimas. Galiausiai buteliukas buvo apverčiamas kas 15 sekundžių (iki 180°), kol susidarys tvirtas krešulys. Mėginio KLT apskaičiuojamas pagal apvertimų skaičių 17,18. Remiantis KLT, tolesniems apibūdinimo tyrimams buvo pasirinktos dvi optimalios NFRCS Cm, Ch ir Cp sudėtys.
Ch NFRCS ir Cp NFRCS sudėčių BCT buvo nustatytas taikant Li ir kt. aprašytą metodą. Į atskiras Petri lėkšteles (37 °C) įdėkite 15 x 15 mm2 Ch NFRCS, Cp NFRCS ir Cs (teigiama kontrolė) mėginius. Kraujas, kuriame yra 3,8 % natrio citrato, buvo sumaišytas su 0,2 M CaCl2 santykiu 10:1, kad prasidėtų kraujo krešėjimo procesas. 20 µl 0,2 M CaCl2 žiurkės kraujo mišinio buvo užtepta ant mėginio paviršiaus ir įdėta į tuščią Petri lėkštelę. Kontrolinis mėginys buvo kraujas, supiltas į tuščias Petri lėkšteles be Ct. Fiksuotais 0, 3 ir 5 minučių intervalais krešėjimas sustabdytas įpilant 10 ml dejonizuoto (DI) vandens į lėkštelę su mėginiu, nepažeidžiant krešulio. Nekrešėję eritrocitai (eritrocitai) hemolizuojami dejonizuoto vandens akivaizdoje ir išskiria hemoglobiną. Hemoglobino kiekis skirtingais laiko momentais (HA(t)) buvo matuojamas UV-Vis spektrofotometru, esant 540 nm bangos ilgiui (λmax hemoglobin). Absoliuti hemoglobino absorbcija (AH(0)) per 0 min. 20 µl kraujo 10 ml dejonizuoto vandens buvo laikoma etaloniniu standartu. Santykinė hemoglobino absorbcija (RHA) krešėjusiame kraujyje buvo apskaičiuota pagal HA(t)/HA(0) santykį, naudojant tą pačią kraujo partiją.
Naudojant tekstūros analizatorių („Texture Pro CT V1.3 Build 15“, Brukfildas, JAV), buvo nustatytos NFRK sukibimo savybės su pažeistu audiniu. Prispauskite atvirą cilindrinę lėkštę prie kiaulės odos vidaus (be riebalų sluoksnio). Mėginiai (Ch NFRCS ir Cp NFRCS) buvo įdedami per kaniulę į cilindrines formas, kad būtų sukurtas sukibimas su kiaulės oda. Po 3 minučių inkubacijos kambario temperatūroje (RT) (25 °C), NFRCS sukibimo stiprumas buvo registruojamas pastoviu 0,5 mm/s greičiu.
Pagrindinė chirurginių silantų savybė – padidinti kraujo krešėjimą ir kartu sumažinti kraujo netekimą. Krešėjimas be nuostolių NFRCS buvo įvertintas naudojant anksčiau paskelbtą metodą su nedideliais pakeitimais19. Pagaminkite mikrocentrifugos mėgintuvėlį (2 ml) (vidinis skersmuo 10 mm) su 8 × 5 mm2 skylute vienoje centrifugos mėgintuvėlio pusėje (atspindinčią atvirą žaizdą). NFRCS naudojamas angai uždaryti, o lipnia juosta užsandarinti išorinius kraštus. Į mikrocentrifugos mėgintuvėlį, kuriame yra 3,8 % natrio citrato premiksas, įpilkite 20 µl 0,2 M CaCl2. Po 10 minučių mikrocentrifugos mėgintuvėliai buvo išimti iš lėkštelių ir nustatytas lėkštelių masės padidėjimas dėl kraujo nutekėjimo iš NFRK (n = 3). Kraujo netekimas Ch NFRCS ir Cp NFRCS buvo palyginti su Cs.
NFRCS drėgnasis vientisumas buvo nustatytas remiantis Mishra ir Chaudhary21 aprašytu metodu su nedideliais pakeitimais. NFRCS supilkite į 100 ml Erlenmejerio kolbą su 50 ml vandens ir 60 sekundžių sukiokite nesudarant viršaus. Mėginių vizualinė apžiūra ir prioritetų nustatymas pagal fizinį vientisumą remiantis surinkimu.
HFFC jungimosi prie Ct stiprumas buvo tirtas naudojant anksčiau paskelbtus metodus su nedideliais pakeitimais. Paviršiaus dangos vientisumas buvo įvertintas NFRK veikiant akustinėmis bangomis (išoriniu dirgikliu), esant miliQ vandeniui (Ct). Sukurtas NFRCS Ch NFRCS ir Cp NFRCS buvo dedamas į stiklinę, pripildytą vandens, ir sonikuojamas atitinkamai 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10 ir 30 min. Po džiovinimo procentinis skirtumas tarp pradinio ir galutinio NFRCS svorio buvo naudojamas medžiagos nuostolių procentinei daliai (HFFC) apskaičiuoti. In vitro BCT papildomai patvirtino paviršiaus medžiagų jungimosi stiprumą arba netekimą. HFFC jungimosi prie Ct efektyvumas užtikrina kraujo krešėjimą ir elastingą dangą ant Ct22 paviršiaus.
