Cyfansoddiadau bioactif sy'n ffurfio ffilmiau nanofandwllog a nanotrwchus ar gyfer cymwysiadau biofeddygol

Diolch i chi am ymweld â Nature.com. Mae gan y fersiwn porwr rydych chi'n ei ddefnyddio gefnogaeth CSS gyfyngedig. I gael y profiad gorau, rydym yn argymell eich bod chi'n defnyddio porwr wedi'i ddiweddaru (neu'n analluogi Modd Cydnawsedd yn Internet Explorer). Yn y cyfamser, er mwyn sicrhau cefnogaeth barhaus, byddwn yn rendro'r wefan heb arddulliau a JavaScript.
Mae gwaedu heb ei reoli yn un o brif achosion marwolaeth. Mae cyflawni hemostasis cyflym yn sicrhau goroesiad y pwnc fel cymorth cyntaf yn ystod ymladd, damweiniau traffig, a gweithrediadau lleihau marwolaethau. Gall sgaffald cyfansawdd wedi'i atgyfnerthu â ffibr nanofandwllog (NFRCS) sy'n deillio o gyfansoddiad ffurfio ffilm hemostatig syml (HFFC) fel cyfnod parhaus sbarduno a gwella hemostasis. Mae datblygiad yr NFRCS yn seiliedig ar ddyluniad adain y gwas neidr. Mae strwythur adain y gwas neidr yn cynnwys adenydd traws a hydredol, ac mae pilenni'r adain wedi'u cysylltu â'i gilydd i gynnal cyfanrwydd y microstrwythur. Mae HFFC yn gorchuddio wyneb y ffibr yn unffurf â ffilm o drwch nanometr ac yn cysylltu'r trwch cotwm wedi'i ddosbarthu ar hap (Ct) (cyfnod gwasgaredig) i ffurfio strwythur nanofandwllog. Mae'r cyfuniad o gyfnodau parhaus a gwasgaredig yn lleihau cost y cynnyrch ddeg gwaith o'i gymharu â chynhyrchion sydd ar gael yn fasnachol. Gellir defnyddio NFRCS wedi'u haddasu (tamponau neu fandiau arddwrn) mewn amrywiaeth o gymwysiadau biofeddygol. Mae astudiaethau in vivo wedi dod i'r casgliad bod yr NFRCS Cp a ddatblygwyd yn sbarduno ac yn gwella'r broses geulo yn y safle cymhwyso. Gall NFRCS addasu'r microamgylchedd a gweithredu ar y lefel gell oherwydd ei strwythur nanofandyllog gan arwain at well iachâd clwyfau yn y model clwyf toredig.
Gall gwaedu heb ei reoli yn ystod brwydro, mewngweithrediadau ac argyfwng fod yn fygythiad difrifol i fywyd y clwyfedig1. Mae'r cyflyrau hyn ymhellach yn arwain at gynnydd cyffredinol mewn ymwrthedd fasgwlaidd ymylol, gan arwain at sioc hemorrhagic. Ystyrir bod mesurau priodol i reoli gwaedu yn ystod ac ar ôl llawdriniaeth yn gallu peryglu bywyd2,3. Mae difrod i bibellau gwaed mawr yn arwain at golli gwaed enfawr, gan arwain at gyfradd marwolaethau o ≤ 50% mewn brwydro a 31% yn ystod llawdriniaeth1. Mae colli gwaed enfawr yn arwain at ostyngiad yng nghyfaint y corff, sy'n lleihau allbwn y galon. Mae cynnydd yng nghyfanswm ymwrthedd fasgwlaidd ymylol a nam cynyddol ar ficrogylchrediad yn arwain at hypocsia yn yr organau cynnal bywyd. Gall sioc hemorrhagic ddigwydd os yw'r cyflwr yn parhau heb ymyrraeth effeithiol1,4,5. Mae cymhlethdodau eraill yn cynnwys dilyniant hypothermia ac asidosis metabolig, yn ogystal ag anhwylder ceulo sy'n rhwystro'r broses geulo. Mae sioc hemorrhagic difrifol yn gysylltiedig â risg uwch o farwolaeth6,7,8. Mewn sioc gradd III (blaengar), mae trallwysiad gwaed yn hanfodol ar gyfer goroesiad cleifion yn ystod morbidrwydd a marwolaethau mewngweithrediadol ac ar ôl llawdriniaeth. Er mwyn goresgyn yr holl sefyllfaoedd sy'n peryglu bywyd uchod, rydym wedi datblygu sgaffald cyfansawdd wedi'i atgyfnerthu â ffibr nanofandyllog (NFRCS) sy'n defnyddio crynodiad polymer lleiaf (0.5%) gan ddefnyddio cyfuniad o bolymerau hemostatig sy'n hydawdd mewn dŵr.
Gyda defnyddio atgyfnerthu ffibr, gellir datblygu cynhyrchion cost-effeithiol. Mae'r ffibrau wedi'u trefnu ar hap yn debyg i strwythur adain gwas y neidr, wedi'u cydbwyso gan y streipiau llorweddol a fertigol ar yr adenydd. Mae gwythiennau traws a hydredol yr adain yn cyfathrebu â philen yr adain (Ffig. 1). Mae NFRCS yn cynnwys Ct wedi'i atgyfnerthu fel system sgaffaldiau gyda chryfder ffisegol a mecanyddol gwell (Ffigur 1). Oherwydd y fforddiadwyedd a'r crefftwaith, mae llawfeddygon yn well ganddynt ddefnyddio mesuryddion edau cotwm (Ct) yn ystod llawdriniaethau a rhwymynnau. Felly, o ystyried ei fanteision lluosog, gan gynnwys > 90% o seliwlos crisialog (sy'n cyfrannu at wella gweithgaredd hemostatig), defnyddiwyd Ct fel system ysgerbydol NFRCS9,10. Felly, o ystyried ei fanteision lluosog, gan gynnwys > 90% o seliwlos crisialog (sy'n cyfrannu at wella gweithgaredd hemostatig), defnyddiwyd Ct fel system ysgerbydol NFRCS9,10. Следовательно, учитывая его многочисленные преимущества, в том числе > 90% кристаллическелюююе преимущества (участвует в повышении гемостатической активности), Ct использовали в качестве скелетной систем9,1 NFRCS. Felly, o ystyried ei fanteision niferus, gan gynnwys >90% o seliwlos crisialog (sy'n ymwneud â chynyddu gweithgaredd hemostatig), defnyddiwyd Ct fel system ysgerbydol NFRCS9,10.因此,考虑到它的多重益处,包括> 90% mwy nag erioed o'r blaen, 有助于增强止血活,被用作NFRCS9,10的骨架系统。因此,考虑到它的多重益处,包括> 90%Felly, o ystyried ei fanteision niferus, gan gynnwys dros 90% o seliwlos crisialog (yn helpu i wella gweithgaredd hemostatig), defnyddiwyd Ct fel sgaffald ar gyfer NFRCS9,10.Cafodd Ct ei orchuddio'n arwynebol (gwelwyd ffurfio ffilm nano-drwchus) a'i gysylltu â chyfansoddiad ffurfio ffilm hemostatig (HFFC). Mae HFFC yn gweithredu fel matrigel, gan ddal Ct wedi'i osod ar hap at ei gilydd. Mae'r dyluniad a ddatblygwyd yn trosglwyddo straen o fewn y cyfnod gwasgaredig (atgyfnerthu ffibrau). Mae'n anodd cael strwythurau nanofandyllog gyda chryfder mecanyddol da gan ddefnyddio crynodiadau polymer lleiaf. Yn ogystal, nid yw'n hawdd addasu gwahanol fowldiau ar gyfer gwahanol gymwysiadau biofeddygol.
