Nature.com தளத்திற்கு வருகை தந்ததற்கு நன்றி. நீங்கள் பயன்படுத்தும் உலாவியில் CSS ஆதரவு குறைவாக உள்ளது. சிறந்த அனுபவத்தைப் பெற, மேம்படுத்தப்பட்ட உலாவியைப் பயன்படுத்துமாறு (அல்லது இன்டர்நெட் எக்ஸ்ப்ளோரரில் இணக்கப் பயன்முறையை முடக்குமாறு) பரிந்துரைக்கிறோம். இதற்கிடையில், தொடர்ச்சியான ஆதரவை உறுதிசெய்யும் வகையில், நாங்கள் இந்தத் தளத்தை ஸ்டைல்கள் மற்றும் ஜாவாஸ்கிரிப்ட் இல்லாமல் வழங்குவோம்.
கட்டுப்படுத்த முடியாத இரத்தப்போக்கு மரணத்திற்கான முக்கிய காரணங்களில் ஒன்றாகும். போர், சாலை விபத்துகள் மற்றும் இறப்பு குறைப்பு நடவடிக்கைகளின் போது முதலுதவியாக, விரைவான இரத்தப்போக்கு நிறுத்தத்தை அடைவது சம்பந்தப்பட்ட நபரின் உயிர் பிழைப்பை உறுதி செய்கிறது. ஒரு தொடர்ச்சியான கட்டமாக, எளிய இரத்தப்போக்கு தடுப்பு படலம் உருவாக்கும் கலவையிலிருந்து (HFFC) பெறப்பட்ட நானோபோரஸ் ஃபைபர்-வலுவூட்டப்பட்ட கூட்டு சாரக்கட்டு (NFRCS), இரத்தப்போக்கு நிறுத்தத்தைத் தூண்டி மேம்படுத்தும் திறன் கொண்டது. NFRCS-இன் உருவாக்கம் தும்பியின் இறக்கை வடிவமைப்பை அடிப்படையாகக் கொண்டது. தும்பியின் இறக்கை அமைப்பு குறுக்கு மற்றும் நீளவாட்டு இறக்கைகளைக் கொண்டுள்ளது, மேலும் அதன் நுண் கட்டமைப்பின் ஒருமைப்பாட்டைப் பராமரிக்க இறக்கை சவ்வுகள் ஒன்றோடொன்று இணைக்கப்பட்டுள்ளன. HFFC, ஃபைபரின் மேற்பரப்பில் நானோமீட்டர் தடிமன் கொண்ட ஒரு படலத்தை சீராகப் பூசி, சீரற்ற முறையில் விநியோகிக்கப்பட்ட பருத்தி தடிமனை (Ct) (சிதறிய கட்டம்) இணைத்து ஒரு நானோபோரஸ் கட்டமைப்பை உருவாக்குகிறது. தொடர்ச்சியான மற்றும் சிதறிய கட்டங்களின் இந்த இணைப்பு, வணிக ரீதியாகக் கிடைக்கும் தயாரிப்புகளுடன் ஒப்பிடும்போது, ​​பொருளின் விலையை பத்து மடங்கு குறைக்கிறது. மாற்றியமைக்கப்பட்ட NFRCS (டேம்பன்கள் அல்லது மணிக்கட்டுப் பட்டைகள்) பல்வேறு உயிர்மருத்துவப் பயன்பாடுகளில் பயன்படுத்தப்படலாம். உருவாக்கப்பட்ட Cp NFRCS, பயன்படுத்தப்படும் இடத்தில் இரத்த உறைதல் செயல்முறையைத் தூண்டி மேம்படுத்துகிறது என்று உயிரினங்களுக்குள் செய்யப்பட்ட ஆய்வுகள் முடிவு செய்துள்ளன. NFRCS அதன் நானோபோரஸ் அமைப்பு காரணமாக நுண்சூழலை நெறிப்படுத்தி, செல்லுலார் மட்டத்தில் செயல்படுவதால், வெட்டுக்காய மாதிரியில் சிறந்த காயம் குணமடைதல் ஏற்படுகிறது.
போர், அறுவை சிகிச்சையின் போது மற்றும் அவசரகால சூழ்நிலைகளில் ஏற்படும் கட்டுப்பாடற்ற இரத்தப்போக்கு, காயமடைந்தவர்களின் உயிருக்கு கடுமையான அச்சுறுத்தலை ஏற்படுத்தக்கூடும்¹. இந்த நிலைமைகள் மேலும் புற இரத்த நாளங்களின் எதிர்ப்பை ஒட்டுமொத்தமாக அதிகரித்து, இரத்தக் கசிவு அதிர்ச்சிக்கு வழிவகுக்கின்றன. அறுவை சிகிச்சையின் போதும் அதற்குப் பின்னரும் இரத்தப்போக்கைக் கட்டுப்படுத்த எடுக்கப்படும் தகுந்த நடவடிக்கைகள் உயிருக்கு ஆபத்தானவையாகக் கருதப்படுகின்றன²,³. பெரிய இரத்த நாளங்களுக்கு ஏற்படும் சேதம் பெரும் இரத்த இழப்புக்கு வழிவகுக்கிறது, இதன் விளைவாக போரில் இறப்பு விகிதம் ≤ 50% ஆகவும், அறுவை சிகிச்சையின் போது 31% ஆகவும் உள்ளது¹. பெரும் இரத்த இழப்பு உடல் கனஅளவைக் குறைத்து, இதய வெளியீட்டைக் குறைக்கிறது. மொத்த புற இரத்த நாளங்களின் எதிர்ப்பு அதிகரிப்பதும், நுண் இரத்த ஓட்டம் படிப்படியாகக் குறைவதும் உயிர் காக்கும் உறுப்புகளில் ஆக்சிஜன் பற்றாக்குறைக்கு வழிவகுக்கிறது. பயனுள்ள தலையீடு இல்லாமல் இந்த நிலை தொடர்ந்தால் இரத்தக் கசிவு அதிர்ச்சி ஏற்படலாம்¹,⁴,⁵. உடல் வெப்பநிலை குறைதல் மற்றும் வளர்சிதை அமிலத்தன்மை அதிகரித்தல், அத்துடன் இரத்த உறைதல் செயல்முறையைத் தடுக்கும் இரத்த உறைதல் கோளாறு போன்றவையும் பிற சிக்கல்களில் அடங்கும். கடுமையான இரத்தக் கசிவு அதிர்ச்சி அதிக இறப்பு அபாயத்துடன் தொடர்புடையது⁶,⁷,⁸. மூன்றாம் நிலை (தொடர்ந்து தீவிரமடையும்) அதிர்ச்சி நிலையில், அறுவை சிகிச்சையின் போதும் அதற்குப் பின்னரும் ஏற்படும் நோயுற்ற தன்மை மற்றும் இறப்பு ஆகியவற்றின் போது நோயாளியின் உயிர் பிழைப்பிற்கு இரத்தமாற்றம் அவசியமாகிறது. மேற்கூறிய அனைத்து உயிருக்கு ஆபத்தான சூழ்நிலைகளையும் சமாளிப்பதற்காக, நீரில் கரையக்கூடிய இரத்தப்போக்கு தடுப்பு பாலிமர்களின் கலவையைப் பயன்படுத்தி, மிகக் குறைந்த பாலிமர் செறிவில் (0.5%) செயல்படும் நானோபோரஸ் ஃபைபர்-வலுவூட்டப்பட்ட கூட்டு ஸ்கேஃபோல்டை (NFRCS) நாங்கள் உருவாக்கியுள்ளோம்.
நார் வலுவூட்டலைப் பயன்படுத்துவதன் மூலம், செலவு குறைந்த தயாரிப்புகளை உருவாக்க முடியும். சீரற்ற முறையில் அமைக்கப்பட்ட நார்கள், தும்பியின் இறக்கையின் அமைப்பை ஒத்திருக்கின்றன; இறக்கைகளில் உள்ள கிடைமட்ட மற்றும் செங்குத்துக் கோடுகளால் இது சமநிலைப்படுத்தப்படுகிறது. இறக்கையின் குறுக்கு மற்றும் நீளவாட்டு நரம்புகள் இறக்கைச் சவ்வுடன் தொடர்பு கொள்கின்றன (படம் 1). NFRCS ஆனது, சிறந்த இயற்பியல் மற்றும் இயந்திர வலிமையுடன் கூடிய ஒரு சாரக்கட்டு அமைப்பாக, வலுவூட்டப்பட்ட பருத்தி நூலைக் (Ct) கொண்டுள்ளது (படம் 1). மலிவு விலை மற்றும் கைவினைத்திறன் காரணமாக, அறுவை சிகிச்சை நிபுணர்கள் அறுவை சிகிச்சைகள் மற்றும் காயக்கட்டுகளின் போது பருத்தி நூல் அளவிகளை (Ct) பயன்படுத்த விரும்புகிறார்கள். எனவே, 90% க்கும் அதிகமான படிக செல்லுலோஸ் (இரத்தப்போக்கு தடுப்பு செயல்பாட்டை மேம்படுத்துவதில் பங்களிக்கிறது) உள்ளிட்ட அதன் பல நன்மைகளைக் கருத்தில் கொண்டு, Ct ஆனது NFRCS9,10 இன் எலும்புக்கூட்டு அமைப்பாகப் பயன்படுத்தப்பட்டது. எனவே, 90% க்கும் அதிகமான படிக செல்லுலோஸ் (இரத்தப்போக்கு தடுப்பு செயல்பாட்டை மேம்படுத்துவதில் பங்களிக்கிறது) உள்ளிட்ட அதன் பல நன்மைகளைக் கருத்தில் கொண்டு, Ct ஆனது NFRCS9,10 இன் எலும்புக்கூட்டு அமைப்பாகப் பயன்படுத்தப்பட்டது. க்ளெடோவடெல்னோ, உச்சித்வயா எகோ மெனோகோச்சிஸ்லென்னியே ப்ரீமியூஷெஸ்ட்வா, வி டாம் சிஸ்லே > 90% கிரிஸ்டலிசெஸ்காய் (சுருட்டல் பொவிஷெனிகள் கேமஸ்டாட்டிக் ஆக்டிவ்னோஸ்டி), சி.டி. எனவே, 90% க்கும் அதிகமான படிக செல்லுலோஸ் (அதிகரித்த இரத்த உறைதல் செயல்பாட்டில் ஈடுபட்டுள்ளது) உள்ளிட்ட அதன் பல நன்மைகளைக் கருத்தில் கொண்டு, Ct ஆனது NFRCS எலும்புக்கூட்டு அமைப்பாகப் பயன்படுத்தப்பட்டது9,10.因此，考虑到它的多重益处，包括> 90% 的结晶纤维素被用作NFRCS9,10 的骨架系统。因此，考虑到它的多重益处，包括> 90%எனவே, 90% க்கும் அதிகமான படிக செல்லுலோஸ் (இரத்தப்போக்கு தடுப்பு செயல்பாட்டை மேம்படுத்த உதவுகிறது) உள்ளிட்ட அதன் பல நன்மைகளைக் கருத்தில் கொண்டு, NFRCS9,10 க்கு ஒரு கட்டமைப்பாக Ct பயன்படுத்தப்பட்டது.Ct ஆனது மேலோட்டமாகப் பூசப்பட்டு (நானோ-தடிமன் கொண்ட படல உருவாக்கம் காணப்பட்டது) மற்றும் ஒரு இரத்தப்போக்கை நிறுத்தும் படலம் உருவாக்கும் கலவையுடன் (HFFC) இணைக்கப்பட்டது. HFFC ஒரு மேட்ரிஜெல் போலச் செயல்பட்டு, சீரற்ற முறையில் வைக்கப்பட்ட Ct-ஐ ஒன்றாகப் பிடித்து வைக்கிறது. உருவாக்கப்பட்ட இந்த வடிவமைப்பு, சிதறடிக்கப்பட்ட கட்டத்திற்குள் (வலுவூட்டும் இழைகள்) அழுத்தத்தைக் கடத்துகிறது. குறைந்தபட்ச பாலிமர் செறிவுகளைப் பயன்படுத்தி நல்ல இயந்திர வலிமையுடன் கூடிய நானோபோரஸ் கட்டமைப்புகளைப் பெறுவது கடினம். மேலும், வெவ்வேறு உயிர்மருத்துவப் பயன்பாடுகளுக்கு வெவ்வேறு அச்சுகளைத் தனிப்பயனாக்குவதும் எளிதல்ல.