Sukurto NFRCS homogeniškumas buvo nustatytas atliekant BCT, paimto iš atsitiktinai parinktų NFRCS vietų (30 mg). Norint nustatyti NFRCS atitiktį, vadovaukitės anksčiau minėta BCT procedūra. Artumas tarp visų penkių mėginių užtikrina vienodą paviršiaus padengimą ir HFFC nusėdimą Ct tinkle.
Nominalus kraujo sąlyčio plotas (NBCA) buvo nustatytas, kaip aprašyta anksčiau, su tam tikrais pakeitimais. Kraujas krešėjamas įspaudžiant 20 µl kraujo tarp dviejų Ct, Ch NFRCS, Cp NFRCS ir Cs paviršių. Po 1 valandos abi stento dalys buvo atskirtos ir rankiniu būdu išmatuotas krešulio plotas. Vidutinė trijų pakartojimų vertė buvo laikoma NBCA NFRCS19.
Dinaminės garų sorbcijos (DVS) analizė buvo naudojama siekiant įvertinti NFRCS efektyvumą sugeriant vandenį iš išorinės aplinkos arba iš pažeidimo vietos, atsakingos už koaguliacijos inicijavimą. DVS gravimetriškai įvertina arba registruoja garų sugertį ir nuostolius mėginyje, naudodama itin jautrias svarstykles, kurių masės skiriamoji geba yra ±0,1 µg. Dalinis garų slėgis (santykinė drėgmė) generuojamas elektroniniu masės srauto reguliatoriumi aplink mėginį, sumaišant sočiąsias ir sausas nešiklio dujas. Remiantis Europos farmakopėjos gairėmis, remiantis mėginių drėgmės sugėrimo procentine dalimi, mėginiai buvo suskirstyti į 4 kategorijas (0–0,012 % m/m – nehigroskopiniai, 0,2–2 % m/m – šiek tiek higroskopiniai, 2–15 % – vidutiniškai higroskopiniai ir > 15 % – labai higroskopiniai)23. Remiantis Europos farmakopėjos gairėmis, remiantis mėginių drėgmės sugėrimo procentine dalimi, mėginiai buvo suskirstyti į 4 kategorijas (0–0,012 % m/m – nehigroskopiniai, 0,2–2 % m/m – šiek tiek higroskopiniai, 2–15 % – vidutiniškai higroskopiniai ir > 15 % – labai higroskopiniai)23.Vadovaujantis Europos farmakopėjos rekomendacijomis, atsižvelgiant į mėginių drėgmės absorbcijos procentą, mėginiai buvo suskirstyti į 4 kategorijas (0–0,012 % m/m – nehigroskopiniai, 0,2–2 % m/m – šiek tiek higroskopiniai, 2–15 %).% умеренно гигроскопичен и > 15 % очень гигроскопичен)23. % vidutiniškai higroskopiški ir > 15 % labai higroskopiški)23.根据欧洲药典指南,根据样品吸收水分的百分比,样品分为4 类(0-0,012 % w/w-0,012 %非吸湿性、0,2-2 % w/w 轻微吸湿性、2-15 % 适度吸湿,> 15 % 非常吸湿)23.根据 欧洲 药典 指南 , 根据 吸收 水分 的 百分比 样品 分为 分为 分为 分为 分为-0% .为 分为W/w- 吸湿 性 、 、 、 、 0,2-2 % W/w 轻微 、 2-15 % 适度 吸湿 ,> 15 %非常吸湿)Vadovaujantis Europos farmakopėjos rekomendacijomis, mėginiai skirstomi į 4 klases, priklausomai nuo mėginio sugertos drėgmės procento (0–0,012 % masės – nehigroskopiniai, 0,2–2 % masės – šiek tiek higroskopiniai, 2–15 % masės).% умеренно гигроскопичен, > 15 % очень гигроскопичен) 23. % vidutiniškai higroskopiškas, > 15 % labai higroskopiškas) 23.NFCS X NFCS ir TsN NFCS higroskopinis efektyvumas buvo nustatytas analizatoriumi DVS TA TGA Q5000 SA. Šio proceso metu buvo nustatytas veikimo laikas, santykinė drėgmė (RH) ir realaus laiko mėginio svoris esant 25 °C24 temperatūrai. Drėgmės kiekis apskaičiuojamas tikslia NFRCS masės analize, naudojant šią lygtį:
MC yra NFRCS drėgmė. m1 – sausosios NVNU masė. m2 yra NFRCS masė realiuoju laiku esant tam tikrai santykinei oro drėgmei.
Bendras paviršiaus plotas buvo įvertintas naudojant azoto adsorbcijos eksperimentą su skystu azotu, ištuštinus mėginius 25 °C temperatūroje 10 val. (< 7 × 10–3 Torr). Bendras paviršiaus plotas buvo įvertintas naudojant azoto adsorbcijos eksperimentą su skystu azotu, ištuštinus mėginius 25 °C temperatūroje 10 val. (< 7 × 10–3 Torr). Общая площадь поверхности оценивалась с помощью эксперимента по адсорбции азорота жидким азополтом образцов при 25 °С в течение 10 ч (< 7 × 10–3 Торр). Bendras paviršiaus plotas buvo įvertintas naudojant azoto adsorbcijos eksperimentą su skystu azotu, po to, kai mėginiai buvo ištuštinti 25 °C temperatūroje 10 val. (< 7 × 10–3 Torr).在25°C 清空样品10 小时(< 7 × 10-3 Torr)后,使用液氮的氮吸附实验估计总表验估计总表在 25°C Общая площадь поверхности оценивалась с использованием экспериментов по адсорбции азота жидкиним постомомя образцов в течение 10 часов при 25°C (< 7 × 10-3 торр). Bendras paviršiaus plotas buvo įvertintas naudojant azoto adsorbcijos eksperimentus su skystu azotu, po to, kai mėginiai buvo ištuštinti 10 valandų 25 °C temperatūroje (< 7 x 10-3 torr).Bendras paviršiaus plotas, porų tūris ir NFRCS porų dydis buvo nustatyti naudojant „Quantachrome“ iš NOVA 1000e (Austrija) naudojant RS 232 programinę įrangą.
Paruoškite 5 % eritrocitų (fiziologinis tirpalas kaip skiediklis) iš viso kraujo. Tada perkelkite HFFC alikvotinę dalį (0,25 ml) į 96 šulinėlių plokštelę ir įpilkite 5 % eritrocitų masės (0,1 ml). Mišinį inkubuokite 37 °C temperatūroje 40 minučių. Eritrocitų ir serumo mišinys buvo laikomas teigiama kontrole, o fiziologinio tirpalo ir eritrocitų mišinys – neigiama kontrole. Hemagliutinacija buvo nustatyta pagal Stajitzky skalę. Siūlomos skalės yra tokios: + + + + tankūs granuliuoti agregatai; + + + lygaus dugno pagalvėlės su išlenktais kraštais; + + lygaus dugno pagalvėlės su nuplėšytais kraštais; + siauri raudoni žiedai aplink lygių pagalvėlių kraštus; – (neigiamas) atskiras raudonas mygtukas 12 apatinio šulinėlio centre.
NFRCS hemosuderinamumas buvo tirtas pagal Tarptautinės standartizacijos organizacijos (ISO) metodą (ISO10993-4, 1999)26,27. Gravimetrinis metodas, aprašytas Singh ir kt. Buvo atlikti nedideli pakeitimai, siekiant įvertinti trombų susidarymą esant NFRCS arba ant jo paviršiaus. 500 mg Cs, Ch NFRCS ir Cp NFRCS buvo inkubuojami fosfatiniu buferiniu tirpalu (PBS) 24 valandas 37 °C temperatūroje. Po 24 valandų PBS buvo pašalintas, o NFRCS apdorotas 2 ml kraujo, kuriame yra 3,8 % natrio citrato. Ant NFRCS paviršiaus į inkubuotus mėginius įpilkite 0,04 ml 0,1 M CaCl2. Po 45 minučių įpilta 5 ml distiliuoto vandens krešėjimui sustabdyti. Krešėjęs kraujas ant NFRK paviršiaus buvo apdorotas 36–38 % formaldehido tirpalu. Formaldehidu fiksuoti krešuliai buvo išdžiovinti ir pasverti. Trombozės procentas buvo įvertintas apskaičiuojant stiklinės be kraujo ir mėginio (neigiama kontrolė) bei stiklinės su krauju (teigiama kontrolė) svorį.
Pradiniam patvirtinimui mėginiai buvo vizualizuoti optiniu mikroskopu, siekiant suprasti HFFC paviršiaus dangos, tarpusavyje sujungto Ct ir Ct tinklo gebėjimą sudaryti poras. Ploni Ch ir Cp pjūviai iš NFRCS buvo apipjaustyti skalpelio ašmenimis. Gautas pjūvis buvo uždėtas ant stiklinio preparato, uždengtas dengiamuoju stikleliu, o kraštai pritvirtinti klijais. Paruošti preparatai buvo apžiūrėti optiniu mikroskopu ir nufotografuoti skirtingais didinimo lygiais.