Mae'r ffigur yn dangos diagram o ddyluniad yr NFRCS yn seiliedig ar strwythur adain gwas y neidr (A). Mae'r ddelwedd hon yn dangos cyfatebiaeth gymharol o strwythur adain gwas y neidr (mae gwythiennau croestoriadol a hydredol yr adain wedi'u cydgysylltu) a ffotomicrograff trawsdoriadol o Cp NFRCS (B). Cynrychiolaeth sgematig o NFRCS.
Datblygwyd NFRCs gan ddefnyddio HFFC fel cyfnod parhaus i fynd i'r afael â'r cyfyngiadau uchod. Mae HFFC yn cynnwys amrywiol bolymerau hemostatig sy'n ffurfio ffilmiau gan gynnwys chitosan (fel y prif bolymer hemostatig) gyda methylcellulose (MC), hydroxypropyl methylcellulose (HPMC 50 cp) ac alcohol polyfinyl (PVA)) (125 kDa) fel polymer cynnal sy'n hyrwyddo ffurfio thrombws. Gwellodd ychwanegu polyfinylpyrrolidine K30 (PVP K30) gapasiti amsugno lleithder yr NFRCS. Ychwanegwyd polyethylen glycol 400 (PEG 400) i wella croesgysylltu polymer mewn cymysgeddau polymer bondio. Cymhwyswyd tri chyfansoddiad hemostatig HFFC gwahanol (Cm HFFC, Ch HFFC a Cp HFFC), sef chitosan gydag MC (Cm), chitosan gyda HPMC (Ch), a chitosan gyda PVA (Cp), i Ct. Mae amrywiol astudiaethau nodweddu in vitro ac in vivo wedi cadarnhau gweithgaredd hemostatig ac iacháu clwyfau NFRCS. Gellir defnyddio deunyddiau cyfansawdd a gynigir gan NFRCS i addasu gwahanol fathau o sgaffaldiau i ddiwallu anghenion penodol.
Yn ogystal, gellir addasu NFRCS fel rhwymyn neu rolyn i orchuddio ardal gyfan yr anaf yn yr eithafion isaf a rhannau eraill o'r corff. Yn benodol ar gyfer anafiadau i aelodau ymladd, gellir newid dyluniad yr NFRCS a gynlluniwyd i hanner braich neu goes lawn (Ffigur Atodol S11). Gellir gwneud yr NFRCS yn fand arddwrn gyda glud meinwe, y gellir ei ddefnyddio i atal gwaedu o anafiadau arddwrn hunanladdol difrifol. Ein prif nod yw datblygu NFRCS gyda chyn lleied o bolymer â phosibl y gellir ei gyflwyno i boblogaeth fawr (o dan y llinell dlodi) a'i roi mewn pecyn cymorth cyntaf. Yn syml, yn effeithlon, ac yn economaidd o ran dyluniad, mae NFRCS o fudd i gymunedau lleol a gall gael effaith fyd-eang.
Prynwyd chitosan (pwysau moleciwlaidd 80 kDa) ac amaranth gan Merck, India. Prynwyd hydroxypropyl methylcellulose 50 Cp, polyethylen glycol 400 a methylcellulose gan Loba Chemie Pvt. LLC, Mumbai. Prynwyd alcohol polyfinyl (pwysau moleciwlaidd 125 kDa) (87-90% wedi'i hydrolysu) gan National Chemicals, Gujarat. Prynwyd polyvinylpyrrolidine K30 gan Molychem, Mumbai, a phrynwyd swabiau di-haint gan Ramaraju Surgery Cotton Mills Ltd., Tamil Nadu, gyda dŵr Milli Q (system puro dŵr Direct-Q3, Merck, India) fel y cludwr.
Datblygwyd NFRCS gan ddefnyddio dull lyoffilio11,12. Paratowyd pob cyfansoddiad HFFC (Tabl 1) gan ddefnyddio cymysgydd mecanyddol. Paratowch doddiant 0.5% o chitosan gan ddefnyddio 1% asid asetig mewn dŵr trwy ei droi'n barhaus ar 800 rpm ar gymysgydd mecanyddol. Ychwanegwyd union bwysau'r polymer wedi'i lwytho a nodir yn Nhabl 1 at y toddiant chitosan a'i droi nes cael toddiant polymer clir. Ychwanegwyd PVP K30 a PEG 400 at y cymysgedd canlyniadol yn y symiau a nodir yn Nhabl 1, a pharhawyd i droi nes cael toddiant polymer gludiog clir. Cafodd y baddon canlyniadol o doddiant polymer ei soniceiddio am 60 munud i gael gwared â swigod aer a oedd wedi'u dal o'r cymysgedd polymer. Fel y dangosir yn Ffigur Atodol S1(b), dosbarthwyd Ct yn gyfartal ym mhob ffynnon o blât 6-ffynnon (mowld) wedi'i ategu â 5 ml o HFFC.
Cafodd y plât chwe ffynnon ei soniceiddio am 60 munud i sicrhau gwlychu a dosbarthiad unffurf o HFFC yn rhwydwaith Ct. Yna rhewwch y plât chwe ffynnon ar -20°C am 8-12 awr. Cafodd y platiau rhewi eu lyoffilio am 48 awr i gael gwahanol fformwleiddiadau o NFRCS. Defnyddir yr un weithdrefn i gynhyrchu gwahanol siapiau a strwythurau, fel tamponau neu tamponau silindrog, neu unrhyw siâp arall ar gyfer gwahanol gymwysiadau.
Mae chitosan (80 kDa) (3%) wedi'i bwyso'n gywir wedi'i doddi mewn 1% asid asetig gan ddefnyddio cymysgydd magnetig. Ychwanegwyd 1% PEG 400 at y toddiant chitosan canlyniadol a'i droi am 30 munud. Arllwyswch y toddiant canlyniadol i gynhwysydd sgwâr neu betryal a'i rewi ar -80°C am 12 awr. Cafodd samplau wedi'u rhewi eu lyoffilio am 48 awr i gael Cs13 mandyllog.
Cafodd yr NFRCS a ddatblygwyd ei arbrofi gan ddefnyddio sbectrosgopeg is-goch trawsnewid Fourier (FTIR) (Shimadzu 8400 s FTIR, Tokyo, Japan) i gadarnhau cydnawsedd cemegol chitosan â pholymerau eraill14,15. Cafwyd sbectrwm FTIR (lled yr ystod sbectrol o 400 i 4000 cm-1) yr holl samplau a brofwyd trwy gynnal 32 sgan.