இந்தப் படம் தும்பியின் இறக்கை அமைப்பை அடிப்படையாகக் கொண்ட NFRCS வடிவமைப்பின் வரைபடத்தைக் காட்டுகிறது (A). இந்தப் படம் தும்பியின் இறக்கை அமைப்பின் ஒப்பீட்டு ஒப்புமையையும் (இறக்கையின் குறுக்கிடும் மற்றும் நீளமான நரம்புகள் ஒன்றோடொன்று இணைக்கப்பட்டுள்ளன) மற்றும் Cp NFRCS-இன் குறுக்குவெட்டு ஒளிநுண்படத்தையும் காட்டுகிறது (B). NFRCS-இன் திட்ட வரைபடம்.
மேற்கண்ட வரம்புகளை நிவர்த்தி செய்வதற்காக, HFFC-ஐ ஒரு தொடர் கட்டமாகப் பயன்படுத்தி NFRC-கள் உருவாக்கப்பட்டன. HFFC என்பது, இரத்த உறைவு உருவாவதை ஊக்குவிக்கும் ஒரு துணைப் பாலிமராக மெத்தில்செல்லுலோஸ் (MC), ஹைட்ராக்ஸிபுரோப்பைல் மெத்தில்செல்லுலோஸ் (HPMC 50 cp) மற்றும் பாலிவினைல் ஆல்கஹால் (PVA) (125 kDa) ஆகியவற்றுடன், கைட்டோசானை (முக்கிய இரத்த உறைவு பாலிமராக) உள்ளடக்கிய பல்வேறு படலம் உருவாக்கும் இரத்த உறைவு பாலிமர்களால் ஆனது. பாலிவினைல்பைரோலிடின் K30 (PVP K30) சேர்க்கப்பட்டதால், NFRCS-இன் ஈரப்பதம் உறிஞ்சும் திறன் மேம்பட்டது. பிணைக்கப்பட்ட பாலிமர் கலவைகளில் பாலிமர் குறுக்குப்பிணைப்பை மேம்படுத்துவதற்காக பாலிஎதிலீன் கிளைக்கால் 400 (PEG 400) சேர்க்கப்பட்டது. மூன்று வெவ்வேறு HFFC இரத்த உறைவு கலவைகள் (Cm HFFC, Ch HFFC மற்றும் Cp HFFC), அதாவது MC உடன் கைட்டோசான் (Cm), HPMC உடன் கைட்டோசான் (Ch), மற்றும் PVA உடன் கைட்டோசான் (Cp) ஆகியவை Ct-இல் பயன்படுத்தப்பட்டன. பல்வேறு இன் விட்ரோ மற்றும் இன் விவோ பண்புக்கூறு ஆய்வுகள், NFRCS-இன் இரத்தப்போக்கை நிறுத்தும் மற்றும் காயங்களை ஆற்றும் செயல்பாட்டை உறுதிப்படுத்தியுள்ளன. NFRCS வழங்கும் கூட்டுப் பொருட்களைக் கொண்டு, குறிப்பிட்ட தேவைகளைப் பூர்த்தி செய்யும் வகையில் பல்வேறு வகையான சாரக்கட்டுகளைத் தனிப்பயனாக்கலாம்.
மேலும், கீழ் முனைகள் மற்றும் உடலின் பிற பாகங்களில் உள்ள காயம்பட்ட முழுப் பகுதியையும் மூடுவதற்கு, NFRCS-ஐ ஒரு கட்டு அல்லது சுருளாக மாற்றியமைக்க முடியும். குறிப்பாகப் போர்க்கால கை, கால் காயங்களுக்கு, வடிவமைக்கப்பட்ட NFRCS வடிவமைப்பை அரை கை அல்லது முழு கால் அளவிற்கு மாற்றியமைக்கலாம் (துணைப் படம் S11). திசுப் பசையைக் கொண்டு NFRCS-ஐ மணிக்கட்டுப் பட்டையாக உருவாக்கலாம், இது கடுமையான தற்கொலை மணிக்கட்டுக் காயங்களிலிருந்து ஏற்படும் இரத்தப்போக்கை நிறுத்தப் பயன்படும். வறுமைக் கோட்டிற்குக் கீழ் உள்ள ஒரு பெரிய மக்கள் தொகைக்கு வழங்கக்கூடிய மற்றும் முதலுதவிப் பெட்டியில் வைக்கக்கூடிய, முடிந்தவரை குறைந்த பாலிமரைக் கொண்ட ஒரு NFRCS-ஐ உருவாக்குவதே எங்கள் முக்கிய இலக்காகும். வடிவமைப்பில் எளிமையான, திறமையான மற்றும் சிக்கனமான NFRCS, உள்ளூர் சமூகங்களுக்குப் பயனளிப்பதோடு, உலகளாவிய தாக்கத்தையும் ஏற்படுத்தக்கூடியது.
சிட்டோசான் (மூலக்கூறு எடை 80 kDa) மற்றும் அமராந்த் ஆகியவை இந்தியாவின் மெர்க் நிறுவனத்திடமிருந்து வாங்கப்பட்டன. ஹைட்ராக்ஸிபுரோப்பைல் மெத்தில்செல்லுலோஸ் 50 Cp, பாலிஎதிலீன் கிளைக்கால் 400 மற்றும் மெத்தில்செல்லுலோஸ் ஆகியவை மும்பையின் லோபா கெமி பிரைவேட் எல்.எல்.சி. நிறுவனத்திடமிருந்து வாங்கப்பட்டன. பாலிவினைல் ஆல்கஹால் (மூலக்கூறு எடை 125 kDa) (87-90% நீராற்பகுக்கப்பட்டது) குஜராத்தின் நேஷனல் கெமிக்கல்ஸ் நிறுவனத்திடமிருந்து வாங்கப்பட்டது. பாலிவினைல்பைரோலிடின் K30 மும்பையின் மோலிகெம் நிறுவனத்திடமிருந்தும், கிருமியழிக்கப்பட்ட பஞ்சுத் துடைப்பான்கள் தமிழ்நாட்டின் ராமராஜு சர்ஜரி காட்டன் மில்ஸ் லிமிடெட் நிறுவனத்திடமிருந்தும், மில்லி க்யூ நீர் (டிரெக்ட்-க்யூ3 நீர் சுத்திகரிப்பு அமைப்பு, மெர்க், இந்தியா) கடத்தியாகவும் வாங்கப்பட்டன.
NFRCS, உறைநிலை உலர்த்தல் முறையைப் பயன்படுத்தி உருவாக்கப்பட்டது¹¹,¹². அனைத்து HFFC கலவைகளும் (அட்டவணை 1) ஒரு இயந்திரக் கலக்கியைப் பயன்படுத்தித் தயாரிக்கப்பட்டன. ஒரு இயந்திரக் கலக்கியில் 800 rpm வேகத்தில் தொடர்ச்சியாகக் கலக்குவதன் மூலம், நீரில் 1% அசிட்டிக் அமிலத்தைப் பயன்படுத்தி 0.5% கைட்டோசான் கரைசலைத் தயாரிக்கவும். அட்டவணை 1-இல் குறிப்பிடப்பட்டுள்ள ஏற்றப்பட்ட பாலிமரின் சரியான எடை, கைட்டோசான் கரைசலில் சேர்க்கப்பட்டு, தெளிவான பாலிமர் கரைசல் கிடைக்கும் வரை கலக்கப்பட்டது. இதன் விளைவாகக் கிடைத்த கலவையில், அட்டவணை 1-இல் குறிப்பிடப்பட்டுள்ள அளவுகளில் PVP K30 மற்றும் PEG 400 சேர்க்கப்பட்டு, தெளிவான பிசுபிசுப்பான பாலிமர் கரைசல் கிடைக்கும் வரை கலக்குதல் தொடரப்பட்டது. இதன் விளைவாகக் கிடைத்த பாலிமர் கரைசல் தொட்டியானது, பாலிமர் கலவையிலிருந்து சிக்கியுள்ள காற்று குமிழ்களை அகற்ற 60 நிமிடங்களுக்கு மீயொலி அலைகளுக்கு உட்படுத்தப்பட்டது. துணைப் படம் S1(b)-இல் காட்டப்பட்டுள்ளபடி, 5 மிலி HFFC சேர்க்கப்பட்ட 6-குழித் தட்டின் (அச்சு) ஒவ்வொரு குழியிலும் Ct சமமாகப் பரப்பப்பட்டது.
Ct வலைப்பின்னலில் HFFC-யின் சீரான ஈரப்பதத்தையும் பரவலையும் அடைவதற்காக, ஆறு-குழித் தட்டு 60 நிமிடங்களுக்கு மீயொலி அலைகளுக்கு உட்படுத்தப்பட்டது. பின்னர், அந்த ஆறு-குழித் தட்டு 8-12 மணி நேரத்திற்கு -20°C வெப்பநிலையில் உறைய வைக்கப்பட்டது. NFRCS-இன் பல்வேறு கலவைகளைப் பெறுவதற்காக, உறைநிலைத் தட்டுகள் 48 மணி நேரத்திற்கு உறைநிலை உலர்த்தலுக்கு உட்படுத்தப்பட்டன. டம்பான்கள் அல்லது உருளை வடிவ டம்பான்கள், அல்லது வெவ்வேறு பயன்பாடுகளுக்கான வேறு எந்த வடிவம் போன்ற பல்வேறு வடிவங்களையும் கட்டமைப்புகளையும் உற்பத்தி செய்ய இதே செயல்முறை பயன்படுத்தப்படுகிறது.
துல்லியமாக எடைபோடப்பட்ட சிட்டோசான் (80 kDa) (3%), ஒரு காந்தக் கலக்கியைப் பயன்படுத்தி 1% அசிட்டிக் அமிலத்தில் கரைக்கப்படுகிறது. இதன் விளைவாகக் கிடைத்த சிட்டோசான் கரைசலுடன் 1% PEG 400 சேர்க்கப்பட்டு 30 நிமிடங்கள் கலக்கப்பட்டது. இதன் விளைவாகக் கிடைத்த கரைசலை ஒரு சதுர அல்லது செவ்வக வடிவக் கொள்கலனில் ஊற்றி, -80°C வெப்பநிலையில் 12 மணி நேரம் உறைய வைக்கவும். உறைந்த மாதிரிகள், நுண்துளைகளுடைய Cs13-ஐப் பெறுவதற்காக 48 மணி நேரம் உறைநிலை உலர்த்தலுக்கு உட்படுத்தப்பட்டன.
உருவாக்கப்பட்ட NFRCS, சிட்டோசானின் வேதியியல் இணக்கத்தன்மையை மற்ற பாலிமர்களுடன்¹⁴,¹⁵ உறுதி செய்வதற்காக, ஃபோரியர் டிரான்ஸ்ஃபார்ம் அகச்சிவப்பு நிறமாலையியல் (FTIR) (ஷிமாட்சு 8400 s FTIR, டோக்கியோ, ஜப்பான்) பயன்படுத்தி சோதனைகளுக்கு உட்படுத்தப்பட்டது. சோதிக்கப்பட்ட அனைத்து மாதிரிகளின் FTIR நிறமாலைகள் (நிறமாலை வரம்பின் அகலம் 400 முதல் 4000 cm⁻¹ வரை) 32 ஸ்கேன்களைச் செய்வதன் மூலம் பெறப்பட்டன.
