Biotibbi tətbiqlər üçün nanoməsaməli və nanoqalın təbəqə əmələ gətirən bioaktiv tərkiblər

Nature.com saytına daxil olduğunuz üçün təşəkkür edirik. İstifadə etdiyiniz brauzer versiyasında məhdud CSS dəstəyi var. Ən yaxşı təcrübə üçün yenilənmiş brauzerdən istifadə etməyinizi (və ya Internet Explorer-də Uyğunluq Rejimini deaktiv etməyinizi) tövsiyə edirik. Bu vaxt ərzində davamlı dəstəyi təmin etmək üçün saytı stillər və JavaScript olmadan render edəcəyik.
Nəzarətsiz qanaxma ölümün əsas səbəblərindən biridir. Sürətli hemostazın əldə edilməsi, döyüş, yol qəzaları və ölümün azaldılması əməliyyatları zamanı ilk yardım kimi subyektin sağ qalmasını təmin edir. Sadə hemostatik film əmələ gətirən tərkibdən (HFFC) davamlı faza kimi əldə edilən nanoməsaməli liflə möhkəmləndirilmiş kompozit iskele (NFRCS) hemostazı tetikleyebilir və gücləndirə bilər. NFRCS-in inkişafı iynəcənin qanadının dizaynına əsaslanır. İynəcənin qanadının quruluşu eninə və uzununa qanadlardan ibarətdir və qanad membranları mikrostrukturun bütövlüyünü qorumaq üçün bir-birinə bağlıdır. HFFC lifin səthini nanometr qalınlığında bir təbəqə ilə bərabər şəkildə örtür və təsadüfi paylanmış pambıq qalınlığını (Ct) (dağılmış faza) birləşdirərək nanoməsaməli bir quruluş yaradır. Davamlı və dağılmış fazaların birləşməsi məhsulun maya dəyərini kommersiya baxımından mövcud olan məhsullarla müqayisədə on dəfə azaldır. Modifikasiya edilmiş NFRCS (tamponlar və ya bilək bantları) müxtəlif biotibbi tətbiqlərdə istifadə edilə bilər. İn vivo tədqiqatlar nəticəsində müəyyən edilib ki, hazırlanmış Cp NFRCS tətbiq yerində laxtalanma prosesini tetikler və gücləndirir. NFRCS nanoməsaməli quruluşuna görə mikro mühiti modulyasiya edə və hüceyrə səviyyəsində təsir göstərə bilər və nəticədə kəsik yara modelində yaraların daha yaxşı sağalmasına səbəb olur.
Döyüş, əməliyyat zamanı və təcili vəziyyətlər zamanı nəzarətsiz qanaxma yaralıların həyatı üçün ciddi təhlükə yarada bilər1. Bu vəziyyətlər periferik damar müqavimətinin ümumi artmasına səbəb olur və hemorragik şoka səbəb olur. Əməliyyat zamanı və sonrasında qanaxmanın qarşısını almaq üçün müvafiq tədbirlər potensial həyati təhlükə hesab olunur2,3. Böyük damarların zədələnməsi kütləvi qan itkisinə səbəb olur və bu da döyüşdə ölüm nisbətinin ≤ 50%, əməliyyat zamanı isə 31% olmasına səbəb olur1. Kütləvi qan itkisi bədən həcminin azalmasına səbəb olur ki, bu da ürək çıxışını azaldır. Ümumi periferik damar müqavimətinin artması və mikrosirkulyasiyanın mütərəqqi pozulması həyatı dəstəkləyən orqanlarda hipoksiyaya səbəb olur. Vəziyyət effektiv müdaxilə olmadan davam edərsə, hemorragik şok yarana bilər1,4,5. Digər ağırlaşmalara hipotermiya və metabolik asidozun irəliləməsi, eləcə də laxtalanma prosesinə mane olan laxtalanma pozğunluğu daxildir. Ağır hemorragik şok daha yüksək ölüm riski ilə əlaqələndirilir6,7,8. III dərəcəli (mütərəqqi) şokda qan köçürülməsi əməliyyat zamanı və əməliyyatdan sonrakı dövrdə xəstənin sağ qalması və ölümü üçün vacibdir. Yuxarıda göstərilən bütün həyati təhlükə yaradan vəziyyətlərin öhdəsindən gəlmək üçün suda həll olan hemostatik polimerlərin kombinasiyasından istifadə edərək minimal polimer konsentrasiyasından (0,5%) istifadə edən nanoməsaməli liflə möhkəmləndirilmiş kompozit iskele (NFRCS) hazırladıq.
Lif möhkəmləndirməsindən istifadə etməklə səmərəli məhsullar hazırlana bilər. Təsadüfi düzülmüş liflər, qanadlardakı üfüqi və şaquli zolaqlar ilə balanslaşdırılmış iynəcənin qanadının quruluşuna bənzəyir. Qanadın eninə və uzununa damarları qanad membranı ilə əlaqə qurur (Şəkil 1). NFRCS, daha yaxşı fiziki və mexaniki möhkəmliyə malik iskele sistemi kimi gücləndirilmiş Ct-dən ibarətdir (Şəkil 1). Əlverişliliyi və sənətkarlığı səbəbindən cərrahlar əməliyyatlar və sarğılar zamanı pambıq sap ölçülərindən (Ct) istifadə etməyə üstünlük verirlər. Beləliklə, Ct-nin çoxsaylı faydaları, o cümlədən 90%-dən çox kristal sellüloza (hemostatik aktivliyin artırılmasında iştirak edir) nəzərə alınmaqla, NFRCS9,10-un skelet sistemi kimi istifadə edilmişdir. Beləliklə, Ct-nin çoxsaylı faydaları, o cümlədən 90%-dən çox kristal sellüloza (hemostatik aktivliyin artırılmasında iştirak edir) nəzərə alınmaqla, NFRCS9,10-un skelet sistemi kimi istifadə edilmişdir. Sledovatelno, ego mnogochislennıe preimushestva, böyük hissələrdə > 90% кристаллической целлюлозы (участвует в повышении гемостатической активности), Ct istifadə edərək, kachestve skelet sistemi NFRCS9,10. Buna görə də, 90%-dən çox kristal sellüloza (hemostatik aktivliyin artmasında iştirak edir) daxil olmaqla bir çox faydası nəzərə alınmaqla, Ct NFRCS skelet sistemi kimi istifadə edilmişdir9,10.因此,考虑到它的多重益处,包括> 90% 的结晶纤维素(有助于增强止血C)tT被用作NFRCS9,10 的骨架系统。因此,考虑到它的多重益处,包括> 90%Buna görə də, 90%-dən çox kristal sellüloza (hemostatik aktivliyi artırmağa kömək edir) daxil olmaqla bir çox faydası nəzərə alınmaqla, Ct NFRCS9,10 üçün iskele kimi istifadə edilmişdir.Ct səthi örtüklə örtülmüş (nano qalınlığında təbəqə əmələ gəlməsi müşahidə edilmişdir) və hemostatik təbəqə əmələ gətirən tərkib (HFFC) ilə birləşdirilmişdir. HFFC təsadüfi yerləşdirilmiş Ct-ni bir yerdə saxlayaraq matrigel kimi fəaliyyət göstərir. Hazırlanmış dizayn, dağılmış fazada (möhkəmləndirici liflər) gərginliyi ötürür. Minimal polimer konsentrasiyalarından istifadə edərək yaxşı mexaniki möhkəmliyə malik nanoməsaməli strukturlar əldə etmək çətindir. Bundan əlavə, müxtəlif biotibbi tətbiqlər üçün müxtəlif qəlibləri fərdiləşdirmək asan deyil.