Gwerthuswyd y gyfradd amsugno gwaed (BAR) ar gyfer pob fformwleiddiad gan ddefnyddio'r dull a ddisgrifiwyd gan Chen et al. 16 gyda mân addasiadau. Sychwyd yr NFRKs a ddatblygwyd o bob cyfansoddiad mewn popty gwactod ar 105°C dros nos i gael gwared ar doddydd gweddilliol. Gosodwyd 30 mg o NFRCS (pwysau sampl cychwynnol – W0) a 30 mg o Ct (rheolaeth bositif) mewn dysglau ar wahân yn cynnwys cymysgedd rhagarweiniol o 3.8% sodiwm sitrad. Ar gyfnodau amser penodol, h.y. 5, 10, 20, 30, 40 a 60 eiliad, tynnwyd yr NFRCS a glanhawyd eu harwynebau o waed heb ei amsugno trwy osod y samplau ar Ct am 30 eiliad. Ystyriwyd pwysau terfynol y gwaed a amsugnwyd gan NFRCS 16 (W1) ar bob pwynt amser. Cyfrifwch ganran y BAR gan ddefnyddio'r fformiwla ganlynol:
Penderfynwyd amser ceulo gwaed (BCT) fel yr adroddwyd gan Wang et al. 17 . Cyfrifwyd yr amser sydd ei angen i waed cyfan (gwaed llygoden fawr wedi'i gymysgu ymlaen llaw â 3.8% sodiwm sitrad) geulo ym mhresenoldeb NFRCS fel BCT y sampl prawf. Gosodwyd y gwahanol gydrannau NFRCS (30 mg) mewn ffiolau cap sgriw 10 ml a'u deori ar 37°C. Ychwanegwyd gwaed (0.5 ml) at y ffiol ac ychwanegwyd 0.3 ml o 0.2 M CaCl2 i actifadu ceulo gwaed. Yn olaf, trowch y ffiol bob 15 eiliad (hyd at 180°) nes bod ceulad cadarn yn ffurfio. Amcangyfrifir BCT y sampl gan nifer y fflipiau 17,18. Yn seiliedig ar BCT, dewiswyd dau gyfansoddiad gorau posibl o NFRCS Cm, Ch a Cp ar gyfer astudiaethau nodweddu pellach.
Penderfynwyd ar y BCT o gyfansoddiadau Ch NFRCS a Cp NFRCS trwy weithredu'r dull a ddisgrifiwyd gan Li et al. 19. Rhowch 15 x 15 mm2 Ch NFRCS, Cp NFRCS, a Cs (rheolaeth bositif) mewn dysglau Petri ar wahân (37 °C). Cymysgwyd gwaed yn cynnwys 3.8% sodiwm sitrad â 0.2 M CaCl2 mewn cymhareb cyfaint o 10:1 i gychwyn y broses ceulo gwaed. Cymhwyswyd 20 µl o gymysgedd gwaed llygod mawr 0.2 M CaCl2 i wyneb y sampl a'i osod mewn dysgl Petri wag. Y rheolydd oedd gwaed a dywalltwyd i ddysglau Petri gwag heb Ct. Ar gyfnodau sefydlog o 0, 3, a 5 munud, stopiwch geulo trwy ychwanegu 10 ml o ddŵr wedi'i ddad-ïoneiddio (DI) at y sampl sy'n cynnwys y ddysgl heb amharu ar y ceulad. Mae erythrocytau heb eu ceulo (erythrocytau) yn cael hemolysis ym mhresenoldeb dŵr wedi'i ddad-ïoneiddio ac yn rhyddhau haemoglobin. Mesurwyd haemoglobin ar wahanol adegau (HA(t)) ar 540 nm (haemoglobin λmax) gan ddefnyddio sbectroffotomedr UV-Vis. Cymerwyd amsugniad absoliwt haemoglobin (AH(0)) mewn 0 munud o 20 µl o waed mewn 10 ml o ddŵr wedi'i ddad-ïoneiddio fel safon gyfeirio. Cyfrifwyd y cymeriant haemoglobin cymharol (RHA) o waed wedi'i geulo o'r gymhareb HA(t)/HA(0) gan ddefnyddio'r un swp o waed.
Gan ddefnyddio dadansoddwr gwead (Texture Pro CT V1.3 Build 15, Brookfield, UDA), penderfynwyd ar briodweddau gludiog NFRK i feinwe wedi'i difrodi. Pwyswch ddysgl silindrog â gwaelod agored yn erbyn tu mewn i groen y porc (heb yr haen o fraster). Cymhwyswyd samplau (Ch NFRCS a Cp NFRCS) trwy ganwla i fowldiau silindrog i greu adlyniad i groen y mochyn. Ar ôl deori 3 munud ar dymheredd ystafell (RT) (25°C.), cofnodwyd cryfder gludiog NFRCS ar gyfradd gyson o 0.5 mm/eiliad.
Prif nodwedd seliwyr llawfeddygol yw cynyddu ceulo gwaed wrth leihau colli gwaed. Gwerthuswyd ceulo di-golled mewn NFRCS gan ddefnyddio dull a gyhoeddwyd yn flaenorol gyda mân addasiadau 19. Gwnewch diwb microcentrifuge (2 ml) (diamedr mewnol 10 mm) gyda thwll 8 × 5 mm2 ar un ochr i'r tiwb allgyrchu (sy'n cynrychioli clwyf agored). Defnyddir NFRCS i gau'r agoriad a defnyddir tâp i selio'r ymylon allanol. Ychwanegwch 20 µl o 0.2 M CaCl2 at y tiwb microcentrifuge sy'n cynnwys y rhag-gymysgedd sodiwm sitrad 3.8%. Ar ôl 10 munud, tynnwyd y tiwbiau microcentrifuge o'r dysglau a phenderfynwyd ar y cynnydd ym màs y dysglau oherwydd all-lif gwaed o'r NFRK (n = 3). Colli gwaed Cymharwyd Ch NFRCS a Cp NFRCS â Cs.
Penderfynwyd ar gyfanrwydd gwlyb yr NFRCS yn seiliedig ar y dull a ddisgrifiwyd gan Mishra a Chaudhary21 gyda mân addasiadau. Rhowch yr NFRCS mewn fflasg Erlenmeyer 100 ml gyda 50 ml o ddŵr a'i droelli am 60 eiliad heb ffurfio top. Archwiliad gweledol a blaenoriaethu samplau ar gyfer cyfanrwydd ffisegol yn seiliedig ar y casgliad.
Astudiwyd cryfder rhwymo HFFC i Ct gan ddefnyddio dulliau a gyhoeddwyd yn flaenorol gyda mân addasiadau. Aseswyd cyfanrwydd yr haenen wyneb trwy amlygu NFRK i donnau acwstig (ysgogiad allanol) ym mhresenoldeb dŵr milliQ (Ct). Gosodwyd yr NFRCS Ch NFRCS a'r Cp NFRCS a ddatblygwyd mewn bicer wedi'i lenwi â dŵr a'u soniceiddio am 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, a 30 munud, yn y drefn honno. Ar ôl sychu, defnyddiwyd y gwahaniaeth canrannol rhwng pwysau cychwynnol a therfynol yr NFRCS i gyfrifo'r golled ganrannol o ddeunydd (HFFC). Cefnogodd BCT in vitro gryfder rhwymo neu golled deunyddiau wyneb ymhellach. Mae effeithlonrwydd rhwymo HFFC i Ct yn darparu ceulo gwaed a haenen elastig ar wyneb Ct22.