அனைத்து ஃபார்முலேஷன்களுக்குமான இரத்த உறிஞ்சும் விகிதம் (BAR), சென் மற்றும் குழுவினரால் விவரிக்கப்பட்ட முறையை 16 சிறிய மாற்றங்களுடன் பயன்படுத்தி மதிப்பிடப்பட்டது. அனைத்து கலவைகளின் உருவாக்கப்பட்ட NFRK-களும், எஞ்சிய கரைப்பானை அகற்ற, 105°C வெப்பநிலையில் ஒரு வெற்றிட அடுப்பில் இரவு முழுவதும் உலர்த்தப்பட்டன. 30 மி.கி NFRCS (ஆரம்ப மாதிரி எடை – W0) மற்றும் 30 மி.கி Ct (நேர்மறை கட்டுப்பாடு) ஆகியவை 3.8% சோடியம் சிட்ரேட் ப்ரீமிக்ஸ் கொண்ட தனித்தனி தட்டுகளில் வைக்கப்பட்டன. முன்னரே தீர்மானிக்கப்பட்ட நேர இடைவெளிகளில், அதாவது 5, 10, 20, 30, 40 மற்றும் 60 வினாடிகளில், NFRCS மாதிரிகள் அகற்றப்பட்டு, அவற்றை 30 வினாடிகளுக்கு Ct மீது வைப்பதன் மூலம் உறிஞ்சப்படாத இரத்தம் அவற்றின் மேற்பரப்புகளில் இருந்து சுத்தம் செய்யப்பட்டது. ஒவ்வொரு நேரப் புள்ளியிலும் NFRCS 16 ஆல் உறிஞ்சப்பட்ட இரத்தத்தின் இறுதி எடை (W1) கணக்கில் எடுத்துக்கொள்ளப்பட்டது. பின்வரும் சூத்திரத்தைப் பயன்படுத்தி BAR சதவீதத்தைக் கணக்கிடுங்கள்:
வாங் மற்றும் குழுவினரால் தெரிவிக்கப்பட்டபடி இரத்த உறைதல் நேரம் (BCT) தீர்மானிக்கப்பட்டது. NFRCS முன்னிலையில் முழு இரத்தம் (3.8% சோடியம் சிட்ரேட்டுடன் முன் கலக்கப்பட்ட எலி இரத்தம்) உறைவதற்குத் தேவையான நேரம், சோதனை மாதிரியின் BCT ஆகக் கணக்கிடப்பட்டது. பல்வேறு NFRCS கூறுகள் (30 மி.கி) 10 மி.லி திருகு மூடி கொண்ட குப்பிகளில் வைக்கப்பட்டு 37°C வெப்பநிலையில் அடைகாக்கப்பட்டன. குப்பியில் இரத்தம் (0.5 மி.லி) சேர்க்கப்பட்டு, இரத்த உறைதலைத் தூண்டுவதற்காக 0.3 மி.லி 0.2 M CaCl2 சேர்க்கப்பட்டது. இறுதியாக, ஒரு திடமான உறைவு உருவாகும் வரை ஒவ்வொரு 15 வினாடிக்கும் குப்பியைத் தலைகீழாகத் திருப்பவும் (180° வரை). மாதிரியின் BCT, குப்பிகளைத் தலைகீழாகத் திருப்பும் எண்ணிக்கையால் மதிப்பிடப்படுகிறது. BCT-யின் அடிப்படையில், NFRCS Cm, Ch மற்றும் Cp ஆகியவற்றிலிருந்து இரண்டு உகந்த கலவைகள் மேலதிக பண்புக்கூறு ஆய்வுகளுக்காகத் தேர்ந்தெடுக்கப்பட்டன.
Ch NFRCS மற்றும் Cp NFRCS கலவைகளின் இரத்த உறைதல் கட்டுப்பாடு (BCT), Li et al. 19 விவரித்த முறையைச் செயல்படுத்துவதன் மூலம் தீர்மானிக்கப்பட்டது. 15 x 15 மிமீ² Ch NFRCS, Cp NFRCS, மற்றும் Cs (நேர்மறை கட்டுப்பாடு) ஆகியவற்றை தனித்தனி பெட்ரி தட்டுகளில் (37 °C) வைக்கவும். இரத்த உறைதல் செயல்முறையைத் தொடங்க, 3.8% சோடியம் சிட்ரேட் கொண்ட இரத்தம் 0.2 M CaCl₂ உடன் 10:1 கன அளவு விகிதத்தில் கலக்கப்பட்டது. 20 µl 0.2 M CaCl₂ எலி இரத்தக் கலவை மாதிரி மேற்பரப்பில் பூசப்பட்டு ஒரு வெற்று பெட்ரி தட்டில் வைக்கப்பட்டது. கட்டுப்பாடு என்பது, இரத்த உறைதல் கட்டுப்பாடு இல்லாமல் வெற்று பெட்ரி தட்டுகளில் ஊற்றப்பட்ட இரத்தம் ஆகும். 0, 3, மற்றும் 5 நிமிடங்களின் நிலையான இடைவெளிகளில், உறைதலைக் கலைக்காமல், மாதிரி உள்ள தட்டில் 10 மிலி அயனியாக்கம் செய்யப்பட்ட (DI) நீரைச் சேர்ப்பதன் மூலம் உறைதலை நிறுத்தவும். உறையாத எரித்ரோசைட்டுகள் (எரித்ரோசைட்டுகள்) அயனியாக்கம் செய்யப்பட்ட நீரின் முன்னிலையில் ஹீமோலிசிஸுக்கு உள்ளாகி ஹீமோகுளோபினை வெளியிடுகின்றன. வெவ்வேறு நேரப் புள்ளிகளில் உள்ள ஹீமோகுளோபின் (HA(t)), ஒரு UV-Vis நிறமாலைமானியைப் பயன்படுத்தி 540 nm (λmax ஹீமோகுளோபின்) அலைநீளத்தில் அளவிடப்பட்டது. 10 மிலி அயனியகற்றப்பட்ட நீரில் உள்ள 20 µl இரத்தத்தின் 0 நிமிடத்தில் ஏற்படும் ஹீமோகுளோபினின் முழுமையான உறிஞ்சுதல் (AH(0)) ஒரு குறிப்புத் தரமாக எடுத்துக்கொள்ளப்பட்டது. உறைந்த இரத்தத்தின் சார்பு ஹீமோகுளோபின் உட்கொள்ளல் (RHA), அதே தொகுதி இரத்தத்தைப் பயன்படுத்தி HA(t)/HA(0) என்ற விகிதத்திலிருந்து கணக்கிடப்பட்டது.
ஒரு டெக்ஸ்சர் அனலைசரைப் (Texture Pro CT V1.3 Build 15, Brookfield, USA) பயன்படுத்தி, சேதமடைந்த திசுக்களுடன் NFRK-இன் ஒட்டும் பண்புகள் கண்டறியப்பட்டன. பன்றியின் தோலின் உட்புறத்தில் (கொழுப்புப் படலம் இல்லாமல்) திறந்த அடிப்பகுதியுடைய உருளை வடிவத் தட்டை அழுத்தவும். பன்றியின் தோலுடன் ஒட்டுதலை உருவாக்குவதற்காக, மாதிரிகள் (Ch NFRCS மற்றும் Cp NFRCS) ஒரு குழாய் வழியாக உருளை வடிவ அச்சுகளில் இடப்பட்டன. அறை வெப்பநிலையில் (RT) (25° C.) 3 நிமிட அடைகாத்தலுக்குப் பிறகு, NFRCS-இன் ஒட்டும் வலிமை 0.5 மிமீ/வினாடி என்ற சீரான விகிதத்தில் பதிவு செய்யப்பட்டது.
அறுவை சிகிச்சை சீலண்டுகளின் முக்கிய அம்சம், இரத்த இழப்பைக் குறைக்கும் அதே வேளையில் இரத்த உறைதலை அதிகரிப்பதாகும். NFRCS-இல் இழப்பற்ற உறைதல், முன்னர் வெளியிடப்பட்ட ஒரு முறையைச் சிறிய மாற்றங்களுடன் பயன்படுத்தி மதிப்பிடப்பட்டது¹⁹. ஒரு மைக்ரோசென்ட்ரிஃபியூஜ் குழாயை (2 மிலி) (உள் விட்டம் 10 மிமீ) உருவாக்கவும், அதன் ஒரு பக்கத்தில் 8 × 5 மிமீ² துளை இருக்க வேண்டும் (இது ஒரு திறந்த காயத்தைக் குறிக்கும்). திறப்பை மூட NFRCS பயன்படுத்தப்படுகிறது மற்றும் வெளிப்புற விளிம்புகளை ஒட்டுவதற்கு டேப் பயன்படுத்தப்படுகிறது. 3.8% சோடியம் சிட்ரேட் ப்ரீமிக்ஸ் உள்ள மைக்ரோசென்ட்ரிஃபியூஜ் குழாயில் 20 µl 0.2 M CaCl₂-ஐ சேர்க்கவும். 10 நிமிடங்களுக்குப் பிறகு, மைக்ரோசென்ட்ரிஃபியூஜ் குழாய்கள் தட்டுகளிலிருந்து அகற்றப்பட்டன, மேலும் NFRK-இலிருந்து இரத்தம் வெளியேறியதால் தட்டுகளின் நிறையில் ஏற்பட்ட அதிகரிப்பு தீர்மானிக்கப்பட்டது (n = 3). இரத்த இழப்பு Ch NFRCS மற்றும் Cp NFRCS ஆகியவை Cs உடன் ஒப்பிடப்பட்டன.
மிஸ்ரா மற்றும் சௌத்ரி21 விவரித்த முறையின் அடிப்படையில், சிறிய மாற்றங்களுடன் NFRCS-இன் ஈர ஒருமைப்பாடு தீர்மானிக்கப்பட்டது. NFRCS-ஐ 50 மில்லி தண்ணீருடன் 100 மில்லி எர்லன்மேயர் குடுவையில் வைத்து, மேல் மூடி உருவாகாமல் 60 விநாடிகளுக்குச் சுழற்றவும். சேகரிப்பின் அடிப்படையில், மாதிரிகளின் பௌதீக ஒருமைப்பாட்டிற்காகக் காட்சி ஆய்வு மற்றும் முன்னுரிமைப்படுத்தல் செய்யப்பட்டது.
முன்னர் வெளியிடப்பட்ட முறைகளில் சிறிய மாற்றங்களைச் செய்து, HFFC-க்கும் Ct-க்கும் இடையிலான பிணைப்பு வலிமை ஆய்வு செய்யப்பட்டது. மில்லிQ நீர் (Ct) முன்னிலையில் NFRK-ஐ ஒலி அலைகளுக்கு (வெளிப்புறத் தூண்டுதல்) உட்படுத்துவதன் மூலம் மேற்பரப்புப் பூச்சின் ஒருமைப்பாடு மதிப்பிடப்பட்டது. உருவாக்கப்பட்ட NFRCS Ch NFRCS மற்றும் Cp NFRCS ஆகியவை நீர் நிரப்பப்பட்ட ஒரு பீக்கரில் வைக்கப்பட்டு, முறையே 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10 மற்றும் 30 நிமிடங்களுக்கு ஒலி அலைகளுக்கு உட்படுத்தப்பட்டன. உலர்த்திய பிறகு, NFRCS-இன் ஆரம்ப மற்றும் இறுதி எடைக்கு இடையிலான சதவீத வேறுபாடு, பொருளின் (HFFC) சதவீத இழப்பைக் கணக்கிடப் பயன்படுத்தப்பட்டது. இன் விட்ரோ BCT, பிணைப்பு வலிமை அல்லது மேற்பரப்புப் பொருட்களின் இழப்பை மேலும் உறுதிப்படுத்தியது. Ct-உடன் HFFC-இன் பிணைப்புத் திறன், இரத்த உறைதலையும் Ct22-இன் மேற்பரப்பில் ஒரு மீள் தன்மையுள்ள பூச்சையும் வழங்குகிறது.
