உயிரி மருத்துவ பயன்பாடுகளுக்கான நானோதுளை மற்றும் நானோ தடிமனான படலத்தை உருவாக்கும் உயிரியல் ரீதியாகச் செயல்படும் கலவைகள்.

Nature.com ஐப் பார்வையிட்டதற்கு நன்றி. நீங்கள் பயன்படுத்தும் உலாவி பதிப்பில் குறைந்த CSS ஆதரவு உள்ளது. சிறந்த அனுபவத்திற்கு, புதுப்பிக்கப்பட்ட உலாவியைப் பயன்படுத்துமாறு பரிந்துரைக்கிறோம் (அல்லது Internet Explorer இல் இணக்கத்தன்மை பயன்முறையை முடக்கவும்). இதற்கிடையில், தொடர்ச்சியான ஆதரவை உறுதிசெய்ய, ஸ்டைல்கள் மற்றும் ஜாவாஸ்கிரிப்ட் இல்லாமல் தளத்தை ரெண்டர் செய்வோம்.
கட்டுப்பாடற்ற இரத்தப்போக்கு மரணத்திற்கான முக்கிய காரணங்களில் ஒன்றாகும். விரைவான இரத்தக் கசிவை அடைவது, போர், போக்குவரத்து விபத்துகள் மற்றும் இறப்பு குறைப்பு நடவடிக்கைகளின் போது முதலுதவியாக நோயாளியின் உயிர்வாழ்வை உறுதி செய்கிறது. தொடர்ச்சியான கட்டமாக ஒரு எளிய இரத்தக் கசிவு படலத்தை உருவாக்கும் கலவையிலிருந்து (HFFC) பெறப்பட்ட நானோபோரஸ் ஃபைபர்-வலுவூட்டப்பட்ட கூட்டு ஸ்கேஃபோல்ட் (NFRCS) இரத்தக் கசிவைத் தூண்டி மேம்படுத்தும். NFRCS இன் வளர்ச்சி டிராகன்ஃபிளையின் இறக்கையின் வடிவமைப்பை அடிப்படையாகக் கொண்டது. டிராகன்ஃபிளை இறக்கை அமைப்பு குறுக்குவெட்டு மற்றும் நீளமான இறக்கைகளைக் கொண்டுள்ளது, மேலும் நுண் கட்டமைப்பின் ஒருமைப்பாட்டை பராமரிக்க இறக்கை சவ்வுகள் ஒன்றோடொன்று இணைக்கப்பட்டுள்ளன. HFFC நானோமீட்டர் தடிமன் கொண்ட ஒரு படலத்தால் இழையின் மேற்பரப்பை சீராக பூசுகிறது மற்றும் சீரற்ற முறையில் விநியோகிக்கப்பட்ட பருத்தி தடிமன் (Ct) (சிதறடிக்கப்பட்ட கட்டம்) ஐ இணைத்து நானோபோரஸ் கட்டமைப்பை உருவாக்குகிறது. தொடர்ச்சியான மற்றும் சிதறடிக்கப்பட்ட கட்டங்களின் கலவையானது வணிக ரீதியாகக் கிடைக்கும் தயாரிப்புகளுடன் ஒப்பிடும்போது தயாரிப்பின் விலையை பத்து மடங்கு குறைக்கிறது. மாற்றியமைக்கப்பட்ட NFRCS (டம்பான்கள் அல்லது மணிக்கட்டுப்பட்டைகள்) பல்வேறு உயிரி மருத்துவ பயன்பாடுகளில் பயன்படுத்தப்படலாம். உருவாக்கப்பட்ட Cp NFRCS, பயன்படுத்தப்படும் இடத்தில் உறைதல் செயல்முறையைத் தூண்டி மேம்படுத்துகிறது என்று இன் விவோ ஆய்வுகள் முடிவு செய்துள்ளன. NFRCS அதன் நானோதுளை அமைப்பு காரணமாக நுண்ணிய சூழலை மாற்றியமைக்கலாம் மற்றும் செல்லுலார் மட்டத்தில் செயல்படலாம், இதன் விளைவாக வெட்டு காயம் மாதிரியில் சிறந்த காயம் குணமாகும்.
சண்டை, அறுவை சிகிச்சை மற்றும் அவசரகால சூழ்நிலைகளின் போது கட்டுப்பாடற்ற இரத்தப்போக்கு காயமடைந்தவர்களின் உயிருக்கு கடுமையான அச்சுறுத்தலை ஏற்படுத்தக்கூடும்1. இந்த நிலைமைகள் புற வாஸ்குலர் எதிர்ப்பில் ஒட்டுமொத்த அதிகரிப்புக்கு வழிவகுக்கும், இது ரத்தக்கசிவு அதிர்ச்சிக்கு வழிவகுக்கிறது. அறுவை சிகிச்சையின் போது மற்றும் அதற்குப் பிறகு இரத்தப்போக்கைக் கட்டுப்படுத்துவதற்கான பொருத்தமான நடவடிக்கைகள் உயிருக்கு ஆபத்தானதாகக் கருதப்படுகின்றன2,3. பெரிய நாளங்களுக்கு சேதம் ஏற்படுவது பாரிய இரத்த இழப்புக்கு வழிவகுக்கிறது, இதன் விளைவாக போரில் ≤ 50% மற்றும் அறுவை சிகிச்சையின் போது 31% இறப்பு விகிதம் ஏற்படுகிறது1. பாரிய இரத்த இழப்பு உடல் அளவு குறைவதற்கு வழிவகுக்கிறது, இது இதய வெளியீட்டைக் குறைக்கிறது. மொத்த புற வாஸ்குலர் எதிர்ப்பின் அதிகரிப்பு மற்றும் நுண் சுழற்சியின் முற்போக்கான குறைபாடு உயிர் ஆதரவு உறுப்புகளில் ஹைபோக்ஸியாவுக்கு வழிவகுக்கிறது. பயனுள்ள தலையீடு இல்லாமல் நிலை தொடர்ந்தால் ரத்தக்கசிவு அதிர்ச்சி ஏற்படலாம்1,4,5. பிற சிக்கல்களில் தாழ்வெப்பநிலை மற்றும் வளர்சிதை மாற்ற அமிலத்தன்மையின் முன்னேற்றம், அத்துடன் உறைதல் செயல்முறையைத் தடுக்கும் ஒரு உறைதல் கோளாறு ஆகியவை அடங்கும். கடுமையான ரத்தக்கசிவு அதிர்ச்சி இறப்புக்கான அதிக ஆபத்துடன் தொடர்புடையது6,7,8. தரம் III (முற்போக்கான) அதிர்ச்சியில், அறுவை சிகிச்சை மற்றும் அறுவை சிகிச்சைக்குப் பிந்தைய மற்றும் அறுவை சிகிச்சைக்குப் பிந்தைய நோயுற்ற தன்மை மற்றும் இறப்பு ஆகியவற்றின் போது நோயாளி உயிர்வாழ்வதற்கு இரத்தமாற்றம் அவசியம். மேலே உள்ள அனைத்து உயிருக்கு ஆபத்தான சூழ்நிலைகளையும் சமாளிக்க, நீரில் கரையக்கூடிய ஹீமோஸ்டேடிக் பாலிமர்களின் கலவையைப் பயன்படுத்தி குறைந்தபட்ச பாலிமர் செறிவை (0.5%) பயன்படுத்தும் நானோபோரஸ் ஃபைபர்-வலுவூட்டப்பட்ட கூட்டு ஸ்கேஃபோல்டை (NFRCS) நாங்கள் உருவாக்கியுள்ளோம்.
ஃபைபர் வலுவூட்டலைப் பயன்படுத்துவதன் மூலம், செலவு குறைந்த தயாரிப்புகளை உருவாக்க முடியும். சீரற்ற முறையில் அமைக்கப்பட்ட இழைகள் ஒரு தட்டாம்பூச்சியின் இறக்கையின் அமைப்பை ஒத்திருக்கின்றன, இறக்கைகளில் கிடைமட்ட மற்றும் செங்குத்து கோடுகளால் சமப்படுத்தப்படுகின்றன. இறக்கையின் குறுக்குவெட்டு மற்றும் நீளமான நரம்புகள் இறக்கை சவ்வுடன் தொடர்பு கொள்கின்றன (படம் 1). NFRCS சிறந்த உடல் மற்றும் இயந்திர வலிமையுடன் கூடிய ஸ்கஃபோல்ட் அமைப்பாக வலுவூட்டப்பட்ட Ct ஐக் கொண்டுள்ளது (படம் 1). மலிவு மற்றும் கைவினைத்திறன் காரணமாக, அறுவை சிகிச்சைகள் மற்றும் டிரஸ்ஸிங் போது அறுவை சிகிச்சை நிபுணர்கள் பருத்தி நூல் அளவீடுகளை (Ct) பயன்படுத்த விரும்புகிறார்கள். எனவே, 90% க்கும் அதிகமான படிக செல்லுலோஸ் (ஹீமோஸ்டேடிக் செயல்பாட்டை மேம்படுத்துகிறது) உட்பட அதன் பல நன்மைகளைக் கருத்தில் கொண்டு, Ct NFRCS9,10 இன் எலும்புக்கூடு அமைப்பாகப் பயன்படுத்தப்பட்டது. எனவே, 90% க்கும் அதிகமான படிக செல்லுலோஸ் (ஹீமோஸ்டேடிக் செயல்பாட்டை மேம்படுத்துகிறது) உட்பட அதன் பல நன்மைகளைக் கருத்தில் கொண்டு, Ct NFRCS9,10 இன் எலும்புக்கூடு அமைப்பாகப் பயன்படுத்தப்பட்டது. க்ளெடோவடெல்னோ, உச்சித்வயா எகோ மெனோகோச்சிஸ்லென்னியே ப்ரீமியூஷெஸ்ட்வா, வி டாம் சிஸ்லே > 90% கிரிஸ்டலிசெஸ்காய் (சுருட்டல் போவிஷெனி, கேமொஸ்டாடிசெஸ்காய் ஆக்டிவ்னோஸ்டி), சி.டி. எனவே, >90% படிக செல்லுலோஸ் (அதிகரித்த ஹீமோஸ்டேடிக் செயல்பாட்டில் ஈடுபட்டுள்ளது) உட்பட அதன் பல நன்மைகளைக் கருத்தில் கொண்டு, Ct NFRCS எலும்புக்கூடு அமைப்பாகப் பயன்படுத்தப்பட்டது9,10.因此,考虑到它的多重益处,包括> 90% 的结晶纤维素被用作NFRCS9,10 的骨架系统。因此,考虑到它的多重益处,包括> 90%எனவே, 90% க்கும் அதிகமான படிக செல்லுலோஸ் (ஹீமோஸ்டேடிக் செயல்பாட்டை மேம்படுத்த உதவுகிறது) உட்பட அதன் பல நன்மைகளைக் கருத்தில் கொண்டு, Ct NFRCS9,10 க்கு ஒரு சாரக்கட்டுமாகப் பயன்படுத்தப்பட்டது.Ct மேலோட்டமாக பூசப்பட்டிருந்தது (நானோ-தடிமனான படல உருவாக்கம் காணப்பட்டது) மற்றும் ஒரு ஹீமோஸ்டேடிக் படல-உருவாக்கும் கலவையுடன் (HFFC) ஒன்றோடொன்று இணைக்கப்பட்டிருந்தது. HFFC ஒரு மேட்ரிகல் போல செயல்படுகிறது, சீரற்ற முறையில் வைக்கப்பட்ட Ct ஐ ஒன்றாக வைத்திருக்கிறது. உருவாக்கப்பட்ட வடிவமைப்பு சிதறடிக்கப்பட்ட கட்டத்தில் (இழைகளை வலுப்படுத்தும்) அழுத்தத்தை கடத்துகிறது. குறைந்தபட்ச பாலிமர் செறிவுகளைப் பயன்படுத்தி நல்ல இயந்திர வலிமையுடன் நானோபோரஸ் கட்டமைப்புகளைப் பெறுவது கடினம். கூடுதலாக, வெவ்வேறு உயிரி மருத்துவ பயன்பாடுகளுக்கு வெவ்வேறு அச்சுகளைத் தனிப்பயனாக்குவது எளிதல்ல.
இந்தப் படம் தட்டாம்பூச்சியின் இறக்கை அமைப்பை அடிப்படையாகக் கொண்ட NFRCS வடிவமைப்பின் வரைபடத்தைக் காட்டுகிறது (A). இந்தப் படம் தட்டாம்பூச்சியின் இறக்கை அமைப்பின் ஒப்பீட்டு ஒப்புமையையும் (இறக்கையின் வெட்டும் மற்றும் நீளமான நரம்புகள் ஒன்றோடொன்று இணைக்கப்பட்டுள்ளன) Cp NFRCS (B) இன் குறுக்கு வெட்டு ஒளிப்பட நுண்ணோக்கியையும் காட்டுகிறது. NFRCS இன் திட்டவட்டமான பிரதிநிதித்துவம்.
மேற்கூறிய வரம்புகளை நிவர்த்தி செய்வதற்காக தொடர்ச்சியான கட்டமாக HFFC ஐப் பயன்படுத்தி NFRCகள் உருவாக்கப்பட்டன. HFFC பல்வேறு படலத்தை உருவாக்கும் ஹீமோஸ்டேடிக் பாலிமர்களைக் கொண்டுள்ளது, இதில் சிட்டோசன் (முக்கிய ஹீமோஸ்டேடிக் பாலிமராக) மெத்தில்செல்லுலோஸ் (MC), ஹைட்ராக்ஸிப்ரோபில் மெத்தில்செல்லுலோஸ் (HPMC 50 cp) மற்றும் பாலிவினைல் ஆல்கஹால் (PVA)) (125 kDa) ஆகியவை த்ரோம்பஸ் உருவாவதை ஊக்குவிக்கும் ஒரு துணை பாலிமராக உள்ளன. உருவாக்கம். பாலிவினைல்பைரோலிடின் K30 (PVP K30) சேர்ப்பது NFRCS இன் ஈரப்பதத்தை உறிஞ்சும் திறனை மேம்படுத்தியது. பிணைக்கப்பட்ட பாலிமர் கலவைகளில் பாலிமர் குறுக்கு இணைப்பை மேம்படுத்த பாலிஎதிலீன் கிளைக்கால் 400 (PEG 400) சேர்க்கப்பட்டது. மூன்று வெவ்வேறு HFFC ஹீமோஸ்டேடிக் கலவைகள் (Cm HFFC, Ch HFFC மற்றும் Cp HFFC), அதாவது MC (Cm) உடன் சிட்டோசன், HPMC (Ch) உடன் சிட்டோசன் மற்றும் PVA (Cp) உடன் சிட்டோசன் ஆகியவை Ct இல் பயன்படுத்தப்பட்டன. பல்வேறு இன் விட்ரோ மற்றும் இன் விவோ குணாதிசய ஆய்வுகள் NFRCS இன் ஹீமோஸ்டேடிக் மற்றும் காயம் குணப்படுத்தும் செயல்பாட்டை உறுதிப்படுத்தியுள்ளன. குறிப்பிட்ட தேவைகளைப் பூர்த்தி செய்ய பல்வேறு வகையான சாரக்கட்டுகளைத் தனிப்பயனாக்க NFRCS வழங்கும் கூட்டுப் பொருட்களைப் பயன்படுத்தலாம்.
கூடுதலாக, NFRCS-ஐ கீழ் மூட்டுகள் மற்றும் உடலின் பிற பாகங்களின் முழு காயப் பகுதியையும் மறைக்க ஒரு கட்டு அல்லது ரோலாக மாற்றியமைக்கலாம். குறிப்பாக போர் மூட்டு காயங்களுக்கு, வடிவமைக்கப்பட்ட NFRCS வடிவமைப்பை அரை கை அல்லது முழு காலாக மாற்றலாம் (துணை படம் S11). NFRCS-ஐ திசு பசை கொண்ட மணிக்கட்டு பட்டையாக மாற்றலாம், இது கடுமையான தற்கொலை மணிக்கட்டு காயங்களிலிருந்து இரத்தப்போக்கை நிறுத்தப் பயன்படுகிறது. முடிந்தவரை சிறிய பாலிமருடன் கூடிய NFRCS-ஐ உருவாக்குவதே எங்கள் முக்கிய குறிக்கோள், இது ஒரு பெரிய மக்கள்தொகைக்கு (வறுமைக் கோட்டுக்குக் கீழே) வழங்கப்படலாம் மற்றும் அதை முதலுதவி பெட்டியில் வைக்கலாம். வடிவமைப்பில் எளிமையானது, திறமையானது மற்றும் சிக்கனமானது, NFRCS உள்ளூர் சமூகங்களுக்கு பயனளிக்கிறது மற்றும் உலகளாவிய தாக்கத்தை ஏற்படுத்தும்.
சிட்டோசன் (மூலக்கூறு எடை 80 kDa) மற்றும் அமராந்த் ஆகியவை இந்தியாவின் மெர்க்கிலிருந்து வாங்கப்பட்டன. ஹைட்ராக்ஸிப்ரோபில் மெத்தில்செல்லுலோஸ் 50 Cp, பாலிஎதிலீன் கிளைகோல் 400 மற்றும் மெத்தில்செல்லுலோஸ் ஆகியவை மும்பையின் லோபா கெமி பிரைவேட் லிமிடெட் எல்எல்சியிலிருந்து வாங்கப்பட்டன. பாலிவினைல் ஆல்கஹால் (மூலக்கூறு எடை 125 kDa) (87-90% ஹைட்ரோலைஸ் செய்யப்பட்டது) குஜராத்தின் நேஷனல் கெமிக்கல்ஸிலிருந்து வாங்கப்பட்டது. பாலிவினைல்பைரோலிடின் K30 மும்பையின் மோலிகெமிலிருந்து வாங்கப்பட்டது, ஸ்டெரைல் ஸ்வாப்கள் தமிழ்நாட்டின் ராமராஜு சர்ஜரி காட்டன் மில்ஸ் லிமிடெட் நிறுவனத்திலிருந்து வாங்கப்பட்டன, மில்லி கியூ நீர் (நேரடி-Q3 நீர் சுத்திகரிப்பு அமைப்பு, மெர்க், இந்தியா) கேரியராக இருந்தது.
NFRCS ஒரு லியோபிலைசேஷன் முறையைப் பயன்படுத்தி உருவாக்கப்பட்டது11,12. அனைத்து HFFC கலவைகளும் (அட்டவணை 1) ஒரு இயந்திர கிளறியைப் பயன்படுத்தி தயாரிக்கப்பட்டன. ஒரு இயந்திர கிளறியில் 800 rpm இல் தொடர்ந்து கிளறி, தண்ணீரில் 1% அசிட்டிக் அமிலத்தைப் பயன்படுத்தி 0.5% சிட்டோசன் கரைசலைத் தயாரிக்கவும். அட்டவணை 1 இல் சுட்டிக்காட்டப்பட்ட ஏற்றப்பட்ட பாலிமரின் சரியான எடை சிட்டோசன் கரைசலில் சேர்க்கப்பட்டு, தெளிவான பாலிமர் கரைசல் கிடைக்கும் வரை கிளறப்பட்டது. அட்டவணை 1 இல் சுட்டிக்காட்டப்பட்ட அளவுகளில் விளைந்த கலவையில் PVP K30 மற்றும் PEG 400 சேர்க்கப்பட்டன, மேலும் தெளிவான பிசுபிசுப்பான பாலிமர் கரைசல் கிடைக்கும் வரை கிளறுதல் தொடர்ந்தது. பாலிமர் கலவையிலிருந்து சிக்கிய காற்று குமிழ்களை அகற்ற பாலிமர் கரைசலின் விளைவாக குளியல் 60 நிமிடங்கள் ஒலியூட்டப்பட்டது. துணை படம் S1(b) இல் காட்டப்பட்டுள்ளபடி, 5 மில்லி HFFC உடன் கூடுதலாக வழங்கப்பட்ட 6-கிணறு தகட்டின் (அச்சு) ஒவ்வொரு கிணற்றிலும் Ct சமமாக விநியோகிக்கப்பட்டது.
Ct நெட்வொர்க்கில் சீரான ஈரப்பதம் மற்றும் HFFC பரவலை அடைய ஆறு கிணறு தகடு 60 நிமிடங்களுக்கு சோனிகேட்டட் செய்யப்பட்டது. பின்னர் ஆறு கிணறு தகட்டை -20°C இல் 8-12 மணி நேரம் உறைய வைக்கவும். NFRCS இன் பல்வேறு சூத்திரங்களைப் பெற உறைந்த தகடுகள் 48 மணி நேரம் லியோபிலைஸ் செய்யப்பட்டன. டம்பான்கள் அல்லது உருளை டம்பான்கள் அல்லது வெவ்வேறு பயன்பாடுகளுக்கான வேறு எந்த வடிவத்தையும் போன்ற வெவ்வேறு வடிவங்கள் மற்றும் கட்டமைப்புகளை உருவாக்க அதே செயல்முறை பயன்படுத்தப்படுகிறது.
துல்லியமாக எடைபோடப்பட்ட சிட்டோசன் (80 kDa) (3%) காந்தக் கிளறியைப் பயன்படுத்தி 1% அசிட்டிக் அமிலத்தில் கரைக்கப்படுகிறது. இதன் விளைவாக வரும் சிட்டோசனின் கரைசலில் 1% PEG 400 சேர்க்கப்பட்டு 30 நிமிடங்கள் கலக்கப்படுகிறது. இதன் விளைவாக வரும் கரைசலை ஒரு சதுர அல்லது செவ்வக கொள்கலனில் ஊற்றி -80°C இல் 12 மணி நேரம் உறைய வைக்கவும். உறைந்த மாதிரிகள் 48 மணி நேரம் லியோபிலிஸ் செய்யப்பட்டு நுண்துளை Cs13 ஐப் பெறப்பட்டன.
உருவாக்கப்பட்ட NFRCS, மற்ற பாலிமர்களுடன் சிட்டோசனின் வேதியியல் பொருந்தக்கூடிய தன்மையை உறுதிப்படுத்த ஃபோரியர் டிரான்ஸ்ஃபார்ம் அகச்சிவப்பு நிறமாலை (FTIR) (ஷிமாட்ஸு 8400s FTIR, டோக்கியோ, ஜப்பான்) ஐப் பயன்படுத்தி சோதனைகளுக்கு உட்படுத்தப்பட்டது. சோதனை செய்யப்பட்ட அனைத்து மாதிரிகளின் FTIR நிறமாலை (400 முதல் 4000 செ.மீ-1 வரையிலான நிறமாலை வரம்பின் அகலம்) 32 ஸ்கேன்களைச் செய்வதன் மூலம் பெறப்பட்டது.
அனைத்து சூத்திரங்களுக்கான இரத்த உறிஞ்சுதல் விகிதம் (BAR) சென் மற்றும் பலர் விவரித்த முறையைப் பயன்படுத்தி சிறிய மாற்றங்களுடன் மதிப்பிடப்பட்டது. அனைத்து கலவைகளின் உருவாக்கப்பட்ட NFRK களும் எஞ்சிய கரைப்பானை அகற்றுவதற்காக ஒரே இரவில் 105°C வெப்பநிலையில் ஒரு வெற்றிட அடுப்பில் உலர்த்தப்பட்டன. 30 mg NFRCS (ஆரம்ப மாதிரி எடை - W0) மற்றும் 30 mg Ct (நேர்மறை கட்டுப்பாடு) ஆகியவை 3.8% சோடியம் சிட்ரேட்டின் முன்கலவை கொண்ட தனித்தனி பாத்திரங்களில் வைக்கப்பட்டன. முன்னரே தீர்மானிக்கப்பட்ட நேர இடைவெளியில், அதாவது 5, 10, 20, 30, 40 மற்றும் 60 வினாடிகளில், NFRCS அகற்றப்பட்டு, மாதிரிகளை 30 வினாடிகளுக்கு Ct இல் வைப்பதன் மூலம் அவற்றின் மேற்பரப்புகள் உறிஞ்சப்படாத இரத்தத்திலிருந்து சுத்தம் செய்யப்பட்டன. NFRCS 16 ஆல் உறிஞ்சப்படும் இரத்தத்தின் இறுதி எடை ஒவ்வொரு நேரப் புள்ளியிலும் (W1) கருதப்பட்டது. பின்வரும் சூத்திரத்தைப் பயன்படுத்தி BAR சதவீதத்தைக் கணக்கிடுங்கள்:
வாங் மற்றும் பலர் அறிக்கை செய்தபடி இரத்த உறைதல் நேரம் (BCT) தீர்மானிக்கப்பட்டது. 17. NFRCS முன்னிலையில் முழு இரத்தமும் (3.8% சோடியம் சிட்ரேட்டுடன் முன் கலக்கப்பட்ட எலி இரத்தம்) உறைவதற்குத் தேவையான நேரம் சோதனை மாதிரியின் BCT ஆகக் கணக்கிடப்பட்டது. பல்வேறு NFRCS கூறுகள் (30 மி.கி) 10 மில்லி திருகு மூடி குப்பிகளில் வைக்கப்பட்டு 37°C இல் அடைகாக்கப்பட்டன. இரத்தம் (0.5 மி.லி) குப்பியில் சேர்க்கப்பட்டு, இரத்த உறைதலை செயல்படுத்த 0.2 M CaCl2 இன் 0.3 மில்லி சேர்க்கப்பட்டது. இறுதியாக, ஒரு உறுதியான உறைவு உருவாகும் வரை ஒவ்வொரு 15 வினாடிகளுக்கும் (180° வரை) குப்பியைத் தலைகீழாக மாற்றவும். மாதிரியின் BCT, ஃப்ளிப்ஸ் வெயில்களின் எண்ணிக்கையால் மதிப்பிடப்படுகிறது17,18. BCT அடிப்படையில், மேலும் குணாதிசய ஆய்வுகளுக்கு NFRCS Cm, Ch மற்றும் Cp இலிருந்து இரண்டு உகந்த கலவைகள் தேர்ந்தெடுக்கப்பட்டன.
Ch NFRCS மற்றும் Cp NFRCS கலவைகளின் BCT, Li et al. 19 விவரித்த முறையை செயல்படுத்துவதன் மூலம் தீர்மானிக்கப்பட்டது. 15 x 15 mm2 Ch NFRCS, Cp NFRCS மற்றும் Cs (நேர்மறை கட்டுப்பாடு) ஆகியவற்றை தனித்தனி பெட்ரி டிஷ்களில் (37 °C) வைக்கவும். 3.8% சோடியம் சிட்ரேட்டைக் கொண்ட இரத்தம் 0.2 M CaCl2 உடன் 10:1 அளவு விகிதத்தில் கலக்கப்பட்டு இரத்த உறைதல் செயல்முறையைத் தொடங்கியது. 20 µl 0.2 M CaCl2 எலி இரத்த கலவை மாதிரி மேற்பரப்பில் பயன்படுத்தப்பட்டு வெற்று பெட்ரி டிஷ்ஷில் வைக்கப்பட்டது. கட்டுப்பாடு Ct இல்லாமல் வெற்று பெட்ரி டிஷ்ஷில் இரத்தம் ஊற்றப்பட்டது. 0, 3 மற்றும் 5 நிமிட நிலையான இடைவெளியில், டிஷ்ஷைக் கொண்ட மாதிரியில் 10 மில்லி டீயோனைஸ்டு (DI) தண்ணீரைச் சேர்ப்பதன் மூலம் உறைதலை நிறுத்தவும். உறையாத எரித்ரோசைட்டுகள் (எரித்ரோசைட்டுகள்) டீயோனைஸ்டு நீரின் முன்னிலையில் ஹீமோலிசிஸுக்கு உட்படுகின்றன மற்றும் ஹீமோகுளோபினை வெளியிடுகின்றன. UV-Vis நிறமாலை ஒளிமானியைப் பயன்படுத்தி வெவ்வேறு நேரப் புள்ளிகளில் (HA(t)) ஹீமோகுளோபின் 540 nm (λmax hemoglobin) இல் அளவிடப்பட்டது. 10 மில்லி அயனியாக்கம் செய்யப்பட்ட நீரில் 20 µl இரத்தத்தில் 0 நிமிடத்தில் ஹீமோகுளோபின் (AH(0)) இன் முழுமையான உறிஞ்சுதல் ஒரு குறிப்பு தரமாக எடுத்துக் கொள்ளப்பட்டது. உறைந்த இரத்தத்தின் ஒப்பீட்டு ஹீமோகுளோபின் உறிஞ்சுதல் (RHA) அதே தொகுதி இரத்தத்தைப் பயன்படுத்தி HA(t)/HA(0) விகிதத்திலிருந்து கணக்கிடப்பட்டது.
ஒரு டெக்ஸ்ச்சர் பகுப்பாய்வியைப் (டெக்ஸ்ச்சர் ப்ரோ CT V1.3 பில்ட் 15, ப்ரூக்ஃபீல்ட், அமெரிக்கா) பயன்படுத்தி, சேதமடைந்த திசுக்களுக்கு NFRK இன் ஒட்டும் பண்புகள் தீர்மானிக்கப்பட்டன. பன்றி இறைச்சி தோலின் உட்புறத்தில் (கொழுப்பு அடுக்கு இல்லாமல்) திறந்த-அடிப்பகுதி கொண்ட உருளை வடிவ பாத்திரத்தை அழுத்தவும். பன்றியின் தோலில் ஒட்டுதலை உருவாக்க மாதிரிகள் (Ch NFRCS மற்றும் Cp NFRCS) கேனுலா வழியாக உருளை அச்சுகளில் பயன்படுத்தப்பட்டன. அறை வெப்பநிலையில் (RT) (25° C) 3 நிமிட அடைகாத்தலுக்குப் பிறகு, NFRCS ஒட்டும் வலிமை 0.5 மிமீ/வினாடி என்ற நிலையான விகிதத்தில் பதிவு செய்யப்பட்டது.
அறுவை சிகிச்சை சீலண்டுகளின் முக்கிய அம்சம் இரத்த இழப்பைக் குறைக்கும் அதே வேளையில் இரத்த உறைதலை அதிகரிப்பதாகும். NFRCS இல் இழப்பற்ற உறைதல் முன்னர் வெளியிடப்பட்ட முறையைப் பயன்படுத்தி சிறிய மாற்றங்களுடன் மதிப்பிடப்பட்டது 19. மையவிலக்கு குழாயின் ஒரு பக்கத்தில் 8 × 5 மிமீ2 துளையுடன் ஒரு மைக்ரோசென்ட்ரிஃபியூஜ் குழாய் (2 மில்லி) (உள் விட்டம் 10 மிமீ) செய்யுங்கள் (திறந்த காயத்தைக் குறிக்கிறது). திறப்பை மூட NFRCS பயன்படுத்தப்படுகிறது மற்றும் வெளிப்புற விளிம்புகளை மூட டேப் பயன்படுத்தப்படுகிறது. 3.8% சோடியம் சிட்ரேட் ப்ரீமிக்ஸ் கொண்ட மைக்ரோசென்ட்ரிஃபியூஜ் குழாயில் 0.2 M CaCl2 இன் 20 µl சேர்க்கவும். 10 நிமிடங்களுக்குப் பிறகு, மைக்ரோசென்ட்ரிஃபியூஜ் குழாய்கள் பாத்திரங்களிலிருந்து அகற்றப்பட்டன, மேலும் NFRK (n = 3) இலிருந்து இரத்தம் வெளியேறுவதால் பாத்திரங்களின் நிறை அதிகரிப்பு தீர்மானிக்கப்பட்டது. இரத்த இழப்பு Ch NFRCS மற்றும் Cp NFRCS ஆகியவை Cs உடன் ஒப்பிடப்பட்டன.
மிஸ்ரா மற்றும் சவுத்ரி விவரித்த முறையின் அடிப்படையில் NFRCS இன் ஈரமான ஒருமைப்பாடு சிறிய மாற்றங்களுடன் தீர்மானிக்கப்பட்டது. NFRCS ஐ 100 மில்லி எர்லென்மேயர் பிளாஸ்கில் 50 மில்லி தண்ணீருடன் வைத்து, மேல் பகுதி உருவாகாமல் 60 வினாடிகள் சுழற்றுங்கள். சேகரிப்பின் அடிப்படையில் உடல் ஒருமைப்பாட்டிற்கான மாதிரிகளின் காட்சி ஆய்வு மற்றும் முன்னுரிமை.
முன்னர் வெளியிடப்பட்ட முறைகளைப் பயன்படுத்தி சிறிய மாற்றங்களுடன் HFFC முதல் Ct வரையிலான பிணைப்பு வலிமை ஆய்வு செய்யப்பட்டது. மில்லிக்யூ நீர் (Ct) முன்னிலையில் NFRK ஐ ஒலி அலைகளுக்கு (வெளிப்புற தூண்டுதல்) வெளிப்படுத்துவதன் மூலம் மேற்பரப்பு பூச்சு ஒருமைப்பாடு மதிப்பிடப்பட்டது. உருவாக்கப்பட்ட NFRCS Ch NFRCS மற்றும் Cp NFRCS ஆகியவை தண்ணீரில் நிரப்பப்பட்ட ஒரு பீக்கரில் வைக்கப்பட்டு முறையே 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10 மற்றும் 30 நிமிடங்களுக்கு ஒலி நீக்கம் செய்யப்பட்டன. உலர்த்திய பிறகு, NFRCS இன் ஆரம்ப மற்றும் இறுதி எடைக்கு இடையிலான சதவீத வேறுபாடு பொருளின் சதவீத இழப்பைக் கணக்கிடப் பயன்படுத்தப்பட்டது (HFFC). இன் விட்ரோ BCT மேற்பரப்பு பொருட்களின் பிணைப்பு வலிமை அல்லது இழப்பை மேலும் ஆதரித்தது. Ct உடன் HFFC பிணைப்பின் செயல்திறன் Ct22 இன் மேற்பரப்பில் இரத்த உறைதல் மற்றும் மீள் பூச்சு ஆகியவற்றை வழங்குகிறது.
NFRCS இன் சீரற்ற முறையில் தேர்ந்தெடுக்கப்பட்ட பொதுவான இடங்களிலிருந்து எடுக்கப்பட்ட மாதிரிகளின் BCT (30 மி.கி) மூலம் உருவாக்கப்பட்ட NFRCS இன் ஒருமைப்பாடு தீர்மானிக்கப்பட்டது. NFRCS இணக்கத்தை தீர்மானிக்க முன்னர் குறிப்பிடப்பட்ட BCT நடைமுறையைப் பின்பற்றவும். ஐந்து மாதிரிகளுக்கும் இடையிலான அருகாமை, Ct வலையமைப்பில் சீரான மேற்பரப்பு கவரேஜ் மற்றும் HFFC படிவை உறுதி செய்கிறது.
முன்னர் அறிவிக்கப்பட்டபடி, சில மாற்றங்களுடன் பெயரளவு இரத்த தொடர்பு பகுதி (NBCA) தீர்மானிக்கப்பட்டது. Ct, Ch NFRCS, Cp NFRCS மற்றும் Cs ஆகிய இரண்டு மேற்பரப்புகளுக்கு இடையில் 20 µl இரத்தத்தை இறுக்குவதன் மூலம் இரத்தத்தை உறைய வைக்கவும். 1 மணி நேரத்திற்குப் பிறகு, ஸ்டெண்டின் இரண்டு பகுதிகளும் பிரிக்கப்பட்டு, இரத்த உறைவின் பகுதியை கைமுறையாக அளவிடப்பட்டன. மூன்று முறை மீண்டும் மீண்டும் செய்வதன் சராசரி மதிப்பு NBCA NFRCS19 என்று கருதப்பட்டது.
வெளிப்புற சூழலில் இருந்து அல்லது உறைதலைத் தொடங்குவதற்குப் பொறுப்பான காயம் ஏற்பட்ட இடத்திலிருந்து நீரை உறிஞ்சுவதற்கு NFRCS இன் செயல்திறனை மதிப்பிடுவதற்கு டைனமிக் வேப்பர் சர்ப்ஷன் (DVS) பகுப்பாய்வு பயன்படுத்தப்பட்டது. DVS, ±0.1 µg நிறை தெளிவுத்திறனுடன் கூடிய அல்ட்ரா-சென்சிட்டிவ் சமநிலையைப் பயன்படுத்தி, கிராவிமெட்ரிக் முறையில் ஒரு மாதிரியில் நீராவி உறிஞ்சுதல் மற்றும் இழப்பை மதிப்பிடுகிறது அல்லது பதிவு செய்கிறது. நிறைவுற்ற மற்றும் உலர்ந்த கேரியர் வாயுக்களைக் கலப்பதன் மூலம் மாதிரியைச் சுற்றி ஒரு மின்னணு நிறை ஓட்டக் கட்டுப்படுத்தியால் ஒரு பகுதி நீராவி அழுத்தம் (ஒப்பீட்டு ஈரப்பதம்) உருவாக்கப்படுகிறது. மாதிரிகள் ஈரப்பதத்தை எவ்வளவு எடுத்துக்கொள்கின்றன என்பதன் அடிப்படையில், ஐரோப்பிய மருந்தக வழிகாட்டுதல்களின்படி, மாதிரிகள் 4 வகைகளாக வகைப்படுத்தப்பட்டன (0–0.012% w/w− ஹைக்ரோஸ்கோபிக் அல்லாதவை, 0.2–2% w/w சிறிது ஹைக்ரோஸ்கோபிக், 2–15% மிதமான ஹைக்ரோஸ்கோபிக் மற்றும் > 15% மிகவும் ஹைக்ரோஸ்கோபிக்)23. மாதிரிகள் ஈரப்பதத்தை எவ்வளவு எடுத்துக்கொள்கின்றன என்பதன் அடிப்படையில், ஐரோப்பிய மருந்தக வழிகாட்டுதல்களின்படி, மாதிரிகள் 4 வகைகளாக வகைப்படுத்தப்பட்டன (0–0.012% w/w− ஹைக்ரோஸ்கோபிக் அல்லாதவை, 0.2–2% w/w சிறிது ஹைக்ரோஸ்கோபிக், 2–15% மிதமான ஹைக்ரோஸ்கோபிக் மற்றும் > 15% மிகவும் ஹைக்ரோஸ்கோபிக்)23.ஐரோப்பிய மருந்தக அமைப்பின் பரிந்துரைகளின்படி, மாதிரிகள் ஈரப்பதத்தை உறிஞ்சும் சதவீதத்தைப் பொறுத்து, மாதிரிகள் 4 வகைகளாகப் பிரிக்கப்பட்டன (0–0.012% w/w – ஹைக்ரோஸ்கோபிக் அல்லாதது, 0.2–2% w/w சிறிது ஹைக்ரோஸ்கோபிக், 2– பதினைந்து%).% உமெரென்னோ ஜிக்ரோஸ்கோபிசென் மற்றும் > 15% ஓச்சன் கிக்ரோஸ்கோபிச்சென்)23. % மிதமான நீர் உறிஞ்சும் தன்மை கொண்டது மற்றும் > 15% மிகவும் நீர் உறிஞ்சும் தன்மை கொண்டது)23.根据欧洲药典指南,根据样品吸收水分的百分比,样品分为4 类(0-0.012% w/w-20.2% w/w- w/w 轻微吸湿性、2-15 % 适度吸湿,> 15% 非常吸湿)23。மேலும்吸湿 性 、 、 、 、 0.2-2% W/w 轻微 、 2-15% 适度 吸湿 ,> 15 %非常吸湿)23。ஐரோப்பிய மருந்தகவியல் பரிந்துரைகளின்படி, மாதிரியால் உறிஞ்சப்படும் ஈரப்பதத்தின் சதவீதத்தைப் பொறுத்து மாதிரிகள் 4 வகுப்புகளாகப் பிரிக்கப்படுகின்றன (எடையால் 0-0.012% - ஹைக்ரோஸ்கோபிக் அல்லாதது, எடையால் 0.2-2% சற்று ஹைக்ரோஸ்கோபிக், எடையால் 2-15%).% உமரென்னோ ஜிக்ரோஸ்கோபிசென், > 15 % ஓச்சன் கிக்ரோஸ்கோபிசென்) 23. % மிதமான நீர் உறிஞ்சும் தன்மை கொண்டது, > 15% மிகவும் நீர் உறிஞ்சும் தன்மை கொண்டது) 23.NFCS X NFCS மற்றும் TsN NFCS இன் ஹைக்ரோஸ்கோபிக் செயல்திறன் DVS TA TGA Q5000 SA என்ற பகுப்பாய்வியில் தீர்மானிக்கப்பட்டது. இந்த செயல்முறையின் போது, ​​இயக்க நேரம், ஒப்பீட்டு ஈரப்பதம் (RH) மற்றும் 25°C24 இல் நிகழ்நேர மாதிரி எடை ஆகியவை பெறப்பட்டன. ஈரப்பதம் பின்வரும் சமன்பாட்டைப் பயன்படுத்தி துல்லியமான NFRCS நிறை பகுப்பாய்வு மூலம் கணக்கிடப்படுகிறது:
MC என்பது NFRCS ஈரப்பதம். m1 - NSAID களின் உலர் எடை. m2 என்பது கொடுக்கப்பட்ட RH இல் நிகழ்நேர NFRCS நிறை ஆகும்.
10 மணிநேரத்திற்கு (<7 × 10–3 Torr) 25 °C வெப்பநிலையில் மாதிரிகளை காலி செய்த பிறகு, திரவ நைட்ரஜனுடன் நைட்ரஜன் உறிஞ்சுதல் பரிசோதனையைப் பயன்படுத்தி மொத்த மேற்பரப்புப் பரப்பளவு மதிப்பிடப்பட்டது. 10 மணிநேரத்திற்கு (<7 × 10–3 Torr) 25 °C வெப்பநிலையில் மாதிரிகளை காலி செய்த பிறகு, திரவ நைட்ரஜனுடன் நைட்ரஜன் உறிஞ்சுதல் பரிசோதனையைப் பயன்படுத்தி மொத்த மேற்பரப்புப் பரப்பளவு மதிப்பிடப்பட்டது. அட்ஸார்பிஸிஸ் அசோட்டா ஜிட்கிம் அட்ஸார்பிஸிஸ் அஸோடா ஜிட்கிம் опорожнения образцов при 25 °С в течение 10 ч (< 7 × 10-3 Торр). 10 மணிநேரத்திற்கு (<7 × 10–3 Torr) 25°C வெப்பநிலையில் மாதிரிகள் காலி செய்யப்பட்ட பிறகு, திரவ நைட்ரஜனுடன் நைட்ரஜன் உறிஞ்சுதல் பரிசோதனையைப் பயன்படுத்தி மொத்த மேற்பரப்புப் பரப்பளவு மதிப்பிடப்பட்டது.在25°C 清空样品10 小时(< 7 × 10-3 Torr)后,使用液氮的氮吸附实验伧计总表在 25°C அட்ஸார்பிஸிஸ் அஸோக்டா ஜிம்டோவலிஸ் опорожнения образцов в течение 10 часов при 25°C (< 7 × 10-3 тор). 25°C (<7 x 10-3 torr) வெப்பநிலையில் 10 மணி நேரம் மாதிரிகள் காலி செய்யப்பட்ட பிறகு, திரவ நைட்ரஜனுடன் நைட்ரஜன் உறிஞ்சுதல் பரிசோதனைகளைப் பயன்படுத்தி மொத்த மேற்பரப்புப் பரப்பளவு மதிப்பிடப்பட்டது.RS 232 மென்பொருளைப் பயன்படுத்தி ஆஸ்திரியாவின் NOVA 1000e இலிருந்து ஒரு குவாண்டாக்ரோம் மூலம் மொத்த மேற்பரப்பு பரப்பளவு, துளை அளவு மற்றும் NFRCS துளை அளவு தீர்மானிக்கப்பட்டது.
முழு இரத்தத்திலிருந்து 5% RBC களை (நீர்த்த உப்பு) தயாரிக்கவும். பின்னர் ஒரு சிறிய அளவு HFFC (0.25 மில்லி) ஐ 96-கிணறு தட்டுக்கும் 5% RBC நிறைக்கும் (0.1 மில்லி) மாற்றவும். கலவையை 37°C வெப்பநிலையில் 40 நிமிடங்கள் அடைகாக்கவும். சிவப்பு இரத்த அணுக்கள் மற்றும் சீரம் கலவை நேர்மறை கட்டுப்பாட்டாகவும், உப்பு மற்றும் சிவப்பு இரத்த அணுக்களின் கலவை எதிர்மறை கட்டுப்பாட்டாகவும் கருதப்பட்டது. ஸ்டாஜிட்ஸ்கி அளவுகோலின் படி ஹேமக்ளூட்டினேஷன் தீர்மானிக்கப்பட்டது. முன்மொழியப்பட்ட அளவுகள் பின்வருமாறு: + + + + அடர்த்தியான சிறுமணி திரட்டுகள்; வளைந்த விளிம்புகளுடன் + + மென்மையான கீழ் பட்டைகள்; கிழிந்த விளிம்புகளுடன் + + மென்மையான கீழ் பட்டைகள்; + மென்மையான பட்டைகளின் விளிம்புகளைச் சுற்றி குறுகிய சிவப்பு வளையங்கள்; - (எதிர்மறை) கீழ் கிணற்றின் மையத்தில் தனித்த சிவப்பு பொத்தான் 12.
NFRCS இன் ஹீமோகாம்படிபிலிட்டி சர்வதேச தரப்படுத்தல் அமைப்பின் (ISO) (ISO10993-4, 1999) முறையின்படி ஆய்வு செய்யப்பட்டது. சிங் மற்றும் பலர் விவரித்த கிராவிமெட்ரிக் முறை. NFRCS முன்னிலையில் அல்லது அதன் மேற்பரப்பில் த்ரோம்பஸ் உருவாவதை மதிப்பிடுவதற்கு சிறிய மாற்றங்கள் செய்யப்பட்டன. 500 மி.கி. Cs, Ch NFRCS மற்றும் Cp NFRCS ஆகியவை பாஸ்பேட் பஃபர் செய்யப்பட்ட உப்புநீரில் (PBS) 24 மணி நேரம் 37°C வெப்பநிலையில் அடைகாக்கப்பட்டன. 24 மணி நேரத்திற்குப் பிறகு, PBS அகற்றப்பட்டு, NFRCS 3.8% சோடியம் சிட்ரேட் கொண்ட 2 மில்லி இரத்தத்துடன் சிகிச்சையளிக்கப்பட்டது. NFRCS இன் மேற்பரப்பில், அடைகாக்கப்பட்ட மாதிரிகளில் 0.04 மில்லி 0.1 M CaCl2 சேர்க்கவும். 45 நிமிடங்களுக்குப் பிறகு, உறைதலை நிறுத்த 5 மில்லி காய்ச்சி வடிகட்டிய நீர் சேர்க்கப்பட்டது. NFRK இன் மேற்பரப்பில் உள்ள உறைந்த இரத்தம் 36-38% ஃபார்மால்டிஹைட் கரைசலுடன் சிகிச்சையளிக்கப்பட்டது. ஃபார்மால்டிஹைடுடன் சரி செய்யப்பட்ட கட்டிகள் உலர்த்தப்பட்டு எடை போடப்பட்டன. இரத்தம் மற்றும் மாதிரி இல்லாத கண்ணாடியின் எடை (எதிர்மறை கட்டுப்பாடு) மற்றும் இரத்தம் உள்ள கண்ணாடியின் எடை (நேர்மறை கட்டுப்பாடு) ஆகியவற்றைக் கணக்கிடுவதன் மூலம் இரத்த உறைவின் சதவீதம் மதிப்பிடப்பட்டது.
ஆரம்ப உறுதிப்படுத்தலாக, HFFC மேற்பரப்பு பூச்சு, Ct ஒன்றோடொன்று இணைக்கப்பட்ட மற்றும் Ct நெட்வொர்க் துளைகளை உருவாக்கும் திறனைப் புரிந்துகொள்ள மாதிரிகள் ஒரு ஒளியியல் நுண்ணோக்கியின் கீழ் காட்சிப்படுத்தப்பட்டன. NFRCS இலிருந்து Ch மற்றும் Cp இன் மெல்லிய பகுதிகள் ஒரு ஸ்கால்பெல் பிளேடுடன் ஒழுங்கமைக்கப்பட்டன. இதன் விளைவாகப் பகுதி ஒரு கண்ணாடி ஸ்லைடில் வைக்கப்பட்டு, ஒரு கவர்ஸ்லிப்பால் மூடப்பட்டு, விளிம்புகள் பசையால் சரி செய்யப்பட்டன. தயாரிக்கப்பட்ட ஸ்லைடுகள் ஒரு ஒளியியல் நுண்ணோக்கியின் கீழ் பார்க்கப்பட்டன மற்றும் புகைப்படங்கள் வெவ்வேறு உருப்பெருக்கங்களில் எடுக்கப்பட்டன.
ரைஸ் மற்றும் பலர் விவரித்த முறையின் அடிப்படையில் ஃப்ளோரசன்ஸ் நுண்ணோக்கியைப் பயன்படுத்தி Ct நெட்வொர்க்குகளில் பாலிமர் படிவு காட்சிப்படுத்தப்பட்டது.29. சூத்திரத்திற்குப் பயன்படுத்தப்படும் HFFC கலவை ஒரு ஃப்ளோரசன்ட் சாயத்துடன் (அமரந்த்) கலக்கப்பட்டு, முன்னர் குறிப்பிடப்பட்ட முறையின்படி NFRCS (Ch & Cp) தயாரிக்கப்பட்டது. சூத்திரத்திற்குப் பயன்படுத்தப்படும் HFFC கலவை ஒரு ஃப்ளோரசன்ட் சாயத்துடன் (அமரந்த்) கலக்கப்பட்டு, முன்னர் குறிப்பிடப்பட்ட முறையின்படி NFRCS (Ch & Cp) தயாரிக்கப்பட்டது.உருவாக்கத்திற்குப் பயன்படுத்தப்படும் HFFC கலவை ஒரு ஃப்ளோரசன்ட் சாயத்துடன் (அமரந்த்) கலக்கப்பட்டு, முன்னர் குறிப்பிடப்பட்ட முறையின்படி NFRCS (Ch மற்றும் Cp) பெறப்பட்டது.将用于配方的HFFC 组合物与荧光染料சிபி).将用于配方的HFFC 组合物与荧光染料சிபி).சூத்திரத்தில் பயன்படுத்தப்படும் HFFC கலவை ஒரு ஃப்ளோரசன்ட் சாயத்துடன் (அமரந்த்) கலக்கப்பட்டு, முன்னர் குறிப்பிட்டபடி NFRCS (Ch மற்றும் Cp) பெற்றது.பெறப்பட்ட மாதிரிகளிலிருந்து NFRK இன் மெல்லிய பகுதிகள் வெட்டப்பட்டு, கண்ணாடி ஸ்லைடுகளில் வைக்கப்பட்டு, கவர் ஸ்லிப்களால் மூடப்பட்டன. பச்சை வடிகட்டியை (310-380 nm) பயன்படுத்தி ஒரு ஒளிரும் நுண்ணோக்கியின் கீழ் தயாரிக்கப்பட்ட ஸ்லைடுகளைக் கவனியுங்கள். Ct நெட்வொர்க்கில் Ct உறவுகள் மற்றும் அதிகப்படியான பாலிமர் படிவுகளைப் புரிந்துகொள்ள படங்கள் 4x உருப்பெருக்கத்தில் எடுக்கப்பட்டன.
NFRCS Ch மற்றும் Cp இன் மேற்பரப்பு நிலப்பரப்பு, 42 N/m, 320 kHz, ROC 2-5 nm, Bruker, தைவான் ஆகிய இடங்களில் டேப்பிங் முறையில் ஒரு அணு விசை நுண்ணோக்கி (AFM) மூலம் அல்ட்ரா-ஷார்ப் TESP கான்டிலீவரைப் பயன்படுத்தி தீர்மானிக்கப்பட்டது. மேற்பரப்பு கடினத்தன்மை மென்பொருளைப் பயன்படுத்தி ரூட் சராசரி சதுரம் (RMS) மூலம் தீர்மானிக்கப்பட்டது (ஸ்கேனிங் ப்ரோப் இமேஜ் ப்ராசசர்). மேற்பரப்பு சீரான தன்மையை சரிபார்க்க பல்வேறு NFRCS இடங்கள் 3D படங்களில் ரெண்டர் செய்யப்பட்டன. கொடுக்கப்பட்ட பகுதிக்கான மதிப்பெண்ணின் நிலையான விலகல் மேற்பரப்பு கடினத்தன்மை என வரையறுக்கப்படுகிறது. NFRCS31 இன் மேற்பரப்பு கடினத்தன்மையை அளவிட RMS சமன்பாடு பயன்படுத்தப்பட்டது.
டோக்கியோவின் ஹிட்டாச்சி, டோக்கியோவில் உள்ள FESEM, SU8000, HI-0876-0003 ஐப் பயன்படுத்தி FESEM அடிப்படையிலான ஆய்வுகள் மேற்கொள்ளப்பட்டன, Ch NFRCS மற்றும் Cp NFRCS இன் மேற்பரப்பு உருவ அமைப்பைப் புரிந்து கொள்ள, இது Cm NFRCS ஐ விட சிறந்த BCT ஐக் காட்டியது. Zhao et al. 32 விவரித்த முறையின்படி FESEM ஆய்வு சிறிய மாற்றங்களுடன் செய்யப்பட்டது. NFRCS 20 முதல் 30 mg Ch NFRCS மற்றும் Cp NFRCS ஆகியவை எலி இரத்தத்துடன் 20 µl 3.8% சோடியம் சிட்ரேட்டுடன் முன்கூட்டியே கலக்கப்பட்டன. இரத்தத்தில் உறைதலைத் தொடங்க 20 μl 0.2 M CaCl2 இரத்த சிகிச்சை மாதிரிகளில் சேர்க்கப்பட்டது, மேலும் மாதிரிகள் அறை வெப்பநிலையில் 10 நிமிடங்கள் அடைகாக்கப்பட்டன. கூடுதலாக, உப்புநீரில் கழுவுவதன் மூலம் NFRCS மேற்பரப்பில் இருந்து அதிகப்படியான எரித்ரோசைட்டுகள் அகற்றப்பட்டன.
அடுத்தடுத்த மாதிரிகள் 0.1% குளுடரால்டிஹைடுடன் சிகிச்சையளிக்கப்பட்டு, பின்னர் ஈரப்பதத்தை நீக்க 37°C வெப்பநிலையில் சூடான காற்று அடுப்பில் உலர்த்தப்பட்டன. உலர்ந்த மாதிரிகள் பூசப்பட்டு பகுப்பாய்வு செய்யப்பட்டன 32. பகுப்பாய்வின் போது பெறப்பட்ட பிற படங்கள் தனிப்பட்ட பருத்தி இழைகளின் மேற்பரப்பில் உறைவு உருவாக்கம், Ct க்கு இடையில் பாலிமர் படிவு, எரித்ரோசைட் உருவவியல் (வடிவம்), உறைவு ஒருமைப்பாடு மற்றும் NFRCS முன்னிலையில் எரித்ரோசைட் உருவவியல் ஆகியவை ஆகும். சிகிச்சையளிக்கப்படாத NFRCS பகுதிகள் மற்றும் இரத்தத்தால் அடைகாக்கப்பட்ட Ch மற்றும் Cp சிகிச்சையளிக்கப்பட்ட NFRCS பகுதிகள் தனிம அயனிகளுக்கு (சோடியம், பொட்டாசியம், நைட்ரஜன், கால்சியம், மெக்னீசியம், துத்தநாகம், தாமிரம் மற்றும் செலினியம்) ஸ்கேன் செய்யப்பட்டன. உறைவு உருவாக்கம் மற்றும் உறைவு ஒருமைப்பாட்டின் போது தனிம அயனி குவிப்பு ஆகியவற்றைப் புரிந்துகொள்ள சிகிச்சையளிக்கப்பட்ட மற்றும் சிகிச்சையளிக்கப்படாத மாதிரிகளுக்கு இடையிலான தனிம அயனி சதவீதங்களை ஒப்பிடுக.
Ct மேற்பரப்பில் உள்ள Cp HFFC மேற்பரப்பு பூச்சுகளின் தடிமன் FESEM ஐப் பயன்படுத்தி தீர்மானிக்கப்பட்டது. Cp NFRCS இன் குறுக்குவெட்டுகள் கட்டமைப்பிலிருந்து வெட்டப்பட்டு ஸ்பட்டர் பூசப்பட்டன. இதன் விளைவாக வரும் ஸ்பட்டர் பூச்சு மாதிரிகள் FESEM ஆல் கவனிக்கப்பட்டன மற்றும் மேற்பரப்பு பூச்சுகளின் தடிமன் 34, 35, 36 என அளவிடப்பட்டது.
எக்ஸ்-ரே மைக்ரோ-CT உயர் தெளிவுத்திறன் கொண்ட 3D அழிவில்லாத இமேஜிங்கை வழங்குகிறது மற்றும் NFRK இன் உள் கட்டமைப்பு அமைப்பைப் படிக்க உங்களை அனுமதிக்கிறது. மாதிரியில் உள்ள எக்ஸ்-கதிர்களின் உள்ளூர் நேரியல் தணிப்பு குணகத்தைப் பதிவு செய்ய மைக்ரோ-CT மாதிரியின் வழியாகச் செல்லும் எக்ஸ்-கதிர் கற்றையைப் பயன்படுத்துகிறது, இது உருவவியல் தகவல்களைப் பெற உதவுகிறது. NFRCS முன்னிலையில் உறிஞ்சுதல் திறன் மற்றும் இரத்த உறைதலைப் புரிந்துகொள்ள Cp NFRCS மற்றும் இரத்த-சிகிச்சையளிக்கப்பட்ட Cp NFRCS இல் Ct இன் உள் இருப்பிடம் மைக்ரோ-CT ஆல் ஆய்வு செய்யப்பட்டது. இரத்த-சிகிச்சையளிக்கப்பட்ட மற்றும் சிகிச்சையளிக்கப்படாத Cp NFRCS மாதிரிகளின் 3D கட்டமைப்புகள் மைக்ரோ-CT (V|tome|x S240, பீனிக்ஸ், ஜெர்மனி) ஐப் பயன்படுத்தி மறுகட்டமைக்கப்பட்டன. VG STUDIO-MAX மென்பொருள் பதிப்பு 2.2 ஐப் பயன்படுத்தி, NFRCS க்கான 3D படங்களை உருவாக்க பல எக்ஸ்-ரே படங்கள் வெவ்வேறு கோணங்களில் (சிறந்தது 360° கவரேஜ்) எடுக்கப்பட்டன. சேகரிக்கப்பட்ட ப்ரொஜெக்ஷன் தரவு தொடர்புடைய எளிய 3D ScanIP கல்வி மென்பொருளைப் பயன்படுத்தி 3D வால்யூமெட்ரிக் படங்களாக மறுகட்டமைக்கப்பட்டது.
கூடுதலாக, உறைவின் பரவலைப் புரிந்து கொள்ள, இரத்த உறைதலைத் தொடங்க NFRCS இல் 20 µl முன் கலந்த சிட்ரேட்டட் இரத்தமும் 20 µl 0.2 M CaCl2 உம் சேர்க்கப்பட்டன. தயாரிக்கப்பட்ட மாதிரிகள் கடினப்படுத்த விடப்படுகின்றன. NFRK மேற்பரப்பு 0.5% குளுடரால்டிஹைடுடன் சிகிச்சையளிக்கப்பட்டு, 30-40°C வெப்பநிலையில் 30 நிமிடங்களுக்கு ஒரு சூடான காற்று அடுப்பில் உலர்த்தப்பட்டது. NFRCS இல் உருவான இரத்த உறைவு ஸ்கேன் செய்யப்பட்டு, மறுகட்டமைக்கப்பட்டு, இரத்த உறைவின் 3D படம் காட்சிப்படுத்தப்பட்டது.
முன்னர் விவரிக்கப்பட்ட முறையைப் பயன்படுத்தி சிறிய மாற்றங்களுடன் Cp NFRCS இல் பாக்டீரியா எதிர்ப்பு மதிப்பீடுகள் செய்யப்பட்டன (Ch NFRCS உடன் ஒப்பிடும்போது சிறந்தது). Cp NFRCS மற்றும் Cp HFFC இன் பாக்டீரியா எதிர்ப்பு செயல்பாடு மூன்று வெவ்வேறு சோதனை நுண்ணுயிரிகளைப் பயன்படுத்தி தீர்மானிக்கப்பட்டது [S.aureus (கிராம்-பாசிட்டிவ் பாக்டீரியா), E.coli (கிராம்-நெகட்டிவ் பாக்டீரியா) மற்றும் வெள்ளை கேண்டிடா (C.albicans)] ஒரு இன்குபேட்டரில் பெட்ரி உணவுகளில் அகாரில் வளரும். 105-106 CFU ml-1 செறிவில் நீர்த்த பாக்டீரியா வளர்ப்பு இடைநீக்கத்தில் 50 மில்லி அகார் ஊடகத்தில் சீராக ஊசி போடவும். ஒரு பெட்ரி பாத்திரத்தில் ஊடகத்தை ஊற்றி அதை திடப்படுத்த விடவும். HFFC நிரப்ப அகார் தட்டின் மேற்பரப்பில் கிணறுகள் செய்யப்பட்டன (HFFCக்கு 3 கிணறுகள் மற்றும் எதிர்மறை கட்டுப்பாட்டிற்கு 1). 3 கிணறுகளுக்கு 200 µl HFFC மற்றும் 4வது கிணற்றுக்கு 200 µl pH 7.4 PBS ஐ சேர்க்கவும். பெட்ரி டிஷின் மறுபுறத்தில், திடப்படுத்தப்பட்ட அகாரில் 12 மிமீ Cp NFRCS வட்டை வைத்து PBS (pH 7.4) உடன் ஈரப்படுத்தவும். சிப்ரோஃப்ளோக்சசின், ஆம்பிசிலின் மற்றும் ஃப்ளூகோனசோல் மாத்திரைகள் ஸ்டேஃபிளோகோகஸ் ஆரியஸ், எஸ்கெரிச்சியா கோலி மற்றும் கேண்டிடா அல்பிகான்ஸ் ஆகியவற்றிற்கான குறிப்பு தரங்களாகக் கருதப்படுகின்றன. தடுப்பு மண்டலத்தை கைமுறையாக அளந்து, தடுப்பு மண்டலத்தின் டிஜிட்டல் படத்தை எடுக்கவும்.
நிறுவன நெறிமுறை ஒப்புதலுக்குப் பிறகு, தென்னிந்தியாவில் உள்ள கர்நாடகாவின் மணிப்பாலில் உள்ள கஸ்தூர்பா மருத்துவக் கல்வி மற்றும் ஆராய்ச்சிக் கல்லூரியில் இந்த ஆய்வு நடத்தப்பட்டது. கர்நாடகாவின் மணிப்பாலில் உள்ள கஸ்தூர்பா மருத்துவக் கல்லூரியின் நிறுவன நெறிமுறைகள் குழுவால் இன் விட்ரோ TEG பரிசோதனை நெறிமுறை மதிப்பாய்வு செய்யப்பட்டு அங்கீகரிக்கப்பட்டுள்ளது (IEC: 674/2020). மருத்துவமனை இரத்த வங்கியிலிருந்து தன்னார்வ இரத்த தானம் செய்பவர்களிடமிருந்து (வயது 18 முதல் 55 வரை) பாடங்கள் ஆட்சேர்ப்பு செய்யப்பட்டன. கூடுதலாக, இரத்த மாதிரிகளை சேகரிப்பதற்காக தன்னார்வலர்களிடமிருந்து தகவலறிந்த ஒப்புதல் படிவம் பெறப்பட்டது. சோடியம் சிட்ரேட்டுடன் முன்கூட்டியே கலந்த முழு இரத்தத்தில் Cp HFFC சூத்திரத்தின் விளைவை ஆய்வு செய்ய பூர்வீக TEG (N-TEG) ​​பயன்படுத்தப்பட்டது. N-TEG பாயிண்ட்-ஆஃப்-கேர் புத்துயிர் பெறுவதில் அதன் பங்கிற்கு பரவலாக அங்கீகரிக்கப்பட்டுள்ளது, இது முடிவுகளில் மருத்துவ ரீதியாக குறிப்பிடத்தக்க தாமதத்திற்கான சாத்தியக்கூறுகள் (வழக்கமான உறைதல் சோதனைகள்) காரணமாக மருத்துவர்களுக்கு சிக்கல்களை உருவாக்குகிறது. N-TEG பகுப்பாய்வு முழு இரத்தத்தைப் பயன்படுத்தி செய்யப்பட்டது. அனைத்து பங்கேற்பாளர்களிடமிருந்தும் தகவலறிந்த ஒப்புதல் மற்றும் விரிவான மருத்துவ வரலாறு பெறப்பட்டது. கர்ப்பம்/பிரசவத்திற்குப் பிந்தைய அல்லது கல்லீரல் நோய் போன்ற ஹீமோஸ்டேடிக் அல்லது த்ரோம்போடிக் சிக்கல்களைக் கொண்ட பங்கேற்பாளர்களை இந்த ஆய்வில் சேர்க்கவில்லை. உறைதல் அடுக்கை பாதிக்கும் மருந்துகளை உட்கொள்ளும் நபர்களும் ஆய்வில் இருந்து விலக்கப்பட்டனர். அடிப்படை ஆய்வக சோதனைகள் (ஹீமோகுளோபின், புரோத்ராம்பின் நேரம், செயல்படுத்தப்பட்ட த்ரோம்போபிளாஸ்டின் மற்றும் பிளேட்லெட் எண்ணிக்கை) அனைத்து பங்கேற்பாளர்களிடமும் நிலையான நடைமுறைகளின்படி செய்யப்பட்டன. N-TEG இரத்த உறைவு விஸ்கோ நெகிழ்ச்சித்தன்மை, ஆரம்ப உறைவு அமைப்பு, துகள் தொடர்பு, உறைவு வலுப்படுத்துதல் மற்றும் உறைவு சிதைவை தீர்மானிக்கிறது. N-TEG பகுப்பாய்வு பல செல்லுலார் கூறுகள் மற்றும் பிளாஸ்மாவின் கூட்டு விளைவுகள் குறித்த வரைகலை மற்றும் எண் தரவை வழங்குகிறது. N-TEG பகுப்பாய்வு இரண்டு வெவ்வேறு அளவு Cp HFFC இல் செய்யப்பட்டது (10 µl மற்றும் 50 µl). இதன் விளைவாக, சிட்ரிக் அமிலத்துடன் கூடிய 1 மில்லி முழு இரத்தம் 10 μl Cp HFFC இல் சேர்க்கப்பட்டது. 1 மில்லி (Cp HFFC + சிட்ரேட்டட் இரத்தம்), 340 µl கலப்பு இரத்தம் 20 µl 0.2 M CaCl2 கொண்ட TEG டிஷ் உடன் சேர்க்கவும். அதன்பிறகு, Cp HFFC41 முன்னிலையில் இரத்த மாதிரிகளில் R, K, ஆல்பா கோணம், MA, G, CI, TPI, EPL, LY 30% ஆகியவற்றை அளவிட TEG டிஷ்கள் TEG® 5000, US இல் ஏற்றப்பட்டன.
