Ẹ ṣeun fún ṣíbẹ̀wò sí Nature.com. Ẹ̀yà ẹ̀rọ ìṣàwárí tí ẹ ń lò ní àtìlẹ́yìn CSS díẹ̀. Fún ìrírí tí ó dára jùlọ, a gbà yín nímọ̀ràn pé kí ẹ lo ẹ̀rọ ìṣàwárí tí a ti mú gbóná (tàbí kí ẹ mú Ìbáramu Ipò nínú Internet Explorer kúrò). Ní ​​àkókò yìí, láti rí i dájú pé a ń tẹ̀síwájú láti ṣe àtìlẹ́yìn, a ó ṣe àtìlẹ́yìn sí ojú-òpó wẹ́ẹ̀bù náà láìsí àwọn àṣà àti JavaScript.
Ẹ̀jẹ̀ tí kò ní ìdarí jẹ́ ọ̀kan lára ​​àwọn ohun tó ń fa ikú. Ṣíṣe àṣeyọrí ìṣàn ẹ̀jẹ̀ kíákíá ń mú kí ẹni tó ní àrùn náà yè gẹ́gẹ́ bí ìrànlọ́wọ́ àkọ́kọ́ nígbà ìjà, ìjànbá ọkọ̀, àti iṣẹ́ ìdínkù ikú. Àgbékalẹ̀ àkójọpọ̀ okun tí a fi okun ṣe (NFRCS) tí a yọ láti inú àkójọpọ̀ ìṣẹ̀dá fíìmù hemostatic (HFFC) tí ó rọrùn gẹ́gẹ́ bí ìpele tí ń tẹ̀síwájú lè fa ìṣàn ẹ̀jẹ̀ kí ó sì mú kí ó sunwọ̀n síi. Ìdàgbàsókè NFRCS dá lórí ìṣẹ̀dá apá dragonfly. Ìṣètò apá dragonfly ní àwọn ìyẹ́ apá transverse àti longitude, àti àwọn àwọ̀ ìyẹ́ náà ni a so mọ́ ara wọn láti pa ìdúróṣinṣin ti microstructure mọ́ra. HFFC fi fíìmù nanometer bo ojú okùn náà ní ìṣọ̀kan, ó sì so ìwúwo owu tí a pín kiri láìròtẹ́lẹ̀ (Ct) (ìpele tí a fọ́nká) láti ṣe ìṣètò nanoporous kan. Àpapọ̀ àwọn ìpele tí ń tẹ̀síwájú àti tí a fọ́nká dín iye owó ọjà náà kù ní ìlọ́po mẹ́wàá ní ìfiwéra pẹ̀lú àwọn ọjà tí ó wà ní ọjà. A lè lo NFRCS tí a yípadà (tampons tàbí wristbands) nínú onírúurú ìlò biomedical. Àwọn ìwádìí In vivo ti parí èrò sí pé Cp NFRCS tí a ti ṣe àgbékalẹ̀ rẹ̀ máa ń fa ìṣàn ẹ̀jẹ̀ ní ibi tí a ti lò ó, ó sì máa ń mú kí ó túbọ̀ lágbára sí i. NFRCS lè ṣe àtúnṣe àyíká kékeré náà, kí ó sì ṣiṣẹ́ ní ìpele sẹ́ẹ̀lì nítorí ìṣètò rẹ̀ tí ó ń yọrí sí ìwòsàn ọgbẹ́ tí ó dára jù nínú àpẹẹrẹ ọgbẹ́ ìyọkúrò.
Ẹ̀jẹ̀ tí a kò ṣàkóso nígbà ogun, nígbà iṣẹ́ abẹ àti nígbà pajawiri lè jẹ́ ewu ńlá fún ẹ̀mí àwọn tí ó farapa. Àwọn ipò wọ̀nyí tún ń fa ìdààmú gbogbogbòò nínú ìdènà ẹ̀jẹ̀, èyí tí ó ń yọrí sí ìkọlù ẹ̀jẹ̀. Àwọn ìgbésẹ̀ tó yẹ láti ṣàkóso ẹ̀jẹ̀ nígbà àti lẹ́yìn iṣẹ́ abẹ ni a kà sí èyí tí ó lè léwu fún ẹ̀mí2,3. Ìbàjẹ́ sí àwọn iṣan ara ńlá ń yọrí sí pípadánù ẹ̀jẹ̀ ńlá, èyí tí ó ń yọrí sí ìwọ̀n ikú ti ≤ 50% nínú ìjà àti 31% nígbà iṣẹ́ abẹ1. Pípàdánù ẹ̀jẹ̀ ńlá ń yọrí sí ìdínkù nínú ìwọ̀n ara, èyí tí ó ń dín ìṣàjáde ọkàn kù. Pípọ̀ sí agbára ìdènà ẹ̀jẹ̀ gbogbogbò àti àìlera microcirculation tí ń tẹ̀síwájú ń yọrí sí hypoxia nínú àwọn ẹ̀yà ara tí ó ń gbé ẹ̀mí ró. Ìkọlù ẹ̀jẹ̀ lè ṣẹlẹ̀ tí ipò náà bá ń bá a lọ láìsí ìtọ́jú tí ó múná dóko1,4,5. Àwọn ìṣòro mìíràn pẹ̀lú ìlọsíwájú hypothermia àti metabolic acidosis, àti àrùn ìdènà ẹ̀jẹ̀ tí ó ń dí ìlànà ìdènà ẹ̀jẹ̀ lọ́wọ́. Ìkọlù ẹ̀jẹ̀ líle koko ní í ṣe pẹ̀lú ewu ikú tí ó ga jùlọ6,7,8. Ní ìkọlù ìpele III (ìlọsíwájú), ìfàjẹ̀sí ẹ̀jẹ̀ ṣe pàtàkì fún ìwàláàyè aláìsàn nígbà iṣẹ́ abẹ àti lẹ́yìn iṣẹ́ abẹ àti ikú. Láti borí gbogbo àwọn ipò tí ó léwu fún ẹ̀mí tí a mẹ́nu kàn lókè yìí, a ti ṣe àgbékalẹ̀ àkójọpọ̀ nanoporous fiber-reinforced composite scaffold (NFRCS) tí ó ń lo ìwọ̀n polymer tí ó kéré jùlọ (0.5%) nípa lílo àpapọ̀ àwọn polymer hemostatic tí ó lè yọ́ omi.
Pẹ̀lú lílo okun ìfàmọ́ra, a lè ṣe àwọn ọjà tí ó ní owó tí ó pọ̀ tó. Àwọn okùn tí a ṣètò láìròtẹ́lẹ̀ jọ ìrísí apá dragonfly, tí a fi àwọn ìlà tí ó wà ní ìlà àti òró lórí àwọn ìyẹ́ náà wọ̀n. Àwọn iṣan tí ó wà ní ìkọjá àti gígùn ti apá náà ń bá awọ ara apá náà sọ̀rọ̀ (Àwòrán 1). NFRCS ní Ct tí a ti mú lágbára gẹ́gẹ́ bí ètò ìfọ́mọ́ra pẹ̀lú agbára ti ara àti ti ẹ̀rọ tí ó dára jù (Àwòrán 1). Nítorí owó tí ó rọrùn àti iṣẹ́ ọwọ́, àwọn oníṣẹ́ abẹ fẹ́ràn láti lo àwọn ìwọ̀n owú (Ct) nígbà iṣẹ́ abẹ àti ìfọwọ́sowọ́pọ̀. Nítorí náà, ní gbígbé àwọn àǹfààní rẹ̀ yẹ̀wò, pẹ̀lú > 90% crystalline cellulose (ó ń ṣe àfikún iṣẹ́ hemostatic), a lo Ct gẹ́gẹ́ bí ètò egungun ti NFRCS9,10. Nítorí náà, ní gbígbé àwọn àǹfààní rẹ̀ yẹ̀wò, pẹ̀lú > 90% crystalline cellulose (ó ń ṣe àfikún iṣẹ́ hemostatic), a lo Ct gẹ́gẹ́ bí ètò egungun ti NFRCS9,10. Следовательно, учитывая его многочисленные преимущества, в том числе > 90% повышении гемостатической активности), Ct использовали в качестве скелетной системы NFRCS9,10. Nítorí náà, nítorí ọ̀pọ̀lọpọ̀ àǹfààní rẹ̀, títí bí cellulose kristali tí ó ju 90% lọ (tí ó ní ipa nínú ìṣiṣẹ́ hemostatic), a lo Ct gẹ́gẹ́ bí ètò egungun NFRCS9,10.因此，考虑到它的多重益处，包括> 90%的骨架系统。因此，考虑到它的多重益处，包括> 90%Nítorí náà, nítorí ọ̀pọ̀lọpọ̀ àǹfààní rẹ̀, pẹ̀lú cellulose kristali tó ju 90% lọ (ó ń ran ìṣiṣẹ́ hemostatic lọ́wọ́ láti mú kí ó lágbára sí i), a lo Ct gẹ́gẹ́ bí àgbékalẹ̀ fún NFRCS9,10.A fi awọ bo Ct (a rí ìṣẹ̀dá fíìmù nano tí ó nípọn) a sì so pọ̀ mọ́ àkójọpọ̀ fíìmù hemostatic (HFFC). HFFC ń ṣiṣẹ́ bí matrigel, ó ń di Ct tí a gbé kalẹ̀ láìròtẹ́lẹ̀ mú. Apẹẹrẹ tí a ṣe jáde ń gbé wahala láàrín ìpele tí a fọ́nká (okùn tí ń mú okun lágbára). Ó ṣòro láti rí àwọn ìrísí nanoporous pẹ̀lú agbára ẹ̀rọ tí ó dára nípa lílo ìwọ̀n polymer díẹ̀. Ní àfikún, kò rọrùn láti ṣe àtúnṣe àwọn mọ́ọ̀dì ọ̀tọ̀ọ̀tọ̀ fún àwọn ìlò biomedical ọ̀tọ̀ọ̀tọ̀.