உருவாக்கப்பட்ட NFRCS-இன் ஒருபடித்தான தன்மையானது, NFRCS-இன் தோராயமாகத் தேர்ந்தெடுக்கப்பட்ட பொதுவான இடங்களிலிருந்து எடுக்கப்பட்ட மாதிரிகளின் (30 மி.கி) BCT மூலம் தீர்மானிக்கப்பட்டது. NFRCS-இன் இணக்கத்தன்மையைத் தீர்மானிக்க, முன்னர் குறிப்பிடப்பட்ட BCT செயல்முறையைப் பின்பற்றவும். ஐந்து மாதிரிகளுக்கும் இடையிலான அருகாமையானது, Ct வலைப்பின்னலில் சீரான மேற்பரப்புப் பரவலையும் HFFC படிதலையும் உறுதி செய்கிறது.
பெயரளவு இரத்தத் தொடர்புப் பகுதி (NBCA) முன்பு அறிவிக்கப்பட்டபடி சில மாற்றங்களுடன் தீர்மானிக்கப்பட்டது. Ct, Ch NFRCS, Cp NFRCS மற்றும் Cs ஆகியவற்றின் இரண்டு பரப்புகளுக்கு இடையில் 20 µl இரத்தத்தை இறுக்குவதன் மூலம் இரத்தத்தை உறைய வைக்கவும். 1 மணி நேரத்திற்குப் பிறகு, ஸ்டென்ட்டின் இரண்டு பாகங்களும் பிரிக்கப்பட்டு, இரத்த உறைவின் பரப்பளவு கைமுறையாக அளவிடப்பட்டது. மூன்று முறை மீண்டும் செய்ததன் சராசரி மதிப்பு NBCA NFRCS19 ஆகக் கருதப்பட்டது.
வெளிப்புறச் சூழலிலிருந்தோ அல்லது உறைதலைத் தொடங்குவதற்குக் காரணமான காயத்தின் இடத்திலிருந்தோ நீரை உறிஞ்சுவதில் NFRCS-இன் செயல்திறனை மதிப்பிடுவதற்கு, டைனமிக் வேப்பர் சார்ப்ஷன் (DVS) பகுப்பாய்வு பயன்படுத்தப்பட்டது. DVS ஆனது, ±0.1 µg நிறைத் தெளிவுத்திறன் கொண்ட ஒரு அதிஉணர்திறன் தராசைப் பயன்படுத்தி, ஒரு மாதிரியில் உள்ள நீராவி உட்கொள்ளலையும் இழப்பையும் ஈர்ப்பு அளவீட்டு முறையில் மதிப்பிடுகிறது அல்லது பதிவு செய்கிறது. தெவிட்டிய மற்றும் உலர் கடத்தி வாயுக்களைக் கலப்பதன் மூலம், ஒரு மின்னணு நிறை ஓட்டக் கட்டுப்படுத்தியால் மாதிரியைச் சுற்றி ஒரு பகுதி நீராவி அழுத்தம் (சார்பு ஈரப்பதம்) உருவாக்கப்படுகிறது. ஐரோப்பிய மருந்தக வழிகாட்டுதல்களின்படி, மாதிரிகளால் உறிஞ்சப்படும் ஈரப்பதத்தின் சதவீதத்தின் அடிப்படையில், மாதிரிகள் 4 வகைகளாகப் பிரிக்கப்பட்டன (0–0.012% w/w − ஈரத்தை உறிஞ்சாதவை, 0.2–2% w/w சிறிதளவு ஈரத்தை உறிஞ்சுபவை, 2–15% மிதமான ஈரத்தை உறிஞ்சுபவை, மற்றும் > 15% அதிக ஈரத்தை உறிஞ்சுபவை)23. ஐரோப்பிய மருந்தக வழிகாட்டுதல்களின்படி, மாதிரிகளால் உறிஞ்சப்படும் ஈரப்பதத்தின் சதவீதத்தின் அடிப்படையில், மாதிரிகள் 4 வகைகளாகப் பிரிக்கப்பட்டன (0–0.012% w/w − ஈரத்தை உறிஞ்சாதவை, 0.2–2% w/w சிறிதளவு ஈரத்தை உறிஞ்சுபவை, 2–15 % மிதமாக ஈரத்தை உறிஞ்சுபவை, மற்றும் > 15% மிக அதிகமாக ஈரத்தை உறிஞ்சுபவை)23.ஐரோப்பிய மருந்தகத் தொகுப்பின் பரிந்துரைகளுக்கு இணங்க, மாதிரிகளால் உறிஞ்சப்படும் ஈரப்பதத்தின் சதவீதத்தைப் பொறுத்து, மாதிரிகள் 4 வகைகளாகப் பிரிக்கப்பட்டன (0–0.012% w/w – ஈரத்தை உறிஞ்சாதவை, 0.2–2% w/w – சிறிதளவு ஈரத்தை உறிஞ்சுபவை, 2–15 %).% உமெரென்னோ ஜிக்ரோஸ்கோபிசென் மற்றும் > 15% ஓச்சன் கிக்ரோஸ்கோபிச்சென்)23. % மிதமான ஈரப்பதம் உறிஞ்சும் தன்மை மற்றும் > 15% அதிக ஈரப்பதம் உறிஞ்சும் தன்மை)23.根据欧洲药典指南，根据样品吸收水分的百分比，样品分为4 类（0-0.012% w/w-20.2% w/w- w/w 轻微吸湿性、2-15 % 适度吸湿，> 15% 非常吸湿）23。மேலும்吸湿 性 、 、 、 、 0.2-2% W/w 轻微 、 2-15% 适度 吸湿 ，> 15 %非常吸湿）23。ஐரோப்பிய மருந்தகத் தொகுப்பின் பரிந்துரைகளின்படி, மாதிரிகளால் உறிஞ்சப்படும் ஈரப்பதத்தின் சதவீதத்தைப் பொறுத்து அவை 4 வகைகளாகப் பிரிக்கப்படுகின்றன (எடையின் அடிப்படையில் 0-0.012% – ஈரத்தை உறிஞ்சாதது, எடையின் அடிப்படையில் 0.2-2% – சிறிதளவு ஈரத்தை உறிஞ்சக்கூடியது, எடையின் அடிப்படையில் 2-15%).% உமரென்னோ ஜிக்ரோஸ்கோபிசென், > 15 % ஓச்சன் கிக்ரோஸ்கோபிசென்) 23. % மிதமான ஈரத்தை உறிஞ்சும் தன்மை, > 15% அதிக ஈரத்தை உறிஞ்சும் தன்மை) 23.NFCS X NFCS மற்றும் TsN NFCS ஆகியவற்றின் ஈரப்பதம் உறிஞ்சும் திறன், DVS TA TGA Q5000 SA என்ற பகுப்பாய்வுக் கருவியில் கண்டறியப்பட்டது. இந்தச் செயல்பாட்டின் போது, ​​இயக்க நேரம், ஒப்பு ஈரப்பதம் (RH), மற்றும் 25°C²⁴-இல் நிகழ்நேர மாதிரி எடை ஆகியவை பெறப்பட்டன. பின்வரும் சமன்பாட்டைப் பயன்படுத்தி, துல்லியமான NFRCS நிறை பகுப்பாய்வின் மூலம் ஈரப்பதத்தின் அளவு கணக்கிடப்படுகிறது:
MC என்பது NFRCS-இன் ஈரப்பதம். m1 – NSAID-களின் உலர் எடை. m2 என்பது ஒரு குறிப்பிட்ட RH-இல் உள்ள நிகழ்நேர NFRCS-இன் நிறை.
மாதிரிகளை 25 °C வெப்பநிலையில் 10 மணி நேரம் (< 7 × 10–3 Torr) வைத்திருந்த பிறகு, திரவ நைட்ரஜனைப் பயன்படுத்தி மேற்கொள்ளப்பட்ட நைட்ரஜன் உள்ளிழுத்தல் சோதனையின் மூலம் மொத்த மேற்பரப்புப் பரப்பளவு மதிப்பிடப்பட்டது. மாதிரிகளை 25 °C வெப்பநிலையில் 10 மணி நேரம் (< 7 × 10–3 Torr) வைத்திருந்த பிறகு, திரவ நைட்ரஜனைப் பயன்படுத்தி மேற்கொள்ளப்பட்ட நைட்ரஜன் உள்ளிழுத்தல் சோதனையின் மூலம் மொத்த மேற்பரப்புப் பரப்பளவு மதிப்பிடப்பட்டது. அட்ஸார்பிஸிஸ் அசோட்டா ஜிட்கிம் அட்ஸார்பிஸிஸ் அஸோடா ஜிட்கிம் 25 ° C வரை течение 10 ч (< 7 × 10–3 Торр). மாதிரிகள் 25°C வெப்பநிலையில் 10 மணி நேரம் (< 7 × 10–3 Torr) காலியாக்கப்பட்ட பிறகு, திரவ நைட்ரஜனைப் பயன்படுத்தி மேற்கொள்ளப்பட்ட நைட்ரஜன் உள்ளிழுத்தல் சோதனையின் மூலம் மொத்த மேற்பரப்புப் பரப்பளவு மதிப்பிடப்பட்டது.在25°C 清空样品10 小时（< 7 × 10-3 Torr）后，使用液氮的氮吸附实验伧计总表在 25°C அட்ஸார்பிஸிஸ் அஸோக்டா ஜிம்டோவலிஸ் опорожнения образцов в течение 10 часов при 25°C (< 7 × 10-3 торр). மாதிரிகள் 25°C வெப்பநிலையில் (< 7 x 10-3 டோர்) 10 மணி நேரம் காலியாக வைக்கப்பட்ட பிறகு, திரவ நைட்ரஜனைப் பயன்படுத்தி நைட்ரஜன் உறிஞ்சுதல் சோதனைகள் மூலம் மொத்த மேற்பரப்பு பரப்பளவு மதிப்பிடப்பட்டது.ஆஸ்திரியாவின் NOVA 1000e குவாண்டாக்ரோம் கருவியைப் பயன்படுத்தி, RS 232 மென்பொருளின் உதவியுடன் மொத்த மேற்பரப்புப் பரப்பளவு, துளைக் கன அளவு மற்றும் NFRCS துளை அளவு ஆகியவை கண்டறியப்பட்டன.
முழு இரத்தத்திலிருந்து 5% இரத்தச் சிவப்பணுக்களை (உப்புக்கரைசலாக) ​​தயாரிக்கவும். பின்னர், HFFC-இன் ஒரு சிறு பகுதியையும் (0.25 மிலி) மற்றும் 5% இரத்தச் சிவப்பணுத் திரளையும் (0.1 மிலி) ஒரு 96-குழித் தட்டில் இடவும். இந்தக் கலவையை 37°C வெப்பநிலையில் 40 நிமிடங்களுக்கு அடைகாக்கவும். இரத்தச் சிவப்பணுக்கள் மற்றும் சீரம் ஆகியவற்றின் கலவை ஒரு நேர்மறைக் கட்டுப்பாடாகவும், உப்புக்கரைசல் மற்றும் இரத்தச் சிவப்பணுக்கள் ஆகியவற்றின் கலவை ஒரு எதிர்மறைக் கட்டுப்பாடாகவும் கருதப்பட்டது. ஸ்டாஜிட்ஸ்கி அளவுகோலின்படி இரத்தக் கட்டியாதல் தீர்மானிக்கப்பட்டது. முன்மொழியப்பட்ட அளவுகோல்கள் பின்வருமாறு: + + + + அடர்த்தியான துகள் திரள்கள்; + + + வளைந்த விளிம்புகளுடன் கூடிய வழவழப்பான அடிப்பகுதிகள்; + + கிழிந்த விளிம்புகளுடன் கூடிய வழவழப்பான அடிப்பகுதிகள்; + வழவழப்பான அடிப்பகுதிகளின் விளிம்புகளைச் சுற்றி குறுகிய சிவப்பு வளையங்கள்; – (எதிர்மறை) கீழ்க்குழியின் மையத்தில் தனித்த சிவப்பு பொத்தான் 12.
சர்வதேச தர நிர்ணய அமைப்பின் (ISO) (ISO10993-4, 1999)26,27 முறையின்படி NFRCS-இன் இரத்த இணக்கத்தன்மை ஆய்வு செய்யப்பட்டது. சிங் மற்றும் குழுவினரால் விவரிக்கப்பட்ட ஈர்ப்பு அளவீட்டு முறை பயன்படுத்தப்பட்டது. NFRCS-இன் முன்னிலையில் அல்லது அதன் மேற்பரப்பில் இரத்த உறைவு உருவாவதை மதிப்பிடுவதற்கு சிறிய மாற்றங்கள் செய்யப்பட்டன. 500 மி.கி Cs, Ch NFRCS மற்றும் Cp NFRCS ஆகியவை பாஸ்பேட் தாங்கல் உப்புக்கரைசலில் (PBS) 37°C வெப்பநிலையில் 24 மணி நேரம் அடைகாக்கப்பட்டன. 24 மணி நேரத்திற்குப் பிறகு, PBS அகற்றப்பட்டு, 3.8% சோடியம் சிட்ரேட் கொண்ட 2 மி.லி இரத்தம் கொண்டு NFRCS பதப்படுத்தப்பட்டது. அடைகாக்கப்பட்ட மாதிரிகளில், NFRCS-இன் மேற்பரப்பில் 0.04 மி.லி 0.1 M CaCl2 சேர்க்கப்பட்டது. 45 நிமிடங்களுக்குப் பிறகு, உறைதலை நிறுத்த 5 மி.லி காய்ச்சி வடிகட்டிய நீர் சேர்க்கப்பட்டது. NFRK-இன் மேற்பரப்பில் உறைந்த இரத்தம் 36-38% ஃபார்மால்டிஹைட் கரைசல் கொண்டு பதப்படுத்தப்பட்டது. ஃபார்மால்டிஹைடு கொண்டு நிலைப்படுத்தப்பட்ட இரத்தக் கட்டிகள் உலர்த்தப்பட்டு எடை போடப்பட்டன. இரத்தம் மற்றும் மாதிரி இல்லாத கண்ணாடிக் குவளையின் (எதிர்மறை கட்டுப்பாடு) எடையையும், இரத்தம் உள்ள கண்ணாடிக் குவளையின் (நேர்மறை கட்டுப்பாடு) எடையையும் கணக்கிடுவதன் மூலம் இரத்த உறைவின் சதவீதம் மதிப்பிடப்பட்டது.
ஆரம்ப உறுதிப்படுத்தலாக, HFFC மேற்பரப்புப் பூச்சு, ஒன்றோடொன்று இணைக்கப்பட்ட Ct, மற்றும் Ct வலைப்பின்னல் ஆகியவற்றின் துளைகளை உருவாக்கும் திறனைப் புரிந்துகொள்வதற்காக, மாதிரிகள் ஒளியியல் நுண்ணோக்கியின் கீழ் காட்சிப்படுத்தப்பட்டன. NFRCS-இலிருந்து பெறப்பட்ட Ch மற்றும் Cp-இன் மெல்லிய பகுதிகள் அறுவைக்கத்தி மூலம் வெட்டப்பட்டன. இதன் விளைவாகக் கிடைத்த பகுதி ஒரு கண்ணாடித் தட்டில் வைக்கப்பட்டு, ஒரு மூடிச்சறுக்கு கொண்டு மூடப்பட்டது, மேலும் அதன் விளிம்புகள் பசை கொண்டு ஒட்டப்பட்டன. தயாரிக்கப்பட்ட தட்டுகள் ஒளியியல் நுண்ணோக்கியின் கீழ் பார்க்கப்பட்டு, வெவ்வேறு உருப்பெருக்கங்களில் புகைப்படங்கள் எடுக்கப்பட்டன.
ரைஸ் மற்றும் அவரது குழுவினரால் விவரிக்கப்பட்ட முறையின் அடிப்படையில், ஃபுளோரசன்ஸ் நுண்ணோக்கியைப் பயன்படுத்தி Ct வலைப்பின்னல்களில் பாலிமர் படிதல் காட்சிப்படுத்தப்பட்டது.29 உருவாக்கத்திற்காகப் பயன்படுத்தப்பட்ட HFFC கலவையானது, ஒரு ஒளிரும் சாயத்துடன் (அமரந்த்) கலக்கப்பட்டு, முன்னர் குறிப்பிடப்பட்ட முறையின்படி NFRCS (Ch & Cp) தயாரிக்கப்பட்டது. உருவாக்கத்திற்காகப் பயன்படுத்தப்பட்ட HFFC கலவையானது, ஒரு ஒளிரும் சாயத்துடன் (அமரந்த்) கலக்கப்பட்டு, முன்னர் குறிப்பிடப்பட்ட முறையின்படி NFRCS (Ch & Cp) தயாரிக்கப்பட்டது.உருவாக்கத்திற்காகப் பயன்படுத்தப்பட்ட HFFC கலவையானது, ஒரு ஒளிரும் சாயத்துடன் (அமரந்த்) கலக்கப்பட்டு, முன்னர் குறிப்பிட்ட முறையின்படி NFRCS (Ch மற்றும் Cp) பெறப்பட்டது.将用于配方的HFFC 组合物与荧光染料சிபி).将用于配方的HFFC 组合物与荧光染料சிபி).முன்னர் குறிப்பிட்டபடி, இந்த உருவாக்கத்தில் பயன்படுத்தப்பட்ட HFFC கலவையானது, ஒரு ஒளிரும் சாயத்துடன் (அமரந்த்) கலக்கப்பட்டு, NFRCS (Ch மற்றும் Cp)-ஐப் பெற்றது.பெறப்பட்ட மாதிரிகளிலிருந்து NFRK-இன் மெல்லிய பகுதிகள் வெட்டப்பட்டு, கண்ணாடி ஸ்லைடுகளில் வைக்கப்பட்டு, கவர் ஸ்லிப்களால் மூடப்பட்டன. தயாரிக்கப்பட்ட ஸ்லைடுகளை, பச்சை வடிகட்டியை (310-380 nm) பயன்படுத்தி ஒரு ஒளிரும் நுண்ணோக்கியின் கீழ் உற்றுநோக்கவும். Ct உறவுகளையும், Ct வலையமைப்பில் உள்ள அதிகப்படியான பாலிமர் படிதலையும் புரிந்துகொள்வதற்காக, படங்கள் 4x உருப்பெருக்கத்தில் எடுக்கப்பட்டன.
NFRCS Ch மற்றும் Cp-யின் மேற்பரப்பு நிலவமைப்பு, தட்டுதல் முறையில் (tapping mode) இயங்கும் மிகவும் கூர்மையான TESP கேன்டிலீவர் கொண்ட அணுவிசை நுண்ணோக்கியைப் (AFM) பயன்படுத்தித் தீர்மானிக்கப்பட்டது: 42 N/m, 320 kHz, ROC 2-5 nm, புரூக்கர், தைவான். மேற்பரப்பு சொரசொரப்பு, மென்பொருளைப் (Scanning Probe Image Processor) பயன்படுத்தி வர்க்கமூல சராசரி (RMS) மூலம் தீர்மானிக்கப்பட்டது. மேற்பரப்பின் சீரான தன்மையைச் சரிபார்க்க, NFRCS-இன் பல்வேறு இடங்கள் முப்பரிமாணப் படங்களில் (3D images) காட்சிப்படுத்தப்பட்டன. ஒரு குறிப்பிட்ட பகுதிக்கான மதிப்பெண்ணின் திட்ட விலக்கம், மேற்பரப்பு சொரசொரப்பு என வரையறுக்கப்படுகிறது. NFRCS31-இன் மேற்பரப்பு சொரசொரப்பை அளவிட RMS சமன்பாடு பயன்படுத்தப்பட்டது.
Cm NFRCS-ஐ விட சிறந்த BCT-ஐக் காட்டிய Ch NFRCS மற்றும் Cp NFRCS ஆகியவற்றின் மேற்பரப்பு உருவவியலைப் புரிந்துகொள்வதற்காக, டோக்கியோவின் ஹிட்டாச்சி நிறுவனத்தின் FESEM, SU8000, HI-0876-0003 கருவியைப் பயன்படுத்தி FESEM அடிப்படையிலான ஆய்வுகள் மேற்கொள்ளப்பட்டன. இந்த FESEM ஆய்வு, ஜாவோ மற்றும் குழுவினரால் விவரிக்கப்பட்ட முறையின்படி, சிறிய மாற்றங்களுடன் மேற்கொள்ளப்பட்டது. 20 முதல் 30 மி.கி Ch NFRCS மற்றும் Cp NFRCS ஆகியவை, எலி இரத்தத்துடன் முன் கலக்கப்பட்ட 20 µl 3.8% சோடியம் சிட்ரேட்டுடன் முன் கலக்கப்பட்டன. இரத்தத்துடன் கலக்கப்பட்ட மாதிரிகளில் உறைதலைத் தொடங்குவதற்காக 20 µl 0.2 M CaCl2 சேர்க்கப்பட்டு, அந்த மாதிரிகள் அறை வெப்பநிலையில் 10 நிமிடங்கள் அடைகாக்கப்பட்டன. கூடுதலாக, NFRCS மேற்பரப்பில் உள்ள அதிகப்படியான எரித்ரோசைட்டுகள் உப்புநீரால் கழுவுவதன் மூலம் அகற்றப்பட்டன.
அடுத்தடுத்த மாதிரிகள் 0.1% குளுடரால்டிஹைடுடன் பதப்படுத்தப்பட்டு, பின்னர் ஈரப்பதத்தை அகற்ற 37°C வெப்பக் காற்று அடுப்பில் உலர்த்தப்பட்டன. உலர்ந்த மாதிரிகள் பூசப்பட்டு பகுப்பாய்வு செய்யப்பட்டன³². பகுப்பாய்வின் போது பெறப்பட்ட மற்ற படங்கள், தனிப்பட்ட பருத்தி இழைகளின் மேற்பரப்பில் உறைவு உருவாக்கம், Ct-க்கு இடையில் பாலிமர் படிதல், எரித்ரோசைட் உருவவியல் (வடிவம்), உறைவின் ஒருமைப்பாடு மற்றும் NFRCS முன்னிலையில் எரித்ரோசைட் உருவவியல் ஆகியவை ஆகும். பதப்படுத்தப்படாத NFRCS பகுதிகள் மற்றும் இரத்தத்துடன் அடைகாக்கப்பட்ட Ch மற்றும் Cp பதப்படுத்தப்பட்ட NFRCS பகுதிகள் தனிம அயனிகளுக்காக (சோடியம், பொட்டாசியம், நைட்ரஜன், கால்சியம், மெக்னீசியம், துத்தநாகம், தாமிரம் மற்றும் செலினியம்) ஸ்கேன் செய்யப்பட்டன³³. உறைவு உருவாக்கத்தின் போது தனிம அயனி குவிப்பு மற்றும் உறைவின் ஒருபடித்தன்மையைப் புரிந்துகொள்ள, பதப்படுத்தப்பட்ட மற்றும் பதப்படுத்தப்படாத மாதிரிகளுக்கு இடையிலான தனிம அயனி சதவீதங்களை ஒப்பிடவும்.
