Շնորհակալություն Nature.com կայք այցելելու համար: Ձեր օգտագործած դիտարկիչի տարբերակն ունի սահմանափակ CSS աջակցություն: Լավագույն փորձի համար խորհուրդ ենք տալիս օգտագործել թարմացված դիտարկիչ (կամ անջատել համատեղելիության ռեժիմը Internet Explorer-ում): Մինչդեռ, շարունակական աջակցությունն ապահովելու համար, մենք կայքը կցուցադրենք առանց ոճերի և JavaScript-ի:
Անվերահսկելի արյունահոսությունը մահվան հիմնական պատճառներից մեկն է: Արագ հեմոստազի ապահովումը ապահովում է ենթարկվողի գոյատևումը որպես առաջին բուժօգնություն մարտական ​​գործողությունների, ճանապարհատրանսպորտային պատահարների և մահացության նվազեցման գործողությունների ժամանակ: Պարզ հեմոստատիկ թաղանթագոյացնող կազմից (HFFC) ստացված նանոծակոտկեն մանրաթելերով ամրացված կոմպոզիտային կառուցվածքը (NFRCS) որպես շարունակական փուլ կարող է խթանել և ուժեղացնել հեմոստազը: NFRCS-ի մշակումը հիմնված է ճպուռի թևի նախագծման վրա: Ճպուռի թևի կառուցվածքը բաղկացած է լայնակի և երկայնական թևերից, և թևերի թաղանթները միացված են միմյանց՝ միկրոկառուցվածքի ամբողջականությունը պահպանելու համար: HFFC-ն միատարրորեն պատում է մանրաթելի մակերեսը նանոմետր հաստության թաղանթով և միացնում է պատահականորեն բաշխված բամբակի հաստությունը (Ct) (դիսպերսված փուլ)՝ ձևավորելով նանոծակոտկեն կառուցվածք: Շարունակական և ցրված փուլերի համադրությունը տասը անգամ նվազեցնում է արտադրանքի արժեքը՝ համեմատած առևտրային առումով մատչելի արտադրանքի հետ: Փոփոխված NFRCS-ները (տամպոններ կամ դաստակի ժապավեններ) կարող են օգտագործվել կենսաբժշկական բազմազան կիրառություններում: In vivo ուսումնասիրությունները եզրակացրել են, որ մշակված Cp NFRCS-ը խթանում և ուժեղացնում է մակարդման գործընթացը կիրառման վայրում: NFRCS-ը կարող է մոդուլացնել միկրոմիջավայրը և գործել բջջային մակարդակում՝ իր նանոծակոտկեն կառուցվածքի շնորհիվ, ինչը հանգեցնում է վերքի ավելի լավ ապաքինմանը կտրված վերքի մոդելում։
Մարտական, վիրահատության ընթացքում և արտակարգ իրավիճակներում անվերահսկելի արյունահոսությունը կարող է լուրջ սպառնալիք ներկայացնել վիրավորների կյանքի համար1: Այս վիճակները հանգեցնում են ծայրամասային անոթային դիմադրության ընդհանուր աճի, ինչը հանգեցնում է արյունազեղման շոկի: Վիրահատության ընթացքում և դրանից հետո արյունահոսությունը վերահսկելու համար համապատասխան միջոցառումները համարվում են կյանքի համար պոտենցիալ վտանգավոր2,3: Խոշոր անոթների վնասումը հանգեցնում է արյան զանգվածային կորստի, որի արդյունքում մարտական ​​գործողություններում մահացության մակարդակը կազմում է ≤ 50%, իսկ վիրահատության ընթացքում՝ 31%1: Արյան զանգվածային կորուստը հանգեցնում է մարմնի ծավալի նվազմանը, ինչը նվազեցնում է սրտի արտամղումը: Ընդհանուր ծայրամասային անոթային դիմադրության աճը և միկրոշրջանառության աստիճանական խանգարումը հանգեցնում են կյանքի ապահովման օրգաններում հիպօքսիայի1,4,5: Հեմոռագիկ շոկ կարող է առաջանալ, եթե վիճակը շարունակվի առանց արդյունավետ միջամտության1,4,5: Այլ բարդություններից են հիպոթերմիայի և նյութափոխանակության ացիդոզի զարգացումը, ինչպես նաև մակարդման խանգարումը, որը խոչընդոտում է մակարդման գործընթացը: Ծանր արյունազեղային շոկը կապված է մահվան ավելի բարձր ռիսկի հետ6,7,8: III աստիճանի (պրոգրեսիվ) շոկի դեպքում արյան փոխներարկումը կարևոր է հիվանդի գոյատևման համար վիրահատության ընթացքում և հետվիրահատական ​​հիվանդացության և մահացության ընթացքում: Վերոնշյալ բոլոր կյանքին սպառնացող իրավիճակները հաղթահարելու համար մենք մշակել ենք նանոփոսիկ մանրաթելային ամրացված կոմպոզիտային կառուցվածք (NFRCS), որն օգտագործում է պոլիմերի նվազագույն կոնցենտրացիա (0.5%)՝ օգտագործելով ջրում լուծվող հեմոստատիկ պոլիմերների համադրություն։
Մանրաթելային ամրացման միջոցով կարելի է մշակել մատչելի արտադրանք: Պատահականորեն դասավորված մանրաթելերը նման են ճպուռի թևի կառուցվածքին, որը հավասարակշռված է թևերի հորիզոնական և ուղղահայաց շերտերով: Թևի լայնակի և երկայնական երակները շփվում են թևի թաղանթի հետ (Նկար 1): NFRCS-ը բաղկացած է ամրացված Ct-ից՝ որպես ավելի լավ ֆիզիկական և մեխանիկական ամրությամբ կառուցվածքային համակարգ (Նկար 1): Մատչելիության և վարպետության շնորհիվ վիրաբույժները նախընտրում են օգտագործել բամբակյա թելի չափիչներ (Ct) վիրահատությունների և վիրակապերի ժամանակ: Հետևաբար, հաշվի առնելով դրա բազմաթիվ առավելությունները, այդ թվում՝ > 90% բյուրեղային ցելյուլոզը (նպաստում է հեմոստատիկ ակտիվության ուժեղացմանը), Ct-ն օգտագործվել է որպես NFRCS9,10-ի կմախքային համակարգ։ Հետևաբար, հաշվի առնելով դրա բազմաթիվ առավելությունները, այդ թվում՝ > 90% բյուրեղային ցելյուլոզը (նպաստում է հեմոստատիկ ակտիվության ուժեղացմանը), Ct-ն օգտագործվել է որպես NFRCS9,10-ի կմախքային համակարգ։ Следовательно, учитывая его многочисленные преимущества, во том числе > 90% Հետևաբար, հաշվի առնելով դրա բազմաթիվ առավելությունները, այդ թվում՝ >90% բյուրեղային ցելյուլոզ (որը մասնակցում է հեմոստատիկ ակտիվության բարձրացմանը), Ct-ն օգտագործվել է որպես NFRCS կմախքային համակարգ9,10:因此，考虑到它的多重益处，包括> 90% 的结晶纤维素（有助于增强止觼被用作NFRCS9,10 的骨架系统։因此，考虑到它的多重益处，包括> 90%Հետևաբար, հաշվի առնելով դրա բազմաթիվ առավելությունները, այդ թվում՝ ավելի քան 90% բյուրեղային ցելյուլոզը (օգնում է ուժեղացնել հեմոստատիկ ակտիվությունը), Ct-ն օգտագործվել է որպես հիմք NFRCS9,10-ի համար։Ct-ն մակերեսորեն պատված էր (նկատվել է նանոհաստ թաղանթի առաջացում) և փոխկապակցված էր հեմոստատիկ թաղանթ առաջացնող կազմի (HFFC) հետ: HFFC-ն գործում է որպես մատրիգել՝ պատահականորեն տեղադրված Ct-ն միասին պահելով: Մշակված դիզայնը լարվածությունը փոխանցում է ցրված փուլի (ամրապնդող մանրաթելերի) ներսում: Դժվար է ստանալ լավ մեխանիկական ամրությամբ նանոծակոտկեն կառուցվածքներ՝ օգտագործելով պոլիմերի նվազագույն կոնցենտրացիաներ: Բացի այդ, հեշտ չէ տարբեր կաղապարներ հարմարեցնել տարբեր կենսաբժշկական կիրառությունների համար:
Նկարում պատկերված է NFRCS-ի դիզայնի դիագրամը՝ հիմնված ճպուռի թևի կառուցվածքի վրա (A): Այս պատկերը ցույց է տալիս ճպուռի թևի կառուցվածքի համեմատական ​​անալոգիան (թևի հատվող և երկայնական երակները փոխկապակցված են) և Cp NFRCS-ի լայնական հատույթի ֆոտոմիկրոգրաֆը (B): NFRCS-ի սխեմատիկ ներկայացումը:
NFFC-ները մշակվել են՝ օգտագործելով HFFC-ն որպես շարունակական փուլ՝ վերը նշված սահմանափակումները լուծելու համար: HFFC-ն բաղկացած է տարբեր թաղանթ առաջացնող հեմոստատիկ պոլիմերներից, այդ թվում՝ քիտոզանից (որպես հիմնական հեմոստատիկ պոլիմեր)՝ մեթիլցելյուլոզով (MC), հիդրօքսիպրոպիլ մեթիլցելյուլոզով (HPMC 50 cp) և պոլիվինիլային սպիրտով (PVA) (125 կԴա)՝ որպես օժանդակ պոլիմեր, որը նպաստում է թրոմբերի առաջացմանը: Պոլիվինիլպիրոլիդին K30-ի (PVP K30) ավելացումը բարելավել է NFRCS-ի խոնավության կլանման ունակությունը: Պոլիէթիլենգլիկոլ 400-ը (PEG 400) ավելացվել է կապված պոլիմերային խառնուրդներում պոլիմերի խաչաձև կապը բարելավելու համար: Ct-ի վրա կիրառվել են HFFC-ի երեք տարբեր հեմոստատիկ կազմություններ (Cm HFFC, Ch HFFC և Cp HFFC), մասնավորապես՝ քիտոզան MC-ով (Cm), քիտոզան HPMC-ով (Ch) և քիտոզան PVA-ով (Cp): Տարբեր in vitro և in vivo բնութագրման ուսումնասիրություններ հաստատել են NFRCS-ի հեմոստատիկ և վերքերի բուժման ակտիվությունը: NFRCS-ի կողմից առաջարկվող կոմպոզիտային նյութերը կարող են օգտագործվել տարբեր տեսակի կառույցներ հարմարեցնելու համար՝ կոնկրետ կարիքները բավարարելու համար։
Բացի այդ, NFRCS-ը կարող է փոփոխվել որպես վիրակապ կամ գլանափաթեթ՝ ստորին վերջույթների և մարմնի այլ մասերի ամբողջ վնասվածքի հատվածը ծածկելու համար: Մասնավորապես մարտական ​​վերջույթների վնասվածքների դեպքում, նախագծված NFRCS-ի դիզայնը կարող է փոխվել՝ կիսաձեռքի կամ ամբողջական ոտքի (Լրացուցիչ նկար S11): NFRCS-ը կարող է վերածվել դաստակի ժապավենի՝ օգտագործելով հյուսվածքային սոսինձ, որը կարող է օգտագործվել ինքնասպանության փորձ կատարած դաստակի ծանր վնասվածքներից արյունահոսությունը դադարեցնելու համար: Մեր հիմնական նպատակն է մշակել NFRCS՝ հնարավորինս քիչ պոլիմերով, որը կարող է տրամադրվել մեծ թվով բնակչության (աղքատության գծից ցածր) և որը կարող է տեղադրվել առաջին բուժօգնության պարագաների մեջ: Պարզ, արդյունավետ և տնտեսող նախագծմամբ NFRCS-ը օգուտ է բերում տեղական համայնքներին և կարող է ունենալ համաշխարհային ազդեցություն:
Քիտոզանը (մոլեկուլային քաշը՝ 80 կԴա) և ամարանտը գնվել են Merck, Հնդկաստան ընկերությունից: Հիդրօքսիպրոպիլ մեթիլցելյուլոզ 50 Cp-ն, պոլիէթիլենգլիկոլ 400-ը և մեթիլցելյուլոզը գնվել են Loba Chemie Pvt. LLC-ից, Մումբայ: Պոլիվինիլային սպիրտ (մոլեկուլային քաշը՝ 125 կԴա) (87-90% հիդրոլիզացված) գնվել է National Chemicals-ից, Գուջարաթ: Պոլիվինիլպիրոլիդին K30-ը գնվել է Molychem-ից, Մումբայ, ստերիլ տամպոնները գնվել են Ramaraju Surgery Cotton Mills Ltd.-ից, Թամիլ Նադու, որպես կրիչ՝ Milli Q ջուր (Direct-Q3 ջրի մաքրման համակարգ, Merck, Հնդկաստան):
NFRCS-ը մշակվել է լիոֆիլիզացիայի մեթոդով11,12: Բոլոր HFFC կազմությունները (աղյուսակ 1) պատրաստվել են մեխանիկական խառնիչի միջոցով: Պատրաստեք քիտոզանի 0.5% լուծույթ՝ օգտագործելով 1% քացախաթթու ջրում՝ անընդհատ խառնելով 800 պտ/րոպե արագությամբ մեխանիկական խառնիչի վրա: Աղյուսակ 1-ում նշված բեռնված պոլիմերի ճշգրիտ քաշը ավելացվել է քիտոզանի լուծույթին և խառնվել մինչև թափանցիկ պոլիմերային լուծույթ ստանալը: Արդյունքում ստացված խառնուրդին ավելացվել են PVP K30 և PEG 400՝ աղյուսակ 1-ում նշված քանակությամբ, և խառնվել է մինչև թափանցիկ մածուցիկ պոլիմերային լուծույթ ստանալը: Արդյունքում ստացված պոլիմերային լուծույթի լոգանքը ուլտրաձայնային մշակման է ենթարկվել 60 րոպե՝ պոլիմերային խառնուրդից թակարդված օդային պղպջակները հեռացնելու համար: Ինչպես ցույց է տրված լրացուցիչ նկար S1(b)-ում, Ct-ն հավասարաչափ բաշխվել է 6-փոսանոց ափսեի (ձուլվածքի) յուրաքանչյուր փոսում, որը լրացվել է 5 մլ HFFC-ով:
Վեց խոռոչից բաղկացած թիթեղը ուլտրաձայնային եղանակով մշակվել է 60 րոպե՝ Ct ցանցում HFFC-ի միատարր թրջման և բաշխման հասնելու համար: Այնուհետև վեց խոռոչից բաղկացած թիթեղը սառեցվել է -20°C ջերմաստիճանում 8-12 ժամ: Սառեցված թիթեղները լիոֆիլացվել են 48 ժամ՝ NFRCS-ի տարբեր բանաձևեր ստանալու համար: Նույն ընթացակարգը կիրառվում է տարբեր ձևերի և կառուցվածքների, ինչպիսիք են տամպոնները կամ գլանաձև տամպոնները, կամ տարբեր կիրառությունների համար նախատեսված ցանկացած այլ ձևի, արտադրության համար:
Ճշգրիտ կշռված քիտոզանը (80 կԴա) (3%) լուծվում է 1% քացախաթթվի մեջ՝ օգտագործելով մագնիսական խառնիչ։ Ստացված քիտոզանի լուծույթին ավելացվում է 1% PEG 400 և խառնվում 30 րոպե։ Ստացված լուծույթը լցվում է քառակուսի կամ ուղղանկյուն տարայի մեջ և սառեցվում -80°C ջերմաստիճանում 12 ժամ։ Սառեցված նմուշները լիոֆիլացվում են 48 ժամ՝ ծակոտկեն Cs13 ստանալու համար։
Մշակված NFRCS-ը ենթարկվել է փորձերի՝ օգտագործելով Ֆուրիեի ձևափոխության ինֆրակարմիր սպեկտրոսկոպիա (FTIR) (Shimadzu 8400 s FTIR, Տոկիո, Ճապոնիա)՝ խիտոզանի քիմիական համատեղելիությունը այլ պոլիմերների հետ հաստատելու համար14,15: Բոլոր փորձարկված նմուշների FTIR սպեկտրները (սպեկտրալ միջակայքի լայնությունը 400-ից մինչև 4000 սմ-1) ստացվել են 32 սկանավորում կատարելով:
Բոլոր բանաձևերի համար արյան մեջ կլանման արագությունը (BAR) գնահատվել է Չենի և այլոց կողմից նկարագրված մեթոդով՝ 16՝ աննշան փոփոխություններով: Բոլոր կազմությունների մշակված NFRK-ները չորացվել են վակուումային վառարանում 105°C ջերմաստիճանում՝ մնացորդային լուծիչը հեռացնելու համար: 30 մգ NFRCS-ը (նմուշի սկզբնական քաշը՝ W0) և 30 մգ Ct-ն (դրական վերահսկողություն) տեղադրվել են առանձին ամանների մեջ, որոնք պարունակում էին 3.8% նատրիումի ցիտրատի նախնական խառնուրդ: Նախապես որոշված ​​ժամանակահատվածներում, այսինքն՝ 5, 10, 20, 30, 40 և 60 վայրկյան, NFRCS-ները հեռացվել են, և դրանց մակերեսները մաքրվել են չկլանված արյունից՝ նմուշները տեղադրելով Ct-ի վրա 30 վայրկյան: Յուրաքանչյուր ժամանակային կետում հաշվի է առնվել NFRCS 16-ի կողմից կլանված արյան վերջնական քաշը (W1): Հաշվարկել BAR տոկոսը՝ օգտագործելով հետևյալ բանաձևը.