Àwòrán náà fi àwòrán àwòrán NFRCS hàn tí ó dá lórí ìṣètò apá dragonfly (A). Àwòrán yìí fi àfiwé ìṣètò apá dragonfly hàn (àwọn iṣan tí ó wà láàárín àti àwọn ìdúró ti apá náà so pọ̀) àti fọ́tò-àgbékalẹ̀ ti Cp NFRCS (B). Àfihàn àwòrán ti NFRCS.
A ṣe agbekalẹ awọn NFRCs nipa lilo HFFC gẹgẹbi ipele ti nlọ lọwọ lati koju awọn idiwọn ti a mẹnuba loke. HFFC ni a ṣe pẹlu awọn polima hemostatic ti o ṣẹda fiimu pẹlu chitosan (gẹgẹbi polima hemostatic akọkọ) pẹlu methylcellulose (MC), hydroxypropyl methylcellulose (HPMC 50 cp) ati polyvinyl alcohol (PVA)) (125 kDa) gẹgẹbi polima atilẹyin ti o ṣe igbelaruge dida thrombus. Afikun polyvinylpyrrolidine K30 (PVP K30) mu agbara gbigba ọrinrin ti NFRCS dara si. A fi Polyethylene glycol 400 (PEG 400) kun lati mu isopọpọ polima dara si ninu awọn adalu polima ti a so pọ. Awọn akopọ hemostatic HFFC oriṣiriṣi mẹta (Cm HFFC, Ch HFFC ati Cp HFFC), eyun chitosan pẹlu MC (Cm), chitosan pẹlu HPMC (Ch), ati chitosan pẹlu PVA (Cp), ni a lo si Ct. Onírúurú àwọn ìwádìí ìṣàfihàn in vitro àti in vivo ti fìdí iṣẹ́ ìtọ́jú hemostatic àti ọgbẹ́ ti NFRCS múlẹ̀. Àwọn ohun èlò ìṣàfihàn tí NFRCS ń pèsè le ṣee lo láti ṣe àtúnṣe onírúurú irú ìkọ́lé láti bá àwọn àìní pàtó mu.
Ni afikun, a le ṣe atunṣe NFRCS gẹgẹbi bandage tabi yiyi lati bo gbogbo agbegbe ipalara ti awọn apa isalẹ ati awọn ẹya ara miiran. Ni pataki fun awọn ipalara awọn apa ọwọ, apẹrẹ NFRCS ti a ṣe apẹrẹ le yipada si idaji apa tabi ẹsẹ kikun (Afikun Aworan S11). A le ṣe NFRCS si okun ọwọ pẹlu lẹẹmọ tissue, eyiti a le lo lati da ẹjẹ duro lati awọn ipalara ọwọ ara ẹni ti o lagbara. Ero akọkọ wa ni lati ṣe agbekalẹ NFRCS pẹlu polima kekere bi o ti ṣee ṣe ti a le fi ranṣẹ si ọpọlọpọ eniyan (ni isalẹ ila osi) ati pe a le fi sinu ohun elo iranlọwọ akọkọ. Apẹrẹ ti o rọrun, ti o munadoko, ati ti ko gbowolori, NFRCS ṣe anfani fun awọn agbegbe agbegbe ati pe o le ni ipa agbaye.
Wọ́n ra Chitosan (ìwọ̀n moleku 80 kDa) àti amaranth láti Merck, India. Wọ́n ra Hydroxypropyl methylcellulose 50 Cp, polyethylene glycol 400 àti methylcellulose láti Loba Chemie Pvt. LLC, Mumbai. Wọ́n ra Polyvinyl alcohol (ìwọ̀n moleku 125 kDa) (87-90% hydrolysed) láti National Chemicals, Gujarat. Wọ́n ra Polyvinylpyrrolidine K30 láti Molychem, Mumbai, wọ́n ra swabs sterile láti Ramaraju Surgery Cotton Mills Ltd., Tamil Nadu, pẹ̀lú omi Milli Q (Ètò ìwẹ̀nùmọ́ omi Direct-Q3, Merck, India) gẹ́gẹ́ bí olùgbé.
A ṣe agbekalẹ NFRCS nipa lilo ọna lyophilization11,12. Gbogbo awọn akojọpọ HFFC (Tabili 1) ni a ṣe nipa lilo ohun elo stirrer ẹrọ. Ṣe ipese ojutu 0.5% ti chitosan nipa lilo 1% acetic acid ninu omi nipa fifi omi ṣan ni 800 rpm lori ohun elo stirrer ẹrọ. Iwọn gangan ti polima ti a fi kun ninu Tabili 1 ni a fi kun ojutu chitosan a si da a titi ti a fi ri ojutu polima ti o han. A fi PVP K30 ati PEG 400 kun adalu ti o jade ni awọn iye ti a fihan ninu Tabili 1, a si tẹsiwaju fifi omi ṣan titi ti a fi ri ojutu polima ti o han gbangba. A fi sonicated iwẹ ti ojutu polima ti o jade fun iṣẹju 60 lati yọ awọn ategun afẹfẹ ti o di mọ kuro ninu adalu polima. Gẹgẹbi a ti fihan ninu Apẹẹrẹ Afikun S1(b), a pin Ct ni deede ni gbogbo kanga ti awo 6-well (mold) ti a fi 5 milimita ti HFFC kun.
A fi sonicated àwo oníhò mẹ́fà náà fún ìṣẹ́jú 60 láti rí i pé HFFC náà rọ̀ déédé àti pínpín nínú nẹ́tíwọ́ọ̀kì Ct. Lẹ́yìn náà, a fi dì àwo oníhò mẹ́fà náà ní -20°C fún wákàtí 8-12. A fi lyophili sí àwọn àwo dídì náà fún wákàtí 48 láti gba onírúurú ìṣètò NFRCS. A lo ìlànà kan náà láti ṣe àwọn ìrísí àti ìṣètò tó yàtọ̀ síra, bíi tampon tàbí cylindrical tampon, tàbí ìrísí mìíràn fún àwọn ìlò tó yàtọ̀ síra.
A máa ń fi ohun èlò tí ó ní agbára mànàmáná 1% tú chitosan tí a wọ̀n dáadáa (80 kDa) (3%) tú u sínú 1% acetic acid nípa lílo ohun èlò tí ó ń mú kí ó rọ̀. A fi 1% PEG 400 kún omi chitosan tí ó yọrí sí, a sì pò ó fún ìṣẹ́jú 30. Tú omi tí ó yọrí sí inú àpótí onígun mẹ́rin tàbí onígun mẹ́rin kí a sì dì í ní -80°C fún wákàtí 12. A fi lyophili sí àwọn àpẹẹrẹ dídì fún wákàtí 48 láti rí Cs13 tí ó ní ihò.
Wọ́n lo Fourier transform infrared spectroscopy (FTIR) (Shimadzu 8400 s FTIR, Tokyo, Japan) láti fi hàn pé chitosan bá àwọn polymer mìíràn mu. A gba àwọn FTIR spectra (ìbú ìwọ̀n spectral láti 400 sí 4000 cm-1) ti gbogbo àwọn àpẹẹrẹ tí a dán wò nípa ṣíṣe àwọn àyẹ̀wò 32.