Şəkildə iynəcənin qanad quruluşuna əsaslanan NFRCS dizaynının diaqramı (A) göstərilir. Bu təsvirdə iynəcənin qanad quruluşunun müqayisəli analogiyası (qanadın kəsişən və uzununa damarları bir-birinə bağlıdır) və Cp NFRCS-in en kəsikli fotomikroqrafik təsviri (B) göstərilir. NFRCS-in sxematik təsviri.
NFRC-lər yuxarıdakı məhdudiyyətləri aradan qaldırmaq üçün davamlı faza kimi HFFC istifadə edilərək hazırlanmışdır. HFFC, tromb əmələ gəlməsini təşviq edən dəstək polimeri kimi metilsellüloza (MC) ilə xitozan (əsas hemostatik polimer kimi), hidroksipropil metilsellüloza (HPMC 50 cp) və polivinil spirti (PVA)) (125 kDa) daxil olmaqla müxtəlif film əmələ gətirən hemostatik polimerlərdən ibarətdir. Polivinilpirrolidin K30-un (PVP K30) əlavə edilməsi NFRC-nin nəm udma qabiliyyətini artırdı. Bağlanmış polimer qarışıqlarında polimer çarpaz əlaqəsini yaxşılaşdırmaq üçün polietilen glikol 400 (PEG 400) əlavə edildi. Ct-yə üç fərqli HFFC hemostatik tərkib (Cm HFFC, Ch HFFC və Cp HFFC), yəni MC ilə xitozan (Cm), HPMC ilə xitozan (Ch) və PVA ilə xitozan (Cp) tətbiq edildi. Müxtəlif in vitro və in vivo xarakteristika tədqiqatları NFRCS-in hemostatik və yara sağaltma aktivliyini təsdiqləyib. NFRCS tərəfindən təklif olunan kompozit materiallar, müəyyən ehtiyacları ödəmək üçün müxtəlif iskele formalarını fərdiləşdirmək üçün istifadə edilə bilər.
Bundan əlavə, NFRCS alt ətrafların və bədənin digər hissələrinin bütün zədə sahəsini örtmək üçün sarğı və ya rulon şəklində dəyişdirilə bilər. Xüsusilə döyüş ətraflarının zədələnməsi üçün hazırlanmış NFRCS dizaynı yarım qol və ya tam ayaqla dəyişdirilə bilər (Əlavə Şəkil S11). NFRCS, ağır intihar bilək xəsarətlərindən qanaxmanı dayandırmaq üçün istifadə edilə bilən toxuma yapışqanlı bilək bandı şəklində hazırlana bilər. Əsas məqsədimiz, mümkün qədər az polimerdən istifadə edərək, böyük bir əhaliyə (yoxsulluq həddindən aşağı) çatdırıla bilən və ilk yardım dəstinə yerləşdirilə bilən bir NFRCS hazırlamaqdır. Sadə, səmərəli və dizayn baxımından qənaətcil olan NFRCS yerli icmalara fayda verir və qlobal təsir göstərə bilər.
Xitozan (molekulyar çəkisi 80 kDa) və amarant Hindistanın Merck şəhərindən alınıb. Hidroksipropil metilsellüloza 50 Cp, polietilen glikol 400 və metilsellüloza Mumbaydakı Loba Chemie Pvt. MMC-dən alınıb. Polivinil spirti (molekulyar çəkisi 125 kDa) (87-90% hidrolizlənmiş) Qucaratdakı National Chemicals şirkətindən alınıb. Polivinilpirrolidin K30 Mumbaydakı Molychem şirkətindən, steril tamponlar isə daşıyıcı kimi Milli Q suyu (Direct-Q3 su təmizləmə sistemi, Merck, Hindistan) istifadə edilərək Tamil Nadudakı Ramaraju Surgery Cotton Mills Ltd. şirkətindən alınıb.
NFRCS liofilizasiya metodu ilə hazırlanmışdır11,12. Bütün HFFC tərkibləri (Cədvəl 1) mexaniki qarışdırıcı istifadə edilərək hazırlanmışdır. Mexaniki qarışdırıcıda 800 dövr/dəq sürətlə davamlı qarışdıraraq suda 1% sirkə turşusu istifadə edərək 0,5% xitozan məhlulu hazırlayın. Cədvəl 1-də göstərilən yüklənmiş polimerin dəqiq çəkisi xitozan məhluluna əlavə edildi və şəffaf polimer məhlulu əldə edilənə qədər qarışdırıldı. Yaranan qarışığa Cədvəl 1-də göstərilən miqdarda PVP K30 və PEG 400 əlavə edildi və şəffaf özlü polimer məhlulu əldə edilənə qədər qarışdırma davam etdirildi. Yaranan polimer məhlulu vannası polimer qarışığından tutulan hava qabarcıqlarını çıxarmaq üçün 60 dəqiqə ərzində ultrasəslə işlənmişdir. Əlavə Şəkil S1(b)-də göstərildiyi kimi, Ct 5 ml HFFC ilə doldurulmuş 6 quyulu lövhənin (qəlibin) hər quyusunda bərabər paylanmışdır.
Altı quyulu lövhə, HFFC-nin Ct şəbəkəsində vahid islanması və paylanmasına nail olmaq üçün 60 dəqiqə ərzində ultrasəslə işlənmişdir. Daha sonra altı quyulu lövhə -20°C-də 8-12 saat ərzində dondurulmuşdur. Müxtəlif NFRCS formulaları əldə etmək üçün dondurulmuş lövhələr 48 saat ərzində liyofilizasiya edilmişdir. Eyni prosedur, tamponlar və ya silindrik tamponlar və ya fərqli tətbiqlər üçün hər hansı digər forma kimi müxtəlif formalar və strukturlar istehsal etmək üçün istifadə olunur.
Dəqiq ölçülmüş xitosan (80 kDa) (3%) maqnit qarışdırıcı istifadə edərək 1%-li sirkə turşusunda həll edilir. Yaranan xitosan məhluluna 1%-li PEG 400 əlavə edilərək 30 dəqiqə qarışdırılır. Yaranan məhlul kvadrat və ya düzbucaqlı qaba tökülür və -80°C-də 12 saat dondurulur. Dondurulmuş nümunələr məsaməli Cs13 əldə etmək üçün 48 saat liyofilizasiya edilir.
Hazırlanmış NFRCS, xitozanın digər polimerlərlə kimyəvi uyğunluğunu təsdiqləmək üçün Furye çevirmə infraqırmızı spektroskopiyası (FTIR) (Shimadzu 8400 s FTIR, Tokio, Yaponiya) istifadə edərək təcrübələrə məruz qalmışdır14,15. Bütün sınaqdan keçirilmiş nümunələrin FTIR spektrləri (spektr diapazonunun eni 400 ilə 4000 sm-1 arasında) 32 skanlama aparılmaqla əldə edilmişdir.