Ct மேற்பரப்பில் உள்ள Cp HFFC மேற்பரப்பு பூச்சின் தடிமன் FESEM ஐப் பயன்படுத்தி தீர்மானிக்கப்பட்டது. Cp NFRCS இன் குறுக்கு வெட்டுத் துண்டுகள் கட்டமைப்பிலிருந்து வெட்டப்பட்டு ஸ்பட்டர் பூச்சு செய்யப்பட்டன. இதன் விளைவாக உருவான ஸ்பட்டர் பூச்சு மாதிரிகள் FESEM மூலம் கவனிக்கப்பட்டு, மேற்பரப்பு பூச்சின் தடிமன் அளவிடப்பட்டது 34, 35, 36.
எக்ஸ்-ரே மைக்ரோ-சிடி உயர்-தெளிவுத்திறன் கொண்ட 3D அழிவற்ற படமெடுப்பை வழங்குகிறது மற்றும் NFRK-இன் உள் கட்டமைப்பு அமைப்பைப் படிக்க உங்களை அனுமதிக்கிறது. மைக்ரோ-சிடி, மாதிரியின் வழியாகச் செல்லும் ஒரு எக்ஸ்-ரே கற்றையைப் பயன்படுத்தி, மாதிரியில் உள்ள எக்ஸ்-கதிர்களின் உள்ளூர் நேரியல் தணிப்புக் குணகத்தைப் பதிவு செய்கிறது, இது உருவவியல் தகவல்களைப் பெற உதவுகிறது. NFRCS37,38,39 முன்னிலையில் உறிஞ்சும் திறன் மற்றும் இரத்த உறைதலைப் புரிந்துகொள்வதற்காக, Cp NFRCS மற்றும் இரத்தம் கலந்த Cp NFRCS ஆகியவற்றில் உள்ள Ct-இன் உள் இருப்பிடம் மைக்ரோ-சிடி மூலம் ஆராயப்பட்டது. இரத்தம் கலந்த மற்றும் கலக்கப்படாத Cp NFRCS மாதிரிகளின் 3D கட்டமைப்புகள் மைக்ரோ-சிடி (V|tome|x S240, ஃபீனிக்ஸ், ஜெர்மனி) பயன்படுத்தி புனரமைக்கப்பட்டன. VG ஸ்டுடியோ-மேக்ஸ் மென்பொருள் பதிப்பு 2.2-ஐப் பயன்படுத்தி, NFRCS-க்கான 3D படங்களை உருவாக்க, பல்வேறு கோணங்களிலிருந்து (சிறந்த முறையில் 360° கோணத்தில்) பல எக்ஸ்-ரே படங்கள் எடுக்கப்பட்டன. சேகரிக்கப்பட்ட வீச்சுத் தரவுகள், அதற்கேற்ற எளிய 3D ஸ்கேன்ஐபி அகாடமிக் மென்பொருளைப் பயன்படுத்தி 3D கன அளவுப் படங்களாக புனரமைக்கப்பட்டன.
மேலும், இரத்த உறைவின் பரவலைப் புரிந்துகொள்வதற்காக, இரத்த உறைதலைத் தொடங்குவதற்கு, 20 µl முன் கலக்கப்பட்ட சிட்ரேட்டட் இரத்தமும் 20 µl 0.2 M CaCl2-ம் NFRCS-ல் சேர்க்கப்பட்டன. தயாரிக்கப்பட்ட மாதிரிகள் கடினமாவதற்காக விடப்பட்டன. NFRK மேற்பரப்பானது 0.5% குளுடரால்டிஹைடு கொண்டு பதப்படுத்தப்பட்டு, 30–40°C வெப்பநிலையில் உள்ள ஒரு சூடான காற்று அடுப்பில் 30 நிமிடங்களுக்கு உலர்த்தப்பட்டது. NFRCS-ல் உருவான இரத்த உறைவு ஸ்கேன் செய்யப்பட்டு, புனரமைக்கப்பட்டு, அந்த இரத்த உறைவின் ஒரு முப்பரிமாணப் படம் காட்சிப்படுத்தப்பட்டது.
முன்னர் விவரிக்கப்பட்ட முறையைச் சிறு மாற்றங்களுடன் பயன்படுத்தி, Cp NFRCS (Ch NFRCS உடன் சிறப்பாக ஒப்பிடக்கூடியது) மீது பாக்டீரியா எதிர்ப்புச் சோதனைகள் செய்யப்பட்டன. இன்குபேட்டரில் உள்ள பெட்ரி தட்டுகளில் அகாரில் வளரும் மூன்று வெவ்வேறு சோதனை நுண்ணுயிரிகளைப் [S.aureus (கிராம்-பாசிட்டிவ் பாக்டீரியா), E.coli (கிராம்-நெகட்டிவ் பாக்டீரியா) மற்றும் வெள்ளை கேண்டிடா (C.albicans)] பயன்படுத்தி Cp NFRCS மற்றும் Cp HFFC ஆகியவற்றின் பாக்டீரியா எதிர்ப்புச் செயல்பாடு தீர்மானிக்கப்பட்டது. 105-106 CFU ml-1 என்ற செறிவில் நீர்த்த பாக்டீரியா வளர்ப்புக் கலவையின் 50 மிலி-ஐ அகார் ஊடகத்தில் சீராக இடவும். அந்த ஊடகத்தை ஒரு பெட்ரி தட்டில் ஊற்றி, அது கெட்டியாக விடவும். HFFC-ஐ நிரப்புவதற்காக அகார் தட்டின் மேற்பரப்பில் கிணறுகள் உருவாக்கப்பட்டன (HFFC-க்கு 3 கிணறுகள் மற்றும் எதிர்மறைக் கட்டுப்பாட்டிற்கு 1 கிணறு). 3 கிணறுகளில் 200 µl HFFC-ஐயும், 4-வது கிணற்றில் 200 µl pH 7.4 PBS-ஐயும் சேர்க்கவும். பெட்ரி தட்டின் மறுபுறத்தில், திடப்படுத்தப்பட்ட அகரின் மீது 12 மிமீ Cp NFRCS வட்டை வைத்து, PBS (pH 7.4) கொண்டு ஈரப்படுத்தவும். சிப்ரோஃப்ளோக்சசின், ஆம்பிசிலின் மற்றும் ஃப்ளூகோனசோல் மாத்திரைகள் ஸ்டேஃபிளோகாக்கஸ் ஆரியஸ், எஸ்செரிச்சியா கோலி மற்றும் கேண்டிடா அல்பிகன்ஸ் ஆகியவற்றிற்கான குறிப்புத் தரநிலைகளாகக் கருதப்படுகின்றன. தடுப்பு மண்டலத்தை கைமுறையாக அளந்து, தடுப்பு மண்டலத்தின் எண்ணிமப் படத்தை எடுக்கவும்.
நிறுவன நெறிமுறை ஒப்புதலுக்குப் பிறகு, இந்த ஆய்வு தென்னிந்தியாவில் உள்ள கர்நாடகாவின் மணிப்பாலில் அமைந்துள்ள கஸ்தூர்பா மருத்துவக் கல்வி மற்றும் ஆராய்ச்சிக் கல்லூரியில் நடத்தப்பட்டது. இன் விட்ரோ TEG பரிசோதனை நெறிமுறையானது, கர்நாடகாவின் மணிப்பாலில் உள்ள கஸ்தூர்பா மருத்துவக் கல்லூரியின் நிறுவன நெறிமுறைக் குழுவால் (IEC: 674/2020) மதிப்பாய்வு செய்யப்பட்டு அங்கீகரிக்கப்பட்டுள்ளது. மருத்துவமனை இரத்த வங்கியில் இருந்து தன்னார்வ இரத்தக் கொடையாளர்களிடமிருந்து (18 முதல் 55 வயது வரை) ஆய்வுக்குட்பட்டவர்கள் தேர்ந்தெடுக்கப்பட்டனர். கூடுதலாக, இரத்த மாதிரிகளைச் சேகரிப்பதற்காக தன்னார்வலர்களிடமிருந்து தகவலறிந்த ஒப்புதல் படிவம் பெறப்பட்டது. சோடியம் சிட்ரேட்டுடன் முன் கலக்கப்பட்ட முழு இரத்தத்தின் மீது Cp HFFC கலவையின் விளைவை ஆய்வு செய்ய நேட்டிவ் TEG (N-TEG) ​​பயன்படுத்தப்பட்டது. N-TEG, உடனடி உயிர் மீட்பு சிகிச்சையில் அதன் பங்கிற்காக பரவலாக அங்கீகரிக்கப்பட்டுள்ளது. இது (வழக்கமான இரத்த உறைதல் சோதனைகள்) முடிவுகளில் மருத்துவ ரீதியாக குறிப்பிடத்தக்க தாமதம் ஏற்பட வாய்ப்புள்ளதால், மருத்துவர்களுக்கு சிக்கல்களை உருவாக்குகிறது. N-TEG பகுப்பாய்வு முழு இரத்தத்தைப் பயன்படுத்தி செய்யப்பட்டது. அனைத்து பங்கேற்பாளர்களிடமிருந்தும் தகவலறிந்த ஒப்புதல் மற்றும் விரிவான மருத்துவ வரலாறு பெறப்பட்டது. கர்ப்பம்/பிரசவத்திற்குப் பிந்தைய நிலை அல்லது கல்லீரல் நோய் போன்ற இரத்த உறைதல் அல்லது த்ரோம்போடிக் சிக்கல்கள் உள்ள பங்கேற்பாளர்கள் இந்த ஆய்வில் சேர்க்கப்படவில்லை. இரத்த உறைதல் சங்கிலியைப் பாதிக்கும் மருந்துகளை உட்கொண்டவர்களும் ஆய்விலிருந்து விலக்கப்பட்டனர். அனைத்துப் பங்கேற்பாளர்களுக்கும் நிலையான நடைமுறைகளின்படி அடிப்படை ஆய்வகப் பரிசோதனைகள் (ஹீமோகுளோபின், புரோத்ராம்பின் நேரம், செயல்படுத்தப்பட்ட த்ரோம்போபிளாஸ்டின் மற்றும் பிளேட்லெட் எண்ணிக்கை) செய்யப்பட்டன. N-TEG இரத்த உறைவின் மீள்நெகிழ்வுத்தன்மை, ஆரம்ப உறைவு அமைப்பு, துகள் இடைவினை, உறைவு வலுவடைதல் மற்றும் உறைவு சிதைவு ஆகியவற்றைத் தீர்மானிக்கிறது. N-TEG பகுப்பாய்வானது பல செல் கூறுகள் மற்றும் பிளாஸ்மாவின் கூட்டு விளைவுகள் குறித்த வரைபட மற்றும் எண் தரவுகளை வழங்குகிறது. N-TEG பகுப்பாய்வானது Cp HFFC-யின் இரண்டு வெவ்வேறு அளவுகளில் (10 µl மற்றும் 50 µl) செய்யப்பட்டது. இதன் விளைவாக, சிட்ரிக் அமிலத்துடன் கூடிய 1 ml முழு இரத்தம் 10 µl Cp HFFC-யுடன் சேர்க்கப்பட்டது. 20 µl 0.2 M CaCl2 கொண்ட TEG தட்டில், 1 ml (Cp HFFC + சிட்ரேட் செய்யப்பட்ட இரத்தம்), 340 µl கலந்த இரத்தத்தைச் சேர்க்கவும். அதன்பிறகு, Cp HFFC41 முன்னிலையில் 30% இரத்த மாதிரிகளில் R, K, ஆல்பா கோணம், MA, G, CI, TPI, EPL, LY ஆகியவற்றை அளப்பதற்காக, TEG தட்டுகள் TEG® 5000, US கருவியில் ஏற்றப்பட்டன.
உயிரின ஆய்வு நெறிமுறையானது, மணிப்பால் உயர் கல்வி நிறுவனத்தின் கஸ்தூர்பா மருத்துவப் பள்ளியின் நிறுவன விலங்கு நெறிமுறைக் குழுவால் (IAEC) மதிப்பாய்வு செய்யப்பட்டு அங்கீகரிக்கப்பட்டது (IAEC/KMC/69/2020). அனைத்து விலங்கு சோதனைகளும் விலங்கு பரிசோதனைகளைக் கட்டுப்படுத்துதல் மற்றும் மேற்பார்வையிடுவதற்கான குழுவின் (CPCSEA) பரிந்துரைகளுக்கு இணங்க செய்யப்பட்டன. அனைத்து உயிரின NFRCS ஆய்வுகளும் (2 × 2 செ.மீ²) பெண் விஸ்டார் எலிகளில் (200 முதல் 250 கிராம் எடை கொண்டவை) செய்யப்பட்டன. அனைத்து விலங்குகளும் 24-26°C வெப்பநிலையில் பழக்கப்படுத்தப்பட்டன, மேலும் விலங்குகள் தரமான உணவு மற்றும் தண்ணீரை வரம்பின்றி அணுகும் வசதியைக் கொண்டிருந்தன. அனைத்து விலங்குகளும் சீரற்ற முறையில் வெவ்வேறு குழுக்களாகப் பிரிக்கப்பட்டன, ஒவ்வொரு குழுவிலும் மூன்று விலங்குகள் இருந்தன. அனைத்து ஆய்வுகளும் விலங்கு ஆய்வுகள்: உயிரின சோதனைகளின் அறிக்கை 43-க்கு இணங்க செய்யப்பட்டன. ஆய்வுக்கு முன்பு, விலங்குகளுக்கு அவற்றின் உடல் எடையில் 1 கிலோவிற்கு 20-50 மி.கி கெட்டமைன் மற்றும் 1 கிலோவிற்கு 2-10 மி.கி சைலாசின் ஆகியவற்றின் கலவையை வயிற்றுக்குள்ளாக (ip) செலுத்தி மயக்கமூட்டப்பட்டது. ஆய்வுக்குப் பிறகு, மாதிரிகளின் ஆரம்ப மற்றும் இறுதி எடைகளுக்கு இடையிலான வேறுபாட்டை மதிப்பிடுவதன் மூலம் இரத்தக் கசிவின் அளவு கணக்கிடப்பட்டது; மூன்று சோதனைகளிலிருந்து பெறப்பட்ட சராசரி மதிப்பே அந்த மாதிரியின் இரத்தக் கசிவின் அளவாக எடுத்துக்கொள்ளப்பட்டது.
அதிர்ச்சி, போர் அல்லது போக்குவரத்து விபத்து (காய மாதிரி) ஆகியவற்றில் இரத்தப்போக்கைக் கட்டுப்படுத்துவதில் NFRCS-இன் திறனைப் புரிந்துகொள்வதற்காக எலியின் வால் துண்டிப்பு மாதிரி செயல்படுத்தப்பட்டது. ஒரு அறுவைக்கத்தியால் வாலின் 50% பகுதியை வெட்டி, இயல்பான இரத்தப்போக்கை உறுதி செய்வதற்காக 15 விநாடிகளுக்கு காற்றில் வைக்கப்பட்டது. கூடுதலாக, சோதனை மாதிரிகள் ஒரு எலியின் வாலில் அழுத்தம் கொடுத்து வைக்கப்பட்டன (Ct, Cs, Ch NFRCS மற்றும் Cp NFRCS). சோதனை மாதிரிகளுக்கான (n = 3) இரத்தப்போக்கு மற்றும் PCT ஆகியவை பதிவு செய்யப்பட்டன¹⁷,⁴⁵.
போர்க்களத்தில் NFRCS அழுத்தக் கட்டுப்பாட்டின் செயல்திறன், தொடையின் மேலோட்டமான தமனி மாதிரியில் ஆராயப்பட்டது. தொடைத் தமனி வெளிப்படுத்தப்பட்டு, 24G ட்ரோகார் மூலம் துளையிடப்பட்டு, 15 வினாடிகளுக்குள் இரத்தம் வெளியேற்றப்பட்டது. கட்டுப்படுத்த முடியாத இரத்தப்போக்கு காணப்பட்ட பிறகு, சோதனை மாதிரியானது துளையிடப்பட்ட இடத்தில் அழுத்தம் கொடுக்கப்பட்டு வைக்கப்பட்டது. சோதனை மாதிரியை வைத்த உடனேயே, இரத்தம் உறைவதற்கான நேரம் பதிவு செய்யப்பட்டு, அடுத்த 5 நிமிடங்களுக்கு இரத்தப்போக்கை நிறுத்தும் செயல்திறன் கண்காணிக்கப்பட்டது. இதே செயல்முறை Cs மற்றும் Ct46 ஆகியவற்றைக் கொண்டும் மீண்டும் செய்யப்பட்டது.
அறுவை சிகிச்சையின் போது ஏற்படும் இரத்தப்போக்கு சூழலில், இரத்தப்போக்கை நிறுத்தும் பொருட்களின் திறனை மதிப்பிடுவதற்காக, டௌலிங் மற்றும் குழுவினர் 47 ஒரு கல்லீரல் காய மாதிரியை முன்மொழிந்தனர். Ct மாதிரிகள் (எதிர்மறை கட்டுப்பாடு), Cs கட்டமைப்பு (நேர்மறை கட்டுப்பாடு), Ch NFRCS மாதிரிகள் மற்றும் Cp NFRCS மாதிரிகளுக்கு BCT பதிவு செய்யப்பட்டது. நடுவயிற்று அறுவை சிகிச்சை செய்வதன் மூலம் எலியின் கல்லீரலுக்கு மேலுள்ள சிரை வெளிப்படுத்தப்பட்டது. அதன்பிறகு, இடது மடலின் தொலைவுப் பகுதி கத்தரிக்கோலால் வெட்டப்பட்டது. அறுவைக்கத்தியால் கல்லீரலில் ஒரு கீறல் செய்து, சில விநாடிகளுக்கு இரத்தப்போக்கு ஏற்பட விடப்பட்டது. துல்லியமாக எடைபோடப்பட்ட Ch NFRCS மற்றும் Cp NFRCS சோதனை மாதிரிகள், எந்தவொரு நேர்மறை அழுத்தமும் இன்றி சேதமடைந்த மேற்பரப்பில் வைக்கப்பட்டு, BCT பதிவு செய்யப்பட்டது. பின்னர், கட்டுப்பாட்டுக் குழு (Ct) காயத்தை உடைக்காமல், அழுத்தம் கொடுத்ததைத் தொடர்ந்து Cs 30 வி47-ஐப் பயன்படுத்தியது.
உருவாக்கப்பட்ட பாலிமர் அடிப்படையிலான NFRCS-களின் காயம் குணப்படுத்தும் பண்புகளை மதிப்பிடுவதற்காக, ஒரு வெட்டுக்காய மாதிரியைப் பயன்படுத்தி, உயிருள்ள விலங்குகளில் காயம் குணப்படுத்தும் சோதனைகள் செய்யப்பட்டன. வெட்டுக்காய மாதிரிகள், முன்னர் வெளியிடப்பட்ட முறைகளின்படி, சிறிய மாற்றங்களுடன் தேர்ந்தெடுக்கப்பட்டு செய்யப்பட்டன¹⁹,³²,⁴⁸. முன்னர் விவரிக்கப்பட்டபடி அனைத்து விலங்குகளுக்கும் மயக்க மருந்து கொடுக்கப்பட்டது. முதுகுத் தோலில் ஒரு வட்டமான ஆழமான கீறலை உருவாக்க, பயாப்ஸி பஞ்ச் (12 மிமீ) பயன்படுத்தப்பட்டது. தயாரிக்கப்பட்ட காயப் பகுதிகளில் Cs (நேர்மறைக் கட்டுப்பாடு), Ct (பஞ்சுப் பட்டைகள் குணப்படுத்துதலில் குறுக்கிடும் என்பதை உணர்ந்து), Ch NFRCS மற்றும் Cp NFRCS (சோதனைக் குழு) மற்றும் எந்த சிகிச்சையும் இல்லாத ஒரு எதிர்மறைக் கட்டுப்பாடு ஆகியவற்றைக் கொண்டு கட்டு போடப்பட்டது. ஆய்வின் ஒவ்வொரு நாளும், அனைத்து எலிகளிலும் காயத்தின் பரப்பளவு அளவிடப்பட்டது. காயப் பகுதியின் படத்தை எடுக்க ஒரு டிஜிட்டல் கேமரா பயன்படுத்தப்பட்டு, புதிய கட்டு போடப்பட்டது. காயம் மூடியதன் சதவீதம் பின்வரும் சூத்திரத்தின் மூலம் அளவிடப்பட்டது:
ஆய்வின் 12-ஆம் நாளில் காயம் குணமடைந்த சதவீதத்தின் அடிப்படையில், சிறந்த குழுவின் ((Cp NFRCS) மற்றும் கட்டுப்பாட்டுக் குழுவின்) எலித் தோல் வெட்டி எடுக்கப்பட்டு, H&E சாயமேற்றல் மற்றும் மாசனின் டிரைகுரோம் சாயமேற்றல் மூலம் ஆய்வு செய்யப்பட்டது. ஆய்வின் 12-ஆம் நாளில் காயம் குணமடைந்த சதவீதத்தின் அடிப்படையில், சிறந்த குழுவின் ((Cp NFRCS) மற்றும் கட்டுப்பாட்டுக் குழுவின்) எலித் தோல் வெட்டி எடுக்கப்பட்டு, H&E சாயமேற்றல் மற்றும் மாசனின் டிரைகுரோம் சாயமேற்றல் மூலம் ஆய்வு செய்யப்பட்டது.ஆய்வின் 12-ஆம் நாளில் காயம் குணமடைந்த சதவீதத்தின் அடிப்படையில், சிறந்த குழுவைச் சேர்ந்த ((Cp NFRCS) மற்றும் கட்டுப்பாட்டுக் குழு) எலிகளின் தோல் வெட்டி எடுக்கப்பட்டு, ஹெமடாக்ஸிலின்-ஈயோசின் மற்றும் மாசனின் டிரைகுரோம் கொண்டு சாயமேற்றிப் பரிசோதிக்கப்பட்டது.根据研究第12天的伤口闭合百分比，切除最佳组((Cp NFRCS)和对照组)的大鼠皮肤，进行H&E染色和Masson三色染色研究。根据研究第12天的伤口闭合百分比，切除最佳组((Cp NFRCS)和对照组)的大鼠皮肤，进行H&E染色和眳组）ஆய்வின் 12-ஆம் நாளில், காயம் மூடிய சதவீதத்தின் அடிப்படையில், சிறந்த குழுவில் ((Cp NFRCS) மற்றும் கட்டுப்பாட்டுக் குழுக்களில்) உள்ள எலிகள், ஹீமடாக்சிலின்-ஈயோசின் சாயமேற்றல் மற்றும் மாசனின் டிரைகுரோம் சாயமேற்றலுக்காக அறுத்து எடுக்கப்பட்டன.செயல்படுத்தப்பட்ட சாயமிடும் செயல்முறை, முன்னர் விவரிக்கப்பட்ட முறைகளின்படி49,50 மேற்கொள்ளப்பட்டது. சுருக்கமாக, 10% ஃபார்மாலினில் நிலைநிறுத்திய பிறகு, மாதிரிகள் தொடர்ச்சியான படிநிலை ஆல்கஹால்களைப் பயன்படுத்தி நீர் நீக்கம் செய்யப்பட்டன. வெட்டி எடுக்கப்பட்ட திசுவின் மெல்லிய பகுதிகளை (5 µm தடிமன்) பெற ஒரு மைக்ரோடோமைப் பயன்படுத்தவும். கட்டுப்பாடுகள் மற்றும் Cp NFRCS ஆகியவற்றின் மெல்லிய தொடர் பகுதிகள், திசுநோயியல் மாற்றங்களைப் படிப்பதற்காக ஹெமடாக்ஸிலின் மற்றும் ஈயோசின் கொண்டு பதப்படுத்தப்பட்டன. கொலாஜன் ஃபைப்ரில்களின் உருவாக்கத்தைக் கண்டறிய மாசனின் டிரைகுரோம் சாயம் பயன்படுத்தப்பட்டது. பெறப்பட்ட முடிவுகள் நோயியல் வல்லுநர்களால் மறைமுகமாக ஆய்வு செய்யப்பட்டன.