இன் விவோ ஆய்வு நெறிமுறை, நிறுவன விலங்கு நெறிமுறைகள் குழு (IAEC), கஸ்தூர்பா மருத்துவப் பள்ளி, மணிப்பால் உயர் கல்வி நிறுவனம், மணிப்பால் (IAEC/KMC/69/2020) ஆகியவற்றால் மதிப்பாய்வு செய்யப்பட்டு அங்கீகரிக்கப்பட்டது. விலங்கு பரிசோதனை கட்டுப்பாடு மற்றும் மேற்பார்வைக்கான குழுவின் (CPCSEA) பரிந்துரைகளின்படி அனைத்து விலங்கு பரிசோதனைகளும் செய்யப்பட்டன. அனைத்து இன் விவோ NFRCS ஆய்வுகள் (2 × 2 செ.மீ2) பெண் விஸ்டார் எலிகள் (200 முதல் 250 கிராம் எடையுள்ள) மீது செய்யப்பட்டன. அனைத்து விலங்குகளும் 24-26°C வெப்பநிலையில் பழக்கப்படுத்தப்பட்டன, விலங்குகளுக்கு நிலையான உணவு மற்றும் தண்ணீர் இலவசமாகக் கிடைத்தது. அனைத்து விலங்குகளும் சீரற்ற முறையில் வெவ்வேறு குழுக்களாகப் பிரிக்கப்பட்டன, ஒவ்வொரு குழுவும் மூன்று விலங்குகளைக் கொண்டிருந்தது. அனைத்து ஆய்வுகளும் விலங்கு ஆய்வுகள்: இன் விவோ பரிசோதனைகளின் அறிக்கை 43 இன் படி செய்யப்பட்டன. ஆய்வுக்கு முன், விலங்குகளுக்கு 20-50 மி.கி கெட்டமைன் (1 கிலோ உடல் எடைக்கு) மற்றும் 2-10 மி.கி சைலாசின் (1 கிலோ உடல் எடைக்கு) கலவையை இன்ட்ராபெரிட்டோனியல் (ஐபி) செலுத்துவதன் மூலம் மயக்க மருந்து வழங்கப்பட்டது. ஆய்வுக்குப் பிறகு, மாதிரிகளின் ஆரம்ப மற்றும் இறுதி எடைக்கு இடையிலான வேறுபாட்டை மதிப்பிடுவதன் மூலம் இரத்தப்போக்கு அளவு கணக்கிடப்பட்டது, மூன்று சோதனைகளிலிருந்து பெறப்பட்ட சராசரி மதிப்பு மாதிரியின் இரத்தப்போக்கு அளவாக எடுத்துக் கொள்ளப்பட்டது.
அதிர்ச்சி, போர் அல்லது போக்குவரத்து விபத்து (காயம் மாதிரி) ஆகியவற்றில் இரத்தப்போக்கை மாற்றியமைக்க NFRCS இன் திறனைப் புரிந்துகொள்ள எலி வால் துண்டிப்பு மாதிரி செயல்படுத்தப்பட்டது. ஒரு ஸ்கால்பெல் பிளேடுடன் 50% வாலை வெட்டி, சாதாரண இரத்தப்போக்கை உறுதி செய்ய 15 வினாடிகள் காற்றில் வைக்கவும். கூடுதலாக, சோதனை மாதிரிகள் அழுத்தத்தைப் பயன்படுத்தி எலியின் வாலில் வைக்கப்பட்டன (Ct, Cs, Ch NFRCS மற்றும் Cp NFRCS). சோதனை மாதிரிகளுக்கு இரத்தப்போக்கு மற்றும் PCT பதிவாகியுள்ளன (n = 3)17,45.
போரில் NFRCS அழுத்தக் கட்டுப்பாட்டின் செயல்திறன் மேலோட்டமான தொடை தமனியின் மாதிரியில் ஆராயப்பட்டது. தொடை தமனி வெளிப்பட்டு, 24G ட்ரோகாரால் துளைக்கப்பட்டு, 15 வினாடிகளுக்குள் இரத்தம் கசிகிறது. கட்டுப்பாடற்ற இரத்தப்போக்கு காணப்பட்ட பிறகு, சோதனை மாதிரி பஞ்சர் செய்யப்பட்ட இடத்தில் வைக்கப்பட்டு அழுத்தம் கொடுக்கப்படுகிறது. சோதனை மாதிரியைப் பயன்படுத்திய உடனேயே, உறைதல் நேரம் பதிவு செய்யப்பட்டு, அடுத்த 5 நிமிடங்களுக்கு ஹீமோஸ்டேடிக் செயல்திறன் காணப்பட்டது. அதே செயல்முறை Cs மற்றும் Ct46 உடன் மீண்டும் செய்யப்பட்டது.
டவ்லிங் மற்றும் பலர். 47, அறுவை சிகிச்சைக்கு இடையேயான இரத்தப்போக்கின் பின்னணியில், இரத்தப்போக்கு பொருட்களின் இரத்தப்போக்கு திறனை மதிப்பிடுவதற்கு கல்லீரல் காயம் மாதிரியை முன்மொழிந்தனர். Ct மாதிரிகள் (எதிர்மறை கட்டுப்பாடு), Cs கட்டமைப்பு (நேர்மறை கட்டுப்பாடு), Ch NFRCS மாதிரிகள் மற்றும் Cp NFRCS மாதிரிகளுக்கு BCT பதிவு செய்யப்பட்டது. ஒரு சராசரி லேபரோடமி செய்வதன் மூலம் எலியின் மேல்புற வேனா காவா வெளிப்பட்டது. அதன் பிறகு, இடது மடலின் தொலைதூர பகுதி கத்தரிக்கோலால் வெட்டப்பட்டது. கல்லீரலில் ஒரு ஸ்கால்பெல் பிளேடுடன் ஒரு கீறலைச் செய்து சில வினாடிகள் இரத்தம் வர விடுங்கள். துல்லியமாக எடைபோடப்பட்ட Ch NFRCS மற்றும் Cp NFRCS சோதனை மாதிரிகள் சேதமடைந்த மேற்பரப்பில் எந்த நேர்மறை அழுத்தமும் இல்லாமல் வைக்கப்பட்டன, மேலும் BCT பதிவு செய்யப்பட்டது. பின்னர் கட்டுப்பாட்டு குழு (Ct) அழுத்தத்தைப் பயன்படுத்தியது, அதைத் தொடர்ந்து காயத்தை உடைக்காமல் Cs 30 s47 ஐப் பயன்படுத்தியது.
உருவாக்கப்பட்ட பாலிமர் அடிப்படையிலான NFRCS-களின் காயம் குணப்படுத்தும் பண்புகளை மதிப்பிடுவதற்கு, ஒரு எக்சிஷனல் காயம் மாதிரியைப் பயன்படுத்தி இன் விவோ காயம் குணப்படுத்தும் மதிப்பீடுகள் செய்யப்பட்டன. எக்சிஷனல் காயங்களின் மாதிரிகள் தேர்ந்தெடுக்கப்பட்டு, முன்னர் வெளியிடப்பட்ட முறைகளின்படி சிறிய மாற்றங்களுடன் 19,32,48 நிகழ்த்தப்பட்டன. முன்னர் விவரிக்கப்பட்டபடி அனைத்து விலங்குகளுக்கும் மயக்க மருந்து அளிக்கப்பட்டது. முதுகின் தோலில் ஒரு வட்ட ஆழமான கீறலைச் செய்ய பயாப்ஸி பஞ்ச் (12 மிமீ) பயன்படுத்தவும். தயாரிக்கப்பட்ட காயம் தளங்கள் Cs (நேர்மறை கட்டுப்பாடு), Ct (பருத்தி பட்டைகள் குணப்படுத்துவதில் தலையிடுகின்றன என்பதை அங்கீகரித்தல்), Ch NFRCS மற்றும் Cp NFRCS (பரிசோதனைக் குழு) மற்றும் எந்த சிகிச்சையும் இல்லாமல் ஒரு எதிர்மறை கட்டுப்பாடு ஆகியவற்றால் அலங்கரிக்கப்பட்டன. ஆய்வின் ஒவ்வொரு நாளிலும், காயத்தின் பரப்பளவு அனைத்து எலிகளிலும் அளவிடப்பட்டது. டிஜிட்டல் கேமராவைப் பயன்படுத்தி காயம் பகுதியைப் படம் எடுத்து புதிய டிரஸ்ஸிங் போடவும். காயம் மூடலின் சதவீதம் பின்வரும் சூத்திரத்தால் அளவிடப்பட்டது:
ஆய்வின் 12வது நாளில் காயம் மூடலின் சதவீதத்தின் அடிப்படையில், சிறந்த குழுவின் எலி தோல் ((Cp NFRCS) மற்றும் கட்டுப்பாட்டு குழு) அகற்றப்பட்டு, H&E சாயமிடுதல் மற்றும் மாசனின் ட்ரைக்ரோம் சாயமிடுதல் மூலம் ஆய்வு செய்யப்பட்டது. ஆய்வின் 12வது நாளில் காயம் மூடலின் சதவீதத்தின் அடிப்படையில், சிறந்த குழுவின் எலி தோல் ((Cp NFRCS) மற்றும் கட்டுப்பாட்டு குழு) அகற்றப்பட்டு, H&E சாயமிடுதல் மற்றும் மாசனின் ட்ரைக்ரோம் சாயமிடுதல் மூலம் ஆய்வு செய்யப்பட்டது.ஆய்வின் 12வது நாளில் காயம் மூடலின் சதவீதத்தின் அடிப்படையில், சிறந்த குழுவின் ((Cp NFRCS) மற்றும் கட்டுப்பாட்டு குழு) எலிகளின் தோல் அகற்றப்பட்டு, ஹெமாடாக்சிலின்-இயோசின் மற்றும் மாசனின் ட்ரைக்ரோம் ஆகியவற்றைக் கொண்டு சாயமிடுவதன் மூலம் பரிசோதிக்கப்பட்டது.根据研究第12天的伤口闭合百分比,切除最佳组((Cp NFRCS)和对照组)的大鼠皮肤,进行H&E染色和Masson三色染色研究。根据研究第12天的伤口闭合百分比,切除最佳组((Cp NFRCS)和对照组)的大鼠皮肤,进行H&E染色和眳组)ஆய்வின் 12 ஆம் நாளில், காயத்தின் சதவீத மூடலின் அடிப்படையில், சிறந்த குழுவில் ((Cp NFRCS) மற்றும் கட்டுப்பாட்டு குழுக்கள்) உள்ள எலிகள் ஹெமாடாக்சிலின்-ஈசின் கறை மற்றும் மாசனின் ட்ரைக்ரோம் கறை ஆகியவற்றிற்காக பிரித்தெடுக்கப்பட்டன.முன்னர் விவரிக்கப்பட்ட முறைகளின்படி செயல்படுத்தப்பட்ட சாயமிடும் செயல்முறை மேற்கொள்ளப்பட்டது49,50. சுருக்கமாக, 10% ஃபார்மலினில் நிலைப்படுத்திய பிறகு, மாதிரிகள் தொடர்ச்சியான தரப்படுத்தப்பட்ட ஆல்கஹால்களைப் பயன்படுத்தி நீரிழப்பு செய்யப்பட்டன. அகற்றப்பட்ட திசுக்களின் மெல்லிய பகுதிகளை (5 µm தடிமன்) பெற மைக்ரோடோமைப் பயன்படுத்தவும். ஹிஸ்டோபோதாலஜிக்கல் மாற்றங்களை ஆய்வு செய்ய கட்டுப்பாடுகளின் மெல்லிய தொடர் பிரிவுகள் மற்றும் Cp NFRCS கள் ஹெமாடாக்சிலின் மற்றும் ஈயோசினுடன் சிகிச்சையளிக்கப்பட்டன. கொலாஜன் ஃபைப்ரில்கள் உருவாவதைக் கண்டறிய மாசனின் ட்ரைக்ரோம் கறை பயன்படுத்தப்பட்டது. பெறப்பட்ட முடிவுகள் நோயியல் நிபுணர்களால் கண்மூடித்தனமாக ஆய்வு செய்யப்பட்டன.