Bütün formulalar üçün qan udma sürəti (BAR), Chen və digərləri tərəfindən təsvir edilən metoddan istifadə etməklə, kiçik dəyişikliklərlə qiymətləndirilmişdir. 16. Bütün tərkiblərin hazırlanmış NFRK-ları qalıq həlledicini çıxarmaq üçün bir gecə ərzində 105°C-də vakuum sobasında qurudulmuşdur. 30 mq NFRCS (ilkin nümunə çəkisi – W0) və 30 mq Ct (müsbət nəzarət) 3,8% natrium sitrat premiksi olan ayrı qablara yerləşdirilmişdir. Əvvəlcədən müəyyən edilmiş vaxt intervallarında, yəni 5, 10, 20, 30, 40 və 60 saniyədə, NFRCS çıxarılmış və nümunələr Ct-nin üzərinə 30 saniyə qoyularaq səthləri sorulmamış qandan təmizlənmişdir. NFRCS 16 tərəfindən udulmuş qanın son çəkisi hər zaman nöqtəsində (W1) nəzərə alınmışdır. Aşağıdakı düsturdan istifadə edərək BAR faizini hesablayın:
Qanın laxtalanma müddəti (BCT) Wang və digərləri tərəfindən bildirildiyi kimi təyin edilmişdir. 17. NFRCS iştirakı ilə bütöv qanın (3,8% natrium sitratla qarışdırılmış siçovul qanı) laxtalanması üçün tələb olunan vaxt test nümunəsinin BCT-si kimi hesablanmışdır. Müxtəlif NFRCS komponentləri (30 mq) 10 ml vintli qapaqlı flakonlara yerləşdirilib və 37°C-də inkubasiya edilmişdir. Flakona qan (0,5 ml) əlavə edilmiş və qan laxtalanmasını aktivləşdirmək üçün 0,3 ml 0,2 M CaCl2 əlavə edilmişdir. Nəhayət, möhkəm laxta əmələ gələnə qədər flakonun hər 15 saniyədə (180°-yə qədər) çevrilməsi lazımdır. Nümunənin BCT-si flip-vulların sayı ilə qiymətləndirilir17,18. BCT-yə əsasən, sonrakı xarakteristika tədqiqatları üçün NFRCS Cm, Ch və Cp-dən iki optimal tərkib seçilmişdir.
Ch NFRCS və Cp NFRCS tərkiblərinin BCT-si Li və digərləri tərəfindən təsvir edilən metodun tətbiqi ilə təyin edildi. 19. 15 x 15 mm2 Ch NFRCS, Cp NFRCS və Cs (müsbət nəzarət) ayrı Petri qablarına (37 °C) yerləşdirin. Qanın laxtalanma prosesinə başlamaq üçün 3,8% natrium sitrat tərkibli qan 0,2 M CaCl2 ilə 10:1 həcm nisbətində qarışdırıldı. Nümunə səthinə 20 µl 0,2 M CaCl2 siçovul qanı qarışığı tətbiq edildi və boş Petri qabına yerləşdirildi. Nəzarət qanı Ct olmadan boş Petri qablarına töküldü. 0, 3 və 5 dəqiqəlik sabit fasilələrlə, laxtalanmanı pozmadan qabı ehtiva edən nümunəyə 10 ml deionlaşdırılmış (DI) su əlavə etməklə laxtalanmanı dayandırın. Laxtalanmamış eritrositlər (eritrositlər) deionlaşdırılmış suyun iştirakı ilə hemolizə məruz qalır və hemoglobini buraxır. Müxtəlif zaman nöqtələrində hemoqlobin (HA(t)) UV-Vis spektrofotometri istifadə edilərək 540 nm-də (λmax hemoglobin) ölçüldü. 10 ml deionlaşdırılmış suda 20 µl qanın 0 dəqiqəsində hemoglobinin mütləq absorbsiyası (AH(0)) istinad standartı kimi qəbul edildi. Laxtalanmış qanın nisbi hemoglobin absorbsiyası (RHA) eyni qan partiyasından istifadə edilərək HA(t)/HA(0) nisbətindən hesablandı.
Tekstura analizatorundan (Texture Pro CT V1.3 Build 15, Brookfield, ABŞ) istifadə edərək NFRK-nın zədələnmiş toxumaya yapışma xüsusiyyətləri müəyyən edildi. Açıq dibli silindrik qabı donuz dərisinin içinə (yağ təbəqəsi olmadan) basın. Nümunələr (Ch NFRCS və Cp NFRCS) donuz dərisinə yapışma yaratmaq üçün kanül vasitəsilə silindrik qəliblərə tətbiq edildi. Otaq temperaturunda (RT) (25°C) 3 dəqiqəlik inkubasiyadan sonra NFRCS yapışma gücü sabit 0,5 mm/san sürətlə qeyd edildi.
Cərrahi möhürləyicilərin əsas xüsusiyyəti qan itkisini azaltmaqla yanaşı qan laxtalanmasını artırmaqdır. NFRCS-də itkisiz laxtalanma əvvəllər dərc edilmiş metoddan istifadə edərək kiçik dəyişikliklərlə qiymətləndirilmişdir 19. Mərkəzdənqaçma borusunun bir tərəfində 8 × 5 mm2 ölçülü dəlik olan (açıq yaranı təmsil edən) mikrosentrifuqasiya borusunu (2 ml) (daxili diametri 10 mm) hazırlayın. Açığı bağlamaq üçün NFRCS, xarici kənarları möhürləmək üçün isə lent istifadə olunur. 3,8% natrium sitrat premiksi olan mikrosentrifuqasiya borusuna 20 µl 0,2 M CaCl2 əlavə edin. 10 dəqiqədən sonra mikrosentrifuqasiya boruları qablardan çıxarıldı və qabların kütləsindəki artım NFRK-dan qanın çıxması səbəbindən müəyyən edildi (n = 3). Qan itkisi Ch NFRCS və Cp NFRCS Cs ilə müqayisə edildi.
NFRCS-in yaş bütövlüyü, Mişra və Chaudhary21 tərəfindən kiçik dəyişikliklərlə təsvir edilən metod əsasında müəyyən edilmişdir. NFRCS-i 50 ml su ilə 100 ml Erlenmeyer kolbasına qoyun və üst hissə yaratmadan 60 saniyə qarışdırın. Nümunələrin vizual yoxlanılması və fiziki bütövlüyünün prioritetləşdirilməsi toplanmaya əsaslanır.
HFFC-nin Ct-yə bağlanma gücü əvvəllər dərc olunmuş metodlardan istifadə etməklə kiçik dəyişikliklərlə öyrənilmişdir. Səth örtüyünün bütövlüyü, milliQ suyun (Ct) iştirakı ilə NFRK-nı akustik dalğalara (xarici stimul) məruz qoymaqla qiymətləndirilmişdir. Hazırlanmış NFRCS Ch NFRCS və Cp NFRCS su ilə doldurulmuş bir stəkana yerləşdirilib və müvafiq olaraq 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10 və 30 dəqiqə ultrasəslə işlənmişdir. Quruduqdan sonra, NFRCS-in ilkin və son çəkisi arasındakı faiz fərqi material itkisinin faizini (HFFC) hesablamaq üçün istifadə edilmişdir. In vitro BCT səth materiallarının bağlanma gücünü və ya itkisini daha da dəstəkləmişdir. HFFC-nin Ct-yə bağlanmasının səmərəliliyi qan laxtalanması və Ct22 səthində elastik örtük təmin edir.
Hazırlanmış NFRCS-in homogenliyi, NFRCS-in təsadüfi seçilmiş ümumi yerlərindən götürülmüş nümunələrin (30 mq) BCT-si ilə müəyyən edilmişdir. NFRCS uyğunluğunu müəyyən etmək üçün əvvəllər qeyd olunan BCT proseduruna əməl edin. Bütün beş nümunə arasındakı yaxınlıq, Ct torunda vahid səth örtüyünü və HFFC çökməsini təmin edir.
Nominal qan təmas sahəsi (NBCA) əvvəllər bildirildiyi kimi bəzi dəyişikliklərlə təyin edildi. Ct, Ch NFRCS, Cp NFRCS və Cs iki səthi arasında 20 µl qan sıxaraq qanı laxtalandırın. 1 saatdan sonra stentin iki hissəsi ayrıldı və laxtanın sahəsi əl ilə ölçüldü. Üç təkrarın orta dəyəri NBCA NFRCS19 hesab edildi.
Dinamik Buxar Sorbsiyası (DVS) təhlili, NFRCS-in xarici mühitdən və ya laxtalanmanın başlanmasından məsul olan zədələnmə yerindən suyu udmaq üçün effektivliyini qiymətləndirmək üçün istifadə edilmişdir. DVS, ±0,1 µg kütlə qətnaməsi olan ultra həssas bir tarazlıq istifadə edərək nümunədəki buxarın udulmasını və itkisini qravimetrik olaraq qiymətləndirir və ya qeyd edir. Doymuş və quru daşıyıcı qazları qarışdırmaqla nümunənin ətrafında elektron kütlə axını tənzimləyicisi tərəfindən qismən buxar təzyiqi (nisbi rütubət) yaradılır. Avropa Farmakopeya qaydalarına uyğun olaraq, nümunələrin nəm udma faizinə əsasən, nümunələr 4 kateqoriyaya bölünmüşdür (0–0.012% w/w− hiqroskopik olmayan, 0.2–2% w/w bir qədər hiqroskopik, 2–15% orta dərəcədə hiqroskopik və >15% çox hiqroskopik)23. Avropa Farmakopeya qaydalarına uyğun olaraq, nümunələrin nəm udma faizinə əsasən, nümunələr 4 kateqoriyaya bölünmüşdür (0–0.012% w/w− hiqroskopik olmayan, 0.2–2% w/w bir qədər hiqroskopik, 2–15% orta dərəcədə hiqroskopik və >15% çox hiqroskopik)23.Avropa Farmakopeyasının tövsiyələrinə uyğun olaraq, nümunələrin nəm udma faizindən asılı olaraq, nümunələr 4 kateqoriyaya bölünmüşdür (0–0.012% çəki/ç – qeyri-higroskopik, 0.2–2% çəki/ç bir qədər higroskopik, 2–15%).% umerenno гигроскопичен и > 15% очень гигроскопичен)23. orta dərəcədə higroskopik və > 15% çox higroskopik)23.根据欧洲药典指南,根据样品吸收水分的百分比,样品分为4 类(0-0,012% w/w非吸湿性、0,2-2% w/w 轻微吸湿性,2-15% 适度吸湿,> 15% 非常吸湿)23。根据 欧洲 药典 指南 , 根据 吸收 水分 的 百分比 样品 分为 分为 分为 分为 分为 分为 分为 , 根据 吸收 水分 的W/w- 吸湿 性 、 、 、 、 0,2-2% W/w 轻微 、 2-15% 适度 吸湿 ,> 15%非常吸湿)2Avropa Farmakopeyasının tövsiyələrinə uyğun olaraq, nümunələr, nümunənin udduğu nəmlik faizindən asılı olaraq 4 sinfə bölünür (çəkiyə görə 0-0,012% - qeyri-higroskopik, çəkiyə görə 0,2-2% - bir qədər higroskopik, çəkiyə görə 2-15%).% umerenno гигроскопичен, > 15 % очень гигроскопичен) 23. orta dərəcədə higroskopik, > 15% çox higroskopik) 23.NFCS X NFCS və TsN NFCS-lərin higroskopik səmərəliliyi DVS TA TGA Q5000 SA analizatorunda təyin edilmişdir. Bu proses zamanı işləmə müddəti, nisbi rütubət (RH) və 25°C24-də real vaxt nümunə çəkisi əldə edilmişdir. Rütubət tərkibi aşağıdakı tənlikdən istifadə edərək dəqiq NFRCS kütlə təhlili ilə hesablanır:
MC NFRCS rütubətidir. m1 – QSİƏP-lərin quru çəkisi. m2 verilən nisbi rahatlıqda real vaxt NFRCS kütləsidir.
Ümumi səth sahəsi, nümunələri 25 °C-də 10 saat (< 7 × 10–3 Torr) boşaltdıqdan sonra maye azotla azot adsorbsiyası təcrübəsi istifadə edilərək hesablanmışdır. Ümumi səth sahəsi, nümunələri 25 °C-də 10 saat (< 7 × 10–3 Torr) boşaltdıqdan sonra maye azotla azot adsorbsiyası təcrübəsi istifadə edilərək hesablanmışdır. Общая площадь поверхности оценивалась с помощью эксперимента по адсорбции azota jidkim azotom posle опорожнения образцов при 25 °С в течение 10 ч (< 7 × 10–3 Torr). Nümunələr 25°C-də 10 saat (< 7 × 10–3 Torr) boşaldıldıqdan sonra maye azotla azot adsorbsiyası təcrübəsi istifadə edilərək ümumi səth sahəsi hesablanmışdır.在25°C 清空样品10 小时(< 7 × 10-3 Torr)后,使用液氮的氮吸附实验估计总表面表25°C 25°C (< 7 × 10-3 torr) temperaturda 10 saatdan sonra azota jidkim azotom üçün adsorbcii azota jidkim azotom eksperimentinin tətbiqi. Nümunələr 25°C-də (< 7 x 10-3 torr) 10 saat boşaldıldıqdan sonra maye azotla azot adsorbsiyası təcrübələri istifadə edilərək ümumi səth sahəsi hesablanmışdır.Ümumi səth sahəsi, məsamə həcmi və NFRCS məsamə ölçüsü RS 232 proqram təminatından istifadə edərək Avstriyanın NOVA 1000e şirkətindən alınmış Quantachrome ilə təyin edilmişdir.
Tam qandan 5% eritrosit (durulayıcı kimi duzlu məhlul) hazırlayın. Daha sonra müəyyən miqdarda HFFC (0,25 ml) 96 quyulu lövhəyə və 5% eritrosit kütləsinə (0,1 ml) köçürün. Qarışığı 37°C-də 40 dəqiqə inkubasiya edin. Qırmızı qan hüceyrələri və serum qarışığı müsbət nəzarət, duzlu məhlul və qırmızı qan hüceyrələrinin qarışığı isə mənfi nəzarət hesab edildi. Hemaqlütinasiya Stajitzky şkalasına əsasən təyin edildi. Təklif olunan şkala aşağıdakılardır: + + + + sıx dənəvər aqreqatlar; + + + əyri kənarları olan hamar alt yastıqlar; + + cırılmış kənarları olan hamar alt yastıqlar; + hamar yastıqların kənarları ətrafında dar qırmızı halqalar; – (mənfi) aşağı quyunun mərkəzində ayrıca qırmızı düymə 12.
NFRCS-in hemouyğunluğu Beynəlxalq Standartlaşdırma Təşkilatının (ISO) metoduna (ISO10993-4, 1999)26,27 uyğun olaraq öyrənilmişdir. Sinqh və digərləri tərəfindən təsvir edilən qravimetrik metod. NFRCS-in iştirakı ilə və ya səthində tromb əmələ gəlməsini qiymətləndirmək üçün kiçik dəyişikliklər edilmişdir. 500 mq Cs, Ch NFRCS və Cp NFRCS 37°C-də 24 saat ərzində fosfat tamponlu salin məhlulunda (PBS) inkubasiya edilmişdir. 24 saatdan sonra PBS çıxarıldı və NFRCS 3,8% natrium sitrat tərkibli 2 ml qanla işlənmişdir. NFRCS-in səthinə inkubasiya edilmiş nümunələrə 0,04 ml 0,1 M CaCl2 əlavə edin. 45 dəqiqədən sonra laxtalanmanı dayandırmaq üçün 5 ml distillə edilmiş su əlavə edildi. NFRK-nin səthindəki laxtalanmış qan 36-38% formaldehid məhlulu ilə işlənmişdir. Formaldehidlə fiksasiya olunmuş laxtalar quruduldu və çəkildi. Trombozun faizi qan və nümunə olmadan stəkanın çəkisini (mənfi nəzarət) və qanlı stəkanın çəkisini (müsbət nəzarət) hesablamaqla hesablandı.
İlkin təsdiq olaraq, nümunələr HFFC səth örtüyünün, Ct bir-biri ilə əlaqəli və Ct şəbəkəsinin məsamə əmələ gətirmə qabiliyyətini anlamaq üçün optik mikroskop altında vizuallaşdırıldı. NFRCS-dən alınan Ch və Cp-nin nazik hissələri skalpel bıçağı ilə kəsildi. Yaranan hissə şüşə slayda yerləşdirildi, örtüklə örtüldü və kənarları yapışqanla bərkidildi. Hazırlanmış slaydlar optik mikroskop altında baxıldı və müxtəlif böyüdücülərdə fotoşəkillər çəkildi.
Ct şəbəkələrində polimer çöküntüsü, Rice və digərləri tərəfindən təsvir edilən metoda əsaslanan flüoresans mikroskopiyası istifadə edilərək vizuallaşdırıldı.29 Formulasiya üçün istifadə edilən HFFC tərkibi flüoresan boya (amaranth) ilə qarışdırılmış və NFRCS (Ch & Cp) əvvəllər qeyd olunan üsula uyğun olaraq hazırlanmışdır. Formulasiya üçün istifadə edilən HFFC tərkibi flüoresan boya (amaranth) ilə qarışdırılmış və NFRCS (Ch & Cp) əvvəllər qeyd olunan üsula uyğun olaraq hazırlanmışdır.Formulasiya üçün istifadə edilən HFFC tərkibi flüoresan boya (amaranth) ilə qarışdırılmış və əvvəllər qeyd olunan metoda uyğun olaraq NFRCS (Ch və Cp) əldə edilmişdir.将用于配方的HFFC 组合物与荧光染料(苋菜)混合,并按照前面提到的斶到的斶Check Cp).将用于配方的HFFC 组合物与荧光染料(苋菜)混合,并按照前面提到的斶到的斶Check Cp).Formulada istifadə edilən HFFC tərkibi, əvvəllər qeyd edildiyi kimi, flüoresan boya (Amaranth) ilə qarışdırılmış və NFRCS (Ch və Cp) əldə edilmişdir.Əldə edilən nümunələrdən NFRK-nın nazik hissələri kəsilmiş, şüşə slaydlara qoyulmuş və örtük slaydları ilə örtülmüşdür. Hazırlanmış slaydları yaşıl filtrdən (310-380 nm) istifadə edərək flüoresan mikroskop altında müşahidə edin. Ct əlaqələrini və Ct şəbəkəsində artıq polimer çöküntüsünü anlamaq üçün şəkillər 4x böyütmə ilə çəkilmişdir.
NFRCS Ch və Cp-nin səth topoqrafiyası, vurma rejimində ultra kəskin TESP konsollu atom qüvvəsi mikroskopu (AFM) istifadə edilərək təyin edildi: 42 N/m, 320 kHz, ROC 2-5 nm, Bruker, Tayvan. Səth pürüzlülüyü proqram təminatından (Scanning Probe Image Processor) istifadə edərək kök orta kvadrat (RMS) ilə təyin edildi. Səth vahidliyini yoxlamaq üçün müxtəlif NFRCS yerləri 3D şəkillərdə göstərildi. Müəyyən bir sahə üçün balın standart sapması səth pürüzlülüyü kimi müəyyən edilir. NFRCS31-in səth pürüzlülüyünü ölçmək üçün RMS tənliyindən istifadə edildi.
FESEM əsaslı tədqiqatlar, Cm NFRCS-dən daha yaxşı BCT göstərən Ch NFRCS və Cp NFRCS-lərin səth morfologiyasını anlamaq üçün FESEM, SU8000, HI-0876-0003, Hitachi, Tokio istifadə edilərək aparılmışdır. FESEM tədqiqatı, Zhao və digərləri tərəfindən təsvir edilən metoda uyğun olaraq, kiçik dəyişikliklərlə aparılmışdır. 32 NFRCS 20-30 mq Ch NFRCS və Cp NFRCS siçovul qanı ilə əvvəlcədən qarışdırılmış 20 µl 3,8% natrium sitratla əvvəlcədən qarışdırılmışdır. Laxtalanmanı başlatmaq üçün qanla işlənmiş nümunələrə 20 µl 0,2 M CaCl2 əlavə edilmiş və nümunələr otaq temperaturunda 10 dəqiqə inkubasiya edilmişdir. Bundan əlavə, artıq eritrositlər NFRCS səthindən fizioloji məhlul ilə yaxalanaraq çıxarılmışdır.
Sonrakı nümunələr 0,1% qlutaraldehid ilə işlənmiş və nəmliyi aradan qaldırmaq üçün 37°C-də isti hava sobasında qurudulmuşdur. Qurudulmuş nümunələr örtülmüş və təhlil edilmişdir 32. Təhlil zamanı əldə edilən digər görüntülər fərdi pambıq liflərinin səthində laxta əmələ gəlməsi, Ct arasında polimer çöküntüsü, eritrosit morfologiyası (forma), laxta bütövlüyü və NFRCS iştirakı ilə eritrosit morfologiyası idi. Təmizlənməmiş NFRCS sahələri və qanla inkubasiya edilmiş Ch və Cp ilə işlənmiş NFRCS sahələri elementar ionlar (natrium, kalium, azot, kalsium, maqnezium, sink, mis və selen) üçün taranmışdır 33. Laxta əmələ gəlməsi zamanı elementar ionların yığılmasını və laxta homogenliyini anlamaq üçün müalicə olunmuş və işlənməmiş nümunələr arasında elementar ion faizlərini müqayisə edin.
Ct səthində Cp HFFC səth örtüyünün qalınlığı FESEM istifadə edilərək təyin edildi. Cp NFRCS-nin en kəsikləri çərçivədən kəsildi və püskürtmə ilə örtüldü. Nəticədə püskürtmə örtük nümunələri FESEM ilə müşahidə edildi və səth örtüyünün qalınlığı ölçüldü 34, 35, 36.
Rentgen mikro-KT yüksək qətnaməli 3D dağıdıcı olmayan görüntüləmə təmin edir və NFRK-nın daxili struktur düzülüşünü öyrənməyə imkan verir. Mikro-KT, nümunədəki rentgen şüalarının lokal xətti zəifləmə əmsalını qeyd etmək üçün nümunədən keçən rentgen şüasından istifadə edir ki, bu da morfoloji məlumat əldə etməyə kömək edir. Cp NFRCS-də və qanla işlənmiş Cp NFRCS-də Ct-nin daxili yeri NFRCS37,38,39 iştirakı ilə udma səmərəliliyini və qan laxtalanmasını anlamaq üçün mikro-KT ilə araşdırıldı. Qanla işlənmiş və işlənməmiş Cp NFRCS nümunələrinin 3D strukturları mikro-KT (V|tome|x S240, Feniks, Almaniya) istifadə edilərək yenidən quruldu. VG STUDIO-MAX proqram təminatı versiyası 2.2 istifadə edərək, NFRCS üçün 3D görüntülər hazırlamaq üçün müxtəlif bucaqlardan (ideal olaraq 360° əhatə dairəsi) bir neçə rentgen görüntüsü çəkildi. Toplanan proyeksiya məlumatları müvafiq sadə 3D ScanIP Academic proqram təminatından istifadə edərək 3D həcmli görüntülərə yenidən quruldu.
Bundan əlavə, laxtanın paylanmasını anlamaq üçün qan laxtalanmasını başlatmaq üçün NFRCS-ə 20 µl əvvəlcədən qarışdırılmış sitratlı qan və 20 µl 0,2 M CaCl2 əlavə edildi. Hazırlanmış nümunələr bərkiməyə buraxıldı. NFRK səthi 0,5% qlutaraldehid ilə işlənmiş və 30-40°C-də isti hava sobasında 30 dəqiqə qurudulmuşdur. NFRCS-də əmələ gələn qan laxtası skan edilmiş, yenidən qurulmuş və qan laxtasının 3D görüntüsü vizuallaşdırılmışdır.
Antibakterial analizlər, əvvəllər təsvir edilmiş metoddan istifadə edərək (Ch NFRCS ilə müqayisədə ən yaxşı) kiçik dəyişikliklərlə Cp NFRCS üzərində aparıldı. Cp NFRCS və Cp HFFC-nin antibakterial aktivliyi, Petri qablarında inkubatorda aqar üzərində böyüyən üç fərqli test mikroorqanizmi [S.aureus (qram-müsbət bakteriyalar), E.coli (qram-mənfi bakteriyalar) və ağ Candida (C.albicans)] istifadə edilərək təyin edildi. 105-106 CFU ml-1 konsentrasiyasında 50 ml durulaşdırılmış bakteriya kulturası suspenziyasını aqar mühitinə bərabər şəkildə inokulyasiya edin. Mühiti Petri qabına tökün və bərkiməsinə icazə verin. HFFC ilə doldurmaq üçün aqar lövhəsinin səthində quyular açıldı (HFFC üçün 3 quyu və mənfi nəzarət üçün 1 quyu). 3 quyuya 200 µl HFFC və 4-cü quyuya 200 µl pH 7.4 PBS əlavə edin. Petri qabının digər tərəfində, bərkimiş aqarın üzərinə 12 mm Cp NFRCS diski qoyun və PBS (pH 7.4) ilə nəmləndirin. Siprofloksasin, ampisillin və flukonazol tabletləri Staphylococcus aureus, Escherichia coli və Candida albicans üçün istinad standartları hesab olunur. İnhibə zonasını əl ilə ölçün və inhibə zonasının rəqəmsal görüntüsünü çəkin.
Tədqiqat, təşkilati etik təsdiqdən sonra, Hindistanın cənubundakı Karnataka ştatının Manipal şəhərindəki Kasturba Tibb Təhsil və Tədqiqat Kollecində aparılmışdır. In vitro TEG eksperimental protokolu, Karnataka ştatının Manipal şəhərindəki Kasturba Tibb Kollecinin İnstitusional Etika Komitəsi (IEC: 674/2020) tərəfindən nəzərdən keçirilmiş və təsdiq edilmişdir. Tədqiqat iştirakçıları xəstəxana qan bankından könüllü qan donorlarından (18-55 yaş arası) seçilmişdir. Bundan əlavə, qan nümunələrinin toplanması üçün könüllülərdən məlumatlı razılıq forması əldə edilmişdir. Native TEG (N-TEG), Cp HFFC formulasının natrium sitratla əvvəlcədən qarışdırılmış tam qana təsirini öyrənmək üçün istifadə edilmişdir. N-TEG, tibbi yardım nöqtəsində reanimasiyada rolu ilə geniş tanınır ki, bu da nəticələrin klinik cəhətdən əhəmiyyətli dərəcədə gecikməsi potensialına görə klinisyenlər üçün problemlər yaradır (adi laxtalanma testləri). N-TEG analizi tam qan istifadə edilərək aparılmışdır. Bütün iştirakçılardan məlumatlı razılıq və ətraflı tibbi tarixçə əldə edilmişdir. Tədqiqata hamiləlik/doğuşdan sonrakı və ya qaraciyər xəstəliyi kimi hemostatik və ya trombotik ağırlaşmaları olan iştirakçılar daxil edilməmişdir. Laxtalanma kaskadına təsir edən dərman qəbul edən subyektlər də tədqiqatdan kənarlaşdırılmışdır. Əsas laboratoriya testləri (hemoglobin, protrombin vaxtı, aktivləşdirilmiş tromboplastin və trombosit sayı) bütün iştirakçılar üzərində standart prosedurlara uyğun olaraq aparılmışdır. N-TEG qan laxtasının özlülük elastikliyini, ilkin laxta quruluşunu, hissəciklərin qarşılıqlı təsirini, laxtanın möhkəmlənməsini və laxta lizisini təyin edir. N-TEG analizi bir neçə hüceyrə elementinin və plazmanın kollektiv təsirləri haqqında qrafik və ədədi məlumatlar təqdim edir. N-TEG analizi iki fərqli həcmdə Cp HFFC (10 µl və 50 µl) üzərində aparılmışdır. Nəticədə, 10 µl Cp HFFC-yə 1 ml limon turşusu olan tam qan əlavə edilmişdir. TEG qabı olan 20 µl 0,2 M CaCl2-yə 1 ml (Cp HFFC + sitratlı qan), 340 µl qarışıq qan əlavə edin. Bundan sonra, Cp HFFC41 iştirakı ilə qan nümunələrinin 30%-nin R, K, alfa bucağı, MA, G, CI, TPI, EPL, LY ölçülməsi üçün TEG qabları TEG® 5000, ABŞ-a yükləndi.
In vivo tədqiqat protokolu Manipal Ali Təhsil İnstitutunun Manipal şəhərindəki Kasturba Tibb Məktəbinin Heyvan Etikası üzrə İnstitusional Komitəsi (IAEC) tərəfindən nəzərdən keçirilmiş və təsdiq edilmişdir (IAEC/KMC/69/2020). Bütün heyvan təcrübələri Heyvan Təcrübələrinə Nəzarət və Nəzarət Komitəsinin (CPCSEA) tövsiyələrinə uyğun olaraq aparılmışdır. Bütün in vivo NFRCS tədqiqatları (2 × 2 sm2) dişi Wistar siçovulları üzərində (çəkisi 200-250 q) aparılmışdır. Bütün heyvanlar 24-26°C temperaturda iqlimləşdirilmiş, heyvanlar standart qida və suya sərbəst çıxış əldə etmişlər. Bütün heyvanlar təsadüfi olaraq müxtəlif qruplara bölünmüş, hər qrup üç heyvandan ibarət olmuşdur. Bütün tədqiqatlar Heyvan Tədqiqatları: In Vivo Təcrübələrinin Hesabatı 43-ə uyğun olaraq aparılmışdır. Tədqiqatdan əvvəl heyvanlara 20-50 mq ketamin (1 kq bədən çəkisi üçün) və 2-10 mq ksilazin (1 kq bədən çəkisi üçün) qarışığının qarın boşluğuna (ip) yeridilməsi ilə anesteziya verildi. Tədqiqatdan sonra qanaxma həcmi nümunələrin ilkin və son çəkisi arasındakı fərqi qiymətləndirməklə hesablandı, üç testdən əldə edilən orta dəyər nümunənin qanaxma həcmi kimi götürüldü.
Siçovul quyruğu amputasiyası modeli, NFRCS-in travma, döyüş və ya yol qəzasında qanaxmanı modulyasiya etmək potensialını anlamaq üçün tətbiq edilmişdir (zədə modeli). Normal qanaxmanı təmin etmək üçün quyruğun 50%-ni skalpel bıçağı ilə kəsin və 15 saniyə havada saxlayın. Bundan əlavə, test nümunələri təzyiq tətbiq etməklə siçovulun quyruğuna yerləşdirildi (Ct, Cs, Ch NFRCS və Cp NFRCS). Test nümunələri üçün qanaxma və PCT bildirildi (n = 3)17,45.
Döyüşdə NFRCS təzyiq nəzarətinin effektivliyi səthi bud arteriyasının modelində araşdırıldı. Bud arteriyası açıq qalır, 24G trokarla deşilir və 15 saniyə ərzində qanaxma çıxarılır. Nəzarətsiz qanaxma müşahidə edildikdən sonra, test nümunəsi təzyiq tətbiq olunmaqla deşmə yerinə yerləşdirilir. Test nümunəsinin tətbiqindən dərhal sonra laxtalanma müddəti qeydə alındı ​​və növbəti 5 dəqiqə ərzində hemostatik effektivlik müşahidə edildi. Eyni prosedur Cs və Ct46 ilə təkrarlandı.
Dowling və digərləri 47 əməliyyat zamanı qanaxma kontekstində hemostatik materialların hemostatik potensialını qiymətləndirmək üçün qaraciyər zədələnməsi modeli təklif etdilər. Ct nümunələri (mənfi nəzarət), Cs çərçivəsi (müsbət nəzarət), Ch NFRCS nümunələri və Cp NFRCS nümunələri üçün BCT qeyd edildi. Siçovulun suprahepatik boş venası median laparotomiya aparılaraq açıqlandı. Bundan sonra, sol payın distal hissəsi qayçı ilə kəsildi. Qaraciyərdə skalpel bıçağı ilə kəsik edin və bir neçə saniyə qanaxmasına icazə verin. Dəqiq çəkilən Ch NFRCS və Cp NFRCS test nümunələri heç bir müsbət təzyiq olmadan zədələnmiş səthə yerləşdirildi və BCT qeyd edildi. Daha sonra nəzarət qrupu (Ct) zədəni qırmadan təzyiq tətbiq etdi və ardınca Cs 30 s47 izlədi.
Yara sağalma analizləri, hazırlanmış polimer əsaslı NFRCS-lərin yara sağalma xüsusiyyətlərini qiymətləndirmək üçün eksizyon yara modeli istifadə edilərək in vivo şəraitdə aparılmışdır. Eksizyon yaralarının modelləri kiçik dəyişikliklərlə əvvəllər dərc olunmuş metodlara uyğun olaraq seçilmiş və aparılmışdır19,32,48. Bütün heyvanlar əvvəllər təsvir edildiyi kimi anesteziya edilmişdir. Arxa dərisində dairəvi dərin kəsik etmək üçün biopsiya yumrusundan (12 mm) istifadə edin. Hazırlanmış yara sahələri heç bir müalicə olmadan Cs (müsbət nəzarət), Ct (pambıq disklərinin sağalmasına mane olduğunu qəbul edərək), Ch NFRCS və Cp NFRCS (eksperimental qrup) və mənfi nəzarət ilə sarğılanmışdır. Tədqiqatın hər günündə bütün siçovullarda yaranın sahəsi ölçülmüşdür. Yara sahəsinin şəklini çəkmək üçün rəqəmsal kameradan istifadə edin və yeni sarğı qoyun. Yaranın bağlanma faizi aşağıdakı düsturla ölçülmüşdür:
Tədqiqatın 12-ci günündə yaranın bağlanma faizinə əsasən, ən yaxşı qrupun siçovul dərisi çıxarıldı ((Cp NFRCS) və nəzarət qrupunun) və H&E boyama və Masson trixrom boyama üsulları ilə öyrənildi. Tədqiqatın 12-ci günündə yaranın bağlanma faizinə əsasən, ən yaxşı qrupun siçovul dərisi çıxarıldı ((Cp NFRCS) və nəzarət qrupunun) və H&E boyama və Masson trixrom boyama üsulları ilə öyrənildi.Tədqiqatın 12-ci günündə yaranın bağlanma faizinə əsasən, ən yaxşı qrupun ((Cp NFRCS) və nəzarət qrupunun) siçovullarının dərisi çıxarılıb və hematoksilin-eozin və Masson trixromu ilə boyanaraq müayinə edilib.根据研究第12天的伤口闭合百分比,切除最佳组((Cp) NFRCS)和对照组)的大鼠皮肤,进行H&E染色和Masson三色染色研究。根据研究第12天的伤口闭合百分比,切除最佳组((Cp) NFRCS)和对照组)的大鼠皮肤,进行H&E染色和眳组)Ən yaxşı qrupdakı ((Cp NFRCS) və nəzarət qrupları) siçovullar, tədqiqatın 12-ci günündə yaranın bağlanma faizinə əsasən hematoksilin-eozin boyama və Masson trixrom boyama üçün çıxarıldı.Tətbiq edilən boyama proseduru əvvəllər təsvir edilmiş metodlara uyğun olaraq həyata keçirilmişdir49,50. Qısaca desək, 10% formalində fiksasiyadan sonra nümunələr bir sıra dərəcəli spirtlərdən istifadə edərək susuzlaşdırıldı. Kəsilən toxumanın nazik hissələrini (5 µm qalınlığında) əldə etmək üçün mikrotomdan istifadə edin. Histopatoloji dəyişiklikləri öyrənmək üçün nəzarət və Cp NFRCS-lərin nazik ardıcıl hissələri hematoksilin və eozinlə işlənmişdir. Masson trixrom boyasından kollagen liflərinin əmələ gəlməsini aşkar etmək üçün istifadə edilmişdir. Əldə edilən nəticələr patoloqlar tərəfindən kor-koranə öyrənilmişdir.
Cp NFRCS nümunələrinin stabilliyi otaq temperaturunda (25°C ± 2°C/60% RH ± 5%) 12 ay ərzində öyrənilmişdir51. Cp NFRCS (səth rənginin dəyişməsi və mikrobların böyüməsi) vizual olaraq yoxlanılmış və Materiallar və Metodlar bölməsində göstərilən yuxarıdakı metodlara uyğun olaraq qatlanma aşınma müqaviməti və BCT üçün sınaqdan keçirilmişdir.
Cp NFRCS-nin miqyaslanma qabiliyyəti və təkrarlana bilmə qabiliyyəti 15×15 sm2 ölçülü Cp NFRCS hazırlanaraq araşdırılmışdır. Bundan əlavə, müxtəlif Cp NFRCS fraksiyalarından 30 mq nümunə (n = 5) çıxarılmış və tədqiq olunan nümunələrin BCT-si əvvəllər Metodlar bölməsində təsvir edildiyi kimi qiymətləndirilmişdir.
Müxtəlif biotibbi tətbiqlər üçün Cp NFRCS kompozisiyalarından istifadə edərək müxtəlif formalar və strukturlar hazırlamağa çalışdıq. Bu cür formalara və ya konfiqurasiyalara burun qanaması üçün konik tamponlar, stomatoloji prosedurlar və vaginal qanaxma üçün silindrik tamponlar daxildir.
Bütün məlumat dəstləri orta ± standart sapma kimi ifadə edilir və Bonferroninin çoxsaylı müqayisə testindən (*p<0.05) sonra Prism 5.03 (GraphPad, San Diego, CA, ABŞ) istifadə edərək ANOVA ilə təhlil edilmişdir.
İnsan tədqiqatlarında aparılan bütün prosedurlar İnstitutun və Milli Tədqiqat Şurasının standartlarına, eləcə də 1964-cü il Helsinki Bəyannaməsinə və onun sonrakı düzəlişlərinə və ya oxşar etik standartlara uyğun idi. Bütün iştirakçılara tədqiqatın xüsusiyyətləri və könüllü xarakteri barədə məlumat verildi. İştirakçı məlumatları toplandıqdan sonra məxfi qalır. In vitro TEG eksperimental protokolu Karnataka ştatının Manipal şəhərindəki Kasturba Tibb Kollecinin İnstitusional Etika Komitəsi tərəfindən nəzərdən keçirilmiş və təsdiq edilmişdir (IEC: 674/2020). Könüllülər qan nümunələri toplamaq üçün məlumatlı razılıq imzaladılar.
Heyvan tədqiqatlarında aparılan bütün prosedurlar Manipal Ali Təhsil İnstitutunun Kastuba Tibb Fakültəsinə (IAEC/KMC/69/2020) uyğun olaraq həyata keçirilmişdir. Bütün heyvan təcrübələri Heyvan Eksperimentlərinə Nəzarət və Nəzarət Komitəsinin (CPCSEA) təlimatlarına uyğun olaraq aparılmışdır. Bütün müəlliflər ARRIVE təlimatlarına əməl edirlər.
Bütün NFRCS-lərin FTIR spektrləri təhlil edilmiş və Şəkil 2A-da göstərilən xitosan spektri ilə müqayisə edilmişdir. 3437 sm-1 (OH və NH dartılması, üst-üstə düşmə), 2945 və 2897 sm-1 (CH dartılması), 1660 sm-1 (NH2 gərginliyi), 1589 sm-1 (N–H əyilməsi), 1157 sm-1 (körpü dartılması O-), 1067 sm-1 (C–O dartılması, ikinci dərəcəli hidroksil), 993 sm-1 (CO dartılması, Bo-OH) 52.53.54-də xitosanın xarakterik spektral pikləri (qeydə alınmışdır). Əlavə Cədvəl S1 xitosan (reportyor), təmiz xitosan, Cm, Ch və Cp üçün FTIR NFRCS udma spektr dəyərlərini göstərir. Bütün NFRCS-lərin (Cm, Ch və Cp) FTIR spektrləri heç bir əhəmiyyətli dəyişiklik olmadan təmiz xitozanla eyni xarakterik udma zolaqlarını göstərdi (Şəkil 2A). FTIR nəticələri NFRCS-in hazırlanmasında istifadə edilən polimerlər arasında kimyəvi və ya fiziki qarşılıqlı təsirlərin olmadığını təsdiqlədi və bu da istifadə edilən polimerlərin inert olduğunu göstərir.
Cm NFRCS, Ch NFRCS, Cp NFRCS və Cs-in in vitro xarakteristikası. (A) sıxılma altında xitozan və Cm NFRCS, Ch NFRCS və Cp NFRCS tərkiblərinin birləşmiş FTIR spektrlərini təmsil edir. (B) a) NFRCS Cm, Ch, Cp və Cg-nin bütün qanla mənimsənilmə sürəti (n = 3); Ct nümunələri daha yüksək BAR göstərdi, çünki pambıq çubuq daha yüksək udma səmərəliliyinə malikdir; b) Qan udulduqdan sonra qan. Absorbsiya olunmuş nümunənin illüstrasiyası. Test nümunəsi C-nin BCT-nin qrafik təsviri (Cp NFRCS ən yaxşı BCT-yə malik idi (15 s, n = 3)). C, D, E və G-dəki məlumatlar orta ± SD kimi göstərilmişdir və xəta zolaqları SD-ni təmsil edir, ***p < 0.0001. C, D, E və G-dəki məlumatlar orta ± SD kimi göstərilmişdir və xəta zolaqları SD-ni təmsil edir, ***p < 0.0001. Dannıe in C, D, E və G predstavlenı kimi ± standartnoe keçid, a planki pogreshnostey predstavlyayut standartnoe otklonie, ***p <0,0001. C, D, E və G-dəki məlumatlar orta ± standart sapma kimi təqdim olunur və xəta zolaqları standart sapmanı, ***p<0.0001-i təmsil edir. C、D、E 和G 中的数据显示为平均值± SD,误差线代表SD,***p < 0.0001。 C、D、E 和G 中的数据显示为平均值± SD,误差线代表SD,***p < 0.0001。 Dannıe v C, D, E və G pokazanı kimi srednee snachology ± standartnoe keçid, planki pogreshnostey predstavlyayut standartnoe keçid, ***p <0,0001. C, D, E və G-dəki məlumatlar orta ± standart sapma kimi göstərilir, xəta zolaqları standart sapmanı təmsil edir, ***p<0.0001.


Yayımlanma vaxtı: 13 Avqust 2022