Արյան մակարդման ժամանակը (BCT) որոշվել է Վանգի և այլոց կողմից ներկայացվածի համաձայն։17։ NFRCS-ի առկայությամբ ամբողջական արյան (առնետի արյուն, որը նախապես խառնված է 3.8% նատրիումի ցիտրատի հետ) մակարդման համար անհրաժեշտ ժամանակը հաշվարկվել է որպես փորձարկվող նմուշի BCT։ NFRCS-ի տարբեր բաղադրիչները (30 մգ) տեղադրվել են 10 մլ պտուտակավոր կափարիչով սրվակների մեջ և ինկուբացվել 37°C ջերմաստիճանում։ Արյունը (0.5 մլ) ավելացվել է սրվակի մեջ և ավելացվել է 0.3 մլ 0.2 Մ CaCl2՝ արյան մակարդումը ակտիվացնելու համար։ Վերջապես, սրվակը շրջել յուրաքանչյուր 15 վայրկյանը մեկ (մինչև 180°) մինչև պինդ մակարդուկի առաջացումը։ Նմուշի BCT-ն գնահատվում է սրվակների շրջումների քանակով17,18։ BCT-ի հիման վրա, հետագա բնութագրման ուսումնասիրությունների համար ընտրվել են NFRCS Cm, Ch և Cp երկու օպտիմալ կազմություններ։
Ch NFRCS և Cp NFRCS կազմերի BCT-ն որոշվել է Լիի և այլոց կողմից նկարագրված մեթոդը կիրառելով: 19: Առանձին Պետրիի ամանների մեջ (37°C) տեղադրեք 15 x 15 մմ2 Ch NFRCS, Cp NFRCS և Cs (դրական վերահսկողություն) արյունը: Արյան մակարդման գործընթացը սկսելու համար 3.8% նատրիումի ցիտրատ պարունակող արյունը խառնվել է 0.2 Մ CaCl2-ի հետ 10:1 ծավալային հարաբերակցությամբ: Նմուշի մակերեսին քսվել է 20 մկլ 0.2 Մ CaCl2 առնետի արյան խառնուրդ և տեղադրվել է դատարկ Պետրիի ամանի մեջ: Վերահսկիչ նյութը դատարկ Պետրիի ամանների մեջ լցված արյունն էր՝ առանց Ct-ի: 0, 3 և 5 րոպե ֆիքսված ընդմիջումներով կանգնեցրեք մակարդումը՝ ամանը պարունակող նմուշին ավելացնելով 10 մլ ապաիոնացված (DI) ջուր՝ առանց մակարդուկը խանգարելու: Չմակարդված էրիթրոցիտները (էրիթրոցիտները) ենթարկվում են հեմոլիզի ապաիոնացված ջրի առկայության դեպքում և արտազատում են հեմոգլոբին: Հեմոգլոբինը տարբեր ժամանակային կետերում (HA(t)) չափվել է 540 նմ-ում (λmax հեմոգլոբին)՝ օգտագործելով UV-Vis սպեկտրոֆոտոմետր: Որպես հղման ստանդարտ ընդունվել է հեմոգլոբինի (AH(0)) բացարձակ կլանումը 0 րոպեում 20 մկլ արյան մեջ 10 մլ ապաիոնացված ջրի մեջ: Մակարդված արյան հարաբերական հեմոգլոբինի կլանումը (RHA) հաշվարկվել է HA(t)/HA(0) հարաբերակցությունից՝ օգտագործելով արյան նույն խմբաքանակը:
Հյուսվածքային վերլուծիչի (Texture Pro CT V1.3 Build 15, Բրուքֆիլդ, ԱՄՆ) միջոցով որոշվել են NFRK-ի կպչունության հատկությունները վնասված հյուսվածքին: Բաց հատակով գլանաձև ամանը սեղմվել է խոզի մաշկի ներքին մասին (առանց ճարպի շերտի): Նմուշները (Ch NFRCS և Cp NFRCS) կանուլայի միջոցով տեղադրվել են գլանաձև կաղապարների մեջ՝ խոզի մաշկին կպչունություն ստեղծելու համար: Սենյակային ջերմաստիճանում (RT) (25°C) 3 րոպե ինկուբացիայից հետո NFRCS-ի կպչունության ամրությունը գրանցվել է 0.5 մմ/վրկ հաստատուն արագությամբ:
Վիրաբուժական կնիքների հիմնական առանձնահատկությունը արյան մակարդելիության բարձրացումն է՝ միաժամանակ նվազեցնելով արյան կորուստը: NFRCS-ում կորուստներից զուրկ մակարդումը գնահատվել է նախկինում հրապարակված մեթոդով՝ աննշան փոփոխություններով 19: Պատրաստեք միկրոցենտրիֆուգային խողովակ (2 մլ) (ներքին տրամագիծը՝ 10 մմ)՝ ցենտրիֆուգային խողովակի մի կողմում 8 × 5 մմ2 անցքով (որը ներկայացնում է բաց վերք): NFRCS-ն օգտագործվում է բացվածքը փակելու համար, իսկ ժապավենը՝ արտաքին եզրերը կնքելու համար: 3.8% նատրիումի ցիտրատի նախնական խառնուրդ պարունակող միկրոցենտրիֆուգային խողովակին ավելացրեք 20 մկլ 0.2 Մ CaCl2: 10 րոպե անց միկրոցենտրիֆուգային խողովակները հանվեցին ամաններից, և որոշվեց ամանների զանգվածի աճը՝ NFRK-ից արյան արտահոսքի պատճառով (n = 3): Արյան կորուստը՝ Ch NFRCS և Cp NFRCS, համեմատվել են Cs-ի հետ:
NFRCS-ի խոնավ ամբողջականությունը որոշվել է Միշրայի և Չաուդհարիի21 կողմից նկարագրված մեթոդի հիման վրա՝ աննշան փոփոխություններով: Տեղադրեք NFRCS-ը 100 մլ Էրլենմայերի սրվակի մեջ 50 մլ ջրի հետ և պտտեք 60 վայրկյան՝ առանց վերին շերտ ձևավորելու: Տեսողական զննում և նմուշների ֆիզիկական ամբողջականության դասակարգում՝ հավաքման հիման վրա:
HFFC-ի և Ct-ի կապի ուժգնությունն ուսումնասիրվել է նախկինում հրապարակված մեթոդներով՝ աննշան փոփոխություններով: Մակերեսային ծածկույթի ամբողջականությունը գնահատվել է NFRK-ը ակուստիկ ալիքների (արտաքին խթան) ենթարկելով milliQ ջրի (Ct) առկայության դեպքում: Մշակված NFRCS Ch NFRCS-ը և Cp NFRCS-ը տեղադրվել են ջրով լցված բաժակի մեջ և ենթարկվել են ուլտրաձայնային մշակման համապատասխանաբար 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10 և 30 րոպե: Չորացնելուց հետո NFRCS-ի սկզբնական և վերջնական քաշերի միջև տոկոսային տարբերությունն օգտագործվել է նյութի կորստի տոկոսային տոկոսը (HFFC) հաշվարկելու համար: In vitro BCT-ն լրացուցիչ հաստատել է մակերևութային նյութերի կապի ուժգնությունը կամ կորուստը: HFFC-ի և Ct-ի կապի արդյունավետությունը ապահովում է արյան մակարդում և առաձգական ծածկույթ Ct22-ի մակերեսին:
Մշակված NFRCS-ի միատարրությունը որոշվել է NFRCS-ի պատահականորեն ընտրված ընդհանուր վայրերից վերցված նմուշների (30 մգ) BCT-ի միջոցով: Հետևեք նախկինում նշված BCT ընթացակարգին՝ NFRCS-ի համապատասխանությունը որոշելու համար: Բոլոր հինգ նմուշների միջև մոտիկությունը ապահովում է միատարր մակերեսային ծածկույթ և HFFC նստեցում Ct ցանցում:
Արյան հետ շփման մակերեսը (NBCA) որոշվել է նախկինում նկարագրվածի պես՝ որոշ փոփոխություններով։ Արյունը մակարդվում է՝ Ct, Ch NFRCS, Cp NFRCS և Cs երկու մակերեսների միջև 20 մկլ արյուն սեղմելով։ 1 ժամ անց ստենտի երկու մասերը առանձնացվել են և ձեռքով չափվել է թրոմբի մակերեսը։ Երեք կրկնությունների միջին արժեքը համարվել է NBCA NFRCS19։
Դինամիկ գոլորշու կլանման (DVS) վերլուծությունը կիրառվել է NFRCS-ի արդյունավետությունը գնահատելու համար՝ արտաքին միջավայրից կամ մակարդումը սկսելու համար պատասխանատու վնասվածքի տեղամասից ջուրը կլանելու համար: DVS-ը գրավիմետրիկորեն գնահատում կամ գրանցում է նմուշում գոլորշու կլանումը և կորուստը՝ օգտագործելով գերզգայուն կշեռք՝ ±0.1 մկգ զանգվածային լուծաչափով: Մասնակի գոլորշու ճնշումը (հարաբերական խոնավությունը) ստեղծվում է նմուշի շուրջ էլեկտրոնային զանգվածային հոսքի կարգավորիչի կողմից՝ հագեցած և չոր կրող գազերը խառնելով: Եվրոպական դեղագիտության ուղեցույցների համաձայն, նմուշների կողմից խոնավության կլանման տոկոսի հիման վրա, նմուշները դասակարգվել են 4 կատեգորիայի (0–0.012% w/w− ոչ հիգրոսկոպիկ, 0.2–2% w/w՝ թեթևակի հիգրոսկոպիկ, 2–15%՝ միջին հիգրոսկոպիկ և > 15%՝ շատ հիգրոսկոպիկ)23: Եվրոպական դեղագիտության ուղեցույցների համաձայն, նմուշների կողմից խոնավության կլանման տոկոսի հիման վրա, նմուշները դասակարգվել են 4 կատեգորիայի (0–0.012% w/w− ոչ հիգրոսկոպիկ, 0.2–2% w/w՝ թեթևակի հիգրոսկոպիկ, 2–15%՝ միջին հիգրոսկոպիկ և > 15%՝ շատ հիգրոսկոպիկ)23:Եվրոպական դեղագիտության առաջարկություններին համապատասխան, նմուշների կողմից խոնավության կլանման տոկոսից կախված, նմուշները բաժանվել են 4 կատեգորիայի (0–0.012% w/w՝ ոչ հիգրոսկոպիկ, 0.2–2% w/w՝ թեթևակի հիգրոսկոպիկ, 2–15%):% միջիննո գիգրոսկոպիական и > 15% очень гигроскопичен)23. % չափավոր հիգրոսկոպիկ և > 15% շատ հիգրոսկոպիկ)23.根据欧洲药典指南，根据样品吸收水分的百分比，样品分为4 类（0-0.012% w/w-.非吸湿性、0,2-2% w/w 轻微吸湿性、2-15% 适度吸湿，> 15% 非常吸湿）23。根据 欧洲 药典 指南 ， 根据 吸收 水分 的 百分比 样品 分为 分为 分为 分为 爆0000%: W/w- 吸湿 性 、 、 、 、 0.2-2% W/w 轻微 、 2-15% 适度 吸湿 ，> 15% 非常吸湿3）Եվրոպական դեղագիտության առաջարկություններին համապատասխան, նմուշները բաժանվում են 4 դասի՝ կախված նմուշի կողմից կլանված խոնավության տոկոսից (0-0.012% ըստ քաշի՝ ոչ հիգրոսկոպիկ, 0.2-2% ըստ քաշի՝ թեթևակի հիգրոսկոպիկ, 2-15% ըստ քաշի):% միջիննո գիգրոսկոպիական, > 15 % очень գիգրոսկոպիական) 23. % չափավոր հիգրոսկոպիկ, > 15% շատ հիգրոսկոպիկ) 23.NFCS X NFCS և TsN NFCS-ի հիգրոսկոպիկ արդյունավետությունը որոշվել է DVS TA TGA Q5000 SA վերլուծիչի վրա: Այս գործընթացի ընթացքում ստացվել են աշխատանքի ժամանակը, հարաբերական խոնավությունը (RH) և իրական ժամանակում նմուշի քաշը 25°C24 ջերմաստիճանում: Խոնավության պարունակությունը հաշվարկվում է NFRCS զանգվածի ճշգրիտ վերլուծությամբ՝ օգտագործելով հետևյալ հավասարումը.
MC-ն NFRCS խոնավությունն է։ m1-ը՝ ոչ ստերոիդային հակաբորբոքային դեղամիջոցների չոր քաշը։ m2-ը՝ տվյալ հարաբերական խոնավության դեպքում NFRCS իրական ժամանակի զանգվածը։
Ընդհանուր մակերեսը գնահատվել է հեղուկ ազոտով ազոտի ադսորբցիայի փորձի միջոցով՝ նմուշները 25°C ջերմաստիճանում 10 ժամ դատարկելուց հետո (< 7 × 10–3 Տորր): Ընդհանուր մակերեսը գնահատվել է հեղուկ ազոտով ազոտի ադսորբցիայի փորձի միջոցով՝ նմուշները 25°C ջերմաստիճանում 10 ժամ դատարկելուց հետո (< 7 × 10–3 Տորր): Общая площадь поверхности գնահատвалась с помощью эксперимента по адсорбции азота жидким азотом после опорожнения образцов при 25 °С течение 10 ч (< 7 × 10–3 Тор). Ընդհանուր մակերեսը գնահատվել է հեղուկ ազոտով ազոտի ադսորբցիայի փորձի միջոցով՝ նմուշները 25°C ջերմաստիճանում 10 ժամ դատարկելուց հետո (< 7 × 10–3 Տորր):在25°C 清空样品10 小时（< 7 × 10-3 Torr）后，使用液氮的氮吸附实验估计总觡+25°C Համառոտ գնահատականները գնահատվում են ինչպես փորձարկումների արդյունքում: Ընդհանուր մակերեսը գնահատվել է հեղուկ ազոտով ազոտի ադսորբցիայի փորձերի միջոցով՝ նմուշները 25°C ջերմաստիճանում (< 7 x 10-3 տոր) 10 ժամ դատարկելուց հետո։Ընդհանուր մակերեսը, ծակոտիների ծավալը և NFRCS ծակոտիների չափը որոշվել են NOVA 1000e (Ավստրիա) ընկերության Quantachrome սարքով՝ օգտագործելով RS 232 ծրագիրը։
Պատրաստեք 5% էրիթրոցիտներ (ֆիզիոլոգիական լուծույթը որպես նոսրացուցիչ) ամբողջական արյունից: Այնուհետև տեղափոխեք HFFC-ի ալիքվոտ (0.25 մլ) 96 փոսիկավոր ափսեի մեջ և 5% էրիթրոցիտների զանգված (0.1 մլ): Խառնուրդը ինկուբացրեք 37°C ջերմաստիճանում 40 րոպե: Կարմիր արյան բջիջների և շիճուկի խառնուրդը համարվել է դրական վերահսկողություն, իսկ ֆիզիոլոգիական լուծույթի և կարմիր արյան բջիջների խառնուրդը՝ բացասական վերահսկողություն: Հեմագլյուտինացիան որոշվել է Ստաջիցկիի սանդղակով: Առաջարկվող սանդղակներն են՝ + + + + խիտ հատիկավոր ագրեգատներ; + + + հարթ ներքևի բարձիկներ կոր եզրերով; + + հարթ ներքևի բարձիկներ պատռված եզրերով; + նեղ կարմիր օղակներ հարթ բարձիկների եզրերի շուրջ; – (բացասական) առանձին կարմիր կոճակ 12 ստորին փոսիկի կենտրոնում:
NFRCS-ի հեմոհամատեղելիությունն ուսումնասիրվել է Միջազգային ստանդարտացման կազմակերպության (ISO) մեթոդի համաձայն (ISO10993-4, 1999)26,27: Սինգհի և այլոց կողմից նկարագրված գրավիմետրիկ մեթոդը: Փոքր փոփոխություններ են կատարվել NFRCS-ի առկայությամբ կամ դրա մակերեսին թրոմբների առաջացումը գնահատելու համար: 500 մգ Cs, Ch NFRCS և Cp NFRCS ինկուբացվել է ֆոսֆատային բուֆերային աղաջրի (PBS) մեջ 24 ժամ 37°C ջերմաստիճանում: 24 ժամ անց PBS-ը հեռացվել է, և NFRCS-ը մշակվել է 2 մլ արյունով, որը պարունակում է 3.8% նատրիումի ցիտրատ: NFRCS-ի մակերեսին ինկուբացված նմուշներին ավելացվել է 0.04 մլ 0.1 Մ CaCl2: 45 րոպե անց մակարդումը դադարեցնելու համար ավելացվել է 5 մլ թորած ջուր: NFRK-ի մակերեսին մակարդված արյունը մշակվել է 36-38% ֆորմալդեհիդի լուծույթով: Ֆորմալդեհիդով ամրացված թրոմբները չորացվել և կշռվել են: Թրոմբոզի տոկոսը գնահատվել է արյուն չպարունակող բաժակի և նմուշի (բացասական վերահսկողություն) և արյունով բաժակի (դրական վերահսկողություն) քաշը հաշվարկելով։
Որպես նախնական հաստատում, նմուշները վիզուալիզացվել են օպտիկական մանրադիտակով՝ հասկանալու համար HFFC մակերեսային ծածկույթի, Ct փոխկապակցվածության և Ct ցանցի ծակոտիներ առաջացնելու ունակությունը: NFRCS-ից Ch և Cp բարակ հատվածները կտրվել են դանակի շեղբով: Արդյունքում ստացված հատվածը տեղադրվել է ապակե սահիկի վրա, ծածկվել է ծածկոցով, և եզրերը ամրացվել են սոսինձով: Պատրաստված սահիկները դիտվել են օպտիկական մանրադիտակով, և լուսանկարվել են տարբեր մեծացումներով:
Պոլիմերային նստեցումը Ct ցանցերում վիզուալիզացվել է Ռայսի և այլոց կողմից նկարագրված մեթոդի հիման վրա՝ օգտագործելով ֆլուորեսցենտային մանրադիտակ։29 Բանաձևի համար օգտագործված HFFC կազմը խառնվել է ֆլուորեսցենտ ներկանյութի (ամարանտ) հետ, և NFRCS (Ch և Cp)-ն պատրաստվել է նախկինում նշված մեթոդով։ Բանաձևի համար օգտագործված HFFC կազմը խառնվել է ֆլուորեսցենտ ներկանյութի (ամարանտ) հետ, և NFRCS (Ch և Cp)-ն պատրաստվել է նախկինում նշված մեթոդով։Ձևակերպման համար օգտագործված HFFC կազմը խառնվել է ֆլուորեսցենտ ներկանյութի (ամարանտ) հետ, և NFRCS (Ch և Cp) ստացվել է նախկինում նշված մեթոդի համաձայն։将用于配方的HFFC 组合物与荧光染料（苋菜）混合，并按照前面提到的戶光染料（苋菜）混合，并按照前面提到的戶方Cp）.将用于配方的HFFC 组合物与荧光染料（苋菜）混合，并按照前面提到的戶光染料（苋菜）混合，并按照前面提到的戶方Cp）.Ինչպես նշվեց նախկինում, բանաձևում օգտագործված HFFC կազմը խառնվել է ֆլուորեսցենտ ներկանյութի (ամարանտ) հետ և ստացել է NFRCS (Ch և Cp):Ստացված նմուշներից կտրվեցին NFRK-ի բարակ հատվածներ, տեղադրվեցին ապակե սլայդների վրա և ծածկվեցին ծածկող թաղանթներով: Դիտարկեք պատրաստված սլայդները ֆլուորեսցենտային մանրադիտակի տակ՝ օգտագործելով կանաչ ֆիլտր (310-380 նմ): Պատկերները ստացվեցին 4x մեծացմամբ՝ Ct կապերը և Ct ցանցում պոլիմերի ավելցուկային նստվածքը հասկանալու համար:
NFRCS Ch-ի և Cp-ի մակերևութային տեղագրությունը որոշվել է ատոմային ուժային մանրադիտակի (AFM) միջոցով՝ գերսուր TESP կոնսոլով, հարվածային ռեժիմով՝ 42 Ն/մ, 320 կՀց, ROC 2-5 նմ, Բրուքեր, Թայվան: Մակերևույթի կոպտությունը որոշվել է միջին քառակուսի արմատի (RMS) միջոցով՝ օգտագործելով ծրագրակազմ (Scanning Probe Image Processor): NFRCS-ի տարբեր դիրքեր արտացոլվել են 3D պատկերների վրա՝ մակերևույթի միատարրությունը ստուգելու համար: Տրված տարածքի համար միավորի ստանդարտ շեղումը սահմանվում է որպես մակերևույթի կոպտություն: RMS հավասարումն օգտագործվել է NFRCS31-ի մակերևույթի կոպտությունը քանակականացնելու համար:
FESEM-ի վրա հիմնված ուսումնասիրությունները կատարվել են FESEM, SU8000, HI-0876-0003, Hitachi, Tokyo, օգտագործելով Ch NFRCS-ի և Cp NFRCS-ի մակերևույթի ձևաբանությունը հասկանալու համար, որը ցույց է տվել ավելի լավ BCT, քան Cm NFRCS-ը: FESEM ուսումնասիրությունը կատարվել է Չժաոյի և այլոց կողմից նկարագրված մեթոդի համաձայն՝ 32՝ աննշան փոփոխություններով: NFRCS-ի 20-30 մգ Ch NFRCS-ը և Cp NFRCS-ը նախապես խառնվել են առնետի արյան հետ նախապես խառնված 20 մկլ 3.8% նատրիումի ցիտրատի հետ: Արյան մակարդումը սկսելու համար արյան մեջ մշակված նմուշներին ավելացվել է 20 մկլ 0.2 Մ CaCl2, և նմուշները ինկուբացվել են սենյակային ջերմաստիճանում 10 րոպե: Բացի այդ, ավելորդ էրիթրոցիտները հեռացվել են NFRCS-ի մակերևույթից՝ աղաջրով լվանալով:
Հետագա նմուշները մշակվել են 0.1% գլուտարալդեհիդով, ապա չորացվել են տաք օդային վառարանում 37°C ջերմաստիճանում՝ խոնավությունը հեռացնելու համար: Չորացրած նմուշները պատվել և վերլուծվել են 32: Վերլուծության ընթացքում ստացված այլ պատկերներն էին առանձին բամբակյա մանրաթելերի մակերեսին թրոմբի առաջացումը, Ct-ի միջև պոլիմերի նստեցումը, էրիթրոցիտների ձևաբանությունը (ձևը), թրոմբի ամբողջականությունը և էրիթրոցիտների ձևաբանությունը NFRCS-ի առկայության դեպքում: Արյան հետ ինկուբացված չմշակված NFRCS տարածքները և Ch և Cp մշակված NFRCS տարածքները սկանավորվել են տարրական իոնների (նատրիում, կալիում, ազոտ, կալցիում, մագնեզիում, ցինկ, պղինձ և սելեն) առկայության համար 33: Համեմատեք մշակված և չմշակված նմուշների միջև տարրական իոնների տոկոսները՝ թրոմբի առաջացման ընթացքում տարրական իոնների կուտակումը և թրոմբի միատարրությունը հասկանալու համար:
Cp HFFC մակերևութային ծածկույթի հաստությունը Ct մակերևույթի վրա որոշվել է FESEM մեթոդով: Cp NFRCS-ի լայնական կտրվածքները կտրվել են շրջանակից և ծածկվել են փոշիացմամբ: Արդյունքում ստացված փոշիացմամբ ծածկույթի նմուշները դիտարկվել են FESEM մեթոդով, և մակերեսային ծածկույթի հաստությունը չափվել է 34, 35, 36:
Ռենտգենյան միկրո-ՀՏ-ն ապահովում է բարձր թույլտվությամբ եռաչափ ոչ դեստրուկտիվ պատկերացում և թույլ է տալիս ուսումնասիրել NFRK-ի ներքին կառուցվածքային դասավորությունը: Միկրո-ՀՏ-ն օգտագործում է նմուշի միջով անցնող ռենտգենյան փունջ՝ նմուշում ռենտգենյան ճառագայթների տեղային գծային մարման գործակիցը գրանցելու համար, ինչը օգնում է ստանալ ձևաբանական տեղեկատվություն: Cp NFRCS-ում և արյունով մշակված Cp NFRCS-ում Ct-ի ներքին դիրքը ուսումնասիրվել է միկրո-ՀՏ-ով՝ NFRCS37,38,39-ի առկայության դեպքում կլանման արդյունավետությունը և արյան մակարդելիությունը հասկանալու համար: Արյան մշակված և չմշակված Cp NFRCS նմուշների եռաչափ կառուցվածքները վերակառուցվել են միկրո-ՀՏ-ի միջոցով (V|tome|x S240, Ֆինիքս, Գերմանիա): VG STUDIO-MAX ծրագրային ապահովման 2.2 տարբերակի միջոցով տարբեր անկյուններից (իդեալականում՝ 360° ծածկույթ) մի քանի ռենտգենյան պատկերներ են արվել՝ NFRCS-ի համար եռաչափ պատկերներ մշակելու համար: Հավաքված պրոյեկցիոն տվյալները վերակառուցվել են եռաչափ ծավալային պատկերների՝ օգտագործելով համապատասխան պարզ 3D ScanIP Academic ծրագիրը:
Բացի այդ, մակարդուկի բաշխումը հասկանալու համար, արյան մակարդումը սկսելու համար NFRCS-ին ավելացվել է 20 մկլ նախապես խառնված ցիտրատացված արյուն և 20 մկլ 0.2 Մ CaCl2: Պատրաստված նմուշները թողնվել են կարծրանալու: NFRK մակերեսը մշակվել է 0.5% գլուտարալդեհիդով և չորացվել է տաք օդային վառարանում 30-40°C ջերմաստիճանում 30 րոպե: NFRCS-ի վրա առաջացած արյան մակարդուկը սկանավորվել, վերակառուցվել և պատկերվել է արյան մակարդուկի եռաչափ պատկերը:
Հակաբակտերիալ փորձարկումները կատարվել են Cp NFRCS-ի վրա (որն ամենալավն է համեմատած Ch NFRCS-ի հետ)՝ օգտագործելով նախկինում նկարագրված մեթոդը՝ աննշան փոփոխություններով: Cp NFRCS-ի և Cp HFFC-ի հակաբակտերիալ ակտիվությունը որոշվել է երեք տարբեր փորձարկվող միկրոօրգանիզմների [S.aureus (գրամ-դրական մանրէներ), E.coli (գրամ-բացասական մանրէներ) և սպիտակ Candida (C.albicans)] միջոցով, որոնք աճում են ագարի վրա Պետրիի թասերի մեջ՝ ինկուբատորում: Ագարային միջավայրի վրա միատարր կերպով ներարկել 50 մլ նոսրացված բակտերիալ կուլտուրայի սուսպենզիա՝ 105-106 CFU ml-1 կոնցենտրացիայով: Լցնել միջավայրը Պետրիի թասի մեջ և թողնել, որ այն պնդանա: Ագարային թիթեղի մակերեսին պատրաստվել են անցքեր՝ HFFC-ով լցնելու համար (3 անցք HFFC-ի համար և 1՝ բացասական վերահսկողության համար): 3 անցքին ավելացնել 200 մկլ HFFC և 4-րդ անցքին 200 մկլ pH 7.4 PBS: Պետրիի ամանի մյուս կողմում կարծրացված ագարի վրա տեղադրեք 12 մմ Cp NFRCS սկավառակ և խոնավացրեք այն PBS-ով (pH 7.4): Ցիպրոֆլոքսացինի, ամպիցիլինի և ֆլուկոնազոլի հաբերը համարվում են Staphylococcus aureus-ի, Escherichia coli-ի և Candida albicans-ի համար հղման ստանդարտներ: Ձեռքով չափեք արգելակման գոտին և ստացեք արգելակման գոտու թվային պատկեր:
Հաստատության էթիկական հաստատումից հետո ուսումնասիրությունը անցկացվել է Կաստուրբա բժշկական կրթության և հետազոտությունների քոլեջում, որը գտնվում է Մանիպալում, Կառնատակա, հարավային Հնդկաստանում: In vitro TEG փորձարարական արձանագրությունը վերանայվել և հաստատվել է Կաստուրբա բժշկական քոլեջի ինստիտուցիոնալ էթիկայի կոմիտեի կողմից, Մանիպալում, Կառնատակա (IEC: 674/2020): Մասնակիցները հավաքագրվել են հիվանդանոցի արյան բանկի կամավոր արյան դոնորներից (18-ից 55 տարեկան): Բացի այդ, կամավորներից ստացվել է տեղեկացված համաձայնության ձև՝ արյան նմուշներ հավաքելու համար: Բնիկ TEG-ն (N-TEG) ​​օգտագործվել է Cp HFFC բանաձևի ազդեցությունը նատրիումի ցիտրատի հետ նախապես խառնված ամբողջական արյան վրա ուսումնասիրելու համար: N-TEG-ն լայնորեն ճանաչված է բուժօգնության կետում վերակենդանացման մեջ իր դերի համար, ինչը խնդիրներ է ստեղծում բժիշկների համար՝ արդյունքների կլինիկորեն նշանակալի ուշացման հնարավորության պատճառով (ռուտինային մակարդման թեստեր): N-TEG վերլուծությունը կատարվել է ամբողջական արյան միջոցով: Բոլոր մասնակիցներից ստացվել է տեղեկացված համաձայնություն և մանրամասն բժշկական պատմություն: Ուսումնասիրությանը չեն ներառվել մասնակիցներ, որոնք ունեցել են հեմոստատիկ կամ թրոմբոտիկ բարդություններ, ինչպիսիք են հղիությունը/հետծննդաբերական շրջանը կամ լյարդի հիվանդությունը: Հետազոտությունից բացառվել են նաև այն անձինք, որոնք ընդունում էին մակարդման կասկադի վրա ազդող դեղամիջոցներ: Բոլոր մասնակիցների վրա ստանդարտ ընթացակարգերի համաձայն կատարվել են հիմնական լաբորատոր թեստեր (հեմոգլոբին, պրոթրոմբինի ժամանակ, ակտիվացված թրոմբոպլաստին և թրոմբոցիտների քանակ): N-TEG-ն որոշում է արյան մակարդուկի մածուցիկ-առաձգականությունը, մակարդուկի սկզբնական կառուցվածքը, մասնիկների փոխազդեցությունը, մակարդուկի ամրացումը և մակարդուկի լիզիսը: N-TEG վերլուծությունը տրամադրում է գրաֆիկական և թվային տվյալներ մի քանի բջջային տարրերի և պլազմայի կոլեկտիվ ազդեցությունների վերաբերյալ: N-TEG վերլուծությունը կատարվել է Cp HFFC-ի երկու տարբեր ծավալների վրա (10 մկլ և 50 մկլ): Արդյունքում, 1 մլ ամբողջական արյուն կիտրոնաթթուով ավելացվել է 10 մկլ Cp HFFC-ի: 20 մկլ 0.2 Մ CaCl2 պարունակող TEG ամանին ավելացվել է 1 մլ (Cp HFFC + ցիտրատացված արյուն), 340 մկլ խառը արյուն: Այնուհետև, TEG ամանները տեղադրվեցին TEG® 5000, US սարքի մեջ՝ արյան նմուշների 30%-ը չափելու համար՝ R, K, ալֆա անկյուն, MA, G, CI, TPI, EPL, LY՝ Cp HFFC41-ի առկայությամբ։