A ṣe àyẹ̀wò ìwọ̀n ìfàmọ́ra ẹ̀jẹ̀ (BAR) fún gbogbo àwọn ìṣètò nípa lílo ọ̀nà tí Chen àti àwọn ẹlẹgbẹ́ rẹ̀ ṣàlàyé pẹ̀lú àwọn àtúnṣe díẹ̀. A gbẹ àwọn NFRK tí a ti ṣe àgbékalẹ̀ nínú gbogbo àwọn ìṣètò sínú ààrò afẹ́fẹ́ ní 105°C ní alẹ́ láti mú omi tí ó kù kúrò. A gbé 30 mg NFRCS (ìwọ̀n àyẹ̀wò àkọ́kọ́ – W0) àti 30 mg Ct (ìṣàkóso rere) sínú àwọn àwo ọ̀tọ̀ọ̀tọ̀ tí ó ní premix ti 3.8% sodium citrate. Ní àwọn àkókò tí a ti pinnu tẹ́lẹ̀, ìyẹn 5, 10, 20, 30, 40 àti 60 ìṣẹ́jú-àáyá, a yọ NFRCS kúrò a sì nu àwọn ojú wọn kúrò nínú ẹ̀jẹ̀ tí kò gbà nípa gbígbé àwọn àyẹ̀wò náà sórí Ct fún ìṣẹ́jú-àáyá 30. A gbé ìwọ̀n ìkẹ́yìn ẹ̀jẹ̀ tí NFRCS 16 gbà (W1) yẹ̀ wò ní àkókò kọ̀ọ̀kan. Ṣe ìṣirò ìpín BAR nípa lílo fọ́múlá yìí:
A pinnu àkókò ìdì ẹ̀jẹ̀ (BCT) gẹ́gẹ́ bí Wang àti àwọn ẹlẹgbẹ́ rẹ̀ ṣe ròyìn rẹ̀. A ṣírò àkókò tí ó yẹ kí ẹ̀jẹ̀ gbogbo (ẹ̀jẹ̀ eku tí a fi 3.8% sodium citrate ṣe àdàpọ̀) di ẹ̀jẹ̀ ní iwájú NFRCS gẹ́gẹ́ bí BCT ti àyẹ̀wò náà. A gbé onírúurú èròjà NFRCS (30 mg) sínú àwọn ìgò ìdè skru 10 ml, a sì fi sínú 37°C. A fi ẹ̀jẹ̀ (0.5 ml) kún ìgò náà, a sì fi 0.3 ml ti 0.2 M CaCl2 kún un láti mú kí ìdì ẹ̀jẹ̀ ṣiṣẹ́. Níkẹyìn, yí ìgò náà padà ní gbogbo ìṣẹ́jú-àáyá 15 (títí dé 180°) títí ìdì ẹ̀jẹ̀ tí ó le koko yóò fi di. A ṣírò BCT ti àyẹ̀wò náà nípa iye àwọn ìdìpọ̀ 17,18. Ní ìbámu pẹ̀lú BCT, a yan àwọn ìdàpọ̀ méjì tí ó dára jùlọ láti inú NFRCS Cm, Ch àti Cp fún àwọn ìkẹ́kọ̀ọ́ ìṣàfihàn síwájú sí i.
A pinnu BCT ti Ch NFRCS ati Cp NFRCS nipa lilo ọna ti Li et al. 19 ṣe apejuwe. Fi 15 x 15 mm2 Ch NFRCS, Cp NFRCS, ati Cs (iṣakoso rere) sinu awọn awo Petri lọtọ (37 °C). A da ẹ̀jẹ̀ ti o ni 3.8% sodium citrate pọ mọ 0.2 M CaCl2 ni ipin iwọn didun 10:1 lati bẹrẹ ilana didi ẹjẹ. A fi 20 µl ti 0.2 M CaCl2 adalu ẹjẹ eku si oju ayẹwo naa a si fi sinu awo Petri ti o ṣofo. A da ẹjẹ sinu awọn awo Petri ti o ṣofo laisi Ct. Ni awọn aaye ti a ṣeto ti 0, 3, ati 5 iṣẹju, da didi duro nipa fifi 10 milimita ti omi deionized (DI) kun ayẹwo ti o ni awo naa laisi da didi duro. Awọn erythrocytes ti ko ni idapọ (erythrocytes) ni a ṣe itọju hemolysis niwaju omi deionized ati tu hemoglobin silẹ. A wọn Hemoglobin ní àwọn àkókò tó yàtọ̀ síra (HA(t)) ní 540 nm (λmax hemoglobin) nípa lílo spectrophotometer UV-Vis. A gba ìfàmọ́ra pípé ti hemoglobin (AH(0)) nínú 0 min ti 20 µl ẹ̀jẹ̀ nínú 10 milimita omi tí a ti yọ ion kúrò gẹ́gẹ́ bí ìwọ̀n ìtọ́kasí. A ṣírò ìfàmọ́ra hemoglobin (RHA) ti ẹ̀jẹ̀ tí a ti dìpọ̀ láti inú ìpíndọ́gba HA(t)/HA(0) nípa lílo ìwọ̀n ẹ̀jẹ̀ kan náà.
Nípa lílo ohun èlò ìṣàyẹ̀wò ìrísí (Texture Pro CT V1.3 Build 15, Brookfield, USA), a pinnu àwọn ànímọ́ ìlẹ̀mọ́ ti NFRK sí àsopọ tí ó bàjẹ́. Tẹ̀ àwo onígun mẹ́ta tí ó ṣí sílẹ̀ sí inú awọ ẹran ẹlẹ́dẹ̀ (láìsí ìpele ọ̀rá). A fi àwọn àpẹẹrẹ (Ch NFRCS àti Cp NFRCS) sí inú àwọn mọ́ọ̀dì onígun mẹ́ta láti ṣẹ̀dá ìlẹ̀mọ́ sí awọ ara ẹlẹ́dẹ̀ náà. Lẹ́yìn ìtẹ̀síwájú ìṣẹ́jú mẹ́ta ní iwọ̀n otútù yàrá (RT) (25° C.), a ṣàkọsílẹ̀ agbára ìlẹ̀mọ́ NFRCS ní ìwọ̀n tí ó dúró déédéé ti 0.5 mm/àáyá.
Àmì pàtàkì ti àwọn ohun tí a fi ń ṣe iṣẹ́ abẹ ni láti mú kí ẹ̀jẹ̀ dídì pọ̀ sí i nígbà tí a bá ń dín ìpàdánù ẹ̀jẹ̀ kù. A ṣe àyẹ̀wò ìṣàn ẹ̀jẹ̀ tí kò ní pàdánù nínú NFRCS nípa lílo ọ̀nà tí a tẹ̀ jáde tẹ́lẹ̀ pẹ̀lú àwọn àtúnṣe díẹ̀ 19. Ṣe páìpù microcentrifuge (2 milimita) (opin inu 10 mm) pẹ̀lú ihò 8 × 5 mm2 ní ẹ̀gbẹ́ kan ti páìpù centrifuge (tí ó dúró fún ọgbẹ́ tí ó ṣí sílẹ̀). A lo NFRCS láti ti ihò náà pa, a sì lo téèpù láti dí àwọn etí òde. Fi 20 µl ti 0.2 M CaCl2 kún páìpù microcentrifuge tí ó ní 3.8% sodium citrate premix. Lẹ́yìn ìṣẹ́jú 10, a yọ àwọn páìpù microcentrifuge kúrò nínú àwọn páìpù náà, a sì pinnu ìbísí nínú ìwọ̀n àwọn páìpù náà nítorí ìṣàn ẹ̀jẹ̀ láti inú NFRK (n = 3). A fi ìpàdánù ẹ̀jẹ̀ Ch NFRCS àti Cp NFRCS wéra pẹ̀lú Cs.
A pinnu iye omi ti NFRCS da lori ọna ti Mishra ati Chaudhary21 ṣe apejuwe pẹlu awọn iyipada kekere. Fi NFRCS sinu igo Erlenmeyer 100 milimita pẹlu omi 50 milimita ki o si yi i pada fun awọn iṣẹju 60 laisi ṣiṣẹda oke kan. Ayẹwo wiwo ati fifi awọn ayẹwo si ipo pataki fun iduroṣinṣin ti ara ti o da lori gbigba.
A ṣe ìwádìí nípa agbára ìdè HFFC sí Ct nípa lílo àwọn ọ̀nà tí a tẹ̀ jáde tẹ́lẹ̀ pẹ̀lú àwọn àtúnṣe díẹ̀. A ṣe àyẹ̀wò ìdúróṣinṣin ìbòrí ojú ilẹ̀ nípa fífi NFRK hàn sí àwọn ìgbì acoustic (ìmúdàgba òde) ní iwájú omi milliQ (Ct). A gbé NFRCS Ch NFRCS àti Cp NFRCS tí a ṣe àgbékalẹ̀ sínú beaker tí a fi omi kún tí a sì fi sonicated fún ìṣẹ́jú 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, àti 30, lẹ́sẹẹsẹ. Lẹ́yìn gbígbẹ, a lo ìyàtọ̀ ìpíndọ́gba láàárín ìwọ̀n àkọ́kọ́ àti ìkẹ́yìn ti NFRCS láti ṣírò ìpíndọ́gba ti ohun èlò (HFFC). In vitro BCT tún ṣètìlẹ́yìn fún agbára ìdè tàbí pípadánù ti àwọn ohun èlò ojú ilẹ̀. Ìṣiṣẹ́ HFFC sí Ct ń pèsè ìdè ẹ̀jẹ̀ àti ìbòrí rírọ̀ lórí ojú Ct22.
A pinnu ìbáramu ti NFRCS ti a ṣe agbekalẹ nipasẹ BCT ti awọn ayẹwo (30 miligiramu) ti a mu lati awọn ipo gbogbogbo ti a yan laileto ti NFRCS. Tẹle ilana BCT ti a mẹnuba tẹlẹ lati pinnu ibamu NFRCS. Isunmọ laarin gbogbo awọn ayẹwo marun rii daju pe ideri oju ilẹ kan naa ati ifipamọ HFFC ninu apapo Ct.