Polimerų nusodinimas Ct tinkluose buvo vizualizuotas fluorescencine mikroskopija, remiantis Rice ir kt. aprašytu metodu.29. Formulavimui naudota HFFC kompozicija buvo sumaišyta su fluorescenciniais dažais (amarantu), o NFRCS (Ch ir Cp) buvo paruošti pagal anksčiau minėtą metodą. Formulavimui naudota HFFC kompozicija buvo sumaišyta su fluorescenciniais dažais (amarantu), o NFRCS (Ch ir Cp) buvo paruošti pagal anksčiau minėtą metodą.Formulavimui naudota HFFC kompozicija buvo sumaišyta su fluorescenciniu dažikliu (amarantu), o NFRCS (Ch ir Cp) gauti pagal anksčiau minėtą metodą.将用于配方的HFFC 组合物与荧光染料(苋菜)混合,并按照前面提到的FR斤懈h刈到的FR斤Cp).将用于配方的HFFC 组合物与荧光染料(苋菜)混合,并按照前面提到的FR斤懈h刈到的FR斤Cp).Formulėje naudojama HFFC kompozicija buvo sumaišyta su fluorescenciniais dažais (amarantu) ir, kaip minėta anksčiau, gauta NFRCS (Ch ir Cp).Iš gautų mėginių buvo išpjauti ploni NFRK pjūviai, uždėti ant stiklinių plokštelių ir uždengti dengiamaisiais stikleliais. Paruoštas plokšteles stebėkite fluorescenciniu mikroskopu, naudodami žalią filtrą (310–380 nm). Vaizdai buvo fotografuojami 4 kartus padidinus, siekiant suprasti Ct ryšius ir perteklinį polimero nusėdimą Ct tinkle.
NFRCS Ch ir Cp paviršiaus topografija buvo nustatyta naudojant atominės jėgos mikroskopą (AFM) su itin aštriu TESP konsoliniu sriegikliu: 42 N/m, 320 kHz, ROC 2-5 nm, „Bruker“, Taivanas. Paviršiaus šiurkštumas buvo nustatytas pagal vidutinę kvadratinę šaknį (RMS) naudojant programinę įrangą („Scanning Probe Image Processor“). Įvairios NFRCS vietos buvo perteiktos 3D vaizduose, siekiant patikrinti paviršiaus vienodumą. Standartinis duotos srities balo nuokrypis apibrėžiamas kaip paviršiaus šiurkštumas. NFRCS31 paviršiaus šiurkštumui kiekybiškai įvertinti buvo naudojama RMS lygtis.
FESEM pagrįsti tyrimai buvo atlikti naudojant FESEM, SU8000, HI-0876-0003, Hitachi, Tokijas, siekiant suprasti Ch NFRCS ir Cp NFRCS paviršiaus morfologiją, kuri parodė geresnį BCT nei Cm NFRCS. FESEM tyrimas buvo atliktas pagal Zhao ir kt. aprašytą metodą32 su nedideliais pakeitimais. 20–30 mg Ch NFRCS ir Cp NFRCS buvo iš anksto sumaišyti su 20 µl 3,8 % natrio citrato, iš anksto sumaišyto su žiurkės krauju. Į krauju apdorotus mėginius buvo įpilta 20 μl 0,2 M CaCl2 krešėjimui pradėti, ir mėginiai buvo inkubuojami kambario temperatūroje 10 minučių. Be to, eritrocitų perteklius nuo NFRCS paviršiaus buvo pašalintas nuplaunant fiziologiniu tirpalu.
Vėlesni mėginiai buvo apdoroti 0,1 % glutaraldehidu ir džiovinti karšto oro krosnyje 37 °C temperatūroje, kad būtų pašalinta drėgmė. Išdžiovinti mėginiai buvo padengti ir analizuojami32. Kiti analizės metu gauti vaizdai buvo krešulio susidarymas ant atskirų medvilnės pluoštų paviršiaus, polimerų nusėdimas tarp Ct, eritrocitų morfologija (forma), krešulio vientisumas ir eritrocitų morfologija esant NFRCS. Neapdorotos NFRCS sritys ir Ch bei Cp apdorotos NFRCS sritys, inkubuotos su krauju, buvo skenuojamos, siekiant nustatyti elementinius jonus (natrio, kalio, azoto, kalcio, magnio, cinko, vario ir seleno)33. Palyginkite elementinių jonų procentus tarp apdorotų ir neapdorotų mėginių, kad suprastumėte elementinių jonų kaupimąsi krešulio susidarymo metu ir krešulio homogeniškumą.
Cp HFFC paviršiaus dangos storis ant Ct paviršiaus buvo nustatytas naudojant FESEM. Cp NFRCS skerspjūviai buvo išpjauti iš karkaso ir padengti dulkių siurbliu. Gauti dulkių siurblio dangos pavyzdžiai buvo stebimi FESEM ir išmatuotas paviršiaus dangos storis 34, 35, 36.
Rentgeno mikrokompiuterinė tomografija (RKT) suteikia didelės skiriamosios gebos 3D neardomąjį vaizdą ir leidžia tirti NFRK vidinę struktūrinę išsidėstymą. Mikrokompiuterinė tomografija naudoja rentgeno spindulį, einantį per mėginį, kad užfiksuotų vietinį rentgeno spindulių linijinio silpninimo koeficientą mėginyje, o tai padeda gauti morfologinės informacijos. Ct vidinė vieta Cp NFRCS ir krauju apdorotame Cp NFRCS buvo ištirta mikrokompiuterine tomografija, siekiant suprasti absorbcijos efektyvumą ir kraujo krešėjimą esant NFRCS37,38,39. Krauju apdorotų ir neapdorotų Cp NFRCS mėginių 3D struktūros buvo rekonstruotos naudojant mikrokompiuterinę tomografiją (V|tome|x S240, Finiksas, Vokietija). Naudojant VG STUDIO-MAX programinės įrangos 2.2 versiją, iš skirtingų kampų (idealiai 360° aprėpties) buvo paimti keli rentgeno vaizdai, kad būtų sukurti 3D NFRCS vaizdai. Surinkti projekcijos duomenys buvo rekonstruoti į 3D tūrinius vaizdus naudojant atitinkamą paprastą 3D ScanIP Academic programinę įrangą.
Be to, siekiant suprasti krešulio pasiskirstymą, į NFRCS buvo įpilta 20 µl iš anksto sumaišyto citratu apdoroto kraujo ir 20 µl 0,2 M CaCl2, kad prasidėtų kraujo krešėjimas. Paruošti mėginiai paliekami sukietėti. NFRK paviršius buvo apdorotas 0,5 % glutaraldehidu ir džiovinamas karšto oro krosnyje 30–40 °C temperatūroje 30 min. Ant NFRCS susidaręs kraujo krešulys buvo nuskaitytas, rekonstruotas ir vizualizuotas kraujo krešulio 3D vaizdas.
Antibakteriniai tyrimai buvo atlikti su Cp NFRCS (geriausiai palyginama su Ch NFRCS), naudojant anksčiau aprašytą metodą su nedideliais pakeitimais. Cp NFRCS ir Cp HFFC antibakterinis aktyvumas buvo nustatytas naudojant tris skirtingus bandomuosius mikroorganizmus [S.aureus (gramteigiamos bakterijos), E.coli (gramneigiamos bakterijos) ir baltąją Candida (C.albicans)], augančius ant agaro Petri lėkštelėse inkubatoriuje. Ant agaro terpės tolygiai inokuliuokite 50 ml praskiestos bakterijų kultūros suspensijos, kurios koncentracija yra 105–106 CFU ml-1. Supilkite terpę į Petri lėkštelę ir leiskite jai sukietėti. Agaro lėkštelės paviršiuje buvo padarytos duobutės HFFC užpildymui (3 duobutės HFFC ir 1 neigiamai kontrolei). Į 3 duobutes įpilkite po 200 µl HFFC, o į 4-ąją duobutę – 200 µl pH 7,4 PBS. Kitoje Petri lėkštelės pusėje ant sukietėjusio agaro uždėkite 12 mm Cp NFRCS diską ir sudrėkinkite PBS (pH 7,4). Ciprofloksacino, ampicilino ir flukonazolo tabletės laikomos etaloniniais Staphylococcus aureus, Escherichia coli ir Candida albicans standartais. Rankiniu būdu išmatuokite slopinimo zoną ir padarykite skaitmeninį slopinimo zonos vaizdą.
Gavus institucinį etinį patvirtinimą, tyrimas buvo atliktas Kasturbos medicinos koledže, esančiame Manipale, Karnatakoje, pietų Indijoje. In vitro TEG eksperimentinį protokolą peržiūrėjo ir patvirtino Kasturbos medicinos koledžo, esančio Manipale, Karnatakoje, institucinis etikos komitetas (IEC: 674/2020). Tiriamieji buvo atrinkti iš savanorių kraujo donorų (18–55 metų amžiaus) iš ligoninės kraujo banko. Be to, iš savanorių buvo gauta informuoto sutikimo forma kraujo mėginių rinkimui. Natūralus TEG (N-TEG) ​​buvo naudojamas tiriant Cp HFFC formulės poveikį viso kraujo, sumaišyto su natrio citratu, mėginiui. N-TEG yra plačiai pripažintas dėl savo vaidmens gaivinime priežiūros vietoje, o tai kelia problemų gydytojams dėl galimo kliniškai reikšmingo rezultatų vėlavimo (įprastiniai krešėjimo tyrimai). N-TEG analizė buvo atlikta naudojant viso kraujo mėginį. Iš visų dalyvių buvo gautas informuotas sutikimas ir išsami ligos istorija. Tyrime nebuvo įtraukti dalyviai, turintys hemostazės ar trombozės komplikacijų, tokių kaip nėštumas / pogimdyvinis laikotarpis ar kepenų liga. Tiriamieji, vartojantys vaistus, turinčius įtakos krešėjimo kaskadai, taip pat nebuvo įtraukti į tyrimą. Pagrindiniai laboratoriniai tyrimai (hemoglobino, protrombino laiko, aktyvuoto tromboplastino ir trombocitų skaičiaus nustatymas) buvo atlikti visiems dalyviams pagal standartines procedūras. N-TEG nustato kraujo krešulio klampumą, pradinę krešulio struktūrą, dalelių sąveiką, krešulio sustiprėjimą ir krešulio lizę. N-TEG analizė pateikia grafinius ir skaitinius duomenis apie bendrą kelių ląstelinių elementų ir plazmos poveikį. N-TEG analizė buvo atlikta su dviem skirtingais Cp HFFC tūriais (10 µl ir 50 µl). Dėl to į 10 μl Cp HFFC buvo įpilta 1 ml viso kraujo su citrinos rūgštimi. Į 20 µl 0,2 M CaCl2 turinčios TEG lėkštelės įpilkite 1 ml (Cp HFFC + citrato prisotinto kraujo), 340 µl mišraus kraujo. Vėliau TEG lėkštelės buvo įkeltos į TEG® 5000, US, kad būtų galima išmatuoti R, K, alfa kampą, MA, G, CI, TPI, EPL, LY 30 % kraujo mėginių, esant Cp HFFC41.
In vivo tyrimo protokolą peržiūrėjo ir patvirtino Institucinis gyvūnų etikos komitetas (IAEC), Kasturbos medicinos mokykla, Manipalo aukštojo mokslo institutas, Manipalas (IAEC/KMC/69/2020). Visi eksperimentai su gyvūnais buvo atlikti laikantis Gyvūnų eksperimentų kontrolės ir priežiūros komiteto (CPCSEA) rekomendacijų. Visi in vivo NFRCS tyrimai (2 × 2 cm2) buvo atlikti su Wistar žiurkių patelėmis (sveriančiomis nuo 200 iki 250 g). Visi gyvūnai buvo aklimatizuoti 24–26 °C temperatūroje, gyvūnai turėjo laisvą prieigą prie standartinio maisto ir vandens ad libitum. Visi gyvūnai buvo atsitiktinai suskirstyti į skirtingas grupes, kiekvieną grupę sudarė trys gyvūnai. Visi tyrimai buvo atlikti pagal „Gyvūnų tyrimai: in vivo eksperimentų ataskaita“ 43. Prieš tyrimą gyvūnai buvo anestezuoti intraperitoniniu (ip) būdu suleidžiant 20–50 mg ketamino (1 kg kūno svorio) ir 2–10 mg ksilazino (1 kg kūno svorio) mišinį. Po tyrimo kraujavimo tūris buvo apskaičiuotas įvertinant skirtumą tarp pradinio ir galutinio mėginių svorio, o vidutinė vertė, gauta iš trijų bandymų, buvo laikoma mėginio kraujavimo tūriu.
Žiurkės uodegos amputacijos modelis buvo pritaikytas siekiant suprasti NFRCS potencialą moduliuoti kraujavimą traumos, kovos ar eismo įvykio metu (sužalojimų modelis). Skalpeliu nupjaukite 50 % uodegos ir 15 sekundžių palaikykite ore, kad būtų užtikrintas normalus kraujavimas. Be to, tiriamieji mėginiai buvo uždėti ant žiurkės uodegos spaudžiant (Ct, Cs, Ch NFRCS ir Cp NFRCS). Buvo pranešta apie tiriamųjų mėginių kraujavimą ir proksimalinę CT (n = 3)17,45.
NFRCS slėgio kontrolės efektyvumas kovos metu buvo tirtas naudojant paviršinės šlaunikaulio arterijos modelį. Šlaunikaulio arterija atidengiama, praduriama 24G trokaru ir per 15 sekundžių nuleidžiamas kraujas. Pastebėjus nekontroliuojamą kraujavimą, tiriamasis mėginys dedamas į dūrio vietą ir uždedamas spaudimas. Iškart po tiriamojo mėginio užtepimo buvo užregistruotas krešėjimo laikas ir 5 minutes stebimas hemostazės efektyvumas. Ta pati procedūra buvo pakartota su Cs ir Ct46.
Dowling ir kt.47 pasiūlė kepenų pažeidimo modelį, skirtą įvertinti hemostazinių medžiagų hemostatinį potencialą intraoperacinio kraujavimo kontekste. BCT buvo užregistruotas Ct mėginiams (neigiama kontrolė), Cs karkaso mėginiams (teigiama kontrolė), Ch NFRCS mėginiams ir Cp NFRCS mėginiams. Žiurkės suprahepatinė tuščioji vena buvo atidengta atliekant vidurinę laparotomiją. Po to žirklėmis buvo išpjauta distalinė kairiosios skilties dalis. Skalpelio ašmenimis padarykite pjūvį kepenyse ir leiskite joms kraujuoti kelias sekundes. Tiksliai pasverti Ch NFRCS ir Cp NFRCS tiriamieji mėginiai buvo uždėti ant pažeisto paviršiaus be jokio teigiamo spaudimo ir užregistruotas BCT. Kontrolinė grupė (Ct) tada pritaikė spaudimą, o po to Cs 30 s47, nesulaužydama pažeidimo vietos.
In vivo žaizdų gijimo tyrimai buvo atlikti naudojant ekscizinės žaizdos modelį, siekiant įvertinti sukurtų polimerų pagrindu pagamintų NFRCS žaizdų gijimo savybes. Ekscizinių žaizdų modeliai buvo parinkti ir atlikti pagal anksčiau paskelbtus metodus su nedideliais pakeitimais19,32,48. Visiems gyvūnams buvo taikoma anestezija, kaip aprašyta anksčiau. Biopsijos skylamušiu (12 mm) padarykite gilų apskritą pjūvį nugaros odoje. Paruoštos žaizdų vietos buvo perrištos Cs (teigiama kontrolė), Ct (atsižvelgiant į tai, kad vatos diskeliai trukdo gijimui), Ch NFRCS ir Cp NFRCS (eksperimentinė grupė) bei neigiama kontrole be jokio gydymo. Kiekvieną tyrimo dieną visoms žiurkėms buvo matuojamas žaizdos plotas. Skaitmeniniu fotoaparatu nufotografuokite žaizdos plotą ir uždėkite naują tvarstį. Žaizdos užsidarymo procentas buvo matuojamas pagal šią formulę:
Remiantis žaizdų užsidarymo procentu 12-ąją tyrimo dieną, geriausios grupės žiurkės oda buvo iškirpta ((Cp NFRCS) ir kontrolinės grupės) ir tirta H&E dažymu bei Massono trichromo dažymu. Remiantis žaizdų užsidarymo procentu 12-ąją tyrimo dieną, geriausios grupės žiurkės oda buvo iškirpta ((Cp NFRCS) ir kontrolinės grupės) ir tirta H&E dažymu bei Massono trichromo dažymu.Remiantis žaizdų užsidarymo procentu 12-ąją tyrimo dieną, geriausios grupės ((Cp NFRCS) ir kontrolinės grupės) žiurkių oda buvo iškirpta ir ištirta dažant hematoksilino eozinu ir Massono trichromu.根据研究第12天的伤口闭合百分比,切除最佳组((Cp NFRCS)和对照组)的大鼠皮肤,进行H&E染色和Masson三色染色研究.根据研究第12天的伤口闭合百分比,切除最佳组((Cp NFRCS)和对照组)的大鼠皮肤,进行H&E染色和眳组)Geriausios grupės ((Cp NFRCS) ir kontrolinės grupės) žiurkės 12 tyrimo dieną buvo iškirptos hematoksilino-eozino dažymui ir Massono trichromo dažymui, remiantis žaizdų užsidarymo procentu.Įdiegta dažymo procedūra buvo atlikta pagal anksčiau aprašytus metodus49,50. Trumpai tariant, po fiksacijos 10 % formaline, mėginiai buvo dehidratuoti naudojant graduotų alkoholių seriją. Naudojant mikrotomą, gauti ploni (5 µm storio) iškirpto audinio pjūviai. Ploni kontrolinių ir Cp NFRCS serijiniai pjūviai buvo apdoroti hematoksilinu ir eozinu histopatologiniams pokyčiams tirti. Massono trichromo dažymas buvo naudojamas kolageno fibrilų susidarymui nustatyti. Gautus rezultatus aklai tyrė patologai.
Cp NFRCS mėginių stabilumas buvo tirtas kambario temperatūroje (25 °C ± 2 °C / 60 % RH ± 5 %) 12 mėnesių51. Cp NFRCS (paviršiaus spalvos pakitimas ir mikrobų augimas) buvo vizualiai apžiūrėtas ir išbandytas atsparumas dilimui bei lenkimo tėkmės koeficientas (BCT) pagal aukščiau aprašytus metodus, aprašytus skyriuje „Medžiagos ir metodai“.
Cp NFRCS mastelio keitimas ir atkuriamumas buvo ištirti paruošiant 15 × 15 cm2 dydžio Cp NFRCS. Be to, iš įvairių Cp NFRCS frakcijų buvo išpjauta 30 mg mėginių (n = 5), o tirtų mėginių BCT buvo įvertintas, kaip aprašyta anksčiau skyriuje „Metodai“.
Bandėme sukurti įvairias formas ir struktūras, naudodami Cp NFRCS kompozicijas įvairioms biomedicinos reikmėms. Tokios formos ar konfigūracijos apima kūginius tamponus kraujavimui iš nosies, odontologinėms procedūroms ir cilindrinius tamponus kraujavimui iš makšties.
Visi duomenų rinkiniai išreikšti kaip vidurkis ± standartinis nuokrypis ir buvo analizuojami dispersijos metodu, naudojant „Prism 5.03“ („GraphPad“, San Diegas, Kalifornija, JAV), po kurio buvo atliktas Bonferroni daugybinių palyginimų testas (*p<0,05).
Visos žmonių tyrimų procedūros atitiko Instituto ir Nacionalinės tyrimų tarybos standartus, taip pat 1964 m. Helsinkio deklaraciją ir jos vėlesnius pakeitimus arba panašius etikos standartus. Visi dalyviai buvo informuoti apie tyrimo ypatybes ir jo savanorišką pobūdį. Surinkus dalyvių duomenis, jie lieka konfidencialūs. In vitro TEG eksperimentinį protokolą peržiūrėjo ir patvirtino Kasturbos medicinos koledžo, Manipale, Karnatakoje, institucinis etikos komitetas (IEC: 674/2020). Savanoriai pasirašė informuotą sutikimą rinkti kraujo mėginius.
Visos su gyvūnais atliktos procedūros buvo atliktos vadovaujantis Kastuba medicinos fakulteto, Manipal aukštojo mokslo instituto, Manipal (IAEC/KMC/69/2020) rekomendacijomis. Visi su gyvūnais atlikti eksperimentai buvo atlikti laikantis Gyvūnų eksperimentų kontrolės ir priežiūros komiteto (CPCSEA) gairių. Visi autoriai laikosi ARRIVE gairių.
Visų NFRCS FTIR spektrai buvo išanalizuoti ir palyginti su 2A paveiksle parodytu chitozano spektru. Būdingi chitozano spektriniai pikai (užfiksuoti) ties 3437 cm⁻¹ (OH ir NH tempimas, persidengimas), 2945 ir 2897 cm⁻¹ (CH tempimas), 1660 cm⁻¹ (NH2 deformacija), 1589 cm⁻¹ (N–H lenkimas), 1157 cm⁻¹ (tiltelio tempimas O–), 1067 cm⁻¹ (tempimas C–O, antrinis hidroksilas), 993 cm⁻¹ (tempimas CO, Bo-OH) 52,53,54. Papildomoje S1 lentelėje pateiktos FTIR NFRCS absorbcijos spektro vertės chitozanui (reporterinis), grynam chitozanui, Cm, Ch ir Cp. Visų NFRCS (Cm, Ch ir Cp) FTIR spektrai parodė tas pačias būdingas absorbcijos juostas kaip ir grynas chitozanas be jokių reikšmingų pokyčių (2A pav.). FTIR rezultatai patvirtino, kad tarp NFRCS kūrimui naudotų polimerų nėra cheminės ar fizinės sąveikos, o tai rodo, kad naudoti polimerai yra inertiški.
Cm NFRCS, Ch NFRCS, Cp NFRCS ir Cs apibūdinimas in vitro. (A) pateikia chitozano ir Cm NFRCS, Ch NFRCS bei Cp NFRCS sudėties FTIR spektrus suspaudimo metu. (B) a) NFRCS Cm, Ch, Cp ir Cg absorbcijos greitis visame kraujyje (n = 3); Ct mėginiai parodė didesnį BAR, nes vatos tampono absorbcijos efektyvumas yra didesnis; b) Kraujas po kraujo absorbcijos. Absorbuoto mėginio iliustracija. Tiriamojo mėginio C BCT grafinis vaizdas (Cp NFRCS turėjo geriausią BCT (15 s, n = 3)). C, D, E ir G duomenys pateikti kaip vidurkis ± SD, o paklaidų juostos žymi SD, ***p < 0,0001. C, D, E ir G duomenys pateikti kaip vidurkis ± SD, o paklaidų juostos žymi SD, ***p < 0,0001. Данные в C, D, E ir G представлены как среднее ± стандартное отклонение, а планки погрешностей представленениют представлендниют ***p <0,0001. C, D, E ir G duomenys pateikiami kaip vidurkis ± standartinis nuokrypis, o paklaidų juostos žymi standartinį nuokrypį, ***p < 0,0001. C、D、E 和G 中的数据显示为平均值± SD,误差线代表SD,***p < 0,0001. C、D、E 和G 中的数据显示为平均值± SD,误差线代表SD,***p < 0,0001. Данные в C, D, E ir G показаны как среднее значение ± стандартное отклонение, планки погрешностей представляют отклонение, ***p <0,0001. C, D, E ir G duomenys pateikti kaip vidurkis ± standartinis nuokrypis, paklaidų juostos žymi standartinį nuokrypį, ***p < 0,0001.


Įrašo laikas: 2022 m. rugpjūčio 13 d.