Penderfynwyd ar homogenedd yr NFRCS a ddatblygwyd gan y BCT o samplau (30 mg) a gymerwyd o leoliadau cyffredinol a ddewiswyd ar hap o'r NFRCS. Dilynwch y weithdrefn BCT a grybwyllwyd yn flaenorol i bennu cydymffurfiaeth NFRCS. Mae agosrwydd rhwng y pum sampl yn sicrhau gorchudd arwyneb unffurf a dyddodiad HFFC yn y rhwyll Ct.
Penderfynwyd ar yr ardal gyswllt gwaed enwol (NBCA) fel yr adroddwyd yn flaenorol gyda rhai addasiadau. Ceulwch y gwaed trwy glampio 20 µl o waed rhwng dau arwyneb Ct, Ch NFRCS, Cp NFRCS a Cs. Ar ôl 1 awr, gwahanwyd y ddwy ran o'r stent a mesurwyd arwynebedd y ceulad â llaw. Ystyriwyd bod gwerth cyfartalog tair ailadrodd yn NBCA NFRCS19.
Defnyddiwyd dadansoddiad Amsugno Anwedd Dynamig (DVS) i werthuso effeithiolrwydd NFRCS i amsugno dŵr o'r amgylchedd allanol neu o'r safle anaf sy'n gyfrifol am gychwyn ceulo. Mae'r DVS yn gwerthuso neu'n cofnodi'r amsugno a'r golled anwedd mewn sampl yn grafimetrig gan ddefnyddio cydbwysedd hynod sensitif gyda datrysiad màs o ±0.1 µg. Cynhyrchir pwysedd anwedd rhannol (lleithder cymharol) gan reolwr llif màs electronig o amgylch y sampl trwy gymysgu nwyon cludwr dirlawn a sych. Yn unol â chanllawiau Pharmacopeia Ewrop, yn seiliedig ar ganran y lleithder a gymerwyd gan y samplau, rhannwyd samplau yn 4 categori (0–0.012% p/p− heb fod yn hygrosgopig, 0.2–2% p/p ychydig yn hygrosgopig, 2–15% yn gymedrol yn hygrosgopig, a > 15% yn hygrosgopig iawn)23. Yn unol â chanllawiau Pharmacopeia Ewrop, yn seiliedig ar ganran y lleithder a amsugnwyd gan y samplau, rhannwyd y samplau yn 4 categori (0–0.012% p/p− heb fod yn hygrosgopig, 0.2–2% p/p ychydig yn hygrosgopig, 2–15% yn gymedrol yn hygrosgopig, a > 15% yn hygrosgopig iawn)23.Yn unol ag argymhellion y Pharmacopoeia Ewropeaidd, yn dibynnu ar ganran yr amsugniad lleithder gan y samplau, rhannwyd y samplau yn 4 categori (0–0.012% p/p – heb fod yn hygrosgopig, 0.2–2% p/p ychydig yn hygrosgopig, 2– pymtheg%).% умеренно гигроскопичен и > 15% очень гигроскопичен)23. % yn gymharol hygrosgopig a > 15% yn hygrosgopig iawn)23.根据欧洲药典指南,根据样品吸收水分的百分比,样品分为4类(0-0.012% w/w-非吸湿性、0.2-2% w/w 轻微吸湿性、2-15% 适度吸湿,> 15% 非常吸湿)23。根据欧洲药典指南,根据吸收水分的百分比样品分为分为分为 籼()吸湿性、、、、0.2-2% W/w轻微、2-15% 适度吸湿 ,> 15%非常吸湿)23。Yn unol ag argymhellion y Ffermacopoeia Ewropeaidd, mae samplau wedi'u rhannu'n 4 dosbarth yn dibynnu ar ganran y lleithder sy'n cael ei amsugno gan y sampl (0-0.012% yn ôl pwysau – heb fod yn hygrosgopig, 0.2-2% yn ôl pwysau ychydig yn hygrosgopig, 2-15% yn ôl pwysau).% умеренно гигроскопичен, > 15 % очень гигроскопичен) 23. % yn gymharol hygrosgopig, > 15% yn hygrosgopig iawn) 23.Penderfynwyd effeithlonrwydd hygrosgopig NFCS X NFCS a TsN NFCS ar ddadansoddwr DVS TA TGA Q5000 SA. Yn ystod y broses hon, cafwyd amser rhedeg, lleithder cymharol (RH), a phwysau sampl amser real ar 25°C24. Cyfrifir cynnwys lleithder trwy ddadansoddiad màs NFRCS cywir gan ddefnyddio'r hafaliad canlynol:
MC yw lleithder NFRCS. m1 – pwysau sych NSAIDs. m2 yw màs NFRCS amser real ar RH penodol.
Amcangyfrifwyd cyfanswm yr arwynebedd gan ddefnyddio arbrawf amsugno nitrogen gyda nitrogen hylifol ar ôl gwagio'r samplau ar 25 °C am 10 awr (< 7 × 10–3 Torr). Amcangyfrifwyd cyfanswm yr arwynebedd gan ddefnyddio arbrawf amsugno nitrogen gyda nitrogen hylifol ar ôl gwagio'r samplau ar 25 °C am 10 awr (< 7 × 10–3 Torr). площадь площадь поверхности оценивалась с помощью эксперимента по адсорбции азота жидкимома опорожнения образцов при 25 °С в течение 10 ч (< 7 × 10–3 Торр). Amcangyfrifwyd cyfanswm yr arwynebedd gan ddefnyddio arbrawf amsugno nitrogen gyda nitrogen hylifol ar ôl i'r samplau gael eu gwagio ar 25°C am 10 awr (< 7 × 10–3 Torr).在25°C 清空样品10小时(< 7 × 10-3 TorrHyd at 25°C Общая площадь поверхности оценивалась использованием экспериментов по адсорбции азота жидкиое опорожнения образцов в течение 10 часов при 25°C (< 7 × 10-3 торр). Amcangyfrifwyd cyfanswm yr arwynebedd gan ddefnyddio arbrofion amsugno nitrogen gyda nitrogen hylifol ar ôl i'r samplau gael eu gwagio am 10 awr ar 25°C (< 7 x 10-3 torr).Penderfynwyd ar gyfanswm arwynebedd, cyfaint mandwll a maint mandwll NFRCS gyda Quantachrome o NOVA 1000e, Awstria gan ddefnyddio meddalwedd RS 232.
Paratowch 5% o gelloedd gwaed coch (hallt fel teneuydd) o waed cyflawn. Yna trosglwyddwch gyfran o HFFC (0.25 ml) i blât 96-ffynnon a 5% màs RBC (0.1 ml). Deorwch y cymysgedd ar 37°C am 40 munud. Ystyriwyd cymysgedd o gelloedd gwaed coch a serwm fel rheolaeth bositif, a chymysgedd o gelloedd gwaed hallt a chelloedd gwaed coch fel rheolaeth negatif. Penderfynwyd hemaglwtineiddio yn ôl graddfa Stajitzky. Y graddfeydd arfaethedig yw'r canlynol: + + + + agregau gronynnog trwchus; + + + padiau gwaelod llyfn gydag ymylon crwm; + + padiau gwaelod llyfn gydag ymylon wedi'u rhwygo; + cylchoedd coch cul o amgylch ymylon y padiau llyfn; – (negatif) botwm coch arwahanol 12 yng nghanol y ffynnon isaf.
Astudiwyd hemogydnawsedd NFRCS yn ôl dull y Sefydliad Safoni Rhyngwladol (ISO) (ISO10993-4, 1999)26,27. Y dull gravimetrig a ddisgrifiwyd gan Singh et al. Gwnaed mân addasiadau i asesu ffurfio thrombws ym mhresenoldeb neu ar wyneb NFRCS. Deorwyd 500 mg o Cs, Ch NFRCS a Cp NFRCS mewn halwynog ffosffad-byfferog (PBS) am 24 awr ar 37°C. Ar ôl 24 awr, tynnwyd PBS a thriniwyd NFRCS â 2 ml o waed yn cynnwys 3.8% sodiwm sitrad. Ar wyneb yr NFRCS, ychwanegwch 0.04 ml o 0.1 M CaCl2 at y samplau wedi'u deori. Ar ôl 45 munud, ychwanegwyd 5 ml o ddŵr distyll i atal ceulo. Triniwyd gwaed wedi'i geulo ar wyneb NFRK â hydoddiant fformaldehyd 36-38%. Sychwyd a phwyswyd y ceuladau a oedd wedi'u trwsio â fformaldehyd. Amcangyfrifwyd canran y thrombosis drwy gyfrifo pwysau'r gwydr heb waed a sampl (rheolaeth negyddol) a'r gwydr gyda gwaed (rheolaeth bositif).
Fel cadarnhad cychwynnol, cafodd y samplau eu delweddu o dan ficrosgop optegol i ddeall gallu'r haen arwyneb HFFC, y Ct wedi'i gysylltu, a'r rhwydwaith Ct i ffurfio mandyllau. Cafodd adrannau tenau o Ch a Cp o NFRCS eu tocio â llafn scalpel. Gosodwyd yr adran sy'n deillio o hyn ar sleid wydr, ei gorchuddio â gorchudd, a chafodd yr ymylon eu gosod â glud. Gwelwyd y sleidiau parod o dan ficrosgop optegol a thynnwyd ffotograffau ar wahanol chwyddiadau.
Delweddwyd dyddodiad polymer mewn rhwydweithiau Ct gan ddefnyddio microsgopeg fflwroleuol yn seiliedig ar y dull a ddisgrifiwyd gan Rice et al.29. Cymysgwyd y cyfansoddiad HFFC a ddefnyddiwyd ar gyfer y fformiwleiddiad â llifyn fflwroleuol (amaranth), a pharatowyd NFRCS (Ch a Cp) yn unol â'r dull a grybwyllwyd yn flaenorol. Cymysgwyd y cyfansoddiad HFFC a ddefnyddiwyd ar gyfer y fformiwleiddiad â llifyn fflwroleuol (amaranth), a pharatowyd NFRCS (Ch a Cp) yn unol â'r dull a grybwyllwyd yn flaenorol.Cymysgwyd y cyfansoddiad HFFC a ddefnyddiwyd ar gyfer y ffurfiant â llifyn fflwroleuol (amaranth) a chafwyd NFRCS (Ch a Cp) yn ôl y dull a grybwyllwyd yn flaenorol.将用于配方的HFFC 组合物与荧光染料(苋菜)混合,并按照前面提到的方揜到的方揼) Cp).将用于配方的HFFC 组合物与荧光染料(苋菜)混合,并按照前面提到的方揜到的方揼) Cp).Cafodd y cyfansoddiad HFFC a ddefnyddiwyd yn y fformiwleiddiad ei gymysgu â llifyn fflwroleuol (Amaranth) a derbyniodd NFRCS (Ch a Cp), fel y soniwyd yn gynharach.Torrwyd darnau tenau o NFRK o'r samplau a gafwyd, eu gosod ar sleidiau gwydr, a'u gorchuddio â gorchudd. Arsylwch y sleidiau parod o dan ficrosgop fflwroleuol gan ddefnyddio hidlydd gwyrdd (310-380 nm). Tynnwyd delweddau ar chwyddiad 4x i ddeall perthnasoedd Ct a dyddodiad polymer gormodol yn y rhwydwaith Ct.
Penderfynwyd topograffeg arwyneb Ch a Cp NFRCS gan ddefnyddio microsgop grym atomig (AFM) gyda chantilifer TESP hynod finiog yn y modd tapio: 42 N/m, 320 kHz, ROC 2-5 nm, Bruker, Taiwan. Penderfynwyd garwedd arwyneb gan sgwar cymedr gwreiddyn (RMS) gan ddefnyddio meddalwedd (Scanning Probe Image Processor). Rendrowyd amrywiol leoliadau NFRCS ar ddelweddau 3D i wirio am unffurfiaeth arwyneb. Diffinnir gwyriad safonol y sgôr ar gyfer ardal benodol fel garwedd arwyneb. Defnyddiwyd yr hafaliad RMS i fesur garwedd arwyneb NFRCS31.
Perfformiwyd astudiaethau seiliedig ar FESEM gan ddefnyddio FESEM, SU8000, HI-0876-0003, Hitachi, Tokyo, i ddeall morffoleg arwyneb Ch NFRCS a Cp NFRCS, a ddangosodd BCT gwell na Cm NFRCS. Perfformiwyd yr astudiaeth FESEM yn ôl y dull a ddisgrifiwyd gan Zhao et al. 32 gyda mân addasiadau. Cymysgwyd 20 i 30 mg o Ch NFRCS a Cp NFRCS ymlaen llaw gyda 20 µl o 3.8% sodiwm sitrad wedi'i gymysgu ymlaen llaw â gwaed llygoden fawr. Ychwanegwyd 20 μl o 0.2 M CaCl2 at y samplau a gafodd eu trin â gwaed i gychwyn ceulo a deoriwyd y samplau ar dymheredd ystafell am 10 munud. Yn ogystal, tynnwyd gormod o erythrocytau o wyneb yr NFRCS trwy rinsio â halwynog.
Cafodd samplau dilynol eu trin â 0.1% glutaraldehyde ac yna eu sychu mewn popty aer poeth ar 37°C i gael gwared â lleithder. Cafodd y samplau sych eu gorchuddio a'u dadansoddi 32. Delweddau eraill a gafwyd yn ystod y dadansoddiad oedd ffurfio ceuladau ar wyneb ffibrau cotwm unigol, dyddodiad polymer rhwng Ct, morffoleg erythrocytau (siâp), cyfanrwydd ceuladau, a morffoleg erythrocytau ym mhresenoldeb NFRCS. Sganiwyd ardaloedd NFRCS heb eu trin ac ardaloedd NFRCS wedi'u trin â Ch a Cp wedi'u deori â gwaed am ïonau elfennol (sodiwm, potasiwm, nitrogen, calsiwm, magnesiwm, sinc, copr a seleniwm) 33. Cymharwch ganrannau ïonau elfennol rhwng samplau wedi'u trin a rhai heb eu trin i ddeall cronni ïonau elfennol yn ystod ffurfio ceuladau a homogenedd ceuladau.