A pinnu agbegbe ifọwọkan ẹjẹ ti a mọ (NBCA) gẹgẹbi a ti royin tẹlẹ pẹlu awọn iyipada diẹ. Mu ẹjẹ naa didi nipa fifi 20 µl ti ẹjẹ di laarin awọn oju meji ti Ct, Ch NFRCS, Cp NFRCS ati Cs. Lẹhin wakati kan, a ya awọn apa meji ti stent sọtọ ati fi ọwọ wọn agbegbe ti didi naa. Iye apapọ ti awọn atunwi mẹta ni a ka si NBCA NFRCS19.
A lo àyẹ̀wò Dynamic Vapor Sorption (DVS) láti ṣe àyẹ̀wò bí NFRCS ṣe ń fa omi láti inú àyíká òde tàbí láti ibi tí ó farapa tí ó ń fa ìdènà ẹ̀jẹ̀. DVS ń ṣe àyẹ̀wò tàbí kí ó ṣe àkọsílẹ̀ ìfàsẹ́yìn àti pípadánù nínú àyẹ̀wò gravimetric nípa lílo ìwọ̀n ìfaradà ultra-sensitive pẹ̀lú ìpinnu ibi-pupọ ti ±0.1 µg. A máa ń mú kí ẹ̀rọ itanna kan máa ṣàkóso ìṣàn omi díẹ̀ (ọrinrin tó jọra) yí àyẹ̀wò náà ká nípa dída àwọn gáàsì onígbèsè àti gbígbẹ pọ̀. Gẹ́gẹ́ bí ìlànà European Pharmacopeia, ní ìbámu pẹ̀lú ìpíndọ́gba iye ọrinrin tí àwọn àpẹẹrẹ náà gbà, a pín àwọn àpẹẹrẹ sí oríṣiríṣi mẹ́rin (0–0.012% w/w− tí kì í ṣe hygroscopic, 0.2–2% w/w díẹ̀ hygroscopic, 2–15% hygroscopic díẹ̀, àti >15% hygroscopic púpọ̀)23. Gẹ́gẹ́ bí ìlànà European Pharmacopeia, ní ìbámu pẹ̀lú ìpíndọ́gba iye ọrinrin tí àwọn àpẹẹrẹ náà gbà, a pín àwọn àpẹẹrẹ sí oríṣiríṣi mẹ́rin (0–0.012% w/w− tí kò ní hygroscopic, 0.2–2% w/w díẹ̀ ní hygroscopic, 2–15% ní hygroscopic díẹ̀, àti >15% ní hygroscopic púpọ̀)23.Gẹ́gẹ́ bí àwọn àbá láti ọwọ́ European Pharmacopoeia, ní ìbámu pẹ̀lú ìpíndọ́gba ìfàmọ́ra ọrinrin láti ọwọ́ àwọn àyẹ̀wò, a pín àwọn àyẹ̀wò sí ẹ̀ka mẹ́rin (0–0.012% w/w – tí kò ní hygroscopic, 0.2–2% w/w díẹ̀ ní hygroscopic, 2–15%).% умеренно гигроскопичен и > 15% очень гигроскопичен)23. % hygroscopic díẹ̀díẹ̀ àti > 15% hygroscopic gidigidi)23.根据欧洲药典指南，根据样品吸收水分的百分比，样品分为4 类（0-0.012% w/w- 㸁% w/w 轻微吸湿性、2-15% 适度吸湿，> 15% 非常吸湿）23.根据 欧洲 药典 指南 ， 根据 吸收 水分 的 百分比 样品 分为 分为 分为 分为 分为 分为 分为 0-0-0. 、 、 、 0.2-2% W/w 轻微 、 2-15% 。度 、 、 15 %非常吸湿）23.Gẹ́gẹ́ bí àwọn àbá tí European Pharmacopoeia dámọ̀ràn, a pín àwọn àpẹẹrẹ sí àwọn kilasi mẹ́rin, ó da lórí ìpín ọrinrin tí àpẹẹrẹ náà gbà (0-0.012% nípa ìwọ̀n - kìí ṣe hygroscopic, 0.2-2% nípa ìwọ̀n díẹ̀ pẹ̀lú hygroscopic, 2-15% nípa ìwọ̀n).% умеренно гигроскопичен, > 15 % очень гигроскопичен) 23. % hygroscopic díẹ̀díẹ̀, > 15% hygroscopic gan-an) 23.A pinnu agbara hygroscopic ti NFCS X NFCS ati TsN NFCS lori ẹrọ itupalẹ DVS TA TGA Q5000 SA. Lakoko ilana yii, a gba akoko ṣiṣe, ọriniinitutu ibatan (RH), ati iwuwo ayẹwo akoko gidi ni 25°C24. A ṣe iṣiro akoonu ọrinrin nipasẹ itupalẹ ibi-iye NFRCS deede nipa lilo idogba atẹle yii:
MC jẹ́ ọriniinitutu NFRCS. m1 – iwuwo gbigbẹ ti awọn NSAIDs. m2 jẹ́ ìwọ̀n NFRCS gidi ní RH kan tí a fúnni.
A ṣe àyẹ̀wò àpapọ̀ ilẹ̀ náà nípa lílo ìdánwò adsorption nitrogen pẹ̀lú nitrogen olomi lẹ́yìn tí a ti tú àwọn àpẹẹrẹ náà jáde ní 25 °C fún wákàtí 10 (< 7 × 10–3 Torr). A ṣe àyẹ̀wò àpapọ̀ ilẹ̀ náà nípa lílo ìdánwò adsorption nitrogen pẹ̀lú nitrogen olomi lẹ́yìn tí a ti tú àwọn àpẹẹrẹ náà jáde ní 25 °C fún wákàtí 10 (< 7 × 10–3 Torr). Общая площадь поверhnosty оценивalась. образцов при 25 °С в течение 10 ч (< 7 × 10–3 Торр). A ṣe ìṣirò gbogbo agbègbè ojú ilẹ̀ nípa lílo ìdánwò adsorption nitrogen pẹ̀lú nitrogen olomi lẹ́yìn tí a ti tú àwọn àpẹẹrẹ náà jáde ní 25°C fún wákàtí 10 (< 7 × 10–3 Torr).在25°C 清空样品10 小时（< 7 × 10-3 Torr）后，使用液氮的氮吸附实验估计总表面积。iwọn otutu ti 25 ° C Общая площадь поверhnosty оцениvalась. опорожнения образцов в течение 10 часов при 25 ° C (< 7 × 10-3 торр). A ṣe àyẹ̀wò gbogbo agbègbè ojú ilẹ̀ nípa lílo àwọn àyẹ̀wò adsorption nitrogen pẹ̀lú nitrogen omi lẹ́yìn tí a ti tú àwọn àpẹẹrẹ náà jáde fún wákàtí mẹ́wàá ní 25°C (< 7 x 10-3 torr).A fi Quantachrome láti NOVA 1000e, Austria ṣe àyẹ̀wò gbogbo agbègbè ojú ilẹ̀, ìwọ̀n ihò àti ìwọ̀n ihò NFRCS nípa lílo sọ́fítíwọ́ọ̀tì RS 232.
Múra 5% RBCs (iyọ̀ gẹ́gẹ́ bí ohun tí a fi omi pò) láti inú ẹ̀jẹ̀ gbogbo. Lẹ́yìn náà, gbé ìpín HFFC kan (0.25 milimita) sí àwo 96-well plate àti 5% RBC scale (0.1 milimita). Fi adalu náà sínú 37°C fún ìṣẹ́jú 40. A kà àdàpọ̀ àwọn sẹ́ẹ̀lì ẹ̀jẹ̀ pupa àti serum sí ìṣàkóso rere, àti àdàpọ̀ àwọn sẹ́ẹ̀lì ẹ̀jẹ̀ saline àti pupa gẹ́gẹ́ bí ìṣàkóso odi. A pinnu ìfúnpọ̀ ẹ̀jẹ̀ gẹ́gẹ́ bí ìwọ̀n Stajitzky. Àwọn ìwọ̀n tí a dábàá ni wọ̀nyí: + + + + + àwọn àkójọpọ̀ granular dídí; + + + àwọn paadi ìsàlẹ̀ dídán pẹ̀lú àwọn etí tí ó tẹ̀; + + àwọn paadi ìsàlẹ̀ dídán pẹ̀lú àwọn etí tí ó ya; + àwọn òrùka pupa díndín ní àyíká àwọn paadi dídán; – (odi) bọ́tìnì pupa dídídí 12 ní àárín kànga ìsàlẹ̀.
A ṣe ìwádìí lórí bí a ṣe lè ṣe àgbéyẹ̀wò ìṣọ̀kan ẹ̀jẹ̀ NFRCS gẹ́gẹ́ bí ọ̀nà tí International Organization for Standardization (ISO) ṣe (ISO10993-4, 1999)26,27. Ọ̀nà gravimetric tí Singh àti àwọn ẹlẹgbẹ́ rẹ̀ ṣàlàyé ni a ṣe àwọn àtúnṣe díẹ̀ láti ṣe àyẹ̀wò ìṣẹ̀dá thrombus ní iwájú tàbí lórí ojú NFRCS. A fi 500 mg ti Cs, Ch NFRCS àti Cp NFRCS sínú iyọ̀ phosphate buffered saline (PBS) fún wákàtí 24 ní 37°C. Lẹ́yìn wákàtí 24, a yọ PBS kúrò, a sì fi 2 ml ti ẹ̀jẹ̀ tí ó ní 3.8% sodium citrate tọ́jú NFRCS. Lórí ojú NFRCS, fi 0.04 ml ti 0.1 M CaCl2 kún àwọn àyẹ̀wò tí a ti fi sínú rẹ̀. Lẹ́yìn ìṣẹ́jú 45, a fi 5 ml ti omi tí a ti fi sínú rẹ̀ kún un láti dá ìṣọ̀kan ẹ̀jẹ̀ dúró. A fi 36-38% formaldehyde so mọ́ àwọn ìdìpọ̀ tí a fi formaldehyde ṣe. A gbẹ àwọn ìdìpọ̀ tí a fi formaldehyde ṣe, a sì wọ̀n wọ́n. A ṣe ìṣirò ìpín ogorun thrombosis nípa ṣíṣírò ìwọ̀n gilasi náà láìsí ẹ̀jẹ̀ àti àpẹẹrẹ (ìṣàkóso odi) àti gilasi náà pẹ̀lú ẹ̀jẹ̀ (ìṣàkóso rere).
Gẹ́gẹ́ bí ìfìdí múlẹ̀ àkọ́kọ́, a fi àwòrán àwọn àpẹẹrẹ náà hàn lábẹ́ awòrán awòrán láti lóye agbára ìbòrí ojú HFFC, Ct tí ó so pọ̀ mọ́ ara wọn, àti nẹ́tíwọ́ọ̀kì Ct láti ṣe àwọn ihò. A fi abẹ́ scalpel gé àwọn apá tín-ín-rín ti Ch àti Cp láti NFRCS. A gbé apá tí ó jáde sórí àwọ̀ dígí, a fi ìbòrí bò ó, a sì fi gọ́ọ̀mù so àwọn etí rẹ̀ pọ̀. A wo àwọn àwọ̀ tí a ti pèsè lábẹ́ awòrán awòrán, a sì ya àwọn fọ́tò ní onírúurú ìgbéga.
A fi àwòrán ìwádìí polima hàn nínú àwọn nẹ́tíwọ́ọ̀kì Ct nípa lílo ohun èlò ìwádìí fluorescence tí ó dá lórí ọ̀nà tí Rice àti àwọn ẹlòmíràn ṣàlàyé. A da àkópọ̀ HFFC tí a lò fún ìṣètò náà pọ̀ mọ́ àwọ̀ fluorescent (amaranth), a sì ṣe NFRCS (Ch & Cp) gẹ́gẹ́ bí ọ̀nà tí a mẹ́nu kàn tẹ́lẹ̀. A da àkópọ̀ HFFC tí a lò fún ìṣètò náà pọ̀ mọ́ àwọ̀ fluorescent (amaranth), a sì ṣe NFRCS (Ch & Cp) gẹ́gẹ́ bí ọ̀nà tí a mẹ́nu kàn tẹ́lẹ̀.A da àkópọ̀ HFFC tí a lò fún ìṣètò pọ̀ mọ́ àwọ̀ fluorescent (amaranth) a sì gba NFRCS (Ch àti Cp) gẹ́gẹ́ bí ọ̀nà tí a ti mẹ́nu kàn tẹ́lẹ̀.将用于配方的HFFC 组合物与荧光染料（苋菜）混合，并照前面提到的方法到的方法NFRCS）将用于配方的HFFC 组合物与荧光染料（苋菜）混合，并照前面提到的方法到的方法NFRCS）A da àkópọ̀ HFFC tí a lò nínú ìṣètò náà pọ̀ mọ́ àwọ̀ fluorescent (Amaranth) ó sì gba NFRCS (Ch àti Cp), gẹ́gẹ́ bí a ti sọ tẹ́lẹ̀.A gé àwọn apá fẹ́lẹ́fẹ́lẹ́ ti NFRK láti inú àwọn àyẹ̀wò tí a rí, a gbé wọn sí orí àwọn gíláàsì dígí, a sì fi àwọn ìbòrí bò wọ́n. Ṣe àkíyèsí àwọn slip tí a ti ṣètò lábẹ́ microscope fluorescent nípa lílo àlẹ̀mọ́ aláwọ̀ ewé (310-380 nm). A ya àwọn àwòrán ní ìbúgbà 4x láti lóye ìbáṣepọ̀ Ct àti ìfipamọ́ polima tí ó pọ̀ jù nínú nẹ́tíwọ́ọ̀kì Ct.
A pinnu ojú ilẹ̀ NFRCS Ch àti Cp nípa lílo microscope agbára átọ́míìkì (AFM) pẹ̀lú cantilever TESP tó mú gan-an ní ipò ìfọ́wọ́: 42 N/m, 320 kHz, ROC 2-5 nm, Bruker, Taiwan. A pinnu ìfọ́wọ́ ilẹ̀ nípa lílo sọ́fítíwọ́ọ̀dù (Scanning Probe Image Processor). A ṣe àfihàn onírúurú ipò NFRCS lórí àwọn àwòrán 3D láti ṣàyẹ̀wò fún ìṣọ̀kan ojú ilẹ̀. Ìyàtọ̀ boṣewa ti àmì fún agbègbè kan ni a túmọ̀ sí ìfọ́wọ́ ojú ilẹ̀. A lo ìṣètò RMS láti ṣe àyẹ̀wò ìfọ́wọ́ ojú ilẹ̀ NFRCS31.
Àwọn ìwádìí tí a gbé kalẹ̀ lórí FESEM ni a lo FESEM, SU8000, HI-0876-0003, Hitachi, Tokyo, láti lóye ìrísí ojú ilẹ̀ Ch NFRCS àti Cp NFRCS, èyí tí ó fi BCT tí ó dára ju Cm NFRCS lọ hàn. A ṣe ìwádìí FESEM gẹ́gẹ́ bí ọ̀nà tí Zhao et al. 32 ṣàlàyé pẹ̀lú àwọn àtúnṣe díẹ̀. A fi 20 µl ti 3.8% sodium citrate tí a fi ẹ̀jẹ̀ eku pò pọ̀ mọ́ NFRCS àti Cp NFRCS. A fi 20 μl ti 0.2 M CaCl2 kún àwọn àyẹ̀wò tí a tọ́jú nínú ẹ̀jẹ̀ láti bẹ̀rẹ̀ ìṣàn ẹ̀jẹ̀, a sì fi àwọn àyẹ̀wò náà sínú iwọ̀n otutu yàrá fún ìṣẹ́jú mẹ́wàá. Ní àfikún, a yọ àwọn sẹ́ẹ̀lì erythrocytes tí ó pọ̀ jù kúrò lórí ojú ilẹ̀ NFRCS nípa fífi iyọ̀ wẹ̀ wọ́n.
Àwọn àyẹ̀wò tó tẹ̀lé e ni a fi 0.1% glutaraldehyde tọ́jú, lẹ́yìn náà a gbẹ wọ́n nínú ààrò afẹ́fẹ́ gbígbóná ní 37°C láti mú ọrinrin kúrò. Àwọn àyẹ̀wò gbígbẹ náà ni a fi bo, a sì ṣàyẹ̀wò wọn 32. Àwọn àwòrán mìíràn tí a rí nígbà ìwádìí náà ni ìṣẹ̀dá ìdìpọ̀ lórí ojú okùn owú kọ̀ọ̀kan, ìdúró polymer láàárín Ct, ìrísí erythrocyte (àwòrán), ìdúróṣinṣin ìdìpọ̀, àti ìrísí erythrocyte ní iwájú NFRCS. A ṣe àyẹ̀wò àwọn agbègbè NFRCS tí a kò tọ́jú àti àwọn agbègbè NFRCS tí a fi ẹ̀jẹ̀ bò fún àwọn ion elemental (sodium, potassium, nitrogen, calcium, magnesium, zinc, copper àti selenium)33. Fi ìpín ogorun ion elemental wé láàrín àwọn àyẹ̀wò tí a tọ́jú àti èyí tí a kò tọ́jú láti lóye ìkójọpọ̀ ion elemental nígbà ìṣẹ̀dá ìdìpọ̀ àti ìṣọ̀kan ìdìpọ̀.
A lo FESEM láti mọ ìwọ̀n ìfúnpọ̀ ojú Cp HFFC lórí ojú Ct. A gé àwọn apá àgbélébùú ti Cp NFRCS láti inú férémù náà, a sì fi sputter bò wọ́n. FESEM ṣe àkíyèsí àwọn àpẹẹrẹ ìfúnpọ̀ ojú tí ó jáde, a sì wọn ìwọ̀n ìfúnpọ̀ ojú tí ó wà ní 34, 35, 36.
X-ray micro-CT n pese aworan 3D ti ko ni iparun giga ati pe o fun ọ laaye lati ṣe iwadi eto eto inu ti NFRK. Micro-CT nlo itanna X-ray ti o kọja nipasẹ ayẹwo lati ṣe igbasilẹ iye idapada laini agbegbe ti awọn egungun X ninu ayẹwo naa, eyiti o ṣe iranlọwọ lati gba alaye nipa awọ ara. A ṣe ayẹwo ipo inu ti Ct ninu Cp NFRCS ati Cp NFRCS ti a ti tọju ẹjẹ nipasẹ micro-CT lati ni oye ṣiṣe imunadoko ati didi ẹjẹ ni iwaju NFRCS37,38,39. A tun awọn eto 3D ti awọn ayẹwo Cp NFRCS ti a ti tọju ẹjẹ ati ti a ko tọju ṣe atunṣe nipa lilo micro-CT (V|tome|x S240, Phoenix, Germany). Nipa lilo sọfitiwia VG STUDIO-MAX version 2.2, ọpọlọpọ awọn aworan X-ray ni a ya lati awọn igun oriṣiriṣi (ti o dara julọ ni agbegbe 360°) lati ṣe agbekalẹ awọn aworan 3D fun NFRCS. A tun ṣe awọn data asọtẹlẹ ti a gba sinu awọn aworan volumetric 3D nipa lilo sọfitiwia 3D ScanIP Academic ti o rọrun ti o baamu.
Ní àfikún, láti lóye bí ìfúnpọ̀ ẹ̀jẹ̀ ṣe ń tàn káàkiri, a fi 20 µl ẹ̀jẹ̀ tí a ti dapọ̀ mọ́ra àti 20 µl ti 0.2 M CaCl2 kún NFRCS láti bẹ̀rẹ̀ ìfúnpọ̀ ẹ̀jẹ̀. A fi àwọn àyẹ̀wò tí a ti pèsè sílẹ̀ láti le. A fi 0.5% glutaraldehyde tọ́jú ojú NFRK, a sì gbẹ ẹ́ nínú ààrò afẹ́fẹ́ gbígbóná ní 30–40°C fún ìṣẹ́jú 30. A ṣe àyẹ̀wò ìfúnpọ̀ ẹ̀jẹ̀ tí a ṣe lórí NFRCS, a tún un kọ́, a sì fi àwòrán 3D ti ìfúnpọ̀ ẹ̀jẹ̀ hàn.
A ṣe àwọn àyẹ̀wò abẹ́rẹ́ abẹ́rẹ́ lórí Cp NFRCS (tí ó dára jùlọ ní ìfiwéra pẹ̀lú Ch NFRCS) nípa lílo ọ̀nà tí a ti ṣàlàyé tẹ́lẹ̀ pẹ̀lú àwọn àtúnṣe díẹ̀. A pinnu iṣẹ́ abẹ́rẹ́ abẹ́rẹ́ Cp NFRCS àti Cp HFFC nípa lílo àwọn ohun abẹ̀rẹ́ abẹ́rẹ́ mẹ́ta tí ó yàtọ̀ síra [S.aureus (bacteria gram-positive), E.coli (bacteria gram-negative) àti Candida funfun (C.albicans)] tí ó ń dàgbà lórí agar nínú àwọn oúnjẹ Petri nínú incubator. Fi 50 milimita ti ìdàpọ̀ abẹ́rẹ́ abẹ́rẹ́ abẹ́rẹ́ agar tí a ti pò mọ́lẹ̀ ní ìwọ̀n 105-106 CFU ml-1 sí orí agar aláwọ̀ aró. Tú abẹ́rẹ́ náà sínú àwo Petri kí ó sì jẹ́ kí ó lẹ̀. A ṣe àwọn kànga náà lórí ojú àwo agar náà láti fi HFFC kún un (kànga mẹ́ta fún HFFC àti 1 fún ìdarí odi). Fi 200 µl HFFC kún àwọn kànga mẹ́ta àti 200 µl pH 7.4 PBS sí kànga kẹrin. Ní apá kejì àwo oúnjẹ petri, gbé díìsìkì NFRCS 12 mm Cp kan sí orí agar tí a ti lẹ̀ mọ́lẹ̀ kí o sì fi PBS (pH 7.4) rọ̀ ọ́. Àwọn tábìlẹ́ẹ̀tì Ciprofloxacin, ampicillin àti fluconazole ni a kà sí àwọn ìlànà ìtọ́kasí fún Staphylococcus aureus, Escherichia coli àti Candida albicans. Wọ́n agbègbè ìdínà náà pẹ̀lú ọwọ́ kí o sì ya àwòrán oní-nọ́ńbà ti agbègbè ìdínà náà.
Lẹ́yìn ìfọwọ́sowọ́pọ̀ ìwà rere ilé-ẹ̀kọ́, wọ́n ṣe ìwádìí náà ní Kasturba Medical College of Education and Research ní Manipal, Karnataka, ní gúúsù Íńdíà. Ìgbìmọ̀ Ìwà rere ilé-ẹ̀kọ́ Kasturba Medical College, Manipal, Karnataka ti ṣe àtúnyẹ̀wò àti fọwọ́ sí ìlànà ìdánwò TEG in vitro (IEC: 674/2020). Wọ́n yan àwọn tó ń ṣe àyẹ̀wò ẹ̀jẹ̀ láti ọ̀dọ̀ àwọn olùfúnni ẹ̀jẹ̀ olùyọ̀ǹda (ọmọ ọdún 18 sí 55) láti ilé ìtọ́jú ẹ̀jẹ̀ ilé-ìwòsàn. Ní àfikún, wọ́n gba fọ́ọ̀mù ìfọwọ́sowọ́pọ̀ tó ní ìmọ̀ láti ọ̀dọ̀ àwọn olùyọ̀ǹda fún gbígba àwọn àyẹ̀wò ẹ̀jẹ̀. Wọ́n lo TEG Native (N-TEG) ​​láti ṣe ìwádìí nípa ipa tí ìṣètò Cp HFFC ní lórí ẹ̀jẹ̀ gbogbo tí a fi sodium citrate ṣe. Wọ́n mọ N-TEG dáadáa fún ipa rẹ̀ nínú ìtúnṣe sí ibi ìtọ́jú, èyí tí ó ń dá ìṣòro sílẹ̀ fún àwọn oníṣègùn nítorí agbára ìfàsẹ́yìn tó ṣe pàtàkì nínú ìṣègùn nínú àwọn àbájáde (àwọn àyẹ̀wò ìṣàn ẹ̀jẹ̀ déédéé). Wọ́n ṣe ìwádìí N-TEG nípa lílo ẹ̀jẹ̀ gbogbogbò. Wọ́n gba ìfọwọ́sowọ́pọ̀ tó ní ìmọ̀ àti ìtàn ìṣègùn tó kún rẹ́rẹ́ láti ọ̀dọ̀ gbogbo àwọn tó ń ṣe àyẹ̀wò náà. Ìwádìí náà kò ní àwọn tó ní àrùn hemostatic tàbí thrombotic bíi oyún/lẹ́yìn ìbímọ tàbí àrùn ẹ̀dọ̀ nínú. Àwọn tí wọ́n ń lo oògùn tí ó ní ipa lórí ìṣàn ẹ̀jẹ̀ ni a tún yọ kúrò nínú ìwádìí náà. Àwọn ìdánwò yàrá ìwádìí (hemoglobin, àkókò prothrombin, thromboplastin tí a mú ṣiṣẹ́ àti iye platelet) ni a ṣe lórí gbogbo àwọn olùkópa gẹ́gẹ́ bí ìlànà ìṣètò. N-TEG ń pinnu viscoelasticity ìṣàn ẹ̀jẹ̀, ìṣètò ìṣàn ẹ̀jẹ̀ àkọ́kọ́, ìbáṣepọ̀ pàtákì, agbára ìṣàn ẹ̀jẹ̀, àti ìṣàn ẹ̀jẹ̀. Ìṣàyẹ̀wò N-TEG ń pèsè ìwádìí àwòrán àti nọ́mbà lórí àwọn ipa àpapọ̀ ti ọ̀pọ̀lọpọ̀ àwọn èròjà sẹ́ẹ̀lì àti plasma. Ìṣàyẹ̀wò N-TEG ni a ṣe lórí àwọn ìpele méjì tí ó yàtọ̀ síra ti Cp HFFC (10 µl àti 50 µl). Nítorí náà, a fi 1 milimita ti ẹ̀jẹ̀ gbogbo pẹ̀lú citric acid kún 10 μl ti Cp HFFC. Fi 1 milimita (Cp HFFC + ẹ̀jẹ̀ citrate), 340 µl ẹ̀jẹ̀ adalu sí 20 µl 0.2 M CaCl2 tí ó ní àwo TEG. Lẹ́yìn náà, a kó àwọn àwo TEG sínú TEG® 5000, US láti wọn R, K, igun alpha, MA, G, CI, TPI, EPL, LY 30% àwọn àyẹ̀wò ẹ̀jẹ̀ ní iwájú Cp HFFC41.
Igbimọ Eda Eranko ti Ile-iṣẹ (IAEC), Ile-ẹkọ Isegun Kasturba, Ile-ẹkọ giga Manipal, Manipal (IAEC/KMC/69/2020) ṣe atunyẹwo ati fọwọsi ilana iwadi in vivo naa. Gbogbo awọn idanwo ẹranko ni a ṣe ni ibamu pẹlu awọn iṣeduro ti Igbimọ fun Iṣakoso ati Abojuto ti Idanwo Eranko (CPCSEA). Gbogbo awọn iwadi NFRCS in vivo (2 × 2 cm2) ni a ṣe lori awọn eku Wistar abo (ti wọn wọn 200 si 250 g). Gbogbo awọn ẹranko ni a mu ni iwọn otutu ti 24-26°C, awọn ẹranko naa ni iwọle ọfẹ si ounjẹ ati omi deede ad libitum. Gbogbo awọn ẹranko ni a pin laileto si awọn ẹgbẹ oriṣiriṣi, ẹgbẹ kọọkan ni awọn ẹranko mẹta. Gbogbo awọn iwadi ni a ṣe ni ibamu pẹlu Awọn Ẹkọ Eranko: Iroyin ti Awọn Idanwo In Vivo 43. Kí ìwádìí náà tó bẹ̀rẹ̀, wọ́n fi oògùn olóró pa àwọn ẹranko náà nípa lílo àdàpọ̀ 20-50 mg ti ketamine (fún 1 kg ti ìwọ̀n ara) àti 2-10 mg ti xylazine (fún 1 kg ti ìwọ̀n ara) nínú ìpele (ip). Lẹ́yìn ìwádìí náà, wọ́n ṣírò ìwọ̀n ẹ̀jẹ̀ nípa ṣíṣe àyẹ̀wò ìyàtọ̀ láàárín ìwọ̀n àkọ́kọ́ àti ìkẹ́yìn ti àwọn àpẹẹrẹ náà, wọ́n sì gba ìwọ̀n àpapọ̀ tí a rí láti inú àwọn ìdánwò mẹ́ta náà gẹ́gẹ́ bí ìwọ̀n ẹ̀jẹ̀ tí a rí nínú àpẹẹrẹ náà.
A ṣe àgbékalẹ̀ àpẹẹrẹ ìgé ìrù eku láti lóye agbára NFRCS láti yípadà ìṣàn ẹ̀jẹ̀ nígbà tí ìpalára bá ṣẹlẹ̀, ìjà, tàbí ìjànbá ọkọ̀ (àwòrán ìpalára). Gé 50% ìrù náà pẹ̀lú abẹ́ ìkọ́kọ́ kí o sì gbé e sínú afẹ́fẹ́ fún ìṣẹ́jú 15 láti rí i dájú pé ìṣàn ẹ̀jẹ̀ déédé. Ní àfikún, a gbé àwọn àpẹẹrẹ ìdánwò sí orí ìrù eku nípa lílo ìfúnpá (Ct, Cs, Ch NFRCS àti Cp NFRCS). A ròyìn ìṣàn ẹ̀jẹ̀ àti PCT fún àwọn àpẹẹrẹ ìdánwò (n = 3)17,45.
A ṣe ìwádìí lórí bí agbára ìdarí ìfúnpá NFRCS ṣe ń ṣiṣẹ́ nínú ìjàkadì lórí àpẹẹrẹ iṣan ẹ̀jẹ̀ abo tí ó wà ní ojú òde. A fi iṣan ẹ̀jẹ̀ abo hàn, a fi trocar 24G gún un, a sì fi ẹ̀jẹ̀ ṣẹ̀dá láàárín ìṣẹ́jú àáyá mẹ́ẹ̀ẹ́dógún. Lẹ́yìn tí a bá ti rí ìfúnpá tí a kò ṣàkóso, a fi àpẹẹrẹ ìdánwò náà sí ibi tí a ti ń gún un pẹ̀lú ìfúnpá tí a fi sí. Lẹ́sẹ̀kẹsẹ̀ lẹ́yìn lílo àpẹẹrẹ ìdánwò náà, a kọ àkókò ìfúnpá náà sílẹ̀, a sì rí ìṣiṣẹ́ hemostatic fún ìṣẹ́jú márùn-ún tó tẹ̀lé e. A tún ṣe irú ìlànà kan náà pẹ̀lú Cs àti Ct46.
Dowling àti àwọn ẹlẹgbẹ́ rẹ̀ 47 dábàá àpẹẹrẹ ìpalára ẹ̀dọ̀ láti ṣe àyẹ̀wò agbára hemostatic ti àwọn ohun èlò hemostatic ní ìbámu pẹ̀lú ìṣàn ẹ̀jẹ̀ nígbà tí a bá ń ṣe iṣẹ́ abẹ. A kọ BCT sílẹ̀ fún àwọn àpẹẹrẹ Ct (ìṣàkóso odi), ìlànà Cs (ìṣàkóso rere), àwọn àpẹẹrẹ NFRCS Ch, àti àwọn àpẹẹrẹ NFRCS Cp. A fi suprahepatic vena cava ti eku hàn nípa ṣíṣe laparotomy àárín. Lẹ́yìn náà, a gé apá jíjìn ti lobe òsì kúrò pẹ̀lú sísíkà. Ṣe ìgé sínú ẹ̀dọ̀ pẹ̀lú abẹ scalpel kí o sì jẹ́ kí ó ṣẹ̀dá fún ìṣẹ́jú díẹ̀. A gbé àwọn àpẹẹrẹ ìdánwò Ch NFRCS àti Cp NFRCS tí a wọ̀n dáadáa sí orí ilẹ̀ tí ó bàjẹ́ láìsí ìfúnpá rere kankan, a sì kọ BCT sílẹ̀. Lẹ́yìn náà, a fi ìfúnpá sí ẹgbẹ́ ìṣàkóso (Ct) lẹ́yìn náà a fi Cs 30 s47 láìsí ìfúnpá náà.
A ṣe àwọn àyẹ̀wò ìwòsàn ọgbẹ́ ní In vivo nípa lílo àpẹẹrẹ ọgbẹ́ ìgbẹ́ láti ṣe àyẹ̀wò àwọn ànímọ́ ìwòsàn ọgbẹ́ ti àwọn NFRCS tí a ṣe àgbékalẹ̀ rẹ̀ pẹ̀lú polymer. A yan àwọn àpẹẹrẹ ọgbẹ́ ìgbẹ́ abẹ́ a sì ṣe wọ́n gẹ́gẹ́ bí àwọn ọ̀nà tí a tẹ̀ jáde tẹ́lẹ̀ pẹ̀lú àwọn àtúnṣe díẹ̀ 19, 32, 48. A fi amúnilára pa gbogbo ẹranko gẹ́gẹ́ bí a ti ṣàlàyé tẹ́lẹ̀. Lo ìfúnpọ̀ biopsy (12 mm) láti ṣe gígé jíjìn sí awọ ara ẹ̀yìn. A fi Cs (ìṣàkóso rere), Ct (ní mímọ̀ pé àwọn ìrọ̀rùn owú ń dí ìwòsàn lọ́wọ́), Ch NFRCS àti Cp NFRCS (ẹgbẹ́ àyẹ̀wò) àti ìdarí odi sí wọn láìsí ìtọ́jú kankan. Ní ọjọ́ kọ̀ọ̀kan tí a ń ṣe ìwádìí náà, a wọn agbègbè ọgbẹ́ náà nínú gbogbo eku. Lo kámẹ́rà oní-nọ́ńbà láti ya àwòrán agbègbè ọgbẹ́ náà kí o sì fi aṣọ ìbora tuntun sí i. A wọn ìpín ogorun pípa ọgbẹ́ náà nípa lílo àgbékalẹ̀ yìí:
Ní ìbámu pẹ̀lú ìpín ogorun pípa ọgbẹ́ ní ọjọ́ kejìlá ti ìwádìí náà, a yọ awọ eku ti ẹgbẹ́ tó dára jùlọ ((Cp NFRCS) àti ẹgbẹ́ ìṣàkóso) tí a sì ṣe ìwádìí rẹ̀ nípa àwọ̀ H&E àti àwọ̀ trichrome Masson. Ní ìbámu pẹ̀lú ìpín ogorun pípa ọgbẹ́ ní ọjọ́ kejìlá ti ìwádìí náà, a yọ awọ eku ti ẹgbẹ́ tó dára jùlọ ((Cp NFRCS) àti ẹgbẹ́ ìṣàkóso) tí a sì ṣe ìwádìí rẹ̀ nípa àwọ̀ H&E àti àwọ̀ trichrome Masson.Ní ìbámu pẹ̀lú ìpín ogorun pípa ọgbẹ́ ní ọjọ́ kejìlá ti ìwádìí náà, a yọ awọ ara àwọn eku ti ẹgbẹ́ tó dára jùlọ ((Cp NFRCS) àti ẹgbẹ́ ìṣàkóso) kúrò, a sì fi àwọ̀ hematoxylin-eosin àti trichrome Masson ṣe àyẹ̀wò rẹ̀.根据研究第12天的伤口闭合百分比，切除最佳组((Cp) NFRCS)和对照组)的大鼠皮肤，进行H&E染色和Masson三色染色研究。根据研究第12天的伤口闭合百分比，切除最佳组((Cp) NFRCS)和对照组)的大鼠皮肤，进行H&E染色和眳组）A yọ àwọn eku nínú ẹgbẹ́ tó dára jùlọ ((Cp NFRCS) àti àwọn ẹgbẹ́ ìṣàkóso) kúrò fún àwọ̀ hematoxylin-eosin àti àwọ̀ trichrome Masson tí a gé kúrò lórí ìpín ogorun pípa ọgbẹ́ ní ọjọ́ kejìlá ti ìwádìí náà.A ṣe ilana awọ ti a ṣe ni ibamu si awọn ọna ti a ti ṣalaye tẹlẹ49,50. Ni ṣoki, lẹhin ti a fi sinu 10% formalin, awọn ayẹwo naa gbẹ nipa lilo awọn alcohols ti a ti ṣe atunṣe. Lo microtome lati gba awọn apakan tinrin (5 µm nipọn) ti àsopọ ti a yọ kuro. A fi hematoxylin ati eosin tọju awọn apakan tinrin ti awọn iṣakoso ati Cp NFRCS lati ṣe iwadi awọn iyipada histopathological. A lo abawọn trichrome ti Masson lati ṣe awari dida awọn fibrils collagen. Awọn onimọ-jinlẹ ṣe iwadi awọn abajade ti a gba ni afọju.
A ṣe àyẹ̀wò ìdúróṣinṣin àwọn àyẹ̀wò Cp NFRCS ní iwọ̀n otutu yàrá (25°C ± 2°C/60% RH ± 5%) fún oṣù 1251. A ṣe àyẹ̀wò ojú Cp NFRCS (ìyípadà àwọ̀ ojú àti ìdàgbàsókè àwọn kòkòrò àrùn) a sì dán an wò fún ìdènà ìfàsẹ́yìn ìfọ́ àti BCT gẹ́gẹ́ bí àwọn ọ̀nà tí a kọ sílẹ̀ lókè nínú abala Àwọn Ohun èlò àti Àwọn Ọ̀nà.
A ṣe àyẹ̀wò bí Cp NFRCS ṣe lè fẹ̀ sí i àti bí ó ṣe lè tún un ṣe nípa ṣíṣe Cp NFRCS pẹ̀lú ìwọ̀n 15×15 cm2. Ní àfikún, a yọ àwọn àpẹẹrẹ 30 mg (n = 5) kúrò nínú onírúurú ìpín Cp NFRCS, a sì ṣe àyẹ̀wò BCT ti àwọn àpẹẹrẹ tí a kẹ́kọ̀ọ́ gẹ́gẹ́ bí a ti ṣàlàyé rẹ̀ tẹ́lẹ̀ nínú abala Àwọn Ọ̀nà.
A ti gbìyànjú láti ṣe àgbékalẹ̀ onírúurú ìrísí àti ìrísí nípa lílo àwọn àkójọpọ̀ Cp NFRCS fún onírúurú ìlò ìṣègùn. Irú àwọn ìrísí tàbí ìrísí bẹ́ẹ̀ ní ìrísí onígun mẹ́rin fún ìṣàn imú, ìtọ́jú eyín, àti ìrísí onígun mẹ́rin fún ìṣàn ibà.
Gbogbo àwọn ìṣètò dátà ni a fihàn gẹ́gẹ́ bí ìyípadà ± ìwọ̀n tí ó jẹ́ ààyò, a sì ṣe àyẹ̀wò wọn nípasẹ̀ ANOVA nípa lílo Prism 5.03 (GraphPad, San Diego, CA, USA) lẹ́yìn náà ni ìdánwò ìfiwéra púpọ̀ ti Bonferroni (*p<0.05).
Gbogbo ilana ti a ṣe ninu awọn ẹkọ eniyan ni ibamu pẹlu awọn ilana ti Institute ati Igbimọ Iwadi Orilẹ-ede, bakanna bi Ipolongo ti Helsinki 1964 ati awọn atunṣe atẹle rẹ, tabi awọn ilana iwa-rere ti o jọra. Gbogbo awọn olukopa ni a sọ fun nipa awọn ẹya ti iwadi naa ati iseda atinuwa rẹ. Awọn data olukopa wa ni ikọkọ nigbati a ba gba wọn. Igbimọ Ethics Institutional ti Kasturba Medical College, Manipal, Karnataka ti ṣe atunyẹwo ati fọwọsi ilana idanwo TEG in vitro (IEC: 674/2020). Awọn oluyọọda fowo si ifọwọsi alaye lati gba awọn ayẹwo ẹjẹ.
Gbogbo ilana ti a ṣe ninu awọn ẹkọ ẹranko ni a ṣe ni ibamu pẹlu Ẹka Isegun Kastuba, Ile-ẹkọ giga Manipal, Manipal (IAEC/KMC/69/2020). Gbogbo awọn idanwo ẹranko ti a ṣe ni a ṣe ni ibamu pẹlu awọn itọsọna ti Igbimọ fun Iṣakoso ati Abojuto ti Idanwo Eranko (CPCSEA). Gbogbo awọn onkọwe tẹle awọn itọsọna ARRIVE.
A ṣe àyẹ̀wò àwọn ìwòran FTIR ti gbogbo NFRCS a sì fi wé wọn pẹ̀lú ìwòran chitosan tí a fihàn nínú Àwòrán 2A. Àwọn òkè onípele ti chitosan (tí a gbà sílẹ̀) ní 3437 cm-1 (ìfàgùn OH àti NH, tí a fi ara wọn bò), 2945 àti 2897 cm-1 (ìfàgùn CH), 1660 cm-1 (ìyà NH2), 1589 cm-1 (ìfàgùn N–H), 1157 cm-1 (ìfàgùn bridge O-), 1067 cm-1 (ìfàgùn C–O, hydroxyl kejì), 993 cm-1 (ìfàgùn CO, Bo-OH) 52.53.54. Àtẹ Àfikún S1 fi àwọn ìwọ̀n ìwòran ìfàgùn FTIR NFRCS hàn fún chitosan (oníròyìn), chitosan mímọ́, Cm, Ch, àti Cp. Ìwòrán FTIR ti gbogbo NFRCS (Cm, Ch àti Cp) fi àwọn ìsopọ̀ ìfàmọ́ra kan náà hàn gẹ́gẹ́ bí chitosan mímọ́ láìsí àwọn ìyípadà pàtàkì kankan (Àwòrán 2A). Àwọn àbájáde FTIR fìdí rẹ̀ múlẹ̀ pé kò sí ìbáṣepọ̀ kẹ́míkà tàbí ti ara láàárín àwọn polymer tí a lò láti ṣe àgbékalẹ̀ NFRCS, èyí tí ó fihàn pé àwọn polymer tí a lò kò ṣiṣẹ́ dáadáa.
Ìṣàfihàn nínú àyẹ̀wò Cm NFRCS, Ch NFRCS, Cp NFRCS àti Cs. (A) dúró fún àpapọ̀ FTIR ti àwọn àkójọpọ̀ chitosan àti Cm NFRCS, Ch NFRCS àti Cp NFRCS lábẹ́ ìfúnpọ̀. (B) a) Ìwọ̀n gbígba ẹ̀jẹ̀ gbogbo ti NFRCS Cm, Ch, Cp, àti Cg (n = 3); Àwọn àyẹ̀wò Ct fi BAR gíga hàn nítorí pé ìfọ́ owu ní agbára gbígba ẹ̀jẹ̀ tí ó ga jùlọ; b) Ẹ̀jẹ̀ lẹ́yìn gbígba ẹ̀jẹ̀ Àwòrán àyẹ̀wò tí ó gbà. Àwòrán àyẹ̀wò tí ó gbà ti BCT ti àyẹ̀wò C (Cp NFRCS ní BCT tí ó dára jùlọ (15 s, n = 3)). A fihan awọn data ninu C, D, E, ati G gẹgẹbi apapọ ± SD, ati awọn ọpa aṣiṣe duro fun SD, ***p < 0.0001. A fihan awọn data ninu C, D, E, ati G gẹgẹbi apapọ ± SD, ati awọn ọpa aṣiṣe duro fun SD, ***p < 0.0001. Данные в C, D, E и G представлены как среднее ± стандартное отклонение, отклонение, *** p <0,0001. A gbé àwọn dátà nínú C, D, E, àti G kalẹ̀ gẹ́gẹ́ bí ìyípadà ± ìwọ̀n, àti àwọn ọ̀pá àṣìṣe dúró fún ìyàtọ̀ standard, ***p<0.0001. C、D、E 和G 中的数据显示为平均值± SD，误差线代表SD，***p <0.0001。 C、D、E 和G 中的数据显示为平均值± SD，误差线代表SD，***p <0.0001。 Данные в C, D, E и G показаны как среднее значение ± стандартное. отклонение, *** p <0,0001. A fihan data ninu C, D, E, ati G gẹgẹbi apapọ ± iyipada boṣewa, awọn ọpa aṣiṣe duro fun iyapa boṣewa, ***p<0.0001.