Cp NFRCS மாதிரிகளின் நிலைத்தன்மை 12 மாதங்களுக்கு அறை வெப்பநிலையில் (25°C ± 2°C/60% RH ± 5%) ஆய்வு செய்யப்பட்டது51. பொருட்கள் மற்றும் முறைகள் பிரிவில் கோடிட்டுக் காட்டப்பட்டுள்ள மேற்கண்ட முறைகளின்படி, Cp NFRCS (மேற்பரப்பு நிறமாற்றம் மற்றும் நுண்ணுயிர் வளர்ச்சி) பார்வைக்கு பரிசோதிக்கப்பட்டு மடிப்பு தேய்மான எதிர்ப்பு மற்றும் BCT க்காக சோதிக்கப்பட்டது.
15×15 செ.மீ2 அளவுள்ள Cp NFRCS தயாரிப்பதன் மூலம் Cp NFRCS இன் அளவிடுதல் மற்றும் மறுஉருவாக்கம் ஆராயப்பட்டது. கூடுதலாக, பல்வேறு Cp NFRCS பின்னங்களிலிருந்து 30 மி.கி மாதிரிகள் (n = 5) பிரித்தெடுக்கப்பட்டன, மேலும் முறைகள் பிரிவில் முன்னர் விவரிக்கப்பட்டபடி ஆய்வு செய்யப்பட்ட மாதிரிகளின் BCT மதிப்பீடு செய்யப்பட்டது.
பல்வேறு உயிரி மருத்துவ பயன்பாடுகளுக்கு Cp NFRCS கலவைகளைப் பயன்படுத்தி பல்வேறு வடிவங்கள் மற்றும் கட்டமைப்புகளை உருவாக்க நாங்கள் முயற்சித்துள்ளோம். இத்தகைய வடிவங்கள் அல்லது உள்ளமைவுகளில் மூக்கில் இரத்தப்போக்குக்கான கூம்பு வடிவ ஸ்வாப்கள், பல் நடைமுறைகள் மற்றும் யோனி இரத்தப்போக்குக்கான உருளை வடிவ ஸ்வாப்கள் ஆகியவை அடங்கும்.
அனைத்து தரவுத் தொகுப்புகளும் சராசரி ± நிலையான விலகலாக வெளிப்படுத்தப்படுகின்றன, மேலும் அவை ANOVA ஆல் பிரிசம் 5.03 (கிராப்பேட், சான் டியாகோ, CA, USA) ஐப் பயன்படுத்தி பகுப்பாய்வு செய்யப்பட்டன, அதைத் தொடர்ந்து போன்ஃபெரோனியின் பல ஒப்பீட்டு சோதனை (*p<0.05).
மனித ஆய்வுகளில் மேற்கொள்ளப்பட்ட அனைத்து நடைமுறைகளும் நிறுவனம் மற்றும் தேசிய ஆராய்ச்சி கவுன்சிலின் தரநிலைகள், ஹெல்சின்கி 1964 பிரகடனம் மற்றும் அதன் அடுத்தடுத்த திருத்தங்கள் அல்லது இதே போன்ற நெறிமுறை தரநிலைகளுக்கு இணங்க இருந்தன. அனைத்து பங்கேற்பாளர்களுக்கும் ஆய்வின் அம்சங்கள் மற்றும் அதன் தன்னார்வ தன்மை குறித்து தெரிவிக்கப்பட்டது. பங்கேற்பாளர் தரவு சேகரிக்கப்பட்டவுடன் ரகசியமாகவே இருக்கும். இன் விட்ரோ TEG பரிசோதனை நெறிமுறை கர்நாடகாவின் மணிப்பாலில் உள்ள கஸ்தூர்பா மருத்துவக் கல்லூரியின் நிறுவன நெறிமுறைகள் குழுவால் மதிப்பாய்வு செய்யப்பட்டு அங்கீகரிக்கப்பட்டுள்ளது (IEC: 674/2020). தன்னார்வலர்கள் இரத்த மாதிரிகளை சேகரிக்க தகவலறிந்த ஒப்புதலில் கையெழுத்திட்டனர்.
விலங்கு ஆய்வுகளில் மேற்கொள்ளப்பட்ட அனைத்து நடைமுறைகளும் மணிப்பால் உயர் கல்வி நிறுவனத்தின் கஸ்துபா மருத்துவ பீடத்தின் (IAEC/KMC/69/2020) படி மேற்கொள்ளப்பட்டன. வடிவமைக்கப்பட்ட அனைத்து விலங்கு பரிசோதனைகளும் விலங்கு பரிசோதனை கட்டுப்பாடு மற்றும் மேற்பார்வை குழுவின் (CPCSEA) வழிகாட்டுதல்களின்படி நடத்தப்பட்டன. அனைத்து ஆசிரியர்களும் ARRIVE வழிகாட்டுதல்களைப் பின்பற்றுகிறார்கள்.
அனைத்து NFRCS-களின் FTIR நிறமாலை பகுப்பாய்வு செய்யப்பட்டு படம் 2A இல் காட்டப்பட்டுள்ள சிட்டோசன் நிறமாலையுடன் ஒப்பிடப்பட்டது. சிட்டோசனின் சிறப்பியல்பு நிறமாலை உச்சங்கள் (பதிவு செய்யப்பட்டுள்ளன) 3437 செ.மீ-1 (OH மற்றும் NH நீட்சி, ஒன்றுடன் ஒன்று), 2945 மற்றும் 2897 செ.மீ-1 (CH நீட்சி), 1660 செ.மீ-1 (NH2 திரிபு), 1589 செ.மீ-1 (N–H வளைவு), 1157 செ.மீ-1 (பால நீட்சி O-), 1067 செ.மீ-1 (நீட்சி C–O, இரண்டாம் நிலை ஹைட்ராக்சில்), 993 செ.மீ-1 (நீட்சி CO, Bo-OH) 52.53.54. துணை அட்டவணை S1 சிட்டோசன் (நிருபர்), தூய சிட்டோசன், Cm, Ch, மற்றும் Cp ஆகியவற்றிற்கான FTIR NFRCS உறிஞ்சுதல் நிறமாலை மதிப்புகளைக் காட்டுகிறது. அனைத்து NFRCS-களின் FTIR நிறமாலை (Cm, Ch மற்றும் Cp) குறிப்பிடத்தக்க மாற்றங்கள் இல்லாமல் தூய சிட்டோசானின் அதே சிறப்பியல்பு உறிஞ்சுதல் பட்டைகளைக் காட்டியது (படம் 2A). FTIR முடிவுகள் NFRCS-ஐ உருவாக்கப் பயன்படுத்தப்படும் பாலிமர்களுக்கு இடையில் வேதியியல் அல்லது இயற்பியல் தொடர்புகள் இல்லாததை உறுதிப்படுத்தின, இது பயன்படுத்தப்படும் பாலிமர்கள் மந்தமானவை என்பதைக் குறிக்கிறது.
Cm NFRCS, Ch NFRCS, Cp NFRCS மற்றும் Cs இன் செயற்கை நுண்ணறிவு பண்பு. (A) என்பது சுருக்கத்தின் கீழ் சிட்டோசன் மற்றும் Cm NFRCS, Ch NFRCS மற்றும் Cp NFRCS ஆகியவற்றின் கலவைகளின் ஒருங்கிணைந்த FTIR நிறமாலையைக் குறிக்கிறது. (B) a) NFRCS Cm, Ch, Cp மற்றும் Cg (n = 3) ஆகியவற்றின் முழு இரத்த உறிஞ்சுதல் விகிதம்; பருத்தி துணியால் அதிக உறிஞ்சுதல் திறன் இருப்பதால் Ct மாதிரிகள் அதிக BAR ஐக் காட்டின; b) இரத்த உறிஞ்சுதலுக்குப் பிறகு இரத்தம் உறிஞ்சப்பட்ட மாதிரியின் விளக்கம். சோதனை மாதிரி C இன் BCT இன் வரைகலை பிரதிநிதித்துவம் (Cp NFRCS சிறந்த BCT ஐக் கொண்டிருந்தது (15 வி, n = 3)). C, D, E மற்றும் G இல் உள்ள தரவு சராசரி ± SD ஆகக் காட்டப்பட்டது, மேலும் பிழைப் பட்டைகள் SD, ***p < 0.0001 ஐக் குறிக்கின்றன. C, D, E மற்றும் G இல் உள்ள தரவு சராசரி ± SD ஆகக் காட்டப்பட்டது, மேலும் பிழைப் பட்டைகள் SD, ***p < 0.0001 ஐக் குறிக்கின்றன. டானி வி சி, டி, இ மற்றும் ஜி ப்ரெட்ஸ்டாவ்லென்டி காக் ஸ்ட்ரெட்னி ± ஸ்டாண்டர்ட்னோ ஆட்க்ளோனேனி, அ பிளான்கி போக்ரெஷ்னோஸ்டெய் ப்ளைட் стандартное отклонение, ***ப <0,0001. C, D, E, மற்றும் G இல் உள்ள தரவு சராசரி ± நிலையான விலகலாக வழங்கப்படுகிறது, மேலும் பிழைப் பட்டைகள் நிலையான விலகலைக் குறிக்கின்றன, ***p<0.0001. C、D、E 和G 中的数据显示为平均值± SD,误差线代表SD,***p <0.0001。 C、D、E 和G 中的数据显示为平均值± SD,误差线代表SD,***p <0.0001。 டான்னி வி சி, டி, இ மற்றும் ஜி பொகசன்ஸ் காக் ஸ்ரேட்னி ஸ்னாசெனி ± ஸ்டாண்டர்ட்னோ ஒட்க்லோனி, பிளான்கி போக்ரஷ்னஸ்டெய் ப்ளைட் стандартное отклонение, ***ப <0,0001. C, D, E, மற்றும் G இல் உள்ள தரவு சராசரி ± நிலையான விலகலாகக் காட்டப்பட்டுள்ளது, பிழைப் பட்டைகள் நிலையான விலகலைக் குறிக்கின்றன, ***p<0.0001.


இடுகை நேரம்: ஆகஸ்ட்-13-2022