Penderfynwyd trwch yr haen wyneb Cp HFFC ar yr wyneb Ct gan ddefnyddio FESEM. Torrwyd trawsdoriadau Cp NFRCS o'r fframwaith a'u gorchuddio â chwistrellu. Arsylwyd y samplau haen chwistrellu canlyniadol gan ddefnyddio FESEM a mesurwyd trwch yr haen wyneb 34, 35, 36.
Mae micro-CT pelydr-X yn darparu delweddu 3D an-ddinistriol cydraniad uchel ac yn caniatáu ichi astudio trefniant strwythurol mewnol NFRK. Mae micro-CT yn defnyddio trawst pelydr-X sy'n mynd trwy'r sampl i gofnodi'r cyfernod gwanhau llinol lleol o'r pelydrau-X yn y sampl, sy'n helpu i gael gwybodaeth forffolegol. Archwiliwyd lleoliad mewnol Ct mewn Cp NFRCS a Cp NFRCS wedi'i drin â gwaed gan ddefnyddio micro-CT i ddeall effeithlonrwydd amsugno a cheulo gwaed ym mhresenoldeb NFRCS37,38,39. Ail-grewyd strwythurau 3D samplau Cp NFRCS wedi'u trin â gwaed a heb eu trin gan ddefnyddio micro-CT (V|tome|x S240, Phoenix, yr Almaen). Gan ddefnyddio meddalwedd VG STUDIO-MAX fersiwn 2.2, cymerwyd sawl delwedd pelydr-X o wahanol onglau (yn ddelfrydol sylw 360°) i ddatblygu delweddau 3D ar gyfer NFRCS. Ail-grewyd y data taflunio a gasglwyd yn ddelweddau folwmetrig 3D gan ddefnyddio'r feddalwedd Academic ScanIP 3D syml gyfatebol.
Yn ogystal, er mwyn deall dosbarthiad y ceulad, ychwanegwyd 20 µl o waed sitredig wedi'i gymysgu ymlaen llaw a 20 µl o 0.2 M CaCl2 at yr NFRCS i gychwyn ceulo gwaed. Gadewir y samplau parod i galedu. Cafodd wyneb yr NFRK ei drin â 0.5% glutaraldehyde a'i sychu mewn popty aer poeth ar 30–40°C am 30 munud. Sganiwyd ac ail-grewyd y ceulad gwaed a ffurfiwyd ar yr NFRCS, a gwelwyd delwedd 3D o'r ceulad gwaed.
Perfformiwyd asesiadau gwrthfacterol ar Cp NFRCS (o'i gymharu orau â Ch NFRCS) gan ddefnyddio'r dull a ddisgrifiwyd yn flaenorol gyda mân addasiadau. Penderfynwyd ar weithgaredd gwrthfacterol Cp NFRCS a Cp HFFC gan ddefnyddio tri micro-organeb prawf gwahanol [S.aureus (bacteria gram-bositif), E.coli (bacteria gram-negatif) a Candida gwyn (C.albicans)] yn tyfu ar agar mewn dysglau Petri mewn deorydd. Brechwch 50 ml o'r ataliad diwylliant bacteriol gwanedig yn unffurf ar grynodiad o 105-106 CFU ml-1 ar y cyfrwng agar. Arllwyswch y cyfrwng i ddysgl Petri a gadewch iddo galedu. Gwnaed pyllau ar wyneb y plât agar i'w llenwi â HFFC (3 pyllau ar gyfer HFFC ac 1 ar gyfer rheolaeth negatif). Ychwanegwch 200 µl o HFFC i 3 pyllau a 200 µl o pH 7.4 PBS i'r 4ydd pyllau. Ar ochr arall y ddysgl petri, rhowch ddisg Cp NFRCS 12 mm ar yr agar wedi'i galedu a'i wlychu â PBS (pH 7.4). Ystyrir tabledi ciprofloxacin, ampicillin a fluconazole yn safonau cyfeirio ar gyfer Staphylococcus aureus, Escherichia coli a Candida albicans. Mesurwch y parth ataliad â llaw a chymerwch ddelwedd ddigidol o'r parth ataliad.
Ar ôl cymeradwyaeth foesegol sefydliadol, cynhaliwyd yr astudiaeth yng Ngholeg Meddygol Addysg ac Ymchwil Kasturba ym Manipal, Karnataka, yn ne India. Mae'r protocol arbrofol TEG in vitro wedi'i adolygu a'i gymeradwyo gan Bwyllgor Moeseg Sefydliadol Coleg Meddygol Kasturba, Manipal, Karnataka (IEC: 674/2020). Recriwtiwyd pynciau o blith rhoddwyr gwaed gwirfoddol (18 i 55 oed) o fanc gwaed yr ysbyty. Yn ogystal, cafwyd ffurflen ganiatâd gwybodus gan y gwirfoddolwyr ar gyfer casglu samplau gwaed. Defnyddiwyd TEG brodorol (N-TEG) ​​i astudio effaith y fformiwleiddiad Cp HFFC ar waed cyfan wedi'i gymysgu ymlaen llaw â sodiwm sitrad. Mae N-TEG yn cael ei gydnabod yn eang am ei rôl mewn adfywio ar bwynt gofal, sy'n creu problemau i glinigwyr oherwydd y potensial am oedi clinigol arwyddocaol mewn canlyniadau (profion ceulo arferol). Perfformiwyd dadansoddiad N-TEG gan ddefnyddio gwaed cyfan. Cafwyd caniatâd gwybodus a hanes meddygol manwl gan bob cyfranogwr. Nid oedd yr astudiaeth yn cynnwys cyfranogwyr â chymhlethdodau hemostatig neu thrombotig fel beichiogrwydd/ôl-enedigol neu glefyd yr afu. Cafodd pynciau a oedd yn cymryd cyffuriau sy'n effeithio ar y rhaeadr ceulo eu heithrio o'r astudiaeth hefyd. Perfformiwyd profion labordy sylfaenol (hemoglobin, amser prothrombin, thromboplastin wedi'i actifadu a chyfrif platennau) ar bob cyfranogwr yn unol â gweithdrefnau safonol. Mae N-TEG yn pennu gludedd elastigedd ceulad gwaed, strwythur ceulad cychwynnol, rhyngweithio gronynnau, cryfhau ceulad, a lysis ceulad. Mae'r dadansoddiad N-TEG yn darparu data graffigol a rhifiadol ar effeithiau cyfunol sawl elfen gellog a plasma. Perfformiwyd dadansoddiad N-TEG ar ddau gyfaint gwahanol o Cp HFFC (10 µl a 50 µl). O ganlyniad, ychwanegwyd 1 ml o waed cyflawn gydag asid citrig at 10 μl o Cp HFFC. Ychwanegwch 1 ml (Cp HFFC + gwaed sitredig), 340 µl o waed cymysg at ddysgl TEG o 20 µl o 0.2 M CaCl2. Wedi hynny, llwythwyd dysglau TEG i mewn i TEG® 5000, US i fesur R, K, ongl alffa, MA, G, CI, TPI, EPL, LY 30% o samplau gwaed ym mhresenoldeb Cp HFFC41.