In vivo ուսումնասիրության արձանագրությունը վերանայվել և հաստատվել է Կենդանիների ինստիտուցիոնալ էթիկայի կոմիտեի (IAEC) կողմից, Կաստուրբայի բժշկական դպրոցի, Մանիպալի բարձրագույն կրթության ինստիտուտի կողմից, Մանիպալ (IAEC/KMC/69/2020): Բոլոր կենդանիների վրա կատարված փորձերը կատարվել են Կենդանիների վրա կատարված փորձերի վերահսկման և վերահսկողության կոմիտեի (CPCSEA) առաջարկություններին համապատասխան: Բոլոր in vivo NFRCS ուսումնասիրությունները (2 × 2 սմ2) կատարվել են էգ Wistar առնետների վրա (քաշը՝ 200-ից 250 գ): Բոլոր կենդանիները ակլիմատիզացվել են 24-26°C ջերմաստիճանում, կենդանիները ազատորեն օգտվել են ստանդարտ սննդից և ջրից՝ ըստ ցանկության: Բոլոր կենդանիները պատահականորեն բաժանվել են տարբեր խմբերի, յուրաքանչյուր խումբ բաղկացած է եղել երեք կենդանիներից: Բոլոր ուսումնասիրությունները կատարվել են Կենդանիների ուսումնասիրություններ. In Vivo փորձերի զեկույց 43-ի համաձայն: Հետազոտությունից առաջ կենդանիներին անզգայացրել են ներորովայնային (ներմկանային) ներարկմամբ՝ 20-50 մգ կետամինի (մարմնի 1 կգ քաշի համար) և 2-10 մգ քսիլազինի (մարմնի 1 կգ քաշի համար) խառնուրդ։ Հետազոտությունից հետո արյունահոսության ծավալը հաշվարկվել է՝ գնահատելով նմուշների սկզբնական և վերջնական քաշերի տարբերությունը, երեք փորձարկումներից ստացված միջին արժեքը ընդունվել է որպես նմուշի արյունահոսության ծավալ։
Առնետի պոչի անդամահատման մոդելը ներդրվել է NFRCS-ի՝ տրավմայի, մարտական ​​գործողությունների կամ ճանապարհատրանսպորտային պատահարների ժամանակ արյունահոսությունը մոդուլացնելու ներուժը հասկանալու համար (վնասվածքի մոդել): Կտրեք պոչի 50%-ը դանակի շեղբով և տեղադրեք օդում 15 վայրկյան՝ նորմալ արյունահոսություն ապահովելու համար: Բացի այդ, փորձարկման նմուշները տեղադրվել են առնետի պոչի վրա՝ ճնշում գործադրելով (Ct, Cs, Ch NFRCS և Cp NFRCS): Փորձարկման նմուշների համար գրանցվել են արյունահոսություն և PCT (n = 3)17,45:
Մարտական ​​մարտերում NFRCS ճնշման կառավարման արդյունավետությունը հետազոտվել է մակերեսային ազդրային զարկերակի մոդելի վրա: Ազդրային զարկերակը բացվում է, ծակվում է 24G տրոկարով և արյունահոսում 15 վայրկյանի ընթացքում: Անվերահսկելի արյունահոսություն նկատելուց հետո փորձարկվող նմուշը տեղադրվում է ծակման տեղում՝ ճնշում գործադրելով: Փորձարկվող նմուշը կիրառելուց անմիջապես հետո գրանցվում է արյան մակարդման ժամանակը, և հաջորդ 5 րոպեների ընթացքում դիտարկվում է հեմոստատիկ արդյունավետությունը: Նույն ընթացակարգը կրկնվում է Cs-ի և Ct46-ի հետ:
Դաուլինգը և այլք 47-ը առաջարկել են լյարդի վնասվածքի մոդել՝ վիրահատության ընթացքում արյունահոսության համատեքստում հեմոստատիկ նյութերի հեմոստատիկ ներուժը գնահատելու համար: BCT-ն գրանցվել է Ct նմուշների (բացասական վերահսկողություն), Cs շրջանակի (դրական վերահսկողություն), Ch NFRCS նմուշների և Cp NFRCS նմուշների համար: Առնետի գերլյարդային սիներակը բացահայտվել է միջնադարյան լապարոտոմիա կատարելով: Դրանից հետո ձախ բլթի դիստալ մասը կտրվել է մկրատով: Լյարդում կտրվածք է արվել դանակի շեղբով և թողնվել է, որ այն արյունահոսի մի քանի վայրկյան: Ճշգրիտ կշռված Ch NFRCS և Cp NFRCS թեստային նմուշները տեղադրվել են վնասված մակերեսի վրա՝ առանց որևէ դրական ճնշման, և BCT-ն գրանցվել է: Այնուհետև վերահսկիչ խումբը (Ct) կիրառել է ճնշում, որին հաջորդել է Cs 30 s47՝ առանց վնասվածքը վնասելու:
Մշակված պոլիմերային հիմքով NFRCS-ների վերքի բուժման հատկությունները գնահատելու համար in vivo վերքի բուժման փորձարկումները կատարվել են հեռացնող վերքի մոդելի միջոցով: Հեռացնող վերքերի մոդելները ընտրվել և իրականացվել են նախկինում հրապարակված մեթոդների համաձայն՝ աննշան փոփոխություններով19,32,48: Բոլոր կենդանիները անզգայացվել են նախկինում նկարագրվածի համաձայն: Օգտագործելով բիոպսիայի դակիչ (12 մմ), մեջքի մաշկի վրա շրջանաձև խորը կտրվածք է կատարվել: Պատրաստված վերքի տեղերը վիրակապվել են Cs (դրական վերահսկողություն), Ct (հաշվի առնելով, որ բամբակյա սկավառակները խանգարում են բուժմանը), Ch NFRCS և Cp NFRCS (փորձարարական խումբ) և բացասական վերահսկողությունով՝ առանց որևէ բուժման: Ուսումնասիրության յուրաքանչյուր օրը բոլոր առնետների մոտ վերքի մակերեսը չափվել է: Օգտագործեք թվային տեսախցիկ՝ վերքի տարածքը լուսանկարելու և նոր վիրակապ դնելու համար: Վերքի փակման տոկոսը չափվել է հետևյալ բանաձևով՝
Հետազոտության 12-րդ օրը վերքի փակման տոկոսի հիման վրա, լավագույն խմբի առնետի մաշկը հեռացվել է ((Cp NFRCS) և վերահսկիչ խումբ) և ուսումնասիրվել H&E և Մասսոնի եռագույն ներկման միջոցով։ Հետազոտության 12-րդ օրը վերքի փակման տոկոսի հիման վրա, լավագույն խմբի առնետի մաշկը հեռացվել է ((Cp NFRCS) և վերահսկիչ խումբ) և ուսումնասիրվել H&E և Մասսոնի եռագույն ներկման միջոցով։Հետազոտության 12-րդ օրը վերքի փակման տոկոսի հիման վրա, լավագույն խմբի ((Cp NFRCS) և վերահսկիչ խմբի) առնետների մաշկը հեռացվել և հետազոտվել է հեմատոքսիլին-էոզինով և Մասոնի եռաքրոմով ներկման միջոցով։根据研究第12天的伤口闭合百分比，切除最佳组((Cp NFRCS) 和对照组) 的大鼠皮肤，进行H&E染色和Masson三色染色研究。根据研究第12天的伤口闭合百分比，切除最佳组((Cp NFRCS)和对照组)的大鼠皮肤，进行H&E染色和眳组）Լավագույն խմբի ((Cp NFRCS) և վերահսկիչ խմբեր) առնետները հեռացվել են հեմատոքսիլին-էոզին ներկման և Մասսոնի եռագույն ներկման համար՝ հիմնվելով վերքի փակման տոկոսի վրա՝ ուսումնասիրության 12-րդ օրը։Կիրառված ներկման ընթացակարգը իրականացվել է նախկինում նկարագրված մեթոդների համաձայն49,50: Հակիրճ ասած, 10% ֆորմալինում ֆիքսացիայից հետո, նմուշները ջրազրկվել են՝ օգտագործելով մի շարք աստիճանավորված սպիրտներ: Միկրոտոմի միջոցով ստացվել են կտրված հյուսվածքի բարակ հատվածներ (5 մկմ հաստությամբ): Վերահսկիչ նյութերի և Cp NFRCS-ի բարակ հաջորդական հատվածները մշակվել են հեմատոքսիլինով և էոզինով՝ հյուսվածաբանական փոփոխությունները ուսումնասիրելու համար: Մասոնի եռագույն ներկումը օգտագործվել է կոլագենային մանրաթելերի առաջացումը հայտնաբերելու համար: Ստացված արդյունքները կուրորեն ուսումնասիրվել են պաթոլոգների կողմից:
Cp NFRCS նմուշների կայունությունն ուսումնասիրվել է սենյակային ջերմաստիճանում (25°C ± 2°C/60% RH ± 5%) 12 ամսվա ընթացքում51: Cp NFRCS-ը (մակերեսի գունաթափում և մանրէային աճ) տեսողականորեն ստուգվել և փորձարկվել է ծալքի դիմադրության և BCT-ի համար՝ համաձայն «Նյութեր և մեթոդներ» բաժնում նշված վերը նշված մեթոդների:
Cp NFRCS-ի մասշտաբայնությունը և վերարտադրելիությունը ստուգվել է 15×15 սմ2 չափի Cp NFRCS պատրաստելով: Բացի այդ, 30 մգ նմուշներ (n = 5) հեռացվել են Cp NFRCS-ի տարբեր ֆրակցիաներից, և ուսումնասիրված նմուշների BCT-ն գնահատվել է «Մեթոդներ» բաժնում նախկինում նկարագրվածի պես:
Մենք փորձել ենք մշակել տարբեր ձևեր և կառուցվածքներ՝ օգտագործելով Cp NFRCS միացություններ՝ տարբեր կենսաբժշկական կիրառությունների համար: Նման ձևերը կամ կոնֆիգուրացիաները ներառում են կոնաձև շվաբրեր քթից արյունահոսության, ատամնաբուժական միջամտությունների և գլանաձև շվաբրեր հեշտոցային արյունահոսության համար:
Բոլոր տվյալների հավաքածուները արտահայտված են որպես միջին ± ստանդարտ շեղում և վերլուծվել են ANOVA-ի միջոցով՝ օգտագործելով Prism 5.03 (GraphPad, Սան Դիեգո, Կալիֆոռնիա, ԱՄՆ), որին հաջորդել է Բոնֆերոնիի բազմակի համեմատությունների թեստը (*p<0.05):
Մարդկանց վրա կատարված ուսումնասիրություններում կատարված բոլոր ընթացակարգերը համապատասխանում էին Ինստիտուտի և Ազգային հետազոտական ​​խորհրդի չափանիշներին, ինչպես նաև 1964 թվականի Հելսինկիի հռչակագրին և դրա հետագա փոփոխություններին, կամ նմանատիպ էթիկական չափանիշներին: Բոլոր մասնակիցները տեղեկացվել են ուսումնասիրության առանձնահատկությունների և դրա կամավոր բնույթի մասին: Մասնակիցների տվյալները հավաքագրվելուց հետո մնում են գաղտնի: In vitro TEG փորձարարական արձանագրությունը վերանայվել և հաստատվել է Կառնատակա նահանգի Մանիպալ քաղաքի Կաստուրբա բժշկական քոլեջի ինստիտուցիոնալ էթիկայի կոմիտեի կողմից (IEC: 674/2020): Կամավորները ստորագրել են տեղեկացված համաձայնություն արյան նմուշներ հավաքելու համար:
Կենդանիների վրա կատարված ուսումնասիրությունների բոլոր ընթացակարգերը կատարվել են Մանիպալի Բարձրագույն կրթության ինստիտուտի Կաստուբա բժշկական ֆակուլտետի (IAEC/KMC/69/2020) պահանջներին համապատասխան։ Բոլոր կենդանիների վրա նախագծված փորձերը կատարվել են Կենդանիների վրա կատարված փորձերի վերահսկման և վերահսկողության կոմիտեի (CPCSEA) ուղեցույցներին համապատասխան։ Բոլոր հեղինակները հետևում են ARRIVE ուղեցույցներին։
Բոլոր NFRCS-ների FTIR սպեկտրները վերլուծվել և համեմատվել են նկար 2A-ում ներկայացված քիտոզանի սպեկտրի հետ: Քիտոզանի բնորոշ սպեկտրալ գագաթները (գրանցված)՝ 3437 սմ-1 (OH և NH ձգում, համընկնում), 2945 և 2897 սմ-1 (CH ձգում), 1660 սմ-1 (NH2 լարվածություն), 1589 սմ-1 (N–H ծռում), 1157 սմ-1 (կամրջի ձգում O-), 1067 սմ-1 (ձգում C–O, երկրորդային հիդրօքսիլ), 993 սմ-1 (ձգում CO2, Bo-OH) 52.53.54: Լրացուցիչ աղյուսակ S1-ը ցույց է տալիս քիտոզանի (հաղորդիչ), մաքուր քիտոզանի, Cm, Ch և Cp-ի FTIR NFRCS կլանման սպեկտրի արժեքները: Բոլոր NFRCS-ների (Cm, Ch և Cp) FTIR սպեկտրները ցույց տվեցին նույն բնութագրական կլանման գոտիները, ինչ մաքուր խիտոզանինը, առանց որևէ էական փոփոխությունների (Նկ. 2A): FTIR արդյունքները հաստատեցին NFRCS-ը մշակելու համար օգտագործված պոլիմերների միջև քիմիական կամ ֆիզիկական փոխազդեցությունների բացակայությունը, ինչը ցույց է տալիս, որ օգտագործված պոլիմերները իներտ են:
Cm NFRCS-ի, Ch NFRCS-ի, Cp NFRCS-ի և Cs-ի in vitro բնութագրումը: (A)-ն ներկայացնում է խիտոզանի և Cm NFRCS-ի, Ch NFRCS-ի և Cp NFRCS-ի բաղադրությունների համակցված FTIR սպեկտրները սեղմման տակ: (B) ա) NFRCS-ի Cm, Ch, Cp և Cg ամբողջական արյան կլանման արագությունը (n = 3). Ct նմուշները ցույց տվեցին ավելի բարձր BAR, քանի որ բամբակյա փայտիկն ունի ավելի բարձր կլանման արդյունավետություն. բ) Արյուն արյան կլանումից հետո։ Կլանված նմուշի նկարազարդում: Փորձարկման նմուշ C-ի BCT-ի գրաֆիկական ներկայացումը (Cp NFRCS-ն ուներ լավագույն BCT-ն (15 վ, n = 3)): C, D, E և G կետերի տվյալները ներկայացված են որպես միջին ± ստանդարտ շեղում, իսկ սխալի սյուները ներկայացնում են ստանդարտ շեղումը՝ ***p < 0.0001: C, D, E և G կետերի տվյալները ներկայացված են որպես միջին ± ստանդարտ շեղում, իսկ սխալի սյուները ներկայացնում են ստանդարտ շեղումը՝ ***p < 0.0001: Данные в C, D, E и G представлены как среднее ± стандартное отклонение, а планки погрешноей представляют стандартное отклонение, ***p <0,0001. C, D, E և G բաժինների տվյալները ներկայացված են որպես միջին ± ստանդարտ շեղում, իսկ սխալի սյուները ներկայացնում են ստանդարտ շեղումը՝ ***p<0.0001: C、D、E 和G 中的数据显示为平均值± SD，误差线代表SD，***p <0,0001。 C、D、E 和G 中的数据显示为平均值± SD，误差线代表SD，***p <0,0001。 Данные в C, D, E и G показаны как среднее значение ± стандартное отклонение, планки погрешноей представляют стандартное отклонение, ***p <0,0001. C, D, E և G բաժինների տվյալները ներկայացված են որպես միջին ± ստանդարտ շեղում, սխալի սյուները ներկայացնում են ստանդարտ շեղումը, ***p<0.0001: