Nature.com भ्रमण गर्नुभएकोमा धन्यवाद। तपाईंले प्रयोग गरिरहनुभएको ब्राउजर संस्करणमा सीमित CSS समर्थन छ। उत्तम अनुभवको लागि, हामी तपाईंलाई अद्यावधिक गरिएको ब्राउजर प्रयोग गर्न सिफारिस गर्छौं (वा इन्टरनेट एक्सप्लोररमा अनुकूलता मोड असक्षम पार्नुहोस्)। यसै बीचमा, निरन्तर समर्थन सुनिश्चित गर्न, हामी शैली र जाभास्क्रिप्ट बिना साइट रेन्डर गर्नेछौं।
अनियन्त्रित रक्तस्राव मृत्युको प्रमुख कारणहरू मध्ये एक हो। लडाई, ट्राफिक दुर्घटना र मृत्यु न्यूनीकरण कार्यहरूको समयमा प्राथमिक उपचारको रूपमा द्रुत हेमोस्टेसिस प्राप्त गर्नाले विषयको अस्तित्व सुनिश्चित गर्दछ। निरन्तर चरणको रूपमा साधारण हेमोस्टेटिक फिल्म-फर्मिङ कम्पोजिसन (HFFC) बाट व्युत्पन्न न्यानोपोरस फाइबर-रिइन्फोर्स्ड कम्पोजिट स्क्याफोल्ड (NFRCS) ले हेमोस्टेसिसलाई ट्रिगर र बढाउन सक्छ। NFRCS को विकास ड्र्यागनफ्लाइको पखेटाको डिजाइनमा आधारित छ। ड्र्यागनफ्लाइको पखेटा संरचनामा ट्रान्सभर्स र अनुदैर्ध्य पखेटाहरू हुन्छन्, र पखेटा झिल्लीहरू माइक्रोस्ट्रक्चरको अखण्डता कायम राख्न एकअर्कासँग जोडिएका हुन्छन्। HFFC ले फाइबरको सतहलाई न्यानोमिटर मोटाईको फिल्मले समान रूपमा कोट गर्छ र अनियमित रूपमा वितरित कपास मोटाई (Ct) (छरिएको चरण) लाई न्यानोपोरस संरचना बनाउन जोड्छ। निरन्तर र छरिएको चरणहरूको संयोजनले व्यावसायिक रूपमा उपलब्ध उत्पादनहरूको तुलनामा उत्पादनको लागत दस गुणा घटाउँछ। परिमार्जित NFRCS (ट्याम्पन वा रिस्टब्यान्ड) विभिन्न बायोमेडिकल अनुप्रयोगहरूमा प्रयोग गर्न सकिन्छ। इन भिभो अध्ययनहरूले निष्कर्ष निकालेका छन् कि विकसित Cp NFRCS ले प्रयोगको ठाउँमा कोगुलेसन प्रक्रियालाई ट्रिगर र बढाउँछ। NFRCS ले सूक्ष्म वातावरणलाई परिमार्जन गर्न सक्छ र यसको न्यानोपोरस संरचनाको कारणले गर्दा कोशिका स्तरमा कार्य गर्न सक्छ जसले गर्दा एक्साइजन घाउ मोडेलमा राम्रो घाउ निको हुन्छ।
लडाईं, शल्यक्रिया र आपतकालीन अवस्थामा अनियन्त्रित रक्तस्रावले घाइतेहरूको जीवनलाई गम्भीर खतरा निम्त्याउन सक्छ। यी अवस्थाहरूले परिधीय भास्कुलर प्रतिरोधमा समग्र वृद्धि निम्त्याउँछ, जसले गर्दा रक्तस्राव झट्का निम्त्याउँछ। शल्यक्रियाको समयमा र पछि रक्तस्राव नियन्त्रण गर्न उपयुक्त उपायहरूलाई सम्भावित रूपमा जीवन-धम्कीपूर्ण मानिन्छ2,3। ठूला नलीहरूमा क्षतिले ठूलो मात्रामा रगतको क्षति निम्त्याउँछ, जसको परिणामस्वरूप लडाईंमा मृत्युदर ≤ 50% र शल्यक्रियाको समयमा 31% हुन्छ1। ठूलो मात्रामा रगतको क्षतिले शरीरको मात्रामा कमी ल्याउँछ, जसले हृदयको उत्पादन घटाउँछ। कुल परिधीय भास्कुलर प्रतिरोधमा वृद्धि र माइक्रोसर्क्युलेसनको प्रगतिशील हानिले जीवन-समर्थन अंगहरूमा हाइपोक्सिया निम्त्याउँछ। प्रभावकारी हस्तक्षेप बिना अवस्था जारी रह्यो भने रक्तस्राव झट्का हुन सक्छ1,4,5। अन्य जटिलताहरूमा हाइपोथर्मिया र मेटाबोलिक एसिडोसिसको प्रगति, साथै कोगुलेसन प्रक्रियामा बाधा पुर्‍याउने कोगुलेसन विकार समावेश छ। गम्भीर हेमोरेजिक झट्का मृत्युको उच्च जोखिमसँग सम्बन्धित छ6,7,8। ग्रेड III (प्रगतिशील) झटकामा, शल्यक्रिया भित्र र शल्यक्रिया पछिको बिरामीपन र मृत्युदरको समयमा बिरामीको बाँच्नको लागि रक्तक्षेपण आवश्यक छ। माथिका सबै जीवन-धम्कीपूर्ण परिस्थितिहरूलाई पार गर्न, हामीले पानीमा घुलनशील हेमोस्टेटिक पोलिमरहरूको संयोजन प्रयोग गरेर न्यूनतम पोलिमर सांद्रता (०.५%) प्रयोग गर्ने न्यानोपोरस फाइबर-प्रबलित कम्पोजिट स्क्याफोल्ड (NFRCS) विकास गरेका छौं।
फाइबर सुदृढीकरणको प्रयोगले, लागत-प्रभावी उत्पादनहरू विकास गर्न सकिन्छ। अनियमित रूपमा व्यवस्थित फाइबरहरू ड्र्यागनफ्लाइको पखेटाको संरचना जस्तै हुन्छन्, पखेटामा तेर्सो र ठाडो धर्काहरू द्वारा सन्तुलित। पखेटाको अनुप्रस्थ र अनुदैर्ध्य नसहरूले पखेटाको झिल्लीसँग कुराकानी गर्छन् (चित्र १)। NFRCS मा राम्रो भौतिक र यान्त्रिक शक्ति भएको स्क्याफोल्ड प्रणालीको रूपमा प्रबलित Ct समावेश हुन्छ (चित्र १)। किफायती र शिल्प कौशलको कारण, सर्जनहरूले अपरेशन र ड्रेसिङको समयमा कपासको धागो गेज (Ct) प्रयोग गर्न रुचाउँछन्। तसर्थ, ९०% भन्दा बढी क्रिस्टलीय सेल्युलोज (हेमोस्टेटिक गतिविधि बढाउनमा योगदान पुर्‍याउने) सहित यसको बहु-फाइदाहरूलाई विचार गर्दै, Ct लाई NFRCS9,10 को कंकाल प्रणालीको रूपमा प्रयोग गरिएको थियो। तसर्थ, ९०% भन्दा बढी क्रिस्टलीय सेल्युलोज (हेमोस्टेटिक गतिविधि बढाउनमा योगदान पुर्‍याउने) सहित यसको बहु-फाइदाहरूलाई विचार गर्दै, Ct लाई NFRCS9,10 को कंकाल प्रणालीको रूपमा प्रयोग गरिएको थियो। Следовательно, учитывая его многочисленные преимущества, в том числе > ९०% кристаллической целюлозы (участвует в гемостатической активности), Ct использовали в качестве скелетной системы NFRCS9,10। त्यसकारण, ९०% भन्दा बढी क्रिस्टलीय सेल्युलोज (बढ्दो हेमोस्टेटिक गतिविधिमा संलग्न) सहित यसको धेरै फाइदाहरूलाई ध्यानमा राख्दै, Ct लाई NFRCS कंकाल प्रणालीको रूपमा प्रयोग गरिएको थियो ९,१०।因此,考虑到它的多重益处，包括> 90% 的结晶纤维素（有助于增强止血活性）,Ct用蔢血活性）,Ct用蔢的骨架系统।因此,考虑到它的多重益处，包括> ९०%त्यसकारण, ९०% भन्दा बढी क्रिस्टलीय सेल्युलोज (हेमोस्टेटिक गतिविधि बढाउन मद्दत गर्दछ) सहित यसको धेरै फाइदाहरूलाई ध्यानमा राख्दै, Ct लाई NFRCS9,10 को लागि स्क्याफोल्डको रूपमा प्रयोग गरिएको थियो।Ct लाई सतही रूपमा लेपित गरिएको थियो (न्यानो-बाक्लो फिल्म गठन अवलोकन गरिएको थियो) र हेमोस्टेटिक फिल्म-फर्मिङ कम्पोजिसन (HFFC) सँग अन्तरसम्बन्धित गरिएको थियो। HFFC ले म्याट्रिजेल जस्तै काम गर्दछ, अनियमित रूपमा राखिएको Ct लाई एकसाथ समातेर राख्छ। विकसित डिजाइनले फैलिएको चरण भित्र तनाव प्रसारण गर्दछ (फाइबरहरूलाई सुदृढ पार्दै)। न्यूनतम पोलिमर सांद्रता प्रयोग गरेर राम्रो मेकानिकल शक्तिको साथ न्यानोपोरस संरचनाहरू प्राप्त गर्न गाह्रो छ। थप रूपमा, विभिन्न बायोमेडिकल अनुप्रयोगहरूको लागि फरक मोल्डहरू अनुकूलित गर्न सजिलो छैन।
चित्रले ड्र्यागनफ्लाइको पखेटा संरचना (A) मा आधारित NFRCS डिजाइनको रेखाचित्र देखाउँछ। यो चित्रले ड्र्यागनफ्लाइको पखेटा संरचनाको तुलनात्मक समानता (पखेटाको काट्ने र अनुदैर्ध्य नसाहरू एकअर्कामा जोडिएका छन्) र Cp NFRCS (B) को क्रस-सेक्शनल फोटोमाइक्रोग्राफ देखाउँछ। NFRCS को योजनाबद्ध प्रतिनिधित्व।
माथिका सीमितताहरूलाई सम्बोधन गर्न HFFC लाई निरन्तर चरणको रूपमा प्रयोग गरेर NFRC हरू विकास गरिएको थियो। HFFC विभिन्न फिल्म-बनाउने हेमोस्टेटिक पोलिमरहरू मिलेर बनेको छ जसमा chitosan (मुख्य hemostatic पोलिमरको रूपमा) मिथाइलसेल्युलोज (MC), हाइड्रोक्साइप्रोपाइल मिथाइलसेल्युलोज (HPMC 50 cp) र पोलिभिनाइल अल्कोहल (PVA)) (125 kDa) लाई समर्थन पोलिमरको रूपमा समावेश गरिएको छ जसले थ्रोम्बस गठनलाई बढावा दिन्छ। गठन। polyvinylpyrrolidine K30 (PVP K30) को थपले NFRCS को आर्द्रता अवशोषण क्षमतामा सुधार ल्यायो। बन्डेड पोलिमर मिश्रणहरूमा पोलिमर क्रसलिङ्किङ सुधार गर्न पोलिथिलीन ग्लाइकोल 400 (PEG 400) थपिएको थियो। तीन फरक HFFC हेमोस्टेटिक रचनाहरू (Cm HFFC, Ch HFFC र Cp HFFC), अर्थात् MC (Cm) सँग chitosan, HPMC (Ch) सँग chitosan, र PVA (Cp) सँग chitosan, Ct मा लागू गरिएको थियो। विभिन्न इन भिट्रो र इन भिभो क्यारेक्टराइजेशन अध्ययनहरूले NFRCS को हेमोस्टेटिक र घाउ निको पार्ने गतिविधि पुष्टि गरेका छन्। NFRCS द्वारा प्रस्ताव गरिएको कम्पोजिट सामग्रीहरू विशिष्ट आवश्यकताहरू पूरा गर्न विभिन्न प्रकारका मचानहरू अनुकूलित गर्न प्रयोग गर्न सकिन्छ।
यसको अतिरिक्त, NFRCS लाई तल्लो भाग र शरीरका अन्य भागहरूको सम्पूर्ण चोट क्षेत्र ढाक्न ब्यान्डेज वा रोलको रूपमा परिमार्जन गर्न सकिन्छ। विशेष गरी लडाई अंगको चोटपटकको लागि, डिजाइन गरिएको NFRCS डिजाइनलाई आधा हात वा पूरा खुट्टामा परिवर्तन गर्न सकिन्छ (पूरक चित्र S11)। NFRCS लाई टिस्यु ग्लुको साथ रिस्टब्यान्डमा बनाउन सकिन्छ, जुन गम्भीर आत्महत्या गर्ने नाडीको चोटबाट रक्तस्राव रोक्न प्रयोग गर्न सकिन्छ। हाम्रो मुख्य लक्ष्य भनेको सकेसम्म थोरै पोलिमर भएको NFRCS विकास गर्नु हो जुन ठूलो जनसंख्या (गरिबी रेखा मुनि) मा डेलिभर गर्न सकिन्छ र जुन प्राथमिक उपचार किटमा राख्न सकिन्छ। सरल, कुशल, र किफायती डिजाइनको रूपमा, NFRCS ले स्थानीय समुदायहरूलाई फाइदा पुर्‍याउँछ र विश्वव्यापी प्रभाव पार्न सक्छ।
चिटोसन (आणविक तौल ८० केडीए) र अमरान्थ भारतको मर्कबाट खरिद गरिएको थियो। हाइड्रोक्सिप्रोपाइल मिथाइलसेलुलोज ५० सीपी, पोलिथिलीन ग्लाइकोल ४०० र मिथाइलसेलुलोज लोबा केमी प्रा. एलएलसी, मुम्बईबाट खरिद गरिएको थियो। पोलिभिनाइल अल्कोहल (आणविक तौल १२५ केडीए) (८७-९०% हाइड्रोलाइज्ड) गुजरातको नेशनल केमिकल्सबाट खरिद गरिएको थियो। पोलिभिनाइलपाइरोलिडिन के३० मोलिचेम, मुम्बईबाट खरिद गरिएको थियो, बाँझ स्वाबहरू रामाराजु सर्जरी कपास मिल्स लिमिटेड, तमिलनाडुबाट खरिद गरिएको थियो, जसमा मिली क्यू पानी (डाइरेक्ट-क्यू३ पानी शुद्धीकरण प्रणाली, मर्क, भारत) वाहकको रूपमा प्रयोग गरिएको थियो।
NFRCS लाईयोफिलाइजेशन विधि ११,१२ प्रयोग गरेर विकसित गरिएको थियो। सबै HFFC रचनाहरू (तालिका १) मेकानिकल स्टिरर प्रयोग गरेर तयार पारिएका थिए। मेकानिकल स्टिररमा ८०० rpm मा निरन्तर हलचल गरेर पानीमा १% एसिटिक एसिड प्रयोग गरेर चिटोसनको ०.५% घोल तयार पार्नुहोस्। तालिका १ मा संकेत गरिएको लोड गरिएको पोलिमरको सही तौल चिटोसन घोलमा थपियो र स्पष्ट पोलिमर घोल प्राप्त नभएसम्म हलचल गरियो। तालिका १ मा संकेत गरिएको मात्रामा परिणामस्वरूप मिश्रणमा PVP K30 र PEG ४०० थपियो, र स्पष्ट चिपचिपा पोलिमर घोल प्राप्त नभएसम्म हलचल जारी रह्यो। पोलिमर मिश्रणबाट फसेको हावाको बुलबुले हटाउन पोलिमर घोलको परिणामस्वरूप बाथलाई ६० मिनेटको लागि सोनिकेट गरिएको थियो। पूरक चित्र S1(b) मा देखाइए अनुसार, Ct लाई ५ मिलीलीटर HFFC सँग पूरक ६-कुवा प्लेट (मोल्ड) को प्रत्येक कुवामा समान रूपमा वितरण गरिएको थियो।
Ct नेटवर्कमा HFFC को एकरूप भिजाउने र वितरण प्राप्त गर्न छ-कुवा प्लेटलाई ६० मिनेटको लागि सोनिकेट गरिएको थियो। त्यसपछि छ-कुवा प्लेटलाई -२०°C मा ८-१२ घण्टाको लागि फ्रिज गर्नुहोस्। NFRCS को विभिन्न सूत्रहरू प्राप्त गर्न फ्रिज प्लेटहरूलाई ४८ घण्टाको लागि लाइओफिलाइज गरिएको थियो। ट्याम्पन वा बेलनाकार ट्याम्पन, वा विभिन्न अनुप्रयोगहरूको लागि कुनै अन्य आकार जस्ता विभिन्न आकार र संरचनाहरू उत्पादन गर्न एउटै प्रक्रिया प्रयोग गरिन्छ।
चुम्बकीय स्टिरर प्रयोग गरेर सही तौल गरिएको चिटोसन (८० केडीए) (३%) १% एसिटिक एसिडमा घुलनशील हुन्छ। चिटोसनको परिणामस्वरूप घोलमा १% पीईजी ४०० थपियो र ३० मिनेटसम्म चलाइयो। परिणामस्वरूप घोललाई वर्गाकार वा आयताकार कन्टेनरमा खन्याउनुहोस् र -८० डिग्री सेल्सियसमा १२ घण्टाको लागि फ्रिज गर्नुहोस्। छिद्रपूर्ण Cs१३ प्राप्त गर्न जमेका नमूनाहरूलाई ४८ घण्टाको लागि लायोफिलाइज गरिएको थियो।
विकसित NFRCS लाई फुरियर ट्रान्सफर्म इन्फ्रारेड स्पेक्ट्रोस्कोपी (FTIR) (Shimadzu 8400 s FTIR, टोकियो, जापान) प्रयोग गरेर अन्य पोलिमरहरूसँग चिटोसनको रासायनिक अनुकूलता पुष्टि गर्न प्रयोग गरिएको थियो14,15। सबै परीक्षण गरिएका नमूनाहरूको FTIR स्पेक्ट्रा (400 देखि 4000 cm-1 सम्मको स्पेक्ट्रल दायराको चौडाइ) 32 स्क्यानहरू गरेर प्राप्त गरिएको थियो।
सबै सूत्रहरूको लागि रगत अवशोषण दर (BAR) चेन एट अल द्वारा वर्णन गरिएको विधि प्रयोग गरेर थोरै परिमार्जनहरू सहित मूल्याङ्कन गरिएको थियो। सबै रचनाहरूको विकसित NFRK हरूलाई अवशिष्ट विलायक हटाउन रातभर १०५°C मा भ्याकुम ओभनमा सुकाइयो। ३० मिलीग्राम NFRCS (प्रारम्भिक नमूना तौल - W0) र ३० मिलीग्राम Ct (सकारात्मक नियन्त्रण) ३.८% सोडियम साइट्रेटको प्रिमिक्स भएको छुट्टाछुट्टै भाँडामा राखियो। पूर्वनिर्धारित समय अन्तरालहरूमा, अर्थात् ५, १०, २०, ३०, ४० र ६० सेकेन्डमा, NFRCS हटाइयो र ३० सेकेन्डको लागि Ct मा नमूनाहरू राखेर तिनीहरूको सतहहरू अवशोषित रगतबाट सफा गरियो। प्रत्येक समय बिन्दुमा NFRCS १६ द्वारा अवशोषित रगतको अन्तिम तौल (W1) विचार गरिएको थियो। निम्न सूत्र प्रयोग गरेर BAR प्रतिशत गणना गर्नुहोस्:
रगत जम्ने समय (BCT) वाङ एट अल द्वारा रिपोर्ट गरिए अनुसार निर्धारण गरिएको थियो। १७। NFRCS को उपस्थितिमा सम्पूर्ण रगत (३.८% सोडियम साइट्रेटसँग प्रिमिक्स गरिएको मुसाको रगत) जम्न आवश्यक समय परीक्षण नमूनाको BCT को रूपमा गणना गरिएको थियो। विभिन्न NFRCS घटकहरू (३० मिलीग्राम) १० मिली स्क्रू क्याप शीशीहरूमा राखियो र ३७°C मा इन्क्युबेट गरियो। शीशीमा रगत (०.५ मिली) थपियो र रगत जम्ने सक्रिय गर्न ०.३ मिली ०.२ M CaCl2 थपियो। अन्तमा, बलियो जम्ने नबनेसम्म प्रत्येक १५ सेकेन्डमा (१८०° सम्म) शीशीलाई उल्टाउनुहोस्। नमूनाको BCT फ्लिप भेलहरूको संख्याद्वारा अनुमान गरिएको छ। १७,१८। BCT को आधारमा, थप विशेषता अध्ययनहरूको लागि NFRCS Cm, Ch र Cp बाट दुई इष्टतम रचनाहरू चयन गरिएको थियो।
Li et al. 19 द्वारा वर्णन गरिएको विधि लागू गरेर Ch NFRCS र Cp NFRCS रचनाहरूको BCT निर्धारण गरिएको थियो। १५ x १५ mm2 Ch NFRCS, Cp NFRCS, र Cs (सकारात्मक नियन्त्रण) लाई छुट्टाछुट्टै पेट्री डिश (३७ °C) मा राख्नुहोस्। रगत जमाउने प्रक्रिया सुरु गर्न ३.८% सोडियम साइट्रेट भएको रगतलाई १०:१ भोल्युम अनुपातमा ०.२ M CaCl2 सँग मिसाइएको थियो। २० µl ०.२ M CaCl2 मुसाको रगतको मिश्रण नमूना सतहमा लगाइएको थियो र खाली पेट्री डिशमा राखिएको थियो। नियन्त्रणको लागि Ct बिना खाली पेट्री डिशमा रगत खन्याइएको थियो। ०, ३ र ५ मिनेटको निश्चित अन्तरालमा, जम्ने समस्यालाई बाधा नपुर्‍याई डिश भएको नमूनामा १० मिलीलीटर डियोनाइज्ड (DI) पानी थपेर जम्ने रोक्नुहोस्। जम्न नदिइएका एरिथ्रोसाइटहरू (एरिथ्रोसाइटहरू) डियोनाइज्ड पानीको उपस्थितिमा हेमोलाइसिसबाट गुज्रन्छन् र हेमोग्लोबिन छोड्छन्। विभिन्न समय बिन्दुहरूमा हेमोग्लोबिन (HA(t)) मा UV-Vis स्पेक्ट्रोफोटोमिटर प्रयोग गरेर ५४० nm (λmax हेमोग्लोबिन) मा मापन गरिएको थियो। १० मिलीलीटर डिआयोनाइज्ड पानीमा २० µl रगतको ० मिनेटमा हेमोग्लोबिन (AH(0)) को पूर्ण अवशोषणलाई सन्दर्भ मानकको रूपमा लिइएको थियो। जमेको रगतको सापेक्ष हेमोग्लोबिन अपटेक (RHA) रगतको एउटै ब्याच प्रयोग गरेर HA(t)/HA(0) अनुपातबाट गणना गरिएको थियो।
बनावट विश्लेषक (टेक्सचर प्रो CT V1.3 बिल्ड १५, ब्रुकफिल्ड, संयुक्त राज्य अमेरिका) प्रयोग गरेर, क्षतिग्रस्त तन्तुहरूमा NFRK को टाँस्ने गुणहरू निर्धारण गरियो। सुँगुरको छालाको भित्री भागमा (बोसोको तह बिना) खुला तल्लो बेलनाकार डिश थिच्नुहोस्। सुँगुरको छालामा टाँस्ने सिर्जना गर्न नमूनाहरू (Ch NFRCS र Cp NFRCS) क्यानुला मार्फत बेलनाकार मोल्डहरूमा लागू गरियो। कोठाको तापक्रम (RT) (२५° C.) मा ३ मिनेट इन्क्युबेशन पछि, NFRCS टाँस्ने शक्ति ०.५ मिमी/सेकेन्डको स्थिर दरमा रेकर्ड गरियो।
सर्जिकल सिलेन्टको मुख्य विशेषता भनेको रगतको कमी कम गर्दै रगत जम्ने क्षमता बढाउनु हो। NFRCS मा हानिरहित कोगुलेसन पहिले प्रकाशित विधि प्रयोग गरेर थोरै परिमार्जनहरू 19 प्रयोग गरेर मूल्याङ्कन गरिएको थियो। सेन्ट्रीफ्यूज ट्यूबको एक छेउमा 8 × 5 mm2 प्वाल भएको माइक्रोसेन्ट्रीफ्यूज ट्यूब (2 ml) (भित्री व्यास 10 mm) बनाउनुहोस् (खुला घाउ प्रतिनिधित्व गर्दछ)। खोल्ने ठाउँ बन्द गर्न NFRCS प्रयोग गरिन्छ र बाहिरी किनारहरू सील गर्न टेप प्रयोग गरिन्छ। 3.8% सोडियम साइट्रेट प्रिमिक्स भएको माइक्रोसेन्ट्रीफ्यूज ट्यूबमा 0.2 M CaCl2 को 20 µl थप्नुहोस्। 10 मिनेट पछि, भाँडाहरूबाट माइक्रोसेन्ट्रीफ्यूज ट्यूबहरू हटाइयो र NFRK (n = 3) बाट रगतको बहिर्गमनको कारणले भाँडाको द्रव्यमानमा वृद्धि निर्धारण गरियो। रगतको कमी Ch NFRCS र Cp NFRCS लाई Cs सँग तुलना गरिएको थियो।
NFRCS को भिजेको अखण्डता मिश्रा र चौधरीद्वारा वर्णन गरिएको विधिको आधारमा निर्धारण गरिएको थियो21 जसमा थोरै परिमार्जनहरू गरिएको थियो। NFRCS लाई १०० मिलीलीटर एर्लेनमेयर फ्लास्कमा ५० मिलीलीटर पानी हालेर राख्नुहोस् र माथिल्लो भाग नबनाई ६० सेकेन्डसम्म घुमाउनुहोस्। सङ्कलनको आधारमा भौतिक अखण्डताको लागि नमूनाहरूको दृश्य निरीक्षण र प्राथमिकता निर्धारण।
HFFC को Ct मा बन्धन शक्ति पहिले प्रकाशित विधिहरू प्रयोग गरेर सानो परिमार्जनहरू प्रयोग गरेर अध्ययन गरिएको थियो। milliQ पानी (Ct) को उपस्थितिमा NFRK लाई ध्वनिक तरंगहरू (बाह्य उत्तेजना) मा उजागर गरेर सतह कोटिंग अखण्डता मूल्याङ्कन गरिएको थियो। विकसित NFRCS Ch NFRCS र Cp NFRCS पानीले भरिएको बीकरमा राखिएको थियो र क्रमशः १, २, ३, ४, ५, ६, ७, ८, ९, १०, र ३० मिनेटको लागि सोनिकेट गरिएको थियो। सुकेपछि, NFRCS को प्रारम्भिक र अन्तिम तौल बीचको प्रतिशत भिन्नता सामग्रीको प्रतिशत हानि (HFFC) गणना गर्न प्रयोग गरिएको थियो। इन भिट्रो BCT ले सतह सामग्रीको बन्धन शक्ति वा हानिलाई थप समर्थन गर्‍यो। Ct मा HFFC बन्धनको दक्षताले Ct22 को सतहमा रगत जम्ने र लोचदार कोटिंग प्रदान गर्दछ।
विकसित NFRCS को एकरूपता NFRCS को अनियमित रूपमा चयन गरिएका सामान्य स्थानहरूबाट लिइएका नमूनाहरू (३० मिलीग्राम) को BCT द्वारा निर्धारण गरिएको थियो। NFRCS अनुपालन निर्धारण गर्न पहिले उल्लेख गरिएको BCT प्रक्रिया पालना गर्नुहोस्। सबै पाँच नमूनाहरू बीचको निकटताले Ct मेषमा एकरूप सतह कभरेज र HFFC निक्षेपण सुनिश्चित गर्दछ।
पहिले रिपोर्ट गरिए अनुसार केही परिमार्जनहरू सहित नाममात्र रक्त सम्पर्क क्षेत्र (NBCA) निर्धारण गरिएको थियो। Ct, Ch NFRCS, Cp NFRCS र Cs को दुई सतहहरू बीच २० µl रगत क्ल्याम्प गरेर रगत जमाउनुहोस्। १ घण्टा पछि, स्टेन्टका दुई भागहरू अलग गरियो र म्यानुअल रूपमा क्लटको क्षेत्र मापन गरियो। तीन पुनरावृत्तिको औसत मान NBCA NFRCS19 मानियो।
बाह्य वातावरणबाट वा जम्ने प्रक्रिया सुरु गर्न जिम्मेवार चोटपटक लागेको ठाउँबाट पानी सोस्न NFRCS को प्रभावकारिता मूल्याङ्कन गर्न गतिशील भाप सोर्प्शन (DVS) विश्लेषण प्रयोग गरिएको थियो। DVS ले ±0.1 µg को द्रव्यमान रिजोल्युसनको साथ अति-संवेदनशील सन्तुलन प्रयोग गरेर गुरुत्वाकर्षण रूपमा नमूनामा वाष्प अवशोषण र क्षतिको मूल्याङ्कन वा रेकर्ड गर्दछ। संतृप्त र सुख्खा वाहक ग्यासहरू मिश्रण गरेर नमूना वरिपरि इलेक्ट्रोनिक द्रव्यमान प्रवाह नियन्त्रकद्वारा आंशिक वाष्प दबाव (सापेक्षिक आर्द्रता) उत्पन्न गरिन्छ। युरोपेली फार्माकोपिया दिशानिर्देशहरू अनुसार, नमूनाहरूले ओसिलोपनको प्रतिशतको आधारमा, नमूनाहरूलाई ४ वर्गमा वर्गीकृत गरिएको थियो (०–०.०१२% w/w− गैर-हाइग्रोस्कोपिक, ०.२–२% w/w थोरै हाइग्रोस्कोपिक, २–१५% मध्यम हाइग्रोस्कोपिक, र > १५% धेरै हाइग्रोस्कोपिक)२३। युरोपेली फार्माकोपिया दिशानिर्देशहरू अनुसार, नमूनाहरूले ओसिलोपनको प्रतिशतको आधारमा, नमूनाहरूलाई ४ वर्गमा वर्गीकृत गरिएको थियो (०–०.०१२% w/w− गैर-हाइग्रोस्कोपिक, ०.२–२% w/w थोरै हाइग्रोस्कोपिक, २–१५% मध्यम हाइग्रोस्कोपिक, र > १५% धेरै हाइग्रोस्कोपिक)२३।युरोपेली फार्माकोपियाको सिफारिसहरू अनुसार, नमूनाहरूद्वारा आर्द्रता अवशोषणको प्रतिशतको आधारमा, नमूनाहरूलाई ४ वर्गमा विभाजन गरिएको थियो (०–०.०१२% w/w - गैर-हाइग्रोस्कोपिक, ०.२–२% w/w थोरै हाइग्रोस्कोपिक, २–पन्ध्र%)।% умеренно гигроскопичен и > 15% очень гигроскопичен)23. % मध्यम हाइग्रोस्कोपिक र > १५% धेरै हाइग्रोस्कोपिक)२३।根据欧洲药典指南,根据样品吸收水分的百分比,样品分为4 类（0-0.012% w/w-2-湀湀典指% w/w 轻微吸湿性、2-15% 适度吸湿，> 15% 非常吸湿）23।根据 欧洲 药典 指南 ， 根据 吸收 水分 的 百分比 样品 分为 分为 分为 分为 分为 类 %0-2吸湿 性 、 、 、 0.2-2% W/w 轻微 、 2-15% 适度 吸湿 ，> 15 %非常吸湿） 23।युरोपेली फार्माकोपियाको सिफारिस अनुसार, नमूनाहरू नमूनाद्वारा अवशोषित आर्द्रताको प्रतिशतको आधारमा ४ वर्गमा विभाजन गरिएको छ (०-०.०१२% तौल अनुसार - गैर-हाइग्रोस्कोपिक, ०.२-२% तौल अनुसार थोरै हाइग्रोस्कोपिक, २-१५% तौल अनुसार)।% умеренно гигроскопичен, > 15 % очень гигроскопичен) 23. % मध्यम हाइग्रोस्कोपिक, > १५% धेरै हाइग्रोस्कोपिक) २३।NFCS X NFCS र TsN NFCS को हाइग्रोस्कोपिक दक्षता DVS TA TGA Q5000 SA विश्लेषकमा निर्धारण गरिएको थियो। यस प्रक्रियाको क्रममा, २५°C२४ मा रन टाइम, सापेक्षिक आर्द्रता (RH), र वास्तविक-समय नमूना तौल प्राप्त गरिएको थियो। निम्न समीकरण प्रयोग गरेर सही NFRCS मास विश्लेषणद्वारा आर्द्रता सामग्री गणना गरिन्छ:
MC भनेको NFRCS आर्द्रता हो। m1 - NSAIDs को सुख्खा तौल। m2 भनेको दिइएको RH मा वास्तविक-समय NFRCS द्रव्यमान हो।
२५ डिग्री सेल्सियसमा १० घण्टा (< ७ × १०–३ टोर) को लागि नमूनाहरू खाली गरेपछि तरल नाइट्रोजनको साथ नाइट्रोजन सोखन प्रयोग प्रयोग गरेर कुल सतह क्षेत्रफल अनुमान गरिएको थियो। २५ डिग्री सेल्सियसमा १० घण्टा (< ७ × १०–३ टोर) को लागि नमूनाहरू खाली गरेपछि तरल नाइट्रोजनको साथ नाइट्रोजन सोखन प्रयोग प्रयोग गरेर कुल सतह क्षेत्रफल अनुमान गरिएको थियो। Общая площадь поверхности оценивалась с помощью эксперимента по адсорбции азота жидким азотом ° Совербожение с помощью эксперимента течение 10 ч (< 7 × 10–3 TOR)। नमूनाहरूलाई २५°C मा १० घण्टा (<७ × १०–३ टोर) को लागि खाली गरिसकेपछि तरल नाइट्रोजनको साथ नाइट्रोजन सोखन प्रयोग प्रयोग गरेर कुल सतह क्षेत्रफल अनुमान गरिएको थियो।25°C 清空样品10 小时（< 7 × 10-3 Torr）后，使用液氮的氮吸附实验估计总表面积।25 डिग्री सेल्सियसमा Общая площадь поверхности оценивалась с использованием экспериментов по адсорбции азота жидким азотом посенивазованием 10 डिग्री सेल्सियस 25 डिग्री सेल्सियस (< 7 × 10-3 торр)। २५°C (<७ x १०-३ टोर) मा १० घण्टाको लागि नमूनाहरू खाली गरिसकेपछि तरल नाइट्रोजनको साथ नाइट्रोजन सोखन प्रयोगहरू प्रयोग गरेर कुल सतह क्षेत्रफल अनुमान गरिएको थियो।RS 232 सफ्टवेयर प्रयोग गरेर NOVA 1000e, अस्ट्रियाबाट आएको क्वान्टाक्रोमको साथ कुल सतह क्षेत्रफल, छिद्रको मात्रा र NFRCS छिद्रको आकार निर्धारण गरिएको थियो।
सम्पूर्ण रगतबाट ५% आरबीसी (पातलो रूपमा नुनिलो) तयार गर्नुहोस्। त्यसपछि ९६-कुवा प्लेट र ५% आरबीसी द्रव्यमान (०.१ मिली) मा HFFC (०.२५ मिली) को एक मात्रा स्थानान्तरण गर्नुहोस्। मिश्रणलाई ३७°C मा ४० मिनेटको लागि इन्क्युबेट गर्नुहोस्। रातो रक्त कोशिका र सीरमको मिश्रणलाई सकारात्मक नियन्त्रणको रूपमा लिइयो, र नुनिलो र रातो रक्त कोशिकाको मिश्रणलाई नकारात्मक नियन्त्रणको रूपमा लिइयो। हेम्याग्लुटिनेशन स्ट्याजिट्ज्की स्केल अनुसार निर्धारण गरिएको थियो। प्रस्तावित स्केलहरू निम्नानुसार छन्: + + + बाक्लो दानेदार समुच्चयहरू; + + + घुमाउरो किनारहरू भएका चिल्लो तल्लो प्याडहरू; + + च्यातिएको किनारहरू भएका चिल्लो तल्लो प्याडहरू; + चिल्लो प्याडहरूको किनारहरू वरिपरि साँघुरो रातो घेराहरू; - (ऋणात्मक) तल्लो कुवाको केन्द्रमा अलग रातो बटन १२।
अन्तर्राष्ट्रिय मानकीकरण संगठन (ISO) (ISO10993-4, 1999) को विधि अनुसार NFRCS को हेमोकम्प्याटिबिलिटी अध्ययन गरिएको थियो। सिंह एट अल द्वारा वर्णन गरिएको गुरुत्वाकर्षण विधि। NFRCS को उपस्थितिमा वा सतहमा थ्रोम्बस गठनको मूल्याङ्कन गर्न सानो परिमार्जन गरिएको थियो। ५०० मिलीग्राम Cs, Ch NFRCS र Cp NFRCS लाई ३७°C मा २४ घण्टाको लागि फस्फेट बफर गरिएको सलाइन (PBS) मा इन्क्युबेट गरिएको थियो। २४ घण्टा पछि, PBS हटाइयो र NFRCS लाई ३.८% सोडियम साइट्रेट भएको २ मिलीलीटर रगतले उपचार गरियो। NFRCS को सतहमा, इन्क्युबेट गरिएको नमूनाहरूमा ०.०४ मिलीलीटर ०.१ M CaCl2 थप्नुहोस्। ४५ मिनेट पछि, जम्ने रोक्नको लागि ५ मिलीलीटर डिस्टिल्ड पानी थपियो। NFRK को सतहमा जमेको रगतलाई ३६-३८% फॉर्मल्डिहाइड घोलले उपचार गरियो। फॉर्मल्डिहाइडले फिक्स गरिएका थक्काहरू सुकाइयो र तौल गरियो। रगत र नमुना बिनाको गिलासको तौल (नकारात्मक नियन्त्रण) र रगत भएको गिलासको तौल (सकारात्मक नियन्त्रण) गणना गरेर थ्रोम्बोसिसको प्रतिशत अनुमान गरिएको थियो।
प्रारम्भिक पुष्टिकरणको रूपमा, HFFC सतह कोटिंग, Ct अन्तरसम्बन्धित, र Ct नेटवर्कको छिद्रहरू बनाउनको क्षमता बुझ्नको लागि नमूनाहरूलाई अप्टिकल माइक्रोस्कोप अन्तर्गत दृश्यात्मक रूपमा हेरिएको थियो। NFRCS बाट Ch र Cp को पातलो भागहरूलाई स्केलपेल ब्लेडले काटिएको थियो। परिणामस्वरूप भागलाई गिलास स्लाइडमा राखिएको थियो, कभरस्लिपले ढाकिएको थियो, र किनारहरू ग्लुले फिक्स गरिएको थियो। तयार गरिएका स्लाइडहरूलाई अप्टिकल माइक्रोस्कोप अन्तर्गत हेरिएको थियो र विभिन्न म्याग्निफिकेसनहरूमा तस्बिरहरू खिचिएका थिए।
राइस एट अल.२९ द्वारा वर्णन गरिएको विधिमा आधारित फ्लोरोसेन्स माइक्रोस्कोपी प्रयोग गरेर Ct नेटवर्कहरूमा पोलिमर निक्षेपणको दृश्यावलोकन गरिएको थियो। सूत्रीकरणको लागि प्रयोग गरिएको HFFC संरचनालाई फ्लोरोसेन्ट डाई (अमरन्थ) सँग मिसाइएको थियो, र पहिले उल्लेख गरिएको विधि अनुसार NFRCS (Ch & Cp) तयार पारिएको थियो। सूत्रीकरणको लागि प्रयोग गरिएको HFFC संरचनालाई फ्लोरोसेन्ट डाई (अमरन्थ) सँग मिसाइएको थियो, र पहिले उल्लेख गरिएको विधि अनुसार NFRCS (Ch & Cp) तयार पारिएको थियो।सूत्रीकरणको लागि प्रयोग गरिएको HFFC संरचनालाई फ्लोरोसेन्ट डाई (अमरन्थ) सँग मिसाइएको थियो र पहिले उल्लेख गरिएको विधि अनुसार NFRCS (Ch र Cp) प्राप्त गरिएको थियो।将用于配方的HFFC 组合物与荧光染料（苋菜）混合，并按照前面提到的方法制制。将用于配方的HFFC 组合物与荧光染料（苋菜）混合，并按照前面提到的方法制制。सूत्रीकरणमा प्रयोग गरिएको HFFC संरचनालाई फ्लोरोसेन्ट डाई (अमरन्थ) सँग मिसाइएको थियो र पहिले उल्लेख गरिएझैं NFRCS (Ch र Cp) प्राप्त गरिएको थियो।प्राप्त नमूनाहरूबाट NFRK का पातलो भागहरू काटेर, गिलास स्लाइडहरूमा राखेर कभर स्लिपहरूले ढाकिएको थियो। हरियो फिल्टर (३१०-३८० एनएम) प्रयोग गरेर फ्लोरोसेन्ट माइक्रोस्कोप मुनि तयार पारिएका स्लाइडहरू अवलोकन गर्नुहोस्। Ct नेटवर्कमा Ct सम्बन्ध र अतिरिक्त पोलिमर निक्षेपण बुझ्नको लागि छविहरू ४x म्याग्निफिकेसनमा लिइएको थियो।
NFRCS Ch र Cp को सतह स्थलाकृति ट्यापिङ मोडमा अल्ट्रा-शार्प TESP क्यान्टिलभर भएको परमाणु बल माइक्रोस्कोप (AFM) प्रयोग गरेर निर्धारण गरिएको थियो: ४२ N/m, ३२० kHz, ROC २-५ nm, ब्रुकर, ताइवान। सतहको खस्रोपन सफ्टवेयर (स्क्यानिङ प्रोब इमेज प्रोसेसर) प्रयोग गरेर रूट मीन स्क्वायर (RMS) द्वारा निर्धारण गरिएको थियो। सतहको एकरूपता जाँच गर्न विभिन्न NFRCS स्थानहरू 3D छविहरूमा रेन्डर गरिएको थियो। दिइएको क्षेत्रको लागि स्कोरको मानक विचलनलाई सतहको खस्रोपनको रूपमा परिभाषित गरिएको छ। NFRCS31 को सतहको खस्रोपनको मात्रा निर्धारण गर्न RMS समीकरण प्रयोग गरिएको थियो।
FESEM-आधारित अध्ययनहरू FESEM, SU8000, HI-0876-0003, HI-0876-0003, HI-0003, HI-0876-0003 प्रयोग गरेर Ch NFRCS र Cp NFRCS को सतह आकारविज्ञान बुझ्नको लागि गरिएको थियो, जसले Cm NFRCS भन्दा राम्रो BCT देखाएको थियो। FESEM अध्ययन Zhao et al. 32 द्वारा वर्णन गरिएको विधि अनुसार गरिएको थियो। NFRCS २० देखि ३० मिलीग्राम Ch NFRCS र Cp NFRCS लाई मुसाको रगतमा २० µl ३.८% सोडियम साइट्रेटको साथ प्रिमिक्स गरिएको थियो। जम्मा हुन सुरु गर्न रगत-उपचार गरिएका नमूनाहरूमा २० μl ०.२ M CaCl2 थपिएको थियो र नमूनाहरूलाई कोठाको तापक्रममा १० मिनेटको लागि इन्क्युबेट गरिएको थियो। थप रूपमा, अतिरिक्त एरिथ्रोसाइटहरू नुनले कुल्ला गरेर NFRCS सतहबाट हटाइयो।
त्यसपछिका नमूनाहरूलाई ०.१% ग्लुटाराल्डिहाइडले उपचार गरियो र त्यसपछि आर्द्रता हटाउन ३७ डिग्री सेल्सियसमा तातो हावाको चुल्होमा सुकाइयो। सुकेका नमूनाहरूलाई लेपित गरियो र विश्लेषण गरियो ३२। विश्लेषणको क्रममा प्राप्त अन्य छविहरू व्यक्तिगत कपास फाइबरको सतहमा थक्का गठन, Ct बीचको पोलिमर निक्षेपण, एरिथ्रोसाइट मोर्फोलोजी (आकार), थक्का अखण्डता, र NFRCS को उपस्थितिमा एरिथ्रोसाइट मोर्फोलोजी थिए। उपचार नगरिएको NFRCS क्षेत्रहरू र रगतले इन्क्युबेट गरिएको Ch र Cp उपचार गरिएको NFRCS क्षेत्रहरूलाई मौलिक आयनहरू (सोडियम, पोटासियम, नाइट्रोजन, क्याल्सियम, म्याग्नेसियम, जस्ता, तामा र सेलेनियम) को लागि स्क्यान गरिएको थियो। थक्का गठन र थक्का एकरूपताको समयमा मौलिक आयन संचय बुझ्न उपचार नगरिएको र उपचार नगरिएको नमूनाहरू बीच मौलिक आयन प्रतिशतहरू तुलना गर्नुहोस्।
Ct सतहमा Cp HFFC सतह कोटिंगको मोटाई FESEM प्रयोग गरेर निर्धारण गरिएको थियो। Cp NFRCS को क्रस सेक्सनहरू फ्रेमवर्कबाट काटिएका थिए र स्पटर लेपित गरिएको थियो। परिणामस्वरूप स्पटर कोटिंग नमूनाहरू FESEM द्वारा अवलोकन गरिएको थियो र सतह कोटिंगको मोटाई 34, 35, 36 मापन गरिएको थियो।
एक्स-रे माइक्रो-सीटीले उच्च-रिजोल्युसन थ्रीडी गैर-विनाशकारी इमेजिङ प्रदान गर्दछ र तपाईंलाई NFRK को आन्तरिक संरचनात्मक व्यवस्था अध्ययन गर्न अनुमति दिन्छ। माइक्रो-सीटीले नमूनामा एक्स-रेको स्थानीय रेखीय क्षीणन गुणांक रेकर्ड गर्न नमूनाबाट गुज्रने एक्स-रे बीम प्रयोग गर्दछ, जसले रूपात्मक जानकारी प्राप्त गर्न मद्दत गर्दछ। NFRCS37,38,39 को उपस्थितिमा अवशोषण दक्षता र रगत जम्ने बुझ्न माइक्रो-सीटीद्वारा Cp NFRCS र रगत-उपचार गरिएको Cp NFRCS मा Ct को आन्तरिक स्थान जाँच गरिएको थियो। रगत-उपचार गरिएको र उपचार नगरिएको Cp NFRCS नमूनाहरूको 3D संरचनाहरू माइक्रो-सीटी (V|tome|x S240, फिनिक्स, जर्मनी) प्रयोग गरेर पुनर्निर्माण गरिएको थियो। VG STUDIO-MAX सफ्टवेयर संस्करण 2.2 प्रयोग गरेर, NFRCS को लागि 3D छविहरू विकास गर्न विभिन्न कोणहरू (आदर्श रूपमा 360° कभरेज) बाट धेरै एक्स-रे छविहरू लिइयो। सङ्कलन गरिएको प्रक्षेपण डेटालाई सम्बन्धित साधारण 3D स्क्यानआईपी शैक्षिक सफ्टवेयर प्रयोग गरेर 3D भोल्युमेट्रिक छविहरूमा पुनर्निर्माण गरिएको थियो।
यसको अतिरिक्त, रगत जम्ने प्रक्रिया बुझ्नको लागि, रगत जम्ने प्रक्रिया सुरु गर्न NFRCS मा २० µl प्रिमिक्स गरिएको साइट्रेटेड रगत र २० µl ०.२ M CaCl2 थपिएको थियो। तयार गरिएका नमूनाहरूलाई कडा हुन छोडिएको थियो। NFRK सतहलाई ०.५% ग्लुटाराल्डिहाइडले उपचार गरिएको थियो र तातो हावाको चुल्होमा ३०-४०°C मा ३० मिनेटको लागि सुकाइएको थियो। NFRCS मा बनेको रगत जम्ने प्रक्रिया स्क्यान गरिएको थियो, पुनर्निर्माण गरिएको थियो, र रगत जम्ने प्रक्रियाको ३D छवि दृश्यात्मक गरिएको थियो।
पहिले वर्णन गरिएको विधि प्रयोग गरेर Cp NFRCS (Ch NFRCS को तुलनामा सबैभन्दा राम्रो) मा थोरै परिमार्जनहरू सहित एन्टिब्याक्टेरियल परीक्षणहरू गरियो। Cp NFRCS र Cp HFFC को जीवाणुरोधी गतिविधि तीन फरक परीक्षण सूक्ष्मजीवहरू [S.aureus (ग्राम-सकारात्मक ब्याक्टेरिया), E.coli (ग्राम-नकारात्मक ब्याक्टेरिया) र सेतो क्यान्डिडा (C.albicans)] प्रयोग गरेर इन्क्यूबेटरमा पेट्री डिशमा अगरमा बढ्दै गरेको प्रयोग गरेर निर्धारण गरिएको थियो। १०५-१०६ CFU ml-१ को सांद्रतामा ५० मिलीलीटर पातलो ब्याक्टेरियल कल्चर सस्पेन्सनलाई अगर माध्यममा समान रूपमा खोप्नुहोस्। माध्यमलाई पेट्री डिशमा खन्याउनुहोस् र यसलाई ठोस हुन दिनुहोस्। HFFC भर्नको लागि अगर प्लेटको सतहमा इनक्वेरहरू बनाइएका थिए (HFFC को लागि ३ इनक्वेर र नकारात्मक नियन्त्रणको लागि १)। ३ इनक्वेरमा २०० µl HFFC र चौथो इनक्वेरमा २०० µl pH ७.४ PBS थप्नुहोस्। पेट्री डिशको अर्को छेउमा, ठोस अगरमा १२ मिमी Cp NFRCS डिस्क राख्नुहोस् र PBS (pH ७.४) ले ओसिलो पार्नुहोस्। सिप्रोफ्लोक्सासिन, एम्पिसिलिन र फ्लुकोनाजोल ट्याब्लेटहरूलाई स्टेफिलोकोकस ऑरियस, एस्चेरिचिया कोलाई र क्यान्डिडा एल्बिकान्सका लागि सन्दर्भ मानक मानिन्छ। निषेध क्षेत्रलाई म्यानुअल रूपमा नाप्नुहोस् र निषेध क्षेत्रको डिजिटल छवि लिनुहोस्।
संस्थागत नैतिक स्वीकृति पछि, दक्षिणी भारतको कर्नाटकको मणिपालमा रहेको कस्तुरबा मेडिकल कलेज अफ एजुकेशन एण्ड रिसर्चमा अध्ययन गरिएको थियो। इन भिट्रो TEG प्रयोगात्मक प्रोटोकललाई कर्नाटकको मणिपालस्थित कस्तुरबा मेडिकल कलेजको संस्थागत नैतिकता समिति (IEC: 674/2020) द्वारा समीक्षा र अनुमोदन गरिएको छ। अस्पतालको रक्त बैंकबाट स्वयंसेवक रक्तदाताहरू (१८ देखि ५५ वर्ष उमेरका) बाट विषयहरू भर्ना गरिएको थियो। थप रूपमा, रगतको नमूना सङ्कलनका लागि स्वयंसेवकहरूबाट सूचित सहमति फारम प्राप्त गरिएको थियो। सोडियम साइट्रेटसँग प्रिमिक्स गरिएको सम्पूर्ण रगतमा Cp HFFC सूत्रीकरणको प्रभाव अध्ययन गर्न नेटिभ TEG (N-TEG) ​​प्रयोग गरिएको थियो। N-TEG लाई पोइन्ट-अफ-केयर पुनरुत्थानमा यसको भूमिकाको लागि व्यापक रूपमा मान्यता दिइएको छ, जसले परिणामहरूमा क्लिनिक रूपमा महत्त्वपूर्ण ढिलाइ (नियमित जम्मा परीक्षण) को सम्भावनाको कारणले चिकित्सकहरूको लागि समस्या सिर्जना गर्दछ। N-TEG विश्लेषण सम्पूर्ण रगत प्रयोग गरेर गरिएको थियो। सबै सहभागीहरूबाट सूचित सहमति र विस्तृत चिकित्सा इतिहास प्राप्त गरिएको थियो। अध्ययनमा गर्भावस्था/प्रसवोत्तर वा कलेजो रोग जस्ता हेमोस्टेटिक वा थ्रोम्बोटिक जटिलता भएका सहभागीहरूलाई समावेश गरिएको थिएन। कोगुलेसन क्यास्केडलाई असर गर्ने औषधि लिने विषयहरूलाई पनि अध्ययनबाट बहिष्कृत गरिएको थियो। आधारभूत प्रयोगशाला परीक्षणहरू (हेमोग्लोबिन, प्रोथ्रोम्बिन समय, सक्रिय थ्रोम्बोप्लास्टिन र प्लेटलेट गणना) सबै सहभागीहरूमा मानक प्रक्रियाहरू अनुसार गरिएको थियो। N-TEG ले रगतको थक्का भिस्कोइलास्टिकिटी, प्रारम्भिक थक्का संरचना, कण अन्तरक्रिया, थक्का बलियो बनाउने, र थक्का लिसिस निर्धारण गर्दछ। N-TEG विश्लेषणले धेरै सेलुलर तत्वहरू र प्लाज्माको सामूहिक प्रभावहरूमा ग्राफिकल र संख्यात्मक डेटा प्रदान गर्दछ। N-TEG विश्लेषण Cp HFFC (१० µl र ५० µl) को दुई फरक मात्रामा गरिएको थियो। फलस्वरूप, साइट्रिक एसिड भएको १ मिलीलीटर सम्पूर्ण रगत Cp HFFC को १० μl मा थपियो। १ मिलीलीटर (Cp HFFC + साइट्रेटेड रगत), ३४० µl मिश्रित रगत २० µl ०.२ M CaCl2 युक्त TEG डिशमा थप्नुहोस्। त्यसपछि, Cp HFFC41 को उपस्थितिमा रगतको नमूनाहरूको R, K, अल्फा कोण, MA, G, CI, TPI, EPL, LY ३०% मापन गर्न TEG डिशहरू TEG® 5000, US मा लोड गरियो।
इन भिभो अध्ययन प्रोटोकललाई संस्थागत पशु नैतिकता समिति (IAEC), कस्तुरबा स्कूल अफ मेडिसिन, मणिपाल उच्च शिक्षा संस्थान, मणिपाल (IAEC/KMC/69/2020) द्वारा समीक्षा र अनुमोदन गरिएको थियो। सबै पशु प्रयोगहरू पशु प्रयोग नियन्त्रण र पर्यवेक्षण समिति (CPCSEA) को सिफारिसहरू अनुसार गरिएको थियो। सबै इन भिभो NFRCS अध्ययनहरू (2 × 2 cm2) पोथी विस्टार मुसा (200 देखि 250 ग्राम तौल) मा गरिएको थियो। सबै जनावरहरूलाई 24-26 डिग्री सेल्सियसको तापक्रममा अनुकूलित गरिएको थियो, जनावरहरूलाई मानक खाना र पानीमा निःशुल्क पहुँच थियो। सबै जनावरहरूलाई अनियमित रूपमा विभिन्न समूहहरूमा विभाजित गरिएको थियो, प्रत्येक समूहमा तीन जनावरहरू थिए। सबै अध्ययनहरू पशु अध्ययन: इन भिभो प्रयोगहरूको रिपोर्ट 43 अनुसार गरिएको थियो। अध्ययन गर्नु अघि, जनावरहरूलाई २०-५० मिलीग्राम केटामाइन (प्रति १ किलोग्राम शरीरको तौल) र २-१० मिलीग्राम जाइलाजिन (प्रति १ किलोग्राम शरीरको तौल) को मिश्रणको इन्ट्रापेरिटोनियल (आईपी) प्रशासनद्वारा बेहोस बनाइएको थियो। अध्ययन पछि, नमूनाहरूको प्रारम्भिक र अन्तिम तौल बीचको भिन्नता मूल्याङ्कन गरेर रक्तस्रावको मात्रा गणना गरिएको थियो, तीन परीक्षणहरूबाट प्राप्त औसत मानलाई नमूनाको रक्तस्रावको मात्राको रूपमा लिइएको थियो।
आघात, लडाई, वा ट्राफिक दुर्घटनामा रक्तस्रावलाई मोड्युलेट गर्न NFRCS को सम्भावना बुझ्न मुसाको पुच्छर विच्छेदन मोडेल लागू गरिएको थियो (चोट मोडेल)। सामान्य रक्तस्राव सुनिश्चित गर्न स्केलपेल ब्लेडले पुच्छरको ५०% भाग काट्नुहोस् र १५ सेकेन्डको लागि हावामा राख्नुहोस्। थप रूपमा, दबाब लागू गरेर मुसाको पुच्छरमा परीक्षण नमूनाहरू राखिएका थिए (Ct, Cs, Ch NFRCS र Cp NFRCS)। परीक्षण नमूनाहरूको लागि रक्तस्राव र PCT रिपोर्ट गरिएको थियो (n = 3)17,45।
लडाईमा NFRCS दबाब नियन्त्रणको प्रभावकारिता सतही फेमोरल धमनीको मोडेलमा अनुसन्धान गरिएको थियो। फेमोरल धमनी खुला गरिन्छ, 24G ट्रोकारले पङ्क्चर गरिन्छ र 15 सेकेन्ड भित्र रक्तस्राव हुन्छ। अनियन्त्रित रक्तस्राव अवलोकन गरिसकेपछि, परीक्षण नमूनालाई दबाब लागू गरेर पङ्चर साइटमा राखिन्छ। परीक्षण नमूना लागू गरेपछि तुरुन्तै, क्लोटिंग समय रेकर्ड गरियो र अर्को 5 मिनेटको लागि हेमोस्टेटिक दक्षता अवलोकन गरियो। Cs र Ct46 सँग पनि उही प्रक्रिया दोहोर्याइएको थियो।
डाउलिंग एट अल। ४७ ले शल्यक्रिया अन्तरगत रक्तस्रावको सन्दर्भमा हेमोस्टेटिक सामग्रीहरूको हेमोस्टेटिक क्षमताको मूल्याङ्कन गर्न कलेजोको चोट मोडेल प्रस्ताव गरे। Ct नमूनाहरू (नकारात्मक नियन्त्रण), Cs फ्रेमवर्क (सकारात्मक नियन्त्रण), Ch NFRCS नमूनाहरू, र Cp NFRCS नमूनाहरूको लागि BCT रेकर्ड गरिएको थियो। मध्य ल्याप्रोटोमी गरेर मुसाको सुप्राहेप्याटिक भेना काभालाई उजागर गरिएको थियो। त्यसपछि, बायाँ लोबको टाढाको भाग कैंचीले काटियो। स्केलपेल ब्लेडले कलेजोमा चीरा बनाउनुहोस् र केही सेकेन्डको लागि रगत बग्न दिनुहोस्। सही रूपमा तौल गरिएको Ch NFRCS र Cp NFRCS परीक्षण नमूनाहरू क्षतिग्रस्त सतहमा कुनै सकारात्मक दबाब बिना राखियो र BCT रेकर्ड गरियो। त्यसपछि नियन्त्रण समूह (Ct) ले चोट नतोडेर Cs ३० s४७ पछि दबाब लागू गर्‍यो।
विकसित पोलिमर-आधारित NFRCSs को घाउ निको पार्ने गुणहरूको मूल्याङ्कन गर्न एक्सिजनल घाउ मोडेल प्रयोग गरेर इन भिभो घाउ निको पार्ने परीक्षणहरू गरिएको थियो। एक्सिजनल घाउहरूको मोडेलहरू छनोट गरी पहिले प्रकाशित विधिहरू अनुसार सानो परिमार्जनहरू १९,३२,४८ अनुसार प्रदर्शन गरिएको थियो। पहिले वर्णन गरिए अनुसार सबै जनावरहरूलाई एनेस्थेटाइज गरिएको थियो। पछाडिको छालामा गोलाकार गहिरो चीरा बनाउन बायोप्सी पंच (१२ मिमी) प्रयोग गर्नुहोस्। तयार गरिएका घाउ ठाउँहरूलाई Cs (सकारात्मक नियन्त्रण), Ct (कपास प्याडहरूले निको पार्ने काममा हस्तक्षेप गर्छ भनेर पहिचान गर्दै), Ch NFRCS र Cp NFRCS (प्रयोगात्मक समूह) र कुनै पनि उपचार बिना नकारात्मक नियन्त्रणले ड्रेस गरिएको थियो। अध्ययनको प्रत्येक दिन, सबै मुसाहरूमा घाउको क्षेत्र मापन गरिएको थियो। घाउ क्षेत्रको तस्वीर लिन र नयाँ ड्रेसिङ लगाउन डिजिटल क्यामेरा प्रयोग गर्नुहोस्। घाउ बन्द हुने प्रतिशत निम्न सूत्रद्वारा मापन गरिएको थियो:
अध्ययनको १२ औं दिनमा घाउ बन्द भएको प्रतिशतको आधारमा, उत्तम समूहको मुसाको छाला ((Cp NFRCS) र नियन्त्रण समूह) निकालियो र H&E स्टेनिङ र म्यासनको ट्राइक्रोम स्टेनिङद्वारा अध्ययन गरियो। अध्ययनको १२ औं दिनमा घाउ बन्द भएको प्रतिशतको आधारमा, उत्तम समूहको मुसाको छाला ((Cp NFRCS) र नियन्त्रण समूह) निकालियो र H&E स्टेनिङ र म्यासनको ट्राइक्रोम स्टेनिङद्वारा अध्ययन गरियो।अध्ययनको १२ औं दिनमा घाउ बन्द भएको प्रतिशतको आधारमा, उत्तम समूह ((Cp NFRCS) र नियन्त्रण समूह) का मुसाहरूको छालालाई हेमेटोक्सिलिन-इओसिन र म्यासनको ट्राइक्रोमले दाग लगाएर निकालेर जाँच गरियो।根据研究第12天的伤口闭合百分比,切除最佳组(Cp NFRCS)和对照组)的大鼠皮肤,进行H&E染色和Masson三色染色研究।根据研究第12天的伤口闭合百分比,切除最佳组(Cp NFRCS)和对照组)的大鼠皮肤,进行H&E染色和眳组）अध्ययनको १२ औं दिनमा घाउ बन्द हुने प्रतिशतको आधारमा हेमेटोक्सिलिन-इओसिन स्टेनिङ र म्यासनको ट्राइक्रोम स्टेनिङको लागि उत्कृष्ट समूह ((Cp NFRCS) र नियन्त्रण समूहहरू) मा रहेका मुसाहरू काटिएका थिए।कार्यान्वयन गरिएको दाग प्रक्रिया पहिले वर्णन गरिएका विधिहरू अनुसार गरिएको थियो49,50। छोटकरीमा, १०% फर्मालिनमा फिक्सेसन पछि, नमूनाहरूलाई ग्रेडेड अल्कोहलहरूको श्रृंखला प्रयोग गरेर निर्जलित गरिएको थियो। एक्साइज गरिएको तन्तुको पातलो खण्डहरू (५ µm बाक्लो) प्राप्त गर्न माइक्रोटोम प्रयोग गर्नुहोस्। हिस्टोपाथोलोजिकल परिवर्तनहरू अध्ययन गर्न नियन्त्रण र Cp NFRCS को पातलो क्रमिक खण्डहरूलाई हेमेटोक्सिलिन र इओसिनले उपचार गरिएको थियो। कोलाजेन फाइब्रिलहरूको गठन पत्ता लगाउन म्यासनको ट्राइक्रोम दाग प्रयोग गरिएको थियो। प्राप्त परिणामहरू रोगविज्ञानीहरूले अन्धाधुन्ध अध्ययन गरेका थिए।
Cp NFRCS नमूनाहरूको स्थिरता १२ महिनाको लागि कोठाको तापक्रम (२५°C ± २°C/६०% RH ± ५%) मा अध्ययन गरिएको थियो। Cp NFRCS (सतहको विकृति र माइक्रोबियल वृद्धि) लाई सामग्री र विधि खण्डमा उल्लिखित माथिका विधिहरू अनुसार फोल्ड वेयर प्रतिरोध र BCT को लागि दृश्यात्मक रूपमा निरीक्षण र परीक्षण गरिएको थियो।
Cp NFRCS को स्केलेबिलिटी र प्रजनन क्षमता १५×१५ cm2 आकारको Cp NFRCS तयार गरेर जाँच गरिएको थियो। यसको अतिरिक्त, विभिन्न Cp NFRCS अंशहरूबाट ३० मिलीग्राम नमूनाहरू (n = ५) निकालिएका थिए र अध्ययन गरिएका नमूनाहरूको BCT विधि खण्डमा पहिले वर्णन गरिए अनुसार मूल्याङ्कन गरिएको थियो।
हामीले विभिन्न बायोमेडिकल अनुप्रयोगहरूको लागि Cp NFRCS रचनाहरू प्रयोग गरेर विभिन्न आकार र संरचनाहरू विकास गर्ने प्रयास गरेका छौं। त्यस्ता आकार वा कन्फिगरेसनहरूमा नाकबाट रगत बग्ने, दन्त प्रक्रियाहरूको लागि कोनिकल स्वाबहरू, र योनिबाट रक्तस्रावको लागि बेलनाकार स्वाबहरू समावेश छन्।
सबै डेटा सेटहरूलाई औसत ± मानक विचलनको रूपमा व्यक्त गरिएको छ र ANOVA द्वारा प्रिज्म 5.03 (ग्राफप्याड, सान डिएगो, CA, USA) प्रयोग गरेर विश्लेषण गरिएको थियो र त्यसपछि बोनफेरोनीको बहु तुलना परीक्षण (*p<0.05) गरिएको थियो।
मानव अध्ययनमा गरिएका सबै प्रक्रियाहरू संस्थान र राष्ट्रिय अनुसन्धान परिषद्को मापदण्ड, साथै हेलसिंकीको घोषणापत्र १९६४ र त्यसपछिका संशोधनहरू, वा समान नैतिक मापदण्डहरू अनुरूप थिए। सबै सहभागीहरूलाई अध्ययनका विशेषताहरू र यसको स्वैच्छिक प्रकृतिको बारेमा जानकारी गराइएको थियो। सहभागीको डेटा सङ्कलन गरेपछि गोप्य रहन्छ। इन भिट्रो TEG प्रयोगात्मक प्रोटोकललाई कर्नाटकको मणिपालस्थित कस्तुरबा मेडिकल कलेजको संस्थागत नैतिकता समिति (IEC: ६७४/२०२०) द्वारा समीक्षा र अनुमोदन गरिएको छ। स्वयंसेवकहरूले रगतको नमूना सङ्कलन गर्न सूचित सहमतिमा हस्ताक्षर गरे।
पशु अध्ययनमा गरिएका सबै प्रक्रियाहरू कस्तुबा संकाय चिकित्सा संकाय, मणिपाल उच्च शिक्षा संस्थान, मणिपाल (IAEC/KMC/69/2020) अनुसार गरिएको थियो। डिजाइन गरिएका सबै पशु प्रयोगहरू पशु प्रयोग नियन्त्रण र पर्यवेक्षण समिति (CPCSEA) को दिशानिर्देशहरू अनुसार गरिएको थियो। सबै लेखकहरूले ARRIVE दिशानिर्देशहरू पालना गर्छन्।
सबै NFRCS को FTIR स्पेक्ट्राको विश्लेषण गरिएको थियो र चित्र २A मा देखाइएको chitosan स्पेक्ट्रमसँग तुलना गरिएको थियो। chitosan को विशेषता वर्णक्रमीय शिखरहरू (रेकर्ड गरिएको) ३४३७ cm-१ (OH र NH स्ट्रेचिङ, ओभरल्याप), २९४५ र २८९७ cm-१ (CH स्ट्रेचिङ), १६६० cm-१ (NH२ स्ट्रेन), १५८९ cm-१ (N–H बेन्डिङ), ११५७ cm-१ (ब्रिज स्ट्रेच O-), १०६७ cm-१ (स्ट्रेच C–O, सेकेन्डरी हाइड्रोक्सिल), ९९३ cm-१ (स्ट्रेच CO, Bo-OH) ५२.५३.५४ मा। पूरक तालिका S1 ले chitosan (रिपोर्टर), शुद्ध chitosan, Cm, Ch, र Cp को लागि FTIR NFRCS अवशोषण स्पेक्ट्रम मानहरू देखाउँछ। सबै NFRCS (Cm, Ch र Cp) को FTIR स्पेक्ट्राले कुनै पनि महत्त्वपूर्ण परिवर्तन बिना शुद्ध chitosan जस्तै विशेषता अवशोषण ब्यान्डहरू देखायो (चित्र 2A)। FTIR नतिजाहरूले NFRCS विकास गर्न प्रयोग गरिएका पोलिमरहरू बीच रासायनिक वा भौतिक अन्तरक्रियाको अनुपस्थिति पुष्टि गर्‍यो, जसले प्रयोग गरिएका पोलिमरहरू निष्क्रिय छन् भनेर संकेत गर्दछ।
Cm NFRCS, Ch NFRCS, Cp NFRCS र Cs को इन भिट्रो विशेषता। (A) ले कम्प्रेसन अन्तर्गत chitosan र Cm NFRCS, Ch NFRCS र Cp NFRCS को रचनाहरूको संयुक्त FTIR स्पेक्ट्रा प्रतिनिधित्व गर्दछ। (B) a) NFRCS Cm, Ch, Cp, र Cg को सम्पूर्ण रगत अवशोषण दर (n = 3); Ct नमूनाहरूले उच्च BAR देखाए किनभने कपास स्वाबको उच्च अवशोषण दक्षता छ; b) रगत अवशोषण पछि रगत अवशोषित नमूनाको चित्रण। परीक्षण नमूना C को BCT को ग्राफिकल प्रतिनिधित्व (Cp NFRCS मा सबैभन्दा राम्रो BCT थियो (15 s, n = 3))। C, D, E, र G मा डेटा औसत ± SD को रूपमा देखाइएको थियो, र त्रुटि पट्टीहरूले SD, ***p < ०.०००१ लाई प्रतिनिधित्व गर्दछ। C, D, E, र G मा डेटा औसत ± SD को रूपमा देखाइएको थियो, र त्रुटि पट्टीहरूले SD, ***p < ०.०००१ लाई प्रतिनिधित्व गर्दछ। C, D, E и G представлены как среднее ± стандартное отклонение, а планки погрешностей представляют стандартное представляют стандартное *** <0,0001। C, D, E, र G मा डेटा औसत ± मानक विचलनको रूपमा प्रस्तुत गरिएको छ, र त्रुटि पट्टीहरूले मानक विचलन, ***p<0.0001 लाई प्रतिनिधित्व गर्दछ। C、D、E 和G 中的数据显示为平均值± SD,误差线代表SD,***p <0.0001। C、D、E 和G 中的数据显示为平均值± SD,误差线代表SD,***p <0.0001। C, D, E र G показаны как среднее значение ± стандартное отклонение, планки погрешностей представляют стандоение <0,0001। C, D, E, र G मा डेटा औसत ± मानक विचलनको रूपमा देखाइएको छ, त्रुटि पट्टीहरूले मानक विचलनलाई प्रतिनिधित्व गर्दछ, ***p<0.0001।