Adolygwyd a chymeradwywyd protocol yr astudiaeth in vivo gan y Pwyllgor Moeseg Anifeiliaid Sefydliadol (IAEC), Ysgol Feddygaeth Kasturba, Sefydliad Addysg Uwch Manipal, Manipal (IAEC/KMC/69/2020). Perfformiwyd yr holl arbrofion anifeiliaid yn unol ag argymhellion y Pwyllgor Rheoli a Goruchwylio Arbrofion Anifeiliaid (CPCSEA). Perfformiwyd yr holl astudiaethau NFRCS in vivo (2 × 2 cm2) ar lygod mawr Wistar benywaidd (yn pwyso 200 i 250 g). Addaswyd yr holl anifeiliaid ar dymheredd o 24-26°C, roedd gan yr anifeiliaid fynediad rhydd at fwyd a dŵr safonol ad libitum. Rhannwyd yr holl anifeiliaid ar hap i wahanol grwpiau, roedd pob grŵp yn cynnwys tri anifail. Perfformiwyd yr holl astudiaethau yn unol ag Astudiaethau Anifeiliaid: Adroddiad ar Arbrofion In Vivo 43. Cyn yr astudiaeth, rhoddwyd anesthetig i'r anifeiliaid drwy roi cymysgedd o 20-50 mg o getamin (fesul 1 kg o bwysau'r corff) a 2-10 mg o xylazine (fesul 1 kg o bwysau'r corff) yn fewnberitoneol (ip). Ar ôl yr astudiaeth, cyfrifwyd y gyfaint gwaedu drwy werthuso'r gwahaniaeth rhwng pwysau cychwynnol a therfynol y samplau, a chymerwyd y gwerth cyfartalog a gafwyd o'r tri phrawf fel cyfaint gwaedu'r sampl.
Gweithredwyd y model torri cynffon llygoden fawr i ddeall potensial NFRCS i fodiwleiddio gwaedu mewn trawma, ymladd, neu ddamwain traffig (model anaf). Torrwch 50% o'r gynffon gyda llafn scalpel a'i rhoi yn yr awyr am 15 eiliad i sicrhau gwaedu arferol. Yn ogystal, gosodwyd samplau prawf ar gynffon llygoden fawr trwy roi pwysau (Ct, Cs, Ch NFRCS a Cp NFRCS). Adroddwyd ar waedu a PCT ar gyfer sbesimenau prawf (n = 3)17,45.
Ymchwiliwyd i effeithiolrwydd rheoli pwysau NFRCS mewn brwydr ar fodel o'r rhydweli ffemoraidd arwynebol. Caiff y rhydweli ffemoraidd ei datgelu, ei thyllu â throcar 24G, a'i gwaedu o fewn 15 eiliad. Ar ôl gweld gwaedu afreolus, rhoddir y sbesimen prawf yn y safle tyllu gyda phwysau'n cael ei roi. Yn syth ar ôl rhoi'r sampl prawf, cofnodwyd yr amser ceulo a gwelwyd effeithlonrwydd hemostatig am y 5 munud nesaf. Ailadroddwyd yr un weithdrefn gyda Cs a Ct46.
Cynigiodd Dowling et al. 47 fodel anaf i'r afu i asesu potensial hemostatig deunyddiau hemostatig yng nghyd-destun gwaedu mewngweithredol. Cofnodwyd BCT ar gyfer samplau Ct (rheolaeth negyddol), fframwaith Cs (rheolaeth gadarnhaol), samplau Ch NFRCS, a samplau Cp NFRCS. Datgelwyd vena cava uwchhepatig y llygoden fawr trwy berfformio laparotomi canolrifol. Ar ôl hynny, torrwyd rhan distal y llabed chwith allan gyda siswrn. Gwnewch doriad yn yr afu gyda llafn scalpel a gadewch iddo waedu am ychydig eiliadau. Gosodwyd samplau prawf Ch NFRCS a Cp NFRCS wedi'u pwyso'n gywir ar yr wyneb a ddifrodwyd heb unrhyw bwysau positif a chofnodwyd BCT. Yna rhoddodd y grŵp rheoli (Ct) bwysau ac yna Cs 30 s47 heb dorri'r anaf.
Perfformiwyd asesiadau iachau clwyfau in vivo gan ddefnyddio model clwyf ysgarthol i werthuso priodweddau iachau clwyfau'r NFRCSau a ddatblygwyd yn seiliedig ar bolymer. Dewiswyd modelau o glwyfau ysgarthol a'u perfformio yn unol â dulliau a gyhoeddwyd yn flaenorol gyda mân addasiadau19,32,48. Anesthetwyd yr holl anifeiliaid fel y disgrifiwyd yn flaenorol. Defnyddiwch dyrnu biopsi (12 mm) i wneud toriad crwn dwfn yng nghroen y cefn. Gwisgwyd safleoedd clwyfau parod â Cs (rheolaeth bositif), Ct (gan gydnabod bod padiau cotwm yn ymyrryd ag iachâd), Ch NFRCS a Cp NFRCS (grŵp arbrofol) a rheolaeth negyddol heb unrhyw driniaeth. Ar bob diwrnod o'r astudiaeth, mesurwyd arwynebedd y clwyf ym mhob llygoden fawr. Defnyddiwch gamera digidol i dynnu llun o ardal y clwyf a rhoi dresin newydd ymlaen. Mesurwyd canran cau'r clwyf gan ddefnyddio'r fformiwla ganlynol:
Yn seiliedig ar ganran cau'r clwyf ar 12fed diwrnod yr astudiaeth, torrwyd croen llygoden fawr y grŵp gorau ((Cp NFRCS) a'r grŵp rheoli) ac astudiwyd ef trwy staenio H&E a staenio trichrome Masson. Yn seiliedig ar ganran cau'r clwyf ar 12fed diwrnod yr astudiaeth, torrwyd croen llygoden fawr y grŵp gorau ((Cp NFRCS) a'r grŵp rheoli) ac astudiwyd ef trwy staenio H&E a staenio trichrome Masson.Yn seiliedig ar ganran cau'r clwyf ar y 12fed diwrnod o'r astudiaeth, torrwyd croen llygod mawr y grŵp gorau ((Cp NFRCS) a'r grŵp rheoli) a'i archwilio trwy staenio â hematoxylin-eosin a thrichrom Masson.根据研究第12天的伤口闭合百分比,切除最佳组((Cp NFRCS) 和对照组)的大鼠皮肤,进行H&E染色和Masson三色染色研究。根据研究第12天的伤口闭合百分比,切除最佳组((Cp NFRCS) 和对照组) 的大鼠皮肤,进行H&E染色和眳组)Torrwyd llygod mawr yn y grŵp gorau ((Cp NFRCS) a'r grwpiau rheoli) ar gyfer staenio hematoxylin-eosin a staenio trichrome Masson yn seiliedig ar ganran cau clwyfau ar ddiwrnod 12 o'r astudiaeth.Cynhaliwyd y weithdrefn staenio a weithredwyd yn unol â dulliau a ddisgrifiwyd yn flaenorol49,50. Yn gryno, ar ôl eu gosod mewn 10% formalin, dadhydradwyd y samplau gan ddefnyddio cyfres o alcoholau graddol. Defnyddiwch ficrotom i gael adrannau tenau (5 µm o drwch) o'r meinwe a dorrwyd. Cafodd adrannau cyfresol tenau o reolaethau ac Cp NFRCS eu trin â hematoxylin ac eosin i astudio newidiadau histopatholegol. Defnyddiwyd staen trichrome Masson i ganfod ffurfio ffibrilau colagen. Astudiwyd y canlyniadau a gafwyd yn ddall gan batholegwyr.
Astudiwyd sefydlogrwydd samplau Cp NFRCS ar dymheredd ystafell (25°C ± 2°C/60% RH ± 5%) am 12 mis51. Archwiliwyd Cp NFRCS (lliwio arwyneb a thwf microbaidd) yn weledol a'i brofi am wrthwynebiad gwisgo plyg a BCT yn ôl y dulliau uchod a amlinellir yn yr adran Deunyddiau a Dulliau.
Archwiliwyd graddadwyedd ac atgynhyrchadwyedd Cp NFRCS trwy baratoi Cp NFRCS gyda maint o 15 × 15 cm2. Yn ogystal, torrwyd samplau 30 mg (n = 5) o wahanol ffracsiynau Cp NFRCS a gwerthuswyd BCT y samplau a astudiwyd fel y disgrifiwyd yn gynharach yn yr adran Dulliau.
Rydym wedi ceisio datblygu gwahanol siapiau a strwythurau gan ddefnyddio cyfansoddiadau Cp NFRCS ar gyfer gwahanol gymwysiadau biofeddygol. Mae siapiau neu gyfluniadau o'r fath yn cynnwys swabiau conigol ar gyfer gwaedu trwyn, gweithdrefnau deintyddol, a swabiau silindrog ar gyfer gwaedu fagina.
Mynegir yr holl setiau data fel cymedr ± gwyriad safonol a chawsant eu dadansoddi gan ANOVA gan ddefnyddio Prism 5.03 (GraphPad, San Diego, CA, UDA) ac yna prawf cymhariaethau lluosog Bonferroni (*p<0.05).
Roedd yr holl weithdrefnau a gyflawnwyd mewn astudiaethau dynol yn unol â safonau'r Sefydliad a'r Cyngor Ymchwil Cenedlaethol, yn ogystal â Datganiad Helsinki 1964 a'i welliannau dilynol, neu safonau moesegol tebyg. Cafodd yr holl gyfranogwyr wybod am nodweddion yr astudiaeth a'i natur wirfoddol. Mae data cyfranogwyr yn parhau'n gyfrinachol ar ôl ei gasglu. Mae'r protocol arbrofol TEG in vitro wedi'i adolygu a'i gymeradwyo gan Bwyllgor Moeseg Sefydliadol Coleg Meddygol Kasturba, Manipal, Karnataka (IEC: 674/2020). Llofnododd gwirfoddolwyr ganiatâd gwybodus i gasglu samplau gwaed.
Cynhaliwyd yr holl weithdrefnau a gyflawnwyd mewn astudiaethau anifeiliaid yn unol â chanllawiau Cyfadran Meddygaeth Kastuba, Sefydliad Addysg Uwch Manipal, Manipal (IAEC/KMC/69/2020). Cynhaliwyd yr holl arbrofion anifeiliaid a gynlluniwyd yn unol â chanllawiau'r Pwyllgor Rheoli a Goruchwylio Arbrofion Anifeiliaid (CPCSEA). Mae pob awdur yn dilyn canllawiau ARRIVE.
Dadansoddwyd sbectrwm FTIR yr holl NFRCS a'u cymharu â'r sbectrwm chitosan a ddangosir yn Ffigur 2A. Pigau sbectrwm nodweddiadol chitosan (a gofnodwyd) ar 3437 cm-1 (ymestyn OH ac NH, gorgyffwrdd), 2945 a 2897 cm-1 (ymestyn CH), 1660 cm-1 (straen NH2), 1589 cm-1 (plygu N–H), 1157 cm-1 (ymestyn pont O-), 1067 cm-1 (ymestyn C–O, hydroxyl eilaidd), 993 cm-1 (ymestyn CO, Bo-OH) 52.53.54. Mae Tabl Atodol S1 yn dangos gwerthoedd sbectrwm amsugno FTIR NFRCS ar gyfer chitosan (gohebydd), chitosan pur, Cm, Ch, a Cp. Dangosodd sbectrwm FTIR yr holl NFRCS (Cm, Ch a Cp) yr un bandiau amsugno nodweddiadol â chitosan pur heb unrhyw newidiadau sylweddol (Ffig. 2A). Cadarnhaodd canlyniadau'r FTIR absenoldeb rhyngweithiadau cemegol neu ffisegol rhwng y polymerau a ddefnyddiwyd i ddatblygu'r NFRCS, sy'n dangos bod y polymerau a ddefnyddiwyd yn anadweithiol.
Nodweddu in vitro o Cm NFRCS, Ch NFRCS, Cp NFRCS a Cs. (A) yn cynrychioli'r sbectrwm FTIR cyfun o gyfansoddiadau chitosan a Cm NFRCS, Ch NFRCS a Cp NFRCS o dan gywasgiad. (B) a) Cyfradd amsugno gwaed cyfan o NFRCS Cm, Ch, Cp, a Cg (n = 3); Dangosodd y samplau Ct BAR uwch oherwydd bod gan y swab cotwm effeithlonrwydd amsugno uwch; b) Darlun o waed ar ôl amsugno gwaed o'r sampl wedi'i amsugno. Cynrychiolaeth graffigol o BCT sampl prawf C (Cp NFRCS oedd â'r BCT gorau (15 eiliad, n = 3)). Dangoswyd data yn C, D, E, a G fel cymedr ± SD, ac mae'r bariau gwall yn cynrychioli SD, ***p < 0.0001. Dangoswyd data yn C, D, E, a G fel cymedr ± SD, ac mae'r bariau gwall yn cynrychioli SD, ***p < 0.0001. Данные в C, D, E и G представлены как среднее ± стандартное отклонение, а планки погрешностей предстатнеланда отклонение, ***p <0,0001. Cyflwynir data yn C, D, E, a G fel cymedr ± gwyriad safonol, ac mae bariau gwall yn cynrychioli gwyriad safonol, ***p<0.0001. C、D、E和G中的数据显示为平均值± SD,误差线代表SD, *** p < 0.0001。 C、D、E和G中的数据显示为平均值± SD,误差线代表SD, *** p < 0.0001。 Данные в C, D, E и G показаны как среднее значение ± стандартное отклонение, планки погрешностей пландартное отклонение, ***p <0,0001. Dangosir data yn C, D, E, a G fel cymedr ± gwyriad safonol, mae bariau gwall yn cynrychioli gwyriad safonol, ***p<0.0001.


Amser postio: Awst-13-2022