Cp NFRCS மாதிரிகளின் நிலைத்தன்மை, அறை வெப்பநிலையில் (25°C ± 2°C/60% RH ± 5%) 12 மாதங்களுக்கு ஆய்வு செய்யப்பட்டது⁵¹. Cp NFRCS (மேற்பரப்பு நிறமாற்றம் மற்றும் நுண்ணுயிர் வளர்ச்சி) பார்வைக்கு ஆய்வு செய்யப்பட்டு, பொருட்கள் மற்றும் முறைகள் பிரிவில் கோடிட்டுக் காட்டப்பட்டுள்ள மேற்கூறிய முறைகளின்படி மடிப்புத் தேய்மான எதிர்ப்பு மற்றும் BCT-க்காக சோதிக்கப்பட்டது.
15×15 செ.மீ² அளவில் Cp NFRCS-ஐத் தயாரிப்பதன் மூலம், அதன் விரிவாக்கத்தன்மை மற்றும் மீண்டும் மீண்டும் உருவாக்கும் தன்மை ஆராயப்பட்டது. மேலும், பல்வேறு Cp NFRCS பின்னங்களிலிருந்து 30 மி.கி மாதிரிகள் (n = 5) வெட்டி எடுக்கப்பட்டு, ஆய்வு செய்யப்பட்ட மாதிரிகளின் BCT ஆனது, வழிமுறைகள் பிரிவில் முன்னர் விவரிக்கப்பட்டபடி மதிப்பிடப்பட்டது.
பல்வேறு உயிர்மருத்துவப் பயன்பாடுகளுக்காக, Cp NFRCS கலவைகளைப் பயன்படுத்தி நாங்கள் பலவிதமான வடிவங்களையும் கட்டமைப்புகளையும் உருவாக்க முயன்றுள்ளோம். அத்தகைய வடிவங்கள் அல்லது உள்ளமைப்புகளில், மூக்கிலிருந்து இரத்தம் வடிதல் மற்றும் பல் மருத்துவ சிகிச்சைகளுக்கான கூம்பு வடிவத் துடைப்பான்களும், பிறப்புறுப்பு இரத்தப்போக்கிற்கான உருளை வடிவத் துடைப்பான்களும் அடங்கும்.
அனைத்து தரவுத் தொகுப்புகளும் சராசரி ± திட்ட விலக்கமாக வெளிப்படுத்தப்பட்டுள்ளன. மேலும் அவை, Prism 5.03 (GraphPad, San Diego, CA, USA) மென்பொருளைப் பயன்படுத்தி ANOVA முறையிலும், அதனைத் தொடர்ந்து போன்ஃபெரோனியின் பன்முக ஒப்பீட்டுச் சோதனையிலும் (*p<0.05) பகுப்பாய்வு செய்யப்பட்டன.
மனித ஆய்வுகளில் மேற்கொள்ளப்பட்ட அனைத்து நடைமுறைகளும், நிறுவனம் மற்றும் தேசிய ஆராய்ச்சிக் குழுவின் தரநிலைகள், அத்துடன் 1964 ஆம் ஆண்டின் ஹெல்சிங்கி பிரகடனம் மற்றும் அதன் பிந்தைய திருத்தங்கள் அல்லது அதுபோன்ற நெறிமுறைத் தரநிலைகளுக்கு இணங்க இருந்தன. பங்கேற்பாளர்கள் அனைவருக்கும் ஆய்வின் அம்சங்கள் மற்றும் அதன் தன்னார்வத் தன்மை குறித்துத் தெரிவிக்கப்பட்டது. பங்கேற்பாளர்களின் தரவுகள் சேகரிக்கப்பட்டவுடன் இரகசியமாக வைக்கப்படும். இன் விட்ரோ TEG பரிசோதனை நெறிமுறையானது, கர்நாடகாவின் மணிப்பாலில் உள்ள கஸ்தூர்பா மருத்துவக் கல்லூரியின் நிறுவன நெறிமுறைக் குழுவால் (IEC: 674/2020) மதிப்பாய்வு செய்யப்பட்டு அங்கீகரிக்கப்பட்டுள்ளது. இரத்த மாதிரிகளைச் சேகரிப்பதற்குத் தன்னார்வலர்கள் தகவலறிந்த ஒப்புதல் படிவத்தில் கையெழுத்திட்டனர்.
விலங்கு ஆய்வுகளில் மேற்கொள்ளப்பட்ட அனைத்து நடைமுறைகளும், மணிப்பால் உயர் கல்வி நிறுவனத்தின் கஸ்தூபா மருத்துவ பீடத்தின் (IAEC/KMC/69/2020) வழிகாட்டுதல்களுக்கு இணங்க நடத்தப்பட்டன. வடிவமைக்கப்பட்ட அனைத்து விலங்கு சோதனைகளும், விலங்கு சோதனைக் கட்டுப்பாடு மற்றும் மேற்பார்வைக் குழுவின் (CPCSEA) வழிகாட்டுதல்களுக்கு இணங்க நடத்தப்பட்டன. அனைத்து ஆசிரியர்களும் ARRIVE வழிகாட்டுதல்களைப் பின்பற்றுகிறார்கள்.
அனைத்து NFRCS-களின் FTIR நிறமாலைகள் பகுப்பாய்வு செய்யப்பட்டு, படம் 2A-வில் காட்டப்பட்டுள்ள சிட்டோசான் நிறமாலையுடன் ஒப்பிடப்பட்டன. சிட்டோசானின் சிறப்பியல்பு நிறமாலை உச்சங்கள் (பதிவுசெய்யப்பட்டவை) 3437 cm-1 (OH மற்றும் NH நீட்சி, மேற்பொருந்தல்), 2945 மற்றும் 2897 cm-1 (CH நீட்சி), 1660 cm-1 (NH2 திரிபு), 1589 cm-1 (N–H வளைவு), 1157 cm-1 (பால நீட்சி O-), 1067 cm-1 (நீட்சி C–O, இரண்டாம் நிலை ஹைட்ராக்சில்), 993 cm-1 (நீட்சி CO, Bo-OH) 52.53.54. துணை அட்டவணை S1, சிட்டோசான் (அறிக்கை), தூய சிட்டோசான், Cm, Ch, மற்றும் Cp ஆகியவற்றிற்கான FTIR NFRCS உட்கிரகிப்பு நிறமாலை மதிப்புகளைக் காட்டுகிறது. அனைத்து NFRCS-களின் (Cm, Ch மற்றும் Cp) FTIR நிறமாலைகளும், குறிப்பிடத்தக்க மாற்றங்கள் ஏதுமின்றி, தூய கைட்டோசானைப் போலவே அதே சிறப்பியல்பு உறிஞ்சுதல் பட்டைகளைக் காட்டின (படம் 2A). NFRCS-களை உருவாக்கப் பயன்படுத்தப்பட்ட பாலிமர்களுக்கு இடையே வேதியியல் அல்லது இயற்பியல் இடைவினைகள் ஏதும் இல்லை என்பதை FTIR முடிவுகள் உறுதிப்படுத்தின; இது பயன்படுத்தப்பட்ட பாலிமர்கள் மந்தமானவை என்பதைக் குறிக்கிறது.
Cm NFRCS, Ch NFRCS, Cp NFRCS மற்றும் Cs ஆகியவற்றின் இன் விட்ரோ பண்புக்கூறு. (A) அழுத்தத்தின் கீழ் கைட்டோசான் மற்றும் Cm NFRCS, Ch NFRCS, Cp NFRCS ஆகியவற்றின் கலவைகளின் ஒருங்கிணைந்த FTIR நிறமாலைகளைக் குறிக்கிறது. (B) a) NFRCS Cm, Ch, Cp, மற்றும் Cg ஆகியவற்றின் முழு இரத்த உட்கொள்ளல் விகிதம் (n = 3); பருத்தித் துடைப்பான் அதிக உறிஞ்சும் திறனைக் கொண்டிருப்பதால், Ct மாதிரிகள் அதிக BAR-ஐக் காட்டின; b) இரத்த உறிஞ்சுதலுக்குப் பிறகான இரத்தம். உறிஞ்சப்பட்ட மாதிரியின் விளக்கப்படம். சோதனை மாதிரி C-யின் BCT-யின் வரைபடப் பிரதிநிதித்துவம் (Cp NFRCS சிறந்த BCT-ஐக் கொண்டிருந்தது (15 வி, n = 3)). C, D, E மற்றும் G-இல் உள்ள தரவுகள் சராசரி ± திட்ட விலக்கமாகக் காட்டப்பட்டுள்ளன, மேலும் பிழைப்பட்டைகள் திட்ட விலக்கத்தைக் குறிக்கின்றன, ***p < 0.0001. C, D, E மற்றும் G-இல் உள்ள தரவுகள் சராசரி ± திட்ட விலக்கமாகக் காட்டப்பட்டுள்ளன, மேலும் பிழைப்பட்டைகள் திட்ட விலக்கத்தைக் குறிக்கின்றன, ***p < 0.0001. டானி வி சி, டி, இ மற்றும் ஜி ப்ரெட்ஸ்டாவ்லென்டி காக் ஸ்ட்ரெட்னி ± ஸ்டாண்டர்ட்னோ ஆட்க்ளோனேனி, அ பிளான்கி போக்ரெஷ்னோஸ்டெய் ப்ளைட் стандартное отклонение, ***ப <0,0001. C, D, E மற்றும் G-இல் உள்ள தரவுகள் சராசரி ± திட்ட விலக்கமாக வழங்கப்பட்டுள்ளன, மேலும் பிழைப்பட்டைகள் திட்ட விலக்கத்தைக் குறிக்கின்றன, ***p<0.0001. C、D、E 和G 中的数据显示为平均值± SD，误差线代表SD,***p <0.0001。 C、D、E 和G 中的数据显示为平均值± SD，误差线代表SD,***p <0.0001。 டான்னி வி சி, டி, இ மற்றும் ஜி பொகசன்ஸ் காக் ஸ்ரேட்னி ஸ்னாசெனி ± ஸ்டாண்டர்ட்னோ ஒட்க்லோனி, பிளான்கி போக்ரஷ்னஸ்டெய் ப்ளைட் ஸ்டாண்டர்ட்னோ ஒட்க்ளோனெனி, ***ப <0,0001. C, D, E மற்றும் G-இல் உள்ள தரவுகள் சராசரி ± திட்ட விலக்கமாகக் காட்டப்பட்டுள்ளன, பிழைப்பட்டைகள் திட்ட விலக்கத்தைக் குறிக்கின்றன, ***p<0.0001.